Dissertations / Theses on the topic 'Carpelle'

L'auxine est une hormone végétale impliquée dans le développement du gynécée. La réponse à l'auxine dépend majoritairement de deux familles protéiques : les ARF (Auxin Response Factors) et les Aux/IAA. Les ARF sont des facteurs de transcription qui régulent la transcription des gènes de réponse à l'auxine, tandis que les Aux/IAA inhibent l'activité transcriptionnelle des ARF par dimérisation. En présence d'auxine, les Aux/IAA sont dégradés et libèrent les ARF. Au cours de ma thèse, je me suis focalisée sur deux proches paralogues ETTIN/ARF3 et ARF4 impliqués dans le développement du gynécée chez Arabidopsis thaliana. Parmi les cibles directes d'ETT identifiées dans l'équipe, 2 catégories ont retenu notre attention : des gènes impliqués dans la voie de signalisation de l'auxine et des gènes codant des enzymes de remodelage de la paroi. Mon projet a consisté à essayer de comprendre l'implication de ces régulations transcriptionnelles dans le développement du gynécée. Dans une première partie, j'ai étudié la signalisation de l'auxine dans le développement du gynécée, puis l'implication d'ETT dans cette signalisation. Dans une deuxième partie, j'ai confirmé la répression par ETT, des cibles identifiées. Nous avons montré qu'ETT induit la déméthylation des pectines en inhibant les inhibiteurs de pectine méthylestérase. De plus, j'ai montré qu'ETT et ARF4 agiraient de façon redondante pour contrôler positivement la croissance du gynécée. Dans une troisième partie, j'ai abordé l'analyse des domaines fonctionnels du facteur de transcription CRABS CLAW, également impliqué dans le développement du gynécée. En conclusion, mes travaux de thèse apportent une nouvelle vision sur le rôle de la signalisation de l'auxine au cours du développement du gynécée et montrent l'importance du remodelage de la paroi dans la morphogénèse des organes.

L'apparition de la fleur a nécessité trois événements majeurs: (i) le regroupement des organes reproducteurs mâles et femelles sur un même axe, (ii) l'internalisation des ovules au sein d'un organe: le carpelle, (iii) la mise en place de pièces stériles en périphérie des organes reproducteurs. Ce travail de thèse consiste en l'identification d'événements moléculaires à l'origine du carpelle. Les gènes ARF3 et ARF4 jouent un rôle clé dans le développement du carpelle chez l'espèce modèle Arabidopsis thaliana. La reconstruction de l'histoire évolutive de ces gènes a permis de montrer qu'ils résultaient d'une duplication dans le lignage menant aux angiospermes. Leurs structures indiquent qu'ils ont évolué par perte de certains domaines protéiques, ceci de manière indépendante dans les lignages ARF3 ou ARF4. Ces changements dans la partie codante constituent un mode d'évolution généralisable à l'ensemble des embryophytes. La famille génique YABBY intervient dans l'établissement de la polarité adadiale-abaxiale des organes latéraux. En particulier, les gènes CRC et INO constituent respectivement deux marqueurs moléculaires du carpelle et de l'ovule. L'étude préliminaire de cette famille semble indiquer l'absence du gène CRC chez les gymnospermes, suggérant que l'apparition de CRC aurait été un pré-requis pour l'origine évolutive du carpelle.

Le carpelle est l’organe reproducteur femelle spécifique des plantes à fleurs ou Angiospermes. Il est composé du stigmate à l'apex qui permet la sélection et la germination des grains de pollen, du style qui guide les tubes polliniques et de l'ovaire où les ovules sont fécondés. Après fécondation, le carpelle se transforme en fruit, permettant ainsi la dissémination des graines. Chez la plante modèle Arabidopsis thaliana, deux carpelles sont présents dans chaque fleur et sont fusionnés en un pistil. Le développement de cette structure est affecté dans un certain nombre de mutants. L’étude des gènes altérés dans ces mutants montre qu’ils codent pour la plupart des facteurs de transcription mettant ainsi en évidence que l’effet observé sur la morphogenèse du carpelle s’effectue via la régulation de l’expression de gènes cibles. Cependant, dans la majorité des cas, les gènes cibles de ces facteurs de transcription sont inconnus. Ainsi, l'objectif de cette thèse est d’identifier les gènes cibles des facteurs de transcription: SPATULA (SPT), CRABS CLAW (CRC), et ETTIN (ETT) qui jouent des rôles primordiaux dans le développement du carpelle<br>The female reproductive structure, or gynoecium, of the Arabidopsis thaliana flower consists of an ovary, divided longitudinally by a septum, and topped by a stigma and short style. Carpel development is controlled by transcription factors including SPATULA (SPT), CRABS CLAW (CRC), and ETTIN (ETT). However, nothing was previously known of the downstream pathways through which these transcription factors control the development of these tissues. This thesis uncovers some of these pathways

Une des caractéristiques définissant les êtres vivants est leur capacité à se reproduire. La reproduction sexuée est le mécanisme qui a encouragé la sélection positive des espèces au cours de l’évolution en augmentant leurs diversités génétiques. Lors de leurs reproductions les angiospermes (les plantes à fleurs) utilisent un organe sexuel appelé fleur. Le sexe de cet organe est déterminé par la présence ou l’absence de deux différents types de tissus reproducteurs. Le tissu reproducteur mâle est appelé étamine et porte le pollen. Le tissu reproducteur femelle est appelé pistil et est constitué d’un ou plusieurs carpelles. La labilité sexuelle et l’importance économique des Cucurbites comme Cucumis melo (le melon), Cucumis sativus (le concombre) et Citrullus lanatus (la pastèque) ont fait d’eux des organismes-modèles pour l’étude du déterminisme du sexe contrôlé par un réseau génétique. Le modèle génétique du déterminisme du sexe de Cucumis melo peut être expliqué par la modulation et l’interaction de trois gènes: CmACS-7, CmWIP1, CmACS11. Le gène CmACS-7 est situé au locus M et code une enzyme de biosynthèse de l’éthylène (Boualem et al 2008) réprimant le développement des étamines. Le gène CmWIP1 est situé au locus G et code un facteur de transcription potentiel réprimant le développement du carpelle (Martin and al 2010). Et le gène CmACS11 est situé au locus A et code une enzyme de biosynthèse de l’éthylène réprimant l’expression de CmWIP1 (Boualem et al 2015). Au vu de la croissance de la population mondiale, il est nécessaire d’élargir le nombre d’outils génétiques permettant l’amélioration de la sélection variétale des plantes cultivées dont font partie les Cucurbites. La plupart des plantes hybrides sont issues d’un croisement entre deux plantes différentes, une plante mâle et une plante femelle. Pour améliorer la production de ces hybrides, il est primordial de connaître le sexe des plantes parentes et particulièrement celui des lignées femelles. Dans cette optique, les sélectionneurs ont besoin d’élargir leurs panels d’allèles permettant le contrôle du développement du carpelle. L’ingénierie de ces allèles permettra de générer des plantes gynoïques portant uniquement des fleurs femelles mais aussi d’augmenter la proportion de fleurs pistillées et de contrôler le délai d’apparition des fleurs pistillées. Ces améliorations de la sélection variétale des Cucurbites pourraient générer des alternatives aux mécanismes de stérilité mâle, de castration manuelle ou chimique. Ainsi qu’une meilleure maîtrise de l’apparition de l’effet nid, générant des plantes potentiellement plus compactes et plus rapidement productives. La manipulation des mécanismes, régulés par CmWIP1 et contrôlant le développement du pistil, pourrait permettre d’identifier de nouveaux allèles impliqués dans le développement du carpelle. Mes travaux de recherche se sont appuyés sur la mise en œuvre d’un crible génétique afin d’identifier les membres du réseau génétique auquel appartient CmWIP1, l’unique gène identifié à ce jour contrôlant le développement du carpelle chez C. melo. Ma thèse a eu pour but d’identifier des gènes suppresseurs de la fonction de TT1 (AtWIP1) et de NTT (AtWIP2), deux membres de la famille WIP chez Arabidopsis thaliana. Ces mutations suppresseurs pourront supprimer les phénotypes d’arrêt de croissance et de sénescence induits par la surexpression de TT1 ou de NTT. Pour cela, j’ai généré une population de lignées d’Arabidopsis thaliana surexprimant de manière inductible les séquences codantes de TT1 ou NTT et ayant subi une mutagenèse à l’EMS. J’ai ensuite criblé cette population pour identifier les plantes suppresseurs et les mutations causales. Mon projet de recherche a permis d’identifier quatre locus potentiellement impliqués dans le contrôle du développement du carpelle. La caractérisation de ces locus pourra aboutir à un meilleur contrôle du déterminisme du sexe des Cucurbites et des plantes possédant un mécanisme similaire<br>One of the characteristics of living organisms is the ability to reproduce themselves. Sexual reproduction is a mechanism that increases the potential diversity of species and their positive selection. To reproduce most of plants species use a type of sexual organ named flower. The sex of this organ is determined by the presence or absence of two different types of reproductive tissue. The stamen is the male reproductive tissue and the carpel is (the female reproductive tissue). In many species the development of these tissues is controlled by a network of genes. Cucumis melo (melon) is a model plant to study genetic network controlling sex determination. Melon sex determination genetic model can be explained by the modulation of three genes. The gene CmACS-7 at the locus M which encodes for an ethylene biosynthesis enzyme that represses stamen development (Boualem and al 2008). The gene CmWIP1 at the locus G which encodes a putative transcription factor that represses carpel development (Martin and al 2010). And the gene CmACS11 at the locus A which encode for an ethylene biosynthesis enzyme that represses CmWIP1 expression (boualem et al 2015). The aim of this thesis project is to understand in which biological process cmWIP1 is involved to inhibit carpel development. The identification of the precise function of cmWIP1 will lead to the identification of new putative alleles controlling carpel development and sex determination. To achieve this goal we set up a genetic screen in Arabidopsis thaliana to unravel genetic interactors of CmWIP1. At the present moment we found four putative genetic interactors. These putative candidates will be tested in melon. Plants that are mutated in theses cmWIP1 genetic interactors should harbour female organ inside each of their flowers. Then the introgression of these alleles in crop species may increase fruit and/or seed yields

Le carpelle est l’organe reproducteur femelle des plantes à fleurs. Nous présentons une analyse transcriptomique comparative, focalisant particulièrement sur le développement des tissus femelles reproducteurs, entre la plante modèle établie Arabidopsis thaliana et la soeur probable du restant des plantes à fleurs vivantes Amborella trichopoda. Des modules de co-expression de gènes ont été d’abord définis et ensuite comparés statistiquement entre espèces sur la base de relations d’orthologie entre tous les gènes dans les deux génomes sous comparaison. Cette étude a révélé des modules génétiques entiers, plutôt que seulement des gènes individuels, qui auraient conservé leurs patrons d’expression depuis le dernier ancêtre commun des plantes à fleurs. D’autres modules d’origine plus récente ont été également mis en évidence, modules qui ont peut-être contribué à une complexification dans la morphologie des carpelles qu’a eue lieu plus tardivement pendant l’évolution des plantes à fleurs. Le deuxième thème majeur de cette thèse concerne l’un des régulateurs de ce deuxième groupe, le facteur de transcription SPATULA (SPT) de la famille bHLH. Nous présentons des données suggérant que SPT aurait acquis son rôle actuel dans les tissus à l’apex du carpelle chez un ancêtre commun des Brassicacées. Nos données suggèrent également que l’acquisition de ce nouveau rôle dépendait de changements au niveau des séquences cis-régulatrices de SPT. Nous décrivons des expériences en cours qui ont pour objectif d’identifier les séquences d’ADN précises responsables pour ce changement évolutive<br>The carpel is the female reproductive organ of flowering plants. We present a comparative transcriptomic analysis, focusing in particular on the development of female reproductive tissues, between the established model plant Arabidopsis thaliana and the probable sister of all remaining living flowering plants Amborella trichopoda. Gene co-expression modules were first defined and then compared statistically between species on the basis of orthology relationships between all genes in the two genomes under comparison. This study revealed entire genetic modules, rather than just individual genes, that appear to have retained their expression patterns since the last common ancestor of living flowering plants. Other modules of more recent origin have also been brought to light, which may have contributed to a complexification in the morphology of carpels that occurred later during the evolution of flowering plants. The second major theme of this thesis concerns one of the regulators of this second group, the transcription factor SPATULA (SPT) of the bHLH family. We present data suggesting that SPT acquired its present role in the tissues at the apex of the carpel in a common ancestor of Brassicaceae. Our data also suggest that the acquisition of this new role depended on changes in the cis-regulatory sequences of SPT. We describe ongoing experiments that aim to identify the precise DNA sequences responsible for this evolutionary change

Flores díclinas originam-se da ausência funcional/estrutural de um dos verticilos envolvidos na reprodução, seja desde o início ou no decorrer do desenvolvimento dos primórdios. Este trabalho visa ao estudo do desenvolvimento floral de Parkia multijuga e Stryphnodendron adstringens, leguminosas andromonoicas, a fim de verificar se as flores estaminadas se formam por ausência do carpelo desde o início do desenvolvimento ou por seu aborto no decorrer do desenvolvimento. Botões florais de vários tamanhos e flores foram coletados e processados para observações em microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia de luz (ML). O desenvolvimento dos órgãos florais inicia-se com o surgimento de cinco primórdios de sépalas no meristema floral, a partir do lado abaxial em P. multijuga e adaxial em S. adstringes: em alguns botões, um sexto primórdio de sépala inicia-se tardiamente; cinco primórdios de pétalas simultaneamente em P. multijuga e bidirecionalmente em S. adstringes; um primórdio de carpelo concomitante aos cinco primórdios de estames antessépalos em P. multijuga, e após a formação das pétalas em S. adstringes; e cinco primórdios de estames antepétalos. As etapas finais do desenvolvimento são similares entre as espécies. Os estames iniciados em dois verticilos, um mais externo (antessépalo) e outro mais interno (antepétalo), encontram-se arranjados em um único verticilo. Entretanto, os estames antessépalos, que se iniciaram primeiro, apresentam-se um pouco mais alongados que os antepétalos. Em P. multijuga os filetes unem-se na base durante seu alongamento, formando um tubo que, posteriormente, torna-se adnato às pétalas. Nas flores hermafroditas de ambas as espécies, o primórdio carpelar inicia-se, alonga-se, a fenda carpelar se fecha e, logo após, começa a diferenciação do estilete. Já nas flores estaminadas, o primórdio carpelar inicia-se e alonga-se, mas sua fenda não se fecha e o carpelo não termina seu desenvolvimento. Na fase final, as flores hermafroditas apresentam estigmas completamente diferenciados, enquanto que nas flores estaminadas, o primórdio carpelar permanece como um rudimento na base do botão floral. Não há iniciação de óvulos neste caso. Conclui-se que as flores estaminadas em ambas as espécies surgem por aborto do carpelo e não por sua ausência desde o início, semelhante a outros membros de Mimosoideae.<br>Diclinous flowers originate by functional/structural absence of one of the reproductive whorls, from the inception or by abortion in the development. This study aims to compare the floral development of two andromonoecious legumes, Parkia multijuga and Stryphnodendron adstringens, in order to verify which process acts in the staminate flower formation (carpel absence from inception or by abortion). Flowers and flower buds of various sizes were collected and processed for observations in scanning electron microscopy (SEM) and light microscopy (LM). The development of floral organs begins with the emergence of five sepal primordia in the floral meristem from the abaxial side (P. multijuga) and from the adaxial side (S. adstringens) in which in some buds, a sixth primordia arises late; five petal primordial simultaneously in P. multijuga and bidirectionally in S. adstringens, a carpel primordium emergence concomitantly to five antesepalous stamens primordia in P. multijuga, and after the petal formation in S. adstringens, and five antepetalous stamen primordium. In the final stages of the development, the stamens initiated in two whorls, one outer (antesepalous) and the other innermost (antepetalous), are arranged in a single whorl. However, the antesepalous stamens, which emerged first, are a little more elongated than the antepetalous ones. In P. multijuga the fillets join in the base while its elongation, forming a tube, which thereafter becomes adnate to the petals. In hermaphrodite flowers, in both species, the carpel primordium emerges, stretches, the carpel cleft closes and, soon after, the style begins its differentiation. In staminate flowers, the carpel primordium begins and stretches, but the carpel cleft does not close and the carpel does not end its development. In the mature stage, the hermaphrodite flowers present fully differentiated stigmas, while in the staminate flowers, the carpel primordium remains as a rudiment at the base of the bud. In this case, there is no initiation of any ovule. We conclude that staminate flowers in both species arise by carpel abortion and not from inception, alike the other members of Mimosoideae.

Scopo di questo lavoro è quello di analizzare le componenti tattiche, strategiche e sociali della guerriglia antiromana in Britannia e in Giudea, in un periodo che va dal I secolo a. C. al III secolo d. C., con l'obiettivo di mettere in luce la differente efficacia delle tattiche non ortodosse rispetto a quelle convenzionali; e di analizzare le risposte teoriche ed empiriche concepite dai Romani per affrontare questa forma di lotta. La tesi è stata articolata nel modo seguente: una prima parte analizza gli aspetti tattici, strategici e sociali della guerriglia e della controguerriglia, anche attraverso il metodo comparativo, mettendo cioè a confronto alcuni dei principali testi sulla guerra non convenzionale redatti in epoche e contesti diversi, dai quali si è cercato di delle costanti potenzialmente applicabili a qualsiasi periodo storico e a qualsiasi area geografica. Nella seconda parte si cerca di applicare tali costanti alla realtà storico – sociale dell'impero romano. Particolare attenzione è stata riservata al rapporto tra la mentalità romana, basata sul concetto di bellum iustum, e le tattiche non ortodosse. La terza e la quarta parte analizzano la resistenza antiromana in Britannia e in Giudea, mettendone in luce tutti gli aspetti, in particolare quelli legati alla guerriglia rurale, a quella urbana, al terrorismo, all'evoluzione della guerriglia da guerra per bande a guerra convenzionale e alla controguerriglia. La scelta di queste due province non è casuale. In province così lontane e diverse tra loro, Roma inviò spesso gli stessi generali esperti di controguerriglia. Questo particolare permette di notare la presenza, a Roma, di una grand strategy che, consapevole del fenomeno della guerriglia, ne affidò la repressione agli stessi generali, specialisti della controguerriglia, non esitando a spostarli, in caso di necessità, da un capo all'altro dell'impero.<br>Aim of this work is the analysis of the strategical, tactical and social aspects of the anti – roman guerrilla warfare in Britannia and Judaea, from the first century B.C. to the III A. D. The target is to underline the differences between conventional and irregular warfare and to analyze the theoretical and practical Roman answers to this particular method of fighting. The first part of the thesis analyzes the characteristics of guerrilla warfare with the use of comparative method, that is comparing some of the most important works about guerrilla written in different periods and historical contexts, trying to obtain some constant rules, potentially applicable in every historical period and geographical area. In the second part there is an attempt to apply these rules to the Roman empire, with particular attention on the relations between the Roman concept of bellum iustum and the irregular strategy. In the third and fourth part there is an analysis of the anti – Roman resistance in Britannia and in Judaea, with particular attention on rural guerrilla, urban guerrilla, terrorism, about the evolution from war of gangs to conventional warfare and about Roman counter - guerrilla. The choice of these two provinces in not casual, because in both, in spite of distance and geographical differences, Rome sent the same generals, expert in counter – guerrilla. This aspect underline the presence, in Rome, of a grand strategy that, conscious of the importance of guerrilla warfare, entrusted the same generals of her repression, without any hesitation in moving them from one end to another of the empire.

[EN] The four highly related family genes NGATHA (NGA), which encode transcription factors with a B3 DNA-binding domain, are functionally redundant in the development of the style and stigma in a dose-dependent manner. While the single mutants in the NGA genes only show very subtle or no defects in carpel morphology, the multiple mutants exhibit greater defects in the development of the apical part of the gynoecium, which is completely altered in the quadruple mutant. This phenotype is related with the lack of activation, in the apical part of the gynoecium, of the YUCCA genes, which encode enzymes involved in auxin synthesis. The phenotype of the nga mutants is very similar to the mutants in the SHORT INTERNODES/STYLISH (SHI/STY) genes, and it has been shown that NGA and STY work together to promote style specification, directing the YUC-mediated auxin synthesis in the apical part of the gynoecium (Trigueros et al., 2009). In addition, the phenotypes of the nga mutants and of the plants over-expressing NGA, resemble those observed in genotypes with altered expression of genes with relevant functions in gynoecium morphogenesis. Thus, it can be inferred that the NGA genes have a key role in gynoecium morphogenesis, though their genetic interaction with the network of genes controlling this process is still unclear; therefore, in this thesis we have carried out a detailed genetic analysis to determine the position and role of NGA genes in this network. With this aim, our first approach has been to identify and characterize regulators of the expression of NGA genes. As the four NGA genes show almost identical expression patterns, it seemed likely that they shared common regulators. For that reason, we made a bioinformatic analysis of the promoter regions of the NGA genes looking for conserved regions. In this analysis we identified two conserved regions and we have used these conserved domains to carry out yeast one-hybrid screenings of Arabidopsis cDNA libraries. These screenings led to the identification of a transcription factor from the SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN-LIKE (SPL) family and three from the TEOSINTE BRANCHED1, CYCLOIDEA, AND PROLIFERATING CELL FACTORS (TCP) family as candidates to regulate NGA expression. After the identification of these candidates, different molecular analysis have been carried out to confirm the binding of these transcription factors to the promoters of the NGA genes. To validate their genetic interaction we have also characterized mutants and over-expression lines of these candidates, as well as genetic combinations of these mutants with reporter and loss- and gain-of-function lines of the NGA genes. In addition, in this thesis we were interested in analyzing in detail the genetic interactions of NGA genes with other genes with a key role in the development of the gynoecium apical tissues. We had observed that over-expression lines of HEC1, HEC3 and NGA3, showed similar phenotypes in the fruit: reduced ovaries and enlarged apical regions and gynophores, similar phenotypes to those of mutants affected in auxin signaling. For that reason, a great part of our analysis has been focused to elucidate the regulatory hierarchy between both factors NGA and HEC. To study this we have carried out genetic analysis combining reporter lines of these genes with mutants in NGA or HEC or with their over-expression lines. We have also carried out several molecular assays which had allowed us to conclude that both factors act at the same level, forming part of a transcriptional complex with cooperative activity. Finally, though similar genetic and molecular analysis in which other genes of the bHLH transcription factor family have been included, we have inferred the participation of the NGA proteins in a high-order complex, possibly composed by NGA, HEC and the IND and SPT proteins, which would be required for correct auxin signaling during gynoecium morphogenesis and stigma development in Arabidopsis thaliana.<br>[ES] La familia de los genes NGATHA (NGA) está formada por cuatro genes que codifican factores de transcripción de tipo B3 (Álvarez et al., 2006). Los genes NGA son funcionalmente redundantes en el desarrollo del estilo y el estigma de una manera dosis-dependiente, mientras que los mutantes individuales no presentan defectos en la morfología del carpelo, los mutantes múltiples presentan defectos cada vez mayores en el desarrollo de la parte apical del gineceo que está completamente alterada en el cuádruple mutante. Este fenotipo mutante está relacionado con la falta de activación en el dominio apical del gineceo de los genes YUCCA (YUC), que codifican enzimas de la ruta de biosíntesis de auxinas. Los fenotipos mutantes de NGA son muy similares a los causados por las mutaciones en la familia SHORT INTERNODES/STYLISH (SHI/STY) y se ha mostrado que NGA y STY promueven la especificación del estilo, dirigiendo la síntesis de auxinas mediada por YUC en el dominio apical del gineceo (Trigueros et al, 2009). Por otro lado, los fenotipos de los mutantes y de las líneas de sobreexpresión de NGA recuerdan a los fenotipos observados en fondos donde la expresión de otros genes con funciones relevantes en la morfogénesis del gineceo está alterada. Así, es posible inferir que los genes NGA tienen un papel clave en este proceso, aunque su relación genética con otros factores importantes en el mismo no está clara, por lo que en la presente tesis hemos pretendido realizar un análisis genético detallado para determinar su posición y papel en estas rutas. La primera aproximación que hemos abordado ha sido determinar posibles reguladores de estos genes. Como los genes NGA muestran patrones de expresión similares parecía probable que tuvieran reguladores comunes, por lo que mediante un análisis informático de los promotores de los genes NGA identificamos dos regiones conservadas en todos los promotores y hemos utilizado estos dominios conservados para llevar a cabo ensayos de híbrido simple en levadura identificando como posibles reguladores a un factor de la familia de los SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN-LIKE (SPL), y a tres miembros de la familia TEOSINTE BRANCHED1, CYCLOIDEA, AND PROLIFERATING CELL FACTORS (TCP). Tras la identificación de los reguladores candidatos, se han llevado a cabo análisis moleculares para confirmar la unión de estos a los promotores de los genes NGA. Y hemos caracterizado los mutantes y las líneas de sobreexpresión de estos posibles reguladores, así como las combinaciones genéticas de los mutantes correspondientes con las líneas reportadoras de NGA y con mutantes de pérdida y ganancia de función NGA para validar su interacción genética. Además en esta tesis doctoral nos interesaba profundizar en el análisis de las interacciones genéticas de NGA y otros factores clave en la morfogénesis de los tejidos apicales del gineceo. Habíamos observado que las líneas de sobreexpresión de HECATE1 (HEC1), HEC3 y NGA3 presentaban fenotipos similares en el fruto: ovarios reducidos, regiones apicales aumentadas y ginóforos largos, fenotipos similares a los de mutantes afectados en la señalización de auxinas. Para investigar la posible relación funcional entre NGA y HEC hemos llevado a cabo análisis genéticos combinando las líneas reportadoras de estos genes con los mutantes nga o hec, o con las líneas de sobreexpresión; y hemos realizado diferentes ensayos moleculares, mediante los cuales hemos comprobado que ambos factores actúan al mismo nivel formando parte de un complejo transcripcional con actividad cooperativa. Finalmente, mediante análisis genéticos y moleculares similares en los que hemos incluido otros genes de la familia bHLH, hemos deducido la necesaria participación de las proteínas NGA en un complejo de mayor orden formado por NGA, HEC y también los factores IND y SPT, que sería necesario para la correcta señalización de auxinas durante la morfogénesis del gine<br>[CAT] Els quatre gens NGATHA (NGA), que codifiquen factors de transcripció de tipus B3 (Álvarez et al., 2006), són funcionalment redundants en el desenvolupament de l'estil i l'estigma d'una manera dosi-depenent, mentre que els mutants individuals no presenten defectes en la morfologia del carpel, els mutants múltiples presenten defectes cada vegada majors en el desenvolupament de la part apical del gineceu que està completament alterada en el quàdruple mutant. Aquest fenotip mutant està relacionat amb la falta d'activació en el domini apical del gineceu dels gens YUCCA (YUC), que codifiquen enzims de la ruta de biosíntesi de auxines. Els fenotips mutants de NGA són molt similars als causats per les mutacions en la família SHORT INTERNODES / STYLISH (SHI / STY) i s'ha mostrat que NGA i STY promouen l'especificació de l'estil, dirigint la síntesi d'auxines mediada per YUC al domini apical del gineceu (Trigueros et al, 2009). D'altra banda, els fenotips dels mutants i les línies de sobreexpressió de NGA recorden als fenotips observats en fons on l'expressió d'altres gens amb funcions rellevants en la morfogènesi del gineceu està alterada. Així, és possible inferir que els gens NGA tenen un paper clau en aquest procés, encara que la seua relació genètica amb altres factors importants en el mateix no està clara, pel que en la present tesi hem volgut realitzar una anàlisi genètica detallat per determinar la seva posició i paper en aquestes rutes. La primera aproximació que hem abordat ha sigut determinar possibles reguladors d'aquests gens. Com els gens NGA mostren patrons d'expressió similars semblava probable que tinguessin reguladors comuns, pel que mitjançant una anàlisi informàtic dels promotors dels gens NGA identificarem dos regions conservades en tots els promotors i hem utilitzat aquests dominis conservats per dur a terme escrutinis de híbrid simple en llevat identificant com a possibles reguladors a un factor de la família dels SQUAMOSA PROMOTOR BINDING PROTEIN-LIKE (SPL), i a tres membres de la família TEOSINTE BRANCHED1, CYCLOIDEA, AND PROLIFERATING CELL FACTORS (TCP). Després de la identificació dels reguladors candidats, s'han dut a terme anàlisis moleculars per confirmar la unió d'aquests als promotors dels gens NGA. I hem caracteritzat mutants i les línies de sobreexpressió d'aquests possibles reguladors, així com les combinacions genètiques dels mutants corresponents amb les línies reportadores de NGA i amb mutants de pèrdua i ganància de funció NGA per validar la seua interacció genètica. A més en aquesta tesi doctoral ens interessava aprofundir en l'anàlisi de les interaccions genètiques de NGA i altres factors clau en la morfogènesi dels teixits apicals del gineceu. Havíem observat que les línies de sobreexpressió de HECATE1 (HEC1), HEC3 i NGA3 presentaven fenotips similars en el fruit i que aquestos fenotips eren semblants als de mutants afectats en la senyalització de auxines. Per investigar la possible relació funcional entre NGA i HEC hem dut a terme anàlisis genètiques combinant les línies reportadoras d'aquests gens amb els mutants nga o hec, o amb les línies de sobreexpressió; i hem realitzat diferents assajos moleculars, mitjançant els quals hem comprovat que tots dos factors actuen al mateix nivell formant part d'un complex transcripcional amb activitat cooperativa. Finalment, mitjançant anàlisis genètiques i moleculars similars en què hem inclòs altres gens de la família bHLH, hem deduït la necessària participació de les proteïnes NGA en un complex de major ordre format per NGA, HEC i els factors IND i SPT, que seria necessari per a la correcta senyalització de auxines durant la morfogènesi del gineceu i la formació de l'estigma en Arabidopsis thaliana.<br>Ballester Fuentes, P. (2016). Los genes NGATHA: análisis genético y molecular de su papel en la morfogénesis del gineceo de Arabidopsis thaliana [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/72867<br>TESIS

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV11MA095.pdf: 39545 bytes, checksum: 37eb5870575464faa52ddb90a093d154 (MD5) Previous issue date: 2011-06-19<br>The moldy core in apple fruits, also called moldy core in English corazón mohoso in Spanish is an of the most important summer disease of the crop in Brazil and have been registered in many countries. This disease is recent years is focusing on high levels in orchards of regions producing of apple of rio Grande do Sul and Santa Catarina State. Factors that influence the shape of the fruit as weather events that occur during the period of pollination and fruit set, nutrition, management and the rootstocks used may predispose and increase in the intensity of the disease. Among these factors the type of rootstocks has been considered a relevant factor and currently, the two rootstock most commonly used in orchards of apple are Marubakaido and EM-9. The objective os this study was to compare morphological characteristics of fruits with the incidence of molfy core in clones of cultivars of apple Galaa and Fuji on different rootstocks during the cycles production of 2009/2010 and 2010/2011 in Vacaria, RS and Fraiburgo, SC. The experimental design was randomized block in a 9x2x2 factorial arrangement, with six clones of the cultivar Gala and three of the Fuji, two rootstocks and two periods of evaluation for the region of Vacaria, RS and 8x2 factorial arrangement with five clones of cultivar Gala and tree of the Fuji and two periods of evaluation ofr the region of Fraiburgo, SC. The variables evaluated were the fruit diameter (D) and length (C), relationship length/diameter (C/D) of fruit, distance between lobes, opening calicinar, calicinar tube length, seed number and state of health of carpels. The disease was not identified in clones of cultivar of Gala in both crop and soil and climatic regions. The highest intensity of disease in clones Fuji Suprema and Mishima from Vacaria/RS, was correlated with the morphological characteristics of fruits evaluated. These clones showed higher opening calicinar, calicinar shorter length of the tube and the greater distance between lobes of fruits when compared to Fuji Select showed the lowest intensity of disease. The number of seeds per fruit was not associated with the incidence of moldy core. The types of rootstocks influence the shape of the fruit characteristics that increased the predisposition to disease incidence in booth periods. Fuji Suprema and Mishima grafted on rootstock EM-9 had a higher incidence of moldy core in the fruits, compared to Maribakaido/EM-9 rootstock. Fruits from these clones of Fuji on EM-9 had a higher average diameter of fruits, which reflected in a lower ratio C/D of the fruit and also greater distance between lobes of the fruit. Clones of Fuji from Fraiburgo/SC dis not differ in relation to moldy core on Maruba/EM-9 rootstock. The highest percentage of fruits tested showed only the level of the disease, in other words, growth of mycelium only I the region of the seeds. Among the genres of fungi isolated from the carpels of apples, Alternaria was the genre with the highest frequency<br>A podridão carpelar em frutos de macieira, também chamada em inglês de moldy core ou em espanhol de corazón mohoso é uma das principais doenças de verão da cultura no Brasil e tem sido registrada em diversos países. Esta doença nos últimos anos vem incidindo em níveis altos nos pomares das regiões produtoras de maçã do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina. Fatores que influenciam no formato dos frutos como eventos climáticos que ocorrem durante o período de polinização e frutificação, nutrição, manejo e porta enxertos utilizados podem predispor um aumento na intensidade da doença. Dentre estes fatores o tipo de porta enxerto tem sido considerado um fator relevante e atualmente, os dois porta enxertos mais utilizados na cultura da macieira são o Marubakaido e o EM-9. O objetivo deste trabalho foi relacionar características morfológicas de frutos com a incidência de podridão carpelar em clones das cultivares Gala e Fuji sobre diferentes porta enxertos, durante os ciclos de produção 2009/2010 e 2010/2011 na região de Vacaria, RS e Fraiburgo, SC. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados, em arranjo fatorial 9x2x2, com seis clones da cultivar Gala e três da Fuji, dois porta enxertos e dois períodos de avaliação, para a região de Vacaria, RS e em arranjo fatorial 8x2, com cinco clones da cultivar Gala e três da Fuji e 2 períodos de avaliação para a região de Fraiburgo, SC. As variáveis avaliadas nos frutos foram: diâmetro (D) e comprimento (C) de frutos, relação comprimento/diâmetro (C/D), distância entre lóbulos, abertura calicinar, comprimento do tubo calicinar, número de sementes e estado de sanidade dos carpelos. A doença não foi identificada em clones da cultivar Gala em ambas as regiões edafoclimáticas de cultivo. A maior intensidade da doença nos clones Fuji Suprema&#8223; e Mishima&#8223; oriundos de Vacaria/RS, apresentou relação com as características morfológicas dos frutos avaliadas. Nestes clones observou-se maior abertura calicinar, menor comprimento do tubo calicinar e maior distância entre lóbulos dos frutos, quando comparados a Fuji Select&#8223; que apresentou menor intensidade da doença. O número de sementes por fruto não apresentou relação com a incidência de podridão carpelar. Os tipos de porta enxertos exercem influência nas características de formato dos frutos que aumentam a predisposição à incidência da doença, em ambos os períodos de avaliação. Fuji Suprema&#8223; e Mishima&#8223; enxertados sobre porta enxerto EM-9 tiveram maior incidência de podridão carpelar nos frutos, comparados ao porta enxerto Marubakaido/EM-9. Frutos oriundos destes clones de Fuji&#8223; sobre EM-9 apresentaram maior diâmetro, o que se refletiu em uma menor relação C/D do fruto e também maior distância entre lóbulos do fruto. Clones de Fuji&#8223; oriundos de Fraiburgo/SC, não diferiram entre si em relação à podridão carpelar sobre porta enxerto Maruba/EM-9. A maior porcentagem de frutos avaliados apresentou apenas o nível inicial da doença, ou seja, o crescimento de micélio somente na região das sementes. Dentre os gêneros de fungos isolados de carpelos de maçãs, Alternaria foi o gênero que apresentou a maior freqüência

Mestrado em Engenharia do Ambiente<br>Este trabalho tem como principal objectivo estudar qual o efeito das carpetes na qualidade do ar interior de uma escola primária. Para alcançar este objectivo, as concentrações de PM10, PM2.5 e BC foram medidas no interior e exterior da escola. As medições foram em três diferentes períodos em duas salas de aulas onde uma troca entre carpete e piso liso foi realizado. O cálculo da deposição e re-suspensão de partículas, no interior das salas, foi feito através da equação do balanço mássico. A comparação entre o número de partículas, partículas em suspensão e carbono negro também foi realizada. Existe uma boa relação entre PN e PM (R2<0.94), pelo que o equipamento Dylos pode ser útil para estudos posteriores, uma vez que é mais económico. Quando o chão da sala é coberto por uma carpete, os resultados sugerem que os níveis de re-suspensão são mais baixos e os níveis de deposição mais elevados. Desta forma, recomenda-se o uso de carpete dentro da sala de aula para melhorar a qualidade do ar interior.<br>The main purpose of this work is to evaluate the effect of the carpet on the indoor air quality of a primary school. To achieve this goal PM10, PM2.5 and BC are measured inside and outside the school. The measurements are performed in two classrooms where an exchange between carpet and regular smooth floor was carried out during three periods. The mass balance equation is used to determinate the resuspension and deposition of particles inside the classrooms. The comparison between particle number, particle matter and black carbon are also performed. To save money, the Dylos equipment might be useful for further studies. There is a high relation between PN and PM (R2<0.94). The results revealed lower resuspension and higher deposition levels when carpet is present in the classroom. Thus, it is recommended to use the carpet inside the classroom.

La maladie de la tache noire affecte les fruits d’ananas mature, les rendant impropre à la consommation. Actuellement, aucune méthode de contrôle n'est disponible pour cette maladie. Une meilleure connaissance du pathosystème est nécessaire pour trouver des moyens de lutte efficaces.Des entretiens et échantillonnages menés auprès de producteurs durant l’hiver austral révèlent une prévalence de la maladie de 74%. Les champignons pathogènes appartiennent à plusieurs espèces : Fusarium ananatum (72% des isolats), Talaromyces stollii (21%), F. oxysporum (6%) et F. proliferatum (1%). Leur potentiel toxinogène a été déterminer, Les champignons du genre Fusarium ont produit des mycotoxines identifiées comme les fumonisines FB1, FB2 et la beauvericine. Sur un milieu de culture ananas, une concentration en beauvericine de 34959 µg kg-1 a été mesurée pour l’espèce F. proliferatum.Une méthode d’inoculation de Fusarium ananatum directement dans le parenchyme a permis de décrire la réponse du biochimique du fruit. La voie des phénylpropanoïdes est sollicitée, particulièrement avec l’élicitation du caffeoylisocitrate et du coumaroylisocitrate dans la zone infectée. Une comparaison des profils métaboliques montre que la réponse du fruit à une inoculation est plus importante chez le cultivar résistant ‘MD-2’ que chez le cultivar sensible ‘Queen’. La majorité des métabolites élicités par l’attaque sont déjà présents dans les fruits sains mature de la variété résistante. Le potentiel antifongique des composés phénoliques à était évalué. Les acides coumarique, caféoylquinique et férulique inhibent la croissance du mycélium à des concentrations similaires à celle trouvées dans les fruits infectés.Une approche par imagerie a permis de décrire l’anatomie des fruits des deux cultivars et notamment la fusion imparfaite des sépales et bractée chez ‘Queen’. Les nectaires et les parois carpellaires jouent un rôle clef dans le processus d'infection et de colonisation de Fusarium ananatum<br>Fruiltet core rot (FCR) disease affects the fruits of mature pineapples. Current disease controls are not available. A deeper knowledge of the pathosystem is needed to find an effective means of control FCR.A diagnostic survey conducted with producers during the southern winter revealed a prevalence of the disease of 74%. Pathogenic fungi belong to several species: Fusarium ananatum (72% isolates), Talaromyces stollii (21%), F. oxysporum (6%) and F. proliferatum (1%). Their toxinogenic potential was determined. Fusarium fungi produced mycotoxins identified as fumonisins FB1, FB2 and beauvericin. On a pineapple culture medium, a concentration of beauvericine of 34959 μg kg-1 was measured for the species F. proliferatum.A method of inoculating Fusarium ananatum directly into the parenchyma allowed to describe the biochemical response of the fruit. The phenylpropanoids pathway is involved, particularly with the elicitation of caffeoylisocitrate and coumaroylisocitrate in the infected zone. A comparison of the metabolic profiles shows that the response to inoculation of resistant cultivar 'MD-2' is higher than in the sensitive cultivar 'Queen'. Most of the metabolites elicited by the attack are already present in healthy mature fruits of the resistant variety. The antifungal potential of the phenolic compounds was evaluated. Coumaric, caffeoylquinic and ferulic acids inhibit mycelial growth at concentrations similar to those found in infected fruits.An imaging approach allowed to describe the anatomy of the fruits of the two cultivars, to identify the key roles played by nectaries and carpel margins in the infection and colonization process of Fusarium ananatum