Letteratura scientifica selezionata sul tema "Cellule épithéliale tubulaire"

La pathogénicité de Salmonella Paratyphi A, isolée dans l’élevage de volailles de Debiwise lors d’un foyer aigu, a été testée. Vingt poulettes âgées de seize semaines ont été inoculées oralement avec 1,3 x 108 UFC/volaille de Salmonella Paratyphi A, et vingt autres du même âge ont servi de témoins non infectés. Quatre jours après l’inoculation, les animaux infectés ont présenté de l’apathie, des plumes ébouriffées ou entremêlées, de la somnolence, des diarrhées vert jaunâtre, une baisse de la prise d’eau et d’aliments ; la mortalité a été de 95 p. 100, seize jours après l’inoculation. Des lésions importantes ont été enregistrées entre les septième et quatorzième jours après l’inoculation. Le foie était hypertrophié, d’aspect brun sombre à bronze, et avait de multiples lésions nécrotiques. Les reins étaient inflammés, avec des zones nécrosées étendues claires et focales, et la rate avait légèrement grossi. A l’analyse histopathologique, le proventricule a présenté des nécroses glandulaires focales, une infiltration des cellules mononucléaires et une infiltration leucocytaire périvasculaire modérée. Une hémorragie des muqueuses a été observée, ainsi qu’un ternissement des villosités intestinales avec réduction de leur taille, et la présence de débris épithéliaux dans la lumière avec augmentation de l’infiltration leucocytaire dans la lamina propria. Dans le foie, une congestion modérée et diffuse de la sinusoïde et de la veine centrale était présente, ainsi que de nombreux foyers de nécroses hépatocytaires, des infiltrations mononucléaires, et cellulaires et périvasculaires. Il y avait une déplétion lymphoïde diffuse dans le nodule et autour des artérioles liénales, ainsi que sur tout le parenchyme. Les reins étaient congestionnés avec des zones de nécrose épithéliale tubulaire caractérisées par une caryrrhexis des noyaux. Salmonella a été trouvée dans le foie, la rate, le coeur, le sang du coeur et la moelle osseuse des oiseaux infectés. Ni signe clinique, ni lésion macroscopique, ni agent pathogène n’ont été observés chez les témoins.

Because of high mortality and long-term hospital stay among patients with SARS-CoV-2 infections, it is important to search for biochemical changes in different organs and systems that could be useful in diagnosis and prognosis of COVID-19. We conducted a literature search of online databases including PubMed, Web of Science, Scopus and Google scholar for relevant materials on biochemical changes in SARS-COV-2 infections published between December 2019 and March 2021. The review shows that SARS-COV-2 uses the angiotensin converting enzyme 2 (ACE2) for attachment and entry into host cells. These ACE2 are abundantly expressed by the epithelial cells of the respiratory tract and moderately expressed by the epithelial cells of the esophagus, stomach, duodenum, ileum, rectum, cholangiocytes, liver hepatocytes, pancreatic beta cells, and kidney tubular cells. This explains the systemic nature of SARS-COV-2 infection, and the high morbidity and mortality associated with COVID-19. Although, tests to assess biochemical changes are not specific enough for the diagnosis of SARS-CoV-2 infection, they may be useful for predicting outcome of COVID-19. This review highlights biochemical parameters that are significantly elevated or reduced in SARS-COV-2 infections, and which can be used as predictive factors of the severity and prognosis in COVID-19 patients. French title: Un examen des valeurs pronostiques possibles des changements biochimiques chez les patients infectés par le SRAS-CoV-2 En raison de la mortalité élevée et du séjour à l'hôpital à long terme chez les patients infectés par le SRAS-CoV-2, il est important de rechercher des changements biochimiques dans différents organes et systèmes qui pourraient être utiles pour le diagnostic et le pronostic de COVID-19. Nous avons effectué une recherche documentaire dans des bases de données en ligne, notamment PubMed, Web of Science, Scopus et Google Scholar, pour rechercher des documents pertinents sur les changements biochimiques dans les infections par le SRAS-COV-2 publiés entre décembre 2019 et mars 2021. La revue montre que le SRAS-COV-2 utilise l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE2) pour la fixation et l'entrée dans les cellules hôtes. Ces ACE2 sont abondamment exprimés par les cellules épithéliales des voies respiratoires et modérément exprimés par les cellules épithéliales de l'oesophage, de l'estomac, du duodénum, de l'iléon, du rectum, des cholangiocytes, des hépatocytes du foie, des cellules bêta pancréatiques et des cellules tubulaires rénales. Cela explique la nature systémique de l'infection par le SRAS-COV-2, ainsi que la morbidité et la mortalité élevées associées au COVID-19. Bien que les tests pour évaluer les changements biochimiques ne soient pas assez spécifiques pour le diagnostic de l'infection par le SRAS-CoV-2, ils peuvent être utiles pour prédire l'issue du COVID-19. Cette revue met en évidence les paramètres biochimiques qui sont significativement élevés ou réduits dans les infections par le SRAS-COV-2, et qui peuvent être utilisés comme facteurs prédictifs de la gravité et du pronostic chez les patients COVID-19.

Une suspension de cellules tubulaires proximales de rein de lapin est isolée par une nouvelle méthode qui ne fait pas intervenir d'enzymes protéolytiques. Ces cellules, après une caractérisation biochimique, morphologique, et métabolique, sont séparées en deux populations hautement purifiées par une technique d'électrophorèse ou flux libre en veine liquide. Présentation d'un modèle de culture primaire de cellules tubulaires proximales de rein de lapin

Un modèle de culture primaire de cellules tubulaires proximales de rein de lapin est développé à partir de fragments calibrés de tubules proximaux cultivés sans sérum dans un environnement cellulaire variable. Un milieu dépourvu d'insuline et de glucose conduit à une réduction de l'activité glycolytique, principale altération du métabolisme des hydrates de carbone observée dans les cellules en culture. L'absence d'insuline et de glucose permet également de maintenir une distribution subcellulaire de la phosphoénolpyruvate carboxykinase, comparable à celle trouvée dans la suspension de tubules proximaux initiale, bien que les ARNm de la forme cytosolique ne soient pas détectables en culture. Le taux de messagers de la PEPCK cytosolique reste cependant inductible par le dibutyryl AMPC. L'agitation de la monocouche cellulaire améliore les échanges de substrats, de métabolites et d'oxygène entre la cellule et le milieu de culture. L'utilisation d'un milieu dépourvu du tampon bicarbonate, généralement présent dans les milieux de culture, permet d'augmenter la viabilité cellulaire et d'améliorer les activités mitochondriales. Les productions extracellulaires de lactate, d'ammoniaque et d'alanine varient au cours du temps en fonction des conditions de culture utilisées, mettant en évidence la capacité d'adaptation à long terme des cellules en culture. Une caractérisation comparative entre les lignées cellulaires rénales LLC-PK1, LLC-RK1, OK et les cultures primaires est réalisée dans des conditions de culture bien définie. Les études morphologique, biochimique, fonctionnelle et immunologique montrent que le modèle cellulaire le plus proche de la cellule tubulaire proximale in vivo demeure la culture primaire. Par ailleurs, l'étude toxicologique réalisée avec la gentamicine, démontre clairement que non seulement le choix du modèle cellulaire mais également la condition de culture utilisée déterminent la sensibilité et le profil de réponse obtenus à l'atteinte néphrotoxique

Des études épidémiologiques et expérimentales suggèrent que la progression de la maladie rénale chronique (MRC) après une lésion initiale est génétiquement déterminée, mais les réseaux génétiques qui contribuent à cette prédisposition restent inconnus. Parmi les voies moléculaires potentielles impliquées dans la MRC, cette étude s'est concentrée sur la voie Hippo, une cascade de signalisation conservée au cours de l'évolution et cruciale pour la régulation de la taille des organes et de la prolifération cellulaire. Les protéines paralogues YAP et TAZ, deux coactivateurs transcriptionnels de la voie Hippo, ont récemment été identifiées comme étant également des mécanosenseurs, capables de détecter un large éventail de signaux mécaniques et de les traduire en programmes transcriptionnels spécifiques aux cellules. L'activation de YAP et TAZ a été impliquée dans la progression de plusieurs maladies rénales et dans la transition de la lésion rénale aiguë (LRA) à la MRC . Cependant, les mécanismes sous-jacents restent obscurs et leur rôle dans des conditions physiologiques n'est pas encore bien compris. L'objectif de ce projet est d'élucider le rôle de YAP et TAZ dans les tubules rénaux. Tout d'abord, en utilisant la combinaison de modèles de souris transgéniques et de néphrectomie comme modèle de MRC, nous avons étudié l'effet de l'inactivation sélective du gène Yap ou Taz dans les cellules tubulaires rénales dans ce contexte de maladie. Nos résultats ont révélé une redondance potentielle entre ces deux protéines dans les cellules épithéliales tubulaires. Il est intéressant de noter que nos souris déficientes à la fois en YAP et en TAZ ont développé spontanément un phénotype rénal sévère avec des lésions tubulaires, de la fibrose et de l'inflammation, qui a été décrit en détail dans ce travail. Grâce à l'analyse transcriptomique, nous avons identifié une nouvelle signature moléculaire qui pourrait permettre de mieux comprendre les mécanismes régulés par YAP et TAZ dans les cellules tubulaires. Paradoxalement, dans notre modèle de double knock-out, nous avons observé une aggravation de l'expression et de l'activation de YAP et TAZ, parallèlement à la progression des lésions. Ceci semble être le résultat d'une expansion des cellules « non recombinées », montrant les rôles complexes de YAP et TAZ dans la communication avec les cellules voisines. Ces données démontrent le rôle essentiel de YAP et TAZ dans le maintien de l'homéostasie tubulaire et l'équilibre complexe nécessaire à leur régulation. Cette complexité peut avoir des implications pour les stratégies thérapeutiques ciblant l'inhibition de YAP et TAZ dans les maladies rénales, surtout si l'on considère les effets secondaires potentiels qui pourraient rendre ces approches plus difficiles
Epidemiological and experimental studies suggest that the progression of Chronic Kidney Disease (CKD) after an initial injury is genetically determined, but the genetic networks that contribute to this predisposition remain unknown. Among the potential molecular pathways involved in CKD, this study focused on the Hippo pathway, an evolutionarily conserved signaling cascade crucial for regulating organ size and cell proliferation. The paralogs proteins YAP and TAZ, two transcriptional coactivators of the Hippo pathway, have recently been identified also as mechanosensors, capable of detecting a wide range of mechanical cues and translating them into cell-specific transcriptional programs. Activation of YAP and TAZ has been implicated to the progression of several kidney diseases and in the transition from acute kidney injury (AKI) to CKD. However, the underlying mechanisms remain unclear and their role under physiological conditions is still not well understood. The aim of this project is to elucidate the role of YAP and TAZ in the renal tubules. First, using the combination of inducing transgenic mouse models and nephrectomy as a model of CKD, we investigated the effect of the selective inactivation of Yap or Taz gene in renal tubular cells in this disease context. Our findings revealed a potential redundancy between these two proteins in tubular epithelial cells. Interestingly, our mice deficient in both YAP and TAZ developed a spontaneous severe renal phenotype with tubular injury, fibrosis and inflammation, which was described in detail in this work. Through transcriptomic analysis, we identified a new novel molecular signature that may provide further insight into the mechanisms regulated by YAP and TAZ in tubular cells. Paradoxically, in our double knock-out model, we observed a worsening of YAP and TAZ expression and activation, in parallel with the lesion progression. This appeared to be the result of an expansion of the "non-recombined" cells, showing the complex roles of YAP and TAZ in the cross-talk with the neighbouring cells. These data demonstrated the essential role of YAP and TAZ in maintaining tubular homeostasis and the intricate balance required for their regulation. This complexity may have implications for therapeutic strategies targeting the inhibition of YAP and TAZ in kidney disease, especially considering the potential side effects that could make such approaches more challenging

HNF1beta (Hepatocyte Nuclear Factor 1 beta) est un facteur de transcription exprimé dans les cellules épithéliales de différents organes tels que le pancréas, l'intestin et les reins. La présence d'anomalies rénales représente le trait phénotypique le plus pénétrant chez les patients porteurs de mutations de HNF1B, associées ou non à un diabète de type MODY (MODY5). Au cours de ma thèse, j'ai analysé le rôle de ce facteur de transcription dans différents compartiments du rein de souris et à différentes périodes, en utilisant une stratégie Cre LoxP. Notre laboratoire a précédemment montré que l'inactivation Hnf1b spécifiquement dans les précurseurs du néphron (Six2Cre) provoque la perte de spécification et d’expansion tubulaires, et la formation de kystes glomérulaires. L'analyse des processus morphogénétiques pendant la glomerulogenèse en l'absence de HNF1beta m'a amenée à proposer un nouveau mécanisme de formation des kystes glomérulaires. Dans les néphrons mutants, la connexion entre le glomérule et le composant tubulaire est anormalement localisée à l'intérieur de la coupe glomérulaire. En raison de cette configuration inhabituelle, le tubule est entouré de capillaires et de cellules mésangiales, conduisant à un rétrécissement de la lumière tubulaire. Lorsque la filtration glomérulaire débute, la production de l'urine primitive provoquerait la dilatation de la capsule de Bowman entrainant la formation de kystes glomérulaires. Dans la deuxième partie de ma thèse, j'ai analysé le rôle de HNF1beta dans des cellules tubulaires en prolifération versus en quiescence, en inactivant ce gène dans les tubules rénaux à deux périodes post-natales (Ksp-CreERT2 inductible). Mes résultats ont montré que l'inactivation de Hnf1b pendant l’élongation tubulaire conduit à une polykystose rénale, comme déjà décrit précédemment dans notre laboratoire. L'analyse de ce nouveau modèle inductible d’inactivation de Hnf1b a également souligné pour la première fois un phénotype fibrotique dans le tissu entourant les kystes. L'inactivation plus tardive, dans des cellules quiescentes se caractérise par la présence d'une fibrose focale et de dilatations tubulaires. Par ailleurs, les cellules tubulaires proximales déficientes en HNF1beta présentent une perte partielle de différenciation épithéliale, caractérisée par une expression réduite de marqueurs tubulaires (LTL) et l'expression de novo de la vimentine. Au niveau moléculaire, l'expression de Zeb2, facteur de transcription impliqué dans la transition épithéliomésenchymateuse, est augmentée. Cela est dû à la régulation négative de son inhibiteur miR200, une cible directe de HNF1beta. Enfin, l’analyse des données transcriptomiques a montré que deux voies de signalisation majeures sont perturbées aux deux périodes d’inactivation. Les voies contrôlant le développement et la différenciation des néphrons sont gravement compromises et les cascades de signalisations pro-inflammatoires et fibrotiques sont fortement surexprimés. Dans leur ensemble, ces résultats ont amélioré nos connaissances du rôle de HNF1beta au cours de la glomérulogenèse et dans le rein adulte
Hepatocyte Nuclear factor 1 beta (HNF1beta) is a transcription factor expressed in epithelial cells of different organs, such as pancreas, intestine and kidney. The most penetrant phenotypic trait in patients carrying HNF1B mutations is the presence of renal abnormalities, frequently associated with Maturity Onset Diabetes of the Young type 5 (MODY5). During my thesis, I analyzed the role played by this transcription factor in different compartments and at different time points in mouse kidney, using a Cre LoxP strategy. Our laboratory has previously shown that Hnf1b specific inactivation in the epithelial nephron precursors cells (Six2Cre) leads to defective tubular specification and expansion and to the formation of glomerular cysts. The analysis of the morphogenetic processes of glomerulogenesis in the absence of HNF1beta led me to propose a new mechanism of glomerular cyst formation. In mutant nephron, the connection between the glomerulus and the tubular component is abnormally trapped inside the glomerular cup. Due to this unusual configuration, the trapped tubule is surrounded by capillaries and mesangial cells, leading to a constriction of the urinary glomerular outflow. When filtration starts, the production of the primary urine might induce the dilation of the Bowman capsule and the formation of glomerular cyst. In the second part of my thesis, I analyzed the role played by Hnf1b in proliferative versus quiescent tubular cells, by inactivating this gene in renal tubules at different time points (inducible Ksp-CreERT2). My results showed that Hnf1b inactivation during postnatal tubular elongation leads to polycystic kidney disease, as previously described in our laboratory. Analysis of this new inducible model of Hnf1b inactivation also highlighted for the first time a fibrotic phenotype in the tissue surrounding the cysts. The later inactivation in a more quiescent status is characterized by the presence of focal tubulointerstitial fibrosis and tubular dilation. Interestingly, in this context, Hnf1b-deficient proximal tubular cells present a partial loss of epithelial differentiation, characterized by a reduced expression of tubular markers (LTL) and de novo expression of vimentin. At the molecular level, the expression of Zeb2, a transcription factor involved in epithelial to mesenchymal transition, is increased. This is due to the downregulation of its inhibitor miR200, a direct target of HNF1beta. Finally, transcriptomical analyses in postnatal and postweaning periods showed that two major pathways are commonly affected. The development and differentiation of nephrons are severely compromised and pro-inflammatory and fibrotic signaling cascades are strongly upregulated. All together these results improved our knowledge about the role of HNF1beta in glomerulogenesis and adult kidney