Tesis sobre el tema "Fígado (Morfologia)"

Orientador: Classius de Oliveira
Banca: Sebastião Roberto Taboga
Banca: Fernando Ribeiro Gomes
Resumo: Os anuros estão em declínio populacional no mundo todo, sendo que a contaminação aquática é um dos fatores que está influenciando neste processo. A Flutamida é um medicamento antiandrogênico utilizado contra o câncer de próstata, presente em corpos d'água como um contaminante. Este composto pode atuar como desregulador endócrino, afetando principalmente a reprodução. Assim, os anuros da família Bufonidae, que apresentam o órgão de Bidder, considerado um ovário rudimentar, são bons modelos para estudar a ação deste composto. Já o fígado é o principal órgão de detoxificação e está diretamente relacionado à metabolização de substâncias tóxicas. Dessa forma, nosso objetivo foi avaliar a ação da Flutamida na morfologia dos órgãos reprodutivos e do fígado de machos Rhinella schneideri, bem como nos níveis séricos dos hormônios sexuais. Foram utilizados 18 machos, os quais receberam, por 7 dias, doses diárias de 1 ou 5 mg/kg de Flutamida diluída em óleo mineral, enquanto o grupo controle recebeu apenas o óleo mineral. Em seguida os animais foram eutanasiados, o sangue foi coletado e foram retirados os testículos, órgãos de Bidder e fígado, que seguiram para a rotina histológica de acordo com a análise empregada. Nos testículos foram avaliadas as áreas das células germinativas e do lóculo seminífero. No órgão de Bidder as células germinativas foram quantificadas, bem como a área ocupada pelo pigmento lipofuscina. Já no fígado nós mensuramos as áreas dos pigmentos melanina, lipofuscina e hemosiderina. Os níveis séricos de testosterona e estradiol foram identificados por ELISA. No testículo, houve aumento das espermatogônias e redução dos espermatozoides em feixe e no lúmen em ambas as concentrações. Houve ainda aumento das espermátides secundárias na menor dosagem e dos espermatócitos primários na maior dosagem. A área locular variou apenas na concentração de 1 mg/kg...
Abstract: The anurans are in population decline worldwide, and water pollution is one of the factor influencing this process. The Flutamide is an antiandrogen medicine used against prostate cancer, and also is a contaminant. This compound can act as an endocrine disrupter that can affect mainly the reproduction. In Bufonidae family occurs a peculiar organ named Bidder's organ, considered a rudimentary ovary. The liver is the main organ with detoxification functions and is directly related to substances metabolism. Thus, our aim was to evaluate the effect of Flutamide on morphology of the reproductive organs and liver of males Rhinella schneideri, and on the serum levels of steroid hormones. We used 18 males of the specie, organized in 3 groups. The treatment groups received, for 7 days, daily doses of 1 or 5 mg/kg of Flutamide diluted in mineral oil, while the control group received only the mineral oil. After the experiments, the animals were euthanized, the blood was collected and testis, Bidder's organs and liver were removed and proceed to histological routine according to the analysis employed for each one. For testis we evaluated the area of the germ cells and seminiferous locule. For Bidder's organ we quantified the the germ cells and the pigmented area of lipofuscin. In the liver we measured the pigmented areas of melanin, lipofuscin and hemosiderin. Serum testosterone and estradiol were identified by ELISA. In testis there was an increase in spermatogonia and reduction of bundle and lumen sperm in both treatments. Also occurred an increase in secondary spermatids in lower dosage and in primary spermatocytes in higher dosage. The locular area varied only at the low dose. In Bidder's organ there was a decrease in degeneration and atresia oocytes and an increase in final diplotene oocytes in both concentrations of Flutamide, as well as a reduction in lipofuscin pigmented area. In the liver the 3 ...
Mestre

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:01Z : No. of bitstreams: 1 000844080.pdf: 1835153 bytes, checksum: 63d573db683f27943deeb8883f18ad05 (MD5)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Os anuros estão em declínio populacional no mundo todo, sendo que a contaminação aquática é um dos fatores que está influenciando neste processo. A Flutamida é um medicamento antiandrogênico utilizado contra o câncer de próstata, presente em corpos d'água como um contaminante. Este composto pode atuar como desregulador endócrino, afetando principalmente a reprodução. Assim, os anuros da família Bufonidae, que apresentam o órgão de Bidder, considerado um ovário rudimentar, são bons modelos para estudar a ação deste composto. Já o fígado é o principal órgão de detoxificação e está diretamente relacionado à metabolização de substâncias tóxicas. Dessa forma, nosso objetivo foi avaliar a ação da Flutamida na morfologia dos órgãos reprodutivos e do fígado de machos Rhinella schneideri, bem como nos níveis séricos dos hormônios sexuais. Foram utilizados 18 machos, os quais receberam, por 7 dias, doses diárias de 1 ou 5 mg/kg de Flutamida diluída em óleo mineral, enquanto o grupo controle recebeu apenas o óleo mineral. Em seguida os animais foram eutanasiados, o sangue foi coletado e foram retirados os testículos, órgãos de Bidder e fígado, que seguiram para a rotina histológica de acordo com a análise empregada. Nos testículos foram avaliadas as áreas das células germinativas e do lóculo seminífero. No órgão de Bidder as células germinativas foram quantificadas, bem como a área ocupada pelo pigmento lipofuscina. Já no fígado nós mensuramos as áreas dos pigmentos melanina, lipofuscina e hemosiderina. Os níveis séricos de testosterona e estradiol foram identificados por ELISA. No testículo, houve aumento das espermatogônias e redução dos espermatozoides em feixe e no lúmen em ambas as concentrações. Houve ainda aumento das espermátides secundárias na menor dosagem e dos espermatócitos primários na maior dosagem. A área locular variou apenas na concentração de 1 mg/kg...
The anurans are in population decline worldwide, and water pollution is one of the factor influencing this process. The Flutamide is an antiandrogen medicine used against prostate cancer, and also is a contaminant. This compound can act as an endocrine disrupter that can affect mainly the reproduction. In Bufonidae family occurs a peculiar organ named Bidder's organ, considered a rudimentary ovary. The liver is the main organ with detoxification functions and is directly related to substances metabolism. Thus, our aim was to evaluate the effect of Flutamide on morphology of the reproductive organs and liver of males Rhinella schneideri, and on the serum levels of steroid hormones. We used 18 males of the specie, organized in 3 groups. The treatment groups received, for 7 days, daily doses of 1 or 5 mg/kg of Flutamide diluted in mineral oil, while the control group received only the mineral oil. After the experiments, the animals were euthanized, the blood was collected and testis, Bidder's organs and liver were removed and proceed to histological routine according to the analysis employed for each one. For testis we evaluated the area of the germ cells and seminiferous locule. For Bidder's organ we quantified the the germ cells and the pigmented area of lipofuscin. In the liver we measured the pigmented areas of melanin, lipofuscin and hemosiderin. Serum testosterone and estradiol were identified by ELISA. In testis there was an increase in spermatogonia and reduction of bundle and lumen sperm in both treatments. Also occurred an increase in secondary spermatids in lower dosage and in primary spermatocytes in higher dosage. The locular area varied only at the low dose. In Bidder's organ there was a decrease in degeneration and atresia oocytes and an increase in final diplotene oocytes in both concentrations of Flutamide, as well as a reduction in lipofuscin pigmented area. In the liver the 3 ...

O Tubarão azul (Prionace glauca), popularmente conhecido como cação-azul dentre todas as espécies de tubarão é a mais abundante no ambiente marinho, podendo ser encontrado em todos os mares. Com a diversidade das espécies, a descrição de qualquer fígado especifico, dificilmente poderá ser utilizada como um modelo. Juntamente com essa variabilidade, algumas características fisiológicas dos peixes contribuem para ampliar seu polimorfismo hepático, entretanto pode ser considerado o ponto inicial para os estudos comparativos e filogenéticos entre os vertebrados. O fígado dos peixes aparece como em todos os outros vertebrados, como um órgão chave que vai controlar muitas funções vitais e realizar um papel proeminente na fisiologia dos peixes, tanto no anabolismo (proteínas, lipídios e carboidratos) e no catabolismo (nitrogênio, glicogenólises e desintoxicação). Por outro lado, deve ser considerado como um órgão alvo para muitos parâmetros biológicos e ambientais que podem alterar a estrutura e o metabolismo do fígado, como por exemplo, a alimentação, toxinas, parasitas, microrganismos e metais pesados acumulados. Nos peixes o fígado é localizado ventralmente na cavidade celomática, ajustando-se ao espaço disponível na cavidade do corpo. Foi realizada através da microscopia de luz e eletrônica de varredura a morfologia estrutural do desenvolvimento do fígado do tubarão azul nos 33 espécimes, divididos em diferentes tamanhos de embriões e fetos de 4 cm até 45 cm, comparados com um indivíduo adulto fêmea de 2 metros. A contagem de hepatócitos e vacúolos de gordura foi pela morfometria, através da técnica de pontos em fotomicrografias aleatórias. Nos resultados obtidos, pode-se notar que o fígado ocupava 20% do tamanho do animal. Microscopicamente, observou a presença de diferentes tamanhos de vacúolos de armazenamento de lipídio nos hepatócitos, diferença nas proporções de hepatócitos, linfócitos e vasos sanguíneos que diminui à medida que aumenta a estocagem de lipídios, consequentemente diminuindo a visibilidade da estrutura do fígado. Maior visualização de vacúolos translúcidos intracitoplasmáticos microgoticular aumentando gradativamente para macrogoticulares. Sugerindo assim que a presença de lipidios seja para manutenção dos filhotes, flutuabilidade e reserva energéticado animal, indicando que ele armazena gordura em seu fígado desde o início da embriogênese.
The blue shark (Prionace glauca), popularly known as blue dogfish among all shark species is the most abundant in the marine environment, and can be found in all seas. With the diversity of species, the description of any specific liver can hardly be used as a model. Together with this variability, some physiological characteristics of the fish contribute to increase its hepatic polymorphism, however, it can be considered the starting point for comparative and phylogenetic studies among vertebrates. Fish liver appears as in all other vertebrates as a key organ that will control many vital functions and play a prominent role in fish physiology, both in anabolism (proteins, lipids and carbohydrates) and in catabolism (nitrogen, glycogenolysis and detoxification). On the other hand, it should be considered as a target organ for many biological and environmental parameters that can alter the structure and metabolism of the liver, such as food, toxins, parasites, microorganisms and accumulated heavy metals. In fish, the liver is located ventrally in the coelomic cavity, adjusting to the available space in the body cavity. The structural morphology of blue shark liver development in 33 specimens divided into different sizes of embryos and fetuses from 4 cm to 45 cm was compared to a female adult of 2 meters, using light microscopy and scanning electron microscopy. The counts of hepatocytes and fat vacuoles were by morphometry, using the technique of points in random photomicrographs. In the results obtained, it can be noted that the liver occupied 20% of the size of the animal. Microscopically, it observed the presence of different sizes of lipid storage vacuoles in hepatocytes, a difference in the proportions of hepatocytes, lymphocytes and blood vessels that decreases as lipid storage increases, consequently decreasing the visibility of the liver structure. Greater visualization of microcyticular intracytoplasmic translucent vacuoles gradually increasing for macrogoticulares. Thus suggesting that the presence of lipids is for the maintenance of the puppies, buoyancy and energy reserve of the animal, indicating that it stores fat in its liver from the beginning of embryogenesis.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico
Hábitos inadequados no estilo de vida, pelo consumo exacerbado de dietas ricas em gorduras e açúcares (frutose e sacarose), correlacionam-se positivamente com o desenvolvimento da obesidade, da resistência à insulina (RI) e da esteatose hepática não alcoólica (NAFLD). O estudo teve como objetivo avaliar a magnitude dos efeitos da administração crônica de dietas ricas em gordura e/ou frutose, e ainda, comparar os efeitos dos açúcares isoladamente (frutose e sacarose) sob as alterações bioquímicas, o perfil inflamatório, as respostas morfofuncionais e as expressões proteicas e gênicas de fatores de transcrição envolvidos na lipogênese, na beta-oxidação, na gliconeogênese e no estresse oxidativo no fígado. Camundongos machos C57BL/6 foram divididos em dois experimentos: 1) Dieta controle/standard chow (SC), dieta high fat (HF 42%), dieta high frutose (HFr 34%) e dieta high fat + high frutose (HFHFr - 42% fat + 34% frutose) por 16 semanas; 2) Dieta controle/standard chow (SC), dieta high frutose (HFru 50%) e dieta high sacarose (HSu 50%) por 15 semanas. Ao final dos experimentos foram observados: 1) Não houve diferença na massa corporal entre os animais HFr e SC, só foi observado ganho de peso nos grupos HF e HFHFr. Houve ainda aumento do colesterol total, dos triglicerídeos plasmáticos e hepáticos e RI nos grupos HF, HFr e HFHFr. No fígado, foi observado NAFLD com aumento na expressão de SREBP-1c e PPAR-γ, e redução de PPAR-α. A gliconeogênese mediada pelo GLUT-2 e PEPCK também foi aumentada nos grupos HF, HFr e HFHFr em relação ao grupo SC. Áreas de necroinflamação também foram observadas nos animais HFr e HFHFr; 2) Não houve diferença na massa corporal entre os grupos SC, HFru e HSu. Porém, houve aumento do colesterol total, dos triglicerídeos plasmáticos e hepáticos, da RI, das adipocinas (IL-6, resistina, MCP-1 e leptina), e redução da adiponectina. No fígado, abundante NAFLD com predominância da expressão proteica e gênica de SREBP-1c, PPAR-γ e redução de PPAR-α; e desequilíbrio antioxidante com redução da SOD, da Catalase e da GRx nos grupos HFru e HSu quando comparados ao SC. Não houve diferença na GPx entre os três grupos. Ainda foi observado aumento na expressão proteica de G6Pase, PEPCK e GLUT-2, envolvidos na gliconeogênese hepática nos grupos HFru e HSu. Áreas de necroinflamação, característico da transição NAFLD-NASH, também foram observados. Os resultados permitem concluir que, independente do aumento da massa corporal, a administração crônica de dietas ricas em frutose e sacarose tem efeitos similares aos observados com o consumo de dieta hiperlipídica. Parece que a RI e a NAFLD sejam os precursores destas alterações.
Habits unsuitable lifestyle, exacerbated by consumption of diets rich in fat and sugars (sucrose and fructose) are positively correlated with the development of obesity, insulin resistance (IR) and nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). The study aimed to evaluate the magnitude of the effects of chronic administration of diets rich in fat and/or fructose, and also compare the effects of sugars alone (fructose and sucrose) in the biochemical changes, the inflammatory profile, and the morphological and functional responses the protein and gene expression of transcription factors involved in lipogenesis, beta-oxidation, gluconeogenesis and oxidative stress in the liver. Male C57BL / 6 mice were divided into two experiments: 1) Diet control/standard chow (SC), high fat diet (HF - 42%), high-fructose diet (HFr - 34%) and high fat + high fructose diet (HFHFr - 42% fat + 34% fructose) for 16 weeks; 2) Diet control/standard chow (SC), high-fructose diet (HFru - 50%) and high sucrose diet (HSu - 50%) for 15 weeks. At the end of the experiments were observed: 1) There was no difference in body mass between HFr and SC groups, only weight gain was observed in the HF group and HFHFr. There was also an increase in total cholesterol, plasma and hepatic triglycerides and IR in HF, HFr, HFHFr groups. In the liver, NAFLD was observed with increased expression of SREBP-1c, PPAR-γ and PPAR-α reduction. The gluconeogenesis mediated by GLUT-2 and PEPCK was also increased in HF, HFr and HFHFr groups compared to SC. Areas of necroinflammation were also observed in HFr and HFHFr; 2) There was no difference in body mass between the SC, HFru and HSu groups. However, there was an increase in total cholesterol, plasma and hepatic triglycerides, IR, adipokines (IL-6, resistin, leptin and MCP-1), and decreased of adiponectin. In the liver, abundant NAFLD with prevalence of protein and gene expression of SREBP-1c, PPAR-γ and PPAR-α reduction; and antioxidant imbalance with reduction of SOD, catalase and GRx in HFru and HSu groups when compared to SC. There was no difference in GPx between the three groups. Further increase in protein expression of G6Pase, PEPCK and GLUT-2, involved in hepatic gluconeogenesis in HFru and HSu groups was noted. Inflammatory infiltrate characteristic of transition NAFLD-NASH were also observed. The results indicate that, regardless of the increase in body mass, chronic administration of diets rich in fructose and sucrose have similar effects to those observed with the consumption of high-fat diet. It seems that IR and NAFLD are the forerunners of these changes.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-08-23T16:48:14Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 602465 bytes, checksum: b24d7eee9a571ca070367356263f9db9 (MD5)
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
Introdução: A obesidade é uma realidade em vários países, afetando todas as faixas etárias e distribuída por todos os tipos de populações. O tratamento farmacológico com enfase no gasto de energia e redução da fome tem aumentado nos últimos anos e a pesquisa acompanha a tendência, principalmente tratando-se dos fármacos fitoterápicos termogênicos. Dentre eles, detaca-se o chá verde por ser a bebida mais consumida no mundo depois da água. Objetivo: Avaliar o efeito da infusão de chá verde no peso corporal, perfil lipídico, estrutura e estresse oxidativo do fígado de camundongos previamente submetidos à dieta de cafeteria (DC). Metodologia: Após consumirem a DC por 90 dias, os animais foram divididos em quatro grupos onde foram combinados os tratamentos de dieta de cafeteria (G1 e G3) e dieta padrão para roedores (G2 e G4), mais a infusão de chá verde na dose de 100mg/Kg de peso corporal (G3 e G4) e o controle água (G1 e G2). A duração destes tratamentos foi de 35 dias. Resultados: A mudança na composição da dieta foi a principal causa da perda de peso, sendo o chá responsável por uma redução de aproximadamente 2% em ambos os grupos. O tratamento com a infusão de chá verde conseguiu reduzir em 50% a porcentagem de gotículas lipídicas, sendo o chá combinado com a dieta responsável por uma redução de 80% na porcentagem de inclusões lipídicas no fígado. As análises do estresse oxidativo do tecido hepático mostraram um aumento nos níveis do marcador de peroxidação lipídica malondialdeído (MDA) no grupo G2 e uma tendência ao aumento na quantidade deste marcador no G4 devido ao aumento do consumo da gordura acumulada. Conclusões: Não houve contribuição quanto a redução do peso corporal, porém o tratamento favoreceu a melhoria dos parâmetros morfométricos do fígado, principalmente quanto ao acúmulo de lipídios e ausência de indicativos de dano celular.
Introduction: The obesity is a reality in several countries, affecting all age groups and distributed by all types of populations. Pharmacological treatment with emphasis on energy expenditure and appetite reduction has increased in recent years and research follows the trend, especially in the case of thermogenic phytotherapeutic drugs. Among them, green tea stands out as the most consumed drink in the world after water. Objective: Evaluate the effect of green tea infusion on body weight, lipid profile, structure and oxidative stress of the liver of mice previously submitted to the cafeteria diet (DC). Methods: After consuming the DC for 90 days, the animals were divided in four groups where combined the treatments of the diet of cafeteria (G1 and G3) and standard diet for rodents (G2 and G4), plus the infusion of green tea in the dose of 100mg / kg of body weight (G3 and G4) and the water control (G1 and G2). The duration of these treatments was 35 days. The treatment lasted 35 days. Results: The change in diet composition was the main cause of weight loss, with tea accounting for a reduction of approximately 2% in both groups. The treatment with green tea infusion was able to reduce the percentage of lipid droplets by 50%, with tea combined with the diet responsible for an 80% of reduction in the percentage of lipid inclusions in the liver. Analyzes of the oxidative stress of the liver tissue showed an increase in levels of the lipid peroxidation marker malondialdehyde (MDA) in the G2 group and a tendency to increase the amount of this marker in G4 due to the increase in accumulated fat consumption. Conclusions: Although the dose studied did not contribute greatly to the reduction of body weight, it favored the improvement of the morphometric parameters of the liver, mainly as regards the accumulation of lipids and absence of cell damage.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-14Bitstream added on 2014-08-13T18:00:18Z : No. of bitstreams: 1 000762915.pdf: 5739468 bytes, checksum: 49bb0796202507fd24ace5db6b55637f (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Uns dos compostos mais despejados nas águas de rios, em geral, são os detergentes biodegradáveis, os quais ainda geram desconfiança, na população, quanto ao fato de serem ou não poluentes. Na verdade são, em geral, substâncias químicas liberadas em ambientes aquáticos e que podem gerar alterações em organismos que vivem nestas áreas. Tendo em vista a crescente preocupação da população em geral sobre os efeitos de poluentes liberados na natureza e de sua ação sobre a fauna, este trabalho pretendeu verificar os efeitos dos poluentes na água do Lago Azul (2º 24' 39''S, 47º 33' 39''L) e dos efeitos da água com uma diluição de detergentes biodegradáveis, comparados com um grupo controle, tratado com água pura, retirada do poço artesiano da UNESP – Campus de Rio Claro, a qual é clorada segundo os padrões exigidos pela SABESP, em espécies de peixes de grande porte: Prochilodus lineatus (Curimbatá) e de pequeno porte: Astyanax altiparanae (Lambari). Para isso foram utilizadas técnicas de histologia, histoquímica, fluorescência e ultra-estrutura, para avaliar os danos na morfologia do fígado e brânquias e no acúmulo de lipofuscina (pigmento do envelhecimento), após 1 e 5 meses de exposição. As análises de histologia e histoquímica demonstraram, no caso do fígado, para ambas as espécies, redução da área ocupada pelo glicogênio, elevação no número de macrófagos recrutados, diminuição de lisossomos presentes nos hepatócitos, além de alterações na morfologia dos hepatócitos. Com relação às brânquias, foram encontradas diversas modificações morfológicas, como fusões lamelares, hipertrofia e hiperplasia epiteliais, aneurismas, sendo que estas alterações variaram quanto a sua frequência nos tratamentos e nas espécies testadas. Além disso, nesse mesmo órgão pudemos identificar a proliferação de células de muco e células ricas em mitocôndrias. Nossas análises ultra-estruturais...
Biodegradable detergents are some of the compounds most dumped into rivers and still raise distrust among the general population concerning its potential to be pollutants. In fact these pollutants are generally chemical substances released onto aquatic environments that can cause alterations in animals who live in these areas. Keeping in mind the growing concern of general population about the effects of pollutants released in nature and their action on fauna, the present study wished to verify effects of water pollutants in lake waters and a biodegradable detergent dilution compared to control groups, exposed to pure water from an artesian well at UNESP- campus de Rio Claro, which is chlorinated according to standards required by SABESP, on large-sized: Prochilodus lineatus (Curimbatá) and smallsized species: Astyanax altiparanae (Lambari). For such purposes histological, histochemical, fluorescence and ultrastructural techniques were used to assess damage in liver and gill morphology and lipofuscin (aging pigment) accumulation after 1 and 5 months of exposure. Histological and histochemical analyses revealed reduced glycogen area, increased number of recruited macrophages, lysosome reduction and general morphological alterations in liver of both species. Gills showed several morphological modifications such as lamellar fusion, epithelial hypertrophy and hyperplasia and aneurisms, with varying frequencies amongst treatments and species tested. Furthermore, the same organ also exhibited mucous cell proliferation and mitochondria-rich cell proliferation. Our ultrastructural analyses revealed that gills are severely affected at cellular levels, presenting cytoplasmic degradation, mitochondrial fusions and damages and in some cases, apoptotic cells. Quantitative studies of lipofuscin presence based on fluorescence microscopy allowed us to verify that these pollutants not only promote lipofuscin accumulation in both organs tested, but they...
FAPESP: 09/17118-9

Orientador: Flavio Henrique Caetano
Banca: Maria Izabel Souza Camargo
Banca: Hélio Batista dos Santos
Banca: Karen Cristiane Martinez de Moraes
Banca: Dimitrius Leonardo Pitol
Resumo: Uns dos compostos mais despejados nas águas de rios, em geral, são os detergentes biodegradáveis, os quais ainda geram desconfiança, na população, quanto ao fato de serem ou não poluentes. Na verdade são, em geral, substâncias químicas liberadas em ambientes aquáticos e que podem gerar alterações em organismos que vivem nestas áreas. Tendo em vista a crescente preocupação da população em geral sobre os efeitos de poluentes liberados na natureza e de sua ação sobre a fauna, este trabalho pretendeu verificar os efeitos dos poluentes na água do Lago Azul (2º 24' 39''S, 47º 33' 39''L) e dos efeitos da água com uma diluição de detergentes biodegradáveis, comparados com um grupo controle, tratado com água pura, retirada do poço artesiano da UNESP - Campus de Rio Claro, a qual é clorada segundo os padrões exigidos pela SABESP, em espécies de peixes de grande porte: Prochilodus lineatus (Curimbatá) e de pequeno porte: Astyanax altiparanae (Lambari). Para isso foram utilizadas técnicas de histologia, histoquímica, fluorescência e ultra-estrutura, para avaliar os danos na morfologia do fígado e brânquias e no acúmulo de lipofuscina (pigmento do envelhecimento), após 1 e 5 meses de exposição. As análises de histologia e histoquímica demonstraram, no caso do fígado, para ambas as espécies, redução da área ocupada pelo glicogênio, elevação no número de macrófagos recrutados, diminuição de lisossomos presentes nos hepatócitos, além de alterações na morfologia dos hepatócitos. Com relação às brânquias, foram encontradas diversas modificações morfológicas, como fusões lamelares, hipertrofia e hiperplasia epiteliais, aneurismas, sendo que estas alterações variaram quanto a sua frequência nos tratamentos e nas espécies testadas. Além disso, nesse mesmo órgão pudemos identificar a proliferação de células de muco e células ricas em mitocôndrias. Nossas análises ultra-estruturais...
Abstract: Biodegradable detergents are some of the compounds most dumped into rivers and still raise distrust among the general population concerning its potential to be pollutants. In fact these pollutants are generally chemical substances released onto aquatic environments that can cause alterations in animals who live in these areas. Keeping in mind the growing concern of general population about the effects of pollutants released in nature and their action on fauna, the present study wished to verify effects of water pollutants in lake waters and a biodegradable detergent dilution compared to control groups, exposed to pure water from an artesian well at UNESP- campus de Rio Claro, which is chlorinated according to standards required by SABESP, on large-sized: Prochilodus lineatus (Curimbatá) and smallsized species: Astyanax altiparanae (Lambari). For such purposes histological, histochemical, fluorescence and ultrastructural techniques were used to assess damage in liver and gill morphology and lipofuscin (aging pigment) accumulation after 1 and 5 months of exposure. Histological and histochemical analyses revealed reduced glycogen area, increased number of recruited macrophages, lysosome reduction and general morphological alterations in liver of both species. Gills showed several morphological modifications such as lamellar fusion, epithelial hypertrophy and hyperplasia and aneurisms, with varying frequencies amongst treatments and species tested. Furthermore, the same organ also exhibited mucous cell proliferation and mitochondria-rich cell proliferation. Our ultrastructural analyses revealed that gills are severely affected at cellular levels, presenting cytoplasmic degradation, mitochondrial fusions and damages and in some cases, apoptotic cells. Quantitative studies of lipofuscin presence based on fluorescence microscopy allowed us to verify that these pollutants not only promote lipofuscin accumulation in both organs tested, but they...
Doutor

As dietas ricas em lipídios saturados provocam efeitos deletérios no metabolismo de glicose, secreção de adipocinas e inflamação, entretanto, outros tipos de lipídios podem modular de forma diferenciada tais efeitos. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar o efeito de diferentes dietas hiperlipídicas no metabolismo de carboidratos, lipídios, no tecido adiposo e no fígado. Camundongos machos C57BL/6 foram divididos em 5 grupos (n=10/grupo): animais que receberam dieta controle (standart chow, SC, 10% de lipídios, grupo controle) e animais que receberam diferentes dietas hiperlipídicas (High-fat, HF, 60% de lipídios): à base de banha de porco (lard, grupo HF-L), à base de óleo de oliva (olive oil, grupo HF-O), à base de óleo de girassol (sunflower oil, grupo HF-S) e à base de óleo de canola (canola oil, grupo HF-Ca).Os animais foram alimentados com as dietas experimentas por 10 semanas. Diariamente a ingestão alimentar era verificada e semanalmente a massa corporal foi aferida. A glicose de jejum e o teste intraperitoneal de tolerância a insulina (TITI) foram realizados uma semana antes da eutanásia. No dia da eutanásia o sangue foi coletado, o tecido adiposo e o fígado dissecados e pesados. A insulina, leptina, adiponectina, resistina, fator de necrose tumoral alfa (TNFα), interleucina-6 (IL-6), proteína quimiotática de monócitos-1 (MCP-1) e inibidor do ativador de plasminogênio-1 (PAI-1) foram dosadas por ELISA. Com os dados de insulina e glicose foi calculado o índice HOMA-IR. Os animais dos grupos HF-L e HF-O apresentaram os maiores valores de insulina, resistina, leptina e HOMA-IR em comparação aos outros grupos (P < 0,0001). No grupo HF-L, os níveis de IL-6 foram maiores quando comparados com os demais grupos (P < 0,0005), enquanto os valores de adiponectina foram os menores (P < 0,0001). A quantidade de gordura subcutânea e visceral foi maior no grupo HF-L e este grupo apresentou também um aumento no diâmetro dos adipócitos. Entretanto a relação:visceral:subcutânea foi maior nos grupos HF-L e HF-O quando comparado com os demais grupos. Além disso, houve aumento de triglicérides hepáticos e de esteatose hepática nos animais dos grupos HF-L e HF-O. Nossos achados nos permitem concluir que animais que são alimentados com dietas hiperlipídica, a distribuição do tecido adiposo, o metabolismo de carboidratos, acumulo de triglicérides hepáticos e esteatose hepática são mais influenciados pelo tipo de lipídios do que pela quantidade.
Diets rich in saturated fat have a deleterious effect on glucose metabolism, adipokine release and inflammation. However, other lipid sources may modulate these parameters differently. Thus, the aim of the present work was to investigate the effect of high-fat diets from different sources on carbohydrate and lipid metabolism, adipose tissue and liver. Male C57BL/6 mice were allocated into 5 groups (n=10/group): standard chow fed mice (SC, 10% lipid, control group), and mice fed with high-fat diets (HF, 60% lipids) as follow: lard (HF-L), olive oil (HF-O), sunflower oil (HF-S), and canola oil (HF-C). Diets were offered for 10 weeks. Food intake was recorded daily and body mass weekly. One week before euthanasia, fasting glucose and intraperitoneal insulin tolerance test (IPITT) were assessed. At euthanasia, blood was collected, and the liver and adipose tissue were weighed. Insulin, leptin, adiponectin, resistin, tumoral necrosis factor alpha (TNFα), interlekin-6 (IL-6), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), and plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) were measured by an Elisa assay. The HOMA-IR index was calculated based on fasting glucose and insulin. Insulin, resistin, leptin and HOMA-IR were higher in HF-L and HF-O groups compared with the remainder groups (P < 0.0001). IL-6 was higher in the HF-L group compared with the other groups (P < 0.0005), whereas adiponectin levels were the lowest (P < 0.0001). The amount of both subcutaneous and visceral fat depots was the highest in the HF-L group, and they also had increased adipocyte diameter. However, visceral to subcutaneous fat ratio was higher in HF-L and HF-O groups compared with the remainder groups. Additionally, HF-L and HF-O groups showed increased hepatic triglyceride content and steatosis. Our data allow us to conclude that the type of lipid instead of its amount is important for determining adipose tissue distribution, carbohydrate metabolism, hepatic triglyceride accumulation and steatosis in mice fed a high-fat diet.

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-02-11T12:23:04Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Michelle Furquim Leão - 2007.pdf: 19618077 bytes, checksum: 185360e935aab77ea3553e7a7d1c4093 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
The sharp toxicity of the herbicide original Roundup (Glifosato), one of the more acquaintances and maybe one of the more used dessecantes in direct planting in the farmings in the area Centro Oeste and in every country now, it was investigated through the effects detected in the fish Poecilia viviparous...
A toxicidade aguda do herbicida Roundup original (Glifosato), um dos mais conhecidos e talvez um dos mais utilizados dessecantes em plantio direto nas lavouras na região Centro Oeste e em todo país atualmente, foi investigada através dos efeitos detectados no peixe Poecilia vivípara...

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-04T13:32:26Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 470280 bytes, checksum: 9f44370b75e414f6dd651fd00494f729 (MD5)
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
Hábitos de vida inadequados têm aumentado a prevalência das doenças crônico-degenerativas, e dentre essas os maiores destaques têm sido quanto as doenças cardiovasculares, obesidade e o diabetes mellitus, ambas envolvidas com o metabolismo lipídico. Assim, manter uma vida saudável é uma tarefa árdua, visto que os nutrientes dietários são fatores importantes na etiologia de doenças. Sendo portanto, imprescindíveis os conhecimentos sobre a qualidade e a quantidade dos nutrientes ingeridos. As moléculas lipídicas presentes nos alimentos exercem efeitos bastante diferenciados no organismo. O seu metabolismo é muito amplo, baseado na complexidade e na diversidade de classes destas moléculas. A classe dos esteróides (colesterol) e dos triacilgliceróis são as mais estudadas. Quanto aos triacilgliceróis há necessidade de muitos estudos para desvendar o efeito de seus ácidos graxos no metabolismo de modelos experimentais, pois o tamanho, grau de saturação e a distribuição posicional dos ácidos graxos nas moléculas de triacilgliceróis dietários exercem efeitos importantes sobre os lipídios celulares e a lipemia. Desta maneira, enquanto não são definidas as recomendações diárias adequadas dos tipos e quantidades de ácidos graxos, é de grande importância o consumo de nutrientes indispensáveis à vida que devem ser fornecidos via alimentação equilibrada. Sendo que associada a esta dieta, que deve ser rica em nutrientes como minerais, vitaminas, aminoácidos, ácidos graxos essenciais (linoléico ω6 e linolênico ω3), fibras, antioxidantes e a água, devem estar presentes no cotidiano a atividade física e outros hábitos saudáveis de vida visando à prevenção e/ou manutenção da saúde.
Inadequated ways of life has increased the prevalence os chronic- degenerative deseases, and among these, the heart deseases, obesity and the mellitus diabetes, both involved with the lipids of metabolism, has been the greatest eminence. So, keeping a healthy life is a difficult task, since the dietary nutrients are important factors in the etiology of the deseases, it is necessary to have the knowledge about the quality and the quantity of the ingested nutrients. The lipids molecules existing in the food exert very different effects in the organism. It has a very high metabolism, based in the complexity and in the diversity of these molecules category. The steroids category (cholesterol) and the triacylglycerols are the most studied ones. About the triacylglycerols, it is necessary to have many studies to discover the effects of their fatty acids in the metabolism of experimental models, because the size, saturation, degree and the positional distribution of the fatty acids in the molecule of the dietary triacylglycerols exert important effects over the celular lipids and lipemy. This way, while the daily adequated recommendations to the types and quantities of fatty acids aren`t defined, the consumption of necessary nutrients for life must be supplied through a balanced feeding. Together with this diet rich in nutrients like minerals, vitamins, aminoacids, essential fatty acids (linoleic 6 and linolenic 3), fibers, antioxidants and water, must be presents in the day by day, the physical activity and other healthy habits in the life aiming the prevention and/or the maintenance of the health.
Não foi localizado o cpf do autor.

As dislipidemias apresentam elevada prevalência em todo o mundo e estão fortemente associadas com a ocorrência de doenças cardiovasculares. Embora a etiologia das dislipidemias seja complexa e multifatorial, a patogênese dessas condições tem sido associada ao perfil de ingestão alimentar. Em modelos animais, a exposição a dietas hiperlipídicas/hipercalóricas é extremamente relevante para investigar o efeito do perfil dietético sobre o metabolismo e estrutura de múltiplos órgãos e tecidos. Além de interferir no metabolismo energético celular, a utilização de doses suprafisiológicas de esteroides anabolizantes tem sido frequentemente associada à elevada toxicidade, causando doenças renais, cardiovasculares e hepáticas de complexidade variável. Está bem estabelecido que o perfil de ingestão alimentar possa aumentar ou atenuar a toxicidade induzida diversas drogas, inclusive hormônios, oferecendo um fator de risco ou proteção ao organismo. Assim, o presente estudo investigou o efeito da dieta rica em gordura trans e esteroide anabolizante sobre o perfil lipídico, estrutura e função hepática em camundongos. Sessenta camundongos C57BL/6 fêmeas com 12 semanas de idade foram igualmente randomizados em 5 grupos: Grupo 1: Dieta padrão; Grupo 2: Dieta padrão + cipionato de testosterona (20 mg/kg); Grupo 3: Dieta hiperlipídica; Grupo 4: Dieta hiperlipídica + cipionato de testosterona (10 mg/kg); Grupo 5: Dieta hiperlipídica + cipionato de testosterona (20 mg/kg). Quando administrado em animais alimentados com a dieta padrão (normolipídica e normocalórica), o anabolizante não induziu alterações morfofuncionais hepáticas e metabólicas deletérias. Ao contrário, o anabolizante foi benéfico ao reduzir os níveis circulantes de LDL colesterol e das enzimas de função hepática nesses animais. Em combinação com a DHH, o anabolizante agravou a dislipidemia, reduzindo os níveis circulantes de HDL colesterol, aumentando os níveis de triglicérides e a gravidade da esteatose hepática em camundongos. Considerados em conjunto, os resultados permitiram concluir que o perfil dietético é capaz de interagir de forma complexa com os esteroides anabolizantes, modificando as características de susceptibilidade e resistência ao dano morfofuncional hepático e metabólico sistêmico em camundongos.
Dyslipidemias exhibit high prevalence worldwide and are strongly associated with the occurrence of cardiovascular diseases. Although the etiology of dyslipidemia is complex and multifactorial, the pathogenesis of these conditions has been associated to the food intake profile. In animal models, exposure to high-fat diets (HFD) constitutes robust experimental models to investigate the effect of dietary profile on metabolism, organ structure and function. Beyond interfere with cellular energy metabolism, use of supraphysiological doses of anabolic steroids has been often associated with high toxicity, causing renal, cardiovascular and liver diseases. It is well established that the food intake profile can increase or reduce the toxicity induced by several drugs, including hormones, offering a risk or protection factor to the organism. The present study investigated the effect of a HFD and anabolic steroid on body composition, lipid profile, liver function and structure in mice. Sixty C57BL/6 female, 12 weeks of age were randomized equally into 5 groups: Group 1: Standard Diet; Group 2: Standard Diet + testosterone cypionate (20 mg / kg); Group 3: HFD; Group 4: HFD + testosterone cypionate (10 mg / kg); Group 5: HFD + testosterone cypionate (20 mg / kg). When administered in animals fed a standard diet (normolipidic and normocaloric), the anabolic did not induce deleterious metabolic or morphofunctional changes in liver tissue. Conversely, anabolic was beneficial in reducing the circulating levels of LDL cholesterol and liver function enzymes in these animals. In combination with HFD, anabolic steroid worsened dyslipidemia, reducing circulating levels of HDL cholesterol, increasing triglycerides levels and the severity of hepatic steatosis in mice. Taken together, the results showed that HFD was able to interact with anabolic steroids in a complex way, modifying the characteristics of susceptibility and resistance to morphofunctional liver damage and systemic lipid metabolism dysfunction in mice.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-22T18:15:15Z No. of bitstreams: 1 MayaraCruzRibeiro.pdf: 1477635 bytes, checksum: 3daf1f5d95a16f48c327f3fb3a6b3b89 (MD5)
Made available in DSpace on 2017-06-22T18:15:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MayaraCruzRibeiro.pdf: 1477635 bytes, checksum: 3daf1f5d95a16f48c327f3fb3a6b3b89 (MD5) Previous issue date: 2014-04-29
Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA)
The diversity of the oscillations in the aquatic environment can be enhanced by the lack of preventive methods in management. The lack of knowledge about the parameters of water quality, such as transparency, alkalinity, hardness, dissolved oxygen, pH, ammonia, nitrite and pollutants cause various problems. The increase in the concentration of ammonia causes toxicity to aquatic organisms as it interacts with the biological parameters and can be intensified by the lack of appropriate management in water. Animals exposed to these contaminants may change in metabolic, immunologic, physiologic, and tissue damage in target organs such as gills and liver processes. The tetra (Bryconops caudomaculatus) is a native species with potential for aquaculture, with great potential for expansion, have high proliferation, short production cycle, accepts artificial food and serves as food for other species. The lack of information and the demand for knowledge about the disturbances caused by these animals increased concentrations of ammonia in the water require more specific studies in these target organs. The objective of this experiment was to evaluate the effects of exposure of un-ionized ammonia (NH3) in juvenile Bryconops caudomaculatus, and morphological and histopathological changes in the gills and liver. 150 juvenile minnows subjected to five treatments in tripicata with concentrations of NH3 (mg L-1) were control 0.003 ± 0.4; 0.15 ± 0.5; 0.30 ± 0.3; 0.50 ± 0.5; 1.00 ± 0.4. After the experimental period, 12 animals from each treatment were collected to obtain the gills and liver. After, target organs passed by fixation, dehydration, and paraffin embedding diafranização processes. The staining technique used was toluidine blue for gills and hematoxylin-eosin for the liver. Analysis of variance was used for parametric data and Kruskal-Wallis test for the descriptive analyzes. Morphological changes were observed in the secondary lamellae in the gills from 0.15 mg L-1 as hyperplasia, hypertrophy, epithelial displacement, lamellar melt, edema, aneurysm rupture lamellar epithelium and increase in width of the lamellae. There was also the presence of liver histopathologies from 0.30 mg L-1 as the capillary congestion, inflammation, pigmentation and endogenous treatment with the highest concentration in hepatocytes showed necrosis. These changes caused by the processes of intoxication impaired vital functions, metabolism, processes of respiration and detoxification of the body, probably in hematopoiesis and osmoregulation.
A diversidade das oscilações no ambiente aquático pode ser intensificada pela falta de metodologias preventivas no manejo. A falta de conhecimento a respeito dos parâmetros de qualidade de água, como transparência, alcalinidade, dureza, oxigênio dissolvido, pH, amônia, nitrito e poluentes, causa vários problemas. A elevação na concentração da amônia causa toxicidade para os organismos aquáticos, pois interage com os parâmetros biológicos e pode ser intensificada pela falta de um manejo adequado na água. Animais expostos a esses contaminantes podem sofrer alterações nos processos metabólicos, imunológicas, fisiológicos, lesões teciduais e nos órgãos-alvo como brânquias e fígado. O lambari (Bryconops caudomaculatus) é uma espécie nativa com potencial para piscicultura, com grandes possibilidades de expansão, tem alta proliferação, ciclo curto de produção, aceita alimento artificial e serve de alimento para outras espécies. A falta de informação e a demanda por conhecimento sobre os distúrbios causados nesses animais pelo aumento das concentrações de amônia na água exigem estudos mais específicos nesses órgãos-alvo. O objetivo deste experimento foi avaliar os efeitos da exposição de amônia não ionizada (NH3) em juvenis de Bryconops caudomaculatus, e as alterações histopatológicas e morfológicas nas brânquias e no fígado. Foram utilizados 150 juvenis de lambaris submetidos a cinco tratamentos, em tripicata, com concentrações de NH3 (mg L-1): controle 0,003 ± 0,4; 0,15 ± 0,5; 0,30 ± 0,3; 0,50 ± 0,5; 1,00 ± 0,4. Após o período experimental foram coletados 12 animais de cada tratamento, para a obtenção das brânquias e do fígado. Após, os órgãos-alvo passaram pelos processos fixação, desidratação, diafranização e inclusão em parafina. A técnica de coloração utilizada foi a Azul de Toluidina para brânquias e a Hematoxilina-Eosina para o fígado. Foi utilizada análise de variância para os dados paramétricos e teste de Kruskall-Wallis para as análises descritivas. Observou-se alterações morfológicas nas lamelas secundárias nas brânquias a partir de 0,15mg L-1, como hiperplasia, hipertrofia, deslocamento epitelial, fusão lamelar, edemas, aneurisma lamelar com ruptura do epitélio e aumento na largura das lamelas. Houve presença também de histopatológias no fígado a partir de 0,30 mg L-1 como congestão nos capilares, processos inflamatórios, pigmentação endógena e no tratamento com maior concentração os hepatócitos apresentaram necrose. Essas alterações causadas pelos processos de intoxicação prejudicaram as funções vitais, metabolização, os processos de respiração e desintoxicação do organismo, hematopoiese e provavelmente na osmorregulação.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
A doença hepática gordurosa não alcoólica é uma desordem multifatorial causada principalmente por excesso nutricional e resistência à insulina, com prevalência estimada de 20-40% nos países ocidentais. A dieta hiperlipídica e/ou rica em sacarose pode influenciar no desenvolvimento da esteatose hepática associada à obesidade e a resistência à insulina. O fígado, por assumir papel central no controle metabólico, é um órgão alvo nos casos de excesso alimentar, ocasionando, principalmente, acúmulo de gotículas de gordura nos hepatócitos. Este trabalho teve como objetivo avaliar o início das alterações morfológicas e metabólicas no fígado e no tecido adiposo de camundongos suíços machos alimentados com dieta hiperlipídica e/ou rica em sacarose. Camundongos suíços machos aos três meses de idade foram divididos em quatro grupos nutricionais: dieta padrão (SC), dieta hiperlipídica (HF), dieta rica em sacarose (HSu) e dieta hiperlipídica rica em sacarose (HFHSu). Os animais receberam as respectivas dietas durante quatro semanas. A massa corporal, a ingestão alimentar e a tolerância oral à glicose foram avaliados. Ao sacrifício, o fígado e os depósitos de gordura corporal foram removidos e processados para análises histomorfométricas e moleculares. As amostras de sangue foram obtidas para análises bioquímicas plasmáticas. Os dados foram expressos como média e erro padrão da média e as diferenças foram testadas por one-way ANOVA com pós-teste de Holm-Sidak, e foi considerado o nível de significância de p<0,05. Os grupos HF e HFHSu apresentaram-se mais pesados quando comparados aos grupos SC e HSu. Os animais dos grupos HF, HSu e HFHSu apresentaram intolerância à glicose, esteatose hepática e aumento de triglicerídeos hepáticos quando comparados ao grupo SC (p<0,0005). Adicionalmente, houve elevação na expressão hepática das proteínas transportador de glicose 2 (GLUT-2), proteína de ligação ao elemento regulador do esterol 1-c (SREBP1-c), fosfoenolpiruvato carboxiquinase (PEPCK), glicose -6- fosfatase (G6PASE), substrato do receptor da insulinaI-1 (IRS-1) e proteína quinase B (AKt/ou PKB) e redução da expressão no fígado do receptor ativador de proliferação peroxissomal (PPAR-α) nos grupos experimentais em comparação com o grupo SC (p<0,0005). A administração de dieta hiperlipídica e/ou rica em sacarose promoveu intolerância à glicose e danos hepáticos (hepatomegalia, esteatose, redução da beta-oxidação, aumento na lipogênese e na produção de glicose) em camundongos machos adultos.
The non-alcoholic fatty liver disease is a multifactorial disorder caused mainly by excess nutritional and insulin resistance, with an estimated prevalence of 20-40% in Western countries. The diet can to influence in the development of fatty liver associated with obesity and insulin resistance. The liver plays a central role in metabolic control, is a target organ, in case of excess of food, mainly causing accumulation of fat droplets in hepatocytes. This study aimed to evaluate the early morphological and metabolic changes in the liver and adipose tissue of male Swiss mice fed high-fat and/or high-sucrose diets. Twenty three-month-old male Swiss Webster mice were divided into 4 groups: standard chow (SC), high-fat diet (HF), high-sucrose diet (HSu) and high-fat-high-sucrose diet (HFHSu). Animals received the respective diets for 4 weeks; throughout the experiment, body mass, food intake and oral glucose tolerance were evaluated. After the mice were euthanized, the liver was removed and processed for histomorphometrical and molecular analysis. Blood samples were obtained for serum analysis. The data were tested by one-way ANOVA with a Holm-Sidak post-hoc test and were expressed as the mean standard error of the mean; the significance level was set at p < 0.05. The HF and HFHSu groups were heavier than the SC and HSu groups. Animals from the HF, HSu and HFHSu groups presented glucose intolerance, hepatomegaly, liver steatosis and augmented hepatic triglycerides when compared to the SC group (p<0.0005). Additionally, there was an elevation in glucose transporter 2 (GLUT-2), sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c), phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK), glucose 6 phosphatase (G6PASE), insulin receptor substrate 1 (IRS-1), protein kinase B (AKT/ or PKB) protein expression and a reduction in peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPAR-alpha) expression in liver from the experimental groups compared to those of the SC group (p<0.0005). Administration of high-fat and/or high-sucrose diets promoted glucose intolerance and liver damage (hepatomegaly, steatosis, reduced beta-oxidation, increased lipogenesis and glucose production) in adult male mice.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
Ingestão precoce de dieta enriquecida com óleo de peixe reverte alterações bioquímicas, hepáticas e do tecido adiposo na prole de camundongos submetidos à restrição protéica. 2010. 61 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Humana e Experimental) Instituto de Biologia Roberto Alcântara Gomes, Universidade do Estado do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2010. Estudos relacionam obesidade na vida adulta com baixo peso ao nascer (programação metabólica). O fígado é um dos órgãos mais afetados pela programação. O óleo de peixe é rico em ácidos graxos poli-insaturados (AGP) da família n-3: ácido eicosapentaenóico (EPA) e docosahexaenóico (DHA). O EPA e DHA são relacionados com redução da pressão arterial sistólica e ação anti-inflamatória. Testar a hipótese que a ingestão precoce de óleo de peixe (FO) pode reverter os efeitos deletérios da programação na prole adulta de camundongos. Fêmeas grávidas foram alimentadas com ração padrão (SC) ou dieta restrita em proteínas (LP) durante a gestação e lactação. Ao desmame, os seguintes grupos foram formados (de acordo com a suplementação com FO): SC-SC e SC-FO, LP-SC e LP-FO. Foram aferidas massa corporal, ingestão e eficiência alimentar, pressão arterial sistólica (PAS), insulina plasmática, glicose, fator de necrose tumoral (TNF)-alfa, colesterol total (CT), triglicerídeos (TG) e alanina aminotransferase (ALT), morfometria dos adipócitos, estereologia do fígado e expressão proteínas SREBP-1c e PPAR-alfa. A prole LP apresentou maior massa corporal, hipercolesterolemia e hiperglicemia Na idade adulta, os animais restritos tornaram-se hipertensos, com esteatose hepática e elevado nível da SREBP-1c. Entretanto, a prole LP com dieta suplementada com FO ocasionou menor ganho e menor massa corporal final. A dieta FO melhorou o metabolismo lipídico, diminuiu a concentração plasmática de CT e TG, reduziu a massa adiposa e o tamanho dos adipócitos. Além disso, LP-FO mostrou níveis reduzidos da ALT, redução da esteatose hepática, baixa expressão da SREBP-1c e aumento da expressão do PPAR-alfa, além de redução da PAS e dos níveis de TNF-alfa. A dieta com FO teve efeitos benéficos revertendo as respostas da programação sobre o metabolismo da glicose e lipídios, estrutura hepática e tecido adiposo na prole adulta programada.
Studies related obesity in adult life with malnutrition in early life, called metabolic programming. The liver seems to be one of the most affected by fetal programming. Fish oil is rich in polyunsaturated fatty acids (PUFA) of n-3 family: eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA). EPA and DHA are related with several biological reactions, like systolic blood pressure reduction and anti-inflammatory properties. We hypothesized that early fish oil (FO) intake would revert the programming responses in adult offspring. Pregnant mice were fed either standard chow (SC) or low-protein diet (LP) throughout pregnancy/lactation. At weaning, the following groups were formed (FO means supplemented with fish oil): SC-SC and SC-FO, LP-SC and LP-FO. We measured body mass, food intake, feed efficiency, blood pressure (BP), levels of plasma insulin, glucose, tumor necrosis factor (TNF-alpha), total cholesterol (TC), triglycerides (TG) and alanine aminotransferase (ALT). We also measured adipocyte morphometry, liver stereology and expression of the SREBP-1 and PPAR-alpha proteins.The LP offspring are predisposed to becoming fat, hypercholesterolemic and hyperglycemic. In addition, during adulthood, they become hypertensive with hepatic steatosis and had high level of SREBP-1. However, LP offspring that were fed FO-enriched diet had decreased body mass gain and lower final body mass. In addition, with FO diet, these mice have improved lipid metabolism with decrease in plasma TC and TG levels, reduced fat pad masses and adipocyte size. Furthermore, LP-FO offspring show low ALT level, reduced liver steatosis with low SREBP-1 protein expression and high PPAR-alpha expression, and improvement of BP and TNF-alpha level. Early fish oil intake has beneficial effects reversing the programming responses that control body mass, glucose and lipid metabolism, and liver and adipose tissue structure in adult programmed offspring.

A dieta hiperlipídica (high-fat, HF) materna durante a gestação e/ou lactação aumenta a susceptibilidade da prole para o desenvolvimento de doenças crônicas na fase adulta. Verificar a hipótese que a ingestão materna de dieta HF nos períodos críticos de desenvolvimento (gestação e/ou lactação) predispõe à doença não alcoólica do fígado gorduroso e alterações pancreáticas e no tecido adiposo de camundongos machos adultos. Camundongos C57BL/6 fêmeas receberam durante a gestação e/ou lactação dieta padrão (standard chow, SC) ou HF. Filhotes machos foram divididos em cinco grupos: SC provenientes de mães SC; G provenientes de mães HF durante a gestação; L provenientes de mães HF durante a lactação; GL/HF provenientes de mães HF durante a gestação/lactação, mantendo a mesma dieta HF no período pós-natal (do desmame aos 3 meses deidade); GL provenientes de mães HF durante a gestação/lactação trocando a dieta para SC no período pós-natal (do desmame aos 3 meses deidade). Foi analisada ao longo do experimento a massa corporal da prole. No sacrifício (3 meses), o fígado, o pâncreas e a gordura epididimária foram removidos, pesados e processados e o sangue foi coletado para análise bioquímica. Ao nascimento e ao desmame, filhotes GL/HF foram mais pesados (+6% e +44%, p<0,05, respectivamente) que os filhotes SC. Os filhotes G apresentaram resistência à insulina e menor expressão do transportador de glicose no fígado (GLUT-2). A esteatose hepática foi observada nos grupos G, L, GL e principalmente nos filhotes do grupo GL/HF. A expressão hepática da proteína ligante de elementos regulatórios de esteróis (SREBP-1c) estava aumentada nos filhotes G, GL e GL/HF. Os filhotes G, GL e GL/HF apresentaram hipertrofia da ilhota pancreática e dos adipócitos quando comparados com o grupo SC. O consumo de dieta HF durante a gestação mostra-se ser o período mais prejudicial para os filhotes adultos de camundongos. A programação metabólica por dieta HF leva ao remodelamento adverso do fígado, do pâncreas e do tecido adiposo
Maternal high-fat diet (HF) during gestation and/or lactation period increases the susceptibility to development of chronic disease in offspring adult life. This work aimed to verify the hypothesis that maternal intake of high-fat diet in critical periods of pregnancy and/or suckling period predisposes to non alcoholic fatty liver disease, pancreatic and adipose tissue alterations in adulthood mice offspring. C57BL/6 female mice were fed, during gestation and/or lactation phases, with standard chow (SC) or HF diet. Male pups were divided into 5 groups: SC- from SC fed dam; G- from HF fed dam during gestation period; L- from HF fed dam during lactation period; GL- from HF fed dam during gestation and lactation periods and GL/HF- from HF fed dam during gestation and lactation, maintaining HF diet from post-weaning to adulthood. We analyzed body mass in all experiment, and at the euthanasia (3 mo-old), liver, pancreas and adipose tissue were removed, weighted and embedded. Blood was collected to biochemical analyses. At birth and at weaning, GL/HF pups were heavier than SC pups (+6% and +44%, p<0.05, respectively). G offspring showed insulin resistance and lower glucose transporter-2 expression (GLUT-2). Hepatic steatosis was present in G, L, GL and mainly in GL/HF offspring. Sterol regulatory element-binding protein-1c (SREBP-1c) expression was higher in G, GL and GL/HF offspring. It is important to mention that pancreatic islet hypertrophy and adipocyte hypertrophy were affected in G, GL and GL/HF offspring in comparison to SC. HF diet administration during gestation period is worse than lactation period. Furthermore, this type of programming by HF predisposes to adverse remodeling in liver, pancreas and adipose tissue in adult mice offspring

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Cebus apella foram expostos a 1,5 ppm de metilmércurio (metilHg) na dieta por 120 dias. Foi investigado a hepatotoxicidade do metilHg, as concentrações no sangue total foram monitoradas a cada 30 dias usando espectrofotômetro de absorção atômica a vapor frio Hg201, as transaminases (ALT e AST) e bilirrubina total (BT) foram dosadas no decorrer da exposição. O fígado foi fixado com formaldeido 10%, e preparado por protocolos da histopatologia. Foi observada diferença significativa entre os grupos exposto e controle, quanto aos níveis de Hgtotal, nos períodos de 60, 90 (P < 0,05) e 120 dias (P < 0,01). A histopatologia revelou esteatose moderada e degeneração hidrópica, um achado comum em exposição ao metilmercúrio em muitas outras espécies. Não foi observada diferença significativa entre os níveis de AST (p= 0.38), ALT (p= 0.83) e BT (p= 0.07) do grupo controle e exposto. A correlação de Pearson com Hgtotal demonstrou correlação negativa ( AST r= -0,7; ALT r=0,07; BT r= -0,3 e p > 0,05), o que sugere a necessidade de novos estudos para esclarecer o nível de alerta da concentração de mercúrio e das dosagens hepáticas.
Cebus apella were exposed to 1,5 ppm methylmercury (methylHg) in the diet for 120 days. Hepatotoxicity was investigated, concentrations of mercury in total blood were monitored each 30 days using atomic absorption spectrometry with cold vapor Hg201, aspartate transaminase (AST), alanine transaminase (ALT) and total bilirubin (BT) were determined. Liver was fixed by formaldehyde 10% and prepared by histopathology protocols. Significant difference was observed in groups exposed and control about total mercury (Hgtotal) in the periods of 60, 90 (P < 0,05) and 120 days (P < 0,01). The histopathology revealed moderate steatosis and hydropic degeneration, common in methylHg exposed in other species. No Significant difference between the levels of AST (p= 0.38), ALT (p= 0.83) and BT (p= 0.07) in groups exposed and control. The Pearson correlation with Hgtotal was negative (AST r= -0,7; ALT r=0,07; BT r= -0,3 e p > 0,05), suggests another studies to clarify the alert levels of mercury concentrations and liver dosages.

Cholestatic diseases and their evolution into fibrosis and cirrhosis are wellknown. Despite the increase in therapies, such as liver transplants, this group of affections still represents a challenge in medical practices, from the diagnosis to the treatment, and is commonly linked to high rates of morbidity and lethality, coupled with high treatment costs. New conducts and the search for the physiopathological mechanisms involved are constantly emerging. The purpose of the present study was to evaluate the influence and effect of the partial or total exclusion of the terminal ileum in the liver, kidney, and ileum, in presence of obstructive cholestasis. Thirty-two male Wistar rats were divided into four groups (n = 8). Groups 2, 3, and 4 underwent the ligation of the common hepatic duct. After four weeks, an internal biliary drainage was performed by means of hepaticoduodenostomy, using a nelaton prosthesis. In the animals from Group 3, a laterolateral ileocolic anastomosis, with a partial exclusion of the final 10 centimeters of the terminal ileum, could be observed. In the animals from Group 4, the sectioning and closing of 10 distal centimeters of the terminal ileum, as well as a terminolateral anastomosis of the ileum with ascending colon, were performed. Group 1 was the control group, in which the rats were undertaken to only laparotomy and laparorrhaphy. At the end of eight weeks, all the rats from the four groups were killed and material was collected for exams. The biochemical exams included: albumin, aspartate-aminotransferase (AST), alanine-aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase, ã-glutamiltransferase, direct bilirubin, indirect bilirubin, urea, and creatinine. The liver, kidneys, and a segment of the terminal ileum were also collected for anatomopathological analyses. The results were submitted to statistical analyses by means of the ANOVA, Kruskal-Wallis, Pearson, and Fisher exact tests. Persistence in the varying degrees of fibrosis could be observed in the rats from groups 2, 3, and 4, with no significant difference amongst these groups. The control group did not present hepatic fibrosis. In the histology of the kidney and the terminal ileum, no differences could be identified among the four groups. Concerning the biochemical analyses, the values of AST, ALT, direct bilirubin, ã-glutamiltransferase, urea, and creatinine were greater in Group 4 as compared to the control group (p < 0.05). Group 4 presented urea and creatinine values that were higher than those from groups 2 and 3 (p < 0.05). In conclusion, in male Wistar rats, the ileocolic partial shunt of the terminal ileum and the total exclusion of the final centimeters of the terminal ileum after internal biliary drainage of the extra-hepatic cholestasis did not alter the intensity of hepatic fibrosis. These procedures did not modify the morphology of the kidney or the terminal ileum. The total exclusion of the terminal ileum worsened the biochemical samples from the liver and kidney. No benefit in the ileocolic shunt in either the morphology or function of the liver and kidneys could be observed. The total exclusion of the terminal ileum after biliary drainage for obstructive cholestasis worsened renal biochemical samples.
As doenças colestáticas e sua evolução para fibrose e cirrose são muito conhecidas. Apesar do incremento de terapias, como o transplante hepático, esse grupo de afecções, ainda representa desafio na prática médica, desde o diagnóstico até o tratamento, além de estarem ligadas a morbidade e letalidade altas, com custos de tratamento elevados. Novas condutas e busca dos mecanismos fisiopatológicos envolvidos são ampliados a cada dia. Este trabalho tem por objetivos avaliar a influência e os efeitos da exclusão parcial e total do íleo terminal em fígado, rins e íleo, na presença de colestase obstrutiva. Foram utilizados trinta e dois ratos Wistar machos, distribuídos em quatro grupos (n = 8). Os grupos 2, 3 e 4 foram submetidos a ligadura do ducto hepático comum e, após quatro semanas, realizou-se drenagem biliar interna, por meio de hepaticoduodenostomia, com uso de prótese de nelaton. Nos animais do Grupo 3 associou-se anastomose ileocólica laterolateral com exclusão parcial dos últimos dez centímetros do íleo terminal. Nos animais do Grupo 4 realizou-se a secção e fechamento dos dez centímetros distais do íleo terminal e foi feita anastomose terminolateral, do íleo com cólon ascendente. O Grupo 1 foi controle, no qual os ratos foram submetidos, apenas a laparotomia e laparorrafia. Ao fim de oito semanas, todos os ratos dos quatro grupos foram mortos e foi colhido material para exames. Os exames bioquímicos foram: albumina, aspartatoaminotransferase, alaninaaminotransferase, fosfatase alcalina, ã-glutamiltransferase, bilirrubina direta, bilirrubina indireta, ureia e creatinina. Foram colhidos ainda, fígado, rins e segmento de íleo terminal, para análise anatomopatológica. Os resultados foram submetidos a análise estatística pelos testes de ANOVA, Kruskal-Wallis, Pearson e Fisher. Houve persistência de graus variáveis de fibrose nos ratos do grupo 2, 3 e 4, sem diferença entre si. O grupo controle não apresentou fibrose hepática. Na histologia renal e do íleo terminal não foram vistas diferenças entre os quatro grupos. Em relação à análise bioquímica, os valores de AST, ALT, bilirrubina direta, ã-glutamiltransferase, ureia e creatinina foram maiores no Grupo 4 em relação ao controle (p < 0,05). O Grupo 4 apresentou valores de ureia e creatinina superiores aos dos grupos 2 e 3 (p < 0,05). Conclui-se que derivação parcial do íleo terminal e a exclusão total dos últimos centímetros do íleo terminal, associadas à drenagem biliar não apresentaram diferenças na intensidade da fibrose hepática, comparadas à drenagem biliar isolada, em ratos submetidos a ligadura prévia do ducto hepático comum. A exclusão do íleo terminal, em modelo de ligadura do ducto hepático associou-se a piora das provas bioquímicas do fígado. Não houve benefício na derivação ileocólica nas alterações morfológicas e na função do fígado e dos rins. A exclusão total do íleo terminal, associada a derivação biliodigestiva pós-colestase, piorou os valores das provas bioquímicas renais.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro
A intervenção farmacológica pode minimizar ou até mesmo reverter o remodelamento adverso em órgãos num modelo de síndrome metabólica. Este trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos das monoterapias e associações medicamentosas sobre a morfologia do tecido adiposo, remodelamento hepático e pancreático em camundongos C57bl/6 alimentados com dieta very high-fat. Camundongos C57bl/6 machos foram alimentados com dieta very high-fat (HF, 60% de lipídios) ou dieta padrão (SC, 10% de lipídios) por 10 semanas, quando foram iniciados os tratamentos: HF-T (HF + Telmisartana, 5.2mg/Kg/dia), HF-S (HF + Sitagliptina, 1.08g/Kg/dia), HF-M (HF + Metformina, 310.0mg/Kg/dia) e as associações medicamentosas HF-TM, HF-TS e HF-SM. Os grupos tratados também tiveram livre acesso à dieta high fat e os tratamentos duraram 6 semanas. Técnicas morfométricas, estereológicas, imunohistoquímicas, ELISA, western blotting e microscopia eletrônica foram utilizadas. A dieta high-fat causou sobrepeso, intolerância oral à glucose, hiperinsulinemia, hipertrofia de ilhotas e adipócitos, grau 2 de esteatose hepatica (<33%) redução da expressão de PPAR-alfa e de GLUT-2, concomitante com aumento da expressão de SREBP-1 no grupo HF (P<0.0001). Por outro lado, todos os tratamentos resultaram em perda de peso significativa, reversão da resistência à insulina, hipertrofia de ilhotas e adipócitos e alívio da esteatose hepática. Somente os grupos HF-T e HF-TS apresentaram massa corporal similar ao grupo SC ao final do experimento, sendo que o ultimo também apresentou reversão da esteatose hepática. O aumento da expressão do PPAR-alfa paralelamente ao decréscimo da expressão do SREBP-1 explica os achados favoráveis para o fígado. A normalização do tamanho do adipócito foi consistente com os níveis maiores de adiponectina e com a redução dos níveis de TNF-alfa (P<0.0001) nos grupos tratados.Todos os tratamentos foram eficazes para controlar a síndrome metabólica. Os melhores resultados foram alcançados com a telmisartana e sitagliptina como monoterapias ou como associação entre essas, combinando a ativação parcial do PPAR-alfa no fígado com a extensão do tempo de ação das incretinas
Pharmacological intervention can minimize or even reverse adverse remodeling due to metabolic syndrome. This work sought to evaluate the effects of monotherapies and combinations of drugs on insulin sensitivity, adipose tissue morphology, pancreatic and hepatic remodelling in C57BL/6 mice fed a high-fat diet. Male C57BL/6 mice were fed a very high-fat diet (HF, 60% lipids) or standard chow (SC, 10% lipids) over 10 weeks, after which drug treatments began: HF-T (HF + Telmisartan, 5.2mg/Kg/day), HF-S (HF + Sitagliptin, 1.08g/Kg/day), HF-M (HF + Metformin, 310.0mg/Kg/day) and the drug combinations HF-TM, HF-TS and HF-SM. Treated groups also had free access to HF diet and treatments lasted 6 weeks. Morphometry, stereological tools, immunostaining, ELISA, Western blotting and electron microscopy were used. The HF diet yielded an overweight phenotype, oral glucose intolerance, hyperinsulinemia, hypertrophied islets and adipocytes, stage 2 steatosis (<33%) and reduced liver PPAR-alpha and GLUT-2, concomitant with enhanced SREBP-1 expression, in the HF group (P<0.0001). Conversely, all drug treatments resulted in significant weight loss, reversed insulin resistance, islet and adipocyte hypertrophy and alleviated hepatic steatosis. Only HF-T and HF-TS presented body weights similar to SC mice at the end of the experiment and the latter treatment reversed hepatic steatosis. Increased PPAR-alpha immunostaining parallel to higher GLUT-2 and reduced SREBP-1 expression explain the favourable hepatic outcomes. Restoration of adipocyte size was consistent with higher adiponectin levels and lower TNF-alpha levels (P<0.0001) in treated groups. In conclusion, all treatments were effective in controlling metabolic syndrome. The best results were achieved using Telmisartan and Sitagliptin as monotherapies or as a dual treatment, combining partial PPAR-gamma agonism and PPAR-alpha activation in the liver with extended incretin action

Cholestatic diseases and their evolution into fibrosis and cirrhosis are well-known. Despite the increase in therapies, such as liver transplants, this group of affections still represents a challenge in medical practices, from the diagnosis to the treatment, and is commonly linked to high rates of morbidity and lethality, coupled with high treatment costs. New conducts and the search for the physiopathological mechanisms involved are constantly emerging. The purpose of the present study was to evaluate the influence and effect of the partial or total exclusion of the terminal ileum in the liver, kidney, and ileum, in presence of obstructive cholestasis. Thirty-two male Wistar rats were divided into four groups (n = 8). Groups 2, 3, and 4 underwent the ligation of the common hepatic duct. After four weeks, an internal biliary drainage was performed by means of hepaticoduodenostomy, using a nelaton prosthesis. In the animals from Group 3, a laterolateral ileocolic anastomosis, with a partial exclusion of the final 10 centimeters of the terminal ileum, could be observed. In the animals from Group 4, the sectioning and closing of 10 distal centimeters of the terminal ileum, as well as a terminolateral anastomosis of the ileum with ascending colon, were performed. Group 1 was the control group, in which the rats were undertaken to only laparotomy and laparorrhaphy. At the end of eight weeks, all the rats from the four groups were killed and material was collected for exams. The biochemical exams included: albumin, aspartate-aminotransferase (AST), alanine-aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase, -glutamiltransferase, direct bilirubin, indirect bilirubin, urea, and creatinine. The liver, kidneys, and a segment of the terminal ileum were also collected for 4 anatomopathological analyses. The results were submitted to statistical analyses by means of the ANOVA, Kruskal-Wallis, Pearson, and Fisher exact tests. Persistence in the varying degrees of fibrosis could be observed in the rats from groups 2, 3, and 4, with no significant difference amongst these groups. The control group did not present hepatic fibrosis. In the histology of the kidney and the terminal ileum, no differences could be identified among the four groups. Concerning the biochemical analyses, the values of AST, ALT, direct bilirubin, -glutamiltransferase, urea, and creatinine were greater in Group 4 as compared to the control group (p < 0.05). Group 4 presented urea and creatinine values that were higher than those from groups 2 and 3 (p < 0.05). In conclusion, in male Wistar rats, the ileocolic partial shunt of the terminal ileum and the total exclusion of the final centimeters of the terminal ileum after internal biliary drainage of the extra-hepatic cholestasis did not alter the intensity of hepatic fibrosis. These procedures did not modify the morphology of the kidney or the terminal ileum. The total exclusion of the terminal ileum worsened the biochemical samples from the liver and kidney. No benefit in the ileocolic shunt in either the morphology or function of the liver and kidneys could be observed. The total exclusion of the terminal ileum after biliary drainage for obstructive cholestasis worsened renal biochemical samples.
As doenças colestáticas e sua evolução para fibrose e cirrose são muito conhecidas. Apesar do incremento de terapias, como o transplante hepático, esse grupo de afecções, ainda representa desafio na prática médica, desde o diagnóstico até o tratamento, além de estarem ligadas a morbidade e letalidade altas, com custos de tratamento elevados. Novas condutas e busca dos mecanismos fisiopatológicos envolvidos são ampliados a cada dia. Este trabalho tem por objetivos avaliar a influência e os efeitos da exclusão parcial e total do íleo terminal em fígado, rins e íleo, na presença de colestase obstrutiva. Foram utilizados trinta e dois ratos Wistar machos, distribuídos em quatro grupos (n = 8). Os grupos 2, 3 e 4 foram submetidos a ligadura do ducto hepático comum e, após quatro semanas, realizou-se drenagem biliar interna, por meio de hepaticoduodenostomia, com uso de prótese de nelaton. Nos animais do Grupo 3 associou-se anastomose ileocólica laterolateral com exclusão parcial dos últimos dez centímetros do íleo terminal. Nos animais do Grupo 4 realizou-se a secção e fechamento dos dez centímetros distais do íleo terminal e foi feita anastomose terminolateral, do íleo com cólon ascendente. O Grupo 1 foi controle, no qual os ratos foram submetidos, apenas a laparotomia e laparorrafia. Ao fim de oito semanas, todos os ratos dos quatro grupos foram mortos e foi colhido material para exames. Os exames bioquímicos foram: albumina, aspartatoaminotransferase, alaninaaminotransferase, fosfatase alcalina, -glutamiltransferase, bilirrubina direta, bilirrubina indireta, ureia e creatinina. Foram colhidos ainda, fígado, rins e segmento de íleo terminal, para análise anatomopatológica. Os resultados foram submetidos a análise estatística pelos testes de ANOVA, Kruskal-Wallis, Pearson e Fisher. Houve persistência de graus variáveis de fibrose nos ratos do grupo 2, 3 e 4, sem diferença entre si. O grupo controle não apresentou fibrose hepática. Na histologia renal e do íleo terminal não foram vistas diferenças entre os quatro grupos. Em relação à análise bioquímica, os valores de AST, ALT, bilirrubina direta, -glutamiltransferase, ureia e creatinina foram maiores no Grupo 4 em relação ao controle (p < 0,05). O Grupo 4 apresentou valores de ureia e creatinina superiores aos dos grupos 2 e 3 (p < 0,05). Conclui-se que derivação parcial do íleo terminal e a exclusão total dos últimos centímetros do íleo terminal, associadas à drenagem biliar não apresentaram diferenças na intensidade da fibrose hepática, comparadas à drenagem biliar isolada, em ratos submetidos a ligadura prévia do ducto hepático comum. A exclusão do íleo terminal, em modelo de ligadura do ducto hepático associou-se a piora das provas bioquímicas do fígado. Não houve benefício na derivação ileocólica nas alterações morfológicas e na função do fígado e dos rins. A exclusão total do íleo terminal, associada a derivação biliodigestiva pós-colestase, piorou os valores das provas bioquímicas renais

Orientador: Cecilia Amelia Fazzio Escanhoela
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Made available in DSpace on 2018-08-12T22:27:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_GustavoHenriqueda_D.pdf: 4225256 bytes, checksum: 6254dc5eb8ce2f1f9c9ac0ffbce99d41 (MD5) Previous issue date: 2009
Resumo: A esteatose hepática não relacionada ao alcoolismo pode ocorrer isoladamente ou fazer parte da doença hepática gordurosa não alcoólica (DGHNA). Esta abrange um amplo espectro de alterações morfológicas, variando desde a esteatose até um estágio mais grave, acompanhado por fibrose, podendo chegar à cirrose. O objetivo do nosso estudo foi avaliar e caracterizar a esteatose de causa não definida na infância, por meio de análise morfológica e morfométrica do tecido hepático. Dezoito biópsias provenientes de 16 pacientes com idade variando de 3 meses a 12 anos e 9 meses, com vaga dor abdominal e/ou mínima hepatomegalia associada a aumento discreto e persistente das enzimas hepáticas, foram analisadas através de microscopia de luz e eletrônica de transmissão. Nestes detectou-se esteatose macro e microvesicular "pura", ou seja, não acompanhada de fibrose ou de quaisquer outras alterações histológicas. Na microscopia de luz foi realizada a determinação semi-quantitativa da intensidade da esteatose total (macro e microvesicular), com classificação de 1 a 4 e a estimativa da porcentagem de hepatócitos afetados pela esteatose microvesicular em relação aos hepatócitos afetados pela macrovesicular; na microscopia eletrônica calculou-se a densidade mitocondrial por hepatócito e a área mitocondrial média utilizado-se em ambos os casos o programa TPS Dig versão 1.30. Dez pacientes com 1 a 14 anos de idade e com diagnóstico de normalidade em biópsia hepática foram utilizados como grupo controle. Os resultados obtidos mostraram predomínio de esteatose microvesicular entre os pacientes estudados (61%), com elevação significativa da área mitocondrial, sendo 1,52 ± 0,08 µm2 a área média para o grupo controle, 1,49 ± 0,07 µm2 para o grupo de esteatose macrovesicular e 2,92 ± 0,36 µm2 para o grupo de esteatose microvesicular. Não foram observadas alterações significativas na densidade mitocondrial, seja relacionada à esteatose microvesicular predominante ou à macrovesicular (72 ± 2 mitocôndrias/hepatócitos para o grupo controle, 70 ± 11 mitocôndrias/hepatócitos para o grupo de esteatose macrovesicular e 66 ± 8 mitocôndrias/hepatócitos para o grupo de esteatose microvesicular). Tampouco se observou correlação entre as variações dos valores das transaminases com ambos os tipos de esteatose, uma vez que para o grupo de esteatose microvesicular os valores médios foram AST = 62.9 ± 35.0, ALT = 125.9 ± 129.0 e GGT = 210.5 ± 278.3 e para o grupo de esteatose macrovesicular AST = 82.1 ± 97.5, ALT = 57.4 ± 41.4 e GGT = 185.8 ± 141.7. No grupo de estudo, a esteatose "pura", com pouca ou nenhuma sintomatologia clínica, associada ou não a alterações de transaminases, não relacionada à obesidade ou doença metabólica conhecida, mostrou-se predominantemente microvesicular e relacionada a aumento do volume mitocondrial. Nas hepatopatias mitocondriais primárias (HMP), principalmente por defeitos na cadeia respiratória, este tipo de alteração é comum. Devido a estas alterações mitocondriais, esta esteatose não deve ser denominada "pura" podendo, inclusive, corresponder à porção mais distal no longo espectro da DGHNA. Destacamos que, apesar da pouca manifestação clínica e laboratorial destas crianças, é fundamental o acompanhamento sistemático destas, havendo necessidade de maior atenção aos casos de esteatose na infância com predomínio da forma microvesicular.
Abstract: Hepatic steatosis unrelated to alcoholism may occur separately or be part of fatty liver disease (NAFLD). It encompasses a wide spectrum of morphologic alterations, ranging from steatosis to a more severe stage accompanied by fibrosis and cirrhosis. The aim of our study was to assess and characterize childhood steatosis of not defined cause carrying out morphologic and morphometric analysis of liver tissue. Eighteen biopsies from 16 patients with age varying from 3 months to 10 years, with vague abdominal pain and/or minimal hepatomegaly associated with slight and persistent increase in hepatic enzymes had been analyzed through light microscopy and transmission electron microscopy. On those patients, "pure" steatosis was detected, meaning it was not followed of fibrose or any other significant histological alterations. In light microscopy total steatosis was semi-quantified with estimative of macro- and microvesicular steatosis percentage and determination of predominant steatosis, classified from 1 to 4 and estimate the percentage of hepatocytes affected by steatosis microvesicular in comparison to hepatocytes affected by macrovesicular; in electron microscopy it was determined the degree of mitochondrial density in the hepatocytes and mean mitochondrial surface area using in both cases the TPS Dig version 1.30. Ten patients between 1 and 14 years old who had a normal diagnosis on liver biopsy were used as a control group. The results had shown microvesicular predominance of steatosis in the studied patients (61%) with significant increase of mitochondrial surface area values: 1,52 ± 0,08 µm2 in the control group, 1,49 ± 0,07 µm2 in the macrovesicular steatosis group and 2,92 ± 0,36 µm2 in the microvesicular steatosis group. Significant alterations in mitochondrial density were not observed, neither related to predominant micro nor macrovesicular steatosis (72 ± 2 mitochondrias/hepatocytes in the control group, 70 ± 11 mitochondrias/hepatocytes in the macrovesicular steatosis group and 66 ± 8 mitochondrias/hepatocytes in the microvesicular steatosis group). A correlation between variations in transaminases levels and both types of steatosis was also not observed, since for the microvesicular steatosis group the average values was AST = 62.9 ± 35.0, ALT = 125.9 ± 129.0 and GGT = 210.5 ± 278.3 and for the macrovesicular steatosis AST = 82.1 ± 97.5, ALT = 57.4 ± 41.4 e GGT = 185.8 ± 141.7. In our study group, "pure" steatosis, with little or no clinical symptoms, associate or not to alterations of transaminases and that did not correlate with obesity or known metabolic diseases is predominantly microvesicular and was related to increased mitochondrial volume. In the primary mitochondrial hepatopathies (PMH), especially for respiratory chain defects, this alteration is common. Due to these probable mitochondrial alterations, this steatosis doesn't have to be called "pure", being able, also, to correspond to the portion distal in the long specter of the NAFLD. It is important to emphasize that although the small number of clinical and laboratorial manifestations of these children, it is essential their systematic accompaniment. There is necessity of more attention to the cases with steatosis in pediatric group where microvesicular form predominance occurs.
Doutorado
Ciencias Biomedicas
Doutor em Ciências Médicas

A hidatidose policística é uma zoonose causada pelo cestóide Echinococcus vogeli, amplamente distribuído no norte do Brasil. Os hospedeiros definitivos são Speothos venaticus (cachorro-vinagre) e Canis familiaris (cães domésticos), enquanto Agouti paca (paca) é hospedeiro intermediário. Tanto as pacas quanto o homem (hospedeiro acidental) desenvolvem a forma larvar (metacestóide), principalmente na superfície e no interior do fígado. Esta tese tem como objetivo geral estudar as características parasitológicas e histopatológicas de metacestóides de E. vogeli, originários de pacas e humanos da região norte do Brasil, visto o conhecimento insuficiente ou mesmo o seu desconhecimento. Os fígados e mesentérios foram obtidos de oito pacientes com hidatidose policística durante ato cirúrgico na Fundação Hospital Estadual do Acre. Pacas foram capturadas no Município de Bujari, Floresta Estadual do Antimary, Acre. Durante a necropsia das pacas, foram observadas lesões macroscópicas (massas esbranquiçadas ou amareladas, semelhantes a bolhas na superfície dos fígados). Para a análise parasitológica foram aplicadas as microscopias de luz, contraste interferencial de Normaski (DIC) e varredura laser confocal. A análise morfométrica foi realizada com o auxílio do Programa Image Pro Plus Media Cybernetics. Os órgãos de pacas e humanos foram submetidos à análise histopatológica. Os pequenos e grandes ganchos rostelares apresentaram polimorfismo morfológico, enquanto a organização dos protoescólices acompanhou o padrão descrito para Echinococcus sp. Todas as pacas apresentavam cistos hepáticos, porém em apenas duas encontramos líquido hidático, comprovados pela presença dos ganchos e protoescólices. A análise histopatológica dos tecidos hepáticos das pacas confirmou a hidatidose policística e evidenciou, pela presença de agrupamentos de ovos, a coinfecção com Calodium hepaticum. As características morfológicas dos ganchos rostelares dos casos humanos não diferiram do descrito para as pacas, entretanto, os ganchos dos helmintos provenientes do fígado foram maiores que os mesentéricos. Já em relação aos protoescólices, os mesentéricos foram maiores do que os hepáticos. Cistos mesentéricos e hepáticos apresentaram protoescólices em diferentes estágios de desenvolvimento, com coroas de ganchos, formadas por grandes e pequenos ganchos, e dois pares de ventosas, além dos corpúsculos calcários. Os cistos hepáticos apresentaram as três membranas características (adventícia, anista e germinativa), enquanto os cistos mesentéricos não apresentaram a membrana adventícia, sendo a anista aquela que mais se destacou neste órgão. No mesentério, as células mononucleares foram os principais constituintes do infiltrado leucocitário, cuja intensidade foi relacionada à capacidade proliferativa da membrana germinativa. Além de cistos hepáticos típicos de fase crônica, dependendo da resposta inflamatória, foram observados cistos na fase aguda e sub-aguda. Foi encontrado um caso de coinfecção com vírus (HIV, HCB e HCV) e outro com envolvimento da vesícula biliar. Em suma, confirma-se hidatidose policística em pacas no Acre e são apresentados novos casos de infecção humana no Acre e Amazonas. Pela primeira vez, é demonstrado polimorfismo, padrão diferente de desenvolvimento dos cistos de acordo com o órgão, coinfecção e envolvimento da vesícula biliar
Polycystic hydatidosis is a zoonotic disease caused by the cestode Echinococcus vogeli, largely distributed in northern Brazil. The definitive hosts are Speothos venaticus (bush dogs) and Canis familiaris (domestic dogs), while Agouti paca (paca) is the intermediate host. Both the pacas and man (accidental host) develop the larval form (metacestodes), mainly on the surface and inside the liver. This thesis aims to study histopathological and parasitological characteristics of metacestodes of E. vogeli, from pacas and humans of the north region of Brazil, seen the insufficient knowledge or lack of it. The mesentery and livers were recovered from eight patients with polycystic hydatidosis during surgery in the Acre State Hospital Foundation. Pacas were captured in the municipality of Bujari, Antimary State Forest, Acre. During the pacas necropsy, macroscopic lesions were observed (whitish or yellowish masses, similar to blisters on the surface of the liver). Identification analyses were applied to light microscopy, interferential contrast microscopy of Normaski (DIC) and confocal laser scanning microscopy. Morphometric analysis was performed by Image Pro Plus Media Cybernetics program. The pacas and human organs were subjected to histopathological analysis. The small and large rostellar hooks presented morphological polymorphism while protoscoleces organisation accompanied the pattern described in Echinococcus sp. All pacas presented liver cysts, however in only two found proven by the presence of hydatid fluid, hooks and protoscoleces. Histopathological analysis of pacas hepatic tissues confirmed polycystic hydatidosis and evidenced by the presence of eggs clusters the Calodium hepaticum coinfection. The morphological characteristics of human cases rostellar hooks did not differ from described to the pacas; however, the hooks were greater than the mesenteric ones. Already in relation to protoscoleces, the mesenteric ones were larger than the liver. Mesenteric and liver cysts presented protoscoleces at different stages of development, with rostellar pad formed by large and small hooks, and two pairs of suckers, in addition to the calcareous corpuscles. Liver cysts showed three characteristics layers (adventitia, laminated and germinative), while mesenteric cysts did not present the adventitia, being the laminated layer the most evidenced in this organ. In the mesentery, mononuclear cells were the principal constituents of leukocyte infiltrated, whose intensity was related to the proliferative capacity of germinative layer. In addition to typical liver cysts of the chronic phase, depending on the inflammatory response, have been observed cysts in acute and subacute phase. It was found a case of co-infection with virus (HIV, HCV and HCB) and another with gallbladder involvement. In short, it is confirmed polycystic hydatidosis in pacas from Acre and is presented new cases of human infection in Acre and Amazonas. For the first time, it was demonstrated polymorphism, different development pattern of cysts depending on the organ, co-infection and gallbladder involvement

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-17. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:04Z : No. of bitstreams: 1 000828023.pdf: 6770813 bytes, checksum: 4d6915d637075fb131746b376725f958 (MD5)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Bases científicas: Em contraste à atenção dada à ocorrência de degeneração gordurosa do fígado de etiologia não-alcoólica (DGFNA) em pacientes com diabetes mellitus do tipo 2 (DM2), pouco se sabe sobre a evolução desta entidade anátomo-clínica em portadores de diabetes mellitus do tipo 1 (DM1). Objetivo: Avaliar se o DM1 é capaz de provocar alterações morfológicas e ultraestruturais no fígado de ratos diabéticos induzidos pela aloxana (ALX), de modo a permitir caracterizar os efeitos desta droga e do diabetes, durante um longo período de seguimento. Esperamos que os resultados possam reproduzir um adequado modelo experimental de hepatopatia diabética crônica. Método: Foram estudados 60 ratos machos, Wistar, com aproximadamente 250g, distribuídos por sorteio em 2 grupos experimentais, com 30 animais cada um: GN - Grupo Normal: constituído de 30 ratos controles, não-diabéticos; GD - Grupo Diabético: constituído de 30 ratos diabéticos, hiperglicêmicos, sem qualquer tratamento da doença. Cada um dos grupos experimentais foi posteriormente dividido em 3 subgrupos de ratos, com 10 animais cada um, para serem avaliados e sacrificados, respectivamente, em 4 momentos do experimento, a saber: M0 - animais dos 3 subgrupos, no momento inicial do experimento (2 semanas de seguimento normal ou de indução do diabetes), para obtenção apenas de parâmetros clínicos e laboratoriais; M1, M2, M3 - animais sacrificados, respectivamente com 6, 14 e 26 semanas de seguimento normal ou diabetes. Parâmetros clínicos e laboratoriais, incluindo: avaliação do peso corporal, ingestão hídrica, ingestão alimentar, diurese e dosagens da glicose sangüínea de jejum, glicose urinária, hemoglobina glicosilada, insulina plasmática, bilirrubinas, aspartato amino transferase (AST), aspartato alanina transferase (ALT), fosfatase alcalina, Υ - glutamil transferase (Υ-GT), colesterol total, lipoproteínas de alta ...

Orientador: César Tadeu Spadella
Banca: Erika Veruska Paiva Ortolan
Banca: Walmar Kerche de Oliveira
Banca: Carlos Eduardo Brossi Pelissari
Resumo: Bases científicas: Em contraste à atenção dada à ocorrência de degeneração gordurosa do fígado de etiologia não-alcoólica (DGFNA) em pacientes com diabetes mellitus do tipo 2 (DM2), pouco se sabe sobre a evolução desta entidade anátomo-clínica em portadores de diabetes mellitus do tipo 1 (DM1). Objetivo: Avaliar se o DM1 é capaz de provocar alterações morfológicas e ultraestruturais no fígado de ratos diabéticos induzidos pela aloxana (ALX), de modo a permitir caracterizar os efeitos desta droga e do diabetes, durante um longo período de seguimento. Esperamos que os resultados possam reproduzir um adequado modelo experimental de hepatopatia diabética crônica. Método: Foram estudados 60 ratos machos, Wistar, com aproximadamente 250g, distribuídos por sorteio em 2 grupos experimentais, com 30 animais cada um: GN - Grupo Normal: constituído de 30 ratos controles, não-diabéticos; GD - Grupo Diabético: constituído de 30 ratos diabéticos, hiperglicêmicos, sem qualquer tratamento da doença. Cada um dos grupos experimentais foi posteriormente dividido em 3 subgrupos de ratos, com 10 animais cada um, para serem avaliados e sacrificados, respectivamente, em 4 momentos do experimento, a saber: M0 - animais dos 3 subgrupos, no momento inicial do experimento (2 semanas de seguimento normal ou de indução do diabetes), para obtenção apenas de parâmetros clínicos e laboratoriais; M1, M2, M3 - animais sacrificados, respectivamente com 6, 14 e 26 semanas de seguimento normal ou diabetes. Parâmetros clínicos e laboratoriais, incluindo: avaliação do peso corporal, ingestão hídrica, ingestão alimentar, diurese e dosagens da glicose sangüínea de jejum, glicose urinária, hemoglobina glicosilada, insulina plasmática, bilirrubinas, aspartato amino transferase (AST), aspartato alanina transferase (ALT), fosfatase alcalina, Υ - glutamil transferase (Υ-GT), colesterol total, lipoproteínas de alta ...
Abstract: Not available
Doutor

Made available in DSpace on 2017-07-10T18:13:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucelia Tessaro.pdf: 2574631 bytes, checksum: ca57438c0aba9b691b6d844030fa8eb8 (MD5) Previous issue date: 2011-02-15
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
It was studied the effect of the different digestible energy levels (DE) on reproductive and animal performance and gonads and livers histological aspects of silver catfish broodstocks (Rhamdia quelen). The treatments were digestible energy levels of 2.850, 3.100, 3.350, 3.600 e 3.850 kcal.kg feed, in diets containing 30% digestible protein (DP. The animals were stocked in tanks of 16m2 under conditions of light and temperature natural. The temperature water of the tanks was monitored daily. pH and oxygen dissolved were measured biweekly. The fish were feed during 210 days and were evaluated, initial and final, length, weight, weight gain and condition factor, separately to males and females. For the reproductive parameters, from October 2009 to February 2010 the males were induce, monthly, by carp pituitary extract (2,5mg.kg male) for collect milt samples. In the reproductive session, the females were induced by carp pituitary extract (5,5mg.kg female) for evaluation to number of spawn females (%) and absolute and relative fecundity. In the same period, six males and six females in each treatment were killed to obtained, visceral, gonad and hepatossomatic index, and to histological characterization of maturation stages and hepatic aspects. The water quality remained in the levels recommended for the species. Animal performances to males and females were not affected by feed. In relation to the hepatic aspects, were observed cytoplasmic vacuolation and steatosis in females. For the males this hepatic alteration were not observed. For the reproductive parameters, males and females were not influenced. The Monthly variations on seminal parameters were observed and indicated a reproductive pike in the spring. The feds containing 30% of digestible protein and energy levels from 2,850 to 3,850 kcal.kg were not affect reproductive parameters to males or females, however, females feed on 3,100 to 3,600kcal.kg showed cytoplasmic vacuolation in hepatocytes.
O estudo avaliou diferentes níveis de energia digestível (ED) sobre o desempenho zootécnico, reprodutivo e aspectos histológicos do tecido hepático e gonadal de machos e fêmeas de jundiá (Rhamdia quelen). As rações testadas foram isoproteicas contendo 30% proteína digestível (PD) e 2.850, 3.100, 3.350, 3.600 e 3.850 kcal de energia digestível (ED) (kcal.kg ração-1) Os peixes foram alojados em tanques escavados sob condições de fotoperíodo e temperatura natural. A água dos tanques foi monitorada diariamente quanto a temperatura e quinzenalmente quanto pH e oxigênio dissolvido. Os animais foram acompanhados durante 210 dias e foram avaliados, separadamente por sexo, ao início e ao término do experimento, quanto ao comprimento padrão, peso médio, ganho de peso e fator de condição, este último apenas para os machos. Para os parâmetros reprodutivos, entre os meses de outubro a fevereiro, os machos mensalmente foram submetidos às análises seminais e espermáticas. Para tanto, os machos foram submetidos ao protocolo de indução hormonal empregando extrato pituitário de carpa em dose única de 2,5 mg.kg-1. Dentro do período reprodutivo, as fêmeas foram induzidas hormonalmente com protocolo semelhante, contudo utilizando 5,5 mg.kg-1. Após a indução foram avaliados o percentual de fêmeas desovantes e as fecundidades absoluta e relativa. No mesmo período em que as fêmeas foram submetidas a reprodução artificial, foram selecionados aleatoriamente e abatidos seis machos e seis fêmeas de cada tratamento. Os reprodutores foram dissecados para mensuração dos índices víscerossomático, hepatossomático e gonadossomático, bem como para caracterização histológica do estágio de maturação gonadal e do tecido hepático. A qualidade da água permaneceu dentro dos níveis recomendados para a espécie. Não foi verificado efeito (p>0,05) das rações para os parâmetros zootécnicos seja para machos ou fêmeas. Quanto aos aspectos hepáticos, foi verificada a ocorrência de vacúolos citoplasmáticos e esteatose nas fêmeas. O mesmo não foi observado nos machos. Para os aspectos reprodutivos, machos e fêmeas não foram influenciados pelos níveis energéticos testados (p>0,05). Os machos apresentaram, ao longo dos meses, características seminais e espermáticas que sugerem a ocorrência de um pico reprodutivo no final da primavera. Rações contendo 30% de proteína digestível e níveis de energia entre 2.850 e 3.850 kcal.kg de ração-1 não afetam os parâmetros reprodutivos de machos e fêmeas de jundiá, contudo, em fêmeas, rações contendo entre 3.100 e 3.600 kcal causam vacuolização nos hepatócitos, possivelmente pela deposição lipídica.

Orientador: Stephen Hyslo
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-07T09:47:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tarsitano_ChristianeAparecidaBadin_D.pdf: 24957423 bytes, checksum: 94d8809a19e27ce5d2957100482d3d27 (MD5) Previous issue date: 2006
Resumo: óxido nítrico (NO), um co-produto do metabolismo do aminoácido Larginina para L-citrulina pela NO sintase (NOS), exerce importantes funções no controle do tôno vascular, no processo inflamatório, e na modulação da expressão gênica e atividade enzimática de diversas enzimas, tais como citocromos P-450 e NOS. A inibição crônica da biossíntese de NO por NW-nitro-L-argininemetil éster (L-NAME) leva à hipertensão e produz alterações morfológicas que incluem hipertrofia e remodelamento vascular, efeitos estes que são revertidos por inibidores da enzima conversora de angiotensina I (ECA) e antagonistas dos receptores AT1 de angiotensina 11. O NO exerce papel fundamental na hemodinâmica e função celular do fígado, e pode regular a atividade dos citocromos P450 monooxigenases que são importantes na biotransformação de substâncias endógenas e exógenas. Neste trabalho, examinamos a influência do tratamento com L-NAME sobre a morfologia hepática, o conteúdo de glicogênio, colesterole triglicérides,e a atividadee expressãodas isoformasCYP1A1/2, CYP 281/2, CYP2C11 e CYP2E1de citocromoP450.No tratamentoagudo estudamos também a expressão de duas metaloproteinases de matriz (MMP-2 e MPP-9). Ratos Wistar machos foram tratados com L-NAME (20 mg/rato/dia, administrado na água de beber) por quarto e oito dias (tratamento agudo) e duas, quatro e oito semanas (tratamento crônico) e os fígados foram removidos para análise. A indução enzimática foi realizada tratando-se os ratos com fenobarbital (para induzir CYP2B1/2), p-naphthoflavone (para induzir CYP1A1/2) (80 mg/kg/dia, Lp., 4 d) ou pirazole (200 mg/kg/dia, Lp., 2 d) (para induzir CYP2E1). O tratamento com L-NAME elevou significativamente a pressão sangüínea e esta foi revertida pelo tratamento concomitante com enalapril (25 mg/kg/dia, p.o., inibidor da ECA) ou losartan (30 mg/kg/dia, p.O.,antagonista dos receptores AT1). L-NAME causou hipertrofia vascular em artérias hepáticas, com depósito de colágeno perivascular e fibrose intersticial. Houve também um aumento significativo no conteúdo de glicogênio hepático. Todas estas alterações foram completamente revertidas por enalapril ou losartan. O tratamento com L-NAME não alterou o conteúdo de colesterol e triglicérides hepáticos, e não afetou as atividades basais e induzidas ou a expressão das isoformas de citocromo P450. O tratamento agudo com LNAME aumentou a expressão de MMP-2 e MMP-9 na parede vascular e em células inflamatórias (Ieucócitos, macrófagos). Esses resultados mostram que o tratamento agudo e crônico com L-NAME produz alterações morfológicas na vasculatura hepática e aumenta o conteúdo hepático de glicogênio, sem porém alterar o metabolismo de lípides ou a atividade e expressão de citocromos P450. A ausência de um efeito sobre os citocromos P450 indica que estas enzimas, não são influenciadas por níveis baixos de NO. Já a capacidade do enalapril e losartan em proteger contra as alterações morfológicas e o aumento de glicogênio indica um papel importante para o sistema renina-angiotensina nestas respostas
Abstract: Nitric oxide (NO), a co-product of the metabolism of L-arginine to L-citrulline by NO synthases (NOS), has an important role in regulating vascular tone, inflammatory responses, and the gene expression and enzymatic activity of various proteins, including cytochrome P450 and NOS. The chronic inhibition of NOS by Nffi-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) produces sustained arterial hypertension and morphological alterations that include arterial wall hypertrophy and vascular remodeling. These changes can be prevented by concomitant treatment with angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitors and angiotensin 11 AT1 receptor antagonists. NO is an important modulator in the hepatic vasculature and of hepatic cell function, and may regulate the activity of cytochrome P450 monooxygenases involved in the biotransformation of endogenous and exogeous substances. In this work, we examined the influence of L-NAME on rat liver morphology, hepatic glycogen, cholesterol and triglyceride content, and the activities and expression of the cytochrome P450 isoforms CYP1A1/2, CYP2B1/2, CYP2C11 and CYP2E1. We also examined the expression of two matrix metalloproteinases (MMP-2 and MPP-9) after short-term treament with L-NAME. Male Wistar rats were treated with L-NAME (20 mg/ratlday, administered in the drinking water) for four and eight days (short-term treatment) and two, four and eight weeks (chronic treatment) and the livers were then removed for analysis. Enzymatic induction was produced by treating rats with phenobarbital (to induce CYP2B1/2), ~-naphthoflavone (to induce CYP1A1/2) (80 mg/kg/day each, i.p., 4 d) or pyrazole (200 mg/kg/day, i.p., 2 d) (to induce CYP2E1). Treatment with LNAME significantly elevated the blood pressure and this was reversed by concomitant treatment with enalapril (25 mg/kg/day, p.o., ACE inhibitor) or losartan (30 mg/kg/day, p.o., angiotensin II AT1 receptor antagonist). L-NAME caused vascular hypertrophy in hepatic arteries, with perivascular and interstitial fibrosis involving collagen deposition. There was also a significant increase in the hepatic glycogen content. Ali of these changes were completely reversed by concomitant treatment with enalapril or losartan. L-NAME had no effect on the hepatic cholesterol and triglyceride content, nor did it affect the basal or drug-induced activities and protein expression of the cytochrome P450 isoforms. Short-term treatment with L-NAME enhanced the expression of MMP-2 and MMP-9 in vessel walls and inflammatory cells (mast cells, macrophages). These results show that acute or chronic treatment with L-NAME produces morphological alterations in the hepatic vasculature and increases the hepatic glycogen content without affecting lipid metabolism or the activity or expression of cytochrome P450 isoforms. The lack of effect on cytochrome P450 activities and expression indicates that these enzymes are not significantly influenced by low levels of NO. In contrast, the ability of enalapril and losartan to prevent the morphological alterations and the increase in hepatic glycogen indicates an important role for the renin-antiogensin system in these responses
Doutorado
Histologia
Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
O objetivo do presente estudo foi avaliar se o Bezafibrato, um agonista PAN-PPAR, é capaz de aliviar a doença não alcoólica do fígado gorduroso (NAFLD) na prole de machos de mães C57BL/6 obesas. Fêmeas virgens foram alimentadas com uma dieta HL (hiperlipídica, 49% de lipídios) ou uma dieta C (controle, 10% de lipídios) por oito semanas antes do acasalamento e durante os períodos de gestação e lactação. A prole de machos foi subdividida em quatro grupos: C (dieta controle para as mães e filhotes); C/BZ (dieta controle para as mães e filhotes com tratamento com Bezafibrato[100mg/Kg]); HL (dieta HL para as mães e dieta controle para os filhotes); e HL/BZ (dieta HL para as mães e dieta controle para os filhotes com tratamento com Bezafibrato [100mg/Kg]). O tratamento com Bezafibrato começou na 12 semana e se manteve por três semanas. Análise do metabolismo, bioquímica, estereológica e por western-blotting foram realizadas. A dieta HL causou um fenótipo de sobrepeso nas mães e acarretou em uma intolerância oral à glicose com aumento da glicemia de jejum. A prole HL apresentou hiperfagia, ganho de massa corporal, altos níveis de triglicerídeo hepático e plasmático, esteatose hepática e aumento da expressão de proteínas lipogênicas concomitante com diminuição do receptor ativador de proliferação peroxissomal alfa (PPARα), que é responsável pela β-oxidação e aumento do receptor ativador de proliferação peroxissomal gama (PPARγ) e do elemento regulador de esterol ligante da proteína 1 (SREBP-1c) proteínas envolvidas na lipogênese hepática. Por outro lado, o tratamento com o Bezafibrato reverteu o quadro da programação metabólica no fígado, com uma melhora dos parâmetros morfológicos, bioquímicos e moleculares do fígado dos animais, com um aumento da ativação de PPARα em associação a uma diminuição do PPARγ e não alterando a expressão de SREBP-1c. Em conclusão, nós demonstramos que o tratamento com Bezafibrato melhora a NAFLD causada pela obesidade materna.
The aim of the present study was to evaluate whether Bezafibrate , a PAN-PPAR agonist, could attenuate non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) of male offspring from obese C57BL/6 dams. Dams were fed on a HF (high-fat, 49% lipids) diet or SC (standard chow; 10% lipids) diet for 8 weeks before mating and during gestation and lactation periods. Male offspring were subdivided into 4 groups: SC (standard-chow for dams and offspring); SC/BZ [standard-chow for dams and offspring with treatment with BZ (100mg/Kg)]; HF (high-fat diet for dams and standard-chow for offspring); HF/BZ [high-fat diet for dams and standard-show for offspring with treatment with Bezafibrate (100mg/Kg)]. Treatment with Bezafibrate started at 12th week and was maintained for 3 weeks. Metabolic measurements, biochemical analysis, stereological tools and western-blotting were performed. The HF diet yielded an overweight phenotype and an increase in oral glucose tolerance and fasting glucose of dams. The HF offspring presented hyperphagia, body mass gain, high levels of plasmatic and hepatic triglycerides, impairment of glucose metabolism, hepatic steatosis and high expression of lipogenic proteins concomitant to decreased expression of PPARα, which is responsible for β-oxidation. On the other hand, treatment with Bezafibrate reverted hepatic outcomes of metabolic programming, with an improvement of morphological, biochemical and molecular parameters of animals livers, with an increase of PPARα activation in association with a decrease of PPARγ expression and no changes in SREBP-1c expression. In conclusion, we demonstrated that treatment with Bezafibrate improved NAFLD caused by maternal obesity.