Academic literature on the topic 'Cellules hépatiques – Croissance – Régulation'

Le tissu adipeux est le principal organe de stockage d’énergie permettant d’assurer un équilibre entre les besoins et les apports chez de nombreux animaux. En dehors de ce rôle métabolique, il a un intérêt particulier chez les animaux producteurs de viande, car il détermine en partie la valeur commerciale de la carcasse et la qualité de la viande. Le tissu adipeux est constitué de cellules appelées adipocytes, capables de synthétiser des acides gras, de les estérifier en triglycérides, et ultérieurement d’hydrolyser ces lipides pour mettre les acides gras à la disposition des autres tissus. Son développement se déroule en trois étapes successives : prolifération cellulaire, différenciation et enfin grossissement des adipocytes. L’ontogenèse du tissu se fait à partir de cellules précurseurs (adipoblastes) qui se multiplient. Sous l’influence de gènes de détermination, ces cellules s’engagent dans le processus de différenciation et acquièrent en plusieurs étapes les caractéristiques fonctionnelles de l’adipocyte. La mise en place des différents dépôts adipeux chez les bovins a lieu durant la vie foetale. Pendant cette période et durant le début de la vie postnatale, la prolifération des cellules adipeuses est très active. Ensuite, l’hypertrophie devient le facteur prépondérant de la croissance du tissu adipeux. Les dépôts adipeux représentent environ 5 % du poids du corps d’un veau nouveau- né. Ce pourcentage reste stable durant les 3 premiers mois de la vie postnatale, puis s’accroît de plus en plus rapidement et atteint environ 25 % chez l’adulte. Le développement des tissus adipeux ainsi que la répartition des dépôts dans les différents sites anatomiques sont variables selon le génotype des animaux et selon le niveau des apports alimentaires. Cependant, les connaissances sur la régulation de la différenciation et de la croissance du tissu adipeux ne sont pas encore suffisantes pour réaliser totalement la maîtrise de l’adiposité.

Les récepteurs membranaires contrôlent les mécanismes essentiels tels que la croissance, l’adhésion, la différenciation et le métabolisme cellulaires via l’activation de voies de signalisation spécifiques. Il apparaît désormais que ces récepteurs ne signalent pas seulement depuis la surface des cellules, mais également, depuis des compartiments intracellulaires, en particulier les endosomes, seulement après avoir été internalisés avec leurs ligands via des voies d’endocytose différentes. Cette synthèse illustre comment une telle compartimentation spatio-temporelle de la transduction du signal permet un degré supplémentaire de régulation des processus cellulaires engagés.

Le facteur de croissance myostatine initialement identifié chez la souris, est un régulateur négatif de la masse musculaire. Des mutations naturelles ou expérimentales dans le gène codant ce facteur sont à l’origine d’un phénotype d’hypermuscularité, notamment chez les bovins culards. La myostatine régule la myogenèse et la balance atrophie/hypertrophie musculaire. Elle intervient dès la vie fœtale en contrôlant la prolifération des cellules musculaires et donc le nombre total de fibres musculaires. Pendant la vie postnatale elle participe au contrôle de la taille des fibres musculaires en régulant l’activité des cellules satellites et la synthèse protéique. Elle est également impliquée dans la fonte musculaire. Il semblerait qu’elle intervienne aussi dans le contrôle de l’adipogenèse et de l’ostéogenèse. Cette revue fait le point sur l’état des connaissances actuelles concernant l’expression et l’activité de ce facteur et leur régulation moléculaire. Ces données permettront à terme d’envisager une utilisation raisonnée de ces connaissances en agronomie pour la production de viande.

Anogeissus leiocarpus (DC.) Guill. & Perr. (Combretaceae) et Combretum collinum Fresen. (Combretaceae) sont deux plantes de la flore ivoirienne couramment utilisées pour traiter plusieurs pathologies telles que les affections cutanées, le paludisme et la fatigue générale. Ce travail s’inscrit dans le cadre de la valorisation de cette flore. Il vise donc à évaluer l’activité antibactérienne des extraits méthanoliques bruts des feuilles de Combretum collinum et des écorces de racines de Anogeissus leiocarpus sur la croissance "in vitro" des souches de Staphylococcus aureus résistantes à la méticilline. La méthode de diffusion en milieu gélosé (solide) a été utilisée pour évaluer la sensibilité des souches bactériennes aux extraits et à déterminer les concentrations minimales inhibitrices (CMI), Quant au screening phytochimique, il a été réalisé par une chromatographie sur couche mince (CCM). La concentration minimale inhibitrice est comprise entre 0,62 mg/ml et 1,25 mg/ml pour Anogeissus leiocarpus et est de 0,325 mg/ml pour Combretum collinum. Le screening phytochimique a révélé la présence de flavonoïdes et de tanins dans l’extrait méthanolique de Anogeissus leiocarpus alors que dans l’extrait méthanolique de Combretum collinum, ce sont des acides phénoliques qui ont été mis en évidence. Il ressort donc que ces deux plantes sont dotées d’un important pouvoir antibactérien et contiennent plusieurs composés chimiques. Elles pourraient donc constituer des voies de prospection pour la recherche de nouvelles molécules antibactériennes en réalisant une étude bio-guidée des extraits bruts et en évaluant leur cytotoxicité sur des cellules hépatiques saines.Mots clés: Antibactérienne, plantes médicinales, flore ivoirienne, extraits methanoliques English Title: Phytochemical screening of methanolic extracts from leaves of Combretum collinum and roots of Anogeisus leiocarpus and in vitro antibacterial effect on multiresistant strains of Staphylococcus aureus Both Anogeissus leiocarpus (DC.) Guill. & Perr. (Combretaceae) and Combretum collinum Fresen. (Combretaceae) are Ivorian national flora plants commonly used in treating skin disorders, malaria, and general fatigue. The current study consists of the valorization of this flora, and aims therefore at revealing antibacterial activity of the methanol crude extracts obtained from stem bark and leaves of the respective plants, against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains. Agar gel diffusion method was used to assess bacteria susceptibility, and broth dilution method allowed determination of minimum inhibition concentrations (MICs). These parameters varied from 0.62 mg/ml to 1.25 mg/ml for Anogeissus leiocarpus, while they reached 0.325 mg/ml for Combretum collinum. In addition, phytochemical screening brought about flavonoids and tanins for the plant, and phenolic acids for the other one. In conclusion, these named plants contain several chemical compounds with antibacterial properties, and could be of great interest in the search of new molecular compounds provided with antibacterial activity through bio-guided experiments. Furthermore, they could best hold value by testing those methanol extracts over hepatic sane cells for cytotoxicity assessment. Keywords: antibacterial, medicinal plants, Ivorian national flora, methanolic extracts.

Ce numéro de la revue INRA Productions Animales contient un dossier consacré aux dernières avancées de la recherche sur le foie gras. En effet, la démocratisation de la consommation de ce produit haut de gamme a été permise notamment par les efforts de recherche et développement sur l’élevage des palmipèdes à foie gras et la maîtrise de la qualité du produit. Ce dossier est l’occasion de faire en préalable quelques rappels sur cette belle histoire ! Un peu d’histoire La pratique du gavage est une tradition très ancienne, originaire d’Egypte, dont les traces remontent à 2 500 avant JC. Elle avait pour objectif d’exploiter la capacité de certains oiseaux à constituer des réserves énergétiques importantes en un temps court pour disposer d’un aliment très riche. Si les basreliefs datant de l’ancien empire égyptien attestent de la pratique du gavage, il n’existe pas de preuves que les égyptiens consommaient le foie gras ou s’ils recherchaient la viande et la graisse. Ces preuves sont apparues pour la première fois dans l’empire romain. Les romains gavaient les animaux avec des figues et pour eux le foie constituait le morceau de choix. Le nom de jecur ficatum, signifiant « foie d’un animal gavé aux figues », est ainsi à l’origine du mot foie en français. La production de foie gras s’est développée dans le Sud-ouest et l’Est de la France aux XVIIe et XVIIIe siècles avec le développement de la culture du maïs. Le foie gras est aujourd’hui un met inscrit au patrimoine culturel et gastronomique français (article L. 654-27-1 du code rural défini par la Loi d’Orientation Agricole de 2006). Le contexte de la production de foie gras Avec près de 72% de la production mondiale en 2012, la France détient le quasi monopole de la production de foie gras. Les autres pays ayant des productions significatives sont la Hongrie et la Bulgarie en Europe Centrale, avec environ 10% pour chacun de ces pays, mais aussi l’Espagne avec 3% de la production. L’Amérique du nord et la Chine représentent les deux autres pôles de production les plus significatifs, mais avec moins de 2% du marché. La production française a connu un essor considérable, sans doute le plus important de toutes les productions agricoles, passant de 5 880 tonnes en 1990 à plus de 19 000 tonnes en 2012. A l’origine, le foie gras était principalement obtenu par gavage des oies, longtemps considérées comme l’animal emblématique de cette production. Aujourd’hui, le canard mulard, hybride d’un mâle de Barbarie (Cairina Moschata) et d’une cane commune (Anas Platyrhynchos), est plus prisé (97% des palmipèdes gavés en France). En France, l’oie a vu de ce fait sa part relative pour la production de foie gras diminuer, et c’est la Hongrie qui contrôle 65% de la production mondiale de foie gras d’oie. Toutefois, cette espèce ne représente que 10% de la production mondiale. La France est également le principal pays consommateur de foie gras avec 71% du total, l’Espagne se classant au second rang avec environ 10%. Compte tenu de son image de produit de luxe et d’exception, le foie gras est consommé un peu partout dans le monde lors des repas de haute gastronomie. Les grandes avancées de connaissance et l’évolution des pratiques d’élevage L’amélioration des connaissances sur la biologie et l’élevage des palmipèdes à foie gras a permis de rationnaliser les pratiques d’élevage et d’améliorer la qualité du produit. Plusieurs laboratoires de recherche et structures expérimentales, ayant leurs installations propres et/ou intervenant sur le terrain, ont contribué à l’acquisition de ces connaissances : l’INRA avec l’Unité Expérimentale des Palmipèdes à Foie Gras, l’UMR Tandem, le Laboratoire de Génétique Cellulaire, la Station d’Amélioration Génétique des Animaux et l’UR Avicoles, l’Institut Technique de l’AVIculture, la Ferme de l’Oie, le Centre d’Etudes des Palmipèdes du Sud Ouest, le LEGTA de Périgueux, l’ENSA Toulouse, l’ENITA Bordeaux et l’AGPM/ADAESO qui a mis fin en 2004 à ses activités sur les palmipèdes à foie gras. Aujourd’hui ces structures fédèrent leurs activités dans un but de rationalité et d’efficacité. Les avancées des connaissances et leur transfert dans la pratique, associés à une forte demande du marché, sont à l’origine de l’explosion des volumes de foie gras produits. Ainsi, la maîtrise de la reproduction couplée au développement de l’insémination artificielle de la cane commune et à la sélection génétique (Rouvier 1992, Sellier et al 1995) ont permis la production à grande échelle du canard mulard adapté à la production de foie gras. En effet, ses géniteurs, le mâle de Barbarie et la femelle Pékin, ont fait l’objet de sélections spécifiques basées sur l’aptitude au gavage et la production de foie gras de leurs descendants. La connaissance des besoins nutritionnels des animaux et le développement de stratégies d’alimentation préparant les animaux à la phase de gavage ont également été des critères déterminants pour la rationalisation d’un système d’élevage (Robin et al 2004, Bernadet 2008, Arroyo et al 2012). La filière s’est par ailleurs structurée en une interprofession (le Comité Interprofessionnel du Foie Gras - CIFOG) qui soutient financièrement des travaux de recherches et conduit des actions (organisation de salons du foie gras par exemple) visant à rendre accessibles toutes les avancées de la filière. Ainsi, l’amélioration du matériel d’élevage (gaveuse hydraulique et logement de gavage) a engendré des gains de productivité considérables (Guy et al 1994). Par exemple, en 20 ans, la taille d’une bande de gavage est passée de deux cents à mille individus. Enfin, la construction de salles de gavage, dont l’ambiance est parfaitement contrôlée autorise désormais la pratique du gavage en toute saison. Des études ont aussi permis de déterminer l’influence des conditions d’abattage et de réfrigération sur la qualité des foies gras (Rousselot-Pailley et al 1994). L’ensemble de ces facteurs a contribué à ce que les possibilités de production soient en cohérence avec la demande liée à un engouement grandissant pour le foie gras. Les pratiques d’élevage actuelles Aujourd’hui, le cycle de production d’un palmipède destiné à la production de foie gras comporte deux phases successives : la phase d’élevage, la plus longue dans la vie de l’animal (11 à 12 semaines chez le canard ou 14 semaines chez l’oie) et la phase de gavage, d’une durée très courte (10 à 12 jours chez le canard ou 14 à 18 jours chez l’oie). La phase d’élevage se décompose elle même en trois étapes (Arroyo et al 2012). Pendant la phase de démarrage (de 1 à 4 semaines d’âge) les animaux sont généralement élevés en bâtiment clos chauffé et reçoivent à volonté une alimentation granulée. Pendant la phase de croissance (de 4 à 9 semaines d’âge), les animaux ont accès à un parcours extérieur. Ils sont nourris à volonté avec un aliment composé de céréales à 75% sous forme de granulés. La dernière phase d’élevage est consacrée à la préparation au gavage (d’une durée de 2 à 5 semaines) grâce à la mise en place d’une alimentation par repas (220 à 400 g/j). Son objectif est d’augmenter le volume du jabot et de démarrer le processus de stéatose hépatique. Pendant la phase de gavage les animaux reçoivent deux (pour le canard) à quatre (pour l’oie) repas par jour d’une pâtée composée à 98% de maïs et d’eau. Le maïs est présenté soit sous forme de farine (productions de type standard), soit sous forme d’un mélange de graines entières et de farine, soit encore sous forme de grains modérément cuits (productions traditionnelles ou labellisées). En France, on distingue deux types d’exploitations. Dans les exploitations dites en filière longue et de grande taille (au nombre de 3 000 en France), les éleveurs sont spécialisés dans une des phases de la production : éleveurs de palmipèdes dits « prêt-à-gaver », gaveurs ou éleveurs-gaveurs. Ce type de production standard est sous contrôle d’un groupe ou d’une coopérative qui se charge des opérations ultérieures (abattage, transformation, commercialisation ou diffusion dans des espaces de vente à grande échelle). Il existe également des exploitations en filière courte qui produisent les animaux, transforment les produits et les commercialisent directement à la ferme et qui sont généralement de plus petite taille. Ces exploitations « fermières » ne concernent qu’une petite part de la production (10 à 15%), mais jouent un rôle important pour l’image de production traditionnelle de luxe qu’elles véhiculent auprès des consommateurs. Pourquoi un dossier sur les palmipèdes à foie gras ? Au-delà des synthèses publiées précédemment dans INRA Productions Animales, il nous a semblé intéressant de rassembler et de présenter dans un même dossier les avancées récentes concernant la connaissance de l’animal (articles de Vignal et al sur le séquençage du génome du canard et de Baéza et al sur les mécanismes de la stéatose hépatique), du produit (articles de Théron et al sur le déterminisme de la fonte lipidique du foie gras à la cuisson et de Baéza et al sur la qualité de la viande et des carcasses), ainsi que les pistes de travail pour concevoir des systèmes d’élevage innovants plus durables (article de Arroyo et al). L’actualité et les enjeux pour demain La filière est soumise à de nombreux enjeux sociétaux qui demandent de poursuivre les efforts de recherche. En effet, pour conserver son leadership mondial elle doit rester compétitive et donc maîtriser ses coûts de production tout en répondant à des attentes sociétales et environnementales spécifiques telles que la préservation de la qualité des produits, le respect du bien-être animal ou la gestion économe des ressources. Ainsi, la production de foie gras est parfois décriée eu égard à une possible atteinte au bien-être des palmipèdes pendant l’acte de gavage. De nombreux travaux ont permis de relativiser l’impact du gavage sur des oiseaux qui présentent des prédispositions à ce type de production : la totale réversibilité de l’hypertrophie des cellules hépatiques (Babilé et al 1998) ; l’anatomie et la physiologie des animaux de même que l’absence de mise en évidence d’une élévation du taux de corticostérone (considéré comme marqueur d’un stress aigu) après l’acte de gavage (Guéméné et al 2007) et plus récemment la mise en évidence de l’aptitude à un engraissement spontané du foie (Guy et al 2013). Le conseil de l’Europe a toutefois émis des recommandations concernant le logement des animaux qui préconisent, la disparition des cages individuelles de contention des canards pendant le gavage au profit des cages collectives. Par ailleurs, il recommande la poursuite de nouvelles recherches pour développer des méthodes alternatives au gavage. Parallèlement, à l’instar des autres filières de productions animales, la filière foie gras doit aussi maîtriser ses impacts environnementaux (voir aussi l’article d’Arroyo et al). Les pistes de recherches concernent prioritairement la maîtrise de l’alimentation, la gestion des effluents et des parcours d’élevage. Il reste donc de grands défis à relever pour la filière foie gras afin de continuer à proposer un produitqui conjugue plaisir et durabilité.Bonne lecture à tous !

La regulation de trois genes codant pour des inhibiteurs de proteases a serine (spi-2. 1, 2. 2, 2. 3) s'effectue au niveau transcriptionnel sous le controle de l'hormone de croissance, des glucocorticoides et de mediateurs inflammatoires. L'etude fonctionnelle de ces promoteurs a necessite la mise au point d'un systeme homologue de cultures primaires d'hepatocytes et l'obtention de condition de transfection ne modifiant pas l'inductibilite hormonale de ces cellules (anal. Biochem. , 204:147-51, 1992). Les resultats les plus originaux que nous avons obtenus dans ce travail sont les suivants: 1) le promoteur du gene spi-2. 1, qui est entierement dependant de la presence de la gh pour son expression, possede deux sites de reponse a cette hormone. Ces deux sites semblent fonctionner de maniere independante et sont differents du point de vue de leur sequence nucleotidique. 2) pour etre fonctionnel, la presence d'un site c/ebp et peut etre d'un site dbp, est requise pour ce promoteur. 3) lors d'une inflammation aigue, ce promoteur est reprime par le tnf-alpha et le tgf-beta. 4) enfin, le promoteur du gene spi-2. 3 qui est insensible a la gh, trouve l'origine de cette hormono-independante dans une insertion palindromique de 42pb reconnue par le facteur nfkb et qui interrompt le second site de reponse a la gh. L'ensemble de ces resultats est publie dans deux articles: nucleic acid research, 20:1061-1068, 1992 et european journal of biochemistry, sous presse

La régulation hormonale de la prolifération et de la différenciation cellulaire peut varier selon les types cellulaires ainsi que leur degré de transformation. Le but principal de ce travail était d'élaborer un système de cellules épithéliales en culture primaire et d'étudier les mécanismes de la régulation hormonale de leur croissance en fonction de leur capacité à exprimer certaines fonctions foetales et différenciées. L'élaboration d'un système de culture d'hépatocytes de rat nouveau-né, en voie de différenciation a permis d'étudier la régulation hormonale de la prolifération et de la différenciation des hépatocytes. Les hépatocytes de rat de 14 jours représentent une population de cellules diploïdes, qui sont synchronisées dans la phase Gi du cycle cellulaire au moment de l'isolement et qui expriment encore des fonctions immatures telle la production d' a-foetoprotéine. Suite à une stimulation par l'EGF et l'insuline ou l'EGF et le glucagon, les hépatocytes de rat de 14 jours ont une plus grande capacité à proliférer que les hépatocytes de rat adulte. Les seuls critères qui distinguent les populations d'hépatocytes de rats nouveau-né et adulte sont leur niveau de ploidie et leur degré de maturation. L'addition de dexaméthasone en présence de ces facteurs de croissance amènent une inhibition sélective de la production d'AFP par rapport à l'albumine, un changement généralement associé à une maturation des hépatocytes. De plus, la dexaméthasone induit une inhibition de la prolifération des hépatocytes en présence de EGF et de glucagon et non en présence d'EGF et d'insuline. Ces résultats mettent en évidence qu'il existe deux sentiers distincts par lesquels l'EGF peut être complémenté pour induire la prolifération des hépatocytes et que la dexaméthasone n'exerce un effet que sur celui utilisé par le glucagon. De plus, la prolifération et la maturation des hépatocytes peuvent être régulées de façon indépendante ou coordonnée. La dexaméthasone est le seul facteur parmi les facteurs testés capable d'induire une maturation des hépatocytes "in vitro". L'addition de DM50 ou de phénobarbital inhibe la prolifération des hépatocytes et permet de maintenir la production d ' -foetoprotéine ainsi que d'albumine. Parmi les événements induits précocement dans la phase préréplicative suite à une stimulation hormonale, plusieurs changements s'effectuent dans la synthèse, l'organisation et la phosphorylation des cytokératines. En effet, 1'addition d1 EGF induit une augmentation dans la phosphorylation de la cytokératine A sur le groupement tyrosine. Des analyses en immunofluorescence à l'aide d'anticorps monoclonaux dirigés spécifiquement contre les cytokératines A et D, anti-CK55 et anti-CK49 respectivement montrent que ce changement dans l'état de phosphorylation de la cytokératine A est associée à une réorganisation des filaments de cytokératines constituées de ces deux cytokératines A et D. D'autre part, la dexaméthasone induit une synthèse préférentielle des deux cytokératines majeures des hépatocytes, les cytokératines A et D. L'EGF n'influence pas cette réponse induite par la dexaméthasone. Cette néosynthèse préférentielle est associée à une inhibition sélective de la production d'a-foetoprotéine par rapport à l'albumine. Ces résultats montrent que les cytokératines sont vraisemblablement impliquées dans les réponses cellulaires induites par l'EGF et la néosynthèse de ces protéines est associée au programme de différenciation des hépatocytes.
Montréal Trigonix inc. 2018

Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2012-2013.
L'activité mécanique des cellules générée par l'interaction entre la matrice extracellulaire (MEC) et le cytosquelette d'actine est essentielle pour la régulation de l'adhésion, de l'étalement et de la migration des cellules lors du développement normal ou tumoral. La stimulation mécanique des cellules découle majoritairement des forces externes appliquées par la MEC ou bien des forces internes générées par la contraction de l'actomyosine. Ces stimuli mécaniques convergent aux intégrines situées aux points focaux d'adhérence (FA) reliant la MEC à l'actine fibrillaire. La formation des FA requiert des molécules adaptatrices pour l'actine, telle que la vinculine, ainsi que des molécules de signalisation, comme la FAK (« focal adhesion kinase ») ou les PKC (« protein kinase C »). Les filaments intermédiaires (FI) de kératines 8/18 (K8/K18) sont exprimés dans l'ensemble de l'épithélium simple, mais constituent les seuls FI présents dans les hépatocytes et les hépatomes. Bien que plusieurs évidences suggèrent une participation des FI K8/K18 dans la régulation de l'activité mécanique des cellules, le mécanisme exact demeure énigmatique. Les travaux présentés dans cette thèse examinent les mécanismes impliqués dans la modulation de l'activité mécanique des cellules par les FI K8/K18. Par une approche s'appuyant sur l'utilisation d'une pince optique et de substrats de rigidité variable, les résultats montrent que les FI K8/K18 contribuent à la rigidité cellulaire et aux mécanismes mécanosenseurs, en raison d'une modulation de la signalisation RhoA-ROCK responsable de la dynamique de l'actine fibrillaire, plutôt que de leurs propriétés viscoélastiques. Par ailleurs, la PKCô est identifiée comme un médiateur de la modulation de l'étalement et de la migration associée aux FI K8/K18 chez les hépatomes, via une boucle de rétroaction positive affectant la FAK et l'intégrine aux FA. En fait, ces éléments corrèlent avec l'assemblage d'un complexe formé de RACK1 « Receptor of Activated C Kinase 1», pi-intégrine, plectine, PKC et c-Src. À noter que les mécanismes dépendant de RhoA et PKC sont mutuellement impliqués dans la modulation de la migration et de la rigidité des cellules associées aux FI K8/K18. Dans leur ensemble, les résultats démontrent une implication incontestable des FI K8/K18 dans la modulation de l'homéostasie mécanique des cellules de l'épithélium simple.

Lors de reconstitution d’hôtes lymphopéniques avec des cellules B, la priorité du système immunitaire est d’assurer un taux d’IgM et un nombre de cellules B sécrétrices d’IgM normal pour se protéger des pathogènes du sang. En utilisant une méthode de transferts séquentiels de cellules B matures dans des hôtes RAG2ko, il a été montré qu’une population de cellules B préalablement établie dans l’hôte diminuait le nombre de cellules activées et le taux d’IgM d’une seconde population. Il existe donc un mécanisme de rétrocontrôle du nombre de cellules B sécrétrices d’IgM. Dans ce travail nous avons voulu vérifier que les immunoglobulines sont le facteur responsable de ce mécanisme. En utilisant différentes souris mutantes lors de transferts séquentiels, nous avons montré que les IgMs n’étaient pas responsables de ce mécanisme, en revanche Les IgGs permettent la régulation des cellules B activées et du niveau d’IgM. Pour comprendre comment les IgGs agissent, nous avons réalisé des transferts séquentiels en utilisant comme seconde population des cellules B de souris déficientes en FcRIIB (récepteur inhibiteur) ou SHIP. Ces cellules, malgré la présence d’une première population, ne sont pas inhibées dans leur production d’IgM. La régulation par les IgGs se fait donc via le récepteur FcRIIB et sa voie de signalisation. Un mécanisme de quorum-sensing permettrait aux cellules B sécrétrices d’IgM de réguler leur quantité via la détection de la densité d’IgG. L’absence de ce mécanisme provoquerait une activation incontrôlée des cellules B et des maladies auto-immunes

Ce travail est centré sur l'étude des mécanismes d'induction et de répression des signaux mitogènes et de motilité des hépatocytes. Le blocage de la prolifération et de la survie des cellules transformées représente un enjeu important dans le développement de traitement anti-cancéreux. Cet objectif, nous a conduit à : 1/ préciser l'implication de la voie MEK/ERK dans l'équilibre prolifération / motilité et démontrer l'incidence de MLCK dans l'intégration des signaux mitogènes dans les hépatocytes normaux ; 2/ analyser les mécanismes MEK/ERK dépendants, régulant la motilité et la prolifération des cellules issues d'hépatocarcinomes ; 3/ appréhender plusieurs techniques d'imagerie afin de visualiser au mieux la tumeur induite suite à l'injection de cellules cancéreuses en ectopique et en orthotopique. Toutes les informations obtenues à l'issue de ces différentes approches devraient nous permettre un meilleur suivi de la croissance tumorale in vivo et de définir de nouvelles cibles thérapeutiques.

L'influence de l'hormone de croissance (gh) sur les activites de glucuronidation hepatiques est etudiee chez des rats males, hypophysectomises ou non, et traites ou non avec du cortisol et de la thyroxine de facon a compenser l'absence d'hormones thyroidiennes et de glucocorticoides chez les animaux hypophysectomises. Deux doses de gh ont ete utilisees, la plus faible permettant de mimer un rythme de secretion de gh de type male, la plus forte permettant de mimer un rythme de secretion de type femelle. La gh agit de facon variable sur l'expression des enzymes de glucuronidation du paranitrophenol, de l'androsterone, de la testosterone, de la bilirubine et de l'oestrone, selon l'activite consideree. La gh diminue particulierement l'activite de glucuronidation de la bilirubine, vraisemblablement a un niveau transcriptionnel ou post-transcriptionnel. Cette influence ne s'apparente pas a un processus de feminisation par une exposition continue a l'hormone comme c'est le cas pour d'autres enzymes de metabolisation hepatiques, particulierement certaines monooxygenases a cytochrome p-450 ou certaines glutathion s-transferases (gsts), qui ont ete etudiees en parallele. Cette etude en parallele a par ailleurs montre l'existence d'une forte similitude de comportement de l'activite de glucuronidation de la bilirubine et de l'expression de la sous-unite 6 des gsts en fonction de l'hypophysectomie et des traitements utilises. La signification et les bases moleculaires de cette relation restent a etablir. La gh modifie egalement l'etat fonctionnel des enzymes de glucuronidation qui depend de l'environnement membranaire de ces enzymes, en interaction avec le traitement par le cortisol et la thyroxine. Cet effet est en relation avec une augmentation des lysophospholipides dans la membrane microsomale. En revanche, la faible influence de la gh sur differents parametres de fluidite membranaire, qui sont dependants de la composition en acides gras des microsomes elle-meme modifiee par la gh et l'hypophysectomie, ne semble pas etre en relation avec l'effet de cette hormone sur l'etat fonctionnel des enzymes de glucuronidation. La gh influence donc l'expression des enzymes de glucuronidation mais aussi leur etat fonctionnel, via la composition lipidique de la membrane microsomale. Les consequences sur le fonctionnement d'autres proteines membranaire reste a determiner

Les cyclines G sont des cyclines atypiques dont le rôle est complexe. Chez les mammifères, Cycline G1 est un régulateur négatif du cycle cellulaire qui induit un arrêt à la transition G2/M ainsi que de l’apoptose en réponse à des dommages de l’ADN. Dans certains contextes cellulaires, elle joue cependant un rôle positif dans la prolifération cellulaire. CyclineG2 est un régulateur négatif du cycle cellulaire, impliquée dans l’arrêt du cycle en G1/S. Chez la drosophile, CycG est le seul gène codant pour la Cycline G. Les dérégulations de CycG induisent une forte létalité et une instabilité du développement. Au cours de ma thèse, j’ai cherché à mieux comprendre le rôle de CyclineG de D. Melanogaster dans la prolifération et le cycle cellulaires. Ainsi, j’ai montré que la surexpression ubiquitaire de CycG produit des individus de petite taille. La surexpression de CycG inhibe la croissance cellulaire alors que son inactivation par ARN interférence tend à promouvoir la croissance. De plus, la surexpression de CycG induit un allongement du cycle cellulaire et une diminution du nombre de cellules. L’étude du cycle cellulaire après incorporation d'EdU m'a permis de montrer que Cycline G est impliquée dans la transition G1/S et dans la progression de la phase S. Par ailleurs, l'analyse du nombre de cellules des ailes où CycG est dérégulé montre que l'instabilité du développement observée est principalement due à une perte de la compensation entre croissance cellulaire et prolifération cellulaire. Ainsi, CyclineG est impliquée dans le contrôle négatif de la croissance et du cycle cellulaire. Ces deux fonctions semblent en faire un acteur important pour la stabilité du développement.