Academic literature on the topic 'Bronches – Sécrétions'

Au cours de ce travail sur les sulfoglycoconjugués trachéo-bronchiques, (i) un système de culture organo-typique de la muqueuse trachéo-bronchique de cobaye a été mis au point: il a permis de définir les sulfoglycoconjugués normalement sécrétés par cette muqueuse, mucines, o-glycoprotéines sulfatées et protéoglycannes à chondroïtine sulfate; (ii) en fonction de ces résultats, la présence de chondroïtine-sulfate dans la sécrétion bronchique humaine a été recherchée: certaines sécrétions bronchiques très infectées, notamment au cours de la mucoviscidose, contiennent du chondroïtine-sulfate; (iii) les caractéristiques de la sulfatation des mucines bronchiques humaines ont été étudiées et des liaisons ester-sulfate sur le c-3 de résidus de galactose terminaux, liaisons qui étaient jusqu'à présent inconnues dans les chaînes glycanniques des mucines, ont été mises en évidence

Les mécanismes de sulfatation des mucines dans les secrétions tracheobronchiques normales et pathologiques sont peu connus. Afin d'aborder cette étude, nous avons isole, grâce à la mise au point de techniques de chromatographie d'échange d'anions hautement résolutive (hpaec), des oligosaccharides sulfates de mucines provenant de l'expectoration de deux patients atteints respectivement de mucoviscidose et de bronchite chronique. La RMN du proton a 400 mhz et la spectrométrie de masse nous ont permis de déterminer la structure de 32 oligosaccharides différents, et de localiser les groupements ester-sulfate, soit sur le c3 d'un résidu de galactose terminal, soit sur le c6 d'un résidu de n-acetylglucosamine interne, suggérant ainsi l'activité d'au moins deux sulfotransferases différentes. Sur la base de ces résultats, nous avons caractérisé, pour la première fois, une activité sulfotransferasique dans la muqueuse bronchique humaine, agissant sur les chaines glycanniques de mucine. Cette activité catalyse le transfert d'un groupement sulfate sur l'hydroxyl porte par le c3 d'un résidu de galactose terminal d'une unité n-acetyl-lactosaminique. Enfin, nous avons recherche un modelé de cellules bronchiques humaines, secrétant des mucines sulfatées et exprimant la protéine cftr (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator). La lignée mm39, dérivant de glandes sous-muqueuses de l'arbre tracheobronchique, présente certaines propriétés de cellules séreuses ; elle exprime la protéine cftr mais elle secrète des mucines très faiblement sulfatées: elle a donc un phénotype mixte, à la fois séreux et muqueux. A l'avenir, la recherche de conditions de culture favorisant la sécrétion de mucines sulfatées devrait permettre de développer une stratégie destinée à comprendre l'origine des anomalies de sulfatation rencontrées dans la mucoviscidose.

L'inhibiteur bronchique (MPI) est un des inhibiteurs physiologiques de l'élastase granulocytaire dans les sécrétions bronchiques humaines. C'est une molécule basique organisée en deux domaines homologues. Actuellement, le rôle physiologique exact du MPI dans la défense du tractus respiratoire et la fonction du domaine N-terminal ne sont pas connus. Dans le but de répondre à ces deux questions, notre travail a consisté à: 1) Isoler l'inhibiteur des sécrétions bronchiques humaines et étudier son interaction avec les mucines respiratoires. L'approche par dichroïsme circulaire a abouti à la caractérisation de liaisons de type ionique entre le MPI et les mucines, impliquant un rôle des résidus d'acide sialique et de sulfate dans l'interaction. De plus, lorsque le MPI est associé aux mucines, il retarde et diminue l'activité de l'élastase sur les mucines. Ce résultat laisse entrevoir un rôle «in vivo» du MPI dans le maintien des propriétés rhéologiques du mucus. 2) Etudier la structure des deux domaines séparés après clivage chimique spécifique et leur activité envers les enzymes cibles connus du MPI. Nous avons aussi effectué une étude comparative avec la protéine recombinante. Le domaine C-terminal est inhibiteur de l'élastase granulocytaire, de la trypsine et la chymotrypsine bovines tandis que le domaine N-terminal n'a aucune activité envers ces trois protéases