Gotowa bibliografia na temat „Tiopurine”

Ulcerozni kolitis kronična je upalna bolest za koju su karakteristične ulceracije sluznice debeloga crijeva i klinički tijek obilježen razdobljima remisije i relapsa bolesti. Klinički se ulcerozni kolitis najčešće očituje učestalim sluzavo-krvavim proljevima. Azatioprin je tiopurin koji imunosupresiju postiže putem svojih aktivnih metabolita. Oni potiču apoptozu T-limfocita, te, inkorporirajući se u replicirajući lanac DNA i blokirajući de novo sintezu purina, smanjuju njihovu proliferaciju. Mjerenjem aktivnosti tiopurin Smetiltransferaze i praćenjem metabolita tiopurina, uspješno se postiže optimizacija terapije. Time se poboljšava klinička djelotvornost liječenja, te sprječava neuspjeh liječenja uzrokovan štetnim nuspojavama azatioprina. Unatoč pretpostavkama da će u budućnosti, zbog razvoja učinkovitijih i sigurnijih lijekova, uloga tiopurina u liječenju bolesnika s ulceroznim kolitisom biti ograničenija, azatioprin i dalje ostaje neizostavan lijek u liječenju bolesnika s ulceroznim kolitisom.

Supresja układu immunologicznego jest podstawą leczenia wielu lokalnych i układowych chorób autoimmunizacyjnych. Przewlekłe stosowanie kortykosteroidów wiąże się z klinicznie istotnymi powikłaniami, co było powodem poszukiwania leków immunosupresyjnych zastępujących kortykosteroidy. Głównym działaniem leków immunomodulujących jest hamowanie proliferacji limfocytów na drodze różnych mechanizmów – alkilujących (cyklofosfamid, chlorambucyl), antymetabolicznych (tiopuryny, metotreksat, mykofenolan mofetylu) lub hamowania kalcyneuryny (cyklosporyna, takrolimus, ewerolimus). Przedstawiono przegląd wiedzy na temat farmakodynamiki, efektów niepożądanych i interakcji lekowych tiopuryn i metotreksatu – konwencjonalnych immunomodulatorów stosowanych w leczeniu nieswoistych zapaleń jelit.

Posamezniku prilagojeno zdravljenje predstavlja sodoben koncept v medicinski praksi, ki temelji na spoznanju, da se posamezniki različno odzivajo na določeno terapijo. Osrednji element prilagojenega zdravljenja predstavljajo biološki označevalci, med katere uvrščamo tudi genetske. Med najuspešnejše primere uvajanja farmakogenetskih označevalcev v klinično prakso z namenom prilagajati odmerjanje zdravil posamezniku sodi zdravljenje akutne limfoblastne levkemije (ALL). Ta predstavlja približno 80 % vseh oblik levkemije, ki se pojavijo pri otrocih, mlajših od 15 let, kar jo uvršča na prvo mesto po pogostosti raka v otroštvu. V zadnjih desetletjih smo bili priča izjemnemu napredku na področju zdravljenja ALL, kljub temu pa je le-to še vedno neuspešno pri nekaterih bolnikih bodisi zaradi toksičnih stranskih učinkov, bodisi zaradi neučinkovitosti uporabljenih zdravil, kar vodi v ponovitev bolezni. Dodaten problem predstavljajo še dolgoročni toksični učinki kemoterapije, ki se lahko pojavijo tudi več let po zaključenem zdravljenju. Prav iz teh razlogov se je v zadnjih letih veliko študij posvetilo odkrivanju bioloških označevalcev, na podlagi katerih bi lahko zdravljenje prilagodili posamezniku in s tem izboljšali njegovo učinkovitost in varnost. Najbolje proučeni so genetski dejavniki, povezani s toksičnostjo 6-merkaptopurina (6-MP), ki predstavlja temelj vzdrževalnega zdravljenja ALL. Encim tiopurin-S-metiltransferaza (TPMT) igra poglavitno vlogo pri deaktiviranju tiopurinov in v veliki meri vpliva na razlike v odzivu posameznikov na zdravljenje. Znano je, da so za znižane encimske aktivnosti v največji meri odgovorni polimorfizmi v genu za TPMT, vendar je ujemanje med genotipom in encimsko aktivnostjo nepopolno. V zadnjem desetletju so identificirali nove farmakogenetske označevalce, povezane s toksičnostjo 6-MP in drugih zdravil, ki se uporabljajo za zdravljenje otroške ALL, vendar se še ne uporabljajo v klinični praksi.

Abstract: Introduction: Genetic polymorphism of thiopurine S-methyltransferase, the key enzyme in metabolism of thiopurines (azathioprine and 6-mercaptopurine) used in the treatment of inflammatory bowel disease, results in different enzyme activities. Decreased enzyme activity causes myelosuppression whereas abnormally high activity results in hepatotoxicity at standard thiopurine doses. Four allele variants (TMPT*2, TMPT*3A, TPMT*3B and TPMT*3C) account for decreased activity in more than 95% of cases. Aim: To evaluate the frequency of severe side effects, such as myelosuppression and hepatotoxicity, at standard or decreased azathioprine doses in children with inflammatory bowel disease who do not exhibit any of the four most common variant alleles. Method: Retrospective analysis of children with inflammatory bowel disease treated with azathioprine at a single tertiary referral center. Results: 51 patients were identified (44: Crohn’s disease, 7: ulcerative colitis; male ratio: 28/51; mean age at diagnosis: 12.4 years). Two patients discontinued azathioprine arbitrarily whereas in one patient it was stopped due to serious pancreatitis and in another one because of severe flu-like symptoms. None of the remaining 47 patients exhibited hepatotoxicity suggesting abnormally high thiopurine S-methyltransferase activity. Four patients (8.5%) had profound myelosuppression on less than 1 mg/kg/day azathioprine requiring discontinuation of the drug, and all of them showed complete bone marrow recovery subsequently. No myelosuppression occurred in the remaining 43 patients on 2.17 ± 0.31 mg/kg/day (mean ± SD) azathioprine treatment. Conclusions: Regular blood tests are necessary on thiopurine therapy despite normal thiopurine S-methyltransferase genotype because of the risk of myelosuppression. The four most common variant alleles were identified in routine genotyping only, therefore most likely rare variant allele(s) or polymorphism of other enzymes involved in thiopurine metabolism account for the aforementioned four cases with profound bone marrow suppression. Thiopurine metabolite monitoring is the key for individualized treatment when optimal dosing can be achieved with the least side effects. Orv Hetil. 2019; 160(5): 179–185.

Background: Se l’uso crescente di farmaci immunomodulatori (ISS) e delle terapie biologiche può aumentare il rischio di neoplasia nelle malattie infiammatorie intestinali (IBD), è indefinito. Obiettivo: In uno studio di coorte monocentrico si vuole stimare la frequenza e l’istotipo di neoplasia in una popolazione di 1057 pazienti sotto regolare controllo medico. La frequenza di neoplasia è stimata anche in relazione ad un uso precedente di ISS e/o anti-TNFs . Materiali e metodi: Studio retrospettivo effettuato su dati registrati nel database del nostro centro di riferimento per le malattie infiammatorie intestinali. I pazienti esaminati sono stati controllati in un arco di tempo tra il 1984 ed il 2009. Sono stati valutati i seguenti dati: tipo di IBD / sede di malattia / durata di malattia, presenza di intervento chirurgico, fumo, uso di ISS e/o anti-TNFs e durata della somministrazione, presenza di neoplasia. Analisi statistica: Wilcoxon’test,t test e test del chi quadrato. Risultati: La popolazione studiata include 1057 pazienti IBD (512 F 545 M): 555 con malattia di Cren (CD), 502 con Colite Ulcerosa (UC). La neoplasia è presente in 73/1057 IBD (6.9%; 39M 34F) di cui: 47/555 CD (8.5%), 26/502 UC (5.2%). Sede della neoplasia / istotipo: mammario 14 (10 CD, 4 UC); intestinale 7 (3 CD, 4 UC), cutaneo 7 (5 CD, 2 UC), linfoma 6 (5 CD, 1 UC), canale anale 2 (2 CD), altre sedi 37. Fra i 73 pazienti, con IBD e neoplasia, usano ISS 20 pazienti (27.3%), anti-TNFs 10 pazienti (13.6%), ISS ed anti-TNFs 7 pazienti (9.5%). L’età mediana alla diagnosi di neoplasia è di 52.4 anni (range 21 -81) di cui: UC 52 anni (range 27 -81), CD 62 anni (range 13 -83). La relazione tra caratteristiche cliniche e neoplasia è stata stimata nei 1057 pazienti IBD: età mediana 52.4 anni ( range 13 -83) 555 CD, 502 UC; durata di IBD: UC 7 anni ( range1-86) versus CD 12 anni ( range 1-76); p = < 0.01. Trattamenti farmacologici precedenti: ISS in 275/1057 IBD (26%), 201/555 CD (36.2%), 74/502 UC (14.7%); Anti-TNFs in 179/1057 IBD (16.9%), 146/555 CD (26.3%), 33/502 UC (6.6%); ISS e concomitante anti-TNFs in 125/1057 IBD (11.8%), 104/555 CD (18.7%), 21/502 UC (4.2%). La neoplasia è stata diagnosticata in 73/1057 pazienti IBD (6.9%; 39M 34F): 47/555 CD (8.5%), 26/502 UC (5.2%; p=ns). Fra i 73 pazienti, con IBD e neoplasia, l’uso di ISS è stato effettuato in 20/73 pazienti (27.3%) (età 51 anni versus i 55 anni dei 53 pazienti con neoplasia e nessun uso di ISS; p=ns), suddiviso per tipo IBD 12/20 CD (0.6%), 8/20 UC (0.4%). Fra i 73 pazienti, con IBD e neoplasia, la somministrazione di anti-TNFs è stata eseguita in 10/73 pazienti (0.14%) (età 53 anni versus i 55 anni dei 63 pazienti con neoplasia e nessun trattamento anti-TNFs; p=ns), suddiviso per tipo IBD 9 / 47 CD (19.1%), 1/26 UC (3.8%). Fra i 73 pazienti, con IBD e neoplasia, l’uso concomitante di ISS e di anti-TNFs è stato riscontrato in 7/73 pazienti (9.5%) (età 51 anni versus i 54 anni dei 50 pazienti senza trattamenti ISS e anti-TNFs; p=ns), suddiviso per tipo IBD 7/47 CD (14.8%), 0/26 UC (0%). Sede della neoplasia / istotipo: mammario 11 (11 CD); intestinale 4 (2 CD), cutaneo 4 (3 CD), linfoma 3 (3 CD), canale anale 1 (CD), altri sedi 18. Conclusioni. Nella nostra popolazione di 1057 IBD pazienti, è stata riscontrata una frequenza alta di neoplasia, con un trend più alto ma non significativo nei pazienti con malattia di Crohn trattati con ISS, mentre la somministrazione di anti-TNFs sembra non aumentare significativamente il rischio di neoplasia.
Background. Whether the growing use of immunomodulatory drugs (ISS) and biologic therapies may increase the cancer risk in Inflammatory Bowel Disease (IBD) is undefined. Aims. In a single-center, cohort study we aimed to assess the frequency and histotype of cancer in a population of 1057 patients (pts) under regular follow up. The frequency of cancer was also assessed in relation to previous ISS and/or anti-TNFs use. Materials and methods. In a cross-sectional study, clinical records from all IBD pts. In follow up from 1984-2009 in our tertiary IBD referral center were reviewed. Data recorded: IBD type/ site/duration, surgery, smoking habits, follow up length, ISS and/or anti-TNFs use. Statistical analysis: Wilcoxon test,t test and χ test. Results. The study population included 1057 IBD pts (512 F 545 M): 555 Crohn’s Disease (CD), 502 Ulcerative Colitis (UC). Cancer was diagnosed in 73/1057 IBD (6.9%; 39M 34F): 47/555 CD (8.5%), 26/502 UC (5.2%). Cancer site/histotype: breast 14 (10 CD, 4 UC); colon 7 (3 CD, 4 UC), skin 7 (5 CD, 2 UC), lymphoma 6 (5 CD, 1 UC), anal canal 2 (2 CD), other cancers 37. Among the 73 pts with IBD and cancer, ISS use reported by 20 (27.3%), anti-TNFs by 10 (13.6%), both ISS and anti-TNFs by 7 pts (9.5%). Age at the diagnosis of cancer: IBD 52.4 yrs (range 21-81), UC 52 (range 27-81), CD 62 (range 13-83). The relation between clinical features and cancer was assessed in 1057 IBD pts (52.4 age range 13-83): 555 CD, 502 UC (IBD duration: UC 7 yrs, range 1-86 vs CD 12 yrs, range 1-76; p=< 0.01). Previous treatments: ISS in 275/1057 IBD (26%), 201/555 CD (36.2%), 74/502 UC (14.7%); Anti-TNFs in 179/1057 IBD (16.9%), 146/555 CD (26.3%), 33/502 UC (6.6%); Concomitant ISS and anti-TNFs in 125/1057 IBD (11.8%), 104/555 CD (18.7%), 21/502 UC (4.2%). Cancer was diagnosed in 73/1057 (6.9%; 39M 34F) IBD pts: 47/555 CD (8.5%), 26/502 UC (5.2%; p=ns). Among the 73 pts with IBD and cancer, ISS use reported by 20/73 (27.3%)(age 51 vs 55 yrs in the 53 pts with cancer and no ISS use; p=ns), including 12/20 CD (0.6%), 8/20 UC (0.4%). Among the 73 pts with IBD and cancer, anti-TNFs use reported by 10/73 IBD (0.14%) (age 53 vs 55 yrs in the 63 pts with cancer and no anti-TNFs; p=ns), including 9/ 47 CD (19.1%), 1/26 UC (3.8%). Among the 73 pts with IBD and cancer, both ISS and anti-TNFs use reported by 7/73 (9.5%)(age 51, vs 54 yrs in the50 pts with no concomitant ISS and anti-TNFs; p=ns), including 7/47 CD (14.8%), 0/26 UC (0%). Cancer site/histotype: breast 11 (11 CD); colon 4 (2 CD), skin 4 (3 CD), lymphoma 3 (3 CD), anal canal 1 (CD), other cancers 18. Conclusions. In our cohort of 1057 IBD pts, a high frequency of cancer was observed, with a not significantly higher trend in CD pts treated with ISS, while anti-TNFs appeared not to significantly increase the cancer risk.

Introdução: A 6-mercaptopurina (6-MP) é o principal componente da maioria dos esquemas de quimioterapia na fase de manutenção do tratamento da leucemia linfocítica aguda (LLA). A tiopurinametiltransferase (TPMT) é uma das enzimas responsáveis pelo metabolismo da 6-MP. Diversos estudos demonstram um polimorfismo genético de caráter autossômico co-dominante para a TPMT em humanos. O metabolismo da 6-MP é intensamente afetado por este polimorfismo. Objetivos: Estimar a freqüência das quatro principais variantes alélicas do gene TPMT: *2 (238G>C), *3A (460G>A e 719A>G) *3B(460G>A) e *3C (719A>G) em uma população de crianças e adolescentes com LLA tratados no Serviço de Hematologia do Hospital das Clínicas UFMG. Correlacionar o genótipo com dados clínicos e laboratoriais obtidos durante a fase de manutenção da quimioterapia e com a concentração intra-eritrocitária dos metabólitos da 6-MP (6-TGN e MMP). Métodos: Amostras de DNA de 116 pacientes foram extraídas sendo 95 a partir de sangue total, 13 a partir de concentrado de hemácias e 8 utilizando esfregaço de medula óssea. A PCR alelo específica foi otimizada separadamente para cada locus, utilizando a estratégia do sistema de amplificação refratário a mutações (ARMS). Posteriormente, a PCR foi realizada em multiplex. Esta PCR foi possível somente com preparado de DNA de sangue total. Os dados clínicos e laboratoriais foram coletados, retrospectivamente, em prontuários médicos. Resultados: Doze dos 116 pacientes (10,34%) apresentaram mutação. Cento e quatro pacientes (89,66%) não apresentaram mutação no gene TPMT. Todas as mutações foram encontradas em heterozigose. O alelo mais freqüente foi o TPMT*3A (9/232 alelos; 3,87%), seguido pelo *3C (2/232; 0,86%), *2 (1/232; 0,43%) e *3B (nenhum alelo; 0%). Não houve diferenças significativas nas medianas da contagem de leucócitos e neutrófilos, quando os grupos de pacientes com e sem mutação foram comparados. Também o tempo de interrupção da quimioterapia de manutenção foi semelhante nos dois grupos. A média das doses prescritas de 6-MP situou-se abaixo da dose preconizada pelo protocolo em ambos os grupos e a mediana da contagem de leucócitos e neutrófilos durante o tratamento de manutenção ficou acima da preconizada pelos protocolos de tratamento. Dos 36 pacientes em que foi realizada a dosagem de metabólitos apenas um apresentou mutação. Neste paciente foi encontrado altas concentrações intra-eritrocitárias de 6-TGN e baixas concentrações de MMP. Portanto, não foi possível a realização de análises estatísticas para avaliação da relação entre o genótipo e a concentração de metabólitos da 6-MP. A sobrevida livre de eventos aos 8,5 anos para todo o grupo foi de 75,1% (IC 95%: 60,8 a 84,8%). Não foi observada diferença na sobrevida livre de eventos quando comparados os grupos com e sem mutação (p = 0,06). Conclusões: Os nossos resultados em pacientes brasileiros coincidem com a literatura, em que o alelo TPMT*3A é o mais freqüente na maioria das populações. Vários indícios encontrados no presente estudo sugerem que a intensidade da quimioterapia pode não ter sido suficiente para se alcançar uma mielossupressão adequada, principalmente no grupo de pacientes com mutação do gene TPMT. Isso explicaria porque não se encontraram diferenças significativas no prognóstico dos grupos com e sem mutação do gene da TPMT. A incorporação da genotipagem à rotina de acompanhamento dos pacientes tratados no Serviço de Hematologia do Hospital das Clínicas da UFMG poderia ser uma ferramenta auxiliar na otimização das doses de 6-MP, minimizando riscos de toxicidade e contribuindo para uma melhor abordagem diagnóstica e terapêutica.

A azatioprina e a 6 mercaptopurina (6-MCP) são drogas muito utilizada no tratamento das doenças inflamatórias intestinais (DII), porém estão associadas a vários efeitos colaterais. A determinação prévia do genótipo da tiopurina metiltransferase (TPMT) pode identificar pacientes de maior risco de toxicidade a droga. Os objetivos deste estudo foram avaliar a prevalência dos polimorfismos do gene da TPMT em pacientes com DII acompanhados no Hospital Universitário Pedro Ernesto (HUPE) da UERJ, comparando com a prevalência em outras populações e correlacionar a presença desses polimorfismos com a toxicidade às drogas. Foram avaliados 146 pacientes com doença de Crohn (DC) e 73 com retocolite ulcerativa idiopática (RCUI). A pesquisa dos principais genótipos da TPMT (*2, *3, *3C) foi realizada por técnicas de PCR (alelo específico e RFLP). Os achados clínicos foram correlacionados com a genotipagem e avaliados por análises multivariadas. Dentre os pacientes que estavam em uso de azatioprina, 14 apresentaram pancreatite ou elevação de enzimas pancreáticas, 6 apresentaram hepatoxicidade e 2 evoluíram com neutropenia. Os polimorfismos do gene da TPMT foram observados em 37 dos 219 pacientes (8 foram heterozigotos para o genótipo *2, 11 heterozigotos para *3A e 18 foram heterozigotos para o polimorfismo *3C). Não foi observado nenhum homozigoto polimórfico. Uma correlação positiva foi observada entre a elevação de enzimas pancreáticas e os genótipos *2 e *3C. A prevalência dos polimorfismos neste estudo (16,89%) foi maior que a descrita para população caucasiana e em outros estudos brasileiros. Apesar do predomínio do genótipo *3C, não houve ocorrência exclusiva de um polimorfismo, conforme observado em outras populações. A população brasileira devido à sua miscigenação têm características genotípicas próprias diferentes do outros países do mundo. Dois polimorfismos da TPMT (*2 e *3C) estiveram associados à toxicidade ao uso da azatioprina em pacientes com DII no sudeste do Brasil. O teste genético pode auxiliar na escolha da melhor droga e na dose ideal para os pacientes portadores de DII antes do início do tratamento.
Although azathioprine is commonly used for treating patients with inflammatory bowel disease (IBD), there is still concern about potential severe side effects. Determining the Thiopurine-Methyl-Transferase (TPMT) genotype is expected to identify patients predisposition in respect of toxicity prior to azathioprine administration. The aim of this study was to analyze the prevalence of TPMT genotypes and association with drug toxicity in IBD patients from south-eastern Brazil, constituted by a heterogeneous population. We analyzed 146 Crohns disease (CD) and 73 ulcerative colitis (UC) patients, for the presence of the major TPMT genetic variants (TPMP*2, *3A, *3C) by means of specific allele and RFLP PCR. Clinical data were systematically recorded and correlated with the genotype results, and analyzed in multivariate models. Among the side effects recorded from patients taking azathioprine, 14 presented pancreatitis and/or elevation of pancreatic enzymes, while 6 had liver toxicity, and 2 had neutropenia. TPMT polymorphisms were detected in 37/219 patients (8 heterozygous for *2, 11 heterozygous for *3A and 18 heterozygous for *3C). No homozygotic polymorphisms were found. A positive correlation was found between the elevation of pancreatic enzymes and either TPMT*2 or TPMT*3C. The prevalence of polymorphisms in this study (16,89%) was greater than described with caucasian population or other Brazilian studies. Despite the prevalence of genotype *3C, it was not the only polymorphism shown as observed in other populations. Two genetic variants of TPMT gene (*2 and *3C) are associated with azathioprine toxicity in IBD patients from a south-eastern Brazilian population. Genetic testing may help in the selection of the most appropriate medication prior to treatment initiation.

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Devido à importância que o sistema imune desempenha na doença de Crohn (DC), as tiopurinas são os imunomoduladores mais indicados na terapia. Entretanto, as tiopurinas, como a Azatioprina (AZA) e seus metabólitos intraeritrocitários, levam a uma série de reações adversas ou falha terapêutica, podendo ocasionar em não adesão ou abandono da terapia. A conversão da AZA para os nucleotídeos ativos de 6-tioguanina (6-TGN) é necessária para a eficácia clínica, entretanto, outro metabólito, a 6-metilmercaptopurina (6-MMP), é formado através de uma via concorrente pela tiopurina metil transferase e está relacionado à hepatotoxicidade. Devido à ampla variabilidade interindividual da tiopurina metil transferase e a uma faixa terapêutica estreita, torna-se importante a realização do monitoramento terapêutico do metabólito ativo 6-TGN e da 6-MMP. Neste trabalho, um método cromatográfico (CLAE/HPLC-UV) foi desenvolvido e validado para a quantificação dos metabólitos nos eritrócitos, envolvendo um procedimento de tratamento simples baseado na desproteinização por ácido perclórico seguido de hidrólise ácida e aquecimento para a conversão dos metabólitos em suas respectivas bases livres. A cromatografia foi realizada em coluna C18 (250 x 4,6 mm, 5 μm). A fase móvel consistiu em mistura de solução tampão fosfato de potássio (0,02 mol/L, pH = 3), acetonitrila e metanol, eluição por gradiente, num fluxo de 1,0 mL/minuto, com detecção de UV em 291 ηm e 342 ηm. Os tempos de retenção foram de 6,2 min (6-TGN); 23,1 min (6-MMP) e 24,7 min (cafeína: padrão interno). A resposta do detector foi linear na concentração de 0,89-29,91 μmol/L (r=0,999) para 6-TGN e entre 0,90-30,08 μmol/L (r=0,999) para 6-MMP. Os limites de detecção foram de 0,29 μmol/L e 0,30 μmol/L e os limites de quantificação foram de 0,89 μmol/L e 0,90 μmol/L, para 6-TGN e 6-MMP respectivamente. As médias das recuperações de 87,9% para 6-TGN e 91,9% para 6-MMP. Os CV da repetibilidade, de 5,48 e 10,48% (intradia) e 9,23 e 10,48% (interdia), enquanto os EPR da reprodutibilidade de 11,36 e 9,85% (intradia) e 10,48 e 7,32% (interdia) para 6-TGN e 6-MMP, respectivamente. As concentrações de 6-TGN e 6-MMP foram determinadas para todos os pacientes do estudo e os resultados encontrados variaram de 4,51 a 1515,27 ρmol/8 x 10⁸ eritrócitos para a 6-TGN e de 169,98 a 53951,53 ρmol/8 x 10⁸ eritrócitos para a 6-MMP. Observou-se uma correlação entre os pacientes em terapia combinada AZA e alopurinol e a diminuição da dosagem de AZA, consequentemente a diminuição significativa dos níveis de 6-MMP (2030,71 ρmol/8 x 10⁸ eritrócitos) em comparação com o grupo de pacientes sob monoterapia (9098,43 ρmol/8 x 10⁸ eritrócitos). Um outro achado foi a diminuição estatisticamente significativa da transaminase TGO/AST (25,03 + 18,62 U/L) no grupo de pacientes que apresentavam a doença em atividade, com os níveis de 6-TGN a 540,51 ρmol/8 x 10⁸ eritrócitos e de 6-MMP a 7952,32 ρmol/8 x 10⁸ eritrócitos, semelhante a relatos anteriores da literatura. O método proposto de quantificação por CLAE-UV mostrou-se preciso, exato e reprodutível, podendo ser utilizado como uma importante ferramenta na rotina de monitorização terapêutica de pacientes com DC, permitindo a individualização da dose, o acompanhamento dos efeitos adversos relacionados com a terapia farmacológica, o monitoramento da adesão ao tratamento e a avaliação da evolução clínica do paciente.
The conversion of azathioprine (AZA) to active nucleotides of 6-thioguanine (6-TGN) is essential for clinical efficacy in Crohn's disease. However, other metabolite, 6-methylmercaptopurine (6-MMP), which is formed through a competitive pathway for thiopurine methyltransferase (TPMT), is related to hepatotoxicity of this drug. Due to the wide interindividual variability of TPMT and a narrow therapeutic range it is important to accomplish the therapeutic monitoring of active metabolite 6-TGN and 6-MMP, which is an unusual procedure in Brazil. In this study, a HPLC-UV method for simultaneous quantification of these metabolites was developed, validated and applied in 37 Crohn's disease patients. The chromatographic process was performed on C18 column (250 x 4.6 mm, 5 μm i.d.), mobile phase consisted of potassium phosphate buffer (0.02 mol/L, pH = 3), acetonitrile and methanol, flow rate at 1.0 ml/min and UV detection at 291 ηm and 342 ηm. Retention times were 6.2 min (6-TGN); 23.1 min (6-MMP) and 24.7 min (caffeine: internal standard). The detector response was linear at 0.89-29.91 μmol/L (r=0.999) for 6-TGN and 0.90-30.08 μmol/L (r=0.999) for 6-MMP. Limits of detection were 0.29 μmol/L and 0.30 μmol/L, while the quantification limits were 0.89 μmol/L and 0.90 μmol/L, for 6-TGN and 6-MMP respectively. Precision, accuracy and recovery, were according FDA and ANVISA guidelines. The concentrations of 6-TGN and 6-MMP were determined in patients’ blood and the results found ranged from 4.51 to 1515 ρmol/8 x 10⁸ erythrocytes for 6-TGN and from 169.98 to 53.951 ρmol/8 x 10⁸ erythrocytes for 6-MMP. It was observed a reduction of levels of 6-MMP in patients using AZA + allopurinol therapy (2030.7 ρmol/8 x 10⁸ erythrocytes) when compared with patients undergoing monotherapy (9098.43 ρmol/8 x 10⁸ erythrocytes). Another finding was the correlation between the decrease in GOT transaminase in the group of patients who had the active disease with the increase in the 6-TGN levels, similar to previous reports in the literature. These results indicate that the method developed was reliable, accurate and reproducible, and can be used as an important tool in the routine monitoring of patients with Crohn's disease, allowing the individualization of the dose, the monitoring of the adverse effects related to the pharmacological therapy, monitoring the adherence to the treatment and the evaluation of the clinical evolution of these patients.