Dissertations / Theses: 'Biliaire, sel'

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Olivier, Jean-François. "Influence du pH dans la capacité d'adsorption des sels biliaires et des lysolécithines "in vitro" par les antiacides contenant de l'argile et/ou de l'aluminium." Paris 5, 1995. http://www.theses.fr/1995PA05P110.

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Aignasse, Marie-France. "Etude des mécanismes d'absorption digestive de la ciclosporine "in vitro" et "in vivo"." Paris 5, 1993. http://www.theses.fr/1993PA05P070.

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Fontbonne, Hervé. "Etude de la lipase sel biliaire dépendante du lait humain : spécificité de substrat et activation par le taurocholate de sodium et par les phospholipides et PAF." Aix-Marseille 3, 2009. http://www.theses.fr/2009AIX30044.

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Abstract:

La lipase sels biliaires dépendante (BSDL) est une enzyme à large spécificité de substrats (phospholipides, lysophospholipides mono-, di- et triglycérides, esters de cholestérol et de vitamines A, Ds, et E. . . ). Elle est sécrétée principalement par les cellules acineuses du pancréas et par les glandes mammaires, mais elle est retrouvée aussi dans des tissus tel que le foie les tissus stéroïdogéniques, le plasma, les monocytes-macrophages, les cellules endothéliales et éosinophiles. Dans ce travail, nous avons purifié à l'homogénéité la BSDL à partir du lait humain et caractérisé son comportement cinétique en l'absence ou en présence de différentes concentration du taurocholate de sodium (NaTC) avec comme substrats des esters de para-nitrophénol dont l'acide gras estérifiant varie de 2 à 16 carbones. L'étude a montré que l'activité moléculaire de la BSDL est maximale avec le substrat contenant 8 atomes de carbone dans la chaîne acylée avec un kcat d'environ 3500 s-1, ce qui est du même ordre de grandeur que les activités moléculaires de la lipase et de l'a-amylase pancréatiques. Le sel biliaire active l'enzyme suivant deux phases successives de saturation. La constante de Michaelis est minimale (4 à 30 [micro]M) avec les substrats de taille moyenne (10 et 12 carbones dans la chaîne acylée), tandis qu'elle est de l'ordre du mM avec les substrats courts. L'efficacité catalytique (kcat/km) est maximale (jusqu'à 140. 10° M-1. S-1) avec les substrats de taille moyenne (8 à 12 carbones) en présence de NaTC, mais en son absence, le maximum d'efficacité catalytique n'est observé qu'avec le substrat à 8 carbones. D'un autre côté, l'étude a montré que les acides phosphatidique et lysophosphatidique, ainsi que PAF sont de puissants activateurs de cette enzyme à des concentrations proches des concentrations physiologiques de ces composés. Les phospholipides neutres phosphatidylcholine, lysophosphatidylcholine et phosphatidyléthanolamine n'ont que peu d'influence sur l'activité de cette enzyme
The bile salt dependent lipase (BSDL) is an enzyme with large specificity of substrate (lysophospholipids, phospholipids, mono-, di- and triglycerides, esters of cholesterol and vitamins A D3 and E. . . ). It is secreted principally by the acinar cells of the pancreas and mammary glands, but it is found also in the liver, the steroidogenic tissue, the plasma, the monocyte-macrophage and the endothelial and eosinophil cells. In this work, we have purified the BSDL from human milk and characterized its kinetic behavior with different concentrations of sodium taurocholate (NaTC) using as substrates the esters of para-nitrophenol whose esterifying fatty acid vary of 2 to 16 carbons length. This study has shown that turn over for BSDL is maximal with substrate containing 8 carbons on acyi chain, with a kcu approximately 3500 s-1, value in range of catalytic constants of lipase and a-amylase pancreatic. The bile salt activated enzyme, follows 2 successive saturation phases. The Michaelis constant is minimal (4 to 30 [micro]M) with medium size substrates (8 to 12 carbons) whereas it is in millimolar range. The maximal catalytic efficiency is maximal (140. 10[6]M-1. S-1) with medium tall substrate, with NaTC, but in its absence, the maximal catalytic efficiency is observed with substrate with acyi length of 8 carbons. Furthermore, the study has shown that phosphatidic and lysophosphatidic acids as well as PAF are strong activators of the enzyme at concentrations close to physiological concentration of these compounds. The neutral phospholipids such as phosphatidylcholine, lysophosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine have no impact on the enzyme activity

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Legrand-Defretin, Véronique. "Dynamique du recyclage enterohepatique des acides biliaires totaux et individuels chez le porc." Paris 7, 1988. http://www.theses.fr/1988PA077101.

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Pean, Noémie. "Récepteur TGR5 des acides biliaires : impact sur la régénération du foie et l'homéostasie biliaire." Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077055.

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Abstract:

La composition en AB était plus hydrophobe chez les souris TGR5-K0 par rapport aux souris WT Après HP, une importante nécrose hépatique, une cholestase prolongée, une réponse inflammatoire excessive et un retard de régénération hépatique ont été observés chez les souriE TGR5-KO. La réponse adaptative rénale et biliaire à la surcharge en AB après HP ont fortement été détériorées chez les souris TGR5-K0 par rapport aux souris WT. Le traitement par la cholestyramine et la déplétion en Kupffer, ont significativement amélioré le phénotype des souris TGR5-K0 après HP. Après une ligature de la voie biliaire principale ou un régime enrichi en CA, les TGR5-K0 avaient des lésions hépatiques plus importantes que les souris WT, ainsi qu'une altération de l'élimination urinaire des AB. Chez les souris TGR5-KO, la synthèse hépatocytaire des AB et le shunt cholécystohépatique n'étaient pas altérés, en revanche, un déficit de relaxation vésiculaire et une hyperperméabilité paracellulaire de l'épithélium biliaire étaient observés par rapport aux WT. Le récepteur TGR5 est crucial pour protéger le foie contre la surcharge en AB après HP, principalement par le contrôle de l'hydrophobicité du pool d'AB et de la sécrétion de cytokines. En absence du récepteur TGR5, la stagnation de bile anormalement hydrophobe et l'excès d'inflammation, associés à l'altération du flux biliaire et de l'élimination urinaire des AB, mènent à une surcharge en AB, à l'origine des lésions hépatiques et du retard de régénération. Le récepteur TGR5 contrôlerait l'hydrophobicité du pool d'AB via le contrôle de la fonction motrice de la vésicule biliaire et régulerait la perméabilité de l'épithélium biliaire
BA composition (plasma, liver, bile, urine, stools) was more hydrophobic in TGR5-KO than in W1 mice. After PH, severe hepatocyte necrosis, prolonged cholestasis, exacerbated inflammatory response and delayed regeneration were observed in TGR5-KO mice. Hepatocyte adaptive response to post-PH BA overload was similar in WT and TGR5-KO mice. However, kidney and biliary adaptive responses to post-PH BA overload were strongly impaired in TGR5-KO as compared with WT mice. Cholestyramine treatment, as well as Kupffer cell depletion, significantly improved the post-PH TGR5 KO mice phenotype. After bile duct ligation or upon a cholic acid-enriched diet, TGR5 KO mice exhibited more severe liver injury than WT as well as impaired BA elimination in urine. In TGR5-KO mice, hepatic bile acid synthesis and cholecystohepatic shunt were not altered, but gallbladder relaxation and biliary epithelium hyperpermeability were observed as compared to WT mice. TGR5 is crucial for liver protection against BA overload after PH, primarily through the control of bile hydrophobicity and cytokine secretion. In the absence of TGR5, intrahepatic stasis of abnormally hydrophobic bile and excessive inflammation, in association with impaired bile flow adaptation and deficient urinary BA efflux, lead to BA overload-induced liver injury and delayed regeneration. TGR5 may control both bile acid pool hydrophobicity via the control of gallbladder motor function, and epithelial permeability in the biliary tract

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Grill, Jean-Pierre. "Étude du potentiel probiotique de bactéries du genre Bifidobacterium : purification et caractérisation de la fructose 6 phosphate phosphocetolase de Bifidobacterium longum et Bifidobacterium animalis." Nancy 1, 1995. http://www.theses.fr/1995NAN10050.

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Abstract:

Cette étude a permis de montrer les effets de certaines souches de bactéries appartenant au genre Bifidobacterium sur la flore intestinale, les nitrites, les nitrosamines et les sels biliaires. L’enzyme impliquée dans la déconjugaison des sels biliaires a été purifiée et caractérisée pour la souche de Bifidobacterium longum BB536. La fructose 6 phosphate phosphocétolase a été purifiée et caractérisée chez différentes souches de bifidobactéries. Des séquences en acides aminés de cette protéine ont ainsi été obtenues pour Bifidobacterium longum et Bifidobacterium animalis

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Aubert-Jousset, Emeline. "Etudes structurales et fonctionnelles de la lipase sels biliaires-dépendante." Aix-Marseille 2, 2004. http://www.theses.fr/2004AIX20687.

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Abstract:

La Lipase sels biliaires dépendante (BSDL) est une enzyme sécrétée par les cellules acineuses du pancréas. Elle hydrolyse des esters du cholestérol en présence de sels biliaires au niveau duodénal. Lors de cette étude, nous avons caractérisé le rôle des deux aires chargées positivement à la surface de l'enzyme. L'aire basique N-terminale, constituée des résidus K32/K56/K61/K62/R63, correspond au site spécifique de liaison des sels biliaires primaires associé avec l'activation de l'enzyme. L'aire basique distale, constituée des résidus R423/K429/R454/R458/K462, correspond au site non-spécifique ou pré-micellaire de fixation des sels biliaires, qui est impliqué dans la fixation de l'enzyme aux micelles. Nous avons aussi mis en évidence la présence d'une séquence sur la BSDL présentant une homologie de structure avec la boucle V3 de la gp120 du VIH-1 et montré son implication dans la fixation de l'enzyme aux radeaux lipidiques membranaires durant son processus de sécrétion
The Bile salt-dependent lipase (BSDL) is an enzyme secreted by the acinar pancreatic cell. It hydrolyses esters of cholesterol in the presence of bile salts in the duodenum. During this study, we have characterized the role of two positively charged clusters at the surface of the enzyme. The basic N-terminal cluster, consisting of positive residues K32/K56/K61/K62/R63, corresponds to the specific binding site of primary bile salts, which is associated to the activation of the enzyme. The basic distal cluster, consisting of positive residues R423/K429/R454/R458/K462 corresponds to the non-specific or pre-micellar bile salt-binding site which is involved in the binding of the enzyme to micelles. We have also highlighted the presence of a domain on the BSDL which shows a structure homology with the V3 loop of the glycoprotein gp120 of the HIV-1 and shown its implication in the binding of the enzyme to the rafts of the membrane during its process towards secretion

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Nganga, Alain. "Implication de la Grp94 dans la sécrétion de la lipase sels biliaires dépendante." Aix-Marseille 2, 2001. http://theses.univ-amu.fr.lama.univ-amu.fr/2001AIX20667.pdf.

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Abstract:

ALa lipase sels biliaires dépendante (BSDL, EC 3. 1. 1. 13) est une enzyme pancréatique qui catalyse l'hydrolyse les esters de cholestérol. Elle est synthétisée et stockée dans les granules de zymogènes des cellules acineuses puis sécrétée dans le suc pancréatique avant d'être deversée dans le duodénum où elle va exercer sa fonction physiologique. Au cours de sa sécrétion, et contrairement aux autres enzymes pancréatiques, la BSDL se lie aux membranes intracellulaires depuis le RE jusqu'au trans-Golgi. Cette liaison se fait via la Grp94, une protéine chaperonne faisant partie d'un complexe membranaire de structuration. Au cours de notre étude, nous nous sommes d'abord intéressés au rôle de la 0-glycosylation dans la sécrétion de la BSDL. A partir de deux lignées cellulaires CHO transfectées et exprimant la BSDL, une lignée CHO KI sauvage et une lignée CHO-ldlD défective pour la 0-glycosylation, nous avons montré que le taux de sécrétion de la BSDL dépendait de la capacité de la cellule à 0-glycosyler les protéines, alors que le déficit sécrétoire de la BSDL constaté avec les cellules CHO-ldlD se traduisait par une dégradation de l'enzyme. Nous nous sommes ensuite intéressés au rôle joué par la Grp94 dans la sécrétion de la BSDL en utilisant deux approches, une affectant le taux de traduction de la Grp94 par l'utilisation d'un ribozyme spécifique de l' ARNm de la Grp94 et l'autre utilisant la geldanamycine, une drogue qui empêche l'interaction entre la Grp94 et ses substrats. Avec ces deux approches, nous avons montré d'une part que la sécrétion de la BSDL était dépendante de l'intégrité de la fonction de la Grp94 et d'autre part que les molécules de BSDL qui ne peuvent pas s'associer à la Grp94 sont instables et seraient dégradées. L'utilisation d'inhibiteurs du protéasome (MG 132, LLnL et la lactacystine) et des anticorps anti-BSDL et anti-ubiquitine, nous a permis de mettre en évidence un variant ubiquitinylé de la BSDL et _de suggérer que l'élimination de la protéine non compétente pour la sécrétion se impliquait une dégradation par le protéasome après une étape d'ubiquitinylation
Bile salt-dependent lipase (BSDL, EC 3. 1. 1. 13) is a pancreatic enzyme which catalyses the hydrolysis of cholesteryl esters. This enzyme is synthesized and stocked within zymogen granules then secreted as a pancreatic juice component before to be diverted to the duodenum where it exerts it physiological function. During secretion and opposite to other pancreatic enzymes, BSDL is associated with intracellular membranes from the ER up to the trans-Golgi. This association implicates a folding complex involving the chaperone Grp94. In this study we first were interested in the role of the 0-glycosylation in BSDL secretion. Two cells lignes, the wild-type CHO-KI and the 0-glycosylation deficient CHO-ldlD lignes were transfected with full-length cDNA of the rat BSDL. Results suggested that the secretion of BSDL was depending upon the cell capacity to 0-glycosylate BSDL, and that BSDL deficient for the 0-glycosylation was likely degraded. We then attempted to delineate the role of the Grp94 in the BSDL secretion. For this purpose we use (i) a ribozyme that specifically decreases the expression of the chaperone and (ii) geldanamycine, a drug that affects the binding of the Grp94 to its substrate. Data indicated that the BSDL secretion is depending on its interaction with the chaperone and that BSDL molecules that are not structurated or associated with Grp94 during cell transport are unstable and degraded. Further results using proteasome inhibitors and antibodies to ubiquitin suggested that BSDL molecules uncompetent for the secretion are ubiquitinated and degraded by the proteasome

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Aloulou, Ahmed. "Etude biochimique de la lipase LIP2 de Yarrowia lipolytica, candidat pour le traitement de l'insuffisance pancréatique exocrine." Aix-Marseille 2, 2007. http://www.theses.fr/2007AIX22043.

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Abstract:

Les échecs thérapeutiques des préparations de pancréatine dans certains cas d’insuffisance pancréatique exocrine (IPE), en particulier quand le pH du tractus gastro-intestinal est très bas, seraient dus aux différents potentiels de dissolution des microsphères gastro-protégées et/ou à l’inactivation des enzymes pancre��atiques par l’acidité. Des enzymes, notamment des lipases, de différentes origines, surexprimées par génie génétique sont activement recherchées pour l’enzymothérapie de substitution. Néanmoins, ces lipases cibles devraient répondre à certains critères, garantissant leur efficacité au niveau du tractus digestif des patients. La caractérisation biochimique de la lipase LIP2 de la levure Y. Lipolytica (YLLIP2) montre qu’elle n’est pas inhibée par les sels biliaires et présente une assez bonne stabilité aux pH acides. Sa régiosélectivité (1,3) est comparable à celle des lipases pancréatiques. YLLIP2 est la lipase qui présente l’activité la plus élevée connue à ce jour sur les triglycérides à chaines longues notamment à pH acide. YLLIP2 semble être alors un bon candidat pour le développement d’un médicament pour le traitement de l’IPE. La structure 3D fermée d’YLLIP2 montre une forte homologie structurale avec la lipase de T. Lanuginosus (TLL). Les différences structurales les plus prononcées se situent au niveau des boucles de surface, régions d’insertions et de délétions, incluant le volet
Therapeutic failures of pancreatin preparations in certain cases of pancreatic exocrine insufficiency (Bonini, et al. ), in particular when gastro-intestinal pH is very low, would be due to the enteric-coated microspheres dissolution potentials and/or to the inactivation of pancreatic enzymes by acidity. Genetic engineering overexpressed enzymes, in particular lipases, from various origins, are actively required for the enzyme replacement therapy. Nevertheless, these target lipases should provide certain criteria, guaranteeing their effectiveness in the digestive tract of patients. The biochemical characterization of LIP2 lipase from the yeast Y. Lipolytica (YLLIP2) shows that it is not inhibited by bile salts and has a rather good stability at the acidic pH. Its regioselectivity (1,3) is comparable with that of pancreatic lipases. YLLIP2 is the lipase which, to date, presents the highest known activity on long-chain triglycerides in particular at acid pH. YLLIP2 seems to be then a good candidate for the development of a drug for the treatment of PEI. The closed 3D structure of YLLIP2 shows a strong structural homology with the lipase of T. Lanuginosus (TLL). The most pronounced structural differences occur, as expected, in the regions of insertions and deletions, all of which are found in surface loops, which include the lid

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Ploton, Maheul. "Impact de la phosphorylation de FXR par la PKA sur son activité transcriptionnelle et sur la régulation de la néoglucogenèse hépatique." Thesis, Lille 2, 2018. http://www.theses.fr/2018LIL2S032/document.

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Abstract:

L’homéostasie glucidique est, durant un jeûne normal, maintenue grâce à un réseau de régulation complexe contrôlé principalement par le glucagon, produit par le pancréas. S’opposant aux effets de l’insuline, celui-ci orchestre notamment l'utilisation, le stockage et la synthèse du glucose par le foie, principal organe de production du glucose au cours du jeûne. Cette dernière s’effectue d’abord suite à la dégradation du glycogène ou glycogénolyse puis par la synthèse de novo de glucose ou néoglucogenèse. La néoglucogenèse hépatique est contrôlée par la modulation de l’activité et/ou de l’expression de différentes enzymes-clefs selon des mécanismes allostériques ou transcriptionnels.De multiples facteurs de transcription sont impliqués dans la régulation, au niveau transcriptionnel, de la néoglucogenèse hépatique. Le récepteur nucléaire des acides biliaires FXR est exprimé dans le foie et dans plusieurs organes impliqués dans le maintien de l’homéostasie glucidique. FXR participe à la régulation de nombreuses fonctions hépatiques essentielles, en contrôlant notamment les métabolismes des acides biliaires et lipidique. Le rôle exact de FXR sur la néoglucogenèse reste toujours débattu. L’objectif de cette thèse a donc été d’étudier le rôle de FXR dans le contrôle de la néoglucogenèse hépatique dans des conditions expérimentales reflétant certains aspects du jeûne. Nous avons démontré que FXR, en présence de glucagon, régulait positivement la néoglucogenèse selon deux mécanismes.Le premier mécanisme implique la phosphorylation de FXR par la PKA, une kinase activée par le glucagon. Cette modification post-traductionnelle de FXR permet une induction synergique de l’expression des enzymes-clefs de la néoglucogenèse par FXR et le facteur de transcription CREB. L’identification de ce mécanisme constitue la majeure partie des travaux présentés dans cette thèse. Ceux-ci ont été intégrés à des travaux menés précédemment dans le laboratoire qui nous ont permis d’identifier un mécanisme additionnel de régulation de la gluconéogenèse. L’interaction directe de FXR avec le facteur de transcription FOXA2, lui-même activé par le glucagon, inhibe la capacité de FXR à induire l’expression de SHP, un récepteur nucléaire inhibiteur de la néoglucogenèse.Ce travail a donc permis d’identifier pour la première fois que la néoglucogenèse hépatique est régulée positivement par FXR dans le cadre de la voie de signalisation du glucagon. Pour cela, FXR intègre le signal « glucagon » par deux mécanismes distincts: via une modification post-traductionnelle, sa phosphorylation par la PKA sur les sérines S325 et S357 et via une interaction protéine-protéine avec FOXA2
Glucose homeostasis is maintained during normal fasting through a complex regulatory network controlled mainly by glucagon, a pancreatic hormone. Opposing the effects of insulin, it orchestrates the glucose use, storage and synthesis by the liver, the main organ that produces glucose during fasting. The latter is carried out first by the degradation of glycogen or glycogenolysis and then by de novo glucose synthesis or gluconeogenesis. Hepatic gluconeogenesis is controlled by modulation of various key enzymes activity and/or expression according to allosteric or transcriptional mechanisms.Multiple transcription factors are involved in the transcriptional regulation of hepatic gluconeogenesis. The nuclear bile acid receptor FXR is expressed in the liver and in several organs involved in glucose homeostasis. FXR regulates many essential liver functions, including controlling bile acid and lipid metabolism. The exact role of FXR on gluconeogenesis is still debated. The objective of this work was therefore to study the role of FXR in the control of hepatic gluconeogenesis under experimental conditions reflecting certain aspects of fasting. We demonstrated that FXR, in the presence of glucagon, positively regulated gluconeogenesis according to two mechanisms.The first mechanism involves phosphorylation of FXR by PKA, a glucagon-activated kinase. This FXR post-translational modification allows synergistic induction of key gluconeogenic enzymes expression by FXR and the CREB transcription factor. This mechanism identification constitutes the major part of the work presented in this thesis. These were integrated with work previously conducted in the laboratory that allowed us to identify an additional mechanism for regulating gluconeogenesis. The FXR direct interaction with the transcription factor FOXA2, itself activated by glucagon, inhibits the ability of FXR to induce the expression of SHP, a gluconeogenesis inhibitory nuclear receptor.This work has therefore identified for the first time that hepatic gluconeogenesis is positively regulated by FXR in the glucagon signalling pathway. For this, FXR integrates the "glucagon" signal by two distinct mechanisms: via post-translational modification, its phosphorylation by PKA on S325 and S357 serines and via protein-protein interaction with FOXA2

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Foucaud, Laurent. "Régulation nutritionnelle, hormonale et biliaire de l'expression des FABP du tractus digestif." Dijon, 1997. http://www.theses.fr/1997DIJOS065.

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Abstract:

Dans la cellule, les lipides sont pris en charge par différentes protéines de transport spécifiques. Parmi ces dernières, les fatty acid-binding protein (FABP) jouent un role essentiel du fait qu'elles lient les acides gras à longues chaines (AGLC) et les sels biliaires. Au niveau du tractus digestif, trois FABP sont exprimées : la liver- FABP (L- FABP), l'intestinal- FABP (I-fabp) et l'iléal bile acid-binding protein (I-BABP). Le but de notre travail a été d'étudier la régulation de l'expression de ces trois protéines afin de préciser leurs rôles respectifs au niveau de deux organes cibles, le foie et l'intestin. Nous avons dans un premier temps mis en évidence l'existence d'une induction de la L- FABP d'origine post-transcriptionnelle au cours de la gestation et de l'allaitement. La recherche de l'origine de cette régulation physiologique nous a amené dans un deuxième temps à étudier l'influence de certaines hormones sur l'expression de la L- FABP du foie. Il a été ainsi démontré que les glucocorticoïdes provoquent une diminution de l'expression de la L- FABP qui pourrait être consécutive a une chute de la teneur intracellulaire en AGLC non liés. Finalement, l'impact de la sécrétion biliaire sur ces 3 FABP a été abordée. Au niveau du foie, nous avons observé l'existence d'une fuite cellulaire de la L- FABP. Au niveau intestinal, certains sels biliaires sont capables d'induire la transcription du gène de l'I-BABP. Des résultats préliminaires indiquent qu'une régulation similaire interviendrait dans le contrôle de l'expression du gène de la I- FABP. Ces résultats suggèrent que les FABP sont régulées par leurs propres ligands. Au niveau fonctionnel, la L- FABP est indispensable au transport des AGLC. La I- FABP interviendrait non seulement dans le transport des AGLC mais également dans le transport passif des sels biliaires au niveau du jéjunum distal et de l'iléon proximal. Enfin l'I-BABP est indispensable au transport actif des sels biliaires au niveau de l'iléon distal.

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Andrieux, Karine. "Interactions des sels biliaires et des phospholipides : application a la transition vesicule-micelle (doctorat : pharmacotechnie et biopharmacie)." Paris 11, 2000. http://www.theses.fr/2000PA114805.

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Olier, Maïwenn. "Caractérisation de souches de portage asymptomatique de Listeria monocytogenes isolées chez l'homme : évaluation des capacités invasives et étude de leur survie en milieu acide et en présence de sels biliaires." Dijon, 2003. http://www.theses.fr/2003DIJOS014.

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Franceschi, Cécile. "Bases fondamentales d’une immunothérapie des cancers du pancréas exocrine par activation des cellules dendritiques." Aix-Marseille 3, 2007. http://www.theses.fr/2007AIX30072.

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Abstract:

Le cancer du pancréas exocrine, un des plus agressifs, présente un diagnostic tardif et reste peu sensible aux traitements conventionnels. Il est donc essentiel de développer de nouvelles approches diagnostiques et thérapeutiques de ce cancer. Nous avons mis en évidence l’expression par la cellule tumorale pancréatique des glycotopes J28 et 16D10 portés par les glycoisoformes pathologiques de la Lipase Sels Biliaires Dépendante (BSDLp-J28, BSDLp-16D10). Cette expression nous a permis d’envisager une approche d’immunothérapie des cancers du pancréas basée sur l’activation des cellules dendritiques (DC) par une BSDLp-J28. Ainsi, nous avons déterminé les mécanismes de capture et de transport de la BSDLp-J28 par les DC et montré que cette BSDLp-J28 pouvait induire en partie la maturation des DC permettant l’activation des lymphocytes T naïfs. De plus, avons également produit et purifié le glycotope J28 recombinant afin de l’utiliser en immunothérapie. Enfin, après avoir identifié la BSDL dans les urines de sujets sains, nous avons montré la présence de la BSDLp-J28 dans les urines de sujets atteints d’adénocarcinomes pancréatiques
Ductal pancreatic adenocarcinoma, one of the most agressive cancers, shows a late diagnosis and is not sensitive to conventional treatments. Therefore it is necessary to develop new diagnostic and therapeutic approaches of this cancer. We have previously shown the expression by pancreatic tumoral cells of the J28 and 16D10 glycotopes carried by pathologic glycoisoforms of the bile salt dependant lipase (pBSDL-J28, pBSDL-16D10). The presence of these glycotopes at the cell surface allows us to intend experimental approaches using activated dendritic cells (DC) by pBSDL-J28. We have determined the uptake, and transport mechanisms of pBSDL-J28 by DC. We showed that pBSDL-J28 could induce the maturation of DC leading to lymphocyte T activation. Furthermore, we also produced and purified recombinant J28 glycotopes of pBSDL that could be used in immunotherapy. Last, after identification of BSDL in the urines of healthy subjects, we showed the presence of pBSDL-J28 in the urines of subjects suffering of pancreatic adenocarcinoma

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Warchol, Magda. "Etude de l'épimérisation de sels biliaires 7α-hydroxylés par Clostridium absonum ATCC 27 555." Nancy 1, 2003. http://www.theses.fr/2003NAN10158.

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Abstract:

Clostridium absonum ATCC 27555 synthétise trois hydroxystéroi͏̈de déshydrogénases inductibles réalisant l'épimérisation de sels biliaires 7a-hydroxylés. Dans des cultures en fermenteur dans un milieu complexe, l'induction de ces enzymes par l'acide chénodésoxycholique était maximale lorsque ce substrat était ajouté pendant la croissance, dans les conditions d'un effet limitant du glucose et du pH sur la production de biomasse et des acides organiques. Dans des cultures continues en milieu chimiquement défini, en présence de l'acide chénodésoxycholique les flux carbonés étaient réorientés en favorisant la production d'acétate et d'énergie, aux dépens de la réoxydation des facteurs nucléotidiques, pour assurer l'épimérisation de cet acide. Certaines propriétés des hydroxystéroi͏̈de déshydrogénases purifiées ont été étudiées. Ces résultats soutiennent l'hypothèse que l'épimérisation de l'acide chénodésoxycholique puisse représenter un processus de détoxification
Clostridium absonum ATCC 27555 synthesize three inducible hydroxysteroid dehydrogenases which ensure epimerization of 7a-hydroxylated bile salts. In cultures in fermentor in complex medium, induction of these enzymes by chenodeoxycholate was maximum when this substrate was added during growth, in condition of a limiting effect of glucose and pH on the production of biomass and organic acids. In continuous cultures in chemically defined medium, in the presence of chenodeoxycholate the carbon flows were reoriented favoring the production of acetate and energy, at the expense of the reoxydation of nucleotidic cofactors, so as to ensure epimerization of this acid. Some properties of the purified hydroxysteroid dehydrogenases was studied. These results support the hypothesis that epimerization of chenodeoxycholate may represent a detoxification process

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Xupei, Huang. "Contribution à l'étude de l'activation de la protéine kinase C par deux familles de promoteurs de tumeurs : les sels biliaires et les acides gras insaturés." Paris 12, 1992. http://www.theses.fr/1992PA120015.

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Abstract:

Les sels biliaires (sb) et les acides gras insatures (agi) sont des promoteurs de tumeurs impliques notamment dans le cancer colorectal. Les esters de phorbol, puissants promoteurs, ont pour cible la proteine kinase c (pkc) qu'ils activent en se substituant aux diglycerides (dg), ses activateurs physiologiques. La pkc joue un role-cle dans la transduction des signaux mitogeniques. L'objet de cette these est de contribuer a la comprehension du mecanisme de l'action promotrice des sb et des agi par l'etude de leurs effets sur la pkc. Les modeles d'etude ont ete le desoxycholate de sodium (doc) et l'acide arachidonique (aa) dans leurs effets sur l'enzyme purifiee de cerveau et les cellules intactes. Aa et doc activent la pkc en des sites differents de celui des esters de phorbol. L'etude des proprietes de cette activation par doc, et aa a fortes doses, ont revele qu'ils agissent selon des modes differents. Les effets du doc et de aa ont ete etudies dans les cellules tumorales de colon (ht29 cl. 19a) par la secretion de cl#, la phosphorylation des substrats endogenes de la pkc et les teneurs cellulaires en seconds messagers. En conclusion, ces resultats etablissent que les sb et les agi possedent la propriete d'activer directement la pkc. Cependant, leurs effets sur le taux des seconds messagers dans la cellule tumorale de colon indiquent que les sb peuvent aussi agir via l'activation de la voie des polyphosphoinositides en amont de la pkc et que les agi peuvent activer d'autres voies de transduction

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Claudel, Thierry. "Rôle du récepteur nucléaire FXR dans le métabolisme lipidique." Lille 2, 2003. http://www.theses.fr/2003LIL2P005.

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Haikal, Ziad. "Régulations nutritionnelles de l'absorption intestinale du cholestérol : effets des glucides et des sels biliaires." Aix-Marseille 2, 2008. http://www.theses.fr/2008AIX20654.

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Abstract:

Il existe une grande variabilité inter-individuelle dans nos capacités à absorber le cholestérol, mais l’origine de cette disparité n’est pas encore parfaitement élucidée. Actuellement, plusieurs protéines présentes à la surface de l’entérocyte sont décrites comme candidats potentiels de l’absorption du cholestérol, mais les mécanismes intestinaux et les modes de régulation de ces transporteurs sont mal connus. Dans le cadre de ce travail, nous avons étudié deux mécanismes de régulation de l’absorption intestinale du cholestérol par des études in vitro sur des cellules issues du clone TC7 de la lignée humaine Caco-2. Ce clone exprime les transporteurs du glucose des cellules intestinales saines et ses capacités d’absorption des lipides ont été validées. Dans la première partie du travail, nous avons mis en évidence une régulation par le glucose et le galactose de l’absorption du cholestérol par les cellules TC7. Cette voie de régulation nécessite l’implication du transporteur commun du glucose et du galactose, SGLT1, et met en jeu une voie de signalisation par les protéines kinases C. Nous avons montré également que la cible de cette voie de régulation est le transporteur intestinal SR-BI. Dans la deuxième partie du travail, nous avons étudié la régulation de l’absorption du cholestérol par la taille et la composition des structures solubilisant le cholestérol. D’abord, nous avons montré que la captation apicale du cholestérol dissous dans les particules de petite taille est beaucoup plus efficace que celui du cholestérol dissous dans les particules de grande taille, les petites particules ayant un meilleur accès aux transporteurs apicaux SR-BI et NPC1L1. Ensuite, nous avons montré que les sels biliaires régulent l’absorption du cholestérol en agissant sur NPC1L1 et en augmentant son taux d’expression. L’ensemble de nos résultats montre que l’absorption du cholestérol est un processus complexe multifactoriel. La nature des glucides ingérés et la structure physico-chimique des particules solubilisantes (taille et composition) jouent vraisemblablement un rôle important dans ce processus, ce qui pourrait expliquer en partie, les grandes variabilités inter-individuelles dans nos capacités à absorber le cholestérol alimentaire et/ou endogène
There is an important inter-individual variability in our capacities to absorb cholesterol, but the origins of this disparity still haven’t been elucidated. Nowadays, many proteins present at the surface of the enterocyte have been described as potential candidates in cholesterol absorption, but intestinal mechanisms and regulation modes of these transporters are not well known. Therefore, we studied two regulation mechanisms involved in the intestinal cholesterol absorption. The work involved in vitro studies on cells issued from the TC7 clone of the human cell-line Caco-2. This clone expresses glucose transporters found in healthy intestinal cells and its capacity to absorb lipids has been validated. In the first part of the work, we have put in evidence, the regulation by glucose and galactose of the absorption of cholesterol by the TC7 cells. This regulation needs the implication of SGLT1, the common transporter for glucose and galactose, and involves a signaling pathway by protein kinases C. We have also shown that the target of this regulation pathway is the intestinal transporter SR-BI. In the second part of the work, we have studied the regulation of cholesterol absorption by the size and the composition of the structures solubilizing cholesterol. First, we have shown that the apical uptake of cholesterol contained in small size particles is much more efficient than that of cholesterol contained in larger size particles, small size particles having better access to the apical transporters SR-BI and NPC1L1. Then, we have shown that biliary salts regulate Cholesterol absorption by acting on NPC1L1 and by increasing its rate of expression. Our results, as a whole, showed that cholesterol absorption is a complex multifactorial process. The type of ingested carbohydrates and the physico-chemical structure of the solubilizing particles (size and composition) might play an important role in the process, which can partly explain the important inter-individual variability in our capacities to absorb dietary and/or endogenous cholesterol

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Miralles, Francisco. "Etude de la protéine foéto-acinaire pancréatique : une protéine associée au développement et l'oncogénèse du pancréas exocrine humain." Paris 11, 1994. http://www.theses.fr/1994PA11T030.

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Riahi, Belkacem. "Biosurfactants : nouveaux agents de formulation de milieux microstructurés, hôtes d'une réaction enzymatique." Compiègne, 1994. http://www.theses.fr/1994COMPD748.

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Abstract:

De cette étude, il ressort que les sels biliaires, agents de surface biologiques, possèdent de former des solutions monophasiques ternaires ou pseudo-ternaires stables, incorporant de l'eau et des composés organiques divers (alcools et corps gras), en particulier des systèmes du type microémulsion. La détermination partielle de l'organisation interne de nombreux systèmes ternaires ou pseudo-ternaire, ainsi que, les études complémentaires de la conductivité électrique et de la viscosité des microémulsions ont montré que le pouvoir micro structurant des sels biliaires considérés est fort différent de celui du dodécylsulfate de sodium. Les milieux microstructurés contenant des sels biliaires ont été utilisés en tant que nouveaux fluides réactionnels pour des réactions enzymatiques. Des systèmes convenant ont été sélectionnés à cet égard. Les tests de l'activité enzymatique, à savoir hydrolyse d'un triglycérides ou estérification d'un acide gras par action de lipase, ont montré l'influence que divers facteurs de constitution et de composition du milieu hôte de la réaction exercent sur l'activité enzymatique. L'ensemble des résultats obtenus avec le cholates de sodium et le déoxycholate de sodium (sels biliaires non conjugués) laisse penser que ses biosurfactants peuvent remplacer les agents de surface de synthèse, dans les milieux microstructurés servant comme milieux hôtes des réactions enzymatiques. Cependant, la complexité des résultats étroitement liée au pouvoir tensioactif particulier des sels biliaires n'a pas encore permis d'aboutir à une proposition concrète d'un éventuel procédé industriel.

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Jayne, Sandrine. "Les lipases pancréatiques apparentées de type 1 et de type 2 : PLRP1 et PLRP2." Aix-Marseille 1, 2001. http://www.theses.fr/2001AIX11050.

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Abstract:

Deux ADNc, appelés PLRP1 et PLRP2, codant pour des lipases apparentées à la lipase pancréatique, l'enzyme clé de la digestion des triglycérides alimentaires au niveau de l'intestin, ont été mis en évidence au début des années 1990, agrandissant la famille des lipases. Malgré leur forte homologie de séquence avec la lipase pancréatique et des structures tridimensionnelles superposables, les protéines ont des propriétés fonctionnelles particulières. La PLRP1 a une activité lipolytique très faible tandis que la PLRP2 possède une spécificité de substrats plus large puisqu'elle hydrolyse, en plus des triglycérides, les phospholipides et les galactolipides. A l'heure actuelle, le rôle physiologique de ces deux protéines n'est toujours pas connu. Les travaux présentés dans ce mémoire s'articulent autour de trois axes principaux : mise en évidence de l'expression des PLRP1 et PLRP2 dans le pancréas de différentes espèces, résolution des bases structurales responsables de leur propriétés particulières, définition de leurs mécanismes d'activation. Nous avons ainsi pu purifier de grandes quantités de PLRP2 chez le cheval adulte dont les propriétés fonctionnelles ont été caractérisées. La présence des lipases apparentées chez les adultes, différente suivant les espèces, soulève le problème de la régulation de leur expression. Contrairement à la lipase pancréatique, la PLRP2 de cheval peut fixer une micelle de sels biliaires qui participe, avec les monomères, à l'activation de la protéine en l'absence de colipase. La faible activité lipolytique de la PLRP1 est causé par la présence simultanée de deux résidus, Vall79 et Ala181, présents uniquement dans les PLRP1. Ce double verrouillage rend la protéine inactive en empêchant la catalyse de se réaliser.

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Panicot, Dubois Laurence. "Modifications de la o-glycosylation du domaine c-terminal de la lipase sels biliaires dependante : relation avec les pathologies neoplasiques et diabetiques du pancreas humain (doctorat : nutrition)." Aix-Marseille 2, 2000. http://www.theses.fr/2000AIX20658.

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Spinelli, Valeria. "Les acides biliaires et la régulation de l’homéostasie métabolique : rôle du récepteur Farnesoid X Receptor (FXR) dans la cellule bêta-pancréatique : variation du pool des acides biliaires et chirurgie bariatrique Roux-en-Y Gastric Bypass." Thesis, Lille 2, 2015. http://www.theses.fr/2015LIL2S054.

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Abstract:

Les acides biliaires (ABs) sont des molécules produites dans le foie, stockées dans la vésicule biliaire, sécrétées dans l’intestin et retournant au foie via le cycle entéro-hépatique. Une fraction des ABs échappe à la recaptation par le foie et passe dans la circulation systémique par laquelle ils atteignent les organes périphériques dont le pancréas. Outre leur fonction de faciliter l’absorption intestinale des lipides, les ABs sont des molécules de signalisation qui agissent via les récepteurs aux ABs, exprimés dans les tissu clés de la régulation du métabolisme, et dont la modulation par les ABs contribue à réguler l’homéostasie énergétique. Ainsi des variations dans la composition du pool d’ABs peuvent déterminer la modulation du métabolisme via leurs récepteurs.Le récepteur aux ABs Farnesoid-X-receptor (FXR) est impliqué dans la régulation du métabolisme glucidique, lipidique et des ABs par son action dans le foie, l’intestin, les tissus adipeux et le pancréas. La souris déficiente pour FXR dans le corps entier présente une intolérance au glucose et une insulino-résistance dans le foie et dans les tissus périphériques, alors que dans un contexte d’obésité la déficience de FXR améliore ces paramètres. De plus, FXR est exprimé dans la cellule bêta-pancréatique (bcell) où il régule la synthèse et la sécrétion d'insuline, mais les mécanismes moléculaires n’ont pas été complètement élucidés. Pour comprendre 1) la contribution de FXR bcell dans le phénotype métabolique de la souris FXRKO-total, et 2) les mécanismes moléculaires de la régulation de l’insuline par FXR dans la bcell, j’ai développé un modèle murin invalidé pour FXR spécifiquement dans la bcell par la stratégie Cre-LoxP. Le développement du modèle a mis en évidence des phénomènes de recombinaison non-spécifiques et j’ai mis au point une stratégie de génotypage permettant de pallier à cette problématique. J’ai testé différents contextes métaboliques permettant de mettre en évidence le phénotype de la souris FXRKObcell (régime standard et riche en graisses, conditions de jeûne et re-nourriture, variation circadienne). Par rapport au contrôle, la souris FXRKO-bcell développe une intolérance au glucose et présente des insulinémies plus basses, défauts majorés par un régime riche en graisses. L’analyse transcriptomique globale des îlots a permis d’identifier un ensemble de microRNA fortement dérégulés par l’invalidation de FXR bcell qui pourraient expliquer les dysfonctions de sécrétion d’insuline.Outre la modulation de l’activité des récepteurs, des effets métaboliques peuvent être obtenus en modulant la composition du pool de leurs ligands, les ABs. Ainsi, des perturbations métaboliques (comme l’insulino-résistance et le diabète de type 2, l’obésité) sont associées à des variations qualitative et/ou quantitative du pool d’ABs. De plus, des variations du pool d’ABs accompagnent les améliorations métaboliques qui suivent la pratique chirurgicale de Roux-en-Y Gastric Bypass (RYGB) avant la perte de poids, ce que suggère que les ABs puissent être parmi les acteurs des effets métaboliques bénéfiques indépendants de la perte de poids. Pour étudier cette hypothèse, des modèles précliniques de RYGB ont été développés. Au cours de ma thèse j’ai comparé le pool d’ABs pre et post RYGB entre trois espèces (rat, cochon et Homme ; coll. Pr. F. Pattou et Dr. E. Osto) avec l’objectif d’évaluer quel modèle préclinique est le plus approprié pour ces études en termes de caractéristiques du pool d’ABs. La deuxième étude concerne la recherche des causes et mécanismes sous-jacents à l’augmentation des concentrations en ABs circulants induits par le RYGB. Dans le modèle de minipig (coll. Pr. F. Pattou), l’analyse de la composition des pool d’ABs circulants et d’expression génique dans le foie avant et après RYGB, a permis de montrer que des changements de la fonction hépatique sont - au moins en partie - responsables de l’augmentation dans le pool d’AB qui suit le RYGB
Bile acids (BAs) are molecules produced in the liver, stored in the gallbladder, secreted into the intestine and returning to the liver via the enterohepatic circulation. A fraction of BAs escapes the reuptake by the liver and enters the systemic circulation, by which they reach the peripheral organs including the pancreas. Besides their function in facilitating the intestinal absorption of lipids, BAs are signaling molecules that act through receptors for BAs, which are expressed in the key tissues for metabolic regulation, and whose modulation by BAs contribute to regulate energy homeostasis. Thus, variations in the composition of the BAs pool determine the modulation of metabolism via their receptors. The BA-receptor Farnesoid-X receptor (FXR) is involved in the regulation of glucose, lipid and BA metabolism by its action in the liver, intestine, adipose tissue and pancreas. Whole body FXR deficient mice are glucose intolerant and insulin resistant in liver and peripheral tissues, whereas in a context of obesity, FXR deficiency rather improves these parameters. Furthermore, FXR is expressed in the pancreatic beta cell (bcell), where it regulates the synthesis and the secretion of insulin, but the molecular mechanisms have not been fully elucidated yet. To understand 1) the contribution of FXR bcell in the metabolic phenotype of the total FXRKO-mouse, and 2) the molecular mechanisms of the regulation of insulin production by FXR in the bcell, I developed a mouse model invalidated for FXR specifically in the bcell by the Cre-loxP strategy. The development of the model showed nonspecific recombination phenomena, and I developed a genotyping strategy to overcome this problem. To highlight the phenotype of the FXRKObcell mouse I tested various metabolic contexts (standard and high fat diet, fasting and refeeding conditions, circadian variations). Compared to control, FXRKO-bcell mice developed glucose intolerance and has lower insulinémia, defects increased by a high fat diet. The global transcriptomic analysis in the islets identified a set of microRNA strongly deregulated by invalidating FXR in the bcell, which could explain the dysfunctions in insulin secretion. Besides the modulation of the activity of the receptors, metabolic effects can be obtained by varying the composition of the pool of their ligands BAs. Thus, metabolic perturbations (such as insulin resistance and type 2 diabetes, obesity) are associated with qualitative and/or quantitative variations in the BA pool. In addition, variations of the BAs pool are associated to the metabolic improvement that precedes the weight loss after the surgical practice of Roux-en-Y Gastric Bypass (RYGB), which suggests that the BAs can be among the actors of the ‘weight loss-indipendent’ beneficial metabolic effects of RYGB. To investigate this hypothesis, some preclinical models of RYGB have been developed. During my thesis I compared the pool of BAs pre and post RYGB among three species (rat, pig and human; Coll. Prof. F. Pattou and Dr. E.Osto) with the aim of assessing which preclinical model is most suitable for these studies in terms of characteristics of the BAs pool. In a second study, I focused on the causes and mechanisms underlying the increased concentrations of circulating BAs induced by RYGB. In the model of minipig (coll. Pr. F. Pattou), the analysis of the plasma BA pool composition and the hepatic gene expression before and after RYGB, allowed to show that changes in the hepatic function are - at least in part - responsible for the increase of the BA pool following RYGB

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Castellanos, jankiewicz Ashley. "Bile acids signaling as a novel mechanism in the hypothalamic control of energy balance." Thesis, Bordeaux, 2019. http://www.theses.fr/2019BORD0218.

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Abstract:

Introduction : Les acides biliaires (AB) sont des molécules connues pour digérer les lipides. En activant le récepteur couplé à la protéine G Takeda 5 (TGR5) dans les tissus périphériques, ils peuvent également servir de molécules de signalisation pour réduire le poids corporel et améliorer le profil glycémique. L'activation de TGR5 peut aussi augmenter la dépense énergétique dans le tissu adipeux, mais les voies métaboliques impliquées dans ces effets sont encore mal connues. Ces observations impliquent une action anti-obésité du TGR5. Cependant, toutes les études sur les AB dans la balance énergétique se sont concentrées exclusivement sur des tissus périphériques. Comme le principal centre de convergence des signaux nutritifs, hormonaux et environnementaux se trouve dans le cerveau, et en particulier dans l'hypothalamus, nous avons émis l'hypothèse que l'activité hypothalamique du TGR5 pourrait moduler la balance énergétique, en particulier dans un contexte d’obésité. Objectif : Démontrer la fonction du système AB – TGR5 dans des populations de cellules hypothalamiques connues pour contrôler l’homéostasie énergétique et étudier sa pertinence pour le traitement de l’obésité. Méthodes : Des canules intra-cérébro-ventriculaires (ICV) ont été implantées sur des souris mâles C57Bl6/J minces (sous régime standard) ou obèses (sous régime riche en graisses) pour permettre l'administration pharmacologique aiguë ou chronique des agonistes du TGR5. Des souris TGR5flox/flox ont été utilisées pour provoquer la délétion du récepteur dans l'hypothalamus médio-basal (HMB), par l’injection in situ d’un AAV-Cre. Nous avons mesuré le poids corporel, prise alimentaire, composition corporelle, sensibilité à l'insuline, niveaux des AB hypothalamiques et plasmatiques et dépense énergétique. Pour bloquer la signalisation sympathique, nous avons exposé les souris à un environnement de thermoneutralité (30°C) ou à une sympathectomie chimique. Des marqueurs de la lipolyse, de la thermogenèse ou du métabolisme thyroïdien ont été mesurés dans le foie, le tissu adipeux et l’hypothalamus par qPCR ou western blot. Toutes les études ont été approuvées par le comité d'éthique en expérimentation animale de l'Université de Bordeaux. Résultats : Nous montrons que les transporteurs du TGR5 et des AB s’expriment dans l’HMB et que les souris obèses ont une diminution des AB dans la circulation et l’hypothalamus. L'administration aiguë d'agonistes du TGR5 (ICV ou intra-HMB) réduit la prise alimentaire et le poids corporel chez les souris obèses, tout en améliorant leur sensibilité à l'insuline. De plus, l'administration chronique ICV de l’agoniste réduit le poids corporel et l'adiposité, tout en augmentant la dépense énergétique et les marqueurs de l'activité sympathique dans le tissus adipeux. La thermo-neutralité ainsi que la sympathectomie chimique atténuent ces effets, démontrant que l’activité du récepteur TGR5 nécessite un tonus sympathique accru. La délétion de TGR5 dans le HMB (souris TGR5flox/flox) n'a aucun effet chez les souris minces. Cependant, l’exposition à une nourriture riche en graisse augmente rapidement leur poids, prise alimentaire et adiposité. Lors de l’exposition au froid (4 heures à 4°C), l’expression des marqueurs de lipolyse et thermogenèse dans le tissu adipeux était atténuée, suggérant une interruption de la signalisation sympathique. Enfin, la suppression du TGR5 dans le HMB de souris déjà obèses augmente l'adiposité en induisant une hyperphagie, aggravant l’obésité. Conclusions : Nos résultats prouvent l’existence d’un système fonctionnel du TGR5 hypothalamique, un récepteur des AB. Nous montrons pour la première fois que l'activation du TGR5 dans le HMB induit une myriade d'effets qui améliorent des paramètres métaboliques, et que cela dépend de l'activation du système nerveux sympathique. Ainsi, nous dévoilons un nouveau mécanisme d'action pour des potentiels traitements contre l'obésité
Introduction: Bile acids (BA) are cholesterol-derived molecules mostly known for their role in digesting lipids. By activating the Takeda G protein coupled receptor 5 (TGR5) in peripheral organs, they can also act as signaling molecules to reduce body weight and improve glucose homeostasis. Notably, TGR5 activation can increase energy expenditure in brown adipocytes, although the metabolic pathways involved in these effects are not yet clear. These outcomes imply an anti-obesity function for TGR5. However, all studies investigating BA in energy balance have exclusively focused on peripheral tissues. Since the major center of convergence of nutrient, hormonal, and environmental cues is the brain, particularly the hypothalamus, we hypothesized a role for TGR5 in this brain structure, suggesting that hypothalamic TGR5 activity may participate in energy balance, specifically under dietinduced obesity. Objective: To demonstrate the function of the BA – TGR5 system in hypothalamic populations known to control energy homeostasis, and disentangle its relevance for the treatment of diet-induced obesity. Methods: C57Bl6/J male mice that were either lean (standard chow) or diet-induced obese (60% high-fat diet; HFD) were implanted with an intra-cerebroventricular (ICV) cannula for the pharmacological delivery of TGR5 agonists. TGR5flox/flox mice were used to target the sitespecific deletion of the receptor within the mediobasal hypothalamus (MBH), through the stereotaxic delivery of AAV-Cre. The following metabolic outputs were measured: body weight, food intake, body composition (EchoMRI analyzer), insulin sensitivity, serum and hypothalamic BA (liquid mass spectrometry), and energy expenditure (TSE Phenomaster system). To block sympathetic signaling, we exposed mice to thermoneutrality (30°C) or performed chemical sympathectomy (6-hydroxydopamine; 80mg/kg i.p.). Markers of lipolysis, thermogenesis, and thyroid metabolism were measured in the liver, adipose and hypothalamic tissues by qPCR or western blots. All studies received the approval from the animal ethical committee of the University of Bordeaux. Results: We demonstrate that TGR5 and BA transporters are expressed in the MBH and that diet-induced obese mice have decreased circulating and hypothalamic BA. Acute ICV or intra-MBH administration of TGR5 agonists reduced food intake and body weight in dietinduced obese mice only, and improved insulin sensitivity. Accordingly, chronic ICV administration of the TGR5 agonist in obese mice reduced their body weight and adiposity, while increasing energy expenditure and mRNA markers of sympathetic activity in the adipose tissue. Indeed, experiments conducted at thermoneutrality or chemical sympathectomy blunted these effects, demonstrating that central TGR5 effects require an enhanced sympathetic tone. By using TGR5flox/flox mice coupled with the delivery of an AAVCre, we observed that the deletion of TGR5 in the MBH had no effect in chow-fed mice. However, a HFD switch rapidly increased their body weight, food intake and adiposity. When exposed to the cold (4 h at 4°C), protein levels of lipolysis and thermogenesis markers in the adipose tissue were blunted, implying an interruption in sympathetic signaling to the periphery due to hypothalamic downregulation of TGR5. Lastly, Cre-dependent deletion of TGR5 in the MBH of already obese mice rapidly increased adiposity by inducing hyperphagia, worsening their obese phenotype. Conclusions: Our work proves the existence of a functional hypothalamic BA – TGR5 receptor system. We show for the first time that the activation of TGR5 in the MBH decreases body weight and adiposity, while increasing energy expenditure through recruitment of the sympathetic nervous system. Taken together, these results expose a new mechanism of action for potential anti-obesity therapies

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Collignon, Aurélie. "Immunogénicité d'une glycoprotéine tumorale pancréatique, la lipase sels biliaires-dépendante pathologique et vaccination par des cellules dendritiques." Thesis, Aix-Marseille, 2012. http://www.theses.fr/2012AIXM5053.

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Abstract:

Le cancer du pancréas exocrine est un cancer très agressif associé à un diagnostic tardif et une résistance aux traitements conventionnels. L'identification de nouveaux marqueurs spécifiques est nécessaire afin de développer des outils diagnostiques ainsi que des traitements innovants. La lipase sels biliaires-dépendante pathologique (BSDLp), une glycoforme tumorale de la BSDL, se caractérise par l'apparition d'épitopes glycosylés reconnus par les anticorps monoclonaux J28 et 16D10. Leur expression spécifique par certaines lignées et tissus pancréatiques tumoraux humains nous permet d'envisager leur utilisation comme cible d'immunothérapie anti-tumorale par les cellules dendritiques (DC). Notre objectif est d'explorer la capacité de la BSDLp à induire une immunité cellulaire et d'apporter une preuve de concept de vaccination par les DC dans un modèle expérimental. Chez l'Homme, nous montrons que les DC chargées avec la partie C-terminale de la BSDLpJ28 (C-ter-J28) induisent l'activation des lymphocytes T. Dans le modèle murin, nous mettons en évidence l'expression de l'épitope J28 à la surface des cellules d'adénocarcinome pancréatique Panc02, utilisées pour induire des tumeurs. Nous montrons que la glycoprotéine BSDLpJ28 est immunogène chez la souris C57BL/6J. De plus, les DC chargées avec le C-ter-J28 puis soumises à maturation sont capables d'induire une réponse cellulaire T. Enfin, les DC, chargées et soumises à maturation ou non, testées en traitement prophylactique instaurent une protection substantielle, de longue durée, chez les souris vaccinées. Dans ces conditions, les DC, immatures lors de l'injection, jouent un rôle important dans la protection anti-tumorale
Pancreatic adenocarcinoma is an aggressive cancer associated to late diagnosis and resistance to conventional treatments. Identification of novel specific markers is necessary to develop diagnostic tools and innovative treatments. Pathological bile salt-dependent lipase (pBSDL), a tumoral glycovariant of BSDL, is characterized by the appearance of glycosylated epitopes recognized by J28 and 16D10 monoclonal antibodies. Their expression specific to some human tumor pancreatic cell lines and tissues led us to consider their use as targets for dendritic cell (DC) antitumor immunotherapy. Our aim is to explore the ability of pBSDL to induce cellular mediated immunity and to provide a proof of concept of DC vaccination in an experimental model. In humans, we show that DC pulsed with C-ter moiety of pBSDL-J28 (C-ter-J28) can induce T-cell activation. In mouse model, we demonstrate the expression of J28 epitope on pancreatic adenocarcinoma Panc02 cells, used to induce tumors in C57Bl/6 mice. We show that glycoprotein pBSDL (pBSDL-J28) is immunogenic in mice. Moreover, DC pulsed with C-ter-J28 and matured, are able to induce T-cell response. Finally, DC pulsed and matured or not, tested in prophylactic treatment provide long-term substantial protection in vaccinated mice. In these conditions, DC, immature at the time of the injection, play an important role in antitumor protection

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Gibold-Lyonne, Lucie. "Impact des facteurs micro-environnementaux de l'hôte sur la colonisation instestinale des Escherichia Coli adhérents et invasifs." Thesis, Clermont-Ferrand 1, 2016. http://www.theses.fr/2016CLF1MM22/document.

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Abstract:

La maladie de Crohn (MC) est une affection inflammatoire chronique du tube digestif dont l’étiologie est multifactorielle. Les lésions intestinales des patients atteints de MC sont anormalement colonisées par des souches pathogènes d’Escherichia coli appartenant au pathovar AIEC pour «Adherent-Invasive Escherichia coli ». Ces souches sont capables d’adhérer et d’envahir les cellules épithéliales intestinales, et ont la capacité de survivre et de se multiplier en macrophages en induisant une synthèse intense de cytokines pro-inflammatoires. Les AIEC pourraient ainsi être impliquées dans l’induction et/ou l’entretien de l’état inflammatoire de la muqueuse intestinale.L’objectif de ce travail est d’identifier les déterminants bactériens des AIEC qui vont intervenir dans les étapes précoces de l’implantation des AIEC au niveau intestinal et de définir quel est le rôle des facteurs micro-environnementaux de l’hôte dans cette implantation.Nous montrons que l’AIEC LF82 possède une activité mucinolytique qui est portée par le gène vat-AIEC et qui favorise la traversée du mucus et la colonisation intestinale. Nous avons retrouvé ce gène chez 42% des souches AIEC isolées de patients atteints de MC, et chez 97% des souches AIEC appartenant au phylogroupe B2. Par ailleurs, nous avons montré que les sels biliaires augmentent l’expression de cette mucinase.Nous avons ensuite étudié l’influence des sels biliaires sur l’expression globale des gènes de la souche LF82. Les sels biliaires modifient profondément le métabolisme de la souche, induisant une diminution globale des voies de biosynthèse (protéines, lipides) et une augmentation des voies de dégradation (alcools, acides carboxyliques, polyamines, …). L’étude du catabolisme de l’éthanolamine et du propanediol indique que les AIEC pourraient se servir de ces substrats pour s’implanter au sein de la flore iléale. De plus, les analyses transcriptomiques révèlent que les sels biliaires augmentent l’expression de gènes codant des facteurs de virulence comme l’invasine IbeA, les systèmes de sécrétion de type VI et la yersiniabactine. Nous montrons également qu’ils favorisent la formation de biofilm chez les souches AIEC.Ces données indiquent que les sels biliaires constituent un signal permettant à la souche AIEC LF82 de mettre en place différentes voies métaboliques et déterminants bactériens nécessaires à son implantation au niveau intestinal.Mots-clé : Escherichia coli, maladie de Crohn, mucines, serine protéase, mucinase, AIEC
The etiology of Crohn's disease (CD) involves disorders in host genetic factors and intestinal microbiota. Ileal mucosa of CD patients is often abnormally colonized by adherent-invasive Escherichia coli (AIEC). These strains isolated from the intestinal mucosa of CD patients are able to adhere to intestinal epithelial cells (IECs). This adhesion to IECs promotes the invasion of cells by the bacteria. Furthermore, the invasive ability of AIEC strains allows bacteria to translocate across the human intestinal epithelium, move into the deep tissues and activate immune cells continuously upon arrival. Thus AIEC could be involved in the inflammatory state of the intestinal mucous membrane. The aim of this study was to identify components of AIEC virulence, which might favor their implantation in the gut of CD patients and to define the role of several chemical factors from the ileal environment. Here, we reported a protease called Vat-AIEC from AIEC which favors the penetration of AIEC through the mucus layer and enhances gut colonization. The screening of E. coli strains isolated from CD patients revealed a preferential vat-AIEC association with AIEC strains belonging to the B2 phylogroup. Besides, Vat-AIEC transcription was increased with bile salts from the ileum environment. Then a global RNA sequencing (RNA-seq) of E. coli LF82 has been used to observe the impact of bile salts on the expression of bacterial genes. The results demonstrate the explosive effect of bile salts with a dysregulation of about 40% of the genome, with a global upregulation of genes involved in degradation and downregulation of those implicated in several biosynthesis. Our results show that LF82 use ethanolamine as a nitrogen source and propane diol as a carbon source, which can favor their colonization in the gut compared to the other bacteria. We also studied virulence genes expression in the presence of bile salts. They increase the expression of several virulence factors like the IbeA invasion, the type 6 secretion systems and the yersiniabactin. Furthermore, we noticed an increased expression of genes implicated in biofilm formation. These results improve the understanding of the global regulatory network in the presence of bile salts and thus of AIEC implantation in the human gut of CD patients

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Favé, Gaëlle. "Stratégies d'amélioration de la biodisponibilité des acides gras : approches physico-chimiques et enzymatiques." Aix-Marseille 2, 2006. https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00689483.

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Abstract:

La biodisponibilité des nutriments lipidiques dépend d'un processus physico-chimique et enzymatique complexe : digestion par les lipases dans l'estomac puis l'intestin, absorption par les entérocytes et transport vers les cellules utilisatrices. L'altération physiologique (nouveau-né, personne âgée) ou pathologique (mucoviscidose, pancréatite) de ce processus réduit la biodisponibilité des acides gras essentiels, indispensables au développement et au fonctionnement des cellules de l'organisme. Ce mémoire présente des stratégies permettant d'améliorer la biodisponibilité des nutriments lipidiques chez l'insuffisant pancréatique, en utilisant les propriétés physico-chimiques des lipides. En effet, elles déterminent des caractéristiques primordiales de l'interface lipidique (superficie, composition), au niveau de laquelle se déroule l'hydrolyse enzymatique. Nos travaux montrent, in vitro dans des conditions proche de la physiologie, que le type de phospholipide entrant dans la composition d'une émulsion de trioléine, ou l'ajout d'un type donné d'acide gras libre dans le mélange lipidique avant l'émulsification, modifie la taille et le potentiel zêta des globules lipidiques, influence l'action des lipases gastrique, pancréatique et stimulée par les sels biliaires, et module l'absorption des acides gras par des cellules Caco-2. Un effet majeur est obtenu avec le lysophosphatidylinositol, rendant ce lipide potentiellement utilisable en nutrition clinique. Il présente un comportement interfacial étonnant (aire moléculaire, compressibilité) et son mécanisme d'action associe des effets indirects (modifications de l'interface lipidique) et directs (interactions avec les lipases).

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Baucheron, Sylvie. "Le système d'efflux AcrAB-TolC chez Salmonella enterica : rôle dans la résistance multiple aux agents anitmicrobiens et dans la colonisation in vivo." Tours, 2004. http://www.theses.fr/2004TOUR4039.

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Abstract:

L'émergence récente de salmonelles non-typhoïdes résistantes aux fluoroquinolones pose un problème thérapeutique chez l'homme. Nous avons montré que les deux mécanismes associés responsables de cette résistance chez des sérotypes de Salmonella enterica sont la modification des cibles, ADN-gyrase et topoisomérase IV, et la surexpression du système d'efflux AcrAB-TolC. Chez le clone épidémique S. Typhimurium DT104, résistant à plusieurs familles d'antibiotiques, nous avons démontré que la résistance au florfenicol et aux tétracyclines est due à une synergie entre le transporteur multidrogue AcrB et les transporteurs FloR et Tet(G), respectivement spécifiques du florfenicol et de la tétracycline. Chez S. Typhimurium DT104 et DT204, TolC, contrairement à AcrB, s'est avéré essentiel dans la résistance aux sels biliaires et dans la colonisation du poussin. Nous avons montré in vitro que l'utilisation d'un inhibiteur de pompe d'efflux permet de contrer la résistance à certains antibiotiques tels que les fluoroquinolones
The recent emergence of fluoroquinolone resistant Salmonella enterica non-typhi presents a therapeutic threat to human health. The two associated responsible mechanisms of this resistance in Salmonella enterica serovars were shown the modification of targets, DNA-gyrase and topoisomerase IV, and overproduction of the AcrAB-TolC efflux system. In the epidemic multidrug-resistant clone S. Typhimurium DT104, we showed that resistance to florfenicol and tetracyclines was mediated in a synergistic way by the florfenicol and tetracycline specific transporters FloR and Tet(G), respectively. In S. Typhimurium DT104 and DT204, TolC but not AcrB were shown to play an essential role in bile salts resistance and in colonisation of chicks. The in vitro use of an efflux pump inhibitor was shown to counter resistance to some antibiotics such as fluoroquinolones

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Oliva, Laurence. "Dysfonctionnements hépatiques induits par l'éthanol : effets protecteurs de l'acide ursodésoxycholique." Aix-Marseille 2, 1999. http://theses.univ-amu.fr.lama.univ-amu.fr/1999AIX20667.pdf.

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Abstract:

Le foie est un des organes cibles de la toxicité éthylique chronique. L'effort thérapeutique doit être porté vers les lésions hépatiques précoces afin de prévenir l'évolution vers une irréversible cirrhose. L'acide ursodésoxycholique est un acide biliaire hydrophile dont les propriétés hépatoprotectrices ont été mises en évidence dans les hépatopathies médicamenteuses et dans plusieurs maladies cholestatiques chroniques. L'objectif de nos travaux est de tester les effets de ce sel biliaire sur les dysfonctionnements hépalobiliaires induits chez le rat par l'ingestion chronique d'un régime supplémenté en alcool (36% des calories totales). Les compartiments biliaires, hépatiques et sériques sont étudiés. Le flux biliaire, la sécrétion biliaire des phospholipides et des sels biliaires sont stimulés par l'administration d'éthanol. L'ajout d'acide ursodésoxycholique permet d'enrichir la bile en tauroursodésoxycholate sans modifier la sécrétion biliaire. Notre étude met en évidence la capacité de l'acide ursodésoxycholique à prévenir partiellement l'hépatomégalie, la stéatose et la cytolyse induites par l'ingestion d'éthanol. De plus, le traitement par l'acide ursodésoxycholique diminue la peroxydation lipidique sans modifier l'expression des cytochromes P4502E1 et P4503A1/2, ni la concentration en glutathion hépatique. Enfin, ce sel biliaire hydrophile prévient presque totalement l'augmentation de la fluidité des membranes plasmiques des hépatocytes, et restaure la structure et la fonction des mitochondries altérées par l'éthanol. Un dernier volet de nos travaux de recherche met en évidence la capacité de l'acide ursodésoxycholique à exercer ses propriétés hépatoprotectrices dans un modèle d'intoxication éthylique accentué par la coadministration d'un acide biliaire hydrophobe, l'acide chénodésoxycholique
Liver is one of the main targets of chronic ethylic intoxication. Therapeutic strategy has to focus on early hepatic lesions to prevent progression to an irreversible cirrhosis. Ursodeoxycholic acid is a hydrophilic bile acid whose hepatoprotective properties have been shown in drug-induced hepatopathy and in various chronic cholestatic liver diseases. The aim of our study was to assess the effects of this bile salt on hepatobiliary dysfunctions induced in rats by chronic ingestion of a liquid diet containing 36% of total calories as alcohol. Biliary, hepatic and blood compartments are studied. Bile flow, biliary secretion of phospholipid and bile salt are increased by ethanol administration. Ursodeoxycholic acid supplementation to alcohol diet allows a biliary enrichment in tauroursodeoxycholate without modifying the biliary secretion. Our study shows the capacity of ursodeoxycholic acid to partially prevent hepatomegaly, fatty liver and cytolysis induced by long-term ethanol ingestion. Furthermore, ursodeoxycholic acid treatment decreases lipid peroxidation without affecting cytochromes P4502E1 and P4503A1/2 expression, or hepatic glutathione concentration. Lastly, this hydrophilic bile salt almost totally prevents the increase in fluidity of liver plasma membranes, and restores ethanol-induced alterations in mitochondrial structure and function. A last part of our investigations shows the ability of ursodeoxycholic acid to exert its hepatoprotective action in a chronic ethylic intoxication model aggravated by the coadministration of chenodeoxycholic acid, a hydrophobic bile acid

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Piessen, Guillaume. "Rôles des mucines MUC1 et MUC4 dans l'adénocarcinome de l'oesophage : études in vitro, ex vivo et dans un modèle animal de carcinogenèse induite." Lille 2, 2007. http://www.theses.fr/2007LIL2S048.

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Abstract:

Le reflux gastro-oesophagien et les acides biliaires ont été incriminés dans la pathogénie de l'oesophage de Barrett, lésion précancéreuse s'accompagnant d'un processus de métaplasie intestinale avec augmentation du nombre de cellules caliciformes, et dans sa dégénérescence en adénocarcinome. Au cours de cette séquence carcinogénétique, a été observée, à partir de tissus humains, une augmentation de l'expression des mucines MUC1 et MUC4. MUC1 et MUC4 sont des O-glycoprotéines membranaires impliquées dans les phénomènes de reconnaissance cellulaire et de signalisation intracellulaire. Dans notre laboratoire, des travaux précédents sur la régulation de l'expression des MUC4 dans la lignée cellulaire d'adénocarcinome de l'oesophage OE33, ont montré que les acides taurocholique (TC), taurodésoxycholique (TDC), aurochénodésoxycholique (TCDC), et glycocholique (GC), ainsi que le glycocholate de sodium (GNa) pouvaient réguler l'expression de MUC4 au niveau transcriptionnel essentiellement via la voie de la phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K). Nous avons entrepris, au cours de ce travail, (i) d'identifier les facteurs de transcription impliqués dans la régulation de MUC4 par les acides biliaires, (ii) d'étudier la régulation de l'expression de MUC1 par les acides biliaires in vitro et ex vivo dans un modèle d'explants, (iii) d'analyser l'intérêt diagnostique et pronostique de l'étude en immunohistochimie de l'expression de MUC1 et MUC4 au cours de la séquence carcinogénétique dans une cohorte de 52 patients et (iv) de mettre au point un modèle animal de carcinogenèse induite chez le rat afin de pouvoir étudier le rôle des mucines in vivo. Nous montrons ainsi que parmi les facteurs de transcription testés, l'Hepatocyte Nuclear Factor-1a (HNF-1a) joue un rôle majeur dans la régulation du promoteur distal de MUC4 par les acides biliaires TDC et TCDC. Dans le modèle cellulaire OE33 et dans un modèle ex vivo d'explants, les acides biliaires TC, TDC, TCDC, GC et GNa, ainsi que l'acide désoxycholique (DC) constituent de puissants activateurs de l'expression de MUC1. Des expériences de transfections cellulaires transitoires, de siRNA (small interfering RNA) et utilisant des inhibiteurs pharmacologiques des voies PI3K, MAPK, PKC et PKA ont permis de montrer que cette régulation était promoteur-dépendante et passait par la voie PI3K. Dans les tissus humains, MUC4 est surexprimé au stade de dysplasie et pourrait constituer un marqueur diagnostique précoce de dégénérescence en adénocarcinome. En revanche, aucun intérêt pronostique n'a pu être mise en évidence pour MUC1 et MUC4. Le modèle animal de carcinogenèse induite chez le rat comportant une anastomose oeso-duodénale associé à la prise de fer en tant que co-carcinogène a pu être établi et a permis de reproduire la totalité de la séquence carcinogénétique. Les résultats préliminaires montrent que le reflux est constitué de façon prépondérante par les acides biliaires TC et TCDC, et que les mucines Muc1 et Muc4 sont surexprimés dans la zone d'exposition au reflux, suggérant leur implication dans le processus de carcinogenèse. Ces nouveaux mécanismes de régulation de l'expression des gènes de mucines MUC1 et MUC4 ainsi que les résultats préliminaires de la modélisation animale mettent en avant le rôle clé des acides biliaires dans les étapes précoces de la carcinogenèse oesophagienne. A terme, ces gènes de mucines pourraient constituer de nouveaux marqueurs biologiques permettant d'affiner les modalités de prise en charge diagnostique et thérapeutique de l'adénocarcinome de l'oesophage et ainsi d'en améliorer le pronostic

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Grzych, Guillaume. "Étude du profil métabolomique des patients atteints de stéatose hépatique non alcoolique (NASH) : recherche d’hypothèses physiopathologiques et de biomarqueurs." Thesis, Lille 2, 2020. http://www.theses.fr/2020LIL2S026.

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Abstract:

La NAFLD (Non Alcoholic Fatty Liver Disease), enjeu majeur de santé publique, est la complication hépatique du syndrome métabolique. La NAFLD se caractérise par des lésions hépatiques dues à une accumulation de triglycérides dans le foie qui, associée à une inflammation, évolue vers la stéato-hépatite (NASH Non-Alcoholic Steatohepatitis). Les mécanismes moléculaires sous-tendant la pathogenèse et particulièrement le passage de la stéatose à la NASH sont encore mal compris. Une meilleure compréhension de la physiopathologie de la NASH est nécessaire afin d’identifier de potentielles cibles thérapeutiques et des marqueurs non invasifs pour le diagnostic et le suivi de la pathologie.Dans ce contexte, la métabolomique apparait prometteuse. La métabolomique est l'analyse de l'ensemble des métabolites dans un milieu biologique et complète les autres techniques «omics» pour l'étude des propriétés biologiques dynamiques. Ce travail a pour objectif d’utiliser l’approche métabolomique pour mettre en évidence un profil particulier chez les patients atteints de NASH afin de comprendre la physiopathologie et d’identifier de potentiels biomarqueurs. Pour cela, nous avons utilisé deux approches métabolomiques : 1/ l’approche ciblée, sur plasma, en se focalisant sur deux classes de métabolites, les acides aminés et les acides biliaires, 2/ l’approche non ciblée sur plasmas et foies humains (dont les résultats sont en attente). Dans la littérature, les acides biliaires (AB) sont étudiés en tant qu'acteurs physiopathologiques et biomarqueurs dans la NASH. Cependant, l'interprétation des résultats est compliquée par l'association étroite de la NASH avec le diabète de type 2 (DT2), la résistance à l'insuline (IR) et l'obésité, contextes métaboliques qui sont aussi associés à des variations d’AB. Nous avons donc cherché à comprendre la relation complexe entre la NASH et les concentrations d’AB, en fonction du statut DT2, et en tenant compte de l’IR et de l’obésité. Par analyses des profils d’AB dans deux cohortes (ABOS n=219, RESOLVE n=58) de patients obèses bien caractérisés (biopsies hépatiques, statut clinico-biologique, effectif élevé), nous montrons que les concentrations plasmatiques des AB sont plus élevés chez les patients NASH vs non-NASH, à la fois chez les patients DT2 et Non-DT2. Par contre, ces augmentations dépendent du degré d’IR, ce qui suggère que la NASH n'entraîne des altérations d’AB qu'en présence d'une IR avancée et indépendamment du statut diabétique.Dans la littérature, les concentrations plasmatiques d’AA à chaîne ramifiée (BCAA) sont associées avec l’obésité, l’IR et la gravité des lésions hépatiques de la NAFLD. De plus, les concentrations plasmatiques de BCAA diffèrent entre les sexes, qui présentent des susceptibilités différentes aux maladies cardiométaboliques. Nous avons évalué l’association entre les concentrations plasmatiques de BCAA et les stades de gravité de la NAFLD,indépendamment du sexe, de l’IR et de l’obésité. Dans la cohorte RESOLVE, 112 patients obèses ont été divisés en quatre groupes en fonction de la sévérité de la NAFLD, et appariés en fonction du sexe, de l'IMC, de l'IR et de l'HbA1c. Comme attendu, une corrélation positive modeste a été observée entre les concentrations de BCAA et la sévérité de la NAFLD, ainsi qu'un impact majeur du sexe sur les concentrations de BCAA. L'analyse des sous-groupes révèle que, si les concentrations plasmatiques de BCAA augmentent avec la sévérité de la NAFLD chez les femmes, elles ont tendance à diminuer chez les hommes, suggérant un impact du sexe sur la composante métabolique de la NAFLD [...]
NAFLD (Non-Alcoholic Fatty Liver Disease), a major public health issue, is considered thehepatic manifestation of the metabolic syndrome. NAFLD is characterized by liver injury dueto an accumulation of triglycerides in the liver which, when associated with inflammation, canprogress to steatohepatitis (NASH Non-Alcoholic Steato Hepatitis). The molecular mechanismsunderlying the pathogenesis, and particularly the transition from steatosis to NASH, are still poorly understood. A better understanding of the pathophysiology of NASH is necessary to identify potential therapeutic targets and non-invasive markers for the diagnosis and monitoring of the pathology. In this context, metabolomic approaches are promising.Metabolomics is the comprehensive analysis of metabolites in a biological medium, and it complements other "omics" techniques for the study of dynamic biological processes. The objective of this work is to use the metabolomics approach to highlight a particular profile in NASH patients in order to understand the pathophysiology and identify potential biomarkers.For this, we have used two metabolomic approaches: 1/ the targeted approach, on plasma,focusing on two classes of metabolites, amino acids and bile acids, 2/ the non-targeted approach on human plasma and livers (results are pending).In the literature, bile acids (B A) are studied as pathophysiological actors and potential biomarkers in the context of NASH. However, interpretation of many cohort studies is complicated by the close association of NASH with type 2 diabetes (T2D), insulin resistance(IR) and obesity, which are also associated with variations in BA. We therefore sought tounderstand the complex relationship between NASH and BA concentrations, as a function ofT2D status, considering IR and obesity as confounding parameters. Through analysis of BAprofiles in two cohorts (ABOS n=219, RESOLVE n=58) of well-characterized obese patients (histological analysis of liver biopsies, clinical-biological status, well-powered statistically), weshow that plasma BA concentrations are higher in NASH vs. non-NASH patients in both T2Dand non-T2D patients. These increases are dependent on the degree of IR, suggesting that NASH causes AB alterations only in the presence of advanced IR and independently of diabetes status.In the literature, plasma levels of branched-chain AA (BCAA) are associated with obesity, IR,and severity of liver damage in NAFLD. In addition, plasma BCAA concentrations differ between genders, which display different susceptibilities to development of cardiometabolicdisease. We evaluated the association between plasma BCAA concentrations and the severity stages of NAFLD, independent of gender, IR and obesity. In the RESOLVE cohort, 112 obese patients were divided into four groups based on NAFLD severity and matched for gender, BMI,IR, and HbA1c. As expected, a modest positive correlation was observed between BCAAconcentrations and NAFLD severity, as well as a major impact of gender on BCAAconcentrations. Subgroup analysis revealed that while plasma BCAA concentrations increased with the severity of NAFLD in females, they tended to decrease in males, suggesting an impact of gender on the metabolic component of NAFLD. Analysis of other AA in the cohort reveals plasma AA alterations involved in the methionine cycle (serine, cysteine, ...), whose molecular mechanisms are being explored in mouse models. The use of metabolomics has allowed us to better characterize the complex interactions of NASH with IR and sex on BA and AA

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Crescence, Lydie. "Propriétés thérapeutiques de l'anticorps monoclonal 16D10 sur les cellules tumorales pancréatiques humaines." Aix-Marseille 2, 2009. http://www.theses.fr/2009AIX20695.

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Abstract:

Le cancer du pancréas exocrine, un des plus agressifs, présente un diagnostic tardif et reste peu sensible aux traitements conventionnels. Il est donc essentiel de développer de nouvelles approches thérapeutiques de ce cancer. Nous avons mis en évidence la présence d’un antigène glycosylé associé à la tumeur portant le glycotope 16D10, reconnu par l’anticorps monoclonal mAb16D10 à la surface des cellules tumorales du pancréas humain. Ce glycotope de surface est porté par une glyco isoforme de la Lipase Sels Biliaires Dépendante (BSDL), exprimée lors des cancers du pancréas. Par ailleurs, le mAb16D10 inhibe la croissance de cellules humaines pancréatiques tumorales SOJ-6 transplantées chez les souris Nude. L’ensemble de ces données nous a permis d’envisager des approches d’immunothérapies des cancers pancréatiques fondées sur l’utilisation du mAb16D10. Nous avons déterminé la spécificité du mAb16D10 sur différents tissus et différentes cellules et étudié in vitro les mécanismes moléculaires impliqués dans la diminution de la croissance tumorale induite par le mAb16D10. Nous avons montré que le mAb16D10 reconnaît spécifiquement des foyers de cellules néoplasiques alors qu’aucune réaction n’est observée, ni dans la zone « normale » des tissus pancréatiques tumoraux, ni dans les tissus humains normaux. Le mAb16D10 inhibe la prolifération des cellules pancréatiques tumorales humaines exprimant l’antigène 16D10 localisé dans les radeaux lipidiques de la membrane plasmique. Le mAb16D10 induit l’expression de la p53 et l’apoptose via la voie intrinsèque. Cet anticorps entraîne l’activation de la GSK-3β, ce qui provoque la dégradation de la β-caténine et la diminution de l’expression de la cycline D1 résultant à l’arrêt du cycle cellulaire en phase G1/S. Le traitement des cellules tumorales avec le mAb16D10 s’accompagne de l’expression de la E-cadhérine. L’antigène 16D10 associé aux radeaux lipidiques et à la β-caténine pourrait constituer une plateforme de signalisation, reconnue par le mAb16D10 permettant le recrutement de la E-cadhérine et l’induction de la mort cellulaire. Nous avons également montré l’efficacité thérapeutique in vitro du mAb16D10, associé aux drogues conventionnelles telles que la gemcitabine et le cisplatine. Le mAb16D10 se révèle être un outil thérapeutique prometteur pour le traitement des adénocarcinomes pancréatiques.

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Bernon, Marc Michael. "A prospective randomised trial comparing plastic and uncovered self-expanding metal stents for palliation of symptomatic jaundice in patients with malignant distal biliary obstruction." Master's thesis, University of Cape Town, 2017. http://hdl.handle.net/11427/25252.

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Abstract:

The aim of this study was to determine the safety and clinical effectiveness of 10Fr plastic biliary stents compared to uncovered self-expanding metal stents (SEMS) for palliative treatment of patients with inoperable malignant distal biliary obstruction in a public hospital in South Africa. Methods: From January 2009 to December 2013, 40 patients who were admitted to a tertiary academic centre because of distal malignant biliary obstruction were enrolled in a prospective randomised study. Patients were randomly assigned to receive either an uncovered SEMS or a plastic stent deployed through the biliary stricture during endoscopic retrograde cholangiopancreatography. Results: Patient survival time in the two groups did not differ significantly (median: SEMS - 114 days; plastic - 107 days) (p=0.181). Stent failure was more common in the plastic stent group (7/19 vs. 1/20) (p=0.043). The results became significant after 6 months of follow up. There was no significant difference between the two groups in the incidence of serious adverse events. Conclusions: SEMS had a longer duration of patency than plastic stents, which favours their use in the palliative treatment of patients with biliary obstruction due to distal malignant biliary obstruction.

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Queniat, Gurvan. "Rôle des acides biliaires et de leur récepteur TGR5 dans la régulation de la somatostatine pancréatique et intestinale : conséquences fonctionnelles sur les îlots pancréatiques humains." Thesis, Lille 2, 2015. http://www.theses.fr/2015LIL2S024/document.

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Abstract:

Le rôle des acides biliaires a évolué ces dernières années passant de simples molécules solubilisatrices des lipides à des composés à activité métabolique. En plus de leur fonction dans l’absorption des lipides post-repas, ils ont été montrés comme stimulant de nombreuses voies de signalisation modulant l’expression de gènes clefs du métabolisme et de nombreux mécanismes physiologiques via l’activation de récepteurs spécifiques tels que les récepteurs « Farnesoid X receptor » (FXR) et le récepteur membranaire couplé à une protéine G, TGR5. La protéine TGR5 codée par le gène GPBAR1, aussi connue sous le nom de « G-protein-membrane-type receptor for bile acids » (M-BAR) est le premier récepteur couplé à une protéine G spécifique aux acides biliaires ayant été mis en évidence. Cette protéine est exprimée dans de nombreux tissus clefs du métabolisme énergétique tels que les cellules L intestinales, le tissu adipeux, les reins, le muscle squelettique et le pancréas. En réponse à la fixation des acides biliaires au récepteur TGR5, celui-ci va être internalisé et sa sous-unité GαS va être libérée. Ce mécanisme va ensuite activer l’adénylate cyclase et augmenter la production d’AMPc à l’origine de l’activation des voies de signalisations liées à la protéine kinase A (PKA). Une fois activée, la PKA va induire la phosphorylation des protéines « cAMP-response element-binding » (CREB) et permettre la modulation de l’expression de gènes cibles.Ces dernières années de nombreux travaux ont eu pour but d’étudier le rôle du récepteur TGR5 dans le métabolisme. Chez la souris, l’activation du récepteur TGR5 stimule la dépense énergétique dans le tissu adipeux brun et dans le muscle squelettique et prévient le développement de l’obésité et de l’insulino-résistance induites par un régime riche en graisses. Le récepteur TGR5 est également impliqué au niveau des cellules L intestinales sécrétrices du GLP-1. Il y joue un rôle essentiel dans l’homéostasie glucidique via la régulation de l’activité pancréatique, des sécrétions de l’insuline et du glucagon, de l’inhibition de la vidange gastrique ou encore de la modulation des messages de satiété via des voies neuroendocrines. TGR5 présente également des fonctions immunologiques avec une expression connue dans les cellules de l’immunité telles que les monocytes, les macrophages alvéolaires ou encore les cellules de Kupffer. TGR5 a également été mis en évidence comme régulateur des mécanismes d’inflammations via les macrophages avec une diminution de l’expression des cytokines pro-inflammatoires. A l’opposé, l’activation de TGR5 serait impliquée dans de nombreux processus pathologiques tels que, le développement de carcinomes gastro-intestinaux, les pancréatites, la lithiase biliaire, suggérant un rôle potentiel du récepteur TGR5 dans la régulation de voies de signalisation responsables de la prolifération et de la mort cellulaire [...]
Bile acids (BAs) have evolved over the years from being considered as simple lipid solubilizers to metabolically active molecules. In addition to their function in dietary lipid absorption, they have also been shown to activate farnesoid X receptor (FXR) and TGR5 receptors to initiate signaling pathways and regulate metabolic gene transcription. TGR5 (encoded by the GPBAR1 gene), also known as G-protein-membrane-type receptor for bile acids (M-BAR) or G-protein-coupled bile acid receptor 1 (GPBAR1), was the first identified G-protein coupled receptor specific for bile acids. In normal individuals, the highest level of GPBAR1 mRNA expression was reported in the gallbladder, placenta and spleen, followed by moderate expression in other tissues including lungs, liver, stomach, small intestine and adipose tissue, with a relatively low level of expression in kidney, skeletal muscles and pancreas. In response to binding of BAs to the ligand-binding pocket of the TGR5 protein, the TGR5 receptor is internalized and the GαS subunit is released. This mechanism leads to activation of adenylate cyclase and an increase in cAMP production resulting in induction of the protein kinase A (PKA) pathway. Subsequently, PKA phosphorylates the cAMP-response element-binding protein (CREB) and enhances the transcription of its target genes in response to extracellular signals.To date, extensive work has been done to investigate the role of TGR5 in metabolism. In rodents, BA-activated TGR5 receptor stimulates energy expenditure in brown adipose tissue and skeletal muscle and prevents obesity and insulin resistance induced by a high fat diet. TGR5 is also implicated in intestinal L-cells secreted GLP-1, which plays an essential role in glucose homeostasis through the stimulation of glucose-dependent-insulin-secretion and inhibition of glucagon secretion, inhibition of gastric emptying and increasing satiety through neuroendocrine pathways. In terms of the immunological function of TGR5, it is now known that TGR5 is expressed in several immune cells such as monocytes, alveolar macrophages and Kupffer cells. The beneficial effects of TGR5 on macrophage-driven inflammation include reduced proinflammatory cytokine expression, thus protecting against atherosclerosis and liver steatosis. On the contrary, TGR5 activation has also been implicated in itch and analgesia, gastrointestinal-tract cell carcinogenesis, pancreatitis, and cholelithiasis, suggesting a potential role for TGR5 as a regulator of signal transduction pathways responsible for cell proliferation and apoptosis. BAs may also influence islet function via both direct and indirect mechanisms as recent studies have shown that Farnesoid X receptor (FXR) is expressed by pancreatic beta cells, and regulates insulin signaling in cultured cell lines. Kumar et al., [14] also reported that the TGR5 agonists INT-777 + oleanolic acid (OA) stimulated glucose-mediated insulin release via TGR5 activation, also in cultured cells. Still, little is known about the regulation of TGR5 expression or its involvement in pancreatic hormone secretion in response to physiological or pathological conditions such as T2D, as these studies have been performed mainly in cultured cell lines. In these contexts, the biological function of TGR5 remains enigmatic. The aim of the present study was first to establish the specific expression of TGR5 in human pancreatic islet cell subtypes. Then, a cross-sectional cohort of human islets isolated from individuals with various degrees of insulin resistance was exploited to determine if TGR5 expression and function was modified in T2D. Finally to determine if targeting TGR5 is clinically relevant, human islets were treated in-vitro with a specific agonist of TGR5 or with siRNA directed against TGR5 and hormone secretion assessed to establish whether TGR5 activation or inhibition modulate pancreatic hormone secretion

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Chavez, Talavera Oscar Manuel. "Rôle des acides biliaires dans la physiopathologie de l'obésité, la résistance à l'insuline, le diabète de type 2, la stéatose hépatique non alcoolique et dans le contexte de la chirurgie bariatrique Bile Acid Control of Metabolism and Inflammation in Obesity, Type 2 Diabetes, Dyslipidemia, and Nonalcoholic Fatty Liver Disease Bile Acid Alterations in Nonalcoholic Fatty Liver Disease, Obesity, Insulin Resistance and Type 2 Diabetes: What Do the Human Studies Tell?” Bile acids associate with glucose metabolism, but do not predict conversion to diabetes Bile acid alterations are associated with insulin resistance, but not with NASH in obese subjects Roux-en-Y gastric bypass increases systemic but not portal bile acid concentrations by decreasing hepatic bile acid uptake in minipigs The functional relevance of bile acids in the improvement of HDL-mediated endothelial protection after bariatric surgery Metabolic effects of bile acid sequestration: impact on cardiovascular risk factors." Thesis, Lille, 2019. http://www.theses.fr/2019LILUS057.

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Abstract:

En plus de leur rôle dans la solubilisation des lipides alimentaires, les acides biliaires sont des molécules de signalisation régulant leur propre métabolisme, l'homéostasie du glucose et des lipides, la dépense énergétique, la fonction cardiovasculaire et l’inflammation, en modulant le Farnesoid X Receptor (FXR) et le Takeda G protein coupled Receptor 5 (TGR5). En effet, des modifications dans les concentrations des acides biliaires sont associées aux maladies métaboliques et ce sont des candidats pour participer à la pathophysiologie de ces maladies ou prédire leur progression.Dans la première partie de cette thèse nous avons étudié les modifications des acides biliaires dans le contexte de l'obésité, l'insulinorésistance, le diabète de type 2 et la stéatohépatite non alcoolique. Nous avons montré que les acides biliaires sont corrélés avec l’homéostasie du glucose chez l’Homme, mais qu’ils ne sont pas des prédicteurs de la bascule du prédiabète en diabète de type 2 dans un étude de cohorte.La deuxième partie de cette thèse est dédiée à l’étude des acides biliaires dans la chirurgie bariatrique. Nos résultats ont montré que la chirurgie bariatrique réduit la recapture hépatique des acides biliaires, provoquant leur augmentation dans la circulation systémique, et que ce n’est pas l’anse biliaire mais l’anse commune qui est responsable des modifications métaboliques après la chirurgie bariatrique chez le minipig. Ensuite, nous avons montré chez l’Homme que les acides biliaires liés aux lipoprotéines de haute densité (HDL) augmentent après la chirurgie bariatrique, et que cette augmentation est corrélée avec la restauration de leurs fonctions vaso-protectrices
In addition to their role in the solubilization of dietary lipids, bile acids are signaling molecules regulating their own metabolism, glucose and lipid homeostasis, energy expenditure, cardiovascular function and inflammation via the activation of the Farnesoid X Receptor (FXR) and the Takeda G protein coupled Receptor 5 (TGR5). Indeed, changes in bile acid concentrations are associated with metabolic diseases and therefore they are candidates to participate in the pathophysiology of these diseases or predict their progression.In the first part of this thesis, we studied bile acid changes in the context of obesity, insulin resistance, type 2 diabetes and non-alcoholic steatohepatitis. We demonstrated that bile acids are correlated with glucose homeostasis in humans, but that they are not predictors for the progression from prediabetes to type 2 diabetes in a longitudinal cohort study.In the second part of this thesis, we studied the bile acids in the context of bariatric surgery. Our results showed that bariatric surgery reduces the hepatic recapture of certain bile acids, causing them to increase in the systemic circulation. Additionally, we showed that it is not the bile limb but the common limb the one responsible for metabolic changes after bariatric surgery in the minipig. Finally, we showed in humans that bile acids linked to high-density lipoproteins (HDL) increase after bariatric surgery, and that this increase is correlated with the restoration of their vasoprotective functions

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Da, Silveira Eduardo. "Cost-effectiveness decision analyses comparing covered to uncovered self-expandable metal stents to elective or on-demand polyethylene stent changes in patients with distal malignant biliary obstruction." Thesis, McGill University, 2005. http://digitool.Library.McGill.CA:80/R/?func=dbin-jump-full&object_id=84091.

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Abstract:

Introduction. Endoscopic placement of stents is the preferred treatment for palliation of obstructive symptoms in non-operative candidates but significant differences in procedure and stent-related costs, patency of stents survival of patients exist. Aim. To determine the cost-effectiveness of two strategies using Polyethylene (PE) stents (PE with replacement on demand; PE with routine exchange every 3 months), as well as uncovered (U-SEMS) and covered self-expandable metal stent (C-SEMS) in the management of distal malignant biliary obstruction. Methods. A Markov model comparing four different initial approaches was designed: (1) PE stent with replacement on demand (PE-D); (2) PE stent changed every 3 months (PE-Q3); (3) U-SEMS or (4) C-SEMS. Probabilities and parameters for distribution were abstracted from randomized controlled trials and imputed to a 12-month time horizon. Effectiveness was calculated as number of occlusion-free months. Procedural and complication-related costs were obtained from the Canadian Institute for Health Information and a Provincial perspective was adopted. A probabilistic cost-effectiveness analysis using Monte Carlo simulations was utilized to obtain a posterior joint distribution for costs and effectiveness. Average and incremental net health benefits, probabilities of cost-effectiveness and value of information were determined across a range of willingness to pay (Rc) values. Results. PE-D has the lowest CE ratio, followed by C-SEMS at an incremental cost-effectiveness ratio (ICER) of $146.64$/month of stent patency. C-SEMS has the lowest CE ratio under the following scenarios: probability of survival at 12 months greater than 83%, ERCP costs higher than $1,282.90, cost C-SEMS less than $1,485.60 and cost ratio between ERCP and C-SEMS greater than 0.4. In the probabilistic analysis, PE-D is the strategy with the highest probability of cost-effectiveness for willingness to pay values lower than $150.60. How
Conclusion. Conditional to the willingness to pay and current Canadian costs, PE-D and C-SEMS are the strategies with the highest probabilities of cost-effectiveness. However, a significant level of uncertainly remains and wrong decisions will occur given the existent information. Acquisition of further knowledge to decrease the uncertainty level may be indicated if it costs less than the opportunity losses.

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Amzal, Rachida. "Pharmacothérapie ciblée dans la cholestase intrahépatique familiale progressive de type 2 (PFIC2)." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2019. http://www.theses.fr/2019SACLS187.

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Abstract:

ABCB11/BSEP est le transporteur des acides biliaires, localisé au niveau du pôle canaliculaire des hépatocytes. Les mutations de ce gène sont responsables de la cholestase familiale intrahépatique progressive de type 2.Au cours de ma thèse, j’ai évalué la capacité des aminoglycosides et du PTC124 à induire la translecture de codons stop prématurés, l’adressage et la fonction de mutants non-sens et faux sens de Bsep ainsi que l’effet d’une bithérapie (translecture+chaperone).Dans nos modèles cellulaires, la gentamicine était capable d’induire la translecture du codon-stop prématuré du mutant non-sens BsepR1090X dans les lignées NIH3T3, HEK293 et Can 10. La protéine entière générée était partiellement détectée aux membranes plasmiques des cellules HEK293 et canaliculaires des cellules Can 10 et était partiellement fonctionnelle puisqu’elle était responsable d’une augmentation de l’activité de transport de 3H-taurocholate (3H-TC) dans les clones MDCK. Ces effets étaient potentialisés par l’addition de drogues chaperones telles que le 4-phenylbutyrate (4-PB).J’ai également mis en évidence la capacité de nouveaux composés dérivés du 4-PB (MHMPB, OTNC et HMPB) à corriger l’adressage et à augmenter le transport de 3H-TC du mutant faux sens BsepR1128C à des concentrations plus faibles que le 4-PB. Enfin, j’ai pu montrer que d'autres drogues chaperones (GPB, PA, SAHA et C18), pouvaient corriger l’adressage canaliculaire de BsepR1128C et augmenter son activité de transport de 3H-TC dans les clones MDCK
ABCB11/BSEP is the main bile acids transporter located at the canalicular pole of hepatocytes. Mutations of ABCB11 are responsible for progressive familial intrahepatic cholestasis type 2.During my phD, I evaluated the ability of aminoglycosides and PTC124 to induce readthrough of premature termination codons, targeting and function of nonsense and missense mutants of Bsep and also the effect of combined therapy (readthrough + chaperone).In our expermental models, gentamicin increased readthrough of p.R1090X mutation NIH3T3, HEK293 and Can 10 lines. The resulting full-length protein was detected at the plasma membrane of HEK293 and at the canalicular membrane of Can 10 cells; and was partially functional since it was responsible for increasing the transport activity of 3H-taurocholate (3H-TC) in MDCK clones. These effects were potentiated by the addition of chaperone drugs such as 4-phenylbutyrate (4-PB).I have also demonstrated the ability of new 4-PB derived compounds (MHMPB, OTNC and HMPB) to correct mistrafficking and to increase 3H-TC transport of BsepR1128C missense mutant at lower concentrations than 4-PB. Finally, I showed that other chaperone drugs (GPB, PA, SAHA, and C18) were able to correct mistrafiking of BsepR1128C and to increase its 3H-TC transport activity in MDCK clones

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Gaëlle, Favé. "Stratégies d'amélioration de la biodisponibilité des acides gras : approches physico-chimiques et enzymatiques." Phd thesis, Université de la Méditerranée - Aix-Marseille II, 2006. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00689483.

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Abstract:

La biodisponibilité des nutriments lipidiques dépend d'un processus physico-chimique et enzymatique complexe : digestion par les lipases dans l'estomac puis l'intestin, absorption par les entérocytes et transport vers les cellules utilisatrices. L'altération physiologique (nouveau-né, personne âgée) ou pathologique (mucoviscidose, pancréatite) de ce processus réduit la biodisponibilité des acides gras essentiels, indispensables au développement et au fonctionnement des cellules de l'organisme. Ce mémoire présente des stratégies permettant d'améliorer la biodisponibilité des nutriments lipidiques chez l'insuffisant pancréatique, en utilisant les propriétés physico-chimiques des lipides. En effet, elles déterminent des caractéristiques primordiales de l'interface lipidique (superficie, composition), au niveau de laquelle se déroule l'hydrolyse enzymatique. Nos travaux montrent, in vitro dans des conditions proche de la physiologie, que le type de phospholipide entrant dans la composition d'une émulsion de trioléine, ou l'ajout d'un type donné d'acide gras libre dans le mélange lipidique avant l'émulsification, modifie la taille et le potentiel zêta des globules lipidiques, influence l'action des lipases gastrique, pancréatique et stimulée par les sels biliaires, et module l'absorption des acides gras par des cellules Caco-2. Un effet majeur est obtenu avec le lysophosphatidylinositol, rendant ce lipide potentiellement utilisable en nutrition clinique. Il présente un comportement interfacial étonnant (aire moléculaire, compressibilité) et son mécanisme d'action associe des effets indirects (modifications de l'interface lipidique) et directs (interactions avec les lipases).

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Mazuy, Claire. "Etude de l’interaction entre le récepteur nucléaire FXR et le facteur de transcription FOXA2 dans le foie." Thesis, Lille 2, 2015. http://www.theses.fr/2015LIL2S055/document.

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Abstract:

Le foie est un organe clef dans la régulation du métabolisme énergétique de l’organisme. La superfamille des récepteurs nucléaires y joue un rôle primordial de senseur de l’environnement métabolique. Parmi ces récepteurs nucléaires, le récepteur des acides biliaires FXR participe aux mécanismes de régulation de l’activité du foie à travers son action sur les métabolismes des acides biliaires, des glucides et des lipides. FXR est devenu ainsi une cible thérapeutique potentielle dans le traitement de nombreuses maladies impliquant un désordre métabolique comme les cholestases, le diabète de type 2 ou la stéatohépatite non-alcoolique. Malgré des résultats prometteurs dans le traitement de la stéatohépatite non-alcoolique, le traitement de patients avec un agoniste de FXR, le INT747, semble augmenter la concentration plasmatique du LDL-Cholestérol et diminue la concentration du HDL-Cholestérol suggérant un risque accru de développement d’athérosclérose. Ces effets sur le profil lipidique sont le frein majeur du développement clinique de ses agonistes. Les mécanismes moléculaires impliqués dans la régulation par FXR de nombreuses voies comme le métabolisme des lipides et du cholestérol sont peu explorés et peu compris. Compte-tenu de ces informations, il est d’autant plus intéressant d’approfondir les connaissances de ces mécanismes et d’identifier des facteurs ou de nouveaux partenaires capables de moduler l’activité transcriptionnelle de FXR plus spécifiquement dans le cadre du contrôle du métabolisme des lipides et du cholestérol. L’un des facteurs de transcription connu comme régulateur majeur de ces voies métaboliques dans le foie est le facteur de transcription de la famille forkhead FOXA2. Ce facteur de transcription, dont l’activité est dépendante des conditions physiologiques, est activé par le glucagon et inhibé par l’insuline. De plus, c’est également un régulateur du métabolisme des acides biliaires, du cholestérol et des lipides.L’objectif de cette thèse a été d’étudier l’interaction entre les voies de signalisation de FXR et de FOXA2 dans différentes lignées cellulaires d’hépatocytes humains ou murins et dans le foie. Nous avons établi que FOXA2 et FXR sont colocalisés sur la chromatine des cellules HepG2 et dans le foie de souris à proximité de gènes impliqués dans la régulation du métabolisme des lipides et du cholestérol. Ces zones de cofixation de FXR et de FOXA2 présentent très peu de motifs de fixation de FOXA2 suggérant l’implication d’autres motifs de fixation non connus ou un mécanisme de type « tethering ». Nous avons montré que la fixation de FOXA2 à ces zones de cofixation avec FXR est augmentée par l’activation de FXR par son agoniste, le GW4064, évoquant une potentielle interaction entre ces deux facteurs. Nous avons démontré que ces deux facteurs interagissaient physiquement et que FOXA2 est un répresseur de l’activité transcriptionnelle de FXR à travers l’utilisation de différentes approches et modèles cellulaires. Finalement, dans les hépatocytes primaires de souris, FOXA2 est impliqué dans la répression de l’activité transcriptionnelle de FXR par le glucagon sur le gène Shp.L’ensemble de ce travail met en évidence pour la première fois la répression de l’activité de FXR par le facteur de transcription caractéristique du jeûne FOXA2 à travers un mécanisme moléculaire suggérant une transrépression de type «tethering». Ces résultats présentent un mécanisme inédit par lequel l’activité de FXR peut être modulée par le statut nutritionnel de façon gène-spécifique
The liver is a key regulator of whole-body energy metabolism. The nuclear receptor super-family plays a leading role in the metabolic sensing of the liver. Among the nuclear receptors, the bile acid nuclear receptor FXR contribute to the modulation of liver activity in particular through the regulation of bile acid, lipids and glucose homeostasis. Consequently, FXR became a potential therapeutic target for many diseases implicated metabolic disorder such as cholestasis, type 2 diabete or Non-Alcoholic Steatohepatitis (NASH). Despite promising results especially on NASH, patient treatment with FXR agonist the INT747 seems to increase LDL-Cholesterol plasma concentrations together with a decreased concentration of HDL-Cholesterol suggesting a higher risk to develop atherosclerosis. These effects on plasma lipid profile are the major break against the development of agonists in clinics. Giving the poor understanding and knowledge of the molecular mechanisms which govern FXR regulation of activity on various signaling pathways, it is of major interest to find new partners and regulators of FXR and especially on lipid and cholesterol homeostasis. One of the transcription factor known to be active in the control of these signaling pathways in the liver is the forkhead box transcription factor FOXA2. This transcription factor whose activity is dependent of physiological conditions is activated by glucagon and inhibited by insulin. In addition, this factor is known to regulate bile acid, cholesterol and lipid metabolism, functions very close from FXR activities in the liver.The objective of this PhD was to study the interaction between FXR and FOXA2 signaling pathways in different hepatic cells lines from human or mouse origin and in the liver. We established that FOXA2 and FXR are colocalised in HepG2 cells and liver chromatin near genes implicated in the lipid and cholesterol metabolism. These FXR/FOXA2 cobinding zones present few consensus FOXA2 response elements suggesting the implication of non consensus binding motifs or a “tethering” mechanism. We show that FOXA2 binding to FXR/FOXA2 cobinding zones is increased when FXR is activated and/or more present in the chromatin evoking a potential interaction between these two factors. We demonstrate that FXR and FOXA2 interact physically and that FOXA2 is a repressor of FXR transcriptional activity using different approaches and cellular models. Finally, we show that FOXA2 is implicated in glucagon-induced repression of FXR transcriptional activity on Shp gene.To conclude, our results show for the first time that the fasting key regulator of lipid and cholesterol homeostasis FOXA2 is a repressor of FXR transcriptional activity through a plausible mechanism involving “tethering” process. This work gives a novel mechanism by which FXR activity can be modified by nutritional status in a gene-specific manner

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Casavant, Stéphanie. "Rôle du niveau d'expression d'ABCC2 dans la sensibilité à la cholestase intrahépatique induite par une infusion de taurocholate." Thèse, 2006. http://hdl.handle.net/1866/15359.

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Wang, Sheng-Hsiang, and 王聖翔. "A Study of Multilayer Self-Cleaning Membranes for Biliary Stents." Thesis, 2019. http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/bzs22r.

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Abstract:

碩士
國立臺灣科技大學
機械工程系
107
Bile duct obstruction is the main problem caused by cholangiocarcinoma. Currently, placing biliary stent in the body is the main solution to biliary occlusion. However, the obstruction could happen again after several months. The secondary endoscopic surgery is a method to solve biliary reocclusion, but it may cause life risk and financial burden. This study is trying to develop a multilayer self-cleaning membrane to postpone stent reocclusion. This multilayer self-cleaning membrane consists of biodegradable PLA (Polylactic Acid) films and PVA (Polyvinyl Alcohol) films. In order to achieve the functions that the structural membrane can not only degrade into PLA fragments periodically but also clean the attached contaminant away smoothly. The experiments of this study focus on different kinds of designed patterns and intervals. Based on the limitation of nanosecond laser machine, the minimum interval can be downsized to 0.3 mm. The experimental results show the structural film with narrower intervals between the structures can disintegrate more effectively. Also, the structural film can disintegrate effectively with comparatively large ratio of pattern size and connection interval width. If the PLA structural film is thinner, it would disintegrate rapidly after the solution permeates the film and degrade the under PVA film. In addition, our experiments have proved the structural membrane can clean the attached contaminant during degradation process periodically.

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Gagnon-Duval, Laurianne. "Une approche moléculaire pour mieux comprendre l'infertilité chez la vache laitière." Thèse, 2015. http://hdl.handle.net/1866/13381.

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Abstract:

Au cours des dernières années, une sélection génétique importante a été faite pour améliorer la production de lait des bovins, ceci au détriment des performances reproductives. Cette diminution de performance n’a cependant pas été rapportée chez la génisse présentant un même potentiel génétique. Cette immense production de lait et les changements métaboliques qui l’accompagnent ont donc un impact négatif sur l’efficacité reproductive des vaches laitières qui subissent un stress métabolique supérieur à celui des génisses. Le but de l’étude était d’acquérir une meilleure connaissance des différences moléculaires et métaboliques entre ces deux groupes d’animaux pour amener à une meilleure compréhension de la pathogenèse de l’infertilité chez la vache laitière. Pour ce faire, les vagues folliculaires de vaches en lactation (30-50 jours en lait; N = 12) et de génisses (N = 10) ont été synchronisées par ablation écho guidée des follicules et par traitement hormonal avec injection de prostaglandine et insertion d’un implant de progestérone. L’aspiration du liquide folliculaire et des cellules de la granulosa du follicule dominant a été faite au jour 6. Les paramètres métaboliques mesurés chez les animaux à partir de prises de sang, faites au jour 6, confirment un plus grand stress métabolique chez la vache, les niveaux de BHBA, acides biliaires et cholestérol étant plus élevés et le niveau de glucose plus bas chez celles-ci. Un total de six échantillons a été utilisé pour le séquençage d’ARN et des analyses bio-informatiques ont été effectuées. Plusieurs gènes et voies de signalisation ont présenté des différences entre les deux groupes d’animaux incluant le cycle cellulaire et la production d’hormones. Une confirmation des résultats par PCR en temps réel a été faite, mais la grande variation intragroupe a nui à l’obtention de résultats significatifs. Conjointement, une culture primaire de cellules de la granulosa a été réalisée pour évaluer l’effet des acides biliaires sur la stéroïdogenèse suite à la détection d’une plus grande quantité de ceux-ci chez la vache laitière. La présence d’acide biliaire dans la culture cellulaire cause une diminution de l’accumulation d’estradiol ainsi que de l’expression des gènes CYP19A1 et CYP11A1. Les résultats présentés dans ce mémoire indiquent une différence potentielle au niveau métabolique et moléculaire des follicules dominants entre la vache laitière et la génisse pouvant avoir une responsabilité dans la diminution de l’efficacité reproductive observée chez la vache laitière.
Over the last fifty or more years, genetic selection has been employed to improve milk production in dairy cattle. This selection was made at the expense of reproductive performance. The observed decrease in fertility does not occur in heifers with the same genetic merit. The enormous milk production and the metabolic challenge that accompany it have a negative impact on the reproductive efficiency due to the metabolic stress of lactation. The purpose of the study was to gain a better knowledge of the molecular and metabolic difference between the two groups of animals in order to better understand the pathogenesis of infertility in dairy cows. To do this, the follicular wave of twelve lactating cows (30-50 days in milk; N = 12) and ten heifers (N = 10) were synchronized by ultrasound guided follicle ablation and by hormonal treatment with injection of prostaglandin-F2α and insertion of a progesterone implant. Follicular fluid and granulosa cells of the dominant follicle were aspirated on day 6. The metabolic indicators BHBA, total bile acids, cholesterol and glucose, were measured in the animals from the blood samples also taken on day 6 confirming greater metabolic stress in the cows when compared to the heifers. A total of six samples were used for RNA sequencing and bioinformatics analyses were performed. Several genes and signaling and cellular function pathways were shown to differ between the two groups of animals, including the cell cycle signaling pathway and hormone production pathway. A confirmation of the results by real-time PCR was undertaken, but the great intragroup variation obviated significant results. In the second set of experiments, primary culture of granulosa cells was conducted to evaluate the effect of bile acids on steroidogenesis to further explore the larger amount of the bile acids in the dairy cows when compared to heifers. The results demonstrate a difference in the metabolic status of the animals; BHBA, total bile acids and cholesterol being higher and glucose being lower in the dairy cow relative to the heifer. Presence of bile acids in the granulosa cell culture caused a decrease in expression of CYP19A1, CYP11A1 and estradiol accumulation. The differences at the metabolic and molecular level of the dominant follicles between dairy cows and heifers may be implicated in the reduced reproductive efficiency of the dairy cows.

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Zhang, Meng. "Supramolecular hydrogels based on bile acids and their derivatives." Thèse, 2016. http://hdl.handle.net/1866/18440.

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Abstract:

Les hydrogels moléculaires avec un réseau de fibres auto-assembles sont utilisés dans différents domaines dont le relargage de médicaments, les senseurs, l’ingénierie tissulaire et la nano-modélisation. Les hydrogels moléculaires à base d’acides biliaires, qui sont une classe de biocomposés d’origine naturelle, montrent une biocompatibilité améliorée et sont de bons candidats pour des applications dans le domaine biomédical. Ces hydrogels présentent une bonne bio-dégradabilité et une diversité fonctionnelle grâce aux faibles interactions supramoléculaires et aux structures chimiques précisément contrôlées. Dans cette thèse, des nouveaux hydrogels moléculaires à base des acides biliaires et leurs dérivés ont été étudiés pour mieux comprendre la relation entre la structure chimique du gélifiant et la formation de gels moléculaires. Un dimère de l'acide cholique avec un groupe diéthylènetriamine est insoluble dans l'eau. Par contre, il peut former des hydrogels grâce à un réseau tri-dimensionnel de fibres en présence de certains acides carboxyliques. L'addition d'acide carboxylique peut protoner le groupe amine secondaire et défaire les interactions intermoléculaires entre les dimères et favoriser la formation des liaisons hydrogènes acide-dimère. Seuls les acides carboxyliques faibles et hydrophiles causent la gélation des dimères. La résistance mécanique des hydrogels formés peut être modifiée par un choix judicieux d'acides. Les interactions hydrophobes et les liaisons hydrogènes entre les chaînes latérales d'acides carboxyliques peuvent améliorer les propriétés mécaniques des hydrogels. La solubilité marginale du complexe acide-dimère a été considérée comme un facteur critique pour la formation d'hydrogels. Un autre système d’hydrogélation à base d’acides biliaires a été développé par l’introduction de dioxyde de carbone (CO2) dans des solutions aqueuses de certains sels d’acides biliaires, qui donne un hydrogel composé de molécules biologiques entièrement naturelles et fournit un réservoir commode du CO2 dans l’eau. Le groupement carboxylate des sels d’acides biliaires peut être partiellement protoné dans les solutions aqueuses, ce qui amène la dissolution marginale dans l’eau et la formation d’hydrogels avec une structure fibreuse. L’aspect et les propriétés mécaniques des hydrogels dépendent de la concentration de CO2. Le bullage avec CO2 pendant une ou deux secondes génère un hydrogel transparent avec des nanofibres. Le bullage supplémentaire forme des hydrogels plus forts. Mais réduit la transparence et la force mécanique des hydrogels. D’ailleurs, les hydrogels transparents ou opaques redeviennent des solutions transparentes quand ils sont chauffés avec bullage de N2. La transition sol-gel est réversible et reproductible. La force mécanique et la transparence des hydrogels peuvent être améliorées par l’addition de sels inorganiques comme NaCl par l’effet de relargage. Toutes les composantes de ces hydrogels sont naturelles, donnant des hydrogels biocompatibles et potentiellement utiles pour des applications dans le domaine biomédical. Le dimère mentionné ci-dessus possède des propriétés d’auto-assemblage dépendamment de sa concentration. Ceci a été étudié en utilisant un sel organique de dimère/acide formique avec un rapport molaire 1/1. Le sel du dimère s’auto-assemble dans l’eau et ainsi forme des nanofibres isolées et mono-dispersées à des concentrations faibles. Les fibres enchevêtrées donnent des réseaux fibreux 3D bien dispersés de façon aléatoire à des concentrations plus élevées. Quand la concentration du sel du dimère est supérieure à la concentration critique de gélation, le réseau fibreux est assez fort pour immobiliser la solution, qui provoque la formation d’un hydrogel isotrope. L’augmentation supplémentaire de la concentration du sel du dimère peut augmenter l’anisotropie de l’hydrogel et former ainsi un hydrogel nématique. La formation de domaines ordonnés des nanofibres alignées donne ces propriétés optiques à l’hydrogel. L’agitation de systèmes aqueux du sel de dimère favorise aussi la formation de nanofibres alignées.
Molecular hydrogels are soft materials formed by the self-assembly of small molecules in aqueous solutions via supramolecular interactions. Although much effort has been made in the past several decades in the study of these hydrogels, the mechanism of their formation remains to be understood and the prediction of their formation is a challenge. The main purpose of this thesis is to develop novel molecular hydrogels derived from bile acids, which are naturally occurring biocompounds, and to find the relationship between the gelator structure and the gelation ability. Two new molecular gelation systems based on bile acids and their derivatives have been developed, which may be useful in biomedical applications. The marginal solubility of the solute in water has been found to be a prerequisite for the formation of such molecular hydrogels. The alignment of the nanofibers in the gels leads to the formation of nematic hydrogels. The first gelation system is based on a cholic acid dimer as a gelator, which has two cholic acid molecules covalently linked by a diethylenetriamine spacer. This dimer is insoluble in water, but it forms hydrogels with 3-D fibrous networks in the presence of selected carboxylic acids. The carboxylic acids protonate the dimer, making it marginally soluble in water to yield hydrogels. Only weak and hydrophilic carboxylic acids were capable of inducing the gelation of the dimer and the mechanical strength of the hydrogels could be varied by judicious choice of the acids. Hydrophobic interactions and hydrogen bonding between the side chains of carboxylic acids improve the mechanical properties of hydrogels. The marginal solubility of the acid-dimer complex is regarded to be the critical factor for the formation of hydrogels. Another hydrogelation system was developed by purging to the aqueous solutions of a series of bile salts with carbon dioxide (CO2), yielding hydrogels made of entire natural biological molecules and providing a convenient storage reservoir of CO2 in water. Bile salts are well dissolved in water, while the solubility of bile acids is limited. The carboxylate group of bile salts may be partially protonated in aqueous solutions by bubbling CO2, making them only marginally soluble in water. This forms fibrous structures. Both the appearance and mechanical properties of the hydrogels depend on the amount of CO2 purged. Bubbling CO2 initially induced the formation of transparent hydrogels with nanofibers. Continued purging with CO2 strengthened the hydrogel mechanically, while further addition of CO2 reduced the transparency and mechanical strength of the hydrogel. Both the transparent and opaque hydrogels reverted to transparent solutions when heated and bubbling N2. The sol-gel transition process was reversible and repeatable. The mechanical strength and transparency of the hydrogels could be improved by adding inorganic salts such as NaCl via a salting-out effect. All the hydrogel components are naturally biological compounds, making such hydrogels biocompatible and potentially useful in biomedical applications. The cholic acid dimer linked with a diethylenetriamine spacer was able to assemble in water and form isolated nanofibers in the presence of certain carboxylic acids at a much lower concentration than the CMC of sodium cholate. These nanofibers entangle with each other to yield well-dispersed and randomly-directed 3-D fibrous networks at higher concentrations. When the concentration of dimer salt is above the minimum gelation concentration, the fibrous network is strong enough to immobilize the solution, leading to the formation of an isotropic hydrogel. Further increase of the dimer salt concentration may transit the hydrogels to be anisotropic, thus the formation of nematic hydrogels. The formation of ordered domains of the aligned nanofibers led to anisotropic optical properties of the hydrogels. Stirring the aqueous systems of dimer salt also promoted the alignment of the nanofibers. These molecular hydrogels with ordered aggregates may be useful in applications such as cell culture and mechano-optical sensing.

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Dissertations / Theses on the topic 'Biliaire, sel'

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