Academic literature on the topic 'Antigènes parasitaires'

La mise en évidence de Babesia divergens chez un bovin autochtone en Tunisie est récente. Une étude sérologique et parasitaire effectuée dans sept différentes localités à biotope favorable à Ixodes ricinus a permis de confirmer la présence de cette Babesia dans plusieurs troupeaux. Au total, 307 bovins de différents âges, répartis dans ces zones, ont été testés par immunofluorescence indirecte en utilisant comme antigène les globules rouges de la gerbille (Meriones unguiculatus) infectés par B. divergens. La prévalence globale de l’infection avec des sérums dilués à 1/80 a été de 44,6 p. 100. Cette prévalence a été variable en fonction de la localité, du troupeau et de la catégorie d’âge. L’examen des frottis confectionnés à partir de sang hépariné de ces bovins a révélé la présence de piroplasmes de petite taille chez 28,3 p. 100 des animaux. L’inoculation de 46 prélèvements aux gerbilles a permis d’isoler deux souches de B. divergens. Ces résultats montrent que B. divergens, considérée jusqu’à présent comme se cantonnant à l’Europe, est présente en Afrique du Nord sous forme de foyers et qu’une endémie stable s’est établie entre cet hémoparasite et les bovins de race locale (Bos taurus).

L’épithélium intestinal est la porte d’entrée de Trichinella lors de l’invasion de l’hôte. Parmi les cellules immunitaires du GALT (gut associated lymphoid tissue), les mastocytes jouent un rôle clé dans la phase innée d’expulsion de Trichinella. Cependant leur rôle dans l’initiation de la réponse spécifique reste mal connu. Dans ce cadre, différents antigènes du stade intestinal du cycle de T. Spiralis ont été produits. L’analyse in vitro de la stimulation par l’antigène 411 de mastocytes murins génère la libération du TNF-α et de l’histamine. De plus, ces cellules montrent une régulation positive d’ARNm pour des molécules de co-stimulation, des molécules du CMH I et II et des cytokines (IL-1α, IL-1β, CXCL-1, CCL-5). Ces résultats indiquent que les mastocytes stimulés pourraient communiquer avec les lymphocytes T. Afin de mieux comprendre le rôle des mastocytes et de 411 dans la protection, des études in vivo d’efficacité vaccinale après test d’épreuve ont été effectuées avec évaluation de la charge parasitaire musculaire finale. Les souris vaccinées avec l’antigène 411, présentent un taux de protection d’environ 25 % par rapport aux souris non vaccinées. Lorsque ce même vaccin contient l’adjuvant Montanide™ ISA 70 VG, ce taux augmente à 40 %. Le suivi sérologique démontre en outre, une bonne réponse anticorps IgG1 et IgG2a amplifiée en présence d’adjuvant. L’analyse des coupes de tissus intestinaux n’a pas révélé de mastocytose après vaccination, comme cela peut être observé lors d’une infection naturelle. Ces résultats montrent un rôle protecteur de 411 dans un vaccin anti-Trichinella avec induction d’une fonction immunostimulante modérée des mastocytes
The intestinal epithelium is the gateway of Trichinella during host infection. Among immune cells of the gut associated lymphoid tissue, mast cells play a key role in the expulsion of T. Spiralis. However, mast cells roles’ in the initiation of the specific immune response against T. Spiralis remains poorly understood. Here, different antigens of the intestinal stage of T. Spiralis were generated. Murine bone marrow mast cells (mBMMC) stimulated with antigen 411 induced the release of TNF- α and histamine. Moreover, stimulated mBMMC showed an upregulation of mRNA for several costimulatory molecules, MHC class I and II molecules and cytokines (IL-1α, IL-1β, CXCL-1, CCL-5). These results indicate that stimulated mast cells could directly communicate with T cells. In vivo studies based on vaccine trials with challenge, were also performed to explore the role played by mast cells and antigen 411 in protection. Mice vaccinated with antigen 411 exhibited a protection rate of 25 % compared with unvaccinated mice. When vaccine containing 411 and the adjuvant Montanide ™ ISA 70 VG were tested, the protection rate reached 40%. Serological analysis demonstrates a good IgG1 and IgG2a response amplified in adjuvanted group. Intestinal tissue sections did not show mastocytosis after vaccination, as observed in a natural infection. These results demonstrated that 411 antigen induced both a protective role in anti-Trichinella vaccine and a moderate immunostimulation of mast cells in vivo

Trois molécules du stade épimastigote de Trypanosoma cruzi se fixent à une colonne de glutathion. Ces holoprotéines de 45, 30, et 25 kDa sont exprimées par tous les stades parasitaires et sont immunogènes au cours des infections chagasiques naturelle et expérimentale. Spécifiques de Trypanosoma cruzi, leur expression est augmentée en présence de phénobarbital. Injectées en présence de Bordetella pertussis et d'alun, elles sont capables de protéger des souris contre une infection léthale de trypomastigotes sanguicoles, alors qu'administrées avec de l'adjuvant de Freund, elles n'induisent pas d'immunité protectrice. Seuls les sérums des animaux immunisés par les trois protéines fixant le glutathion, injectées en présence de Bordetella pertussis et d'alun, sont capables de lyser des parasites vivants. De plus, seuls ces sérums possèdent des taux significatifs d'immunoglobulines G2a, G2b et E spécifiques. Des mécanismes effecteurs pouvant être impliqués dans la protection observée sont proposés. Les protéines de 25 et 30 kDa ont ensuite clonées et séquencées. Elles sont codées par une famille de gènes très proches et traduites par deux ARNs de taille différente. Ces protéines ne possèdent pas d'homologie significative avec d'autres glutathion S-transférases déjà clonées, mais avec des facteurs d'élongation de type 1 béta, impliqués dans la régulation de la synthèse des protéines. Au vu de ces observations, nous discutons du rôle probable de ces deux antigènes dans la biologie du parasite, ainsi que de l'orientation à apporter à notre stratégie vaccinale

Afin de mieux connaitre les mecanismes immunitaires mis en jeu au cours de la fasciolose et afin de rechercher des antigenes <<<>candidats-vaccins<>>>, nous avons etudie, chez des moutons infestes experimentalement, la cinetique des reponses humorale et cellulaire dirigees contre des fractions purifiees des produits d'excretion/secretion de f. Hepatica (pesfh) ainsi que les sous-populations lymphocytaires peripheriques et locales mises en jeu au cours de l'infestation. Par differentes techniques, 9 fractions ont ete purifiees a partir des pesfh : 6 fractions de 50-70, 35-40, 27-30, 24, 20 et <17 kda (electrophorese preparative), 1 fraction glucidique (gel filtration), une fraction 18/8g de 25 et 27 kda (chromatographie d'affinite avec des anticorps monoclonaux) et une fraction gst de 26,8 et 27,2 kda. La reponse humorale anti-pesfh est precoce et dure tout au long de l'infestation. Elle est dirigee contre un grand nombre d'antigenes dont 14 sont reconnus par une majorite de moutons. Elle se caracterise par la predominance d'igg1 par rapport aux igg2 et par une production d'igm tout au long de l'infestation. La reponse cellulaire anti-pesfh est precoce et transitoire, entre jpi7 (7#e#m#e jour post-infestation) et jpi35. Une cinetique similaire de la reponse immunitaire est observee avec les fractions purifiees par electrophorese preparative et avec la fraction 18/8g. Une reponse humorale anti-fraction sucree a ete detectee precocement mais aucune reponse cellulaire dirigee n'a ete decelee. Enfin, aucune reponse immunitaire n'a ete observee contre les gst. Par phenotypage et par immunohistochimie, nous avons montre la predominance de la reponse humorale au cours de la fasciolose. La caracterisation des immunoglobulines de surface montre l'existence de nombreuses cellules igg+ et igm+ tout au long de l'infestation, l'augmentation du nombre de cellules iga+ en jpi10 et de cellules igg2+ en jpi20. Les variations de proportion des lymphocytes t se caracterisent par un recrutement local autour des lesions et dans les espaces portes hepatiques des lymphocytes peripheriques ovcd4+. Aucune stimulation preferentielle des lymphocytes par les pesfh n'a ete decelee. En revanche, les lymphocytes stimules par les pesfh produisent precocement, entre jpi7 et jpi4, de l'ifng et plus tardivement, en jpi35-42 de l'ii10.

L'hydatidose est une maladie parasitaire due au cestode Echinococcus granulosus. Le clonage moléculaire des antigènes echinococciques a été entrepris afin de participer au développement d'un nouveau test sérologique. A partir d'arme extrait de protoscolex d'e. Granulosus, une banque d'adnc a été réalisée en vecteur d'expression lambda gt11, est criblée avec un mélange de 5 sérums de patients hydatiques. 13 clones ont été sélectionnés, dont 10 se sont révélés identiques. La séquence nucléotidique a été déterminée, de 456bp, codant pour 152 aminoacides (17,3 kda). Aucune homologie n'a été trouvée par consultation des banques de données actuelles. La protéine de fusion clonée (pf6) est reconnue par 11 des 12 sérums humains hydatiques, ainsi que par des sérums de patients infestés par d'autres parasites proches. Pf6 est aussi reconnue par l'anticorps monoclonal eg 02 154/12 spécifique de l'antigène 5 d'e. Granulosus. Les anticorps selectionnés sur le clone eg6 reconnaissent parmi les antigènes du liquide hydatique une molécule de 37 kda, de même masse moléculaire qu'une des sous-unités de l'antigène 5. Ces résultats mettent en évidence l'existence d'une corrélation entre l'antigène 5 et le polypeptide cloné

Les bases moléculaires de la reconnaissance immunitaire permettent la prévision des épitopes b et t d'une protéine à la seule vue de sa structure primaire. Afin de valider et d'améliorer ces méthodes, nous les avons utilisées dans plusieurs modèles parasitaires et viraux pour sélectionner des peptides, les synthetiser et, en collaboration avec plusieurs équipes d'immunologistes, en étudier les propriétés. Du point de vue de l'antigénicité, il est possible de synthétiser une protéine complète et d'observer sa reconnaissance par des sérums de sujets infectés. Par ailleurs, les fragments peptidiques sont de bons outils pour cartographier les épitopes d'une protéine et peuvent dans certains cas constituer des antigènes plus performants que la protéine elle-même. Il est également possible d'induire une organisation spatiale chez un peptide afin d'en ameliorer l'antigénicité. Du point de vue de l'immunogénicité, nous avons mis en évidence plusieurs peptides actifs, parmi lesquels certains possedaient une structure modifiée par rapport à la séquence naturelle leur conférant des propriétés nouvelles, telle la génération d'une réponse cellulaire cytotoxique spécifique de l'antigène naturel

L'isolement biochimique et immunochimique du composant 5 de Trypanosoma cruzi, réalisé à partir de différentes sources antigéniques (extrait antigénique total, fraction enrichie en composant 5 et surnageant de milieu de culture), a permis de préciser ses caractéristiques biochimiques. Tous les résultats concordent pour dire que le composant 5 correspond à une famille de glycoprotéines constituée principalement d'une molécule majeure de 72 kD de poids moléculaire apparent, riche en glucides (GP72) et d'une autre molécule de 90 kD. Ces deux molécules ne présentent pas dans nos conditions expérimentales de relations immunologiques détectables. Il est intéressant de noter que l'approche biochimique de la purification du composant 5 permet l'obtention, avec un très bon rendement, d'une fraction enrichie en ce composant. Celle-ci conduit à la purification d'un antigène 24 kD, riche en protéines, qui conservent les propriétés antigéniques et immunogéniques du composant 5. Cette molécule semble correspondre à un produit de clivage de la GP72. En raison de la nécessité, dans la maladie de Chagas, d'un test diagnostique sensible et spécifique, une partie plus appliquée nous a permis de mettre au point une trousse diagnostique utilisant la fraction enrichie en antigène 24 kD et un anticorps monoclmonal correspondant dans un test de compétition ELISA.

L'un des objectifs prioritaires dans le domaine de la vaccinologie reside dans le developpement de nouvelles strategies exploitant le systeme immunitaire muqueux. Dans ce contexte, nous avons evalue le potentiel de bordetella pertussis, agent etiologique de la coqueluche, comme vecteur vivant vaccinal administrable par voie nasale. Pour cela, nous avons utilise l'adhesine majeure de cette bacterie, l'hemagglutinine filamenteuse ou fha. Nous nous sommes interesses au mecanisme de secretion de cette proteine afin de determiner les regions dans lesquelles une proteine etrangere pouvait etre inseree sans alterer la biogenese ni modifier les proprietes intrinseques de la fha. L'antigene heterologue choisi est un candidat vaccinal tres prometteur, la glutathion s-transferase de 28 kda exprimee par le parasite schistosoma mansoni (sm28gst). L'administration nasale d'une souche recombinante de b. Pertussis exprimant une proteine hybride fha-sm28gst est capable de stimuler la production d'iga secretoires au niveau des muqueuses du tractus respiratoire et d'induire une memoire immune specifique de la proteine parasitaire. L'attenuation de cette souche recombinante nous a permis de reduire la pathogenicite de ce vecteur tout en augmentant la reponse anticorps contre la fha et la sm28gst. Notre protocole d'immunisation se revele efficace dans les conditions defavorables que sont une primovaccination contre la coqueluche ou une primo-infection par b. Pertussis. L'administration nasale d'une souche recombinante attenuee de b. Pertussis est donc capable de proteger les souris contre une infection par b. Pertussis et contre l'infection heterologue par s. Mansoni. Cette protection peut egalement etre obtenue chez des sujets deja infectes par le parasite. L'ensemble de ce travail montre l'efficacite de b. Pertussis comme vecteur vivant attenue exprimant une proteine hybride fha-antigene heterologue. Son administration par voie nasale induit la production d'anticorps au niveau des muqueuses du tractus respiratoire et au niveau serique, et protege les souris contre une infection homologue et heterologue.