Academic literature on the topic 'Cellules dendritiques'

Il y a de plus en plus de preuves du rôle des mécanismes épigénétiques dans le développement des cancers et des maladies auto-immunes. Dans la plupart des cas, le mode d'action précis n'est pas connu, cependant l'hypométhylation de l'ADN et l'acétylation des histones sont couramment observées et ont montrées des effets sur le système immunitaire. Or les cellules dendritiques (DC) sont des cellules présentatrices d'antigènes professionnelles qui jouent un rôle majeur au niveau du système immunitaire. Il nous a donc paru important de tester l'impact de deux drogues immunomodulatrices utilisées en clinique humaine, un agent hypométhylant, la 5-azacytidine (5-AZA), et un inhibiteur d'histone désacétylase, l'acide valproïque (VPA). Ces effets ont été mesurés sur le phénotype et la fonction de DC dérivées de monocytes humains. Outre son impact sur la maturation des DC et la diminution de sécrétion des cytokines IL-10 et IL-27 des DC traitées par 5-AZA, il existe une augmentation de la réponse Th17 chez des patients traités par cette drogue. Le VPA, quant à lui, modifie significativement le phénotype et la fonction des DC matures en entraînant une diminution de l'expression des molécules de costimulation de la sécrétion d'IL-12p70, d'IL-10, d'IL-23. La sécrétion d'IFN-γ par les lymphocytes CD4+ (profil Th1) est également diminuée. Tout ceci suggère une diminution de la capacité allo-stimulatrice des DC traitées au VPA. L'ensemble des effets de ses drogues in vitro suggèrent un rôle important de celles-ci dans la manipulation des DC dans un contexte d'immunothérapie anticancéreuse ou de maladies auto-immunes<br>There is growing evidence for the role of epigenetic mechanisms in the development of cancer and autoimmune diseases. In most cases, the precise mechanism is not known, however, DNA hypomethylation and histone acetylation are commonly observed and have shown effects on the immune system. Dendritic cells (DC) are the professional antigen presenting cells that play a major role in the immune system. Thus, we thought it was important to assess the impact of two immunomodulatory drugs used in the routine clinic, namely the hypomethylating agent, 5-azacytidine (5-AZA) and the histone deacetylase inhibitor, valproic acid (VPA). The effects of these drugs were measured on phenotype and function of human monocyte-derived DC. In addition to its impact on DC maturation and secretion of IL-10 and IL-27, we observed an increase of Th17 response in patients treated with 5-AZA. On the other hand, VPA, significantly altered the phenotype and function of mature DC resulting in a decreased expression of costimulatory molecules, and decreased secretion of IL-12p70, IL-10, and IL-23. Consequently, the secretion of IFNγ by CD4+ T cells (Th1 profile) was also reduced suggesting a decreased of allo-stimulatory capacity of DC treated with VPA. Taken together, the latter findings suggest an important role of these epigenetic drugs for the manipulation of DC in the context of cancer immunotherapy or treatment of auto-immune diseases

Leur pouvoir exceptionnel de capture et d'appretement des antigenes et de maturation fonctionnelle font des cellules dendritiques (cd) les seules cellules presentatrices d'antigene aptes a initier les reponses immunitaires t a partir de lymphocytes naifs. La possibilite d'introduire des antigenes dans les cd et de manipuler leurs fonctions autorise le developpement de nouvelles strategies d'immunotherapie specifique. Dans cette these, nous demontrons que les adenovirus recombinants du sous-groupe c sont extremement prometteurs pour vehiculer des molecules vaccinales dans les cd ex vivo. En effet, ils accroissent les capacites immunostimulatrices des cd humaines et cooperent avec les facteurs de maturation des cd. Cependant, le transfert genique necessite un contact prolonge avec un nombre de particules virales eleve du fait de l'absence de car (coxsackie and adenovirus receptor), le recepteur d'attachement de la fibre des adenovirus du sous-groupe c a la surface des cd. Le remplacement de cette fibre par celle d'adenovirus appartenant a d'autres sous-groupes nous permet d'ameliorer le tropisme dendritique des vecteurs du sous-groupe c. Les vecteurs porteurs d'une fibre d'adenovirus du sous-groupe b, dont le recepteur cellulaire est a ce jour inconnu, se revelent en effet 100 fois plus efficaces que les vecteurs non modifies pour transferer et exprimer des genes dans les cd. Cette superiorite est liee a une penetration intracellulaire accrue et plus rapide, et a une meilleure expression des genes transferes lors de la maturation des cd. De plus, elle s'accompagne d'une meilleure presentation des antigenes codes par les genes transferes aux lymphocytes t. Les adenovirus du sous-groupe c porteurs d'une fibre d'adenovirus du sous-groupe b sont donc des vecteurs d'avenir en immunotherapie basee sur l'administration de cd genetiquement modifiees ex vivo et permettront peut-etre d'adresser directement les antigenes aux cd in vivo.

Partant d'une etude sur le retentissement de l'infection par vih sur l'hematopoiese, ce travail s'est focalise sur la differenciation des cellules dendritiques (dc) avant d'aborder leur interaction avec le vih. En cultivant cellules cd34+ de sang de cordon avec du gm-csf et du tnf-a, nous avons mis en evidence des etapes de la differenciation des dc et etudie l'effet de differentes cytokines. Nous avons montre que l'addition de scf permet d'obtenir un plus grand nombre de dc sans influencer leur differenciation et que dans ces conditions, la population cd34+ de depart acquiert une forte expression de cd13 avant de se differencier en dc et d'exprimer cd1a. Une population cd13hi lin - qui comprend des precurseurs myeloides, dont ceux des dc a alors ete identifiee. Dans un second temps, nous avons montre qu'en potentialisant l'effet du scf, le flt-3 ligand favorise la proliferation des precurseurs hematopoietiques sans influencer de facon majeure la differenciation des dc alors que l'il-4 et l'il-13 favorisent la differenciation des dc principalement en inhibant celle des macrophages. Leur utilisation apres le 5eme jour de culture permet de plus de reduire leur effet inhibiteur sur la croissance cellulaire et d'obtenir un plus grand nombre de dc. Elles induisent egalement au niveau des dc une augmentation d'expression de cd1a et une diminution de cd14. Nous avons par la suite montre que les dc et leurs precurseurs sont susceptibles au vih mais que leur infection n'influence pas de facon majeure leur differenciation leur phenotype et leur fonction. Nous avons ensuite etudie la capacite des monocytes sanguins a se differencier en macrophages en presence de m-csf et dc en presence de gm-csf et de l'il-4. Dans cette derniere condition la differenciation des monocytes en dc se deroule sans proliferation et se caracterise par une perte d'expression de cd14, l'acquisition de cd1a et d'une forte capacite a stimuler la rlm. Lorsque l'on induit par du m-csf, des monocytes a se differencier en macrophages, ces derniers conservent tardivement la capacite de se differencier en dc. Ces resultats suggerent que l'engagement des monocytes vers la voie de differenciation des dc ou des macrophages est finement regulee par leur environnement cytokinique et souligne le lien etroit existant entre ces deux types de cellules presentatrices d'antigene.

Les cellules dendritiques (DCs) jouent un rôle essentiel dans la réponse immunitaire. En effet leur fonction de présentation de l’antigène les place au cœur de l’induction de la réponse immunitaire adaptative. Ceci, les rends vulnérables aux attaques des agents pathogènes. En effet de nombreux agents pathogènes détournent la réponse des DCs. Je me suis donc proposé d’étudier la réponse des DCs à Tropheryma whipplei, Coxiella burnetii, Brucella abortus et Orientia tsutsugamushi. J’ai pu mettre en évidence un défaut de maturation des DCs infectées par C. burnetii et B. abortus, liée à un défaut de la voie de l’interféron (IFN) de type I et de secretion de l'IFN-b. La deuxième partie de ma thèse replace le système immunitaire inné dans le cadre de l’immunité tissulaire humaine. Je me suis premièrement intéressé aux macrophages placentaires. J’ai pu démontrer que la capacité des macrophages placentaires à former des MGCs est altérée lors d’une chorioamniotite, ce qui laisse supposer que ces cellules géantes jouent un rôle dans le maintient de la tolérance fœto-maternelle. Deuxièmement je me suis intéressé aux DCs placentaires (plaDCs). J’ai ainsi put démontrer que les plaDCs sont de véritables DCs myéloïdes conditionnées par leur environnement direct ou hormonal au cours de la grossesse. Mon travail illustre deux concepts, le premier démontre la nécessité d’utiliser des techniques à haut débit pour identifier les perturbations induites par plusieurs agents pathogènes. Le deuxième démontre que l’environnement des cellules immunitaires participe fortement à leurs réponses face à des agents pathogènes mais également sur leur phénotype et fonction<br>Dendritic cells (DCs) play a key role in the immune response. Indeed, their antigen presenting function allows them to be considered as the main inducers of adaptive response. This pivotal role also makes vulnerable to pathogen attacks. Indeed, numerous pathogens target DC response to avoid a microbicidal adaptive immunity to take place. To understand these mecanisms, I investigated the response of DCs to T. whipplei, C. burnetii, B. abortus and O. tsutsugamushi. I could highlight a phenotypic but not functional defect of maturation in DCs infected by C. burnetii and B. abortus, which was related to a defect in type I IFN response. Indeed, C. burnetii and B. abortus did not induce the production of IFN-b and induced an abnormal phosphorylation of MAPKs, known to participate to DC maturation. In this study, I could demonstrate that C. burnetii and B. abortus interfere with type I IFN response. The second part of my thesis dealt with innate immune system in the human tissue. First I interested myself in placental macrophages. I demonstrated that placental macrophages ability to form MGCs was altered in chorioamnionitis, suggesting that MGCs play a role in tolerance as they disappear in an infectious pathology. Second, I interested myself in placental DCs (plaDCs) for which I could conclude that plaDCs are true myeloid DCs that are polarized by their microenvironment. My work highlight two concepts, the first one demonstrate the necessity of high throughput methods for the analysis of cell response to several pathogens. The second concept demonstrates that direct environment or hormones can affect immune cells response to pathogen but also their phenotype and function

Au cours de ces études, nous avons montré la capacité de l'association GM-CSF/IFN-α à différencier des CD à partir de monocytes isolés de donneurs sains (ou CD/IFN). Les CD/IFN stimulent plus efficacement les lymphocytes T CD8+, aussi bien les cellules TCD4+ mémoires mais plus faiblement lymphocytes T CD4+ naifs que les CD/IF-4. Les CD/IFN induisent plus efficacement la génération des cellules Th1 et Tr1. Lorsque les monocytes sont isolés de patients infectés par le VIH, les CD/IFN et CD/IL-4 stimulent de la même manière les lymphocytes T CD8+ mais plus faiblement les lymphocytes T CD4+. En présence d'anticorps anti-IL-10, la prolifération de lymphocytes T CD4+. .<br>In these studies, we have demonstrated the ability of the GM-CSF/IFN-α combination to differentiate DC from monocytes isolated from healthy donors. These IFN-DCs stimulatemore efficiently CD8+T lymphocytes, stimulate as efficiently memory CD4+ T cells but stimulate weakly naive CD4+ T lymphocytes, as compared with IL-4-DC. IFN-DC also induce stronger generation of Th1 et Tr1 cells. When derived from monocytes isolated from HIV-infected patients, both population stimulate CD8+ T lymphocytes but weakly stimulate CD4+ T cells. In the presence of anti-il-10 neutralizing antibodies, the proliferation of CD4+ T cells induced by DC is significantly.

Les cellules dendritiques (DC) sont des cellules présentatrices d'antigènes qui jouent un rôle essentiel dans l'orchestration de la réponse immunitaire. Notre projet a consisté à étudier l'influence du microenvironnement tissulaire sur les propriétés phénotypiques et fonctionnelles de DC. A l'aide d'une lignée de cellules épithéliales biliaires de rats (RLEC), ns avons analysé l'influence de l'environnement hépatique sur la différenciation de monocytes en DC. Nous avons démontré que cet environnement supplémenté en IL-4 favorise la différenciation de DC présentant des caractéistiques similaires à celles desDC différenciées en présence de cellules hépatiques humaines et à cellesdes DC humaines détectées in vivo : un phénotype CD11c/CD14/CD123, un défaut de sécrétion d'IL-12, une forte capacité à induire la prolifération de lymphocytes T allogéniques et à favoriser une réponse immunitaire de type Th2. Ainsi, nos résultats montrent que les RLEC représentent un environnement intéressant pour étudier la différenciation des DC hépatiques et pour analyser l'influence de molécules ou d'agents pathogènes hépatotropes sur la modulation de leurs propriétés fonctionnelles. Puis ns avons analysé l'influence de l'environnement tumoral sur les aptitudes fonctionnelles des DC et montré que les cytokines immunosuppressives libérées par les cllules tumorales rénales diminuent la capacité des DC chargées par ces cellules tumorales à activer in vitro des lymphocytes. Ns montrons donc que les DC présentent une grande plasticité phénotypique et fonctionnelle et que leurs propriétés sont dépendantes de l'environnement dans lequel elles évoluent.

Les cellules dendritiques (CD) jouent un rôle central dans le développement et la régulation de l'immunité. Elles sont rares et difficiles à isoler, c'est pourquoi nous avons optimisé la production de ces cellules in vitro à partir des précurseurs myéloides en présence du GM-CSF et d'IL-4. La génération et les propriétés phénotypiques et fonctionnelles de ces cellules sont étroitement liées aux conditions de culture, aux facteurs utilisés et au microenvironnement cellulaire. Dans ce travail, nous montrons que la génération des CD à partir de la moelle osseuse ainsi que leur activité immunomodulatrice peuvent être modulées par les eicosanoides. Les CD possèdent toute la machinerie enzymatique requise à la biosynthèse des PGs et des LTs et n'ont pas besoin de substrat exogène pour produire suffisamment de PGE2 et LTB4 quantifiable par ELISA et par chromatographie à phase gazeuse. En terme d'immunomodulation, les eicosanoides affectent l'expression des molécules de co-stimulation, la capacité des CD à activer les lymphocytes T ainsi que la production d'IL-10 et d'IL-12. L'activation des CD par du LPS induit une forte expression de la protéine COX-2 responsable d'une importante production de PGE2. Ce médiateur lipidique inhibe considérablement la production d'IL-12 par les CD via un mécanisme dépendant de l'IL-10. Ceci permet de comprendre pourquoi ces cellules sont capables d'induire le phénomène de tolérance. L'interaction entre les eicosanoides peut moduler le métabolisme de l'AA et aboutir à une production régulée des eicosanoides. Nous montrons que la PGE-2 inhibe la voie 5-LO responsable de la biosynthèse de LTB4. Cette inhibition médiée par l'IL-10, porte essentiellement sur l'expression de la protéine membranaire qui fixe et présente l'AA à la 5-LO, appelée FLAP. Enfin, la PGE2 module les fonctions des cellules dendritiques via un mécanisme faisant intervenir essentiellement les récepteurs EP2 et EP4.