Academic literature on the topic 'Antigènes CD34 – Dissertations universitaires comme sujet'

CCR5 est un récepteur de chimiokine appartenant à la famille des récepteurs couplés aux protéines G (RCPG), jouant un rôle important dans l'entrée du VIH, en association avec la glycoprotéine CD4. Nous avons pu démontrer que la grande majorité de CCR5 (90%) était maintenue à l'état fonctionnel dans les compartiments intracellulaires des cellules immunitaires humaines et des fibroblastes transfectés. CCR5 est particulièrement localisé dans le réticulum endoplasmique (RE) et le Golgi. Les mécanismes moléculaires qui régulent l'export de CCR5 en provenance des compartiments intracellulaires s'avèrent différents dans le RE et le Golgi. La progression de CCR5 hors du RE est lente, et favorisée par son association avec CD4, qui fonctionne comme une protéine d'escorte et régule l'adressage de CCR5 vers la membrane plasmique. D'un point de vue mécanistique, CD4 induirait un changement conformationnel de CCR5, permettant de lever sa rétention dans le RE par PRAF2, une protéine résidente de ce compartiment. Dans le Golgi, la libération de CCR5 est beaucoup plus rapide (5-10min) et contrôlée par des signaux extracellulaires initiés par l'adhésion cellulaire. La rétention dans les compartiments intracellulaires de CCR5 et, plus généralement, des RCPG, pourrait constituer un système d'adaptation permettant de maintenir une réponse physiologique prolongée, dans des contextes cellulaires qui requièrent une réactivité de réponse soutenue, comme au cours du chimiotactisme des leucocytes, via le remplacement progressif des récepteurs de surface désensibilisés et internalisés
CCR5 a chemokine receptor belonging to the G protein-coupled receptor (GPCR) family, plays a major role in HIV entry, by forming the viral receptor in association with the glycoprotein CD4. We report that the vast majority of fully functional CCR5 (=90%) is maintained within the intracellular compartments of human immune cells and of transfected fibroblasts. Intracellular CCR5 is mostly localized in the endoplasmic reticulum (ER) and the Golgi apparatus. The molecular mechanisms which control the export of CCR5 from the intracellular compartments are different in the ER and the Golgi. In the ER, the progression of CCR5 is slow and depends on its association with CD4 which functions as an escort protein and controls the CCR5 exit. Association with CD4 would induce a conformational change of CCR5, which would release the receptor from its retention in the ER by a resident protein, PRAF2. In the Golgi, the release of CCR5 is faster (5-10min) and is controlled by extracellular signals promoted by cell adhesion. The intracellular retention of CCR5 and, more generally, of GPCRs could represent an adaptive mechanism to maintain a prolonged physiological response. In particular contexts, which require sustained receptor response such as leukocyte chemotaxis, intracellular receptors would allow the permanent replacement of cell surface desensitized and internalized receptors

Récemment, des cellules précurseurs neuraux multipotentes (CPN) injectées par voie systémique se sont avérées capables d'intégrer le système nerveux central (SNC) et d'induire une récupération fonctionnelle dans un modèle rongeur de sclérose en plaques (SEP). Afin d'atteindre le SNC, les CPN doivent franchir la barrière hémato-encéphalique. L'objectif général de ce travail était d'identifier les mécanismes moléculaires impliqués dans la migration trans-endothéliale (MTE) des CPN à travers l'endothélium cérébral. Parmi l'ensemble des molécules d'adhérence testées, nous avons identifié la molécule CD44 comme majoritairement impliquer dans les différentes étapes de la MTE. Par ailleurs, nous avons démontré que les CPN migraient en réponse à ILS et CXCL13, deux chimiokines présentes au sein des lésions de SEP. L'ensemble de ces résultats contribuent à la meilleure connaissance des mécanismes moléculaires de la MTE des CPN à travers l'endothélium cérébral
Recently, systematically-injected multipotent neural precursor cells (NPC) were found to be able to cross the blood-brain barrier (BBB), access to the central nervous system (CNS) and induce functionnal recovery in a murine model of multiple sclerosis (MS). In order to access to the CNS, NPC have to cross the BBB. The main objective of this study was to identify the molecular mechanisms of trans-endothelial migration (TEM) of NPC across brain endothelium. Among the tested adhesion molecules, we identified the molecule CD44 as having a major role in TEM. We also showed that NPC were able to realize TEM in response to IL8 and CXCL13, two chemokines present in MS lesions. These results contribute to the better knowledge of molecular mechanisms of TEM of NPC across the brain endothelium

Les cytopénies et pancytopénies régulièrement observées chez les individus infectés par les virus de l'immunodéficience humaine ou simienne suggèrent une atteinte centrale de l'hématopoïèse qui pourrait prendre part au déficit immunologique qui caractérise ces pathologies. Dans le modèle de l'infection expérimentale du macaque par le SIVmac251 nous montrons que l'atteinte clonogénique des progéniteurs CD34+, qui survient dès la primo-infection, est corrélée à une diminution des ARNm STAT5A et STATB. Ce défaut clonogénique des CSHs est complètement levé par une expression forcée de STAT5B. Nous montrons que la protéine virale Nef (HIV ou SIV) reproduit ex vivo l'atteinte clonogénique des cellules CD34+, que sa présence est nécessaire à l'altération de la clonogénicité des progéniteurs hématopoïétique in vivo et que cette action de la protéine Nef est dépendante du récepteur d'activation et de prolifération des peroxysomes gamma (PPAR-y). Ce travail apporte un nouvel éclairage sur le rôle primordial de la protéine Nef dans la pathologie des infections par le VIH ou le SIV et révèle un nouveau mécanisme de régulation de l'hématopoïèse précoce impliquant la voie de signalisation PPAR-y/STATS. Il ouvre des perspectives majeures sur l'utilisation thérapeutique de ligands de PPAR-y (antagonistes et agonistes) dans le cadre d'infections par le VIH ou le SIV mais également dans le domaine des hémopathies impliquant une dérégulation de STAT5. En ce sens, nous avons évalué le potentiel thérapeutique de l'activation de la voie de signalisation PPAR-y/STAT5 sur les CSLs associées à la maladie résiduelle de la LMC
Infection by HIV and SIV immunodeficiency virus induce multiple hematopoietic defects in Primates that reflect central hematopoietic disorders, which contribute to immunodeficiency in infected individuals. Here we show that CD34+ progenitor cells lost their clonogenic potential upon SIV infection, in parallel with down-regulation of STAT5A and STAT5B expression. This defect was entirely rescued by forced expression of STAT5B. We demonstrate that HIV/SIV Nef recapitulates SIV action on CD34+ progenitors ex vivo and is required for SIV action on hematopoietic progenitors in vivo. We further demonstrate that Nef activity strictly depends on thé presence of the peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR-y). Our findings extend the crucial role of Nef in HIV/SIV pathogenicity. They further reveal the pivotal role of PPAR-y/STAT5 pathway in regulating early hematopoiesis. They provide an avenue for exploration of the therapeutic benefits of PPAR-y antagonists in AIDS patients, and also of PPAR-y agonists in hematopoietic disorders. In this context, we particulary focused on therapeutic potential of PPAR-y/STAT5 pathway in Bcr/Abl leukemic stem cells

Les thérapeutiques ophtalmologiques topiques peuvent interférer avec le système de défense de la surface oculaire et induire des réactions indésirables toxiques et inflammatoires. Notre travail s'est focalisé sur ces relations entre défenses naturelles et conservateurs des collyres, principaux responsables d'effets adverses de la surface oculaire. Notre but a été de montrer l'implication de cytokines proinflammatoires et de leurs récepteurs (TNF, TNFR, TLRs) en utilisant des modèles animaux d'inflammation et de toxicité oculaires induites par le LPS, le TNF et le chlorure de benzalkonium (BAC) et d'envisager d'éventuelles thérapeutiques antiinflammatoires. Pour cela, nous avons appliqué pour la première fois et ainsi mis au point l'utilisation chez l'animal de nouveaux outils d'étude précis et objectifs comme la microscopie confocale in vivo et les empreintes conjonctivales. Grâce à ces outils, nous avons également démontré l'intérêt de développer de nouvelles formulations moins toxiques pour la surface oculaire telles que des émulsions cationiques ou des prostaglandines antiglaucomateuses sans conservateur comme le tafluprost
The therapeutic ophthalmologic eye drops can interfere with this defense system by inducing undesirably toxic and inflammatory reactions. In the long term, this real iatrogenic problem deteriorates the epithelia of the ocular surface. Our works were focused on these relations between natural defenses and toxic preservative contained in the eye drops. We established several animal models of inflammation/toxicity induced by LPS or TNF and the most common preservative, benzalkonium chloride (BAG) with aims of identifying the role of cytokines and their receptors (TNF, TNFR, TLRs). We also developed new in vivo confocal microscopy technique and ex vivo impression cytology thus refining the exploration of the ocular surface in animal models and determining the interests of new formulation (such as cationic emulsion) or the new molecule without BAG (such as tafiuprost) in an effort to improve safety and comfort for glaucoma patients

Les multiples propriétés de la protéine Nef du VIH-1 sont responsables de sa capacité à accélérer la progression vers l'immunodéficience in vivo. Dans ce travail de thèse, nous avons choisi d'explorer les mécanismes qui régissent deux des fonctions les plus conservées dans les isolats primaires de nef: (i) la diminution de l'expression de surface de CD4 dans les cellules cibles du VIH et (ii) l'augmentation du pouvoir infectieux des particules virales néoformées. C'est en interférant avec les éléments de la machinerie de l'endocytose que Nef provoque la diminution de l'expression de surface de CD4, à la fois dans les lignées lymphoïdes et myéloïdes. Cependant, le trafic intracellulaire de CD4 est régit par des règles différentes dans ces cellules: dans les cellules myéloïdes, CD4 est rapidement internalisé, alors que dans les cellules lymphoïdes, CD4 est stabilisé à la surface, notamment grâce à son interaction avec la tyrosine kinase p56lck. Dans cette étude, nous montrons que Nef augmente le taux d'internalisation de CD4 uniquement dans les cellules qui expriment p56lck. Nef utilise donc des mécanismes distincts pour réduire l'expression de surface de CD4 dans les cellules lymphoïdes et myéloïdes. A ce jour il n'y a pas de consensus quant aux contributions respectives des fonctions remplies par Nef pendant la biogénèse virale ou lorsque le virus atteint les cellules cibles, à l'augmentation du pouvoir infectieux. Des protéines de fusion de Nef ont été construites, nous permettant de manipuler les quantités de Nef incorporées dans les particules virales. Cette étude nous a permis d'établir que l'incorporation de Nef dans les particules virales n'est pas suffisante pour induire une augmentation du pouvoir infectieux des particules virales ; le corolaire en est que Nef exerce probablement des fonctions pendant la biogénèse virale, qui sont déterminantes pour les propriétés infectieuses des particules virales
HIV-1 Nef accelerates progression towards immunodeficiency in vivo. During my thesis we explored two of the most conserved functions of Nef: (i) CD4 downregulation in HIV-1 target cells and (ii) viral infectivity enhancement. Interference of Nef with the endocytic machinery causes CD4 cell surface downregulation. However, CD4 trafficking is governed by different rules in the target cells of the infection: in myeloid cells CD4 is rapidly internalized from the cell surface whilst in lymphoid cells, CD4 is stabilized at the cell surface through interaction with the tyrosine kinase p56lck. In this study, we show that Nef increases CD4 internalization rate only in cells that express p56lck. Therefore Nef uses different mechanisms to downregulate CD4 from the cell surface of myeloid and lymphoid cells. To date, the relative contribution of the functions of Nef during viral biogenesis and upon arrival in the target cells to the Nef dependent increase of viral infectivity, have not been deciphered yet. We designed fusion proteins that allowed the manipulation of the amount of Nef in producer cells and incorporated into viral particles. This study allowed us to determine that the incorporation of Nef into viral particles is not sufficient to cause an increase of viral infectivity. Nef must therefore exert functions, during viral biogenesis, that are crucial for the infectivity of nascent viral particles

Une grande majorité de peptides présentés par les molécules de CMH classe I est produit par la protéasome, qui dégrade les protéines dans le cytosol. Même si certaines études montrent que les protéines exprimées dans le réticulum endoplasmique (RE) peuvent aussi dégradées via cette voie avec un mécanisme de rétro-transport au cytosol, ce que concerne à l'apprêtage d' antigène de ce type de protéine reste peu connu. Deux différents types de pro-insuline, l'autoantigène qui joue un rôle important dans la réponse auto-immunitaire cellulaire de la diabète type 1, sont étudiés dans ce projet : forme cytosolique et forme de RE (pre-proinsulin). Nous avons trouvé que le peptide signale, qui est présente dans la forme de RE mais pas dans la forme cytosolique, n'influence pas seulement comment la pro-insuline est dégradée et aussi la régulation de la synthèse protéique. L'inhibition de la protéasome réduit la dégradation de la pro-insuline en forme cytosolique ainsi que la présentation de l'épitope insuline B15-23 aux cellules T CD8+ spécifiques. Cependant, le prétraitement avec l'inhibiteur de protéasome diminue fortement la production de la pre-proinsuline via l'induction du stress de réticulum endoplasmique. Ce phénomène est observé dans les cellules infectées par le virus vaccinia recombinant et aussi dans celles transfectées avec un système d'expression réglable avec tétracycline. En plus, en utilisant ces systèmes d'expression de la pre-proinsuline, nous avons trouvé que RE-targeting modifiait l'apprêtage protéolytique de la protéine pour la présentation antigénique par le CMH de classe I. Ces résultats montrent qu'il y a deux chemins de dégradation de la proinsuline de forme RE, et la contribution relative de ces deux mécanismes dépende de la stabilité de la protéine. La dégradation de pre-proinsuline non-modifiée est dépende partiellement de la protéasome, tandis que le mutant, qui manque quelques bondes disulfures, augmente le rôle du protéasome dans l'apprêtage de la présentation antigénique. Néanmoins, l'introduction d'un site de N-glycosylation donne un effet opposant. En conclusion, RE-targeting avec les caractères structuraux influencent profondément la production d'antigène ainsi la voie protéolytique dans la dégradation antigénique et la présentation antigénique
Most peptide ligands presented by MHC class I molecules are thought to be produced by degradation of cytosolic and nuclear, but also endoplasmic reticulum (ER)-resident proteins by the proteasome. However, antigen processing of ER proteins remains little characterized. Studying processing and presentation of proinsulin, which plays a pivotal role in autoimmune diabetes, we found that ER-targeting has profound effects not only on how proinsulin is degraded, but also on regulation of its synthesis. While proteasome inhibition inhibited degradation and presentation of cytosolic proinsulin, as expected, it strongly reduced production of ER-targeted proinsulin, presumably through induction of ER stress. ER-targeting and protein modifications altering stability also had profound effects on MHC class I presentation and proteolytic processing of proinsulin. Thus, presentation of stable ER-targeted forms was inefficient but enhanced by proteasome inhibition, while that of unstable forms was more efficient and proteasome-dependent. Additional experiments suggested that a pathway involving autophagosomes and the proteasome acts in proinsulin processing. Thus, both structural features and subcellular targeting of antigens can have dramatic effects on MHC class I antigen presentation

La réaction inflammatoire est décrite comme une réponse induits par les pathogènes ou les tissus endommagés impliquant des cellules innées. Mon étude est basée sur deux modèles: d'une part des cellules HY répondant à l'antigène mâle en l'absence de signaux de danger, d'autre part des cellules OT-1 répondant à l'infection par L/ster/a-OVA. Dans les deux cas, nous avons identifié une forte expression de cytokines et chimiokines pro-inflammatoires immédiatement après l'activation des cellules T CD8. Une injection locale de ces cellules T au niveau de l'oreille induit l'hypertrophie du ganglion drainant et le recrutement préférentiel de monocytes inflammatoires, PMN, cellules dendritiques et cellules NK. Ces résultats démontrent que la réponse T CD8 induit deux phases effectrices distinctes, inflammatoire puis cytotoxique. Nous avons ainsi mis en évidence un nouvel aspect de l'inflammation qui pourra conduire aux nouvelles thérapies anti-inflammatoires ou un rejet de transplantation
The inflammatory reaction is believed to be induced by pathogens or tissue damage and mediated by innate cells. In this PhD work I used two immune response models, the response of anti-HY cells to male cells (no danger signals) or the response of OT1 cells to infection with L/ster/a-OVA. In both cases we found that immediately after activation CDS T cells expressed high levels of pro-inflammatory cytokines and chemokines. A local injection of these pro-inflammatory effectors in the ear induced the hypertrophy of the draining lymph node and the preferential recruitment of inflammatory monocytes, PMNs, cDCs and NK cells. These results demonstrated that CDS responses involved two distinct effector phases (inflammatory to cytotoxic) and that antigen recognition by CDS T cells is sufficient to initiate inflammatory reactions, even when danger signals are absent. We expect our results to give new important perspectives on anti-inflammatory therapy during infection and transplant rejection

Les E. Coli d'adhésion diffuse (DAEC) sont impliqués dans les infections urinaires et dans les diarrhées. Le seul facteur de virulence identifié est une famille d'adhésines, Afa/Dr, liant le Decay Accelerating Factor (DAF) et le Carcinoembryonic Antigen (CEA) qui appartient à la famille des CEACAM. Notre objectif a été d'étudier les interactions entre les CEACAMs et les DAEC Afa/Dr. Nous avons montré que le le CEACAM1 et le CEACAM6 sont des récepteurs pour les DAEC Afa/Dr et sont recrutés autour des bactéries comme le GM1 et la cavéoline, marqueurs de rafts lipidiques. L'adhésion aux DAF, CEA et CEACAM6 induit la formation de prolongements cellulaires autour des bactéries et nécessite un remaniement du réseau d'actine et des rafts lipidiques, l'intervention des Rho GTPases et la phophorylation des protéines ERM. Nous avons aussi démontré que l'internalisation des bactéries s'effectuait par un mécanisme de type «zipper», indépendant de l'actine et faisant intervenir le CEA et le CEACAM6
Diffusely adhering E. Coli (DAEC) are involved in urinary tarct infections and diarrhoeas. The only virulence factor identified is a family of adhesines, Afa/Dr, binding Decay Accelerating Factor (DAF) and Carcicoembryonic Antigen (CEA) which belongs to the CEACAM family. Our objective was to study the interactions between CEACAMs and the Afa/Dr DAEC. We observed that CEACAM1 and CEACAM6 are receptors for the Afa/Dr DAEC and are recruited around adhering bacteria as well as the GM1 and the caveoline, two lipid rafts markers. Adhesion to the DAF, CEA and CEACAM6 induces the formation of cellular prolongations around the bacteria and requires a reorganization of the actin network and the lipids rafts, as well as Rho GTPases and ERM proteins phophorylation. We also showed that the internalization of the bacteria was carried out by azipper like mechanism, indenpendently of actin. Moreover, CEA and the CEACAM6 seem to support entered of the bacteria into the cells

La présentation de peptides antigéniques par les molécules du CMH-I est la base de la surveillance de l'organisme, de la détection et de l'élimination de cellules infectées ou transformées, par les cellules T CD8+. Les composants de la machinerie complexe d'apprêtement des Ags et de leur présentation par les molécules du CMH-I, ont été identifiés par plusieurs groupes de recherche. Cependant, même si la séquence des événements de l'apprêtement des Ags pour la présentation par les molécules du CMH-I est actuellement bien définie, il subsiste des parties non résolues. Le sujet de ma thèse vise à élucider certains aspects peu compris de la voie d'apprêtement et de présentation des Ags par des molécules du CMH-I. La description complète des étapes d'apprêtement des Ags dans le cytoplasme ou dans d'autres compartiments cellulaires, du transport des peptides vers les molécules du CMH-I par le système complexe de chargement, de l'expression des complexe CMH I/peptide à la surface cellulaire et de l'induction d'une réponse par les cellules T CD8+, permettrait d'améliorer nos connaissances fondamentales de cette voie et de développer de nouvelles stratégies pour la lutte contre les maladies infectieuses, tumorales et auto-immunes. L'introduction de cette thèse traite trois aspects fondamentaux de la voie d'apprêtement et de présentation des Ags par les molécules du CMH-I: le rôle du protéasome, qui constitue l'un des éléments majeurs impliqués dans la génération des épitopes de classe I (sa structure, ses fonctions et son rôle dans l'apprêtement); la présentation croisée qui représente la voie de présentation des Ags exogènes par les molécules du CMH-I; l'enzyme de dégradation de l'insuline ou IDE (son rôle dans la dégradation de l'insuline). La partie expérimentale est illustrée par l'article publié ainsi que la discussion concernant l'article soumis et des résultats non publiés. Il y est exposé comment la calreticuline favorise la formation des molécules du CMH-I à basse température, capables de fixer un peptide ; les résultats que nous avons obtenus sur le rôle dans la dégradation cytoplasmique de l'insuline / proinsuline par l'enzyme de la dégradation de l'insuline ; et finalement, une stratégie de double queue TAP/Tag que nous avons développée dans le but de comprendre l'interaction entre les différents éléments de la voie de présentation.

Insulin-degrading enzyme (IDE) est une metallo-protéase avec une forte affinité pour l'insuline. Les souris déficients en IDE sur fond B6 montrent un niveau élevé d'insuline et une intolérance pour le glucose. Ces phénotypes sont associés au diabète de type 2. Dans un modèle murin du diabète de type 1, un phénotype exceptionnel a été mis en évidence dans des souris invalidées pour le gène IDE: une baisse de l'incidence du diabète auto-immun et de l'infiltrat dans les cellules bêta du pancréas. En analysant ces souris protégées, nous avons pu observer une réduction d'activation et du nombre de lymphocytes T auto-immuns. Des transferts de cellules effectrices dans des souris Rag KO ont montré que les cellules issues de souris IDE KO induisent un diabète retardé. En outre la réponse des cellules T CD8+ aux peptides immunodominants était réduite dans les souris IDE KO. Une différence dans la réponse cytokinique a été également observée. Des PBMCs activés des souris IDE KO sécrètent plus d'IL-4 anti-inflammatoire et moins de TNF-alpha proinflammatoire. Des résultats analogues ont été observés pour les lymphocytes infiltrants et les splénocytes. Le mécanisme expliquant ces résultats sont à confirmer. La déficience en IDE pourrait changer la présentation antigénique et la sélection négative des cellules T autoréactives dans le thymus. La protection contre le diabète pourrait alternativement s'expliquer par une réduction de la présentation antigénique de l'épitope PI 15-23 par des cellules bêta ou les cellules dendritiques expliquer. Il est possible que IDE joue un rôle dans le metabolism et la réponse au stress
Insulin-degrading enzyme (IDE) is a metalloprotease with high affinity for insulin. IDE knockout mice on thé C57BL/6 genetic background show increased sérum insulin levels and glucose intolérance, findings associated with type 2 diabètes. To investigate thé rôle of IDE in type I diabètes, IDE knockout was bred to thé NOD background. IDE déficient NOD mice were found to be protected from diabètes and also displayed reduced levels of insulitis. To explore thé mechanism of protection, we performed transfers of splenic effector T cells from IDE ko and wt mice to Rag2 ko NOD mice. Effector T cells from IDE wt mice transfered diabètes more rapidly then enriched effector cells from IDE knockout mice, suggesting a réduction in thé number and/or functional activity of diabetogenic T cells in IDE déficient mice. Moreover, thé CD8+ T cell responses to immunodominant bêta cell epitopes derived from proinsulin and IGRP were reduced in IDE ko mice. Additionally a différence in thé cytokine répertoire was observed: activated PBMC from IDE knockout mice secret more anti-inflammatory IL-4 and less pro-inflammatory TNF-a compared to IDE wildtype mice. Analogous results were obtained with islet-infiltrating lymphocytes and splenocytes. The mechanism underlying thèse findings remains to be clarified. IDE deficiency could change antigen présentation and négative sélection of autoreactive T cells by thymic epithelial cells. Alternatively, reduced présentation of thé immunodominant CD8+ T cell epitope proinsulin 615-23 by bêta cells or cross presenting LN dendritic cells is conceivable. It is also possible that IDE plays a rôle in thé metabolism and/or stress response of bêta cells