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Dissertations / Theses on the topic 'Coxsackieviruses. Enterovirus'
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Hindersson, Maria. "Coxsackie B virus pathogenesis in mice /." Stockholm : Karolinska institutet, 2006. http://diss.kib.ki.se/2006/20060608hind/.
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Lau, Ming-ho, and 劉明昊. "Risk factors of hand foot mouth diseases outbreaks in kindergartens inHong Kong." Thesis, The University of Hong Kong (Pokfulam, Hong Kong), 2009. http://hub.hku.hk/bib/B42994901.
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3
Lau, Ming-ho. "Risk factors of hand foot mouth diseases outbreaks in kindergartens in Hong Kong." Click to view the E-thesis via HKUTO, 2009. http://sunzi.lib.hku.hk/hkuto/record/B42994901.
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4
Triantafilou, Martha. "Interactions of coxsackievirus A9 with cellular receptors." Thesis, University of Essex, 1999. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.285856.
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5
Mirza, Momina. "Characterization of the cellular receptor for coxsackievirus and adenovirus /." Stockholm, 2006. http://diss.kib.ki.se/2006/91-7140-889-4/.
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6
Sävneby, Anna. "Reverse genetic studies of Enterovirus replication." Doctoral thesis, Linnéuniversitetet, Institutionen för kemi och biomedicin (KOB), 2015. http://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:lnu:diva-41636.
Full textAbstract:
Enteroviruses belong to the Picornaviridae family and are small icosahedral viruses with RNA genomes of positive polarity, containing a single open reading frame. They mostly cause mild or asymptomatic infections, but also a wide array of diseases including: poliomyelitis, encephalitis, gastroenteritis, aseptic meningitis, myocarditis, hand-foot-and-mouth disease, hepatitis and respiratory diseases, ranging from severe infections to the common cold. The projects described in this thesis have been carried out through reverse genetic studies of Enterovirus B and Rhinovirus C. In Papers I and II, a cassette vector was used to study recombination and translation of the RNA genome. It was found that the non-structural coding region could replicate when combined with the structural protein-coding region of other viruses of the same species. Furthermore, the genome could be translated and replicated without the presence of the structural protein-coding region. Moreover, it was found that when two additional nucleotides were introduced, shifting the reading frame, the virus could revert to the original reading frame, restoring efficient replication. In Paper III, a vector containing the genome of echovirus 5 was altered to produce an authentic 5’end of the in vitro transcribed RNA, which increased efficiency of replication initiation 20 times. This result is important, as it may lead to more efficient oncolytic virotherapy. An authentic 5’end was further used in Paper IV, where replication of Rhinovirus C in cell lines was attempted. Although passaging of the virus was unsuccessful, the genome was replicated and cytopathic effect induced after transfection. The restriction of efficient replication was therefore hypothesized to lie in the attachment and entry stages of the replication cycle. In Paper V, a cytolytic virus was found to have almost 10 times larger impact on gene expression of the host cell than a non-cytolytic variant. Furthermore, the lytic virus was found to build up inside the host cell, while the non-cytolytic virus was efficiently released. As a whole, this thesis has contributed to a deeper understanding of replication of enteroviruses, which may prove important in development of novel vaccines, antiviral agents and oncolytic virotherapies.
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Wehbe, Michel. "Etude de l’activité de réplication des formes de Coxsackievirus B3 complètes et tronquées dans la région 5’non codante dans un modèle de cardiomyocytes humains primaires en culture." Thesis, Reims, 2016. http://www.theses.fr/2016REIMS042.
Full textAbstract:
Les Entérovirus humains du groupe B (EV-B) et plus spécifiquement les virus Coxsackie B sont considérés comme une cause majeure des myocardites infectieuses aigues et chroniques dont 10% peuvent évoluer vers la cardiomyopathie dilatée (CMD). Les mécanismes moléculaires viraux impliqués dans la progression de la myocardite aiguë vers le stade de la CMD ne sont pas élucidés.L’analyse par séquençage NGS a montré chez 8 (33%) des 24 patients atteints de CMD inexpliquée l’existence de populations majoritaires tronquées de 19 à 50 nucléotides associées à des formes virales minoritaires complètes. La proportion de populations tronquées s’est révélée négativement corrélée au ratio ARN+/ARN- et à la charge virale. Des études immuno-histologiques et par hybridation in situ des tissus cardiaques ont montré que le clivage de la dystrophine était uniquement retrouvé dans les cardiomyocytes infectés par les EV-B. Pour étudier les activités de réplication des populations d’EV-B persistants, un réplicon (CVB3-emGFP) a été généré à partir d’une souche cardiotrope (CV-B3/28). La transfection d’ARN de synthèse complets et tronqués (d50) dans des cultures de cardiomyocytes humains primaires a mis en évidence des mécanismes de recombinaison et/ou de trans-complémentation entre ces 2 formes virales induisant de faibles activités de réplication.Nos résultats démontrent l’existence de mécanismes de coopération moléculaire entre des populations d’EV-B tronquées et complètes qui pourraient expliquer la mise en place du mécanisme de persistance virale observée au cours de la phase clinique de CMD. Ces résultats pourraient contribuer au développement de nouvelles stratégies thérapeutiques pour prévenir et traiter les infections cardiaques à EV-BEnteroviruses group B (EV-B) and more specifically Coxsackievirus B are recognized as major causes of acute and chronic infectious myocarditis, which 10% may progress towards dilated cardiomyopathy (DCM). Viral molecular mechanisms involved in the progression from acute myocarditis to the clinical stage of DCM remain unknown.Deep sequencing analysis showed in 8 (33%) of 24 unexplained DCM patients the existence of major CVB3 populations with deletions of 19 to 50 nucleotides associated with a minority of complete viral forms. The proportion of deleted viral populations was negatively correlated with RNA+/RNA- ratio and the viral load levels. Immuno-histological and in situ hybridization assays of DCM cardiac tissues demonstrated that the cleavage of dystrophin was found only in cardiomyocytes infected with EV-B. To study the replication activities of persistent EV-B populations, a replicon (CVB3-emGFP) was generated from a cardiotropic strain (CV-B3/28). Transfection of synthesized complete and truncated (d50) viral RNAs in primary human cardiomyocytes cultures revealed mechanisms of recombination and / or trans-complementation between these two viral forms inducing low replication activities.In conclusions, our original results demonstrated the existence of new molecular mechanisms of cooperation between EV-B deleted and complete viral populations that could explain the development of a viral persistence mechanism observed during the clinical phase of DCM. These findings may contribute to the development of new therapeutic strategies to prevent and treat persistent heart EV-B infections
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Skog, Oskar. "Effects of Enterovirus Infection on Innate Immunity and Beta Cell Function in Human Islets of Langerhans." Doctoral thesis, Uppsala universitet, Klinisk immunologi, 2012. http://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:uu:diva-172586.
Full textAbstract:
This thesis focuses on enteroviral effects on human pancreatic islets. Most knowledge of viral effects on host cells relies on studies of immortalized cell lines or animal models. The islets represent a fundamentally different and less well studied cellular host. Also, enterovirus has been implicated in the etiology of type 1 diabetes (T1D). We show that when enterovirus replicates in human islets it activates innate immunity genes and induces secretion of the chemokines MCP-1 and IP-10. An important difference in activation of innate immunity by replicating EV and synthetic dsRNA is suggested, since the chemokine secretion induced by EV infection but not by dsRNA is reduced by female sex hormone. We also demonstrate a direct antiviral effect of nicotinamide, and even though this substance failed to prevent T1D in a large-scale study, this finding could have implications for the treatment/prevention of virus- and/or immune-mediated disease. We also had access to human pancreata from two organ donors with recent onset T1D and several donors with T1D-related autoantibodies, which gave us the opportunity to study ongoing pathogenic processes at and before the onset of T1D. Despite this, we could neither confirm nor reject the hypothesis that EV is involved in T1D development. Several observations, such as ultrastructural remodeling of the beta cell, activation of innate immunity, and immunopositivity to EV capsid protein 1, supported an ongoing virus infection, but direct evidence is still lacking. An interesting finding in the donors with recent onset T1D was that the islets were positively stained for insulin, but did not secrete insulin in response to glucose-stimulation. A similar effect was observed in EV-infected islets in vitro; EV destroyed islet function and insulin gene expression, but the islets still stained positive for insulin. This may be indicative of that a functional block in addition to beta cell destruction is involved in T1D pathogenesis. In conclusion, these studies of EV in isolated human islets in vitro support that this virus can cause T1D in vivo, but future studies will have to show if and how frequently this happens.
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Peng, Jian Hong. "Immunological and molecular relationship of swine vesicular disease virus with coxsackievirus B5 and other enteroviruses of pigs." Thesis, University of Hertfordshire, 1995. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.283405.
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Sane, Famara. "Infection à Coxsackievirus B4 et prévention." Phd thesis, Université du Droit et de la Santé - Lille II, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00793386.
Full textAbstract:
Le diabète de type 1 (DT1) est une maladie chronique multifactorielle. Les infections entérovirales, en particulier à Coxsackievirus du groupe B (CVB), et notamment CVB4, transmises par voie digestive, constituent le facteur de risque le plus souvent évoqué dans la littérature. Plusieurs mécanismes physiopathologiques sont proposés pour expliquer cette relation entre CVB4 et diabète de type 1. Il s'agit, entre autres, du tropisme préférentiel de CVB4 pour les ilots et les cellules β pancréatiques et l'inflammation qui s'ensuit, de la persistance du virus au niveau des cellules infectées qui pourrait constituer un facteur déterminant dans le processus d'altération des cellules endocrines, de l'exacerbation possible de l'infection par des d'anticorps facilitateurs ou encore du mimétisme moléculaire entre les auto-antigènes et les antigènes viraux. Par ailleurs des auteurs ont montré que la cause de la déplétion des cellules β chez des souris infectées par la souche diabétogénique CVB4E2 est un défaut de régénération plutôt qu'une destruction directe de ces cellules par le virus. La présence de constituants entéroviraux dans les cellules ductales du pancréas de patients diabétiques a été observée. Le diabète de type 1, qui serait l'expression finale d'un long processus, survient généralement chez des sujets jeunes, c'est pourquoi l'hypothèse que le tissu pancréatique jeune serait plus permissif aux infections à CVB4 n'est pas exclue. La prévention des infections virales reste le meilleur moyen de protéger les individus contre les maladies qu'elles provoquent. Un intérêt particulier est aujourd'hui accordé à la mise en évidences et à la caractérisation d'inhibiteurs antiviraux à large spectre. L'absence d'allaitement maternel est associé à un risque plus élevé de diabète de type 1, mais la nature du ou des facteurs du lait conférant une protection est mal connue, et l'activité anti-CVB4 du lait maternel n'a pas été étudiée jusqu'à présent. Objectifs : Nous avons émis l'hypothèse que CVB4 pouvait infecter des cellules humaines précurseurs de cellules endocrines, impliquées dans la régénération des îlots. L'infection de ces cellules par CVB4E2 et ses conséquences ont été étudiées ; nous avons utilisé des cellules humaines précurseurs canalaires primitives et la lignée continue de cellules Panc-1, dont la différenciation in vitro est possible. La permissivité au CVB4 du tissu pancréatique selon l'âge a été étudiée ex vivo chez le rat et l'existence d'inhibiteurs antiviraux à large spectre est notamment explorée dans l'intestin de souris. L'activité anti-CVB4 du lait maternel susceptible de protéger, à un âge critique, le jeune enfant vis-à-vis d'un virus diabétogène a été étudiée in vitro et l'hypothèse que le lait humain pourrait prévenir le déclenchement du DT1 chez la souris NOD a également été évaluée in vivo.
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El, Kfoury Khalil Antoine. "Interactions coxsackievirus B4, bactéries intestinales et lait maternel : application à la pathogenèse et à la prévention du diabète de type 1." Thesis, Lille 2, 2016. http://www.theses.fr/2016LIL2S044/document.
Full textAbstract:
La présente étude vise à étudier le potentiel de bifidobactéries à protéger les cellules contre l’infection par le Coxsackie B4 (CV-B4). Le criblage de bifidobactéries a identifié deux des cinq souches qui protégeaient les cellules HEp-2 lorsque les bifidobactéries sont pré-incubées avec les particules virales avant l'inoculation sur les cellules Hep-2. En revanche, aucun effet protecteur n'a été observé en incubant les cellules Hep-2 avec des bifidobactéries avant l'inoculation de CV-B4. Les lipoprotéines des parois cellulaires (LpAs) sécrétées par les souches sélectionnées sont testées pour leur activité antivirale. Les deux LpAs présentaient une activité antivirale quand ils sont incubés avec les particules virales avant d’être inoculées aux cellules HEp-2. Aucun effet protecteur n'a été induit par incubation des LpAs avec les cellules HEp-2 avant l'inoculation de CV-B4. La protéine recombinante présente une activité antivirale identique. Pour identifier les séquences peptidiques interagissant avec les particules virales, les protéines de LpAs sont alignées avec les séquences peptidiques du nord bord du canyon et avec l’empreinte de la région puff sur le Coxsackievirus et sur le récepteur de l’adénovirus (CAR). L'étude d'amarrage moléculaire in silico (Docking) utilisant le CV-B3 en tant que modèle a montré une faible énergie de liaison indiquant un système stable pour les peptides sélectionnés et par conséquent une interaction probable avec le CV-B. Les peptides de B.longum et de B.breve qui sont homologues à l’empreinte du rebord nord viral sur la séquence CAR, forment des liaisons d’hydrogène avec plusieurs résidus viraux dans la région du rebord nord du canyon, qui sont déjà décrits pour leur interaction avec le CAR.En conclusion, les protéines de LPAS bifidobactéries peuvent inhiber l'infection par le CV-B4 probablement par liaison aux acides aminés de la capside qui interagissent avec le CARThe present study aims at investigating the potential of bifidobacteria in protecting cells from Coxsackievirus B4 (CV-B4) infection. The bifidobacterial screening identified two out of five strains that protected HEp-2 cell viability when bifidobacteria were incubated with the viral particles prior inoculation. In contrast, no effect was shown by incubating HEp-2 cells with bifidobacteria prior CV-B4 inoculation. Cell-wall lipoproteins secreted by the selected strains (LpAs) were assayed for their anti-viral activity. The two LpAs exhibited anti-viral activity when they were incubated with the viral particles prior inoculation to HEp-2 cells. No effect was induced by incubating LpAs with HEp-2 cells prior CV-B4 inoculation. The recombinant LpAs derived-protein exhibited identical anti-viral activity. To identify the peptide sequences interacting with the virus particles, LpAs proteins were aligned with the peptide sequences of north canyon rim and puff footprint onto coxsackievirus and adenovirus receptor (CAR). The in silico molecular docking study using CV-B3 as template showed a low energy binding indicating a stable system for the selected peptides and consequently a likely binding interaction with CV-B. B.longum and B.breve peptides homologous to the viral north rim footprint onto CAR sequence formed hydrogen bonds with several viral residues in the north rim of the canyon, which were already predicted as interacting with CAR. In conclusion, proteins from bifidobacterial LpAs can inhibit the infection with CV-B4 likely through binding to the capsid aminoacids that interact with CAR
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Smith, Matthew Adams. "Evaluation and implementation of a molecular-based protocol for the identification of enteroviruses at the Florida Department of Health - Tampa Laboratory." [Tampa, Fla.] : University of South Florida, 2003. http://purl.fcla.edu/fcla/etd/SFE0000164.
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N'Guyen, Yohan. "Détection moléculaire des formes complètes et tronquées en région 5’non codante des Entérovirus et conséquences sur la réponse inflammatoire chez des patients souffrant de myocardite ou de cardiomyopathie dilatée Virus detection and semiquantitation in explanted heart tissues of idiopathic dilated cardiomyopathy adult patients by use of PCR coupled with mass spectrometry analysis Enterovirus but not Parvovirus B19 is associated with idiopathic dilated cardiomyopathy and endomyocardial CD3, CD68, or HLA-DR expression Major Persistent 5' Terminally Deleted Coxsackievirus B3 Populations in Human Endomyocardial Tissues Enterovirus Persistence in Cardiac Cells of Patients With Idiopathic Dilated Cardiomyopathy Is Linked to 5' Terminal Genomic RNA-Deleted Viral Populations With Viral-Encoded Proteinase Activities." Thesis, Reims, 2019. http://www.theses.fr/2019REIMM203.
Full textAbstract:
Des ARN génomiques d’Enterovirus (EV) tronqués en région 5’ Non-Codante ont été détectés dans les tissus cardiaques de cas de myocardite aigue et de cardiomyopathie dilatée (CMD). La cinétique d’apparition de ces formes virales cardiaques et leurs conséquences sur la réponse inflammatoire sont inconnues. Une technique de PCR-MS a permis de détecter des ARN d’EV seuls (32%) ou associés à l’ADN du PVB19 (48%) chez des patients souffrant de CMD idiopathique. Chez ces patients, la présence exclusive d’ARN EV était associée avec un immunomarquage endomyocardique positif pour CD3, CD68 ou HLA-DR. Dans ces cas de CMD, une stratégie de « RACE-PCR » a montré que les populations EV tronquées de 37 à 50 nucleotides (nt) représentaient les formes persistantes majoritaires (80%) associées à des formes tronquées intermédiaires (19%) et complètes (1%). Dans des cas de myocardite à EVs, les proportions des ARN tronqués de 37 à 50 nt (84%) étaient supérieures à celles des formes intermédiaires et complètes (P<10-3). Dans le sous groupe des patients avec une myocardite sévère, les proportions des populations tronquées de 8 à 36 nt étaient supérieures (P=0.02) et associées à des niveaux plus élevés d’ARNm d’IFN-β (P=0.02). La transfection de cardiomyocytes par des ARN viraux synthétiques tronquées de 8 à 36 nt dans des proportions identiques à celles des cas sévères, induit des niveaux supérieurs d’ARNm (P<10-3) et protéiques d’IFN-β (P=0.02). Les populations EV tronquées en région 5‘NC sont majoritaires dès la phase de myocardite aigue et les proportions des formes minoritaires tronquées de 15 à 36 nt pourraient moduler l’activation de la voie des IFN-β et la sévérité de la pathologieMajor enterovirus (EV) populations characterized by 5’ terminal genomic RNA deletions (TD) ranging up to 50 nucleotides were previously identified in cardiac tissues from acute myocarditis and chronic dilated cardiomyopathy (DCM) patients. Dynamics of emergence and impact of various EV-TD populations onto the inflammatory response remains unknown. Using a PCR-MS approach EV-RNAs were detected alone (32%) or with PVB19 genomes in 48 % of patients with an idiopathic DCM. Among these patients, EV- RNA was associated with a positive endomyocardial CD3, CD68 ou HLA-DR immunostaining. In these EV-DCM cases, a quantitative "RACE-PCR" system showed that 37 to 50 nt EV-TD forms were the major persistant viral populations (80%) in association with 15 to 36 nt EV-TD (19%) and full-length (FL) (1%) forms. In samples from myocarditis cases, levels of 37 to 50 nt EVB-TD forms (84%) appeared to be statistically higher than other EV-TD (8%) and FL forms (8%) (P<10-3). Among severe myocarditis cases subgroup, levels of 15 to 36 nt EV-TD forms were significantly higher (P=0.02)) and associated with higher IFN-β mRNA levels (P=0.02)) than in non-severe myocarditis patients. HCM transfection of synthetic 8 to 36 nt EV-TD forms induced higher IFN-β mRNA (P<10-3) and cytokine levels (P=0.02) comparatively to those obtained after transfection by others deleted EV RNA forms. EV-RNA TD populations appeared to be major in acute myocarditis and DCM cases. Moreover, the proportions of minor 15 to 36nt EV-TD forms could modulate the innate immune sensing mechanisms in cardiomyocytes and therefore the clinical severity of cardiac infection
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Thevenin, Thomas. "Pouvoir virucide de désinfectants à l'encontre de coxsackievirus B4 et d'autres virus en suspension ou en surface." Thesis, Lille 2, 2011. http://www.theses.fr/2011LIL2S052.
Full textAbstract:
La résistance au séchage des virus dépend de plusieurs facteurs : le type de support, la température, l'humidité et la composition de l'enveloppe ou de la capside. Un virus déposé sur une surface peut conserver son pouvoir infectieux pendant plusieurs jours voire plusieurs mois si les conditions sont réunies. Inactiver des virus présents sur différentes surfaces est un enjeu majeur dans la lutte contre la propagation des maladies nosocomiales. Cette problématique est importante et elle nécessite de réaliser des travaux pour connaître davantage la sensibilité des virus aux substances et produits utilisés dans ce but. [...] Dans le cadre de cette thèse des méthodes ont été développées pour comparer l'activité virucide de désinfectants sur des virus en suspension ou sur une surface (acier inoxydable ou support non tissé-fonctionnalisé). Deux approches ont été mises en oeuvre : la première afin de tester l'activité virucide de supports préalablement fonctionnalisés, la seconde afin de comparer l'activité virucide de produits sous forme liquide ou diffusés par voie aérienne à l'encontre de virus en suspension ou séchés sur un support solide. [...]The resistance of viruses to drying relies on several factors : the type of surface, temperature, humidity and the compositon of the viral envelope or capsid. A virus adsorbed on a surface can remain infectious for several days or months if the conditions are met. [...] In this thesis, methods were developed to compare the virucidal activity of disinfectants towards viruses in suspension and on surfaces (stainless steel or non-woven fuctionalized textiles). Two approaches were implemented : the first to test the virudical activity of functionalized surfaces
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Wang, Ching-Ying, and 王靜瑩. "Antiviral Ability of Kalanchoe gracilis against Enterovirus 71 and Coxsackievirus A16." Thesis, 2014. http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/5eqw58.
Full textAbstract:
博士中國醫藥大學
中國藥學暨中藥資源學系博士班
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Kalanchoe gracilis (Crassulaceae) is a traditional Chinese medicinal, a.k.a. Da-Huan-Hun, and usually used in injuries, pain, fever and inflammation in Taiwan. In 1998, enterovirus 71 (EV71) and coxsackie A16 (CVA16) outbroke with severe or even fatal cases occurred in Taiwan, causing public health concern. EV71 and CVA16 become two major endemic agents of HFMD in children in Taiwan. There are not yet specific vaccines or antiviral drugs for treating enterovirus infection in clinic. In this study, extracts and compounds of K. gracilis leaf and stem were divided into two groups for investigating the antiviral activities against EVs. HPLC analysis indicated leaf and stem extracts exhibiting different ingredients, such as ferulic acid, quercetin and kaempferol in the leaf extract, as well as caffeic acid and eupafol in stem extracts. Plaque reduction assay indicated IC50 values of K. gracilis leaf extract were 35.88 μg/ml for EV71, and 42.91 μg/ml for CVA16, repectively. Leaf extract showed potent activity in the procedures of pre- and post-treatment for virus. Leaf extract inhibit the virus yield production to 90%. IC50 values of K. gracilis leaf extract in cell-based FRET assay were 40.82 μg/ml for EV71 and 47.84 μg/ml for CVA16. IC50 value of K. gracilis leaf extract in 2A protease assay was 32.46 μg/ml for EV71. The result implied K. gracilis leaf extract inhibited the proteolytic activity of EV71 and CVA16 2A proteases. K. gracilis leaf extract also revises the NF-κB-mediated signaling that induced by the virus infected. K. gracilis leaf extract effective against enterovirus is via inhibited viral replication and viral 2A protease activity. In the other hand, K. gracilis stem extract, EA fraction, BuOH fraction and relative compounds processed low cyotoxicity. IC50 values of K. gracilis stem extract were 75.18 μg/mL for EV71, and 81.41 μg/mL for CVA16, respectively. Anti-EV activity of stem extract was weaker than leaf extract, but stem extract potently inhibited EVs replication. EA and BuOH fractions of stem extract also showed the competence on inhibiting viral 2A protease enzymatic activity. Among the ingredients, eupafolin reduced virus-induced expression of IL-6 and RANTES. In vivo experiments proved leaf and stem extract potently inhibiting viral titers in intestines of infected mice. Together with data of two parts showed K. gracilis extracts as potent therapeutics against EV71 and CVA16. K. gracilis, an indigenous herbal plant in Taiwan, could easily cultivate and develop antiviral drugs for treatment and prevention against EV71 and CVA16 infections.
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Ma, Hsiu-Hsun, and 馬秀勳. "Analysis of drug susceptibilities of Enterovirus 71 and Coxsackievirus B3 to 2A protease inhibitor." Thesis, 2008. http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/55685046111164725114.
Full textAbstract:
碩士國立陽明大學
醫學生物技術暨檢驗學系暨研究所
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Human enteroviruses (HEVs) belong to the picornavirus family, and are associated with diverse clinical syndromes ranging from minor febrile illness to severe, potentially fatal conditions. A number of anti-HEV compounds have been developed, mainly targeting HEV capsid and 3C protease. Despite the sustained effort, treatment of HEV infection remains a significant unmet medical need, partly due to the development of drug resistance. In this study, we focused on the inhibition of HEV 2A protease (2Apro), an enzyme pivotal in HEV multiplication and pathogenesis. We utilized MPCMK, an irreversible inhibitor demonstrated to target some HEV serotypes in cell culture. The potential for resistance was studied following in vitro serial passage of two representative HEV strains, enterovirus 71 (EV 71) and coxsackievirus B3 (CB3), in the presence of increasing MPCMK concentrations. No significant increase in the 50% effective concentration (EC50) of EV 71 was measured following up to five passages exposed to MPCMK ranging from 0.025-0.4 mM at two-fold increases. Genotypic analyses of the EV 71 2Apro revealed only a nucleotide mutation that leads to alteration of amino acid sequences at the fifth passage. Phenotypic analyses of CB3 indicated slight yet statistically significant increases in EC50s, and the results obtained by the novel FRET-based assay and the conventional dye reduction assay were highly correlated. In summary, no significant reductions in susceptibility to the 2Apro inhibitor highlight the advantages of 2Apro as an antiviral target.