Tesi sul tema "Canaux potassiques – Souris de laboratoire"

La morphine demeure l'antalgique de référence pour le traitement de la douleur (nociception), mais elle est également responsable d‘effets secondaires importants. Des études ont montré que les animaux privés de canaux potassiques TREK-1 (TWIK-related K+channels) étaient plus sensibles à la douleur. Plus récemment, il a été démontré que le canal potassique TREK-1 joue un rôle crucial dans l'analgésie induite par la morphine chez les souris, alors qu'il n'est pas impliqué dans les effets secondaires (constipation, dépression respiratoire et dépendance). Ces résultats suggèrent que les canaux TREK-1 constituent des cibles d‘intérêt pour la conception de nouveaux antalgiques sans effets indésirables liés aux opioïdes. Des études antérieures au sein de notre laboratoire ont permis l'identification de quatre structures chefs de file, activatrices des canaux TREK-1, présentant une activité antalgique in vivo. La structure 3D du canal TREK-1 n‘étant pas élucidée au moment de nos travaux, nous avons décidé d'effectuer une optimisation basée sur une étude de relation structure-activité (RSA). Trente-six analogues ont été synthétisés par condensation de Knoevenagel et évalués pour leur effet antalgique (test de l‘acide acétique, test de la plaque chaude) et leur capacité à activer le canal TREK-1 (électrophysiologie). La capacité des substituants du noyau aromatique à établir des interactions de type liaison hydrogène ainsi que le volume de ces substituants ont une influence déterminante sur l'activité. Des résultats prometteurs ont émergé de cette étude RSA: 5 molécules présentent une très bonne activité antalgique (&gt; 50% d'inhibition de la douleur, test de la plaque chaude) ainsi que d'une bonne activation de TREK-1 canaux (R ≥ 2 à 10 μM ou R ≥ 4 au-dessus de 20 μM)<br>Morphine remains the analgesic of reference for the treatment of pain (nociception), but it is also responsible for serious adverse effects. Research studies have shown that animals deprived of potassium channels TREK-1 (TWIK-related K+ channels) were over-sensitive to pain. More recently, it has been demonstrated that the TREK-1 potassium channel is a crucial contributor of morphine-induced analgesia in mice, while it is not involved in morphine-induced constipation, respiratory depression and dependence. These results suggest that the TREK-1 channels constitute targets of interest for the design of novel analgesics without opioid-like adverse effects. Previous studies within our consortium led to the identification of four lead structures as TREK-1 activators exhibiting analgesic activity in vivo.Since the 3D structure of TREK-1 was not available at the time, we decided to perform hit optimization by conventional structure-activity relationship (SAR) studies. Thirty six analogs were synthesized via Knoevenagel condensation and evaluated for their analgesic effect (writhing test, hot plate assay) and their ability to activate TREK-1 channel (electrophysiology). It turned out that the possibility to form hydrogen bonding interaction (aryl moiety) and the volume of substituents of the amide or ester has a crucial influence on activity. Promising results emerged from this SAR study: 5 molecules display a very good analgesic activity (&gt; 50% inhibition of pain, hot plate assay) as well as a good activation of TREK-1 channels (R ≥ 2 at 10μM or R ≥ 4 above 20μM)

De nombreuses mutations du gène Scn5A, codant le canal cardiaque sodique Nav1. 5, ont été trouvées chez des patients souffrant de différentes pathologies cardiaques responsables de morts subites telles que la maladie de Lenègre ou le syndrome de Brugada. Nav1. 5 joue un rôle majeur dans l’initiation et la propagation du potentiel d’action cardiaque. Afin de mieux comprendre l'implication de Nav1. 5 dans ces pathologies, j'ai travaillé sur un modèle de souris invalidée de façon hétérozygote pour le gène Scn5a, Scn5a+/-. Ces souris ont la particularité de développer au sein d'une même portée des troubles de la conduction plus ou moins prononcés. Les souris Scn5a+/- ayant des troubles de la conduction sévères développent, comme dans la maladie de Lenègre, de la fibrose en vieillissant. Pour expliquer cette différence de phénotype, j'ai étudié la biosynthèse du canal Nav1. 5. Par des expériences de marquage métabolique j’ai estimé à 3h50 la demi-vie du canal Nav1. 5 néo-synthétisé et j’ai montré que la présence de la sous-unité β1 régulatrice du canal ne modifiait pas cette cinétique. Par des approches biochimiques, j’ai aussi montré que le canal Nav1. 5 dans les membranes plasmiques est très stable et est peu endocyté. J'ai également étudié le profil d’expression des miRNAs cardiaques des souris Scn5a+/-. Parmi les 117 miRNAs mis en évidence, j'ai détecté la surexpression de miR-574-3p dans les cœurs de souris adultes Scn5a+/- développant des troubles sévères de la conduction et la sous expression de miR-23a dans les cœurs de jeunes souris Scn5a+/-. L'ensemble de ces résultats ouvre des nouvelles perspectives pour appréhender les mécanismes impliqués dans la maladie de Lenègre<br>Many mutations in Scn5A gene encoding Nav1. 5 cardiac sodium channel, were identified in patients suffering from cardiac channelopathies such as Lenegre disease or the Brugada syndrome, responsible for sudden death. Nav1. 5 plays a key role in the generation of the cardiac action potential and in its propagation. To understand the role of Nav1. 5 in these syndromes, we are using a mouse model invalidated for Scn5a at the heterozygous state (Scn5a+/-). Interestingly, littermates Scn5a+/- mice develop either severe or mild conduction defects. In addition, mice with severe conduction defects develop fibrosis with aging, as do patients with Lenègre disease. To explain these different phenotypes I analyzed Nav1. 5 biosynthesis. Using metabolic labeling in pulse chase experiments I determined a half-life of 3h50 for neo-synthesized Nav1. 5 and showed that the presence of β1 auxiliary subunit did not influence Nav1. 5 synthesis and stability. On the other hand, using biochemical analysis and membrane biotinilation experiments I showed that, once expressed in the plasma membranes, Nav1. 5 was very stable and exhibited little endocytosis. I also analyzed the cardiac miRNA expression profiles of Scn5a+/- mice. Among the 117 miRNAs identified, I showed that miR-574-3p was over-expressed in adult Scn5a+/- mice with severe conduction defects whereas miR-23a was under-expressed in young Scn5a +/- mice. Altogether, these data open new avenues of research to understand the mechanisms of Lenègre disease

Nous avons analyse, grace a la technique de patch-clamp, le controle des canaux calciques dependants du potentiel membranaire (vccs) par les recepteurs metabotropiques du glutamate (mglurs) dans les cellules granulaires du cervelet en culture. Dans ces cellules, la majeure partie du courant calcique (ca#2#+) global est due aux canaux de type l, q et r (26% chacun) alors que les canaux de type p et n representent une fraction moins importante. Les recepteurs mglur2/r3 inhibent les vccs de type l et n, alors que mglur1 active selectivement les canaux de type l. L'effet inhibiteur met en jeu une proteine g de type gi/go et le mecanisme de transduction n'implique aucun des seconds messagers classiques mobilises par les mglurs. L'effet activateur met en jeu une proteine g de type non gi/go et un mecanisme original impliquant les canaux ca#2#+ des compartiments calciques internes sensibles a la ryanodine. L'augmentation de la probabilite d'ouverture des canaux l suite a l'activation de mglur1 est maintenue apres excision du patch et inhibee par la ryanodine appliquee sur la face cytoplasmique du canal. La ryanodine n'a aucun effet sur un canal excise qui n'a pas ete prealablement stimule par mglur1. Les * recepteurs a la ryanodine intracellulaires et les canaux ca#2#+ de type l membranaires. Ce couplage pourrait intervenir dans la depression a long terme, un phenomene de plasticite synaptique cerebelleuse qui necessite a la fois l'activation de mglur1 et l'augmentation de ca#2#+ interne. *recepteurs mglur1 induisent une interaction fonctionnelle tres etroite entre les

Chez les mammiferes, les neurones primaires vestibulaires sont classes en deux sous-populations en fonction de leurs proprietes physiologiques specifiques. Le but de ce travail a ete de caracteriser les canaux ioniques actives par le voltage dans les neurones ganglionnaires vestibulaires afin de mettre en evidence ceux pouvant etre a l'origine de ces caracteristiques differentes. Cette etude a ete realisee chez la souris a l'aide de la technique de patch-clamp en configuration cellule entiere. Une conductance sodique unique, sensible a la tetrodotoxine, a ete rencontree dans tous les neurones enregistres et ne peut donc pas rendre compte de la difference de physiologie entre les deux populations de neurones. L'etude des conductances calciques nous a permis de caracteriser deux grandes familles que sont les courants bas et haut seuil, distinctes par leurs proprietes d'activation et d'inactivation. Nous avons pu montrer que les courants bas seuil presents seulement dans quelques neurones aux stades etudies, n'etaient plus presents a des stades adultes donnant a ce courant un role plus developpemental que physiologique. Au prealable, une etude montre l'importance des canaux calciques bas seuil et du canal haut seuil de type p lors du developpement et de la maturation de ces neurones. Deux classes de conductances potassiques ont ete caracterisees. Une conductance sensible aux ions tetraethylammonium est toujours presente alors que deux conductances sensibles a la 4-aminopyridine existent en proportion tres variable en fonction des differentes categories de neurones. L'analyse des caracteristiques des potentiels d'action a permis de classer les neurones vestibulaires en deux sous-populations en fonction de leur phase d'hyperpolarisation. Des resultats preliminaires suggerent que la proportion des composantes potassiques sensible a la 4-aminopyridine pourrait etre l'element qui determine les differences physiologiques enregistrees dans les deux populations de neurones vestibulaires.

Les canaux calciques actives par le voltage sont des complexes multimeriques composes entre autre, d'une sous-unite 1 constituant le pore du canal permettant le passage des ions ca 2 +. Ces canaux, classes selon des criteres pharmacologiques et biophysiques en six classes differentes, sont impliques dans de nombreuses fonctions cellulaires telles que la contraction musculaire, la liberation de neurotransmetteurs ou l'activation d'enzymes. Nous avons etudie les canaux calciques cardiaque et squelettique de type l impliques notamment dans le couplage excitation-contraction des muscles. En complement d'etudes electrophysiologiques, nous avons, a l'aide d'anticorps specifiques des sous-unites 1 squelettique ou cardiaque, suivi le profil d'expression de chacune de ces sous-unites grace a la lignee cellulaire h9c2 exprimant les deux sortes de canal. L'application d'acide retinoique, connu pour son implication dans la cardiogenese de l'embryon de mammifere, a montre une modulation de l'expression proteique des sous-unites canalaires. Par les techniques de western blot et d'immunolocalisation, nous avons mis en evidence sur des myocytes cardiaques de rat et humains fraichement dissocies, la presence de la sous-unite 1 squelettique en plus de la sous-unite cardiaque. Le role de cette sous-unite squelettique au niveau cardiaque reste a etre defini. Nous avons enfin detecte la presence de cette sous-unite 1 squelettique sur des cellules granulaires de souris mises en culture.

Cette thèse analyse l'implication de plusieurs éléments de la synapse Fibres Moussues (FM) / CA3-hippocampique dans la formation de la mémoire contextuelle chez la souris. La région CA3 de l'hippocampe est un véritable réseau auto-associatif qui participe à la création de souvenirs complexes, de type épisodique. Les FM, principales projections des cellules granulaires du gyrus denté sur les neurones du CA3, sont essentielles aux processus d'apprentissages et de mémorisation. Elles sont capables de libérer, en plus du glutamate (leur neurotransmetteur principal), de nombreux neuromodulateurs. 1- Les FM co-libèrent un peptide opioïde, la dynorphine, dont les récepteurs cibles, les récepteurs opioïdes Kappa (KOR), sont localisés sur les terminaisons présynaptiques des fibres. Par des injections pharmacologiques localisées dans la région CA3 d'agonistes et/ou d'antagonistes sélectifs, nous avons montré que l'activation pharmacologique des KOR immédiatement après un apprentissage dans le paradigme de peur conditionnée au contexte (CPC), supprimait la mémoire contextuelle chez la souris. Les KOR sont également une des nombreuses cibles modulées par le zinc vésiculaire, un neurotransmetteur atypique co-localisé avec le glutamate dans des vésicules spécifiques, et libéré par les FM. 2- Les travaux antérieurs de notre laboratoire ont montré que la chélation pharmacologique du zinc hippocampique perturbait l'acquisition et la consolidation de la mémoire contextuelle (Daumas et al. , 2004). Afin de répondre aux problèmes de spécificité posés par les chélateurs du zinc et de clarifier les rôles joués par cet ion, nous avons essayé d'invalider le gène codant le transporteur ZnT3, une protéine internalisant le zinc vésiculaire dans cette région. L'injection intra-tissulaire ou intracérébroventriculaire de siRNAs nus visant l'ARNm de ce transporteur n'a pas eu d'effets sur le comportement et les concentrations hippocampiques en zinc. Nous avons donc commencé à développer un protocole original d'administration des siRNAs: l'électropulsation in situ. 3- Finalement, nous avons étudié l'implication des canaux KATP Kir6. 2/SUR1 de la région CA3 dans la mémoire contextuelle. Ces canaux possèdent un site de liaison spécifique pour le zinc et ils participeraient au contrôle métabolique de la neurosécrétion des FM. .<br>This work analyses the putative involvement of several actors of the mossy fibers/CA3 synapse in the processing of contextual memory in mice. The CA3 of hippocampus forms a structured autoassociative network thought to process complex learning and episodic-like memories. Mossy fibers (MF), the main excitatory projections from dentate gyrus granule cells to the CA3, are essential for driving the storage of informations. MF terminals contain high amounts of vesicular zinc co-released with glutamate. Zn2+ has been shown to play the role of an atypical neurotransmitter in the hippocampus and might be required for the processing of memory at MF/CA3 synapses. 1- The hippocampus contains high amounts of Dynorphin, an opioid peptide co-released with glutamate from mossy fiber synapses. We performed transient pharmacological modulation of MF presynaptic Kappa opioid receptors (KOR) using bilateral microinjections in the CA3. Single injections of a selective agonist, antagonist or both, were performed immediately after conditioning C57BL/6J mice in a fear conditioning paradigm (FC). The agonist specifically decreased context-induced response suggesting that CA3-KOR are involved in the early consolidation of contextual memory processing. Importantly, among many other targets, KOR are sensitive to zinc modulation. 2- Previous works in our laboratory have shown the involvement of zinc released by MF in contextual memory (Daumas et al. , 2004). In order to improve our knowledge on the role played by MF-Zn2+ in memory, we injected specific naked siRNAs targeting the ZnT3 transporter, a protein internalizing zinc in MF synaptic vesicles. Repeated injections of different siRNAs either in the dentate gyrus or in the lateral ventricles were nearly without effects on mice behaviour in the FC and failed to alter hippocampal zinc levels. Meanwhile, we adapted the well known electropulsation technique in order to introduce nucleic acids in restricted brain areas of adult mice under brief anaesthesia. We will apply this technique for the delivery of anti-ZnT3 siRNAs in future experiments. 3- Finally, we evaluated the involvement of hippocampal ATP-sensitive potassium Kir6. 2/SUR1 channels (KATP) in learning and memory. .

This work shows that low doses of carbon monoxyde (CO) corresponding to air pollution impair right ventricle (RV) and right coronary circulation adaptive response in animals preexposed to hypoxic hypoxemia. A complementary study on coronary smooth muscle cell shows that voltage-gated potassium channels contribute to the repolarizing outward membrane currents and they were impaired following hypoxemia and CO exposures. This work provides physiological findings on the cardiac effects of air pollution and increased sensitivity in hypoxic hypoxemic animals. We have used the techniques of cardiovascular functional exploration and electrophysiological assessment of the coronary smooth muscle cell.

La 4e de couverture indique : "Système nerveux central (SNC), système immunitaire et système endocrine communiquent entre eux par le biais de diverses molécules (cytokines, neuropeptides), une dérégulation de cette communication pouvant aboutir à l'émergence de pathologies. Ainsi l'obésité apparaît comme un désordre à l'interface de ces trois systèmes, sous la dépendance de facteurs génétiques, environnementaux et centraux. Dans ce contexte, les virus neurotropes sont de bons candidats de dérégulation de l'homéostasie centrale en particulier dans l'hypothalamus, structure majeure dans le maintien de la balance énergétique. L'infection du SNC de souris par le CDV, un morbillivirus proche du virus humain de la rougeole, peut conduire à une obésité et représente ainsi un modèle expérimental pertinent pour analyser les altérations géniques viro-induites dans l'hypothalamus. Nous avons montré qu'à la réplication du CDV était associée (i) une réponse immune importante, objectivée par une induction de cytokines, (ii) un déséquilibre de la balance MMP/TIMP traduisant une altération de la matrice extra-cellulaire (iii) une perturbation hétérogène de l'expression de neuropeptides hypothalamiques impliqués dans l'intégration centrale de la leptine et maintenue dans l'hypothalamus des souris obèses (MCH). Le réseau leptinémique de ces souris est également modifié et se traduit par une augmentation des taux de leptine plasmatique et une diminution de l'expression de l'isoforme fonctionnelle du récepteur à la leptine spécifiquement dans l'hypothalamus des souris obèses. Une comparaison des populations d'ARNm par DDRT-PCR et SSH a mené à identifier de nouveaux gènes dont l'expression est modulée par l'infection virale et le phénotype des animaux infectés. Parmi ces gènes, nous avons isolé un messager inconnu (Urop11) fortement augmenté dans l'hypothalamus et le tissu adipeux des souris obèses. La caractérisation de ce gène a permis d'identifier une séquence nucléique pouvant correspondre à deux ARNm codant pour des protéines de 39 ou 110 aa (Urop 11-p39 et Urop 11-p110), localisés sur le chromosome 19 de la souris dans l'intron du gène ABPA1. Ces résultats apportent trois retombées majeures sur (i) le mode d'action du virus dans le cerveau notamment l'amplification de la réaction immune par les neurones dans un contexte global de neuro-immuno-virologie, (ii) l'analyse de mécanismes impliqués dans l'obésité et (iii) l'identification de nouveaux gènes. "

Comme beaucoup de réseaux neuronaux en développement, la moelle épinière génère spontanément une activité neuronale synchronisée récurrente qui intervient dans de nombreux aspects de maturation du circuit moteur. Au cours d'une période embryonnaire initiale (E12,5-E14,5 chez la souris), cette activité est majoritairement sous le contrôle de la libération d’acétylcholine, de GABA et de glycine. Dans les motoneurones, cette activité se caractérise par des dépolarisations géantes (GDPs) évoquées principalement par une libération de GABA, cette dernière étant régulée par l’activation de récepteurs cholinergiques, suggérant une boucle récurrente entre les motoneurones et les interneurones GABAergiques. Les mécanismes de libération de ces neurotransmetteurs et l’identification des premiers interneurones GABAergiques fonctionnels interagissant avec les motoneurones sont inconnus. Nous montrons qu’à E12,5, les cellules de Renshaw (CRs), expriment du GABA et génèrent aussi des GDPs, pouvant évoquer une décharge répétée de potentiels d’action ou de « potentiels en plateau ». Différents profils de décharge intrinsèques des CRs, en réponse à l’injection de courant, ont été observés et classés en « 1 PA », « train de PA », « potentiels en plateau ». De manière surprenante, entre E12,5 et E14,5, alors que l’excitabilité intrinsèque des MNs augmente classiquement, l’excitabilité intrinsèque des CRs régresse transitoirement. Nous montrons que les rapports des conductances sodiques persistantes et les conductances potassiques voltage-dépendantes jouent un rôle majeur dans la détermination des profils de décharge et peuvent expliquer la régression d’excitabilité intrinsèque des CRs<br>As many developing neuronal networks, embryonic spinal cord spontaneously generates recurrent synchronized neural activity, which is involved in multiple aspects of motor circuit maturation. During an initial embryonic period (E12.5 to E14.5 in mice), this activity is mainly under the control of acetylcholine, GABA and glycine release. In motoneurons, this activity is characterized by giant depolarizing potentials (GDPs), mainly evoked by a release of GABA, the latter being regulated by the activation of cholinergic receptors, suggesting a recurrent loop between motoneurons and GABAergic interneurons. The mechanisms of this neurotransmitters release and the identification of the first functional GABAergic interneurons interacting with motoneurons are unknown. On this basis, we show that at E12.5, Renshaw cells (RCs) express GABA and also generate GDPs that can evoke multiple action potentials or "plateau potentials". Distinct firing patterns of RCs, in response of injected current, were observed and classified as single-spiking, repetitive-firing or sodium plateau potentials. Between E12.5 and E14.5, while motoneurons intrinsic excitability classically increases, RCs intrinsic excitability surprisingly transitory regresses. We show that the ratios of persistent sodium and potassium voltage-dependent conductances play a major role in determining firing patterns and account for the regression of RCs intrinsic excitability

Les traitements actuels des neuropathies étant insuffisants, il est nécessaire d’identifier de nouvelles cibles thérapeutiques. L’isoforme Cav3.2 des canaux calciques de type T est un bon candidat de par son rôle dans la perception douloureuse aiguë et neuropathique établi au niveau périphérique et spinal. Cependant, le rôle de Cav3.2 dans le traitement supra-spinal des informations douloureuses est mal connu. Pour l’élucider, nous avons utilisé la lignée murine KI-Cav3.2-eGFPflox permettant la localisation de Cav3.2 grâce à l’insertion d’une GFP, et sa délétion spécifique grâce à des sites loxP. Nous avons observé l’expression de Cav3.2, principalement dans les neurones à parvalbumine (PV) du Noyau Prétectal Antérieur (APN). L’APN étant un carrefour de connectivité du système somatosensoriel impliquée dans la perception douloureuse, nous avons étudié l’impact de Cav3.2 exprimé dans cette région sur la perception somatosensorielle basale et neuropathique. Nous avons testé la sensibilité de souris ayant subi une délétion de Cav3.2 dans cette région, avant et après lésion du nerf sciatique. Cette délétion ne semble par affecter la sensibilité basale, mais atténue significativement le développement de la douleur neuropathique. L’enregistrement in vitro et l’analyse moléculaire des neurones à PV de l’APN montrent que ceux co-exprimant Cav3.2 sont GABAergiques. De plus, ces neurones projettent vers le thalamus, la zona incerta et le bulbe rachidien. L’APN pourrait donc exercer un contrôle inhibiteur ascendant et/ou descendant du système somatosensoriel. L’excitabilité de ce réseau dépendrait de l’activité de Cav3.2 lors du développement de la neuropathie<br>Current treatments of neuropathies are inadequate. It is necessary to identify new therapeutical targets. Cav3.2 isoform of T-type calcium channels is a good candidate, considering its role in acute and neuropathic pain perception, established at the peripheral and spinal level. However, the role of Cav3.2 in the supra-spinal treatment of pain signals remains elusive. To address this question, we used the mouse line KI-Cav3.2-eGFPflox allowing localization of Cav3.2 thanks to an inserted GFP, and its specific deletion thanks to loxP sites. Cav3.2 was expressed in parvalbumin (PV) neurons of the Anterior Pretectal Nucleus (APN). APN is a crossroad of connectivity of the somatosensory system implicated in pain perception. Therefore we studied the impact of Cav3.2 expressed in this region on basal and neuropathic somatosensory perception. We tested the sensitivity of mice deleted for Cav3.2 in this region, before and after spared nerve injury. This deletion does not seem to affect basal sensitivity but significantly reduces the development of neuropathic pain. In vitro recordings and molecular analysis of PV neurons of the APN shows that those co-expressing Cav3.2 are GABAergic. Moreover, these neurons project to the thalamus, zona incerta and medulla. Together, these results suggest that APN could exert a descending and/or ascending inhibitory control on somatosensory system. The network excitability would critically depend on Cav3.2 activity during the development of neuropathy

La maladie d’Alzheimer (MA) est responsable des deux tiers des cas de démence dans le monde. Plusieurs facteurs sont impliqués dans cette maladie tels que la formation des plaques amyloïdes et des enchevêtrements neurofibrillaires, le déficit cholinergique, la dyshoméostasie calcique et le stress oxydant. L’approche actuellement étudiée pour contrer ce caractère multifactoriel consiste à développer des molécules multicibles. Dans ce travail nous avons choisi des réactions multicomposants, qui permettent d’associer plusieurs fragments en une seule étape, pour développer des molécules multicibles. Nous avons employé les réactions de Hantzsch et de Biginelli qui conduisent respectivement aux noyaux 1,4-dihydropyridine et 3,4-dihydropyrimidin-2-(1H)-one largement étudiés comme inhibiteurs calciques. Nous y avons incorporé divers fragments inspirés de la mélatonine, le pitolisant, la sélégiline et le donépézil, visant respectivement les radicaux libres, les récepteurs histaminergiques H3 (H3R), les monoamines oxydases (MAO) et l’acétylcholinestérase (AChE). Les composés multicibles obtenus ont été évalué, certains sont prometteurs. Nous avons par exemple de bons antagonistes calciques qui sont aussi de puissants antioxydants, d’autres présentent une excellente affinité pour les H3R et sont de très bons inhibiteurs sélectifs pour l’AChE, un autre produit a permis de restaurer la mémoire chez la souris. Ainsi les réactions multicomposants de Hantzsch et de Biginelli nous ont permis de synthétiser rapidement et facilement des molécules multicibles d’intérêt potentiel pour le traitement de la MA<br>Alzheimer’s disease (AD) is responsible for two thirds of cases of dementia worldwide. Many factors are involved in this disease such as amyloid plaques, neurofibrillary tangles, cholinergic deficit, calcium dyshomeostasis and oxidative stress. The approach currently studied to counter the multifactorial nature of AD is to create Multi-Target-Directed Ligands (MTDL). In this work we chose multicomponent reactions to develop MTDL as they allow the incorporation of different fragments in a single step. We used the Hantzsch and Biginelli reactions which lead respectively to 1,4-dihydropyridines and 3,4-dihydropyrimidin-2-(1H)-ones well known as calcium channel blockers (CCB). We integrated different fragments inspired from melatonin, pitolisant, selegiline and donepezil, targeting respectively reactive oxygen species (ROS), histaminergic H3 receptors (H3R), monoamine oxidases (MAO) and acetylcholinesterase (AChE). The synthesised multitarget molecules were evaluated, some of them are promising hit compounds. A few are potent CCB and antioxidants, other show excellent affinity for H3R and are selective inhibitors of AChE, a product was able to restore memory in mice. Hence the Hantzsch and Biginelli multicomponent reactions allowed us to synthesize easily and rapidly multitarget molecules of potential therapeutic interest for AD