Dissertations / Theses: 'Antiviraux – pharmacologie – Dissertations universitaires'

1

Ermishov, Mikhail. "Etude des complexes de médicaments antiviraux et antitumoraux par spectroscopies Raman et SERS." Reims, 2003. http://www.theses.fr/2003REIMP203.

Full text

Abstract:

L'@étude des mécanismes d'interaction des molécules montrant une activité antivirale et/ou antitumorale représente une étape essentielle dans l'élaboration de nouvelles générations de médicaments. Dans ce travail, les spectroscopies Raman et Surface-Enhanced Raman Scattering (SERS) ainsi que d'autres méthodes spectroscopiques ont été employées pour l'investigation des composés sialylés et de leurs assemblages supramoléculaires mais aussi pour l'étude de complexes de drogues antitumorales telles que bis-nétropsines et topotécan, des inhibiteurs de l'ADN topoisomérase I humaine (topo I), avec l'ADN. Les résultats obtenus élucident les mécanismes moléculaires responsables de l'activité antivirale et/ou antitumorale des composés étudiés et peuvent servir de base au développement de nouvelles molécules possédant une activité plus élevée @The study of mechanisms of interactions of the molecules showing antiviral and/or antitumoral activity represents an essential stage in design of new generations of these agents. In this work, Raman and Raman Surface-Enhanced Scattering (SERS) spectroscopy and other spectroscopic methods were employed for investigation of sialic acid compounds and their supramolecular assemblies as well as for study of complexes of antitumoral drugs bis-netropsins and topotecan, the inhibitors of human DNA topoisomérase I (topo I), with DNA. The results obtained elucidate the molecular mechanisms responsible for the antiviral and/or antitumoral activity of the compounds studied and can be used as a basis for the development of new molecules possessing higher activity

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

2

Lagneau, Franck. "Intérêts des modèles physiologiques en pharmacologie anesthésique." Paris 5, 2005. http://www.theses.fr/2005PA05P623.

Full text

Abstract:

L'anesthésie est une situation clinique instable d'un point de vue pharmacologique, l'équilibre de distribution des médicaments n'étant pas atteint et les paramètres physiologiques régissant leur distribution initiale variant à tout instant. Les modèles PK-PD classiques, bien qu'ayant considérablement contribué à l'amélioration des connaissances pharmacologiques en anesthésie, restent ainsi limités en terme de compréhension et de prédiction de certains phénomènes. C'est le cas par exemple des conséquences combinées de la circulation extracorporelle et de l'hypothermie sur les propriétés pharmacocinétiques et pharmacodynamiques du propofol (article n°1). De ce point de vue, les modèles physiologiques semblent plus adaptés en raison de leurs modalités même de construction. Ils permettent entre autre de prédire, en fonction du terrain des patients, les concentrations tissulaires efficaces de céfazoline générées par un protocole d'antibioprophylaxie donné lors d'une hépatectomie (article n°2). Ils permettent également d'étudier les mécanismes physiopathologiques à l'origine d'interactions médicamenteuses complexes telles que celles décrites entre le propofol et le mivacurium (article n°3). Les informations fournies par ces modèles devraient ainsi permettre d'optimiser l'administration des agents anesthésiques lors de certaines chirurgies majeures. Elles devraient également contribuer à l'amélioration des connaissances pharmacologiques dans d'autres situations instables comme en réanimation General anesthesia is an original situation from a pharmacological point of view. Indeed, the distributive steady-state of drugs is quite never obtained and physiological parameters regulating their initial distribution vary in a great extent throughout the procedure. Therefore, although classical PK-PD models highly improved the anesthetic pharmacological knowledge, their ability to explain and predict specific observed phenomenoms is quite limited. For example, classical PK-PD model do not allow to explain the combined consequences of cardiopulmonary bypass and hypothermia on the propofol PK-PD properties during cardiac surgery (article n°1). From this point of view, physiologically-based pharmacokinetic models seem more suitable because of their underlying building concept. For example, they allow to predict cefazoline intratissular free concentrations throughout a major liver surgery while using a recommended protocol for antibioprophylaxis. They allow as well to investigate physiological mechanisms underlying specific interactions between drugs such as those reported between propofol and mivacurium (article n°3). Therefore, informations obtained from physiological models should improve anesthetic drugs administration during major surgeries. Moreover, they should improve drugs administration in other unstable contexts such as in the intensive care

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

3

Aissa, Jamal. "Pathophysiologie et pharmacologie cardio-pulmonaire et inflammatoire du PAF-ACETHER." Paris 5, 1993. http://www.theses.fr/1993PA05CD07.

Full text

Abstract:

Le paf-acéther (paf) est un médiateur pro inflammatoire dérivé du métabolisme des lipides constitutifs des membranes cellulaires. Nous avons étudié les effets physiothologiques du paf dans le domaine cardio-pulmonaire et lors d'une inflammation locale et articulaire. L'injection de ce médiateur dans la circulation pulmonaire chez la brebis induit une thrombocytopénie et une leucopénie immédiate puis une accumulation leucocytaire pulmonaire décelable à la 5ème minute. On observe une hypertension pulmonaire indépendante du thromboxane B2 (TxB2). Toutes les réponses induites par le paf sont inhibées par un antagoniste spécifique de ce médiateur, le WEB 2086. L'administration du complexe héparine-protamine chez le lapin s'accompagne d'une production transitoire de paf associée à une thrombocytopénie et à une leucopénie et d'une production retardée mais prolongée de TxB2. L'effet protecteur du BN 52021, autre antagoniste spécifique du paf, sur la trombocytopénie et le niveau plasmique du TxB2 indique d'une part que le paf exerce un rôle précoce au niveau cellulaire, d'autre part que la production de TxB2 est partiellement médiée par le paf. Notre travail a également montré l'implication du paf dans l'arthrite induite par la carragénie chez le lapin, notamment dans sa phase aiguë. Un antagoniste spécifique du paf, le BN 50730, exerce une action préventive et curative sur l'arthrite. Dans le modèle du granulome inflammatoire induit par la carragénine chez le rat, le paf est produit in situ au cours de la phase aiguë mais également au cours du passage à la phase chronique ce qui suggère son implication à cette étape de la réaction inflammatoire. L'action du paf doit se concevoir en fonction de ses nombreux effets cellulaires et de ses interrelations avec d'autres médiateurs de l'inflammation. Les effets bénéfiques des antagonistes des récepteurs au paf pourraient représenter une alternative thérapeutique et un intérêt clinique, notamment dans l'inflammation chronique.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

4

Kahan, André. "Physiologie et pharmacologie clinique de la vasomotricité dans les maladies du collagène." Paris 5, 1989. http://www.theses.fr/1989PA05CD01.

Full text

Abstract:

Nos études pharmacodynamiques ont montré l'efficacité de la nifédipine, de la nicardipine et du diltiazem dans le phénomène de Raynaud. La nifédipine est plus efficace que la prazonine sur le spasme vacsulaire digital, en utilisant des doses des deux médicaments ayant un effet similaire sur la réponse vasopressine à la phényléphrine. Nous avons mis en évidence une limitation majeure de la capacité de vasodilatation coronaire dans la sclérodermie systémique, suggérant l'existence d'une anomalie organique des petites artères coronaires. Nos études pharmacodynamiques, utilisant les tomoscintigraphies myocardiques au thallium-201, ont montré la réversibilité partielle des défauts de perfusion coronaire après vasodilatation coronaire maximale par le dipyridamole i. V. , suggérant l'existence d'un spasme de la microcirculation coronaire. L'administration par voie orale de nifédine, de nicardipine ou de captopril entraîne à court et à long terme une amélioration des défauts scintigraphiques de perfusion myocardique. La nicardipine administrée par voie orale entraîne à court terme une amélioration de la fonction ventriculaire gauche segmentaire évaluée par angiographie isotopique.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

5

Slimano, Florian. "Pharmacologie et pharmacocinétique du peptide YSNSG." Thesis, Reims, 2018. http://www.theses.fr/2018REIMP202/document.

Full text

Abstract:

Le peptide YSNSG est un cyclopeptide antagoniste de l’intégrine alpha v beta 3 actif par inhibition de la migration tumorale et de l'angiogénèse. Ces propriétés ont été démontrées in vitro sur diverses lignées cellulaires et in vivo chez des souris C57BL/6 avec xénogreffe de mélanome. Nos travaux se sont intéressés à la pharmacologie et à la pharmacocinétique du YSNSG. Dans un premier temps, nous avons étudié sa pharmacocinétique plasmatique et tissulaire (cerveau et sous-cutané) chez des rats Wistar en utilisant la microdialyse tissulaire. Elle a permis la détermination des principaux paramètres plasmatiques et tissulaire. Le taux de pénétration du peptide au niveau tissulaire est apparu élevé au niveau sous-cutané et faible au niveau cérébral. L’analyse compartimentale de ces données a permis de valider un modèle de type PB-PK pour simuler différents débits de perfusion permettant d’atteindre au niveau tissulaire des concentrations actives. Dans un second temps, nous avons étudiés la distribution intra—tumorale du peptide YSNSG sur le modèle de souris C57BL/6 xénogreffé. A l’aide de la microdialyse tissulaire, nous avons étudié la distribution du peptide YSNSG au sein de deux régions intra-tumorales distinctes, respectivement au centre et en périphérie de la tumeur pour discuter du rôle de l’hétérogénéité intra-tumorale dans la distribution intra-tissulaire des anticancéreux. Notre approche n’a pas permis de mettre en évidence de différence significative dans la distribution du peptide entre les deux régions mais a permis de montrer une faible distribution. Dans une troisième et dernière approche, nous présentons les résultats de la nanoencapsulation du peptide YSNSG à l’aide de particules de type PLGA +/- F-68 à l’aide de méthodes spectroscopiques (Raman), microscopiques (confocale) et in vivo (comparaison de l’efficacité du peptide encapsulé ou non sur l’inhibition de la croissance tumorale sur le modèle animal précédemment utilisé) Peptide YSNSG is a cyclopeptide addressed against integrins growth tumor inhibition and neoangiogenesis. These properties were highlighted in vitro on several cell lines and in vivo in syngeneic mice C57BL/6 with B16F1 melanoma xenograft. In order to describe the pharmacology and pharmacokinetic of peptide YSNSG we first studied plasma and tissue pharmacokinetic (cerebral and subcutaneous) in healthy Wistar rats using microdialysis. We finded main plasma and tissue parameters and a high penetration rate in subcutaneous and a low penetration rate of peptide YSNSG in cerebral tissue, respectively. Compartment analysis of our data allowed assessing a physiologically-based pharmacokinetic model in order to simulate different administration flow rate required to reach pharmacological active concentrations. Secondly we investigated the intra-tumoral distribution of peptide YSNSG the same syngeneic mice C57BL/6 model previously described, using microdialysis. Distribution was assessed in two distinct regions of melanoma tumor (central and peripheral) for the study of the impact of intra-tumoral heterogeneity on YSNSG peptide distribution. This approach did not found any significant difference in term of penetration rate and, moreover, found a low penetration rate in the melanoma tumor in discordance with previous subcutaneous distribution in healthy rat. In a third chapter we describe results of nanoencapsulation tests of YSNSG peptide using PLGA +/- F-68 with spectroscopic method (Raman), microscopic (confocal) and in vivo experimentation (growth tumor inhibition level in the same mice model with or without nanoencapsulation of YSNSG peptide)

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

6

Grancher, Nicolas. "Vectorisation de la ribavirine par les cyclodextrines : caractérisation physico-chimique des complexes et activité in vitro et in vivo sur le virus de la rougeole." Nancy 1, 2005. http://www.theses.fr/2005NAN11301.

Full text

Abstract:

En dépit de la vaccination, la mortalité due au measles virus (MV) reste importante puisqu'elle est estimée à environ 1 million de morts par an, surtout dans les pays en voie de développement. Les complications graves, telle l'encéphalite aiguë, justifient une thérapeutique efficace. Le MV est sensible à la ribavirine (RBV), mais l'utilisation de cette molécule est limitée par sa toxicité. Pour y remédier, nous avons étudié des vecteurs capables de transporter les molécules antivirales: les cyclodextrines (CDs). Ce sont des oligosaccharides cycliques possédant une cavité hydrophobe. Les CDs sont capables de former des complexes d'inclusion avec de nombreuses molécules, améliorant leur biodisponibilité, leurs propriétés biologiques et diminuant leur toxicité. Dans un premier temps, nous avons cherché à caractériser les interactions entre la RBV et les CDs natives (α, ß, et γ). L'étude de la complexation a été réalisée soit en solution, par chromatographie liquide haute performance (CLHP) et par résonance magnétique nucléaire, soit à l'état solide, par thermogravimétrie, calorimétrie différentielle et par spectrophotométrie dans l'infrarouge. Nous avons montré par CLHP que la RBY forme un complexe de stœchiométrie 1: 1 avec chacune des CDs natives. Les constantes de stabilité de ces complexes sont: 1493 M-1 pour l'α-CD, 2606 M-1 pour la β-CD et 1179 M-1 pour la γ-CD. Dans un deuxième temps, l'activité antivirale de ces complexes a été évaluée sur les souches Edmonston et CAM/RB du MY, cultivées sur cellules Vero. Nous avons montré in vitro que la CI50 de la RBV sur les deux souches de MV est améliorée après complexation avec la Iβ-CD et l'a-CD de 2 fois et 5 fois, respectivement. La γ-CD n'apporte pas d'amélioration. Enfin, dans le but d'évaluer le bénéfice de cette complexation in vivo, nous avons développé un modèle d'encéphalite à MV chez la souris CBA/ca, inoculée par voie intracrânienne avec une épreuve de 1000 UFP.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

7

Sahuc, Marie-Emmanuelle. "Identification de composés naturels inhibant le virus de l’hépatite C." Thesis, Lille 2, 2017. http://www.theses.fr/2017LIL2S056/document.

Full text

Abstract:

L’hépatite C est une maladie affectant aujourd’hui 170 millions d’individus dans le monde. Cette maladie est causée par le virus de l'hépatite C (VHC). Les nouveaux traitements récemment mis sur le marché, visant à soigner l’hépatite C, sont très onéreux et donc inaccessibles pour les pays du Sud. De plus, l’utilisation de ces nouvelles molécules engendre l’apparition de mutation de résistance virale responsable de l’échec des traitements pour 5 à 10% des patients. La découverte de nouveaux antiviraux est donc toujours indispensable. Les plantes utilisées en médecine traditionnelle depuis des siècles sont une source de composés bio-actifs très intéressante. L’utilisation de ces plantes ou de composés naturels en complément des molécules utilisées en thérapie classique, permettrait de réduire significativement le coût de ces traitements et de les rendre accessibles à davantage de patients.L’epigallocatéchine-3-gallate (EGCG) et la delphinidine sont des molécules naturelles issues respectivement du thé vert et des fruits rouges. Ces deux molécules inhibent l’étape d’entrée du VHC dans les cellules hépatocytaires. Nous avons montré que l'EGCG et la delphinidine inhibent cette étape virale dans les hépatocytes en déformant les particules et bloquant ainsi leur attachement à la surface cellulaire. Nous nous sommes ensuite intéressés au processus engendrant cette déformation qui est probablement lié à l’agrégation des glycoprotéines d’enveloppe virale.Nous avons procédé au criblage d’extraits bruts de plantes extrêmophiles tunisiennes et mis en évidence que l’extrait brut de rhizome de Juncus maritimus inhibait l’étape de réplication du VHC. Le J. maritimus est une plante fortement présente dans les sols arides en Tunisie mais également sur les côtes françaises. En collaboration avec le laboratoire de Pharmacognosie de Lille et grâce à un fractionnement bioguidé, le principe actif a pu être isolé. Il s’agit du déhydrojuncusol qui inhibe la réplication virale avec une concentration effective médiane de 1,31 µM. De plus, nous avons montré que le déhydrojuncusol pouvait inhiber la réplication de virus présentant des mutations de résistance aux traitements actuels ciblant la protéine virale NS5A. Nous avons cherché à identifier la cible virale du déhydrojuncusol et il semblerait que ce soit également la protéine NS5A.Les résultats obtenus dans cette thèse confortent l’hypothèse que des molécules naturelles pourraient être utilisées dans le traitement de l’hépatite C Hepatitis C is a liver disease affecting 170 million people worldwide. This disease is caused by hepatitis C virus (HCV). New treatments, recently marketed, against HCV are very expensive and not really accessible for most-infected patients especially in low-income countries. Moreover, the use of these new molecules generates the emergence of HCV resistant variants responsible for treatment failure for 5 to 10% of the patients. Therefore, the discovery of new antiviral molecules is always needed. Since centuries, plants are used in traditional medicine. They are a very attractive source of bio-active compounds. Plant extracts or natural molecules used in combination with actual therapy, could significantly reduce the cost of these new treatments and render them accessible to more patients.Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) and delphinidin are natural molecules derived respectively from green tea and red berries. These two molecules inhibit HCV entry into hepatocyte cells. We have shown that this inhibition is due to a deformation of viral particles by the molecules inducing a blockade of virus attachment to the cell surface. We further investigated the process leading to this deformation, and conclude that it might be related to aggregation of viral envelope glycoproteins.We screened extracts of extremophile plants from Tunisia and showed that the crude extract of Juncus maritimus rhizome inhibited HCV replication step. J. maritimus is a plant present in arid soils in Tunisia but also in French coasts. In collaboration with the Pharmacognosy laboratory of Lille and thanks to a bioguided fractionation, the active compound present in this plant could be isolated. It was identified as dehydrojuncusol, which inhibits viral replication with a half maximal effective concentration of 1.31 μM. We have also shown that dehydrojuncusol is able to inhibit replication of viruses with resistance mutations to current treatments targeting the viral protein NS5A. We have also tried to identify the viral target of dehydrojuncusol, and it seems that the target might also be the NS5A protein.The results obtained in this thesis confirm the hypothesis that natural molecules could be used in the treatment of hepatitis C

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

8

Mony, Laetitia. "Modulateurs allostériques des récepteurs NMDA contenant la sous-unité GluN2B : sites de liaison et mécanismes d'action." Paris 5, 2010. http://www.theses.fr/2010PA05S005.

Full text

Abstract:

Les récepteurs NMDA (rNMDA) forment une classe de récepteurs-canaux membranaires activés par le glutamate, le principal neurotransmetteur excitateur du cerveau des Vertébrés. Ils jouent un rôle prépondérant dans l'initiation de différentes formes de plasticité synaptique mais sont également impliqués dans diverses pathologies comme les ischémies cérébrales, les douleurs chroniques ou la schizophrénie. Les composés régulant l'activité des rNMDA ont donc un fort intérêt thérapeutique. De façon remarquable, les rNMDA possèdent de nombreux sites modulateurs extracellulaires pouvant lier des ions ou des petites molécules. Ces sites allostériques, qui diffèrent des sites de liaison pour les agonistes et de ceux situés dans le canal, sont d'autant plus intéressants qu'ils permettent de cibler sélectivement certains sous-types de rNMDA, ce que les autres sites ne permettent généralement pas. Ainsi, l'ifenprodil (modulateur négatif synthétique) et les polyamines (modulateurs positifs présents naturellement) sont des composés agissant sélectivement sur les rNMDA contenant la sous-unité GluN2B. Les sites de liaison et les mécanismes d'action de ces composés restaient cependant mal connus. En combinant modélisation moléculaire, électrophysiologie, mutagénèse dirigée et biochimie sur cystéines, nous avons tout d'abord établi un modèle tridimensionnel d'interactions de l'ifenprodil avec le domaine N-terminal (NTD) de la sous-unité GluN2B. Nous avons de plus identité l'interface de dimérisation entre les NTDs des sous-unités GluN1 et GluN2B comme le site de liaison des polyamines, et proposons que ces molécules potentialisent les rNMDA en maintenant proches les deux NTDs, empêchant ainsi leur fermeture. Ces travaux apportent de nouvelles informations sur les bases moléculaires qui régissent la régulation allostérique des rNMDA. Ils soulignent notamment le rôle central des NTDs dans le contrôle de l'activité des rNMDA et révèlent l'importance des interfaces entre sous-unités comme sites d'action de ligands allostériques NMDA receptors (NMDARs) are a major class of excitatory neurotransmitter receptors in the brain of Vertebrates. They form glutamate-gated ion channels highly permeable to calcium that mediate synaptic plasticity. NMDAR dysfunction is involved in multiple brain disorders, including stroke, chronic pain and shizophrenia Compounds that regulate NMDAR activity are thus of therapeutic interest. Remarkably, NMDARs are endowed with multiple extracellular regulatory sites that recognise ions or small molecule ligands. These allosteric sites, which are distinct from agonist-binding and channel-permeation sites, are of particular interest because they can selectively target certain NMDAR subtypes. Thus, ifenprodil (a synthetic allosteric modulator) and polyamines (naturally occuring positive allosteric modulators) selectively modulate GluN2B-containing NMDARs. However, the binding sites and mechanisms of action of these compounds were still ill-denied. By combining molecular modelling, electrophysiology, site-directed mutagenesis and chemical protein modifcations, we first built a tridimensional model of ifenprodil interacting with the N-terminal domain (NTD) of the GluN2B subunit. Moreover, we have identified the dimerisation interface between GluN1 and GluN2B NTDs as polyamine binding-site. We propose that these molecules potentiate NMDARs by maintaining both NTDs in close proximity, thus preventing their closure. This work reveals new information about the molecular mechanisms underlying allosteric regulation of NMDARs. They highlight the central role of NTDs in the one control of NMDAR activity and show the importance of interfaces between subunits as binding sites for allosteric ligands

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

9

Pepin-Covatta, Stéphanie. "Biodynamique des interactions entre des F(ab')2spécifiques et des toxines macromoléculaires." Paris 5, 1996. http://www.theses.fr/1996PA05CD06.

Full text

Abstract:

Les antivenins et les antitoxines issus de l'hyperimmunisation de chevaux constituent le principal traitement des envenimations et des toxi-infections. Bien que l'efficacité de la sérothérapie soit reconnue, l'administration de sérums induit un certain nombre de réactions allergiques. Pour accroître la pureté et la sécurité d'emploi des antivenins, une nouvelle technique de préparation fondée sur la chromatographie d'échange a été développée. Le procédé inclut en particulier une séparation des immunoglobulines équines antitoxines (IgG(t)) des autres immunoglobulines avant leur transformation en fragments F(ab')2. L'étude comparative des F(ab')2 équinsantitoxines (tétanique, venin de vipère Aspis ammodytes berus, venin de scorpion Buthus occitanus mardochei) issus de la nouvelle préparation à ceux jusqu'à présent disponibles a porté sur trois chapitres : l'immunoréactivité, la pharmacocinétique, l'activité neutralisante en terme d'analyse de la cinétique d'immunoneutralisation. Dans la première partie de ce travail, nous avons déterminé les propriétés d'immunoréactivité (constante d'affinité et pourcentage de sites actifs) des fragments F(ab')2 équins anti-toxines de Viperae Aspis ammodytes berus et du tétanos par la technique de résonnance plasmonique de surface (système BIAcore(R), Pharmacia). L'étude de l'immunoréactivité a permis de montrer que les constantes d'affinité des F(ab')2 équins se situent dans des zones compatibles avec la formation d'immunocomplexes stables de 10(8) à 10(9) M(-1) et que les étapes de préparation n'altèrent pas cette propriété. Le principal avantage des nouvelles préparations réside dans le dédoublement des pourcentages de sites anticorps actifs à la suite des étapes plus poussées de purification. Dans une deuxième partie, une méthode immunoradiométrique a été développée et validée afin de doser les F(ab')2 équins dans le plasma de lapin. L'analyse pharmacocinétique montre que la concentration en F(ab')2 équins suit une décroissance exponentielle avec une demi-vie de distribution de 2,66±0,18h et une demi-vie d'élimination de 49,69± 4,13h. Le volume de distribution (Vdss ou Vdβ) varie de 209 à 265 ml. Kg(-1) et correspond au volume d'eau extracellulaire chez le lapin (300 ml. Kg(-1)). La clairance varie de 3,3 à 3,56 ml. H(-1). Kg(-1). Après administration intramusculaire des nouvelles préparations, le Tmax est de 48 h et la biodisponibilité se situe entre 36 er 46 %. L'analyse pharmacocinétique a permis de décrire les propriétés pharmacocinétiques des F(ab')2 chez le lapin et de montrer un équivalence entre les nouvelles et anciennes préparations. La faible biodisponibilté de la voie intramusculaire en terme de vitesse et de quantité résorbées semble limiter l'intérêt de cette voie par rapport à la voir parentérale. Enfin nous avons étudié in vivo chez le lapin la pharmacocinétique de l'interaction F(ab')2-toxines afin de vérifier le pouvoir séquestrant des anticorps et de mieux percevoir la cinétique d'élimination des immunocomplexes. Les études de cinétique d'immunoneutralisation ont été étudiées avec les venins de vipère et de scorpion. Les résultats confirment la meilleure efficacité des nouvelles préparations sur la base des paramètres pharmacocinétiques calculés. L'augmentation des concentrations et des aires sous la courbe des diverses toxines traduisent bien la séquestration des toxines par les F(ab')2 équins et une éventuelle redistribution de ces toxines vers le compartiment central. L'association des trois études confirme donc une amélioration significative des performances des F(ab')2 équins anti-toxines dits de "nouvelles générations" par rapport à ceux déjà existants.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

10

Jobard-Rouppert, Fabienne. "Deux-(thiazol-5-yloxy)éthylamines et 3-(4-arylpipérazin-yl)-1-(thiazol-5-yloxy)propan-2-ols : synthèse et évaluation pharmacologique." Nantes, 1993. http://www.theses.fr/1993NANT07VS.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

11

Benkahla, Mehdi Ayech. "Infection à entérovirus in vitro et in vivo." Thesis, Lille 2, 2016. http://www.theses.fr/2016LIL2S053/document.

Full text

Abstract:

Le genre Enterovirus comporte de nombreux virus à ARN non enveloppés regroupés en espèces EV-A-J et Rhinovirus A-C. Les coxsackievirus B (CV-B) appartiennent à l’espèce EV-B. Le rôle des CV-B et notamment de CV-B4 dans la pathogenèse du diabète de type 1 (DT1) est fortement suspecté. Coxsackievirus-B4 E2 (CV-B4 E2) isolé à partir du pancréas d’un patient souffrant de DT1 est capable d’induire une hyperglycémie chez des souris. Les mécanismes de la pathogenèse entérovirale du diabète ne sont pas encore bien connus. Il a été montré que les monocytes humains sont infectés par CV-B4 in vitro grâce à des anticorps anti-VP4 formant des complexes avec le virus, et que les macrophages humains également sont infectés par CV-B4 in vitro. Les études réalisées in vitro sont riches d’informations mais des modèles d’infection in vivo sont nécessaires pour explorer d’avantage les mécanismes des infections à entérovirus. Malgré l’impact des entérovirus en pathologie les moyens de lutte contre ces virus sont limités.Nos principaux objectifs étaient i) d’étudier l’infection à CV-B4 E2 chez la souris et de déterminer si les monocytes/macrophages sont des cibles du virus in vivo ii) de mettre en œuvre un modèle de diabète induit par CV-B4 E2 chez la souris iii) d’étudier l’activité anti-CV-B4 de diverses molécules in vitro iiii) de mettre en évidence la survenue d’infections entérovirales naturelles chez des animaux.L'ARN viral est présent in vivo dans les monocytes (CD14+) et macrophages (F4/80+) de la rate et dans les cellules de la moelle osseuse de souris ICR-CD1 inoculées avec CV-B4 E2. In vitro, CV-B4 E2 infecte les cellules CD14+ et les cellules F4/80+ de la rate. Les macrophages dérivés de la moelle osseuse cultivés en présence de M-CSF sont infectés par CV-B4 in vitro. Le sérum de souris infectée par CV-B4 E2 facilite l’infection in vitro des cellules spléniques par CV-B4 E2, mais pas celle des macrophages dérivés de la moelle osseuse. Chez des souris ICR-CD1 préalablement traitées par des doses sub-diabétogènes de streptozotocine β (STZ), l’inoculation de CV-B4 E2 provoque une hyperglycémie associée à une hypo-insulinémie. La charge virale du pancréas évaluée par RT-PCR quantitative n’est pas différente chez les animaux diabétiques (STZ/CV-B4 E2) par rapport aux animaux inoculés avec le virus mais non diabétiques. L'analyse histologique du pancréas d’animaux diabétiques (STZ/CV-B4 E2) met en évidence des foyers d’inflammation au niveau des ilots de Langerhans. Des dérivés de pirodavir, molécules qui se fixent à la capside des entérovirus inhibent l’infection à echovirus 7 et 11 mais pas à CV-B4 E2 in vitro. Par contre la fluoxétine a fait preuve d’un effet anti-CV-B4 E2 dans un modèle de culture de fragments de pancréas et de cellules béta pancréatiques murins. La détection d’anticorps sériques anti-VP4 par ELISA, à l’aide d’un peptide de 50 acides-aminés de la protéine VP4 d’EV-G1 (un entérovirus porcin), a été appliquée à la mise en évidence de l’infection de jeunes porcs par des entérovirus. Une homologie de 88% de la séquence du peptide VP4 d’EV-G1 avec celle des protéines VP4 d’ autres EV-G suggère que des anticorps dirigés contre ces virus distincts d’EV-G1 puissent être détectés.En conclusion, CV-B4 E2 peut infecter les monocytes et les macrophages in vitro et in vivo dans un système murin, et le virus peut provoquer un diabète chez des souris préalablement exposées à de faibles doses de STZ. La fluoxétine inhibe l’infection à CV-B4 E2 de cellules pancréatiques in vitro. La détection d’anticorps anti-VP4 d’EV-G1 a permis de mettre en évidence des infections naturelles à entérovirus chez des jeunes porcs. Ce modèle porcin pourrait être mis à profit pour étudier la physiopathologie des infections à entérovirus et tester des moyens de lutte contre ces virus Enterovirus genus encompasses a number of non-enveloped RNA viruses grouped into 12 species, EV-A-J and Rhinovirus A-C. Group B coxsackieviruses (CV-B) belong to the EV-B species. CV-B and particularly CV-B4 is thought to be involved in the development of chronic diseases like type 1 diabetes (T1D). A strain of CV-B4 (CV-B4 E2) was isolated from the pancreas of a patient with T1D, and was able to induce a hyperglycemia in mouse. The mechanisms of the enteroviral pathogenesis of T1D are not well known yet. It has been observed that the infection of human monocytes with CV-B4 E2 in vitro can be enhanced by anti-VP4 antibodies bound to the virus, and human macrophages are also infected by CV-B4 in vitro. The in vitro studies are rich with information but in vivo infection models are needed to better understand the mechanisms of enterovirus infections. Despite the effect of enterovirus on health, the means in the fight against these viruses are limited.Our main objectives were i) to investigate CV-B4 E2-infection in mice and to determine whether monocytes / macrophages are targets of the virus in vivo ii) to implement a CV-B4 E2-induced diabetes model in mice iii) to study the anti-CV-B4 activity of various molecules in vitro iiii) To highlight the natural occurrence of enterovirus infections in animals.Viral RNA was found in vivo in monocytes (CD14+) and macrophages (F4/80+) of the spleen and in bone marrow cells of ICR-CD1 mice inoculated with CV-B4 E2. In vitro, CV-B4 E2 infected the CD14+ and the F4/80+ cells of the spleen. Bone marrow-derived macrophages (BMDM) were infected by CV-B4 in vitro. The serum of CV-B4 E2- infected mice enhanced in vitro the infection of spleen cells by CV-B4 E2 but not the infection of BMDM. ICR-CD1 mice, treated with a sub-diabetogenic dose of Streptozotocin β (STZ), and afterwards inoculated with CV-B4 E2 developped hyperglycaemia and hypoinsulinemia. The viral load of pancreas assessed by quantitative RT-PCR was not different in diabetic animals (STZ/CV-B4 E2) compared to non-diabetic animals inoculated with CV-B4 E2. Histological analysis of diabetic animals highlighted an inflammation of pancreas isletsPirodavir-derived molecules, which bind to the enteroviruses capsid, inhibited the infection with echovirus 7 and 11 but not the infection with CV-B4 E2 in vitro. On the other hand, it was displayed that an anti-CV-B4 E2 effect of fluoxetine in cultures of mouse pancreas fragments and mouse beta cells. The detection of anti-VP4 antibodies in serum by ELISA using a 50 amino acids peptide of VP4 from EV-G1 (a porcine enterovirus) was applied to piglets to highlight enterovirus infections. A strong sequence homology (88%) between the VP4 of EV-G1 and of other EV-G suggests that antibodies directed against viruses other than EV-G1 can be detected.In conclusion, CV-B4 E2 can infect monocytes and macrophages in vitro and in vivo in a murine system, and the virus can cause diabetes in mice previously exposed to low doses of STZ. Fluoxetine inhibits the infection of pancreatic cells with CV-B4 E2 in vitro. The detection of anti-EV-G1-VP4 antibodies highlighted natural enterovirus infections in young pigs. This porcine model could be used to study the pathophysiology of enterovirus infections and to evaluate approaches aimed to fight these viruses

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

12

Gressier, Florence. "Pharmacogénétique de la réponse aux antidépresseurs en conditions réelles de prescription." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T022.

Full text

Abstract:

La réponse aux antidépresseurs (AD) dans l’épisode dépressif majeur (EDM) varie selon les individus, suggérant l’implication de polymorphismes génétiques pharmacodynamiques et/ou pharmacocinétiques. Deux études prospectives et naturalistes ont été réalisées chez des patients caucasiens présentant un EDM et nécessitant un traitement AD. Dans la première étude d’une durée de 4 semaines sur 120 sujets, les polymorphismes 5-HTTLPR, C825T du GNB3, C3435T de l’ABCB1 de la P-glycoprotéine et du CYP2D6 ont été étudiés. Dans la deuxième, d’une durée de 6 mois, une analyse intermédiaire portant sur 397 sujets unipolaires a été réalisée pour le C825T du GNB3 et le Val66Met du BDNF. Tous les AD commercialisés ont été étudiés. Seuls sont impliqués dans l’efficacité des AD, les polymorphismes du 5-HTTLPR et du CYP2D6. Les femmes SS du 5-HTTLPR ont une moindre réponse aux AD par rapport aux femmes LL/LS, la TSH pouvant jouer un rôle dans cette association. Les métaboliseurs ultra-rapides du CYP2D6 traités par imipraminiques nécessitent des posologies plus élevées. Les polymorphismes C825T du GNB3, C3435T de l’ABCB1 et Val66Met du BDNF ne semblent pas impliqués dans l’efficacité des AD. En termes de tolérance, les sujets TT du C825T développent davantage d’hypertension artérielle. Pour améliorer la prise en charge thérapeutique des EDM, en adaptant le traitement AD à chaque patient, nous suggérons la réalisation des tests génétiques suivants en routine chez les patients non répondeurs à un premier traitement AD : le 5-HTTLPR chez les femmes, le CYP2D6 chez les patients traités par imipraminiques, le C825T chez les sujets présentant des facteurs de risque cardiovasculaire There is substantial interindividual variation in response to antidepressants. Pharmacodynamic and pharmacokinetic gene polymorphisms could, at least in part, explain these differences. Two prospective and naturalistic studies have been conducted in depressed Caucasian patients undergoing an antidepressant treatment. The first one is a 4-week study including 120 inpatients in which the 5-HTTLPR, G-protein beta3 subunit C825T, ABCB1 C3435T and CYP2D6 polymorphisms were analysed. The second one is a 6-month study in which an intermediate analysis on 397 unipolar patients was performed with the GNB3 C825T and BDNF Val66Met polymorphisms. All antidepressants were studied in naturalistic conditions. Only the 5-HTTLPR and CYP2D6 polymorphisms were associated with antidepressant efficacy. As compared to LL/LS, the SS genotype of the 5-HTTLPR was associated with lower antidepressant efficacy in depressed women and TSH may mediate this association. CYP2D6 ultrarapid metabolisers treated by imipraminics required higher doses. In terms of tolerance, as compared to CC/CT, the TT genotype of the GNB3 C825T developed more hypertension at 6 months. To improve the therapeutic outcome of major depression, adapting the antidepressant for each patient, we suggest the implementation in routine of genetic tests in patients unresponsive to a first antidepressant treatment: 5-HTTLPR in women, CYP2D6 in patients treated by imipraminics, C825T in subjects with cardiovascular risk factors

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

13

Trabelsi, Mohamed-Sami. "Rôle du récepteur nucléaire FXR dans la régulation de la production de GLP-1 : nouvelle cible thérapeutique dans le traitement du diabète de type 2 ?" Thesis, Lille 2, 2015. http://www.theses.fr/2015LIL2S012/document.

Full text

Abstract:

L’homéostasie énergétique ou ‘balance énergétique’ est l’équilibre qui s’établit chez l’Homme et l’animal adulte entre la prise quotidienne de nutriments sous la forme de glucides, de lipides ou de protéines et leur oxydation pour ne produire que la quantité énergétique strictement nécessaire. Pour maintenir cette balance l’organisme doit recueillir en permanence des signaux nerveux, métaboliques ou hormonaux de la part de cellules spécifiques. Ces senseurs des besoins énergétiques transmettent alors à des centres régulateurs leurs informations qui en retour, par voie hormonale ou nerveuse, informent les organes effecteurs des mesures à prendre pour stocker, produire ou consommer l’énergie. Les trois principaux centres de cette balance sont 1/ le cerveau, centre intégrateur de l’information ; 2/ un groupe d’organes effecteurs parmi lesquels le foie, le tissu adipeux, les muscles squelettiques, le pancréas et 3/ un centre senseur de la qualité et de la quantité des aliments, le tractus gastrointestinal (Migrenne 2006). En plus d’être la source d’énergie nécessaire à la vie des cellules, les nutriments tels que les acides gras, le cholestérol ou encore le glucose sont aussi des molécules de signalisation cellulaire à la fois par leur fixation à des récepteurs membranaires mais aussi via des récepteurs nucléaires. Un déséquilibre dans l’homéostasie énergétique dû à une alimentation déséquilibrée, à un manque d’exercice physique ou à des facteurs génétiques est une caractéristique de l’obésité et de complications telles que le diabète de type 2 et les maladies cardiovasculaires (Hill, 2006). Au cours de ma thèse je me suis intéressé à l’intestin pour son rôle de régulateur de l’homéostasie énergétique dans un contexte physiologique ou physiopathologique d’obésité via sa capacité à sécréter l’incrétine Glucagon-Like Peptide-1 (GLP-1) en réponse au glucose et aux acides biliaires. J’ai étudié plus particulièrement le rôle du récepteur nucléaire en tant que senseurs moléculaires des acides biliaires FXR dans les cellules sécrétrices de cette incrétine car à l’heure actuelle rien n’était connu quant à son rôle ni même quant à son expression dans la cellule L. Pour cela, j’ai utilisé des lignées cellulaires murines et humaines où j’ai mis au point les conditions expérimentales pour répondre aux questions posées. Grâce à des ARN d’intestins issus de différents modèles de souris la relevance chez le rongeur a été testée. La relevance de ces résultats sur des biopsies intestinales humaine a également été testée. Grâce à ces outils, j'ai pu montré que FXR dans les cellules L était fonctionnel et que son activation interférait avec la voie de la glycolyse entrainant moins de synthèse et de sécrétion de GLP-1. Cela nous a permis de proposer un nouveau mécanisme moléculaire par lequel les séquestrants des acides biliaires exercent leur effets bénéfiques chez des patients atteints de diabète de type 2 Originally identified as dietary lipid detergents, bile acids (BA) are now recognized as signaling molecules which bind to the transmembrane receptor TGR5 and the nuclear receptor FXR (Farnesoid X Receptor). Upon binding to TGR5 at the surface of enteroendocrine L cells, bile acids (BA) promote the secretion of the incretin GLP-1 which potentiates the glucose-induced insulin secretion by pancreatic beta-cells. More than 50% of the insulin secretion in response to glucose is mediated by GLP-1 and the other incretin Glucose-dependent Insulinotropic Polypeptide (GIP). Once secreted, GLP-1 is rapidly (2-3 minutes) degraded by the endothelial enzyme Dipeptydil Peptidase 4 (DPP4). GLP-1 analogues and DPP4 inhibitors are successfully used for the treatment of T2D. FXR is a ligand-activated nuclear receptor highly expressed in the liver and in the distal intestine. FXR controls BA, lipid and glucose metabolism. Whether FXR is expressed, functional in intestinal enteroendocrine L cells and in which extend its activation affects GLP-1 production are not yet reported. Encouraging data were obtained during my M2 training course. The aim of my thesis was thus to assess whether FXR in enteroendocrines cells could participate in the control of the deregulation of glucose homeostasis. Multiple in vitro, ex vivo and in vivo human and murine models allowed us to show that FXR is present and functional in L cells. FXR activation decreases GLP-1 production and secretion in L cells by inhibiting glycolysis pathway through an interference with the carbohydrate responsive transcription factor ChREBP. Finally, I identified an additional mechanism of action of the bile acid sequestrant Colesevelam, a molecule currently successfully used in USA for treating type 2 diabetic patients

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

14

Shirvani, Hamasseh. "Export régulé des récepteurs couplés aux protéines G depuis des compartiments de biosynthèse vers la membrane plasmique." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T053.

Full text

Abstract:

Les récepteurs couplés aux protéines G (RCPG), la plus grande famille de récepteurs membranaires, sont impliqués dans presque toutes les grandes fonctions physiologiques de l'organisme. Le nombre de ces récepteurs à la surface cellulaire au moment de la stimulation représente un paramètre essentiel de leur réponse fonctionnelle. Les travaux présentés dans ce manuscrit étudient les mécanismes qui contrôlent l'adressage vers la membrane plasmique de deux récepteurs en particulier, le récepteur de chimiokine CCR5 et le récepteur métabotropique GBR1 de l'acide gamma amiobutyrique (GABA), pour lesquels l'adressage vers la surface constitue une régulation essentielle de leurs fonctions physiologiques. Nous avons pu caractériser une famille de protéines ubiquitaires, les PRAF (de Prenylated Rab Acceptor Protein), comptant trois isoformes, qui contribuent à la rétention intracellulaire de CCR5 et GBR1. En particulier, l'adressage de surface de CCR5 et GBR1 depuis le RE est contrôlé négativement par PRAF2. En ce qui concerne CCR5, nous avons découvert qu'il était majoritairement (à 90%) retenu à l'état fonctionnel dans le réticulum endoplasmique (RE) et le Golgi. Nous avons montré que la libération de CCR5 à partir du RE était favorisée par son association avec CD4, qui fonctionne, dans ce contexte, comme une protéine d'escorte. CD4 induirait un changement conformationnel permettant de lever la rétention de CCR5 par PRAF2 dans le RE. L'adressage de GBR1 à la surface nécessite l'interaction avec l'isoforme GBR2 du récepteur. Comme PRAF2, GBR2 interagit avec la queue C-terminale de GBR1, masquant ainsi le signal de rétention de type RXR qui représente une interface d'interaction entre GBR1 et PRAF2. PRAF2 est un "gate-keeper", un contrôleur négatif de l'export de GB1. L'interaction de GB1-PRAF2 représente un nouveau mécanisme de contrôle de la fonction du GBR, fondée sur l'équilibre stoechiométrique entre PRAF2 et GBR2. Nos suggèrent que tous les membres de la famille des PRAFs, pourraient fonctionner comme des gate-keepers dans les compartiments où ils sont exprimés et que leur niveau d'expression est inversement proportionnel à la densité des récepteurs en surface. Nos travaux ont permis de montrer que ce nouveau mécanisme de régulation de l'expression de surface des RCPG peut être perturbé dans des conditions pathologiques comme la dépression G-protein coupled receptors (GPCRs) are the largest family of membrane receptors and are involved in major physiological functions. The number of these receptors on the cell surface at the time of stimulation is crucial for their functional response. Our work focuses on the mechanisms that control the targeting to the plasma membrane of two GPCRs, the chemokine CCR5 receptor and the -aminobutiric acid (GABA) metabotropic receptor (GB1). Here, we demonstrate how a family of ubiquitus proteins, PRAFs (Prenylated Rab Acceptor of protein), contribute to the intracellular retention of CCR5 and GB1. In particular, the membrane export of CCR5 and GB1 from the endoplasmic reticulum (ER) is negatively controlled by PRAF2. For CCR5, we report that the majority of fully functional CCR5 (90%) is maintained within intracellular compartments (ER and Golgi). We show that the release of CCR5 from the ER is enhanced by its association with CD4, which functions in this context, as an escort protein. CD4 induces a conformational change in the CCR5/praf2 complex, thereby liberating CCR5 from PRAF2 and promoting its trafficking to the plasma membrane. As for GB1, its cell surface translocation requires the interaction with the GB2 receptor isoform. GB2 interacts with the C-terminal tail of GB1, masking an RXR retention signal that represents a new mechanisms for controlling the function of GABA receptors based on the stoichiometric balance between PRAF2 and GB2. PRAF2 is therefore considered a "gatekeeper," a negative controller for export of GB1. In conclusion, our data suggest that specific PRAF family members work as "gatekeepers" within the compartments where they are expressed and therefore could act as regulators of GPCR export. This mechanism of GPCR regulation can be perturbed in pathologic conditions since PRAF2 itself is regulated in vivo in depression-like states in mice

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

15

Boutant, Marie. "Fonction et régulation du facteur de transcription COUP-TFII dans les cellules β du pancréas". Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T047.

Full text

Abstract:

La plasticité du pancréas endocrine est essentielle pour répondre de façon adaptée à une demande accrue en insuline et maintenir un contrôle optimal de l’homéostasie glucidique. L’invalidation génique de COUP-TFII dans les cellules ß pancréatiques à l’état hétérozygote chez la souris adulte conduit à une intolérance au glucose suite à une diminution de la sécrétion d’insuline en réponse au glucose. De plus, l’expression transcriptionnelle de COUP-TFII est inhibée par l’insuline. Au cours de cette thèse, l’étude des souris homozygotes et de la lignée cellulaire INS-1 832/13 nous a permis de mettre en évidence que COUP-TFII participe au maintien du nombre de cellules ! au cours de la période post-natale en activant la voie de signalisation Wnt/ß-caténine/TCF7L2 en réponse au GLP-1. Nous avons aussi mis en évidence une région du promoteur COUP-TFII activée par liaison d’HNF4 !MODY1 en réponse à de faibles concentrations de glucose. La diminution de COUP-TFII en réponse à de fortes concentrations de glucose implique la diminution d’HNF4" dont l’expression génique est sous le contrôle de la voie de signalisation de FOXO1, facteur réprimé par l’insuline. Enfin, nous avons établi une corrélation entre le polymorphisme rs3743462-C situé dans les régions régulatrices amont du gène COUP-TFII et des paramètres glucidiques liés à la sensibilité à l’insuline chez l’homme. Dans la cellule ß, ce variant lie COUP-TFII avec une plus grande affinité et est associé à une diminution de l’expression basale de COUP-TFII conduisant à une plus forte répression par le glucose. L’ensemble de ces données suggèrent que COUP-TFII participe in vivo à l’homéostasie glucidique de la souris et de l’homme The development and maintenance of functional pancreatic β cell mass are essentials for an appropriate response to changes in blood glucose levels. Pancreatic β cell knockout of the COUP-TFII (Chicken Ovalbumin Upstream Promoter Transcription Factor II) gene, in adult heterozygous mice, led to glucose intolerance due to an impaired glucose-stimulated insulin secretion. We also reported that COUP-TFII expression is repressed by insulin. During this PhD, using COUP-TFII homozygous knockout mice and the 832/13 INS-1 β cells, our results suggested that COUP-TFII can provide sufficient stimulation of the Wnt/β-catenin/TCF7L2 dependent transcription signaling pathway in response to GLP-1 to allow development of an appropriate β cell mass during the postnatal period. We also identified a DNA region of the promoter that down-regulates COUP-TFII expression by attenuating the activating effect of HNF4 !MODY1 in response to high glucose concentrations through FoxO1 signaling, a major downstream target of the insulin signaling pathway. Finally, individuals from the prospective DESIR cohort carrying the minor C-allele at rs3743462 which is located in these conserved upstream regulatory regions, displayed lower basal levels of circulating insulin and a lower insulin resistance index. In β cells, this polymorphism is associated with a decreased of basal level of COUP-TFII gene activation and an increased repression to high glucose concentrations. We showed that COUP-TFII binds the rs3743462-C oligonucleotide with higher affinity suggesting a possible autorepression of its expression. In conclusion, COUPTFII could be a key regulator of in vivo glucose homeostasis in mice and in human

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

16

Compain, Séverine. "Pharmacologie intracellulaire des antirétroviraux utilisés contre le VIH : développement et méthodes analytiques et intérêt de la mesure des concentrations intracellulaires pour la compréhension des phénomènes d'efficacité et d'échappement thérapeutique." Paris 11, 2006. http://www.theses.fr/2006PA114806.

Full text

Abstract:

Durant ce travail de thèse, plusieurs méthodes analytiques ont été validées pour quantifier par couplage LC-MS/Ms et Lc-UV dans le plasma et le milieu intracellulaire les différents antirétroviraux utilisés contre le VIH. Ces outils analytiques ont permis d'étudier la transformation de l'AZT conduisant à la formation de d4T-TP dont l'identité a été confirmée. Des informations sur l'étape de la transformation et le profil cinétique de la d4T-TP issue d'AZT ont été apportées. Il a été montré que l'utilisation des concentrations intracellulaires pouvait être un outil prédictif de l'efficacité et permettrait de comprendre les phénomènes d'échappement thérapeutique. Ainsi, la d4TP-TP ne participerait pas à l'efficacité antivirale de l'AZT mais au contraire la diminuerait. La mesure des concentrations plasmatiques et intracellulaires constitue donc un outil indispensable à la pharmacologie des antirétroviraux utilisés contre le VIH et devrait permettre de mettre en place des traitements efficaces Several analytical methods were developed using LC/MS/MS and LC/UV for the determination of the antiretroviral drugs used against HIV in plasma and intracellular medium. In particular, these analytical lethods enabled to study the transformation of AZT that leads to the formation of d4TP-TP, compound thaty was formally identified. Some information concerning the step of this transformation, and the intracellular pharmacocinetik profile of d4TP-TP from AZT was given. We showed that intracellular concentrations could be a predictive tool for efficient treatment and allowed understanding treatment failure phenomena. Thus d4TP-TP from AZT did not participate to effectiveness of AZT and in contrary d4TP-TP decreased its. The use of plasmatic and intracellular concentrations is an essential tool for the pharmacology of antiviral drugs used against HIV and will allow setting up an effective treatment

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

17

Kovalenko, Lesia. "Sélection et caractérisation de molécules ciblant la protéine de la nucléocapside de VIH-1." Thesis, Strasbourg, 2017. http://www.theses.fr/2017STRAJ086.

Full text

Abstract:

La tri-thérapie utilisée pour le traitement du VIH-1 est efficace mais limitée par l'apparition de résistances. Par conséquent, des cibles virales alternatives sont nécessaires. Une des cibles les plus prometteuses est la protéine nucléocapside (NC), qui est hautement conservée et qui joue un rôle essentiel dans le cycle viral. Dans ce contexte, le projet européen THINPAD a eu pour but de développer des inhibiteurs de la NC en combinant plusieurs approches : criblage virtuel, criblage secondaire in vitro, tests antiviraux et de toxicité. Pour le criblage in vitro, nous avons utilisé le test de déstabilisation de cTAR, hautement spécifique de l’activité chaperonne de NC. Cinq séries de molécules ont été sélectionnées par les premiers criblages et tests antiviraux. Après des études de relation structure-activité, une seule des cinq séries a été poursuivie jusqu’aux tests d'efficacité chez les souris. Les composés de cette série présentent une activité antivirale à des concentrations nanomolaires, mais ne sont pas actifs dans le modèle murin. Les études de mécanisme d'action ont révélés que leur activité antivirale était bien consécutive au ciblage de la NC Highly Active Anti-Retroviral Therapy (HAART) is successfully used for HIV-1 treatment, but is hampered by the appearance of drug resistance. Thereby, alternative drug targets are required. One of the most promising target is the nucleocapsid protein (NC), which is highly conserved and plays essential role in HIV life cycle. In this context, the European project THINPAD was organized with the aim to develop NC inhibitors. To fulfil this objective, several approaches were used, including virtual screening, in vitro secondary screening, in cellulo antivirals tests, and toxicity evaluation. For in vitro screening, the specific NC-promoted cTAR destabilization assay was used. Five series of molecules were selected by the first screenings and antiviral tests. After structure-activity relationship studies, only one series was continued until efficacy testing in mice. The compounds of this series exhibit antiviral activity at nanomolar concentrations but are not active in the murine model. The mechanisms of action studies revealed that their antiviral activity was indeed consecutive to the targeting of the NC

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

18

Kourjian, Georgio. "Effect of HIV antiretroviral drugs on antigen processing and epitope presentation by MHC-I to cytotoxic T cells." Thesis, Strasbourg, 2015. http://www.theses.fr/2015STRAJ027/document.

Full text

Abstract:

L’apprêtement antigénique par les protéases intracellulaires et la présentation des épitopes sont essentiels pour la reconnaissance des cellules infectées par les lymphocytes CD8+. Ici nous avons montré que certains inhibiteurs de la protéase de la VIH (IPs) modulent l’activité de la protéasome et aminopeptidase impliqué dans l’apprêtement antigénique endogène et l’activité cathepsins importante dans l’apprêtement croisée. Deux IPs agissent directement sur les cathepsins et leurs régulateurs en inhibant les activités kinase, NOX2 et en régulant le pH phagolysosomal. Les IPs ont changé la dégradation des protéines viral et la production des épitopes de façon séquence- et cellule-spécifique, ont altéré la présentation direct et croisée des épitopes, et ont partiellement changé l’auto-peptidome des cellules primaires. La modulation par les drogues de l’apprêtement et la présentation des épitopes peut fournir une approche thérapeutique alternative pour moduler la reconnaissance immunitaire Antigen processing by intracellular proteases and peptidases and epitope presentation are critical for recognition of pathogen-infected cells by CD8+ T lymphocytes. Here we show that several HIV protease inhibitors (PIs) prescribed to HIV-infected persons variably modulate proteasome and aminopeptidase activities involved in endogenous antigen presentation and cathepsin activities involved in antigen cross-presentation. Two HIV PIs acted directly on cathepsins and on their regulators by inhibiting kinases, NOX2 and the regulation of phagolysosomal pH, subsequently enhancing cathepsin activities. HIV PIs modified HIV protein degradation and epitope production in a sequence- and cell-dependent manner, altered direct- and cross-presentation and T cell-mediated killing, and partly changed the self-peptidome of primary cells. Drug-induced modulation of antigen processing and peptidome may provide an alternate therapeutic approach to modulate immune recognition

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

19

Potey, Camille. "Intérêt des approches pléiotropes dans l'ischémie cérébrale : modulation pharmacologique par l'atorvastatine." Thesis, Lille 2, 2013. http://www.theses.fr/2013LIL2S014/document.

Full text

Abstract:

L’accident vasculaire cérébral ischémique reste un problème majeur de santé publique, contre lequel l’arsenal thérapeutique reste très limité. L’atorvastatine (AT), utilisée en prévention cardiovasculaire, possède des effets pléiotropes lui conférant un pouvoir protecteur dans l’AVC. Les objectifs de cette thèse étaient d’évaluer et de caractériser les effets neuro- et vasculoprotecteurs de l’AT dans l’ischémie cérébrale, et la part jouée par le récepteur nucléaire PPARα. Des souris C57BL/6J sauvages et KO-PPARα ont été soumises à ischémie-reperfusion (I/R) cérébrale. Elles étaient traitées par AT préventivement pendant 14 jours ou après I/R pendant 24 ou 72 heures. L’effet neuroprotecteur est évalué histologiquement et par des tests fonctionnels moteurs. L’effet vasculoprotecteur est évalué sur l’artère cérébrale moyenne par étude de la fonction endothéliale et sur les microvaisseaux cérébraux par étude de leur structure et des interactions leucocytes-endothélium. Le traitement préventif et aigu par AT induit une diminution du volume lésionnel, et une amélioration de la récupération fonctionnelle chez les animaux traités à la phase aiguë. Le traitement aigu permet de préserver la fonction endothéliale et l’intégrité des microvaisseaux cérébraux, et de limiter les interactions leucocytes-endothélium. PPARα est nécessaire aux effets neuro- et vasculoprotecteurs de l’AT dans l’ischémie cérébrale. Ce travail met en évidence l’intérêt de l’atorvastatine en tant qu’agent neuroprotecteur pléiotrope dans l’ischémie cérébrale Ischemic stroke still is a heavy public health burden, as effective therapeutic means remain scarce. Atorvastatin (AT), widely used as a preventive treatment in the cardiovascular field, possesses pleiotropic effects that give it protective properties in stroke. The goals of this work were to assess and characterize the neuro- and vasculoprotective effects of AT in cerebral ischemia, and the part played by PPARα. Wild-type and PPARα-KO C57BL/6J mice were submitted to cerebral ischemia-reperfusion (I/R). They were treated with AT before I/R for 14 days or acutely after I/R for 24 or 72 hours. Neuroprotection is assessed histologically and by a motor functional evaluation. Vasculoprotection is assessed on the middle cerebral artery by evaluating the endothelial function and on cerebral microvessels by evaluating their structure and the interactions between leukocytes and the vascular wall. Preventive and acute treatments with AT induce a reduction in lesion volumes, functional recovery was improved in acutely treated animals. The acute treatment with AT preserves the endothelial function and the microvascular integrity, and reduces the interactions between leukocytes and the endothelium. PPARα is necessary for AT neuro- and vasculoprotective effects to take place. This works highlights the interest of atorvastatin as a pleiotropic neuroprotective agent in ischemic stroke

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

20

Sharif, Tanveer. "Étude des effets anticancéreux de polyphénols d'origine naturelle : rôle essentiel des espèces réactives de l'oxygène et des gènes suppresseurs de tumeurs." Thesis, Strasbourg, 2012. http://www.theses.fr/2012STRAJ103.

Full text

Abstract:

Ce travail de recherche montre que les différentes sources de polyphénols (polyphénols de vin rouge, jus d'aronia melanocarpa, jus de cassis) ont de puissants effets chemothérapeutiques et chemopréventifs sur différentes lignées de culture cellulaires, mais également in vivo sur un modèle de tumorigenèse. Ces polyphénols inhibent la prolifération des cellules cancéreuses (leucémie lymphoblastique aigüe, cellules souches) en induisant un arrêt du cycle cellulaire et l'apoptose. Les effets anti-cancéreux sont dépendants de l' induction du stress oxydatif mettant en jeu les anions superoxydes et le peroxyde d·hydrogène qui à son tour, activent les voies de signalisation conduisant à une surexpression des gènes suppresseurs de tumeurs comme p73 et p53 et ainsi que caspase 3. Celle étude montre également que les polyphénols contrôlent la prolifération des cellules cancéreuses au niveau épigénétique en diminuant l'expression d'UHRF1 (un intégrateur épigénétique de prolifération). Cependant l'effet anticancéreux de ces polyphénols est sélectif et agit sur les cellules cancéreuses et non sur les cellules normales. Le fractionnement de ces sources riches en polyphénols et les études menées en utilisant des composés purs montrent que les effets anticancéreux sont attribués à plusieurs composés différents. Cette étude montre l' identification de cyanidine-3-glucoside et de cyanidine-3-rutinoside comme source de composés anticancéreux actifs This research work shows that different sources of polyphenols (RWPs, AMJ and blackcurrant) have strong chemotherapeutic and chemopreventive effects on several cancer cells lines (acute lymphoblastic leukemia and cancer stem cells) and also in vivo in a model of tumorigenesis in mouse. These polyphenols inhibit the proliferation of various cancer cells by inducing cell cycle arrest and apoptosis. The anti-cancer effect is dependent on the induction of oxidative stress involving superoxide anions and hydrogen peroxide which, in turn, activate the signaling pathways leading to the re-expression of tumor suppressor genes such as p73 and p53 and executor of apoptosis such as caspase 3. This study also shows that polyphenols control the proliferation of cancer cells at epigenetic level by decreasing the expression of UHRF1 (an epigenetic integrator of proliferation). Moreover, the anticancer effect of these polyphenols is selective towards cancer cells and not in normal cells. Fractionation of these rich sources of polyphenols and studies on the commercially available pure products shows that anti-cancer effects of these polyphenols involve several different compounds. This study leads to the identification of cyaniding-3-O-glucoside and cyaniding-3-O-rutinoside as active anticancer compounds

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

21

Pasquier, Adrien. "Lysosomal degradation of insulin granules promotes β-cell failure in type 2 diabetes". Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ083/document.

Full text

Abstract:

Notre équipe a récemment découvert l’importance du ciblage des granules d’insuline aux lysosomes lors d’une mise à jeun chez les cellules pancréatiques β. Le diabète de type 2 (TD2) est caractérisé par la résistance à l’insuline couplé au dysfonctionnement des cellules β-et à leur perte. Je souhaitais évaluer le ciblage des granules d’insuline aux lysosomes dans le contexte diabétique. Grâce à un modèle murin, nous avons trouvé que le nombre des lysosomes contenant des granules d’insuline était augmenté chez les cellules β-provenant de souris diabétiques en comparaison aux contrôles. Ceci était accompagné par l’augmentation des niveaux de la protéine lysosomale CD63. Parce que PKD1 contrôle le ciblage des granules d’insuline aux lysosomes lors d’une mise à jeun, nous nous sommes demandé si PKD1 était importante lors d’un diabète de type 2. Dans nos modèles, les niveaux de PKD1 étaient diminués en conditions diabétiques en comparaison aux contrôles. De plus, l’inhibition de PKD1 entrainait l’augmentation du ciblage des granules d’insuline aux lysosomes et accélérait l’apparition du diabète dans notre modèle murin. Nous souhaitions ensuite savoir si l’activation de PKD1 dans les cellules pancréatiques β-pouvait être avantageuse dans un contexte diabétique. De fait, grâce à l’utilisation d’un composé spécifique, nous avons pu montrer que l’activation de PKD1 menait à l’augmentation des niveaux d’insuline sur des ilots pancréatiques humains et ralentissait l’apparition du diabète dans notre modèle murin. Pour conclure, j’ai aussi débuté la caractérisation des lysosomes sur d’autres types cellulaires des ilots pancréatiques. Nous avons observé que LIMP2, une autre protéine lysosomale, était fortement exprimée chez les cellules pancréatiques α Our team recently uncovered the importance of the targeting of insulin granules to the lysosomal compartments in pancreatic β-cells during fasting. Type 2 Diabetes (T2D) is characterised by insulin resistance coupled with pancreatic β-cell failure which account for both β-cells dysfunction and β-cells death. I wanted to assess the targeting of insulin granule to the lysosomes in the context of T2D. Using murine diabetic model, we found that the number Granule-containing Lysosomes was enhanced in diabetic β-cells in comparison to controls. This was accompanied by an increase in the level of the lysosomal protein CD63. Because PKD1 controls the targeting of insulin granule to the lysosomes during fasting, I wondered if PKD1 was important during T2D. PKD1 levels were decreased in our diabetic models in comparison to controls. Moreover inhibition of PKD1 led to enhanced targeting of the insulin granules to the lysosomes and accelerated apparition of diabetes in our murine model. I also tested if activation of PKD1 in pancreatic β-cells could be beneficial in the context of diabetes. Indeed using a specific compound, we showed that PKD1 activation led to an increase in insulin levels and delayed onset of diabetes in our murine model. My work thus uncovered mechanisms underlying a fundamentally new process in β-cells with potential implications for novel therapeutic directions in T2D. Finally, I started to assess lysosomes in another pancreatic islets cell type. I found that LIMP2, another lysosomal membrane protein, was specifically highly expressed in the pancreatic α-cells

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

22

Abboud, Dayana. "Rôle des chimiokines dans les maladies atopiques : étude pharmacologique à l'aide des neutraligands." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ023.

Full text

Abstract:

La dermatite atopique est une maladie inflammatoire cutanée caractérisée par le recrutement de nombreuses cellules inflammatoires, y compris les cellules T CD4+ detype 2, les éosinophiles et les cellules dendritiques. Les chimiokines et leurs récepteurs jouent un rôle central dans le trafic des globules blancs de la circulation sanguine vers la peau enflammée. Deux chimiokines, CCL17/TARC (thymus and activation-regulated chemokine) et CCL22/MDC (macrophage-derived chemokine) présentent un intérêt dans l'inflammation cutanée, puisqu’elles attirent principalement les lymphocytes T de type 2 exprimant le récepteur CCR4. Compte tenu du rôle de l'axe CCL17/CCL22/CCR4 dans le développement de la dermatite atopique, nous cherchons à identifier des petites molécules chimiques, appelées aussi "neutraligands", ciblant CCL17 ou CCL22. Par analogie aux anticorps neutralisants,ces molécules se fixent aux chimiokines et neutralisent leurs fonctions biologiques.Nous avons mis en place un essai de criblage à haut débit basé sur la détection de la mobilisation du calcium intracellulaire induite par CCL17 ou CCL22, et nous avons testé une collection de substances naturelles. Deux “touches”, GPN279 et GPN136,bloquent respectivement les réponses calciques induites par CCL17 et CCL22. Ces deux composés ne sont pas des antagonistes du récepteur CCR4 puisque leur préincubation avec le récepteur n'a pas inhibé les réponses calciques par CCL17 ouCCL22. Nous avons également évalué l'activité in vivo de GPN279 et GPN136 dans un modèle murin de dermatite atopique. Ces deux composés diminuent la rougeur,l'épaisseur des oreilles, l’expression des cytokines Th2 et le taux des IgE plasmatiques. En conclusion, nos résultats montrent que les neutraligands présentent un potentiel pour contrôler l’inflammation de type Th2. Ils nous aideront à mieux comprendre le rôle des chimiokines dans la dermatite atopique Atopic dermatitis is an inflammatory skin disease characterized by the recruitment of many inflammatory cells, including CD4+T helper 2 cells, eosinophils et dendritic cells.Chemokines and their receptors are believed to be essential for leukocyte traffickingfrom the circulation into the enflamed skin. Two chemokines, thymus and activation regulated chemokine (TARC/CCL17) and macrophage-derived chemokine(MDC/CCL22) may be of interest in skin inflammation, because they mainly attract Tcells expressing the chemokines receptor CCR4 preferentially expressed on T helper2 cells. Considering the role of CCL17/CCL22/CCR4 axis in the development of atopic dermatitis, we aim at the identification of small compounds called “neutraligands”targeting CCL17 or CCL22. By analogy to neutralizing antibodies, these molecules bind to chemokines (and not to the receptors) and neutralize their biological functions.So, we have set up a high-through put assay based on the intracellular Ca2+ increase upon activation with CCL17 or CCL22, and we screened the natural substance library. Two hit compounds, GPN279 and GPN136, blocked CCL17 and CCL22-induced Ca2+responses, respectively. The compounds did not block the CCR4 receptor since their preincubation with the receptor did not affect the Ca2+ response. Then, we evaluated the in vivo activity of GPN279 and GPN136 in a mouse model of atopic dermatitis. We show that both compounds prevented ear redness and thickness and decreased Th2-related cytokines as well as plasma IgE in a MC903-induced atopic dermatitis model. Altogether, our results show successful control of Th2 inflammation with the CCL17and CCL22 neutraligands. These new pharmacological tools will help us to better understand the role of chemokines in the pathogenesis of atopic dermatitis

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

23

Zgheib, Sarwat. "Distribution cellulaire de la protéine de la nucléocapside NCp7 du VIH-1 et caractérisation de son interaction avec la protéine nucléolaire hNoL12." Thesis, Strasbourg, 2015. http://www.theses.fr/2015STRAJ076/document.

Full text

Abstract:

La protéine de nucléocapside (NC) du virus de l’immunodéficience humaine (VIH-1) joue un rôle majeur dans les différentes étapes du cycle viral du VIH-1 : soit comme domaine fonctionnel de la polyprotéine Gag (NC-Gag) dans les phases tardives du cycle viral, soit sous sa forme mature NCp7 dans les phases précoces. Afin de mieux comprendre le rôle de la forme mature dans le cycle viral, nous avons cherché de nouveaux partenaires cellulaires spécifiques de la NCp7 et identifié la protéine nucléolaire, hNoL12, impliquée dans la maturation des ARNs ribosomaux. L’interaction NCp7/hNoL12 a été confirmée par co-IP, FRET-FLIM et double hybride chez la levure et le domaine d’interaction a été localisé entre les a.a. 22 et 61 correspondant au domaine 5’-3’-exonucléase de hNoL12. Nous avons développé un test pour caractériser cette activité et montré qu’elle est spécifique des ARN simples brins. Enfin, l’extinction de l’expression de hNoL12 entraine une diminution significative de l’infection par un lentivecteur modèle des phases précoces de l’infection soulignant l’implication fonctionnelle de hNoL12 dans cette phase de l’infection. Dans un second projet, nous nous sommes intéressés au devenir de la NCp7 dans les cellules infectées, suite à la transcription inverse. Nous avons généré des vecteurs lentiviraux composés de protéines NCp7 fusionnées à une étiquette tétracysteine permettant son marquage spécifique avec le dérivé de la fluorescéine (FlAsH). Nous avons alors étudié, par microscopie confocale, la distribution intracellulaire de la NCp7 dans des conditions proches de l’infection. Nos résultats indiquent qu’une grande partie de la NCp7 se dissocie du PIC durant son transport dans le cytoplasme. Toutefois, la perte de la NCp7 est une étape tardive qui se déroule proche du noyau confirmant ainsi que la décapsidation a lieu à la membrane nucleaire juste avant l’entrée du complexe de préintegration dans le noyau. Le troisième projet a porté sur le développement d’antiviraux ciblant la NCp7. Nous avons travaillé sur la vectorisation et la caractérisation des propriétés antivirales en milieu cellulaire, d’un peptide sélectionné in vitro pour sa capacité à inhiber l’action chaperonne de la NCp7. L’activité antivirale du peptide vectorisé vis-à-vis d’une infection par un vecteur lentiviral basé sur le VIH-1 s’est révélée décevante The Human Immunodeficiency Virus-1 (HIV-1) nucleocapsid protein (NC) plays a major role in the different steps of theviral lifecycle under its two forms; either as a domain of the polyprotein Gag (NC-Gag) in the late phase or as a matureNCp7 protein in the early phase. In order to better understand the role of the mature form in the viral cycle, we searchedfor new NCp7 specific cellular partners and identified the nucleolar protein hNoL12 which is known to be involved inthe maturation of ribosomal RNAs. The NCp7/hNoL12 interaction was confirmed by co- IP, FRET-FLIM, and yeast twohybrid. The interaction domain was localized between a.a. 22 and 61 on hNoL12; which corresponds to its putative 5’-3’-exonuclease domain. We developed an assay to monitor this activity and found it to be specific of single strand RNA.Finally, the cellular knockdown of hNoL12 resulted in a significant decrease in the infection by a pseudovirus mimickingthe early phase of the infection, emphasizing the functional involvement of hNoL12 in this phase. In a second project, wewere interested in the fate of the viral incoming NCp7 in the infected cells, after reverse transcription. We thus generatedlentiviral vectors composed of NCp7 fused to a tetracysteine tag enabling its specific labeling with the fluoresceinderivative FlAsH. We then studied by confocal microscopy, the intracellular distribution of NCp7 containing viralparticles in conditions close to the infection. Our results showed that an important proportion of the NCp7 moleculesdissociates from the PIC during its transport in the cytoplasm. However, the loss of NCp7 is a late step of this processand seems to take place close to the nucleus suggesting that the dissociation of the capsid occurs at the nuclear membranejust before the nuclear entry of the PIC. The third project concerns the development of antiviral inhibitors targetingNCp7. We worked on the vectorization and the characterization of the antiviral properties of a peptide selected in vitrofor its ability to inhibit the NCp7 chaperone activity. The inhibitory activity of the vectorized peptide on infection ofHeLa cells by a HIV-1 based lentiviral vector was found deceiving

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

24

Weiss, Maud. "Etudes des effets cardio-métaboliques d'une aminopyrroline sympatho-inhibitrice dans un modèle de syndrome métabolique chez le primate non humain : mise en évidence des mécanismes d’action impliqués." Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ071/document.

Full text

Abstract:

Le syndrome métabolique (SMet) est caractérisé par la conjonction de troubles cardiovasculaires et métaboliques. Une hyperactivité du système nerveux sympathique pourrait être impliquée dans le développement du SMet. Les récepteurs I1 des imidazolines (RI1) identifiés par notre équipe ont une action sympatho-inhibitrice et représentent donc une cible de choix pour le développement de nouveaux médicaments. Dans notre laboratoire, des études de pharmaco-chimie ont permis de synthétiser une série d’aminopyrrolines sélectives des RI1. Des études préliminaires nous ont permis de sélectionner un chef de file, le LNP599, qui diminue la pression artérielle et induit des effets métaboliques bénéfiques. Des effets périphériques additionnels liés à l’adiponectine ont également été remarqués. Le premier objectif de ma thèse a consisté au développement d’un modèle original de SMet chez le ouistiti pour y tester l’intérêt thérapeutique du LNP599. Le second objectif fut d’étudier les effets périphériques potentiels des ligands RI1. Ces études ont été menées chez le rat âgé, un modèle d’insulino-résistance modérée, et sur les cellules hépatocytaires HepG2 Metabolic syndrome (MetS) can be defined as a combination of cardiovascular and metabolic disorders. Sympathetic nervous system overactivity may be involved in the development of MetS. I1 imidazoline receptors (I1R), identified by our team, have a sympatho-inhibitory action and therefore, represent a target for developing new drugs. In our laboratory, pharmaco-chemical studies led to the synthesis of I1R selectives aminopyrrolines. Preliminary studies allowed us to select a leader, the LNP599, which lowers blood pressure and induces beneficial metabolic effects. Additional peripheral effects related to adiponectin were also noted. The first aim of my thesis consisted in the development of an original model of MetS in marmoset in order to test the therapeutic benefit of LNP599. The second objective was to study the potential effects of peripheral I1R ligands. These studies were conducted in elderly rats, a model of moderate insulin resistance, and in the HepG2 cells

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

25

Rashid, Sherzad Khorsheed. "The endothelial dysfunction in portal hypertension : role of the oxidative stress and angiotensin system." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ096/document.

Full text

Abstract:

[...]L'ensemble de nos études soulignent le rôle important du stress oxydant qui est lié à la stimulation du SRAA dans la survenue de la dysfonction endothéliale chez le rat présentant une cirrhose biliaire. L'action sur des facteurs pouvant induire le stress oxydant comme la translocation bactérienne et le traitement par des antioxydants (polyphénols) ont clairement montré leurs actions bénéfiques chez nos rats cirrhotiques. Le rôle du NO, en tous cas en tant que vasodilatateur pur, n'est peut-être pas primordial ce qui peut expliquer les résultats décevants en clinique publiés parcertains auteurs [...]The important role of oxidative stress in the development of endothelial dysfonction in rats with biliary cirrhosis is emphasized in our studies. Oxidative stress is associated with the stimulation of the RAAS and bacterial translocation. Treatment with antioxidants (polyphenols) and probiotics have clearly demonstrated their beneficial effects on the endothelial dysfonction in our cirrhotic rats. The role of NO as a pure vasodilator is perhaps not essential which may explain the disappointing clinical results published by some authors

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

26

Gasser, Adeline. "Découverte et mise en évidence des effets cardioprotecteurs du premier agoniste non-peptidique du récepteur-1 des prokinéticines." Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ078/document.

Full text

Abstract:

Les prokinéticines sont des hormones angiogéniques qui exercent leurs fonctions biologiques par l’intermédiaire de deux récepteurs couplés aux protéines G : PKR1 et PKR2. PKR1 a été révélé comme crucial dans l’homéostasie cardiovasculaire. L’objectif de ce projet de thèse était de développer un nouvel agoniste non–peptidique à PKR1 pour la cardioprotection et la régénération cardiaque. Les premiers résultats ont permis de caractériser le premier ligand spécifique à PKR1 : IS20. L’étude in vivo a démontré qu’IS20 est capable de prévenir les lésions après induction d’un infarctus du myocarde chez la souris. Ce composé améliore les fonctions cardiaques en activant la prolifération de cellules progénitrices cardiaques et la néovascularisation (Gasser et al, PlosOne, 2015). Dans une deuxième étude, nous avons évalué le potentiel cardioprotecteur d’IS20 face à la toxicité induite par la doxorubicine (DOX), un anticancéreux de la famille des anthracyclines très efficace mais cardiotoxique. Les résultats montrent qu’IS20 atténue l’apoptose des cardiomyocytes H9c2 et des cellules progénitrices humaines de types EPDC, induite par la doxorubicine, sans affecter la cytotoxicité de la doxorubicine sur les cellules cancéreuses. In vivo, le traitement par IS20 atténue la diminution de la prolifération provoquée par la doxorubicine dans un modèle de cardiotoxicité juvénile. Dans un modèle de cardiotoxicité chronique, IS20 maintient l’intégrité cellulaire et tissulaire des vaisseaux et protège des défaillances produites par DOX. Par ses effets cytoprotecteurs des cardiomyocytes et des cellules progénitrices cardiaques, l’IS20 présente un potentiel thérapeutique prometteur pour protéger les patients cancéreux des effets cardiotoxiques des anthracyclines Prokineticins are angiogenic hormones that activate two G protein-coupled receptors (GPCRs): PKR1 and PKR2. PKR1 has emerged as a critical mediator of cardiovascular homeostasis and cardioprotection. The aim of this thesis project was to develop a first non-peptide PKR1 agonist stimulates cardioprotection and cardiac regeneration in mouse model of myocardial infarction (MI) or anti-cancer drug mediated cardiotoxicity. Collaboration with chemist and biomodelization team, we characterized the first selective/specific PKR1 agonist, named IS20. In vivo study demonstrated IS20 prevented cardiac lesion formation and improved cardiac function after myocardial infarction in mice, promoting proliferation of cardiac progenitor cells and neovasculogenesis (Gasser et al., 2015). Since use of a very potent anthracycline chemotherapeutic, Doxorubicin (DOX) is limited by cardiotoxicity, we hypothesized that IS20 could protect heart against DOX-mediated cardiotoxicity. Indeed, IS20 attenuated apoptosis induced by DOX in H9c2 cardiomyocytes and human epicardial progenitors in vitro. However, IS20 did not affect antineoplastic or cytostatic effect of DOX in cancer cell lines. In vivo, in the juvenile model of cardiotoxicity, IS20 significantly attenuated DOX-induced decrease in viability and proliferation cardiac progenitor cells. In the chronic cardiotoxicity model by DOX, IS20 improves heart structure and function by the activation of cardiac progenitor cells, diminishing cardiac cell death, improving vascular stability. IS20 has translational potential for cardioprotection in patients with cancer receiving anthracyclines

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

27

Malak, Abbas. "Role of vascular microparticles in endothelial senescence : study of their pro-coagulant properties and pharmacological modulation in a porcine model of replicative senescence." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ130.

Full text

Abstract:

Ce travail est consacré au rôle pléotropique des microparticules endothéliales dans la réponse et l'homéostasie vasculaire. Un modèle de sénescence réplicative a été caractérisé en utilisant des cellules endothéliales de coronaires de porc en culture primaire. Ce modèle a mis en évidence des changements drastiques du phénotype endothélial avec la production de ROS, la dépolarisation de la membrane mitochondriale et la surexpression de régulateurs clés du cycle cellulaire incluant p53, p21 et p16. La sénescence a transformé le phénotype endothélial vers un statut procoagulant indiqué par la libération de microparticules (MP). L'induction d'activité Facteur Tissulaire (FT) et une réduction drastique de l'inhibition de l'agrégation plaquettaire due à la sécrétion réduite de NO endothélial. Simultanément, une augmentation importante des protéines du système de l'angiotensine à la surface des cellules sénescentes et des MPs qu'elles émettent a été mesurée. D'autres résultats obtenus avec les MPs circulantes de patients transplantés ou atteints de syndrome coronarien suggèrent l'existence dune boucle d'amplification des effets délétères des MPs au travers de la signalisation Redox et l'altération des fonctions vasculaires résultant d'une sénescence exacerbée. En plus de ses qualités reconnues d'immunosuppresseur, la cyclosporine A (CsA) est un inhibiteur puissant de l'ouverture des pores mitochondriaux (mPTP). Certaines études ont présenté le traitement bref et contrôlé par CsA comme un moyen de limiter les dommages vasculaires de l'ischémie reperfusion.Nos données suggèrent une possible modulation de la sénescence endothéliale induite par les MPs grâce au préconditionnement avec des concentrations faibles de CsA. nos résultats suggèrent aussi que de faibles doses de Cs A peuvent avoir un effet bénéfique dans les pathologies cardiovasculaires lorsque la sénescence est exacerbée et contribue les fonctions vasculaires de l’endothélium This scientific work has tackled the issue of the pleitropic role mediated by endothelial microparticles function and homeostasis. A replicative model of senescence using coronary endothelial cells was set showing drastic phenotype changes characterized by ROS production, mitochondrial membrane depolarization and the up-regulation of key regulators of cell cycle arrest including p53, p21 and p16.Replicative senescence shifted the coronary endothelial phenotype toward a procoagulant status as evidenced by (i) procoagulant MP shedding (ii) enhanced tissue factor (TF) expression and (iii) a marked decrease in the endothelial NO-mediated inhibition of platelet aggregation. In parallel, a drastic up regulation of the angiotensin system could be evidenced at the surface of senescent cells or derived MP. Results obtained with MPs from patients with acute coronary artery syndrome and from grafted patients,suggested a feedback loop disseminating the deleterious effect of circulating MPs redox signaling and alteration of vascular function owing to exaggerated senescence. In addition to its well-known immunosuppressive properties, cyclosporine A (Cs A) is a potent inhibitor of the opening of the mitochondrial permeability transition pore (mPTP), and several reports have indicated that a brief and timely administration of Cs A can limit ischemia-reperfusion injuries. Our data evidenced the possible pharmacological modulation of endothelial MP-mediated senescence by cell preconditioning with low concentrations of Cs A. our data are thus suggestive of a beneficial effect of CsA in cardiovascular disorders where senescence is altering the endothelial vascular functions

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

28

Spaety, Marie-Élodie. "Implication des régulations épigénétiques dans la réponse aux chimiothérapies dans les cancers gastriques : perspectives thérapeutiques." Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ043/document.

Full text

Abstract:

Le cancer gastrique (CG) est traité par résection chirurgicale combinée à une chimiothérapie à base de composés de platine. La résistance croissante aux chimiothérapies renforce la nécessité d’identifier des marqueurs moléculaires robustes pour adapter le traitement et développer des thérapies ciblées. Durant ma thèse, j’ai montré l’importance des voies de l’épigénétique dans le mode d’action de drogues anti-cancéreuses dans le CG. Notamment, j’ai identifié le rôle d’une histone déacétylase, HDAC4, et de plusieurs miRNAs, dont miR-140, dans la réponse au cisplatine. De plus, j’ai démontré que des composés à base de ruthénium ayant des propriétés redox agissent indépendant de l’ADN et de p53 mais affectent certaines régulations épigénétiques. Ceci m’a donc conduit à étudier l’intérêt thérapeutique et les mécanismes sous-jacents d’un traitement combiné associant le cisplatine et des inhibiteurs de HDAC. L’ensemble de ces résultats permet d’ouvrir de nouvelles perspectives dans la compréhension des mécanismes d’action des drogues anticancéreuses dans le CG et dans l’identification de marqueurs pronostiques ou de thérapie innovante plus adaptée Gastric cancer (GC) is treated by surgical resection combined with chemotherapy based on platinum compounds. The increase in chemotherapy resistance reinforces the need to identify robust molecular markers to tailor treatment and develop targeted therapies. During my PhD, I examined the importance of the epigenetic pathways in the mode of action of anticancer drugs in gastric cancer. In particular, I have identified the role of one histone deacetylase, HDAC4, and several miRNAs, including miR-140, in response to cisplatin. Moreover, I have shown that ruthenium compounds having redox properties act independently of DNA and p53 but affect some epigenetic regulations. This then led me to investigate the therapeutic value and the underlying mechanisms of a combined therapy associating cisplatin and HDAC inhibitors. All these results will open new perspectives in the understanding of the mechanisms of action of anticancer drugs in gastric cancer and in the identification of prognostic markers or more appropriate advanced therapy

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

29

Lawson, Roland Fabrice. "Implication de la sérotonine et des récepteurs 5-HT2 dans le remodelage valvulaire cardiaque." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ076/document.

Full text

Abstract:

Un lien entre certaines dysfonctions du système sérotoninergique et la survenue de valvulopathies a été suggéré par les lésions valvulaires observées au cours de l’utilisation chronique de certains agonistes des récepteurs 5-HT2 (dérivés de l’ergot de seigle, fenfluramine) et les atteintes tumorales carcinoïdes (qui entrainent une augmentation des taux de 5-HT circulante). Les lésions dégénératives associent une fibrose, une sténose et/ou une régurgitation des valves pouvant conduire à de nombreuses complications cardiovasculaires. À l’heure actuelle, il n’existe aucune thérapeutique pouvant freiner ou faire régresser les lésions. Nos travaux démontrent à partir de modèles animaux et cellulaires, l’implication effective des récepteurs 5-HT2B et 5-HT2A dans l’initiation des lésions. L’analyse histologique des valves à partir de nos modèles animaux a révélé la contribution des cellules endothéliales au cours des stades précoces. Ces cellules sont des progéniteurs endothéliaux (CD34+) recrutés à partir de la moelle au sein de la valve sous la stimulation des récepteurs 5-HT2 et par un mécanisme intracellulaire impliquant la eNOS. Des travaux ultérieurs permettront de mieux caractériser les différents types cellulaires et les biomarqueurs d’initiation du processus afin de déterminer de nouvelles pistes thérapeutiques Several studies have reported a strong correlation between the development of cardiac valve injury and some dysfunctions of the serotonergic system. Valve lesions are observed during the chronic use of some 5-HT2 receptors agonists (ergot derivates or fenfluramine derivatives) or are secondary to metastatic carcinoid tumours (with increased circulating 5-HT amount). These lesions show fibrosis, with thickened leaflets, valves stenosis and/or regurgitation followed by several cardiovascular complications. There is no medical treatment to stop or alter the natural course of the lesions. Surgical replacement by prosthesis is the only effective therapy. Our study based on animal and cellular pharmacological models, demonstrates the serotonergic system contribution through 5-HT2B and 5-HT2A receptors in the pathogenesis of valve degeneration. Histological analysis of the lesions reveals the contribution of endothelial cells to the initiation process. These cells are probably endothelial progenitors (CD34+) recruited inside the valve implying a NO-dependent mechanism. Further studies will characterize the specific cells to find biomarkers of valve remodelling initiation and at term, will identify best therapeutic targets around the serotonergic system

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

30

Melchior, Meggane. "Caractérisation du contrôle descendant inhibiteur ocytocinergique et de sa modulation par un stress de séparation maternelle néonatale." Thesis, Strasbourg, 2018. http://www.theses.fr/2018STRAJ013/document.

Full text

Abstract:

L’ocytocine est un petit peptide synthétisé par des neurones de l’hypothalamus. Il est connu pour ses rôles dans la reproduction et les interactions sociales, en particulier dans les interactions mère-enfants, mais possède également un effet analgésique endogène. Au cours de cette thèse, j’ai cherché à comprendre plus en détail les circuits qui sous-tendent son effet analgésique. Dans un second temps j’ai cherché à déterminer si une séparation maternelle précoce, qui affecte les interactions mère-enfants, perturbe les réponses à la douleur et l’analgésie ocytocinergique chez la descendance. Ces travaux ont permis d’identifier un groupe de neurones ocytocinergiques dans l’hypothalamus, capables de diminuer la douleur par une double action. D’une part ils inhibent directement la transmission de l’information nociceptive dans la moelle épinière, et d’autre part contrôlent l’activité de neurones à ocytocine libérant la molécule dans la circulation sanguine. Notre étude sur la séparation maternelle démontre qu’elle induit une hypersensibilité à la douleur à l’âge adulte et un dysfonctionnement de l’analgésie endogène ocytocinergique Oxytocin is a small peptide synthesized in hypothalamic neurons. She is well known for its roles in reproduction and social interactions, especially in mother-infant interactions, but also displays analgesic effects. During this thesis, I tried to get a better understanding of the circuits underlying OT analgesia. Then, I tried to determine if neonatal maternal separation, affecting mother-infant interactions, alters adult pain responses and oxytocin analgesia. This work allowed to identify a subgroup of oxytocinergic neurons in the hypothalamus, able to decrease pain through a dual action. They directly inhibit nociceptive transmission in the spinal cord and control the activity of another population of oxytocinergic neurons releasing the peptide in the bloodstream. Our work on maternal separation shows that it induces nociceptive hypersensitivity at adulthood, and a dysfunction in oxytocin analgesia

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

31

Dong, Jihu. "Physiopathologie de cellules souches cancéreuses isolées de glioblastomes primitifs et évaluation pré-clinique de molécules "tête de série" par une approche de biologie et de chimie médicinale." Thesis, Strasbourg, 2015. http://www.theses.fr/2015STRAJ036/document.

Full text

Abstract:

Les glioblastomes sont des tumeurs primaires du cerveau les plus malignes. L’identification des cellules souches cancéreuses de glioblastome (CSGs) a transformé notre vision globale des glioblastomes en révélant une hiérarchie cellulaire au sein de ces tumeurs. Les CSGs sont douées de propriétés d’auto-renouvellement, de différenciation et peuvent entrer en quiescence. Elles sont considérées comme les cellules entretenant les tumeurs, responsables de leur dissémination et des rechutes après traitement. La découverte des CSGs a conduit à un changement de paradigme dans le développement des thérapies anticancéreuses, avec la nécessité de cibler dans le traitement non seulement les cellules de la masse tumorale, mais aussi les CSGs. Un criblage différentiel de la chimiothèque Prestwick réalisé au laboratoire a permis d’identifier le bisacodyl comme une molécule présentant une cytotoxicité spécifique sur les CSGs en quiescence.Cette thèse présente un travail sur la caractérisation des CSGs, la compréhension du mode d’action du bisacodyl, ainsi que l’évaluation de son potentiel thérapeutique sur un modèle 3D in intro et des modèles in vivo Glioblastomas are the most malignant primary brain tumors. The identification of glioblastoma stemcells (GSCs) has transformed our comprehension of those tumors by revealing a hierarchical organization. GSCs can self-renew, differentiate and enter into a quiescent state. They are considered as cells which fuel and as the main culprits of tumor relapse. The discovery of GSCs triggered a change in paradigm for cancer therapy. Indeed to gain in efficacy, therapies need to target, not only the cells forming the bulk of the tumor, but also GSCs particularly resistant and endowed with a high tumorigenic potential. Chemical screening of the Prestwick chemical library in our laboratory, unveiled bisacodyl with a specific activity on quiescent GSCs.This thesis presents work on the characterization of GSCs, study of the mode of action of bisacodyl on GSCs, as well as a preclinical evaluation of bisacodyl on a 3D model in vitro and animal models in vivo

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

32

Amissi, Said. "Potentiel de la formulation EPA/DHA 6/1 à prévenir la dysfonction endothéliale et le remodelage cardiopulmonaire dans l’hypertension artérielle pulmonaire chez le rat." Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ048/document.

Full text

Abstract:

L’hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) est une pathologie affectant les artères pulmonaires de petit calibre entraînant une augmentation des résistances artérielles pulmonaires aboutissant à une défaillance cardiaque droite. La vasoconstriction, le remodelage des artères pulmonaires distales, l’inflammation et le stress oxydant sont de facteurs clés de la pathogénèse de l'HTAP. Nous avons testé les potentiels de la formulation EPA:DHA 6:1 à prévenir l’hypertension pulmonaire et les altérations cardiovasculaires et pulmonaires induites par l’injection de monocrotaline chez le rat. Le traitement des rats monocrotaline avec l’EPA:DHA 6:1 (500 mg/kg/j, p.o) prévient significativement l’élévation de la pression artérielle pulmonaire moyenne, la pression systolique du ventricule droit, diminue le débit cardiaque, l’hypertrophie et la dilatation du ventricule droit. L’EPA:DHA 6:1 réduit également les résistances vasculaires pulmonaires, le remodelage des artérioles pulmonaires et les infiltrations lymphocytaires et macrophagiques. De plus, l’EPA:DHA 6:1 inhibe la production des espèces réactives de l’oxygène, diminue la surexpression des sous-unités p22phox et p47phox de la NADPH oxydase, des cyclooxygénases 1 et 2, des récepteurs ETA et ETB de l’endothéline-1, de la eNOS découplée et améliore la dysfonction endothéliale des artères pulmonaires. L’EPA:DHA 6:1 exercent des effets anti-inflammatoires, antioxydants et vasoprotecteurs et prévient le développement de l’HTAP induite par l’injection de monocrotaline chez le rat Pulmonary arterial hypertension (PAH) is characterized by remodeling of the small pulmonary arteries leading to a progressive increase in pulmonary vascular resistance and right ventricular failure. Pulmonary endothelial dysfunction, inflammation and oxidative stress promote the development of pulmonary hypertension. Omega-3 polyunsaturated fatty acids such as eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acids (DHA) have been shown to protect the cardiovascular system and reduce inflammation and oxidative stress. The present study evaluate the potential of EPA:DHA 6:1 to prevent monocrotaline-induced PAH in rats. EPA:DHA 6:1 treatment (500 mg/kg/d, p.o) prevented the MCT-induced mean pulmonary arterial pressure, right ventricular systolic pressure and decreased cardiac output. EPA:DHA 6:1 also attenuated right ventricular hypertrophy by reducing Fulton’s index and pulmonary arterial remodeling, decreased lymphocytes T and macrophages infiltration. EPA:DHA 6:1 treatment significantly reduced MCT-induced vascular oxidative stress and improved endothelial function in pulmonary arteries. The protective effect of EPA:DHA 6:1 was associated with the prevention of the MCT-induced upregulation of NADPH oxidase subunits (p22phox and p47phox), COX-1 and COX-2, endothelin A and B receptors and uncoupled eNOS in pulmonary arterioles. Our studies show that the EPA:DHA 6:1 formulation exerts anti-inflammatory, anti-oxidant and has a protective vascular effect in the pulmonary arteries, which may contribute to prevent and potentially cure pulmonary hypertension induced by MCT in rat

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

33

Khemais, Sonia. "Induction de la sénescence endothéliale par le high glucose : rôle des transporteurs SGLT1 et SGLT2." Thesis, Strasbourg, 2017. http://www.theses.fr/2017STRAJ081/document.

Full text

Abstract:

La sénescence endothéliale est une étape précoce menant à la dysfonction endothéliale, laquelle favorise la pathogénèse de maladies cardiovasculaires lors du vieillissement physiologique et, de manière prématurée, chez le sujet diabétique. La première étude indique que le stress oxydant favorise l’induction du système angiotensine local menant à la sénescence et la dysfonction endothéliale dans les cellules endothéliales en culture. La deuxième étude indique que l’expression redox-sensible des co-transporteurs sodium-glucose 2 (SGLT2) entraîne via le système angiotensine la sénescence et la dysfonction endothéliale en réponse au high glucose. De plus, les observations indiquent que l’Empagliflozine, un inhibiteur sélectif de SGLT2, et les anthocyanes du jus de cassis sont capables d’inhiber l’induction de la sénescence endothéliale au glucose. De ce fait, le système angiotensine local et le SGLT2 sont des cibles intéressantes pour retarder le vieillissement vasculaire Endothelial senescence is an early step to endothelial dysfunction, known to favor the development of cardiovascular diseases during ageing, or its accelerated form in diabetes. The first in vitro study shows that the activation of the local angiotensin system is favored by the oxidative stress and leads to endothelial senescence and dysfunction. The second study indicates that endothelial senescence and dysfunction in response to high glucose are driven by the redox-sensitive expression of sodium-glucose co-transporters SGLT-2, via the angiotensin system. Moreover, data also indicate that empagliflozin, a SGLT2 selective inhibitor, and anthocyans from black-currant juice can inhibit the glucose-induced endothelial senescence. Therefore, the local angiotensin system and SGLT2 are promising targets to stunt vascular ageing

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

34

Lee, Jung-Ok. "Cardiovascular protective effects of Lindera obtusiloba." Thesis, Strasbourg, 2013. http://www.theses.fr/2013STRAJ005.

Full text

Abstract:

La dysfonction endothéliale est un problème majeur au niveau mondial du fait de son implication dans de nombreuses pathologies. Ainsi, la dysfonction endothéliale est considérée comme un facteur pronostique défavorable dans les maladies cardiovasculaires. Les principaux mécanismes impliqués dans la dysfonction endothéliale sont la réduction de la formation et/ou de la biodisponibilité du monoxyde d’azote (NO), et la présence d’un stress oxydant. Le but de ce travail était d’évaluer des traitements phytothérapeutiques pouvant prévenir et/ou améliorer la dysfonction endothéliale. Le criblage de plus de trois cent plantes en fonction de leur capacité à induire une relaxation vasculaire et une inhibition de la NADPH oxydase (données confidentielles) a conduit à s’intéresser à Lindera obtusiloba. Ensuite, la capacité d’un extrait alcoolique de Lindera obtusiloba (LOE) à améliorer in vitro et in vivo la dysfonction endothéliale en activant la eNOS et en réduisant le stress oxydant a été testée. En conclusion, ces travaux indiquent que LOE possède des effets vasoprotecteurs in vitro et in vivo dans plusieurs modèles expérimentaux comme l’hypertension artérielle induite par l’angiotensine II, le diabète de type 2, l’athérosclérose et la thrombose pulmonaire. Ces effets bénéfiques impliquent, au moins en partie, la stimulation de la formation endothéliale du NO, la réduction du stress oxydant vasculaire via l’inhibition de la NADPH oxydase et l’inhibition de l’agrégation plaquettaire. Ainsi, LOE pourrait être un excellent candidat pour la prévention et/ou le traitement phytothérapeutique des maladies cardiovasculaires associées à une dysfonction endothéliale Endothelial dysfunction is a major worldwide topic because it is an important component and risk factor of a number of common human diseases. Therefore, endothelial dysfunction is considered a hallmark for vascular diseases, and has also been shown to be predictive of future adverse cardiovascular events. The main characteristic is a reduced NO production and bioavailability, and an increased vascular oxidative stress. The goal of the present research was to find a candidate for cardiovascular protective herbal medicine for the treatment of endothelial dysfunction. Through measurement of changes in isometric tension of porcine coronary artery rings, Lindera obtusiloba was selected amongst three hundred plants. Thereafter, the aim of our research was to determine whether an ethanolic extract of L. obtusiloba stems (LOE) improves endothelial dysfunction via activation of endothelial nitric oxide synthase and reduction of oxidative stress oxidase in vitro and in several animal models of cardiovascular diseases, and, if so, to elucidate the underlying mechanism. Altogether, the present findings indicate that LOE has vasoprotective effects both in vitro and in vivo including the Ang II-induced hypertention in rats, a type 2 diabetic mice model, and an atherosclerotic mice model, and a thromboembolism mice model, which involve its ability to stimulate the formation of NO, to reduce oxidative stress in the arterial wall, and to inhibit platelet aggregation. In conclusion, our studies reveal that LOE might be an interesting candidate as a cardiovascular protective herbal medicine in pathologies with endothelial dysfunction

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

35

Chen, Wanyin. "Reprolifilage d'une petite molécule chimique à activité thérapeutique et cellules souches cancéreuses : étude et compréhension du mécanisme d'action du bisacodyl sur les cellules souches cancéreuses isolées de glioblastome." Thesis, Strasbourg, 2017. http://www.theses.fr/2017STRAJ027.

Full text

Abstract:

Les glioblastomes (GBM) sont les formes les plus agressives de tumeurs gliales avec une survie médiane des patients traités n’excédant pas 2 ans. Ce mauvais pronostic est dû, entre autres, à l’hétérogénéité de ces tumeurs avec la présence de cellules souches cancéreuses (CSCs) en prolifération ou quiescentes, particulièrement résistantes aux traitements conventionnels. Cibler ces cellules au sein du microenvironment tumoral hypoxique et acides fait donc partie des thérapies d’avenir des GBMs. Le laxatif bisacodyl a été identifié par criblage de la chimiothèque Prestwick comme un composé induisant la mort par nécrose des CSCs de glioblastome (GSCs en prolifération et en quiescence), uniquement dans des conditions de faible acidité retrouvées également au sein des tumeurs. Une activité antitumorale in vivo a également été démontrée pour ce composé. Cette thèse présente l’identification du mode d’action du bisacodyl dans les GSCs. Celui-ci implique la serine/thréonine kinase WNK1 et ses partenaires, les kinases Akt et SGK1 et des co-transporteurs Na+/HCO3- NBC. Nos résultats ont également révélé un rôle de WNK1 dans la physiopathologie des GSCs Glioblastoma (GBM), the most aggressive glial tumor, is currently incurable with a very short-term patient survival (< 2 years). The heterogeneity of GBM and the presence of highly resistant proliferating and quiescent cancer stem-like cells (CSCs), is largely responsible for poor prognosis in this disease. Thus, new approaches targeting glioblastoma CSCs (GSCs), within the acidic/hypoxic tumor microenvironment, are promising strategies for treating GBM. The laxative bisacodyl was identified in a high throughput screening of the Prestwick chemical library as a compound inducing necrotic cell death in proliferating and quiescent GSCs only in acidic microenvironments similar to those found in tumors. Bisacodyl was further shown to induce tumor shrinking and to increase survival in in vivo GBM models. In this thesis work, we identify bisacodyl’s mechanism of action in GSCs. This mechanism involves the serine/threonine kinase WNK1 and its signaling partners including protein kinases Akt and SGK1 and NBC Na+/HCO3- cotransporters. Our data also highlight a previously unknown role of WNK1 in GSC physiopathology

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

36

Alles, Roxane. "Développement de nouveaux nanovecteurs pour les thérapies anti-HCV/HCC." Phd thesis, Université de Strasbourg, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00998936.

Full text

Abstract:

Ce travail concerne le développement d'un système de vectorisation nanoparticulaire pour l'interférence ARN, constituant une nouvelle proposition thérapeutique applicable à des pathologies virales ou tumorales, et possiblement complémentaire aux traitements existants. La vectorisation de siRNA est ici basée sur l'enrobage multicouche de nanoparticules de phosphate de calcium, la multicouche étant constituée de dépôts alternés de PEI modifié et de siRNA. Ce système permet d'obtenir une efficacité de transfection des cellulaires cibles supérieure à celle des procédés conventionnels et une rémanence fonctionnelle in vitro jusqu'à neuf jours. Les résultats d'interférence ARN obtenus ont permis notamment d'inhiber l'infection par le virus de l'hépatite C jusqu'à 99,95%, l'inhibition de l'expression d'une protéine intrinsèque jusqu'à90,5%, et le ralentissement de la croissance cellulaire dans un modèle 3D mimant une tumeur hépatique jusqu'à 46,5%. Ces nanoparticules pourraient présenter un intérêt majeur, en offrant une action à long terme et en résolvant la plupart des difficultés rencontrées en utilisant des siRNA en thérapie.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

37

Sharma, Rajhans. "Caractérisation et ciblage de la reconnaissance dynamique de Trp37-G lors de l’interaction de la protéine NCp7 de HIV-1 avec des acides nucléiques." Thesis, Strasbourg, 2018. http://www.theses.fr/2018STRAJ014.

Full text

Abstract:

La protéine de la nucléocapside (NC) possède un rôle important dans le cycle de viral du VIH-1 grâce à sa propriété chaperone des acides nucléiques (NA) qui implique la reconnaissance de son résidu Trp37 avec un résidu Guanine de l'acide nucléique cible. Nous avons caractérisé cette reconnaissance dynamique Trp37-G en utilisant des séquences impliquées dans la transcription inverse et l'assemblage de l'ARN génomique. En utilisant les analogues nucléosidiques fluorescents thienoguanosine (thG) et 2-thiényl-3-hydroxychromone (3HCnt), nous avons déterminé l'ensemble des constantes de vitesse cinétiques du mécanisme d’hybridation de la séquence (-)PBS avec (+)PBS en absence et en présence de NC. Nous avons également étudié le rôle du NA sucre dans les complexes NC-ARN et NC-ADN, puisque la protéine NC se lie avec la polarité opposée aux séquences d'ADN et d'ARN. Nous avons confirmé que l'interaction du résidu Trp37 avec les amino-acides de type guanines était critique lors de la formation des complexes avec les deux mutants d’ARN et d’ADN de PBS et de SL3. Enfin, nous avons réalisé un criblage de potentiels inhibiteurs de la protéine NC et examiné les touches identifiées à partir d’un test basé sur la fluorescence de la sonde thG Nucleocapsid protein (NC) plays crucial roles in HIV-1 life cycle through its nucleic acid (NA) chaperoning property that involves recognition of it’s Trp37 residue with a Guanine residue of the target nucleic acid sequences. Herein, we characterized this dynamic Trp37-G recognition with sequences involved in reverse transcription and genomic RNA packaging. Using the fluorescent thienoguanosine (thG) and 2-thienyl-3-hydroxychromone (3HCnt) nucleoside analogues, we determined the whole set of kinetic rate constants for annealing of (-)PBS with (+)PBS in the absence and presence of NC. We also investigated the role of NA sugar in NC-RNA and NC-DNA complexes, as NC binds with opposite polarity to DNA and RNA sequences. We confirmed that the interaction of the Trp37 residue with guanines was critical for the formation of complexes with both RNA and DNA variants of PBS and SL3. Finally, we performed screening of NC inhibitors and tested the selected hits on a thG-based assay

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

Dissertations / Theses on the topic 'Antiviraux – pharmacologie – Dissertations universitaires'

Create a spot-on reference in APA, MLA, Chicago, Harvard, and other styles