Academic literature on the topic 'Cellules acineuses du pancréas – Cancer – Immunothérapie'

Le cancer du pancréas exocrine, un des plus agressifs, présente un diagnostic tardif et reste peu sensible aux traitements conventionnels. Il est donc essentiel de développer de nouvelles approches thérapeutiques de ce cancer. Nous avons mis en évidence la présence d’un antigène glycosylé associé à la tumeur portant le glycotope 16D10, reconnu par l’anticorps monoclonal mAb16D10 à la surface des cellules tumorales du pancréas humain. Ce glycotope de surface est porté par une glyco isoforme de la Lipase Sels Biliaires Dépendante (BSDL), exprimée lors des cancers du pancréas. Par ailleurs, le mAb16D10 inhibe la croissance de cellules humaines pancréatiques tumorales SOJ-6 transplantées chez les souris Nude. L’ensemble de ces données nous a permis d’envisager des approches d’immunothérapies des cancers pancréatiques fondées sur l’utilisation du mAb16D10. Nous avons déterminé la spécificité du mAb16D10 sur différents tissus et différentes cellules et étudié in vitro les mécanismes moléculaires impliqués dans la diminution de la croissance tumorale induite par le mAb16D10. Nous avons montré que le mAb16D10 reconnaît spécifiquement des foyers de cellules néoplasiques alors qu’aucune réaction n’est observée, ni dans la zone « normale » des tissus pancréatiques tumoraux, ni dans les tissus humains normaux. Le mAb16D10 inhibe la prolifération des cellules pancréatiques tumorales humaines exprimant l’antigène 16D10 localisé dans les radeaux lipidiques de la membrane plasmique. Le mAb16D10 induit l’expression de la p53 et l’apoptose via la voie intrinsèque. Cet anticorps entraîne l’activation de la GSK-3β, ce qui provoque la dégradation de la β-caténine et la diminution de l’expression de la cycline D1 résultant à l’arrêt du cycle cellulaire en phase G1/S. Le traitement des cellules tumorales avec le mAb16D10 s’accompagne de l’expression de la E-cadhérine. L’antigène 16D10 associé aux radeaux lipidiques et à la β-caténine pourrait constituer une plateforme de signalisation, reconnue par le mAb16D10 permettant le recrutement de la E-cadhérine et l’induction de la mort cellulaire. Nous avons également montré l’efficacité thérapeutique in vitro du mAb16D10, associé aux drogues conventionnelles telles que la gemcitabine et le cisplatine. Le mAb16D10 se révèle être un outil thérapeutique prometteur pour le traitement des adénocarcinomes pancréatiques.

L'antiport na/h est un mecanisme de transport membranaire, echangeant un ion na pour un proton. L'activation de cet echange par la cck et la gastrine conduit a une augmentation du ph intracellulaire. L'effet de la cck est medie par le recepteur cck et semble impliquer la stimulation de la kinase c. L'activation de l'antiport par la gastrine ne passe pas par le recepteur cck a. L'antiport na/h est egalement present au niveau de la lignee cellulaire ar4-2j, derivee d'un cancer pancreatique de rat et presente les memes caracteristiques pharmacologiques: dependance vis-a-vis des concentrations externes en na, inhibition par l'amiloride. L'activation de l'echange na/h et la stimulation de la proliferation cellulaire par le serum de veau ftal sont correlees. L'amiloride et ses analogues inhibent echange na/h et proliferation cellulaire aux memes concentrations, temoignant du role de l'antiport dans le controle de la proliferation de cette lignee cellulaire. D'autres agents sont capables de stimuler l'echange na/h sans etre des facteurs de croissances, indiquant que d'autres processus metaboliques sont controles par l'activation de l'antiport na/h, notamment des phenomenes d'hypertrophie cellulaire

La recherche de nouvelles molécules participant à la réponse cellulaire au stress, notamment au cours de la pancréatite aiguë, est le thème principal de notre laboratoire. Grâce à une approche systématique utilisant la technique des micropuces à ADN le laboratoire a identifié des gènes dont l'expression est modifiée au cours de la pancréatite aiguë. L'un des nouveaux gènes analysés dans cette étude a retenu notre attention car il présente une induction précoce de l'ARNm dans les cellules acineuses pancréatiques au cours de la pancréatite aiguë. Le laboratoire a appelé ce gène p8. In vivo, plusieurs agents de stress induisent la transcription de p8. De plus, le fait que ce gène soit également inductible in vitro par de nombreux agents de stress sur différentes lignées cellulaires montre que son rôle est de participer de manière générale à la réponse au stress. La séquence complète de l'ARNm comprend 719 nucléotides et elle présente un seul cadre de lecture ouvert codant pour une protéine putative de 82 acides aminés, d'un poids moléculaire d'environ 8 kDa. Elle joue un rôle important dans la régulation du cycle cellulaire, par sa capacité à réguler différentes voies MAP kinases (Article 1) ainsi que par son action sur la protéine p27Kip1 (Article 2) et dans le mécanisme de mort cellulaire programmée par son interaction avec la Prothymosine α (Article 3). Les fonctions de p8 sont différentes en fonction de sa localisation, nucléaire ou cytoplasmique, et des différentes modifications post-traductionnelles qu'elle subit qui peuvent accélérer l'augmentation de sa dégradation par le protéasome. En conclusion, ce travail a permis la caractérisation d'un gène de réponse au stress, le gène p8. Ce gène est surexprimé lors d'un stress et contrôle de nombreux mécanismes cellulaires, ce qui explique probablement l'implication de p8 dans la cancérogenèse
The main objective of our laboratory is to identify new molecules involved in the cellular stress response, especially during acute pancreatitis. We used DNA microarray analysis to identify the genes showing significant changes in their expression during acute pancreatitis. One of them was found of special interest because of its very early transcriptional induction in acinar cells during acute pancreatitis. We called it p8. In vivo several stress agents induce p8. Furthermore the fact that this gene could be also induced in vitro by several stress agents demonstrates its participation to a general stress response. For instance p8 is involved in cell-cycle regulation, by its ability to modulate some MAP kinase pathways (Article1) and by its role in p27Kip1 (Article2), and involved in apoptosis (Article3). P8 functions are modulated by its localization, nuclear or cytoplasmic, and by the different post-translational modifications which can modulate its half-life. In conclusion this work allowed characterisation of a gene involved in stress response, p8. This gene is overexpresed during a stress and controls several cellular mechanisms, which may explain its function in tumorigenesis

Cette etude porte sur la regulation de la proliferation de cellules pancreatiques. Son objectif est l'analyse de quelques mecanismes moleculaires impliques dans les premieres etapes d'un effet proliferatif induit par des peptides gastro-intestinaux et par des facteurs de croissance. La voie metabolique des polyamines et l'enzyme cle de leur biosynthese l'ornithine decarboxylase (odc) sont fondamentales dans la proliferation cellulaire. La regulation de cette enzyme par la cholecystokinine (cck) et la gastrine d'une part et par les facteurs de croissance de l'epiderne (egf) et des fibroblastes (fgf) d'autre part a ete etudiee dans un modele de cellules tumorales pancreatiques de rat. L'activite catalytique et les niveaux d'acide ribonucleique messager (arnm) de l'odc ont ete mesures apres stimulation par les differents peptides mitogeniques. L'analyse des courbes dose-reponse realisees avec les peptides de la famille cck/gastrine met en evidence que la stimulation de l'activite odc est mediee par un recepteur de type gastrine; ce resultat est confirme par l'utilisation d'antagonistes. L'occupation des recepteurs egf et fgf induit d'une maniere dose-dependante la stimulation de cette activite, le fgf etant le peptide le plus efficace (ec50=20 pmoles). L'utilisation d'un ester de phorbol activateur de la proteine kinase c met en evidence une relation directe entre cette kinase et l'activite odc. La cck et l'egf d'une part et la gastrine et le fgf d'autre part semblent emprunter des voies intracellulaires partiellement differentes pour stimuler l'activite odc. Le fgf augmente l'arnm de l'odc d'un facteur 2 a 3, visualise par hybridation d'une sonde radioactive d'adn complementaire de l'odc de rat. Ceci suggere un effet transcriptionnel de ce peptide sur l'expression du gene odc. L'ensemble de ces resultats, couples aux effets de ces peptides sur la croissance cellulaire, montre que la stimulation de l'od

L'expression du récepteur de somatostatine sst2, un médiateur critique de l'effet antiprolifératif de la somatostatine, est perdue dans la plupart des adénocarcinomes pancréatiques humains. Lorsqu'il est réexprimé dans les cellules cancéreuses pancréatiques, sst2 agit comme un suppresseur de tumeur en inhibant la croissance et l'angiogenèse tumorale. L'objectif de ma thèse était d'identifier les mécanismes moléculaires impliqués dans l'effet anti-angiogénique du récepteur sst2. Nous avons identifié la protéine anti-angiogénique TSP-1 comme cible de sst2 dont l'expression est augmentée dans les cellules cancéreuses pancréatiques exprimant sst2. Nos résultats ont mis en évidence le rôle critique de la TSP-1 dans l'effet anti-tumoral et anti-angiogénique du récepteur sst2, notamment in vivo sur le modèle de la CAM. TSP-1, exerce un effet anti-angiogénique direct sur les cellules endothéliales environnantes en induisant leur apoptose, et indirect en séquestrant et en inhibant ainsi l'action du VEGF, un facteur angiogénique sécrété par la tumeur pancréatique. D'autre part, nous avons démontré, sur des coupes de cancers humains (tissue microarrays), que sst2 et TSP-1 joueraient un rôle de rétrocontrôle négatif freinant la carcinogenèse pancréatique. Un autre mécanisme sous-jacent à l'effet anti-angiogénique de sst2 implique l'inhibition par ce récepteur de l'activation du facteur pro-angiogénique TGF-beta1 (Transforming growth factor -ß1) dans les cellules BxPC-3. Ce mécanisme implique l'inhibition, par sst2, de l'expression de la métalloprotéinase matricielle-9 (MMP-9), qui est une protéase impliquée dans le clivage de la forme latente du TGF-beta1 en une forme active
Somatostatin receptor sst2 behaves as a tumor suppressor when expressed and stimulated by its ligand somatostatin in pancreatic cancer cells. Re-introducing sst2 into the human pancreatic cancer cells results in a decrease of tumor progression and angiogenesis. However, the intracellular mechanisms responsible for sst2-dependent inhibition of tumor angiogenesis are unknown. We first showed that sst2 up-regulates the expression of the secreted angio-inhibitory factor thrombospondin-1 (TSP-1) in pancreatic cancer cells. The chick chorioallantoic membrane was used as an experimental in vivo model to demonstrate that TSP-1 is a critical effector of sst2 inhibitory role on neoangiogenesis and oncogenesis induced by pancreatic cancer cells. TSP-1 inhibited tumor cell-induced neoangiogenesis by inducing endothelial cell apoptosis and by directly sequestering the proangiogenic factor VEGF, and subsequently inactivating its angiogenic action on endothelial cells. Using human pancreatic tissue-microarrays, we have shown An up-regulation of both sst2 and TSP-1 tumor suppressors in precancerous lesions which may function as an early negative feedback to restrain pancreatic carcinogenesis. As an alternative mechanism underlying sst2 angio-inhibitory activity, we also showed that this receptor decreases the activation of the pro-angiogenic factor TGF-beta1 secreted by BxPC-3 cells. Sst2 blocks TGF-ß1 activation by down-regulating the expression of the matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), a protease which cleaves and activates the secreted latent form of TGF-beta1 in an active form

La cholecystokinine et la gastrine sont impliques dans les processus secretoires et proliferatifs des cellules acineuses pancreatiques. La gastrine stimule la proliferation des cellules acineuses tumorales pancreatiques de rat (ar4-2j) exprimant les deux recepteurs cck (rccka/rcckb). Les mecanismes intra-cellulaires impliques dans le controle de la proliferation cellulaire sont mal definis. Nous avons etudies dans les cellules ar4-2j le role relatif des rccka et rcckb dans la mobilisation du ca#2#+#i et la secretion d'amylase stimulees par la cck et la gastrine. Les antagonistes des recepteurs cck, nous ont permis de montrer que la cck via rccka et rcckb et la gastrine via rcckb mobilisent le ca#2#+#i et stimulent la secretion d'amylase. A l'aide du pd135158 nous montrons l'existence de sites haute affinite gastrine egalement impliques dans la secretion d'amylase. La pancreatite aigue est une auto-digestion du pancreas induite par l'activation in-situ des enzymes pancreatiques au cours de laquelle les leucocytes stimules secretent des interleukines.

L’Adénocarcinome Canalaire Pancréatique (ACP), la forme majeure de cancer du pancréas, est un des cancers les plus mortels du fait de son agressivité d’invasion locale et de dissémination vasculaire et de l’absence de méthode de détection précoce de la maladie. Nous avons développé un nouveau modèle d’invasion in vivo, sur la membrane chorio-allantoïdienne de l’embryon de poulet, permettant d’analyser les mécanismes d’interactions entre les cellules tumorales pancréatiques et leur microenvironnement. Nous avons montré que dans ce modèle les gènes codant pour les protéines sécrétées nétrine-1 et CXCL4L1/PF4v1 sont surexprimés dans les cellules tumorales au cours du processus d’invasion et que cette surexpression est également retrouvée dans les échantillons de patients humains. Nos études fonctionnelles ont indiqué que la nétrine-1 et CXCL4L1 pourrait jouer le rôle de régulateurs de la progression tumorale selon le modèle suivant : a) la chimiokine CXCL4L1 exercerait de façon paracrine une activité angiostatique sur les cellules endothéliales de l’ACP alors que b) la nétrine-1 aurait une activité pro-tumorale en agissant à la fois sur les cellules tumorales et sur les cellules endothéliales. Ces résultats ont permis d’une part de valider notre modèle en confirmant que les gènes surexprimés sélectionnés peuvent être impliqués dans la progression tumorale chez les patients. D’autre part, notre étude a permis de démontrer que les protéines CXCL4L1 et nétrine-1 constituent de nouvelles cibles thérapeutiques et/ou diagnostiques potentielles pour le cancer du pancréas
Pancreatic Ductal Adenocarcinoma (PDAC), the major form of pancreatic cancer, is one of the deadliest cancers because of its propensity for local invasion and vascular dissemination and the lack of early diagnostic strategy. We have developed a new in vivo invasion model, on the chick embryo chorioallantoic membrane, allowing the analyze of mechanisms governing interactions between pancreatic tumor cells and their host microenvironment. We showed in its model that the genes encoding netrin-1 and CXCL4L1/PF4v1 secreted proteins are up-regulated in tumor cells in the course of the invasion process and we confirmed these up-regulation was also observed in human patients. Our functional studies indicated that netrin-1 and CXCL4L1 may play regulator roles in tumor progression according to the following model: a) CXCL4L1 chimiokine may have an angiostatic activity on endothelial cells by a paracrine mechanism of action whereas b) netrin-1 may have a pro-tumoral activity by acting on both endothelial and tumor cells. These results allowed in one hand to validate our model by showing that selected up-regulated genes may be involved in PDAC progression in human patients. On the other hand, our work provided evidence that CXCL4L1 and netrin-1 constitute new potential therapeutic and/or diagnostic targets for pancreatic cancer