Dissertations / Theses on the topic 'Peau pathologie'

Cette étude s’attache à l’observation et l’analyse des représentations de la peau humaine dans les textes latins des débuts de la littérature romaine (IIème s. av. J.-C.) à l’apogée de l’Empire romain (IIème s. apr. J.-C.). A la suite d’une recherche lexicale et sémantique approfondie sur le vocabulaire explicite de la peau, le thème de la peau est étudié à travers plusieurs champs disciplinaires permettant d’aborder les évocations implicites de la peau, son vocabulaire, ses images et ses significations. L’étude de la physiologie de la peau, appuyée sur l’héritage grec, permet d’en poser une définition chez les Romains, par sa nature, ses fonctions, ses transformations. Peu représentée à l’état normal et sain, la peau est soumise à de multiples violences et maux. L’analyse de la traumatologie de la peau, à travers les poèmes épiques, et de ses pathologies, évoquées dans le Traité de la médecine de Celse, donnent à voir une peau maltraitée, aux blessures fatales, mais d’une importance capitale dans le diagnostic clinique, permettant de jauger la santé – et surtout la maladie – du corps dans son ensemble. Les soins de la peau, thérapeutiques – pour la guérir, chez Celse –, cosmétiques ou commotiques – pour l’entretenir ou la masquer, chez Pline l’Ancien –, s’imposent à la peau, la malmènent eux aussi bien souvent. À côté de cette peau dégradée, coexiste la peau idéale de la poésie amoureuse, à voir et à toucher, entre esthétique et érotique. Enfin, la peau apparaît comme une interface qui transmet à la société romaine des signes selon des critères géographique, sociaux, biographiques, moraux et psychologiques. Elle signale l’appartenance de l’individu à un groupe et définit son identité dans ce groupe
The aim of this thesis is to observe and analyse representations of human skin in Latin literature from the 2nd century B.C. to the 2nd century A.D. Starting with a detailed lexical and semantic study of the vocabulary pertaining to the skin, the notion of skin is examined in various fields, allowing us to address implicit allusions to skin along with the associated vocabulary, images and meanings. A physiological approach, based on anatomical knowledge inherited from Greek philosophers, brings us to a definition of normal skin in terms of its nature, functions and changes. Rarely represented in its normal, healthy state, skin is subject to assaults and ill health in various ways. Analysing skin trauma in epic poems and skin pathology, which is referred to in Celsus’ De Medicina, reveals a prevailing representation of damaged and even fatally wounded skin, this being of utmost importance in clinical diagnosis, a means of measuring the health - and particularly illness - of the body as a whole. Therapeutics and cosmetics, in Celsus’ texts, aim to heal whereas in Pliny’s Naturalis Historia, the aim is to care for and mask imperfections. These often cause as much harm to the skin as good. This damaged skin coexists with ideal skin, mainly in elegiac poetry, a skin meant to be seen and touched, from an aesthetical and erotic perspective. Finally, human skin in Roman society acts as an interface, indicating to which social group anindividual may belong as much as one’s identity within that group, according to ethnical, social, biographical, moral and psychological criteria

L'homéostasie des muqueuses intestinale et cutanée dépend des interactions complexes entre le microbiote, l'épithélium et le système immunitaire de l'hôte. Des mécanismes régulateurs divers coopèrent afin de maintenir l'équilibre physiologique, et un défaut dans ces mécanismes entrainent des situations pathologiques. Le glucagon like peptide 2 (GLP-2) est un neuropeptide caractérisé par des propriétés prolifératives et anti-inflammatoires. Le potentiel thérapeutique des analogues de GLP-2 est actuellement évalué dans des essais cliniques pour des maladies digestives. Les effets du GLP-2 dans l'intestin sont médiés par son récepteur GLP-2 receptor (GLP-2R). Malgré la présence des nombreuses études évaluant l'expression cellulaire et la distribution tissulaire du GLP-2R, celles-ci restent controversées, que ca soit chez l'homme ou les rongeurs. Il est admis que l'expression du GLP-2R était confinée au tube digestif, principalement à l'intestin proximal, malgré des études évoquant une expression extra-intestinale. Une meilleure compréhension de l'expression et de la distribution de GLP-2R est nécessaire pour élucider les fonctions biologiques de GLP-2. Nous avons réalisé une cartographie de l'expression de GLP-2R dans différents organes murins ainsi que dans des lignées immortalisées humaines et murines. Nous avons également évalué l'expression intestinale du GLP-2R dans 2 modèles de colites induites chez la souris et dans des biopsies intestinales des patients atteints de maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI). Nous avons démontré que GLP-2R était exprimé en dehors du tube digestif notamment dans la vessie, le système nerveux central, le mésentère, les ganglions mésentériques, la rate et le foie. Nous avons également montré que la plus forte expression de GLP-2R dans le tube digestif était détectée dans le colon proximal et le rectum. Dans les modèles murins de colites et chez les patients atteints de MICI, l'expression du GLP-2R était diminuée, notamment dans les zones inflammatoires. Ceci pose la question le rôle physiopathologique des analogues de GLP-2 dans les maladies inflammatoires digestives. En conclusion, les hypothèses précédentes considérant une expression du GLP-2R majoritaire dans le tube proximal doivent être reconsidérées. Les fonctions physiologiques extra-intestinales du GLP-2 doivent être explorés afin d'anticiper des effets indésirables extra-digestifs des analogues de GLP2.

L’inflammation neurogène est un processus inflammatoire induisant la libération de neuropeptides, en particulier la Substance P et le Calcitonin Gene-Related Peptide (CGRP), par les neurones sensoriels. Lors de ce processus, l’angiogenèse et la réépithélialisation, sont essentielles pour que l’inflammation diminue suite à une lésion. Dans le cadre de pathologies telle que le diabète, les patients sont souvent atteints de neuropathies en plus de souffrir d’une mauvaise guérison des plaies où l’angiogenèse est diminuée. Pour mieux comprendre ses phénomènes, deux modèles ont été reconstruits par génie tissulaire à partir d’éponge de collagène et de chitosane : l’un permettant de mimer un derme endothélialisé innervé reconstruit, et le second est un modèle permettant de suivre la réépithélialisation dans un modèle glyqué par du glyoxal, au cours du temps. À la vue de nos résultats, la Substance P semble être un neuropeptide jouant un rôle majeur dans l’angiogenèse et la réépithélialisation.
Neurogenic inflammation is an inflammatory process, characterized by the release of neuropeptides, particularly substance P and Calcitonin Gene-Related Peptide (CGRP), in sensory neurons. During this process, angiogenesis and reepithelialization following an injury are essential to reduce inflammation. Within certain diseases, such as diabetes, angiogenesis is diminished, and patients are often suffering of diabetic neuropathies and poor wound healing. To understand that process, two models were reconstructed using tissue engineering with a collagen and chitosan sponge: one model mimics a reconstructed endothelialized and innervated dermis, and the second one follows over time re-epithelialization in a glycated model using glyoxal. Based on our results, substance P seems to be a neuropeptide playing a major role in both mechanisms.

L'épidermolyse bulleuse simplex (EBS) est caractérisée par un décollement intra-épidermique au niveau de la couche basale de Pépiderme aboutissant à la formation de bulles et de cloques cutanées. L'EBS est causée par des mutations au niveau des gènes qui codent pour la kératine 5 (K5) ou la kératine (K14), qui sont transmises majoritairement selon un mode autosomique dominant. L'EBS affecte environ 1/50 000 à 1/30 000 personnes dans le monde et elle est considérée comme une maladie orpheline. Dans cette étude, les kératinocytes ont été isolés de biopsies de la peau de patients atteints d'EBS ayant des mutations dans le gène KRT14 et de témoins non atteints. Des essais thérapeutiques utilisant l'interféron gamma (IFN-y) ont été réalisés afin de stimuler la production de la Kl5. Les résultats ont révélé que l'IFN-y réduit l'expression et la production de la Kl5 contrairement à ce que suggérait la littérature. Cette discordance pourrait s'expliquer par un effet « régulateur » de l'IFNy sur la Kl 5 lorsque les cellules seraient activées. Cette hypothèse a été validée par l'augmentation de l'expression de la KRT16 qui est considérée comme un marqueur de préactivation des kératinocytes. Ainsi, l'IFN-y ne semble pas être une cible thérapeutique potentielle pour l'EBS causée par une mutation de KTR14 (R125S).

Appareil de mesure de la permittivite de la peau "in vivo" en haute frequence (0,1 a 10 ghz). Variations de la dispersion dielectrique dues a l'hydratation, la vascularisation, a l'epaisseur du tissu sous-cutane

La glande uropygienne de la caille male est un organe cible des androgenes, elle possede des recepteurs aux androgenes qui ont ete mis en evidence. Mise au point d'une technique qui permet de mesurer a la fois les recepteur actives et non actives. La glande uropygienne est androgeno-dependante: la testosterone entraine une activation rapide des recepteurs des androgenes suivie d'une augmentation de leur concentration cellulaire, c'est le compose le plus efficace de tous les androgenes. L'oestradiol et la progesterone se comportent comme des anti-androgenes par competition au niveau du recepteur. Le ru 38882 est un anti-androgene pur qui utilise en application locale garde une action strictement locale (traitement de choix des affections cutanees androgeno-dependantes)

L'objectif de ce travail de recherche est d'évaluer la capacité des spectroscopies optiques d'autofluorescence et de réflectance diffuse à caractériser les différents stades de la transformation néoplasique de la peau et ainsi d'aider au diagnostic des deux lésions de peau les plus létales : le mélanome malin et le carcinome épidermoïde. Dans l'étude portant sur le mélanome, un objet-test (« fantôme ») a été développé pour modéliser différentes épaisseurs de mélanome (indice de Breslow). La spectroscopie de réflectance diffuse résolue spatialement (grâce à l'utilisation de cinq fibres optiques réceptrices situées à cinq distances différentes de la fibre optique excitatrice) a montré sa capacité à discriminer (p<0,05) des indices de Breslow simulés grâce à des fantômes d'épaisseur variant par pas d'1 mm. D'autre part, des mesures de spectroscopie bimodale (combinant autofluorescence en multi-excitation et réflectance diffuse) ont été réalisées sur peau murine tout au long des sept mois de photocarcinogenèse. Des prélèvements cutanés ont permis d'établir trois classes histologiques (en plus de la classe saine du groupe contrôle) : hyperplasie compensatoire, hyperplasie atypique et dysplasie. Puis la précision diagnostique a été évaluée par analyse statistique multivariée. Nos principaux résultats montrent que la bimodalité associant autofluorescence (excitation à 410 nm) et réflectance diffuse permet une amélioration de la spécificité de 9 points de pourcentage comparées aux performances de chacune des modalités utilisée seule lors de la discrimination des trois types d'hyperplasie. Des études cliniques doivent maintenant confirmer l'intérêt de ces résultats.

Nous avons étudié le rôle de l'immunité innée de la peau lors de la transmission des Borrelia (agent infectieux de la borréliose de Lyme) par son vecteur, une tique dure du genre Ixodes. Nous avons montré que la salive de tique et la protéine salivaire Salp15 inhibent la réaction inflammatoire (production de chimiokines et de peptides antimicrobiens) des kératinocytes induite par Borrelia. Cet effet anti- " alarmine " de la salive de tique contribue probablement à créer un environnement cutané local favorable à la transmission de Borrelia. Nous avons montré que Borrelia induit également au niveau des fibroblastes cutanés la transcription de nombreux gènes proinflammatoires. Nous avons observé un effet toxique direct de la salive de tique sur les fibroblastes cutanés : cet effet dose-dépendant est de nature protéique mais non lié à la protéine Salp15. Ces résultats indiquent que les fibroblastes jouent un rôle important dans l'inflammation cutanée induite par Borrelia.

Ce travail est consacré à l'analyse des relations existant entre la cellule endothéliale et le complément au cours de l'inflammation. Une première approche a consisté en une étude in vitro de la synthèse constitutive et de sa régulation, sous l'influence de cytokines pro-inflammatoires et d'un agent pharmacologique anti-inflammatoire, par les cellules endothéliales, de protéines essentielles de la voie alterne: les protéines activatrices C3 et facteur B et les protéines inhibitrices facteur H et facteur I. Les résultats suggèrent que, in vivo, les cellules endothéliales seraient orientées, dans des conditions physiologiques normales, vers une fonction inhibitrice de l'activation spontanée du complément par la voie alterne, c'est-a-dire vers une fonction anti-inflammatoire. Cytokines et corticoïdes influenceraient les synthèses dans un sens, qui respectivement, favoriserait l'activation locale du complément ou au contraire renforcerait son inactivation constitutive. L'existence de ces synthèses locales hautement régulées des protéines de la voie alterne du complément constituerait de nouveaux éléments dans les processus d'activation de l'endothélium au cours de l'inflammation et d'inactivation de l'endothélium au cours de glucocorticothérapie. La deuxième approche est une étude clinique de l'implication du complément au cours de pathologies inflammatoires de l'endothélium à complexes immuns: les vascularités leucocytoclasiques cutanées. Elle a permis de démontrer: i) l'intérêt, dans l'exploration clinique du complément au cours de ces maladies, de nouveaux dosages plasmatiques des marqueurs d'activation initiale et finale, le fragment C3d,g et le complexe d'attaque membranaire (CAM); ii) l'implication de l'intégralité de la cascade, jusqu'à formation du CAM  à la surface de l'endothélium, dans la genèse des lésions vasculaires; iii) la responsabilité potentielle prépondérante des immunoglobulines A dans l'activation pathologique du complément; iv) l'intervention d'un processus de contrôle de l'activation par les protéines régulatrices du complément. A la fois source et cible du complément, l'endothélium pourrait potentialiser le processus inflammatoire local, mais aussi subir les dommages consécutifs à son activation pathologique

Cette etude comporte diverses investigations relatives a l'evolution des proprietes microanatomiques de la peau au cours du vieillissement normal et pathologique. Nous avons etudie l'evolution du microrelief cutane humain en fonction de l'age a l'aide d'analyse d'image. Il existe une bonne correlation entre les parametres du relief cutane et l'age chronologique. Dans une population de personnes agees de plus de 65 ans certains parametres du relief cutane sont mieux correles aux scores d'un test des fonctions cognitives qu'a l'age chronologique. Dans le syndrome de down les parametres du microrelief cutane correspondent a ceux observes chez les sujets sains plus ages de 10 ans. L'evolution des parametres histomorphometriques de la peau de rat est differente de celle de l'homme: l'epaisseur moyenne et la quantite relative de collagene augmente avec l'age. Nous avons etudie l'influence d'un extrait vegetal complexe ainsi de ses deux fractions sur les proprietes biomecaniques et histomorphometriques de la peau de rat. L'extrait complexe exerce un effet stimulant sur la proliferation cellulaire et ameliore les proprietes biomecaniques. Une amelioration plus importante de ces proprietes a ete retrouvee avec une des fractions. Aucune fraction n'a d'effet stimulant sur la proliferation cellulaire

L'analyse de la topographie des surfaces biologiques necessite l'utilisation d'appareils offrant une echelle verticale de mesures de plusieurs millimetres, tout en couvrant une aire de plusieurs dizaines de centimetres carres. Un prototype d'appareil sans contact a ete realise, repondant a cet objectif, tout en offrant une sensibilite suffisante pour permettre la quantification de la plupart des surfaces mecaniques. Le traitement des images ainsi acquises a ete developpe afin de permettre leur filtrage, leur quantification, ainsi que la resolution de problemes particuliers tels que la cicatrisation et la mesure de volume des plaies. La technique et les methodes numeriques developpees permettent la saisie et le traitement des images tridimensionnelles en des temps beaucoup plus courts que ceux auxquels parviennent les methodes conventionnelles

Caracterisation d'expressions geniques liees au chromosome x, de 6 sequences genomiques humaines liees au chromosome x; localisation du syndrome coffin-lowry par analyse de linkage et de la dysplasie ectodermique anhidrotique

Le psoriasis est une maladie cutanée grave pour laquelle il n’existe encore aucun traitement curatif. Des modèles de peau psoriasique in vitro sont alors nécessaires afin de tester de nouveaux traitements. Cette étude visait, en premier lieu, à optimiser la production de substituts cutanés psoriasiques par la méthode d’auto-assemblage, pour ensuite les utiliser afin d’évaluer l’efficacité d’une nouvelle molécule potentiellement antipsoriasique, la tBEU. Dans un premier temps, des substituts sains et psoriasiques ont été produits par la méthode d’auto-assemblage partiellement modifiée en utilisant des plaques 6 puits et 12 puits. Ces expériences ont permis de démontrer que les plaques 6 puits étaient plus efficaces pour la production de substituts reproductibles et représentatifs d’une peau psoriasique in vivo. Ensuite, ces substituts ont été traités avec la tBEU, démontrant que cette molécule diminue la prolifération des kératinocytes et améliore leur différenciation. Ainsi, la tBEU pourrait éventuellement être utilisée comme un traitement efficace du psoriasis.
Psoriasis is a serious cutaneous disease for which there is currently no cure. In vitro psoriatic skin models could become new tools to assess the potency of new drugs during the development of new therapies. First, this study aimed to optimize the production of psoriatic skin substitutes by the self-assembly method, and then use them to assess the effectiveness of a new potentially antipsoriatic molecule, tBEU. Initially, healthy and psoriatic substitutes have been produced by the self-assembly method partially modified, using 6-well and 12-well plates. These experiments demonstrated that the 6-well plates were more effective for the production of reproducible substitutes and representative of psoriatic skin in vivo than the 12-well plates. Then, these substitutes were treated with tBEU, showing that this molecule decreases significantly keratinocytes proliferation and improves their differentiation. Thus, tBEU may eventually be used as an effective topical treatment for psoriasis.

L'évaluation visuelle de lésions cutanées est l'analyse la plus couramment réalisée par les dermatologues. Ce diagnostic s'effectue principalement à l'œil nu et se base sur des critères tels que la taille, la forme, la symétrie mais principalement la couleur. Cependant, cette analyse est subjective car dépendante de l'expérience du praticien et des conditions d'utilisation. Nous proposons dans ce manuscrit (1) le développement d'une caméra multispectrale spécialement conçue pour un usage en dermatologie. Cette caméra multispectrale se base sur la technologie de roue porte-filtres composée de filtres interférentiels et d'un algorithme basé sur les réseaux de neurones générant un cube hyperspectral de données cutanées. Cet ensemble combine l'avantage d'un spectrophotomètre (information spectrale), et celui d'une caméra (information spatiale). Son intérêt est également de délivrer une information reproductible et indépendante des conditions d'acquisition. La mise en place d'un protocole d'acquisition de données de peaux saines issues de cinq des six phototypes existants a permis la validation de notre système en comparant les spectres générés par notre système avec des spectres théoriques acquis par un spectrophotomètre professionnel. (2) La réflectance spectrale de données de peau fournit une information précieuse, car directement liée à sa composition en chromophores. La mesure quantitative des propriétés optiques du tissu cutané peut être basée sur la modélisation de la propagation de la lumière dans la peau. Pour cela, nous nous sommes appuyés sur le modèle de Kubelka-Munk, auquel nous avons associé une méthode d'optimisation basée sur les algorithmes évolutionnaires. Cette dernière apporte une réponse à l'inversion de ce modèle. A partir de cette approche, la quantification de divers paramètres de la peau peut être obtenue, tels que la mélanine et l'hémoglobine. (3) La validation de cette méthodologie est effectuée sur des données pathologiques (vitiligo et melasma) et permet de quantifier une différence de composition entre zone saine et zone affectée sur une même image.

Copies of author's previously published articles inserted. Bibliography: leaves 128-143. This thesis describes the development of serological and nucleic acid based diagnostic methods for pea-seed borne mosaic virus (PSbMV), the isolation of specific effects on infected pea plants, the collection and biological comparison of new PSbMV isolates from Pakistan, the cloning and sequencing of specific parts of the genome of selected isolates, nucleotide and amino acid sequence comparisons between selected isolates, and the development of a ribonuclease protection assay (RPA) for identifying genomic differences among the PSbMV isolates. It is the first comparison of a range of geographically different isolates of PSbMV on the basis of both biological and molecular properties.

L'objet de cette thèse est l'étude de la pénétration des actifs cosmétiques dans la peau. Les axes d'investigation principaux ont concerné l'influence des propriétés physicochimiques des actifs et des ingrédients de la formule sur les mécanismes de pénétration. Les actifs cosmétiques choisis sont le rétinol, actif lipophile, et la caféine, actif hydrophile. Les formulations investiguées sont des émulsions de type huile dans eau, comparées aux solutions de tensioactifs correspondantes. Trois huiles cosmétiques ont été utilisées: Butylène glycol de cocoate, Octyldodecyl myristate et la Paraffine liquide, stabilisées en émulsion avec des tensioactifs ester de polyéthylène glycol (PEG20 et PEG6) possédant des longueurs de chaîne carbonées variables (C8, C12, C18 et C18:1). La pénétration percutanée a été mesurée quantitativement en utilisant la méthode des cellules de diffusion de Franz en fonctionnement statique et dynamique et qualitativement par la microscopie confocale Raman. Avec cette combinaison de techniques analytiques, il est possible, de mesurer la pénétration et d'évaluer l'impact de chaque composant de la formulation sur la pénétration cutanée d'un actif. Une corrélation a pu être établie entre l'effet fluidifiant d'une huile et l'augmentation de la pénétration du rétinol. Par ailleurs les tensioactifs, même s'ils ont montré un effet moindre en terme de fluidification conduisent également à une augmentation de la pénétration en raison d'une variation du coefficient de partage de l'actif entre la formule et la peau. Concernant la caféine, l'influence de la structure des tensioactifs et en particulier de la longueur de chaîne carbonée a été mise en évidence

Includes bibliographical references (leaves 82-92). Five isolates of pea seed-borne mosaic virus were compared by host range and symptomatology on 16 pisum sativum cultivars lines, 21 lines of Lathyrus and Lens spp. and several indicator species

The purpose of this study was to teach 3 children vocal imitation and to compare dev words and random words. A multiple baseline design was implemented across three participants two with an expressive and receptive language delay and one with Autism where the participants were taught to vocally imitate several sounds using the PEAK Relational Training curriculum. The sounds were divided into 2 groups: first set composed of age appropriate sound in sequential order of suggested acquisition and the second set were random but age appropriate sounds. Trial blocks began with the child being asked to imitate a sound from their specific sound set. If the child correctly imitated the sound, child was given their chosen reinforcement (bubbles, surprise eggs or a book). After a trial block of 5 imitation requests, the child is given 5 minutes of free play where the child is able to pick an activity around their home. The results of the study show that children with a language disorders and Autism Spectrum Disorder increased the correct number of sound imitations during the PEAK Relational Training System – Direct Training module. Given both sets of sounds, the age appropriate sound sequence emerged first. Two participants showed an increasing trend at a high level during intervention. The third participant showed an increasing trend but at a low level.

Les mélanocytes synthétisent la mélanine, et la distribuent aux kératinocytes environnants avec qui ils forment l'unité épidermique de mélanisation. Les deux types cellulaires adhèrent par l'intermédiaire notamment des jonctions adhérentes. Celles-ci sont composées de la E-cadhérine et de β-caténine. Au cours de ma thèse, nous avons montré que l'absence de E-cadhérine dans les mélanocytes in vivo provoque un défaut de prolifération et de la morphologie des cellules affectant l'organisation de l'unité épidermique de mélanisation et donc de la pigmentation épidermique. La E-cadhérine est également connue comme gène suppresseur de tumeurs. Nous avons montré, au sein d'un modèle in vivo favorisant la transformation mélanocytaire, que l'absence de E-cadhérine peut augmenter le caractère agressif du mélanome. Dans le lignage mélanocytaire, β-caténine intervient également dans la voie de signalisation Wnt et régule la transcription de gènes cibles. L'élaboration de modèle gain- et perte-de-fonction de β-caténine dans les mélanocytes, a mis en évidence un défaut de prolifération des mélanocytes. La quantité de β-caténine apparaît essentielle pour la prolifération mélanocytaire, dont l'action s'effectue via Mitf-M. Mitf-M agit directement sur la prolifération ou indirectement en inhibant l'activité transcriptionnelle de β-caténine sur ses cibles, notamment c-myc et cycline-D1. Enfin, β-caténine contribue à l'immortalisation lors de la transformation des mélanocytes in vivo. La forme stabilisée de β-caténine inhibe l'expression de la protéine p16Ink4a. L'activation de β-caténine permet donc de court-circuiter le processus de sénescence lors de la progression tumorale des mélanomes
Melanocytes synthesize melanin, that they distribute to surrounding keratinocytes with whom they form the epidermal melanin unit. The two cell types adhere through different types of junctions including adherens junctions, composed of E-cadherin and β-catenin. During my thesis, we demonstrated that the absence of E-cadherin in melanocytes in vivo leads to a defect of proliferation and morphology of cells affecting the organization of the epidermal melanin unit and thus the pigmentation. E-cadherin is also known as tumor suppressor. We have shown in an in vivo model promoting melanocytes transformation, that the absence of E-cadherin may increase the aggressiveness of melanoma. In the melanocyte lineage, β-catenin is also involved in the Wnt signaling pathway and regulates the transcription of target genes. The development of β-catenin gain- and loss-of-function in melanocytes, highlighted a proliferation defect in those cells. The quantity of β-catenin seems to be essential for melanocyte proliferation, mostly done via Mitf-M. Mitf-M acts directly on the proliferation or indirectly by inhibiting the activity of transcription in β-catenin on its targets, including c-myc and cyclin-D1. Finally, β-catenin contributes to the immortalization during melanocytes transformation in vivo. The stabilized form of β-catenin inhibits protein expression of p16Ink4a. The activation of β-catenin can therefore go through the process of senescence at the tumor progression of melanoma

La manipulation du système immunitaire du receveur avant la transplantation pourrait permettre d'obtenir la tolérance de transplants allogéniques vascularisés en évitant la réaction de rejet à médiation lymphocytaire et humorale et l'utilisation permanente de traitement immunosuppresseur. Chez l'animal, l'injection au receveur, avant la transplantation, de cellules du donneur sous couvert d'anticorps bloquant le premier ou le second signal permet l'expansion périphérique d'une sous population de lymphocytes T CD4+CD25+FOXP3+, à activité suppressive (Treg).Dans ce travail de thèse, j'ai montré, dans un modèle murin utilisant des rats Fischer F344 comme donneur et des rats Lewis comme receveur, que l'injection au receveur avant la transplantation de cellules dendritiques spléniques OX62+ du donneur sous couvert d'anticorps monoclonal anti-CD4 W3/25 non dépletant permet d'obtenir la tolérance de transplants allogéniques cutanés et cardiaques à condition que ce protocole soit appliqué 28 jours avant la transplantation. La tolérance est due en partie à l'expansion de Treg inductibles spécifiques des alloantigènes. Elle n'est associée à aucune lésion d'artériopathie oblitérante observé au cours du rejet chronique de transplants vascularisés. Ces Treg ont aussi la capacité d'induire la tolérance de transplants allogéniques lorsqu'ils sont injectés au receveur la veille de la transplantation. Le blocage partiel de la production d'anticorps spécifiques du donneur chez les animaux tolérants suggère que les Treg interagissent avec les lymphocytes B en empêchant, soit la maturation des lymphocytes B en plasmocytes soit en favorisant l'expansion de lymphocytes B régulateurs. Ces résultats confirment que les Treg inductibles sont capables de prévenir les lésions vasculaires du rejet chronique. Ils soulignent également que les anticorps spécifiques du donneur apparaissant après la transplantation n'ont pas toujours un effet délétère.

Ce travail concerne l'étude des propriétés biologiques d'hydrogels physiques bicouches de chitosane, dont l'usage est destiné à la cicatrisation des brûlures du 3ème degré. L'étude bactériologique a révélé que les dispositifs présentaient des propriétés bactériostatiques voire bactéricides de grand intérêt pour l'application visée. L'étude à long terme de la cicatrisation en présence des hydrogels physiques bicouches de chitosane a montré que ces dispositifs permettent la reconstruction d'un tissu bien organisé, bien vascularisé et aux propriétés mécaniques et esthétiques similaires à celles d'un tissu sain. L'avantage thérapeutique du dispositif proposé est que le système hydrogel n'a pas à être remplacé au cours de la cicatrisation, contrairement aux pansements traditionnels qui nécessitent d'être changés régulièrement, impliquant risques d'infection, douleurs et altération du tissu en formation. Le tissu cutané a été étudié au cours de ce travail à différentes échelles et selon différentes approches complémentaires : une approche esthétique et clinique (photos, calques), mécanique (tests de traction), histologique et immuno-histologique, et enfin nanostructurale grâce à l'utilisation conjointe de la microscopie électronique et de la diffusion des rayons X aux petits angles. L'étude histologique détaillée des interactions biologiques entre le tissu hôte et le dispositif a permis de valider son caractère biocompatible, biorésorbable et colonisable, et d'envisager son utilisation en ingénierie tissulaire en tant que milieu à gradient de propriétés biologiques, favorable au développement de néo-tissu cutané.

Nitric oxide (NO) and reactive oxygen species are two key components in the induction of the hypersensitive response (HR) during plant defense against pathogen infection. In animal cells, the production of NO is catalyzed by nitric oxide synthase (NOS). Although NOS activity has been documented in plants, the process of NO synthesis in plants is not well understood. Isolation of the NOS protein and/or cloning of the corresponding gene will greatly facilitate the understanding of NO synthesis and its role in plant defense. The objectives of this research were to analyze the physiological and biochemical properties of a NOS-like protein (peaNOS) of pea (Pisum sativum L.), to purify and characterize peaNOS, and to clone the gene(s) encoding peaNOS and relate its expression to NOS activity in pea-bacteria interactions. The application of abiotic agents that induce systemic defense in plants [copper chloride, ActiguardÒ, Triton-X100 and salicylic acid (SA)] to pea leaves did not induce NOS activity and verified reports that NO and NOS function upstream of SA in the signaling pathway of defense responses. Maximum (two-fold) NOS activity was detected three hours before the onset of HR in pea leaves infiltrated with incompatible bacteria (Ralstonia solanacearum), which is consistent with the effect of NO in the activation of HR after interaction with H2O2. The compatible bacteria (Pseudomonas syringae pv pisi) induced NOS activity significantly, suggesting that NO generation may also be a general response to biotic stress in plants. Antibodies raised against mammalian NOS did not have apparent specificity and utility for isolating peaNOS and should be used with caution in non-mammalian systems. The peaNOS protein was most efficiently extracted under alkaline conditions (pH 8.5 and 9.0) as compared to the neutral conditions (pH 7.4-7.5) in animal systems. Precipitation of the peaNOS protein with various concentrations of ammonium sulfate, sodium citrate and sodium chloride caused rapid loss of NOS activity. The peaNOS protein did not bind to 2',5'-ADP-Sepharose and calmodulin (CaM)-agarose indicating that the protein lacks binding sites for NADPH and CaM. Cloning of a peaNOS gene based on mammalian NOS was unsuccessful suggesting that the structure of peaNOS gene may be significantly different from mammalian NOS. Analysis of the Arabidopsis thaliana genome database identified two gene sequences related to animal NOS, i.e., accessions At4g09680 (similar to NOS of Rattus norvegicus) and At3g47450 (similar to NOS of Helix pomatia). Gene At4g09680 is probably not expressed since attempts to clone cDNA of this gene using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) consistently failed, even when RNA of Arabidopsis was used as a template. A potential expressed peaNOS gene was successfully cloned using RNA template of pea HR tissues in RT-PCR. The 784-bp peaNOS cDNA sequence had 50% nucleotide identity to the At3g47450 coding sequence and had no other significant match in the database. The correlation of the gene expression of P protein of glycine decarboxylase complex (GDC) of pea (peaP) and NOS activity during HR in pea was not demonstrated here but peaP gene was highly expressed concomitant with NOS activity during disease development. The NOS-like protein involved in NO production during HR in pea appears to be more related to At3g47450 sequence, and is possibly encoded partially by the cloned 784-bp pea cDNA.

Le rejet d’allogreffe dépend de la reconnaissance d’antigènes d’histocompatibilité étrangers par le système immunitaire du receveur. En l'absence de thérapies immunosuppressives, la réaction inflammatoire éventuelle conduit à la destruction rapide du tissu transplanté. Le rôle critique joué par les lymphocytes T CD4+ dans le rejet aigu d'allogreffe est bien établi. Cependant, les contributions respectives des lymphocytes CD4+ Th1 et Th2 dans la réaction de rejet sont controversées. Alors que le rôle des cellules Th1 dans la pathogénèse du rejet est bien établi, l'hypothèse que les cellules Th2 favorisent l'acceptation de la greffe est invalide puisque ces cellules sont capables de déclencher des voies alternatives de rejet. En effet, la fonction effectrice des lymphocytes Th2 a été démontrée dans beaucoup de modèles de rejet de greffe ou de tumeur, et dans la maladie du greffon contre l'hôte. Les caractéristiques principales du rejet de type Th2 sont sa dépendance envers la production d'IL-4 et d'IL-5, le recrutement d'éosinophiles au site du rejet, et son inhibition par les lymphocytes T CD8+ alloréactifs. Les éosinophiles activés exercent leur activité cytotoxique par la libération de plusieurs molécules cytotoxiques comme l’EDN, l’ECP, la MBP et l’EPO. Ces molécules sont probablement responsables de la capacité des éosinophies à affecter la perméabilité vasculaire et à induire des dégâts tissulaires dans les organes rejetés.

L'interleukine 9 (IL-9) est une cytokine produite par les lymphocytes T qui joue un rôle important dans les voies effectrices Th2. Dans la littérature, l’IL-9 est fortement associée au développement de l’éosinophilie tissulaire. Dans notre première étude, nous avons analysé le rôle joué par l'IL-9 dans le rejet d'allogreffe bm12 par des souris B6 (pour C57BL/6), un modèle dans le lequel une simple disparité au niveau de la molécule du CMH de classe II favorise une réaction inflammatoire de type Th2. Dans ce modèle, de faible alloantigénicité, les greffes cardiaques bm12 survivent presque indéfiniment dans les receveurs B6 (>60 jours). Nos expériences ont été conçues afin de savoir si l’expression de l’IL-9 au niveau de la greffe pouvait modifier la survie de greffes cardiaques exprimant les alloantigènes bm12. Nous avons ainsi montré que la production locale d’IL-9 induit le rejet des allogreffes cardiaques exprimant l’alloantigène I-Abm12 (survie <30jours). Aucun des organes transgéniques pour l’IL-9 n’a survécu plus de 30 jours alors que des greffes non transgéniques ne furent pas rejetées (>50 jours). L’analyse histologique des allogreffes cardiaques transgéniques pour l’IL-9 montre une infiltration cellulaire dense du myocarde. La composante principale de cet infiltrat est la présence de nombreux éosinophiles.

Pour étudier la contribution des cytokines de type Th2, comme l’IL-4 et l’IL-5, dans le rejet des cœurs transgéniques pour l’IL-9, nous avons sélectivement bloqué ces cytokines lors du processus de rejet. Le traitement avec des anticorps neutralisant l’IL-4 bloque complètement le rejet induit par l’IL-9 et permet la survie à long terme des allogreffes cardiaques. Au point de vue de l’histologie ces greffes ne montrent ni infiltration leucocytaire ni artériopathie. Afin de déterminer si l’infiltration éosinophilique induite par l’IL-9 provient de l’activité directe de l’IL-9 ou est le résultat de la sécrétion d’IL-5, un traitement avec un anticorps anti-IL-5 a été appliqué aux receveurs d'allogreffe cardiaque. Ce traitement augmente la survie de la majorité des allogreffes et modifie de manière marquée la composition de l’infiltrat cellulaire en prévenant le recrutement des éosinophiles. De manière intéressante, les cœurs transgéniques pour l’IL-9 qui survivent indéfiniment après le traitement anti-IL-5 arborent une importante fibrose.

A la différence du cœur bm12, la peau bm12 greffée sur un receveur B6 subit un rejet rapide et l'histologie des greffes rejetées révèle la présence d'infiltrats denses à éosinophiles. Notre laboratoire a montré que ce processus de rejet est dirigé par les lymphocytes T CD4+ alloréactifs et que les souris B6 déficientes pour l'IL-5 et la voie de cytotoxicité Fas/Fas-L sont incapables de rejeter des peaux bm12. Nos premiers résultats laissaient supposer un rôle pour l'IL-9 dans notre modèle de rejet de greffes en disparité des molécules du CMH de classe II: premièrement, nous avions observé la production d'IL-9 par les lymphocytes T de type Th2 alloréactifs et deuxièmement, l'ARNm d'IL-9 était fortement exprimé au niveau des allogreffes de peaux rejetées. C’est pourquoi, la survie de peaux bm12, déficientes pour la molécule Fas, greffées sur des receveurs B6 déficients pour l'IL-9 (B6.IL-9-/-) a été comparée avec celle de peaux transplantées sur des receveurs B6. Nous avons montré que, comme les souris B6 normales, les animaux B6.IL-9-/- rejettent leur greffe dans les 15 jours. Donc, contrairement à l'IL-5, l'IL-9 n'est pas essentielle pour le rejet de peau dirigé par les cellules T CD4+ de type Th2 dans notre modèle de disparité des molécules du CMH de classe II.

Néanmoins, les allogreffes de peaux, dans notre modèle de disparité des molécules du CMH de classe II, contiennent moins d’éosinophiles lorsqu’elles sont rejetées par des receveurs déficients pour la synthèse d’IL-9 (IL-9-/-). En plus du modèle bm12, nous avons également observé un rôle de l’IL-9 dans un autre modèle de rejet Th2. Il a été montré par notre laboratoire que le rejet d’allogreffes cardiaques Balb/c complètement incompatibles par des souris receveuses B6.CD8-/- est caractérisé par le recrutement d’éosinophiles dans l’organe rejeté (106). Dans celui-ci, l’ARNm de l’IL-9 est présent pendant le rejet, de même que l’IL-4 et l’IL-5 et les greffes rejetées par des receveurs IL-9-/- contiennent moins d’éosinophiles par rapport à des receveurs contrôles. Les mécanismes par lesquels l’IL-9 induit le recrutement des éosinophiles ne sont pas complètement connus.

L’IL-5 est considérée comme la cytokine clé pour le développement de l’éosinophilie. De plus, le rejet aigu des cœurs transgéniques pour l’IL-9 est caractérisé par une infiltration massive d'éosinophiles et est inhibé lors de la neutralisation de l'IL-5. Nous avons entrepris la seconde étude pour investiguer le lien fonctionnel entre l’IL-9 et l’IL-5 dans le rejet d’allogreffe, ce qui permettra de mieux comprendre le recrutement des éosinophiles par l’IL-9.

Bien que le rejet ne soit pas inhibé par le manque d’IL-9, les allogreffes rejetées par les souris déficientes en IL-9 contiennent moins d’éosinophiles par rapport à des souris contrôles et présentent une production plus faible d’IL-5 par les cellules T alloréactives. De manière intéressante, la production optimale d’IL-5 après une stimulation allogénique requiert un récepteur à l’IL-9 (IL-9R) fonctionnel sur les cellules répondeuses. De plus, l’infiltration d’éosinophiles induite par l’IL-9 est absente dans des peaux transplantées sur des receveurs déficients pour le récepteur de l’IL-9. Finalement, la production d’IL-5 par des cellules T CD4+ stimulées par l’anti-CD3 est abolie par la neutralisation de l’IL-9.

En conclusion, nous pouvons dire que l'IL-9 est capable d'induire un rejet de type Th2, caractérisé par une forte infiltration d’éosinophiles et une dépendance à l'IL-5 et à l'IL-4. Notre étude montre également que l’IL-9 peut agir directement sur les cellules T CD4+ pour induire leur capacité à sécréter de l’IL-5. Cependant, l’IL-9 n’est pas indispensable au processus de rejet Th2 et il est probable que lorsque l’IL-9 est bloquée d'autres cytokines soient capables de compenser son absence. Notre étude permet une meilleure compréhension des voies complexes du recrutement des éosinophiles.

Doctorat en sciences biomédicales
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The fungus Nectria haematococca is a broad host range pathogen. Isolates pathogenic on pea are able to detoxify the phytoalexin pisatin using the enzyme pisatin demethylase. When the gene (PDA1 ) encoding this enzyme was mutated via gene disruption, the mutants were less virulent but still pathogenic on pea. Additional studies demonstrated that PDA1 was on a 1.6-Mb conditionally dispensable (CD) chromosome and that loss of this CD chromosome resulted in the complete loss of pea pathogenicity. This leads to the hypothesis that there are other pea p̱athogenicity (PEP) genes in addition to the PDA1 gene on the CD chromosome. One of the major goals of this work was to test this hypothesis by isolating and characterizing these PEP genes. The results identified three novel PEP genes: PEP1, PEP2, and PEP5, each of which can confer disease-causing ability independently when introduced into a nonpathogenic isolate lacking the CD chromosome. The predicted product of PEP5 is related to members of the major facilitator superfamily, including proton-dependent multidrug export systems, and the predicted product of PEP2 contains conserved RNA-binding motifs. PEP1 shows no significant similarity to any known gene in the public databases. The three PEP genes and PDA1 are organized into a functional cluster, termed the PEP cluster, within 25 kb that conditions full pathogenicity on pea. The PEP cluster contains two additional genes, cDNA3 and cDNA4, and neither gene by itself is able to confer disease-causing abilities. The open reading frame (ORF) for cDNA3 gene is small. The predicted cDNA4 product exhibits significant similarities to the transposon impala of Fusarium oxysporum. The sequences of other portions of the PEP cluster predict four ORFs showing strong similarities to other fungal transposases. Several features of the PEP cluster, such as possession of multiple virulence genes, presence of DNA mobile elements, and differences in both codon usage and G+C content compared with other portions of the genome, resemble those of the pathogenicity islands identified in plant and animal bacterial pathogens. These properties raise the possibility that the PEP gene cluster may represent a fungal pathogenicity island. The second major goal of my work was to quantify the expression of PDA1, PEP1, PEP2, and PEP5 in vitro and in planta, and to characterize the regions flanking the PEP cluster. A real-time quantitative RT-PCR approach was used to measure the mRNA levels of these pathogenicity genes. In a glucose-based growth medium, mRNA levels of PDA1, PEP1, PEP5 were very low, while expression of PEP2 was undetectable. Starvation in vitro strongly stimulated PDA1 gene expression, whereas expression of PEP1 and PEP5 increased only moderately. In contrast, starvation had no effect on expression of PEP2 as indicated by an undetectable mRNA level during the 12 hr time course tested. In vitro pisatin strongly induced the expression of all four pathogenicity genes and the PDA1 experienced the highest level of induction (∼300-fold increase). Finally, marked induction of PDA1, PEP1 and PEP2 was observed during infection of pea roots, whereas the expression of PEP5 was only moderately induced. The flanking regions of the PEP cluster were sequenced and the sequences predict six ORFs that display significant similarities to various fungal genes. The G+C content, gene density, and codon preference of the PEP cluster and its flanking regions are similar. All six of the predicted genes in the flanking regions of the PEP cluster are expressed during infection of pea.

In vivo and in vitro degradation of resin-dentin interfaces can occur and accounts for poor clinical performance of adhesive dentin interfaces/restorations. Interfacial degradation results from several factors, to include, but not limited to: water sorption, hydrolysis of ester linkages of methacrylates resins, and activation of endogenous dentin matrix metalloproteinases (MMPs) in non-infiltrated collagen fibrils. Reduction of collagenolytic and gelatinolytic activity in dentin has been shown to be effective both in vivo and in vitro upon application of proteases inhibitors, such as chlorhexidine. This study compared the in vitro durability of resin-dentin bonds using microtensile testing over 12-month of water storage among five adhesive systems, including an experimental adhesive system, which had 2% chlorhexidine incorporated into the material. The results showed that all adhesive systems had a significant decrease in bond strength after 6 months, and that this reduction in bond strength was not significant different among the five adhesive systems studied. It is possible that chlorhexidine might have its inhibitory activity against MMPs lost or reduced due to chemical interaction with the adhesive system components. Also, to assess resin-dentin bonds degradation process, laboratorial studies use long-term water storage, which is labor-intense and time consuming process, therefore this study tested the possibility of accelerating the resin-dentin degradation process using water storage at 50° C. A significant reduction in microtensile bond strength occurred for specimens after 12-month storage at 50° C. The higher temperature may have increased the rate of water sorption and hydrolytic activity within the polymer network leading to adverse consequences to the interface.

L'objectif général de cette thèse a été d'étudier le potentiel de billes à base de molécules d'α-cyclodextrine et d'huile de soja, pour l'administration orale de principes actifs peu solubles dans l'eau.Nous avons tout d'abord vérifié qu'il était possible d'encapsuler dans les billes des molécules actives (la progestérone et l'indométacine) autres que les rétinoïdes et le diazépam, avec une teneur élevée et un rendement de fabrication satisfaisant. L'étude du comportement des billes nues lyophilisées, en termes de stabilité et de libération dans des milieux digestifs simulés, nous a permis de proposer un mécanisme de libération de la molécule encapsulée qui se déroule en plusieurs étapes: i) hydratation des billes, ii) dissolution de la matrice hydrophile d'α-cyclodextrine, iii) libération de gouttelettes d'huile contenant le principe actif puis de la fraction dissoute dans l'huile par un phénomène de partage, iiii) fragmentation des billes fragilisées et libération totale de l'huile. La présence de sels biliaires dans le milieu, accélère à la fois la libération et la quantité dissoute, en fragilisant les billes et en réduisant la valeur du coefficient de partage du principe actif entre l'huile et le milieu digestif. Nous avons montré in vitro et in vivo qu'il est possible de moduler la libération d'un principe actif à partir d'une même formulation de départ, en jouant sur l'organisation du système (émulsion sèche, billes nues, billes coquées par un nouvel ajout d'α-cyclodextrine sur les billes nues). Les études in vivo chez le rat ont révélé que l'émulsion sèche se comporte comme une forme à libération immédiate, les billes coquées comme une forme à libération prolongée et les billes nues comme une forme à libération intermédiaire. Enfin, la libération du principe actif encapsulé peut également être modulée en modifiant le mode de séchage des billes. Comparativement à la lyophilisation, le séchage à l'étuve modifie les propriétés des billes en augmentant leur résistance dans les milieux digestifs simulés et prolonge la libération de la molécule encapsulée.

Le lupus erythemateux dissemine est une maladie auto-immune caracterisee par la production d'anticorps antidna double brin qui sont un marqueur du lupus erythemateux dissemine et qui sont consideres comme etant responsable des lesions tissulaires du lupus par l'intermediaire du depot de complexes immuns dna anti-dna. Des anticorps anti dna monoclonaux specifiques du dna double brin ont ete produits dans des modeles experimentaux de souris lupiques b/w. Nous avons montre que ces anticorps anti-dna monoclonaux reconnaissent 5 polypeptides a la surface de differents types cellulaires concernes dans la pathogenie du lupus. Nous avons montre qu'il existe un motif antigenique commun entre le dna double brin et ces polypeptides membranaires. Nous avons isole ces polypeptides membranaires et produit un anticorps polyclonal contre ces polypeptides. Nous suggerons que ces polypeptides membranaires pourraient jouer le role d'immunogene que ne joue pas le dna double brin

Many plants produce toxic compounds, called phytoalexins, in response to infection by microorganisms. Some fungal pathogens of these plants can detoxify their host's phytoalexins and genetic studies of the ascomycete, Nectria haematococca Mating Population VI have established an association between detoxification of the pea phytoalexin, pisatin (Pda), and pathogenicity. Previous studies of one of the six genes (PDA) that confer this trait (PDA6-1) was on a dispensable chromosome. In the current study, a technique was developed that uses the pea plant to select for highly virulent recombinant progeny from crosses in which such progeny were relatively rare. It was demonstrated that when pea plants are inoculated with a mixture of ascospores that isolates recovered from pea lesions showed a strong bias for Pda and for being more virulent on pea, compared with ascospore progeny which did not undergo selection on plant. Additionally, all highly virulent isolates had PDA1-1, one of the three PDA genes present in the cross parents, showing that PDA1-1, or a linked gene, was necessary for virulence on pea. In the current study, highly virulent isolates were also identified by screening progeny from crosses that involved a highly virulent parent, 34-18. Analysis of 34-18 and its progeny showed that this isolate contains three PDA genes, PDA5 and PDA9, which were characterized in this study, and an allele of a previously characterized PDA gene. All three genes were associated with virulence on pea and could be lost during genetic crosses. Electrophoretic karyotype (CHEF) analysis showed that this was due to loss of a 1.5 Megabase chromosome carrying PDA1-2 and at least a portion of a 4.9 Mb chromosome carrying PDA5 and PDA9. CHEF analysis also showed that the other previously characterized PDA genes (PDA1-1, PDA2, PDA3, PDA4, PDA6-1 and PDA6-2) were on dispensable chromosomes. These dispensable chromosomes were not required for pathogenicity on carrot and ripe tomato. The results from this work provide evidence to support the hypothesis that the PDA chromosomes are dispensable, that some of them contain genes conferring virulence specifically on pea and genes for pathogenicity on other hosts were on non-PDA chromosomes.

Le rayonnement ultraviolet (UV) est un cancérigène pour lequel peu d'informations sur l'exposition des populations est disponible. L'intensité et les variations de l'exposition au rayonnement UV solaire, principale source d'exposition, a un impact sur la santé mais il est difficile de les surveiller. Le travail de cette thèse a permis de développer un outil pour une estimation quantitative de l'exposition individuelle à l'UV solaire pour l'épidémiologie. Nous avons créé un atlas des moyennes mensuelles d'irradiation journalière en Europe. Certaines données manquantes au niveau des pays nordiques en hiver ont dû être extrapolées. Nous avons vu que la saisonnalité est forte et que la répartition spatiale ne suit pas seulement le gradient de latitude. Par exemple, l'irradiation UV est plus élevée au sud des pays nordiques qu'au centre de l'Europe. Une enquête a été menée dans huit populations européennes afin d'estimer l'exposition individuelle. Ces populations ont des comportements différents vis-à-vis de l'exposition au soleil. Après une étape de modélisation pour estimer les données d'irradiation UV manquantes au nord de la Norvège sur l'ensemble de l'année, nous avons pu quantifier l'exposition chronique et l'exposition pendant les vacances dans trois populations (française, italienne et norvégienne). L'outil développé au cours de cette thèse pourra être utilisé pour de futures études épidémiologiques qui permettront de connaître l'exposition au rayonnement ultraviolet solaire de populations et de mieux comprendre son rôle dans l'étiologie de diverses maladies, telles que les cancers cutanés.

Plant exudates have been implicated as a driving force for rhizosphere interactions, the molecular mechanisms of root exudation and release of plant signal molecules remain unknown. Molecular dissection of the process of root exudation may eventually lead to the genetic engineering of plants to manage rhizosphere interactions. In this study, the release of microbial gene inducers was examined by manipulating border cell separation. Specifically, the hypothesis to be tested is whether border cell separation contributes to the release of nodulation (nod) gene inducers. The model system was pea and Rhizobium leguminosarum bv viciae. The experimental approach was to identify gene that play a role in border cell separation, which can be used as a tool to manipulate the process experimentally. Molecular cloning and genetic manipulation by antisense mutagenesis of rcpme1 was carried out to test whether expression of rcpme1 in root tips of pea is required for border cell separation. The cDNA and genomic copy of rcpme1 were cloned and characterized. The rcpme1 promoter was isolated and analyzed by expression of a GUS reporter genes fused to the promoter. Using Agrobacterium rhizogenes-mediated transgenic hairy roots, the effect of PME on border cell separation was examined by expressing antisense rcpme1 mRNA driven by its own promoter. Transgenic hairy roots of pea expressing antisense rcpme1 mRNA showed various phenotypes including incomplete separation of root border cells, decreased border cell number, abnormal root tip morphology, and stunted hairy root development. To test the hypothesis that the process of border cell separation plays a role in root-microbe interactions, pea and its symbiotic partner Rhizobium leguminosarum bv viciae were used. Results from this study indicated that transgenic hairy roots with reduced border cell separation resulted in reduced nod gene induction, while physiological treatments that increase border cell separation activity resulted in enhanced nod gene induction. Increased nod gene induction was correlated with increased nodulation on pea roots. These results are consistent with the hypothesis that the process of border cell separation from root tips of pea is important in border cell separation and consequent release of root exudate-derived nod inducers.

Pterocarpan phytoalexins are antimicrobial compounds produced by legumes when challenged by biotic stresses. Most legumes produce pterocarpan phytoalexins with (-)-stereochemistry but pea (Pisum sativum L.) produces as its major phytoalexin (+)-pisatin. Pea also occasionally produces a minor amount of (-)-maackiain as a pterocarpan phytoalexin, and studies on the biosyntheses of (+)-pisatin and (-)-maackiain have shown that up to (-)-7,2'-dihydroxy-4',5'-methylenedioxyisoflavanone [(-)-sophorol] and 7,2'-dihydroxy-4',5'-methyl-enedioxyisoflavanol [(-)-DMDI]they have common intermediates with (-)-DMDI being where the two pathways diverge. The final step in (+)-pisatin biosynthesis is the methylation of (+)-6a-hydroxymaackiain [(+)-6a-HMK] by 6a-hydroxymaackiain methyltransferase (HMM2) but the steps from (-)-DMDI to (+)-6a-HMK are unknown.The shifting of the stereochemistry from (-)-DMDI to (+)-6a-HMK has been proposed to involve the achiral isoflavene, 7, 2'-dihydroxy-4', 5'-methylene-dioxyisoflav-3-ene (DMDIF). In this dissertation, I have shown that cis-(-)-DMDI is the enzymatic product of (-)-sophorol, and is the precursor of DMDIF which is produced by the dehydration activity of "isoflavene synthase" (IFVS). IFVS activity was not observed in elicited tissues of alfalfa, chickpea, beans, pepper, and broccoli, plants that do not produce (+) pterocarpans. Partial purification of IFVS demonstrated that it is either large in size or tightly complexed with other proteins. The SDS-PAGE of the 29-fold purified product revealed 12 major bands that aggregated into 3 bands in the non-denaturing PAGE. IFVS activity was in band 3 which co-migrated with marker proteins of>100 kDa in size. Proteins identified from LC-MS/MS peptide sequences of the proteins in band 3, when compared to three protein databases, did not identify any proteins with an enzymatic activity expected for IFVS. A disease resistance-response protein (a dirigent-like protein) and two protein-binding proteins were the most abundantly detected proteins in the pea transcriptome-translated database. Also, four of the known enzymes (isoflavone reductase, HMM1, HMM2, and sophorol reductase) involved in (+)-pisatin biosynthesis were among the proteins identified. It may be that IFVS is associated with these other proteins as a complex in vitro and in vivo. The lack of detection of IFVS in the databases could be because it has not yet been sequenced as it functions in a rare biosynthetic pathway.

L'application d'une pression sur la peau provoque une vasodilatation cutanée, appelée vasodilatation induite par une pression (PIV), et retarde l'apparition de l'ischémie tissulaire liée à cette pression. La pression appliquée sur la peau active les fibres nerveuses capsaïno-sensibles, qui sécrètent en réponse des neurotransmetteurs, qui eux provoquent au niveau de l'endothélium la synthèse et la sécrétion de facteurs endothéliaux qui induisent une relaxation du muscle lisse. Ce travail avait pour objectif d'étudier l'effet du vieillissement sur la PIV.
Chez la souris âgée, sans neuropathie périphérique, la PIV était altérée en raison d'une diminution de la vasodilatation endothélium-dépendante ; et la contribution des facteurs endothéliaux de la vasodilatation était modifiée : l'Endothelium-Derived Hyperpolarizing Factor jouait un rôle primordial en raison d'une diminution du monoxyde d'azote et de la prostacycline. Chez les sujets âgés (60-75 ans), la PIV était altérée en comparaison avec les sujets jeunes (20-35 ans) en raison d'une diminution de la vasodilatation endothélium-dépendante mais aussi d'une altération des fibres capsaïno-sensibles et/ou des neurotransmetteurs. En présence d'une neuropathie périphérique, la PIV était abolie. Ces modifications de la microcirculation cutanée au cours du vieillissement expliqueraient la plus grande vulnérabilité de la peau à l'ischémie et l'augmentation du risque d'ulcère de pression liée à l'âge. La compréhension des modifications de la PIV avec l'âge permet d'entrevoir de nouvelles perceptives de prévention et de traitement de l'ulcère de pression chez le sujet âgé.

Thesis (MScAgric)--Stellenbosch University, 2012.
ENGLISH ABSTRACT: Botrytis cinerea Pers. Fr. [teleomorph Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel] causes serious losses of over 200 crops worldwide, including rooibos seedlings and pears. This pathogen is characterized by morphological, physiological and genetic diversity. The genetic diversity and population structure have not been investigated for B. cinerea populations in South Africa. Botrytis cinerea collected from rooibos seedlings and in pear orchards in the Western Cape of South Africa were investigated in the present study. The study was done with the aid of microsatellite markers, the amplification of mating type alleles MAT1-1 and MAT1-2 and determination of resistance towards various fungicides. Population dynamics was inferred and a similar picture emerged in both production systems. Botrytis cinerea annually causes severe losses of rooibos seedlings (Aspalathus linearis) in nurseries situated in the Clanwilliam region. Sampling was done in five nurseries and the cryptic species status of the isolates obtained was determined through restriction enzyme digestion of the Bc-hch gene. All but one (206 out of 207) of the isolates belonged to Group II or B. cinerea ‘sensu stricto’. Analysis of the B. cinerea Group II population, using seven microsatellite loci, was performed to assess the genetic population structure. Total gene diversity (H) was high, with a mean of 0.67. Two of the nurseries populations’ sample sizes were severely limited after clone correction, yet 100 genotypes were discerned among the 206 isolates genotyped. The percentage of maximal genotypic diversity (G) ranged between 16 and 68 for the five populations, with a total value of 17 for the 100 genotypes. One genotype, represented by 27 clones, was isolated from four nurseries. Relatively low but significant population differentiation was observed in total between nurseries (mean FST = 0.030, P = 0.001). The distribution of mating types MAT1-1 and MAT1-2 differed significantly from the ratio of 1:1 for the total population plus two of the nurseries’ populations. Three nursery populations had an equal mating type distribution. The index of association (IA) analyses suggests that the populations are asexually reproducing. Analysis of molecular variance (AMOVA) indicated that 97% of the total genetic variation is distributed within subpopulations. Fungicide resistance frequency against iprodione for 198 of the genotyped isolates displayed highly varying levels of resistance amongst the five nurseries. The mean total incidence of resistance towards iprodione was 43%, ranging from 0% to 81% for the five nurseries. Baseline sensitivity towards pyrimethanil yielded an average EC50 value of 0.096 mg/L. Botrytis cinerea isolates were collected from pear blossoms (Pyrus communis) in four orchards. Two orchards in the Ceres area and two in the Grabouw area were sampled from. A total of 181 isolates were collected from the four orchards. Incidence of blossom infection in the orchards ranged from 3% to 17%. Overall, there was a high incidence of isolates that had only the Boty transposable element (74%) compared to those harbouring both (Boty and Flipper), simultaneously (transposa, 24%). One isolate examined had the Flipper element only. Cryptic species status according to restriction enzyme digestion of the Bc-hch gene indicated that all the isolates belonged to Group II or B. cinerea ‘sensu stricto’. Analysis of the Group II population, through the use of seven microsatellite loci, was performed to assess the genetic population structure. Total gene diversity (H) was high, with a mean of 0.69 across all populations. Although two of the subpopulations displayed a high clonal proportion, overall 91 genotypes were discerned among the 181 isolates. The percentage of maximal genotypic diversity (G) ranged between 18 and 33 for the four populations, with a total value of 14 for the 91 genotypes. One genotype, represented by 27 clones, was isolated from all orchards. Moderate, but significant population differentiation was present in total among orchards (mean FST = 0.118, P = 0.001). The distribution of the mating types, MAT1-1 and MAT1-2, did not differ significantly from a 1:1 ratio for the total population as well as the subpopulations. Index of association (IA) analyses, on the other hand, suggests that the populations reproduce asexually. Analysis of molecular variance (AMOVA) indicated that 88% of the total genetic variation is distributed within subpopulations, 9% between subpopulations and only 3% between production areas. Fungicide resistance frequency against fenhexamid, iprodione and benomyl varied, with the highest levels of resistance present against benomyl and low levels of resistance seen towards iprodione and fenhexamid. In conclusion, this study has shown that there exist within the studied populations of B. cinerea, obtained from rooibos nurseries and pear orchards, an adaptive capacity to overcome current means of control. The use of population genetics to further our understanding of how plant pathogens interact and spread throughout a given environment is of cardinal importance in aiding the development of sustainable and integrated management strategies. Knowledge of the dispersal of B. cinerea in the two studied cropping systems has shed light on the inherent risk that it poses, and this together with knowledge of the levels of resistance that occurs should serve as an early warning to help divert possible loss of control in future.
AFRIKAANSE OPSOMMING: Botrytis cinerea Pers. Fr. [teleomorf Botryotinia fuckeliana (de Bary) Whetzel] veroorsaak ernstige verliese van meer as 200 gewasse wêreldwyd, insluitende rooibossaailinge en pere. Hierdie patogeen word deur morfologiese, fisiologiese, asook genetiese diversiteit gekenmerk. Die genetiese diversiteit en populasie-struktuur van B. cinerea populasies wat in Suid-Afrika voorkom, is nog nie ondersoek nie. Botrytis cinerea verkryg vanaf rooibossaailinge en in peerboorde in die Wes-Kaap van Suid-Afrika is ondersoek. Hierdie studie is met behulp van mikrosatellietmerkers, amplifikasie van die twee paringstipe gene (MAT1-1 en MAT1-2), asook die bepaling van weerstandsvlakke teenoor verskeie swamdoders, uitgevoer. Populasie-dinamika is afgelei en ‘n soortgelyke tendens is in beide produksie-sisteme waargeneem. Botrytis cinerea veroorsaak jaarliks ernstige verliese van rooibossaailinge (Aspalathus linearis) in kwekerye in die Clanwilliam-area. Monsters is in vyf kwekerye versamel en die kriptiese spesiestatus van die verkrygde isolate is deur restriksie-ensiemvertering van die Bc-hch geen bepaal. Almal behalwe een (206 uit 207) isolaat het aan Groep II of B. cinerea ‘sensu stricto’ behoort. Analise van die B. cinerea Groep II populasie, deur middel van sewe mikrosatellietmerkers, is uitgevoer om die genetiese populasiestruktuur te bepaal. Totale geendiversiteit (H) was hoog, met ‘n gemiddelde van 0.67. Alhoewel twee van die kwekerye se monstergrootte erg ingeperk is ná kloonverwydering, is daar nogtans 100 genotipes onder die 206 isolate wat geïsoleer is, waargeneem. Die persentasie van maksimale genotipiese diversiteit (G) het tussen 16 en 68, vir die vyf populasies, gewissel, met ‘n totaal van 17 vir die 100 genotipes. Een genotipe, verteenwoordig deur 27 klone, is uit vier kwekerye geïsoleer. Relatief lae dog noemenswaardige populasie-differensiasie is in totaal tussen kwekerye waargeneem (gem. FST = 0.030, P = 0.001). Die verspreiding van die twee paringstipes (MAT1-1 en MAT1-2) het beduidend verskil van ‘n 1:1 verhouding vir die totale populasie, asook twee van die kwekerye se populasies. Die drie oorblywende kwekerye se populasies het egter ‘n gelyke verdeling van die twee paringstipes getoon. Die indeks van assosiasie (IA) analises toon dat die populasies ongeslagtelik voortplant. Analise van molekulêre variasie (AMOVA) het aangedui dat 97% van die totale genetiese variasie binne die subpopulasies versprei is. Hoogs variërende vlakke van weerstand tussen die vyf kwekerye teenoor die swamdoder iprodioon, is vir die 198 isolate wat getoets is, gevind. Die totale gemiddelde frekwensie van weerstand teenoor iprodioon was 43%, wat tussen 0% en 81% vir die vyf kwekerye gevarieer het. Fondasie-vlak-sensitiwiteit vir pyrimethanil het ‘n gemiddelde EC50 waarde van 0.096 mg/L opgelewer. Botrytis cinerea isolate is ook vanuit peerbloeisels (Pyrus communis L.) vanuit vier boorde versamel, twee uit elk van die Ceres- en Grabouw-areas. In totaal is 181 isolate vanuit die vier boorde versamel. Die frekwensie van bloeiselinfeksie het tussen 3% en 17% gewissel. Oor die algemeen was daar ‘n hoë frekwensie van isolate wat slegs die Boty transponeerbare element teenwoordig gehad het (74%) in vergelyking met dié wat tegelykertyd beide (Boty en Flipper) teenwoordig gehad het. Een isolaat het slegs die Flipper element gehad. Bepaling van die kriptiese spesiestatus met behulp van restriksie-ensiemvertering van die Bc-hch geen het aangedui dat alle versamelde isolate tot Groep II of B. cinerea ‘sensu stricto’ behoort het. Analise van die Groep II populasie, deur middel van sewe mikrosatellietmerkers, is uitgevoer om genetiese populasie-struktuur te bepaal. Totale geendiversiteit (H) was hoog, met ‘n gemiddelde van 0.69 oor alle populasies. Alhoewel twee subpopulasies ‘n hoë klonale fraksie getoon het, is 91 genotipes tussen die 181 isolate wat verkry is, onderskei. Die persentasie van maksimale genotipiese diversiteit (G) het tussen 18 en 33 vir die vier populasies gewissel, met ‘n totale waarde van 14 vir die 91 genotipes. Een genotipe, verteenwoordig deur 27 klone, was in al vier boorde teenwoordig. Gematigde dog beduidende populasie differensiasie was in totaal tussen boorde teenwoordig (gem. FST = 0.118, P = 0.001). Die verspreiding van die paringstipes (MAT1-1 en MAT1-2) het nie betekenisvol van ‘n 1:1 verhouding vir die totale populasie, insluitende die subpopulasies, verskil nie. Indeks van assosiasie (IA) analises het egter aangedui dat die populasies ongeslagtelik voortplant. Analise van molekulêre variasie (AMOVA) het aangedui dat 88% van die totale genetiese variasie in subpopulasies te vinde was, 9% tussen subpopulasies en slegs 3% tussen produksie-areas. Frekwensie van swamdoder weerstandbiedendheid vir fenhexamid, iprodioon en benomyl het gewissel, met die hoogste vlakke teenoor benomyl waargeneem, maar baie lae vlakke teenoor fenhexamid en iprodioon. Samevattend het hierdie studie getoon dat die populasies van B. cinerea wat in hierdie twee produksie-sisteme, op rooibossaailinge en in peer boorde, ondersoek is, ‘n aanpasbaarheid toon om huidige metodes van beheer te oorkom. Die gebruik van populasiegenetika as ‘n hulpmiddel om ons kennis van patogeen-interaksies en -verspreiding te verbreed, is van kardinale belang in die ontwikkeling van geïntegreerde en volhoubare beheermaatreëls. Kennis van die verspreiding van B. cinerea in die bestudeerde gewasproduksiestelsels, werp lig op die inherente risiko wat dié patogeen inhou. Dít, tesame met kennis van die weerstandsvlakke wat voorkom, kan as ‘n vroegtydige waarskuwing dien ten einde moontlike verlies van beheer in die toekoms te help teenwerk.

La prise en charge des pathologies obstructives des voies aériennes supérieures (VAS) de l'enfant est actuellement basée sur l'évaluation de l'obstruction lors d'une endoscopie sous anesthésie générale. Cet examen a une morbidité non négligeable et les contraintes pesant sur un enfant atteint d'une pathologie obstructive des VAS sont lourdes. La difficulté de quantifier de manière simple et précise l'obstruction des VAS et son retentissement justifie l'évaluation de nouvelles techniques. L'objectif de ce travail a été d'étudier des méthodes d'explorations, non ou peu invasives, de ces pathologies obstructives : la méthode de réflexion acoustique (MRA) et la mesure du travail respiratoire. La MRA est basée sur l'analyse de la réflexion d'une onde sonore dans les VAS. Le travail respiratoire est la mesure de l'effort fourni par les muscles respiratoires au cours de la respiration. Nous avons démontré que la MRA était applicable chez l'enfant de plus de 2 ans. Des mesures sur des enfants atteints de mucoviscidose et de mucopolysaccharidose ont permis d'étudier les résistances des VAS et leur évolution au cours de la maladie. Chez l'enfant plus jeune, quand la MRA est impossible, nous avons mis en évidence chez des nourrissons atteints d'une séquence de Robin et présentant un travail respiratoire très augmenté qu'une ventilation non invasive était capable de diminuer l'effort fourni et d'améliorer l'évolution clinique Les méthodes d'explorations peu ou non invasives des VAS de l'enfant sont prometteuses car simples, sans danger, et potentiellement complémentaires d'autres examens plus invasifs. Leur réalisation en routine est envisageable dans de nombreux cas de figure

La grande famille des facteurs de transcription Ets est caractérisée par un domaine de liaison à l’ADN, le domaine ETS, qui présente une structure de type hélice-tour-hélice ailé et qui reconnaît la séquence nucléotidique GGAA/T. Ces facteurs sont des protéines modulaires, dont les domaines sont structurellement conservés, régulent la transcription de leurs gènes cibles. L’action régulatrice de ces facteurs de transcription, ainsi que leur spécificité, dépendent de leurs sites d’expression, du taux auquel ils sont exprimés ainsi que des modifications post-traductionnelles qui les touchent. Au sein de la famille Ets, les trois membres du groupe PEA3 - Erm, Pea3 et Er81 - sont impliqués dans divers processus tant physiologiques tels que le développement des neurones sensitifs et moteurs que pathologiques tels que la croissance et l’invasion tumorale ou l’apparition de métastases, au niveau mammaire notamment.

Notre travail a eu pour ambition de mieux comprendre les relations structure/fonction des membres du groupe PEA3, et plus particulièrement de Erm.

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Doctorat en sciences biomédicales
info:eu-repo/semantics/nonPublished

Le papovavirus de hamster (hapv) possede un tropisme restreint in vivo vis a vis des keratinocytes et des lymphocytes. Il se replique dans les tumeurs cutanes qui apparaissent chez des hamsters syriens, et induit egalement des lymphomes chez le hamster. L'organisation genetique du hapv deduite de sa sequence a montre qu'il appartient a la famille des polyomavirus. Le hapv est present dans les lymphomes sous forme de multiples copies libres possedant toujours une deletion localisee dans la meme region du genome. Les signaux de transcription precoce du hapv semblent etre actives par la region precoce de ce virus

Characteristics of quantitative resistance in pea (Pisum sativum L.) to Erysiphe pisi DC, the pathogen causing powdery mildew, were investigated. Cultivars and seedlines of pea expressing quantitative resistance to E. pisi were identified and evaluated, by measuring the amounts of pathogen present on plant surfaces in field and glasshouse experiments. Disease severity on cv. Quantum was intermediate when compared with that on cv. Bolero (susceptible) and cv. Resal (resistant) in a field experiment. In glasshouse experiments, two groups of cultivars, one with a high degree of resistance and the other with nil to low degrees of resistance to E. pisi, were identified. This indicated either that a different mechanism of resistance applied in the two groups, or that there has been no previous selection for intermediate resistance. Several other cultivars expressing quantitative resistance were identified in a field experiment. Quantitative resistance in Quantum did not affect germination of E. pisi conidia, but reduced infection efficiency of conidia on this cultivar compared with cv. Pania (susceptible). Other epidemiological characteristics of quantitative resistance expression in Quantum relative to Pania were a 33% reduction in total conidium production and a 16% increase in time to maximum daily conidium production, both expressed on a colony area basis. In Bolero, the total conidium production was reduced relative to Pania, but the time to maximum spore production on a colony area basis was shorter. There were no differences between the cultivars in pathogen colony size or numbers of haustoria produced by the pathogen. Electron microscope studies suggested that haustoria in Quantum plants were smaller and less lobed than those in Pania plants and the surface area to volume ratios of the lobes and haustorial bodies were larger in Pania than in Quantum. The progress in time and spread in space of E. pisi was measured in field plots of cultivars Quantum, Pania and Bolero as disease severity (proportion of leaf area infected). Division of leaves (nodes) into three different age groups (young, medium, old) was necessary because of large variability in disease severity within plants. Disease severity on leaves at young nodes was less than 4% until the final assessment at 35 days after inoculation (dai). Exponential disease progress curves were fitted for leaves at medium nodes. Mean disease severity on medium nodes 12 dai was greatest (P<0.001) on Bolero and Pania (9.3 and 6.8% of leaf area infected respectively), and least on Quantum (1.6%). The mean disease relative growth rate was greatest (P<0.001) for Quantum, but was delayed compared to Pania and Bolero. Gompertz growth curves were fitted to disease progress data for leaves at old nodes. The asymptote was 78.2% of leaf area infected on Quantum, significantly lower (P<0.001) than on Bolero or Pania, which reached 100%. The point of inflection on Quantum occurred 22.8 dai, later (P<0.001) than on Pania (18.8 dai) and Bolero (18.3 dai), and the mean disease severity at the point of inflection was 28.8% for Quantum, less (P<0.00l) than on Pania (38.9%) or Bolero (38.5%). The average daily rates of increase in disease severity did not differ between the cultivars. Disease progress on Quantum was delayed compared with Pania and Bolero. Disease gradients from inoculum foci to 12 m were detected at early stages of the epidemic but the effects of background inoculum and the rate of disease progress were greater than the focus effect. Gradients flattened with time as the disease epidemic intensified, which was evident from the large isopathic rates (between 2.2 and 4.0 m d⁻¹) Some epidemiological variables expressed in controlled environments (low infection efficiency, low maximum daily spore production and long time to maximum spore production) that characterised quantitative resistance in Quantum were correlated with disease progress and spread in the field. These findings could be utilised in pea breeding programmes to identify parent lines from which quantitatively resistant progeny could be selected.

Les aquaporines (AQPs) sont des petites protéines formant des canaux hydriques àtravers les membranes cellulaires. Les AQPs 0, 1, 2 ,4 ,5 ,6 et 8 assurent le transport sélectif de l'eautandis que les AQPs 3, 7, 9 et 10 permettent également le passage du glycérol. Nous avons étudié leurexpression dans l'épiderme, la couche supérieure de notre peau supposée imperméable. Dans lesmélanocytes, des cellules dendritiques responsables de la pigmentation, seule l'AQP1 est exprimée.Nous avons montré que les kératinocytes, les cellules majoritaires de l'épiderme, expriment enprolifération les AQPs 3 et 10, alors que les kératinocytes différenciés expriment les AQPs 3 et 9. Lalocalisation de l'AQP3 a été précédemment rapportée à la membrane plasmique des kératinocytes, de lacouche basales à la couche épineuse. Nous avons localisé l'AQP9 dans les kératinocytes différenciés dela couche granuleuse au contenu riche en glycérol et réduit en eau. De fait nous pensons que l'AQP9 ysert de transporteur de glycérol. Enfin contrairement à d'autres auteurs, nous n'avons pu mettre enévidence de lien entre prolifération tumorale et expression des aquaporines.

The purpose of this study was to determine the reliability of two new alternative portable methods for measuring maximal isometric force measures while performing the standard mid-thigh pull. One method, the bar grip method, required the use of the trunk and upper extremity muscles, while the second method, the pelvic belt method, did not. Both methods demonstrated good test-retest reliability via randomized repeated measures over 24-36 hours. Interestingly, the pelvic belt method generally demonstrated average maximal forces up to 65% higher than the bar method. There was a good relationship between both methods. These new alternative methods could provide strength coaches an option for a more efficient, cost-effective, portable means for the mid-thigh pull test.