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Rachidi, Makgangtsake Dominic. "Heterologous expression of alcelaphine herpesvirus 1 structural proteins and their use in the development of an ELISA." Diss., University of Pretoria, 2013. http://hdl.handle.net/2263/40709.
Full textAbstract:
Malignant catarrhal fever (MCF), a disease that is usually fatal in cattle, is caused by two
distinct but related bovine herpesviruses which are members of the genus Macavirus. The
wildebeest-associated alcelaphine herpesvirus-1 (AlHV-1) occurs mainly in East and
southern Africa, whereas the sheep-associated ovine herpesvirus-1 (OvHV-2) has an almost
worldwide distribution. The natural hosts or carriers of these two viruses are subclinically
infected. The 130 kilobase pair (kbp) AlHV-1 double stranded DNA genome consists of 18
open reading frames (ORFs) coding for structural proteins and approximately 50 ORFs
coding for non-structural proteins. The 18 structural ORFs encode for 4 capsid proteins, 5
tegument proteins, 8 glycoproteins and a minor capsid scaffold protein. ORF8 encoding for
glycoprotein B, is the most conserved of the proteins amongst gammaherpesviruses,
whereas the minor capsid protein encoded by ORF65, is amongst the most variable. Thus,
the minor capsid protein is one of the antigens of choice for the development of an ELISA
for detection of AlHV-1 reactive antibodies and glycoprotein B could be of importance in
developing a cross-protective vaccine for gammaherpesviruses. The naming and annotation of most of the AlHV-1 ORFs is based on comparison with related
gammaherpesviruses and bioinformatics. Most of these ORFs are putative as there is no
direct experimental evidence confirming that they code for any particular protein. In order
to investigate whether the ORFs code for any proteins, two ORFs were targeted for in vitro
heterologous expression.
AlHV-1, isolate C500, was grown in fetal bovine turbinate (BT) cell culture and viral genomic
DNA extracted. ORF8, the putative glycoprotein B, was amplified with a PCR assay and
inserted into a mammalian expression vector, pCI. VERO cells were transfected with the
recombinant vector. Expression of ORF8 was confirmed by an indirect immunofluorescence
assay (IFA) with AlHV-1 polyclonal sera and rabbit anti-bovine IgG (whole molecule) FITC
conjugate. Truncated forms of ORF8 were further expressed as baculovirus recombinants
using the Bac-to-Bac baculovirus expression system. Expression of the truncated ORF8 was
confirmed by SDS-PAGE and Western blot.
AlHV-1 ORF65, the minor capsid protein gene, was amplified with a PCR assay from the viral
genomic DNA and cloned in frame with a histidine tag in a bacterial expression vector,
pCOLD I. Expression of the minor capsid protein was confirmed by SDS-PAGE and Western
blot with the histidine tag monoclonal as well as AlHV-1 polyclonal sera. Orf65 was
expressed in large quantities and column purified using the histidine tag. Orf65 was also
expressed as a baculovirus recombinant using the Bac-to-Bac baculovirus expression system.
Expression of the protein was confirmed by SDS-PAGE and Western blot with the histidine
tag and AlHV-1 polyclonal sera. ORF65 expression in the baculovirus Bac-to-Bac expression
system was up-scaled and the expressed protein column purified. Antibodies raised in
chicken against the purified antigen were used successfully in an indirect immunoassay to
detect AlHV-1 infected cells.
An indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect antibodies against AlHV-1
was developed. It is based on the use of the AlHV-1 minor capsid protein as the capture
antigen for antibodies. The primary antibodies are detected by the addition of enzymelabelled
(horseradish peroxidase) protein G which detects bovid, ovid and wildebeest
antibodies. Addition of a substrate of the enzyme, in this case, 3,3’,5,5’-
tetramethylbenzidine (TMB), results in a colour reaction which is measured using
spectrophotometric procedures. At a selected cut-off point of 18, the ELISA test has a
sensitivity of 100% and a specificity of 100% and has been shown to detect AlHV-1
antibodies in cattle and wildebeest. The ELISA showed no cross-reactivity with sera raised in
cattle against related viruses such as ovine herpesvirus 2, bovine herpesvirus 1, 2 and 4.
The two expressed proteins used in this study were found to be amongst the antigens
expressed in cattle suffering from malignant catarrhal fever. The experimental AlHV-1
indirect ELISA needs further validation and this research may be extended to determine the
performance of these antigens as candidate subunit vaccines.<br>Dissertation (MSc)--University of Pretoria, 2013.<br>gm2014<br>Veterinary Tropical Diseases<br>unrestricted
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Fava, Claudia Del. "Índices reprodutivos e características de desempenho em bovinos de corte infectados e não infectados pelo Herpesvírus bovino tipo 1 (HVB-1)." Universidade de São Paulo, 2002. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-09052002-120213/.
Full textAbstract:
O presente trabalho avaliou índices reprodutivos e características de desempenho em fêmeas bovinas de corte, infectadas e não infectadas pelo HVB-1, criadas sob manejo extensivo, em uma fazenda na região norte do Estado de São Paulo, Brasil. Animais das raças Gir, Guzerá, Nelore e Caracu foram avaliados no início da estação de monta e a ocorrência de touros e fêmeas reagentes ao HVB-1 pelo teste ELISA foi, respectivamente, 92,5% (37/40) e 54,2% (386/712), sendo o número de touros reagentes maior do que o de fêmeas (p < 0,0001). Foi verificado um aumento na proporção de fêmeas reagentes nas diferentes faixas etárias: 23,2% (32/138) de 2 a 3 anos; 45,2% (57/126) de 3 a 4 anos; 54,6% (59/108) de 4 a 5 anos e 70,0% (238/340) para  5 anos (p < 0,0001). O número de matrizes que soroconverteram no período de um ano foi igual a 10,3% (58/561). O HVB-1 não reduziu o índice de prenhez de matrizes reagentes - 80,3% (310/386) e não reagentes - 74,5% (243/326) (p > 0,05) e nem a taxa de parição de matrizes reagentes - 97,7% (300/307) e não reagentes - 93,8% (225/240) (p < 0,05). O índice de prenhez e parição de fêmeas reagentes não diferiu segundo a raça, soroconversão, grupo genético do rebanho Nelore e faixa etária (p > 0,05). O coeficiente de natimortalidade de matrizes reagentes ao HVB-1 - 1,3% (4/300) não diferiu da encontrada para as não reagentes - 2,2% (5/225) (p > 0,05) e não foram observados efeitos de raça, soroconversão, grupo genético do rebanho Nelore e faixa etária (p > 0,05). O HVB-1 não afetou a média de algumas características de desempenho de fêmeas reagentes e não reagentes (p > 0,05), respectivamente, como ganho de peso médio diário durante a estação de monta (459,90  2,82 g e 466,63  2,87 g), condição corporal na entrada da estação de monta (6,89  0,08 e 6,99  0,08), condição corporal na saída da estação de monta (7,73  0,06 e 7,71  0,06) e peso à parição (419,17  3,34 kg e 425,97  3,22 kg). Concluiu-se que matrizes de corte infectadas pelo HVB-1 e não vacinadas, criadas sob condições adequadas de manejo zootécnico, apresentaram bons índices de prenhez, parição e natalidade, independente da raça, grupo genético e faixa etária.<br>This work evaluated reproductive rates and performance traits in beef cattle females, infected and non infected by BHV-1, bred under extensive management conditions, in a farm in the northern region of São Paulo State, Brazil. Gir, Guzerá, Nelore and Caracu purebred animals were monitorated at the beginning of the breeding season and the occurrence of bulls and females reagent to BHV-1 by ELISA test was, respectively, 92.5% (37/40) and 54.2% (386/712), with positive cases among bulls higher than among females (p < 0.0001). There was an increase in the proportion of reagent females in the different ages analyzed: 23.2% (32/138) from 2 to 3 years old; 45.2% (57/126) from 3 to 4 years old; 54.6% (59/108) from 4 to 5 years old and 70.0% (238/340) above 5 years old (p < 0.0001). The rate of females that seroconverted was 10,3% (58/561). BHV-1 did not interfere in the pregnancy rates of both reagent - 80.3% (310/386) and non-reagent - 74.5% (243/326) females (p > 0.05). It did not reduce the parturition rate of both reagent - 97.7% (300/307) and non-reagent - 93.8% (225/240) females, either (p < 0.05). The pregnancy and parturition rates of reagent females did not differ according to breed, seroconversion, Nelore herd genetic group and age (p > 0.05). Total rate of stillbirths in BHV-1 reagent females - 1.3% (4/300) did not differ from that found in non-reagent females - 2.2%(5/225) (p > 0.05) and did not differ acording to breed, seroconversion, Nelore herd genetic group and age (p > 0.05). BHV-1 did not affect performance traits for reagent and non-reagent females (p > 0.05), respectivelly, to daily weight gain during the breeding season (459.90  2.82 g and 466.63  2.87 g), body condition score at the beginning of the breeding season (6.89  0.08 and 6.99  0.08), body condition score at the end of the breeding season (7.73  0.06 and 7.71  0.06), weight at parturition (419.17  3.34 kg and 425.97  3.22 kg). It was concluded that non-vaccinated beef cattle females infected by BHV-1 and bred under adequate management conditions, presented good pregnancy, parturition and birth rates, no matter the breed, genetic group and age.
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Varela, Ana Paula Muterle. "Análises sorológicas e filogenéticas de amostras de herpesvírus bovino tipos 1 e 5." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2011. http://hdl.handle.net/10183/34652.
Full textAbstract:
O presente estudo foi conduzido com o objetivo de determinar se a sensibilidade do teste de Soroneutralização (SN) seria afetada quando utilizados distintos subtipos de herpesvírus bovino tipos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5). Dessa forma, soros de bovinos, coletados randomicamente (n= 287) foram testados por SN frente a três amostras de BoHV-1 (BoHV-1.1: EVI123/98 e Los Angeles (LA); BoHV-1.2a: SV265/96) e três amostras de BoHV-5 (BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 e BoHV-5c: ISO 97/95), utilizando um período de incubação soro-vírus de 24 horas. A sensibilidade da SN variou significativamente dependendo da amostra viral utilizada. Esta variação foi de 77% (80/104 soros positivos) até 91% (95/104) com as amostras ISO 97/95 e LA, respectivamente, quando cada vírus foi considerado individualmente. A sensibilidade máxima (104/104) foi obtida quando os resultados positivos de uma combinação particular de quatro vírus (LA + EVI123 + SV265 + A663), algumas combinações de cinco vírus, ou ainda, todos os seis vírus foram adicionados. Estes resultados evidenciaram que quando a SN é realizada frente a uma única amostra viral, a sensibilidade pode variar significativamente, podendo comprometer programas de controle e erradicação das infecções por estes agentes. Além disso, a realização de SN frente a diferentes isolados virais mostrou aumentar significativamente a sensibilidade do teste. Com isso, a caracterização de novos isolados de campo pode favorecer futuras avaliações de diferentes subtipos de BoHV-1 e BoHV-5 e contribuir com a escolha de amostra e/ou combinação de amostras mais sensíveis. Deste modo, buscou-se caracterizar isolados de campo de BoHV-1 e BoHV-5 com base na análise molecular da região carboxi-terminal do gene que codifica a glicoproteína C (gC) e na análise com enzima de restrição (REA) do genoma viral. Para tanto, a multiplicação de 24 isolados da América do Sul foi realizada em células CRIB para posterior extração do DNA viral, PCR e sequenciamento. As seqüências foram alinhadas utilizando o programa ClustalX2 para uma inferência filogenética pelo método de Neighbor-Joining (Mega 4.0), Kimura 2-parâmetros. O alinhamento das seqüências de nucleotídeos revelou níveis de identidade variando de 70 a 99,6% entre os isolados de BoHV-1; de 66,9 a 100% entre os isolados de BoHV-5 e de 62,9 a 92,8% entre os isolados BoHV-1 e BoHV-5. A árvore filogenética mostrou o agrupamento dos vírus de acordo com o tipo (BoHV-1 e BoHV-5) e subtipo de BoHV-1 (BoHV-1.1 e BoHV-1.2). No entanto, essa técnica não permitiu a diferenciação dos isolados em diferentes subtipos de BoHV-5. Do mesmo modo, a análise por restrição enzimática não proporcionou uma clara diferenciação dos isolados em subtipos devido à presença de variações nos padrões de restrição. Somente um isolado (ISO 94/232) pode ser diferenciado como subtipo 5a. Todavia, este estudo mostrou que a análise filogenética utilizada representa uma potencial ferramenta para a diferenciação e classificação dos vírus em BoHV-1.1, BoHV-1.2 e BoHV-5. No entanto, ambas as técnicas podem ser empregadas, de maneira complementar, quando maiores informações sobre estes vírus forem requeridas. Além disso, com o presente estudo, foi possível expandir o número de amostras caracterizadas, fornecendo subsídios para estudos futuros.<br>This study was carried out to determine whether the sensitivity of serum neutralization (SN) tests would be affected by the use of distinct subtypes of bovine herpesvirus 1 (BoHV- 1) and 5 (BoHV-5) as test challenge viruses. Bovine sera collected from a randomized sample (n = 287) were tested in a 24 hour incubation SN against three type 1 viruses (BoHV-1.1 strains „„Los Angeles‟‟ (LA) and „„EVI 123‟‟; BoHV-1.2a strain „„SV 265‟‟) and three type 5 viruses (BoHV-5a strain „„EVI 88‟‟; BoHV-5b strain „„A 663‟‟ and BoHV-5c „„ISO 97‟‟). SN sensitivity varied greatly depending on the challenge virus used in the test, particularly when results against each virus were considered individually, where it ranged from 77% (detecting 80 out of 104 antibody-positive sera) to 91% (95/104) with ISO 97/95 and LA strain, respectively. Maximum sensitivity (104/104) was achieved when positive results to a particular combination of four of the challenge viruses (LA + EVI 123 + SV 265 + A 663) or some combinations of five viruses (or all six viruses) were added cumulatively. These results clearly shown that when SN is performed with single test challenge viruses, sensitivity could vary significantly that might compromise control or eradication efforts. Performing SN against a number of different viruses demonstrated to improve significantly the test‟s sensitivity. Thus, news field isolates characterization could aid future evaluations of different BoHV-1 and BoHV-5 subtypes and also provide the better strain and/or strains combination choice. In such case, this study aimed to characterize field isolates of BoHV-1 and BoHV-5 by molecular analyses of glycoprotein C (gC) carboxy-terminal region and viral genome restriction enzymatic analysis (REA). The 24 isolates from South America were propagated in CRIB cells for viral DNA extraction, PCR and sequencing. The sequences were aligned in ClustalX2 to perform a distance–based phylogenetic analysis by Neighbor-Joining method in MEGA 4.0 software under de Kimura 2-parameter. The nucleotide sequence alignments revealed levels of genomic similarity ranging from 70% to 99.6% between BoHV-1 isolates; from 67% to 100% among BoHV-5 isolates and from 63% to 93% between BoHV-1 and BoHV-5 isolates. The phylogenetic tree clustered the viruses according to types (BoHV-1 and BoHV-5) and BoHV-1 subtypes (BoHV-1.1, -1.2). However, this method did not allow clearly differentiated in BoHV-5 subtypes. Likewise, REA did not clear showed differentiation in subtypes due presence variation in restriction pattern. Only one isolate (ISO 94/232) could be differentiated in subtype 5a. The results suggest that the phylogenetic analysis performed could be an important tool for differentiation and classification of such viruses in BoHV-1.1, BoHV-1.2, BoHV-5. However, when adiccional informations were resquested both techniques should be performed. Furthermore, with this work it was possible to expand the number of samples characterized to support future investigation of these viruses.
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Ferrari, Heitor Flávio [UNESP]. "Detecção herpesvírus bovino tipo 5 em cortes histológicos e fragmentos de encéfalo congelado pela reação em cadeia de polimerase." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2007. http://hdl.handle.net/11449/94696.
Full textAbstract:
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ferrari_hf_me_araca.pdf: 4576809 bytes, checksum: eeae7dcf4af69f9ff19ef43bdbba48ef (MD5)<br>Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)<br>Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)<br>Meningoencefalite não supurativa causada pelo Herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) ocorre de forma endêmica em algumas regiões do Brasil, com ênfase no Rio Grande do Sul. No entanto, outras regiões possuem poucos relatos da ocorrência da doença, como os estados de São Paulo e Mato Grosso do Sul. O presente trabalho objetivou realizar a classificação histológicas das lesões desenvolvidas durante a infecção aguda pelo BoHV-5, no encéfalo de 20 animais naturalmente acometidos pelo infecção. As principais lesões observadas, em 80% dos animais, foram de meningoencefalite não supurativa, caracterizadas por infiltrado linfo-histiocitária inflamatório. Em 20% dos animais as lesões encontradas foram não significativas, mas nestes casos todos os bovinos desenvolveram sintomatologia neurológica, e o diagnóstico da doença foi confirmado na reação em cadeia pela polimerase (PCR), com amplificação do DNA do BoHV-5. Esta classificação histológica permitiu observar alterações compatíveis com a doença, mas também mostrou que nem sempre nestes casos vai ocorrer o desenvolvimento de alterações histológicas. Todas as amostras frescas (n=20) foram submetidas ao isolamento viral e a técnica da técnica de PCR. Já os fragmentos fixados em formol e incluídos em parafina foram testados quanto à presença do vírus por meio da técnica de PCR. As vinte amostras congeladas foram consideradas positivas para o isolamento viral e para a amplificação do DNA viral na técnica de PCR, enquanto apenas 15 das 20 incluídas em parafina foram consideradas positivas para o vírus. Os fragmentos de tecidos que apresentaram alterações histopatológicas permitiram suspeitar de infecção viral por BoHV-5, mas nos casos em que estas alteração não estão presentes testes mais sensíveis são necessários.<br>Meningoencephalitis occasioned by Bovine Herpesvirus type 5 (BoHV-5) has been described as localized in some regions inside Brazil, like Rio Grande do Sul State and, also characterized as an endemic encephalitis disorder. However, the often description of its occurrence in São Paulo end Mato Grosso has being notice. The aim of this work was to first characterize the histologic lesions obtained from bovine brains suspected of suffering of neurological disorders. For this purpose, 20 brains were collected from acute cases of the disease, naturally infected by BoHV-5, confirmed by virus isolation and PCR. The most observed lesions were described as being: inflammatory cells, specially infiltrated lymphocytes (80%), necrosis (20%), and less focal gliosis and hemorrhage, in spite of these lesions have been characterized as no-specific. Brains were divided into two halves, one kept fresh for virus isolation and PCR assay, targeting the glycoprotein C gene from BoHV-5 genome. The other half brain, corresponding to cortex region, was submitted to formalin fixation and embedded into paraffin blocks for total DNA isolation. The 20 fresh samples were confirmed, by virus isolation and PCR assay, as having the BoHV-5 virus, while 15 of 20 formalin-fixed, paraffin-embedded samples were considered positive for the same analysis. Finally, the gross lesions and microscopic damage of the brain structure were sufficient for the virus infection suspicion, however it is necessary the complementary techniques to confirm the diagnosis in most of the cases.
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Silva, Bruno Toledo. "Influência dos anticorpos maternos na resposta imune induzida pela vacinação em bezerros Holandeses." Universidade de São Paulo, 2015. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-24032016-151529/.
Full textAbstract:
O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar a transferência de imunidade passiva e a sua influência na resposta vacinal para as viroses envolvidas na Doença Respiratória Bovina (DRB). Os dados obtidos nesta pesquisa estão apresentados em dois capítulos. Capítulo 1 - Objetivou-se avaliar a dinâmica de anticorpos (Acs) específicos para as viroses respiratórias e subpopulações de linfócitos em bezerros do nascimento aos 240 dias (d) de vida. Para tanto, acompanhou-se a transferência de imunidade passiva de Acs específicos para as viroses respiratórias em 19 bezerros, destes cinco foram selecionados para acompanhamento da dinâmica de Acs neutralizantes e subpopulações de linfócitos dos 14 aos 240d. O colostro fornecido era proveniente de vacas doadoras vacinadas. A análise da qualidade individual do colostro revelou índice Brix ≥21%, observando-se forte correlação desses valores com proteína total (r= 0,942 e P= 0,001). Após 48 horas da ingestão do colostro, pôde-se observar soroconversão dos 19 animais (100%) para os agentes virais envolvidos na DBR. As medianas (Log2) encontradas foram de 12,3, 9,0, 5,0 e 8,5 para BVDV, BoHV-1, BRSV e BPIV-3. Dos 14 aos 240d os 5 bezerros avaliados, demonstraram declínio gradual dos títulos de Acs (Log2) para BVDV (12,8-3,3), BoHV-1 (10,0-3,3) e BPIV-3 (10,0-2,0), embora o BVDV não tenha apresentado soronegatividade até os 240d. Manifestações clínicas de broncopneumonia foram observadas em 4/5 (80%) bezerros dos 80 aos 135 d. BRSV (11,3-2,0) apresentou perfil diferenciado na dinâmica de anticorpos em relação às demais viroses. Não foram detectadas diferenças estatísticas entre os momentos para as viroses apesar das variações detectadas (P>0,05). A meia-vida e tempo para soronegatividade foram de 36,2±6,1 e 367,01±68,7d para BVDV, 50,7±18,0 e 239,67±66,88d para BoHV-1 e, 46,8±21,1 e 303,36±60,15d para BPIV- 3. BRSV não respeitou modelo de regressão para cálculos de meia-vida e soronegatividade. Valores absolutos e relativos das populações de linfócitos não revelaram diferenças estatísticas entre os momentos (P>0,05). Contudo, a dinâmica das subpopulações de linfócitos revelou aumento de células B CD21+ até 150d; aumento nos valores relativos das subpopulações CD4+, CD8+ e CD3+CD4-CD8- principalmente aos 74-90d. Assim, pôde-se determinar uma janela de susceptibilidade a partir dos 74d especialmente ao BRSV e BoHV-1, momento que precede o aumento dos títulos de Acs após exposição natural. Capítulo 2 Objetivou-se avaliar a influência dos Acs maternos na resposta imune para DRB induzida pela vacinação. Foram selecionados 23 bezerros recém-nascidos, distribuídos aleatoriamente entre 4 grupos experimentais: G1 vacinado aos 14d e booster aos 44d; G2 aos 90d e aos 120d; G3 aos 180d e aos 210d. Além disso manteve-se um grupo controle não vacinado CG1, CG2 e CG3. Os bezerros foram vacinados com a mesma vacina comercial empregada para vacinação das doadoras de colostro. Observou-se: (1) a vacina com BVDV inativado não promoveu aumento dos títulos de Acs para nenhum dos grupos avaliados; (2) G1 não demonstrou soroconversão para nenhuma das viroses, enquanto controle CG1 exibiu decréscimo dos títulos para BVDV, BoHV-1 e BPIV-3; (3) o BRSV apresentou baixa soroconversão no G2, enquanto o controle demonstrou altos títulos dos 44-120d; (4) não foi possível distinguir entre quais tempos ocorreram diferenças entre títulos (P>0,0167); (5) linfócitos B (CD21+) aumentaram do T0-T2 para G1, diminuíram para G2, e aumentaram no G3; (6) linfócitos T CD3+ diminuíram ao longo do tempo para todos os grupos, exceto CG3; (7) apesar de oscilações, linfócitos T CD4+, CD8+ e WC1+ se mantiveram praticamente constantes até 240d, exibindo maiores proporções nos grupos vacinados; (8) a expressão do marcador CD25+foi mantida pelo grupo G1 até o T2, mas apresentou aumento no G2 e G3; (9) manifestações de broncopneumonias foram identificadas nos bezerros do grupo controle (4/5 - 80%) e podem ter exercido influência nas diferenças encontradas para as células entre os grupos. Em geral, a vacinação dos bezerros aos 90 (G2) e 180d (G3) manteve ou estimulou a produção de Acs para o BoHV-1, BRSV e BPIV-3, e a ativação das células T expressas pelo marcador CD25+ pode ter sido responsável pela proteção dos bezerros frente à DRB. Assim, com base nos resultados, concluiu-se que a intensidade da imunidade dos bezerros induzida pela vacinação aumentou de acordo com o desenvolvimento etário e diminuição dos títulos de Acs maternos. A conclusão geral desta dissertação aponta para a necessidade precoce de imunização dos bezerros, especialmente pela susceptibilidade observada para BRSV e BPIV-3 aos 74-90d de vida. Entretanto, esta pesquisa não encontrou resposta humoral induzida pela vacinação no grupo de bezerros vacinados aos 14 e 44 dias, apesar dos indícios de resposta imune celular. Assim, estudos futuros devem ser elaborados considerando estratégias para amplificar a resposta imune precoce dos bezerros para os agentes virais envolvidos na DRB<br>The main purpose of this research was to evaluate the transfer of passive immunity and its influence on vaccine response to the viruses involved in bovine respiratory disease (BRD). The data obtained in this study are presented in two chapters. Chapter 1 - The objective was to evaluate the dynamics of specific antibodies to the respiratory viruses and lymphocyte subpopulations in the calves from birth to 240 days (d) of life. Thus, the transfer of passive immunity of specific antibodies to the respiratory viruses were assessed in 19 calves; from these, five were selected for monitoring the dynamic of neutralizing Abs and lymphocytes subpopulations from 14 to 240d. The colostrum was provided from donor vaccinated cows. The analysis of individual quality of the colostrum revealed Brix ≥21%, observing strong correlation of these values with total protein (r = 0.942 and P = 0.001). After 48 hours of colostrum intake, was observed seroconversion of the 19 animals (100%) for the viral agents involved in the DBR. The median (Log2) ratio found was 12.3, 9.0, 5.0 and 8.5 for BVDV, BoHV-1, BRSV and BPIV-3. The 5 calves followed from 14 to 240d showed gradual decline in antibody titers (Log2) to BVDV (12.8 to 3.3), BoHV-1 (10.0 to 3.3) and BPIV-3 (10, 0-2.0), although could not be detected seronegative calves for BVDV up to eight months of age. Clinical manifestations of bronchopneumonia were observed in 4/5 (80%) calves from 80 to 135 days of life. BRSV (11.3 to 2.0) showed a distinct profile in the dynamics of antibodies compared to other viruses. There were no statistical differences between times for viruses despite variations detected (P> 0.05). The half-life and time to become seronegative were 36.2±6.1 and 367.01±68.7d for BVDV, 50.7±18.0 and 239.67± 66.88d for BoHV-1 and, 46.8±21.1 and 303.36±60.15d for BPIV-3. BRSV did not respect regression model to perform half-life and seronegative calculations. Absolute and relative values of lymphocyte populations revealed no statistical differences between times (P> 0.05). However, the dynamics of lymphocyte subpopulations showed increase in B cells CD21+ up to 150d; increase in the relative values of CD4+, CD8+ and CD3+CD4-CD8- subpopulations, mainly to 74-90d. Thus, it was possible to determine a window of susceptibility since 74d especially for BRSV and BoHV-1, moment that precede the increase in antibody titers after natural exposure. Chapter 2 - The objective was to evaluate the influence of maternal antibodies in the immune response to respiratory viruses induced by vaccination. Was selected 23 newborn calves that were randomly distributed in four groups: G1 - vaccinated at 14d and booster at 44d; G2 - vaccinated at 90d and booster at 120d; G3 - vaccinated at 180d and booster at 210d. Furthermore were kept a non-vaccinated control group - CG1, CG2 and CG3. Calves were vaccinated with the same commercial vaccine in the colostrum donors. From these, could be observed: (1) the vaccine with inactivated BVDV did not promote increase of antibodies titers in any of the assessed groups; (2) G1 did not demonstrated seroconversion for any of the viruses while CG1 control exhibited decrease in the titers for BVDV, BoHV-1 and BPIV-3; (3) BRSV had low seroconversion in G2, while the control showed high titers from 44 to 120d; (4) where the differences between times occurred could not be distinguished (P <0.0167); (5) B cells (CD21+) increased from T0 to T2 for G1, decreased for G2, and increased for G3; (6) T lymphocytes CD3+ decreased over time for all groups except for CG3; (7) despite variations, T lymphocytes CD4+, CD8+ and WC1+ remained almost constant until 240d, displaying greater proportions in the vaccinated groups; (8) the expression of the CD25+ marker was maintained in the vaccinated group G1 up to T2, whereas vaccination promoted an increase of this expression in G2 and G3; (9) clinical manifestations of bronchopneumonia were identified in the control group (4/5 calves - 80%) and may have influenceon the differences found for the cells between the groups. In general, vaccination of calves at 90 (G2) and 180d (G3) maintained or stimulated the production of Abs to BoHV-1, BRSV and BPIV-3, and the activation of T cells expressed by the CD25+ marker may have been responsible for the protection of calves from BRD. Thus, based on the results, it was concluded that the intensity of the immunity induced by vaccination of calves increased according to the age of development and decay of maternal antibody titers. The general conclusion of this research, points to the need for early immunization of calves, especially by the susceptibility observed for BRSV and BPIV-3 from 74-90d of life. However, this research didnot found humoral response induced by vaccination in the group of calves vaccinated at 14 and 44 days, despite the evidence of cellular immune response. Thus, future studies should be designed considering strategies to amplify the early immune response of calves to the viral agents involved in the BRD
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Sánchez, Salazar Manuel Rodolfo. "Permisibilidad de cultivos celulares secundarios de alpaca y llama a multiplicación viral de herpesvirus bovino, virus de la diarrea viral bovina, virus parainfluenza 3 bovina y virus respiratorio sincitial bovino." Bachelor's thesis, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2006. https://hdl.handle.net/20.500.12672/705.
Full textAbstract:
El objetivo del presente estudio fue determinar la permisibilidad de los cultivos celulares secundarios de alpaca y llama a la infección por distintos agentes virales de conocida seroprevalencia en este tipo de ganado. Se establecieron dos líneas celulares de cornete nasal y piel de alpaca y llama infectándose con Virus de la diarrea viral bovina (VDVB), Virus Herpes Bovino tipo 1 (VHB-1), Virus respiratorio Sincitial Bovino (VRSB) y Virus Parainfluenza bovino tipo 3(VPI-3). Se determinó y caracterizó la presentación de efectos citopatogénicos (ECP) por medio de microscopia óptica de las monocapas teñidas con Hematoxilina-Eosina (HE). Se confirmó la presencia de antígenos virales por medio de la prueba de Inmunofluorescencia Directa (IF). Los cultivos celulares secundarios de piel y cornete nasal de llama y alpaca fueron permisibles a la infección de los distintos virus, presentando los ECP característicos de cada uno de ellos. Esto demuestra que las células de alpaca y llama cultivadas in vitro presentan receptores homólogos a los presentes en células bovinas y determina que este tipo de cultivos es un modelo apropiado para ensayos de infección viral.
Palabras Claves: alpacas, llamas, líneas celulares, permisibilidad, Virus de la diarrea viral bovina (VDVB), Virus Herpes Bovino tipo 1 (VHB-1), Virus respiratorio Sincitial Bovino (VRSB) y Virus Parainfluenza bovino tipo 3(VPI-3), Efectos citopatogénicos (ECP).<br>--- In order to determine the permisibility of alpaca and llama cell cultures to infection by various viral agents of known seroprevalence, nasal turbinate and skin cell lines of alpaca and llama were established and infected with Bovine Viral Diarrhoea Virus (BVDV), Bovine Herpes Virus type 1 (BHV-1), Bovine respiratory Sincitial Virus (BRSV) and Bovine Parainfluenza Virus type 3 (BPIV-3). Presentation of citopathogenic effect (CPE) was determined and characterized by optical microscopy of Hematoxilin-Eosine stained monolayers. The presence of viral antigen was confirmed by Direct Immunofluorescence. Every cell line was permisible to infection with the four viral strains, showing the characteristic CPE. These results prove that alpaca and llama cells cultured in vitro show homologue receptors to those found in bovine cells and determine that these type of cultured cells repesent an appropriate model for viral infection assays.
Key Words: alpaca, llama, cell lines, permisibility, Bovine Viral Diarrhoea Virus (BVDV), Bovine Herpes Virus type 1 (BHV-1), Bovine respiratory Sincitial Virus (BRSV) and Bovine Parainfluenza Virus type 3 (BPIV-3), Citopathogenic effect (CPE).<br>Tesis
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Baccili, Camila Costa. "Imunização passiva e ativa de bezerros para o Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) e Herpesvírus Bovino tipo 1 (BoHV-1)." Universidade de São Paulo, 2013. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-09012014-104148/.
Full textAbstract:
O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar a resposta imune (RI) humoral e celular de bezerros recém-nascidos mediante imunização passiva e ativa, usando como modelo o Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) e o Herpesvírus Bovino tipo-1 (BoHV-1). Esta pesquisa foi dividida em duas etapas e seus dados estão apresentados em dois capítulos. Capítulo 1- Acompanhou-se a imunização passiva de bezerros do nascimento até os seis meses de idade e a influência da vacinação materna no período pré-parto nessa resposta. Os animais foram distribuídos em dois grupos experimentais que receberam colostro de mães não imunizadas (G1, n=4) e (G2, n=6) de mães imunizadas no período pré-parto para o BVDV e BoHV-1. A colostragem foi feita pela administração de seis litros de colostro nas primeiras doze horas de vida, distribuídas em duas mamadas. Nesta etapa foi possível verificar: (1) a presença de títulos de ACs neutralizantes apenas no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas, obtendo soroconversão após a mamada de colostro em 2/6 (33%) bezerros para o BVDV e 6/6 (100%) para o BoHV-1; (2) manutenção dos títulos de ACs protetores até os três meses de vida. Em relação a RI celular: (3) observou-se maior proporção de células T auxiliares CD4+ (P=0,05) no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas no período pré-parto; (4) o leucograma dos bezerros demonstrou respostas inflamatórias em alguns momentos desta pesquisa, mais intensa nos animais que ingeriram colostro proveniente de mães nãoimunizadas. Capítulo 2- Acompanhou-se a imunização de bezerros para BVDV e BoHV-1 aos seis meses de idade. Dez bezerros foram distribuídos em dois grupos de bezerros não vacinados (VAC-, n=5) e vacinados para o BVDV e BoHV-1 (VAC+, n=5), as análises foram realizadas antes da imunização aos 180 dias (T0), após a 1°dose aos 210 dias (T1) e após a 2° dose aos 240 dias (T2). Os resultados obtidos para avaliação da RI humoral foram: (1) soroconversão de 2/5 (40%) animais no momento T1 e 3/5 (60%) no T2 para o BVDV; (2) soroconversão em 2/5 (40%) no T1 e 5/5 (100%) no T2 para o BoHV-1. Para a RI celular observou-se: (3) maior expressão de CD25+ pelas subpopulações de linfócitos T gama-delta WC1+ no VAC+, observando-se diferença estatística no momento T1 (P=0,0016). Com base nos resultados obtidos nas duas etapas experimentais desta pesquisa pode-se concluir que a vacinação materna é uma estratégia para melhorar a qualidade do colostro e as repostas imunes humoral e celular dos bezerros para BVDV e BoHV-1; a duração da imunidade materna considerando-se níveis protetores de Acs foi de três meses; os componentes do colostro influenciaram na resposta inflamatória dos bezerros à exposição natural aos patógenos; a vacinação dos bezerros aos seis meses de idade estimulou a resposta imune humoral para BoHV-1 e parcial para BVDV.<br>The aim of this research was to evaluate the humoral and cellular immune response (IR) of newborn calves by active and passive immunization, using by model the Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) and Bovine Herpesvirus type-1 (BoHV-1). This research was divided in two stages and the datas are presented in two chapters. Chapter 1: Was followed the passive immunization of calves from birth until six months old and the maternal vaccination influence on pre-partum period on this response. The animals were divided in two experimental groups that received colostrum from unvaccinated mothers (G1, n = 4) and (G2, n=6) from immunized mothers in the pre-partum period to BVDV and BoHV-1. The calves received six liters of colostrums on the first twelve hours of life, divided in two feedings. At this stage was verified: (1) the presence of neutralizing titers antibodies (Abs) only in group of calves that received colostrum from immunized mothers, getting seroconversion after feeding in 2/6 (33%) of calves for BVDV and 6/6 (100%) for BoHV-1, (2) maintenance of Abs titers protectors up to three months of life. In relation to immune cellular response: (3) was observed higher proportion of helper T cells CD4+ (P = 0.05) in the group of calves that received colostrum from immunized mothers during pre-partum; (4) the leukogram of calves showed inflammatory responses in some moments of this research, more intense in animals that ingested colostrums from non-immunized mothers. Chapter 2: Was followed the immunization of calves for BVDV and BoHV-1 at six months old. Ten calves were divided in two groups of calves non-vaccinated (VAC-, n = 5) and vaccinated for BVDV and BoHV-1 (VAC +, n = 5). The analyzes were performed before immunization at 180 days (T0), after the 1st dose at 210 days (T1) and after the 2nd dose at 240 days (T2). The results for evaluation of immune humoral response were: (1) seroconversion 2/5 (40%) animals at the T1 moment and 3/5 (60%) of T2 for BVDV, (2) soroconversion on 2/5 (40 %) in the T1 to 5/5 (100%) at T2 for BoHV-1. For the immune cellular response was observed: (3) increased expression of CD25+ subpopulations of T lymphocytes by gamma-delta WC1+ in VAC+, observing statistical difference in T1 moment (P = 0.0016). Based on the results obtained in the two experimental stages of this research can be concluded that maternal vaccination is a strategy to improve the quality of colostrum and humoral and cellular immune response of calves to BVDV and BoHV-1, the duration of maternal immunity considering protective levels of Abs was three months. The components of colostrum influence the inflammatory response of calves to natural exposure to pathogens. The vaccination of calves at six months old stimulated the humoral immune response to BoHV-1 and partial for BVDV.
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Alexandrino, Bruna [UNESP]. "Modelo experimental com caprinos e cobaias para avaliação da eficácia de vacinas contra o herpesvírus bovino tipo 1 e o vírus da diarreia viral bovina tipos 1 e 2." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2012. http://hdl.handle.net/11449/103790.
Full textAbstract:
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alexandrino_b_dr_jabo.pdf: 403623 bytes, checksum: a596d9d91434dd37dd44458b1b70eb74 (MD5)<br>Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)<br>Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)<br>A presente pesquisa teve como objetivo avaliar a utilização de cobaias e caprinos para teste de vacinas contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e os vírus da diarreia viral bovina tipos 1 (BVDV-1) e 2 (BVDV-2). Inicialmente foi realizada a infecção experimental em cobaias e bovinos, com esses três vírus, para verificar a máxima resposta imunogênica em ambas as espécies. As médias geométricas dos títulos de anticorpos (GMT) dos bovinos foram altas para todos os agentes virais; em cobaias foi possível observar que o BoHV-1 induziu elevadas GMT, para o BVDV-1 a indução foi moderada, enquanto para o BVDV-2 foi baixa, podendo comprometer a viabilidade dos testes antigênicos. Após essa etapa, foram vacinados bovinos, cobaias e caprinos, com seis vacinas comerciais de antígenos inativados, para verificar a indução de anticorpos por estímulo vacinal. Nos bovinos, as GMT obtidas para o BoHV-1 mostraram que as vacinas utilizadas promoveram a indução moderada na resposta imunológica, e apenas três delas foram consideradas satisfatórias. Para o BVDV-1, apenas uma vacina pode ser considerada eficiente, e em relação ao BVDV-2 nenhuma delas poderia ser assim classificada. Os resultados da vacinação com os caprinos mostraram que, apesar de os animais serem reagentes ao BoHV-1 no início do experimento, as formulações foram capazes de induzir a produção de anticorpos com títulos elevados contra os três vírus estudados. As cobaias, por sua vez, receberam doses fracionadas de uma vacina comercial nacional e, das frações testadas, 3,2mL foi a que apresentou melhores resultados, sendo esta estabelecida para testar as demais vacinas nesta espécie. Depois da imunização, os resultados mostram que para o BoHV-1 as GMT foram altas; em relação ao BVDV-1, apenas duas vacinas foram capazes de induzir...<br>The present research had as objective to evaluate the use of guinea pigs and goats in test of vaccines against the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and the bovine viral diarrhea viruses types 1 (BVDV-1) and 2 (BVDV-2). First, an experimental infection was realized in guinea pigs and bovines, using these three viruses, to verify the maximum immune response in both species. The geometric means of antibodies titres (GMT) for bovines were high for the viral agents; in guinea pigs was possible to observe that the GMT induced by BoHV-1 was high, by BVDV-1 was moderate and by BVDV-2 was weak and could compromise the viability of antigenic tests. After this stage, the bovines, guinea pigs and goats were vaccinated using six commercial vaccines with inactivated antigens to verify the induction of antibodies production by vaccinal stimulus. In bovines, the GMT obtained for BoHV-1 showed the vaccines induced a moderate immune response, being only three of them considered satisfactory. For BVDV-1 only one and for BVDV-2 none of them can have the same classification. The results obtained with the goats, despite they were positive to BoHV-1 in the sorting, showed the formulations were able to induce high antibody production against the three virus studied. The guinea pigs, on the other hand, received fractional doses of a commercial vaccine well-established in the domestic trade and, from the fractions tested, 3.2 mL showed the best results, being established to test the other vaccines. After immunization, the results of GMT for BoHV-1 was high; relating to BVDV-1, only two vaccines were capable to induce antibodies production, but their GMT were weak; and there was no immune response against BVDV-2. Thus, goats can be ... (Complete abstract click electronic access below)
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Mittal, Suresh Kumar. "Analysis of bovine herpesvirus 1 thymidine kinase." Thesis, University of Cambridge, 1989. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.305823.
Full text
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Affonso, Ingrid Bortolin [UNESP]. "Monitoração da ocorrência do Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) em plantéis leiteiros infectados pelo Herpesvírus Bovino Tipo 1 (BoHV-1)." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2010. http://hdl.handle.net/11449/94635.
Full textAbstract:
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affonso_ib_me_jabo.pdf: 804054 bytes, checksum: 44c5a047b2c4507ea787e45752bb674c (MD5)<br>Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)<br>Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)<br>O Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) é um dos patógenos pertencentes ao complexo respiratório bovino. Apesar de não provocar enfermidade severa na maioria dos casos, há evidências de que este vírus possa facilitar o estabelecimento de outros patógenos. Assim, o presente estudo buscou estabelecer a possibilidade de relação entre o BRSV e o Herpesvírus Bovino Tipo 1 (BoHV-1), em três propriedades leiteiras, localizadas em três municípios do noroeste do Estado de São Paulo. Além disso, visou também monitorar ao longo do tempo os títulos de anticorpos contra o BRSV em bezerros desde o nascimento. Com base em dados previamente estabelecidos, essas propriedades foram categorizadas como tendo alta, média e baixa prevalência de BoHV-1, respectivamente, propriedade A, no município de Viradouro, (78,6%); propriedade B, no município de Altinópolis, (40%); e, propriedade C, no município de Jaboticabal, (1,6%). Com relação à prevalência de BRSV, a propriedade B apresentou maior prevalência sorológica (82,4%), possivelmente por possuir fatores de risco facilitadores para o desenvolvimento da infecção, enquanto que as propriedades A e C mostraram prevalências estatisticamente equivalentes (45,6% e 59,1%, respectivamente), sem qualquer correlação entre as prevalências de BRSV e BoHV-1. A curva dos títulos de anticorpos contra o BRSV em bezerros nas propriedades A e B monitorados ao longo de um ano foi semelhante, pois ambas apresentaram redução dos títulos a partir do sexto até o oitavo mês de idade dos animais, com seguida retomada de títulos cada vez mais elevados, fato característico de infecção natural. A propriedade C apresentou uma dinâmica semelhante, porém, a maior parte dos bezerros manteve-se positiva durante todo o período, com títulos que decresceram e voltaram a aumentar.<br>The Bovine Respiratory Syncytial Vírus (BRSV) is one of the Bovine Respiratory Complex pathogens. The disease caused by this virus is often mild, but there are evidences that this pathogen may ease the establishment of other pathogens. Data on the epidemiology of BRSV are still scarce. Based on that, this study aimed to determine the prevalence and evaluate antibody titers in calves from three farms. Moreover, the relationship between BRSV and the Bovine Herpesvirus Type 1 (BHV-1) was investigated, based on epidemiological data previously determined in these farms. The three farms were categorized as A, in Viradouro municipality, with high prevalence of BHV-1 (78.6%); B, in Altinópolis municipaltity, with intermediate prevalence for this agent (40%); and C, in Jaboticabal municipality, with low prevalence of BHV-1 (1.6%). Farm B showed higher BRSV prevalence (82.4%), maybe due to larger herd and colder climate than farms A and C, which showed equivalent prevalences for BRSV (45.6% and 59.1%, respectively). The curve of antibody titers against BRSV in calves from farms A and B over one year were similar, as both showed lower titers by 6 to 8 months of age, rising up again due to antigenic induction. Farm C showed equivalent dynamics, but calves remained positive all over the year. In disagree to literature data, this experiment did not showed correlation between BRSV and BHV-1 prevalences, maybe due to lack of circulation of the latter.
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Holz, Carine Lidiane. "Otimização da soroneutralização com diferentes tipos e subtipos de herpesvírus bovino e sua aplicação à epidemiologia." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2008. http://hdl.handle.net/10183/14341.
Full textAbstract:
No presente estudo, buscou-se avaliar quais seriam as cepas de herpesvírus bovinos tipos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) seriam mais adequadas para uso como vírus de confrontação em testes de soroneurtralização (SN). Oitocentas e dez amostras de soros de duas regiões geograficamente distintas foram avaliadas à SN frente a seis diferentes cepas virais, incluindo tipos e subtipos diversos (BoHV-1.1: EVI123/98 e Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 e BoHV-5c: ISO95/97). A maior sensibilidade foi revelada pelo somatório de soropositivos identificados com as seis cepas utilizadas no estudo. Uma combinação de quatro vírus (BoHV-1.1: LA e EVI123/98, BoHV-5a: EVI88/95 e BoHV-5b: A663) foi capaz de detectar 99,1% das amostras soropositivas. Estes quatro vírus foram selecionados para serem utilizados em um levantamento soroepidemiológico com o intuito de estimar a prevalência das infecções causadas pelos BoHV-1 e BoHV-5 no Estado do Rio Grande do Sul. Para tanto, soros de 2200 fêmeas bovinas adultas (>24 meses), representativos da população bovina do Rio Grande do Sul, foram submetidos à SN frente às quatro cepas virais escolhidas. om esta combinação, a soroprevalência média das infecções por BoHV-1 e BoHV-5 encontrada foi de 29,2%. Além disso, analisando outros fatores que pudessem influenciar a prevalência das infecções, foram considerados fatores de risco o tipo de exploração corte, a ausência da prática de ordenha, o contato dos bovinos com ovinos/caprinos e animais silvestres, a venda de animais de reprodução, o uso de piquetes de parto/pós-parto, o uso de assistência veterinária privada e a criação de animais de raças européias de corte. Os resultados obtidos no presente trabalho demonstraram que, para que a SN seja capaz de detectar animais soropositivos ao BoHV-1 e BoHV-5 com a máxima sensibilidade, o teste deve ser realizado com várias amostras de BoHV-1 e BoHV-5, não necessariamente de tipos ou subtipos diferentes, pois amostras do mesmo tipo de vírus apresentarrm diferentes sensibilidades. Além disso, as amostras de confrontação podem variar de acordo com a região geográfica de origem dos soros. Os resultados obtidos nesse levantamento revelam que anticorpos anti-BoHV-1 e anti-BoHV-5 encontram-se amplamente distribuidos nos rebanhos gaúchos. No entanto, não foi possível determinar a prevalência tipo-específica destas infecções com os testes realizados. Assim, a proporção de animais que estão infectados com o BoHV-1 ou com o BoHV-5 (ou ambos) na região examinada permanece desconhecida.<br>In this study a search was carried out to determine which of a number of available strains/isolates of bovine herpesviruses types 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) would be more suitable for use as challenge virus in serum neutralization (SN) tests. Eight hundred and ten bovine serum samples collected from two geographically distinct regions were evaluated in SN tests against six BoHVs of different types and subtypes (BoHV-1.1: EVI123/98 and Los Angeles; BoHV-1.2a: SV265/96; BoHV-5a: EVI88/95; BoHV-5b: A663 and BoHV-5c: ISO95/97). The highest sensitivity was achieved when the SN-positive sera obtained with the six different viruses were added. A combination of four viruses (BoHV-1.1 LA, and EVI123/98, BoHV-5a EVI88/95 and BoHV-5b A663), was able to detect 99.1% of the seropositive samples. These four viruses were selected to carry out a seroepidemiological survey to estimate BoHV-1 and BoHV-5 prevalence in the state of Rio Grande do Sul. In order to achieve that, sera from 2,200 bovine female cows (>24 months-old), representative of the bovine population of Rio Grande do Sul state were tested on SN tests against the four selected viruses. With such combination, seroprevalence of BoHV-1 and BoHV-5 infections was 29.2%. After examining potential factors that might affect the prevalence of such infections, the following were considered as significant risk factors: the type of exploitation (beef cattle > dairy), use of milking procedures, concomitant presence of sheep, goats or wild animals in farm; sale of animals for reproductive purposes; use of pre and postparturition paddocks; use of private veterinary assistance and farming of European beef breeds. The results obtained here indicate that for the SN test to provide the highest sensitivity in detecting BoHV-1 and BoHV-5 seroposivive animals, it must be performed against a number of BoHV-1 and BoHV-5 strains, though not necessarily of different types and subtypes as viruses within a same subtype may display different sensitivities. Besides, challenge viruses may vary for geographically distinct areas. The serological survey performed with four distinct bovine herpesviruses reveal that antibodies to BoHV-1 and BoHV-5 are widely distributed among cattle flocks in Rio Grande do Sul. However, it was not possible to determine type-specific prevalence with the tests performed. Thus, the proportion of cattle actually infected with either BoHV-1 or BoHV-5 (or both) in the examined region remains undetermined.
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Giroto, Tássia de Paula [UNESP]. "Distribuição genômica e antigênica do BHV5 em encéfalos bovinos com meningoencefalite não supurativa: casos clínicos." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2015. http://hdl.handle.net/11449/132384.
Full textAbstract:
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Dissertação Pronta Tássia.pdf: 1266459 bytes, checksum: 865343b89e94980c883c0603fb556588 (MD5)<br>Made available in DSpace on 2015-12-21T15:30:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2015-12-14<br>A meningoencefalite por herpesvírus bovino 5 (BHV5) foi descrita em várias regiões do mundo. A doença ocorre na forma de surtos ou de casos isolados. No Brasil, encefalites causadas pelo BHV5 têm sido confirmadas de forma crescente nos rebanhos, sendo considerada a segunda maior causa de encefalite com etiologia determinada em bovinos. Nesse sentido, o presente estudo objetivou caracterizar as regiões do sistema nervoso central (SNC) com maior freqüência do BHV5, o envolvimento de diferentes populações de lincócitos e a expressão de citocinas relacionadas ao processo inflamatório. As amostras (n=8) foram submetidas às análises histopatológica, imuno-histoquímica e molecular. A principal lesão observada foi caracterizada como infiltrado perivascular, classificado em leve, moderado e severo. Em todos os casos o infiltrado perivascular foi notado de forma severa no bulbo olfatório, lobos frontal, temporal e parietal. A expressão de citocinas foi principalmente detectada nas regiões do bulbo olfatório e lobo piriforme. Este estudo abordou que a incidência do BHV5 ocorreu principalmente na região frontal, visto que a contaminação pelo vírus ocorre de forma nasal, tendo como primeiro contato a região frontal do cérebro com o BHV5.<br>Meningoencephalitis caused by bovine Herpesvirus 5 (BHV5) has been described worldwide. The disease occurred as outbreaks of isolates clinical cases. In Brazil, encephalitis caused by BHV5 has been confirmed by the increase of positive animals, being the second major cause of bovine viral encephalitis. Likewise, the aim of this study was to characterize brain regions from central nervous system (CNS) presenting high frequency of BHV5 antigen and genome, phenotype lymphocytes subpopulations among perivascular cuffs and compare these results with cytokines transcription. The samples (n=8) were submitted to histopathological analysis, immunohistochemistry and molecular evaluation. The main histopathological lesions were characterized as perivascular cuffs, classified as severe, and sometimes moderate. All cases, perivascular infiltrates were severe in olfactory bulb, and frontal, temporal and parietal lobes. The cytokines expression was considered up regulated in olfactory bulb and piriform lobe. This study addressed the BHV5 distribution mainly observed in frontal regions from CNS, what confirmed the respiratory route as important for virus infection.
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Alexandrino, Bruna. "Modelo experimental com caprinos e cobaias para avaliação da eficácia de vacinas contra o herpesvírus bovino tipo 1 e o vírus da diarreia viral bovina tipos 1 e 2 /." Jaboticabal : [s.n.], 2012. http://hdl.handle.net/11449/103790.
Full textAbstract:
Orientador: Samir Issa Samara<br>Banca: Moacir Marchiori Filho<br>Banca: Fabio Carvalho Dias<br>Banca: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho<br>Banca: Luís Antonio Mathias<br>Resumo: A presente pesquisa teve como objetivo avaliar a utilização de cobaias e caprinos para teste de vacinas contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e os vírus da diarreia viral bovina tipos 1 (BVDV-1) e 2 (BVDV-2). Inicialmente foi realizada a infecção experimental em cobaias e bovinos, com esses três vírus, para verificar a máxima resposta imunogênica em ambas as espécies. As médias geométricas dos títulos de anticorpos (GMT) dos bovinos foram altas para todos os agentes virais; em cobaias foi possível observar que o BoHV-1 induziu elevadas GMT, para o BVDV-1 a indução foi moderada, enquanto para o BVDV-2 foi baixa, podendo comprometer a viabilidade dos testes antigênicos. Após essa etapa, foram vacinados bovinos, cobaias e caprinos, com seis vacinas comerciais de antígenos inativados, para verificar a indução de anticorpos por estímulo vacinal. Nos bovinos, as GMT obtidas para o BoHV-1 mostraram que as vacinas utilizadas promoveram a indução moderada na resposta imunológica, e apenas três delas foram consideradas satisfatórias. Para o BVDV-1, apenas uma vacina pode ser considerada eficiente, e em relação ao BVDV-2 nenhuma delas poderia ser assim classificada. Os resultados da vacinação com os caprinos mostraram que, apesar de os animais serem reagentes ao BoHV-1 no início do experimento, as formulações foram capazes de induzir a produção de anticorpos com títulos elevados contra os três vírus estudados. As cobaias, por sua vez, receberam doses fracionadas de uma vacina comercial nacional e, das frações testadas, 3,2mL foi a que apresentou melhores resultados, sendo esta estabelecida para testar as demais vacinas nesta espécie. Depois da imunização, os resultados mostram que para o BoHV-1 as GMT foram altas; em relação ao BVDV-1, apenas duas vacinas foram capazes de induzir... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)<br>Abstract: The present research had as objective to evaluate the use of guinea pigs and goats in test of vaccines against the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and the bovine viral diarrhea viruses types 1 (BVDV-1) and 2 (BVDV-2). First, an experimental infection was realized in guinea pigs and bovines, using these three viruses, to verify the maximum immune response in both species. The geometric means of antibodies titres (GMT) for bovines were high for the viral agents; in guinea pigs was possible to observe that the GMT induced by BoHV-1 was high, by BVDV-1 was moderate and by BVDV-2 was weak and could compromise the viability of antigenic tests. After this stage, the bovines, guinea pigs and goats were vaccinated using six commercial vaccines with inactivated antigens to verify the induction of antibodies production by vaccinal stimulus. In bovines, the GMT obtained for BoHV-1 showed the vaccines induced a moderate immune response, being only three of them considered satisfactory. For BVDV-1 only one and for BVDV-2 none of them can have the same classification. The results obtained with the goats, despite they were positive to BoHV-1 in the sorting, showed the formulations were able to induce high antibody production against the three virus studied. The guinea pigs, on the other hand, received fractional doses of a commercial vaccine well-established in the domestic trade and, from the fractions tested, 3.2 mL showed the best results, being established to test the other vaccines. After immunization, the results of GMT for BoHV-1 was high; relating to BVDV-1, only two vaccines were capable to induce antibodies production, but their GMT were weak; and there was no immune response against BVDV-2. Thus, goats can be ... (Complete abstract click electronic access below)<br>Doutor
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Finoketti, Fernando. "Detecção de herpesvírus bovino tipo 4 em líquidos foliculares e sêmen de bovinos." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2014. http://hdl.handle.net/10183/109796.
Full textAbstract:
O herpesvírus bovino tipo 4 (BoHV-4) é um herpesvírus membro da subfamília Gammaherpesvirinae, gênero Rhadinovirus que tem sido detectado em bovinos sadios e com diferentes sinais clínicos em todos os continentes. Sugere-se que este vírus está relacionado com diversas doenças do trato reprodutivo de bovinos. Dessa forma, faz-se necessária a pesquisa desse vírus em amostras biológicas com potencial utilização em biotécnicas de reprodução de bovinos, com o objetivo de reduzir sua transmissão e possíveis prejuízos econômicos advindos de sua infecção. Cento e dezenove amostras de líquido folicular de fêmeas abatidas em frigorífico e 164 amostras de sêmen de centros de inseminação artificial foram submetidas a uma reação de nested PCR para detecção do genoma do BoHV-4. Foi detectado o DNA de BoHV-4 em 2 amostras (1,68%) de liquido folicular e em 14 amostras (8,54%) de sêmen. Sete produtos foram submetidos ao sequenciamento, que revelou a semelhança dessas amostras com amostras europeias. É o primeiro relato de detecção do DNA de BoHV-4 em amostras de líquido folicular de bovinos, o que pode sugerir uma nova via de transmissão desse agente. Dessa forma, as alíquotas de sêmen destinadas à inseminação artificial e os ovários destinados a produção de embriões in vitro necessitam de um controle maior para evitar a disseminação do BoHV-4 entre os rebanhos bovinos e possíveis prejuízos econômicos associados ao vírus.<br>Bovine herpesvirus type 4 (BoHV-4), a member of the Gammaherpesvirinae subfamily, genus Rhadinovirus has been detected in healthy as well as diseased cattle in all continents. It is suggested that this virus is associated to several disorders of the reproductive tract of bovines, and the virus or its genome has been found in clinical and biological samples like fetuses, semen and cells of the granulosa. Given the lack of evidences on the circulation of BoHV-4 in bovines of Brazil, specifically from samples from the reproductive tract, this study aimed the detection of BoHV-4 DNA from semen and follicular fluids of bovines. One hundred and nineteen follicular fluid samples obtained from a slaughterhouse and 164 semen samples obtained in artificial insemination centers were subjected to a nested PCR for the detection of BoHV-4 DNA. BoHV-4 DNA was detected in 2 samples (1.68%) from follicular fluid and 14 (8.54%) of semen samples. Seven products were subjected to sequencing, which confirmed the identity of the PCR products and revealed the similarity of these viruses with European virus isolates. It is the first report on the detection of BoHV-4 DNA in bovine follicular fluid samples and semen in Brazil, which may suggest that the virus may be disseminating in Brazilian cattle through reproductive practices. In addition, the results found here point to the a requirement for the testing of such samples, in search for BoHV-4 DNA, in order to prevent the spread of BoHV-4 between the cattle herds and the potential economic losses associated.
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Victorio, Cisneros Willy Mayk. "Seroprevalencia de los virus neumopatógenos de la Parainfluenza bovina 3 (VPI3), Herpesvirus bovino 1 (HVB1) y Virus respiratorio sincitial bovino (VRSB) en alpacas adultas de la provincia de Canchis - Cusco." Bachelor's thesis, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2004. https://hdl.handle.net/20.500.12672/2271.
Full textAbstract:
Con el objetivo de tener una información general sobre la presencia de agentes virales neumotrópicos, se muestreó 345 alpacas adultas procedentes de 31 hatos, pertenecientes a medianos y pequeños criadores de la provincia de Canchis - Cusco. Las muestras de sueros sanguíneos fueron procesadas para la detección de anticuerpos neutralizantes para los virus: Parainfluenza tipo 3 (PI3), Respiratorio Sincitial Bovino (RSB) y el Herpes virus bovino tipo 1 (VHB1). Todas las muestras fueron trabajadas mediante la prueba de neutralización viral utilizando cultivos celulares secundarios de origen bovino (cornetes nasales) y cepas virales citopáticas mantenidas en el laboratorio. Las pruebas de laboratorio evidencian que los 31 hatos muestreados tienen animales seropositivos a los virus RSB y PI3; y solamente 1/30 se encontró animales reactores al VHB1. El estudio, además determino una seroprevalencia de 80.16% ± 6.96% (101/126) y 67.54% ± 4.94% (233/345) del VRSB y el PI3 respectivamente. Estos resultados sugieren que los animales muestreados han estado expuestos a varios agentes potencialmente neumopatogénicos, y evidencian una activa replicación viral al momento del muestreo que coincidió con una severa ola de baja temperatura en la zona y mortalidad de animales por neumonías en el campo, quedando por demostrarse la presencia directa de estos agentes en muestras patológicas y verificar el posible rol causal en procesos neumónicos.<br>The objective of the present study was determine the presence of respiratory virus. Three hundred forty five serum samples from thirty one farms were tested by virus neutralization test to detect neutralizing antibodies against PI-3, BHV1 and BRSV. The farms were small farms from the province of Canchis - Cusco. All the samples were worked by means of the test of viral neutralization using secondary cellular cultures of bovine origin and cytopathic virus from the laboratory. Thirty one farms had seroreactive animals to BRSV and PI-3; and one farm had seroreactive animals to BHV1. The 80,16% ± 6,96% (101/126) and 67,54% ± 4,94% (233/345) of the samples had antibodies against BRSV and PI-3 respectively. These results suggest that sample animals have been exposed potentially to respiratory virus, and demonstrate an active viral replication at the time of the sampling that agreed with a severe low temperature in the zone and mortality of animals by pneumonia in the field.<br>Tesis
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Bleasdale, Ben. "Novel envelopment dynamics in bovine herpesvirus 1 assembly." Thesis, Imperial College London, 2014. http://hdl.handle.net/10044/1/49227.
Full textAbstract:
Bovine herpesvirus-1 (BHV-1) is a member of the alphaherpesvirus subfamily which includes several prominent animal and human pathogens, including herpes simplex virus 1 (HSV-1). A new model for the morphogenesis of HSV-1 has recently been proposed, in which the virus is enveloped by endocytic membranes recently derived from the plasma membrane. Here we show that this model extends to a second alphaherpesvirus, BHV-1, through a detailed ultrastructural study of morphogenesis using electron microscopy and techniques which utilise the particularly high abundance of the protein VP8 in the BHV-1 tegument. These studies also revealed that greater than half of the particles released during BHV-1 infection are capsidless, non-infectious ‘light’ particles (L-particles). Such particles are composed of only tegument and an envelope, and display comparable protein profiles to virions. These L-particles were shown to be efficiently produced under conditions where DNA synthesis was inhibited, indicating that the processes of glycoprotein trafficking to the plasma membrane, retrieval into endocytic membranes, recruitment of tegument to these membranes, and the egress of these particles from the cell, all represent autonomous events which are ongoing from the early stages of infection. In short, we have demonstrated that BHV-1 infected cells can be viewed as efficient factories for the continuous and autonomous secretion of enveloped virus-like particles, irrespective of the availability of DNA for packaging. We propose BHV-1 as an excellent model for further investigation of both the process of tegumentation and the role of L-particles in virus infection.
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Caixeta, Suzana Pereira de Melo Borges. "Análise antigênica de herpesvirus bovino tipo 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) com anticorpos monoclonais." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2008. http://hdl.handle.net/10183/13370.
Full textAbstract:
Os herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e tipo 5 (BoHV-5) são responsáveis por uma série de patologias em bovinos. A diferenciação entre tipos e subtipos desses vírus é importante para a compreensão da epidemiologia das infecções associadas a eles, assim como para permitir a tomada de medidas de controle adequadas. No presente estudo foram efetuadas análises antigênicas utilizando anticorpos monoclonais (AcMs) preparados contra antígenos específicos de herpesvírus bovinos. Quarenta e cinco amostras virais foram examinadas com um painel de 36 AcMs previamente preparados, em testes de imunoperoxidase em monocamada. Quatro amostras virais, sendo três BoHV-1 e uma BoHV-5, não apresentaram reatividade frente a nenhum dos AcMs avaliados. Oito dos 36 AcMs reagiram com todas as demais 41 amostras de herpesvírus bovinos. Por outro lado, oito amostras virais (três BoHV-5 e cinco BoHV-1) reagiram com todos os AcMs testados. Um AcM foi capaz de diferenciar o subtipo “c” do BoHV- 5 das demais amostras. Os demais resultados obtidos sugerem que não há uma clara correlação entre tipos e subtipos genomicamente determinados de herpesvírus bovinos e os AcMs aqui avaliados.<br>Bovine herpesvirus 1(BoHV-1) and 5 (BoHV-5) are associated to different clinical conditions of cattle. The differentiation between types and subtypes of these viruses maybe important for a better understanding of the epidemiology of bovine herpesvirus infections, as well as to provide support for adequate control measures. In the present study, antigenic analyses were performed with monoclonal antibodies (Mabs) prepared to bovine herpesviruses specific antigens. Fourty five virus isolates/strains were examined with a panel of 36 previously prepared Mabs, immunoperoxidase monolayer assays. Four virus isolates, of which three BoHV-1 and one BoHV-5, did not react with any of the Mabs tested. Eight of the 36 Mabs reacted with all other 41 bovine herpeviruses. On the other hand, eight viruses (three BoHV-5 and five BoHV-1) reacted with all Mabs tested. One Mab was capable of distinguishing BoHV-5 subtype “c” from the other subtypes. Additional results revealed that no clearcut correlation could be established between bovine herpesviruses types and subtypes determinated by molecular methods and the Mabs here evaluated.
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Kunert, Filho Hiran Castagnino. "Detecção de dna de herpesvírus bovino em encéfalos de bovinos submetidos ao diagnóstico de raiva." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2011. http://hdl.handle.net/10183/29063.
Full textAbstract:
Os herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) são alfaherpesvírus freqüentemente associados a meningoencefalites. Por outro lado, o vírus da raiva é o agente mais frequentemente identificado como causador de encefalites virais em bovinos no Brasil. O objetivo do presente estudo foi examinar a ocorrência de infecções por BoHV-1 e/ou BoHV-5 em amostras de tecido encefálico bovino submetidas ao diagnóstico de raiva e avaliar seu possível envolvimento nos quadros de encefalite que originaram a suspeita de raiva. Para tanto, 101 amostras desses tecidos, sendo 39 positivas para raiva e 62 negativas, recebidas pelo órgão oficial responsável pelo diagnóstico de raiva no Estado do Rio Grande do Sul (IPVDF) no período de 2009- 2010, foram submetidas a exames buscando o isolamento viral e amplificação de genomas de herpesvírus bovinos. Ao isolamento viral, todas as amostras foram negativas para vírus infeccioso após a realização de três passagens cegas em células MDBK. As mesmas foram submetidas à amplificação por “nested PCR” (nPCR) para a pesquisa de genomas de BoHV-1 e BoHV-5. Das 101 amostras totais analisadas esta técnica revelou que 25,7% (26/101) continham genomas de BoHV-1 e 21,8% (22/101) continham genomas de BoHV-5. Genomas de ambos os tipos foram identificadas em 30 (29,7%) amostras. Entre as amostras que foram também positivas para raiva em 23% (9/39) foram detectados genomas de BoHV-1 e em 15,4% (6/39) continham genomas de BoHV-5. Em 16 destas 39 amostras (41%) foram detectados genomas de BoHV-1 e BoHV-5. Em contrapartida, nas amostras negativas para o vírus rábico, 27,4% (17/62) também foram positivas para BoHV-1, 25,8% (16/62) foram positivas para BoHV-5. Detectaram-se os genomas de ambos BoHVs em 22,6% (14/62) dos animais. Estas diferenças não foram estatisticamente significativas, indicando não haver correlação entre a ocorrência de raiva e infecções por herpesvírus na amostragem realizada. Estes resultados indicam que, embora as infecções por BoHV-1 e BoHV-5 tenham apresentado elevada incidência nessas amostras, não havia vírus infeccioso nas mesmas, sugerindo infecções latentes sem envolvimento aparente nos quadros de encefalite que originaram a suspeita inicial de raiva.<br>Bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) are alphaherpesviruses associated with a number of clinical manifestations in cattle, including encephalitis. On the other hand, rabies virus is the agent most frequently identified as cause of viral encephalitis in cattle in Brazil. The aim of this study was to examine the occurrence of BoHV-1 and / or BoHV-5 in bovine brain tissue samples submitted to rabies diagnosis. The search was carried out by virus isolation and nested polymerase chain reaction (PCR) in brain tissues of cattle submitted to rabies diagnosis in the state of Rio Grande do Sul in the period 2009-2010. One hundred and one brain samples from cattle with signs of neurological disease, of which 39 were positive and 62 negative for rabies, were used in this study. At virus isolation, all samples were negative for the presence of infectious herpesviruses after three successive passages in MDBK cells. Of the 101 total samples analyzed, this test revealed that 25.7% (26/101) of cattle were infected with BoHV-1 and 21.8% (22/101) were infected with BoHV-5. Genomes of both types were detected in 29.7% (30/101) samples. With the 39 samples positive for rabies virus, BoHV-1 genome was detected in 23% (9/39) and 15.4% (6/39) were positive for BoHV-5 as well as in 41% (16/39) of these samples, which were positive for both BoHVs. On the other hand, the negative samples for rabies virus, 27.4% (17/62) also were positive for BoHV-1, as well and 25.8% (16/62) were positive for BoHV-5. Genomes of both BoHVs were detected in 22.6% (14/62) of the specimens. These differences were not statistically significant indicating no correlation between the occurrence of rabies and herpesvirus infections in the animals. These results do not imply that the herpesviruses detected, even showing a high incidence, were the causative agents of meningoencephalitis in the samples tested, once it was not possible to isolate virus in its infectious form, however it suggests a latent infection in the animals involved with neurological signs of meningoencephalitis whose primary suspicion was rabies.
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Alves, Saullo Vinícius Pereira. "Bovine herpesvirus 1 interfere na maturação in vitro de ovócitos bovinos em modelo de infecção artificial e natural." Universidade Federal de Viçosa, 2018. http://www.locus.ufv.br/handle/123456789/22539.
Full textAbstract:
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-11-13T12:15:03Z
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Previous issue date: 2018-07-23<br>Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior<br>O bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) é de fácil disseminação, difícil controle e está amplamente disseminado nos rebanhos bovinos no mundo. Essa infecção viral é responsável por prejuízos à pecuária principalmente quanto aos aspectos reprodutivos. Estudos prévios envolvendo infecção experimental com o BoHV-1 em um sistema de produção in vitro de embriões reportou que a presença do vírus afetou o desenvolvimento embrionário. Neste trabalho, foi avaliada a interferência do BoHV-1 sobre a maturação in vitro de complexos cumulus-ovócito (COCs) e ovócitos desnudados com células do cumulus em suspensão (DOs). Foram coletados sangue e os ovários de fêmeas bovinas sabidamente não vacinadas contra o BoHV-1. Após o teste de soroneutralização, os animais soropositivos foram classificados de acordo com a sua titulação de anticorpos. Os ovócitos recuperados após aspiração folicular foram divididos em COCs e DOs e avaliados através da sua capacidade de maturação nuclear associado a detecção viral pela microscopia confocal de varredura a laser. Dois experimentos foram realizados: (I) maturação após infecção in vitro de COCs e DOs de animais soronegativos; (II) maturação in vitro de COCs e DOs de animais soropositivos. No experimento I, diferença (P<0,01) foi observada entre as taxas de maturação do grupo COCs controle (78,2%) e os grupos infectados dos COCs (43,6%). No experimento II verificou-se diferença (P<0,01) na taxa de maturação entre os animais de titulação de anticorpos ≥ 16 (56,9%) e o grupo controle (79,4%). Os ensaios de imunofluorescência permitiram a identificação do BoHV-1 nos COCs e DOs. Diante disso, conclui-se que o BoHV-1 foi capaz de afetar o processo de maturação in vitro tanto nas condições de infecção in vitro e em condições naturais de infecção.<br>Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) disseminates easily, is difficult to control, and is widely spread in cattle herds worldwide. BoHV-1 causes a broad range of losses to the cattle industry, mainly concerning reproduction. Previous studies involving experimental infection of BoHV-1 in an in vitro embryo production system have reported impairment of embryonic development by BoHV-1. In this study, we evaluated the interference of BoHV-1 in the in vitro maturation system of cumulus- oocyte complexes (COCs) and denuded oocytes (DOs) cultured with a cumulus cell suspension. Blood samples and ovaries were collected from slaughterhouse cows unvaccinated against BoHV-1. Using virus neutralization assays, the seropositive animals were classified according to their antibody titers. The oocytes were recovered by follicular aspiration and divided into two groups, COCs and DOs, which were evaluated for their nuclear maturation capacity using immunofluorescence assays by laser scanning confocal microscopy. Two experiments were carried out: (I) in vitro maturation of COCs and DOs after artificial infection of seronegative animals and (II) in vitro maturation of COCs and DOs of seropositive animals. In experiment I, a difference (P <0.01) was observed between the maturation rates of the control group COCs (78.2%) and the infected COCs (43.6%). In experiment II, there was a difference (P <0.01) in the maturation rate between animals with antibody titers ≥ 16 (56.9%) and the control group (79.4%). Immunofluorescence assays identified BoHV-1 in the COCs and DOs. Therefore, it was concluded that BoHV-1 affects the in vitro maturation process in both in vitro and natural infections.
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Souza, Luiz Felipe Lourenço de. "Comparação de isolados de Herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) como candidatos à vacina." Universidade Federal de Viçosa, 2006. http://locus.ufv.br/handle/123456789/5080.
Full textAbstract:
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2006-07-28<br>Bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) is the etiological agent of the bovine meningoencephalitis that presents high morbidity in young bovine. Due to the similarity in the morphology of the virion, cytopathic effect in cell culture and antigenic properties, the BoHV-5 was classified erroneously as BoHV-1 in the past. BoHV-1 is responsible for respiratory and genital diseases, however the disease caused by BoHV-5 presents neurological clinical signs. This virus has been considered a variant of the same agent (BoHV-1) with neuropathogenic characteristics. Comparative studies among isolates of BoHV-5 revealed 97% of proteic similarity. However, the amino-terminal region of the most abundant glycoprotein of the viral envelope, the gC, differs substantially. This glycoprotein is involved in the initial interactions of the virus with the cellular surface besides of presenting as target for antibodies with neutralizing activities. This study aimed at to select an isolate of BoHV-5, among 5 isolates collected in outbreaks in different properties in Brazil, presenting higher antigenicity in vaccinated animals. Vaccines were formulated using isolates ISO9898292, SV507, SV163, 1807 and EVI145 and administered to 5 groups of 10 sheeps, which have received two intramuscular doses on days 0 and 21. Collections of blood were accomplished for analysis of production of antibodies by virus-neutralization and attendance of possible clinical signs to the 63rd day after the first vaccination. Antibodies titers averages ranged from 6,85 and 14,92 on the day 0 before the first vaccination. Antibody peak were on day 14, ranged from 4,50 (isolated ISO9898292) to 138,63 (isolated SV163). A second peak was observed 14 days after the booster ranged from 7,77 (ISO9898292) to 1017,54 (1807). In the 42nd day after the booster, it was observed titers variation from 3,84 (ISO9898292) to 305,97 (1807). The discrepancy among titers of antibody of each group of animals suggests a smaller antigenicity of isolated ISO9898292 in relation to the others, demonstrating a possible variation among the isolates, what results in antigenic differences. All isolates, with exception to ISO9898292, were effective in the induction of antibodies.<br>O herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) é o agente etiológico da menigoencefalite bovina que apresenta alta morbidade em bovinos jovens. Devido à similaridade na morfologia do virion, efeito citopático na cultura de células e propriedades antigênicas, o BoHV-5 foi classificado erroneamente como herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1). Este vírus é responsável por doenças respiratórias e genitais, porém a doença causada pelo BoHV-5 apresenta sinais clínicos neurológicos, com isso o vírus foi considerado uma variante do mesmo agente com características de neuropatogenicidade. Estudos comparativos entre isolados de BoHV-5 revelaram 97% de similaridade protéica. No entanto, a região amino terminal da glicoproteína mais abundante do envelope viral, a gC, difere substancialmente. Esta glicoproteína está envolvida nas interações iniciais do vírus com a superfície celular, além de se apresentar como alvo para anticorpos com atividades neutralizantes. Este estudo objetivou selecionar um isolado do vírus BoHV-5, entre 5 isolados coletados em surtos da doença em diferentes propriedades, que confira maior antigenicidade em animais vacinados. As vacinas foram formuladas com os isolados ISO9898292, SV507, SV163, 1807 e EVI145 e administradas a 5 grupos de 10 ovelhas, as quais receberam duas doses vacinais por via intramuscular nos dias 0 e 21. Foram realizadas coletas de sangue para análise de produção de anticorpos por virusneutralização e acompanhamento de possíveis sinais clínicos até o 63º dia após a primo-vacinação. Foram observados dois picos na curva de anticorpos, o primeiro no dia 14, após a vacinação, onde os títulos de anticorpos variaram entre 4,50 (isolado ISO9898292) a 138,62 (isolado SV163). O segundo pico foi observado 14 dias após a revacinação onde os títulos variaram entre 7,77 (ISO9898292) a 1017,54 (1807). No 42º dia após a revacinação observou-se variação de título entre 3,84 (ISO9898292) a 305,97 (1807). A discrepância entre as médias de título de anticorpo de cada grupo de animais sugere uma menor antigenicidade do isolado ISO9898292 em relação aos demais, demonstrando uma possível variação entre os isolados, o que resulta em diferenças antigênicas. Todos os isolados, com exceção ao ISO9898292, mostraram-se eficazes na indução de anticorpos.
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Baptistiolli, Lillian. "Herpesvirus bovino : aspectos da interação vírus-hospedeiro /." Araçatuba, 2018. http://hdl.handle.net/11449/154905.
Full textAbstract:
Orientador: Tereza Cristina Cardoso<br>Coorientadora: Katia Denise Saraica Bresciani<br>Banca: Roberto Gameiro de Carvalho<br>Banca: Ana Carolina Borsanelli<br>Banca: Andréa Fontes Garcia<br>Banca: Jamila Cristina Baptistella<br>Resumo: O Brasil é o segundo maior produtor mundial de carne bovina. Entretanto diversas patologias podem acometer o rebanho bovino e causar significativas perdas econômicas. Diante deste cenário, a infecção por Herpesvirus bovino 5 (BHV5) possui grande importância epidemiológica neste setor, sendo o BHV5 conhecido pelo desenvolvimento de meningoencefalite. Esse vírus possui como características a rápida replicação lítica em cultura de células e a capacidade de estabelecer latência nos gânglios sensoriais do hospedeiro. Assim, essa cepa viral está relacionada à habilidade do BHV5 de invadir, replicar-se no sistema nervoso central (SNC) e causar enfermidade neurológica. É de conhecimento científico que infecções virais estimulam ou inibem a resposta imunológica com objetivo de impedir a replicação e disseminação viral. Entretanto, pouco se sabe sobre o desenvolvimento da resposta imunológica do BHV5 no curso da infecção aguda ou latente. Assim, muitos conceitos sobre a patogênese do BHV5 acabam sendo extrapolados do Herpesvirus bovino 1 (BHV1). Diante deste contexto, faz-se necessário a busca pelo conhecimento da relação entre os vírus e as células de defesa do hospedeiro. Esses achados irão contribuir para um melhor entendimento da patogênese da doença, bem como para o possível desenvolvimento de vacinas mais específicas e eficazes.<br>Abstract: Brazil is the second largest producer of beef in the world. However several pathologies can affect the bovine herd and cause significant economic losses. In view of this scenario, bovine herpesvirus 5 infection (BHV5) is of great epidemiological importance in this sector, and BHV5 is known for the development of meningoencephalitis. This virus is characterized by rapid lytic replication in cell culture and the ability to establish latency in host sensory ganglia. Thus, this viral strain is related to the ability of BHV5 to invade, replicate in the central nervous system (CNS) and cause neurological disease. It is scientifically known that viral infections stimulate or inhibit the immune response in order to prevent viral replication and dissemination. However little is known about the development of the BHV5 immune response in the course of acute or latent infection. Thus, many concepts about the pathogenesis of BHV5 end up being extrapolated from bovine herpesvirus 1 (BHV1). In this context, it is necessary to search for knowledge about the relationship between viruses and host defense cells. These findings will contribute to a better understanding of the pathogenesis of the disease, as well as to the development of more specific and effective vaccines.<br>Doutor
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Marley, Mylissa Shonda Divina Givens Maurice Daniel. "Assessment of methods to minimize transmission of bovine herpesvirus associated with embryos." Auburn, Ala., 2007. http://hdl.handle.net/10415/1332.
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Bradley, Andrew John. "Development of Bovine Herpesvirus-2 as a vector system for antigen presentation to bovine mammary gland." Thesis, University of Bristol, 1998. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.263923.
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Raggo, Camilo. "The construction and characterization of Bovine herpesvirus 1 expressing cytokines." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1999. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk1/tape7/PQDD_0021/NQ43519.pdf.
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Brown, Graham Alfred. "A study of bovine herpesvirus 1 pathogenesis using laboratory models." Thesis, University of Cambridge, 1988. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.304239.
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Silva, Danilo Rezende e. "Detecção molecular de herpesvírus bovino tipo-1 e herpesvírus bovino tipo-5 em amostras de encéfalos bovinos incluídos em parafina." Universidade Federal de Goiás, 2014. http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/5337.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2014-09-04<br>Identification of herpesvirus in specimes fixed in formalin and paraffin embedded has been used in experimental analysis. Several molecular techniques have been used in research and in diagnosing of herpesviral meningoencephalitis. 80 cases of routine in veterinary pathology were reviewed on the Department of Animal Pathology of Veterinary and Science Animal School Medicine of Federal University of Goias, Goiania, GO (EVZ/UFG) performed between January 2007 to December 2012. Were used 18 cases with a total of 44 paraffin blocks (Group I - 14 blocks, Group II - 17 blocks and Group III - 13 blocks), which were grouped according to histopathological diagnosis, in Group I - samples without histological changes and no clinical history of neurological disease, Group II - samples with nonspecific encephalitis, Group III - samples with rabies encephalitis. Were extracted DNA fragments, from cuts blocks, using a commercial extraction kit of formalin and paraffin embedded tissue. Afterwards the technique standardization of conventional PCR for bovine herpesvirus-1 and bovine herpersvírus type-5 was performed. Were positive for BoHV-5 28% (5/18) of cases, with 11% (2/18) of the group with nonspecific encephalitis and 17% (3/18) of the group with encephalitis and positive for the rabies virus. In the test for checking of the bands for the BoHV-1, all samples, 100% (18/18) were negative. These results demonstrate that the conventional PCR technique is helpful in aiding the definitive diagnosis of encephalitis bovine herpesvirus type-5.<br>A extração do DNA de herpesvírus em amostras fixadas em formol, assim como amostras emblocadas em parafina, tem sido utilizada em análises experimentais, permitindo o emprego de técnicas moleculares em pesquisas e no diagnóstico das meningonencefalites por herpesvírus. Foram revisados 80 casos da rotina anatomopatológica do Setor de Patologia Animal da Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO (EVZ/UFG) realizados entre janeiro de 2007 à dezembro de 2012. Foram utilizados 18 casos com um total de 44 blocos (Grupo I – 14 blocos, Grupo II – 17 blocos e Grupo III – 13 blocos), os quais foram agrupados, de acordo com diagnóstico histopatológico, em Grupo I – amostras sem alterações histológicas e sem histórico clínico de doença neurológica, Grupo II – amostras com encefalite inespecífica, Grupo III – amostras com encefalite por Raiva. DNA dos fragmentos foram obtidos a partir dos cortes dos blocos, foi extraído com kit comercial de extração de material parafinizado. Posteriormente foi realizada a padronização da técnica de PCR convencional para herpesvírus bovino tipo-1 e herpersvírus bovino tipo-5. Foram positivos para BoHV-5 28% (5/18) dos casos, sendo 11% (2/18) do grupo com encefalite inespecífica e 17% (3/18) do grupo com encefalite e positivos para o vírus da raiva. No teste para verificação das bandas para o BoHV-1, todas as amostras, 100% (18/18), foram negativas. Esses resultados comprovam que a técnica de PCR convencional é útil no auxílio do diagnóstico definitivo de encefalite por herpesvírus bovino tipo-5.
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Spilki, Fernando Rosado. "Patogenicidade e vacinologia de amostras brasileiras de Herpesvírus bovino tipo 1." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2004. http://hdl.handle.net/10183/3673.
Full textAbstract:
O herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1) está amplamente disseminado no rebanho bovino brasileiro. Visando aprofundar o conhecimento sobre a patogenicidade para o trato respiratório de amostras dos subtipos deste vírus mais freqüentemente encontrados no Brasil (BHV-1.1 e BHV-1.a), isolados autóctones oriundos de casos de doença respiratória foram inoculados em bovinos suscetíveis. As amostras de ambos os subtipos foram capazes de induzir doença respiratória após inoculação pela via intranasal, em intensidade que variou de moderada a grave, independentemente do subtipo de vírus inoculado. Foi ainda caracterizada a resposta imune humoral induzida por tais amostras quanto ao perfil de classes e subclasses de imunoglobulinas, sendo esta igualmente indistinguível com relação aos vírus inoculados. O perfil de classes de imunoglobulinas apresentadas pelos animais permitiu a determinação do status da infecção nos animais inoculados através da análise da resposta sorológica. Na segunda etapa deste trabalho foram testadas as propriedades vacinais de um vírus recombinante, do qual foi deletada a glicoproteína E (gE; 265gE-), gerado a partir de uma amostra brasileira de BHV-1.2a. Experimentos de inoculação do recombinante 265gE- em animais suscetíveis e o desafio destes animais com a amostra parental virulenta demonstraram a segurança e eficácia desta amostra na prevenção de sinais clínicos da infecção pelo BHV-1. Posteriormente, o recombinante 265gE- foi inoculado em vacas em diferentes estágios da gestação. Não foram observadas quaisquer anormalidades nestas gestações e as 22 vacas vacinadas deram à luz a animais saudáveis. Conclui-se que o recombinante é imunogênico e capaz de conferir significativa proteção frente ao desafio com a amostra parental virulenta do vírus. O recombinante também não causou enfermidade nas vacas inoculadas nem tampouco aos fetos quando inoculado em diferentes estágios da gestação.
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Affonso, Ingrid Bortolin. "Monitoração da ocorrência do Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) em plantéis leiteiros infectados pelo Herpesvírus Bovino Tipo 1 (BoHV-1) /." Jaboticabal : [s.n.], 2010. http://hdl.handle.net/11449/94635.
Full textAbstract:
Orientador: Samir Issa Samara<br>Banca: Sandra Possebon Gatti<br>Banca: Edvirges Maristela Pituco<br>Resumo: O Vírus Respiratório Sincicial Bovino (BRSV) é um dos patógenos pertencentes ao complexo respiratório bovino. Apesar de não provocar enfermidade severa na maioria dos casos, há evidências de que este vírus possa facilitar o estabelecimento de outros patógenos. Assim, o presente estudo buscou estabelecer a possibilidade de relação entre o BRSV e o Herpesvírus Bovino Tipo 1 (BoHV-1), em três propriedades leiteiras, localizadas em três municípios do noroeste do Estado de São Paulo. Além disso, visou também monitorar ao longo do tempo os títulos de anticorpos contra o BRSV em bezerros desde o nascimento. Com base em dados previamente estabelecidos, essas propriedades foram categorizadas como tendo alta, média e baixa prevalência de BoHV-1, respectivamente, propriedade A, no município de Viradouro, (78,6%); propriedade B, no município de Altinópolis, (40%); e, propriedade C, no município de Jaboticabal, (1,6%). Com relação à prevalência de BRSV, a propriedade B apresentou maior prevalência sorológica (82,4%), possivelmente por possuir fatores de risco facilitadores para o desenvolvimento da infecção, enquanto que as propriedades A e C mostraram prevalências estatisticamente equivalentes (45,6% e 59,1%, respectivamente), sem qualquer correlação entre as prevalências de BRSV e BoHV-1. A curva dos títulos de anticorpos contra o BRSV em bezerros nas propriedades A e B monitorados ao longo de um ano foi semelhante, pois ambas apresentaram redução dos títulos a partir do sexto até o oitavo mês de idade dos animais, com seguida retomada de títulos cada vez mais elevados, fato característico de infecção natural. A propriedade C apresentou uma dinâmica semelhante, porém, a maior parte dos bezerros manteve-se positiva durante todo o período, com títulos que decresceram e voltaram a aumentar.<br>Abstract: The Bovine Respiratory Syncytial Vírus (BRSV) is one of the Bovine Respiratory Complex pathogens. The disease caused by this virus is often mild, but there are evidences that this pathogen may ease the establishment of other pathogens. Data on the epidemiology of BRSV are still scarce. Based on that, this study aimed to determine the prevalence and evaluate antibody titers in calves from three farms. Moreover, the relationship between BRSV and the Bovine Herpesvirus Type 1 (BHV-1) was investigated, based on epidemiological data previously determined in these farms. The three farms were categorized as A, in Viradouro municipality, with high prevalence of BHV-1 (78.6%); B, in Altinópolis municipaltity, with intermediate prevalence for this agent (40%); and C, in Jaboticabal municipality, with low prevalence of BHV-1 (1.6%). Farm B showed higher BRSV prevalence (82.4%), maybe due to larger herd and colder climate than farms A and C, which showed equivalent prevalences for BRSV (45.6% and 59.1%, respectively). The curve of antibody titers against BRSV in calves from farms A and B over one year were similar, as both showed lower titers by 6 to 8 months of age, rising up again due to antigenic induction. Farm C showed equivalent dynamics, but calves remained positive all over the year. In disagree to literature data, this experiment did not showed correlation between BRSV and BHV-1 prevalences, maybe due to lack of circulation of the latter.<br>Mestre
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Campos, Fabrício Souza. "Detecção de infecções latentes por herpesvírus bovino 1 e 5 em gânglios trigêmeos de bovinos através da técnica de reação em cadeia da polimerase." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2009. http://hdl.handle.net/10183/16775.
Full textAbstract:
Infecções pelos herpesvírus bovinos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5) têm sido sistematicamente detectadas em rebanhos bovinos brasileiros. Entretanto, por causa da alta similaridade antigênica entre estes dois vírus e a falta de testes sorológicos específicos, a prevalência de cada um deles é atualmente desconhecida. Com o objetivo de detectar e diferenciar infecções latentes causadas por BoHV-1 e/ou BoHV-5, gânglios trigêmeos de 200 bovinos foram coletados e analisados para a presença de DNA viral. As amostras foram coletadas em um frigorífico localizado no município de Capão do Leão, Rio Grande do Sul. Uma PCR semi quantitativa foi desenvolvida, otimizada e utilizada para detectar o DNA viral em gânglios. Para diferenciar entre infecções por BoHV-1 e BoHV-5, duas nested PCR tipo-específicas foram desenvolvidas e utilizadas. Além disto, as amostras de soros obtidas foram submetidas a testes de neutralização viral (VN) para detecção de anticorpos. O DNA de BoHV-1 e/ou BoHV-5 foi detectado em 87% dos animais. Os resultados das nested PCRs revelaram que 82,8% dos animais positivos estavam latentemente infectados com BoHV-1 e 93,1%, com BoHV-5. Além disto, foi detectada uma alta proporção de animais co-infectados com os dois vírus (75,9 %). Por outro lado, os resultados das VN mostraram que somente 49,5% dos animais apresentaram anticorpos anti-virais. Este é o primeiro estudo que utiliza testes moleculares para detectar infecções latentes por BoHV-1 e/ou BoHV-5 em gânglios de um grande número de animais e mostra uma alta proporção de co-infecções por estes dois vírus em bovinos.<br>Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) and 5 (BoHV-5) infections have been consistently detected in Brazilian bovine herds. However, mainly because of their high antigenic similarity and the lack of specific serologic tests for both viruses, the prevalence of each of these viruses is currently unknown. Aiming the detection and differentiation of latent infections caused by BoHV-1 and/or BoHV-5, we collected trigeminal ganglia of 200 bovines and analyzed them for the presence of viral DNA. The samples were collected in an abattoir located in Capão do Leão, Rio Grande do Sul. A semi quantitative PCR was developed, optimized and used to detect the viral DNA in ganglia. To differentiate between BoHV-1 and BoHV-5 infections, two type-specific nested PCR were developed and performed. In addition, for the detection of anti-viral antibodies, serum samples were submitted to the virus neutralizing test (VNT). DNA of BoHV-1 and/or BoHV-5 was detected in 87% of the animals. The results of the nested PCRs reveled that 82.8% of the bovines were latently infected with BoHV-1 and 93.1%, with BoHV-5. Moreover, we detected a high proportion of co-infected animals (75.9 %). On the other hand, the results of the VNT indicated that only 49.5% of the animals had anti-viral antibodies. This is the first study that applies molecular tests to detect latent infection by either BoHV-1 and/or BoHV-5 in ganglia of a high number of animals and shows such a high proportion of coinfections of these two viruses in bovines.
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Crook, Tara Catherine. "Investigating the role of bovine herpesvirus-1 in abortion and systemic disease in cattle." Thesis, University of Edinburgh, 2011. http://hdl.handle.net/1842/5908.
Full textAbstract:
Bovine herpesvirus-1 (BoHV-1) is a pathogen of cattle, which most commonly affects the upper respiratory tract to cause infectious bovine rhinotracheitis (IBR). It can also spread systemically to cause fatalities in calves and abortion in pregnant cattle. The virally encoded mechanisms of this systemic spread are poorly understood and therefore have been addressed by comparing isolates from the respiratory form of disease with isolates that have previously demonstrated systemic spread. A survey of 400 bovine abortions in Scotland from 2007-2009 demonstrated a BoHV-1 prevalence of 2.5%. It also demonstrated the importance of real-time PCR as a diagnostic technique when analysing samples from natural cases. The study of BoHV-1 distribution in the placenta and foetal tissue provided support for a haematogenous route of viral spread. Whole genome sequencing of 11 BoHV-1 isolates using Illumina Solexa technology was completed and added significantly to the sequencing data of BoHV-1. In terms of identifying genetic variation between isolates causing respiratory infection and those causing systemic infection, no differences were observed by SNP or phylogenetic analysis. However, there were significant differences in the extent of variation between essential and non-essential genes, which may reflect the evolution of BoHV-1. An in vivo challenge of the natural host to compare two isolates representing the respiratory and systemic forms of infection showed differences in clinical presentation, histopathological analysis, viral distribution and viral transcript expression, measured throughout the infection period. In particular, it was noted that a more severe ocular infection, rather than respiratory based infection was caused by infection with the ‘systemic’ isolate. Differences in the tropism of the virus were observed early in the infection with the ‘systemic’ isolate showing more association with the nasal mucosa than the trachea. The tonsils demonstrated different responses to the virus and differences in viral transcript expression. However, this may simply represent different stages of virus infection. Both isolates demonstrated spread to the brain at day 10 post infection. In vitro methods were used to study the differences in transcript expression in more detail. In a bovine turbinate cell infection faster replication of the respiratory isolate was observed by a significantly faster development of cytopathic effect. This was also reflected in the higher gene expression levels of the respiratory isolate in the first 12 hours of infection. More isolates were studied to investigate whether these differences were consistent, or as suggested by the sequencing, random differences between isolates. Six isolates were used to infect bovine lung slices. Differences in transcript expression were minimal between the two isolate groups. Immunofluorescence did not provide the sensitivity to detect virus in all samples where PCR showed replication. This compromised the study of co-localization but did show promise as a model to study the tropism of respiratory viruses. Overall, this work has showed that systemic spread of BoHV-1 does not appear to be controlled by virally encoded mechanisms. The in vivo experimental infection suggested host factors may play a large part. Further work is also needed to consider any differences that may exist between reactivated virus and the original infecting isolate.
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Pereira, Emílio César Martins. "Detecção sorológica e molecular do herpesvírus bovino 1 em estruturas reprodutivas de fêmeas bovinas." Universidade Federal de Viçosa, 2011. http://locus.ufv.br/handle/123456789/5051.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2011-02-28<br>Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico<br>The aim of this study was to evaluate the serological status of slaughterderived cows for the presence of antibodies against bovine herpesvirus 1 (BoHV-1), viral DNA in ovarian tissue, oocyte, follicular fluid and blood of these animals by polymerase chain reaction (PCR) and correlate it with the serological profile. Serum samples, blood, ovarian tissue, follicular fluid and cumulus-oocyte complex were collected from 147 animals that had no history of vaccination against BoHV-1. Toxic or insufficient samples were discarded. Serological tests allowed the detection of the antibody titers from 2 to 1024. Molecular tests were preceded by the extraction of DNA from the samples, according to manufacturer's recommendations. The PCR reaction to use the primers previously described by Takiuchi et al. (2005). A total of 83.6% (117/140) of serum-positive for BoHV-1 in serum samples were observed. The positive samples were divided into groups according to serological profile, to get 10% of Down Titer (2 ≤ X <8), 32.9% of Moderate Titer (8 ≤ X <64); 40.7% High Titer (64 ≤ X ≤ 512). In molecular tests, viral DNA was detected only in groups of positive samples. From positive animals, viral DNA was detected in 0.9% (1/115) of oocytes, at 4.3% (5/117) of ovarian tissue, 2.8% (3/108) of blood and any of follicular fluid sample. Comparing the results among groups of samples, the differences were not significant (p>0.05). Thus, animals showed high prevalence of antibodies against BoHV-1 and molecular tests that have provensuccessful in detecting DNA in genital samples from cows, suggesting that these structures could be sites of tropism of this virus.<br>O objetivo do presente trabalho foi avaliar a condição sorológica de fêmeas bovinas abatidas em um frigorífico quanto à presença de anticorpos contra o Bovine Herpesvirus 1 (Herpesvírus Bovino 1 - BoHV-1). Objetivou-se também avaliar a presença do DNA viral no tecido ovariano, nos ovócitos, líquido folicular e sangue destes animais por meio da Reação de Cadeia de Polimerase (PCR) e correlacioná-la com o perfil sorológico. Foram coletadas amostras de soro, sangue, tecido ovariano, líquido folicular e complexo cumulus-ovócitos de 147 animais que não tinham histórico de vacinação com o BoHV-1. Amostras tóxicas ou insuficientes foram descartadas. Os testes sorológicos foram realizados permitindo a detecção de títulos virais de anticorpos de 2 a 1024. Os testes moleculares foram precedidos da extração do DNA das amostras, de acordo com recomendações do fabricante. Sucessivamente, foram realizadas as PCRs utilizando os oligonucleotídeos previamente descritos por Takiuchi et al. (2005). Observou-se 83,6% (117/140) de soropositividade para o BoHV-1 nas amostras sorológicas. As amostras positivas, divididas em grupos, de acordo com o título sorológico, apresentaram-se 10% de Título Baixo (2 ≤ X < 8); 32,9% de Título Médio (8 ≤ X < 64); 40,7% de Título Alto (64 ≤ X ≤ 512). Em relação aos testes moleculares, o DNA viral foi detectado somente nos grupos de amostras soropositivas. Dos animais soropositivos, foi evidenciado o DNA viral em 0,9%(1/115) dos ovócitos, em 4,3%(5/117) do tecido ovariano, 2,8%(3/108) do sangue e em nenhuma amostra de líquido folicular. Comparando os resultados entre os grupos de amostras, as diferenças não se mostraram significativas (P > 0,05). Conclui-se que do rebanho analisado foi detectada alta prevalência de anticorpos contra o BoHV-1 e que os testes moleculares se mostraram eficientes na detecção do DNA nas amostras de genitais de fêmeas bovinas, sugerindo que estas estruturas poderiam ser sítios de tropismo deste vírus.
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Bandyopadhyay, Santanu Kumar. "Bovine herpesvirus 1 specified polypeptides : identification, characterization and inhibitors of biosynthesis." Thesis, University of Cambridge, 1988. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.292954.
Full text
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Brenner, Mariana Pontes Carvalho. "Avaliação dos efeitos da exposição experimental ao herpesvírus bovino tipo 5 em embriões bovinos produzidos in vitro /." Araçatuba : [s.n.], 2012. http://hdl.handle.net/11449/88164.
Full textAbstract:
Orientador: Tereza Cristina Cardoso<br>Banca: Roberto Gameiro de Carvalho<br>Banca: Vera Cláudia Lorenzetti Magalhães Cursi<br>Resumo: A produção in vitro de embriões é uma biotecnologia da reprodução aplicada rotineiramente no melhoramento genético da espécie bovina. No entanto, ainda não está determinado até que ponto sua utilização pode implicar na disseminação de patógenos, como por exemplo, do Herpesvirus bovino tipo 5 (BoHV-5), considerado um α-herpesvirus neuro- virulento, potencialmente patogênico em bovinos. Para avaliar o impacto da exposição de oócitos bovinos ao BoHV-5 este estudo avaliou as taxas de desenvolvimento dos embriões bovinos produzidos in vitro, a atividade mitocondrial, a ação antioxidante e a resposta ao estresse em dois grupos distintos; grupo controle e grupo expostos ao BoHV-5. A qualidade dos embriões bovinos produzidos in vitro, não foi afetada pela exposição ao BoHV- 5, a taxa de produção foi de 54,6 % no controle e 49,7% no exposto. O DNA viral correspondente ao gene US9 foi identificado em embriões bovinos no D7 após a fecundação in vitro e confirmado por reação imunofluorescência indireta. Os resultados revelaram diferenças (p<0,05) entre embrião do grupo de expostos e controle pelo MitoTracker Green FM, e pelo Jc-1. Não existiu diferença significativa nos índices de Hoechst 33342. Os embriões expostos produziram proteína antioxidante tipo 1 (AOP-1). Nenhum dos grupos produziram a proteína do choque térmico heat shock protein (Hsp 70.1). Ambos os grupos produziram a superóxido desmutase (SOD1), revelando atividade mitocondrial intensa, sem interferir na quantidade e qualidade dos embriões produzidos. Esses achados podem ajudar a entender a habilidade do α- herpesvirus em prevenir a apoptose<br>Abstract: The in vitro production of embryos is a biotechnology of reproduction routinely applied in the improvement of the bovine specie. However, it is not yet determined the extent to which its use may result in the spread of pathogens, such as the bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5), considered an α-herpesvirus neuro-virulent, potentially pathogenic in cattle. To assess the impact of exposure of bovine oocytes to BoHV-5 we studied the developmental rates of bovine in vitro produced, mitochondrial activity, antioxidant effects, stress response into two distinct groups, control group and group exposed to BoHV-5. The quality of bovine embryos produced in vitro was not affected by exposure to BoHV-5, the production rate was 54.6% in the control and 49.7% in the exposure. The viral DNA corresponding to the US9 gene was identified in the D7 bovine embryos after in vitro fertilization and confirmed by indirect immunofluorescence reaction. The results revealed differences (p <0.05) between embryo exposed group and control by MitoTracker Green FM, and the Jc-1. There was no significant difference in rates of Hoechst 33342. The exposed embryos produced antioxidant protein type 1 (AOP-1). None of them produced heat shock protein (Hsp 70.1). Both groups produced the superoxide dismutase (SOD1), revealing intense mitochondrial activity, without interfering in the quantity and quality of embryos produced. These findings may help understand the ability of α-herpesvirus in preventing apoptosis<br>Mestre
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Li, Yuanhao. "Structural and functional study of bovine herpesvirus 1 glycoprotein B in the interaction with Madin Darby bovine kidney cells." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1996. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk3/ftp04/nq24030.pdf.
Full text
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Mendes, Vívian Rachel de Araújo. "Detecção viral e capacidade de maturação in vitro de ovócitos de vacas naturalmente infectadas pelo Herpesvirus bovino 1." Universidade Federal de Viçosa, 2012. http://locus.ufv.br/handle/123456789/5099.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2012-06-01<br>This study was carried out to verify the presence of DNA of the bovine herpesvirus 1 (BoHV1) in Cumulus Oophorus Complexes (COCs) and in blood, as well as to evaluate the development ability of the oocytes from the naturally infected cows. COCs were obtained from 15 donors through follicular aspiration guided by ultrasound (OPU). The DNA extraction was accomplished in a pool of COCs of all aspirations from a same donor and in the total blood, in order to accomplish the Nested-PCR reactions. The treatments were defined from the title of the antibodies detected by serum-neutralization in microplates, and four groups were established: negative animals (title lower than 2); low title (2 to 8); medium title (16 to 32) and high title (64 to 512). Only the COCs provided with compact layer of cumulus cells, an integral pellucid zone and homogenous cytoplasm were selected for in vitro culture. After 24 hours under culture, the oocytes were fixed and stained for evaluation of the nuclear maturation. The stage of the meiotic cellular cycle was evaluated through an optical microscope with increase of 1000X in immersion. The oocyte reaching the metaphasis stage II was considered as ripe. The DNA of BoHV1 was identified in the pool of COCs from three serum-positive donors, as being not detected in any serumpositive sample. However, the viral DNA was not found in sanguine samples, even in those from the serum-positive animals. No differences (P>0.05) occurred in the nucleus maturation rate of the negative control group (76.7%), when compared with that one observed in animals with low titration of antibodies against BoHV1 (62.2%). However, lower nucleus maturation rate (P
<0.05) were verified in oocytes from the cows with average (48.4%) and high titration (50.9%), when compared with negative control. The obtained results allow to conclude that cows naturally infected by BoHV1 can present either viral DNA in ovarian structures and endangerment of the maturation rate of the oocyte nucleus.<br>O objetivo do presente estudo foi verificar a presença do DNA do herpesvirus bovino 1 (BoHV1) em Complexos Cumulus Oóforus (COCs) e no sangue, além de avaliar a capacidade de desenvolvimento de ovócitos oriundos de vacas infectadas naturalmente. Os COCs foram obtidos de 15 doadoras por meio de aspiração folicular guiada por ultrassom (OPU). A extração do DNA foi realizada em um pool de COCs de todas as aspirações de uma mesma doadora e no sangue total, para a realização das reações de Nested-PCR. Os tratamentos foram definidos a partir do título de anticorpos detectados pela soroneutralização em microplacas, sendo estabelecidos quatro grupos: animais negativos (título menor do que 2); título baixo (2 a 8); título médio (16 a 32) e título alto (64 a 512). Foram selecionados para o cultivo in vitro somente os COCs com camada compacta de células do cumulus, zona pelúcida íntegra e citoplasma homogêneo. Após 24 horas de cultivo, os
ovócitos foram fixados e corados para avaliação da maturação nuclear. O estádio do ciclo celular meiótico foi avaliado, por meio de um microscópio óptico com aumento de 1000X em imersão. Foi considerado maduro o ovócito que atingiu o estádio de metáfase II. O DNA do BoHV1 foi identificado no pool de COCs de três doadoras soropositivas, não sendo detectado em nenhuma das amostras soronegativas. Entretanto, não foi encontrado DNA viral em amostras sanguíneas, mesmo nas oriundas de animais soropositivos. Não houve diferença (P>0,05) na taxa de maturação nuclear ovocitária do grupo controle negativo (76,7%), quando comparada com a observada em animais com baixa titulação de anticorpos contra o BoHV1 (62,2%). Entretanto, verificou-se menor taxa de maturação nuclear (P<0,05) em ovócitos oriundos de vacas com titulação média (48,4%) e alta (50,9%), quando comparadas com o controle negativo. Os resultados obtidos permitem concluir que vacas infectadas naturalmente pelo BoHV1 podem apresentar o DNA viral em estruturas ovarianas e ainda ter comprometimento na taxa de maturação nuclear ovocitária.
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Brenner, Mariana Pontes Carvalho [UNESP]. "Avaliação dos efeitos da exposição experimental ao herpesvírus bovino tipo 5 em embriões bovinos produzidos in vitro." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2012. http://hdl.handle.net/11449/88164.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2012-07-06Bitstream added on 2014-06-13T19:49:57Z : No. of bitstreams: 1
brenner_mpc_me_araca.pdf: 350193 bytes, checksum: 3a33f5c5edd18147c32800c3b76b95e8 (MD5)<br>Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)<br>A produção in vitro de embriões é uma biotecnologia da reprodução aplicada rotineiramente no melhoramento genético da espécie bovina. No entanto, ainda não está determinado até que ponto sua utilização pode implicar na disseminação de patógenos, como por exemplo, do Herpesvirus bovino tipo 5 (BoHV-5), considerado um α-herpesvirus neuro- virulento, potencialmente patogênico em bovinos. Para avaliar o impacto da exposição de oócitos bovinos ao BoHV-5 este estudo avaliou as taxas de desenvolvimento dos embriões bovinos produzidos in vitro, a atividade mitocondrial, a ação antioxidante e a resposta ao estresse em dois grupos distintos; grupo controle e grupo expostos ao BoHV-5. A qualidade dos embriões bovinos produzidos in vitro, não foi afetada pela exposição ao BoHV- 5, a taxa de produção foi de 54,6 % no controle e 49,7% no exposto. O DNA viral correspondente ao gene US9 foi identificado em embriões bovinos no D7 após a fecundação in vitro e confirmado por reação imunofluorescência indireta. Os resultados revelaram diferenças (p<0,05) entre embrião do grupo de expostos e controle pelo MitoTracker Green FM, e pelo Jc-1. Não existiu diferença significativa nos índices de Hoechst 33342. Os embriões expostos produziram proteína antioxidante tipo 1 (AOP-1). Nenhum dos grupos produziram a proteína do choque térmico heat shock protein (Hsp 70.1). Ambos os grupos produziram a superóxido desmutase (SOD1), revelando atividade mitocondrial intensa, sem interferir na quantidade e qualidade dos embriões produzidos. Esses achados podem ajudar a entender a habilidade do α- herpesvirus em prevenir a apoptose<br>The in vitro production of embryos is a biotechnology of reproduction routinely applied in the improvement of the bovine specie. However, it is not yet determined the extent to which its use may result in the spread of pathogens, such as the bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5), considered an α-herpesvirus neuro-virulent, potentially pathogenic in cattle. To assess the impact of exposure of bovine oocytes to BoHV-5 we studied the developmental rates of bovine in vitro produced, mitochondrial activity, antioxidant effects, stress response into two distinct groups, control group and group exposed to BoHV-5. The quality of bovine embryos produced in vitro was not affected by exposure to BoHV-5, the production rate was 54.6% in the control and 49.7% in the exposure. The viral DNA corresponding to the US9 gene was identified in the D7 bovine embryos after in vitro fertilization and confirmed by indirect immunofluorescence reaction. The results revealed differences (p <0.05) between embryo exposed group and control by MitoTracker Green FM, and the Jc-1. There was no significant difference in rates of Hoechst 33342. The exposed embryos produced antioxidant protein type 1 (AOP-1). None of them produced heat shock protein (Hsp 70.1). Both groups produced the superoxide dismutase (SOD1), revealing intense mitochondrial activity, without interfering in the quantity and quality of embryos produced. These findings may help understand the ability of α-herpesvirus in preventing apoptosis
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Antello, Talita Fontes. "Expressão de fatores ligados à apoptose : herpesvirus bovino tipo 5 /." São José do Rio Preto, 2014. http://hdl.handle.net/11449/111014.
Full textAbstract:
Orientador: Tereza Cristina Cardoso<br>Banca: Roberto Gameiro de Carvalho<br>Banca: Camila da Silva Frade<br>Resumo: Pertencente a família Herpesviridae, subfamília Alphaherpesvirinae, o Herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5), é o agente causal da meningoencefalite bovina não supurativa, que atinge majoritariamente bovinos jovens. No Brasil, os casos de encefalite por BoHV-5 são a segunda maior causa de óbitos no rebanho. A infecção viral geralmente resulta em alteração no processo de morte celular programada, pela via mitocondrial, estimulando ou inibindo genes relacionados à apoptose, favorecendo a replicação e disseminação viral. O presente estudo teve como objetivo a análise da expressão de genes relacionados à apoptose (Apaf-1, α, FasL e citocromo c) em células MDBK infectadas ou não com o BoHV-5. Foi possível observar um aumento (p<0,05) na expressão dos genes estudados para o grupo infectado comparado ao controle, em diferentes momentos pós-infecção experimental. No caso da família Herpesviridae, a modulação da apoptose parecer ser uma etapa chave para sua patogênese, apesar da associação das atividades anti e pró-apoptóticas com o BoHV-5 ser completamente desconhecida. Este estudo demonstra a capacidade do BoHV-5 em modular, seja ativando ou inibindo, a via extrínseca da apoptose<br>Abstract: Belonging to the family Herpesviridae, subfamily Alphaherpesvirinae, bovine Herpesvirus type 5 ( BoHV-5) is the causative agent of bovine non-suppurative meningoencephalitis, which predominantly affects young cattle. In Brazil, cases of encephalitis caused by BoHV-5 are the second leading cause of deaths in the herd. Viral infection usually results in a change in the programmed cell death via mitochondrial, stimulating or inhibiting apoptosis related genes, promoting viral replication and dissemination process. The present study aimed to analyze the expression of apoptosis related genes (Apaf-1, TNFα-R1, FasL and cytochrome c) in infected or uninfected MDBK cells with BoHV-5. We observed an increase ( p < 0.05 ) in expression of the genes studied for the infected group compared with controls, in different times post-infection experimental. In the case of the Herpesviridae family, modulation of apoptosis appears to be a key step in its pathogenesis, despite the association of anti and pro-apoptotic activities with BoHV-5 is completely unknown. This study demonstrates the ability of BoHV-5 in modulating either activating or inhibiting the extrinsic pathway of apoptosis<br>Mestre
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Antello, Talita Fontes [UNESP]. "Expressão de fatores ligados à apoptose : herpesvirus bovino tipo 5." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2014. http://hdl.handle.net/11449/111014.
Full textAbstract:
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000799460.pdf: 800786 bytes, checksum: cd0f247b24020afc29b5a1ee55611100 (MD5)<br>Pertencente a família Herpesviridae, subfamília Alphaherpesvirinae, o Herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5), é o agente causal da meningoencefalite bovina não supurativa, que atinge majoritariamente bovinos jovens. No Brasil, os casos de encefalite por BoHV-5 são a segunda maior causa de óbitos no rebanho. A infecção viral geralmente resulta em alteração no processo de morte celular programada, pela via mitocondrial, estimulando ou inibindo genes relacionados à apoptose, favorecendo a replicação e disseminação viral. O presente estudo teve como objetivo a análise da expressão de genes relacionados à apoptose (Apaf-1, α, FasL e citocromo c) em células MDBK infectadas ou não com o BoHV-5. Foi possível observar um aumento (p<0,05) na expressão dos genes estudados para o grupo infectado comparado ao controle, em diferentes momentos pós-infecção experimental. No caso da família Herpesviridae, a modulação da apoptose parecer ser uma etapa chave para sua patogênese, apesar da associação das atividades anti e pró-apoptóticas com o BoHV-5 ser completamente desconhecida. Este estudo demonstra a capacidade do BoHV-5 em modular, seja ativando ou inibindo, a via extrínseca da apoptose<br>Belonging to the family Herpesviridae, subfamily Alphaherpesvirinae, bovine Herpesvirus type 5 ( BoHV-5) is the causative agent of bovine non-suppurative meningoencephalitis, which predominantly affects young cattle. In Brazil, cases of encephalitis caused by BoHV-5 are the second leading cause of deaths in the herd. Viral infection usually results in a change in the programmed cell death via mitochondrial, stimulating or inhibiting apoptosis related genes, promoting viral replication and dissemination process. The present study aimed to analyze the expression of apoptosis related genes (Apaf-1, TNFα-R1, FasL and cytochrome c) in infected or uninfected MDBK cells with BoHV-5. We observed an increase ( p < 0.05 ) in expression of the genes studied for the infected group compared with controls, in different times post-infection experimental. In the case of the Herpesviridae family, modulation of apoptosis appears to be a key step in its pathogenesis, despite the association of anti and pro-apoptotic activities with BoHV-5 is completely unknown. This study demonstrates the ability of BoHV-5 in modulating either activating or inhibiting the extrinsic pathway of apoptosis
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Benavides, Benavides Bibiana. "Risk analysis of Bovine viral diarrhea and Bovine herpesvirus-1 introduction based on biosecurity measures implemented in dairy cattle farms." Doctoral thesis, TDX (Tesis Doctorals en Xarxa), 2020. http://hdl.handle.net/10803/670393.
Full textAbstract:
L'objectiu general d'aquesta tesi doctoral va ser desenvolupar una eina d'avaluació de riscos per a donar suport a la presa de decisions de priorització de mesures de bioseguretat en granges lleteres.
En el primer estudi, es va desenvolupar un model d'anàlisi de risc estocàstic per quantificar la probabilitat d'introducció de Virus de la Diarrea Vírica Bovina (BVDV) i de l'Herpesvirus Boví tipus 1 (BoHV-1) a través de el moviment d'animals, és a dir , compra o introducció d'animals, recria criada fora de la granja i moviments a fires de bestiar. Els paràmetres es van obtenir a partir de literatura científica, així com de la base de dades de moviments animals de l'administració, enquestes de bioseguretat i opinió dels veterinaris de camp. En l'anàlisi es van incloure 46 granges de Galícia i Catalunya que van moure animals durant el 2017. La probabilitat anual d'introducció de BVDV i BoHV-1 va ser molt heterogènia, sent propera a 0 en algunes granges i en altres proper a 1. La mitjana d' la probabilitat anual d'introducció de BVDV va ser 12% i per BoHV-1 9%, amb un rang interquartílic entre 1.2% i 28% per BVDV i 3% a 23% per BoHV-1. Les probabilitats més altes estaven associades a el moviment local d'animals (i.e., dins de la mateixa comunitat autònoma) i a el fet de compartir el vehicle de transport entre granges. A l'avaluar l'efecte de les mesures de bioseguretat en una granja, la implementació d'una correcta quarantena i el no compartir el transport amb altres granges disminueixo considerablement aquesta probabilitat.
En el segon estudi, es va quantificar la probabilitat d'introducció de BVDV i BoHV-1 a través de contactes indirectes per la qual cosa també es va desenvolupar un model d'anàlisi de risc estocàstic. Es van considerar els vehicles que transporten vedells, animals a l'escorxador, cadàvers i barreja d'alimentació, així com els visitants, entre els quals es van incloure veterinaris, podòlegs, treballadors de les granges i veïns. Per a aquest estudi es van avaluar les 127 granges que van participar en el projecte i la informació per a l'estimació dels paràmetres de el model, a més de les fonts citades anteriorment, es va obtenir d'entrevistes a podòlegs, transportadors d'animals i una empresa de recollida de cadàvers. Els resultats van mostrar que la mitjana de la probabilitat anual d'introducció per BVDV va ser de 2.1% i per BoHV-1 3.9%, en un rang de 0.5% a 14.6% i de 1.0% a 24.9% per BVDV i BoHV-1, respectivament . L'entrada de el vehicle de transport de vedells i les visites dels veterinaris van ser les vies d'entrada amb major risc. Les mesures de bioseguretat amb un major impacte en la disminució de la probabilitat d'introducció dels dos virus van ser l'ús de botes i roba propis de la granja i evitar que el conductor que transporta animals entri en contacte amb els animals de la granja.
Els dos models van permetre establir les vies d'entrada més perilloses per a cada granja estudiada i d'aquesta forma són una eina útil per prioritzar les mesures de bioseguretat que s'han d'implementar o millorar per reduir la probabilitat de l'ingrés de BVDV i BoHV-1 en una granja.<br>El objetivo general de esta tesis doctoral fue desarrollar una herramienta de evaluación de riesgos para apoyar la toma de decisiones de priorización de medidas de bioseguridad en granjas lecheras.
En el primer estudio, se desarrolló un modelo de análisis de riesgo estocástico para cuantificar la probabilidad de introducción del Virus de la Diarrea Vírica Bovina (BVDV) y del Herpesvirus Bovino tipo 1 (BoHV-1) a través del movimiento de animales, es decir, compra o introducción de animales, recría criada fuera de la granja y movimientos a ferias de ganado. Los parámetros se obtuvieron a partir de literatura científica, así como de la base de datos de movimientos animales de la administración, encuestas de bioseguridad y opinión de los veterinarios de campo. En el análisis se incluyeron 46 granjas de Galicia y Catalunya que movieron animales durante el 2017. La probabilidad anual de introducción de BVDV y BoHV-1 fue muy heterogénea, siendo cercana a 0 en algunas granjas y en otras cercano a 1. La mediana de la probabilidad anual de introducción de BVDV fue 12% y para BoHV-1 9%, con un rango intercuartilico entre 1.2% y 28% para BVDV y 3% a 23% para BoHV-1. Las probabilidades más altas estaban asociadas al movimiento local de animales (i.e., dentro de la misma comunidad autónoma) y al hecho de compartir el vehículo de transporte entre granjas. Al evaluar el efecto de las medidas de bioseguridad en una granja, la implementación de una correcta cuarentena y el no compartir el transporte con otras granjas disminuyo considerablemente esta probabilidad.
En el segundo estudio, se cuantifico la probabilidad de introducción de BVDV y BoHV-1 a través de contactos indirectos para lo cual también se desarrolló un modelo de análisis de riesgo estocástico. Se consideraron los vehículos que transportan terneros, animales a matadero, cadáveres y mezcla de alimentación, así como los visitantes, entre los que se incluyeron veterinarios, podólogos, trabajadores de las granjas y vecinos. Para este estudio se evaluaron las 127 granjas que participaron en el proyecto y la información para la estimación de los parámetros del modelo, además de las fuentes citadas anteriormente, se obtuvo de entrevistas a podólogos, transportadores de animales y una empresa de recolección de cadáveres. Los resultados mostraron que la mediana de la probabilidad anual de introducción para BVDV fue de 2.1% y para BoHV-1 3.9%, en un rango de 0.5% a 14.6% y de 1.0% a 24.9% para BVDV y BoHV-1, respectivamente. La entrada del vehículo de transporte de terneros y las visitas de los veterinarios fueron las vías de entrada con mayor riesgo. Las medidas de bioseguridad con un mayor impacto en la disminución de la probabilidad de introducción de los dos virus fueron el uso de botas y ropa propios de la granja y evitar que el conductor que transporta animales entre en contacto con los animales de la granja.
Los dos modelos permitieron establecer las vías de entrada más riesgosas para cada granja estudiada y de esta forma son una herramienta útil para priorizar las medidas de bioseguridad que deben implementarse o mejorarse para reducir la probabilidad del ingreso de BVDV y BoHV-1en una granja.<br>The general aim of this PhD thesis was to develop a risk assessment tool to support biosecurity measures prioritization decision making in dairy farms.
In the first study, a stochastic risk analysis model was developed to quantify Bovine viral diarrhea virus (BVDV) and Bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) introduction through animal movements. Purchasing cattle, rearing replacement heifers offsite and showing cattle at competitions, were considered in the model. Besides a review of the scientific literature, parameters were estimated using animal movement database, biosecurity surveys and the opinion of field veterinarians. In this model, 46 farms from Galicia and Catalonia that moved animals during 2017 were included. Results showed that the annual probability of BVDV and BoHV-1 introduction was very heterogeneous, being close to 0 in some farms and in others close to 1. The median of the probability of introduction of BVDV was 12% and for BoHV-1 9%, with an inter-quartile range from 1.2% to 28% for BVDV and 3% to 23% for BoHV-1. The highest probabilities were associated with local movements of cattle (i.e., inside the same autonomous community) and the fact of sharing the transport vehicle between farms. By evaluating the effect of biosecurity measures on a selected farm, implementation of a correct quarantine or not sharing transport with other farms greatly decreased this probability.
In the second study, the probability of BVDV and BoHV-1 introduction through indirect contacts was quantified also with a stochastic risk analysis model. Vehicles transporting calves, cattle to slaughterhouse, dead animals, and food mix, as well as visits by veterinarians and hoof trimmers, farm workers and contacts with neighbors were considered in the model. For this study were included the 127 farms that participated in the project. Data to estimate model parameters was obtained from the sources indicated before as well as from interviews with hoof trimmers, animal transporters and a rendering company. Results evidenced that the median annual probability of introduction for BVDV was 2.1% and for BoHV-1 3.9%, in a range of 0.5% to 14.6% and 1.0% to 24.9% for BVDV and BoHV-1, respectively. The calf transport vehicle and veterinarians’ visits were the routes with the highest risk. The biosecurity measures with the greatest impact in reducing the probability of introduction of both viruses were the use of boots and clothing belonging to the farm and avoiding the driver that transports cattle coming into contact with the animals on the farm.
The two models allowed establishing the riskiest pathways for each studied farm and thus are a useful tool to prioritize biosecurity measures that must be implemented or improved to reduce the probability of BVDV and BoHV-1 introduction into a farm.
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Zhou, Jianwei. "Detection of bovine herpesvirus 1 (BHV 1) in bovine semen by combined polymerase chain reaction and in vitro protein synthesis." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1998. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk2/ftp01/MQ35465.pdf.
Full text
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Cagnini, Didier Quevedo [UNESP]. "Avaliação histopatológica, imunoistoquímica e detecção molecular do DNA viral no sistema nervoso central de bovinos inoculados experimentalmente com herpesvirus bovino 5." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2011. http://hdl.handle.net/11449/89247.
Full textAbstract:
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0
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cagnini_dq_me_botfmvz.pdf: 1790427 bytes, checksum: 7e7453715dc898af589170842b6953fe (MD5)<br>Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)<br>A meningoencefalite herpética bovina é uma infecção viral do SNC causada pelo BoHV-5, um vírus DNA de fita dupla, envelopado, pertencente á família Herpesviridae, subfamília Alphaherpesvirinae. A meningoencefalite acomete principalmente animais jovens, ocorrendo principalmente em forma de surtos de casos isolados ou de surtos com morbidade baixa e letalidade é alta. A doença não possui caráter sazonal e nem predileção por raça ou sexo. Surtos de meningoencefalite por BHV-5 têm sido relatados após algumas práticas de manejo, todas associadas a situações de estresse. O diagnóstico final baseiase nos achados clínicos, epidemiológicos, macro e microscópicos e o isolamento viral associado a técnicas como imunoperoxidase, restrição da endonuclease e PCR. Entrentanto, o isolamento viral nem sempre é possível devido a distância das fazendas e ao tempo entre a morte dos animais e a coleta das amostras. Nestes casos a imunoistoquímica e a PCR são ferramentas diagnósticas úteis. Além disso, estas técnicas permitem o diagnóstico a partir de tecido fixado em formol e incluído em parafina. O objetivo deste trabalho foi descrever as alterações histopatológicas nas diferentes regiões do sistema nervoso central de bovinos infectados experimentalmente pelo BoHV-5 e relacionar a intensidade e o tipo das lesões encontradas com os resultados da PCR e da imunoistoquímica (IHQ) para detecção do BoHV-5. Para isso, blocos de parafina do sistema nervoso central de seis bovinos provenientes de animais inoculados experimentalmente pelo BoHV-5 foram avaliados microscopicamente e pelas técnicas da IHQ e da PCR. Todos os animais apresentaram alterações histopatológicas de meningoencefalite não supurativa, com intensidade variável entre as áreas e os animais, sendo que as regiões do córtex cerebral apresentaram alterações microscópicas mais acentuadas...<br>Bovine meningoencephalitis is a viral infection caused by BHV-5, a doublestranded DNA and enveloped virus, that belongs to the Herpesviridae family, subfamily Alphaherpesvirinae. Meningoencephalitis mainly occurs in young animals, causing individual deaths or outbreaks with low morbidity and high mortality. The disease has no seasonal character or predilection for breed or gender. Outbreaks of meningoencephalitis have been reported associated with stressful factors like weaning, vaccinations, transport, changes in feeding. The final diagnosis is based on clinical, epidemiological, gross and microscopic findings and virus isolation associated with others techniques like immunoperoxidase, endonucleases restriction and PCR. Wherever, virus isolation is no always possible due the distance of farms and time from animal death to the samples collection. Immunohistochemistry and PCR are better diagnostic tools in this cases. Besides this two techniques could be used in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues. The aim of this study was to describe the histological changes in the CNS of BHV-5 experimentally infected calves and associate it with the PCR and IHC results. For this purpose, formalin-fixed, paraffin-embedded CNS tissue from previously BHV-5 inoculated calves (Cunha, 2010) were microscopically evaluated and were tested by immunohistochemistry (IHC) and polymerase chain reaction (PCR). All animals presented non-suppurative meningoencephalitis that had variable distribution among the cases and among the various sections of brain regions in each case. The cerebral cortex had more accentuated lesions. From 108 evaluated areas, 32.41% and 35.19% were positives by IHC and PCR, respectively. The IHQ and PCR positive areas had more accentuated microscopic lesions. These findings extend the knowledge about the BHV-5 distribution in the CNS of calves and show that IHC and PCR could be useful
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Cagnini, Didier Quevedo. "Avaliação histopatológica, imunoistoquímica e detecção molecular do DNA viral no sistema nervoso central de bovinos inoculados experimentalmente com herpesvirus bovino 5 /." Botucatu : [s.n.], 2011. http://hdl.handle.net/11449/89247.
Full textAbstract:
Resumo: A meningoencefalite herpética bovina é uma infecção viral do SNC causada pelo BoHV-5, um vírus DNA de fita dupla, envelopado, pertencente á família Herpesviridae, subfamília Alphaherpesvirinae. A meningoencefalite acomete principalmente animais jovens, ocorrendo principalmente em forma de surtos de casos isolados ou de surtos com morbidade baixa e letalidade é alta. A doença não possui caráter sazonal e nem predileção por raça ou sexo. Surtos de meningoencefalite por BHV-5 têm sido relatados após algumas práticas de manejo, todas associadas a situações de estresse. O diagnóstico final baseiase nos achados clínicos, epidemiológicos, macro e microscópicos e o isolamento viral associado a técnicas como imunoperoxidase, restrição da endonuclease e PCR. Entrentanto, o isolamento viral nem sempre é possível devido a distância das fazendas e ao tempo entre a morte dos animais e a coleta das amostras. Nestes casos a imunoistoquímica e a PCR são ferramentas diagnósticas úteis. Além disso, estas técnicas permitem o diagnóstico a partir de tecido fixado em formol e incluído em parafina. O objetivo deste trabalho foi descrever as alterações histopatológicas nas diferentes regiões do sistema nervoso central de bovinos infectados experimentalmente pelo BoHV-5 e relacionar a intensidade e o tipo das lesões encontradas com os resultados da PCR e da imunoistoquímica (IHQ) para detecção do BoHV-5. Para isso, blocos de parafina do sistema nervoso central de seis bovinos provenientes de animais inoculados experimentalmente pelo BoHV-5 foram avaliados microscopicamente e pelas técnicas da IHQ e da PCR. Todos os animais apresentaram alterações histopatológicas de meningoencefalite não supurativa, com intensidade variável entre as áreas e os animais, sendo que as regiões do córtex cerebral apresentaram alterações microscópicas mais acentuadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)<br>Abstract: Bovine meningoencephalitis is a viral infection caused by BHV-5, a doublestranded DNA and enveloped virus, that belongs to the Herpesviridae family, subfamily Alphaherpesvirinae. Meningoencephalitis mainly occurs in young animals, causing individual deaths or outbreaks with low morbidity and high mortality. The disease has no seasonal character or predilection for breed or gender. Outbreaks of meningoencephalitis have been reported associated with stressful factors like weaning, vaccinations, transport, changes in feeding. The final diagnosis is based on clinical, epidemiological, gross and microscopic findings and virus isolation associated with others techniques like immunoperoxidase, endonucleases restriction and PCR. Wherever, virus isolation is no always possible due the distance of farms and time from animal death to the samples collection. Immunohistochemistry and PCR are better diagnostic tools in this cases. Besides this two techniques could be used in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues. The aim of this study was to describe the histological changes in the CNS of BHV-5 experimentally infected calves and associate it with the PCR and IHC results. For this purpose, formalin-fixed, paraffin-embedded CNS tissue from previously BHV-5 inoculated calves (Cunha, 2010) were microscopically evaluated and were tested by immunohistochemistry (IHC) and polymerase chain reaction (PCR). All animals presented non-suppurative meningoencephalitis that had variable distribution among the cases and among the various sections of brain regions in each case. The cerebral cortex had more accentuated lesions. From 108 evaluated areas, 32.41% and 35.19% were positives by IHC and PCR, respectively. The IHQ and PCR positive areas had more accentuated microscopic lesions. These findings extend the knowledge about the BHV-5 distribution in the CNS of calves and show that IHC and PCR could be useful<br>Orientador: Alexandre Secorun Borges<br>Coorientador: Renée Laufer Amorim<br>Banca: Júlio Lopes Sequeira<br>Banca: Paulo Henrique Jorge da Cunha<br>Mestre
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Khattar, Sunil Kumar. "Identification and characterization of bovine herpesvirus 1 minor glycoproteins L, H and M." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1997. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk3/ftp04/nq23946.pdf.
Full text
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Okamura, Lucas Hidenori. "Interação célula hospedeira e a infecção pelo herpesvirus bovino 5 (BHV5) /." São José do Rio Preto, 2017. http://hdl.handle.net/11449/149767.
Full textAbstract:
Orientador: Tereza Cristina Cardoso da Silva<br>Banca: Roberto Gameiro de Carvalho<br>Banca: Luiz Eduardo Corrêa Fonseca<br>Banca: Andrea Fontes Garcia<br>Banca: Lídia Luciana Ravagnani<br>Resumo: O Brasil possui um dos maiores rebanhos de bovinos mundialmente. Estes animais estão expostos constantemente a agentes virais causadores de patologias. Dentre estes, o herpesvírus bovino 1 (BHV1) e 5 (BHV5) apresentam grande importância epidemiológica. O BHV1 causa infecções respiratórias e genitais, enquanto que o BHV5 meningoencefalite. As proteínas de membrana presentes nos herpesvírus os tornam capazes de infectar as células do hospedeiro. Com afinidade a distintas células, desenvolvem sua capacidade de infecção, apresentam mecanismos de sobrevivência à morte celular programada e a resposta imunológica. As interações vírus-hospedeiro são fundamentais no entendimento de aspectos relacionados a transmissão viral, capacidade de infecção e progressão da doença. Para este fim, se faz necessário compreender elementos fundamentais, como a modulação da função mitocondrial e a replicação do BHV, bem como os níveis de apoptose nas células do hospedeiro. De igual importância, é indispensável entender o comportamento de genes apoptóticos que estão relacionados à infecção por BHV5 e seus envolvimentos na viabilidade celular. Estes achados contribuem para o entendimento da imunopatogenia do BHV, auxiliam a evitar a disseminação destes agentes e são de grande valia para o desenvolvimento de vacinas<br>Abstract: Brazil has one of the largest cattle hers worldwide. These animals are constantly exposed to pathological viral agents. Bovine herpesvirus 1 (BHV1) and BHV5 have great epidemiological importance. BHV1 is causative agent of respiratory and genital infections, while BHV5 causes meningoencephalitis. Herpesvirus membrane proteins allow them to infect the host cells. They present affinity to different types of cells, develop mechanisms to survive programmed cell death, and immune response. Virus-host interactions are essential to understand aspects related to viral transmission, capacity of infection and disease progression. To this end, it is necessary to understand the fundamental elements related to the modulation of mitochondrial function and replication of BHV, as well as apoptosis levels in the host cells. It is crucial to understand the behavior of apoptotic genes related to BHV5 infection and cell viability. These findings contribute to understanding the BHV immunopathogenesis, help to prevent the spread of these agents, and are of great value to the development of vaccines<br>Doutor
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Okamura, Lucas Hidenori [UNESP]. "Interação célula hospedeira e a infecção pelo herpesvirus bovino 5 (BHV5)." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2017. http://hdl.handle.net/11449/149767.
Full textAbstract:
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Tese - Okamura LH.pdf: 16867432 bytes, checksum: 3ff6041b8c167ca16d68fd929bd4a69e (MD5)<br>Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-03-17T17:28:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1
okamura_lh_dr_sjrp.pdf: 16867432 bytes, checksum: 3ff6041b8c167ca16d68fd929bd4a69e (MD5)<br>Made available in DSpace on 2017-03-17T17:28:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2017-02-24<br>Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)<br>O Brasil possui um dos maiores rebanhos de bovinos mundialmente. Estes animais estão expostos constantemente a agentes virais causadores de patologias. Dentre estes, o herpesvírus bovino 1 (BHV1) e 5 (BHV5) apresentam grande importância epidemiológica. O BHV1 causa infecções respiratórias e genitais, enquanto que o BHV5 meningoencefalite. As proteínas de membrana presentes nos herpesvírus os tornam capazes de infectar as células do hospedeiro. Com afinidade a distintas células, desenvolvem sua capacidade de infecção, apresentam mecanismos de sobrevivência à morte celular programada e a resposta imunológica. As interações vírus-hospedeiro são fundamentais no entendimento de aspectos relacionados a transmissão viral, capacidade de infecção e progressão da doença. Para este fim, se faz necessário compreender elementos fundamentais, como a modulação da função mitocondrial e a replicação do BHV, bem como os níveis de apoptose nas células do hospedeiro. De igual importância, é indispensável entender o comportamento de genes apoptóticos que estão relacionados à infecção por BHV5 e seus envolvimentos na viabilidade celular. Estes achados contribuem para o entendimento da imunopatogenia do BHV, auxiliam a evitar a disseminação destes agentes e são de grande valia para o desenvolvimento de vacinas.<br>Brazil has one of the largest cattle hers worldwide. These animals are constantly exposed to pathological viral agents. Bovine herpesvirus 1 (BHV1) and BHV5 have great epidemiological importance. BHV1 is causative agent of respiratory and genital infections, while BHV5 causes meningoencephalitis. Herpesvirus membrane proteins allow them to infect the host cells. They present affinity to different types of cells, develop mechanisms to survive programmed cell death, and immune response. Virus-host interactions are essential to understand aspects related to viral transmission, capacity of infection and disease progression. To this end, it is necessary to understand the fundamental elements related to the modulation of mitochondrial function and replication of BHV, as well as apoptosis levels in the host cells. It is crucial to understand the behavior of apoptotic genes related to BHV5 infection and cell viability. These findings contribute to understanding the BHV immunopathogenesis, help to prevent the spread of these agents, and are of great value to the development of vaccines.
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[Verfasser], Luu Quang Minh. "Studies on the bovine herpesvirus 1 US3 protein kinase (BHV-1pUS3) / Quang Minh Luu." Greifswald : Universitätsbibliothek Greifswald, 2011. http://d-nb.info/1012609170/34.
Full text
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Henzel, Andréia. "Experimental pathogenesis of acute and latent genital infection by bovine herpesvirus type 1.2 in heifers." Universidade Federal de Santa Maria, 2012. http://repositorio.ufsm.br/handle/1/4062.
Full textAbstract:
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior<br>The feline calicivirus (FCV) and the felid herpesvirus type 1 (FeHV-1) are the main agents of the
respiratory tract diseases of felines. Both viruses are distributed worldwide, however its
distribution and prevalence in Brazil are not well known. In the present thesis we describe the
isolation and one serosurvey of FCV and FeHV-1 in some counties of the Rio Grande do Sul
State, Brazil; and the molecular characterization of the capsid protein gene of FCV isolates is also
described. In Chapter 1, we describe the epidemiologic survey of FCV and FeHV-1 through
investigation of the conjunctival, nasal, oral and oropharyngeal swabs from 302 domestic cats.
The viral isolation was performed in Crandell-Reese feline kidney cells and the isolates were
submitted to PCR and RT-PCR for confirmation of the presence of the FeHV-1 and FCV,
respectively. Fifty five (18.2%) of the 302 cats analyzed were positive for the viral isolation;
when tested by PCR, 29 cats (52.7%) were shedding the FCV, 21 (38.2%) shedding FeHV-1, and
5 cats (9.1%) shedding both viruses. In addition, isolates of FCV and FeHV-1 were standardized
to be used as control in the PCR and virus neutralization (VN) assays (serological technical used
in chapter 3 of the thesis). The SV65/90 (FCV) and the SV534/00 (FeHV-1) isolates were
defined as standard viruses for the assays. In Chapter 2, the molecular characterization of 13
FCV isolates is described; ten isolates came from the survey performed in chapter 1, two were
deposited in the virology laboratory of the UFSM and one was obtained from a cat with
gingivitis-stomatitis syndrome. The ORF2 (open reading frame) region that codifies the major
protein of the viral capsid was sequenced, which includes an immunodominant region of the
virus. The ORF 2 was analyzed at the nucleotide and amino acid levels and these data was used
for phylogenetic studies of the 13 Brazilian isolates of FCV. These isolates were compared to ten
reference strains of FCV and to the San Miguel sea lion virus type 1 (SMSV-1) as an outgroup in
phylogenetic study. The primers were designed using the complete sequence of FCV-F9. The
comparison of the 13 Brazilian isolates with the F9 strain revealed a large molecular diversity
among them, concentrated mainly along the linear epitopes of the region. The Chapter 3
describes a serosurvey against FCV and FeHV-1 in serum samples from domestic feline. From
the 630 samples tested by the VN assay, 53.6% (338/630) were positive to one or both viruses
with a prevalence of 39.2% for neutralizing antibodies against FCV and 30.6% for FeHV-1. The
results from the present study demonstrated that the FCV and FeHV-1 are circulating among the
feline population examined, and also, the presence of carriers of the viruses among these cats.
Besides, the molecular characterization of the FCV evidenced the great genetic variability of the
Brazilian isolates when compared to vaccine and reference strains.<br>O calicivírus felino (feline calicivirus FCV) e o herpesvírus felino tipo 1 (felid herpesvirus type
1 FeHV-1) são os principais agentes das doenças do trato respiratório dos felinos. Ambos os
vírus são mundialmente distribuídos, mas no Brasil sua distribuição e prevalência são ainda
pouco conhecidas. Na presente tese descrevemos o isolamento e sorologia do FCV e do FeHV-1
em alguns municípios do estado do Rio Grande do Sul (RS), Brasil; e a caracterização molecular
do gene da proteína do capsídeo de isolados de FCV. No Capítulo 1, descreve-se o isolamento do
FCV e do FeHV-1 por meio da coleta de suabes (conjuntival, nasal, oral e orofaringeano) de 302
gatos domésticos. O material coletado foi inoculado em cultivo celular de origem felina (CRFK)
e submetidos a PCR e RT-PCR para confirmação em FeHV-1 e FCV, respectivamente. Dos 302
gatos analisados, 55 (18,2%) foram positivos no isolamento; e quando testados por PCR, 29 dos
55 gatos (52,7%) excretavam o FCV, 21 (38,2%) excretavam o FeHV-1 e 5 gatos (9,1%)
apresentavam ambos os vírus. Além dessa descrição, realizou-se a padronização de um isolado de
FCV e de FeHV-1, para serem utilizados como controle nas técnicas de PCR e na vírus
neutralização [VN] (técnica sorológica utilizada no capítulo 3 da tese). O SV65/90 (FCV) e o
SV534/00 (FeHV-1) foram os isolados definidos como vírus-padrão. No Capítulo 2, incluímos o
estudo sobre a análise molecular de 13 isolados de FCV; dez isolados foram obtidos a partir do
material descrito no capítulo 1, dois estavam armazenados no laboratório de virologia da UFSM e
um foi obtido de um gato acometido pela síndrome gengivo-estomatite. A região analisada foi o
gene da proteína do capsídeo, codificado pela ORF2 (open reading frame), na qual se localizam
as regiões imunodominantes do FCV. A ORF2 foi analisada em nível de nucleotídeos e
aminoácidos; e uma análise filogenética dos 13 isolados brasileiros de FCV, incluindo dez cepas
de referência e o vírus dos leões marinhos de San Miguel tipo 1 (San Miguel sea lion virus type 1
SMSV-1) como um outgroup, foi também realizada. Os primers foram desenhados com base na
sequência completa do genoma da cepa de referência a FCV-F9. Quando os 13 isolados
brasileiros de FCV foram comparados a cepa F9, detectou-se grande diversidade molecular nas
regiões variáveis do gene e nos epitopos lineares mapeados. O Capítulo 3 contem um estudo
sorológico contra FCV e FeHV-1 em amostras de soro de felinos domésticos. Das 630 amostras
testadas pela VN, 53,6% (338/630) foram positivas para um ou ambos os vírus; sendo a
prevalência de anticorpos neutralizantes contra o FCV de 39,2% e do FeHV-1 de 30,6%. Os
resultados aqui apresentados demonstram a circulação do FCV e do FeHV-1 na população de
gatos domésticos analisados, assim como, a presença de gatos portadores para ambos os vírus.
Além disso, a caracterização molecular do FCV demonstrou a grande variabilidade genética dos
isolados brasileiros em comparação às cepas vacinais e às de referência.
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Borges, Lucimara Antonio [UNESP]. "Influência da resposta vacinal contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) nos parâmetros reprodutivos de vacas receptoras de embrião." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2011. http://hdl.handle.net/11449/94630.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2011-02-18Bitstream added on 2014-06-13T19:14:32Z : No. of bitstreams: 1
borges_la_me_jabo.pdf: 248872 bytes, checksum: bb6dce02b71fa4434990be14d38d0fe8 (MD5)<br>Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)<br>O herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), agente etiológico da rinotraqueite infecciosa bovina (IBR)/Vulvovaginite Pustular Bovina (IPV), tem grande importância como agente causador de problemas reprodutivos em vacas por determinar baixas taxas de concepção ou parição, acarretando consideráveis perdas econômicas para o produtor. Assim, o presente estudo conduzido em rebanhos de três fazendas (A, B e C) onde se processa a transferência de embriões (TE) no município de Prata no Estado de Minas Gerais teve como objetivo verificar as condições sorológicas de 209 animais antes do processamento biotécnico, determinar a resposta imune de esquema vacinal pré-definido e analisar a relação entre títulos médios geométricos (TMG) de anticorpos antes e depois da vacinação com os parâmetros reprodutivos de fêmeas receptoras de embriões vacinadas contra o BoHV-1. O título dos anticorpos para BoHV-1 foi determinado por meio do teste de virusneutralização (VN), conforme protocolo definido pelo Organização Mundial de Saúde Animal (OIE) e o quadro reprodutivo foi caracterizado por meio do exame de ultrassonografia transretal. Com isso, verificou-se que as prevalências de 39,7% (27/68) na fazenda A, 27,5% (11/40) na fazenda B e 36,6% (37/101) na fazenda C não foram estatisticamente diferentes; essa situação epidemiológica definiu o aumento de títulos de anticorpos para o BoHV-1 em 72,7% (152/209) dos animais pela vacinação com dose única; o maior sucesso de prenhez (75%) na 1ª TE foi observada nos animais que eram positivos e atingiram títulos acima de 256 após a vacinação; mesmo assim, no contexto estatístico, os índices gerais de gestação não tiveram influência significativa em decorrência da vacinação com dose única<br>The bovine herpesvirus type 1 (BoVH-1), which causes infectious bovine rhinotracheitis (IBR) / infectious pustular vulvovaginitis (IPV), has major importance as an agent that causes reproductive problems by determining low conception or calving rates causing significant economical losses for the producer. The present study, was carried out in the cattle of three farms (A, B and C), where the embryos transfer is processed (ET), at Prata municipality in Minas Gerais State, aiming to verify the serological conditions of 209 animals before biotechnical processing, to determine immune response to a pre defined vaccination schedule and to analyze the relationship between geometric mean titers (TMG) of antibodies before and after vaccination with the reproductive parameters in embryo recipient heifers vaccinated against BoHV-1. The antibodies titers of BoHV-1 were determined by the virusneutralization test (VN), according to the protocol established by the World Organization for Animal Health (OIE) and the reproductive performance was characterized by transrectal ultrasonography examination. Thus, it was verified that the prevalence rates of 39.7% (27/68) in farm A, 27.5% (11/40) in farm B and 36.6% (37/101) in farm C had no statistical difference; this epidemiological situation defined the increase of antibody titers for BoHV-1 in 72.7% (152/209) of the animals by vaccination with a single dose; the greater success of pregnancy (75%) in the first ET was observed in animals that were positive and reached titers higher than 256 after vaccination; in the statistical context, the single dose vaccination had no significative influence in the overall rates of pregnancy
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Dummer, Luana Alves. "Clonagem e expressão em Pichia pastoris da forma truncada da glicoproteína D (gD) de Herpesvírus Bovino tipo 5." Universidade Federal de Pelotas, 2008. http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/123456789/1258.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2008-06-12<br>Outbreaks of fatal meningoencephalitis caused by Bovine Herpesvirus type 5 (BoHV-5) cause important economic losses in national trade of bovine beef. Commercial vaccines developed against Bovine Herpesvirus type 1 can protect cattle of neurological disease caused by BoHV-5. These cross-reactions are due to its genetic and antigenic similarities of both BoHV-1 and 5. However, these vaccines can not prevent latent infection of BoHV-5, even viral spread to healthy animals. This way, new vaccines strategies are based on envelope glycoproteins and are focusing safety, economic viability and on prevention of BoHV-5 latency and spread. This glycoprotein acts in initial steps of viral infection and glycoprotein D has drawn the attention in studies carried out with BoHV-1 and other homologous herpesvirus. The gD acts on viral membrane fusion with permissive cells through glycoproteins and host receptors interactions, so it is essential for viral entry. A vaccine that is capable to stimulate specific humoral and cellular immunity against BoHV-5 must be developed. The aim of this work was the production of a recombinant truncated form of gD of BoHV-5 in yeast Pichia pastoris and its antigenicity and immunogenicity evaluation. Data show that yeast P. pastoris can express the truncated form of BoHV-5 gD to the supernatant due to its secretion of ~190mg/L of recombinant protein, simplifying protein purification. The recombinant protein was successfully recognized by antibodies of animals immunized with BoHV-5, suggesting its antigenicity and immunogenicity and that native protein characteristic are conserved. The data presented herein allow the design of future studies aiming at expression optimization and further immunogenicity evaluation, as well as its capacity to neutralize the virus in biological models and on cattle.<br>Surtos de meningoencefalites fatais causadas pelo Herpesvírus Bovino tipo 5 (BoHV-5) ocasionam importantes perdas econômicas no comércio nacional de carne bovina. Vacinas comerciais destinadas ao Herpesvírus Bovino tipo 1 são capazes de impedir o aparecimento de sintomatologia clínica do BoHV-5. Estas reações cruzadas se devem a existência de semelhanças genéticas e antigênicas existentes entre ambos os vírus. No entanto, estas vacinas não impedem o estabelecimento da infecção latente e a disseminação do BoHV-5 para animais não imunizados. Desta forma, estratégias que visem à produção de vacinas seguras, economicamente viáveis e que possam ser capazes de impedir a latência do BoHV-5 e sua disseminação estão focadas para glicoproteínas localizadas no envelope viral e que atuam nas etapas iniciais da infecção. Dentre estas, a glicoproteína D tem se destacado em estudos realizados com BoHV-1 e outros herpesvírus homólogos. A gD atua na fusão do envelope viral com a membrana da célula permissiva no hospedeiro através de interações com receptores celulares e com outras glicoproteínas virais, sendo essencial para a entrada do capsídeo na célula. Assim, uma vacina que seja capaz de estimular respostas humorais e celulares contra esta glicoproteína deve ser desenvolvida. Os objetivos deste trabalho foram à produção da forma truncada da gD do BoHV-5 em levedura Pichia pastoris e a avaliação desta quanto a sua antigenicidade e imunogenicidade. Os resultados demonstram que a Pichia pastoris expressou a forma truncada da gD de BoHV-5 secretando para o meio de cultivo ~190mg/L da proteína recombinante, facilitando a purificação da mesma. Testada quanto a sua a sua antigenicidade e imunogenicidade, a proteína recombinante foi reconhecida por anticorpos de animais imunizados com o BoHV-5, sugerindo que características da proteína nativa foram conservadas na proteína recombinante. Os dados apresentados irão permitir o desenvolvimento de estudos
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futuros com o objetivo de aperfeiçoar a expressão da proteína recombinante e avaliar a sua capacidade de neutralizar o vírus na espécie-alvo.
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Silva, Alessandra D'Avila da. "Vacinologia e patogenicidade de amostras recombinantes de herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1)." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2007. http://hdl.handle.net/10183/16294.
Full textAbstract:
O herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) é um dos principais agentes causadores de prejuízos econômicos em criações de bovinos. A vacinação tem sido amplamente utilizada para minimizar as perdas causadas por infecções pelo BoHV-1. Dentre as vacinas disponíveis, as vacinas desenvolvidas a partir de amostras virais recombinantes apresentam a vantagem de permitirem a diferenciação entre animais infectados e imunizados. Anteriormente, foi desenvolvida uma vacina recombinante diferencial com uma amostra de BoHV-1 brasileira baseada na deleção do gene que codifica a glicoproteína E (gE). No primeiro capítulo do presente trabalho, a segurança e imunogenicidade desta vacina recombinante inativada foi avaliada. Os experimentos de imunização, desafio e reativação da vacina diferencial em animais experimentalmente inoculados demonstraram que a vacina recombinante foi segura e eficiente ao minimizar ou mesmo prevenir os efeitos da infecção pelo BoHV-1. No segundo capítulo, a segurança da vacina gE- foi avaliada, através da imunização intramuscular (IM) de 22 vacas (14 BoHV-1 soronegativas e 8 soropositivas) prenhes. Foi observada soroconverão, mas não abortos e nem anormalidades fetais nos animais imunizados. Na segunda parte do mesmo estudo foi analizada a capacidade do vírus recombinante difundir-se em um rebanho bovino. Quatro terneiros foram inoculados pela rota intranasal (IN) com a amostra recombinante gE- e, posteriormente, adicionados a outros 16 animais com mesma idade e semelhante condição corporal durante 180 dias. Todos os animais foram monitorados diariamente em busca de sintomatologia clínica. Foi observada soroconversão apenas nos animais imunizados. Estes resultados indicam que, nas condições deste estudo, a amostra recombinante não causou nenhum dano nas vacas prenhes ou em seus terneiros e não foi capaz de difundir-se horizontalmente no rebanho. No terceiro capítulo foi avaliada a patogenicidade de uma amostra recombinante de BoHV-1 com deleção no gene Us9, utilizando coelhos como modelo experimental. Coelhos com quatro semanas de idade foram divididos em quatro grupos (A, B, C, D). Dois grupos (A e B) foram infectados via intranasal (IN) e dois (C e D) infectados via intraocular (IO). Em cada via de infecção, um grupo foi infectado com o vírus recombinante e o outro com o vírus selvagem (wt). Após a infecção IO, todos os animais, de ambos os grupos, desenvolveram intensa conjuntivite entre os dias 3 a 10 pós-inoculação (pi). Vírus infeccioso foi consistentemente isolado a partir dos suabes oculares entre os dias 1 a 10 pi chegando a um título máximo de 103,05 TCID50/mL. Nos grupos infectados pela via IN com BoHV-1 wt, 4/4 coelhos apresentaram sintomatologia característica da doença, tais como: pirexia, apatia, anorexia, tosse, secreção nasal severa (entre os dias 2 e 8 pi). Animais inoculados com o recombinante apresentaram apatia, anorexia e descarga nasal (entre os dias 3 e 7 pi). Vírus infeccioso foi isolado em diversos tecidos tanto nos animais inoculados com o vírus wt como recombinante. Ambos os vírus foram capazes de replicar nas mucosas. Análises histológicas dos tecidos dos animais demonstraram lesões em ambos os grupos. Este estudo apresentou que a proteína Us9 não tem um papel significante na patogenicidade in vivo.<br>Bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) is an the major cause of losses in cattle. Vaccination has been widely applied to minimize losses induced by BoHV-1 infections. Vacines developed from recombinant strains have the advantage of allow the differentiation between immunized and infected animals. Previously, a recombinant differential BoHV-1 vaccine based on a glycoprotein E deleted (gE) virus was developed. In the first chapter of the present work, the safety and immunogenicity of such recombinant, as a inactivate vaccine, was evaluated. The experiments showed that the DIVA vaccinne was safe and efficient in order to minimize or even prevent the clinical signs of the infection by BoHV- 1. In the second chapter of the present study, the safety of the gE- vaccine during pregnancy was evaluated by the intramuscular inoculation into 22 pregnant dams (14 BoHV-1 seronegative; 8 seropositive). Seroconversion was detected but no abortions, stillbirths or fetal abnormalities were seen after vaccination. In the second part of the same study, the potential of the gE- vaccine virus to spread among beef cattle under field conditions was examined. Four heifers were inoculated intranasally (IN) with the gE- vaccine and mixed with other 16 animals at the same age and body conditions, for 180 days. All animals were daily monitored for clinical signs.. Seroconversion was observed only in vaccinated heifers. These results indicate that, under the conditions of the present study, the gE vaccine virus did not cause any noticeable harmful effect on pregnant dams and on its offspring and did not spread horizontally among cattle. In the third chapter the pathogenicity of a US9 negative recombinant strain BoHV-1 using rabbits as an experimental model was avaluated. Rabbits four weeks old were divided in four groups (A, B, C, D) within four rabbits per group. Two groups were infected IN route and two via intraocular (IO). In each route, one group was infected by recombinant virus and the other infected by wild type (wt) virus. After IO infection, all rabbits developed intense conjunctivitis between days 3 to 10 pos infection (pi). Infective virus was consistently isolated from ocular swabs on days 1 to 10, reaching a maximum of 103.05 TCID50/mL. Animals infected in the IN rote with BoHV-1 wt, 4/4 rabbits showed characteristic signs of disease, which included pyrexia, apathy, anorexia, cough, severe nasal secretion between days 2 to 8. Rabbits inoculated with recombinant virus showed apathy, anorexia, nasal secretion (between days 3 and 7pi). Infectious virus was isolated in differents tissues as much as animals inoculated with wt and recombinant virus. Both virus were capable of replication in the mucosa nasal and ocular of the inoculated rabbits. Histopatological lesions were evident in both groups. In the present study showed which the US9 protein have not significantly in the pathogenicity in vivo.