Dissertations / Theses: 'Dopamina'

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González, González Sergio. "Receptores de dopamina y heterómeros de receptores de dopamina en la modulación de la neurotransmisión." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2012. http://hdl.handle.net/10803/83919.

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Abstract:

La mayoría de los ligandos de GPCR que actúan como agonistas, antagonistas o agonistas inversos, se unen al mismo dominio del receptor reconocido por los agonistas endógenos, es decir, el lugar de unión ortostérico. Muchos GPCR poseen sitios alostéricos topográficamente distintos a los ortostéricos. Esto ha llevado a la identificación y estudio de ligandos que actúan como moduladores alostéricos, que pueden regular indirectamente la actividad de los ligandos ortostéricos y/o mediar directamente efectos agonista/antagonista. Este es el caso del híbrido trans-indoloquinolicidina-péptido 28 (IP28) estudiado en la primera parte de esta Tesis Doctoral. Este compuesto es un modulador alostérico de los receptores de dopamina D1, actuando como ligando ortostérico para los receptores D2, D3, D4 y D5 de dopamina; disminuyendo la afinidad del ligando y la potencia de los receptores, preservando al mismo tiempo la eficacia de los mismos y actuando como un agonista débil por si mismo. A pesar de una cierta resistencia inicial por parte de la comunidad científica, la existencia de heterómeros entre diversos receptores de neurotransmisores y neuromoduladores es, hoy por hoy, un hecho aceptado. La heteromerización implica cambios en la forma de entender la neurotransmisión. Así, los receptores no pueden considerarse como una única unidad funcional, sino como agregados multimoleculares localizados en el plano de la membrana plasmática. Bajo esta idea, en la segunda parte de esta tesis se demostró que los receptores de dopamina D2S, D4.2 y D4.4, pero no la variante D4.7 asociada con el trastorno de déficit de atención e hiperactividad (ADHD), forman heterómeros funcionales en células transfectadas y en cerebro de ratón. La coestimulación de los receptores D2S y D4 en el heterómero D2S-D4 tiene un efecto sinérgico en la señalización, hecho que no ocurre en células que expresaban la variante D4.7 o en el estriado de ratones mutados (knock-in) portadores de la variante de 7 repeticiones (D4.7) en el tercer bucle intracelular del receptor D4 de dopamina. Estos resultados indican una diferencia funcional de la variante D4.7 del receptor D4 respecto a las variantes D4.2 y D4.4, la cual puede tener implicaciones importantes para la comprensión de la patogénesis de ADHD. Otra particularidad del receptor de dopamina D4 es que es el único receptor dopaminérgico en la glándula pineal de rata sin que se conozca cual es su función a pesar de que se expresa de manera circadiana. Por tanto, la glándula pineal de rata es una región del cerebro con gran interés para investigar las características del receptor D4. Dado que la glándula pineal está bajo el control de los receptores α1B y β1 adrenérgicos, de cuya activación depende la regulación del ritmo circadiano y la síntesis y liberación de serotonina y melatonina, una posibilidad es que los receptores de dopamina D4, que en animales no presenta formas polimórficas, puedan modular la función de los receptores adrenérgicos de la glándula pineal mediante un proceso de heteromerización. Basado en esta hipótesis, en la tercera parte experimental de esta tesis se ha identificado un nuevo mecanismo que describe como la dopamina regula la función de los receptores adrenérgicos durante el ritmo circadiano. Utilizando diversas técnicas experimentales se ha puesto de manifiesto que: 1) los receptores D4 de dopamina forman heterómeros con receptores adrenérgicos α1B y β1 en células transfectadas y en la glándula pineal 2) los heterómeros α1B-D4 y β1-D4 permiten la modulación inducida por agonistas y antagonistas del receptor D4 de la activación de MAPK y Akt mediada por agonistas de los receptores adrenérgicos en células transfectadas y en la glándula pineal 3) la síntesis y la liberación de serotonina y melanina, promovida por la estimulación de los receptores adrenérgicos en la glándula pineal, está controlada por el receptor D4 a través de la activación de los heterómeros α1B-D4 y β1-D4, y 4) la modulación de los heterómeros a través de los receptores D4 depende de los ciclos circadianos de día/noche. La búsqueda de ligandos específicos para receptores que puedan acoplarse a un sistema de transferencia de energía es de gran interés, ya que las técnicas de BRET y FRET no son aplicables a tejidos ex vivo. Debido a ello, en la cuarta y última parte de esta Tesis se ha querido contribuir al desarrollo de ligandos para receptores de dopamina útiles para detectar heterómeros que contengan estos receptores. Para ello se ha desarrollado y caracterizado ergopéptidos biotinilados como herramientas para el estudio de heterómeros que contengan receptores de dopamina. Así pues, se ha utilizado una quimioteca de ergopéptidos unidos a biotina mediante un espaciador apropiado que conservan sus propiedades como ligandos de receptores de dopamina, identificándose el compuesto 13 como un agonista de elevada afinidad para los receptores D1, D2 y D3 de dopamina y convirtiéndose así en una herramienta útil para estudiar heterómeros que contengan estos receptores.
In the first part of this thesis, we obtained a trans-indoloquinolizidine-peptide hybrid (IP28) obtained by a combinatorial approach, behaved as an orthosteric ligand of all dopamine D2- like receptors (D2, D3, and D4) and dopamine D5 receptors, but as a negative allosteric modulator of agonist and antagonist binding to striatal dopamine D1 receptors. Indoloquinolizidine-peptide 28 induced a concentration-dependent hyperbolic increase in the antagonist apparent equilibrium dissociation constant values and altered the dissociation kinetics of dopamine D1 receptor antagonists. In the second part of this thesis, we show that whereas the most frequent 4-repeat (D4.4) and the 2-repeat (D4.2) variants form functional heteromers with the short isoform of the dopamine D2 receptor (D2S), the 7-repeat risk allele (D4.7) does not. D2 receptor activation in the D2S–D4 receptor heteromer potentiates D4 receptor- mediated MAPK signaling in transfected cells and in the striatum, which did not occur in cells expressing D4.7 or in the striatum of knockin mutant mice carrying the 7 repeats of the human D4.7 in the third intracellular loop of the D4 receptor. Using the same receptor, le dopamine D4R, in the third part of this thesis, we describe that the production of both melatonin and serotonin by the pineal gland is regulated by a circadian-related heteromerization of adrenergic and dopamine D4 receptors. Through α1B-D4 and β1-D4 receptor heteromers dopamine inhibits adrenergic receptor signaling and blocks the synthesis of melatonin induced by adrenergic receptor ligands. And this inhibition was not observed at hours of the day when D4 was not expressed. Finally, in the last part of this thesis, we made the systematic derivatization of two ergopeptides with different peptide-based spacers and we realized their evaluation by radioligand binding assays. Selected spacer-containing ergopeptides with minimal biological alteration and a proper anchoring point were further derivatized with a biotin reporter. Detailed characterization studies identified 13 as a biotin ergopeptide maintaining high affinity and agonist behavior at dopamine receptors, being a useful tool for the study of heteromers involving D1R, D2R, or D3R.

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Noronha, Emmanuelle Coelho. "AÃÃo de drogas agonistas e antagonistas dos sistemas colinÃrgico e dopaminÃgico: estudo comportamental e neuroquÃmico em corpo estriado de rato." Universidade Federal do CearÃ, 2005. http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=277.

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Abstract:

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior
No presente trabalho, foi avaliado a interaÃÃo entre os sistemas dopaminÃrgico e colinÃrgico atravÃs do estudo dos efeitos comportamentais (campo aberto e catalepsia) e neuroquÃmicos (densidade de receptores dopaminÃrgicos (D1 e D2-sÃmile) e muscarÃnicos (M1+M2-sÃmile) em corpo estriado de rato. As seguintes drogas foram utilizadas: mazindol (agonista dopaminÃrgico indireto), apomorfina (agonista dopaminÃrgico D1-sÃmile e D2-sÃmile), pimozida (antagonista dopaminÃrgico D2-sÃmile), SCH 23390 (antagonista dopaminÃrgico D1-sÃmile), pilocarpina (agonista muscarÃnico M1-sÃmile), carbacol (agonista muscarÃnico M2-sÃmile), pirenzepina (antagonista muscarÃnico M1-sÃmile), atropina (antagonista muscarÃnico M1 e M2 nÃo seletivo), clozapina (neurolÃptico atÃpico). Os resultados mostraram que a pimozida e o carbacol, sozinhos ou associados, causaram um aumento da resposta catalÃptica e uma diminuiÃÃo da atividade locomotora. O mazindol tambÃm aumentou a atividade locomotora. Carbacol, nas menores doses, e o mazindol aumentaram a densidade de receptores D1-sÃmile. A pimozida e a atropina, isoladamente, aumentaram a densidade de receptores D1-sÃmile no corpo estriado enquanto que a atropina causou uma diminuiÃÃo dos receptores D2-sÃmile e uma upregulation dos receptores muscarÃnicos. O mazindol aumentou o binding de 3H-NMS no corpo estriado. O presente trabalho sugere, de maneira geral, que existe uma relaÃÃo entre os receptores muscarÃnicos M1 e M2 com os receptores dopaminÃrgicos D1 e D2, sendo que esta relaÃÃo pode ocorrer de maneira positiva ou negativa, dependendo da seletividade e da dose das drogas utilizadas
In the study, the interaction between the dopaminergic and cholinergic systems through the study of behavioral (open field and catalepsy) and neurochemical (density of dopaminergic receptor (D1 and D2-like) and muscarinic (M1+M2-like)) effect in striatum rat was evaluated. The following drugs were used: mazindol (indirect dopaminergic agonist), apomorphine (D1-like and D2-like dopaminergic agonist), pilocarpine (M1-like muscarnic aginist), carbachol (M-2like agonist muscarinc), pirenzepine (M1-like antagonist muscarinic), atropine (non-selective M1 and M2 antagonist muscarinic), clozapina(non-typical neuroleptic). The results showed that the pimozida and carbachol, alone or associated, caused increase in the cataleptic response and reduction in the motor activity. The mazindol also increased the motor activity. In small dosage, the carbachol and mazindol increased the density of D1-like receptors. Isolated, the pimozida and atropine increased the density of the D1-like receptors in striatum whereas the atropine caused a reduction of D2-like receptors and upregulation of muscarinic receptors. This work suggests a relationship, between muscarinc receptors M1 and M2 and dopaminergic receptors D1 and D2, and that this relationship can occur in a positive and negative manner, depending on the selectivity and the dose of the used drug

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Tanimoto, Sonia Tomie. "\"Utilização da engenharia interfacial para a preparação de superfícies nano-estruturadas de Au pela aproximação bottom-up\"." Universidade de São Paulo, 2006. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-11042007-105623/.

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Abstract:

Este trabalho tem como objetivo principal a utilização da técnica bottom-up para a construção de nanoestruturas de ouro por meio de técnicas voltamétricas sobre uma superfície de Carbono Vítreo. Estas estruturas foram caracterizadas por métodos microscópicos e voltamétricos. A dimensão crítica das nanoestruturas foi obtida por meio de uma curva Gausseana de distribuição de alturas e diâmetros, fornecendo um valor médio de 35 nm por 150 nm de diâmetro. As nanoestruturas obtidas foram modificadas pela deposição de uma camada automontada de cistamina (um tiól), resultando num substrato adequado para futuras aplicações como a imobilização de enzimas. Os comportamentos eletroquímicos da dopamina e do ácido ascórbico, sobre eletrodos de ouro, Carbono Vítreo e Nanoestruturado, foram avaliados para a caracterização das modificações dos eletrodos. A diferença dos potenciais de pico de oxidação do AA sobre eletrodos de Carbono Vítreo e de ouro, de cerca de 300 mV, possibilitou avaliar o recobrimento do Carbono Vítreo com nanoestruturas pela diminuição da corrente de pico. Já a dopamina foi utilizada neste trabalho para determinar a presença da camada automontada de cistamina sobre a superfície das nanoestruturas de ouro, uma vez que sua resposta voltamétrica mostra um deslocamento do potencial de pico quando realizada sobre Au e sobre Au modificado com a camada automontada.
The subject of this work is focused in the utilization of a bottom-up approach to develop an Au nanostructured electrodeposits on the glassy carbon surface by a voltammetric procedure. These Au nanostructures have been characterized either by microscopic and voltammetric techniques. The critical dimensions of nanostructures has been evaluated by a Gausean normal data distribution curve and presented, as results a mean height of 35 nm and a mean diameter of 150 nm. The Au nanostructures were further modified by the deposition of a cystamine (thiol) self-assembled monolayer, yielding a suitable substrate for enzyme immobilization, as a possible future application. The electrochemical behaviour of dopamine and ascorbic acid on gold, Glassy Carbon and nanostructures was studied aiming to characterize the modified electrode. The 300 mV shift in the oxidation peak potential for ascorbic acid on gold in relation to Glassy Carbon allows to calculate the nanostructure coverage factor by the peak current inhibition as 43%. Finally, dopamine was employed to detect the self assembled monolayer formation on the Au nanostructure through its voltammetric behaviour. The variation in the oxidation potential for DA on gold and self assembled monolayer was used as an indicator for such modification.

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Brum, Alexandre Martini de [UNESP]. "Avaliação da função renal de cães sadios e nefropatas sob infusão de dopamina." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2007. http://hdl.handle.net/11449/89199.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-23Bitstream added on 2014-06-13T18:19:59Z : No. of bitstreams: 1 brum_am_me_jabo.pdf: 342441 bytes, checksum: 76ea043eafca848acccc425ff6c78e8f (MD5)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
A dopamina e um composto endogeno amplamente utilizado em terapia intensiva. Possui um amplo espectro de acoes, tanto sobre o sistema cardiovascular como urinario. Aumento da taxa de filtracao glomerular, do fluxo sanguineo renal e excrecao fracionada de sodio e fosforo sao efeitos renais esperados em individuos normais, porem sao pouco explorados na medicina veterinaria. Com o proposito de testar a hipotese que a dopamina e capaz de aumentar a excrecao fracionada de fosforo em caes nefropatas, este estudo foi conduzido. Diferentes doses de dopamina foram administradas em caes nefropatas. Avaliacoes laboratoriais foram realizadas durante e apos os tratamentos. O clearance de creatinina e a excrecao fracionada de fosforo apresentaram aumento dose-dependente nos caes sadios. Em caes nefropatas, a dose de 1 Êg/kg/min aumentou discretamente a TFG, alem de aumentar o volume urinario e excrecao de fosfato, sem modificar a U-P/C e pressao arterial sistemica, enquanto a dose de 3 Êg/kg/min nao aumentou os beneficios e, ainda, promoveu aumento da excrecao urinaria de proteinas.
Dopamine is a endogenous compound largely used in critical care. It has a large spectrum of actions on cardiovascular and urinary systems. Increases in glomerular filtration rate, renal blood flow and frational excretion of sodium and phosphate are renal effects expected in healthy patient, but there are few reports in veterinary medicine. In order to test the hypothesis that dopamine can increase frational excretion of phosphate in nephropathy dogs this study was conducted. Different dopamine doses were administered in nephropathy dogs. Laboratory evaluations were done during and after treatments. Creatinin clearance and frational excretion of phosphate increases dose-dependent form in healthy dogs. In the nephropathy dogs, the dose of 1ìg/kg/min increased the glomerular filtration rate, urinary volume and phosphate excretion, without modified U-P/C and systemic arterial blood pressure, while the dose of 3ug/kg/min don t increased the benefits and promoted a increase in the urinary excretion of proteins.

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Omar, Muhammad Yusof. "Modulation of Presynaptic Dopamine Synthesis and Storage Dynamics by D2-Like Receptor Partial Agonist Antipsychotics in Rat Brain Striatum." Doctoral thesis, Universitat Autònoma de Barcelona, 2020. http://hdl.handle.net/10803/670700.

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Abstract:

La regulació dopaminèrgica presinàptica és important per mantenir un equilibri homeostàtic dels nivells emmagatzemats de dopamina i el seu alliberament. Els canvis en la neurotransmissió de dopamina contribueixen a trastorns neurològics i psiquiàtrics. Treballs recents del nostre grup (Ma et al., 2015; González-Sepúlveda et al.,-presentada) van descriure importants efectes de diverses classes de fàrmacs dopaminèrgics sobre la síntesi de dopamina, inclosa la L-DOPA (emprada en Parkinson), la tetrabenazina (Huntington) i aripiprazol (esquizofrènia). En aquest estudi, vam confirmar i ampliar aquestes troballes i vam comparar els efectes dels antipsicòtics agonistes parcials D2R cariprazina i brexpiprazol, els pricostimulants amfetamina i metilfenidat i diversos altres compostos selectius i experimentals. L’estriat cerebral de rata va ser trocejat i incubat ex-vivo en presència o absència d’aquests fàrmacs a diferents concentracions. De manera espontània, la dopamina i la serotonina es van acumular al llarg del temps i van assolir nivells d’emmagatzematge gairebé màxims. Aquest enfocament experimental ens va permetre avaluar la seva síntesi i dinàmica d’emmagatzematge sota la influència d’agents farmacològics escollits. Els nostres resultats podrien ser útils per comprendre els mecanismes d’acció dels antipsicòtics, i podrien facilitar més investigacions amb models animals i assajos clínics mitjançant nous agents dopaminèrgics.
La regulación dopaminérgica presináptica es importante para mantener un equilibrio homeostático de los niveles almacenados y liberación de dopamina. Los cambios en la neurotransmisión de dopamina contribuyen a los trastornos neurológicos y psiquiátricos. Hallazgos recientes de nuestro grupo (Ma et al., 2015; González-Sepúlveda et al., presentado) describieron los fuertes efectos de varias clases de medicamentos dopaminérgicos en la síntesis de dopamina, incluida L-DOPA (utilizada en Parkinson), tetrabenazina (Huntington) y aripiprazol (esquizofrenia). En este estudio, confirmamos y ampliamos esos hallazgos y comparamos los efectos de los antipsicóticos agonistas parciales D2R cariprazina y brexpiprazol, las psicoestimulantes anfetamina y metilfenidato varios otros compuestos selectivos y experimentales. El estriado cerebral de rata fue troceado e incubado ex-vivo en presencia o ausencia de estos fármacos a diferentes concentraciones. Espontáneamente, la dopamina y la serotonina se acumularon con el tiempo alcanzando niveles de almacenamiento casi máximos. Este enfoque experimental nos permitió evaluar su dinámica de síntesis y almacenamiento bajo la influencia de los agentes farmacológicos elegidos. Nuestros resultados podrían ser útiles para comprender los mecanismos de acción de los antipsicóticos, y podrían facilitar la investigación futura con modelos animales y ensayos clínicos utilizando nuevos agentes dopaminérgicos.
Presynaptic dopaminergic regulation is important to maintain a homeostatic balance of dopamine stored levels and release. Changes in dopamine neurotransmission contribute to neurological and psychiatric disorders. Recent findings from our group (Ma et al., 2015; González-Sepúlveda et al.,-submitted) describe strong effects of several classes of dopaminergic drugs on dopamine synthesis, including L-DOPA (used in Parkinson), tetrabenazine (Huntington) and aripiprazole (schizophrenia). In this study, I confirm and extend those findings and compare the effects of D2R partial agonist antipsychotics cariprazine and brexpiprazole, the psychostimulants amphetamine and methylphenidate, and several other selective and experimental compounds. Rat brain striatum was minced and incubated ex-vivo in the presence or absence of these drugs at different concentrations. Spontaneously, dopamine and serotonin accumulated over time reaching near-maximal storage levels. This experimental approach allowed me to evaluate their synthesis and storage dynamics under the influence of chosen pharmacological agents. My results could be useful to understand the mechanisms of action of antipsychotics, and they could facilitate further research with animal models and clinical trials using new dopaminergic agents.

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Winter, Eduardo. "Influencia de compostos carboxilicos e ions metalicos na degradação de neurotransmissores." [s.n.], 2007. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/249435.

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Abstract:

Orientadores: Susanne Rath, Jarbas Jose Rodrigues Rohwedder
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica
Made available in DSpace on 2018-08-09T10:51:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Winter_Eduardo_D.pdf: 3366512 bytes, checksum: 6c8baea3dd6502c19761ad449683bb95 (MD5) Previous issue date: 2007
Resumo: Muitas doenças neurodegenerativas são associadas com disfunções de neurotransmissores, em particular catecolaminas, no cérebro. Numerosas pesquisas têm indicado que íons metálicos podem induzir estresse oxidativo - dependente da neurodegeneração de dopamina e são responsáveis pelo aparecimento de doenças neurodegenerativas. Em estudos prévios foi verificado que alguns carboxilatos diminuem a velocidade de oxidação de catecolaminas e inibem a passivação de eletrodos sólidos durante a análise voltamétrica destes compostos fenólicos. Este trabalho teve por objetivo estudar a influência de carboxilatos (EDTA, NTA, EGTA, DTPA, acetato, citrato e oxalato) e íons metálicos (Ce(IV), Fe(III) e Hg(II)) durante a oxidação de neurotransmissores (dopamina, serotonina, epinefrina, norepinefrina e L-dopa) no intuito de estabelecer mecanismos de reações que possam contribuir no esclarecimento do papel destes compostos no processo de degeneração dos neurotransmissores, assim como compreender como os carboxilatos inibem o envenenamento do eletrodo durante a varredura de potencial. Para eses propósitos foram empregadas as técnicas de espectrofotometria, voltametria e espectroeletroquímica. A cela espectroeletroquímica de camada delgada desenvolvida incorporou um sistema de três eletrodos, sendo o eletrodo de trabalho uma minigrade de Pt. O sistema foi caracterizado usando o-tolidina e K4[Fe(CN)6]/ K3[Fe(CN)6] e permitiu o monitoramento das reações in situ. Os resultados obtidos mostraram que os carboxilatos desprotonados interagem com os produtos intermediários formados durante a oxidação das catecolaminas por meio de ligações de hidrogênio, sendo estas interações dependentes do pH do meio, estruturas do carboxilato e do próprio neurotransmissor. Foi proposto um mecanismo eletroquímico para a oxidação de aminas biogênicas na presença de carboxilatos no eletrodo de platina. A estabilização dos produtos intermediários formados inibe a formação de compostos poliméricos que são responsáveis pelo envenenamento do eletrodo. Do mesmo modo, os carboxilatos retardam ou inibem a oxidação química de algumas aminas biogênicas por íons metálicos
Abstract: Several neurological disorders are associated with improper catechoalmine regulation in the brain. Numerous researches have indicated that metallic ions can induce oxidative stress-dependent neurodegeneration of dopamine, and are responsible for the induction of neurodegenerative diseases. In previous work was verified that some carboxylates diminishes the oxidation rate of catecholamines and inhibit the well known solid state electrode passivation during voltammetric analysis of these phenolic compounds. The aim of this work was to study the influence of carboxylates (EDTA, NTA, EGTA, DTPA, acetate, oxalate and citrate) and metallic ions (Ce(IV), Fe(III) and Hg(II)) during the oxidation of neurotransmitters (dopamine, serotonin, epinephrine, norepinephrine and L-dopa) in order to establish putative reaction mechanism which could contribute to understand the role of these compounds in neurodegenerative processes, as well as comprehend how the carboxylates inhibit the electrode fouling during potential scan. For these purposes, the studies were carried out using spectrophotometric, voltammetric and spectroelectrochemical techniques. The spectroelectrochemical thin layer cell developed incorporated a three electrode system, using a Pt- minigrade as working electrode. The system was characterized employing o-tolidine and K4[Fe(CN)6]/ K3[Fe(CN)6] and allowed monitoring the electrode reactions in situ. The results obtained showed that the deprotonated carboxylates interacts with the intermediates formed at the electrochemical oxidation of catecholamines by hydrogen bonds. These interactions are dependent on the pH of the medium, as well as on the chemical structures of the carboxylates and neurotransmitters itself. An electrochemical mechanism for the oxidation of biogenic amines in the presence of carboxylates at the platinum electrode is proposed. The stabilization of the intermediates formed inhibits the formation of polymeric compounds that are responsible for the electrode fouling. In the same manner, the carbolxylates retards or inhibit the chemical oxidation of some biogenic amines by metallic ions by the same reaction pathway
Doutorado
Quimica Analitica
Doutor em Ciências

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Brum, Alexandre Martini de. "Avaliação da função renal de cães sadios e nefropatas sob infusão de dopamina /." Jaboticabal : [s.n.], 2007. http://hdl.handle.net/11449/89199.

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Abstract:

Orientadora: Marileda Bonafim Carvalho
Banca: Aparecido Antonio Camacho
Banca: Márcia Mery Kogika
Resumo: A dopamina e um composto endogeno amplamente utilizado em terapia intensiva. Possui um amplo espectro de acoes, tanto sobre o sistema cardiovascular como urinario. Aumento da taxa de filtracao glomerular, do fluxo sanguineo renal e excrecao fracionada de sodio e fosforo sao efeitos renais esperados em individuos normais, porem sao pouco explorados na medicina veterinaria. Com o proposito de testar a hipotese que a dopamina e capaz de aumentar a excrecao fracionada de fosforo em caes nefropatas, este estudo foi conduzido. Diferentes doses de dopamina foram administradas em caes nefropatas. Avaliacoes laboratoriais foram realizadas durante e apos os tratamentos. O clearance de creatinina e a excrecao fracionada de fosforo apresentaram aumento dose-dependente nos caes sadios. Em caes nefropatas, a dose de 1 Êg/kg/min aumentou discretamente a TFG, alem de aumentar o volume urinario e excrecao de fosfato, sem modificar a U-P/C e pressao arterial sistemica, enquanto a dose de 3 Êg/kg/min nao aumentou os beneficios e, ainda, promoveu aumento da excrecao urinaria de proteinas.
Abstract: Dopamine is a endogenous compound largely used in critical care. It has a large spectrum of actions on cardiovascular and urinary systems. Increases in glomerular filtration rate, renal blood flow and frational excretion of sodium and phosphate are renal effects expected in healthy patient, but there are few reports in veterinary medicine. In order to test the hypothesis that dopamine can increase frational excretion of phosphate in nephropathy dogs this study was conducted. Different dopamine doses were administered in nephropathy dogs. Laboratory evaluations were done during and after treatments. Creatinin clearance and frational excretion of phosphate increases dose-dependent form in healthy dogs. In the nephropathy dogs, the dose of 1ìg/kg/min increased the glomerular filtration rate, urinary volume and phosphate excretion, without modified U-P/C and systemic arterial blood pressure, while the dose of 3ug/kg/min dont increased the benefits and promoted a increase in the urinary excretion of proteins.
Mestre

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Dias, Elayne Vieira 1975. "Papel dos receptores de dopamina do Núcleo Accumbens na hiperalgesia crônica de origem inflamatória." [s.n.], 2013. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/313995.

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Abstract:

Orientador: Carlos Amilcar Parada
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-23T21:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dias_ElayneVieira_D.pdf: 15528641 bytes, checksum: d53f9d8a514c6239af90a41cfe787afb (MD5) Previous issue date: 2013
Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital
Abstract: The complete abstract is available with the full electronic document
Doutorado
Fisiologia
Doutora em Biologia Funcional e Molecular

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Rodrigues, Luciana Tovo. "Receptor de dopamina D4 : estudo da variabilidade e evolução em populações ameríndias." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2010. http://hdl.handle.net/10183/26621.

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Abstract:

O DRD4 é um dos genes mais variáveis do genoma humano. Seu terceiro éxon contém um polimorfismo do tipo VNTR de 48 pb cujas variantes apresentam uma grande diversidade em populações humanas. Além disso, interno ao VNTR, muitos polimorfismos do tipo SNPs são observados, totalizando 74 diferentes haplótipos descritos em humanos até o momento. O alelo de sete repetições do VNTR é descrito como o mais freqüente em populações nativas da América do Sul e possivelmente esteja sob efeito de seleção positiva. Como o DRD4 tem sido considerado gene candidato em diversos estudos de associação com doenças psiquiátricas e como os nativos da América do Sul constituem um dos três grupos parentais das populações atuais desse continente, é importante que a variabilidade nesse locus seja conhecida nessas populações. Neste estudo foi avaliada a variabilidade genética do terceiro exon do gene DRD4 em 172 indivíduos das populações Kaingang e Guarani do centro-sul do Brasil. Além disso, o seqüenciamento do alelo 7R foi realizado em indivíduos homozigotos para esse alelo. Foram adicionados os dados da literatura relativos a outras populações para o mesmo polimorfismo objetivando re-avaliar a variabilidade genética deste locus na América do Sul. As análises incluíram 18 populações, totalizando 568 indivíduos. A freqüência do alelo 7R observada nas populações Kaingang e Guarani foi intermediária às observadas em populações amazônicas e às populações nativas da Argentina. A análise dos haplótipos obtidos pelo seqüenciamento revelaram que as populações Kaingang e Guarani-Kaiowá apresentam apenas o haplótipo mais comum na populações mundiais, enquanto que na população Guarani-Ñandeva foram identificados três haplótipos, um deles já descrito exclusivamente nos Suruí. A relação genética por distância DA indicou que populações classificadas como caçadoras-coletoras são mais próximas entre si, formando um agrupamento separado das populações classificadas como predominantemente agriculturalistas. Corroborando esses resultados, o Teste Exato de Fisher revelou um excesso de alelos 7R nas populações predominantemente caçadoras-coletoras quando comparadas às agriculturalistas e a freqüência do alelo 7R apresentou correlação positiva com a latitude, evidenciando uma maior freqüência do alelo 7R no norte, onde estão localizadas a maioria das populações caçadoras-coletoras estudadas. Nossos resultados apresentam uma evidência indireta da atuação da seleção natural no gene DRD4. É possível que esse gene tenha influenciado o comportamento das populações nativo-americanas, tendo sido vantajoso naquelas populações em que o comportamento exploratório e a caça e a coleta foram predominantes. Estudos envolvendo um maior número de populações caçadorascoletoras ao sul do continente seriam necessários para melhor entender os padrões observados na América do Sul em relação ao DRD4.
DRD4 is one of the most variable genes in the human genome. Its third exon presents a VNTR polymorphism of 48 bp. Furthermore, SNPs were observed into repeats, composing at least 74 different haplotypes variants until now. The seven repeat (7R) allele is the most frequent in South America Amerindian populations and may be under positive selection. DRD4 is a candidate gene for many association studies between psychiatric disorders and genetics. Then, it is important to study the variability of this locus in Amerindian populations because they represent one of three parental groups of admixed populations in South America. In this study, the genetic variability concerning this locus was studied in 172 subjects from Kaingang and Guarani populations of Brazilian Center-SE. Furthermore, all 7R homozygous individuals were sequenced. The results were integrated with those published, aiming to re-evaluate DRD4 variability into South America. 18 populations and 568 individuals were integrated to the analysis. The observed frequency in Kaingang and Guarani populations were intermediate between those reported in the Amazon region and in Argentina. The sequence data revealed that Kaingang and Guarani-Kaiowá were monomorphic showing only the most frequent worldwide haplotype while the Guarani-Ñandeva population was polymorphic for this locus. The DA genetic distance indicates that the predominantly hunter-gatherer populations were tightly clustered whereas the predominantly agriculturalist populations were more scattered. Fisher Exact Test revealed an excess of the 7R allele in predominantly hunter-gatherer populations when compared with agriculturalists and a correlation between latitude and 7R frequency was observed, that indicates that the high frequencies of 7R are in North, where most of hunter-gatherer populations are located. Our results suggest indirectly that positive selection could be acting on the DRD4 gene. It is possible that the DRD4 gene have influenced life habits of South American native populations. 7R could be adaptative in populations with more explorative behavior and with predominantly hunter and gatherer subsistence. Further studies considering larger numbers of hunter-gatherer populations in the south would provide a better interpretation of the genetic variability of the Amerindian populations and clarify the patterns of DRD4 evolution in South America.

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Manrique, Muñante Rubén. "Love: there is (bio)chemistry between us." Revista de Química, 2014. http://repositorio.pucp.edu.pe/index/handle/123456789/99292.

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Abstract:

El enamoramiento implica procesos bioquímicos en los que sustancias como neurotransmisores, neuromoduladores y hormonas interaccionan con células nerviosas u otros órganos. Al estar enamorados, los niveles de dopamina aumentan generando atención, deseo y motivación en todo lo relacionado al ser amado. La serotonina, por el contrario, se presenta en concentraciones bajas en este estado. La oxitocina, por su parte, entra en juego cuando la demanda de dopamina no se logra suplir y es crucial al entablar relaciones de largo plazo. El entendimiento del mecanismo de la oxitocina en el ser humano es crucial no solo para el conocimiento académico sino también porque brinda luces para el tratamiento de algunos desórdenes psicológicos.
Romantic love involves biochemical processes in which substances such as neurotransmitters, neuromodulators and hormones interact with other nerve cells or organs. When being in love, dopamine levels increases, generating attention, desire and motivation in everything related to the beloved person. Serotonin, however, is present in low levels in this state. When the body does not supply the necessary amount of dopamine, oxytocin is released. Oxytocin is vital in long term relationships. Understanding the mechanism of oxytocin in humans is crucial not only for academic knowledge of the chemistry of love but also because it provides new lights for the treatment of some psychological disorders.

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Reckziegel, Patrícia. "MECANISMOS BIOQUÍMICOS E MOLECULARES ENVOLVIDOS EM EFEITOS COMPORTAMENTAIS INDUZIDOS POR RESERPINA EM RATOS E C. elegans COM ÊNFASE EM PARÂMETROS OXIDATIVOS E DOPAMINÉRGICOS." Universidade Federal de Santa Maria, 2015. http://repositorio.ufsm.br/handle/1/3847.

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Abstract:

Fundação de Amparo a Pesquisa no Estado do Rio Grande do Sul
Animal models as reserpine are helpful to understand the pathophysiology of several diseases with involuntary movements, as Parkinson s disease (PD), and to search efficient treatments. The present study tested the effects of reserpine on behavioral alterations induced by reserpine in rats and worms, with emphasis in oxidative and dopaminergic parameters, and the effect of the antioxidant gallic acid (GA) in reserpine-exposed rats. As result, reserpine (1mg/Kg, sc, for 3 consecutive days) increased the frequency of vacuous chewing movements (VCMs) in rats in relation to controls, and maintained this increase for at least 3 days after reserpine withdrawal. Treatment with GA (4.5 , 13.5 or 40.5 mg/kg/day, po) for 3 days reverted reserpine-induced increase in VCMs, showing protective effect. Neither reserpine nor GA changed oxidative parameters (TBARS and DCFH-DA oxidation), antioxidant levels (proteic and non-proteic thiol) and the activity of Na+,K+-ATPase (total and α-subunit) in striatum and cortex. Afterward, studies were performed with Caenorhanditis elegans due its several advantages in studies of neurodegeneration and of drugs mechanism of action. L1-larval stage C. elegans were exposed to reserpine (30 ou 60 μM) for different times. Reserpine decreased the survival, development, food intake, locomotor rate on food and dopamine (DA) levels in worms and it had effect on egg laying and defecation cycles. Morphological evaluations of dopaminergic cephalic (CEP) neurons in BY200 worms (with GFP coupled to dat-1 gene) reveled neurodegeneration by: 1) decreased fluorescence intensity, 2) decreased the number of intact neurons, and 3) increased the number of shrunken somas per worm. These effects were unrelated to reserpine s effect on dat-1 gene expression. Interestingly, the reserpine effects on locomotor rate, dopaminergic CEP neurons morphology and dat-1 gene expression were reverted after reserpine withdrawal. Furthermore, reserpine decreased the survival of vesicular monoamine transporter (VMAT) and dat-1 loss-of-function mutant worms, but no of tyrosine hydroxylase (TH, cat-2) and dopaminergic receptors (dop-1, dop-2, dop-3 e dop-4) loss-of-function mutants in relation to wild-type N2 worms. Reserpine also decreased the survival of worms pre-exposed to DA; and it activated SKN-1 detoxification pathway. Moreover, no differences were found in DAT and TH immunoreactivity in striatum of rats treated with reserpine and/or GA. The GA protective effects against reserpine-induced VCMs in rats are probably not related to its antioxidant and antiapoptotic properties or monoamine oxidase (MAO) inhibition. As conclusion, the reserpine decreases DA levels though action on VMAT, and it induces neurotoxicity/neurodegeneration due probably an increase on extracellular DA contents resulted from changes on DAT function. More studies evaluating the reserpine effect on DAT and the GA mechanism of protection are necessary.
Modelos animais como o da reserpina auxiliam no entendimento da fisiopatologia de diversas doenças que se manifestam por movimentos involuntários, como a doença de Parkinson (DP), e na busca por formas de tratamento. O presente trabalho avaliou mecanismos envolvidos na indução de alterações comportamentais induzidas por reserpina em ratos e vermes com ênfase em parâmetros oxidativos e dopaminérgicos, e a ação do antioxidante ácido gálico (AG) em ratos tratados com reserpina. Como resultado, a reserpina (1mg/Kg, sc, por 3 dias consecutivos) aumentou a frequência de movimentos de mascar no vazio (MMVs) em ratos em relação ao controle, e manteve esse aumento por pelo menos 3 dias após o término das administrações da reserpina. O tratamento com AG (4,5 ou 13,5 ou 40,5 mg/kg/day, vo) por 3 dias reverteu esse aumento dos MMVs, mostrando efeito protetor. Nem reserpina nem o AG alteraram os parâmetros avaliados de dano oxidativo (TBARS e oxidação da DCFH-DA), de antioxidantes (tiol protéico e não protéico) e a atividade da Na+,K+-ATPase (total e α-subunidade) no estriado e córtex cerebral. Estudos posteriores foram realizados em Caenorhanditis elegans devido as diversas vantagens oferecidas por esse modelo animal em estudos de neurodegeneração e de investigação do mecanismo de ação de drogas. C. elegans em estágio larval L1 foram expostos a reserpina (30 ou 60 μM) por diferentes tempos. A reserpina reduziu a sobrevivência, o desenvolvimento, a ingestão de alimento, a atividade locomotora na comida e as concentrações de dopamina (DA) nos vermes, e afetou a postura de ovos e tempo entre defecações. Análise da morfologia dos neurônios dopaminérgicos cefálicos (CEP) de vermes BY200 (com GFP acoplado ao gene dat-1) indicam neurodegeneração por: 1) redução da intensidade da fluorescência, 2) redução do número de neurônios intactos e 3) aumento do número de somas atrofiados por verme em relação ao controle. Esses efeitos não estão relacionados a efeitos da reserpina na expressão do gene dat-1. Interessantemente, os efeitos da reserpina na atividade locomotora, na morfologia dos neurônios CEP e na expressão do gene dat-1 foram revertidos após a retirada dos vermes da exposição a reserpina. Em adição, a reserpina reduziu a sobrevivência de vermes deficientes do transportador vesicular de monoaminas (TVMs, cat-1) e do transportador de DA (DAT, dat-1), mas não alterou a sobrevivência de deficientes da tirosina hidroxilase (TH, cat-2) e dos receptores dopaminérgicos (dop-1, dop-2, dop-3 e dop-4) em relação aos vermes selvagens N2. A reserpina também reduziu a sobrevivência de vermes N2 pré-expostos a DA, e ativou a via de detoxificação SKN-1 dos vermes. Alterações na imunoreatividade ao DAT e a TH no estriado de ratos tratados com reserpina e/ou AG não foram encontradas. O efeito protetor do AG nos MMVs induzidos por reserpina em ratos parece não envolver sua atividade antioxidante, antiapoptótica ou na monoaminoxidase (MAO). Como conclusão, a reserpina age no TVMs causando depleção de DA, e causa neurotoxicidade/neurodegeneração dopaminérgica devido provavelmente a um acúmulo de DA no espaço sináptico resultande de uma interferência no funcionamento do DAT. Mais estudos avaliando a ação da reserpina no DAT e o mecanismo de proteção do AG são necessários.

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Chovar, Vera Ornella. "Rol del receptor 3 de dopamina en la respuesta citotóxica generada en linfocitos T CD8+." Tesis, Universidad de Chile, 2018. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/170210.

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Abstract:

Seminario de Título entregado a la Universidad de Chile en cumplimiento parcial de los requisitos para optar al Grado de Magister en Ciencias Biológicas.
El sistema nervioso y el sistema inmune se encuentran íntimamente relacionados comunicándose bidireccionalmente mediante citoquinas, neuropéptidos y neurotransmisores, como la dopamina. Este neurotransmisor ejerce su efecto a través de cinco receptores dopaminérgicos que poseen diferentes grados de afinidad, contando con la mayor afinidad el receptor 3 (D3R). Su presencia se ha reportado en diferentes células del sistema inmune. La estimulación del D3R promueve la producción de IFN-γ en linfocitos T CD4+, favoreciendo su diferenciación a un perfil Th1. Sin embargo, el rol de este receptor en los linfocitos T CD8+ aún no se ha estudiado a cabalidad. En esta tesis se estudió la incidencia del D3R en la formación del perfil citotóxico en linfocitos T CD8+, que poseen un TCR transgénico específico para el péptido OVA(257-264) alojado sobre el MHC de clase I H2-Kb (linfocitos OT-I). La diferenciación in vitro muestra que la carencia del D3R en linfocitos OT-I (OT-I D3RKO) resulta en una reducción significativa en la producción de IFN-γ, TNF-α, IL-2 y en la expresión de CD25 (cadena α del receptor de IL-2) en respuesta a la estimulación con péptido OVA(257-264). Estas deficiencias se revierten al añadir IL-2 exógena a los cultivos, sugiriendo que el mecanismo de acción por el cual el D3R favorece la diferenciación hacia un fenotipo efector productor de IFN-γ y TNF- α ocurre a través de la producción de IL-2. Concordante con lo anterior, se observó que la expresión del D3R en linfocitos OT-I promueve la expansión clonal y la protección antitumoral frente a melanoma. En conjunto los resultados obtenidos en linfocitos T CD8+ sugieren que el D3R promueve la formación de un perfil citotóxico, induciendo la producción de IFN-γ y favoreciendo una alta tasa de expansión clonal, lo que conlleva a una mayor sobrevida frente a un desafío tumoral.
The nervous system and the immune system are intimately related, communicating bi-directionally through cytokines, neuropeptides and neurotransmitters. Dopamine is a neurotransmitter that exerts its effect through five dopaminergic receptors which display different degrees of affinity. The D3R, which display the highest affinity for dopamine, has been found expressed in CD4+ T cells, where its stimulation promotes high production of IFN-γ, favoring the acquisition of the Th1 profile. However, the role of this receptor in CD8+ T lymphocytes has not yet been fully studied. In this thesis the role of D3R in the acquisition of the cytotoxic profile by CD8+ T lymphocytes was studied. For this purpose, in this thesis CD8+ T-cells bearing a transgenic TCR specific for the recognition of the OVA peptide(257-264) over the class I MHC H2-Kb (OT-I lymphocytes) were used. In vitro differentiation experiments show that lack of D3R in OT-I lymphocytes (OT-I D3RKO) results in a significant reduction in the production of IFN-γ, TNF-α and on the expression of CD25 (α chain of the IL-2 receptor) in response to the stimulation with OVA peptide(257-264). These effects were reversed by adding exogenous IL-2 into the cultures, suggesting a mechanism by which D3R favors the differentiation towards an effector phenotype through the production of IL-2. In vivo experiments show that D3R expressed on OT-I lymphocytes favors a higher clonal expansion and thereby an stronger protection against melanoma tumors. The results obtained suggest that D3R promotes the formation of a more efficient cytotoxic profile capable of producing higher percentages of IFN-γ and higher rates of clonal expansion, which leads to greater survival in the face of a tumor challenge.
Junio 2020

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Peruzatto, Josi Maria Zimmermmann. "Comportamento sexual e expressão gênica de receptores em áreas encefálicas de fêmeas nocaute para o gene da ocitocina." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2015. http://hdl.handle.net/10183/122349.

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Abstract:

As relações sociais são construídas e mantidas a partir da interação entre os indivíduos. A ocitocina (OT), vasopressina (AVP), estrogênios (EST) e dopamina (DOPA), bem como seus respectivos receptores estão envolvidos na modulação do comportamento sexual de fêmeas. Estruturas do sistema nervoso central (SNC), tais como o bulbo olfatório (BO), o hipotálamo (HPT), o córtex pré-frontal (CPF) e o hipocampo (HPC) exercem importantes funções relacionadas à motivação sexual, reconhecimento de odores, memória e respostas emocionais. Em camundongos fêmeas, a OT é essencial para o comportamento de lordose e para estabelecer a preferência pelo parceiro. Este estudo teve como objetivo analisar o impacto do nocauteamento no gene da OT (OTKO) no comportamento sexual de camundongos fêmeas, na síntese hipotalâmica de AVP e na expressão gênica dos receptores de OT (OTR), AVP (AVPR1a), EST alfa (ERα), EST beta (ERβ) e DOPARD2 no BO, HPT, CPF e HPC. Foram utilizados 11 camundongos fêmeas (C57BL/6J) para o grupo controle (WT) e o mesmo número para o grupo OTKO. A detecção do transgene no genoma foi realizada pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) e os animais foram classificados como: WT (OT+/+), heterozigoto (OT+/-) e OTKO (OT-/-). O teste do comportamento sexual da fêmea foi realizado na noite do proestro e os parâmetros comportamentais avaliados foram: frequência, duração e latência de lordose, além da frequência de montas, bem como as posturas não receptivas e a locomoção. A coleta das estruturas encefálicas (BO, HPT, CPF e HPC) aconteceu na manhã seguinte do teste comportamental. Os cDNAs foram sintetizados por transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). A expressão gênica de cada receptor foi calculada a partir da fórmula 2-ΔΔCt. Os dados do registro comportamental e da expressão gênica foram expressos pela média, erro padrão da média (±EPM), analisados pelo teste de Mann-Whitney e o nível de significância aceito foi de p<0,05. Nossos resultados mostraram aumento significativo da latência e diminuição significativa da frequência e da duração do comportamento de lordose em fêmeas OTKO. Em relação às posturas não receptivas, fêmeas OTKO apresentaram diminuição significativa da latência e aumento significativo da frequência e da duração destas posturas. No que concerne à expressão gênica dos diferentes receptores, fêmeas OTKO apresentaram diminuição significativa da expressão gênica do OTR apenas no HPC em relação ao grupo WT. Verificamos que o grupo OTKO apresentou diminuição significativa da expressão gênica do AVPR1a apenas no HPT, mas aumento da expressão no HPC quando comparadas ao grupo WT. Também, fêmeas OTKO apresentaram diminuição significativa da expressão gênica do ERα e ERβ apenas no CPF quando comparadas ao grupo WT. Não foram encontradas diferenças significativas na expressão gênica do DOPARD2 em nenhuma das estruturas estudadas quando comparados os dois grupos estudados. No que diz respeito ao nocauteamento no gene da OT, nossos resultados mostraram que este não promove diferença significativa na síntese de RNAm de AVP no HPT do grupo OTKO quando ao grupo WT. Nossos principais achados nos permitem inferir que a ausência da OT dentro do SNC, bem como a importante alteração da expressão dos genes estudados (OTR, AVPR1a, ERα e ERβ) principalmente no CPF estão relacionados com a diminuição do comportamento sexual observada nas fêmeas OTKO.
Social relations are built and maintained from the interaction between individuals. Oxytocin (OT), vasopressin (AVP), estrogens (EST), dopamine (DOPA) and their receptors are involved in the modulation of sexual behavior in females. Structures of the central nervous system (CNS), such as the olfactory bulb (OB), hypothalamus (HPT), medial amygdale, prefrontal cortex (PFC) and hippocampus (HPC) have important functions related to sexual motivation, odor recognition, memory, and emotional responses. In mice, OT is essential for lordosis behavior and to establish the female preference for her partner. The experimental model using knockout animals for OT allows evaluating the physiological and behavioral changes generated from this genetic manipulation. This study aimed to analyze the impact of OT gene knockout (OTKO) in sexual behavior of female mice, in the synthesis hypothalamic of AVP and gene expression of OT receptors (OTR), AVP (AVPR1a), EST alpha (ERα), EST beta (ERβ) and DOPARD2 in OB, HPT, PFC and HPC. We used 11 female mice (C57BL/6J) for the control group (WT) and the same number for the OTKO group. Detection of the transgene in the genome was performed by polymerase chain reaction (PCR) and the animals were classified as: WT (OT+/+), heterozygous (+/-OT) and OTKO (OT-/-). The female sexual behavior test was performed on the evening of proestrus and these behavioral parameters were evaluated: frequency, duration and latency lordosis, frequency of mounts, as well as non-receptive positions and locomotion. The collection of brain structures (OB, HPT, PFC and HPC) happened the next morning the behavioral test. The CDNAs were synthesized by reverse transcription followed by polymerase chain reaction (RT-PCR). The gene expression of each receptor was calculated from the 2-ΔΔCt formula. Data from the behavioral record and gene expression were expressed as mean, standard error of the mean (±SEM) and analyzed by the Mann-Whitney test. In all cases, P<0.05 was considered statistically significant. Our results showed significant increase in latency and decrease in the frequency and duration of lordosis behavior in OTKO females. For non-receptive postures, OTKO females were significantly reduced latency and increased frequency and duration of these postures. Regarding the gene expression of different receptors, OTKO females showed significant decrease in OTR gene expression only in the HPC compared to WT group. We found that the OTKO group showed a significant decrease in gene expression of AVPR1a only in HPT, but increased expression in HPC as compared to WT group. Also, OTKO females showed significant decrease in gene expression of ERα and ERβ only the PFC when compared to the WT group. There were no significant differences in gene expression DOPARD2 in any of the studied structures when comparing the two groups. Regarding knockout in OT gene, our results showed that this does not promote significant difference in AVP mRNA synthesis in HPT of OTKO group when the WT group. Our main findings allow us to infer that the absence of OT within the CNS, as well as a significant changes in expression of the genes studied (OTR, AVPR1a, ERα and ERβ) mainly in the PFC are related to decreased sexual behavior observed in OTKO females.

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Teles, Rita Tique Arriaga. "Efeito do treino na neurobioquímica cerebral do cão." Master's thesis, Universidade de Évora, 2018. http://hdl.handle.net/10174/23173.

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Abstract:

Com o objetivo de perceber de se o treino afeta a comunicação química do cérebro canino de uma forma permanente, estudaram-se dois grupos de cães: um grupo de cães treinado com marcadores e outro grupo sem contacto com nenhum tipo de treino. Foram recolhidas amostras sanguíneas dos dois grupos e medidas as concentrações de serotonina e dopamina. Os valores médios encontrados para a serotonina e dopamina para o grupo de controlo foram de 269.66 μg/l 56,97 ng/l respetivamente. Para a serotonina, a comparação das médias revelou diferenças entre os grupos (p=0,087), havendo uma diminuição no grupo de cães treinados. Já a dopamina não se verificou ser diferente entres os dois grupos estudados (p=0,2). As vias dopaminérgicas ativadas em situações de compulsão/adição são as mesmas que se ativam no circuito do reforço. Também os valores de serotonina estão diminuídos nesses casos, sugerindo que poderá haver uma componente compulsiva/aditiva em cães treinados; ABSTRACT: The effect of training markers in the cerebral neurochemistry of the dog To understand if dog training affects permanently the chemical communication of canine brain, two groups of dogs were studied: one group had dogs trained with markers and the other one had dogs without any type of training. Blood samples were collected from both groups and concentrations of serotonin and dopamine were measured. The mean values found for serotonin and dopamine for the control group were 269.66 μg/l and 56.93 ng/l respectively. Comparison of means of the groups revealed different values of serotonin between the two groups (p-value= 0,087) having a decrease in serotonin in the trained dog group. As for dopamine, it was not found to be different between the two groups studied (p-value=0,2). The dopaminergic pathways activated in compulsion/addition situations are the same ones that activate in the reinforcement circuit. Also, serotonin levels are decreased in these cases, suggesting that there may be a compulsive/additive component in trained dogs.

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ORDAZZO, GABRIELE. "Deciphering the defects of vesicle trafficking in RAB39B forms of Parkinson’s disease with implication in autophagy, α-Synuclein aggregation and dopaminergic presynaptic system alteration." Doctoral thesis, Università Vita-Salute San Raffaele, 2021. http://hdl.handle.net/20.500.11768/121784.

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Abstract:

Rab GTPases, working as essential controllers of cellular membrane dynamics, recently associated in diverse pathological pathways of Parkinson's disease (PD). In particular, RAB39B pathogenic variants cause intellectual disability (ID) and X-linked early-onset PD with α-Synuclein (α-Syn) brain pathology. Notably, RAB39B gene is specific to the brain, highly expressed in neurons mainly involved in intracellular vesicles trafficking in the ER-Golgi-endosome secretory pathways but it was found to be work in synapse formation and maintenance. The overall objective of this work is finding new insights about its unknown role in PD pathogenesis and which mechanism could lead to neuronal weakness in autophagic deficit of toxic cellular aggregates and presynaptic dopaminergic (DA) alteration. In order to identify RAB39B effectors and downstream key molecular functions, its interactome was identified thanks to the implementation of APEX2 labelling system directly on living neuronal culture. Through this biochemical approach, we establish a novel link between RAB39B and the retromer complexes, with functional consequences on cargo sorting like for M6PR, ATG9 or ATG9. Studying its interactors, we focused on vesicular and membrane trafficking function during the formation of the nascent autophagosome. We hypothesized that RAB39B loss-of-function could lead to a defect in autophagic degradation of α-Syn aggregates in neurons. Based on that, we intoxicated mouse primary neurons and human-derived RAB39B-knock out (KO) neurons with α-Syn preformed-fibrils (PFFs) to stress the autophagic system response, finding significant alteration in LC3 and P62 canonical markers. Additionally, to evaluate α-Syn spreading, aggregation and typical DA neurodegeneration, we inject PFFs directly in RAB39b-KO mice brain. Also, due to its synaptic role enrichment, we focused on presynaptic system alteration in RAB39b-KO mice. The absence of RAB39b may alter the presynaptic vesicle formation, function and recycling with morphological and density synaptic vesicles alteration, leading to profound reduction in dopamine striatal release. We found concomitant DA neurodegeneration and loss of VMAT2 protein level in age dependent fashion in RAB39b-KO mice. In conclusion, our results demonstrate a strong interaction between RAB39B loss of function in early-onset PD development with α-Syn accumulation and DA neurodegeneration both in vitro and in vivo. Our work focus on prospectively biological interactor associations, combining mouse and human data, providing a comprehensive assessment of the disease phenotype.
Le proteine Rab, che lavorano come controllori essenziali della dinamica della membrana cellulare, recentemente associate a diversi percorsi patologici della malattia di Parkinson (MdP). In particolare, le varianti patogene di RAB39B causano disabilità intellettiva e MdP ad esordio precoce legato all'X con patologia cerebrale α-Sinucleina (α-Syn). In particolare, il gene RAB39B è specifico per il cervello, altamente espresso nei neuroni coinvolti principalmente nel traffico di vescicole intracellulari delle vie secretorie dell'ER-Golgi-endosoma, ma è stato scoperto che lavora nella formazione e nel mantenimento delle sinapsi. L'obiettivo generale di questo lavoro è trovare nuove intuizioni sul suo ruolo sconosciuto nella patogenesi del MdP e quale meccanismo potrebbe portare alla debolezza neuronale nel deficit autofagico di aggregati cellulari tossici e nell'alterazione dopaminergica presinaptica (DA). Al fine di identificare gli effettori RAB39B e le funzioni molecolari chiave a valle, il suo interactoma è stato identificato grazie all'implementazione del sistema di etichettatura APEX2 direttamente sulla coltura neuronale vivente. Attraverso questo approccio biochimico, stabiliamo un nuovo legame tra RAB39B e i complessi retromeri, con conseguenze funzionali sullo smistamento del carico come per M6PR, ATG9 o ATG9. Studiando i suoi interattori, ci siamo concentrati sulla funzione di traffico vescicolare e di membrana durante la formazione dell'autofagosoma nascente. Abbiamo ipotizzato che la perdita di funzione di RAB39B potrebbe portare a un difetto nella degradazione autofagica degli aggregati α-Syn nei neuroni. Sulla base di ciò, abbiamo intossicato neuroni primari di topo e neuroni RAB39B-knock out (KO) di derivazione umana con fibrille preformate α-Syn (PFF) per sottolineare la risposta del sistema autofagico, trovando alterazioni significative nei marcatori canonici LC3 e P62. Inoltre, per valutare la diffusione di α-Syn, l'aggregazione e la tipica neurodegenerazione DA, iniettiamo PFFs direttamente nel cervello dei topi RAB39b-KO. Inoltre, a causa del suo arricchimento del ruolo sinaptico, ci siamo concentrati sull'alterazione del sistema presinaptico nei topi RAB39b-KO. L'assenza di RAB39B può alterare la formazione, la funzione e il riciclo delle vescicole presinaptiche con alterazioni morfologiche e di densità delle vescicole sinaptiche, portando a una profonda riduzione del rilascio di dopamina striatale. Abbiamo trovato neurodegenerazione DA concomitante e perdita del livello di proteina VMAT2 in modo dipendente dall'età nei topi RAB39b-KO. In conclusione, i nostri risultati dimostrano una forte interazione tra la perdita di funzione di RAB39B nello sviluppo precoce del MdP con l'accumulo di α-Syn e la neurodegenerazione di DA sia in vitro che in vivo. Il nostro lavoro si concentra su associazioni prospettiche di interattori biologici, combinando dati murini e umani, fornendo una valutazione completa del fenotipo della malattia.

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Gonzaga, Maria de Fátima de Magalhães. "Prolactinomas resistentes aos agonistas da dopamina : estudo de série de casos." reponame:Repositório Institucional da UnB, 2016. http://repositorio.unb.br/handle/10482/22194.

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Abstract:

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2016.
Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-12-08T19:23:49Z No. of bitstreams: 1 2016_MariadeFátimadeMagalhãesGonzaga.pdf: 5144127 bytes, checksum: cb59574d03a568889d6d7b757bf394f8 (MD5)
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Introdução. O tratamento preferencial dos prolactinomas é realizado com agonistas da dopamina porque eles oferecem melhores resultados em controlar a doença do que a cirurgia de exérese do tumor. Contudo, alguns poucos adenomas apresentam resistência ao tratamento com os agonistas da dopamina. Objetivo. Avaliar o comportamento de pacientes portadores de prolactinoma resistentes ao tratamento com os agonistas da dopamina, em acompanhamento a longo prazo. Métodos. Estudo retrospectivo de estudo de série de casos. Foram considerados resistentes aos agonistas da dopamina, os pacientes que não normalizaram as concentrações sanguíneas de prolactina e não obtiveram redução de mais de 50% do volume tumoral, com a dose de no mínimo 2,0 mg de cabergolina por semana. Dez pacientes com diagnóstico de prolactinoma resistente à agonista de dopamina, sendo nove deles acompanhados na Clínica de Neurologia e Endocrinologia (CLINEN) e um no Hospital Universitário de Brasília. Resultados. Três pacientes receberam tratamento com a bromocriptina antes de iniciar a cabergolina. Sete pacientes receberam tratamento com cabergolina exclusivamente. Na época do diagnóstico, as idades variaram de 11 a 62 anos. A prolactina inicial variou de 128 ng/mL a 14.992 ng/mL e na última avaliação variou de 4,1 ng/mL a 2169 ng/mL. As doses máximas por semana da cabergolina variaram de 2,5 mg a 4,5 mg. O tempo de acompanhamento variou de 3 anos a 17 anos. A normalização da prolactina aconteceu em duas mulheres e em dois homens. A regressão tumoral ocorreu em todos pacientes, mas o desaparecimento total do adenoma com a formação de sela vazia ocorreu em três pacientes. Três pacientes foram submetidos à cirurgia, mas somente uma mulher teve cura da doença. Conclusão. Este estudo de série de casos sugere que os tumores com resistência aos agonistas da dopamina podem ser mais agressivos em homens do que em mulheres; que o tumor a longo prazo pode regredir com o continuar do tratamento com dose baixa ou alta de cabergolina, mesmo nos macroprolactinomas e o controle efetivo da prolactina ocorre em poucos pacientes. ________________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT
Introduction.The preferential treatment of prolactinoma is with dopamine agonists because they have better results in controlling the disease than the tumor excision surgery. However, some few adenomas show resistance to treatment with dopamine agonists. Objective.To evaluate the behavior of patients with prolactinoma resistant to treatment with dopamine agonists in long-term follow-up. Methods.Retrospective study of case series study. Patients who did not normalize blood concentrations of prolactin and had no more than 50% reduction of tumoral volume, with the dose of at least 2.0 mg of cabergoline per week, were considered resistant to agonists. Ten patients with diagnosis of prolactinoma resistant to dopamine agonist, nine of them followed in the Clinic of Neurology and Endocrinology (CLINEN) and one at the University Hospital of Brasilia. Results. Three patients received treatment with bromocriptine before starting the cabergoline. Seven patients received treatment with cabergoline exclusively. At the time of diagnosis, the ages ranged from 11 to 62 years old. The initial prolactin ranged from 128 ng/mL to 14.992 ng/mL and that last evaluation ranged from 4.1 ng/mL to 2.169 ng/mL. The maximum weekly doses of cabergoline ranged from 2.5 mg to 4.5 mg. The follow-up time ranged from 3 years to 17 years. The normalization of prolactin happened in two women and two men. The tumoral regression occurred in all patients, but the complete disappearance of the adenoma with empty sella formation occurred in three patients.Three patients were also submitted to a surgery, but only one woman had cure of the disease. Conclusion. This case series study suggests that tumors resistant to dopamine agonists can be more aggressive in men than women; that the long-term tumor, even the macroprolactinomas, can regress with the continue treatment with low or high doses of cabergoline,and that the control of prolactin can occur in a fraction of patients.

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de, Castro Rodrigues Junior Luiz. "Metodologia cinética em fluxo não interrompido: determinação de dopamina em fármacos." Universidade Federal de Pernambuco, 2004. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/8942.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:03:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9360_1.pdf: 944401 bytes, checksum: bf76fc5d7693eaf86ef5a70611724276 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004
Um novo método cinético de análise por injeção em fluxo para a determinação de fármacos foi desenvolvido. Este método baseia-se na medida do sinal em posições equivalentes (em torno do máximo) do gradiente de concentração da amostra, sem a necessidade de interromper o fluxo transportador, requerendo um menor grau de automação. A estratégia de calibração do gradiente de concentração em Análise por Injeção em Fluxo foi utilizada. Um planejamento fatorial 24 foi realizado a fim de planejar as condições experimentais. Quatro variáveis do sistema (fatores) foram estudadas e os efeitos foram interpretados para seis respostas: sensibilidade, coeficiente de regressão linear, desvio padrão relativo dos resultados, magnitude da faixa dinâmica de concentração, limite de quantificação e tempo para medida. Para definir a melhor condição, as seis respostas foram consideradas, utilizando a função desejabilidade. Ao analisar as amostras de dopamina injetável, observou-se que estas apresentaram efeito de matriz. Fez-se, então, necessária a utilização do método de adição do analito, que foi implementado utilizando a estratégia de zonas coalescentes ( merging zones ) com posterior amostragem da zona dispersa ( zone sampling ). A condição ideal, definida pela função desejabilidade, foi mantida. Foram analisadas amostras de três diferentes fabricantes, apresentando um erro relativo médio de 3,3%, com relação ao método recomendado pela farmacopéia Americana. A estimativa do desvio padrão encontrado para quinze repetições foi de 0,0033 g L-1. Ainda, foi atingida uma freqüência analítica de 48 injeções por hora, bem maior que no método padrão (HPLC), em torno de 3 determinações por hora

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Silva, Gilvanildo Roberto da. "Efeito da desnutrição proteica perinatal sobre a expressão gênica de receptores dopaminérgicos drd1a e drd2 no núcleo accumbens e estriado em ratos adultos." Universidade Federal de Pernambuco, 2013. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/13188.

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Abstract:

Submitted by Leonardo Freitas (leonardo.hfreitas@ufpe.br) on 2015-04-15T13:52:12Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DissertaçãoGilvanildo da Silva.pdf: 1451576 bytes, checksum: ffb58d860ad317325ae03824ccc8b3a3 (MD5)
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A desnutrição perinatal induz adaptações neurais que são responsáveis pelas alterações da expressão gênica de receptores dopaminérgicos em áreas do cérebro envolvidas com a regulação do comportamento alimentar. Os receptores dopaminérgicos DRD1 e DRD2 são conhecidos por atuarem na via de recompensas do sistema mesolímbico controlando a ingestão alimentar. A ativação da via de recompensas cria uma sensação de prazer e interfere com os sinais fisiológicos de saciedade, o que promove o consumo maior de alimentos palatáveis. O acesso a alimentos palatáveis com alto teor energético é considerado fator de risco ambiental para a obesidade. A compreensão dos mecanismos relacionados com a expressão gênica pelos quais a vida precoce influencia no padrão de saúde do adulto tem implicações importantes na busca de medidas preventivas e de controle do comportamento alimentar e sobre o risco para determinadas doenças na vida adulta. Este trabalho analisou o efeito da desnutrição proteica perinatal sobre a expressão gênica dos receptores dopaminérgicos DRD1a e DRD2, no núcleo accumbens e estriado em animais adultos. Foram utilizados 60 ratos da linhagem Wistar divididos em dois grupos segundo a dieta materna oferecida no período perinatal: normonutrido n=30 (17% de caseína) e desnutrido n=30 (8% de caseína). Foram analisados o peso corporal entre 15 e 120 dias de vida, a ingestão de alimento palatável sob efeito dos agonistas dopaminérgicos D1 e D2 e os níveis de expressão gênica dos receptores DRD1a e DRD2 no núcleo accumbens e estriado de animais normonutridos (n=6) e desnutridos (n=7). Os animais desnutridos que foram expostos à dieta palatável sem estímulos dos agonistas D1 e D2, consumiram maior quantidade do alimento palatável em relação aos animais normonutridos. Após aplicação dos agonistas D1 e D2, houve redução no consumo da dieta palatável em ambos os grupos (normonutrido e desnutrido), entretanto o efeito anorético do agonista D1 foi atenuado nos animais desnutridos. Ocorreu aumento da expressão gênica do receptor DRD1a no núcleo accumbens e estriado de animais desnutridos, não havendo alterações significativas em relação ao receptor DRD2. Assim, a desnutrição proteica perinatal altera a expressão gênica do receptor dopaminérgico DRD1a no núcleo accumbens e estriado em ratos adultos e altera o comportamento alimentar, reduzindo a ação hipofágica do receptor dopaminérgico D1 estimulando o consumo de alimentos palatáveis.

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Siopa, Filipa Alexandra Delgado. "Modificação de proteínas e DNA por quinonas derivadas de catecolaminas." Doctoral thesis, Faculdade de Ciências e Tecnologia, 2011. http://hdl.handle.net/10362/8782.

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Abstract:

Dissertação para obtenção do Grau de Doutor em Química Especialidade de Química Orgânica, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e Tecnologia
Fundação para a Ciência e Tecnologia - bolsa de doutoramento SFRH/BD/39171/2007

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Neri, Hipolito Javier. "DESARROLLO DE UN SENSOR FLUORESCENTE PARA SOLUCIONES DE DOPAMINA A PARTIR DE LA INCORPORACIÓN DE UNA MOLÉCULA SENSOR EN CRISTALES DE BIOMOF-1." Tesis de Licenciatura, Universidad Autónoma del Estado de México, 2015. http://hdl.handle.net/20.500.11799/95105.

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Abstract:

Preparación de un sensor reutilizable para dopamina
La síntesis y obtención de la molécula sensor (DAP) y la estructura que la almacena (BioMOF-1) así como la inclusión de la molécula en los poros del cristal, fue exitosa y en ambos casos, siendo corroborados minuciosamente por técnicas como microscopia óptica y electrónica, difracción de rayos X de polvos y monocristal, espectroscopia infrarrroja, análisis termogravimétricos, análisis de adsorción de gases de tipo Langmuir, espectroscopia UV-vis y espectroscopia de emisión fluorescente. La disposición del complejo DAP-BioMOF-1 en películas de PVC flexibles permitió una fácil manipulación del material al ser analizado y utilizado en diversas pruebas evitando de este modo una pérdida de material tanto de BioMOF-1 como DAP al ser manipulado. Una característica fundamental que se consiguió al tener el sensor en esta configuración fue la eficiente, prolongada y controlada liberación de DAP en medios acuosos evitando el uso innecesario de grandes cantidades de 2, 3 diaminofenazina, por tanto, una reducción de material desperdiciado y de esta forma bajando los costos económicos del ensayo. La alta sensibilidad de la molécula sensor ha sido corroborada al detectar soluciones de dopamina con concentraciones nanomolares teniendo un comportamiento predecible que lo hace reproducible, es importante destacar que las concentraciones de DA son similares a las presentes en tejidos biológicos, además la inocuidad del cristal de BioMOF-1 así como su alta capacidad de modular la liberación del sensor hacen de este sistema una opción a tener en cuenta en la detección de dopamina in vivo.
NA

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Corvino, María Elisa. "Investigação da participação do receptor dopaminérgico D2 nas diferenças comportamentais, relacionadas à ansiedade, das linhagens SHR e SLA16." reponame:Repositório Institucional da UFSC, 2015. https://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/169371.

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Abstract:

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2015.
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Em um estudo utilizando as linhagens LEW e SHR foi descrita a região do cromossomo 4, Anxrr16. O estudo mostrou que essa região influencia a locomoção central no teste do Campo Aberto. A fim de melhor compreender a importância da região Anxrr16 nos comportamentos, foi desenvolvida uma linhagem congênica a partir das linhagens SHR e LEW, chamada SLA16 (SHR.LEW-Anxrr16). O gene da alfa-sinucleína (Snca) localizado na região do Anxrr16 codifica uma proteína que inibe a atividade do transportador da dopamina e a síntese da dopamina nos neurônios dopaminérgicos. O objetivo do presente estudo foi investigar o papel da região diferenciada entre as linhagens SHR e SLA16, Anxrr16, na regulação do sistema dopaminérgico em comportamentos relacionados à ansiedade/emocionalidade. Foram utilizados animais das linhagens SHR e SLA16, que receberam o tratamento com duas doses de agonista D2, Quimpirole (1.5 mg/kg e 3mg/kg), e duas doses do antagonista preferencial do receptor D2, Haloperidol (0.25 mg/kg e 0.5 mg/kg). Os tratamentos foram administrados IP e através de microinjeções na região ventral do hipocampo. O tratamento periférico com Quimpirole mostrou efeitos farmacogenéticos nas linhagens SHR e SLA16, provocando uma diminuição da locomoção total dos animais das duas linhagens no LCE, ou da linhagem SLA16 no CA. Ele também parece influenciar nos comportamentos relacionados à ansiedade/emocionalidade aumentando a preferência pelas áreas aversivas nos testes comportamentais avaliados. Já o tratamento no hipocampo ventral causou uma diminuição da locomoção dos animais das duas linhagens no CA e LCE. O tratamento periférico com Haloperidol provocou efeitos farmacogenéticos específicos nas linhagens SHR e SLA16, diminuindo somente a locomoção da linhagem SLA16 no CA, enquanto que o tratamento no hipocampo ventral não influenciou a locomoção ou os comportamentos relacionados à ansiedade/emocionalidade. Os resultados sugerem que os receptores dopaminérgicos D2 destas linhagens influenciam nos comportamentos relacionados à ansiedade/emocionalidade quando estimulados com agonistas IP. A região diferencial (Anxrr16) entre as linhagens SHR e SLA16 pode conter genes reguladores do sistema dopaminérgico que causaram o efeito farmacogenético encontrado, em resposta a drogas que atuam no receptor D2.

Abstract : In a study using the LEW and SHR strains was described that the region of chromosome 4, Anxrr16, influences the central locomotion in the Open Field test. In order to better understand the importance of Anxrr16 region on behaviors, a congenic strain from SHR and LEW rats, named SLA16 (SHR.LEW-Anxrr16), was developed. The gene of alpha-sinuclein localized in the Anxrr16 region codified a protein (Snca) that inhibits the dopamine transporter activity and the dopamine synthesis in dopaminergic neurons. The aim of this work was investigated the role of the Anxrr16 region on the regulation of the dopaminergic system in anxiety/emotionality related behaviors. Animals of SHR and SLA16 strains were treated with two dose of agonist of D2 receptor, Quimpirole (1.5 mg/kg and 3.0 mg/kg) and two dose of antagonist of D2 receptor, Haloperidol (0.25 mg/kg and 0.5 mg/kg). Treatments were administered through IP injection and microinjected in ventral hippocampus. Peripheral treatment with the D2 agonist showed pharmacogenetic effects in SHR and SLA16 strains, causing, in general, decreased mobility of the strains in EPM or in the SLA15 strain in the OF. It also appears to influence behaviors related to anxiety/emotionality since the preference for aversive areas was increased. Treatment in the ventral hippocampus caused a decrease of locomotion of both strains in both behavior tests. Peripheral treatment with the dopamine D2 receptor antagonist caused a pharmacogenetic effect decreasing the locomotion only in SLA16 animals in the OF whereas treatment in the ventral hippocampus did not influence the behavior or locomotion related to anxiety/ emotionality. The results suggest that dopamine D2 receptor of these strains influence behaviors related to anxiety/emotionality when stimulated with agonists IP. The differential region (Anxrr16) between SHR and SLA16 strains possibly contain genes, regulating the dopaminergic system that caused the pharmacogenetic effect found in response to drugs that act on the D2 receptor.

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Lima, Iri Sandro Pampolha. "Avaliação das alterações comportamentais, neuroquímicas, histopatológicas e bioquímicas em ratos tratados com cocaína e etanol isoladamente ou em associação." reponame:Repositório Institucional da UFC, 2003. http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/2410.

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Abstract:

LIMA, Iri Sandro Pampolha. Avaliação das alterações comportamentais, neuroquímicas, histopatológicas e bioquímicas em ratos tratados com cocaína e etanol isoladamente ou em associação. 2003. 148 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2003.
Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-04T14:16:14Z No. of bitstreams: 1 2003_dis_isplima.pdf: 1200234 bytes, checksum: 7d7755a50ff69ce8f388a3db9ab8418e (MD5)
Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-09T16:03:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2003_dis_isplima.pdf: 1200234 bytes, checksum: 7d7755a50ff69ce8f388a3db9ab8418e (MD5)
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In the present work, behavioral, neurochemical (determination of monoamines and metabolites levels rat in striatum), histopatological and biochemical (lipoproteins and transaminases) alterations produced by cocaine, ethanol and the association of theses were analyzed. Females Wistar rats (180-200 g) were treated during 7 days with cocaine (Coc 10 and 20 mg/kg, i.p.), ethanol (Et 2 and 4g/kg, p.o.) and the association of theses (Coc 10 mg + Et 2g - low interaction doses; Coc 20 mg + Ethanol 4g - high interaction doses). The results demonstrated that the spontaneous locomotor activity (SLA) was increased after cocaine administration and decreased after ethanol in both doses. It was not observed alterations in the SLA in the association cocaine + ethanol. The treatment with cocaine and ethanol caused an increase in dopamine level. The association cocaine + ethanol in higher doses caused an increase of dopamine and serotonin and decrease of DOPAC levels, suggesting that those drugs would can actuate directly in those systems or, indirectly, across a process of modulation. Cocaine, ethanol and the association of theses, after subcronic administration and in both doses, caused a donwregulation of D2-like receptors, not by recurring alterations in the values of Kd. The values of Bmax and Kd of the M1 + M2-like receptors have not already suffered alterations. In the biochemical study, the administration of cocaine induced an increase the concentrations of TGO and triglycerides, and decrease of the concentrations of TGP, total cholesterol and HDL. The treatment with ethanol decreases the levels of HDL, total cholesterol and triglycerides. The association cocaine + ethanol caused in both doses decrease of triglycerides, HDL, TGP and total cholesterol. All treatments did promote histopatological alterations in cardiac and hepatic woven. Ours results suggest that the association cocaine + ethanol appears to interfere more intense in the systems of neurotransmitters and in the biochemical parameters than the use of the isolated drugs.
No presente trabalho foram estudadas as alterações comportamentais, neuroquímicas (determinações dos níveis de monoaminas e metabólitos), histopatológicas e bioquímicas (lipoproteínas e transaminases) em corpo estriado de ratos tratados com cocaína e etanol isoladamente ou em associação. Foram utilizadas ratas Wistar (180-200 g), que foram tratadas durante 7 dias com cocaína (Coc 10 e 20 mg/kg, i.p.), etanol (Et 2 e 4g/kg, v.o.) e a associação destes (Coc 10 mg + Et 2g - interação baixas doses; Coc 20 mg + Etanol 4g - interação altas doses). Os resultados demonstraram que a atividade locomotora espontânea (ALE) foi aumentada após administração de cocaína em ambas as doses e diminuída após a administração de etanol em ambas as doses. Não foram observadas alterações na ALE na associação cocaína + etanol. O tratamento com cocaína e etanol causou um aumento de dopamina, sem alterações nos demais neurotransmissores e metabólitos. A associação cocaína + etanol em altas doses, promoveu aumento dos níveis de dopamina, diminuição de DOPAC e aumento dos níveis de 5-HT, sugerindo que essas drogas poderiam atuar diretamente nesses sistemas ou, indiretamente, através de um processo de modulação. A cocaína, etanol e a associação destes, após administração sub-crônica e em ambas as doses, causou uma downregulation em receptores D2-símile, não ocorrendo alterações nos valores de Kd. Os valores de Bmax e Kd dos receptores M1 + M2-símile não sofreram alterações. No estudo bioquímico, a administração de cocaína induziu um aumento nas concentrações de TGO e triglicerídeos, e diminuição das concentrações de TGP, colesterol total e HDL. O tratamento com etanol diminuiu os níveis de HDL, colesterol total e triglicerídeos. A associação cocaína + etanol promoveu em ambas as doses diminuição de trigicerídeos, HDL, TGP e colesterol total. Todos os tratamentos promoveram alterações histopatológicas em tecido cardíaco e hepático. Nossos resultados sugerem que a associação cocaína + etanol parece interferir de maneira mais intensa nos sistemas de neurotransmissão e nos parâmetros bioquímicos do que o uso das drogas isoladas.

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Martin, Ana Luíza de Aguiar Rocha. "Efeitos comportamentais e neuroquímicos induzidos pelo etanol em camundongos e suas relações com o sistema colinérgico e dopaminérgico." reponame:Repositório Institucional da UFC, 2011. http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/9156.

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Abstract:

MARTIN, Ana Luíza de Aguiar Rocha. Efeitos comportamentais e neuroquímicos induzidos pelo etanol em camundongos e suas relações com o sistema colinérgico e dopaminérgico. 2011. 78 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2011.
Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-09-24T11:56:24Z No. of bitstreams: 1 2011_dis_alarmartin.pdf: 1193813 bytes, checksum: e9b6f09fb40e9ca4a6950bd16dff2f7c (MD5)
Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-09-24T11:58:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_dis_alarmartin.pdf: 1193813 bytes, checksum: e9b6f09fb40e9ca4a6950bd16dff2f7c (MD5)
Made available in DSpace on 2014-09-24T11:58:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_dis_alarmartin.pdf: 1193813 bytes, checksum: e9b6f09fb40e9ca4a6950bd16dff2f7c (MD5) Previous issue date: 2011
Ethanol is an agent with nonspecific action, which may interfere in various neurotransmitter systems. Atropine is an alkaloid with blocking action of the cholinergic system, used in cholinergic intoxication and other with cardiac involvement. The neuroleptic, haloperidol, is an antagonist of dopaminergic pathways, mainly by blocking the D2 receptor, used in the treatment of schizophrenia in both acute and chronic psychoses and maniac psychotic episodes. Several studies have reported the interaction between the dopaminergic and cholinergic pathway and their interaction separately with the ethanol. This study investigated the behavioral and neurochemical effects produced in the striatum induced by subchronic treatment with ethanol in presence and absence of atropine or haloperidol. Swiss mice were used, females, weighing between 25 - 30g. The animals were treated with distilled water (control), ethanol (1 or 3g/kg, po) or pre-treated with haloperidol (0.5 mg / kg, ip) or atropine (0.5 mg / kg, ip), this application was thirty minutes before administration of ethanol or distilled water daily for seven days. Thirty minutes after the last drug administration intraperitoneally or sixty minutes after the last oral administration, the animals were subjected to behavioral tests of open field and track rod (locomotors activity), hole board and plus maze (anxiety activity) and then sacrificed with dissection of the striatum for determination of monoamines (norepinephrine, dopamine and its metabolic acid 3, 4-dihydroxyphenylacetic) or the concentration of acetylcholinesterase. Ethanol showed a stimulating effect in depressing the lower dose and higher dose, especially in tests of locomotors activity. When associated with a higher dose, haloperidol showed, in most cases the potentiating effect of ethanol, since atropine in some tests only showed a tendency to reverse this effect only associated with ethanol at the lowest dose, although not observed in all parameters of evaluated. However, the effect produced a modest increase in the concentrations of dopamine in the striatum, but when associated with blockers, a reduction of these levels was more pronounced when the association was made with ethanol at the highest dose. In the evaluation of the enzyme acetylcholinesterase, all substances used, combined or not, reduced more than 60% levels this enzyme, being more evident in the administration of atropine alone, or the authorities which showed a significant reduction in the concentration of AD, also showed reduced AChE, showing the interaction of these two systems, suggesting them as possible targets of action of drug development which contribute to the treatment of alcoholism
O etanol tem influência sobre diversos sistemas de neurotransmissores. Vários estudos têm relatado a interação entre a via dopaminérgica e colinérgica e a interação delas isoladamente com os efeitos do etanol. O bloqueador colinérgico atropina, que é um alcalóide muito utilizado no caso de intoxicações colinérgica e comprometimento cardíaco e o haloperidol, é neuroléptico, antagonista das vias dopaminérgicas, principalmente pelo bloqueio do receptor D2, utilizado no tratamento da esquizofrenia, tanto na fase aguda como crônica, psicoses e episódios maníacos psicóticos são fármacos utilizados para o estudo desses sistemas. Este trabalho objetivou estudar os efeitos comportamentais e neuroquímicas produzidos em corpo estriado induzidos pelo tratamento subcrônico com etanol na presença e ausência de atropina ou haloperidol. Foram utilizados camundongos Swiss, fêmeas, com peso variando entre 25 – 30g. Os animais foram tratados com água destilada (controle), etanol (1 ou 3g/kg, v.o) ou pré tratados com haloperidol (0,5mg/kg, i.p) ou atropina (0,5mg/kg, i.p), essa aplicação foi feita trinta minutos antes da administração do etanol ou água destilada diariamente durante sete dias.Trinta minutos após a última administração das drogas por via intraperitoneal ou sessenta minutos após a última administração por via oral, os animais foram submetidos aos testes comportamentais de campo aberto e rota rod (atividade locomotora), placa perfurada e plus maze (atividade de ansiedade) e, posteriormente, sacrificados com dissecação do corpo estriado para determinação dos níveis de monoaminas (norepinefrina, dopamina e seu metabólico ácido 3, 4-dihidroxifenilacético) e a atividade da acetilcolinesterase. O etanol apresentou efeito estimulante na menor dose e depressor na maior dose, principalmente nos testes de atividade locomotora. Quando associado à maior dose, o haloperidol apresentou, na maioria das vezes o efeito potencializador do etanol, já a atropina apenas em alguns testes mostrou uma tendência de reversão desse efeito apenas associado ao etanol na menor dose, embora não observado em todos os paramentos avaliados. Além disso, o efeito produziu um discreto aumento nos níveis de dopamina no corpo estriado, porém quando associado aos bloqueadores, houve redução desses níveis, sendo mais acentuada quando essa associação foi feita com o etanol na maior dose. Na avaliação da atividade da enzima acetilcolinesterase, todas as substâncias utilizadas associadas ou não, provocaram a redução de mais de 60% na atividade desta enzima, sendo mais evidente na administração isolada de atropina, ou seja, as administrações que apresentaram redução significativa da concentração de DA, apresentaram também a atividade da AchE reduzida, evidenciando a interação desses dois sistemas, sugerindo-os como possíveis alvos de ação no desenvolvimento de medicamento que coadjuvem no tratamento do alcoolismo

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Bonaventura, Jordi. "Homòmers i heteròmers dels receptors D(2) de dopamina: implicacions funcionals a l'estriat." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2012. http://hdl.handle.net/10803/101095.

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Abstract:

Els receptors acoblats a proteïna G són la diana d'una gran part dels fàrmacs en ús i en desenvolupament. L'homomerització i l'heteromerització entre GPCR és un concepte cada cop més acceptat dins la comunitat científica. I de fet, els heteròmers entre alguns d'aquests receptors s'estan postulant com a dianes terapèutiques emergents, com és el cas dels heteròmers de receptors A(2A)-D(2) per al cas de la malaltia de Parkinson. Per tant, l'objectiu general d'aquesta tesi ha estat conèixer els mecanismes pels quals els lligands clàssics, nous lligands i altres receptors de la membrana plasmàtica poden regular les característiques farmacològiques dels receptors de dopamina. Entendre la dinàmica dels GPCR i la seva regulació mitjançant lligands o altres proteïnes és fonamental per a desenvolupar fàrmacs més efectius, per això en el primer capítol d'aquest tesi s'ha estudiat i descrit la dinàmica dels receptors D(2) de dopamina i els efectes de l'estimulació per un agonista dels receptors en aquesta utilitzant la microscòpia confocal de disc giratori. El fet que els receptors es trobin en forma de dímers pot afectar a les seves propietats farmacològiques, per tant, aquest fet ha de ser tingut en compte a l'hora d'analitzar els resultats obtinguts en experiments d'unió de radiolligands. En el segon capítol s'han introduït els conceptes de cooperativitat i de modulación al•lostèrica entre agonista i antagonista aplicant el “two-state dimer receptor model” desenvolupat pel nostre grup (Casadó et al., 2009). Utilitzant aquests conceptes s'ha caracteritzat un nou lligand per als receptors D(2) de dopamina, obtingut a partir de l'escombratge d'una biblioteca d'híbrids quinolizidinapèptid, que té propietats d'agonista parcial. Recentment el nostre grup havia descrit l'heteromerització dels receptors de dopamina amb els receptors sigma1 (Navarro et al., 2010), en aquesta tesi hem descrit l'heteromerització dels receptors sigma1 amb els receptors D(2) de dopamina, hem caracteritzat les propietats d'aquest heteròmer i hem plantejat un mecanisme de com aquest fet pot intervenir en els mecanismes d'acció de la cocaïna. Als quart i cinquè capítol d'aquesta tesi hem descrit la modulació al•lostèrica dels receptors D(2) de dopamina per molècules no dopaminèrgiques, com la cafeïna o la cocaïna, a través dels heteròmers formats amb altres receptors (A2A o G1, respectivament). Ja que els heteròmers formats per receptors de dopamina poden ser una diana farmacològica per a controlar el sistema dopaminèrgic, i el nostre grup va descriure la possibilitat de formació d'heteròmers entre receptors A2A d'adenosina, 02 de dopamina i CB1 de cannabinoides, hem estudiat l'expressió i la funcionalitat d'aquests heteròmers en teixits obtinguts d'animals models (macacos i rates lesionats amb MPTP o 6-OHDA) de la malaltia de Parkinson en diferents estats de progressió. Els animals parkinsonians mostren intacta la capacitat d'aquests receptors per interaccionar funcionalment però s'ha observat una desaparició dels heteròmers i de les seves empremtes bioquímiques associades en animals (tant rates com primats) que han estat tractats amb L-dopa. El conjunt d'aquests resultats proporciona un nou escenari amb nous factors a tenir en compte a l'hora de dissenyar noves aproximacions terapèutiques en el camp dels GPCR.
Receptor homomerization and heteromerization is a concept becoming widely accepted. Indeed, the receptor heteromer A(2A)-D(2) has emerged lately as a major target on the treatment of Parkinson’s disease. The main aim of this thesis has been to understand the mechanisms by which receptor homomers and heteromers could be regulated by the classical ligands, novel ligands or by other receptors in the membrane. Understanding the trafficking of GPCR and their regulation by ligands is fundamental to develop more effective drugs. So studied the D(2) receptor ligand-promoted dynamics (Aymerich et al., 2011). We also studied the role of the receptor dimerization in ligand binding and introduced the concepts of cooperativity and antagonist-agonist modulation applying the twostate dimmer receptor model developed by our group (Casadó et al., 2009). Using these concepts we characterized a novel ligand for the dopamine D(2) receptors with properties of a partial agonist (article in preparation). We studied the capacity of D(2) dopamine receptors to form heteromers with or sygma σ1, related to cocaine addiction. We also described the allosteric modulation of D(2) receptors by non‐dopaminergic molecules, such as caffeine or cocaine, through other receptors (A2A or sygmaσ1, respectively) in the heteromers (articles in preparation). Since D(2) receptor heteromers could be a target to control the dopaminergic system, we also examined the expression of receptor heteromers between dopamine D(2), adenosine A(2A) and cannabinoid CB(1) receptors in native rat and primate models of Parkinson’s disease tissues, via the identification of the specific cross-talk between these receptors in ligand binding, and reported the disruption on these receptor heteromers in tissues from animals with L-dopa induced dyskinesia. (articles in preparation).

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Sickler, Thaís de Paula. "Análise da expressão da filamina A nos tumores hipofisários e suas implicações clínicas e terapêuticas." Universidade de São Paulo, 2018. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5135/tde-08052018-083923/.

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Abstract:

A filamina A (FLNA) é uma proteína de citoesqueleto com diversas funções, dentre as quais estão motilidade celular e ancoragem de receptores de membrana. A alteração de sua expressão foi anteriormente descrita em diversos tipos de neoplasia. Em tumores hipofisários, demonstrou-se que sua expressão se correlacionou à expressão de receptores de dopamina tipo 2 (DRD2) em prolactinomas, e com a sinalização intracelular do receptor de somatostatina tipo 2 (SSTR2) após ativação por agonista, em somatotropinomas. Neste estudo, avalariam-se a expressão da FLNA, DRD2, SSTR2 e SSTR5 em diversos tumores hipofisários: prolactinomas, somatotropinomas, corticotropinomas e adenomas clinicamente não funcionantes (ACNF). Avaliou-se também a correlação entre a expressão da FLNA e resposta aos tratamentos medicamentosos, com agonista dopaminérgico (AD) ou com ligantes do receptor de somatostatina (LRS), e entre FLNA e as características de invasividade e/ou agressividade tumorais. Houve correlação entre a expressão de FLNA e a expressão de DRD2 e, entre FLNA e a resposta ao AD, nos ACNFs. Nos corticotropinomas, houve correlação entre a expressão da FLNA e critérios de invasividade tumoral. Portanto, o papel da FLNA nos tumores hipofisários pode depender do tipo celular implicado. Além disso, o envolvimento da FLNA nos mecanismos de resistência aos medicamentos utilizados nos tumores hipofisários, AD ou LRS, não deve estar relacionado apenas à sua ação na ancoragem e reciclagem dos receptores DRD2 e SSTRs, mas também à sua ação na motilidade celular, propiciando caratecterísticas de invasividade
Filamin A (FLNA) is a cytoskeletal protein with a variety of functions, including cell motility and membrane receptor anchorage. Changes in FLNA expression has already been described in several types of neoplasia. In pituitary tumors, its expression has been shown to correlate with the expression of dopamine type 2 receptors (DRD2) in prolactinomas and with intracellular somatostatin type 2 receptor (SSTR2) signaling after agonist activation in somatotropinomas. The expression of FLNA, DRD2, SSTR2 and SSTR5 in different pituitary tumors: prolactinomas, somatotrophinomas, corticotrophinomas and clinically nonfunctioning adenomas (CNFA) were evaluated. We also correlate FLNA expression to sensibility to drug treatments with dopamin agonists (DA) or somatostatin receptor ligands (SRL), and to tumor invasiveness and/or aggressiveness. Positive correlation between FLNA expression and DRD2 expression and between FLNA and DA response were found in CNFA. In corticotrophinomas, there was correlation between FLNA expression and tumor invasiveness. Therefore, the role of FLNA in pituitary tumors seems to depend on the cell type involved. Additionally, FLNA involvement in the mechanisms of drug (DA or SRL) resistance in pituitary tumors could not be related only to its action in the anchoring and recycling of DRD2 and SSTR receptors, but also to its action on cellular motility and invasiveness

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SANTOS, Anderson Felipe da Silva. "Expressão tecidual dos receptores dopaminérgicos D1 no Núcleo Accumbens e estriado de ratas desnutridas." Universidade Federal de Pernambuco, 2015. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/16607.

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Abstract:

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-04-15T14:05:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_AndersonFelipe_Versão Final.pdf: 4770513 bytes, checksum: bd8c869ddc087cfbf7bc953f303cf9e5 (MD5)
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A desnutrição durante o período perinatal tem sido associada a aumento da compulsão alimentar, preferência por alimentos palatáveis e risco de desenvolvimento de obesidade na vida adulta. O apetite é controlado por vários sistemas fisiológicos, dentre os quais o sistema neural de recompensa. A dopamina é um conhecido neurotransmissor deste sistema, estando envolvida nas relações de prazer proporcionado por alimentos e drogas, agindo através da ligação em receptores neuronais, de duas classes: D1-like e D2-like. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão dos receptores dopaminérgicos D1 no Núcleo Accumbens e estriado, áreas relacionadas ao comportamento alimentar, em ratas desnutridas. Dois grupos experimentais foram formados: grupo-controle (CF - fêmeas gestadas por mães normonutridas durante a gestação e lactação) e grupo-desnutrido (DF - fêmeas gestadas por mães que receberam dieta hipoprotéíca no período perinatal). Os animais passaram a receber dieta-padrão de laboratório após o desmame e tiveram o peso avaliado em diferentes momentos da vida. No 120º dia, foram sacrificadas e submetidas à perfusão, para retirada dos encéfalos. Após os cortes dos cérebros em micrótomo de congelamento, procedeu-se a Imunohistoquímica para contagem de neurônios marcados para DRD1. As imagens foram obtidas através de câmera acoplada ao microscópio óptico e a morfometria realizada no software livre ImageJ. Os dados estatísticos foram expressos em média±desvio-padrão, sendo analisados no software livre GraphPad Prism 5. Os animais desnutridos apresentaram menor peso em relação aos normonutridos desde o nascimento até o sacrifício. Não foi encontrada diferença significativa entre os grupos na expressão de DRD1 nas áreas cerebrais analisadas (Estriado: CF: 230,0 ± 86,40, n=4; DF: 225,50 ± 89,90, n=4; Núcleo Accumbens: CF: 109,80 ± 41,40, n=4; DF: 128,0 ± 49,50, n=5; test t de Student, p<0,05). Estes dados sugerem que a expressão dos receptores D1 está diretamente relacionada à quantidade de dopamina liberada na fenda sináptica, quantidade essa que é maior na apresentação de alimentos novos e palatáveis.
Malnutrition during the perinatal period has been linked to increased binge eating, preference for palatable foods and risk of obesity developing in adulthood. Appetite is controlled by several physiological systems, including the neural reward system. Dopamine is a neurotransmitter in this system and it is involved in relations of pleasure provided by foods and drugs, acting through its binding to neuronal receptors of two classes: D1-like and D2-like. The goal of this study was to evaluate the expression of dopamine D1 receptors in the striatum and Nucleus Accumbens, areas related to feeding behavior, in malnourished rats. Two experimental groups were formed: the control group (CF - rats coming from normonutridas mothers during pregnancy and lactation) and group-malnourished (DF - coming rats of mothers who received low protein diet during the perinatal period). The animals began to receive standard laboratory diet after weaning and had the weight assessed at different times of life. In 120 days, they were sacrificed and submitted to perfusion, to remove the brains. After the cuts of the brains in freezing microtome, it proceeded to Immunohistochemistry for counting neurons marked for DRD1. The images were obtained through camera coupled to an optical microscope and morphometry performed on the Free Software ImageJ. Statistical data were expressed as mean ± standard deviation and analyzed the free software GraphPad Prism 5. Malnourished animals showed lower weight compared to well-nourished from birth to the sacrifice. There was no significant difference between groups in the expression of DRD1 the analyzed brain areas (Striatum: CF: 230.0 ± 86.40, n = 4; DF: 225.50 ± 89.90, n = 4; Nucleus Accumbens: CF: 109.80 ± 41.40, n = 4; DF: 128.0 ± 49.50, n = 5; Student's t test, p <0.05). These data suggest that the expression of D1 receptors is directly related to the amount of dopamine released in the synaptic cleft, which amount is higher in presenting new and palatable food.

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Vencio, Sérgio Alberto Cunha. "Avaliação do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal em indivíduos com e sem mediunidade (experiência anômala) em um contexto religioso." Universidade Federal de Goiás, 2017. http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/7963.

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Abstract:

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-11-13T12:25:15Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Sérgio Alberto Cunha Vencio - 2017.pdf: 2722594 bytes, checksum: 80a33a6cb62da8ad55462ad15376f83c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)
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Objective - To evaluate the HPA axis and the mental health status in a non-pathological dissociation condition (mediumship) Methods - In this prospective and controlled study, 29 psychophonic mediums (group 1) were evaluated before and after psychophony and compared to 22 non-medium volunteers of the same religious context (group 2) before and after a creative visualization, simulating a mediumistic assistance. Plasma catecholamines, ACTH, cortisol and glucose were measured pre-and 1 hour after the intervention. A structured questionnaire - DDIS was applied (Dissociative Disorders Interview Schedule) and the results were compared with historical data from patients with dissociative disorder (DD) who answered the DDIS. Results - In group 1, cortisol and ACTH decreased (14.7 μg/dl to 11.2 μg/dl with p-0.001 and 20.6 pg/ml to 13.9 pg/ml with p-0.001, respectively), However, the HPA axis showed diversified responses with epinephrine and noradrenaline decreasing after the intervention (39 pg/ml at 33 pg/ml and 311.2 pg/ml at 284.1 pg/ml, respectively) and an increased in dopamine (41.7 pg/ml to 44.4 pg/ml with p-0.046). In group 2, cortisol decreased from 15.5 μg/dl to 13.4 μg/dl (p -0.01). The scores obtained in the structured interview (DDIS) were similar in both groups, but with considerable differences when compared with historical data from TD patients. Conclusion - This study showed that one hour after psychophony the HPA axis remains preserved in mediums. Dopamine is the main neurochemistry of religious manifestations and may eventually constitute a biomarker of this phenomenon.
Objetivo - Avaliar o eixo HHA e o estado de saúde mental em uma condição de dissociação não-patológica (mediunidade) Métodos - Neste estudo prospectivo e controlado, 29 médiuns de psicofonia (grupo1) foram avaliados pré e pós psicofonia e comparados com 22 voluntários não médiuns do mesmo contexto religioso (grupo 2) pré e pós uma visualização criativa, simulando uma assistência mediúnica. Catecolaminas plasmáticas, ACTH, cortisol e glicose foram medidas pré e 1 hora após a intervenção. Um questionário estruturado DDIS foi aplicado (Dissociative Disorders Interview Schedule) e os resultados foram comparados com dados históricos de pacientes com transtorno dissociativo (TD) que responderam ao DDIS. Resultados - No grupo 1, o cortisol e o ACTH diminuíram (14,7 μg/dl para 11,2 μg/dl com p- 0,001 e 20,6 pg/ml para 13,9 pg/ml com p-0,001, respectivamente), apesar disso, o eixo HHA mostrou respostas diversificadas com epinefrina e noradrenalina diminuindo após a intervenção (39 pg/ml a 33 pg/ml e 311,2 pg/ml para 284,1 pg/ml, respectivamente) e aumento da dopamina (41,7 pg/ml a 44,4 pg/ml com p-0,046). No grupo 2, o cortisol diminuiu de 15,5 μg/dl para 13,4 μg/dl (p-0,01). Os escores obtidos na entrevista estruturada (DDIS) foram semelhantes nos dois grupos, porém com diferenças consideráveis quando comparados com os valores históricos de pacientes com TD. Conclusão - Este estudo mostrou que uma hora após a psicofonia o eixo HHA permanece preservado em médiuns. A dopamina é a principal neuroquímica de manifestações religiosas e pode eventualmente se constituir num marcador desse fenômeno.

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Pitella, Felipe Arriva. "Avaliação quantitativa e qualitativa da densidade de transportadores pré-sinápticos de Dopamina em pacientes saudáveis e em portadores de Doença de Parkinson: um estudo de SPECT com [99mTc]-TRODAT-1." Universidade de São Paulo, 2017. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-10042018-150836/.

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Abstract:

Introdução: A doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa progressiva. A característica principal da fisiopatologia é a perda de neurônios dopaminérgicos na substância nigra pars compacta. A tomografia por emissão de fóton único (SPECT) com [99mTc]- TRODAT-1, um tropano radiomarcado que se liga a transportadores dopaminérgicos (DAT) pré-sinápticos, foi proposta para avaliar a integridade do sistema dopaminérgico nigroestriatal. Na rotina clínica, a interpretação visual de DAT-SPECT e várias técnicas de semiquantificação podem ser aplicadas. OBJETIVO: (1) caracterizar a densidade de DAT no estriado em pacientes saudáveis e com DP; (2) comparar diferentes métodos semiquantitativos de densidade de DAT no estriado. MÉTODOS: Este estudo incluiu prospectivamente 67 pacientes; 23 controles saudáveis (8 do sexo masculino, 15 do sexo feminino, idade 59 ± 11 anos) e 44 pacientes com DP idiopática em graus variados (29 homens, 15 mulheres, idade 59 ± 7 anos). SPECT com [99mTc]-TRODAT-1 de todos os pacientes foram avaliados e comparados com achados clínicos. A interpretação visual e quatro abordagens de semiquantificação foram avaliadas: (1) Método manual; (2) corregistro com ressonância magnética (RM); (3) corregistro com RM corrigida para efeito de volume parcial (4) Two Box. RESULTADOS: Na avaliação qualitativa, foi encontrada alta sensibilidade (90,91% - 95,45%), especificidade (91,3% - 100%) e acurácia (92,54% - 95,52%). A concordância intraobservador foi excelente. A concordância interobservador variou entre moderada a pobre. Os pacientes com DP apresentaram potencial de ligação (BPI) estriatal significativamente 8 menor em comparação aos controles em todos os métodos semiquantitativos. Entre os métodos semiquantitativos, o mais acurado foi o manual, seguido por Two Box. O método manual poderia potencialmente reduzir os casos falsos positivos de 3 para 0 e os casos falsos negativos de 9 para 7. A reprodutibilidade dos métodos semiquantitativos foi excelente. Em geral, correlações negativas entre BPI e a severidade da DP e as escalas motoras foram encontradas, no entanto, as correlações não foram estatisticamente significantes. O índice de assimetria e a relação putamen/caudado apresentaram desempenho inferior ao BPI. Observouse diferença estatisticamente significante do BPI entre o grupo com discinesia e sem discinesia no corpo estriado e nos caudados. Conclusão: A avaliação qualitativa de SPECT cerebral com [99mTc]-TRODAT-1 apresenta excelente desempenho do diagnóstico diferencial entre pacientes saudáveis e com DP. A avaliação semiquantitativa é complementar a avaliação qualitativa, e pode contribuir de forma a reduzir falsos negativos ou falsos positivos.
Introduction: Parkinson disease (PD) is a progressive neurodegenerative disease. The pathophysiology\'s main hallmark is the loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra pars compacta. Single photon emission computed tomography (SPECT) with 99mTcTRODAT-1, a radiolabeled tropane that binds dopamine transporters (DAT), has been proposed to evaluate the integrity of the nigrostriatal dopaminergic system. In clinical routine, visual interpretation of DAT-SPECT and several semiquantification techniques can be applied. AIM: (1) to characterize DAT density in the striatum in healthy patients and with Parkinson\'s disease; (2) to compare different semiquantitative methods. METHODS: This study included prospectively 67 patients; 23 healthy controls (8 male; 15 female; age 59±11 years old) and 44 patients with various degrees of severity of idiopathic PD (29 male; 15 female; age 59±7 years old). SPECT with [99mTc]-TRODAT-1 of all patients were evaluated and compared with clinical findings. Visual interpretation and four semiquantification approaches were evaluated: (1) Manual method; (2) ROI automatically drawn on the coregistered Magnetic Resonance Imaging (MRI); (3) coregistered MRI corrected by partial volume effects (4) Two Box. RESULTS: In the qualitative evaluation, high sensitivity (90.91% - 95.45%), specificity (91.3% - 100%) and accuracy (92.54% - 95.52%) were found. Intraobserver agreement was excellent. Interobserver agreement ranged from moderate to poor. PD patients had significantly lower striatal DAT binding potential (BPI) compared to controls in all semiquantitative methods. Among the semiquantitative methods, the most 10 accurate was the manual, followed by Two Box. The manual method would potentially reduce false positive cases from 3 to 0 and false negative cases from 9 to 7. The reproducibility of semiquantitative methods was excellent. In general, negative correlations between striatal DAT binding and PD severity and motor scales were found, however, the correlations were not statistically significant. Asymmetry index and putamen/caudate ratio presented inferior performance compared to BPI. A statistically significant difference between the group with dyskinesia and without dyskinesia in the striatum and caudate BPI was found. Conclusion: Qualitative evaluation of DAT-SPECT with TRODAT-1 presents excellent differential diagnosis performance among healthy and PD patients. Semiquantitative evaluation is complementary to the qualitative evaluation, and may contribute in a way to reduce false negatives or false positives.

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Oliveira, Daniel de Jesus Cardoso de. "Mecanismos neuroendócrinos envolvidos na puberdade de novilhas da raça Nelore." Universidade de São Paulo, 2006. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-27062007-150401/.

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Abstract:

O presente trabalho teve por objetivo investigar a variação na secreção de LH em resposta ao tratamento com neurotransmissores, na presença ou não de esteróides gonadais e desta forma gerar informações sobre os mecanismos neuroendócrinos envolvidos na maturação sexual de novilhas da raça Nelore. A concentração de LH foi quantificada por radioimunoensaio e as novilhas ovariectomizadas (OVX) apresentaram maior concentração basal de LH (P≤0,05), que as novilhas inteiras (INT). A administração de um antagonista gabaérgico (picrotoxina, 0,18 mg/kg, iv, amostras 15 min por 10 h) aos 8, 10, 14 e 17 meses de idade, aumentou (P≤0,05) a concentração média e área total de secreção de LH nas novilhas INT tratadas aos 14 meses, a área total dos picos e área do maior pico de secreção de LH foi maior (P≤0,05) nas novilhas OVX aos 14 e 17 meses de idade . A administração de um antagonista dopaminérgico (sulpiride, 0,59 mg/kg, sc, amostras 15 min por 10 h) aos 8, 12 e 16 meses de idade diminuiu (P≤0,05) a secreção de LH (concentração média, área total, área total dos picos e área do maior pico secreção de LH) nas novilhas OVX aos 8 meses de idade. A administração de um estimulador alfa-adrenérgico (clonidina, 10 µg/kg, iv, amostras 15 min por 4 h) aos 8, 12 e 15 meses de idade, diminuiu (P≤0,05) o número de picos nas novilhas OVX com 8 meses de idade. A administração do 17β-estradiol (2 µg/kg, iv, amostra 15 min por 3 h, 1 h por 7 h e 3 h por 22 h) aos 10, 13 e 17 meses de idade diminuiu a diferença (P≥0,05) entre os grupos OVX e INT em relação ao número de picos, área total de picos, área do maior pico e tempo necessário para acontecer o maior pico. Foi avaliada a secreção de LH da desmama à primeira ovulação em novilhas INT e OVX. A concentração de LH aumentou durante a maturação sexual, tanto nas novilhas INT quanto nas OVX. O número de picos de secreção de LH e amplitude máxima de secreção de LH foi maior (P≤0,05) nas novilhas OVX com o aproximar da primeira ovulação. Os resultados indicam uma diminuição da sensibilidade do hipotálamo aos esteróides gonadais durante o processo de maturação sexual nas novilhas da raça Nelore e a participação alternada de neurotransmissores, inibindo e estimulando a secreção de LH. Concluímos que, em novilhas pré-púberes da raça Nelore o desenvolvimento da retroalimentação positiva aos esteróides gonadais no hipotálamo foi importante para aumentar a secreção de LH antes da primeira ovulação, com a participação de neurotransmissores estimulando ou inibindo a secreção de LH.
The variation on LH secretion after neurotransmitter administration, on the presence or absence of gonadal steroid, was investigated, generating information about the mechanisms evolved on sexual maturation in Nellore heifers. LH concentration was quantified by RIA. As expected ovariectomized heifers higher basal LH concentration (P≤0,05) than intact heifers. The picrotoxin administration (GABA antagonist, 0,18 mg/kg, iv, samples 15 min for 10 h) at 8, 10, 14 and 17 months of age increased (P≤0,05) average concentration and total secretion area on intact treated heifers at 14 months and peak total area and area of highest peal on ovariectomized heifers at 14 and 17 months of age. The dopaminergic antagonist (sulpiride, 0.59 mg/kg, sc, sample 15 min for 10 h) administrated at 8, 12 and 16 months of age decreased (P≤0,05) LH secretion (average levels, total peak area and area of the highest secretion peak) on ovariectomized heifers at 8 months of age. The administration of an alfa-adrenérgic stimulatory (clonidine 10 µg/kg, iv, samples 15 min for 4 h) at 8, 12 and 15 months of age decreased (P≤0,05) decreased the number of peaks at 8 months of age. 17β-estradiol administration (2 µg/kg, iv, samples every 15 min for 3 h, every 1 h for 7 h and every 3 h for 22 h) decreased the differences between ovariectomized and intact heifers on number of peaks, total peak area, highest peak area and time to highest peak occurrence. The LH secretion from weaning to first ovulation in non treated intact and ovariectomized heifers was also evaluated. LH concentration increase during sexual maturation in both ovariectomized and intact heifers. The number of peaks, and maximum LH secretion amplitude was higher in ovariectomized heifer closest to first ovulation, when compared to intact heifers. The results suggested a decrease on hipothalamus sensitivity to gonadal steroid during the sexual maturation in Nelore heifer associated with neurotransmitter participation either stimulating or inhibiting LH secretion. It was possible to conclude that the decrease of negative feedback associated with the increase on positive feedback of gonadal steroids over hipothalamus was necessary to increase LH secretion before first ovulation, that was associated with neurotransmitter participation on LH secretion.

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Junior, Jose Roberto Siqueira. "Filmes automontados de quitosona/ftalocianinas metálicas:caracterização e aplicação em sensores." Universidade de São Paulo, 2006. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/88/88131/tde-18112014-144356/.

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Abstract:

Este trabalho descreve a fabricação de filmes nanoestruturados de quitosana (Q) e metaloftalocianinastetrassulfonadas de níquel (NiTsPc), cobre (CuTsPc) e ferro (FeTsPc) pela técnica de automontagem. A formação dos filmes foi monitorada por espectroscopia na região do UV−vis, focalizando a absorbância da banda Q das metaloftalocianinas. A absorção aumentou linearmente com o número de bicamadas, indicando que a quantidade de metaloftalocianina adsorvida no filme é a mesma a cada bicamada depositada. A espessura média por bicamada variou entre 1,1 e 1,3 nm. Interações específicas nos filmes automontados foram analisadas por espectroscopia FTIR, nos modos de transmissão e reflexão, e Micro−Espectroscopia Raman, evidenciando a formação de interações iônicas entre grupos sulfônicos (SO3− da metaloftalocianina e grupos amina (NH3+) protonados da quitosana. Medidas de voltametria cíclica mostraram que os filmes de QNiTsPc sobre ITO são eletroativos, possuindo um par redox estável, reversível e bem definido em 0,80 V e 0,75 V, respectivamente. A corrente de pico anódica aumentou linearmente com a velocidade de varredura, indicando que a reação eletroquímica é controlada por um mecanismo de transferência de carga na superfície do eletrodo via saltos de elétrons (electronhopping). Entretanto, os filmes automontados de QCuTsPc e QFeTsPc apresentaram comportamentos instáveis e irreversíveis devido à possível formação de espécies agregadas adsorvidas no ITO. A partir dos resultados de voltametria cíclica e UV−vis determinaram−se os parâmetros de energia de gap (Eg), eletroafinidade (EA) e potencial de ionização (IP), mostrando que a energia de transição necessária do nível HOMO para o LUMO foi de 1,7 eV. Os eletrodos com filmes automontados foram utilizados como sensores de dopamina (DA) e ácido ascórbico (AA). Para ambos analitos, as concentrações utilizadas variaram de 5 x 10−6 a 1,5 x 10−4 mol L−1. O filme de QNiTsPc apresentou atividade eletrocalítica, alterando o potencial de oxidação da DA de 1,44 V, em ITO puro, para 0,76 V. Para os filmes de QCuTsPc e QFeTsPc, esse fenômeno não foi observado. O limite de detecção (LD) de DA e a AA foi obtido usando a equação de calibração de cada eletrodo, sendo da ordem de 10−5 mol L−1. O eletrodo com filme de QNiTsPc apresentou maior sensibilidade para ambos analitos. A seletividade dos eletrodos foi testada em soluções contendo AA e DA em diferentes proporções. A distinção entre os picos de oxidação do AA e DA não ocorreu para o filme automontado de QNiTsPc, devido ao efeito eletrocatalítico na oxidação da DA Por outro lado, os filmes de QCuTsPc e QFeTsPc apresentaram comportamento seletivo, distinguindo os picos de oxidação destes analitos. A seletividade apresentada pelo filme de QCuTsPc iniciou−se para concentrações de DA três vezes menor que AA e para o filme de QFeTsPc foi dez vezes menor que a de AA
ThisworkdescribesthefabricationofnanostructuredfilmswiththeLayer−by−layer (LbL) techniqueusingchitosan (Q) andmetallophthalocyaninesofnickel (NiTsPc), copper (CuTsPc) andiron (FeTsPc). The filmgrowthwasmonitoredwith UV−vis spectroscopy, focusingonthe Q−band ofthemetallophthalocyanines. The absorption increased linearly with the number of bilayers, thus pointing to the same amount of phthalocyanine being adsorbed in each bilayer. The average thickness per bilayer varied between 1.1 and 1.3 nm. Specific interactions in the LbL films were analysed with FTIR in transmission and reflection modes and Raman micro−Spectroscopy, which confirmed ionic interactions between the phthalocyanine sulfonic groups (SO3−) and the chitosan amine groups (NH3+). Cyclic voltammograms showed that QNiTsPcLbL films on ITO are electroactive, with a well−defined, stable and reversible redox pair at 0.80 V and 0.75 V. The anodic peak current increased linearly with the scan rate, characteristic of electrochemical reactions controlled by electron hopping on the electrode surface. In contrast, CuTsPc and FeTsPcLbL films showed unstable and irreversible behaviour, probably due to adsorbed aggregated species on ITO. From the UV−VIS. Data and cyclic voltammograms, the energy gap (Eg), electroaffinity (EA) and ionization potencial (IP) were determined, leading to a HOMO−LUMO energy difference of 1.7 eV. Electrodes with LbL films were used for detecting dopamine (DA) and ascorbic acid (AA), in the concentration range from 5 x 10−6 to 1.5 X 10−4mol L−1. QNiTsPcLbL films showed electrocatalytic activity, by shifting the oxidation potential of DA from 1.44 V (for bare ITO) to 0.76 V. This did not occur with QCuTsPc and QFeTsPcLbL films. The limit of detection (LD) of DA and AA was obtained using the calibration equation for each electrode, being of the order to 10−5mol L−1. Electrodes made with QNiTsPcLbL films were the most sensitive. The selectivity of the electrodes was tested by using solutions containing DA and AA in different proportions. There was no distinction between AA and DA oxidation peaks for QNiTsPcLbL films, because of their electrocatalytic effect. On the other hand, using QCuTsPc and QFeTsPcLbL films one could distinguish between the two analytes. Distinction was made possible with QCuTsPcLbL films and DA concentrations three times less than the concentration of AA, while for QFeTsPcLbL films it was possible to distinguish DA concentrations ten times less than that of AA

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Silva, Vinicius Carlos Costa. "Estudo eletroanalítico da dopamina utilizando eletrodo de pasta de carbono produzidos com pó de grafite recoberto por eletrodepósitos de ouro." Universidade Federal de Goiás, 2018. http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/8925.

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Abstract:

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-09-28T14:09:15Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vinicius Carlos Costa Silva - 2018.pdf: 2032136 bytes, checksum: d25ea59456e929f9d6d4588e5f39838d (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)
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Electroanalytical techniques are extensively studied for the quantification of species of biological and pharmacological interest. In general, they present high sensitivity and low costs, which, combined with the possibility of miniaturization and real-time analysis, has generated increasing attention in recent times. This work describes an electroanalytical dopamine research system using voltametric techniques through the application of a modified carbon electrodeposite (EPCM) carbon paste electrode. The electrochemical measurements were performed in a potentiostat using a three electrode system, using a gold electrode as working electrode (EPCM), AgCl electrode as reference and platinum wire as electrode. The kinetics of dopamine oxidation was investigated by cyclic voltammetry and by square wave voltammetry using EPCM in dopamine standard solution, without and with sodium metabisulfite (additive present in the drug). By cyclic voltammetry, different scanning velocities were used as a methodology to identify the type of kinetic control, whereas square wave voltammetry was used, with the use of factorial design, to investigate how the gold electrodeposing variables influence the oxidation of DA. he effect of the pH of the medium was also investigated, using phosphate buffer at different pH. Furthermore, under optimized conditions the effect of various concentrations of DA was investigated in order to obtain an analytical curve. The results show by means of measurements by cyclic voltammetry in solutions of DA with and without metabisulfite, that the anodic current of the DA increases from potentials more positive than +0,225 V, with a peak at +0,320. Factorial design observed that sodium metabisulfite significantly decreased the peak current for oxidation of DA. In quadra wave voltammograms for EPCM in phosphate buffer solutions pH 7 containing dopamine and sodium metabisulfite, it is observed that the peak oxidation of dopamine occurs at +0.195 V, while the oxidation of the metabisulfite occurs at approximately +0.834 V. In the study of the pH effect it is verified that an increase of the current occurs when the pH value is above 6.0, while the oxidation potential of the dopamine shifts to more negative values from pH 2, having a sigmoid relation. In the parameter effect of the concentration it was possible to conclude that using this type of modification (gold electrodeposits) showed an improvement in the peak currents when compared to the unmodified electrode. The linearity ranges obtained using EPCM were 3.17 × 10-5 - 1.06 × 10-4, but it was not possible to obtain an ideal calibration curve for the determination of dopamine.
As técnicas eletroanalíticas são amplamente estudadas para quantificação de espécies de interesse biológico e farmacológico. De modo geral, apresentam alta sensibilidade e baixos custos, o que, aliado à possibilidade de miniaturização e análise em tempo real, tem gerado atenção crescente nos últimos tempos. Este trabalho descreve um sistema eletroanalítico de investigação de dopamina utilizando técnicas voltametricas através da apliacação de um eletrodo de pasta de carbono modificado com eletrodepositos de ouro (EPCM). As medidas eletroquímicas foram realizadas em um potenciostato utilizando um sistema de três eletrodos, empregando eletrodo de ouro como eletrodo de trabalho (EPCM), eletrodo de AgCl como referência e fio de platina como contra eletrodo. A cinética de oxidação de dopamina foi investigada por voltametria cíclica e por voltametria de onda quadrada utilizando o EPCM em solução padrão de dopamina, sem e com metabissulfito de sódio (aditivo presente no medicamento). Por voltametria cíclica foi utilizada diferentes velocidades de varredura como metodologia para identificar o tipo de controle cinético, enquanto que a voltametria de onda quadrada foi empregada, com uso de planejamento fatorial, para investigar como as variáveis de eletrodeposição de ouro influenciam sobre a oxidação de DA. Também foi investigado o efeito do pH do meio, utilizando-se tampão fosfato a diferentes pH. Além disso, sob condições otimizadas foi investigado o efeito de várias concentrações de DA, com a finalidade de se obter uma curva analítica. Os resultados mostram através das medidas por voltametria cíclica em soluções de DA com e sem metabissufito, que a corrente anódica da DA aumenta a partir de potenciais mais positivos que +0,225 V, apresentando um pico em +0,320. Diante do planejamento fatorial observou que o metabissulfito de sódio diminui significativamente a corrente de pico para oxidação da DA. Nos voltamogramas de onda quadra para o EPCM nas soluções tampão fosfato pH 7 contendo dopamina e metabissulfito de sódio, observa-se que o pico de oxidação da dopamina ocorre em +0,195 V, enquanto que a oxidação do metabissulfito ocorre em aproximadamente +0,834 V. No estudo do efeito do pH verifica-se que ocorre um aumento da corrente quando o valor de pH está acima de 6,0, enquanto que o potencial de oxidação da dopamina desloca para valores mais negativos desde o pH 2, tendo uma relação sigmoide. No parâmetro efeito da concentração foi possível concluir que utilizando este tipo de modificação (eletrodepósitos de ouro) mostrou uma melhora no aumento das correntes de pico quando comparado com o eletrodo não modificado. As faixas de linearidade obtidas utilizando o EPCM foram de 3,17 × 10-5 – 1,06 × 10-4, porém não foi possível obter uma curva de calibração ideal para a determinação da dopamina.

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Molero, Luis Marta. "Biomarcadors del metabolisme de la dopamina en alteracions neurològiques en la infància." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2014. http://hdl.handle.net/10803/145760.

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Abstract:

En el sistema nerviós central (SNC) la dopamina es comporta com la catecolamina prototip controlant el moviment i l’estat de motivació de l’individu, així com l’alliberació de prolactina. L’objectiu principal d’aquesta tesi doctoral ha estat estudiar la utilitat de tres biomarcadors relacionats amb el metabolisme de la dopamina (àcid homovaníl•lic, les pterines i el piridoxal fosfat) com a eines pel diagnòstic i la investigació de malalties neurològiques en la infància. La tesi ha estat estructurada en tres objectius, i per tant en tres treballs. En el primer treball, es va avaluar la utilitat de l’àcid homovaníl•lic, el metabòlit principal i més estable de la dopamina, per estudiar l’estat dopaminèrgic. El seu ús com a biomarcador en el líquid cefaloraquidi (LCR) ens ha permès diagnosticar varis errors congènits del metabolisme en els últims anys. No obstant això, la necessitat d’aquest estudi va originar-se pel fet que hi ha molts pacients amb simptomatologia de deficiència dopaminèrgica que romanen sense un diagnòstic definitiu confirmat. La descripció d’aquests pacients des d’un punt de vista bioquímic, buscant associacions amb les característiques clíniques, radiològiques i electrofisiològiques ens ha permès millorar el coneixement científic respecte aquest marcador bioquímic en l’àmbit neuropediàtric. Seguint en l’avaluació del metabolisme de la dopamina, cal remarcar el paper essencial que tenen els cofactors tetrahidrobiopterina i vitamina B6 en el metabolisme dopaminèrgic. Les alteracions quantitatives d’aquests cofactors també poden provocar deficiències en la via dopaminèrgica i, per tant, també tenen un important valor a la hora d’estudiar aquests pacients. D’altra banda, s’ha demostrat el paper que té la neopterina (metabòlit de la tetrahidrobiopterina) com a marcador bioquímic en LCR en el diagnòstic de processos immuno-inflamatoris del SNC. D’aquí neix el plantejament del segon treball, la finalitat del qual és estudiar les pterines (neopterina i biopterina) com a eina d’ajut en pacients neurològics sense un diagnòstic confirmat però que presenten alteracions en el valor de pterines en LCR. Alteracions que poden estar associades a malalties genètiques d’aquest cofactor o bé causades per processos immuno-inflamatoris. Finalment l’últim treball es basa en la utilitat de quantificar els valors del cofactor que participa en l´últim pas de la síntesi dopaminèrgica, el piridoxal fosfat (la forma activa de la vitamina B6). Les seves deficiències poden provocar trastorns marcats de la síntesis de dopamina, però també d’altres metabòlits, com aminoàcids o l’àcid gamma-aminobutíric. Clínicament, aquests pacients presenten greus alteracions neurològiques sent l’epilèpsia refractària als anticonvulsivants habituals, la simptomatologia més freqüent. La necessitat d’aquest treball esdevé en què hi ha varis pacients que presenten deficiències de piridoxal fosfat els quals han respòs favorablement a suplements de vitamina B6. Els diferents estudis que s’han presentat en aquesta tesi s’han realitzat en pacients procedents del Hospital Sant Joan de Déu, però també d’altres hospitals nacionals i internacionals, entre els quals n’hi ha de Portugal, Argentina, Grècia, Turquia i la Índia. La col•laboració amb altres serveis del nostre hospital ha donat un component traslacional als tres treballs presentats en aquesta tesi, que inclouen dades clíniques, bioquímiques i moleculars, aportant un aspecte més holístic i tenint una aplicació pràctica i valuosa per l’estudi de pacients amb malalties neuropediàtriques greus.
Our objective was to study the utility of three biomarkers related to dopamine metabolism (homovanillic acid (HVA), pterins and pyridoxal phosphate (PLP)) as a diagnostic and investigation tool of neurologic disorders in infancy. In the first study our objective was to determine and assess the HVA concentrations in cerebrospinal fluid (CSF) in a large neuropediatric cohort as a biochemical tool to identify dopaminergic abnormalities. To achieve this aim, we studied biogenic amines in 1388 CSF samples from children with neurological disorders analysed by high pressure liquid chromatography with electrochemical detector. This study allowed us to determine the prevalence of dopaminergic abnormalities, as well as we defined several neurologic diseases with CSF HVA abnormalities, besides from 21 primary dopaminergic defects. In the second study, our objective was to analyse the CSF pterins (neopterin and biopterin) concentrations in children with neurologic disorders to identify primary or secondary diseases about these coenzymes. We also evaluated the CSF neopterin utility as a biomarker in inflammatory-immune mediated processes establishing a new cut-off for it. After that, the next step was to assess data from 606 neuropediatric patients presenting CSF neopterin values above or below the new established cut-off value. Finally, our last study was to analyse the CSF PLP concentrations in neuropediatric patients without an aetiological diagnosis in order to identify primary or secondary diseases related to PLP metabolism. After the analyses of PLP in CSF of 147 patients, we detected our first PNPO gene defect. Moreover, we recruited a series of 10 patients who disclosed low-normal CSF PLP values, that the main clinical feature was epilepsy. Additionally we also assessed the response to PLP treatment in all of them. These different studies have been performed in patients from Hospital Sant Joan de Déu, as well as from other national and international hospitals, such as Portugal, Argentina, Greece, Turkey and India. Moreover, the collaboration with other services of our hospital has allowed this thesis to have a holistic component including clinical, radiological, biochemical and molecular data.

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PAES, PAULO C. de A. "Aspectos das liberacoes de dopamina e acetilcolina mediadas por receptores de glutamato." reponame:Repositório Institucional do IPEN, 2002. http://repositorio.ipen.br:8080/xmlui/handle/123456789/11023.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:47:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Made available in DSpace on 2014-10-09T14:10:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 07976.pdf: 1699700 bytes, checksum: 1ecc44195023300aaef5127a99a940de (MD5)
Dissertacao (Mestrado)
IPEN/D
Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

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Nunes, Bruno de Almeida. "ANÁLISE DA EXPRESSÃO DOS RECEPTORES DA SOMATOSTATINA (SST1-5) E DA DOPAMINA (DR2) EM ADENOMAS HIPOFISÁRIOS." Universidade Federal do Maranhão, 2012. http://tedebc.ufma.br:8080/jspui/handle/tede/1174.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2016-08-19T18:16:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Bruno.pdf: 2654529 bytes, checksum: 8a96ae87802691862664f63085d257f5 (MD5) Previous issue date: 2012-03-12
FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO
Pituitary tumors represent 15% of intracranial neoplasms and are usually benign. The treatment primary is surgical resection with exception for prolactinomas because dopamine agonists are very effective in the treatment these tumors. If surgery does not lead to healing, it is necessary other therapeutic strategy in a attempt to control hormone levels and tumor size reduction. The radiotherapy and medical treatment with somatostatin analogs and agonist dopamine are often used. The study aimed to analyze the presence, distribution and frequency of somatostatin receptor and dopamine receptor (DR2) in pituitary adenomas, and compared their mRNA expression and protein expression. We studied 38 patients with pituitary adenomas. The GH-secreting adenomas showed immunoreactivity more frequent SST2 and SST3 present in 100% of the tumors followed SST5, SST4 and SST1 respectively. Clinically nonfunctioning adenomas SST3 receptor was most widely distributed, present in 13 of 14 tumors followed SST2, SST4, SST1 and SST5 respectively. The mRNA expression of SST2 and SST5 receptor was present in all pituitary adenomas with higher expression of SST2. The DR2 receptor was present and 85% of samples analyzed. In conclusion, the high expression of SST2 in somatotropinomas support the possibility of the use of octreotide as an adjunct therapy in the treatment of acromegalic patients. Patients with clinically nonfunctioning adenomas showed expression of somatostatin receptor and dopamine which indicates the possibility of treating these patients with the somatostatin analogues and / or dopamine agonists.
Os tumores hipofisários correspondem por cerca de 15% das neoplasias intracranianas e são geralmente benignos. O tratamento primário mais comumente utilizado é a cirurgia com exceção para os prolactinomas, devido a eficácia do tratamento com a utilização de agonistas dopaminérgicos. Caso o resultado cirúrgico não leve a ressecção da doença, faz-se necessário o uso de outras modalidades terapêuticas, na tentativa de controlar os níveis hormonais e crescimento tumoral. A radioterapia e o tratamento medicamentoso com os análogos da somatostatina e/ou os agonistas dopaminérgicos são frequentemente utilizados como tratamento adjuvante. O presente estudo teve por objetivo analisar a presença, distribuição e frequência dos receptores da somatostatina e da dopamina (DR2) em adenomas hipofisários e comparar as suas expressões do mRNA e proteicas, através de testes por qPCR em tempo real e por imunohistoquímicos. Foram analisados 38 pacientes diagnosticados com adenomas hipofisários. Os adenomas secretores de GH apresentaram imunoreatividade mais frequente dos receptores SST2 e SST3, presentes em 100% dos tumores, seguidos pelos receptores SST5, SST4 e SST1, respectivamente. Nos adenomas clinicamente não funcionantes o receptor mais amplamente distribuído foi o SST3, presente em 13 dos 14 tumores seguidos pelo SST2, SST4, SST1 e SST5 respectivamente. A expressão do mRNA dos receptores SST2 e SST5 estava presente em todos os adenomas hipofisários estudados, com maior expressão do subtipo SST2. A expressão do mRNA do receptor DR2 foi encontrada em aproximadamente 85% das amostras analisadas. Em conclusão, a elevada expressão do SST2 nos somatotropinomas reforça a possibilidade do uso do octreotide como terapia complementar no tratamento dos pacientes acromegálicos. Os pacientes com adenomas clinicamente não funcionantes apresentaram expressão dos receptores da somatostatina e da dopamina o que indica a possibilidade de tratamento destes pacientes com os análogos da somatostatina e/ou agonistas dopaminérgicos.

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Araujo, Stífani Machado. "Efeito protetor do γ-orizanol em um modelo de doença de parkinson induzida por rotenona em Drosophila melanogaster." Universidade Federal do Pampa, 2016. http://dspace.unipampa.edu.br:8080/xmlui/handle/riu/313.

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Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-18T18:12:36Z No. of bitstreams: 1 Stífani Machado Araujo.pdf: 2701104 bytes, checksum: db0f252b8e5b648fd9a2f147be16081a (MD5)
Made available in DSpace on 2016-04-18T18:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stífani Machado Araujo.pdf: 2701104 bytes, checksum: db0f252b8e5b648fd9a2f147be16081a (MD5) Previous issue date: 2016-02-19
Doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais comum no mundo, afetando cerca de 1% dos adultos com mais de 60 anos. A DP está relacionada com a degeneração de neurônios dopaminérgicos principais componentes da substância negra cerebral, concomitantemente, com a disfunção do complexo I mitocondrial e o estresse oxidativo que desempenham um papel crucial na patogênese desta doença. A rotenona (ROT) é um pesticida natural e muito utilizado para induzir fenótipo de DP em modelos animais, por ser lipofílico pode atravessar facilmente a barreira hematoencefálica causando disfunção do complexo I mitocondrial e possível morte de neurônios dopaminérgicos. Dentre as várias aplicações terapêuticas dos antioxidantes, ressalta-se sua ação neuroprotetora, uma vez que o sistema nervoso central exibe uma maior vulnerabilidade e susceptibilidade aos insultos oxidativos, o γ-orizanol (ORY) é um produto natural composto por uma mistura de ésteres de ácido ferúlico extraídos a partir do óleo de farelo de arroz, e é bem descrito na literatura por possuir propriedades antioxidantes. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar um possível efeito neuroprotetor do γ-orizanol sobre alterações comportamentais e bioquímicas causadas pela exposição crônica de Drosophila melanogaster a rotenona. A mosca da fruta Drosophila melanogaster, é uma espécie alternativa à utilização de modelos mamíferos que vem sendo usada com bastante confiabilidade na reprodução de modelos de disfunção dopaminérgica. As moscas (de ambos os sexos) com idades compreendidas entre 1 a 5 dias de idade foram divididos em quatro grupos de 50 moscas cada um: (1) de controle, (2) ORY 25 μM, (3) ROT 500 μM, (4) ORY 25 μM + ROT 500 μM. As moscas foram concomitantemente expostos a uma dieta contendo ROT e ORY durante 7 dias de acordo com os seus respectivos grupos. Após o tratamento foram feitas as analises comportamentais e bioquimicas. Como resultados, verificamos que o ORY ofereceu proteção contra as alterações locomotoras causadas por ROT, além de prevenir a mortalidade induzida por rotenona, protegeu contra geração de estresse oxidativo e disfunções mitocondriais além de otimizar as defesas antioxidantes celulares. Nossas descobertas apontam uma restauração dos déficits colinérgicos, e nos níveis de dopamina fornecida por pelo tratamento com ORY. Em conclusão, os presentes resultados mostram que ORY é eficaz na redução da toxicidade induzida ROT em Drosophila melanogaster, o que mostrou uma ação neuroprotetora, possivelmente devido à presença dos componentes de antioxidantes tais como o ácido ferúlico.
Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease in the world, affecting about 1% of adults over 60 years. The DP is linked to the degeneration of dopaminergic neurons main components of the substantia nigra brain, concurrently with mitochondrial complex I dysfunction and oxidative stress play a crucial role in the pathogenesis of this disease. The rotenone (ROT) is a natural pesticide, and used to induce PD phenotype in animal models, being lipophilic can easily cross the blood-brain barrier dysfunction causing mitochondrial complex I and possible death of dopaminergic neurons. Among the various therapeutic applications of antioxidants, it emphasizes its neuroprotective action, as the central nervous system displays a greater vulnerability and susceptibility to oxidative insults, the γ-oryzanol (ORY) is a natural product composed of a mixture of esters ferulic acid derived from rice bran oil, and is well described in the literature to possess antioxidant properties. The objective of this study was to investigate a possible neuroprotective effect of ORY on behavioral and biochemical changes caused by chronic exposure of Drosophila melanogaster the rotenone. The fly fruit Drosophila melanogaster, is an alternative species to the use of mammalian models that have been used quite reliable reproduction of dopaminergic dysfunction models. The flies (male and female) between the ages of 1 to 5 days of age were divided into four groups of 50 flies each: (1) control, (2) ORY 25 μM, (3) ROT 500 μM ( 4) ORY 25 μM + ROT 500 μM. The flies were simultaneously exposed to a diet containing ROT and ORY for 7 days according to their respective groups. After treatment were made behavioral and biochemical analysis. As a result, we find that the ORY offered protection against locomotor changes caused by ROT, and to prevent the mortality induced by rotenone, protected against the generation of oxidative stress and mitochondrial dysfunction and optimize cellular antioxidant defenses. Our findings point to a restoration of cholinergic deficits, and dopamine levels provided by the treatment ORY. In conclusion, the present results show that ORY is effective in reducing the ROT induced toxicity in Drosophila melanogaster, which showed a neuroprotective effect, possibly due to the presence of antioxidants components such as ferulic acid.

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Barbosa, Marta Cristina Fornelos. "Sistema Nervoso Central: planeamento químico-farmacológico para obtenção de um novo alvo terapêutico para a doença de Parkinson." Master's thesis, [s.n.], 2012. http://hdl.handle.net/10284/3205.

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Trabalho apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte integrante dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências Farmacêuticas
O presente trabalho pretende seguir uma linha de investigação pré-laboral, mas de enorme potencial devido à possibilidade de apresentar uma significativa redução nos custos aquando do lançamento de uma nova solução terapêutica. O trabalho será desenvolvido na área do sistema nervoso central (SNC) e a doença abordada será a doença de Parkinson. No decorrer deste trabalho irá ser feito uma abordagem ao tratamento farmacológico da DP, e realizado um estudo químico-farmacológico de potenciais novos inibidores da COMT. A Doença de Parkinson (DP) é uma patologia cerebral em que ocorre morte dos neurónios numa zona do cérebro designada de substância negra. É a segunda doença neurodegenerativa mais frequente depois da doença de Alzheimer. This work intends to pursue a line of pre-employment investigation, but with great potential due to the possibility of presenting a significant cost reduction at the launch of a new therapeutic solution. The work will be developed in the area of the central nervous system (CNS) and the disease discussed will be Parkinson's disease. We will make an approach to the pharmacological treatment of PD, and we will conduct a chemical and pharmacological study of potential new COMT inhibitors. Parkinson's disease (PD) is a brain pathology in which occurs neuronal death in an area of the brain called substantia nigra. It is the second most common neurodegenerative disorder after Alzheimer's disease.

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Gutmann, Patrícia Andréia Dombrowski. "Estudo do efeito da lesão da substância Negra Pars Compacta sobre a liberação de dopamina no estriado de ratos durante o teste de rotação e durante o treino na tarefa de esquiva ativa de duas vias." reponame:Repositório Institucional da UFPR, 2010. http://hdl.handle.net/1884/24848.

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Abstract:

Resumo: Os prejuízos motores observados na Doença de Parkinson (DP) aparecem somente depois da perda de mais de 70% da dopamina (DA) estriatal. No presente trabalho, usamos ratos que receberam uma infusão unilateral da neurotoxina 1- methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyrindine (MPTP) na substância negra parte compacta (SNc) e perderam em torno de 50% da DA estriatal como um modelo da fase inicial dessa doença. Embora esses animais não apresentem alterações motoras, eles rodam em direção ao lado lesado quando desafiados com drogas dopaminérgicas, como a apomorfina e a anfetamina. Este estudo tem como objetivo testar se isso ocorre porque essas drogas rompem os mecanismos compensatórios que mantêm inalterado o nível extracelular de DA no estriado (DAE). Esta hipótese foi então testada em um estudo de microdiálise in vivo de liberação de DA no estriado de ratos MPTP. Ratos MPTP que não receberam nenhum tratamento farmacológico não apresentaram comportamento rotatório e seu nível basal não se alterou. Contudo, depois do tratamento com a apomorfina, o DAE diminuiu em ambos os lados do animal MPTP, sendo dessa diminuição ainda mais acentuada no lado lesado apenas durante o tempo em que os animais apresentaram o comportamento rotatório ipsiversivo. Depois do tratamento com a anfetamina, o DAE aumentou em ambos os lados, se tornando significativamente maior no lado nãolesado, isso também coincidindo com o tempo em que os animais começaram o comportamento rotatório ipsiversivo. Estes resultados estão de acordo com a hipótese de que a ausência de alterações motoras em ratos que mimetizam o modelo da fase inicial da DP depende da manutenção do DAE por mecanismos compensatórios. Assim como os pacientes na fase inicial da DP, estudos anteriores mostram que os ratos MPTP apresentam éficits cognitivos. Sabe-se que a DA tem um papel importante na recompensa e em outros comportamentos motivados, mas é ainda controverso se a sua função é codificar o valor hedônico dos estímulos, odificar a sua saliência, ou promover a aprendizagem. A segunda parte deste estudo teve por objetivo testar a hipótese de que a DA é liberada no estriado para promover o aprendizado, a qual implica que: (i) sua iberação no estriado aumenta durante a aprendizagem; (ii) esse aumento ocorre somente quando o aprendizado é possível; (iii) depois de aprendida uma tarefa, os mesmos estímulos que promoveram aprendizado não mais causam o aumento na liberação de DA; (iv) a aprendizagem é prejudicada por tratamentos que diminuam a liberação de DA ou bloqueiem os seus receptores. Essas predições também foram testadas por um estudo de microdiálise in vivo. Ratos controle e MPTP foram treinados para associar uma dica preditiva (som) com uma ação capaz de evitar um choque nas patas. Nós pudemos observar que: (i) o DAE aumentou durante o aprendizado; (ii) depois do aprendizado, o som e o choque não mais causaram o aumento do DAE; (iii) esse aumento não ocorreu quando o som e o choque foram apresentados de uma maneira imprevisível, não pareada e inescapável; (iv) a quantidade de DA liberada no estriado predizia o aprendizado; (v) o aprendizado não ocorreu em animais com uma lesão nos neurônios DA mesencefálicos ou tratados com antagonistas dos receptores dopaminérgicos. Este estudo apresenta evidências de que, pelo menos durante o aprendizado na esquiva ativa de 2-vias, a DA é liberada no estriado para promover o aprendizado. Em conjunto esses estudos sugerem que na fase inicial da DP os pacientes não apresentam déficits motores porque uma população de neurônios dopaminérgicos remanescentes consegue manter os níveis basais de DA no estriado. Esse estudo sugere também que os déficits cognitivos observados nesses pacientes resultam da incapacidade desses neurônios de atender a uma demanda por uma grande liberação de DA necessária para promover a aprendizagem.

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Negrelli, Bernadete. "Efeito do haloperidol sobre a escolha entre respostas com diferentes probabilidades de reforço." reponame:Repositório Institucional da UFPR, 2017. http://hdl.handle.net/1884/47565.

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Orientador : Prof. Dr. Cláudio da Cunha
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 30/03/2017
Inclui referências : f. 25-34
Resumo: A esquizofrenia é um transtorno mental grave que se manifesta em sintomas positivos (delírios e alucinações), sintomas negativos (anedonia, isolamento social) e déficits cognitivos (memória de trabalho, atenção, habilidades sociais). Alguns sintomas da esquizofrenia estão associados ao aumento da atividade dopaminérgica e expressão de receptores D2 estriatais. Há evidências de que a transmissão dopaminérgica está envolvida com o aprendizado e expressão do aprendizado por eventos que envolvem recompensa, pois a liberação fásica de dopamina quando o evento é melhor do que o esperado (erro de predição positivo) reforça as sinapses dos neurônios corticais e quando o evento é pior do que o esperado (erro de predição negativo) há um enfraquecimento dessas sinapses. As disfunções dopaminérgicas causam efeitos sobre o sistema de recompensa que podem desencadear os sintomas da esquizofrenia, sendo que uma hiperfunção domipaminérgica no estriado está relacionada com os efeitos positivos da esquizofrenia e uma hipofunção dopaminérgica no córtex préfrontal está associada com sintomas negativos e déficits cognitivos. Os antipsicóticos atuam principalmente antagonizando os receptores D2 de dopamina no cérebro. Eles tem se mostrados eficientes para tratar os sintomas positivos da esquizofrenia, mas podem não causar nenhum efeito ou até mesmo agravar os sintomas negativos e déficits cognitivos. Além disso, estudos anteriores tem demonstrado que os antipsicóticos causam prejuízos no comportamento baseado em recompensa por diminuírem a excitação motivacional, que é crucial para objetivos dirigidos a metas. Por isso, nesta dissertação investigamos se a administração do antipsicótico haloperidol causa distúrbios no comportamento de ratos treinados em uma tarefa probabilística em um labirinto em Y por interromper o aprendizado adquirido com previsão de recompensa e erros de predição. Os animais foram treinados a entrar mais vezes em um dos braços do labirinto, sendo que havia 70% de chance de encontrar recompensa em um dos braços e 30% em outro. Após os animais estarem treinados nesta tarefa, foram divididos em 4 grupos e diferentes doses de haloperidol (0,05mg/Kg, 0,10mg/Kg, 0,15mg/Kg e salina), foram administradas em cada grupo. Verificamos que houve uma redução dose-dependente nos resultados no número de escolha do braço mais reforçado; aumento dose-dependente na latência para escolher um dos braços e para alcançar a recompensa e aumento na perseverança ao erro. Concluímos que os resultados sugerem que o haloperidol causa déficits na expressão do aprendizado anteriormente aprendido e reduz a motivação para respostas motoras, corroborando com a hipótese de que os antipsicóticos como o haloperidol, por atuar antagonizando os receptores D2 de dopamina, podem aumentar os sintomas negativos e déficits cognitivos em seus usuários. Palavras-chave: Dopamina; Haloperidol; Motivação; Cognição.
Abstract: Schizophrenia is a serious mental disorder manifested in positive symptoms (delusions and hallucinations), negative symptoms (anecdote, social isolation) and cognitive deficits (work memory, attention, social skills). Some symptoms of schizophrenia are associated with increased dopaminergic activity and expression of striatal D2 receptors. There is evidence that dopaminergic transmission is involved in the learning and expression of reward-learning events, since the phasic release of dopamine when the event is better than expected (positive prediction error) reinforces the synapses of cortical neurons and When the event is worse than expected (negative prediction error) there is a weakening of these synapses. Dopaminergic dysfunctions cause effects on the reward system that can trigger the symptoms of schizophrenia, and a dopaminergic hyper function in the striatum is related to the positive effects of schizophrenia, and a dopaminergic hypofunction in the prefrontal cortex is associated with negative symptoms and cognitive deficits. Antipsychotics work primarily by antagonizing D2 dopamine receptors in the brain. They have been shown to be effective in treating the positive symptoms of schizophrenia but may not cause any effect or even aggravate negative symptoms and cognitive deficits. In addition, previous studies have shown that antipsychotics cause prejudice in reward-based behavior by diminishing motivational excitement, which is crucial for goal-directed goals. Therefore, in this dissertation we investigated whether the administration of the antipsychotic haloperidol causes disturbances in the behavior of trained rats in a probabilistic task in a Y labyrinth by interrupting the acquired learning with prediction of reward and prediction errors. The animals were trained to enter more often in one of the arms of the labyrinth, being that there was a 70% chance to find reward in one of the arms and 30% in another. After the animals were trained in this task, they were divided into 4 groups and different doses of haloperidol (0.05mg / kg, 0.10mg / kg, 0.15mg / kg and saline) were administered in each group. We verified that there was a dose-dependent reduction in the results in the number of choice of the most reinforced arm; dose-dependent increase in latency to choose one of the arms and to achieve reward and increase in perseverance to error. We conclude that the results suggest that haloperidol causes deficits in the expression of previously learned learning and reduces motivation for motor responses, corroborating the hypothesis that antipsychotics such as haloperidol, by acting antagonizing dopamine D2 receptors, may increase negative symptoms and cognitive deficits in their users. Palavras-chave: Dopamine; Haloperidol; Motivation; Cognition.

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Winter, Eduardo. "Estudo do comportamento eletroquimico de aminas biogenicas na presença de carboxilatos utilizando eletrodo de gota pendente de mercurio." [s.n.], 2003. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/249414.

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Orientador: Susanne Rath
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica
Made available in DSpace on 2018-08-03T18:14:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Winter_Eduardo_M.pdf: 5365181 bytes, checksum: 84032878570ec5b4614bd23baf5bc494 (MD5) Previous issue date: 2003
Mestrado

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Schuh, Artur Francisco Schumacher. "Estudo de fatores clínicos e genéticos associados à variabilidade da resposta farmacológica à terapia dopaminérgica na doença de Parkinson." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2014. http://hdl.handle.net/10183/104805.

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Abstract:

A doença de Parkinson (DP) é a segunda enfermidade neurodegenerativa mais frequente e acomete cerca de 1 a 3% das pessoas acima de 65 anos. Com a expectativa de envelhecimento da população, espera-se um aumento proporcional da prevalência desta doença, o que justifica uma preocupação crescente com o manejo desses pacientes. O tratamento da DP consiste no uso de medicamentos que proporcionam estímulo dopaminérgico, principalmente a levodopa, o que possibilita um controle quase ótimo dos sintomas motores nos primeiros anos de uso. Entretanto, em aproximadamente cinco anos, cerca de metade dos pacientes apresentarão complicações (motoras ou não-motoras) induzidas pelo uso crônico destas medicações, o que determina piora da qualidade de vida. O presente trabalho tem por objetivo investigar fatores genéticos e não-genéticos associados às principais complicações induzidas pela terapia dopaminérgica (flutuação motora, discinesia e alucinação visual) e demanda dopaminérgica (dose equivalente de levodopa). Duzentos e vinte e cinco pacientes com doença de Parkinson idiopática em acompanhamento no Serviço de Neurologia do Hospital de Clínicas de Porto Alegre concordaram em participar do estudo e assinaram Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. A avaliação clínica consistiu de entrevista estruturada, exame neurológico, aplicação de escalas e revisão de dados de prontuário. Foram obtidas amostras de sangue periférico e estudados polimorfismos nos genes da COMT, DAT e HOMER1 através da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real ou por PCR seguido por análise de fragmentos de enzimas de restrição (RFLP). Os resultados mostraram que pacientes com queixa de tremor como primeiro sintoma motor da doença possuem menor chance de apresentarem complicações motoras induzidas por levodopa, especialmente discinesia (P = 0,005). Esses mesmos pacientes mostraram escores de tremor maiores na avaliação presente (P < 0,001), consolidando a hipótese de que uma informação histórica simples pode predizer fenótipos futuros e resposta farmacológica. Alucinação visual foi associada com o alelo C do polimorfismo rs2652511 do gene DAT (P = 0,02) e com o alelo 158Met do polimorfismo Val158Met do gene COMT (P = 0,02). Menor demanda dopaminérgica foi observada em pacientes portadores do alelo de 9 repetições da variação de número de repetições em tandem (VNTR) de 40 pares de base da região 3' do DAT (P = 0,01). Verificou-se ainda que o alelo G do polimorfismo rs4704559 do gene HOMER1 apresentou um efeito protetor tanto para discinesia quanto para alucinação visual (P = 0,009 e P = 0,02, respectivamente). Os resultados obtidos sugerem que a farmacogenética pode fornecer informações importantes relacionadas com a variabilidade da resposta ao tratamento na doença de Parkinson e contribuir para a busca de uma terapia farmacológica individualizada.
Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disorder and affects approximately 1-3 % of subjects older than 65 years. Since its prevalence increase with ageing and considering that our population is getting older, the management of these patients is a matter of concern. The pharmacological treatment of PD consists in the use of drugs that provide dopaminergic stimulation, especially levodopa. It provides an almost optimal control of motor symptoms in the first years of treatment. However, in five years, about half of patients will develop complications (motor and non motor) induced by chronic use of these medications. The present study aims to investigate the development of complications induced by dopaminergic therapy (motor fluctuations, dyskinesia and visual hallucinations) and dopaminergic demand (equivalent dose of levodopa) in relation to genetic and non-genetic factors. Two hundred and twenty five patients with idiopathic Parkinson's disease followed at the Neurology Section of the "Hospital de Clinicas de Porto Alegre" agreed to participate in the study and signed a consent form. Clinical evaluation consisted of a structured interview, neurological examination, standardized scales and review of medical records. Peripheral blood samples were obtained and polymorphisms in COMT, DAT and HOMER1 genes were determined by polymerase chain reaction (PCR) real-time or through PCR followed by analysis of restriction enzyme length polymorphisms (RFLP). The results showed that patients who complain of tremor as the first motor symptom are less likely to experience levodopa motor complications, especially dyskinesia (P = 0.005). These same patients showed higher tremor scores at the time of evaluation (P < 0.001), reinforcing the hypothesis that a simple historical information can predict future phenotypes and pharmacological response. Visual hallucinations were associated with DAT rs2652511 C allele (P = 0.02) and also with COMT 158Met allele (P = 0.02). Carriers of the 9 repeat allele of the 40 base pairs variable number tandem repeat (VNTR) at DAT 3' region showed lower dopaminergic demand (P = 0.01). The G allele of HOMER1 rs4704559 polymorphism was associated with lower prevalence of both diskynesia and visual hallucinations (P = 0.009 e P = 0.02, respectively). The present results suggest that pharmacogenetics might provide important information for better understanding the variability of pharmacological response in Parkinson's disease and could contribute to the pursuit of an individualized therapy.

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Camarini, Rosana [UNIFESP]. "Sensibilização ao efeito estimulante do etanol: influência dos sistemas dopaminérgico, opióide e glutamatérgico." Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1997. http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/15497.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2015-12-06T22:59:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1997
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Associação Fundo de Incentivo à Psicofarmacologia (AFIP)
BV UNIFESP: Teses e dissertações

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Landuci, Felipe Schwahofer. "Efeitos da aplicação de implantes de um análogo do LHRH associado à domperidona na maturação gonadal do robalo-flecha (Centropomus undecimalis) em cativeiro." Florianópolis, 2012. http://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/100848.

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Abstract:

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Aquicultura
Made available in DSpace on 2013-06-25T23:14:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 305590.pdf: 3156597 bytes, checksum: 22c41ed01abbb3bc81b0dca5dfe12dea (MD5)
Para obtenção de larvas do robalo-flecha, C. undecimalis em laboratório, a maturação dos reprodutores é um processo fundamental. Desta forma pretende-se avaliar o efeito na gametogênese, de implantes Etileno Vinil Acetato, contendo um analogo do hormônio LHRH e um antagonista de dopamina (Domperidona). Foram utilizados 18 peixes marcados com microchip, mantidos em um tanque circular de 36 m³ com controle de temperatura e fotoperíodo em sistema de recirculação. Foram realizados dois tratamentos em duplicata: implantes contendo 100 µg de LHRH + 5 mg de DOM kg-1; implantes contendo 100 µg de LHRH kg-1 e tratamento controle com implante sem hormonio. A temperatura foi mantida em 27 ºC e após os implantes sofreu um acréscimo de 0,1 ºC a cada 24 h, até atingir 29 ºC. A salinidade foi mantida em 35#. Foram realizadas biopsias ovarianas em fêmeas e massagem abdominal em machos, no momento do implante e também após um período de vinte dias e cinqüenta dias. Em conjunto foram tomadas amostras de sangue para análise de eritrócitos e esteróides sexuais. Os resultados indicam que não há controle da dopamina no processo de maturação sexual. Para fêmeas o implante agiu como um acelerador da maturação, sem entanto agir como um iniciador da vitelogênese. Para machos não foram notadas melhorias nos aspectos volume de sêmen, motilidade do sêmen e tempo de motilidade do sêmen em funções dos tratamentos. Os valores plasmáticos do esteroide estradiol corroboram com a classificação sexual através da histologia. A liberação continua e prolongada por parte do implante EVAc não foi capaz de suprir o estimulo inicial necessário para a desova, demonstrando ser necessário, para este tipo de implante, doses maiores.

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Berríos, Cárcamo Pablo. "Salsolinol e isosalsolinol : productos de la condensación de dopamina y acetaldehído como efectores finales del efecto reforzante del etanol." Tesis, Universidad de Chile, 2013. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/113542.

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Abstract:

Magíster en Bioquímica, área de especialización en Bioquímica Toxicológica y Diagnóstico Molecular
Memoria para optar al Título de Bioquímico
Recientemente, se demostró que la metabolización de etanol a acetaldehído es indispensable para que su consumo sea reforzante; sin embargo, no se conoce el mecanismo cerebral por el cual se produce este efecto. Se ha postulado que el salsolinol, un producto racémico de la condensación no enzimática de acetaldehído con dopamina, es responsable del efecto reforzante del etanol. La concentración cerebral de salsolinol aumenta luego del consumo de etanol y el salsolinol es una molécula reforzante más potente que el acetaldehído y el etanol, probablemente activando al receptor μ de opioides. Sin embargo, el salsolinol de Sigma-Aldrich, caracterizado como reforzante en los estudios en la literatura, está compuesto por 4 isómeros: R- y S-salsolinol, y R- y S-isosalsolinol (este último es un producto secundario de la condensación no enzimática de acetaldehído y dopamina). Queda por esclarecer: cuál o cuáles de estas moléculas son reforzantes y si estas moléculas alcanzan su concentración reforzante cuando se consume etanol. Además, se ha reportado la existencia de una enzima R-salsolinol sintasa cuyos sustratos son dopamina y acetaldehído. Si la formación de R-salsolinol es responsable del efecto reforzante del etanol, esta enzima podría ser necesaria para que el etanol sea reforzante; sin embargo, no se ha publicado su secuencia aminoacídica. A partir de estos antecedentes se postula que un producto de la condensación de dopamina y acetaldehído es responsable del efecto reforzante del etanol, y este producto alcanza su concentración reforzante a través de su síntesis enzimática (por una R-salsolinol sintasa) o su síntesis no enzimática. Así, el primer objetivo de esta tesis fue detectar, caracterizar y purificar una enzima cerebral con actividad R-salsolinol sintasa en rata, que tenga como sustratos dopamina y acetaldehído. Se abordó la búsqueda de actividad R-salsolinol sintasa en las siguientes preparaciones de cerebro de ratas: homogeneizado completo, sobrenadante citosólico y proteínas purificadas en una resina modificada con dopamina. Se incubaron estas preparaciones con los sustratos dopamina y acetaldehído más cofactores que podrían ser requeridos por esta enzima. No se encontró actividad salsolinol sintasa en muestra alguna. Además, la revisión crítica de los artículos que reportan la presencia de la enzima como de peso molecular bajo 2 kDa y actividad de menor magnitud que la síntesis no enzimática, tornó su búsqueda infundada. Por lo tanto, se descartó esta línea de investigación. La búsqueda de una síntesis enzimática mostró que la velocidad de síntesis no enzimática de salsolinol podría ser suficiente para formar la cantidad reforzante de salsolinol. Luego de esta nueva evidencia, se siguió el objetivo alternativo en esta tesis: determinar cuál es el isómero de salsolinol reforzante, y si su concentración activa en el cerebro es alcanzable a partir de dopamina y acetaldehído. Primeramente, se determinó si las velocidades de síntesis no enzimática de los regioisómeros de salsolinol, salsolinol e isosalsolinol, son suficientemente rápidas para generar sus concentraciones reforzantes. Se midió la formación de salsolinol e isosalsolinol mediante cromatografía líquida de alta eficacia. Se calculó que la concentración reforzante de salsolinol, y no la de isosalsolinol, se alcanza en el cerebro partir de la concentración de acetaldehído reforzante; a través del uso de un modelo de estado estacionario que determina la concentración de salsolinol que se alcanza cuando sus velocidades de síntesis y de degradación se igualan. Debido a que las preparaciones de salsolinol (Sigma-Aldrich) usadas en estudios previos para determinar su efecto reforzante estaban contaminadas con isosalsolinol, era importante confirmar si el salsolinol sin isosalsolinol mantiene su efecto reforzante. Existe evidencia de que al menos un isómero de salsolinol activa al receptor μ de opioides y que, posiblemente, este sea el mecanismo que ejerce su efecto reforzante. Por esto, se realizó un estudio de acoplamiento molecular in silico de los 4 isómeros de salsolinol en el receptor μ de opioides (recientemente cristalizado) que pudiera identificar a cada isómero como activo o inactivo, antes de estudiarlos in vivo. Se observó que todos los isómeros de salsolinol calzan correctamente en el bolsillo de morfina del receptor μ de opioides. Esto no esclarece si cada isómero es agonista (o antagonista) del receptor. Para determinar in vivo si el salsolinol sin isosalsolinol es reforzante, se realizaron dos ensayos: (i) se estudió si, presionando una palanca, ratas se autoadministran intracerebralmente salsolinol; y (ii) se estudió si el salsolinol infundido intracerebralmente provoca una preferencia de lugar condicionada por esta infusión de salsolinol en ratas. La autoadministración intracerebral de salsolinol resultó negativa, posiblemente por la dificultad de la metodología. En el ensayo de preferencia de lugar, las ratas mostraron una tendencia a preferir el lado en el cuál se infundió salsolinol racémico, sin isosalsolinol, y no cuando se infundió la mezcla de ambos regioisómeros. Los resultados en este trabajo (i) indican que el salsolinol racémico no necesita de isosalsolinol para ser reforzante, sugieren que (ii) el isosalsolinol disminuye la capacidad reforzante del salsolinol, y que (iii) el salsolinol racémico alcanza su concentración reforzante no enzimáticamente y podría ser responsable del efecto reforzante del etanol.
Recently, it was shown that the metabolism of ethanol to acetaldehyde is essential for its consumption to be reinforcing; however the cerebral mechanism by which this effect occurs is not known. It has been postulated that salsolinol, a racemic non-enzymatic condensation product of acetaldehyde with dopamine, is responsible for the reinforcing effect of ethanol. The concentration of salsolinol in the brain increases after consumption of ethanol and salsolinol is a more powerfully reinforcing molecule than acetaldehyde and ethanol, possibly activating the μ-opioid receptor. However, the Sigma-Aldrich salsolinol that has been characterized in the literature studies comprises 4 isomers: R- and S-salsolinol, and R- and S-isosalsolinol (the latter is a secondary non-enzymatic condensation product of acetaldehyde and dopamine). Which of these molecules is reinforcing and if this molecule reaches its reinforcing concentration in the brain when ethanol is consumed remains to be elucidated. Furthermore, the existence of an enzyme R-salsolinol synthase whose substrates are acetaldehyde and dopamine has been reported. If the R-salsolinol formation is responsible for the reinforcing effect of ethanol, this enzyme may be necessary for ethanol to be reinforcing; however, its amino acid sequence has not been reported. From this background it is postulated that a condensation product of acetaldehyde and dopamine is responsible for the reinforcing effect of ethanol, and this product reaches its reinforcing concentration through either an enzymatic synthesis (by an R-salsolinol synthase) or a non-enzymatic synthesis. Thus, the first objective of this thesis was to detect, characterize and purify a brain enzyme with R-salsolinol synthase activity in rat, having dopamine and acetaldehyde as its substrates. The search for R-salsolinol synthase activity was addressed by using the following rat brain preparations: whole brain homogenates, cytosolic supernatant and proteins purified in a resin modified with dopamine. These preparations were incubated with the substrates dopamine and acetaldehyde, and cofactors that may be required by this enzyme. No salsolinol synthase activity was found in any sample. In addition, a critical review of articles reporting the presence of the enzyme with a molecular weight lower than 2 kDa and an activity of lesser magnitude than the non-enzymatic rate of synthesis, turned his search unfounded. Therefore, this line of research was discarded. The search for an enzymatic synthesis revealed that the rate of non-enzymatic synthesis of salsolinol may be sufficient for the formation of the reinforcing amount of salsolinol. After this new evidence, we followed the alternative objective in this thesis: to determine which salsolinol isomer is reinforcing and whether its active concentration in the brain can be reached from dopamine and acetaldehyde. Firstly, we investigated whether non-enzymatic synthesis rates of salsolinol and isosalsolinol were fast enough to generate its reinforcing concentrations. The formation of salsolinol and isosalsolinol was measured by high performance liquid chromatography. It was calculated that the reinforcing concentration of salsolinol, and not of isosalsolinol, can be reached in the brain if synthesized from the reinforcing concentrations of acetaldehyde; by means of a steady state model which determines the concentration of salsolinol achieved when its rate of synthesis and degradation are equal. Given that the salsolinol (Sigma-Aldrich) preparations used to determine its reinforcing effect in previous studies were contaminated with isosalsolinol, it was important to confirm that salsolinol without isosalsolinol retains its reinforcing effect. There is evidence that at least one salsolinol isomer activates the μ-opioid receptor and that, possibly, this is the mechanism that exerts its reinforcing effect. Therefore, we performed molecular docking studies of the 4 salsolinol isomers to the μ-opioid receptor (recently crystallized) aimed at identifying each isomer as active or inactive, before studying these in vivo. It was observed that all salsolinol isomers properly fit in the morphine pocket of the μ-opioid receptor. This result does not clarify if an isomer is an agonist (or antagonist) for this receptor. Subsequently, to determine in vivo if salsolinol without isosalsolinol is reinforcing, two assays were performed: (i) we studied if rats self-administered salsolinol directly in the brain by pressing a lever, and (ii) we examined whether salsolinol infused in the brain is capable of inducing a conditioned place preference in rats. The intracraneal salsolinol self-administration was negative, possibly because of the difficulty of the methodology. In the place preference test, rats showed a tendency to prefer the side on which racemic salsolinol without isosalsolinol was infused, and not when a mixture of both regioisomers was infused. The results in this study (i) indicate that racemic salsolinol does not need isosalsolinol to be reinforcing, suggest that (ii) the isosalsolinol decreases the salsolinol reinforcing capability, and (iii) racemic salsolinol reaches its reinforcing concentration non-enzymatically and could be responsible for the reinforcing effect of ethanol.
Fondecyt

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Giménez, Xavier Pol. "Mecanismes de toxicitat de la dopamina en cèl·lules de neuroblastoma humà SH-SY5Y." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2008. http://hdl.handle.net/10803/1156.

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Abstract:

La malaltia de Parkinson és una de les malalties neurodegeneratives humanes més freqüents, especialment en pacients d'edat avançada amb una simptomatologia provocada especialment per la manca de DA. La gènesi d'aquesta malaltia no és clara, si bé sembla haver un component genètic en un nombre reduït dels casos diagnosticats, la principal causa roman encara desconeguda. La hipòtesi neurotòxica està present des de fa molt temps i el que sembla més lògic és pensar en l'existència d'una condició mixta, es a dir, una predisposició genètica (congènita, heretada o adquirida) i un detonant que podria ser endogen o exogen.

Diverses evidencies suggereixen un paper important de la dopamina en el dany neuronal observat durant la malaltia, per aquest motiu, mitjançant diversos experiments, el nostre laboratori ha determinat els efectes de diferents concentracions de dopamina (DA) sobre la viabilitat de les cèl·lules SH-SY5Y.

El primer que s'ha fet es comprovar que la DA s'acumula dins la cèl·lula i aproximadament a quines concentracions ho fa. La DA entra ràpidament dins la cèl·lula, on arribarà a unes concentracions inferiors però properes a les utilitzades extracel·lularment.

El primer pas dins de la toxicitat produïda per la DA sembla clarament implicar la seva oxidació intracel·lular. Totes les alteracions produïdes per la DA s'han bloquejat amb antioxidants d'acció intracel·lular com la N-acetilcisteïna. Així doncs, per garantitzar que la DA no sigui tòxica, cal que no s'oxidi.

És difícil precisar si la toxicitat de la DA pot estar vinculada al seu procés d'oxidació o als metabòlits reactius que es produeixen. En el primer cas la DA, a l'oxidar-se, està donant lloc a peròxid d'hidrogen i, per tant, a un potencial estrès oxidatiu. En les nostres cèl·lules, l'augment de peroxidació per efecte de la DA és relativament suau, a menys que s'incorpori Fe3+ en el medi com a catalitzador d'aquest procés. En el segon cas s'ha de considerar que la DA està donant lloc a quinones i a aminocroms. Les primeres són prou reactives com per unir-se a grups tiol de forma covalent i per tant, potencialment, poder modificar qualsevol proteïna. Venim a suggerir i en part a demostrar que la DA, oxidant-se a dopaquinona i dopaminocrom, pot reduir-se novament en presència de NADH o NADPH i donar lloc a un cicle redox en el que es pot disminuir considerablement el contingut de la forma reduïda d'aquests coenzims, essencials pel bon funcionament cel·lular.

A part d'aquesta alteració redox, s'han observat altres alteracions com a conseqüència de l'oxidació de la DA. Una de les més primerenques és l'acumulació de proteïnes ubiqüitinitzades. Com a conseqüència d'aquest fet i d'altres mecanismes s'activarien una sèrie de vies que modificarien l'expressió de tota una gama de gens implicats en la transducció de senyals i en mort o supervivència cel·lular com GADD153 i C/EBP-beta així com de l'alfa-sinucleïna. L'acumulació d'alfa-sinucleina, conjuntament amb la de les proteïnes alterades per les quinones i les proteïnes ubiqüitinitzades no degradades pel proteosoma pot afavorir la formació d'agregats de nucleació, amb característiques d'agressoma, que donen lloc a la formació al seu voltant de vacuoles autofàgiques i a l'activació d'un senyal d'estrès reticular.

La DA desencadena doncs clarament i de forma dosi-dependent un procés d'autofàgia en el citoplasma cel·lular. Pensem que la finalitat de l'autofàgia és un cop més la de salvar la cèl·lula, però si l'agressió no s'atura la cèl·lula s'acaba morint per acció de la mateixa autofàgia, o bé mitjançant un procés apoptòtic en alguns casos o simple necrosi en d'altres.

BNIP3 és una proteïna la expressió de la qual també incrementa després del tractament amb DA. BNIP3 ja s'ha descrit anteriorment com factor que s'indueix quan hi ha autofàgia. Un dels factors que la regulen és HIF-1-alfa, factor que s'indueix ràpidament en situacions d'hipòxia o d'estrès oxidatiu i com hem vist després del tractament amb DA. Per tant, la cèl·lula es comporta de forma semi-anaeròbica, de manera que la relació lactat/piruvat augmenta, i com a conseqüència d'aquest fet, els nivells d'AMP han d'estar augmentats, podent-se activar l'AMPK. Aquest procediment per si sol pot explicar l'aturada de la ruta de mTOR observada per part de la DA, sense descartar algun efecte més directe sobre TSC1/TSC2 o Rheb.
"Mechanisms of cell damage triggered by dopamine in SH-SY5Y cells."

TEXT:

Dopamine (DA) could play a central role in neuronal dopaminergic degeneration in Parkinson's disease and other neurodegenerative disorders. The mechanisms leading to neuronal damage and death are not yet fully understood.

We have used human neuroblastoma SH-SY5Y cells that are sensitive to dopamine, with the aim to further understand the molecular mechanisms through which dopamine may damage the cell.

DA enters the cell in a dose-dependent and saturating way. DA triggers a redox cycle that causes a slight increase in peroxidation (DCFH) and a decrease in the reductive power of the cell that could be assessed by MTT, NADH concentration and GSH/GSSG relationships. Such an effect is reflected in a decrease in cell viability, a decrease in oxygen consumption and an increase in cytosolic calcium concentration. The transcription factors C/EBPß and GADD153/CHOP increase their expression. Parameters of endoplasmic reticulum stress (grp78) are activated and a consistent autophagy is observed using electronic microscopy.

Autophagy is a process characterized by the presence of double or multiple-membrane cytoplasmic vesicles sequestering cytoplasm and organelles such as mitochondria and endoplasmic reticulum.
The genes related with autophagy and their products are currently known as ATG. The microtubule-associated protein light chain 3 (LC3) (the mammalian orthologue of yeast ATG8) is a useful procedure for autophagy detection. We show that dopamine increases LC3 expression and its proteolysis product LC3-II which is localized in autophagosamal membranes.
The PI3K-AKT-mTOR pathway is involved in autophagy induced by starvation. The activation of S6K (a downstream substrate of mTOR) decreases after incubation with dopamine. This is indicative of a mTOR inhibition by dopamine. 3-Methyladenine blockes autophagy but not the LC3 increase. Beclin 1 (ATG6) is also involved in this process.
Moreover, a multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) showed an increase in BNIP3, NOXA and PUMA expression after DA treatment. BNIP3 and p53 expression were confirmed by WB. BNIP3 is a member of the BH3-only family, which are factors involved in apoptosis and autophagy. Since BNIP3 is induced under hypoxic conditions we studied and found an increase of hypoxia inducible factor (HIF 1alpha) expression, suggesting a hypoxic-like condition caused by dopamine.

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Cavagnolli, Daniel Alves [UNIFESP]. "Avaliação da Densidade do Transportador Dopaminérgico utilizando [99MTc]-TRODAT-1 E SPECT em pacientes com movimentos periódicos das pernas após teste de esforço máximo." Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011. http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/9012.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-26
Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar o perfil da densidade do transportador dopaminérgico utilizando SPECT em pacientes com Movimento Periódico das Pernas (MPP) e a influência do exercício físico agudo na concentração do DAT após um teste de esforço máximo (TEM). Métodos: Para isso 16 pacientes (8 grupo CTRL e 8 grupo Experimental) realizaram uma polissonografia (PSG) basal para a avaliação do padrão de sono e do índice do MPP. Após a PSG basal foi realizado o SPECT basal. Posteriormente os voluntários realizaram um TEM no período da manhã, após 2 horas, um novo exame de SPECT, e na mesma noite uma PSG para avaliar o efeito do exercício físico agudo no DAT e no padrão do sono. Resultados: Os resultados encontrados demonstraram que o grupo experimental apresentou valores menores no perfil da densidade do DAT no momento basal na região do estriado (p=0,03), foi demonstrado também uma redução do índice de MPP no grupo experimental (p=0,01) e um aumento da porcentagem do estagio 1 do sono NREM em ambos os grupos após o TEM (p=0,02). O estagio 2 do sono (p=0,02) e sono de ondas lentas (p=0,01) apresentaram diferenças entre os grupos no momento basal. Conclusão: Nossos resultados mostram que pacientes com MPP apresentaram uma menor densidade de DAT na região do putâmen esquerdo comparado ao grupo CTRL e uma sessão de exercício físico agudo (TEM) não alterou este perfil. Esses achados sugerem que alterações na densidade do DAT, talvez estejam relacionados a prática de exercício físico crônico.
Restless legs syndrome and periodic leg movement are sleep-related movement disorders and studies have shown changes in striatal dopaminergic activity in patients with these disorders. Physical exercise has been shown to improve the symptoms of restless legs syndrome and periodic leg movement, as has treatment with dopamine agonists. However, the mechanism by which physical exercise acts as a nonpharmacological treatment in improving symptoms of restless legs syndrome and periodic leg movement remains unknown. We evaluated dopamine transporter density profiles in 16 sedentary patients (control and experimental - with periodic leg movement, groups) and the influence of acute physical exercise on its concentration after a maximal exercise test. Each patient underwent baseline polysomnography to evaluate sleep patterns and periodic leg movement index values. After obtaining the polysomnography baseline, the single photon emission computer tomography baseline was determined. Subsequently, the volunteers performed a maximal exercise test in the morning, followed by a single photon emission computer tomography two hours later and polysomnography that night, to assess the effect of acute physical exercise on dopamine transporter and sleep patterns. The results showed significant lower dopamine transporter baseline densities in the striatum region for the experimental group. The results also showed a significant reduction in the periodic leg movement rate in the experimental group and a significant increased percentage of stage-1 non-REM sleep in both groups after maximal exercise test. Significant differences between the groups were only observed for Stage 2 sleep and slow wave sleep. Our results show that patients with periodic leg movement had a lower dopamine transporter density in the left putamen region compared to the control group and an acute physical exercise (maximal exercise test) did not alter this profile, providing evidence that this improvement is the result of chronic physical exercise.
TEDE
BV UNIFESP: Teses e dissertações

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Castellanos, Martínez Antonio. "Estudios de la interacción de los receptores de dopamina con otros receptores implicados en la enfermedad de Huntington." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2021. http://hdl.handle.net/10803/673435.

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Abstract:

En la enfermedad de Huntington (HD), muchos síntomas están asociados con alteraciones en las funciones reguladas por la dopamina y el glutamato; una intervención directa sobre los receptores de dopamina D1 (D1R) pueden provocar numerosos efectos secundarios dada la amplia distribución en el sistema nervioso central. En nuestro grupo de investigación se demostró que el heterómero que forman los D1R con los receptores H3 de histamina (D1R- H3R), y que posee nuevas propiedades bioquímicas y farmacológicas, podría actuar como una posible diana terapéutica para regular la sobreactivación del D1R mediante una modulación por parte del H3R en etapas tempranas de HD. En células Wt y modelo de HD demostramos ahora, mediante ensayos de ligación por proximidad (PLA), la presencia de los heterómeros A1R-D1R, A2AR-D2R, D1R-D3R D1R-NMDAR y H3R-NMDAR que podrían considerarse nuevas dianas para HD. D1R-NMDAR y H3R-NMDAR señalizan a través de la vía de fosforilación de ERKs; sin embargo, en el modelo HD no se modificó dicha señalización. En la vía del AMPc, H3R-NMDAR presentó un cross-talk positivo de NMDAR sobre H3R para las células Wt y negativo para las células HD. Mediante ensayos de unión de radioligandos, los ligandos del H3R: imetit y RAMH (agonistas), A331440, carcinina, conessina y VUF 4904 (antagonistas) modulan alostéricamente la unión de la dopamina al D1R, específicamente al segundo protómero del homómero D1R-D1R. Además, mediante estudios de BRET, se confirmó que estos receptores forman un complejo heterotetrámero D1R-D1R-H3R-H3R que puede activar diferencialmente los distintos subtipos Gαs y Gαi, éste último a altas concentraciones de agonistas de D1R. Concretamente, entre los subtipos de proteína Gαi, el heterómero D1R-H3R tiene preferencia por los subtipos Gαi1 y Gαo2. Al determinar la afinidad de ligandos de H3R al unirse a su receptor en presencia o no de D1R, se determinó que los antagonistas A331440, ROS, conessina y JNJ10181457 mostraron mejor afinidad por el heterómero D1R-H3R que sobre el homómero H3R-H3R, lo que indica la existencia de una modulación alostérica de D1R sobre el centro ortostérico de H3R que favorece la unión de estos ligandos a H3R dentro del heterómero. El JNJ10181457, presentó una mejor afinidad de unión al heterómero y también una mayor potencia de bloqueo de la señal del AMPc inducida por la activación del H3R en el heterómero. Esto significa que el D1R ejerce de modulador alostérico positivo tanto de la unión como del efecto antagónico de la vía del AMPc del JNJ10181457. Estos resultados hacen de este antagonista un candidato ideal como lead compound en la búsqueda de ligandos de H3R selectivos del heterómero D1R-H3R. Mediante ensayos de BRET de proteína G, CODA-RET y de determinación de AMPc, se ha determinado que los complejos H3R-H3R y D1R-H3R pueden activar a la proteína Gαi al ser tratados con agonistas selectivos de H3R. Al evaluar la preferencia diferencial de estos complejos por las subunidades de Gαi/Gαo, se detectó que ambos complejos pueden activar a las subunidades Gαo1, Gαo2, Gαi1, Gαi2 y Gαi3; sin embargo, podemos decir que RAMH para la subunidad Gαo1, proxyfam para la Gαi1, SAMH para Gαi2 e imetit para Gαi1 y Gαi3 tienen preferencia por el heterómero. Al analizar la vía de activación de las ERKs, cuando el H3R del heterómero D1R-H3R se activó con immepip, se alcanzó un nivel de señalización similar al del SKF 81297. Se encontraron resultados opuestos al analizar la vía de las ERKs y la del AMPc con los ligandos RAMH, immethridina, histamina y SAMH que podrían sugerir un biased agonism que deberá confirmarse con curvas completas de activación de ERKs que permitan calcular las respectivas EC50. Todo ello valida nuestro interés por encontrar ligandos selectivos del heterómero D1R-H3R.
Huntington's disease (HD) presents alterations in dopamine neurotransmission; a direct intervention on dopamine D1 receptors (D1R) would cause numerous side effects. The heteromer with the histamine H3 receptor (D1R-H3R), which has new pharmacological properties, could regulate the overactivation of D1R through modulation by H3R in early stages of HD. In Wt and HD model cells, we demonstrated the presence of the heteromers A1R-D1R, A2AR-D2R, D1R-D3R, D1R-NMDAR and H3R- NMDAR. With cAMP signaling, H3R-NMDAR presented a positive cross-talk of NMDAR over H3R for Wt cells and negative for HD cells. Through binding assays, imetit, RAMH, A331440, carcinin, conessin and VUF 4904 allosterically modulate the binding of dopamine to the second protomer of the D1R-D1R homomer, which is part of the D1R- D1R-H3R-H3R heterotetramer and that can differentially activate the Gαs and Gαi subtypes, the latter at high concentrations of D1R agonists. The D1R-H3R heteromer has a preference for the Gαi1 and Gαo2 subtypes. The antagonists A331440, ROS, conessin and JNJ10181457 showed a greater affinity for the D1R-H3R heteromer than for the H3R-H3R homomer, which indicates an allosteric modulation of D1R on the orthosteric center of H3R favoring the binding of these ligands to H3R. JNJ10181457 also presented a higher blocking power of the cAMP signal induced by the activation of the H3R in the heteromer. This means that D1R acts as a positive allosteric modulator of both the binding and the antagonistic effect of the JNJ10181457 on cAMP pathway. It would be a lead compound in the search for selective H3R ligands of the D1R-H3R heteromer. The H3R-H3R and D1R-H3R complexes can activate all the Gαi protein subtypes when treated with selective H3R agonists; RAMH for Gαo1, proxyfam for Gαi1, SAMH for Gαi2 and imetit for Gαi1 and Gαi3 have a preference for the heteromer. When analyzing the activation pathway of ERKs, immepip activated the H3R of the D1R-H3R heteromer with a level of signaling similar to that of SKF 81297. Opposite results were found when analyzing the pathway of ERKs and that of cAMP with the ligands RAMH, immethridine, histamine and SAMH that could suggest a biased agonism that must be confirmed.

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Sánchez, Soto Marta. "Noncanonical Neurotransmitter Activation of Catecholamine Receptors." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2017. http://hdl.handle.net/10803/400298.

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Abstract:

From the D2‐like receptors (D2,D3, D4), only D4 receptor (D4R) has been described as “promiscuous” since it can be activated both by dopamine (DA) and norepinephrine (NE) and function as a noradrenergic receptor in the brain. However, there is no evidence for the other D2‐like receptors. In addition, D4R has a large number of polymorphisms, one of the variants, D4.7, has been associated with several neuropsychiatric disorders. The first aim of this thesis was to study the possible activation of D2‐like recptors (including the three main D4 variants, D2 short, D2 long and D3) by radiolabeled ligand binding and BRET‐based functional assays. Our results indicate that first, NE binds and activates D2‐like receptors and second, there are no differences in the signaling of D4R variants. In addition, the potency of DA and NE depends not only on the receptor but also on the G protein subtype. The catecholamine NE is implicated in important brain functions and it binds to three receptor families. The α2A receptor (α2AR) is expressed in many brain regions and is particularly enriched in the striatum together with α2C (α2CR). The low levels of NE in the striatum led us to question what is the role of α2R there and hypothesize whether DA could provide the endogenous neurotransmitter of α2R in the striatum. Therefore, the second aim of this thesis was to study the activation of α2AR and α2CR by DA and dopaminergic ligands through radiolabeled binding experiments, activation of different subtypes of G protein and adenylyl cyclase inhibition. Surprisingly, the potencies of α2AR and α2CR for DA are very similar or even higher than for some D2‐like receptors. Thus, we can hypothesize that the DA in the striatum should reach enough concentration to activate α2AR and α2CR. In addition, these receptors are also targets for compounds previously described as D2‐like agonists. Particularly striking is the ability of the D3R and D4R agonists, 7‐OH‐PIPAT and RO‐105824 to bind and activate with high affinity α2AR i α2CR. Similar to the previous part, the efficacy and potency of ligands depends on the receptor and the G protein subtype. Finally, is its well accepted that G protein‐coupled receptors (GPCRs) form homo‐, heteromers and high order oligomers. Since we had shown that DA and NE bind and activate D2‐like receptors and α2R, we wanted to study the activation of G protein mediated by the complexes formed by D4R variants, D4.4R and D4.7R, and D2R or α2R. In order to do that we used CODA‐RET (complemented donor‐acceptor resonance energy transfer) a technique that allows the study of the function of a signaling complex formed by two defined GPCRs and a subunit of the heterotrimeric G protein. Our results indicate that, although they physically interact, D4.7R is not implicated in the G protein activation when is forming complexes with D2R or α2AR. Also, there are no differences in the potency or efficacy of the endogenous neurotransmitters DA and NE with D4.4R and D4.7R monomers or homodimers, but the association with D2R or 2AR discloses differences between the two D4R variants. Finally, we found important differences in the potency and efficacy dopaminergic ligands for the different receptor complexes that could be important for some neuropsychiatric diseases.
Dels receptors D2‐like de dopamina (D2, D3, D4) només el D4 (D4R) s’ha descrit com a “promiscu” ja que pot ser activat tant per dopamina (DA) com per noradrenalina (NE); en canvi, no hi ha evidències de que això sigui cert per la resta de receptors D2‐like. A més, el D4R és un receptor molt polimòrfic i una de les seves variants, la D4.7, s’ha associat a desordres psiquiàtrics. El primer objectiu va ser estudiar la possible activació dels receptors D2‐like (D2S, D2L, D3 i les tres variants més prevalents de D4) per NE mitjançant estudis d’unió de radiolligands i assajos funcionals de BRET. Els resultats mostren que primer, la NE s’uneix i activa els receptors D2‐like i segon, no hi ha diferències en la senyalització de les variants de D4R. El receptor α2A (α2AR) adrenèrgic s’expressa en moltes zones cerebrals i està particularment enriquit a l’estriat junt amb el receptor α2C (α2CR). Els baixos nivells de NE a l’estriat donen peu a la possibilitat de que la DA sigui el neurotransmissor endogen de α2AR i α2CR. Per tant, el segon objectiu de la tesi va ser estudiar l’activació de α2AR i α2CR per DA i lligands dopaminèrgics mitjançant estudis d’unió de radiolligands, activació de diferent proteïnes G i inhibició d’adenilat ciclasa. Sorprenentment les potències de α2AR i α2CR per la DA són molt similars o inclús més altes que per alguns receptors D2‐ like. Per tant és probable que els nivells de DA a l’estriat siguin suficients per activar α2R. A més, aquests receptors també són activats per compostos prèviament descrits com agonistes dels receptors D2‐like com ara el 7‐OH‐PIPAT (D3R) i el RO‐105824 (D4R). A més, tant l’eficàcia com la potència dels lligands depèn del receptor i del subtipus de proteïna G. Per últim, els GPCRs poden formar dímers, heteròmers o entitats superiors. A la tercera part vam voler comparar l’activació de proteïna G per DA i NE mitjançant complexes entre dues de les variants de D4R, D4.4R i D4.7R amb D2R i α2AR. Els resultats indiquen que hi ha diferències en l’activació dels diferents complexes que podria tenir importància en malalties com RLS i Parkinson. A més, donen suport a la teoria de que les diferències entre les variants de D4R es troben en la seva interacció amb altres receptors.

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Souza, Marina Freire de. "Alterações motoras, cognitivas e neuroquímicas causadas pela administração repetida da deltametrina em ratos." Universidade Federal de Sergipe, 2015. https://ri.ufs.br/handle/riufs/3986.

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Abstract:

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
Studies have shown that pesticide exposure is a risk factor to Parkinson Disease (PD) development in urban areas and mainly in rural areas. One of these pesticides, Deltamethrin (DM), is used indiscriminately for vector control in crops, veterinary medicine and control of domestic pests. The aim of the study is investigate the motor, cognitive and neurochemical changes caused by repeated administration of DM in rats. 38 Male Wistar rats were used, 9-10 months-old, from the Neurophysiology Laboratory animal house of UFS. The study was divided into two experiments: (1) intranasal (i.n.) and (2) intracerebroventricular (i.c.v.). In the (1), the animals were divided into 2 groups (CTR, 0.9% saline solution, n=9) and DM 0.5 (treated with DM 0.5 mg, n=10), that received 3 infusions administrated one every 7 days. During the treatment, the animal were subjected to behavior test: catalepsy, novel object recognition task, spontaneous alternation and contextual conditioned fear. In i.c.v. experiment, the animals were divided into 3 groups: control (CTR, n=7); DM 0.5 (treated with DM 0.5 μg diluted in 2 μL, n=7) and DM 5 (treated with DM 5 μg diluted in 2 μL, n=5). In the experiment (2), the animals received 3 i.c.v. injections (2 μL/injection), one each 48 hours. During the treatment, the rats were submitted to behavior test: catalepsy, open field test and spontaneous alternation. After the behavior tests of both experiments, the rats were anesthized, perfused transcardially, their brains removed and submitted to Tyrosine Hydroxylase (TH) immunochemistry in Substancia Nigra pars compacta (SNpc), Ventral Tegmental Area (VTA) and dorsal striatum areas. In i.n. experiment, there were motor changes in open field and cognitive changes in novel object recognition task and contextual conditioned fear. The immunohistochemistry shows a reduction of TH+ cells in SNpc and VTA and an increase of Optical Density in dorsal striatum. In i.c.v. experiment, it was observed motor changes in open field and cognitive changes in spontaneous alternation. In immunohistochemical there was a decrease of TH + cells in DM 5ug animals in SNpc and VTA and decreased their levels in DM 0.5 g and DM 5 ug groups in the dorsal striatum. In both experiments, cognitive changes preceded the motor changes. The data presented contribute to understanding of physiological and behavioral changes after exposure to DM and more studies are needed to elucidate the DM as a possible cause of parkinsonism symptoms.
Estudos tem demonstrado que a exposição a pesticidas é um fator de risco para o desenvolvimento da doença de Parkinson (DP) em áreas urbanas e principalmente em áreas rurais. Um desses pesticidas, a deltametrina (DM), é utilizada indiscriminadamente no controle de vetores na lavoura, na medicina veterinária e no controle de pestes domésticas. Diante disso, o objetivo da pesquisa é avaliar as alterações motoras, cognitivas e neuroquímicas causadas pela administração repetida da DM em ratos. Foram utilizados 38 ratos Wistar machos, com idade entre 9-10 meses, provenientes do Biotério do Laboratório de Neurofisiologia da UFS. O trabalho foi dividido em dois experimentos: (1) administração intranasal (i.n.) e (2) intracerebroventricular (i.c.v.) de DM. No experimento 1 (intranasal), os animais foram divididos em 2 grupos: controle (CTR, solução salina 0,9%, n=9) e DM 0,5 (tratados com DM 0,5 mg, n=10), que receberam 3 infusões intranasais administradas 1 a cada 7 dias. Durante o tratamento, os animais foram submetidos a testes comportamentais: catalepsia, reconhecimento de objeto novo, alternação espontânea e medo condicionado ao contexto. No experimento 2 (i.c.v.), os animais foram divididos em 3 grupos: controle (CTR, n=7), DM 0,5 (tratados com DM 0,5 μg em 2 μL, n=7) e DM 5 (tratados com DM 5 μg em 2 μL, n=5). Nessa etapa, os animais receberam 3 injeções i.c.v. (2 μL por injeção), uma a cada 48h. Ao longo do tratamento, os ratos foram avaliados nos testes da catalepsia, campo aberto e alternação espontânea. Após os testes de comportamento em ambos experimentos, os ratos foram anestesiados, perfundidos, seus cérebros removidos e submetidos a imunohistoquímica para Tirosina Hidroxilase (TH) na substância negra parte compacta, área tegmental ventral e estriado dorsal. Foi observado no experimento i.n. que houve alterações motoras no campo aberto e cognitivas no reconhecimento de objeto novo e no medo condicionado ao contexto. A imunohistoquímica mostrou redução de células TH+ na SNpc e VTA e aumento de TH+ no estriado dorsal. No experimento i.c.v., foram observadas alterações motoras no campo aberto e cognitivas na alternação espontânea. Na imunohistoquímica houve diminuição de células TH+ nos animais DM 5 μg na SNpc e em VTA e redução de seus níveis nos grupos DM 0,5 μg e DM 5 μg no estriado dorsal. Em ambos os experimentos, alterações cognitivas precederam as alterações motoras. Os dados apresentados contribuem no entendimento sobre alterações fisiológicas e comportamentais após exposição a DM e mais estudos deverão ser realizados para elucidar a DM como um possível causador de sintomas de parkinsonismo.

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Munari, Leonardo Mattos. "Avaliação do efeito de um extrato lipofílico de Hypericum caprifoliatum Cham.& Schltdl sobre os níveis cerebrais de dopamina e seus metabólitos através de microdiálise cerebral em ratos conscientes." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2006. http://hdl.handle.net/10183/8209.

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Abstract:

OBJETIVO: Desenvolver e validar a técnica de CLAE-DE para o doseamento de dopamina (DA), ácido diidrofenilacético (DOPAC), ácido homovanílico (HVA) e 3-metoxitiramina (3-MT); validar a técnica de microdiálise (MD) cerebral em animais conscientes e avaliar o efeito do tratamento agudo com um extrato lipofílico das partes aéreas de Hypericum caprifoliatum (HCP) sobre os níveis cerebrais de DA e seus metabólitos. MATERIAIS E MÉTODOS: A validação analítica foi realizada conforme o preconizado pela ANVISA, com análise dos parâmetros linearidade, precisão, exatidão, especificidade e limite inferior de quantificação. A técnica de microdiálise foi realizada de forma clássica: guias de sonda foram implantadas nas regiões cerebrais de interesse por cirurgia estereotáxica; os dialisados foram obtidos, 48 horas após a cirurgia, através da perfusão da sonda com líquido cérebroespinhal artificial (1 μL/min) e coleta durante três horas, em intervalos de 20 min; as três primeiras coletas foram utilizadas para determinação da linha de base e só então foram administrados os tratamentos. Para a validação da MD a sonda foi implantada no estriado (A: -0,3; L: + 3,2; P: - 4,5) e o tratamento foi sulfato de anfetamina (2 mg/kg, s.c.). Para a avaliação do efeito de HCP, a sonda foi implantada no núcleo acumbens (A: +2,2; L: -1,5; P: -5,8) e o tratamento foi uma dose de 270 mg/kg do extrato (v.o.). RESULTADOS E DISCUSSÃO: Os parâmetros avaliados para validar o método analítico ficaram dentro dos limites especificados pela ANVISA. O sulfato de anfetamina produziu um aumento nos níveis extracelulares de DA em 160% e uma redução de DOPAC e de HVA em 80% e 50%, respectivamente. O extrato HCP não alterou o conteúdo intersticial de DA, DOPAC e HVA no núcleo acumbens. Os valores basais encontrados estão de acordo com dados relatados na literatura. Não foi possível quantificar 3-MT. CONCLUSÃO: A metodologia analítica e as condições experimentais de microdiálise utilizadas permitiram a mensuração de mudanças induzidas por anfetamina nos níveis extracelulares de DA e seus principais metabólitos demonstrando que os fundamentos da técnica estão estabelecidos em nossas condições. O regime de tratamento empregado com HCP não foi suficiente para alterar os níveis de DA e seus principais metabólitos no núcleo acumbens de ratos.
OBJECTIVE: The objectives of this work were to validate the HLPC-ED technique for measuring dopamine (DA), dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC), homovanillic acid (HVA) and 3- methoxytyramine (3-MT); to put into operation the brain microdialysis technique (MD) in freely moving rats; to evaluate, by using MD, the effect of a single treatment with lipophilic extract from aerial parts of Hypericum caprifoliatum (HCP) on DA, DOPAC, HVA and 3-MT brain levels. MATERIALS AND METHODS: In order to validate the analytical technique we followed the parameters established by ANVISA for bioanalytical samples. The parameters were: precision, accuracy, specificity and also the lower limit of quantitation. The microdialysis technique was carried out following classical procedures: male Wistar rats were submitted to stereotaxic surgery for the guide cannula implantation in the brain regions of interest; 48 hours later, the microdiaysis probe was inserted and perfused with cerebrospinal fluid (1 μL/min). After baseline samples collecting (1 h), the treatments were administrated and samples were collected every 20 min, during 2h. To accomplish MD technique validation the animals were treated with amphetamine sulfate (2 mg/kg, s.c.) and the extracellular levels of DA, DOPAC e HVA were measured in striatum (A: -0,3; L: + 3,2; P: - 4,5). The effect of HCP acute treatment (270 mg/kg, p.o.) was evaluated in nucleus accumbens (A: +2,2; L: -1,5; P: -5,8). RESULTS AND DISCUSSION: The analytical parameters values found were within the acceptable ranges for bio-analytical limits specified by ANVISA. As expected, amphetamine sulfate administration significantly increased DA (160%) extracellular levels and decreased DOPAC (80%) and HVA (50%) levels. The quantification of 3-MT was not possible. Acute HCP administration did not affected DA, DOPAC and HVA levels in the nucleus accumbens. CONCLUSION: The HPLC-ED methodology and microdialysis procedures employed allowed the detection of amphetamineinduced changes in extracellular levels of DA and its metabolites demonstrating that the technical starting point was acceptable. The acute administration of 270 mg/kg, p.o. of HCP to rats was not sufficient to modify the extracellular levels of DA, DOPAC and HVA in the nucleus accumbens.

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Navarro, Brugal Gemma. "Interrelaciones moleculares y funcionales entre receptores de dopamina, cannabinoides y adenosina en el estriado." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2010. http://hdl.handle.net/10803/1036.

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La identificación de oligómeros formados por varios protómeros en la membrana plasmática es esencial para decodificar las propiedades de las redes moleculares que controlan la comunicación intercelular. En este estudio se combinan las técnicas de BRET (bioluminescense resonance energy transfer) y FRET (fluorescence resonance energy transfer) en una nueva técnica denominada SRET (sequential BRET-FRET), que permite la identificación de heterómeros formados por tres proteínas diferentes. Con la técnica de SRET y también con la combinación de las técnicas de BRET i complementación bimolecular (BiFC) se han identificado heterómeros de receptores de cannabinoides CB1, de dopamina D2 y de adenosina A2A en células vivas. El SRET y el BRET con BiFC son dos técnicas muy valiosas para identificar complejos heteroméricos de más de dos receptores de neurotransmisores, que va a permitir entender mejor la integración de las señales a nivel molecular.

Los heterómeros de receptores acoplados a proteína G (GPCR) son complejos macromoleculares con características funcionales propias, diferentes de las de los receptores individuales. Se sabe muy poco sobre la estructura cuaternaria de los heterómeros de GPCR, responsable de las características funcionales propias de estos complejos. En este estudio, se muestra, por primera vez, una clara evidencia del papel de las interacciones electrostáticas en la formación de la estructura cuaternaria de los heterómeros entre los receptores A2A de adenosina, D2 de dopamina y CB1 de cannabinoides. Estos resultados nos permiten proponer el primer modelo de estructura cuaternaria de heteromultímeros de receptores.

La proteína de unión de calcio, calmodulina (CaM), es capaz de unirse a la porción N-terminal del largo tercer bucle intracelular del receptor D2 de dopamina, en un epítopo rico en argininas que también se encuentra implicado en la unión a la proteína Gi/o y al receptor de adenosina A2A, en la formación del heterómero A2A-D2. En este estudio, se muestran evidencias de la interacción de la calmodulina con el receptor A2A y de la formación de oligómeros de receptores A2A-CaM-D2. Por otro lado, se han detectado cambios conformacionales en el oligómero de receptores A2A-CaM-D2 inducidos por calcio y se ha visto que el calcio modula de forma selectiva la señalización vía MAPK de los receptores A2A y D2 en el heterómero A2A-D2. Estos resultados pueden tener implicaciones en desórdenes de los ganglios basales debido a que los heterómeros de receptores A2A-D2 están siendo considerados como objetivo en el desarrollo de agentes antiparkinsonianos.

Por otro lado, en este estudio se describe un nuevo mecanismo mediante el cual la cocaína modula la función de los receptores D1 de dopamina. Por primera vez, se demustra la capacidad de los receptores sigma-1 para heteromerizar con homómeros de receptores D1 de dopamina en células vivas. De acuerdo con una interacción molecular entre ambos receptores, la coexpresión de los receptores sigma-1 y dopamina D1 provoca una alteración de la distribución subcelular del receptor sigma-1 que se ve potenciada con la cocaína. La unión de la cocaína a los receptores sigma-1 provoca cambios estructurales en el heterómero y aumenta fuertemente la producción de AMPc inducida por los agonistas del receptor D1. Este efecto es debido al receptor sigma-1, ya que no se observa en células tratadas con ARNi para el receptor sigma-1 o en ratones KO para el receptor sigma-1. En conjunto, estos resultados demuestran que la cocaína puede ser capaz de modular la transmisión dopaminérgica mediada por el receptor D1, mediante la interacción con una de sus proteínas de unión, el receptor sigma-1. Estos resultados introducen una nueva perspectiva para entender las bases moleculares de la adicción a cocaína.
Identification of higher-order oligomers localized in the plasma membrane is essential for understanding the decoding properties of molecular networks controlling cell-to-cell communication. Bioluminescence and fluorescence resonance energy transfer techniques (BRET and FRET, respectively) have been fundamental for the demonstration of homodimers and heterodimers of heptaspanning membrane receptors. We introduce a sequential BRET-FRET (SRET) approach that allows the identification of heteromers with three different heptaspanning membrane receptors. By means of SRET, complexes of cannabinoid CB1, dopamine D2 and adenosine A2A receptors, which are colocalized in striato-pallidal GABA neurons and importantly participate in motivational and motor control, have been identified in living cells. The interactions in these complexes involve hydrophilic intracellular domains that contain evolutionarily conserved arginine-rich epitopes, whose guanidinium groups form salt bridges with a phosphorylated serine or threonine residues from a CK1/2 consensus site. Experiments with selective mutation of these reactive amino acids demonstrated that each protomer in the A2A-CB1-D2 receptor heteromer contains two intracellular key domains that establish selective electrostatic interactions with intracellular domains of the other two protomers. Mutation-induced disruption of the quaternary structure of the A1-CB1-D2 receptor heteromer led to functional modifications (change in MAPK signaling), which allowed their identification in rodent brain tissue.
A new mechanism by which cocaine modulates dopaminergic neurotransmission is described. Sigma-1 receptors heteromerizes with dopamine D1 receptors in living cells and cocaine binding to sigma-1 receptors induces significant structural changes in the D1-sigma-1 receptor heteromer. D1-sigma-1 receptor heteromerization introduces a new perspective to understand the molecular basis of cocaine addiction.

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Dissertations / Theses on the topic 'Dopamina'

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