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Dissertations / Theses on the topic 'Cellules hépatiques – Croissance – Régulation'
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Paquereau, Laurent. "Régulation transcriptionnelle d'une famille multigénique hépatique codant pour des inhibiteurs de protéases à sérine : mécanismes moléculaires." Montpellier 2, 1992. http://www.theses.fr/1992MON20169.
Full textAbstract:
La regulation de trois genes codant pour des inhibiteurs de proteases a serine (spi-2. 1, 2. 2, 2. 3) s'effectue au niveau transcriptionnel sous le controle de l'hormone de croissance, des glucocorticoides et de mediateurs inflammatoires. L'etude fonctionnelle de ces promoteurs a necessite la mise au point d'un systeme homologue de cultures primaires d'hepatocytes et l'obtention de condition de transfection ne modifiant pas l'inductibilite hormonale de ces cellules (anal. Biochem. , 204:147-51, 1992). Les resultats les plus originaux que nous avons obtenus dans ce travail sont les suivants: 1) le promoteur du gene spi-2. 1, qui est entierement dependant de la presence de la gh pour son expression, possede deux sites de reponse a cette hormone. Ces deux sites semblent fonctionner de maniere independante et sont differents du point de vue de leur sequence nucleotidique. 2) pour etre fonctionnel, la presence d'un site c/ebp et peut etre d'un site dbp, est requise pour ce promoteur. 3) lors d'une inflammation aigue, ce promoteur est reprime par le tnf-alpha et le tgf-beta. 4) enfin, le promoteur du gene spi-2. 3 qui est insensible a la gh, trouve l'origine de cette hormono-independante dans une insertion palindromique de 42pb reconnue par le facteur nfkb et qui interrompt le second site de reponse a la gh. L'ensemble de ces resultats est publie dans deux articles: nucleic acid research, 20:1061-1068, 1992 et european journal of biochemistry, sous presse
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Guirouilh-Barbat, Josée. "Expression de l'hepatocyte growth factor dans les carcinomes hépatocellulaires humains, régulation de sa sécrétion par les myofibroblastes hépatiques humains et utilisation thérapeutique dans le cadre de la cirrhose." Bordeaux 2, 2000. http://www.theses.fr/2000BOR28750.
Full text
3
Tsaconas, Christos. "Croissance de cellules épithéliales de foie de rat, cellules primaires et lignées, dans des milieux dépourvus de sérum : effecteurs endogènes et activités fonctionnelles." Dijon, 1987. http://www.theses.fr/1987DIJOS020.
Full text
4
Baribault, Hélène. "Régulation hormonale de la prolifération, de la maturation et de l'expression des cytokératines des cultures d'hépatocytes en voie de différenciation." Doctoral thesis, Université Laval, 1986. http://hdl.handle.net/20.500.11794/33558.
Full textAbstract:
La régulation hormonale de la prolifération et de la différenciation cellulaire peut varier selon les types cellulaires ainsi que leur degré de transformation. Le but principal de ce travail était d'élaborer un système de cellules épithéliales en culture primaire et d'étudier les mécanismes de la régulation hormonale de leur croissance en fonction de leur capacité à exprimer certaines fonctions foetales et différenciées. L'élaboration d'un système de culture d'hépatocytes de rat nouveau-né, en voie de différenciation a permis d'étudier la régulation hormonale de la prolifération et de la différenciation des hépatocytes. Les hépatocytes de rat de 14 jours représentent une population de cellules diploïdes, qui sont synchronisées dans la phase Gi du cycle cellulaire au moment de l'isolement et qui expriment encore des fonctions immatures telle la production d' a-foetoprotéine. Suite à une stimulation par l'EGF et l'insuline ou l'EGF et le glucagon, les hépatocytes de rat de 14 jours ont une plus grande capacité à proliférer que les hépatocytes de rat adulte. Les seuls critères qui distinguent les populations d'hépatocytes de rats nouveau-né et adulte sont leur niveau de ploidie et leur degré de maturation. L'addition de dexaméthasone en présence de ces facteurs de croissance amènent une inhibition sélective de la production d'AFP par rapport à l'albumine, un changement généralement associé à une maturation des hépatocytes. De plus, la dexaméthasone induit une inhibition de la prolifération des hépatocytes en présence de EGF et de glucagon et non en présence d'EGF et d'insuline. Ces résultats mettent en évidence qu'il existe deux sentiers distincts par lesquels l'EGF peut être complémenté pour induire la prolifération des hépatocytes et que la dexaméthasone n'exerce un effet que sur celui utilisé par le glucagon. De plus, la prolifération et la maturation des hépatocytes peuvent être régulées de façon indépendante ou coordonnée. La dexaméthasone est le seul facteur parmi les facteurs testés capable d'induire une maturation des hépatocytes "in vitro". L'addition de DM50 ou de phénobarbital inhibe la prolifération des hépatocytes et permet de maintenir la production d ' -foetoprotéine ainsi que d'albumine. Parmi les événements induits précocement dans la phase préréplicative suite à une stimulation hormonale, plusieurs changements s'effectuent dans la synthèse, l'organisation et la phosphorylation des cytokératines. En effet, 1'addition d1 EGF induit une augmentation dans la phosphorylation de la cytokératine A sur le groupement tyrosine. Des analyses en immunofluorescence à l'aide d'anticorps monoclonaux dirigés spécifiquement contre les cytokératines A et D, anti-CK55 et anti-CK49 respectivement montrent que ce changement dans l'état de phosphorylation de la cytokératine A est associée à une réorganisation des filaments de cytokératines constituées de ces deux cytokératines A et D. D'autre part, la dexaméthasone induit une synthèse préférentielle des deux cytokératines majeures des hépatocytes, les cytokératines A et D. L'EGF n'influence pas cette réponse induite par la dexaméthasone. Cette néosynthèse préférentielle est associée à une inhibition sélective de la production d'a-foetoprotéine par rapport à l'albumine. Ces résultats montrent que les cytokératines sont vraisemblablement impliquées dans les réponses cellulaires induites par l'EGF et la néosynthèse de ces protéines est associée au programme de différenciation des hépatocytes.Montréal Trigonix inc. 2018
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Kaulek, Vincent. "Caractérisation et prévention du rejet allogénique d'hépatocytes : élaboration d'une stratégie immunomodulatrice." Besançon, 2002. http://www.theses.fr/2002BESA0022.
Full text
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Bordeleau, François. "Implication des kératines 8/18 dans la modulation de l'activité mécanique des cellules hépatiques initiée aux points focaux d'adhérence." Doctoral thesis, Université Laval, 2012. http://hdl.handle.net/20.500.11794/23624.
Full textAbstract:
Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2012-2013.L'activité mécanique des cellules générée par l'interaction entre la matrice extracellulaire (MEC) et le cytosquelette d'actine est essentielle pour la régulation de l'adhésion, de l'étalement et de la migration des cellules lors du développement normal ou tumoral. La stimulation mécanique des cellules découle majoritairement des forces externes appliquées par la MEC ou bien des forces internes générées par la contraction de l'actomyosine. Ces stimuli mécaniques convergent aux intégrines situées aux points focaux d'adhérence (FA) reliant la MEC à l'actine fibrillaire. La formation des FA requiert des molécules adaptatrices pour l'actine, telle que la vinculine, ainsi que des molécules de signalisation, comme la FAK (« focal adhesion kinase ») ou les PKC (« protein kinase C »). Les filaments intermédiaires (FI) de kératines 8/18 (K8/K18) sont exprimés dans l'ensemble de l'épithélium simple, mais constituent les seuls FI présents dans les hépatocytes et les hépatomes. Bien que plusieurs évidences suggèrent une participation des FI K8/K18 dans la régulation de l'activité mécanique des cellules, le mécanisme exact demeure énigmatique. Les travaux présentés dans cette thèse examinent les mécanismes impliqués dans la modulation de l'activité mécanique des cellules par les FI K8/K18. Par une approche s'appuyant sur l'utilisation d'une pince optique et de substrats de rigidité variable, les résultats montrent que les FI K8/K18 contribuent à la rigidité cellulaire et aux mécanismes mécanosenseurs, en raison d'une modulation de la signalisation RhoA-ROCK responsable de la dynamique de l'actine fibrillaire, plutôt que de leurs propriétés viscoélastiques. Par ailleurs, la PKCô est identifiée comme un médiateur de la modulation de l'étalement et de la migration associée aux FI K8/K18 chez les hépatomes, via une boucle de rétroaction positive affectant la FAK et l'intégrine aux FA. En fait, ces éléments corrèlent avec l'assemblage d'un complexe formé de RACK1 « Receptor of Activated C Kinase 1», pi-intégrine, plectine, PKC et c-Src. À noter que les mécanismes dépendant de RhoA et PKC sont mutuellement impliqués dans la modulation de la migration et de la rigidité des cellules associées aux FI K8/K18. Dans leur ensemble, les résultats démontrent une implication incontestable des FI K8/K18 dans la modulation de l'homéostasie mécanique des cellules de l'épithélium simple.
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Montaudouin, Caroline. "Mécanisme de régulation des cellules B activées sécrétives d'IgM." Paris 6, 2010. http://www.theses.fr/2010PA066217.
Full textAbstract:
Lors de reconstitution d’hôtes lymphopéniques avec des cellules B, la priorité du système immunitaire est d’assurer un taux d’IgM et un nombre de cellules B sécrétrices d’IgM normal pour se protéger des pathogènes du sang. En utilisant une méthode de transferts séquentiels de cellules B matures dans des hôtes RAG2ko, il a été montré qu’une population de cellules B préalablement établie dans l’hôte diminuait le nombre de cellules activées et le taux d’IgM d’une seconde population. Il existe donc un mécanisme de rétrocontrôle du nombre de cellules B sécrétrices d’IgM. Dans ce travail nous avons voulu vérifier que les immunoglobulines sont le facteur responsable de ce mécanisme. En utilisant différentes souris mutantes lors de transferts séquentiels, nous avons montré que les IgMs n’étaient pas responsables de ce mécanisme, en revanche Les IgGs permettent la régulation des cellules B activées et du niveau d’IgM. Pour comprendre comment les IgGs agissent, nous avons réalisé des transferts séquentiels en utilisant comme seconde population des cellules B de souris déficientes en FcRIIB (récepteur inhibiteur) ou SHIP. Ces cellules, malgré la présence d’une première population, ne sont pas inhibées dans leur production d’IgM. La régulation par les IgGs se fait donc via le récepteur FcRIIB et sa voie de signalisation. Un mécanisme de quorum-sensing permettrait aux cellules B sécrétrices d’IgM de réguler leur quantité via la détection de la densité d’IgG. L’absence de ce mécanisme provoquerait une activation incontrôlée des cellules B et des maladies auto-immunes
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Bessard, Anne. "Mécanismes moléculaires de la cascade de signalisation des MAPKinases contrôlant la motilité et la prolifération des cellules hépatiques normales et transformées." Rennes 1, 2006. http://www.theses.fr/2006REN1S035.
Full textAbstract:
Ce travail est centré sur l'étude des mécanismes d'induction et de répression des signaux mitogènes et de motilité des hépatocytes. Le blocage de la prolifération et de la survie des cellules transformées représente un enjeu important dans le développement de traitement anti-cancéreux. Cet objectif, nous a conduit à : 1/ préciser l'implication de la voie MEK/ERK dans l'équilibre prolifération / motilité et démontrer l'incidence de MLCK dans l'intégration des signaux mitogènes dans les hépatocytes normaux ; 2/ analyser les mécanismes MEK/ERK dépendants, régulant la motilité et la prolifération des cellules issues d'hépatocarcinomes ; 3/ appréhender plusieurs techniques d'imagerie afin de visualiser au mieux la tumeur induite suite à l'injection de cellules cancéreuses en ectopique et en orthotopique. Toutes les informations obtenues à l'issue de ces différentes approches devraient nous permettre un meilleur suivi de la croissance tumorale in vivo et de définir de nouvelles cibles thérapeutiques.
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Guéraud, Françoise. "Etude de l'influence de l'hormone de croissance sur les activités hépatiques de glucuronoconjugaison chez le rat." Aix-Marseille 3, 1996. http://www.theses.fr/1996AIX30129.
Full textAbstract:
L'influence de l'hormone de croissance (gh) sur les activites de glucuronidation hepatiques est etudiee chez des rats males, hypophysectomises ou non, et traites ou non avec du cortisol et de la thyroxine de facon a compenser l'absence d'hormones thyroidiennes et de glucocorticoides chez les animaux hypophysectomises. Deux doses de gh ont ete utilisees, la plus faible permettant de mimer un rythme de secretion de gh de type male, la plus forte permettant de mimer un rythme de secretion de type femelle. La gh agit de facon variable sur l'expression des enzymes de glucuronidation du paranitrophenol, de l'androsterone, de la testosterone, de la bilirubine et de l'oestrone, selon l'activite consideree. La gh diminue particulierement l'activite de glucuronidation de la bilirubine, vraisemblablement a un niveau transcriptionnel ou post-transcriptionnel. Cette influence ne s'apparente pas a un processus de feminisation par une exposition continue a l'hormone comme c'est le cas pour d'autres enzymes de metabolisation hepatiques, particulierement certaines monooxygenases a cytochrome p-450 ou certaines glutathion s-transferases (gsts), qui ont ete etudiees en parallele. Cette etude en parallele a par ailleurs montre l'existence d'une forte similitude de comportement de l'activite de glucuronidation de la bilirubine et de l'expression de la sous-unite 6 des gsts en fonction de l'hypophysectomie et des traitements utilises. La signification et les bases moleculaires de cette relation restent a etablir. La gh modifie egalement l'etat fonctionnel des enzymes de glucuronidation qui depend de l'environnement membranaire de ces enzymes, en interaction avec le traitement par le cortisol et la thyroxine. Cet effet est en relation avec une augmentation des lysophospholipides dans la membrane microsomale. En revanche, la faible influence de la gh sur differents parametres de fluidite membranaire, qui sont dependants de la composition en acides gras des microsomes elle-meme modifiee par la gh et l'hypophysectomie, ne semble pas etre en relation avec l'effet de cette hormone sur l'etat fonctionnel des enzymes de glucuronidation. La gh influence donc l'expression des enzymes de glucuronidation mais aussi leur etat fonctionnel, via la composition lipidique de la membrane microsomale. Les consequences sur le fonctionnement d'autres proteines membranaire reste a determiner
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Faradji, Floria. "Rôle de cycline G de Drosophila melanogaster dans la régulation de la croissance et du cycle cellulaires." Paris 6, 2010. http://www.theses.fr/2010PA066416.
Full textAbstract:
Les cyclines G sont des cyclines atypiques dont le rôle est complexe. Chez les mammifères, Cycline G1 est un régulateur négatif du cycle cellulaire qui induit un arrêt à la transition G2/M ainsi que de l’apoptose en réponse à des dommages de l’ADN. Dans certains contextes cellulaires, elle joue cependant un rôle positif dans la prolifération cellulaire. CyclineG2 est un régulateur négatif du cycle cellulaire, impliquée dans l’arrêt du cycle en G1/S. Chez la drosophile, CycG est le seul gène codant pour la Cycline G. Les dérégulations de CycG induisent une forte létalité et une instabilité du développement. Au cours de ma thèse, j’ai cherché à mieux comprendre le rôle de CyclineG de D. Melanogaster dans la prolifération et le cycle cellulaires. Ainsi, j’ai montré que la surexpression ubiquitaire de CycG produit des individus de petite taille. La surexpression de CycG inhibe la croissance cellulaire alors que son inactivation par ARN interférence tend à promouvoir la croissance. De plus, la surexpression de CycG induit un allongement du cycle cellulaire et une diminution du nombre de cellules. L’étude du cycle cellulaire après incorporation d'EdU m'a permis de montrer que Cycline G est impliquée dans la transition G1/S et dans la progression de la phase S. Par ailleurs, l'analyse du nombre de cellules des ailes où CycG est dérégulé montre que l'instabilité du développement observée est principalement due à une perte de la compensation entre croissance cellulaire et prolifération cellulaire. Ainsi, CyclineG est impliquée dans le contrôle négatif de la croissance et du cycle cellulaire. Ces deux fonctions semblent en faire un acteur important pour la stabilité du développement.
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Kourimate, Sanae. "Pcsk9 : régulation et implication dans le syndrome métabolique." Nantes, 2008. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=4ac185ba-f999-45ff-9241-4278a9699b5c.
Full textAbstract:
Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) est une serine protéase, jouant un rôle important dans la régulation des niveaux de cholestérol circulant. Les mutations gains de fonctions de PCSK9 sont associées à une hypercholestérolémie autosomale dominante due à une élévation des concentrations en Low Density Lipoprotein associées au cholestérol (LDLc). A l'inverse, des mutations perte de fonction de PCSK9, sont associées à une diminution de ces concentrations et à une réduction de 88% du risque d'apparition de maladies coronariennes. Dans le réticulum endoplasmique, Pro-PCSK9 subit un autoclivage indispensable à sa maturation et à sa sécrétion. PCSK9 circulante se lie au domaine EGF-A du récepteur aux LDL (LDLR) et entraîne sa dégradation lysosomale. Tout comme le LDLR, PCSK9 est positivement régulé par les statines via le Sterol Responsive element Binding Protein -2 (SREBP2). Les statines sont très utilisées en clinique pour leurs effets hypocholestérolémiants, ajouter des inhibiteurs de PCSK9 pourrait améliorer leur efficacité. Le premier objectif a été de caractériser la régulation négative de PCSK9 par le récepteur nucléaire Peroxisome Proliferator Activated Receptor alpha (PPARα) et ses agonistes synthétiques : les fibrates. Les résultats obtenus in vitro sur des lignées d’hépatocytes humains révèlent que l’activation de PPARα réprime la transcription de PCSK9 -via une répression de son promoteur- suppriment son activation par les statines, et potentialise l’effet des statines sur l’activité du LDLR. De plus, ces résultats révélèrent que la furine et PC5/6A -deux protéines convertases qui dégradent PCSK9- sont également régulées positivement par PPARα. Au-delà de PCSK9, cette étude a permis d’identifier une nouvelle famille d’enzyme régulée par les fibrates : les pro-protéines convertases. La deuxième partie de mes travaux de thèse a porté sur la mise au point d’un test flurorométrique de dosage de l’activité autocatalytique de PCSK9. La spécificité de notre approche a été de considérer non pas la protéine recombinante purifiée, qui semble dépourvue d’activité pour une raison inconnue, mais la forme endogène des hépatocytes. Après avoir validé ce test sur des hépatocytes primaires de souris PCSK9-/-, je l’ai appliqué à l’étude de divers mutants de PCSK9. Enfin, suite aux travaux du laboratoire sur la régulation de PCSK9 par l'insuline, j’ai également caractérisé l’expression de PCSK9 dans divers modèles animaux de diabète et d’insulinorésistance. PCSK9 est une cible thérapeutique sérieuse pour diminuer le LDL-c. D'après ces résultats, l’inhibition transcriptionnelle de PCSK9 par les fibrates semble être très prometteuse. Cependant, en clinique les fibrates sont préférentiellement utilisés pour leurs propriétés hypotriglycéridémiantes, puisque leurs effets sur le cholestérol restent limités. Existerait-il in vivo un mécanisme inhibiteur de cette voie? L'identifier serait une des perspectives qu'ouvre cette thèseProprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) is a member of the serine protease family. Gain of function mutations within PCSK9 are associated with dominant forms of familial hypercholesterolemia. Inversely, humans harbouring loss of function mutations have a significant plasma LDLc reduction and a 88% decrease of the risk of coronary heart disease. In the endoplasmic reticulum Pro-PCSK9 undergoes an autocalytique clivage that is crucial for its secretion. Then, this secreted protein binds to the EGF-A domain of the LDLR and targets it to the lysosomes rather than to the cell surface. Both PCSK9 and the LDLR are up-regulated by statins via SREBP2. Using PCSK9 inhibitors may optimize the effects of this hypocholesterolemic drug. The first aim of my thesis was to investigate in vitro the mechanisms of PCSK9 repression by the fibrates which are PPARα synthetic agonists. Activation of PPARα down-regulates PCSK9 transcription at the promoter level and increase the expression of two others Proprotein convertases: furin and PC5/6A which are known to degrade PCSK9. Fibrates counteracts PCSK9 induction by statins and amplifies the effects of this hypocholesterolemic drugs on the LDLR acitivity. The second part of my studies was based on measuring the endogenous cleavage activity of PCSK9, using a fluorogenic peptide corresponding to the cleavage site of Pro-PCSK9. After validation of the specificity of this assay on mice primary hepatocytes from PCSK9-/-, I applied it to the test of several PCSK9 variants. The final part of my studies dealt about the characterisation of PCSK9 expression in diabetic and insulin resistant animal models. PCSK9 is an attractive therapeutic target for lowering plasma LDLc levels. This study clearly showed that PCSK9 transcriptional inhibition by fibrates might be envisaged in combination with statins. However, in vivo, in humans, the fibrates are rather known for their hypotriglyceridemic properties. The limited effect of fibrates on lowering LDLc might be explained by a counteracting pathway. Identifying this pathway is one of the promising perspectives of this thesis
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Ollivier, Hélène. "Contribution à l'étude des mécanismes de régulation du volume des hépatocytes isolés de turbot (Scophthalmus maximus) en condition hypo-osmotique : principaux effecteurs et voies de signalisation intracellulaire." Brest, 2005. http://www.theses.fr/2005BRES0002.
Full textAbstract:
Lorsque les hématocytes de turbot sont exposés à une diminution de l'osmolalité de leur milieu environnant, leur volume augmente d'environ 20 % dès les premières minutes suivant le choc-osmotique. Ces cellules recouvrent ensuite leur volume initial grâce au processus de RVD ("Regulatory Volume Decrease") dont la mise en oeuvre requiert la coopération de mécanismes élaborés pour percevoir les perturbations du volume cellulaire, amplifier et propager le signal puis activer les systèmes effecteurs de la régulation. Cette réponse cellulaire adaptative se caractérise principalement par une sortie d'ions K+ et Cl- et d'eau osmotiquement liée via des canaux Cl- et K+ distincts, des co-transporteurs K+/Cl- et des échangeurs Cl-/HCO3-. Les voies de signalisation intracellulaire impliquent diverses protéines kianses (PTK, PI3K, PKC, p38MAPK. . . ), les phospholipases A2, C et D, l'acide arachinodique et ses dérivés eicosanoïdes ou encore le calcium dont la concentration intracellulaire augmente fortement après la stimulation hypo-osmotique. Les protéines cytosquelettiques contribuent également au processus de RVD. De même, l'ATP libéré dans le milieu extracellulaire par action d'un canal de type CFTR ou par exocytose constitue un second messager clé de la régulation en agissant de façon autocrine ou paracrine via la stimulation des récepteurs purinergiques. L'objectif de ce travail était de caractériser les évènements cellulaires majeurs inhérents au processus de RVD des hépatocytes de turbot et de tenter de les replacer, les uns par rapport aux autres, dans le contexte d'une réponse complexe et intégrativeWhen turbot hepatocytes are exposed to a reduction of extracellular osmolality, they swell by about 20 % within first minutes after the hyposmotic shock. Cells subsequently undergo a RVD (Regulatory Volume Decrease) process to recover their original volume. This volume regulation process require coordinated mechanisms to sense volume perturbations, amplify and transduce the signal to the RVD effectors. Cell volume is regulated by the loss of K+ and Cl- with osmotically obligated water by activation of separate K+ and Cl- channels as well as K+/Cl- co-transporter and Cl/HCO3- exchanger. Signaling pathways involve many kinases ( PTK, PI3K, PKC, p38MAPK). . . ), phospholipases A2, C and D, arachinodic acid and eicosanoids and calcium, whose concentration strongly increases after hyposmotic stimulation. Cytoskeletal proteins also contribute to RVD process. Moreover, ATP released in extracellular medium by action of a CFTR-type channel or exocytosis is an important second messenger which acts as an auto/paracrine factor via purinergic receptors activation. The aim of this study was to determine the main cellular events linked to turbot hepatocytes RVD process and to attempt to replace them in the context of a complex and integrative response
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Yacoub, Chakib M. "Étude de la régulation du métabolisme hépatique chez les Ruminants : utilisation du modèle "hépatocytes isolés"." Montpellier 2, 1988. http://www.theses.fr/1988MON20045.
Full textAbstract:
Etude in vitro ches le mouton et le rat de l'utilisation par les hepatocytes isoles des acides gras volatils et des divers substrats glucoformateurs. Analyse des interactions entre le metabolisme du profionate et celui des principaux substrats de la gluconeogenese (pyruvate), de l'ureogenese (ammoniaque) et de la cetogenese (acide gras long, moyens et courts). Etude in vivo par perfusion intraveineuse, des effets des divers substrats glucoformateurs ainsi que du glucacon et des catecholamines sur les principales relations interorganes chez le mouton
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El, Boustany Charbel. "Rôle des canaux calciques de la membrane plasmique dans la prolifération des cellules tumorales hépatiques." Thesis, Lille 1, 2009. http://www.theses.fr/2009LIL10038/document.
Full textAbstract:
La tumeur maligne primitive du foie la plus fréquente est le carcinome hépatocellulaire. Le développement des cellules tumorales hépatiques dépend d'un influx calcique dont la base moléculaire, dans le foie, est constituée de TRPC6, des STIM1 et 2, et de Orai1. Nous avons recherché si le développement de ces tumeurs était accompagné d'un changement du profil d'expression de ces protéines. Nous avons montré que le canal TRPC6 est absent des hépatocytes humains sains mais fortement exprimé dans les tumeurs hépatiques, les foyers d'expression de TRPC6 étant visibles uniquement dans les zones tumorales du foie. Le niveau d'expression de TRPC6 dépend de certains facteurs de croissance et cette expression est directement corrélée à l'amplitude de l'entrée de calcium et à la prolifération cellulaire des hépatomes humains. STIM1 et Orai1 sont aussi impliqués dans cette relation, l'inhibition de l'expression de TRPC6, STIM1 ou Orai1 entraînant une baisse de l'expression des cyclines D1 dans ces cellules. Inversement, le blocage du cycle cellulaire va entraîner, de manière réversible (<4heures), une importante réduction de l'entrée de calcium. Les cultures primaires d'hépatocytes humains nous ont permis de confirmer ces résultats, démontrant ainsi la relation étroite entre entrée calcique et prolifération cellulaire. Nos derniers résultats ont montré que la base moléculaire de cette entrée dépend du type cellulaire utilisé mais que Orai1 en est la pièce centrale. Ce travail de thèse a permis d'élargir les connaissances sur la composition du complexe moléculaire formant l'entrée calcique directement impliquée dans la prolifération cellulaire et le développement de tumeurs hépatiquesHepatocellular carcinoma is the most frequent primary liver tumor. Tumoral cell proliferation depends on calcium influx which molecular basis in human liver is formed of TRPC6, STIM1 and 2, and Orai1. We have investigated whether tumors' development in human livers was accompanied by a change in the pattern of expression of these proteins. We have shown that TRPC6 channel is absent in healthy human hepatocytes but strongly expressed in human liver tumors, and TRPC6 expression is only detectable in the tumor zones. TRPC6 expression level depends on growth factors, and this expression is directly correlated with the amplitude of the calcium entry and cell proliferation of human hepatoma cell line. STIM1 and Orai1 also play a major role in this process and inhibition of the expression of TRPC6, STIM1 or Orai1 causes a decrease in cyclin D1 expression in human hepatoma cell line. Conversely, cell cycle block results in a large decrease in calcium influx that quickly reversed in less than 4 hours after cell cycle release. Primary cultures of human hepatocytes allowed us to confirm these results, emphasizing the tight relation between calcium influx and cell proliferation. Our recent data strongly suggested that the molecular basis of this calcium entry varies from one cell type to another, with Orai1 as the core of this plasma membrane complex. In conclusion, this thesis has expanded the knowledge about the actors of calcium entry and their role in the proliferation of both liver cells and liver cancer development
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Glei͏̈zes, Chantal. "Induction des cytochromes P450 1A1 et 1A2 par l'oxfendazole. Régulation comparée de leur expression chez le lapin et en culture primaire d'hépatocytes." Toulouse 3, 1992. http://www.theses.fr/1992TOU30054.
Full textAbstract:
La caracterisation du pouvoir inducteur microsomal hepatique d'un antiparasitaire, l'oxfendazole, a ete entreprise chez le lapin (recevant 0,9-4,5 ou 22,5 mg/kg/j pendant 10 jours) et en culture primaire d'hepatocytes de 72 h (10 mm). L'etude in vivo met en evidence aux deux plus fortes doses une induction du cytochrome p450 1a2 liee a une augmentation de l'ethoxyresorufine o-deethylase. L'augmentation des activites acetanilide et benzo(a)pyrene hydroxylases a 4,5 mg/kg/j seulement s'expliquerait par une forte liaison de l'oxfendazole au p450 mise en evidence par un spectre de type ii et une inhibition non-competitive des activites specifiques a la famille 1a. L'invariabilite des taux d'arnm suggere une stabilisation proteique a l'origine de l'induction observee. L'etude in vitro revele un effet inducteur de l'oxfendazole sur le p450 1a1. L'actinomycine abolissant cette action traduit une amplification du taux de transcription par l'anthelminthique, hypothese accreditee par l'augmentation de l'arnm specifique du p450 1a1. En presence de cycloheximide, l'induction observee est encore plus importante; il s'agirait du phenomene de super-induction. Le fenbendazole, precurseur metabolique, engendre des resultats similaires mais moins intenses, ceci s'expliquerait par sa sulfoxydation progressive et necessaire en oxfendazole. Quelle que soit la methodologie utilisee, l'oxfendazole est a l'origine d'une induction des p450 1a. Les differences entre modeles animal et cellulaire demontrent la transposition difficile des modeles in vitro en raison des differences d'environnement, du devenir metabolique du medicament etudie
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Langhi, Cédric. "Implication de PCSK9 dans les maladies métaboliques : régulation par les acides biliaires et rôle fonctionnel dans le pancréas." Nantes, 2009. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=8ce2a36e-ee33-47ea-b8e8-fc89d736a8f4.
Full textAbstract:
PCSK9 (proprotein convertase subtilisin kexin type 9) est le 3ème gène impliqué dans l'hypercholestérolémie familiale dominante, après les mutations des gènes codant pour le récepteur aux LDL (LDLR) et pour son ligand l’apo-B. PCSK9 agit comme un inhibiteur de l'expression hépatique du LDLR par un mécanisme post-traductionnel. En se liant au domaine extracellulaire du LDLR à la surface des membranes plasmiques, PCSK9 induit l'internalisation du LDLR et sa dégradation dans les lysosomes. Ainsi les mutations de PCSK9 associées à l'hypercholestérolémie sont des mutations gain de fonction. A l'inverse, les mutations perte de fonction de PCSK9 induisent une hypocholestérolémie et une protection contre les maladies cardiovasculaires. Le développement d'inhibiteurs de PCSK9 est donc un enjeu thérapeutique majeur dans la prise en charge des hypercholestérolémies. Dans ce contexte, la 1ère partie de ma thèse a consisté à étudier la régulation transcriptionnelle de PCSK9 par les acides biliaires et le récepteur nucléaire FXR (Farnesoid X Receptor). De nombreux gènes du métabolisme lipidique sont régulés par FXR et l’activation de FXR a des effets bénéfiques dans les troubles métaboliques. Les résultats obtenus dans des lignées d'hépatocytes humains montrent que l'activation de FXR réprime l'expression de PCSK9, ce qui s'accompagne d'une augmentation de l'activité du LDLR mesurée in vitro. Ceci suggère que l'utilisation d’agoniste de FXR pour réprimer PCSK9 et ainsi potentialiser l'action des statines pourrait être utile dans le traitement de l'hypercholestérolémie. On sait à présent que le métabolisme du cholestérol intervient dans la régulation de la sécrétion d’insuline par les cellules β du pancréas et pourrait ainsi jouer un rôle dans la physiopathologie du diabète de type 2. La 2nde partie de ma thèse s'est intéressée au rôle de PCSK9 dans la fonction insulino-sécrétrice des cellules β. A partir d’ilots isolés du pancréas humains et de souris, je démontre que PCSK9 est exprimée dans les cellulesdelta. Par ailleurs, PCSK9 diminue l'expression du LDLR au sein des ilots de Langerhans, probablement via une action endocrine En revanche, l'invalidation de PCSK9 chez la souris ne semble pas perturber l'homéostasie du glucose ex vivo et in vivo, ni la survie des cellules β en réponse à un traitement par la streptozotocinePCSK9 (proprotein convertase subtilisin kexin type 9) is the 3rd gene implicated in autosomic familial hypercholesterolemia with the LDL Receptor (LDLR) gene and its ligand apo-B. PCSK9 acts as a post-transcriptional inhibitor of hepatic LDLR expression. Gain of function mutations of PCSK9 are associated with hypercholesterolemia. By contrast, loss of function mutations of PCSK9 induce hypocholesterolemia and a protection against cardiovascular diseases. Therefore, development of PCSK9 inhibitors is a promising therapeutical approach to treat hypercholesterolemia. In this context, the 1st part of my thesis consisted of studying transcriptional regulation of PCSK9 by bile acids and the nuclear receptor FXR (Farnesoid X Receptor). FXR regulates many genes involved in lipid metabolism, and FXR activation may have beneficial effects in metabolic diseases. My results in human hepatocytes cell lines show that FXR activation represses PCSK9 expression. Such PCSK9 repression is correlated with the induction of LDLR activity in vitro. These findings suggest that FXR agonists may be used in combination with statins to amplify their hypocholestrolemic action in hyperlipidemic patients. It is now admitted that cholesterol metabolism modulates insulin secretion by pancreatic β cells and might interfere with the development of type 2 diabetes. The 2nd part of my thesis focussed on the role of PCSK9 in the β cells function. Using isolated pancreatic islets from humans and mice, I show that PCSK9 is expressed in delta cells of islets of Langehrans. PCSK9 is able to downregulate LDLR expression in the whole islet, probably acting in an endocrine manner. However, PCSK9-deficiency does not alter glucose homeostasis ex vivo and in vivo in mice, as well as β cell survival upon streptozotocin treatment
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Ferrini, Jean-Bernard. "Caractérisation de l'expression des facteurs C/EBPs et rôle des régulateurs du cycle cellulaire au cours de la différenciation hépatique dans un modèle d'hépatocytes humains en culture primaire." Montpellier 2, 1999. http://www.theses.fr/1999MON20202.
Full textAbstract:
Dans ce travail, nous avons developpe un modele de culture primaire d'hepatocytes humains adultes dans lequel de nombreuses caracteristiques du phenotype hepatique telles que la secretion des proteines plasmatiques, l'expression, et l'activite des cytochromes p450 de la famille 1a, 2c et 3a sont maintenues pendant au moins un mois. Afin de mieux caracteriser le mecanisme de differenciation de l'hepatocyte humain, nous avons etudie dans ces cultures, et a partir de foies de differentes especes, l'expression et l'activite de fixation a l'adn des facteurs de transcriptions c/ebp et c/ebp. Alors que le niveau de messager et de proteine de c/ebp augmente rapidement apres ensemencement en culture, l'expression de l'arnm de c/ebp et l'accumulation de l'isoforme proteique 45 kda apparaissent plus tardivement. Parallelement, l'expression des nombreux isoformes c/ebp semble etre regulee differemment selon l'etat de differenciation et l'origine du tissu analyse. Enfin, les differences d'expression des facteurs c/ebp ont ete confirmees par l'analyse de leur complexe avec l'adn. Afin d'etudier les mecanismes d'arret de la proliferation durant le processus de differenciation, nous avons analyse le niveau proteique et l'activite des regulateurs du cycle cellulaire. Apres ensemencement, les complexes cyclines g1-cdks actifs s'accumulent dans les hepatocytes sans provoquer l'entree en phase s, parallelement a une forte augmentation des formes prb hypophosphoryles et p130 phosphoryles (forme 2), deux proteines connues pour jouer un role cle dans le processus d'arret de la proliferation lie a la differenciation. De plus, nous avons mis en evidence que le complexe cycline e-cdk2 est responsable de la phosphorylation de p130 au cours des etapes precoces de la differenciation. Enfin, durant les etapes tardives de la differenciation, l'inactivation des complexes cyclines g1-cdk resulte de leurs associations avec p27 k i p 1 et de la sequestration de cdk4/k6 par p16 i n k 4 a.
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Fremin, Christophe. "Spécificités fonctionnelles des MAP kinases ERK1 et ERK2 dans la prolifération / différenciation / motilité / survie des cellules hépatiques normales et transformées." Rennes 1, 2007. http://www.theses.fr/2007REN1S102.
Full textAbstract:
Le foie est un organe essentiel, comme en atteste son exceptionnelle capacité de régénération. A la suite d’une perte de masse hépatique, les hépatocytes, cellules hautement différenciées du foie, quittent leur quiescence et prolifèrent de manière à restaurer cette perte. De nombreux facteurs participent à ce processus, en permettant l’activation de voies de signalisation diverses. La cascade des MAPKs MEK/ERK constitue l’une d’entre elles. Notre objectif est de progresser dans la compréhension des mécanismes contrôlés par la voie MEK/ERK au cours du processus de prolifération. Ce travail s’est précisément focalisé sur l’étude des kinases ERK1 et ERK2, qui pourraient contrôler des fonctions spécifiques dans les hépatocytes sains et les cellules hépatiques cancéreuses, chez lesquelles la cascade est fréquemment dérégulée. L’identification des mécanismes régulant la prolifération des cellules cancéreuses représente un enjeu majeur dans le développement de traitements anti-tumorauxThe liver is an essential organ, as certified by its incredible ability of regeneration. Following a loss of hepatic mass, the highly differentiated cells of the liver, the hepatocytes, leave their quiescence and proliferate in order to restore this loss. Many factors participate in this process, by allowing the activation of various signalling pathways. The MAPKs MEK/ERK cascade constitutes one of them. Our objective is to progress in the understanding of mechanisms controlled by the MEK/ERK pathway in the process of regeneration. This work precisely focused on the study of kinases ERK1 and ERK2, which could control specific functions in the healthy hepatocytes and hepatic cancerous cells, in which the pathway is often deregulated. The identification of mechanisms regulating the proliferation of hepatic cancer cells represents a major goal in the development of anti-tumoral treatments
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Mathew, Jasmin. "Keratin 8/18 regulation of hepatic cell death and metabolism." Thesis, Université Laval, 2009. http://www.theses.ulaval.ca/2009/26554/26554.pdf.
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Viard, Isabelle. "Régulation par les hormones et les facteurs de croissance des fonctions spécifiques des cellules surrénaliennes." Lyon 1, 1991. http://www.theses.fr/1991LYO1T208.
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Phung-Koskas, Thu. "Microtubules stables et microtubules dynamiques dans les cellules hépatiques : aspects structuraux et implications dans la voie de signalisation de l'hormone de croissance." Paris 11, 2002. http://www.theses.fr/2002PA114825.
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Daujat-Chavanieu, Martine. "Induction et régulation de l'expression des cytochromes P450 IA1, IA2 et IIIA dans des cultures primaires d'hépatocytes de lapin et humains." Montpellier 2, 1990. http://www.theses.fr/1990MON20255.
Full textAbstract:
Les cytochromes p450 microsomaux hepatiques, membres de la superfamille multigenique des cytochromes p450, sont des hemoproteines de fonction monooxygenasique, impliquees dans le metabolisme des xenobiotiques. Un systeme de cultures primaires d'hepatocytes de lapin et humains a ete developpe: cultives sur collagene et dans un milieu chimiquement defini, les hepatocytes synthetisent comme in vivo des p450 fonctionnels des familles iib, iiia et ia en reponse aux inducteurs classiques de type phenobarbital, rifampicine rif et b-naphtoflavone bnf. Ce modele d'etude in vitro nous a permis d'aborder les mecanismes de regulation de l'expression des genes p450ia et iiia en presence de leurs inducteurs la bnf et la rif, chez l'homme et le lapin. Bien qu'induits par les memes composes chimiques, les genes ia1 et ia2 ne sont pas co-regules: les cinetiques d'induction des arnmia1 et ia2 sont differentes; la cycloheximide provoque en presence de bnf une superinduction du gene ia1 et en absence de bnf une levee de la repression constitutive du gene ia1, mais reste sans effet sur l'expression du gene ia2. L'induction des genes iiia necessite une synthese proteique. Chez le lapin, l'etude de la transcription des genes p450 suggere une regulation transcriptionnelle des genes ia1 et iiia6 et post-transcriptionnelle du gene ia2. Les inducteurs ne stabilisent pas les arnm ia et iiia6. Les genes ia et iiia6 sont localises sur les chromosomes 17 et 6. Dans les hepatocytes humains, l'omeprazole est un inducteur des arnm ia1 et ia2. Parmi les cinq formes de la famille iiia, seul le p450 iiia4 est induit par la rif et le clotrimazole
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Crowell, Elizabeth. "Dynamique et régulation des protéines impliquées dans la synthèse de cellulose chez arabidopsis thaliana." Paris 11, 2009. http://www.theses.fr/2009PA112270.
Full textAbstract:
La croissance et l'architecture des plantes reposent sur l'expansion cellulaire anisotrope. Le relâchement pariétal, modulé par l’orientation des microfibrilles de cellulose déposées autour de chaque cellule végétale, permet de contrôler l’expansion cellulaire. La cellulose est synthétisée par des complexes cellulose synthases (CSCs) au niveau de la membrane plasmique. Le mouvement des CSCs, et en conséquence le dépôt ordonné de la cellulose, est guidé par les microtubules corticaux par un mécanisme encore inconnu. La présence de la protéine membranaire KORRIGAN1 (KOR1), une endo--1,4-glucanase, est aussi nécessaire pour la synthèse de la cellulose. Par des approches combinées de biologie cellulaire et de biochimie, nous avons montré que trois isoformes différentes de cellulose synthase sont nécessaires pour constituer un CSC fonctionnel de paroi primaire. Nos différents résultats suggèrent que les CMTs non seulement guident les trajectoires des CSCs dans la membrane plasmique mais aussi régulent l’insertion et l’internalisation des CSCs. Nous avons également montré que les microtubules corticaux contrôlent la réorientation globale des trajectoires des CSCs et que la paroi de la face interne de l’épiderme contrôle l'expansion cellulaire de l'hypocotyle chez Arabidopsis. Ces données suggèrent que les CSCs interagissent directement avec les CMTs ou via un facteur associé aux CMTs. Par des approches similaires, nous avons également montré que la protéine KOR1 est associée aux CESAs impliquées dans la mise en place de la paroi primaire. En conclusion, nous avons mis en évidence de nouvelles interactions entre les CESAs et le cytosquelette d'une part, et les CESAs et KOR1 d'autre part, qui permettent de proposer un nouveau modèle pour la machinerie de biosynthèse de la cellulose et sa régulationPlant development and architecture result from anisotropic cell expansion. Cell wall yielding controls cell shape and expansion, and is modulated in part by the oriented deposition of cellulose microfibrils around the cell. Cellulose is synthesized by motile cellulose synthase complexes (CSCs) in the plasma membrane, whose movement is directed by cortical microtubules through an unknown mechanism. In higher plants, the KORRIGAN1 (KOR1) membrane-bound endo--1,4-glucanase is also required for cellulose synthesis. Using cell biology and biochemical approaches, we have demonstrated that three different CESA isoforms are required for primary cell wall cellulose synthesis. We find that CSC delivery to the plasma membrane is regulated by pauses of the Golgi apparatus along cortical microtubules. Our results illustrate that cortical microtubules not only guide the trajectories of CSCs in the plasma membrane, but also regulate their secretion and internalization. We have also shown that cortical microtubules mediate global reorientation of CSC trajectories during growth, and provide evidence that the cell wall on the inner epidermal face drives anisotropic cell expansion of the hypocotyl in Arabidopsis. Together, our data support the hypothesis that CSCs physically interact with cortical microtubules or a microtubule-associated factor, yielding insight into the mechanism by which cortical microtubules may direct CSC trajectories. We have also conducted parallel studies of the dynamics and localization of the KOR1 endo--1,4-glucanase, and find that it associates with the CSC through specific interactions with primary CESAs. In conclusion, our research has shed light on the complex interactions between CESA isoforms, KOR1, and the cytoskeleton, offering a more comprehensive model for the regulation of cellulose synthesis and deposition
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Coulouarn, Cédric. "Développement d'un réseau d'ADNc dédié à l'analyse du transcriptome hépatique humain : application à l'étude de la réponse du foie au cours d'évènements physiologiques et pathologiques." Rouen, 2004. http://www.theses.fr/2004ROUES002.
Full textAbstract:
Nous avons développé une plate-forme, dédiée à l'analyse des fluctuations du transcriptome hépatique humain dans son intégralité. Celle-ci comprend notamment l'établissement d'une collection ordonnée de plus de 10000 ADNc (Liverpool) et la mise en place d'une base de données spécifique (LiverTools). Une analyse in vivo dans un contexte d'inflammation aigue͏̈ systémique a permis d'identifier la fraction du transcriptome hépatique qui fluctue avec la sévérité de l'inflammation, laquelle rend accessible l'identification de nouveaux marqueurs du syndrome inflammatoire. Une étude globale in vitro a permis d'identifier la cinétique des fluctuations du transcriptome hépatique et les contributions respectives de la transcription, de la stabilité des ARNm et la traduction, dans la régulation de synthèse des protéines de l'inflammation. Une autre étude a permis d'identifier la fraction du transcriptome hépatique qui fluctue de façon similaire dans le foie fœtal et le carcinome hépatocellulaireWe have aimed at an extensive coverage of the liver transcriptome and we developed a dedicated Liverpool array of 10000 non-repondant cDNA probes and a LiverTools database. Inflammation-induced transcriptome changes were first studied in vivo. We identified a wealth of genes whose hepatic expression statistically correlates with the extent of inflammation. Some of the cognate proteins are secreted and may provide novel markers of clinical relevance. Next, time-course analysis of the hepatic transcriptome were performed in cytokine-challenged hepatoma cells. Transcriptional gene activity, mRNA stability and translational state, were also studied in vitro and allowed us to determine the respective contributions of these regulatory mechanisms. Another study dealt with a genome-wide comparison of gene regulation in hepatocellular carcinoma (HCC) and fetal liver (FL). Altered gene expression in HCC and FL mostly resulted in down-regulated mRNAs coding for a limited number of functions
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Biron-Andréani, Christine. "Modulation de la réponse hémostatique : régulation de la synthèse et mécanismes inhibiteurs." Montpellier 1, 2007. http://www.theses.fr/2007MON1T024.
Full textAbstract:
La régulation des processus hémostatiques par le système de la Protéine C est essentielle comme l'illustre le purpura fulminans qui accompagne le déficit sévère en PC dans la période néonatale. Dans les années 90, la mise en évidence de la mutation FV Leiden qui engendre une résistance à la PC activée a généré la conception d'anomalie de l'hémostase par gain de fonction, associée à une fréquence élevée et à un risque thrombotique modéré. Dans ce travail, nous avons constitué, dès 1994, une cohorte multicentrique pour caractériser et évaluer le risque thrombotique associé à la présence du FV Leiden homozygote. Le risque thrombotique veineux est modérément augmenté chez les homozygotes par rapport aux hétérozygotes. Nous avons analysé l'impact des facteurs déclenchants plus spécifiques à la femme et enfin l'impact du groupe sanguin et de polymorphismes génétiques d'autres protéines de l'hémostase. Par ailleurs, le foie joue un rôle fondamental dans la synthèse des protéines de l'hémostase et dans le métabolisme des stéroïdes sexuels, faisant des cultures primaires hépatocytaires un modèle d'étude de la synthèse et de la régulation de l'hémostase intéressant. Dans le surnageant de cultures hépatocytaires, nous avons mis en évidence la sécrétion à long terme des principales protéines de l'hémostase fonctionnelles (FII, FV, FVII, fibrinogène, antithrombine). Nous avons montré la présence de FVIII dans le surnageant uniquement en présence de facteur Willebrand ajouté au milieu de culture. Nous avons démontré l'influence de la vitamine K sur les taux de protéines vitamine K dépendantes. En présence de stéroïdes sexuels, les taux de protéine S et de FVII sont inversement modifiés. En conclusion, ce travail participe à une meilleure description du phénotype clinique associé à la mutation FV Leiden homozygote. Il amorce un travail sur les mécanismes de synthèse et de régulation des protéines de l'hémostase au niveau hépatique, avec un intérêt particulier pour l'impact des facteurs déclenchants hormonaux chez la femme.
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Tomkiewicz, Céline. "Régulation de l'expression des gènes des transaminases par les médicaments et les médiateurs de l' inflammation." Paris 5, 2001. http://www.theses.fr/2001PA05P630.
Full textAbstract:
Le dosage sérique des transaminases, alanine aminotransférase (AlaAT ou GPT) et aspartate aminotransférase (AspAT ou GOT), est trés utilisé en clinique. Une élévation de l' activité sérique de ces enzymes est interprétée comme le signe d' une toxicité tissulaire, le plus souvent hépatique. Cette notion est bien étayée en ce qui concerne les élévations importantés comme au cours des hépatites virales ; elle l' est beaucoup moins en ce qui concerne les augmentations modérées, surtout lorsque le bilan et la biopsie hépatique sont normaux. Dans certains cas, il y a absence de corrélation entre le niveau des transaminases et l' atteinte hépatique. En effet, certains médicaments provoquent des augmentations transitoires, isolées et modérées du taux sérique des transaminases sans qu' il y ait atteinte tissulaire. A l' inverse, certains patients atteints d' hépatite C ont des taux normaux de transaminases. Les transaminases ne sont pas seulement étudiées d' un point de vue clinique. Grâce au clonage des ADNc et des gènes des isoformes cytosolique (AspATc) et mitochondriale (AspATm) de rat, plusieurs travaux ont montré une régulation nutri tionnelle et hormonale de l' AspATc.
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Viel, Sébastien. "Régulation des cellules NK par le TGF-β." Thesis, Lyon, 2016. http://www.theses.fr/2016LYSE1010/document.
Full textAbstract:
Les cellules NK sont des lymphocytes de l'immunité innée impliqués dans la reconnaissance et l'élimination de cellules tumorales ou infectées par des pathogènes intracellulaires. La biologie des cellules NK est régulée par des facteurs intrinsèques comme les facteurs de transcription ainsi que par des facteurs environnementaux comme les cytokines, produites en condition homéostatique ou inflammatoire. Certaines cytokines, comme l'IL-15, l'IL-12 ou l'IL-18 sont connues pour potentialiser les fonctions effectrices des cellules NK. L'IL-15, en activant la voie STAT5 permet, d'une part, d'assurer la survie des cellules NK et, d'autre part via la kinase mTOR, d'induire leur prolifération, d'augmenter leur métabolisme ainsi que leurs fonctions effectrices. D'autres cytokines comme le TGF-ß sont connues pour inhiber les fonctions des cellules NK. Le TGF-ß1 est une des cytokines les plus immunosuppressives du système immunitaire et, en étant secrété´ par différents types de cancers, il participe a` l'échappement tumoral. Depuis longtemps, les effets du TGF-ß in vitro sont connus pour contrer ceux de l'IL-15. L'objectif de ce travail a été´ d'étudier les effets du TGF-ß sur la biologie des cellules NK. Nous avons observé´ que l'ajout de TGF-ß, in vitro, induit un blocage rapide de l'activation de la voie mTOR par l'IL-15, que le TGF-ß a des effets très proches de ceux de la rapamycine, un inhibiteur spécifique de mTOR et que, in vivo chez la souris, l'activation constitutive des voies de signalisation activées par le TGF-ß induit un phénotype proche de celui de la délétion de mTOR dans les cellules NKNK cells are innate lymphocytes involved in the recognition and elimination of tumor or infected cells. The biology of NK cells is regulated by intrinsic factors such as transcription factors but also by cytokines produced at steady state or under inflammatory conditions. Some of these cytokines like IL-15, IL-12 or IL-18 are known to increase NK cells functions. IL-15 allows NK cell survival via STAT5 and, via mTOR, increase NK cell proliferation, metabolism and acquisition of functions. In the other hand, cytokines like TGF-ß are known to inhibit NK cell function. TGF-ß1 is a major immunosuppressive cytokine, often secreted by tumor cells and participates to tumor escape. The inhibitory effects of TGF-ß in vitro on IL-2/15 mediated NK cell activation have long been shown, but the mechanism remains unknown. The objective of this work was to characterize the effects of TGF-ß at a molecular level. We have observed that TGF-ß induces a rapid blockade of IL-15 induced mTOR activation, in vitro. TGF-ß and the mTOR inhibitor rapamycin have similar effects. Finally, using genetic mouse models in vivo, constitutive TGF-ß signaling or mTOR deletion results in similar developmental arrests in NK cells
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Joulia, Dominique. "Caractérisation de l'influence de myostatine sur la régulation de la prolifération et de la différenciation des myoblastes." Montpellier 2, 2002. http://www.theses.fr/2002MON20179.
Full text
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Larribere, Lionel. "Étude de mécanismes moléculaires impliqués dans la régulation de la survie et de l'apoptose des cellules mélanocytaires." Nice, 2006. http://www.theses.fr/2006NICE4000.
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Le mélanome, qui est la forme la plus agressive des cancers de la peau est un problème majeur de santé publique. Cette tumeur touche des sujets jeunes et son incidence a doublé en trente ans. Il y a donc un besoin urgent de mieux comprendre les mécanismes entraînant la transformation du mélanocyte en mélanome, et notamment les processus qui conduisent à l'altération des voies apoptotiques et l'acquisition d'une résistance aux traitements thérapeutiques existants. Au cours de ma thèse, j'ai étudié les mécanismes moléculaires qui sont impliqués dans la régulation de la survie et de la mort des mélanocytes et de leur contrepartie transformée les mélanomes. Ainsi, j'ai montré que le SCF (Stem Cell Factor), un facteur de croissance des mélanocytes protège ces cellules de l'apoptose induite par Trail ou la staurosporine. Le SCF est capable d'activer à la fois la voie Ras/Raf/MAPK et la voie PI3K/AKT qui sont fréquemment mutées et constitutivement activées dans les mélanomes. Cependant, j'ai observé que la protection de l'apoptose par le SCF est majoritairement médiée par la voie PI3K/AKT et que l'activation de cette voie seule est suffisante pour bloquer l'apoptose. De plus, le rôle clé de la voie PI3K/AKT dans la transformation mélanocytaire a récemment été mis en évidence dans une étude qui montre que la PI3K active, contrairement à Ras actif, peut induire une hyperprolifération mélanocytaire invasive. Donc, dans la peau, une surproduction de SCF pourrait prévenir, via la voie PI3K/AKT, l'apoptose des mélanocytes et favoriser leur survie et leur transformation. L'approfondissement de cette étude m'a permis de montrer une diminution d'expression de MITF (MIcrophthalmia-associated Transcription Factor), un facteur de transcription spécifique des mélanocytes, au cours de l'apoptose induite par Trail. J'ai démontré que cette perte d'expression de MITF est la conséquence d'un clivage par les caspases qui génère un grand fragment N-terminal et un petit fragment C-terminal. Le rôle physiologique de ce processus est d'amplifier le signal apoptotique. En effet, un mutant non-clivable de MITF rend les mélanomes résistants à l'apoptose. De plus, la surexpression du petit fragment C-terminal induit l'apoptose par elle-même. Donc, ces résultats révèlent l'existence d'un mécanisme apoptotique spécifique des mélanocytes et dépendant de MITF. Ceci met en évidence la dualité fonctionnelle de MITF qui contribue à la survie en contrôlant l'expression de Bcl-2 et à la mort cellulaire en libérant, après son clivage par les caspases, un fragment pro-apoptotiqueMelanoma, which is the most aggresive form of skin cancer, is becoming a main problem of public health. This tumor appears young individuals and its incidence doubled in thirty years. Thus, there is an urgent need to better understand the mechanisms leading to melanocyte transformation into a melanoma, and notably to understand the process inducing alteration of apoptotic pathways and a strong chemoresistance. In the course of my PhD, I studied molecular mechanisms that are implied in the regulation of the survival and the death of melanocytes and melanoma cells. I showed that SCF (Stem Cell Factor), a melanocyte growth factor protects cells form Trail or staurosporine-induced apoptosis. SCF activates both Ras/Raf/MAPK and PI3K/AKT pathways that are frequently mutated and constitutively activated in melanoma. However, I observed that SCF mediated apoptosis protection acts mainly via PI3K/AKT pathway and that activation of this pathway alone is sufficient to block apoptosis. Moreover, the key role of PI3K/AKT pathway in melanocyte transformation has recently been underlined in a study showing that active PI3K, contrary to active Ras, is able to induce an invasive melanocytic neoplasia. Thus, in the skin, SCF deregulation could prevent melanocyte apoptosis and favour their survival and their transformation via PI3K/AKT pathway. Deepening of this study allowed me to observe a reduction of MITF (MIcrophthalmia-associated Transcription Factor) expression, which is a melanocyte specific transcription factor, during Trail-induced apoptosis. I demonstrated that loss of MITF expression is the consequence of caspase cleavage generating a large N-terminus fragment and a short C-terminus fragment. Physiological role of the processing could be to amplify apoptotic signal. Indeed, uncleavable mutant of MITF renders melanoma cells resistant to apotosis. Moreover, overexpression of C-terminus fragment induces apoptosis by its own. Thus, these results show the existence of a melanocyte specific and MITF dependent apoptotic mechanism and highlight the functional duality of MITF which contributes to survival, by controlling Bcl-2 expression and cellular death, by the generation of a pro-apoptotic fragment after its cleavage by caspases
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Goddard, Isabelle. "Expression et régulation par le système endocrinien des récepteurs du TGFβ dans les gonades." Lyon 1, 1996. http://www.theses.fr/1996LYO1T151.
Full text
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Fombonne, Joanna. "Mécanismes de régulation par l'EGF [Epidermal Growth Factor] de la dynamique des cellules adénohypophysaires somatolactotropes." Aix-Marseille 2, 2005. http://www.theses.fr/2005AIX20659.
Full textAbstract:
La dynamique d’une population cellulaire dépend, très schématiquement, de l’équilibre entre la division, la différenciation et la mort programmée. Le modèle des lignées cellulaires adénohypophysaires somatolactotropes (GH4C1) traitées à l’EGF nous a permis d’étudier les mécanismes de régulation de ces différents programmes génétiques. En effet, l’EGF est capable d’induire simultanément dans ces cellules un changement de profil sécrétoire, une mort cellulaire programmée et une inhibition de la division. La mort programmée atypique induite par l’EGF possède un phénotype hétérogène et implique de nouveaux effecteurs comme la L-DNase II et Alix. L’étude de l’inhibition de la division cellulaire par l’EGF nous a permis de montrer un contrôle transcriptionnel de l’expression de la cycline D3 (une molécule clé du cycle cellulaire) par Pit-1 (un facteur de transcription impliqué dans la différenciation hypophysaire). Pit-1 participe donc à la régulation de la division des cellules GH4C1Very schematically, cell dynamics depends on the balance between division, differentiation and programmed cell death. We used EGF-treated pituitary somatolactotrope cell line GH4C1 as a model to study the mechanisms of the switch between different genetic programs. Indeed, EGF treatment simultaneously triggers a change of the secretion profile, a programmed cell death and an inhibition of cell division. We further found that EGF-induced cell death defines an original programmed cell death with a heterogeneous phenotype and involves new effectors such as the endonuclease L-DNase II and Alix, an endo-lysosomal protein. Concerning the EGF-mediated inhibition of cell division, we showed that Pit-1 (a pituitary transcription factor involved in pituitary terminal differentiation) exerts a transcriptionnal control of cyclin D3 expression (a key cell cycle molecule). Pit-1 thus is involved in the regulation of GH4C1 cells division
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Ait, Ghezala Hayet. "La terminaison de la traduction et la régulation traductionnelle de l'activateur de la transcription ATF4 chez les mammifères." Paris 6, 2012. http://www.theses.fr/2012PA066315.
Full textAbstract:
Le taux de synthèse protéique est un des déterminants majeurs de la croissance des cellules, de leur progression à travers le cycle cellulaire et de leur prolifération. Il est contrôlé par plusieurs voies de signalisation qui mettent en jeu des protéines kinases et des cascades de phosphorylation qui ont pour cibles des facteurs agissant principalement dans les étapes d'initiation et d'élongation du processus de traduction de l'ARN messager en protéine. Ces voies de signalisation, et en particulier la voie de la protéine kinase mTOR (mammalian Target of Rapamycin), permettent d'adapter le taux de synthèse protéique à la disponibilité en nutriments et en énergie et à diverses stimulations extracellulaires provoquées par des hormones, des facteurs de croissance ou des stress. Notre équipe a montré qu'une déplétion du facteur de terminaison de la traduction eRF3a dans des cellules humaines en culture entraînait un arrêt du cycle cellulaire par inhibition de la voie mTOR chez les eucaryotes. Cette déplétion induit parallèlement une augmentation de l’expression d’un certains nombre de gènes, en particulier des gènes impliqués dans la biosynthèse des acides aminés et des gènes sous le contrôle de ATF4 comme les gènes REDD1 ou TRIB3 qui sont connus pour être des inhibiteurs de la voie mTOR. Ces gènes sont habituellement exprimés en condition de stress à travers la voie eIF2α. Nous avons montré que la déplétion du facteur eRF3a agit sur la voie mTOR par l’intermédiaire du gène REDD1, et ceci indépendamment de la voie eIF2α. Nous avons ainsi identifié un nouveau mécanisme de régulation de la voie mTOR qui passe par l’induction de l’expression d’ATF4The rate of protein synthesis is a major determinant of cell growth, proliferation through the cell cycle and cell proliferation. It is controlled by several signaling pathways involving protein kinases and phosphorylation cascades that target factors acting mainly in the initiation and elongation steps of the mRNA translation process. These signaling pathways, and in particular the protein kinase mTOR (mammalian Target of Rapamycin), adjust the rate of protein synthesis to nutrient and energy availability and to various extracellular stimuli caused by hormones, growth factors or stress. We have shown that the depletion of the translation termination factor eRF3a in human cells induces a cell cycle arrest by inhibiting the mTOR pathway in eukaryotes. This depletion induces in parallel an increase in the expression of numerous genes, especially genes involved in the biosynthesis of amino acids and genes under the control of ATF4, as REDD1 or TRIB3, known to be inhibitors of the mTOR pathway. These genes are usually expressed under stress conditions through the eIF2α pathway. We have shown that eRF3 depletion acts on the mTOR pathway through the REDD1 gene, independently of the eIF2α pathway. We have characterized a new mTOR regulation mechanism, which involves ATF4 induction
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Gauchoux, Anne. "Etude de la régulation de l'activité de l'uridyltransférase par le galactose et la progestérone dans différents modèles cellulaires hépatiques en culture." Paris 5, 1994. http://www.theses.fr/1994PA05P027.
Full text
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Prade-Houdellier, Naïs. "Régulation de la télomérase dans les cellules hématopoïétiques normales et leucémiques." Toulouse 3, 2007. http://thesesups.ups-tlse.fr/52/.
Full textAbstract:
La télomérase est une transcriptase inverse constituée d'une sous-unité catalytique hTERT, facteur limitant de l'activité télomérase, et d'une sous-unité ribonucléique hTR. Sa fonction primordiale est de compenser l'érosion des télomères lors des divisions cellulaires. Cette enzyme est fortement exprimée dans la plupart des cellules tumorales dont les leucémies aiguës myéloïdes (LAM) ainsi que dans les cellules à renouvellement rapide comme les cellules de l'hématopoïèse. L'objectif de notre travail était d'étudier les voies de régulation de hTERT par les facteurs de croissance et les cytokines inhibitrices de l'hématopoïèse dans les cellules normales et leucémiques. Nous avons montré ainsi que le TNF-alpha inhibe dans des cellules de LAM, la transcription du gène hTERT en activant une voie céramide/JNK. Le GM-CSF permet de bloquer cette inhibition. De plus, le TNF-alpha régule négativement hTERT dans les progéniteurs hématopoïétiques normaux avec une diminution de la prolifération et une accélération de la différenciation. De même, au cours de l'érythropoïèse, l'EPO active transcriptionnellement hTERT via la voie JAK2/STAT5/c-myc. Le TGF-alpha active Smad3 et bloque cette activation. De plus, l'inhibition de hTERT par expression d'un dominant négatif a révélé que cette enzyme ne joue pas de rôle direct dans la prolifération induite par l'EPO ou la protection contre l'apoptose, mais permet l'expansion cellulaire à long terme. L'ensemble de nos résultats suggère que la télomérase peut être régulée par les cytokines de l'hématopoïèse, et que tout événement conduisant à la répression de l'expression de cette enzyme devrait induire de profondes altérations de l'hématopoïèseHuman telomerase is a ribonucleoprotein DNA polymerase comprising a catalytic protein subunit, telomerase reverse transcriptase (hTERT), which represents the rate-limiting state in telomerase activity, and a RNA template (hTR). The primary defined function of telomerase is to elongate telomere at the end of chromosomes and allow cells to bypass replicative senescence. Recently, other important cellular functions have been attributed to telomerase, including cell proliferation, genetic stability, protection against apoptosis and cell differentiation. HTERT is highly expressed in cancer cells including acute myeloid leukaemia (AML), and in proliferative tissues such as haematopoietic cells. Previous studies have indicated that telomerase activity is low in primitive haematopoietic cells, but increases upon stimulation with a mixture of cytokines in parallel to cell expansion, and then declines progressively during differentiation. These observations suggest a function for telomerase in haematopoiesis. The aim of our study was to assess hTERT regulation by HGF in normal and leukemic cells. In the first part of the study, we showed that in AML cells, treatment with TNF-α induces a decrease in hTERT gene transcription through a ceramide/JNK pathway, and that coincubation with GM-CSF can inhibit the effect of TNF-α. Interestingly, in normal haematopoietic progenitors, TNF-α also down-regulate hTERT gene expression alongside with a decrease in proliferation and an increase in differentiation. In the second part of the study, we investigated whether hTERT can be regulated during erythropoiesis, by erythropoietin (EPO) and TGF-β, wich are respectively the major positive and negative regulators of erythropoiesis. As a result, we demonstrated that EPO can stimulate hTERT transcription through a JAK2/STAT5/c-myc pathway, and that TGF-β counteracts this effect through Smad3 activation. Moreover, hTERT inhibition by ectopic expression of a dominant negative, reveals that EPO-mediated hTERT regulation serves neither for the proliferative response to EPO, nor to enhance cell survival, but can play a role in long term erythroid expansion. In conclusion, the compiled results produced clearly suggest that telomerase can be regulated by haematopoietic cytokines, and that all events leading to inhibition of hTERT expression may potentially alter haematopoiesis and lead to medullar insufficiency found in myelodysplastic syndromes for instance
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Roux, Alexandra. "Les kératines 8/18 dans la régulation de la voie de signalisation et du trafic vésiculaire du récepteur de l'insuline chez les cellules hépatiques." Doctoral thesis, Université Laval, 2017. http://hdl.handle.net/20.500.11794/27983.
Full textAbstract:
Les filaments intermédiaires (FIs), de concert avec les microfilaments (MFs) et les microtubules (MTs), forment le cytosquelette. Contrairement aux quelques gènes qui codent pour les MFs d’actine et les MTs, exprimés dans toutes les cellules de l’organisme, les protéines des FIs sont codées par un grand nombre de gènes et classées en 6 types, selon la nature du tissu et l’état de différenciation des cellules. Pour leur part, les kératines s’expriment en paire dans les différents épithéliums. Plus précisément, la paire de kératines 8/18 (K8/K18) est présente dans toutes les cellules de l’épithélium simple, avec certaines cellules possédant une seconde paire. En revanche, la paire K8/K18 forme les seuls FIs retrouvés chez les hépatocytes et les cellules d’hépatome, d’où l’intérêt d’utiliser ces deux modèles cellulaires dans des études à visée fonctionnelle. Comme pour tous les autres types de FIs, les FIs K8/K18 contribuent au maintien de l’intégrité des cellules hépatiques. Par ailleurs, l’utilisation de souris transgéniques a permis d’entrevoir un rôle marquant pour ces FIs, en tant que partenaires de plateformes signalétiques chez les cellules épithéliales hépatiques. Le foie exerce un rôle primordial dans la régulation de la glycémie, du fait de sa capacité à stocker et à redistribuer d’importantes quantités de glucose à travers l’organisme, selon les besoins. Cette modulation est finement régulée par l’insuline via l’activation de son récepteur (RI) et de la signalisation qui s’en suit. Des anomalies au niveau de cette régulation conduisent à des maladies métaboliques, particulièrement au niveau du foie. À ce titre, l’accumulation récente de données expérimentales suggère une contribution des FIs K8/K18 dans la modulation du métabolisme du glucose et de la voie RI/PI3K/Akt. Cependant, la relation croisée entre cette paire de FIs, le métabolisme du glucose et cette voie signalétique, de même que les mécanismes moléculaires sous-jacents, demeure énigmatique. Les travaux dévoilés dans cette thèse examinent l’implication des FIs K8/K18 dans la régulation de la voie de signalisation et du trafic vésiculaire du RI chez les cellules hépatiques. L’approche expérimentale s’appuie sur la mise en culture d’hépatocytes ou de cellules d’hépatome dépourvues ou non de FIs K8/K18, en combinaison avec l’utilisation de diverses méthodes biochimiques et d’imagerie cellulaire. Les résultats révèlent pour la première fois, un rôle des FIs K8/K18 dans la signalisation dépendante des phosphoinositides (PIPs) initiée à la membrane plasmique, laquelle se reflète sur l’activation de la voie PI3K/Akt en réponse à l’insuline, et le trafic endosomal du RI via Rab5/EEA1/PI3P, chez des hépatocytes en culture primaire. Par ailleurs, chez les cellules d’hépatome, les résultats montrent une intervention des FIs K8/K18 dans la modulation de la signalisation et du trafic vésiculaire du RI, qui diffère grandement de celle observée chez les hépatocytes. Dans l’ensemble, les résultats démontrent une contribution incontestable des FIs K8/K18 dans la régulation de la voie signalétique de l’insuline chez les cellules hépatiques.Intermediate filaments (IFs), together with microfilaments (MFs) and microtubules (MTs), form the cytoskeleton. Unlike the few genes that code for actins and tubulins, expressed in all cells in the body, IF proteins are coded by a large number of genes, classified into 6 types, depending on the tissue and cell differentiation status. For their part, keratins are expressed in pairs in the different epithelia. In more specific terms, the keratin pair 8/18 (K8/K18) is present in all simple epithelia, with some cells containing a second pair. In contrast, the K8/K18 pair forms the only IF network found in hepatocytes and hepatoma cells, hence their usefulness as cell models for addressing functional issues. As for all other IF types, K8/K18 IFs contribute to the maintenance of liver cell integrity. In addition, the use of transgenic mice has allowed to foresee a significant role for these IFs, as partners of signaling platforms in hepatic epithelial cells. The liver exerts a key task as regulator of blood glucose level, due to its ability to store and redistribute large amount of glucose throughout the body, as required. This modulation is finely regulated by insulin via the activation of its receptor (IR) and the downstream signaling pathway. Perturbations in this regulation lead to metabolic diseases, particularly in the liver. As such, recent experimental data suggest a contribution of K8/K18 IFs in the modulation of glucose metabolism and IR/PI3K/Akt pathway. However, the interplay between the IF pair, glucose metabolism and the signaling pathway, as well as the underlying molecular mechanisms, remain enigmatic. The work unveiled in this thesis examines the involvement of K8/K18 IFs in the regulation of the IR signaling pathway and vesicular trafficking in liver cells. The experimental approach is based on the use of cultured hepatocytes and hepatoma cells, which may or may not contain K8/K18 IFs, in combination with the use of assorted biochemical and cell imaging assays. The results uncover a role of K8/K18 IFs in the interplay taking place between the phosphoinositide-dependent signaling (PIPs) initiated at the plasma membrane, which reflects itself into the activation of the PI3K/Akt pathway in response to the insulin stimulation of IR, and its endosomal trafficking via Rab5/EEA1/PI3P, in hepatocytes. In comparative terms, the results using hepatoma cells show an intervention of K8/K18 IFs in the modulation of the IR signaling and vesicular trafficking, which differs greatly from the one observed in hepatocytes. Overall, the results demonstrate an indisputable contribution of K8/K18 IFs in the regulation of the insulin signaling pathway in hepatic cells.
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Van, Grunsven Leonardus Adrianus. "Régulation du cycle cellulaire dans les cellules PC12 : effet du NGF ou «Nerve Growth Factor»." Lyon, École normale supérieure (sciences), 1996. http://www.theses.fr/1996ENSL0025.
Full textAbstract:
La lignée cellulaire PC12, provenant d'un phéochromocytome de rat, est largement utilisée comme modèle pour l'étude de la régulation de la différenciation neuronale par rapport à la prolifération. Cultivées en présence du facteur neurotrophique «Nerve Growth Factor» (NGF), ces cellules cessent de se diviser, forment des neurites et deviennent stimulables par voie électrique. Dans un premier temps, nous avons montré qu'une culture de cellules PC12 en phase exponentielle de croissance était composée de cellules au contenu en ADN 2c, 4c, et 8c. Lors du traitement au NGF, une augmentation de cellules au contenu en ADN 2c et 4c est observée, mais celles-ci expriment la cycline D1 et correspondent donc à des cellules en phase G1 du cycle cellulaire (van Grunsven et coll. 1996 a). L'arrêt en phase G1 après 3 à 5 jours de traitement au NGF est corrélé à une diminution de l'expression des cyclines A et B, des «Cyclin dependent kinases» Cdc2, Cdk2 et Cdk4 ainsi que de PCNA. De plus, une diminution de la phosphorylation de Rb, ainsi que de la quantité totale de protéine Rb, sont aussi observées. Par contre, une hausse du niveau d'expression de la protéine cycline D1 est mis en évidence, reflétant l'augmentation du pourcentage de cellules en G1. Une accumulation de l'inhibiteur p21Cipl est observée dans les complexes cycline D1/Cdk4 au cours du traitement des cellules PC12 au NGF. Ce phénomène est corrélé à une inhibition de l'activité kinase associée à ces complexes, et à un arrêt de prolifération des cellules (van Grunsven et col. , 1996b). L'augmentation de p21 est probablement due à un effet du NGF sur le promoteur de p21 et pourrait impliquer le facteur p300. L'ensemble de ces études devraient contribuer à notre compréhension des mécanismes d'arrêt du cycle cellulaire lors de l'initiation de la différenciation neuronale.
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Maréchal, Pierre-André. "Etude de la réponse cellulaire des levures soumises à des variations contrôlées du potentiel hydrique." Dijon, 1992. http://www.theses.fr/1992DIJOS048.
Full textAbstract:
L’influence de la variation du potentiel hydrique des milieux biologiques sur le comportement physiologique et structural des levures a été étudiée par l'intermédiaire de la mesure du taux de viabilité et de la cinétique de variation du volume cellulaire des microorganismes. Un système de mesure du volume cellulaire a été développe. Il comprend un micro-fermenteur spécifique qui permet une mesure individualisée du volume cellulaire des microorganismes, et un système d'analyse d'images couple a un microscope inverse qui permet par traitements informatiques une approche de la variation du volume cellulaire des levures. L’application de variation du potentiel hydrique sous forme de choc met en évidence une réponse cellulaire purement thermodynamique qui est en fonction de l'amplitude de la variation du potentiel hydrique du milieu biologique. L’importante mortalité observée (80 a 100%) lors de ces variations de potentiel hydrique peut être minimisée par l'application de variations linéaires (rampe) et lentes du potentiel hydrique (-0,0092 mpa/s; -0,0237 mpa/s). Le taux de mortalité observe dans le cas des rampes en milieu binaire (eau et glycérol) est de l'ordre de 10 a 20%. L'analyse thermodynamique des phénomènes de transfert au travers de la membrane des microorganismes et l'analyse des cinétiques de variations du volume cellulaire ont permis de mettre en évidence que la réponse volumique des microorganismes est fonction uniquement du niveau de potentiel hydrique du milieu et est indépendante de la vitesse de variation de celui-ci. La vitesse de sortie d'eau de la cellule semble être le facteur déterminant de la mortalité cellulaire. Des phénomènes d'osmorégulation active ont pu être observes lors de rampe de variation et pour des milieux contenant des éléments nutritifs. Ces phénomènes métaboliques permettent aux microorganismes de maintenir un volume cellulaire constant et une activité métabolique pour des niveaux de potentiel hydrique (psi=65 mpa) largement inférieur au seuil de tolérance défini dans la littérature. La viabilité observée dans le cas de ces rampes est de l'ordre de 100%.
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Brunet, de la Grange Philippe. "Régulation de l'hématopoïèse par les basses concentrations d'oxygène : rôles de l'antigène CD34 et du facteur de croissance VEGF165." Bordeaux 2, 2004. http://www.theses.fr/2004BOR21093.
Full textAbstract:
L'hématopoïèse, processus de production des cellules sanguines à partir des cellules souches, est notamment régulée par les concentrations d'O2 médullaires comprises entre 0 à 5 % (hypoxie). Nous avons établi des liens entre des facteurs intrinsèques à la cellule impliqués dans le processus de différenciation (antigène CD34) et leur sensibilité à l'hypoxie, et étudié les effets sur l'hématopoïèse de facteurs inductibles par l'hypoxie (Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF). La culture de cellules hématopoiétiques CD34+ à 1 % d'O2 augmente ou stabilise l'expression du gène cd34 qui diminue à 20 % d'O2. Le maintien prolongé de cette expression associé à une expression membranaire durable de la protéine sont corrélés avec le statut immature des cellules. D'autre part, le VEGF165 permet la survie de cellules souches murines en culture liquide à 1 % d'O2. Ainsi l'hypoxie freine la différenciation des cellules souches par l'expression du gène cd34 et favorise leur survie par le VEGF165Hematopoiesis, the process of mature blood production from stem cells, is in part regulated by bone marrow oxygen concentrations, which vary from 0 to 5 % (hypoxia). We studied in this work the relationships between cell intrinsic factors involved in the maturation process (CD34 antigen) and their sensitivity to hypoxia, and the effects of molecules inducible by hypoxia (Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF) on hematopoiesis. We showed that cultures of CD34+ cells at 1 % O2 induce or stabilize the cd34 gene expression that decreases at 20 % O2. The prolonged maintenance of this expression associated with the long-lasting membrane expression of the protein were correlated with the primitiveness of cells. We also showed that VEGF165 led to the survival of murine stem cells cultured at 1 % O2. This work suggests that hypoxia slows down the differentiation of stem cells by inducing cd34 gene expression, and favours their survival through VEGF165
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Le, Pabic Hélène. "Mise en évidence et caractérisation de la protéine ADAM12 dans le cancer du foie ; régulation de son expression." Rennes 1, 2004. http://www.theses.fr/2004REN10139.
Full textAbstract:
Le cancer du foie est la plus fréquente des tumeurs malignes observées chez le sujet de sexe masculin. Nos travaux ont mis en évidence l'expression de deux ADAMs, nouvelle famille de métalloprotéases, ADAM9 et ADAM12, dans les cellules étoilées activées. Leur expression est augmentée dans les cancers du foie et associée à l'agressivité des tumeurs. L'expression de ADAM12 est augmentée en présence de TGF béta, cytokine profibrogénique et implique la voie PI3K/ERK/p70s6kinase. L'étude du promoteur de ADAM12 a mis en évidence le rôle des facteurs c-Jun et SP1 dans l'expression constitutive de ADAM12. Nous nous sommes intéressés à la recherche du rôle biologique de ADAM12 dans les cancers du foie et avons identifié une nouvelle protéine interagissant avec ADAM12, RACK1, impliquée dans la communication cellulaire. Ces travaux pourront à terme permettre d'identifier le rôle de ADAM12 au cours de la progression tumorale et le cas échéant, le proposer comme outil diagnostic et cible thérapeutique.
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Drocourt, Lionel. "Régulation de l'expression des cytochromes P450 des sous-familles 2B, 2C et 3A dans l'hépatocyte humain : rôles physiologiques et pharmacologiques des récepteurs nucléaires GR, PXR, et VDR." Montpellier 2, 2001. http://www.theses.fr/2001MON20203.
Full text
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Mathieu, Marc. "Le récepteur mannose 6-phosphate/IGF-II dans les cellules mammaires : interactions avec la cathepsine D et l'IGF-II et régulation hormonale." Montpellier 2, 1990. http://www.theses.fr/1990MON20310.
Full textAbstract:
Dans les cellules cancereuses mammaires, une protease lysosomale, la cathepsine d et un facteur de croissance, l'igf-ii, se fixent avec une affinite comparable sur le recepteur m6p/igf-ii et interagissent negativement pour leur liaison a ce recepteur commun. A faibles concentrations, l'igf-ii se fixe exclusivement a ce recepteur et stimule la croissance cellulaire. La cathepsine d inhibe a la fois la liaison de l'igf-ii au recepteur mcp/igf-ii et son effet mitogene. A fortes concentrations, l'igf-ii interagit egalement avec le recepteur igf-i et stimule plus efficacement la croissance cellulaire. Dans ce cas, la cathepsine d n'a plus d'effet inhibiteur et les anticorps anti-igf-i recepteur bloquent partiellement l'effet de l'igf-ii. Ces resultats indiquent que, le recepteur m6p/igf-ii, dont le role de transducteur reste controverse, semble capable, dans les cellules mammaires cancereuses, de transmettre partiellement le signal mitogene d'igf-ii. D'autre part, la secretion de la cathepsine d est fortement augmentee dans les cellules cancereuses mammaires sous l'effet de l'stradiol. Cette hypersecretion est inversement correlee, dans differentes lignees, a la concentration en recepteurs m6p/igf-ii tant au niveau proteine que arn messager, ce qui suggere que ce recepteur pourrait etre implique dans ce mecanisme. Dans les cellules cancereuses mammaires, l'stradiol augmente l'expression genique de la cathepsine d et de l'igf-ii, et diminue celle du recepteur m6p/igf-ii. L'stradiol pourrait donc favoriser la secretion de la cathepsine d ainsi que celle d'autres enzymes lysosomales non hormono-sensibles par un phenomene de saturation du recepteur m6p/igf-ii par deux de ses ligands.
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Sordoillet, Catherine. "Régulation de la fonction stéroïdogène des cellules de Leydig porcines en culture : actions et sites d'action de facteurs de croissance." Lyon 1, 1992. http://www.theses.fr/1992LYO10118.
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Les fonctions testiculaires (steroidogenese et spermatogenese) sont regulees par deux systemes differents: regulation neuroendocrinienne par les gonadotrophines et regulation locale, paracrine ou autocrine, par des molecules intragonadiques. Dans ce travail in vitro, mene sur un modele de cellules de leydig porcines immatures en culture primaire, nous avons etudie la regulation locale de la fonction steroidogene de ces cellules, par des facteurs de croissance. Nous avons determine: i) les effets et les sites d'action de deux facteurs de croissance, l'egf et le fgfb, sur la secretion de testosterone; ii) les sites d'interaction entre l'egf et un autre facteur intragonadique, le tgf-beta 1. Nos resultats montrent que: i) les cellules de leydig possedent des recepteurs specifiques pour l'egf et le fgfb; ii) le fgfb et l'egf stimulent la production de testosterone induite par la lh, respectivement par une action stimulante sur l'activite de l'enzyme 17-ceto-reductase pour le fgfb et par une action stimulante sur les mecanismes de transport du cholesterol dans la mitochondrie et sur l'activite de l'enzyme 3-beta-hydroxysteroide deshydrogenase/isomerase (3-beta-hsdi) pour l'egf; iii) l'egf et le tgf-beta-1 ont des effets antagonistes au niveau du transport du cholesterol mais additifs sur l'activite de l'enzyme 3-beta-hsdi, leur interaction conduisant a un effet additif sur la secretion de testosterone stimulee par la lh. En conclusion, nos resultats demontrent la presence de recepteurs a l'egf et au fgfb sur des cellules de leydig purifiees et non transformees, et delimitent les etapes biochimiques regulees par l'egf et le fgfb ainsi que les sites d'interaction entre l'egf et le tgf-beta-1
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Paré, Émanuel. "Étude du rôle de PIN1 dans la régulation de la signalisation NOTCH et la croissance des cellules pancréatiques tumorales humaines." Mémoire, Université de Sherbrooke, 2016. http://hdl.handle.net/11143/8829.
Full textAbstract:
Le manque d’outils diagnostiques et thérapeutiques efficaces font de l’adénocarcinome ductal pancréatique le cancer le plus létal pour les Canadiens, avec son taux de survie à 5 ans de 8 %. Il est caractérisé par une fréquence élevée de mutations de RAS (90 %) qui est requise pour l’initiation et le maintien de la carcinogenèse. De plus, il a été démontré qu’une activation aberrante de la voie de signalisation NOTCH coopère avec la signalisation RAS dans la promotion de la carcinogenèse pancréatique. La famille NOTCH comprend quatre récepteurs transmembranaires qui subissent une série de clivages protéolytiques suite à la liaison avec leurs ligands. Ces clivages permettent la libération du domaine intracellulaire de NOTCH (NIC) dans le cytosol. NIC transloque ensuite au noyau pour s’associer avec ses partenaires transcriptionnels CSL et MAML1 et favoriser l’expression de gènes cibles tels qu’HES1. Nous avons récemment démontré que l’activation des sérine/thréonine kinases ERK1/2, en aval de RAS, promeut l’expression d’HES1 de façon NOTCH-dépendante dans les cellules pancréatiques tumorales humaines. Bien que cela suggère une interaction entre les voies ERK et NOTCH, les mécanismes sous-jacents cette interaction restent à être identifiés.
Il a été suggéré que PIN1, une prolyl-isomérase qui reconnait spécifiquement des résidus proline lorsque ceux-ci sont précédés d’une sérine ou d’une thréonine phosphorylée, interagit avec NIC1. Ainsi, nous avons émis l’hypothèse que la prolyl-isomérase PIN1 régule l’activité de la voie NOTCH et a un effet positif sur la croissance des cellules pancréatiques tumorales humaines. Pour y répondre, un modèle stable de cellules pancréatiques tumorales humaines MIAPaCa2 exprimant un shARN dirigé contre PIN1 a été généré. Nous avons démontré que PIN1 et la voie RAS/RAF/MEK/ERK régulent positivement les niveaux d’expression de NIC1. De plus, les niveaux d’expression de PIN1 régulent positivement les niveaux d’expression du récepteur NOTCH1 et du ligand DLL3 sans influencer les niveaux d’expression du récepteur NOTCH3 et des ligands JAGGED 1 et JAGGED 2. PIN1 a une influence positive sur les niveaux d’expression des gènes cibles de la voie NOTCH c-MYC et cycline D1 et une influence négative sur les niveaux d’expression d’HES1. Cette étude a également démontré que les niveaux d’expression de PIN1 influencent positivement la croissance en 2D ainsi que certains régulateurs du cycle cellulaire. Lorsque les cellules MIAPaCa2 sont ensemencées à faible densité, la taille des clones formés est influencée à la fois par les niveaux d’expression de PIN1 et par la voie RAS/RAF/MEK/ERK. Cependant, dans un contexte de croissance en indépendance d’ancrage, PIN1 influence négativement la croissance des cellules MIAPaCa2. Cette étude a démontré que PIN1 pouvait influencer le phénotype des cellules pancréatiques humaines. De plus, l’étude des mécanismes de régulation de la voie NOTCH a révélé une régulation complexe impliquant PIN1.
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Joannard, Florence. "Implication de protéines kinases et phosphatases dans la régulation de l'expression de cytochromes P-450 2B par le phénobarbital et l'interleukine-1béta dans les hépatocytes de rat en culture primaire." Rennes 1, 2002. http://www.theses.fr/2002REN10082.
Full textAbstract:
L'expression des cytochromes P-450 (CYP) impliqués dans l'élimination des xénobiotiques est inductible par ces derniers et inhibée par l'inflammation. Notre but a été d'étudier les voies de signalisation régulant l'expression des CYP2B par le phénobarbital (PB) (inducteur) et l'interleukine-1b (IL-1b) (cytokine inflammatoire) dans des hépatocytes de rat en culture. Nous avons montré une régulation de l'induction par le PB des CYP2B et 3A par l'AMP cyclique et certaines phosphatases et kinases. Cherchant à préciser l'implication de certaines kinases dans l'induction des CYP2B, nous avons montré que la p38 ne jouerait pas de rôle, bien que le PB active la p38a. L'IL-1b inhibe l'induction de manière rapide et transcriptionnelle. L'étude du rôle de différentes voies de signalisation a montré notamment qu'un métabolite de sphingolipides pourrait être un second messager médiant l'effet de l'IL-1b. En conclusion, des voies de phosphorylation régulent l'expression des CYP2B chez le rat.
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Bompard, Guillaume. "La protéine tyrosine phosphatase PTPL1 : localisation et rôles dans le contrôle de la croissance cellulaire et de l'apoptose." Montpellier 2, 2002. http://www.theses.fr/2002MON20124.
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Besset, Valérie. "Expression et régulation du système IGF par le TGFβ1 et le TNFα dans les cellules somatiques testiculaires." Lyon 1, 1994. http://www.theses.fr/1994LYO1T901.
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Yazidi, Ikram El. "Expression et régulation des facteurs de croissance FGF1 et FGF2 dans les cellules épithéliales normales et cancereuses du sein." Lille 1, 1996. http://www.theses.fr/1996LIL10024.
Full textAbstract:
Les facteurs de croissance FGF1 et FGF2 sont ubiquitaires et multifonctionnels. Ils contrôlent divers processus biologiques dont la prolifération cellulaire. La détection des facteurs FGF1 et FGF2 dans des tumeurs mammaires a suggéré que ces protéines seraient produites par les cellules tumorales et interviendraient comme facteurs mitogènes et angiogènes dans la croissance tumorale. La culture in vitro des cellules épithéliales mammaires normales et cancéreuses permettait de s'affranchir des autres constituants de la glande mammaire et d'analyser ainsi la production de facteurs de croissance FGF par ces cellules. Des techniques biochimiques, de biologie cellulaire et moléculaire ont permis de montrer que les cellules épithéliales mammaires humaines normales et cancéreuses expriment différentiellement les ARNm du FGF1 et du FGF2 et les protéines correspondantes. Le gène FGF1 répond au sérum et aux œstrogènes dans les cellules épithéliales mammaires normales et cancéreuses. Les régulations sont transcriptionnelles et/ou traductionnelles et diffèrent en fonction de l'état physiologique de la cellule (normale, immortalisée ou cancéreuse). À l'opposé, le gène FGF2 est insensible aux facteurs sériques et aux œstrogènes. Le gène FGF1 comprend une longue région 5' non codante constituée de 6 exons non codants à l'origine de 8 transcrits alternativement épisses différents spécifiant la même protéine FGF1. L'étude de 4 de ces transcrits dans les cellules épithéliales mammaires cancéreuses ou non a mis en évidence des expressions et des régulations différentielles. Ces résultats suggèrent un rôle pour les exons non codants de la region 5' dans la régulation génique du FGF1. L'analyse comparative de l'expression, de la régulation et du rôle de l'épissage alternatif du gène FGF1 dans les cellules épithéliales normales et cancéreuses du sein pourrait contribuer à la compréhension des mécanismes d'action du facteur FGF1 dans la prolifération cellulaire normale et la croissance anarchique survenant lors de la cancérogenèse.
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Leblay, Julie. "Expression des ARN méssagers cycline A et C-MYC dans deux conditions de prolifération cellulaire hépatique normale chez le rat : hépatectomie partielle et administration d'éthinylestradiol." Paris 5, 1996. http://www.theses.fr/1996PA05P136.
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Hasseine, Larbi Kamal. "Régulation de la signalisation et de l'action de l'insuline par la protéine adaptatrice Hrs et par les microARN ciblant Fox01." Nice, 2008. http://www.theses.fr/2008NICE4081.
Full textAbstract:
Dû à son développement très rapide, le diabète est devenu une menace de santé publique au niveau mondial. En effet, en 2005, l’Organisation Mondiale de la Santé estimait le nombre de diabétiques dans le monde à plus de 180 millions, et elle prévoit que ce nombre aura doublé d’ici 2030. Cette maladie métabolique se caractérise par un état d’hyperglycémie chronique, qui est responsable des complications micro-vasculaires au niveau de l’œil, du rein, et des nerfs. La plupart des patients diabétiques développent à long terme des complications microvasculaires, dont la rétinopathie diabétique proliférante qui est la cause principale de cécité de l’adulte dans le monde occidental. Le niveau d’expression du VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor), facteur angiogénique et mitogène, est augmenté dans les yeux des patients diabétiques. L’insuline et l’IGF-1 ont également été impliqués dans l’angiogenèse dérégulée au cours du diabète. L’action de l’insuline et du VEGF est médiée par leurs récepteurs spécifiques respectifs, IR et VEGF-R2. L'un des principaux mécanismes utilisé par les cellules pour atténuer le signal induit par ces facteurs de croissance est l'endocytose et la dégradation des récepteurs. Au cours de la première partie de mon travail de thèse, je me suis intéressé à l’étude du rôle de la protéine adaptatrice Hrs (Hepatocyte growth factor-Regulated tyrosine kinase Substrate) dans le mécanisme d’internalisation et de dégradation d’IR et VEGF-R2. Nous avons montré que l'expression ectopique de Hrs a comme effet une augmentation du nombre des deux récepteurs et de leur phosphorylation sur tyrosine conduisant à une amplification des voies de signalisation en aval. A l’inverse de IR, pour induire cet effet sur VEGF-R2, Hrs requiert son domaine UIM (Ubiquitin Interaction Motif). De plus, Hrs est phosphorylée sur tyrosine en réponse à l'insuline et au VEGF. Le domaine UIM est nécessaire pour la phosphorylation de Hrs en réponse au VEGF, mais pas en réponse à l'insuline. Nous avons également observé que Hrs co-localise et co-immunoprécipite avec ces deux récepteurs indépendamment de son domaine UIM. Enfin, nous avons montré que Hrs inhibe la dégradation de VEGF-R2 induite par Nedd4 et agit de façon additive à Grb10. L’ensemble de ces résultats suggèrent que Hrs est un régulateur positif de la voie de signalisation du VEGF et de celle de l’insuline. Dans une deuxième partie de ma thèse, je me suis intéressé à la régulation du facteur de transcription FoxO1 par les microARN. FoxO1 est un des acteurs clefs des réponses transcriptionnelles à l’insuline, et joue un rôle central dans l’adaptation métabolique au jeûne. De plus, avec ses homologues, il est impliqué dans des fonctions cellulaires majeures telles que l'apoptose, le cycle cellulaire, la réparation des dommages de l'ADN ou encore la différenciation cellulaire. La modulation de l’activité transcriptionnelle de ce facteur fait appel à des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation, l’ubiquitination et l’acétylation. Nous avons voulu savoir si FoxO1 est la cible d’une régulation post-transcriptionnelle par les microARN. Les microARN sont de petites séquences d’ARN non-codantes de 19-24 nucléotides, se caractérisant par une expression spatio-temporelle et par une distribution tissu-spécifique. Ces deux caractéristiques suggèrent leur implication dans la régulation de processus physiologiques cruciaux tels l’apoptose, le développement, le métabolisme des lipides, la différenciation adipocytaire et la physiologie des cellules β pancréatiques. Des publications récentes montrent que ces microARN interviennent également dans des conditions pathologiques comme le cancer. Nous avons démontré que, dans une lignée néonatale immortalisée d’hépatocytes de souris, le miR-139 peut réguler le niveau protéique de FoxO1 sans modifier le niveau d'expression de ses ARN messagers. Cette diminution du niveau protéique affecte les événements en aval de ce facteur de transcription tels que l'expression des gènes cibles (AdQR1, AdQR2 et Mttp), et la phosphorylation de PKB en réponse à l'insuline. En outre, dans ces cellules, l’expression du miR-139 est régulée négativement par l'insuline, mais positivement par le glucagon et par le glucose. Ce dernier résultat a également été observé dans le foie d’animaux injectés avec ces hormones ou avec le glucose. Enfin, nous avons trouvé qu’un régime riche en graisse et l’état de jeûne ne régulent pas l’expression du miR-139. L’ensemble de nos données révèle un nouveau mécanisme par lequel miR-139 régule la protéine FoxO1 et son activité transcriptionnelle en réponse à des facteurs environnementauxDue to its epidemic development, diabetes has become a threat to global public health. In 2005, the World Health Organization estimated the number of diabetics in the world to be over 180 millions and expects that this number will double by the year 2030. This metabolic disease is characterized by a chronic state of hyperglycemia, which is thought to be responsible for microvascular complications affecting kidneys, eyes and nerves. Over the years, most diabetic patients develop some microvascular complications including diabetic retinopathy, which is the leading cause of blindness of adults in the western world. The level of VEGF expression (Vascular Endothelial Growth Factor), a mitogenic and a angiogenic factor, is increased in the eyes of diabetic patients. Insulin and IGF-1 are also thought to be implicated in abnormal vassal growth. The action of insulin and VEGF is mediated by their respective specific receptors, IR and VEGF-R2. One of the major mechanisms used by cells to attenuate activation by growth factors is endocytosis and degradation of receptors. In the first part of my PhD work, I have been interested in the role of the adapter protein Hrs (Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substrate) in the mechanism driving internalization and degradation of IR and VEGF-R2. We have shown that ectopic Hrs expression increases VEGF-R2 and IR number and tyrosine phosphorylation, leading to amplification of their downstream signaling. The UIM (Ubiquitin Interacting Motif) domain of Hrs is required for Hrs-induced increases in VEGF-R2, but not in IR. In addition, Hrs is tyrosine-phosphorylated in response to VEGF and insulin. We show that the UIM domain is required for Hrs phosphorylation in response to VEGF, but not to insulin. Importantly, Hrs co-localizes with both VEGF-R2 and IR, and co-immunoprecipitates with both in a manner independent of the Hrs-UIM domain. Finally, we demonstrate that Hrs inhibits Nedd4-mediated VEGF-R2 degradation and acts additively with Grb10. We conclude that Hrs is a positive regulator of VEGF-R2 and IR signaling, and that ectopic Hrs expression protects both VEGF-R2 and IR from degradation. In the second part of my PhD work, I have been interested in the regulation of the transcription factor FoxO1 by microRNAs. FoxO1 is a master regulator of insulin signaling, and plays a central role in metabolic adaptation to fasting. With its homologues, FoxO1 is involved in a wide range of events, including apoptosis, cell cycle, DNA repair and cell differentiation. The regulation of FoxO transcription factors is due to a complex series of post-translational modifications, including phosphorylation, ubiquitination and acetylation. We were interested to see whether FoxO1 could be regulated at the post-transcriptional level by microRNAs. MicroRNAs are short non-coding RNAs (19 to 24 nucleotides) characterized by a spatial-temporal expression and a tissue-specific distribution, heralding important biological functions in apoptosis, development, lipid metabolism, adipocyte differentiation and pancreatic β cell physiology. Recent data have shown that these microRNAs could be involved in pathological conditions such as cancer. We found, in immortalized neonatal mouse hepatocytes, that miR139 regulates FoxO1 protein levels without affecting its mRNA expression. This effect requires a direct interaction between miR-139 and the 3’UTR of FoxO1 mRNA. The decrease in FoxO1 protein results in a decrease in FoxO1-mediated regulation of target genes, such as AdQR1, AdQR2 and Mttp, and in insulin-stimulated PKB phosphorylation on Ser473. Moreover, we found, in these cultured neonatal hepatocytes, that mature miR-139 is negatively regulated by insulin, but positively by both glucose and glucagon. Importantly, this regulation was also observed in vivo in the liver of mice injected with insulin, glucagon and glucose. Finally, we found that a high fat diet and fasting do not appear to regulate the expression of miR-139. Our findings suggest a new mode of FoxO1 regulation by which miR-139 maintains the protein level of FoxO1 to preserve homeostatic regulation of its transcriptional activity in response to environmental stimuli
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Prud'Homme, Nicolas. "L'absence des kératines 8/18 augmente la résistance des cellules hépatocytaires au stress oxydant par une modulation de l'association de l'hexokinase à la mitochondrie." Thesis, Université Laval, 2012. http://www.theses.ulaval.ca/2012/29649/29649.pdf.
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