Littérature scientifique sur le sujet « Recepteur dopaminergique d2 »

Les techniques de transgenese et en particulier de recombinaison homologue ont fourni l'opportunite de produire des alterations specifiques des genes cibles in vivo. En utilisant cette technique, des souris genetiquement modifiees pour l'expression des recepteurs dopaminergiques d2 ont ete generees dans le laboratoire du docteur e. Borrelli. Ces animaux representent un modele tres interessant pour l'etude de la fonction physiologique du recepteur d2 in vivo. Au cours de ce travail de these nous avons caracterise et compare avec des approches comportementales, neurochimiques et moleculaires deux mutants pour le recepteur d2. La premiere etape de ma recherche est focalisee sur le role du recepteur d2 dans le controle du niveau de dopamine extracellulaire. Dans ce projet, le role du recepteurs d2 dans l'auto-regulation a ete etudie, ainsi que sa contribution dans la reponse du systeme dopaminergique aux psychostimulants et aux opioides, comme la cocaine et la morphine. Dans mon etude, les variations des concentrations extracellulaires de dopamine ont ete dosees par microdialyse intracraniale et par voltametrie in vivo chez des animaux dont le recepteur d2 est mute, et chez des animaux dont seul l'isoforme d2l est inactive. Ceci a montre que le recepteur d2 a un role crucial dans l'auto-regulation. Dans la deuxieme partie de mon projet, la question relative a la caracterisation fonctionnelle des deux isoformes du recepteur d2 a ete soulevee. Ceci suggere que le recepteur d2l est la cible de l'haloperidol, avec des implications pour les traitements des pathologies neuropsychatriques. L'analyse des souris mutantes a permis de mettre en evidence que l'isoforme d2l en synergie avec le recepteur d1 est implique dans le controle de

Le recepteur dopaminergique d2 est exprime principalement dans le systeme nerveux central et l'hypophyse ; il est implique dans une serie de fonctions vitales allant du controle de la locomotion jusqu'a la regulation hormonale. L'alteration de l'expression de ce recepteur pourrait etre a l'origine de plusieurs pathologies neurologiques humaines. Cela nous a conduit a l'etude des mecanismes impliques dans la regulation de l'expression genique du recepteur d2. Cette etude nous a permis de demontrer in vitro et in vivo que l'acide retinoique stimule la transcription du gene du recepteur d2. De plus, l'analyse des mutants nuls pour les recepteurs aux retinoides montre une diminution significative chez certains mutants de l'expression du recepteur d2 mais aussi du recepteur d1 dans le striatum de ces souris. Ces souris presentent les symptomes caracteristiques d'une alteration des voies de signalisation dopaminergiques avec des troubles de la locomotion et une reduction des effets des psychostimulants tels que la cocaine. Dans la deuxieme partie de ce travail de these, nous avons etudie le role physiologique des recepteurs d2 dans le processus de la dependance aux drogues. Nous avons montre que l'administration de morphine ne developpe pas chez les souris d2r-/- un phenomene de recompense. En revanche, la dependance physique aux opioides n'est pas affectee chez ces souris. Dans la troisieme partie de ce travail, nous avons etudie l'implication des recepteurs d2 dans la mediation des effets comportementaux et moleculaires de la cocaine. Nous avons montre que l'absence du recepteur d2 altere les reponses locomotrices et cellulaires aux psychostimulants indiquant une implication de d2r dans la mediation de ces effets. Enfin, nous avons etudie l'importance physiologique du rapport d'expression des deux isoformes du recepteur d2 (d2l et d2s) dans les cellules lactotropes de l'hypophyse. Pour cela nous avons genere des souris transgeniques surexprimant d2l ou d2s specifiquement dans les lactotropes. Cette approche nous a permis d'attribuer a ces deux isoformes des fonctions distinctes dans la regulation de la synthese et de la secretion de l'hormone prolactine. De plus cette etude a permis d'etablir un lien potentiel entre la signalisation dopaminergique au niveau des lactotropes, et le processus de differenciation des autres types cellulaires du lobe anterieur de l'hypophyse.

Dans l'hypophyse, la synthese et la secretion de la prolactine (prl) sont soumises au tonus inhibiteur exerce par la dopamine, qui agit en se liant aux recepteurs de type d2. Ces recepteurs inhibent l'activite de l'adenylate cyclase et de la phospholipase c par l'intermediaire respectivement des proteines gi2 et gq et regulent l'activite des canaux ca#2#+ via la proteine go et des canaux k#+ via la proteine gi3. Les mecanismes impliques dans l'inhibition dopaminergique de l'expression de la prl ne sont pas tous connus et nous nous sommes interesses au role de la proteine kinase c (pkc). La diminution des taux d'arnm de la prl induite par la bromocriptine, agoniste d2 dopaminergique, est reduite lorsque la pkc est desensibilisee. En fait la pkc intervient dans la regulation de l'expression de la prl par l'ampc et par le ca#2#+, deux voies de transduction associees au recepteur d2 dans les cellules lactotropes. Nous nous sommes ensuite interesses aux alterations de la regulation dopaminergique de la secretion de la prl dans les adenomes hypophysaires humains secretant de la prl. Les patients porteurs d'un prolactinome sont traites par la bromocriptine mais 5 a 18% des patients sont resistants. Cette resistance a la bromocriptine est une propriete intrinseque des cellules tumorales. La technique de pcr semi-quantitative que nous avons developpe, nous a permis de montrer que les prolactinomes resistants exprimaient 4 fois moins le recepteur d2 que les prolactinomes sensibles. Les taux d'arnm de la forme courte du recepteur d2 sont diminues de facon plus importante que ceux de la forme longue. Au niveau des proteines g, les taux d'arnm de go sont identiques chez les prolactinomes resistants et sensibles, de meme que le rapport gs/go. Seul le rapport gi2/go est plus faible dans les adenomes resistants que dans les adenomes sensibles. Ainsi, la resistance a la bromocriptine des prolactinomes est associee a la diminution des taux d'arnm du recepteur d2 et de l'expression relative de gi2

La nature de l'activite antipsychotique n'est pas encore clairement definie. Plusieurs types de recepteurs sont susceptibles d'en etre responsables, conjointement ou non. Parmi eux, les recepteurs dopaminergiques de type d#2 se trouvent etre d'excellents candidats. Il apparait alors necessaire de mettre au point des produits avec une bonne affinite et surtout, une bonne selectivite pour chaque sous-type de recepteur. En reprenant le travail realise sur les benzamides en tant qu'antipsychotiques, nous avons synthetise plusieurs analogues du clebopride et du metoclopramide. Certains benzamides ont ete synthetises integrant dans leur structure une quinoleine, un macrocycle ou un cyclopropane. La majorite des 68 produits synthetises montrent une bonne affinite dopaminergique pour les recepteurs d#2 et d#3. De maniere interessante, on constate une amelioration de l'affinite dopaminergique du metoclopramide avec le cis-4-amino-n-(2-diethylamino-1-cyclopropyl)-5-chloro-2-methoxybenzamide 148. La structure active du metoclopramide possederait donc une conformation eclipsee ou gauche de la liaison ethylenediamine. La plupart des produits montrent une meilleure affinite pour le recepteur d2 que pour le recepteur d3. Le maximum de selectivite est obtenu avec le 2,3-dimethoxy-n-(1-cyclohexylmethyl-4-piperidinyl)benzamide 125 qui presente une affinite pour le recepteur d2 40 fois plus importante que pour le recepteur d3. Les recepteurs d2 et d3 ont ete construits par modelisation moleculaire en utilisant la rhodopsine comme structure de reference. A l'aide du benzamide 125, les sites de fixation des deux recepteurs ont ete compares. Cette etude a permis de mettre en evidence l'importance des residus ser163 et phe382 du recepteur d2, ala161 et thr368 du recepteur d3 pour la selectivite des produits entre les recepteurs d2 et d3