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Dissertations / Theses on the topic 'Culture de neurones'

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Forbes, C. A. "Properties of central neurones and synapses in cell culture." Thesis, University of Newcastle Upon Tyne, 1986. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.378280.

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Gillard, Samantha Ellen. "Voltage-dependent calcium channels of cerebellar neurones in culture." Thesis, Royal Veterinary College (University of London), 1997. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.268052.

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McCarthy, Peter William. "Actions of neuropeptides on mouse spinal neurones in culture." Thesis, University of St Andrews, 1985. http://hdl.handle.net/10023/14744.

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Abstract:
1] Spinal cords from mouse embryos were successfully prepared and maintained in primary dissociated cell culture, for periods in excess of 10 weeks. 2] Stable intracellular recordings were made from spinal neurones which had been sustained in these cultures. 3] Experiments were made on these spinal neurones using various amino acids and peptides. Solutions of these compounds were discretely applied by pressure ejection. 4] L-Glutamate, GABA and glycine evoked responses which appeared the same as those documented previously. 5] Ethylene-diamine did not evoke a response from the spinal neurones tested. 6] Only a small percentage of the spinal neurones responded to met5- and leu5 - enkephalin, FMRFamide, neurotensin and glycyl L-glutamine. Supplementing the cultures with tissue from other organs did not increase the percentage of spinal neurones which were capable of responding to peptide. 7] Met5 -enkephalin and leu5 -enkephalin each evoked responses from the spinal neurones. 8] The enkephalin-evoked depolarizations accompanied by an increased input resistance were apparently voltage dependent. These responses were abolished at potentials more negative than -90mV and did not invert under normal recording conditions. 9] The enkephalin-evoked depolarizations associated with a decreased input resistance had extrapolated inversion potentials of -20mV. No voltage dependence was seen. 10] Enkephalins also evoked responses which had an inversion potential close to the resting membrane potential. These were accompanied by a decreased input resistance and were not desensitized by prolonged application of peptide. 11] None of these responses showed obvious desensitization with prolonged application, however, they were all attenuated by naloxone. 12] Met5 -enkephalin was apparently more potent than leu5 -enkephalin on a small number of neurones. Furthermore, met5 -enkephalin application, during the weaker response from those neurones to leu5 -enkephalin, evoked a attenuated response. 13] FMRFamide evoked two responses from these spinal neurones. These responses were seen separately and mixed. In the latter case they were referred to as biphasic responses. 14] The depolarizing response to FMRFamide was accompanied by an increase in input resistance. Potassium had some involvement in these responses. 15] The FMRFamide responses which were accompanied by a decreased input resistance showed a great variety of inversion potentials between neurones. These actions were dependent upon sodium and chloride ions. 16] Enkephalin and FMRFamide, when applied separately to the same spinal neurone, did not evoke the same response. 17] Responses evoked by neurotensin were hyperpolarizations associated with a decreased input resistance. These responses were dependent upon potassium and independent of chloride ions. 18] Glycyl L-glutamine evoked two types of hyperpolarizing response from the spinal neurones. These could appear separately or combined. 19] The faster responses to glycyl L-glutamine were apparently dependent on potassium ions. 20] The slower responses to glycyl L-glutamine were apparently insensitive to changes in extracellular potassium or chloride. However, these responses were sensitive to intracellular injection of chloride ions. 21] At concentrations of peptide which evoked a response from other spinal neurones, none of the peptides produced any measurable modulation of amino acid-evoked responses.
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4

Robert, Fabienne. "Aspects ultrastructuraux et neurochimiques des astrocytes et des neurones en culture : influence des antibiotiques." Orléans, 2003. http://www.theses.fr/2003ORLE2034.

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Abstract:
Les cultures d'astrocytes et de neurones sont des modèles couramment utilisés pour l'étude des fonctions du système nerveux central. Le but du présent travail est la recherche de l'influence des conditions de culture sur les astrocytes et les neurones. L'étude ultrastructurale montre la présence de mitochondries difformes et de vésicules multilamellaires dans les cellules. Les antibiotiques utilisés en culture renforcent la présence des vésicules multilamellaires. L'utilisation de traceurs du système endolysosomal montre que ces vésicules sont d'origine lysosomale. Les antibiotiques modifient l'activité de plusieurs fonctions astrocytaires et altèrent l'intégrité membranaire. Par une étude de l'apoptose, nous observons que les antibiotiques ont un effet délétère sur les astrocytes et les neurones. Ces résultats montrent que la culture perturbe le système lysosomal des cellules étudiées. Les antibiotiques amplifient ces modifications et altèrent certaines fonctions cellulaires.
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Martin-Biran, Magali. "Etude par spectroscopie de RMN du métabolisme des neurones et des astrocytes en culture primaire." Bordeaux 2, 1994. http://www.theses.fr/1994BOR28314.

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Abstract:
Dans la perspective de mieux comprendre les phénomènes de compartimentation cellulaire au sein du système nerveux central, nous avons choisi de définir les caractéristiques métaboliques des neurones et des astrocytes en culture primaire homogène. Le devenir métabolique du [1-13C]glucose dans les neurones et les astrocytes cérébelleux, de même que dans les astrocytes corticaux, a été caractérisé par spectroscopie de RMN. Les astrocytes, contrairement aux neurones, synthétisent la glutamine. La maturation des voies de biosynthèse de cet acide aminé est retardée dans les astrocytes cérébelleux par rapport aux astrocytes corticaux. La quantification des flux du catabolisme du glucose exogène a été réalisée. Ces résultats ont montré l'utilisation quasi-exclusive du glucose comme source de carbone par les neurones, alors que les astrocytes utilisent des sources plus diversifiées (glucose, acides aminés exogènes, sources endogènes de carbone). De même, l'activité de la voie de la pyruvate carboxylase est de faible importance dans les neurones, ce qui implique la nécessité d'un apport de carbone extérieur pour ces cellules. Cette étude nous a permis de mettre en évidence des composés synthétisés et libérés par les astrocytes dans le milieu extracellulaire, l'alanine et le citrate, susceptibles de servir de navettes de carbone et/ou d'azote, autres que la glutamine, entre les neurones et les astrocytes. Les données acquises par RMN du 31P ont révélé des charges énergétiques très similaires dans les neurones et les astrocytes cérébelleux, de même que dans le cervelet entier. Des différences concernant les composés liés au métabolisme des membranes ont pu être observées. Une étude du développement du cervelet de rat a été réalisée par RMN du 31P et du 1H, démontrant l'existence d'un contenu élevé en acétate dans le cervelet à la naissance. Celui-ci décroît lors des 1ers jours postnataux, alors que la concentration en NAA augmente
In order to investigate the cellular compartmentation of the central nervous system, we first defined the metabolic properties of neurons and astrocytes in homogenous primary culture. The metabolic fate of [1-13C]glucose in cerebellar neurons and astrocytes, as well as in cortical astrocytes, was characterized by NMR spectroscopy. The astrocytes, contrary to neurons, synthesized glutamine. The maturation of the glutamine synthesis pathway was delayed in cerebellar astrocytes, as compared to cortical astrocytes. The fluxes involved in exogenous glucose utilization were quantified. The results demonstrated that if neurons used exclusively glucose as carbon source to fuel the Krebs cycle, the carbon sources for astrocytes were diversified (glucose, exogenous amino acids, endogenous carbon sources). In the same way, the pyruvate carboxylase activity was of minor importance in neurons, that implied the need for these cells of exogenous carbon substrates. We evidenced that alanine and citrate were also synthesized by astrocytes and exported to their extracellular medium. These metabolites may play a role as carbon and/or nitrogen shuttles betwen neurons and astrocytes. 31P NMR data showed similar energy charges in cerebellar neurons, astrocytes and in the cerebellum. Differences in the content of metabolites linked to membrane metabolism were observed. The postnatal development of the cerebellum was studied using 31P and 1H NMR spectroscopy. A large content of acetate was evidenced at birth, that decreased during the first postnatal days whereas the NAA content increased
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Gaffuri, Anne-Lise. "Drosophila melanogaster, as a model system to study the cell biology of neuronal GPCRs." Thesis, Paris 5, 2012. http://www.theses.fr/2012PA05T063.

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Abstract:
Le récepteur cannabinoique de type 1 (CB1R) est l’un des récepteurs couplés aux protéines G les plus abondants du cerveau mammifère. CB1R a longtemps été décrit comme un récepteur présynaptique régulant de manière rétrograde la transmission synaptique. Cependant, depuis les vingt dernières années, de nouveaux rôles ont été découverts et il est maintenant clairement admis que l’action des endocannabinoides (eCBs) ne se limite pas à la régulationde la neurotransmission au niveau de synapses adultes déjà établies. En effet, les eCBs et le CB1R sont des acteurs majeurs de l’ensemble des phases du développement cérébral. Cependant, les mécanismes moléculaires impliqués n’ont toujours pas été identifiés. Les mécanismes cellulaires auxquels nous nous intéressons ne dépendant pas de l’environnement cellulaire, nous proposons donc de combiner la puissance génétique du modèle drosophile à l’accessibilité et la haute résolution offerte par la culture primaire de neurones. De plus, le récepteur CB1 ne possédant pas d’orthologue parmi les invertébrés, ce système offre la possibilité d’étudier la biologie du récepteur en s’affranchissant de la machinerie endocannabinoide. Cependant, actuellement, aucun protocole de culture primaire de neurones de drosophile ne permet d’obtenir des cellules hautement différenciées et polarisées à basse densité. Ainsi, nous avons tout d’abord développé, optimisé et validé un nouveau protocole permettant de d’obtenir des neurones fonctionnels, hautement différenciés et polarisés en culture de basse densité. Dans un second temps, nous avons démontré que l’activation durécepteur CB1, exprimé ectopiquement dans les neurones de drosophile, entrainait son internalisation, de manière identique à ce qui avait déjà été observé chez les mammifères. Puis, nous avons étudié l’effet de l’expression et de l’activation ectopique de CB1R sur le développement neuronal chez la drosophile. Ainsi, nous avons démontré que l’activation du récepteur module directement la dendritogénèse. Afin de compléter la caractérisation de notremodèle, nous avons démontré que l’activation transitoire du récepteur dans les corps pédonculés (le centre de la mémoire olfactive chez la drosophile) altérait spécifiquement la formation d’une forme consolidée de mémoire après un conditionnement aversif. En conclusion, la validation du modèle drosophile dans l’étude de la biologie cellulaire durécepteur CB1 ouvre de nouvelles perspectives quant à la détermination des mécanismes moléculaires régissant l’action du récepteur sur le fonctionnement neuronal
The type-1 cannabinoid receptor (CB1R), the neuronal receptor for the major psychoactive substance of marijuana, is one, of the most abundant G-protein coupled receptors in the mammalian central nervous system. CB1R is traditionally described as a presynaptic receptor that retrogradely regulates synaptic transmission. In addition to this now relatively wellcharacterized function, in the last two decades it has become widely recognized that endocannabinoid (eCB) actions in the brain are not limited to the regulation of neurotransmission at established adult synapses. Indeed, eCB and CB1R are now recognized to be involved in brain development at the synaptic, neuronal and network levels. However, precise mechanisms underlying these processes remain poorly described. Since cellular mechanisms that mediate CB1R-activition dependent neuronal remodeling and subneuronal targeting have been demonstrated to be cell-autonomous, we aimed to combine the power of Drosophila genetics with the experimental accessibility and single-cell resolution of lowdensity primary neuronal cultures, a tool currently lacking in Drosophila. Moreover, becauseDrosophila does not have a CB1R ortholog, CB1R cell biology may be observed independently from eCB machinery. Thus, we first developed and validated an in vitro culture protocol that yields mature and fully differentiated Drosophila neurons. Secondly, we showed that activation-dependent endocytosis of ectopically expressed CB1R is conserved in Drosophila neurons. Next, we investigated whether ectopic expression and activation of CB1R in Drosophila modulate neuronal development. As observed in mammals, we observed that activation of CB1R impairs dendritogenesis in a cell-autonomous manner. For further characterization of our model, we showed that, as with mammals, transient ectopic CB1R expression and activation in mushroom body neurons (the center of olfactory memory in Drosophila) modulate the formation of a consolidated form of aversive memory. In conclusion, the validation of this new animal model opens new perspectives to better characterize mechanisms underlying modulation of neuronal functions induced by CB1Ractivity
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Raynaud, Brigitte. "Aspects moléculaires de la plasticité phénotypique de neurones sympathiques en culture." Grenoble 2 : ANRT, 1987. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376092185.

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MARTINOU, AMAT ISABELLE. "Etude immunocytochimique de la plasticite phenotypique de neurones sympathiques en culture." Toulouse 3, 1988. http://www.theses.fr/1988TOU31175.

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Catone, Christelle. "Effets morphogènes et trophique de l'acetylcholine sur les motoneurones embryonnaires de rat en culture." Aix-Marseille 2, 2004. http://www.theses.fr/2004AIX22153.

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10

Langui, Dominique. "Effets des neurones sur le developpement des cellules gliales en culture primaire." Strasbourg 1, 1990. http://www.theses.fr/1990STR13182.

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Plachez, Céline. "Etude des transporteurs du glutamate au cours du développement "in vitro" des neurones hippocampiques." Montpellier 2, 2001. http://www.theses.fr/2001MON20002.

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Abstract:
Le glutamate, principal neurotransmetteur excitateur du snc de mammifere adulte, a un role neurotrophique au cours du developpement. La regulation de son taux extracellulaire par des transporteurs s'avere importante. Cinq transporteurs existent : glast et glt localises sur les astrocytes et eaac, eaat4 et eaat5 situes sur les neurones. L'expression et la fonctionnalite de glast, glt et eaac ont ete etudiees au cours du developpement in vitro de neurones hippocampiques de rat. Eaac, est exprime par les neurones, mais glast et glt, presents sur les cellules gliales, sont aussi exprimes transitoirement par les neurones. A de fortes concentrations de glutamate, l'activite de transport croit avec l'age de la culture. A de faibles concentrations, un pic transitoire de capture est observe. Ce pic, n'etant pas altere par le dihydrokainate, un inhibiteur specifique de glt, pourrait etre relie a l'activite de glast sur les neurones. Pour elucider la disparition de l'expression neuronale de glast et de glt, des milieux conditionnes par des astrocytes matures ont ete ajoutes a des cultures neuronales, et des neurones ont ete cultives sur un tapis glial mature (co-culture). Seule l'expression neuronale de glast disparait sous l'effet de milieux conditionnes gliaux. Les expressions neuronales de glast et de glt sont reprimees dans les co-cultures. Ces expressions sont donc regulees par des interactions neurones-glie, mais par des mecanismes differents. L'immunohistochimie d'hippocampes a des stades precoces du developpement montre que glast et glt sont exprimes in vivo par des neurones. Cette expression neuronale de glast et de glt pourrait jouer un role au cours du developpement.
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Chateau, Yannick. "Co-culture compartimentée de cellules épidermiques et cellules nerveuses : modèle d'étude des interactions neuro-cutanées." Brest, 2005. http://www.theses.fr/2005BRES3108.

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Abstract:
Le traitement de l’information sensorielle suite à un stimulus externe a comme point de départ l’activité d’une population variée de récepteurs cutanés et sous-cutanés. Les corps cellulaires de ces récepteurs se situent dans les ganglions des racines dorsales (GRD). Ils sont reliés à la moelle épinière (ME) par des neurites. Le challenge pour réaliser un modèle d’étude in vitro des interactions neuro-cutanées réside dans la reproduction de la suite physiologique (peau, neurones des GRD, neurones sensitifs de la ME) et dans la formation de connexions entre cellules épidermiques et neurites des neurones pseudo unipolaires en L. Ce modèle doit intégrer dans un même espace l’ensemble de ces constituants et permettre la mise en place de connexions entre cellules nerveuses et cellules épidermiques ce qui n’a pas encore été réalisé avec les “peaux reconstruites”. Nous avons développé un modèle, intégrant cellules nerveuses (neurones en T, cellules de la ME et cellules gliales) et cellules épidermique (kératinocytes, mélanocytes et cellules de Merkel CM). Les résultats obtenus sont une croissance spécifiquement orientée des neurites, des connexions, des terminaisons nerveuses avec les kératinocytes d’une part et les CM d’autre part. Cette co-culture permet la survie des CM et l’enregistrement d’une activité des neurones en T. L’originalité de ce modèle est donc de proposer in vitro une co-culture de cellules nerveuses et de cellules épidermiques permettant leurs connexions. Ces résultats ouvrent de larges perspectives qui proposent, pour la recherche fondamentale comme pour la recherche appliquée en dermatologie, une alternative à l’expérimentation animale
The skin through its innervation is the support of the fifth sense : the touch. Exogenous stimuli are recognized at the nerve endings which represent avaried population of cutaneous receptors. Cellular bodies of those nerve endings are located in dorsal root ganglion (DRG) and connected at spinal cord by neurites The principal challenge to carry out a model for in vitro studies of the neuro-cutaneous interactions lies in the reproduction orme physiological continuation previously described (skin, neurons 0f the DRG, sensitive neurons of the spinal cord) and in the reconstruction of connections between epidermal cells and neurites of the pseudo-unipolar sensory neurons. This model must integrate in the same space all these components and allow the instatlation of connections between nervous cells and epidermal cells. This feature was not realised before with other “skin equivalent”. We have performed a model, integrating nervous cells (pseudo-unipolar sensory neurons, cells of the spinal cord and glial cells) and epidermal cells (keratinocytes, melanocytes and Merkel cells). We obtained a specifically directed growth of neurites, connections, synapse-like formation with both keratinocytes and Merkel cells. This co-culture allowed the survival of Merkel cells and the recording of an activity of the pseudo-unipolar sensory neurons. The originality of this model is thus to propose an in vitro co-culture of nervous oeIls md epidermal cells allowing their connections. These results open large perspectives from fundamental research to applied research in dermatology, as an alternative to the animal experimentation
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Wyart, Claire. "Dynamique de l'activité spontanée dans des réseaux de neurones hippocampiques d'architecture contrôlée en culture." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2003. https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2003/WYART_Claire_2003.pdf.

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Abstract:
De l'activité électrique spontanée est observée dans de nombreuses structures cérébrales. C'est pour explorer les mécanismes d'initiation et de persistance et le rôle de l'architecture fonctionnelle dans l'activité spontanée que nous avons mis au point une approche de culture où l'architecture des réseaux de neurones hippocampiques est contrôlée par traitement des surfaces d'adhésion. L'activité spontanée a été mesurée par la technique de patch clamp sur 1 ou 2 neurones avec une résolution de 0. 1ms, et en imagerie de fluorescence avec la sonde Fura-2 liant le calcium dans tous les neurones d'un réseau avec une résolution de 50ms. J'ai montré que la libération spontanée de glutamate aux synapses permet l'initiation de l'activité spontanée dans des réseaux de neurones en culture. La persistance de l'activité à basse fréquence dans le modèle de réseau excitateur ultra-synchrone qu'est l'autapse glutamatergique repose sur le récepteur NMDA, une dépolarisation lente dépendant du calcium résiduel (I CAN) et la libération asynchrone de glutamate. Dans les réseaux, le maintien de l'activité est permis par des composantes synaptiques lentes et la réverbération de l'excitation. La structure fonctionnelle d'un réseau est définie par le nombre de neurones, la présence de neurones inhibiteurs et la distance entre neurones associée à une probabilité de connectivité. J'ai cherché l'incidence de ces paramètres sur la dynamique de l'activité spontanée. Un réseau de neurones purement excitateur n'exprime que des bouffées de potentiels d'action synchrones pour tous les neurones du réseau. En revanche, les profils de décharge des neurones et les états d'activation du réseau deviennent complexes avec le neurones inhibiteurs. Les neurones GABAergiques ont plusieurs actions: à l'échelle du réseau, ils diminuent le niveau d'activité et la "synchronisation" globale des neurones excitateurs ; localement, ils entraînent une segmentation des assemblées de neurones synchrones. Nous avons décrit avec les réseaux de neurones d'architecture contrôlée de nouveaux mécanismes déterminant la dynamique de l'activité spontanée. Le couplage réussi de la lithographie avec les multi-électrodes (Multi-Electrodes Arrays) permet d'envisager l'enregistrement d'unités uniques sur plusieurs semaines in vitro.
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Pointu, David. "Films multicouches de polyélectrolytes : Une nouvelle interface biocompatible pour la croissance de neurones." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2002. http://www.theses.fr/2002STR13160.

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Abstract:
Des films minces organiques multicouches auto-assemblés avec des polyélectrolytes synthétiques ont été fabriqués et ont permis l'adhésion et la croissance de motoneurones spinaux purifiés d'embryon de rats in vitro. Les polyélectrolytes cationiques et comportant des groupements amines ont, en plus de leur très bonne biocompatibilité, d'excellentes affinités pour les cellules nerveuses. Comme l'a montré l'étude statistique quantitative morphologique, ces surfaces donnent des résultats comparables et souvent meilleurs que ceux obtenus sur les substrats PLL/laminine traditionnellement utilisés. La grande flexibilité de cette technique de fabrication de systèmes interfaciaux nous a permit de moduler les propriétés de ces interfaces pour obtenir différentes réponses des neurones. Nous avons également trouvé que le milieu de culture avait une influence sur le développement des neurones de part son interaction avec les surfaces. Une autre partie du travail a consisté en la fabrication de films multicouches composites de macromolécules dendritiques chargées (dendrimères) et de polyélectrolytes. Des dendrimères phosphorés de 4ème génération avec un cœur tri ou hexafonctionnel et des groupements ammonium en surface et le polystyrène sulfonate ont été utilisés. La caractérisation a été faite par UV/Vis, ellipsométrie et réflectivité de rayons X. Les dendrimères forment des couches homogènes et stables sur des substrats de silicium. L'épaisseur moyenne d'une couche dépend de la structure des dendrimères et de la force ionique et est toujours trouvée inférieure au diamètre du dendrimère dans une forme idéale sphérique. La fraction axiale de cette déformation anisotrope des dendrimères aplatis peut varier de 1:2 à 1:7. Les films multicouches de dendrimères présentent une propriété très marquée de non perméabilité aux solvants. Enfin, les dendrimères peuvent être utilisé dans des films multicouches comme hôte de molécules organiques contenues dans leurs cavités internes
We report the development of new bioactive coatings, based on the alternate physical adsorption of oppositely charged polyelectrolytes, for survival, adhesion and outgrowth of nerve cells. Various substrates built with various polyelectrolytes adsorbed on glass substrats were used to test the effect of surface chemistry on dissociated cultures of purified rat embryonic spinal motoneurons. A complete statistical morphological studie was carried out. We found that survival and morphological properties are the best, even compared to classical substrates coated with polylysine and laminin, when polycations with an amine group are used. The polyelectrolytes increase the number of the neuritic process and decrease somewhat their length. We also investigate the effect of roughness and find that it increases significantly the length of neuritic process. We find that interaction between surface and the medium in which the neurons are is also a key parameter and influence the behaviour of the nerve cells. On the other hand, we fabricate composite multilayers films of charged dendritic macromolecules (dendrimer) and polyelectrolytes. Phosphorus-containing dendrimers of 4th generation with tri or hexafunctional core and with ammonium groups on surface and polystyrenesulfonate have been used as building units. Characterization are carried out by UV/Vis, ellipsometry and X-ray reflectivity. All dendrimers are observed to form homogeneous, stable layers on a silicon surface. The average thickness of a molecular layer varies with structure and ionic strength and is much smaller than the diameter of ideal spherical dendritic macromolecules. The model of molecular ordering dendrimer films assumes compressed dendrimers of oblate shape with the axial ratio in the range from 1:2 to 1:7. The structure of the formed films do not allow penetration of solvent. We also demonstrate that dendrimers can act as host for small organic molecules embedded in their internal cavities
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Launey, Thomas. "Propriétés des récepteurs aux acides aminés excitateurs exprimés par les motoneurones crâniens de rat, en culture organotypique." Aix-Marseille 1, 1998. http://www.theses.fr/1998AIX11027.

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Abstract:
En tant que voie finale commune du systeme nerveux central, les motoneurones doivent traiter des signaux synaptiques pour produire une sortie coherente vers les effecteurs musculaires. Les capacites de traitement dependent des proprietes electriques membranaires et de la morphologie de l'arborisation dendritique. Ces caracteristiques apparaissent au cours de la maturation neuronique, pre et post-natale. Au cours de cette periode, les trois types de recepteurs glutamatergiques ionotropiques (nmda, ampa, kainate) pourraient influencer le developpement. Nous avons etudie l'expression fonctionnelle de ces recepteurs au niveau de motoneurones faciaux et hypoglosse, en cours de developpement in vitro, en co-culture organotypique. Notre but a ete de caracteriser les proprietes de ces recepteurs, les implications dans la transmission synaptique et leur distribution membranaire. I : expression fonctionnelle de recepteurs glutamatergiques ionotropiques. L'enregistrement electrophysiologique des motoneurones, combine a des techniques d'applications locales d'agonistes et a l'utilisation d'antagonistes specifiques des recepteurs a permis de montrer l'expression fonctionnelle des trois types de recepteurs, nmda, ampa et kainate. Ii : implication de ces recepteurs dans la transmission synaptique au niveau des motoneurones et des reseaux premoteurs. La stimulation des afferences premotrices, l'utilisation d'antagonistes specifiques et de techniques d'analyse de l'activite synaptique spontanee montrent que les courants synaptiques au niveau des motoneurones sont essentiellement produits par l'activation de recepteurs de type ampa alors que des recepteurs nmda participent a la transmission poly-synaptique. Iii : etude de la distribution cellulaire et subcellulaire de recepteurs-canaux ampa permeables au calcium. L'utilisation de la technique d'accumulation intracellulaire d'ions cobalt en presence d'agonistes des recepteurs ampa a permis de montrer que les motoneurones faciaux et hypoglosse en cours de developpement expriment des canaux ampa permeables au calcium. Ces recepteurs-canaux ne sont pas distribues de maniere homogene au sein des regions somatiques et dendritiques. La discussion est essentiellement axee sur l'implication des recepteurs nmda extra-synaptiques et des recepteurs ampa permeables au calcium dans la maturation des motoneurones craniens et spinaux.
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Hernández, Navarro Lluís. "Theoretical and experimental approaches for the initiation and propagation of activity in spatially embedded neuronal cultures." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2018. http://hdl.handle.net/10803/565905.

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Abstract:
Spatial embedding and inherited metric constraints are a fundamental trait of biological neuronal circuits. However their role in shaping connectivity and dynamics has been often disregarded, with models of neuronal networks paying much more attention to the distribution of connections in the quest for understanding network's behavior. In this thesis we aim at filling this gap by studying the importance of metric features in the complex connectivity- dynamics-noise interplay that shapes spontaneous neuronal activity. This thesis combines experiments in rat dissociated neuronal cultures with theoretical analyses to better comprehend the relevance of spatial embedding. We developed a new theoretical model grounded on Ising Models to assess metric effects in neuronal cultures' behavior, and in the context of percolation approaches. Once metric effects were settled, we illustrated their relevance in shaping spontaneous activity by perturbing the structural connectivity blueprint of neuronal cultures. This was achieved by patterning the substrate where neurons grow, and by using topographical molds that dictated the connectivity of the network. Next, and since the initiation of bursting activity is governed in great manner by a complex amplification mechanism that involves metric correlations and noise, we focused on the metric-driven amplification of spontaneous single-neuron noise to derive an analytical model that predicts the frequency of bursting events in neuronal cultures. We then further investigated in an experimental context the contribution of noise to the observed activity patterns, and by implementing a moderate electrical stimulation protocol that increases the level of activity noise in cultures. Finally, the latter study was completed with experiments regarding the specific role of inhibition in neuronal networks, to provide a wider understanding of the mechanisms that govern the initiation and propagation of activity fronts in cortical cultures.
L'objectiu d'aquesta tesis és investigar els mecanismes que generen l'activitat espontània i estimulada en xarxes neuronals, més concretament en cultius corticals dissociats, i fent un especial èmfasi en l’efecte de les correlacions mètriques. En aquest marc, l’activitat col·lectiva consisteix en episodis esporàdics de dispars quasi sincronitzats entre totes les neurones del cultiu, anomenats “esclats de xarxa”. Tres elements principals en determinen les característiques: connectivitat entre neurones, dinàmica intrínseca neuronal, i soroll (activacions neuronals aleatòries). La investigació s’ha centrat en cinc línies de recerca: l’estudi de correlacions mètriques en cultius neuronals; el desenvolupament d’un model teòric per descriure i predir l’esclat de xarxa; l’anàlisi de la propagació dels fronts d’activitat experimentals sota pertorbacions estructurals de la connectivitat del cultiu; l’estudi de l’efecte de la inhibició en la iniciació i propagació dels esclats ‘in vitro’; i l’estudi de la resposta experimental dels cultius sota una estimulació elèctrica moderada de baixa freqüència. En la primera línia de recerca hem comprovat que les correlacions mètriques dominen el comportament dinàmic del cultiu, fins al punt d’emmascarar la contribució de la distribució del nombre de connexions. En la segona línia hem desenvolupat un model analític que prediu semi- quantitativament la freqüència dels esclats observada experimentalment. La tercera línia s’ha centrat en l’efecte de pertorbacions estructurals en la connectivitat; la dinàmica resultant ha mostrat una gran riquesa en patrons d’activitat, esclats de xarxa a diferents escales, i propagació altament específica de cada cultiu. La quarta línia de recerca ha demostrat que les xarxes sense inhibició disminueixen la seva freqüència d’esclat respecte a les xarxes control, que la velocitat de propagació de l’activitat incrementa lleugerament quan s’ha bloquejat la inhibició, i que els punts on s’inicien ens esclats varien respecte als controls. I, finalment, la cinquena línia de recerca ha constatat que l’aplicació d’un camp elèctric feble augmenta el soroll d’activitat de la xarxa, generant un increment en la freqüència dels esclats de xarxa.
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Smith, S. M. "The properties of agonist-activated chloride channels on rat spinal neurones in cell culture." Thesis, University of Newcastle Upon Tyne, 1987. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.379367.

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Eustache, Isabelle. "Le développement morphologique et fonctionnel des motoneurones craniens d'embryons de rat en culture organotypique avec co-culture musculaire : interactions morphologiques et fonctionnelles." Aix-Marseille 3, 1995. http://www.theses.fr/1995AIX30084.

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Abstract:
Dans des cultures organotypiques de tranches de tronc cerebral d'embryon de rat co-cultivees avec un fragment musculaire, les motoneurones survivent, se differencient et deviennent fonctionnels en controlant la contraction de fibres musculaires neoformees. Les motoneurones sont inseres dans un reseau synaptique et developpent des proprietes intrinseques specifiques. La presence d'influences trophiques reciproques, exercees par les motoneurones sur la differentiation des fibres musculaires, et par le tissu musculaire sur la differentiation morphologique des motoneurones est demontree. Le role des afferences synaptiques et de la cible musculaire dans la mise en place de la morphologie et de la fonction du motoneurone est discute
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Gómez, Orlandi Javier. "Noise, coherent activity and network structure in neuronal cultures." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2015. http://hdl.handle.net/10803/346925.

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Abstract:
In this thesis we apply a multidisciplinary approach, based on statistical physics and complex systems, to the study of neuronal dynamics. We focus on understanding, using theoretical and computational tools, how collective neuronal activity emerges in a controlled system, a neuronal culture. We show how the interplay between noise and network structure defines the emergent collective behavior of the system. We build, using theory and simulation, a framework that takes carefully describes spontaneous activity in neuronal cultures by taking into account the underlying network structure of neuronal cultures and use an accurate, yet simple, model for the individual neuronal dynamics. We show that the collective behavior of young cultures is dominated by the nucleation and propagations of activity fronts (bursts) throughout the system. These bursts nucleate at specific sites of the culture, called nucleation points, which result in a highly heterogeneous probability distribution of nucleation. We are able to explain the nucleation mechanism theoretically as a mechanism of noise propagation and amplification called noise focusing. We also explore the internal structure of activity avalanches by using well--defined regular networks, in which all the neurons have the same connectivity rules (motifs). Within these networks, we are able to associate to the avalanches an effective velocity and topological size and relate it to specific motifs. We also devise a continuum description of a neuronal culture at the mesoscale, i.e., we move away from the single neuron dynamics into a coarse--grained description that is able to capture most of the characteristic observables presented in previous chapters. This thesis also studies the spontaneous activity of neuronal cultures within the framework of quorum percolation. We study the effect of network structure within quorum percolation and propose a new model, called stochastic quorum percolation, that includes dynamics and the effect of internal noise. Finally, we use tools from information theory, namely transfer entropy, to show how to reliably infer the connectivity of a neuronal network from its activity, and how to distinguish between different excitatory and inhibitory connections purely from the activity, with no prior knowledge of the different neuronal types. The technique works directly on the fluorescence traces obtained in calcium imaging experiments, without the need to infer the underlying spike trains.
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Tibau, Martorell Elisenda. "Linear and nonlinear approaches to unravel dynamics and connectivity in neuronal cultures." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2017. http://hdl.handle.net/10803/460683.

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Abstract:
In the present thesis, we propose to explore neuronal circuits at the mesoscale, an approach in which one monitors small populations of few thousand neurons and concentrates in the emergence of collective behavior. In our case, we carried out such an exploration both experimentally and numerically, and by adopting an analysis perspective centered on time series analysis and dynamical systems. Experimentally, we used neuronal cultures and prepared more than 200 of them, which were monitored using fluorescence calcium imaging. By adjusting the experimental conditions, we could set two basic arrangements of neurons, namely homogeneous and aggregated. In the experiments, we carried out two major explorations, namely development and disintegration. In the former we investigated changes in network behavior as it matured; in the latter we applied a drug that reduced neuronal interconnectivity. All the subsequent analyses and modeling along the thesis are based on these experimental data. Numerically, the thesis comprised two aspects. The first one was oriented towards a simulation of neuronal connectivity and dynamics. The second one was oriented towards the development of linear and nonlinear analysis tools to unravel dynamic and connectivity aspects of the measured experimental networks. For the first aspect, we developed a sophisticated software package to simulate single neuronal dynamics using a quadratic integrate–and–fire model with adaptation and depression. This model was plug into a synthetic graph in which the nodes of the network are neurons, and the edges connections. The graph was created using spatial embedding and realistic biology. We carried out hundreds of simulations in which we tuned the density of neurons, their spatial arrangement and the characteristics of the fluorescence signal. As a key result, we observed that homogeneous networks required a substantial number of neurons to fire and exhibit collective dynamics, and that the presence of aggregation significantly reduced the number of required neurons. For the second aspect, data analysis, we analyzed experiments and simulations to tackle three major aspects: network dynamics reconstruction using linear descriptions, dynamics reconstruction using nonlinear descriptors, and the assessment of neuronal connectivity from solely activity data. For the linear study, we analyzed all experiments using the power spectrum density (PSD), and observed that it was sufficiently good to describe the development of the network or its disintegration. PSD also allowed us to distinguish between healthy and unhealthy networks, and revealed dynamical heterogeneities across the network. For the nonlinear study, we used techniques in the context of recurrence plots. We first characterized the embedding dimension m and the time delay δ for each experiment, built the respective recurrence plots, and extracted key information of the dynamics of the system through different descriptors. Experimental results were contrasted with numerical simulations. After analyzing about 400 time series, we concluded that the degree of dynamical complexity in neuronal cultures changes both during development and disintegration. We also observed that the healthier the culture, the higher its dynamic complexity. Finally, for the reconstruction study, we first used numerical simulations to determine the best measure of ‘statistical interdependence’ among any two neurons, and took Generalized Transfer Entropy. We then analyzed the experimental data. We concluded that young cultures have a weak connectivity that increases along maturation. Aggregation increases average connectivity, and more interesting, also the assortativity, i.e. the tendency of highly connected nodes to connect with other highly connected node. In turn, this assortativity may delineates important aspects of the dynamics of the network. Overall, the results show that spatial arrangement and neuronal dynamics are able to shape a very rich repertoire of dynamical states of varying complexity.
L’habilitat dels teixits neuronals de processar i transmetre informació de forma eficient depèn de les propietats dinàmiques intrínseques de les neurones i de la connectivitat entre elles. La present tesi proposa explorar diferents tècniques experimentals i de simulació per analitzar la dinàmica i connectivitat de xarxes neuronals corticals de rata embrionària. Experimentalment, la gravació de l’activitat espontània d’una població de neurones en cultiu, mitjançant una càmera ràpida i tècniques de fluorescència, possibilita el seguiment de forma controlada de l’activitat individual de cada neurona, així com la modificació de la seva connectivitat. En conjunt, aquestes eines permeten estudiar el comportament col.lectiu emergent de la població neuronal. Amb l’objectiu de simular els patrons observats en el laboratori, hem implementat un model mètric aleatori de creixement neuronal per simular la xarxa física de connexions entre neurones, i un model quadràtic d’integració i dispar amb adaptació i depressió per modelar l’ampli espectre de dinàmiques neuronals amb un cost computacional reduït. Hem caracteritzat la dinàmica global i individual de les neurones i l’hem correlacionat amb la seva estructura subjacent mitjançant tècniques lineals i no–lineals de series temporals. L’anàlisi espectral ens ha possibilitat la descripció del desenvolupament i els canvis en connectivitat en els cultius, així com la diferenciació entre cultius sans dels patolo`gics. La reconstrucció de la dinàmica subjacent mitjançant mètodes d’incrustació i l’ús de gràfics de recurrència ens ha permès detectar diferents transicions dinàmiques amb el corresponent guany o pèrdua de la complexitat i riquesa dinàmica del cultiu durant els diferents estudis experimentals. Finalment, a fi de reconstruir la connectivitat interna hem testejat, mitjançant simulacions, diferents quantificadors per mesurar la dependència estadística entre neurona i neurona, seleccionant finalment el mètode de transferència d’entropia gereralitzada. Seguidament, hem procedit a caracteritzar les xarxes amb diferents paràmetres. Malgrat presentar certs tres de xarxes tipus ‘petit món’, els nostres cultius mostren una distribució de grau ‘exponencial’ o ‘esbiaixada’ per, respectivament, cultius joves i madurs. Addicionalment, hem observat que les xarxes homogènies presenten la propietat de disassortativitat, mentre que xarxes amb un creixent nivell d’agregació espaial presenten assortativitat. Aquesta propietat impacta fortament en la transmissió, resistència i sincronització de la xarxa.
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Cot, Christine. "Utilisation de cellules nerveuses foetales murines et humaines dans une perspective de thérapie génique." Montpellier 2, 1998. http://www.theses.fr/1998MON20112.

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Oillet, Jean. "Caractérisation d'un modèle d'étude de l'hypoxie sur les neurones centraux en culture : évaluation du rôle des radicaux libres et des acides aminés excitateurs." Nancy 1, 1996. http://www.theses.fr/1996NAN12152.

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Saias, Laure. "Laboratoires-sur-puce pour l'analyse cellulaire : tri de cellules tumorales circulantes et culture de neurones." Paris 6, 2009. http://www.theses.fr/2009PA066684.

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Abstract:
Nous présentons deux dispositifs microfluidiques dédiés à l’analyse cellulaire. Le premier système est dédié à la caractérisation de Cellules Tumorales Circulantes (CTC) dans l’objectif de permettre une meilleure prise en charge d’un patient ayant développé un cancer (pronostic, orientation du traitement le plus adapté). Afin de permettre l’analyse d’un prélèvement sanguin à haut débit, l’architecture des canaux d’un nouveau système microfluidique a été optimisée grâce à des simulations fluidiques avec le logiciel COMSOL. Les cellules sont capturées dans le microsystème par un réseau de colonnes constituées de billes magnétiques fonctionnalisées avec des anticorps dirigés spécifiquement contre une protéine membranaire exprimée par les CTC (en particulier dans les cas de cancer du sein), EpCAM (Epithelial Cell Adhesion Molecule). Ce réseau de colonnes a été stabilisé en réalisant un ancrage magnétique par assemblage capillaire. Les capacités de capture du système ont été évaluées grâce à des échantillons cellulaires modèles (lignées cellulaires, sang de donneurs sains). Une fois les cellules immobilisées sur les colonnes, l’expression de protéines spécifiques (cytokératine, CD45) peut être caractérisée par marquages immunofluorescents en imagerie confocale haute résolution. Le deuxième système microfluidique a été développé afin de pouvoir reconstruire des réseaux neuronaux dirigés. Une géométrie innovante de microcanaux a permis l’élaboration de diodes axonales. L’aptitude du système à structurer les connexions entre neurones a été évaluée avec des neurones primaires. Plusieurs types de réseaux ont ainsi été reconstruits et maintenus en culture sur 12 jours.
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Lahaie, Collins Vicky. "Effet neuroprotecteur de la sésamine sur des neurones en culture en état de stress oxydant." Thèse, Université du Québec à Trois-Rivières, 2008. http://depot-e.uqtr.ca/1333/1/030097292.pdf.

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Teller, Amado Sara. "Functional organization and networ resilience in self-organizing clustered neuronal cultures." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2016. http://hdl.handle.net/10803/396114.

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Abstract:
Major dynamical traits of a neuronal network are shaped by its underlying circuitry. In several neurological disorders, the deterioration of brain's functionality and cognition has been ascribed to changes in the topological properties of the brain's circuits. To deepen in the understanding of the activity-connectivity relationship, neuronal cultures have emerged as remarkable systems given their accessibility and easy manipulation. A particularly appealing configuration of these in vitro systems consists in an assembly of interconnected aggregates of neurons termed 'clustered neuronal networks'. These networks exhibit a complex dynamics in which clusters fire in small groups, shaping communities with rich spatiotemporal properties. The detailed characterization of this dynamics, as well as its resilience to perturbations, has been the main objective of this thesis. In our experiments we monitored spontaneous activity using calcium fluorescence imaging, which allows the detection of neuronal firing events with both high temporal and spatial resolution. The detailed analysis of the recorded activity, in the context of network theory and community analysis, allowed for the quantification of important properties, including the effective connectivity map and its major topological descriptors. As major results, we observed that these clustered networks present hierarchical modularity, assortative mixing and the presence of a rich club core, a series of features that have also been observed at the scale of the brain. All these characteristic topological traits are associated with a robust architecture that reinforces and stabilizes network activity. To verify the existence of such robustness in our cultures, we studied their resilience upon chemical and physical damage. We concluded that, indeed, clustered networks present higher resilience compared to other configurations. Moreover, these clustered networks exhibited recovery mechanisms that can be linked to the balance between integration and segregation in the network, which ultimately tend to preserve network activity upon damage. Thus, these in vitro preparations offer a unique scenario to explore vulnerability in networks with topological properties similar to the brain. Moreover, the combination of all these approaches can help to develop models to quantify damage upon network degradation, with promising applications for the study of neurological disorders in vitro.
Desvelar la relación entre la red de conexiones anatómica y su emergente dinámica es uno de los grandes desafíos de la neurociencia actual. En este sentido, los cultivos neuronales han tomado un papel muy importante para entender esta cuestión, ya que fenomenologías fundamentales pueden ser estudiadas a escalas más tratables. Los cultivos neuronales se obtienen típicamente a base de disociar tejido neuronal de una parte específica del cerebro, corteza cerebral de rata en nuestro caso, y su cultivo en un medio adecuado. Neuronas en cultivo constituyen en 1-2 semanas una red nueva con una actividad espontánea rica. Una de las preparaciones in vitro que ofrece mayor potencial es las 'redes clusterizadas'. Estas redes se auto-organizan de forma natural, formando grupos de neuronas (clústeres) interconectados a través de axones. La caracterización de la dinámica de estas redes clusterizadas, así como su sensibilidad a perturbaciones, ha sido el objetivo principal de esta tesis. Así, hemos caracterizado la red funcional del cultivo a partir de su dinámica espontánea, desarrollando para ello un novedoso modelo fisicomatemático. Hemos observado que las redes tienen una conectividad modular, donde clústeres tienden a conectarse fuertemente en pequeños grupos, los cuales a su vez se conectan entre ellos. Además, las redes funcionales muestran propiedades topológicas clave, en especial asortatividad (interconexión preferente de clústeres con número similar de conexiones) y la existencia de un 'rich club' (grupo de clústeres con una interconectividad tan destacada que forman el núcleo fundamental de la red). Estas propiedades confieren una gran robustez y flexibilidad a la red. Por esta razón, en la tesis hemos investigado diferentes perturbaciones físicas y bioquímicas, demostrando que las redes clusterizadas son mucho más resistentes a daño que otras configuraciones, lo que refuerza la relación entre las propiedades topológicas descritas y resistencia al daño. Además, observamos que las redes presentaron diferentes mecanismos de reforzamiento entre conexiones para preservar la actividad de la red. Por ello, las redes clusterizadas constituyen una plataforma ideal para estudiar resistencia en redes o como sistema modelo aplicado a estudios de enfermedades neurodegenerativas, como por ejemplo Alzheimer.
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Lakard, Sophie. "Culture et étude de neurones olfactifs sur des surfaces fonctionnalisées par des polymères aminés biocompatibles électrodéposés." Besançon, 2005. http://www.theses.fr/2005BESA2031.

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Abstract:
Au cours de cette étude nous avons cherché dans un premier temps à synthétiser par voie électrochimique des polymères biocompatibles permettant d'améliorer l'adhésion puis la prolifération de cellules neuronales. Ainsi, parallèlement au travail de synthèse électrochimique, nous avons cherché à cultiver des neurones olfactifs matures, tout d'abord sur des substrats classiques, puis sur ces polymères électrodéposés. Nous nous sommes également attaché à caractériser ces cellules neuronales puis à étudier leur structure et leur morphologie. L'ensemble de cette étude se veut original puisque si l'importance de la surface d'accrochage a déjà été démontrée, la solution la plus couramment utilisée pour optimiser cette fixation est l'ajout d'une matrice extracellulaire comme le collagène ou la laminine et non le développement de supports polymères déposés par voie électrochimique. Dans un second temps, l'objectif de ce travail, combinant électrochimie et neurosciences, a consisté à développer un biocapteur original capable de différencier les odeurs. En effet, nous désirons fabriquer un " bio-nez " en utilisant un microsystème sur lequel nous pouvons déposer un polymère et faire croître des cellules neuronales olfactives susceptibles de réagir à un stimulus olfactif par une réponse électrique et une réponse ionique
During this study, we have first synthesized biocompatible polymers using electrochemistry in order to improve the adhesion and proliferation of neuronal cells. Thus, we have optimized the culture of mature olfactory neurons first on standard substrates, then on the electrodeposited polymers. We have also characterized these cells and study their structure and morphology. This study is original since extracellular matrix, such as collagen or laminin, are the most common used substrates contrary to electrodeposited polymers which are rarely used as culture substrate. The second part of this work combining electrochemistry and neurosciences consists in the elaboration of a biosensors destinated to recognize difrferent odours. Indeed, we want to elaborate a 'bio-nose' using a microsystem on which the polymer and the neurons can be fixed. Then, the neurons can grow on this microsystem and react to an olfactory stimulus by emitting an electronic and an ionic signal charasteristic of a particular odour
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Bossenmeyer-Pourié, Carine. "Caractérisation des effets de l'hypoxie sur des neurones centraux en culture primaire : de l'activation du cycle cellulaire à l'apoptose." Nancy 1, 1999. http://www.theses.fr/1999NAN12007.

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Abstract:
Les difficultés de l'adaptation néonatale, la détresse respiratoire et les apnées ont pour conséquence l'apparition d'épisodes d'hypoxie, une des principales causes de souffrance cérébrale chez l'enfant. En dépit des progrès en obstétrique et néonatologie, l'encéphalopathie hypoxique-ischémique périnatale demeure une situation pathologique majeure à l'origine d'événements métaboliques et hémodynamiques aux répercussions immédiates et à long terme. Ce travail avait pour but d'explorer les mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans les altérations cérébrales engendrées par l'hypoxie/réoxygénation dans le cerveau en développement. Les études ont été réalisées in vitro sur un modèle utilisant des cultures de neurones centraux notamment issus de territoires sensibles (hippocampe, cortex, striatum) d'embryons de rat de 14 jours. Les propriétés des neurones cultivés à partir du cerveau embryonnaire, en particulier leur capacité à pouvoir encore se diviser, témoignent de l'intérêt de ce modèle pour l'étude des processus sous-jacents aux lésions cérébrales consécutives aux accidents hypoxiques précoces et ainsi permettre de définir des mécanismes potentiellement neuroprotecteurs, à visée thérapeutique. [. . . ]
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Ulmann, Lauriane. "Etude des interactions fonctionnelles entre neurones sensoriels des ganglions rachidiens et kératinocytes de l'épiderme : mise au point d'un modèle de coculture." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2004. http://www.theses.fr/2004STR13213.

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Abstract:
Nous avons mis au point un modèle de coculture de kératinocytes et de neurones de ganglion rachidien de rat nouveau-né et entre leurs homologues de lignées cellulaires. Chaque type cellulaire cultivé seul a été caractérisé par immunocytochimie, microscopie électronique et imagerie du calcium. La coculture nécessite l'utilisation du milieu spécifique aux kératinocytes, contenant une faible concentration en calcium (MCDB 20). Dans ce milieu, les neurones cultivés seuls ne présentent pas de croissance axonale, alors qu'une poussée neuritique est observée dans ce milieu lorsque la concentration de calcium est augmentée à 2 mM. L'addition de kératinocytes (cocultures) permet une élongation axonale dans le milieu MCDB 20 et la poussée neuritique est comparable à celle observée en condition 2 mM de calcium. Cette observation suggère que les cellules cibles périphériques libèrent des molécules trophiques agissant sur la croissance axonale des neurones. Après avoir déterminé le phénotype des neurones en coculture, nous avons recherché les molécules impliquées dans l'effet trophique des kératinocytes. En présence de NGF, de BDNF, ou de DHEA, les neurones cultivés dans le milieu MCDB 20 émettent des prolongements de taille identique à celle mesurée avec les kératinocytes. La présence de récepteurs Trk et de BDNF dans les neurones, la diminution de la longueur axonale des neurones en coculture en présence soit de bloquants des récepteurs Trk ou du PBR, ou en présence d'inhibiteurs des enzymes de synthèse de DHEA, montre que les neurotrophines et la DHEA sont impliqués dans l'effet trophique des kératinocytes. Cependant, les contacts physiques observés en microscopie électronique ne présentent pas de différenciation morphologique particulière. Ce système de coculture permet d'étudier les effets des cellules cibles sur le développement neuronal, la nature des facteurs impliqués et la transmission du message sensoriel depuis la périphérie
A coculture model between sensory neurons of dorsal root ganglion and keratinocytes of epidermis of newborn rats and corresponding cell lines has been developed. Each cell type has been characterized by immunocytochemistry, electron microscopy and calcium imagery. The coculture needs a specific medium for keratinocytes, with a low calcium concentration (MCDB 20). In this medium, axons of neurons cultivated without keratinocytes don't appear, but the axonal growth is observed when the calcium concentration is increased to 2 mM. The presence of keratinocytes (cocultures) allows an important neuritic extension similar to this observed in the 2 mM calcium medium. This observation suggests that the target cells release some trophic factors which induce the axonal growth. After determining the neuronal phenotype in coculture, we have looked for the molecules implied in the trophic effect. The addition of NGF, BDNF or DHEA induces an important axonal extension. The presence of Trk receptors and BDNF in neurons, the decrease of the axons gowth in coculture with the Trk or PBR blokers, or with the addition of the DHEA synthesis enzyme shows that neurotrophins and DHEA are imply in the trophic effect of keratinocytes. On the other hand, the physical contacts observed with electron microscopy don't show any specific morphological differentiation. This coculture system allows the study of the effects of target cells on the neuronal development, the nature of trophics factors and the transmission of the sensory signal since the periphery
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Golly, Francis. "Métabolisme des phospholipides dans des neurones de poulet en culture primaire modifications induites par la CDP-choline." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb375979665.

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BROUARD-CUVILLIEZ, ALINE. "Action de la neurotensine sur les neurones dopaminergiques embryonnaires de mesencephale de rat maintenus en culture primaire." Paris 6, 1994. http://www.theses.fr/1994PA066067.

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Abstract:
Dans des cultures primaires de cellules de mesencephale de rat, nous avons montre que la neurotensine (nt) potentialisait la liberation de dopamine tritiee stimulee par 20 mm de kc1. Cette action est due a la presence de recepteurs de la nt localises directement sur les neurones dopaminergiques. Les proprietes pharmacologiques de ces recepteurs ont ete etudiees a l'aide de pseudopeptides analogues de la nt et du sr48692, un nouvel antagoniste des recepteurs de la nt. Elles sont similaires a celles du recepteur de haute affinite de la nt du cerveau de rat adulte. L'etude du mecanisme d'action de la nt sur la liberation de dopamine a aussi ete aborde. Il ne fait pas intervenir de canaux potassiques sensibles au tetraethylammonium, a la 4-aminopyridine ou a l'apamine et n'est pas bloque par les inhibiteurs de la proteine kinase c. Cependant, l'effet de la nt est desensibilise par un traitement aux esters de phorbol. Bien qu'etant dependant du calcium, l'action de la nt n'est pas inhibee par les antagonistes des canaux calciques de type t, l ou n. Nos resultats demontrent la presence de recepteurs fonctionnels de la nt sur les neurones dopaminergiques mesencephaliques foetaux et suggerent que la nt pourrait influencer le developpement de ces neurones
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Golly, Francis. "Metabolisme des phospholipides dans les neurones de poulet en culture primaire : modifications induites par la cdp-choline." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1986. http://www.theses.fr/1986STR13149.

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Abstract:
Lors de lesions nerveuses par retrait de co::(2), l'etude du metabolisme des lipides a montre qu'un traitement a la cdp-choline ne modifie pas la distribution et la synthese des phospholipides et des acides gras mais provoque par contre une diminution de la liberation d'acides gras. La cdp-choline diminue l'activite phospholiposique a1 au niveau des membranes et protege donc celles-ci de la degradation
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Damjanac, Morel Milena. "Relation entre les voies de signalisation PKR et mTOR dans la maladie d'Alzheimer." Poitiers, 2008. http://www.theses.fr/2008POIT1403.

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Garrido-Sanchez, Luis Edmundo. "Conception et mise en œuvre d'un système d'aide a la modélisation de procédés de fermentation utilisant un système expert et des réseaux de neurones." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1993. http://www.theses.fr/1993INPL023N.

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Abstract:
L'objectif général de notre travail a été de développer une méthode de structuration des connaissances procédurales mises en œuvre lors de la modélisation de bioprocédés. Ce modèle cognitif permet la réalisation d'un système informatique d'aide à la modélisation. Dans une première partie, nous développons la méthodologie suivie pour effectuer l'extraction du savoir faire d'un expert en modélisation. Nous présentons l'expertise obtenue ainsi qu'une description de la procédure de modélisation et les éléments cinétiques utilisés. Dans une deuxième partie nous proposons la structure d'un système hybride compose d'un système expert contenant le savoir faire en construction de modèles et de plusieurs réseaux de neurones intégrant les connaissances nécessaires a la classification des courbes cinétiques. La troisième partie traite du test des procédures du système dans le cas d'une culture de bactéries pour la production d'acide lactique. Un modèle cinétique de la littérature est utilise pour simuler les données fournies au système: le modèle restitue lui est alors comparé. Finalement, nous présentons le modèle obtenu avec le prototype du système d'aide à la modélisation a partir de données expérimentales obtenues dans le cas d'une culture continue de kluyveromyces fragilis
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Levasseur, Grégoire. "Caractérisation fonctionnelle de récepteurs olfactifs de mammifères exprimés en lignées hétérologues : étude de l'effet de neuromodulateurs sur des cellules d'épithélium olfactif en culture primaire." Paris 11, 2003. http://www.theses.fr/2003PA112314.

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Abstract:
L'olfaction est un sens primordial qui a une influence importante sur le comportement des animaux. Bien qu'étudié depuis plus d'un siècle c'est seulement depuis un quinzaine d'années que les principaux acteurs moléculaires de la détection des odeurs, notamment les récepteurs olfactifs, ont été identifiés. Malgré cette découverte, les mécanismes moléculaires qui régissent la perception et la signalisation olfactive sont encore largement énigmatiques. Dans le travail qui a mené à cette thèse, j'ai développé un système d'expression hétérologue ou pseudo-homologue en cellules eucaryotes pour caractériser la réponse fonctionnelle de récepteurs olfactifs aux odorants. L'enjeu était de suivre les mécanismes de la détection et de la signalisation olfactive et d'envisager la possibilité d'un criblage des couples récepteurs olfactifs - odorants. Deux récepteurs olfactifs de mammifères, de ligands préférentiels déjà connus ont été utilisés pour développer les méthodes et initier l'étude, le récepteur 17 de rat et le récepteur 17-40 humain. Trois choix prépondérants ont été faits. D'une part, un système "minimaliste" d'expression de récepteurs "intègres", natifs (ou sans modification de leur séquence primaire), avec seulement une "étiquette" c-myc, a été utilisé pour perturber au minimum la reconnaissance du ligand et l'initiation de la signalisation cellulaire. Par contre, les systèmes d'expression ont été multipliés pour déterminer leur influence sur le niveau d'expression fonctionnelle. L'étude comparative a été effectuée sur des cellules de mammifères considérées comme "usines cellulaires" (COS, CHO, HEK), une lignée immortalisée issue d'épithélium olfactif de rat (adora). Enfin, la réponse fonctionnelle de clones stables ou de cellules exprimant transitoirement les récepteurs a été principalement étudiée par l'intermédiaire du calcium intracellulaire, second messager impliqué dans la transduction du signal olfactif, en spectrofluorimétrie ou en imagerie calcique. Par ailleurs, la mise au point d'un système de culture primaire de cellules de l'épithélium olfactif, s'est imposée en complément des systèmes d'expression hétérologue. Elle permettrait d'étudier d'une part les récepteurs olfactifs dans les cellules qui l'expriment naturellement, et d'autre part la modulation de ce signal olfactif par l'action de neuromodulateurs, dans le cadre de la régulation de l'olfaction par l'état physiologique, notamment nutritionnel. . .
Olfaction is dramatically influencing animal behaviour. Despite one century of thorough investigations main molecular actors of the olfactory perception, namely olfactory receptors, have only been identified for a decade. Even with this important discovery, molecular mechanisms underlying olfactory perception and signalisation still remain unclear. During this PhD thesis I've set up a heterologous expression system in eukaryote cell lines in order to characterise a response of receptors to odorants by a functional approach. The aim was to follow mechanisms of olfactory detection and signalisation and to allow the screening of olfactory receptor/odorant pairs. Two olfactory receptors, namely the i7 rat receptor (rORi7) and the 17-40 human receptor (hOR17-40), which already have known ligands (octanal and helional, respectively), have been used in the study. Three leading choice have been made. First, the expression system was chosen as providing a native receptor protein expression with no modification within the intrinsic open reading frame (ORF) of the receptor (which, in the particular case of OR is always free of introns), accepting solely the addition of detection tag sequence (no secretion or import tag) like the c-myc sequence. We thus hoped to limit the possibly interfering events in ligand detection or signalisation triggering. The comparative study as been carried out on mammalian cell lines usually considered as cellular factory (CHO, COS or HEK cells) and on a conditionally immortalized cell line (ODORA) that was derived from the olfactory neuron precursor lineage: globose basal cells. Least, to achieved functional characterisation, I have chosen to focus on the intracellular calcium which is the main second messenger implicated in the olfactory transduction signal. Measurements were achieved using spectrofluorimetric and imaging techniques both in real time. Beside this approach, the use of olfactory cells primary culture quickly appeared as an important tools to complete the studies in heterologous systems. Primary culture of olfactory neurons could allow to study olfactory receptors in their natural hosting cells but also to look for the action of neuromodulators on the olfactory signal transduction. That second point would then offer the possibility of studying the influence of the animal physiological state, including nutritional state, on the olfactory capacity. . .
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Grignon, Sylvain. "La culture de neurones granulaires du cervelet comme modele d'etude de la pharmacologie cellulaire du lithium (doctorat : neurosciences)." Aix-Marseille 2, 1996. http://www.theses.fr/1996AIX20657.

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Croce, Ariane. "Etude des régulations de l'activité neuronale par la noradrénaline dans les neurones hippocampiques de rat en culture primaire." Montpellier 2, 2003. http://www.theses.fr/2003MON20062.

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Parés-Herbuté, Nuria. "Mécanismes mis en jeu dans la libération de la somatostatine par les neurones de diencéphale et de cortex en culture primaire." Montpellier 2, 1989. http://www.theses.fr/1989MON20192.

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Abstract:
Trois modeles de culture primaire ont ete mis au point pour etudier certains des mecanismes susceptibles d'etre impliques dans la liberation de la somatostatine (srif) par les neurones diencephaliques et corticaux: cultures enrichies en neurones ou cultures mixtes de ftus de rat de 17 jours et cultures de cellules gliales de rat nouveau-ne. Les conditions necessaires au bon developpement des cellules (attachement, proliferation et survie) ont ete determinees. La cinetique de liberation de srif montre que la presence des cellules gliales augmente le contenu intracellulaire en srif et diminue celui du srif accumule dans le milieu. Par ailleurs, sous l'action de la forskoline, les cellules gliales produisent un facteur capable de stimuler la secretion de srif dans une culture enrichie en neurones, ce qui suggere l'existence d'un lien fonctionnel entre les cellules gliales et les neurones a srif. Sur ces cultures enrichies en neurones, la liberation de srif est ca#2#+-dependante: les ionophores calciques (a23187 ou ionomycine) stimulent la liberation de srif de facon dose-dependante et la formation d'ampc intracellulaire; l'absence de ca#2#+ ou la presence de co#2#+ abolissent ces effets. Pourtant, la calmoduline ne semble pas intervenir dans le processus secretoire: des antagonistes de la calmoduline (w-7 ou calmidazolium) ou des inhibiteurs de la proteine kinase calmoduline-dependante (phenytoine ou diazepam) ne modifient pas la liberation de srif. L'ampc per se n'est pas non plus implique dans la liberation de srif puisque cette derniere ne peut etre obtenue par l'action de la forskoline. Par contre, l'activation de la proteine kinase c par le pma stimule la liberation de srif d'une facon dose-dependante, suggerant la participation de la voie des phosphoinositides dans la liberation du peptide
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Camu, William. "Facteurs trophiques et toxiques des motoneurones de rat embryonnaire en culture." Montpellier 1, 1993. http://www.theses.fr/1993MON1T028.

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Cerruti, Catherine. "Etude, sur des neurones en culture primaire, du transporteur de la dopamine, au moyen d'un inhibiteur spécifique, la BTCP : pharmacologie, influence sur la maturation neuronale, neuroprotection." Montpellier 2, 1991. http://www.theses.fr/1991MON20167.

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Abstract:
Les etudes pharmacologiques, sur membranes striatales et sur neurones en cultures primaires, ont montre que la btcp, derive de la phencyclidine (pcp), se lie avec une haute affinite sur le complexe de recapture de la dopamine, dont elle inhibe selectivement le transport. L'utilisation de la btcp, comme outil de marquage des sites de recapture de la dopamine, a permis de localiser ces derniers dans les zones de l'encephale de rat adulte riches en elements dopaminergiques (striatum et substance noire) et sur l'ensemble du neurone exprimant la dopamine en culture (au niveau des membranes terminales, neuritiques et somatiques). Un traitement chronique, par la btcp, entraine des modifications metaboliques (reduction de la synthese et accumulation accrue de la dopamine), qui influencent le developpement des neurones dopaminergiques in vitro. Ces effets sont modules par la presence de cellules striatales cibles dans la culture, qui previent les effets de la drogue. En outre, la btcp protege les neurones dopaminergiques de la toxicite de la 6-hydroxydopamine et du 1-methyl-4-pyridinium (mpp+), en bloquant leur transport dans la cellule
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Couturier, Julien. "Rôle de la kinase PKR dans l'inflammation au cours de la maladie d'Alzheimer." Poitiers, 2011. http://www.theses.fr/2011POIT1401.

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Chihab, Rifki. "Influence de la maturation cellulaire sur les conséquences d'une hypoxie transitoire dans les neurones centraux en culture : évaluation de la contribution de l'excitotoxicité et des facteurs de transcription." Nancy 1, 1998. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/SCD_T_1998_0351_CHIHAB.pdf.

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Abstract:
En dépit des progrès en obstétrique et néonatologie, l'encéphalopathie hypoxique-ischémique périnatale demeure une situation pathologique majeure à l'origine d'événements métaboliques et hémodynamiques aux répercussions immédiates et à long terme. La suractivation des récepteurs glutamatergiques causée par la libération excessive du glutamate est un des mécanismes proposés dans la médiation des dommages hypoxiques-ischémiques. Cependant, le rôle de cet acide aminé excitateur dans les conséquences de l'hypoxie est aujourd'hui discuté. Un des objectifs de notre travail était d'évaluer la contribution de l'excitotoxicité liée au glutamate aux désordres cérébraux engendrés par à un épisode hypoxique. L'hypoxie serait plus délétère chez le nouveau-né à terme que chez le prématuré et il a été rapporté que les animaux jeunes résistent mieux à une privation en oxygène que les adultes. En ce sens, nous avons étudié l'influence de la maturation cellulaire sur le devenir des neurones suite à une exposition à l'hypoxie ou au glutamate. Dans un second volet, nous avons analysé la séquence d'expression de certains facteurs de transcription impliqués dans l'adaptation cellulaire et dont l'interaction avec l'ADN influence la transcription génétique et donc le devenir neuronal. Nous avons également appréhendé une des voies de signalisation, celle des JNK (c-Jun N-terminal kinases). Les études ont été réalisées in vitro sur un modèle utilisant des cultures de neurones centralLx issus de territoires connus pour être sensibles (hippocampe, cortex, striatum) d'embryons de rat de 14 jours. L'agression hypoxique a été provoquée pendant 6 h par incubation des neurones, utilisés à deux stades de maturation (6 jours et 13 jours), dans une atmosphère dépourvue d'oxygène (95% N2-5% CO2). Par ailleurs, les effets du glutamate ont été évalués par addition au milieu de culture de l'acide aminé ou d'agonistes de ses récepteurs (100 µM). Les neurones ont été étudiés immédiatement, puis 24 h et 72 h après traitement. La viabilité cellulaire a été mesurée par la méthode au MTT (3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliurn bromide), le métabolisme énergétique par la mesure du prélèvement de 2-D-désoxyglucose[3H] (2DG), et la synthèse protéique par l'incorporation de leucine[3H]. L'apoptose et la nécrose ont été analysées par incorporation nucléaire d'un fluorochrome, le 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI). Les résultats montrent que la viabilité et les caractéristiques fonctionnelles des neurones de 6 jours n'ont pas été altérées par l'exposition au glutamate ou à ses analogues. Par contre, leur sensibilité à l'hypoxie s'est traduite par un hypermétabolisme transitoire, une augmentation biphasique de la synthèse protéique et par le développement d'un phénomène d'apoptose, lequel a été pratiquement aboli par un traitement avec un inhibiteur de la synthèse protéique, la cyclohéximide (CHX, 1 µM). A ce stade, les neurones deviennent toutefois vulnérables au glutamate lorsqu'ils ont été traités par un inhibiteur de la protéine kinase C (staurosporine, 30 nM). Dans les cultures de neurones de 13 jours, l'hypoxie a induit une faible augmentation de l'apoptose (8,2%), tandis que le taux de nécrose atteignait 22,3%, 72 h après exposition. Le glutamate a réduit durablement le métabolisme énergétique dès la fin de l'exposition (26%). Alors que sous l'effet du glutamate, le taux d'apoptose est resté identique à celui des témoins, le pourcentage de nécrose a augmenté sensiblement pour atteindre 40,7% à 72 h après exposition. L'inhibition soutenue de la synthèse protéique et l'absence d'effet protecteur de la CHX confirment les résultats obtenus avec le DAPI. En outre, le traitement des neurones de 13 jours par des antagonistes des récepteurs NMDA et non-NMDA (respectivement MK-801 et NBQX, 10 µM) les a protégé de la nécrose induite par le glutamate et l'hypoxie. Ainsi, les neurones "immatures", bien qu'ils possèdent un système glutamatergique fonctionnel, sont résistants à la toxicité du glutamate alors qu'ils sont sensibles à l' hypoxie. La perte de l'activité de la protéine kinase C semble être un processus nécessaire pour médier l'excitotoxicité. En revanche, dans les neurones "plus matures", les effets de l'hypoxie ne correspondent pas exactement à ceux engendrés par le glutamate, tandis que la composante nécrotique de l'hypoxie serait médiée par ce dernier. L'apoptose se développe via un programme dépendant de la synthèse de macromolécules et implique l'expression de gènes capables de réguler les événements associés à la mort cellulaire. Sur les cultures de neurones de 6 jours, nous avons analysé par immunohistochirnie et western blotting les effets de l'hypoxie/réoxygénation sur l'expression des protéines de la famille Myc (c-Myc, Max et Madl) ainsi que celles liées au complexe nucléoprotéique AP-I, à savoir c-Fos, c-Jun, Jun B et Jun D. Alors que l'expression de Max n'a pas été altérée au cours de l'hypoxie/réoxygénation, celle de c-Myc a été réprimée jusqu'à 96 h post-réoxygénation suggérant que cette protéine ne jouerait pas un rôle actif dans la mort neuronale induite par l'hypoxie. L'expression des produits protéiques qui composent le complexe AP-I a subi des variations séquentielles, à l'exception de c-Jun dont l'expression a été augmentée de façon soutenue tout au long de l'étude. L'activité de liaison du complexe AP-I a été détectée dans les neurones en culture. Par conséquent, les modifications dynamiques de la composition d'AP-I et l'induction persistante de c-Jun pourraient être impliquées dans la mort neuronale retardée d'origine hypoxique. Par ailleurs, l'expression constitutive de JNKI a diminué durant l'hypoxie pour ensuite augmenter transitoirement à 48 h après réo»:ygénation, ceci parallèlement à l'apparition de JNK3 et des premiers signes d'apoptose. L'activation retardée de JNKl et JNK3 couplée à l'expression soutenue de c-Jun suggèrent l'implication de la voie JNK dans la signalisation cellulaire entraînant l'apoptose induite par une hypoxie transitoire dans les neurones du cerveau en développement.
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Lavergne, Pauline, and Pauline Lavergne. "Caractérisation des réponses de neurones corticaux de rat en culture suite à des stimulations glutamatergiques grâce à la microscopie holographique numérique : vers une mesure de la balance excitation/inhibition." Master's thesis, Université Laval, 2020. http://hdl.handle.net/20.500.11794/38153.

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Abstract:
De nouvelles preuves suggèrent que les dysfonctionnements des circuits sous-jacents aux symptômes et aux déficits cognitifs des maladies psychiatriques pourraient être causés par une altération des paramètres d'équilibre d’excitation/inhibition (E/I). Cependant, les preuves physiologiques directes de cette hypothèse à partir de données électrophysiologiques et de neuro-imagerie non invasives sont jusqu'à présent rares. Pour apporter un soutien supplémentaire à l’hypothèse de l’équilibre E/I, la présente étude a appliqué une approche avancée de microscopie holographique numérique (MHN) pour examiner la dynamique des systèmes excitateurs/inhibiteurs suite à une stimulation glutamatergique dans des réseaux de neurones à différents stades de maturation neuronale. Cette approche fournissant une mesure approximative très précise des variations de mouvement de l’eau dans les cellules permet d’étudier certains processus physiologiques, tels que ceux reliés à l’activité neuronale. Cette étude a ainsi permis d’améliorer les connaissances sur la dynamique de la réponse neuronale induite par le glutamate, notamment en la caractérisant dans des cultures de neurones corticaux primaires de rats postnataux. L’activation des neurones engendrée par le glutamate, le principal neurotransmetteur excitateur, a révélé des changements plus ou moins persistants de la morphologie et des propriétés intracellulaires des neurones. De plus, les différentes réponses obtenues indiquent que le glutamate engendre des mécanismes d’activation et des processus de régulation du volume neuronal distincts d’un neurone à l’autre, probablement dépendant de l’état d’excitabilité de ce dernier qui résulte de l’interaction complexe des neurones inhibiteurs et excitateurs. Ainsi, la régulation de l’équilibre E/I de réseaux neuronaux pourrait potentiellement être reflétée par la proportion des différentes réponses de phase induites lors de stimulation de réseaux neuronaux au glutamate.
De nouvelles preuves suggèrent que les dysfonctionnements des circuits sous-jacents aux symptômes et aux déficits cognitifs des maladies psychiatriques pourraient être causés par une altération des paramètres d'équilibre d’excitation/inhibition (E/I). Cependant, les preuves physiologiques directes de cette hypothèse à partir de données électrophysiologiques et de neuro-imagerie non invasives sont jusqu'à présent rares. Pour apporter un soutien supplémentaire à l’hypothèse de l’équilibre E/I, la présente étude a appliqué une approche avancée de microscopie holographique numérique (MHN) pour examiner la dynamique des systèmes excitateurs/inhibiteurs suite à une stimulation glutamatergique dans des réseaux de neurones à différents stades de maturation neuronale. Cette approche fournissant une mesure approximative très précise des variations de mouvement de l’eau dans les cellules permet d’étudier certains processus physiologiques, tels que ceux reliés à l’activité neuronale. Cette étude a ainsi permis d’améliorer les connaissances sur la dynamique de la réponse neuronale induite par le glutamate, notamment en la caractérisant dans des cultures de neurones corticaux primaires de rats postnataux. L’activation des neurones engendrée par le glutamate, le principal neurotransmetteur excitateur, a révélé des changements plus ou moins persistants de la morphologie et des propriétés intracellulaires des neurones. De plus, les différentes réponses obtenues indiquent que le glutamate engendre des mécanismes d’activation et des processus de régulation du volume neuronal distincts d’un neurone à l’autre, probablement dépendant de l’état d’excitabilité de ce dernier qui résulte de l’interaction complexe des neurones inhibiteurs et excitateurs. Ainsi, la régulation de l’équilibre E/I de réseaux neuronaux pourrait potentiellement être reflétée par la proportion des différentes réponses de phase induites lors de stimulation de réseaux neuronaux au glutamate.
New evidences suggest that circuit dysfunctions underlying symptoms and cognitive deficits of psychiatric disorders may be caused by impaired excitation/inhibition equilibrium parameters (E/I). However, direct physiological evidences supporting this hypothesis from non-invasive electrophysiological and neuroimaging remain scarce. To provide additional support concerning the E/I balance hypothesis, this study uses an advanced digital holographic microscopy (DHM) approach to explore the dynamics of excitatory/inhibitory systems following glutamatergic stimulation in neural networks at different stages of neuronal maturation. This approach provides a very accurate approximate measurement of the water movement variations in cells allowing to study certain specific physiological processes, such as those related to neuronal activity. This study improves the knowledge regarding the dynamics of the glutamate-induced neuronal response, especially by characterizing it in cultures of primary cortical neurons of postnatal rats. The activation of neurons induced by glutamate, which is the main excitatory neurotransmitter, revealed more or less permanent changes in the morphology and intracellular properties of neurons. Moreover, the various responses obtained indicate that glutamate generates different neuronal activation mechanisms and neuronal volume regulation processes from a neuron to another, probably depending to the excitability state of the neuron that results from the complex interaction of inhibitory and excitatory neurons. Thus, the E/I balance regulation of neural networks could potentially be reflected by the proportion of different phase responses induced during glutamate neural network stimulation.
New evidences suggest that circuit dysfunctions underlying symptoms and cognitive deficits of psychiatric disorders may be caused by impaired excitation/inhibition equilibrium parameters (E/I). However, direct physiological evidences supporting this hypothesis from non-invasive electrophysiological and neuroimaging remain scarce. To provide additional support concerning the E/I balance hypothesis, this study uses an advanced digital holographic microscopy (DHM) approach to explore the dynamics of excitatory/inhibitory systems following glutamatergic stimulation in neural networks at different stages of neuronal maturation. This approach provides a very accurate approximate measurement of the water movement variations in cells allowing to study certain specific physiological processes, such as those related to neuronal activity. This study improves the knowledge regarding the dynamics of the glutamate-induced neuronal response, especially by characterizing it in cultures of primary cortical neurons of postnatal rats. The activation of neurons induced by glutamate, which is the main excitatory neurotransmitter, revealed more or less permanent changes in the morphology and intracellular properties of neurons. Moreover, the various responses obtained indicate that glutamate generates different neuronal activation mechanisms and neuronal volume regulation processes from a neuron to another, probably depending to the excitability state of the neuron that results from the complex interaction of inhibitory and excitatory neurons. Thus, the E/I balance regulation of neural networks could potentially be reflected by the proportion of different phase responses induced during glutamate neural network stimulation.
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Šmít, Daniel. "Analysis of dynamical interactions of axon shafts and their biophysical modelling." Thesis, Paris 6, 2017. http://www.theses.fr/2017PA066095/document.

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Abstract:
La fasciculation des axones joue un rôle essentiel dans le développement des réseaux neuronaux. Cependant, la dynamique de la fasciculation axonale, ainsi que les mécanismes biophysiques à l’œuvre dans ce processus, demeurent encore très mal compris. En vue d'étudier les mécanismes de fasciculation d'axones ex vivo, nous avons développé un système modèle simple, constitué par des explants d'épithélium olfactif de souris embryonnaires en culture, à partir desquels poussent les axones des neurones sensoriels olfactifs. Grâce à une étude en vidéomicroscopie, nous avons observé que ces axones interagissent de façon dynamique par leur fibre, à la manière de fermetures éclair pouvant se fermer ("zippering") ou s'ouvrir ("unzippering"), ce qui conduit respectivement à la fasciculation ou à la défasciculation des axones. Mettant à profit cette nouvelle préparation expérimentale pour l'étude des interactions dynamiques entre axones, nous avons développé une analyse biophysique détaillée des processus de zippering/unzippering.Nous mettons en évidence dans notre travail l'existence d'un mécanisme biophysique cohérent de contrôle des interactions locales entre fibres axonales. Ce mécanisme local est à mettre en relation avec les changements de la structure globale du réseau axonal (degré de fasciculation) qui s'opèrent sur une échelle temporelle plus longue. Enfin, nous discutons la signification fonctionnelle de nos observations et analyses, et proposons un nouveau rôles de la tension mécanique dans le développement du système nerveux : la régulation de la fasciculation des axones et, en conséquence, de la formation des cartes topologiques au sein des réseaux neuronaux
While axon fasciculation plays a key role in the development of neural networks, very little is known about its dynamics and the underlying biophysical mechanisms. In a model system composed of neurons grown ex vivo from explants of embryonic mouse olfactory epithelia, we observed that axons dynamically interact with each other through their shafts, leading to zippering and unzippering behaviour that regulates their fasciculation. Taking advantage of this new preparation suitable for studying such interactions, we carried out a detailed biophysical analysis of zippering, occurring either spontaneously or induced by micromanipulations and pharmacological treatments.We show that there is a consistent mechanism which governs local interactions between axon shafts, supported by broad experimental evidence. This mechanism can be reconciled with changes in global structure of axonal network developing on slower time scale, analogically to well-studied relation between local relaxations, and topological changes and coarsening in two-dimensional liquid foams. We assess our observations and analysis in light of possible in vivo functional significance and propose a new role of mechanical tension in neural development: the regulation of axon fasciculation and consequently formation of neuronal topographic maps
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LOUIS, JEAN-CLAUDE. "Mise au point, caracterisation et applications de cultures pures de neurones du systeme nerveux central." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1986. http://www.theses.fr/1986STR13050.

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Abstract:
Le present memoire decrit notre contribution a la mise au point de cultures pures de neurones a partir d'hemispheres cerebraux d'embryon de poulet ou de foetus humain. Les avantages des cultures de neurones mais aussi les inconvenients et leurs limites sont discutes tout au long de ces memoires
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Laurent, Stéphanie. "Une approche de la discrimination olfactive : étude en "patch-clamp" des neurones sensoriels olfactifs de l'abeille." Paris 6, 2002. http://www.theses.fr/2002PA066427.

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Ferret, Blandine. "Contribution à l'étude du rôle des gangliosides dans l'activité fonctionnelle du neurone effets des gangliosides exogènes sur certains paramètres morphologiques et biochimiques des neurones de poulet en culture primaire /." Grenoble 2 : ANRT, 1987. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37605084f.

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Ferret, Blandine. "Contribution a l'etude du role des gangliosides dans l'activite fonctionnelle du neurone : effets des gangliosides exogenes sur certains parametres morphologiques et biochimiques des neurones de poulet en culture primaire." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1987. http://www.theses.fr/1987STR13009.

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Abstract:
Le role biologique des gangliosides a ete etudie en utilisant des cultures primaires d'embryon de poulet en presence et/ou en absence d'un melange de gangliosides purifies. Les gangliosides s'inserent tres rapidement dans la membrane neuronale et produisent un effet neurotrophique et neutrogenique. Une legere stimulation de la synthese proteique est observee. Les gangliosides stimulent la methilation des proteines et des acides nucleiques, representant un mecanisme de regulation de l'activite cellulaire
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Jourdain, Pascal. "Caractérisation morphofonctionnelle des neurones magnocellulaires à ocytocine de rat en culture organotypique : rôle des afférences et de l'ocytocine dans le déclenchement et le contrôle d'une activité électrique en bouffée." Bordeaux 2, 1997. http://www.theses.fr/1997BOR28520.

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Nicolas, Frédéric. "Mise au point d'un modèle d'étude de l'hypoxie sur des neurones centraux en culture : évaluation du rôle neuroprotecteur des analogues de l'adénosine." Nancy, 1996. http://www.theses.fr/1996NAN10394.

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Puymirat, Jack. "Influence de la triiodothyronine sur le développement des neurones dopaminergiques de l'hypothalamus de souris : étude in vitro dans des cultures en milieu sans sérum." Paris 6, 1986. http://www.theses.fr/1986PA066137.

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Abstract:
Etude in vivo sur la souris du développement pré et postnatal de l'activité de la tyrosine hydroxylase et de la capacite de capture spécifique de la dopamine. Mise en évidence in vitro de la t3 sur les neurones dopaminergiques de l'hypothalamus.
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