Academic literature on the topic 'Cellules interstitielles de valves'

The study was carried out to evaluate the biopotency of antioxidant supplements on physiological, testicular and oxidative biomarkers in adult male guinea pigs (Cavia porcellus). A total of 60 adult male guinea pigs of three months of age with an average body weight of 500±20g were randomly allocated into three dietary treatment groups of vitamin C, vitamin E and selenium and each comprised four varying levels with five animals per group in a completely randomized design (CRD). Feed and water were provided ad-libitum. The testicular morphology showed a significant (P<0.05) difference in weight of right testis, weight of left testis, paired testis weight, right testis width, testis volume, testis density, right testis length and left testis length of guinea pig supplemented varying dosage of vitamin C, E and Selenium. microphotograph indicated considerable changes in seminiferous tubules density, size, and other morphological characteristics, also intertubular space, basement membrane, leydigs cells and spermatogonia of the guinea pigs supplemented varying dosage of vitamin C, E and Selenium revealed considerable changes. The supplementation of adult male guinea pigs diets with 200 mg vitamin C had the highest values of testicular morphometric followed by 15 mg vitamin E group and 0.3 mg of selenium. Similarly, considerable histo-architectural changes in seminiferous tubules and interstitial cells size and shape occurred in guinea pigs supplemented 200, 15 and 0.3 mg per kg diet vitamin C, E and selenium respectively. Therefore, supplementation of vitamin C, E and Selenium has a profound effect on testicular histo-morphology of adult male guinea pigs. L'étude a été réalisée pour évaluer la biopotence des suppléments antioxydants sur les biomarqueurs physiologiques, testiculaires et oxydatifs chez les cobayes mâles adultes (Caviaporcellus). Un total de 60 cobayes mâles adultes de trois mois avec un poids corporel moyen de 500 ± 20 g ont été répartis au hasard dans trois groupes de traitement diététique de vitamine C, vitamine E et sélénium et chacun comprenait quatre niveaux variables avec cinq animaux par groupe en une conception complètement aléatoire. L'alimentation et l'eau étaient fournies ad libitum. La morphologie testiculaire a montré une différence significative (P <0.05) du poids du testicule droit, du poids du testicule gauche, du poids du testicule apparié, de la largeur du testicule droit, du volume du testicule, de la densité du testicule, de la longueur du testicule droit et de la longueur du testicule gauche du cobaye supplémenté en doses variables de vitamine C, E et sélénium. La microphotographie a indiqué des changements considérables dans la densité, la taille et d'autres caractéristiques morphologiques des tubules séminifères, ainsi que l'espace intertubulaire, la membrane basale, les cellules de 'leydigs' et la spermatogonie des cobayes complétés par des doses variables de vitamine C, E et de sélénium ont révélé des changements considérables. La supplémentation des régimes alimentaires de cobayes mâles adultes avec 200 mg de vitamine C avait les valeurs les plus élevées de morphométrie testiculaire suivie par 15 mg de groupe de vitamine E et 0.3 mg de sélénium. De même, des changements histoarchitecturaux considérables de la taille et de la forme des tubules séminifères et des cellules interstitielles se sont produits chez les cobayes ayant reçu respectivement 200, 15 et 0.3 mg par kg de vitamine C, E et de sélénium. Par conséquent, la supplémentation en vitamine C, E et en sélénium a un effet profond sur l'histomorphologie testiculaire des cobayes males adultes.

Les pathologies cardiovasculaires sont le plus souvent l’aboutissement des processus liés à l’athérosclérose. Elles représentent la première cause de morbi-mortalité dans le monde et leur incidence s’accroit avec le vieillissement de la population et l’expansion de facteurs de risques comme le diabète ou l’obésité. La sténose valvulaire aortique (SVA) est la valvulopathie la plus fréquente dans les pays développés présentant de nombreux points communs avec l’athérosclérose vasculaire. En plus des facteurs de risque, les lésions valvulaires et les lésions vasculaires partagent des similitudes dans les processus physiopathologiques impliqués comme l’inflammation, la fibrose, l’angiogenèse et la calcification. Ce dernier processus apparait dans les stades avancés des pathologies liées à l’athérosclérose et joue un rôle critique via son implication dans la stabilité de la plaque ou l’épaississement des cuspides valvulaires aortiques. Les macrophages, cellules issues de la différenciation des monocytes infiltrés, jouent un rôle prépondérant dans ces lésions via les phénotypes classiques (M1) et alternatifs (M2). Néanmoins cette dichotomie ne reflète pas complètement la variété de leur plasticité et les différents phénotypes induits notamment par le microenvironnement des monocytes/macrophages (zones riches en lipides, zones riches en fer ou zones riches en calcification). Dans la valve aortique, les cellules interstitielles de valve (VIC) forment la population cellulaire la plus présente au sein de la valve aortique. Ces cellules jouent un rôle déterminant dans le maintien du tissu valvulaire, mais également dans les processus de calcification menant à la SVA. Dans un premier temps, cette thèse a pour but d’étudier la capacité des macrophages à former des ostéoclastes, cellules responsables de la dégradation de la matrice osseuse, au sein des plaques d’athérosclérose. Dans un second temps, ce travail se focalisera sur les processus de calcification de la valve aortique via l’étude du rôle de la leptine dans les calcifications valvulaires (étude a priori) puis dans une étude transcriptomique sans a priori de VIC issues de valve sténosées et non-sténosées. Nos résultats sur les macrophages montrent ex vivo que les cellules en bordure des calcifications vasculaires sont des macrophages alternatifs de type M2. In vitro, ces cellules sont incapables de se différencier en ostéoclastes et de résorber une matrice osseuse. Pour l’étude de l’effet de la leptine sur les VIC, nous montrons que la leptine sérique est plus élevée chez des patients présentant une SVA, nous confirmons que la leptine et son récepteur sont exprimés au sein des valves aortiques et que la leptine favorise la différenciation ostéoblastique des VIC de manière dépendante des voies Akt et ERK. Enfin, l’étude transcriptomique a permis de mettre en évidence une nouvelle voie métabolique dérégulée dans les VIC. Cette enzyme est sous exprimée dans les VIC issues de valves pathologiques et dans les zones calcifiées des valves aortiques sténosées. Par ailleurs, le traitement des VIC par le produit de cette enzyme en milieu procalcifiant inhibe la calcification. Cette thèse met en avant de nouveaux indices sur les processus de calcification observés dans les plaques d’athérosclérose et les valves aortiques sténosées. Ces résultats décrivent l’impossibilité des M2 à former des ostéoclastes capables de résorber les calcifications. Il sera intéressant d’étudier le phénotype des macrophages en bordure des calcifications des valves aortiques sténosées. D’autre part, il sera intéressant d’étudier l’origine de la leptine dans la valve et son mécanisme d’action sur les VIC. Enfin, ce travail a mis à jour une nouvelle voie métabolique, impliquée dans le développement des calcifications valvulaires, qui pourrait constituer une voie thérapeutique innovante dans le traitement médicamenteux de la SVA
Cardiovascular diseases (CVD) are the most often outcome of atherosclerosis processes. CVD are the first leading cause of death rate with an increasing incidence due to ageing populations and expansion of risk factors such as diabetes mellitus or obesity. Aortic valve stenosis (AVS) is the most frequent valvulopathy in developed countries sharing common points with vascular atherosclerosis. More than only risk factors, valvular and vascular lesions share common pathophysiological processes implicated in the development of the disease such as inflammation, fibrosis, angiogenesis and calcification. This last process appears in late stages of atherosclerosis diseases and play critical roles via implication in plaque stability or thickening of the aortic valve. Macrophages are cells deriving from infiltrated monocytes, playing an important role in the inflammatory state of lesions via classical (M1) or alternative phenotypes (M2) phenotypes. Nevertheless, this dichotomy does not reflect completely the variety of their plasticity and different phenotypes induced by the microenvironment of monocytes/macrophages (lipid riche zone, iron riche zone or calcium rich zone). In the aortic valve, valvular interstitial cells (VIC) are the most prominent cell type found in the aortic valve. These cells play a major role not only in the valve tissue homeostasis but also in the calcification processes leading to AVS. In a first part, the aim of this thesis is to elucidate the ability of macrophages to differentiate into osteoclasts, cell type responsible for bone matrix remodeling, inside atherosclerosis plaques. In a second part, this work will focus on the calcification processes occurring in the aortic valve via the study of the role of leptin in valvular calcification (association study) and then in a transcriptomic analysis of VIC isolated from calcified versus non calcified aortic valves (genome-wide expression study). Our results about macrophages show that ex vivo cell surrounding vascular calcification are alternative M2 macrophages. In vitro, these cells are no able to differentiate into true osteoclasts nor to resorb calcium deposits. Concerning the role of leptin on VIC, the results show that serum leptin is higher in patients with AVS, leptin and its receptors are expressed in the aortic valves and leptin enhances the osteoblast différenciation of VIC in an Akt and ERK dependant manner. Finally, the transcriptomic analysis allowed to highlight a new pathway deregulated in VIC. This enzyme is underexpressed in VIC isolated from calcified aortic valves and in the calcified zonesAbstract4of stenosed aortic valves. Otherwise, treating VIC with the product of this enzyme in a procalcifying medium inhibits calcification processes.This thesis highlights new insights into the calcification processes occurring in atherosclerosis lesions and calcified aortic valves. These results describe that M2 macrophages cannot differentiate into osteoclasts and reverse calcification formation inside atherosclerosis plaques. In parallel, it would be interesting to study the macrophages phenotypes surrounding calcium deposits in stenosed aortic valves. Then, it will be interesting to decipher the origin of leptin and its precise mechanism of action on VIC. Finally this work points out a new metabolic pathway implicated in the development of valvular calcification which could be a medical treatment of SVA

Les maladies cardiovasculaires, conséquence de l’athérosclérose, sont la première cause de morbi-mortalité dans le monde et voient leur incidence et sévérité augmenter avec l’expansion de leurs principaux facteurs de risque, tels que l’âge, l’obésité et le diabète. La sténose valvulaire aortique, valvulopathie la plus fréquemment rencontrée dans les pays occidentaux essentiellement chez le sujet vieillissant, partage de fortes similitudes avec l’athérosclérose vasculaire. En effet, les plaques athéroscléreuses et les lésions valvulaires sont le siège de processus d’inflammation, d’angiogenèse, de fibrose et de calcification. Les macrophages, issus de la différenciation tissulaire des monocytes infiltrés, jouent un rôle clé dans l’apparition des lésions athéroscléreuses vasculaires et leur devenir. Leur rôle dans l’état inflammatoire des lésions est aujourd’hui bien établi avec de récentes publications qui font état des propriétés plastiques des macrophages, selon leur microenvironnement. Deux principaux sous types de macrophages ont été décrits dans les plaques athéroscléreuses, les macrophages M1 dit « classiques » et M2 dits « alternatifs ». Leur rôle respectif dans la thrombogénécité, la protéolyse et l’angiogenèse, processus impliqués dans l’instabilité de la plaque, ont été moins étudiés. En revanche, les macrophages sont peu décrits dans la valve, à l’inverse des cellules interstitielles de valves (VIC), qui sont cruciales pour le maintien de l’homéostasie et la fonction valvulaire et sont impliquées dans la fibrose et la rigidité des feuillets valvulaires. Mon travail de thèse a pour objectif d’étudier les rôles des macrophages M1/M2 dans les pathologies vasculaires et valvulaires chez l’homme. Nous nous sommes focalisés sur leurs rôles dans l’instabilité de la plaque athéroscléreuse (processus de coagulation et de remodelage vasculaire) et dans la fibrose valvulaire ainsi que sur leur modulation phénotypique par d’autres types cellulaires présents dans les lésions, les polynucléaires neutrophiles dans la plaque ou les VIC dans la valve.Nos résultats suggèrent que les macrophages M1 et M2 pourraient moduler différemment des processus physiopathologiques majeurs de l'athérosclérose. Par ailleurs, les macrophages M1 de patients diabétiques présentent un phénotype délétère qui pourrait expliquer la plus grande vulnérabilité des plaques d’athérosclérose observée chez ces sujets. Concernant la pathologie valvulaire, après avoir caractérisé par analyse histologique les M1/M2 dans les valves aortiques humaines, nous avons montré que les macrophages M1 sont impliqués dans la progression de la fibrose via la modulation de leur répertoire sécrétoire par les VIC.Cette thèse apporte de nouveaux indices sur les processus physiopathologiques impliqués dans les maladies vasculaires et valvulaires. Elle met l’accent sur le rôle délétère des macrophages M1 chez les sujets diabétiques en pathologie vasculaire et identifie également une fonction jusque-là méconnue des M1 dans la progression de la fibrose, associée au « cross-talk » avec les VIC. Il conviendra par la suite d’identifier les mécanismes moléculaires sous-jacents à ces intéractions, ce qui devrait permettre d’envisager de nouvelles voies thérapeutiques visant à moduler l’effet de ce sous-type cellulaire dans ces pathologies
Cardiovascular disease, as a result of atherosclerosis, are the main cause of morbidity and mortality in the world and see their incidence and severity increase with the expansion of their major risk factors, such as age, obesity and diabetes. Aortic valve stenosis, valve disease most frequently encountered in Western countries mainly in the old subject, shares strong similarities with vascular atherosclerosis. Indeed, atherosclerotic plaques and valvular lesions are the site of inflammation, angiogenesis, fibrosis and calcification processes. Macrophages, from monocytes infiltrated tissue differentiation, play a key role in the development of vascular atherosclerotic lesions and their future. Their role in the inflammatory state of the lesions is now well established with recent publications that report on plastic properties of macrophages, according to their microenvironment. Two major subtypes of macrophages have been described in the atherosclerotic plaques, classically (M1) or alternatively (M2) activated macrophages. Their respective role in thrombogenicity, proteolysis and angiogenesis processes involved in plaque instability, have been less studied. In contrast, macrophages are not disclosed in the valve, compared to the valvular interstitial cells (VIC), which are crucial for the maintenance of homeostasis and the valvular function and are involved in the fibrosis and rigidity of the valvular leaflets. My thesis aims to study the roles of macrophages M1/M2 in vascular and valvular pathologies in humans. We focused on their roles in the instability of atherosclerotic plaque (haemostatic or clotting process and vascular remodeling) and valvular fibrosis and their phenotypic modulation by other cell types present in the lesions, neutrophils (PNN) in the plaque or VIC in the valve.Our results suggest that the M1 and M2 macrophages may differently modulate major pathophysiological processes of atherosclerosis. In addition, M1 macrophages from diabetic patients have a deleterious phenotype that could explain the increased vulnerability of atherosclerotic plaques observed in these subjects. About valvular pathology, after characterized histologically M1/M2 in human aortic valves, we have shown that the M1 macrophages are involved in the progression of fibrosis through the modulation of their secretory repertoire by VIC.This work provides new clues about the pathophysiological processes involved in vascular and valvular diseases. It focuses on the deleterious role of M1 macrophages in diabetic subjects in vascular pathology and also identifies an unknown function of M1 in the progression of fibrosis associated with "cross-talk" with VIC. It will be necessary later to identify the molecular mechanisms underlying these interactions, which is expected to consider new therapeutic approaches to modulate the effect of this cell subtype in these diseases

Définie comme étant le rétrécissement de la valve, la sténose aortique (SA) est la 3ème pathologie cardiovasculaire dans les pays industrialisés. Touchant essentiellement les personnes âgées de plus de 65 ans, cette pathologie représente un véritable problème de santé publique compte tenu du vieillissement de la population. Considérée initialement comme issue d’un processus passif de dégénérescence, il est désormais établi que la sténose aortique est une pathologie dite « atherosclerosis-like » caractérisée par les processus d’inflammation, de fibrose, de néo-angiogenèse et de calcification. Certaines protéines de la voie de coagulation tel que le facteur tissulaire (FT) sont connues pour avoir un rôle pro-fibrotique et participent activement au développement des lésions athéroscléreuses. Leurs rôles dans la SA semblent donc probables et restent à être identifiés.Composante cellulaire majeure de la valve aortique, les VICs présentent 5 sous-populations distinctes : les cellules progénitrices embryonnaires (EPCs), les cellules progénitrices (pVICs), quiescentes (qVICs), activées (aVICs) et ostéoblastiques (obVICs). Au cours de la valvulogenèse, les EPCs permettent la cellularisation de la valve en se différenciant en qVIC. Celles-ci maintiennent l’homéostasie valvulaire et, en cas de lésion, s’activent (aVICs) pour réparer efficacement le tissu valvulaire. L’inflammation valvulaire et l’activation des VICs initient la sécrétion de protéines pro-calcifiantes induisant la différenciation des aVICs en obVICs. Enfin, les pVICs, naturellement présentes au sein de la valve (appelées résidantes) ou issues de la circulation sanguine (appelées hématopoïétiques), semblent favoriser le renouvellement cellulaire et peuvent être impliquées dans les processus angiogénique et ostéoblastique.Bien que décrites, la validation de la culture primaire des VICs par le suivi de ces sous-populations n’avait pas été réalisé et à constituer notre premier objectif. Nous avons ensuite étudié l’implication des voies de signalisation du FT dans le développement de la SA.Dans le cadre du suivi longitudinal des VICs depuis les valves aortiques humaines contrôles et pathologiques jusqu’à la culture in vitro réalisée sur plastique et sur collagène, nous avons tout d’abord montré que les différentes sous-populations étaient présentes au sein de ces valves avec des localisations et des proportions différentes selon l’état physiopathologique du tissu. Après digestion enzymatique de la valve, elles sont toutes retrouvées mais lors de la mise en culture, les pVICs hématopoïétiques ont disparu, quel que soit le support. Nous avons ainsi validé le modèle de culture primaire des VICs tout en mettant en lumière ses limites : absence des pVICs hématopoïétique, activation et différenciation ostéoblastique spontanée des VICs au cours de la culture.Dans le cadre de l’’étude de l’implication du FT dans le développement de la SA, nous avons montré sa colocalisation avec la thrombine et les calcifications de valves pathologiques. A partir de la culture primaire de VICs issues de valves humaines contrôles et pathologiques, nous avons montré que l’expression et l’activité du FT étaient constitutivement plus importantes pour les VICs pathologiques et que son expression pouvait être induite par l’IL1β. De plus, l’activation du FT, en présence de son ligand le facteur VII, induit, directement et via le récepteur PAR2, différentes voies de signalisation impliquées dans la prolifération cellulaire et les processus de fibrose et de calcification. Cette étude suggère ainsi que le FT produit par les VICs est un médiateur clef dans le développement de la sténose aortique
Defined as the narrowing of the aortic valve, aortic stenosis (AS) is the third cardiovascular pathology in industrialized countries. Affecting mainly people aged over 65 years, AS represents a major public health problem because of the aging of the population. After initially been considered as a passive degenerative process, it is now established that AS is an "atherosclerosis-like " disease characterized by the processes of inflammation, fibrosis, neo-angiogenesis and calcification. Some proteins of the coagulation pathway such as tissue factor (TF) are known to have a pro-fibrotic role and actively participate in the development of atherosclerotic lesions. Their implication in AS seems, therefore, probable and remain to be identified.Prevalent cellular component of the aortic valve, VICs have five distinct subpopulations: embryonic progenitor cells (EPCs), progenitor cells (pVICs) quiescent (qVICs), activated (aVICs) and osteoblastic (obVICs). During the valvulogenesis, EPCs allow the cellularization of the valve, differentiating into qVICs. These cells maintain the valvular homeostasis and, in case of damage, are activated (aVICs) to effectively repair the valve tissue. The valvular inflammation and VICs activation initiate the secretion of pro-calcifying proteins inducing the differentiation of aVICs into obVICs. Finally, pVICs, naturally present within the valve (called resident) or from the blood circulation (called hematopoietic), seem to promote cell renewal and may be involved in the angiogenic and osteoblastic processes.Although described, these subpopulations have never been studied longitudinally, in respect to their behavior in vitro. Our first objective was to perform this investigation. Our second objective was to study the potential role of TF pathway in the deleterious mechanisms of AS.As part of the longitudinal follow-up of VICs from control and pathological human aortic valves to the in vitro culture performed on plastic and collagen, we first showed that different subpopulations were present in these valves with different locations and proportions according to the pathophysiological state of the tissue. After enzymatic digestion, all subpopulations are found but, in culture, hematopoietic pVICs disappeared, whichever the support. Thus, we validated the primary culture model of VICs while highlighting its limitations: lack of hematopoietic pVICs, spontaneous osteoblastic differentiation and activation of VICs in culture.As part of the study the involvement of FT in the AS development, we showed its colocalization with thrombin and calcifications of pathological valves. We showed that the expression and activity of TF were constitutively more important in VICs from fibrocalcified valves than control ones and that IL-1β for pathological VICs and that its expression could be induced by IL1 beta. In addition, TF activation in the by its ligand FVII, induced, directly and via the PAR-2 receptor, different signaling pathways involved in cell proliferation and the processes of fibrosis and calcification. Thus, our findings suggest that the FT expressed by VICs mediates fibrocalcific processes of aortic stenosis

Les cellules interstitielles de Cajal (CIC) sont des cellules impliquées principalement dans l'activité autorythmique du tractus digestif. Notre étude concerne les mécanismes à l'origine des ondes lentes (DL) générées par les CIC. Nous avons montré, au niveau de l'estomac de souris, que la fréquence des DL antrales est la même que celle du corps lorsque les CIC de ces deux régions sont interconnectées. Chez les témoins, le pacemaker dominant est situé au niveau de la région proximale du corps et impose sa fréquence à tout l'organe. Chez les souris WN-Jv, le réseau de CIC est altéré au niveau du corps. La fréquence imposée à l'organe provient alors de propriétés intrinsèques acquises par les CIC antrales qui déchargent à une fréquence plus élevée que chez les témoins. Comme la fréquence de l'organe est similaire à celle des témoins, l'apparition de pacemakers dominants antraux pourrait traduire qu'un mécanisme de compensation visant à pallier à la défaillance des CIC du corps s'est mis en place. L'altération des réseaux de CIC s'accompagne presque invariablement de profondes perturbations de la motricité digestive. Nous avons montré qu'à l'inverse, les dysfonctionnements observés chez les patients atteints de la maladie de Crohn s'accompagnent de la disparition des CIC situées dans les couches musculaires. Par contre, nous n'avons pas observé de modification des CIC localisées au niveau des plexus myentériques, du plexus musculaire profond et des septa. Nos travaux contribuent à montrer l'importance des CIC dans la genèse de l'activité pacemaker et ouvrent des perspectives nouvelles de recherche se rapportant aux altérations de la motricité digestive
The interstitial cells of Cajal (ICC) which are mesenchymal cells located in the gastrointestinal tract are mainly involved for the generation of electrical slow waves. Here we studied the mechanism of slow waves generated by ICC and whether disruption of ICC networks can lead to dysrhythmias. Our results show that slow wave frequencies were constant throughout wild-type (WT) mice gastric muscle sheets containing corpus and antrum. Separating the antrum from the corpus caused a significant drop in antral slow wave frequencies indicating that gastric slow waves originate from a dominant pacemaker site in the orad corpus. ICC networks were disrupted in the corpus of WN-Jv mice. Antral pacemaker frequency in ICC from WN-Jv stomachs was the same as in corpus ICC. Chronic depletion of ICC networks disrupts the proximal-to-distal frequency gradient, and emergence of ectopie pacemakers in the antrum may be caused by reprogramming of the ICC pacemaker apparatus. Disruption of ICC networks lead in the generation of motility disorders. The aim of the second study was to determine if there is an abnormality in the density or distribution of ICC from patients with Crohn's disease. Tissues from Crohn's disease patients showed an almost complete abolition of ICC within the external muscle layers and a significant reduction in numbers at the level of the myenteric and deep muscular plexuses. The disturbance of intestinal motility in Crohn's disease may be a consequence of the loss of specifie ICC. Our findings strengthen the role of ICC in electrical pacemaking and suggest that ICC are potentially important target for the study of new treatments of gastrointestinal motor disorders

Les cellules interstitielles de cajal (cic) sont des cellules mesenchymateuses du tractus digestif des mammiferes impliquees principalement dans l'activite auto-rythmique et la neuroregulation de la motricite digestive. Notre etude concerne la caracterisation morpho-fonctionnelle des cic dans l'estomac, l'intestin grele et le colon chez l'homme. Nous avons mis en uvre des techniques d'immunohistologie en microscopie de fluorescence et confocale, d'immunocytochimie a haute resolution et de microscopie electronique a transmission. La caracterisation des cic a ete affinee par la mise en evidence du recepteur tyrosine kinase (c-kit) qu'elles expriment. Nous avons montre que dans les trois regions etudiees les cic etaient presentes au niveau des musculeuses lisses, autour des plexus nerveux ganglionnaires et dans les plexus aganglionnaires. Nos resultats contribuent a une connaissance plus exhaustive de la distribution des cic dans le tractus digestif chez l'homme. Nous avons montre a l'echelle ultrastructurale l'existence de contacts etroits entre les cic c-kit positives, les fibres nerveuses et les cellules musculaires. Nos travaux immunohistochimiques montrent que ces fibres nerveuses pouvaient contenir divers mediateurs a fonction excitatrice ou inhibitrice sur l'activite motrice a savoir : la substance p, l'enzyme de synthese du monoxyde de carbone (heme-oxygenase) et des catecholamines (tyrosine hydroxylase). Dans un modele inflammatoire, la maladie de crohn, nous avons pu mettre en evidence la disparition d'une population particuliere de cic situees dans les couches musculaires. Cette disparition pourrait expliquer les dysfonctionnements severes de l'activite motrice qui caracterisent cette maladie. Nos travaux contribuent a demontrer l'importance des cic dans l'organisation et la commande nerveuse de l'activite motrice digestive et ouvrent des perspectives nouvelles de recherche en clinique humaine se rapportant aux alterations de la motricite digestive.

L'etude porte sur les cellules de la glie corticale des ganglions d'aplysia, ainsi que sur les cellules interstitielles du muscle retracteur du byssus de mytilus ou de l'oesophage d'aplysia. Les granules caracteristiques de ces tissus ou gliagrana sont acides, ce qui est montre par l'accumulation d'orange d'acridine, et riches en calcium (determine par microanalyse x). Dans des conditions susceptibles d'augmenter la concentration du calcium cytosolique, ils accumulent un surcroit de calcium et perdent simultanement leur acidite, ce qui suggere l'existence d'un echange ca2+/h+. Une activite ca2+-atpase, localisee par cytochimie sur la membrane des gliagrana, peut rendre compte de cet echange. L'extinction de l'acidite intragranulaire fait probablement intervenir un echangeur na+/ca2+ au niveau de la membrane plasmique: la diminution de concentration du sodium extracellulaire (a calcium constant) a le meme effet que l'augmentation du calcium. Les gliagrana maintiennent une forte concentration en ca2+ (vue par la sonde fluo-3). Cette concentration diminue lorsqu'on abaisse de 50% la concentration calcique extracellulaire. Les elements excitables qui possedent des potentiels d'action avec une composante calcique (pericaryons neuroniques et terminaisons axonales) sont associes a un tissu glial qui presente une importante activite ca2+-atpasique membranaire et des gliagrana dans le cytoplasme alors que l'axone, qui n'a qu'un courant rentrant sodique, est environne d'une glie sans gliagrana ni atpase calcique visible en cytochimie. Ces differentes donnees peuvent etre retenues en faveur de l'intervention des cellules gliales dans la regulation calcique perineuronale

Les cellules de Leydig sont les principales cellules stéroïdogéniques dans le testicule. La stéroïdogenèse est un mécanisme crucial pour la masculinisation pendant l’embryogenèse et la puberté ainsi que pour le maintien des caractéristiques mâles durant l’âge adulte. Elle est donc finement régulée par l’axe hypothalamo-hypophysaire mais également directement dans la cellule de Leydig. Un des mécanismes majeurs, ayant lieu dans la cellule de Leydig, est la régulation de l’expression des gènes stéroïdogéniques par des facteurs de transcription. Pendant ma thèse, j’ai caractérisé la présence des facteurs de transcription MEF2 dans les cellules de Leydig. Ces facteurs font partie de la famille des facteurs de transcription MEF2 qui compte quatre membres : MEF2A, 2B, 2C et 2D. J’ai mis en évidence que les facteurs MEF2, et plus précisément les facteurs MEF2A et MEF2D, sont présents dans la lignée cellulaire de Leydig MA-10 et qu’ils activent l’expression du gène Nr4a1 ainsi que du gène Star. NR4A1 est connu comme un régulateur de l’expression de gènes stéroïdogéniques et STAR comme réalisant une étape limitante de la stéroïdogenèse. De plus, MEF2 régule l’expression de ces gènes en coopération avec la CAMKI, la forskoline ou l’AMPc. Ces molécules sont connues pour mimer l’activation par la LH ou faire partie d’une des voies activées par la LH. De plus, MEF2 est exprimé dans le testicule tout au long du développement embryonnaire et de la vie adulte mais à aucun de ces stades dans l’ovaire. Ceci suggère un/des rôle(s) bien particulier(s) de MEF2 dans le développement et la fonction de la gonade mâle. Afin de mieux comprendre son (ses) rôle(s), des expériences de micropuces ont été réalisées à partir de cellules de Leydig dans lesquelles l’expression de MEF2 a été diminuée par des petits ARN interférents. Ces expériences ont permis d’identifier des nouveaux gènes cibles de MEF2 dans les cellules de Leydig. Ma thèse a donc permis d’identifier un nouveau facteur de transcription dans les cellules de Leydig et de commencer à décrypter son rôle dans ces cellules.
Leydig cells are the main steroidogenic cells in the testis. Steroidogenesis is an essential mechanism for the development of male characteristics during embryogenesis and puberty and their maintenance throughout adulthood. Therefore, steroidogenesis is tightly regulated by the hypothalamo-pituitary axis, but also directly within the Leydig cell. One mechanism that occurs in Leydig cells is the regulation of steroidogenic gene expression by transcription factors. During my PhD, I have identified MEF2 as new transcription factors present in Leydig cells. These factors are member of the MEF2 family of transcription factors which contains four members: MEF2A, 2B, 2C and 2D. MEF2 factors and more specifically MEF2A and MEF2D factors are present in the MA-10 Leydig cell line and they activate Nr4a1 and Star gene expression. NR4A1 is known as a key regulator of several steroidogenic genes and STAR is essential for the rate-limiting step in steroidogenesis. Furthermore, MEF2 was found to regulate expression of these genes in cooperation with CAMKI, cAMP or forskolin. These molecules are known to mimic the LH activation pathways. Moreover, MEF2 is present in the testis throughout embryonic development and into adulthood whereas MEF2 expression was not detected at any stage in the ovary. This suggests broad roles for MEF2 factors in male gonadal formation and function. To better understand the role(s) of MEF2, microarray experiments were performed using Leydig cells in which MEF2 expression was downregulated by siRNA. These experiments lead to the identification of several new MEF2 target genes in Leydig cells. In conclusion, during my doctoral work, I was able to identify a novel transcription factor in Leydig cells and to characterize its role in these cells.