Dissertations / Theses on the topic 'Embriologia'

El desarrollo embrionario del núcleo estriado está controlado por gran cantidad de factores de transcripción. En esta tesis, nos centramos en el estudio de los miembros de la familia de factores de transcripción Ikaros. Los miembros de esta familia que se expresan en el primordio embrionario del núcleo estriado, eminencia ganglionar lateral (EGL) son Helios e Ikaros. Helios se expresa en la EGL durante la etapa embrionaria y es completamente ausente en el estriado de animales adultos. Esta proteína se expresa tanto en las zonas donde habitan los precursores neurales como en las zonas de precursores más diferenciados. Presenta una elevada relación con marcadores de precursores neuronales inmaduros como la nestina siendo su expresión completamente ausente en los precursores neurales que se diferenciarán hacia astrocitos. Los estudios realizados in vitro, mediante el uso del ensayo de neurosferas y de cultivos primarios, demuestran que la sobreexpresión de Helios induce un aumento en la neurogénesis y una reducción en la astrogénesis. Al estudiar el otro factor de la familia, Ikaros, observamos que esta proteína se expresa exclusivamente durante las edades embrionarias del desarrollo de la EGL. Está localizada exclusivamente en la zona del manto donde residen los precursores neuronales postmitóticos. La sobreexpresión de Ikaros en el ensayo de neurosferas induce una reducción del número de células proliferantes. En cambio, los precursores derivados de animales deficientes de Ikaros presentan una tasa de proliferación más elevada. Estos resultados nos indican que Ikaros induce la salida de ciclo de los precursores neurales regulando el ciclo celular. El mecanismo de acción por el cual Ikaros induce la salida de ciclo celular es regulando los niveles de la proteína inhibidora de ciclina p21 y favoreciendo así la diferenciación hacia fenotipos neuronales, específicamente neuronas encefalinérgicasl. Además de demostrar la funcionalidad de estas proteínas, nuestros resultados demuestran que existe una relación en el mecanismo de acción de Helios e Ikaros y que ambas proteínas están situadas en la misma vía de diferenciación estriatal de la familia Dlx. Así pues, la presente tesis describe la función de dos factores de transcripción, Helios e Ikaros, que ambos están implicados en el desarrollo embrionario del núcleo estriado.
“Study the role of the family of Ikaros transcription factor during striatum development” TEXT: The embryionic development of striatum is controlled by many transcription factors. In this thesis, we focus on the study of family members of Ikaros transcription factor. The members of this family that are expressed in the striatum embryonic primordium, lateral ganglionic eminence (LGE), are Helios and Ikaros. Helios is expressed during embryonic ages specifically in LGE. During development, Helios is expressed in areas where precursors are inhabited (subventricular zone), as well as in areas where more mature cells are located (mantle zone). This protein has a high relationship with markers of immature neural precursors as nestin. Neurospheres assay that Helios overexpression induces a reduction of proliferative tax in the precursors. Moreover, Helios induces an increase in neurogenesis process and a reduction in astrogenesis differentiation as we can observe studying the overexpression of Helios in primary cultures. The other member of the family expressed in LGE, Ikaros, is expressed only in embryonic ages exclusively in the mantle zone. In vitro studies show that Ikaros overexpression in precursors cultures induce a reduction in proliferative tax. However, precursors from Ikaros knockout mice proliferate more than precursors from wilt type. The reduction of proliferative tax is regulated by cyclin inhibitor protein p21. Cell cycle exit promote enkephalinergic neuronal differentiation as well as astrogenic inhibition as we can observe in neurosphere assay and primary cultures. In order to study Ikaros and Helios function in striatum development, we observe Helios and Ikaros act in the same differentiation involved in striatum development, de Dlx pathways. Both proteins are expressed downstream of Dlx1/2 however the relationship with the other transcription factor Dlx5/6 is different. While Helios is expressed upstream of Dlx5/6, Ikaros is expressed downstream of these transcription factors. In summary, we describe the role of two new proteins involved in striatum development: Helios and Ikaros.

Utilizando un sensor de vibraciones (disco cerámico piezoeléctrico) y aparatos de medición y registro, se han estudiado las señales u ondas vibratorias producidas por los movimientos somáticos del embrión de pollo y su frecuencia cardiaca a lo largo de todo el periodo de desarrollo y bajo condiciones normales. Se obtuvieron datos dinámicos por tres vías diferentes que se complementan entre si: 1) Distribución temporal de los movimientos (periodos de actividad-inactividad de intensidad); 2) Distribución frecuencial de las vibraciones producidas por estos movimientos; y 3) Distribución de las intensidades de las vibraciones y nivel medio de las mismas. Se completó el estudio correlacionando los datos dinámicos con los datos morfológicos que se apreciaron en los cortes histológicos de las articulaciones de estos mismos embriones sacrificados en sucesivos estadios de desarrollo.

Orientador: Vera Lucia Sactena
Banca: Adelita Ap. Sartori Paoli
Banca: Denise Maria Trombert Oliveira
Banca: Simone Pádua Teixeira
Banca: Daniela Guimarães Simão
Resumo: A embriologia e o desenvolvimento pós-seminal de Olyra humilis, Sucrea monophylla (Bambusoideae), Axonopus aureus, Paspalum polyphyllum (Panicoideae), Eragrostis solida e Chloris elata (Chloridoideae) foram estudadas visando à caracterização dessas subfamílias de Poaceae. As anteras são bitecas e tetrasporangiadas; apresentam tapete secretor; microsporogênese sucessiva; tétrades isobilaterais, grãos de pólen esféricos, tricelulares, monoporados, com anel e opérculo. Apresentam óvulo bitegumentado; saco embrionário tipo Polygonum; endosperma nuclear e embrião lateral. As espécies apresentam raiz embrionária de origem endógena (adventícia), cotilédone dividido em hiperfilo (escutelo), bainha reduzida e hipofilo (coleóptilo), coleorriza (raiz primária reduzida), mesocótilo (eixo entre escutelo e coleóptilo) e epiblasto (folha embrionária). O desenvolvimento pósseminal inicia-se com a emissão da coleorriza, seguida do coleóptilo e primeira folha desenvolvida semelhante ao metafilo, exceto em Bambusoideae, que é modificada em catafilo. Essas características embriológicas e do desenvolvimento pós-seminal se assemelham com as demais espécies de Poaceae já estudadas. Algumas características são diagnósticas para as subfamílias como grãos de pólen com exina granulosa em Bambusoideae, insular com espínulos densamente agrupados em Panicoideae e com espínulos esparsamente agrupados em Chloridoideae; óvulo hemianátropo pseudocrassinucelado em Bambusoideae e Panicoideae e campilótropo tenuinucelado em Chloridoideae; tegumento externo restrito à base do óvulo em Bambusoideae, estendendo até um terço do nucelo em Panicoideae e alongado até a região próxima à micrópila em Chloridoideae.
Abstract: The embryology and post-seminal development of Olyra humilis, Sucrea monophylla (Bambusoideae), Axonopus aureus, Paspalum polyphyllum (Panicoideae), Eragrostis solida and Chloris elata (Chloridoideae) were studied here in order to characterize the respective subfamilies within Poaceae. The bithecous and tetrasporangiate anthers present: secretory tapetum, successive microsporogenesis, isobilateral tetrads, and spherical pollen grains, which are tricellular and monoporate and have annulus and operculum. The ovule is bitegmic and the embryo sac is of the Polygonum type. The endosperm is nuclear and the embryo is lateral. The studied species have endogenous embryonic root (adventitious); cotyledon divided into hyperphyll (scutellum), reduced sheath and hypophyll (coleoptile); coleorhiza (reduced primary root); mesocotyl (axis between the scutellum and the coleptile); and epiblast (embryonic leaf). The post-seminal development starts with the emission of the coleorhiza, followed by the coleoptile and the first leaf, which is similar to the metaphyll except for Bambusoideae, in which it converts into a cataphyll. These embryological and post-seminal developmental features resemble the ones already known for species of Poaceae. Some features are diagnostic within the subfamilies: the exine of the pollen grain is granulose in Bambusoideae, insular with densely grouped spinules in Panicoideae, and insular with scarcely grouped spinules in Chloridoideae; the ovule is hemi-anatropous and pseudocrassinucelate in both Bambusoideae and Panicoideae, but it is campylotropous and tenuinucellate in Chloridoideae; the outer integument is restricted to the base of the ovule in Bambusoideae, whereas in Panicoideae it reaches up to one third of the nucellus, and in Chloridoideae it extendes until the micropyle.
Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-28Bitstream added on 2014-06-13T21:01:46Z : No. of bitstreams: 1 nakamura_at_dr_rcla.pdf: 6553085 bytes, checksum: f435f359f0a4b6c70dc1300f43ee20ad (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
A embriologia e o desenvolvimento pós-seminal de Olyra humilis, Sucrea monophylla (Bambusoideae), Axonopus aureus, Paspalum polyphyllum (Panicoideae), Eragrostis solida e Chloris elata (Chloridoideae) foram estudadas visando à caracterização dessas subfamílias de Poaceae. As anteras são bitecas e tetrasporangiadas; apresentam tapete secretor; microsporogênese sucessiva; tétrades isobilaterais, grãos de pólen esféricos, tricelulares, monoporados, com anel e opérculo. Apresentam óvulo bitegumentado; saco embrionário tipo Polygonum; endosperma nuclear e embrião lateral. As espécies apresentam raiz embrionária de origem endógena (adventícia), cotilédone dividido em hiperfilo (escutelo), bainha reduzida e hipofilo (coleóptilo), coleorriza (raiz primária reduzida), mesocótilo (eixo entre escutelo e coleóptilo) e epiblasto (folha embrionária). O desenvolvimento pósseminal inicia-se com a emissão da coleorriza, seguida do coleóptilo e primeira folha desenvolvida semelhante ao metafilo, exceto em Bambusoideae, que é modificada em catafilo. Essas características embriológicas e do desenvolvimento pós-seminal se assemelham com as demais espécies de Poaceae já estudadas. Algumas características são diagnósticas para as subfamílias como grãos de pólen com exina granulosa em Bambusoideae, insular com espínulos densamente agrupados em Panicoideae e com espínulos esparsamente agrupados em Chloridoideae; óvulo hemianátropo pseudocrassinucelado em Bambusoideae e Panicoideae e campilótropo tenuinucelado em Chloridoideae; tegumento externo restrito à base do óvulo em Bambusoideae, estendendo até um terço do nucelo em Panicoideae e alongado até a região próxima à micrópila em Chloridoideae.
The embryology and post-seminal development of Olyra humilis, Sucrea monophylla (Bambusoideae), Axonopus aureus, Paspalum polyphyllum (Panicoideae), Eragrostis solida and Chloris elata (Chloridoideae) were studied here in order to characterize the respective subfamilies within Poaceae. The bithecous and tetrasporangiate anthers present: secretory tapetum, successive microsporogenesis, isobilateral tetrads, and spherical pollen grains, which are tricellular and monoporate and have annulus and operculum. The ovule is bitegmic and the embryo sac is of the Polygonum type. The endosperm is nuclear and the embryo is lateral. The studied species have endogenous embryonic root (adventitious); cotyledon divided into hyperphyll (scutellum), reduced sheath and hypophyll (coleoptile); coleorhiza (reduced primary root); mesocotyl (axis between the scutellum and the coleptile); and epiblast (embryonic leaf). The post-seminal development starts with the emission of the coleorhiza, followed by the coleoptile and the first leaf, which is similar to the metaphyll except for Bambusoideae, in which it converts into a cataphyll. These embryological and post-seminal developmental features resemble the ones already known for species of Poaceae. Some features are diagnostic within the subfamilies: the exine of the pollen grain is granulose in Bambusoideae, insular with densely grouped spinules in Panicoideae, and insular with scarcely grouped spinules in Chloridoideae; the ovule is hemi-anatropous and pseudocrassinucelate in both Bambusoideae and Panicoideae, but it is campylotropous and tenuinucellate in Chloridoideae; the outer integument is restricted to the base of the ovule in Bambusoideae, whereas in Panicoideae it reaches up to one third of the nucellus, and in Chloridoideae it extendes until the micropyle.

Orientador: Júlia Ziviani Vitiello
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Artes
Made available in DSpace on 2018-08-21T09:54:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lourenco_Robson_M.pdf: 4093412 bytes, checksum: 5644ca1ce88fba83b6892a2fee5237a4 (MD5) Previous issue date: 2012
Resumo: Esta pesquisa propõe a investigação entre duas áreas de conhecimento: Dança e Embriologia Humana. A primeira é desenvolvida através das técnicas de dança e práticas artísticas. Através da Embriologia Humana considera algumas das reflexões sobre a fenomenologia de Johann Wolfgang Goethe (1749-1832), a qual desenha inter-relações a partir da observação da estrutura total dopróprio fenômeno, onde o individuo não está separado da pesquisa, mas faz parte integral da experiência. Desenvolve uma metodologia do corpo na dança, onde o conhecimento não deve vir através de fenômenos isolados, mas sim através de suas inter-relações entre sujeito e objeto de pesquisa, onde os sentidos, a intuição e o raciocínio devem ser usados para acompanhar a experiência do fenômeno.Nos relacionamentos entre Dança e Embriologia Humana é possível criar procedimentos artísticos diferenciados, visando tanto a compreensão corporal dos conteúdos da embriologia, quanto para a criação de um solo de dança
Abstract: This research proposes the investigation of two areas of expertise: Dance and Human Embryology. The first is developed through the techniques of dance and artistic practices. Through the Human Embryology considers some of the reflections on the phenomenology of Johann Wolfgang Goethe (1749-1832), which draws inter-relationshipsfrom the observation of the total structure of the phenomenon itself, where the individual is not separate from research, but is an integral part of the experience.This research develops a methodology of the body in dance, where knowledge should not come acrossas isolated phenomena, but rather through their inter-relationships between subject and object of research, where the senses, intuition and reasoning should be used to monitor the experience of the phenomenon. Inrelationships between dance and Human Embryology is possible to create different artistic procedures, aimed at both understanding in content of embryology and for the creation of a solo dance
Mestrado
Artes Cenicas
Mestre em Artes

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-02Bitstream added on 2014-06-13T19:40:25Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_assbs_dr_botib.pdf: 4158514 bytes, checksum: 5956ae458c6e301103b5dc97aeaa09ce (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
O processo educacional sofreu massificação nos últimos anos devido ao crescimento do conhecimento, a facilidade de acesso, a oferta de cursos, aliados às novas tecnologias da informação e comunicação. Assim, surgiram grupos de pesquisa dedicados a métodos de aprendizagem com o objetivo de elucidar e aperfeiçoar o processo de aquisição de conhecimentos e suas competências, além de torná-los mais eficientes. Desta forma, esta pesquisa teve como objetivos elaborar conteúdos didáticos, na forma de curso sobre o tema “Embriologia Comparada”, transpô-los para um ambiente virtual de apoio ao aprendizado presencial e não presencial, disponibilizá-lo aos alunos do 2º ano de Biologia noturno da UNESP, Campus de Botucatu, e por fim avaliar o seu impacto no processo ensino/aprendizagem. Para isto, foi necessária a construção do projeto didático-pedagógico sobre o tema proposto voltado para a educação não presencial O conteúdo didático foi produzido por professores especialistas e dividido em 15 módulos para facilitar a sua visualização, interação e compreensão pelos alunos. Estes foram customizados para linguagem digital, contendo textos, hipertextos, multimídia, hipermídia, imagens, vídeos e animações. Após, baseado na análise do público-alvo, iniciou-se a construção da sua programação visual e seu design instrucional, sendo inserido no ambiente virtual de ensino Moodle, que era acessado mediante senha. Este foi customizado e disponibilizado durante o oferecimento da Disciplina de “Embriologia Comparada” aos alunos do 2º ano de Biologia noturno da UNESP, Campus de Botucatu. Os alunos participaram do ambiente por meio de fórum, consulta ao material didático, chat, wiki e jogos interativos. A avaliação do processo de aprendizagem ocorreu de duas formas: a primeira comparou as notas dos alunos com as notas das três turmas anteriores da mesma...
The educational process has undergone massification in recent years due to the growth of knowledge, ease of access and offering of courses combined with new information and communication technology. Thus, research groups appeared devoted to study learning methods in order to clarify and improve the process of acquiring knowledge and skills, as well as to make them more efficient. This research aimed to develop an educational content in “Comparative Embryology”, and customize it in a virtual environment of learning to support classroom and distance learning. The content was available to second-year Biology students of UNESP, Botucatu, and its impact on teaching/learning process was assessed. It was necessary to build the didactic-pedagogic project while the scientific contents were produced by expert teachers and divided into 15 modules for easy viewing, interaction and understanding among the students. The modules were adapted to digital language and contained texts, hypertexts, multimedia, hypermedia, images, videos and animations. Based on analysis of the target audience, the visual programming and instructional design begun, inserted in Moodle Virtual Learning Environment, which was accessed by password. The students participated in the online learning environment through forums, consultation of the material, chat, wiki and interactive games. The evaluation of the learning process occurred in two ways: the first compared the grades of the students with grades of three previous classes of the same discipline; the second was performed by means of a questionnaire that assessed the environment, by the end of the course, answered by the students. Regarding test scores, when compared with previous years, there was no significant difference. In contrast, after the students analyzed the virtual environment, they said that the educational content was good and approved... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador : Neusa Taroda Ranga
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-07-28T02:16:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Teixeira_SimonedePadua_D.pdf: 32778598 bytes, checksum: dfb60d8ef1ab2bac08e67d0c348f2d42 (MD5) Previous issue date: 2001
Resumo: Estudos reprodutivos em Leguminosae são escassos e restritos principalmente a espécies de importância agrícola e às encontradas em regiões temperadas. As informações disponíveis mostram uma alta incidência de aborto de flores e frutos na família, fenômeno também observado nas duas espécies brasileiras de Dahlstedtia Malme. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a ocorrência de aborto nos representantes de D. pínnata e D. pentaphy/la e, para tal, procurou-se: 1. investigar o desenvolvimento da flor, do grão de pólen, do óvulo e dos primeiros estádios da semente, compará-Io ao de outros representantes de Papilionoideae e, então, verificar a ocorrência de anomalias no decorrer do processo; 2. verificar o comportamento e a contagem dos cromossomos meióticos, e a normalidade das tétrades para avaliar se o grão de pólen pode ser considerado um fator limitante nos eventos de fertilização; 3. verificar a relação entre o aborto e a posição das flores/frutos na inflorescência/planta e dos óvulos/sementes no ovário/fruto e, 4. levantar a distribuição geográfica, os períodos de floração e frutificação e verificar a possibilidade de fertilização interespecífica, a fim de relacionar seus efeitos no processo reprodutivo das espécies e, juntamente aos resultados de morfologia externa e interna, esclarecer melhor a delimitação entre elas. Botões, flores fertilizadas e não fertilizadas, frutos e sementes em vários estádios de desenvolvimento foram utilizados em análises cito-histológicas e em testes da estratégia reprodutiva adotada pelas plantas. As características encontradas no desenvolvimento floral são comuns à subfamília Papilionoideae. Anomalias e supressão de órgãos florais não foram encontrados. Diferenças em níveis taxonômicos infragenéricos são raras nos primeiros estádios da ontogênese; entretanto as espécies diferiram na distribuição de cavidades secretoras nos órgãos florais. O número cromossômico encontrado foi n = 11, contagem inédita para as espécies. Como o estudo citológico abrangeu todas as espécies do gênero, conclui-se que o número básico é igual a 11. D. pentaphy/la é uma espécie meioticamente estável e os grãos de pólen não são limitantes da fertilização. Já D. pínnata apresenta regularidade meiótica menor, resultando num maior número de grãos de pólen estéreis e, tal dado, juntamente com observações de grande número de rebrotas nas plantas, pode indicar que a propagação vegetativa tem maior importância no processo reprodutivo desta espécie. O desenvolvimento do óvulo é do tipo «Polygonum» e o do endosperma Nuclear. Não foram encontradas diferenças entre a autopolinização e a polinização cruzada quanto à germinação do pólen, ao crescimento do tubo polínico, à megagametogênese, à dupla fertilização e à embriogênese. Em todos os tratamentos foram observados a retração e o espessamento prematuros das paredes celulares dos tegumentos e da placenta, seguidos de colapsos do saco embrionário (óvulo) ou do zigoto e do endosperma (semente). As espécies são autocompatíveis, não tendo sido observados mecanismos pré- ou pós-zigóticos atuando como barreiras à autofertilização. Em D. pentaphyfla não há diferenças na polinização de flores e na formação de frutos em determinada região da inflorescência. Não se encontrou também relação entre o acúmulo de calose no óvulo e sua posição no ovário, bem como entre semente em desenvolvimento e sua posição no fruto. O aborto nas espécies está mais relacionado à limitação de recursos maternos ao nível do fruto e ao nível do embrião, devido aos altos custos da frutificação e maturação das sementes, o que pode ser confirmado pela presença de características abortivas ocorrendo primeiro nos tecidos maternos dos óvulos e sementes e depois nos embriogênicos. As duas espécies apresentam distribuição restrita às áreas de Floresta Atlântica, mas não se observou sobreposição geográfica. Plantas de D. pinnata podem ser encontradas nos Estados do Rio de Janeiro e de São Paulo e de D. pentaphy/la nos Estados de São Paulo, Paraná e Santa Catarina. Não se observou a formação de embriões após os cruzamentos interespecíficos. A fertilização em D. pinnata foi evitada pela presença de uma secreção micropilar densa e em grande quantidade, impedindo a penetração do tubo polínico. As espécies não estão isoladas sazonalmente, mas estão geograficamente separadas. Provavelmente, não trocam pólen na natureza e, se trocassem, não haveria formação de sementes
Abstract: Flowers, fruits and seed abortion was studied in two Brazilian species: Dahlstedtia pinnata e D. pentaphy/la (Leguminosae, Papilionoideae). Such a study was developed through investigations of: 1. floral development, microsporogenesis, ovule and early seed development following open, self- and cross-pollination, in order to compare the results to other papilionoids and to verify the occurrence of abnormalities in the process; 2. chromosome number, meiotic behavior and meiotic index, in order to verify if pollen grains can limit the fertilization events; 3. fruiting pattern related with position within the inflorescence and ovule degeneration and seed development related with position within ovaries and fruits; 4. geographical distribution, flowering and fruiting, gene flow possibility and their eftects in the reproductive process and delimitation of the species. Buds, fertilized and unfertilized flowers, fruits and seeds in several developmental stages were utilized in histological studies and in tests of the reproductive strategies adopted by plants. D. pinnata and D. pentaphylla shared common developmental pathways in flower formation of other papilionoids. Anomalies and suppression of floral organs were not found. Differences in characters expressed in early stages of ontogeny in infrageneric taxa are scarce; however, species differed in the distribution of secretory cavities on floral organs. Both species have n = 11 and such a chromosome number has not been reported before. The basic number is also 11, because cytological observations included ali species in Dahlstedtia. Plants of D. pentaphy/la are meiotically stable and pollen grains do not limit fertilization. D. pinnata showed lower meiotic index, and a high number of adventitious shoots, which can indicate that vegetative propagation has a great importance in that species. Embryo sac development is of the «polygonum» type and endosperm development follows the «Nuclear» type. No differences were observed between cross- and self-pollination in pollen germination, pollen tube growth, megagametogenesis, double fertilization and embryogenesis. In ali treatments premature thickening and retraction of cell walls were observed in the integuments and placenta, followed by embryo sac collapse (ovule) or endosperm and zygote failures (seed). Species are self-compatible, with no occurrence of pre- or post-zygotic mechanisms as barriers to selfing. In D. pentaphylla no differences were found in flower pollination and in fruit production according to the region in the inflorescence; or in degenerating ovule and developing seed according to their position within ovary and fruit. Seed abortion is mostly related to the limited maternal resource at fruit and embryo levels rather than the high degree of self-pollination, which can be confirmed by the occurrence of abortive characteristics first in maternal tissues and later in the offspring. 80th species present distribution restrict to Atlantic Forest, but are geographically isolated in State of São Paulo. There are reports for D. pinnata plants in State of Rio de Janeiro and São Paulo, and for D. pentaphy//a in State of São Paulo, Paraná and Santa Catarina. No embryos were observed after interspecific crossing. Fertilization in D. pinnata was avoided by a dense secretion occupying ali micropilar cavity, obstructing the pollen tube enter. Species are not sazonally isolated, but geographically, and it seems that there is not gene flow between species
Doutorado
Doutor em Biologia Vegetal

Orientadores: Sandra Maria Carmello-Guerreiro, Simone de Padua Teixeira
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-09T03:29:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cortez_PriscilaAndressa_M.pdf: 142634667 bytes, checksum: 533aad1a400f13a4d678be944c37b495 (MD5) Previous issue date: 2007
Resumo: Miconia albicans (Melastomataceae) mostrou-se uma espécie com agamospermia obrigatória do tipo diplosporia e viabilidade polínica nula em populações do Cerrado e da Floresta Atlântica. A inviabilidade polínica não esteve restrita a um único estádio de desenvolvimento dos andrófitos e a principal anormalidade observada nas anteras de flores em pré-antese foi a deformidade das células reprodutivas, principalmente aquelas em estádio de andrósporos livres. A intensa vacuolação das células androsporogênicas e tapetais, bem como a precoce degeneração das células do tapete, podem ser características relacionadas à esterilidade masculina da espécie. A ontogenia dos estratos parietais diferiu da observada em outros membros do gênero, corroborando a sua classificação como irregular. Anteras em estádio de pré-deiscência apresentaram a região de deiscência coberta por uma provável epiderme com características distintas daquela observada no restante da mesma. Diferenças ambientais foram observadas apenas na quantidade de células encontradas nas anteras de flores em pré-antese, cerca de 50% maior nos indivíduos provenientes do Cerrado. A ontogenia do óvulo e do ginófito se assemelhou àquela observada em outras espécies do gênero, exceção feita a divisão da célula arquesporial e a supressão da meiose em M. albicans. Os embriões agamospérmicos foram originados no interior do ginófito, a partir da oosfera ou de uma das duas sinérgides. Evidências sugerem que o endosperma autônomo do tipo nuclear foi originado por expansões de cada um dos núcleos da célula central, e não por sua fusão. A porcentagem de aborto de óvulos na espécie foi de cerca de 50% e as sementes maduras produzidas apresentaram uma porcentagem de germinação bastante variável, provavelmente em decorrência da alta incidência de fungos observada nos experimentos realizados. Os frutos formados em botões florais apresentaram características semelhantes às observadas nas demais unidades, incluindo a viabilidade das sementes
Abstract: Miconia albicans (Melastomataceae) is a species with diplosporic obligate agamospermy and no pollen viability in ¿Cerrado¿ and Atlantic Forest vegetations. The sterility of pollen grains wasn¿t restricted to one developmental stage and the major abnormality of the cells from pre-anthesis flower anthers was the deformation of the reproductive cell wall, mainly in the free microspore stage. Intense vacuolation of both sporogenous and tapetal cells as well as the precocious degeneration of the tapetal cells may be related to male sterility in this species. The ontogeny of the parietal layers was different from that observed in another species of the genus and was in agreement with its classification of irregular type. The anthers in predehiscence stage showed the dehiscence region probable closed with an epidermis with papilous cells, differently from that observed in the another anther regions. Ambient differences were restricted to the number of cells observed in the pre-anthesis anthers, which was about 50 percent up in the Atlantic Forest vegetation in relation to the Cerrado one. The ovule and embryo sac ontogeny was similar to that observed in another species of the genus, except for the division of the arquesporic cell and the suppression of the meiotic division during the gametogenesis, both observed only in M. albicans. The agamospermous embryos were originated in the embryo sac from the egg cell or one of two synergids. Evidence suggested that the nuclear autonomous endosperm was originated from expansions in both nucleus of the central cell, and not from the fusion of both. The percentage of ovule abortion was about 50 percent and the mature seeds showed a variable germination percentage probably due to fungi incidence which occurred in the seeds from both environments. The ontogenetic characteristics observed in fruits from both floral buds and flowers were similar, as well as the seeds viability
Mestrado
Biologia Vegetal
Mestre em Biologia Vegetal

Orientador: Wilma de Grava Kempinas
Banca: Joel Carlos Lastória
Banca: Selma Maria Michelin Matheus
Banca: Carlos Antonio Caramori
Banca: Isabel Cristina Cherici Camargo
Resumo: O processo educacional sofreu massificação nos últimos anos devido ao crescimento do conhecimento, a facilidade de acesso, a oferta de cursos, aliados às novas tecnologias da informação e comunicação. Assim, surgiram grupos de pesquisa dedicados a métodos de aprendizagem com o objetivo de elucidar e aperfeiçoar o processo de aquisição de conhecimentos e suas competências, além de torná-los mais eficientes. Desta forma, esta pesquisa teve como objetivos elaborar conteúdos didáticos, na forma de curso sobre o tema "Embriologia Comparada", transpô-los para um ambiente virtual de apoio ao aprendizado presencial e não presencial, disponibilizá-lo aos alunos do 2º ano de Biologia noturno da UNESP, Campus de Botucatu, e por fim avaliar o seu impacto no processo ensino/aprendizagem. Para isto, foi necessária a construção do projeto didático-pedagógico sobre o tema proposto voltado para a educação não presencial O conteúdo didático foi produzido por professores especialistas e dividido em 15 módulos para facilitar a sua visualização, interação e compreensão pelos alunos. Estes foram customizados para linguagem digital, contendo textos, hipertextos, multimídia, hipermídia, imagens, vídeos e animações. Após, baseado na análise do público-alvo, iniciou-se a construção da sua programação visual e seu design instrucional, sendo inserido no ambiente virtual de ensino Moodle, que era acessado mediante senha. Este foi customizado e disponibilizado durante o oferecimento da Disciplina de "Embriologia Comparada" aos alunos do 2º ano de Biologia noturno da UNESP, Campus de Botucatu. Os alunos participaram do ambiente por meio de fórum, consulta ao material didático, chat, wiki e jogos interativos. A avaliação do processo de aprendizagem ocorreu de duas formas: a primeira comparou as notas dos alunos com as notas das três turmas anteriores da mesma... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: The educational process has undergone massification in recent years due to the growth of knowledge, ease of access and offering of courses combined with new information and communication technology. Thus, research groups appeared devoted to study learning methods in order to clarify and improve the process of acquiring knowledge and skills, as well as to make them more efficient. This research aimed to develop an educational content in "Comparative Embryology", and customize it in a virtual environment of learning to support classroom and distance learning. The content was available to second-year Biology students of UNESP, Botucatu, and its impact on teaching/learning process was assessed. It was necessary to build the didactic-pedagogic project while the scientific contents were produced by expert teachers and divided into 15 modules for easy viewing, interaction and understanding among the students. The modules were adapted to digital language and contained texts, hypertexts, multimedia, hypermedia, images, videos and animations. Based on analysis of the target audience, the visual programming and instructional design begun, inserted in Moodle Virtual Learning Environment, which was accessed by password. The students participated in the online learning environment through forums, consultation of the material, chat, wiki and interactive games. The evaluation of the learning process occurred in two ways: the first compared the grades of the students with grades of three previous classes of the same discipline; the second was performed by means of a questionnaire that assessed the environment, by the end of the course, answered by the students. Regarding test scores, when compared with previous years, there was no significant difference. In contrast, after the students analyzed the virtual environment, they said that the educational content was good and approved... (Complete abstract click electronic access below)
Doutor

Infertility, defined by the World Health Organization (WHO) as the inability to conceive after a year of unprotected sex, is a disease that affects 1 in 9 couples of reproductive age worldwide. Most of these couples will only achieve pregnancy through assisted reproduction techniques. In recent decades, many improvements have been made in this field, but no method has been able to achieve 100% success. There are many variables that could affect the outcome of assisted reproduction cycles, one of the most important is the quality of the woman's oocytes. Maternal age is the most important factor affecting women’s ability to conceive and give birth, since female reproductive aging is associated with reduced oocyte quality; however, the underlying molecular mechanisms remain poorly understood. It is also well established that as woman age increases, her ovarian reserve diminishes. However, the role of ovarian reserve in the decline of oocyte quality with age is currently unknown. The developmental competence of an oocyte is its ability to sustain embryonic development until embryonic genome activation. It is determined by the transcripts (coding and non-coding RNAs) accumulated during oocyte maturation. The lack of transcription during final oocyte maturation suggests that regulation of the genes involved in this process occurs at the post-transcriptional level. Among the possible mechanisms, alternative splicing (AS) of the messenger RNA could be involved. Studying oocyte gene expression and the spliced mRNA isoforms might provide novel information on the molecular mechanisms driving early development, and might be a source of potential biomarkers of oocyte quality. The main objective of this thesis is to explore new possibilities for the identification of oocyte quality biomarkers at the molecular level in order to better understand the oocyte and how its developmental competence can be improved. For this, the results of oocytes from women with different age and ovarian reserve have been compared. In addition, to identify non-invasive biomarkers for oocyte developmental competence, the evaluation of the association between the expression analysis of different aging markers in human cumulus cells (CCs), the age and ovarian reserve and the oocyte maturation rates was conducted. Finally, because many of the oocytes used were vitrified, the effect of vitrification on oocyte developmental competence was analysed by comparing the reproductive outcomes of fresh and vitrified oocytes from the same stimulation cycle. The results suggest an important role for ncRNAs and alternative splicing in human oocyte biology. Age and ovarian reserve have been shown to independently affect the ncRNAs transcriptome of in vivo matured oocytes. These results might provide valuable information for the search of oocyte quality markers, and for the (re)interpretation of existing dataset. On the other hand, differences in transcribed splicing variants can also provide biomarkers of oocyte quality, since the profile of confirmed AS events could determine the specific transcriptome of the mature oocyte. The expression of common somatic aging markers in CCs didn’t show a clear correlation between the analysed genes and age, suggesting that CCs of reproductively old women do not present the typical transcriptome of aged tissues. In addition, when looking at future clinical applications, these markers have not been found useful for the development of non-invasive markers for oocyte developmental competence, since no correlation was observed either with the ovarian reserve or the oocyte maturation rates. Finally, this study showed that oocyte vitrification per se maintained the developmental potential of human oocytes within a reasonable biological range, clinically comparable to fresh oocytes. As a consequence, we established that the main reason for the reported lower clinical results in vitrified cycles has to be attributed to the loss of oocytes during the warming step. This has important repercussions in the clinical practice, as measures can be easily put in place to offset oocyte loss.
La competencia de desarrollo ovocitaria se define como la capacidad del ovocito para mantener el desarrollo embrionario hasta que el embrión activa su propio genoma. Está determinada por los transcritos (ARN codificantes y no codificantes) acumulados durante la maduración de los ovocitos. La falta de transcripción durante la maduración final de los ovocitos sugiere que la regulación de los genes involucrados en este proceso ocurre a nivel postranscripcional. Entre los posibles mecanismos, el “splicing alternativo” del ARN mensajero, podría estar involucrado. El objetivo principal de esta tesis es explorar nuevas posibilidades para la identificación de biomarcadores de calidad de ovocitos a nivel molecular con el fin de comprender mejor el ovocito y cómo se puede mejorar su competencia de desarrollo. Además, para identificar biomarcadores no invasivos de la competencia de desarrollo de ovocitos, se ha evaluado la expresión de diferentes marcadores de envejecimiento somático en células de cúmulos humanos que rodean los ovocitos, y se ha correlacionado con la edad y la reserva ovárica de las mujeres y con las tasas de maduración de los ovocitos. Finalmente, debido a que muchos de los ovocitos utilizados estaban vitrificados, se ha analizado el efecto de la vitrificación sobre la competencia de desarrollo de los ovocitos comparando los resultados reproductivos de ovocitos frescos y vitrificados del mismo ciclo de estimulación. Los resultados sugieren que los ARNs no codificantes y el splicing alternativo representan un papel importante en el proceso de adquisición de la competencia de desarrollo en ovocitos humanos. Estos resultados pueden proporcionar información valiosa para la búsqueda de marcadores de calidad de ovocitos y para la (re)-interpretación de conjuntos de datos existentes. El estudio de la expresión de marcadores de envejecimiento somático en células de cúmulos humanos no ha mostrado una clara correlación entre los genes analizados y la edad, lo que sugiere que las células del cúmulo de mujeres de edad reproductiva avanzada no presentan el transcriptoma típico de los tejidos envejecidos. Finalmente, este estudio ha demostrado que la vitrificación de ovocitos mantiene per se el potencial de desarrollo de los ovocitos humanos dentro de un rango biológico razonable, clínicamente comparable a los ovocitos frescos.

Orientador: Luiz Fernando Bleggi Torres
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Parana, Setor de Ciencias da Saude, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna
Resumo: O objetivo do presente trabalho foi a embriologia, histologia e epidemiologia das doenças que acometem o tegumento das crianças. A embriologia, histologia e variações anatômicas da pele (experimento 1) foram estudadas através da avaliação histológica de amostras da pele da região interna da coxa direita coletadas de fetos, natimortos, neomortos, préescolares e adolescentes submetidos a autópsia no Hospital de Clínicas, UFPR. Os aspectos epidemiológicos (experimento li) foram estudados através da revisão de 662 biópsias de pacientes pediátricos, entre 1990 e 1995, diagnosticadas no Serviço de Anatomia Patológica do Hospital de Clínicas, UFPR. Os resultados do experimento 1 foram descritos através de esquemas e fotomicrografias e comparados com dados de literatura. Os resultados do experimento li revelaram predomínio de pacientes com idades oscilando de 7 a 15 anos. Há uma prevalência maior de lesões císticas incluindo cistos epidermóides e dermóides, e lesões tumorais incluindo pilomatricoma e angiomas, em relação as dermatoses neste estudo. Estes resultados são comparados com os de outras séries publicadas. XIV
Abstract: The aim of the present study was the embriology, histology and epidemiology of cutaneous diseases in childhood. The embriological and histological observations (experiment 1), including the study of the anatomical variations of the normal skin, were carried out through the microscopical analysis of fragments of the skin obtained from the internai right thigh of fetus, stillborns, infants and adolecents autopsied at Hospital de Clínicas, UFPR. lhe epidemiological observations (experiment li) were based on the study of 662 skin biopsies that were reviewed from the files of the Division of Anatomic Pathology, Hospital de Clínicas, UFPR between 1990 and 1995. The results of experiment 1 were presented through schemes and pictures, and compared with previous observations reported in the literature. The results of experiment li revealed that there was predominance of skin biopsies from patients with age ranging from 7 to 15 years old. The most prevalent pathological diagnosis in this study were the cystic lesions including epidermoid and dermoid cysts, and benign tumours represented mainly by pylomatrixoma and angiomas. These results were also compared with the world literature.

Orientador: Antonio Benedito Prado Fortuna
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Made available in DSpace on 2018-07-14T04:16:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MiguelJunior_Armando_D.pdf: 2674163 bytes, checksum: d645b735b2b80ec7233e9b3f07d3e532 (MD5) Previous issue date: 1988
Resumo: O primórdio nodal é a estrutura embrionária inicial do nó AV compacto. Caracteriza-se citográficamente por apresentar células com limites imprecisos, citoplasma vermelho brilhante, vacuolizado e núcleos maiores quando comparamos com os núcleos das células precursoras das musculares contrateis. 0 estudo através da cariometria mostrou que, a diferença entre os núcleos das células do primórdio nodal e das precursoras das musculares contrateis, só foi estatisticamente significante nos estádios 16 e 20 de RAHILLY (1371). Histográficamente o primórdio nodal nos embriões dos estádios 15 e 16 de O'RAHILLY apresenta-se como uma faixa recobrindo a região superior da porcão muscular posterior do septo interventricular e nos embriões do estádio 20 de O'RAHILLY assume posicão semelhante à do nó AV compacto definitivo. Estes nossos achados estão de acordo com os de ANDERSON et alii (1976), mas divergem dos de TRUEX et alii (1967,1978) que localizou as células precursoras do nó AV compacto na parede dorsal do átrio primitivo
Abstract: The nodal primordium is the early structure of the compact AV node. It differs from the other parts of the myocardium to exhibit large cells of bright red cytoplasm and "smooth' homogeneous appearence. Throught cariometrie study a significative larger nuclei has been found when compared with -the other cells of myocardium in the human embryos of the 16 and 20, O'RAHILLY stages, In the human embryos of the stages 15 and 16, the nodal primordium recovers the astride posterior muscular ventricular septum in development, and in embryos of the stage 20 it is located in similar position of the definitive AV node. This study is according to ANDERSON et alii's finding (1976), but differs from TRUES et alii's finding (1967, 1878) who had located cells of the nodal pr imord ium in dorsal walls of the primitive atrium
Doutorado
Doutor em Medicina

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2011.
Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-03-30T16:26:23Z No. of bitstreams: 1 2011_LuceliaGoncalvesVieira.pdf: 19615247 bytes, checksum: bdee2332fdcbb89b7aa97010081942bc (MD5)
Approved for entry into archive by Leila Fernandes (leilabiblio@yahoo.com.br) on 2012-04-03T13:29:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_LuceliaGoncalvesVieira.pdf: 19615247 bytes, checksum: bdee2332fdcbb89b7aa97010081942bc (MD5)
Made available in DSpace on 2012-04-03T13:29:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_LuceliaGoncalvesVieira.pdf: 19615247 bytes, checksum: bdee2332fdcbb89b7aa97010081942bc (MD5)
Neste trabalho caracterizamos os estágios embrionários de Melanosuchus niger, baseado nas principais transformações morfológicas sofridas pelo embrião durante o processo de desenvolvimento e descrevemos a formação condrogênica e o padrão de ossificação do esqueleto. Na Reserva Extrativista do Lago do Cuniã, Rondônia, Brasil, seis ninhos foram marcados e protegidos após sua postura. As amostras foram submetidas à técnica de diafanização e coloração dos ossos e cartilagens. Para estágios iniciais foi empregada a técnica histológica de rotina com coloração HE e microscopia eletrônica de varredura para análises mais acuradas. Identificamos 28 estágios embrionários entre a formação do arco faríngeo e eclosão. As variações encontradas no aparecimento das estruturas do M. niger comparado com outros Crocodylia, podem ser explicadas, em parte, pela temperatura. Na coluna vertebral a formação cartilagínea aparece primeiro nos arcos vertebrais e só mais tarde no corpo vertebral, a progressão dessa condensação segue no sentido crânio-caudal. Já o processo de ossificação se inicia nos corpos das vértebras e depois pelos arcos vertebrais também no sentido crâniocaudal. Os processos espinhoso e transverso desenvolvem-se a partir de extensões do arco vertebral e as costelas surgem com centros de ossificação independente. O condrocrânio de M. niger corresponde nas regiões da cápsula nasal orbitotemporal e ótico-occipital. Seu desenvolvimento inicia-se no estágio 9, com a condrificação da cartilagem acrocordal, das trabéculas e da cartilagem mandibular. A cápsula nasal inicia sua formação pela condrificação do septo nasal no estágio 10, que contata a região orbitotemporal através da comissura esfenoetimóide. A cartilagem quadrada bem como a placa basal estão presentes no estágio 13 e 14, respectivamente. O condrocrânio apresenta-se bem formado no estágio 16. Mas as primeiras ossificações são notadas a partir do estágio 13 nos ossos maxila, jugal, pós-orbital, pterigóide e dentário. O osso parietal inicia sua formação óssea a partir de dois centros de ossificação, no estágio 20. O basisfenóide e o paraesfenóide se ossificam nos estágios 15 e 16 e, durante a ontogenia, se fundem e dão origem ao parabasisfenóide. Os ossos da mandíbula se ossificam entre os estágios 13 a 16. Os ossos quadrado, lateroesfenóide, basisfenóide, basioccipital, exoccipital, prootico, epiótico, opistótico, supraoccipital e articular se ossificam de maneira endocondral. Os elementos dérmicos iniciam sua ossificação antes dos endocondrais. Na cintura peitoral a escápula é ligeiramente maior e apresenta centros de ossificação antes do coracóide. Nos elementos da cintura pelvina, ílio e ísquio se desenvolvem como uma peça única, apesar de se ossificarem por dois centros distintos. Já o púbis se desenvolve por um centro cartilagíneo independente e se mantém livre. Nos estágios iniciais descrevemos a formação do estilopódio e zeugopódio dos membros torácicos e pelvinos, oriunda da condensação cartilagínea com formato de Y, diferenciação do eixo primário e arco digital. As maiores alterações foram observadas nos mesopódios, tanto no padrão condrogênico como na ossificação, como fusões de elementos cartilagíneos e ausência de ossificação em algumas falanges. As sequências condrogênica e de ossificação não seguem o mesmo padrão de outros grupos de répteis. Além do mais, as diferenças apontadas entre M. niger e outras espécies indicam claramente que há mais de um padrão desses eventos para os Alligatoridae. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT
In the present work, we characterize the embryonic stages of Melanosuchus niger, based on the main morphological transformations which occurre during development. We also describe the chondrogenesis and ossification pattern of the skeleton. Six nests were labeled and protected following laying in the Reserva Extrativista do Lago Cuniã, Rondônia, Brasil. Samples were prepared using the clearing and double-staining method. For the early stages, a routine histological technique HE, was applied and for more accurate analysis scanning electron microscopy was used. We established 28 embryonic stages from the formation of pharyngeal arches to hatch. The variations found in embryogenesis of M. niger, when compared to other Crocodylia can be partially explained by temperature. Spinal column cartilage formation centers rise in vertebral arches and only later in the vertebral body and the progress of this condensation follow a goes continue in a cranio-caudal direction. The process of ossification begins in the vertebral body and then by the vertebral arches also follow a goes continue in a cranio-caudal direction. The spinous and transverse processes develop from vertebral arch extensions and the ribs develop by independent.The chondrocranium of M. niger corresponds to the nasal capsule, orbitotemporal and oticoccipital regions. Its development begins at stage 9, with condrification of the trabeculae, and the acrocordal and mandibular cartilages. The nasal capsule begins its formation with condrification of the nasal septum at stage 10, which reaches the orbitotemporal region through the sphenoethmoidal commissure. The quadrate cartilage and the basal plate are present at stages 13 and 14, respectively. Chondrocranium is already well formed on Stage 16. However, early ossifications are noticed from stage 13 on maxillary, jugal, postorbital, pterygoid, and dentary bones. The parietal bone begins its formation on two ossification centers, at stage 20. Basisphenoid and Parasphenoid bones are formed at stages 15 and 16. These bones fuse during ontogeny, giving rise to the parabasiphenoid bone. The jaw bones ossify between Stage 13 and 16. Quadrate, laterosphenoid, basisphenoid, basioccipital, exoccipital, prootic, epiotic, opisthotic, supraoccipital and articular bones ossify endochondrally. Skin elements begin their ossification before the endochondral elements. On the forelimb, the scapula is larger than the coracoid and its ossification centers are previously formed. On the hindlimb, the ileum and ischium develop as a single piece, despite their ossifications being performed at two different centers. The pubis is developed by an independent cartilaginous center, and remains unattached. During the early stages, we described the formation of stilopodium and zeugopodim of both the thoracic and pelvic limbs, originated from Y-shaped cartilaginous condensation, and differentiation the primary axis and digital arch. The most important alterations were observed for the mesopodium, on both chondrogenic pattern and ossification, as the fusion of cartilaginous elements and the absence of ossification of some phalanges. The chondrogenic and ossification sequences do not share the same patterns as other groups of reptiles. Moreover, the differences between M. niger and other species indicate that there is clearly more than one pattern of these events among Alligatoridae.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-08Bitstream added on 2014-06-13T21:01:45Z : No. of bitstreams: 1 coan_ai_dr_rcla.pdf: 17033809 bytes, checksum: 1ae8df7113d96a44c82c828cd54a77c3 (MD5)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
The embryology and the seed development of Eriocaulaceae and Cyperaceae were studied here in order to contribute to the taxonomy and phylogeny of both families. The results given by different genera of Eriocaulaceae allowed us to strengthen the embryological uniformity of the family. The endothecial thickenings of the baseplate-type, the spiraperturate pollen grains, the antipodal cyst closely associated to the hypostase, and the operculated endotestal seeds are synapomorphies of Eriocaulaceae within Poales. The use of the character number of microsporangia of anthers in genera delimitation is not consistent, while those related to the seed coat seem to be more stable in establishing relationships between genera. The overall embryological features pointed out the necessity of a taxonomic revision in Eriocaulaceae, aiming at a more natural classification of its taxa. In Cyperaceae, the embryology and the fruit development were investigated in species of Hypolytrum and Rhynchospora, showing that most of these aspects are also uniform within the family. The endothecial thickenings of the spiral type, the Cyperaceous-type of simultaneous microsporogenesis, the trinucleate pollen grain of the pseudomonad type, the formation of a funicular obturator closely associated with the hypostase of the ovule, the Onagrad-Juncus variation embryogeny, and the fruit of the achene type with silica deposition clearly distinguish this family amongst the other Poales. Hypolytrum differs from Rhynchospora as well as from the other genera of Cyperaceae already studied for the spherical pseudomonads, with reticulate exine and central arrangement in the microsporangia, the micropyle formed by both the integuments, and the conspicuous parietal tissue which indicate its position as a basal group in the family. Moreover, the number and the ...(Complete abstract, click electronic address below).

Orientador: Vera Lúcia Scatena
Banca: Marccus Vinícius da Silva Alves
Banca: Simone de Pádua Teixeira
Banca: Silvia Rodrigues Machado
Banca: Julio Antonio Lombardi
Abstract: The embryology and the seed development of Eriocaulaceae and Cyperaceae were studied here in order to contribute to the taxonomy and phylogeny of both families. The results given by different genera of Eriocaulaceae allowed us to strengthen the embryological uniformity of the family. The endothecial thickenings of the baseplate-type, the spiraperturate pollen grains, the antipodal cyst closely associated to the hypostase, and the operculated endotestal seeds are synapomorphies of Eriocaulaceae within Poales. The use of the character number of microsporangia of anthers in genera delimitation is not consistent, while those related to the seed coat seem to be more stable in establishing relationships between genera. The overall embryological features pointed out the necessity of a taxonomic revision in Eriocaulaceae, aiming at a more natural classification of its taxa. In Cyperaceae, the embryology and the fruit development were investigated in species of Hypolytrum and Rhynchospora, showing that most of these aspects are also uniform within the family. The endothecial thickenings of the spiral type, the Cyperaceous-type of simultaneous microsporogenesis, the trinucleate pollen grain of the pseudomonad type, the formation of a funicular obturator closely associated with the hypostase of the ovule, the Onagrad-Juncus variation embryogeny, and the fruit of the achene type with silica deposition clearly distinguish this family amongst the other Poales. Hypolytrum differs from Rhynchospora as well as from the other genera of Cyperaceae already studied for the spherical pseudomonads, with reticulate exine and central arrangement in the microsporangia, the micropyle formed by both the integuments, and the conspicuous parietal tissue which indicate its position as a basal group in the family. Moreover, the number and the ...(Complete abstract, click electronic address below).
Doutor

Orientador: Luis Antonio Violin Dias Pereira
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-05T12:45:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_SuzanaGuimaraes_D.pdf: 50010658 bytes, checksum: fd19532640ee16db1a01334371893f0f (MD5) Previous issue date: 2005
Resumo: As disciplinas tradicionais de embriologia humana exigem do aluno um rápido entendimento de uma série de mudanças que ocorrem simultaneamente em uma escala macro e microscópica no embrião. Os estudantes têm dificuldade em compreender os conceitos apresentados e criar mentalmente imagens tridimensionais dos processos envolvidos. O estudo do desenvolvimento humano normal e anormal é importante para facilitar o entendimento da anatomia humana e para fornecer a base fisiopatológica da correção cirúrgica ou tratamento clínico dos defeitos congênitos. No presente trabalho foi desenvolvida uma metodologia de ensino para ilustrar e aumentar a compreensão da embriologia humana normal e os defeitos congênitos. A estratégia elaborada envolve a produção e utilização de filmes de técnicas em reprodução assistida e de correção cirúrgica de malformações congênitas, animações desenvolvidas em Flash MX (Macromedia) e a documentação digital macro e microscópica de embriões, fetos e neonatos encaminhados para autópsia. Recém-nascidos e crianças portadores de defeitos congênitos, submetidos à tratamento clínico e cirúrgico também foram documentados. Todas estas imagens obtidas, incluindo os ultra-sons e radiografias, foram cuidadosamente descritas, editadas, catalogadas e organizadas em um banco digital de imagens e dados. Os achados da autópsia, história clínica e outras informações relevantes também foram inseridos no banco de dados. Estas ferramentas de ensino foram utilizadas nos módulos Morfofisiologia Humana I e II do curso de Medicina da Universidade Estadual de Campinas. As aulas de embriologia foram divididas em dois momentos. No primeiro foi descrito o desenvolvimento normal das estruturas corporais, utilizando-se dos esquemas e animações produzidas. No segundo momento, histórias clínicas, imagens de autópsias, de exames imaginológicos e cirurgias corretivas foram apresentadas aos alunos, encorajando-os a identificar as malformações e discutir as histórias clínicas, diagnóstico e terapêutica. O material didático também foi organizado e disponibilizado em um ambiente interativo, o qual foi usado pelos alunos como um complemento às aulas. No final do módulo tanto o material didático quanto a metodologia de ensino desenvolvidos neste trabalho foram avaliados através de instrumentos quantitativos e qualitativos. A maioria dos alunos aprovou a metodologia e enfatizaram a importância da integração entre as disciplinas básicas e clínicas. Esta metodologia se mostrou útil para solucionar uma dificuldade importante associada às metodologias de ensino em instituições médicas, ou seja, a falta de integração entre disciplinas básicas e clínicas
Abstract: Traditional human embryology courses are demanding in that they require students to rapidly understand the various changes that occur simultaneously on a macro and on a microscopic scale in embryos. Students have difficulty in grasping the concepts presented and in creating three-dimensional mental images of the processes invblved. Knowledge of normal and abnormal human development is important for understanding the pathophysiology, clinical treatment and surgical repair of malformations. In this study, we developed a teaching methodology to illustrate and enhance the comprehension of normal human embryology and of birth defects. The strategy involved movies of the assisted reproduction techniques, congenital malformations correction surgeries, the Flash MX (Macromedia) animation development and the macro- and microscopical digital documentation of embryos, fetuses and neonates following autopsy. Newborn babies were also photographed in a nursery. The ultrasound and macro- and microscopic images were carefully described, computer edited, catalogued and organized into a digital image database. The autopsy findings, clinical history and other relevant data were aiso stored in the database. These teaching tools were used in the Human Morpho-Physiology course of the medical curriculum at State University of Campinas. The embryology lectures were divided into two parts. During the first part, the development of the body's structures was explained, while in the second, images of selected autopsies were shown to the students, who were also encouraged to find and discuss the malformations and their clinical history, diagnosis and therapeutics. The teaching materiais were also organized on an educational software used by the students as a complement to the lectures. At the end of the course, research methodology was used aiming at evaluating the developed teaching material and method via an attitudinal measuring scale instrument. Most of the students approved of the method and emphasized the importance of integration between basic and clinical disciplines. This approach proved useful for solving an important difficulty associated with teaching methods in many medical institutions, namely, the lack of integration between basic and clinical disciplines
Doutorado
Histologia
Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação, 2005.
Submitted by Thaíza da Silva Santos (thaiza28@hotmail.com) on 2009-09-15T15:04:29Z No. of bitstreams: 1 2005_LeiladeAragaoCVJotta.pdf: 2056832 bytes, checksum: 8cb26b8eb3dab9605b83d15d52b62895 (MD5)
Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2010-06-16T16:30:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2005_LeiladeAragaoCVJotta.pdf: 2056832 bytes, checksum: 8cb26b8eb3dab9605b83d15d52b62895 (MD5)
Made available in DSpace on 2010-06-16T16:30:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2005_LeiladeAragaoCVJotta.pdf: 2056832 bytes, checksum: 8cb26b8eb3dab9605b83d15d52b62895 (MD5) Previous issue date: 2005-06-20
A embriologia estuda as etapas e os mecanismos de formação de embriões, cujo significado, para os seres vivos, está atrelado à perpetuação (não garantida) da espécie. É relevante na formação global do aluno, por relacionar-se a temas amplamente discutidos na atualidade, entre os quais a gravidez na adolescência, o aborto, o uso de drogas e a biotecnologia (utilização de células-tronco e clonagem). O ensino da embriologia apresenta desafios: não se costuma apresentar a evolução dos estudos embriológicos; o conteúdo programático tem muitos desdobramentos e tópicos considerados irrelevantes; é constante, na embriologia, a rejeição, por parte dos alunos, ao excesso de termos para memorizar, além da falta de compreensão das inúmeras representações visuais encontradas no livro didático, recurso bastante usado nas salas de aula. O foco da presente dissertação é a análise das características das linguagens verbal (com base em bibliografia específica, necessária e suficiente para esta pesquisa, que não é de natureza lingüística) e visual referentes à embriologia animal, encontradas nos livros didáticos de Biologia (LDBio), na qualidade de limitadores ou promotores da aprendizagem. Dessa forma, foram analisados os textos, quanto ao uso das linguagens figurada, técnico-científica e implícita, e as imagens, quanto à tipologia, à morfologia e à funcionalidade. Após a coleta de dados em dez capítulos contidos em oito livros, extraídos de seis coleções de LDBio destinadas ao Ensino Médio, eles foram computados e sistematizados em tabelas para melhor visualização e comparação. Foram consideradas 1499 palavras ou expressões, que não têm o mesmo significado da linguagem comum (sentido figurado), ou não fazem parte da linguagem coloquial do aluno (terminologia técnicocientífica), ou, ainda, contêm sentidos implícitos (implicitação), e 190 imagens, inseridas nas 123 páginas efetivamente analisadas. O percentual de opacidade semântica em relação ao total de termos analisados, em todas as obras, é de 55,5%. Em relação às imagens, 73,2% são de esquemas de cortes anatômicos e 97,4% das imagens possuem função explicativa. Na interface texto-imagem, ocorrem problemas variados, como a presença de imagens complementares, a não-remissão à imagem no texto, a falta de imagens explicativas e de textos com explanações que complementem a imagem, além da dificuldade em descrever, tanto por meio do texto quanto das imagens, os eventos dinâmicos e seqüenciais. Visando a contribuir para a atividade docente, esta pesquisa chegou a alguns parâmetros potencialmente eficazes para a análise de livros didáticos de Biologia. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT
Embryology studies the stages and mechanisms of formation of embryos, whose meaning to living beings is connected to the perpetuation (not guaranteed) of species. It is relevant on the global formation of students, due to its relation with themes widely discussed nowadays, among them adolescence pregnancy, abortion, drug addiction and biotechnology (utilization of trunk cells and cloning). The teaching of embryology presents challenges: the evolution of embryological studies is not usually presented; the pragmatic content has many topics and developments that are considered irrelevant; when studying embryology, part of the students constantly reject the excess of terms to be memorized, besides the lack of understanding of the innumerous visual representations found on text-books, which are the main resources used in class rooms. The focus of the present dissertation is the analysis of the characteristics of both verbal (in this case, using specific but necessary and sufficient – for non-linguistics researches – bibliography) and visual languages related to animal embryology, found on Biology text-books (BioTB), either to limit or to promote learning. This way, the texts were analyzed regarding the use of figurative, technical-scientific and implicit languages, and the pictures regarding typology, morphology and functionalism. After collecting data in ten chapters of eight books, taken from six collections of BioTB designed to Secondary School, they were computed and systematized in charts to best visualization and comparison. 1499 words or expressions that do not have the same meaning on the common language (figurative sense) or that are not included in the colloquial language of students (technical -scientific terminology) or even have implicit sense (impliciting) and 190 pictures, included on 123 pages effectively analyzed were taken into consideration. The percentage of semantic opaqueness in relation to the total of terms analyzed in all publications is 55.5%. As regards pictures, 73.2% of them are schemes of anatomical sections and 97.4% of them have explanatory function. On the interface text–picture, various problems occur, like the presence of complementary pictures, the lack of reference to the picture in the text, the lack of explanatory pictures and texts giving explanations to complement them, besides the difficulty of describing the dynamic and sequential events, not only by means of the text but also through pictures. With a view to contributing to the teaching activity, this research reached some parameters potentially efficient to the analysis of Biology text-books.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-15Bitstream added on 2014-06-13T20:54:01Z : No. of bitstreams: 1 pereirajunior_ej_me_sjrp.pdf: 1176824 bytes, checksum: ea26888e0c90e98ae7bc9367c03e1901 (MD5)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Caracteres embriológicos possuem valor sistemático e sua utilidade foi demonstrada por diversos autores para elucidar o posicionamento filogenético de certas famílias de angiospermas. Este estudo visa analisar a ontogenia das estruturas reprodutivas de Cybistax antisyphilitica, com o propósito de acrescentar dados embriológicos relevantes ao delineamento filogenético da família, ou de categorias taxonômicas infrafamiliares. As características embriológicas observadas demonstraram similaridade com espécies pertencentes à ―Tabebuia alliance‖ cuja embriologia já foi investigada. Observou-se durante a ontogenia do óvulo de C. antisyphilitica que apenas o ginósporo calazal se desenvolve e, durante sua diferenciação em célula-mãe do saco embrionário, a face micropilar de sua parede celular assume uma conformação côncava, na qual há grande deposição de calose. No estádio octonuclear, há acúmulo de uma substância fibrogranular entre o endotélio e a parede do ginófito fazendo com que o saco embrionário apresente um característico afunilamento mediano. Em relação a ontogenia da antera da espécie estudada, verificou-se que as camadas tapetais são dimórficas, embora ao final do estádio pré-meiótico se tornem similares; embora, após a meiose, o dimorfismo se acentua novamente nas camadas tapetais. Os amiloplastos das células-mãe dos andrósporos são herdados pelos andrósporos e grãos de pólen deles resultantes. Os amiloplastos dos grãos de pólen gradualmente aumentam em número e tamanho em um único ciclo de amilogênese/amilólise. Com base nos dados obtidos conclui-se que a configuração da parede distal do ginósporo calazal e o acúmulo de secreção na porção mediana do saco embrionário são características não relatadas para outras espécies da família e podem...
Embryological characters have systematic value and its usefulness has been demonstrated by several authors to elucidate the phylogenetic position of certain angiosperms families. This study aims to analyze the ontogeny of reproductive structures of Cybistax antisyphilitica, with the purpose of adding relevant embryological data to the phylogenetic design of the family or, infra-familiar taxonomic categories. The embryological features observed was similar to species belonging to ―Tabebuia alliance‖ whose embryology has been investigated. During the ontogey of C. antisyphilitica ovule, only the chalazal megaspore develops, and in the course of its differentiation in the embryo sac mother cell, the micropylar side of its cell wall assumes a concave conformation in which there is an expressive deposition of callose. In the octonuclear stage, there is an accumulation of a fibrogranular substance between the endothelium and megagametophyte wall causing a bottleneck in the middle portion of embryo sac. For anther ontogeny of the species studied, the tapetal layers are dimorphic, although becoming similar at the late pre-meiotic stage. After meiosis, the dimorphism is accentuated between the two tapetal layers. The microspore mother cell amyloplasts are inherited by the microspores and the resulting pollen grains. The pollen grain amyloplasts gradually increasing in number and size in a single amylogenesis/amylolyse cycle. Based on the obtained data we concluded that the configuration of the distal wall of the chalazal megaspore and the accumulation of secretion in the median portion of embryo sac are characters not reported for other species of the family, and may possibly be autapomorphic characters. Regarding the ontogeny of the anther, Cybistax antisyphilitic showed a multistratified fibrous endothecium... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador : Dr. Paulo Roberto Dalsenter
Coorientadora : Drª Ana Cláudia Boareto
Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 19/04/2016
Inclui referências : f. 56-61;83-86;106-108;116-120
Área de concentração
Resumo: A malária é uma doença infecciosa responsável por milhares de mortes, principalmente em países tropicais. Crianças menores de cinco anos e gestantes são consideradas como grupos de alto risco, devido a maior susceptibilidade às formas severas desta infecção que podem ser letais. A malária durante a gestação pode causar abortos, parto prematuro, restrição no crescimento intrauterino, baixo peso ao nascimento e morte fetal. Devido a estes riscos para a mãe e para o feto as gestantes diagnosticadas devem ser tratadas imediatamente. Entretanto, para a maioria dos antimaláricos disponíveis não há dados consistentes que comprovem a segurança do seu uso durante a gestação. Atualmente, os derivados da artemisinina são os fármacos mais eficazes no tratamento da malária, porém devido à embrioletalidade e teratogenicidade observadas em estudos pré-clínicos o uso destes agentes durante o primeiro trimestre gestacional é restrito a casos de malária severa. Porém, até o momento, estes efeitos embriotóxicos não foram comprovados em humanos. Um dos diferenciais entre estudos clínicos e pré-clínicos é a presença da infecção. O mecanismo de ação dos derivados da artemisinina envolve certa seletividade aos parasitas e/ou eritrócitos infectados, deste modo seus efeitos tóxicos poderiam ser alterados em animais infectados. Assim, neste trabalho foram avaliados os efeitos embriotóxicos do artesunato em modelo de malária na gestação. Para isso, foi estabelecido um modelo de malária durante a gestação em camundongos suíços, onde animais infectados e não infectados foram expostos a diferentes doses de artesunato no dia 10 de gestação (dentro do período crítico de toxicidade), e posteriormente, seus efeitos sobre o desenvolvimento embrionário foram avaliados. O modelo estabelecido mimetizou características da malária durante a gestação em humanos, como maior susceptibilidade das fêmeas prenhas à infecção, parto prematuro, embrioletalidade, redução do peso fetal, retardo no desenvolvimento ósseo, danos na placenta e em múltiplos órgãos maternos. O tratamento com o artesunato na maior dose utilizada (30 mg/kg) demonstrou alta embrioletalidade e causou danos aos tecidos embrionários, corroborando dados da literatura. Foi verificada a eficácia do tratamento na redução da parasitemia e na prevenção dos efeitos negativos da infecção sobre o ganho de peso materno, peso de órgãos maternos e mortalidade embrionária. Houve uma redução na embrioletalidade, causada tanto pela infecção quanto pelo tratamento isoladamente, quando o artesunato na maior dose foi administrado em animais infectados. No entanto, ainda foram observados efeitos embriotóxicos do artesunato nesta dose, como redução de eritroblastos e danos histopatológicos nos embriões vivos de progenitoras infectadas e tratadas. É possível que tenha ocorrido uma redução na concentração do artesunato que chegou aos embriões devido à presença dos parasitas, no entanto este mecanismo deve ser investigado. Estes resultados demonstram a importância de considerar as alterações causadas pela presença da infecção no organismo hospedeiro na avaliação da toxicidade de antimaláricos. Neste sentido, o modelo aqui estabelecido terá grande aplicabilidade em estudos futuros. Contudo, neste estudo pré-clínico os benefícios do tratamento com o artesunato foram superiores aos riscos da infecção sobre o desenvolvimento embrionário. Palavra-chave: modelo de malária experimental; malária placentária; derivado da artemisinina; artesunato; embriotoxicidade; embrioletalidade, teratogenicidade.
Abstract: Malaria is an infectious disease responsible for thousands of deaths, mainly in tropical countries. Children under five and pregnant women are considered as groups at high risk, due to their higher susceptibility to the severe forms of this infection which can be lethal. Malaria during pregnancy can cause miscarriage, preterm delivery, intrauterine growth restriction, low birth weight and fetal death. Due to these risks for both the mother and the fetus, diagnosed pregnant women must be promptly treated. However, for the majority of antimalarial drugs available there are no consistent data to prove the safety of their use during pregnancy. Currently, artemisinin derivatives are the most effective drugs for malaria treatment, but due to embryolethality and teratogenicity observed in non-clinical studies the use of these agents during the first trimester of pregnancy is restricted to cases of severe malaria. Nevertheless, until now these embryo toxic effects have not been proved in humans. One of the differences between clinical and non-clinical studies is the presence of the infection. The mechanism of action of artemisinin derivatives involves a certain selectivity to parasites and/or infected erythrocytes, so their toxic effects might be altered in infected animals. Thus, in this work, the embryo toxic effects of artesunate were assessed in a malaria model during pregnancy. For this, a malaria model during pregnancy was set in Swiss mice, in which uninfected and infected animals were exposed to different doses of artesunate in gestational day 10 (within the critical toxicity period), and thereafter, its effects on embryo development were assessed. The model set mimic features of malaria during pregnancy in humans, such as higher susceptibility of pregnant females to infection, preterm delivery, embryolethality, reduction on fetal weight, delay in bone development, placental damage and alterations in multiple maternal organs. The treatment with artesunate in the highest dose used (30 mg/kg) showed high embryolethality and caused damage to embryonic tissues corroborating literature data. It was verified the efficacy of the treatment in the reduction of parasitemia and preventing the negative effects of the infection on maternal weight gain, maternal organs weight, and embryonic mortality. There was a reduction on embryolethality, caused by either the infection or the treatment isolated, when the artesunate in the highest dose was administered to infected females. However, the embryo toxic effects of artesunate were still seen on this dose, as like a reduction of erythroblasts and histopathological damage in live embryos from females infected and treated. It is possible to have occurred a reduction in the artesunate concentration which reaches the embryos due to the presence of parasites, but this mechanism needs to be investigated. These findings show the importance to consider the alterations caused by the presence of the infection in the host organism in evaluating the toxicity of antimalarial drugs. Therefore, the model set here has great applicability in future studies. Withal, in this non-clinical study, the benefits of treatment with artesunate were higher than the risks of the infection on embryo development. Keywords: experimental malaria model; placental malaria; artemisinin derivative; artesunate; embryotoxicity; embryolethality, teratogenicity.

Orientador: Thales Rocha Mattos Filho
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Made available in DSpace on 2018-07-14T02:19:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_RosileneFernandesda_D.pdf: 1953598 bytes, checksum: 5335bde27fb22a311480f18c0e0b9168 (MD5) Previous issue date: 1991
Resumo: Não informado
Abstract: It was studied in rats the influence of 5-fluoruracyl on the formation of dental germ and external malformations of rats embryo born from treated mothers. 5-fluoruracyl was administered intraperitonealy in single dose to each rat, that is 10, 20, 30 and 40 mg/kg in different phases of pregnancy: 9th, 10th, 11th, 12th or 13th days. The fetuses were examined at the 21st of day of pregnancy, after Caesarian operation. They were examined regarding to external malformations, the heads cut out of hystological examination of dental germ. The results were the following according the days of pregnancy the drug was administered: a)9th day:dose of 10 mg/kg caused respectively 21 and 20% of external malformations and 15 and 19% of anormal dental germ; all of the embryos were reabsorbed with doses of 30 and 40 mg/kg; 10th day:doses of 10, 20 and 30 mg/kg caused no malformations and dose of 40 mg/kg induced 94,2% of fetal reabsortionl 11th day:doses of 10 and 20 mg/kg caused no malformations while with those of 30 and 40 mg/kg total reabsortion of fetuses occurred; 12th day:only the dose of 10 mg/kg caused no abnormal fetuses; the doses of 20 and 30 mg/kg induced respectively 22 and 47% of malformations and 26-21% of dental germ agenesis; the dose of 40 mg/kg induced 97% of embrionary reabsortion; 13th day: doses of 10 and 20 mg/kg had no influence on fetuses; the one of 30 mg/kg caused 72% of malformations and 20% of dental agenesis; with the dose of 40 mg/kg 63% of the embryo were dead at the birth
Doutorado
Farmacologia
Doutor em Ciências

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2006.
Submitted by samara castro (sammy_roberta7@hotmail.com) on 2010-10-19T22:24:40Z No. of bitstreams: 1 2006-Georgia Assis Corrêa.pdf: 547203 bytes, checksum: 9313c80c72e30acdf66d51b83b4d9867 (MD5)
Rejected by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br), reason: Falta abstract. Está na p. xv on 2010-10-19T22:45:49Z (GMT)
Submitted by samara castro (sammy_roberta7@hotmail.com) on 2010-11-04T09:39:31Z No. of bitstreams: 1 2006-Georgia Assis Corrêa.pdf: 547203 bytes, checksum: 9313c80c72e30acdf66d51b83b4d9867 (MD5)
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Apesar dos avanços obtidos nos últimos anos nas técnicas de maturação, fecundação e cultivo in vitro de embriões bovinos, a qualidade dos embriões produzidos in vitro ainda é inferior a dos in vivo. O ambiente de cultivo após a fecundação é considerado responsável pela qualidade dos embriões. Dentre os fatores que podem influenciar o ambiente de cultivo, o estresse oxidativo causado pela alta tensão de O2 tem recebido especial atenção. Atualmente, a maioria dos sistemas de cultivo utilizada para a PIV usa o meio SOFaaci com atmosfera de 5% de O2. Portanto, o presente estudo teve por objetivo comparar a produção de embriões em sistema de cultivo com alta e baixa tensão de O2. Um total de 1118 ovócitos obtidos de ovários de abatedouro foram maturados e fecundados in vitro. Dezoito horas após a inseminação (pi) os zigotos foram separados em 2 grupos. No primeiro grupo (T1) os zigotos foram lavados e transferidos para o meio de cultivo SOFaaci e cultivados por 7 dias em atmosfera de 5% CO2 em ar, à 39°C. No outro grupo (T2), os zigotos foram desnudados por pipetagens sucessivas, e transferidos para o meio SOFaaci, onde foram cultivados em atmosfera de 5% CO2 e 5% de O2, a 39°C. As taxas de clivagem foram avaliadas 48 horas pi e as de blastocisto em D6 e D7 pi. De ambos os grupos, um total de 94 embriões no estágio de blastocisto expandido em D7 foram fixados e corados com aceto-orceína para contagem do número de células, e 7 "pools" com 15 embriões de cada tratamento, foram congelados para avaliação da expressão de genes relacionados ao estresse oxidativo, sendo superóxido dismutase (Mn-SOD), catalase e glutationa peroxidase (GPX4). Os dados relativos à taxa de clivagem e blastocisto foram analisados pelo teste do Chi-quadrado, os de número de células pela análise de variância e os relativos à expressão gênica, pelo teste t de Student ou teste de Mann-Whitney. A taxa de clivagem foi semelhante (P>0,05) para os grupos sendo 77,4% para o T1 e 79,9% para o T2. A taxa de blastocisto em D6 foi maior (P<0,05) no grupo cultivado em baixa tensão de O2 (40,7%) do que no de alta tensão (33,8%). Entretanto, a taxa de blastocisto em D7 foi similar (P>0,05) para os dois grupos, sendo 44,7% e 47,1% para T1 e T2, respectivamente. O número total de células (T1= 175,6±54,1; T2= 160,6±41,8) dos embriões, não variou (P>0,05) entre os dois sistemas de cultivo. A quantidade relativa de transcritos para o gene Mn-SOD foi maior (P<0,05) na presença de alto O2, para a catalase e a GPX4 o nível de expressão foi semelhante nos dois sistemas de cultivo. Esses resultados sugerem que o cultivo de embriões bovinos em meio SOFaaci sob alta tensão de O2 na presença de células do cumulus não afeta a quantidade e qualidade dos embriões produzidos in vitro. É possível que as células do cumulus tenham um papel importante na retirada de substâncias indesejáveis minimizando o estresse oxidativo causado pela alta tensão de O2. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT
Although substantial progress has been made in the procedures for in vitro maturation, fertilization and culture of bovine oocytes, the percentage and quality of embryos produced in vitro are lower than those produced in vivo. The environment where embryos are cultured after fertilization is the main factor responsible for their quality. Among the factors that can influence the culture environment, oxidative stress caused by high O2 tension, has received special attention. Currently, the majority of the in vitro culture systems for embryo production (IVP) use SOFaaci medium under 5% of O2. Therefore, the present study had the objective to compare in vitro embryo production using high and low O2 during embryo culture. A total of 1118 oocytes obtained from abattoir ovaries were matured and fertilized in vitro. Twenty hours pos-insemination (hpi) the zygotes were divided into two groups. In the first group (T1) the zygotes were washed and transferred to SOFaaci medium and cultured for 7 days under 5% CO2 in air, at 39°C. In the second group (T2) the zygotes were denuded by successive pipetting and then, transferred to SOFaaci medium and cultured under 5% CO2 and 5% de O2 at 39°C. Cleavage rates were evaluated 48 hpi and the blastocyst rates at D6 and D7 pi. From both groups a total of 94 expanded blastocyst, from D7 of culture, were fixed and stained with acetoorcein to evaluate cell numbers. Seven pools of 15 embryos from each treatment were frozen for gene expression evaluation. The abundance of transcripts for genes related to oxidative stress, superoxide dismutase (Mn-SOD), catalase and gluthatione peroxidase (GPX) were determined using a semi-quantitative PCR. Data for cleavage and blastocyst rates were analyzed by Chi-square test and those for embryo cell number by analysis of variance. Data from gene expression were analyzed by t test or Mann-Whitney test. Cleavage rate was similar (P>0.05) for both groups, being 77.4 % for T1 and 79.9% for T2. The blastocyst rate at D6 pi was higher (P<0.05) in the group cultured under low O2 tension (40.7%) than in the high O2 tension (33.8%). However, blastocyst rate at D7 was similar (P>0.05) for both groups, being 44.7% and 47.1% for T1 and T2, respectively. Embryos total cell numbers (T1=175.654.1; T2=160.641.8) did not differ between culture systems (P>0.05). The relative abundance of transcripts for Mn-SOD gene was higher (P<0.05) for embryos cultured in high O2 tension. The catalase and GPX expression level was similar for both systems. The results suggested that culture of bovine embryos in SOFaaci medium under high O2 tension, in the presence of cumulus cells, does not affect quantity and quality of IVP embryos. It is possible that the cumulus cells have an important role in the removal of detrimental substances, minimizing the oxidative stress caused by the high O2 concentration.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2009.
Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2010-11-08T16:32:22Z No. of bitstreams: 1 2009_OsmarAlvesCarrijoJunior.pdf: 6406744 bytes, checksum: 07674c06417eb8b10ec210ab00bc7d43 (MD5)
Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-11-09T00:36:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_OsmarAlvesCarrijoJunior.pdf: 6406744 bytes, checksum: 07674c06417eb8b10ec210ab00bc7d43 (MD5)
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O presente trabalho visou conhecer as características numéricas, morfométricas e ultra-estruturais de folículos ovarianos pré-antrais de gatas domésticas. No primeiro experimento, um total de 190 folículos pré-antrais (100 primordiais, 60 primários e 30 secundários) foram analisados por microscopia eletrônica. Os diâmetros do folículo, ovócito e núcleo do ovócito foram estimados e o número de células da granulosa foram contados por um programa de computador. Ovários de gatas apresentaram 37.853 ± 6.118 folículos pré-antrais em média. Sendo, 87% primordial, 10,4% primários e 2,3% de folículos secundários. Diferenças significativas foram observadas nas 3 classes foliculares tanto para o diâmetro do folículo, ovócito e núcleo do ovócito e número de células da granulosa (P< 0,05). Quanto a ultra-estrutura, ovócitos de folículos pré-antrais de gatas apresentam características únicas, como formação de zona pelúcida em folículos primários, organização das mitocôndrias e outras organelas em conglomerados e o alinhamento precoce de grânulos da cortical na periferia do ovócito de folículos secundários. No segundo experimento, ovários de 5 gatas foram coletados, seccionados e separados tanto para vitrificação quanto congelamento lento. A análise histológica da integridade folicular demonstrou que a porcentagem de folículos normais no grupo vitrificado (15,7±5,7) e no congelamento lento (60,6±9,5) foi diferente da observada no grupo controle (89,1±4,8) (fragmentos ovarianos fresco). Já, quando comparados os dois tratamentos o congelamento lento diferiu estatisticamente do grupo vitrificado. Para a análise ultra-estrutural, folículos criopreservados demonstram crio-injúrias nos ovócitos. Para os grupos do congelamento lento ou vitrificado, as alterações mais comuns foram a desorganização do citoplasma, mitocôndrias apresentando um aspecto mais eletronluscente e um número maior de vesículas. Poucos retículos citoplasmáticos foram observados no citoplasma e em alguns folículos o ovócito se apresentava destacado das células da granulosa deixando um espaço vazio entre eles. Sendo assim, esse estudo descreveu a morfometria e ultra-estrutura de folículos ovarianos pré-antrais de gatas e sua população ovariana estabelecendo assim um padrão para a espécie e conseqüentemente permitindo comparações com outras espécies. Para a criopreservação podemos concluir que ambos os métodos de estudados no presente trabalho causaram crio-injúrias no ovócito, especialmente a vitrificação. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT
The aim of the present study was to estimate the population and morphometrically and ultrastructurally characterize preantral follicles from queen ovaries. In the first experiment, a total of 190 preantral follicles (100 primordial, 60 primary and 30 secondary) were analyzed by light microscopy. The diameters of the follicle, oocyte and oocyte nucleus were taken and the number of granulosa cells was counted using a computer program. Queen ovaries presented 37,853 ± 6,118 preantral follicles on average, with 87% primordial, 10.4% primary and 2.3% secondary follicles. Significant differences were observed in the 3 follicular classes in regard to follicular, oocyte and oocyte nucleus diameters and granulosa cell number (p<0.05). In regard to ultrastructure, queen preantral follicles presented many unique characteristics, such as early zona pellucida formation in primary follicles and the organization of mitochondria and other organelles in conglomerates and cortical granules aligned at the peripheral zone in secondary follicle oocytes. In the second experiment, Ovaries from 5 queens were collected, sectioned, and cryopreserved by vitrification or slow cooling. Histological analysis of follicle integrity showed that the percentages of normal follicles in ovarian fragments in the vitrified (15.7±5.7) and slow cooled (60.6±9.5) groups were different to those of controls (89.1±4.8) (fresh ovarian fragments). The percentages of normal follicles in the slow freezing group significantly differ from that observed in the vitrification group. Follicular degeneration occurred more in the vitrification group than in the other groups. For ultrastructural analyses, the cryopreserved group demonstrated some cryoinjuries in the oocytes. For slow cooling or vitrified groups, the most common alterations were within the oocytes cytoplasm which was disorganized, with mitochondria demonstrating a more clear aspect, and a greater number of vesicles. Few endoplasmatic reticulum cisternae were observed within the ooplasm. In some oocytes the cytoplasm and the granulosa cells were detached leaving an empty space between them. In conclusion, this study described the morphometry and ultrastructure of queen preantral follicles and the preantral follicle population in the ovaries, establishing a pattern for the species and consequently allowing comparisons with other species. For cryopreservation it can be conclude that both methods bring cryoinjuries to the oocyte, especially vitrification.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, Departamento de Ciências Biológicas, 2013.
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Na tentativa de melhorar os índices da produção in vitro de embriões (PIVE) em bovinos, várias substâncias têm sido utilizadas na maturação in vitro (MIV) e no cultivo in vitro (CIV). A suplementação com a combinação de insulina-transferrina-selênio (ITS) e o ácido ascórbico (AA) têm sido associada com a redução na produção de radicais livres nos meios de cultivo celular, sendo uma alternativa para melhorar os resultados da PIVE. O presente estudo visou testar o efeito da presença do ITS e AA durante a MIV e/ou CIV na quantidade e qualidade de embriões PIVE. Complexos cumulus-ovócitos (COCs) foram obtidos de ovários de abatedouro, sendo que os provenientes de folículos de 1-3mm e 6-8mm foram dissecados da córtex ovariana e os de 3-8mm obtidos por aspiração folicular. Para avaliar os estágios da meiose os ovócitos foram corados com lacmóide, e para avaliar o efeito dos tratamentos na produção de embriões foi avaliada a taxa de clivagem (D2), blastocisto (D7), o tamanho dos embriões com auxílio da câmera Motic Images Plus 3.0 e o número total de células pela coloração HOESCH. Os dados de cinética de maturação, desenvolvimento embrionário, e tamanho dos embriões foram analisados pelo teste do Qui-Quadrado (P<0.05), e a contagem do número de células embrionárias pelo teste de Kruskall-Wallis (P<0.05). Inicialmente foi avaliado o efeito do ITS (0,5μg/ml) durante a MIV, durante o CIV e durante a MIV e o CIV. Todos os tratamentos apresentaram taxa de clivagem, produção de blastocisto e qualidade dos blastocistos semelhante ao grupo controle na ausência de ITS (P>0,05). A suplementação do meio com uma associação do ITS e AA por diferentes períodos (12h e 24h) durante a MIV, mostrou que quando realizada nas 12 últimas horas causa um aumento na produção de blastocistos em D7 (51,6%) quando comparado ao grupo controle (39,5%), e aos grupos expostos nas primeiras 12h (40,2%), e nas 24h (41,1%). Apesar do número de células ter sido maior nos embriões do grupo tratado com ITS e AA nas últimas 12h de MIV (143,2±49,9) em relação aos grupos expostos nas primeiras 12h (122,3±46,1), não diferiu (P>0,05) dos grupos controle (131,9±44,7) e do tratado por 24h (124,3±35,3). A cinética de maturação nuclear foi comparada em ovócitos de diferentes competências obtidos de folículos de 1-3 e 6-8mm de diâmetro, e foi observado que as 24h de maturação todos os ovócitos, independente do grupo, tinham completado a meiose sendo que em torno de 90% encontrava-se em estagio de MII. Então, foi investigado o efeito da presença do ITS associado ao AA nas 12 últimas horas da MIV em ovócitos com diferentes graus de competência. O tratamento não afetou (P<0.05) as taxas de clivagem e blastocisto quando ovócitos provenientes de folículos 1-3mm foram utilizados, sendo respectivamente 49,9% e 4,4% e 51,0% e 14,9% para os tratados e não tratados.Conclui-se que a adição de ITS isoladamente não afetou a produção de embriões, mas quando associado ao AA nas 12 últimas horas de maturação melhorou a quantidade e qualidade dos embriões produzidos. Além disso, o uso de ITS e AA durante a MIV não melhorou a competência de ovócitos provenientes de folículos pequenos. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT
In attempt to improve bovine in vitro embryos production (IVP), several substances have been used during the in vitro maturation (IVM) and in vitro culture (IVC). Supplementation with a combination of insulin-transferrin-selenium (ITS) and ascorbic acid (AA) have been associated with a reduction in free radicals production in cell culture media, being an alternative to improve the results of IVP. The present study aimed to test the effect of ITS and AA during IVM and / or IVC in the quantity and quality of IVP embryos. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were obtained from slaughterhouse ovaries. Which were either recovered from Follicles of 1-3mm and 6-8mm dissected from the ovarian cortex, or from aspiration of 3-8mm follicles. . To evaluate the stages of meiosis oocytes were stained with lacmóide, and to assess the effect of treatments on embryo production cleavage rate (D2), blastocyst rate (D7), size of the embryos using the camera Motic Images Plus 3.0 and the total number of cells staining by HOESCH, were evaluated. Data of maturational kinetics, embryonic development, and size of the embryos were analyzed by chi-square test (P<0.05), and embryonic cells number by Kruskal-Wallis test (P<0.05). Initially we investigated the effect of ITS (0.5 mg/ml) during IVM, IVM and IVC and during IVC. All treatments had similar cleavage rate, blastocyst production and embryo quality to the control group (P<0.05). Medium supplementation with a combination of AA and ITS for different periods (12h and 24h) during IVM, showed that when treatment was performed in last 12 h an increase in production D7 blastocysts (51.6%) was observed whem compared the control (39.5%), first 12h (40.2%) and 24h groups (41.1%). Although the number of cells was higher in the group treated with ITS and AA in the last 12h of IVM (143.2 ± 49.9) than in groups exposed in the first 12h (122.3 ± 46.1), it did not differ (P> 0.05) from the control (131.9 ± 44.7) and treated for 24h group (124.3 ± 35.3). The kinetics of nuclear maturation was compared between oocytes of different competence obtained from follicles of 1-3 and 6-8mm diameter, it was observed that the at 24h of maturation every oocyte, around 90% of the oocytes were in MII stage. Then, we investigated the effect of ITS associated with AA in the last 12 hours of IVM in oocytes with different degrees of competence. Treatment did not affect (P<0.05), the cleavage and blastocyst rate when oocytes from follicles 1-3mm were used, being respectively 49.9% and 4.4% and 51.0% and 14.9% for those treated and untreated. It was concluded that the addition of ITS alone did not affect the production of embryos, but when combined with AA in the last 12 hours of maturation improved quantity and quality of embryos produced. Furthermore, the use of AA and ITS during IVM not improve the competence of oocytes from small follicles.

Bromeliaceae owns a huge diversity of species in the Neotropical region, comprising about 3140 species, in which 551 consist of the genus Tillandsia. The article aims the descritption, of the anther development and ovule as the esporogenesis and gametogenesis characterization as well, in order to make easier both the taxonomy and philogeny of the family, which is still in process of change. Tillandsia aeranthos (Lois.) L. B. Sm. contains six stamens flowers; superior, tricarpellate and trilocular ovary. The pattern of development of the anther wall is characterized as mixed-type. Androsporangium is formed by epidermis, middle layers, endothecium and tapetum. The tapetum is the secretor-type. Meiosis is the successive-type with cleavage of the centrifugal type. The tetrads formed are decussate or isobilateral. The first division of the pollen is preceded by vacuolation, it is assymmetric and produce both generative and vegetative cells. The two cells formed are separated by a callose wall. The mature grain pollen is bicelullar. The ovule of Tillandsia aeranthos is anatropus, bitegmic and crassinucellate, with axial placentation. The ovule originates in the subdermal layer (zone II) of the placentae. The integument nucellar epidermis is originated by divisions in the dermal layers. One to three ginospore mother celss, which are originated by divisions in archesporial cell, undergo meiotic divisions development a linear tetrad, with presence callosic wall. Only the chalazal ginospore becomes functional. The functional ginospore differs in that a gametophyte uninucleate after mitosis and yields a two-nucleate and four-nucleate gametophyte. The female gametophyte has a monosporic origin and a Polygonum-type development. The female gametophyte consists of two synergids, an egg cell, three antipodes and two polar nuclei. Polar nuclei fuse prior to fertilization.
Bromeliaceae possui grande diversidade de espécies na região neotropical, compreendendo cerca de 3140 espécies, sendo 551 do gênero Tillandsia. O presente trabalho teve como objetivo descrever o desenvolvimento da antera e do rudimento seminal, além da caracterização da espogênese e gametogênese, com a finalidade de auxiliar na taxonomia e filogenia da família, ainda em fase de mudança. Tillandsia aeranthos, apresenta flores com estames em número de seis e ovário súpero, tricarpelar. Na antera, o desenvolvimento dos estratos parietais é do tipo misto , formado por epiderme, endotécio, camada média e tapete. A epiderme é papilada e o tapete é do tipo secretor. A microsporogênese é sucessiva com clivagem do tipo centrífuga, onde são formadas tétrades isobilaterais e decussadas. Após a liberação do andróspro da tétrade, ocorre a primeira divisão do grão de pólen e é precedida por vacuolação. Após mitose, é formada a célula generativa e a célula vegetativa, separadas por uma parede de calose. O andrófito é liberado bicelular. O rudimento seminal de Tillandsia aeranthos é anátropo, bitegumentado e crassinucelado, com placentação axial. O rudimento seminal tem origem na camada subdérmica da placenta. Os tegumentos são de origem dérmica. A inicial arquesporial dá origem á célula mãe de ginósporo (CMG). A CMG sofre o primeiro ciclo meiótico que origina uma díade de ginósporo com presença de calose ao redor. O segundo ciclo meiótico dá origem a tétrade linear de ginósporo, tornando-se o ginósporo calazal funcional. O ginósporo funcional diferencia-se em um gametófito uninucleado que após mitoses origina um gametófito bi e tetranucleado. Esse tipo de desenvolvimento do ginófito é do tipo monospórico e Polygonum, onde o ginófito apresenta sete células e oito núcleos, com a presença de duas sinérgides, uma oosfera, formando o aparelho oosférico e três antípodas. Os núcleos polares de fusionam antes da fecundação.

Orientadores: Simone de Pádua Teixeira, Sandra Maria Carmello-Guerreiro
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-26T04:30:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Caetano_AnaPauladeSouza_D.pdf: 7171602 bytes, checksum: 846db1ce62126a16e2c2bbde210017b5 (MD5) Previous issue date: 2014
Resumo: Melastomataceae, com cerca de 4.500 espécies distribuídas em regiões tropicais e subtropicais, é a sexta maior família entre as angiospermas no Brasil. O grupo destaca-se pela elevada proporção de espécies apomíticas, claramente concentradas em Miconieae. Apesar do monofiletismo da família, a evolução de caracteres morfológicos, as relações e a própria delimitação das tribos permanecem em debate. Este trabalho teve dois objetivos gerais. O primeiro objetivo foi investigar o tipo de apomixia e verificar a ocorrência de reprodução sexuada em seis espécies de Miconieae: Clidemia hirta, Leandra aurea, L. melastomoides, Miconia leucocarpa, Ossaea amygdaloides e O. confertiflora, por meio de análises anatômicas da esporogênese, gametogênese, embriogênese e mensuração da viabilidade e da germinação dos grãos de pólen. O segundo objetivo foi testar a importância sistemática de dois caracteres embriológicos em Melastomataceae: ocorrência de drusas na parede da antera madura e número de camadas no tegumento externo do óvulo, a partir de 180 e 144 espécies, respectivamente. As amostras foram obtidas de espécimes herborizadas ou preservadas em álcool e analisadas anatomicamente. Os resultados revelam que alterações na meiose e heterocronia no desenvolvimento dos grãos de pólen levam à inviabilidade polínica. Apomixia do tipo gametofítica diplospórica é observada nas seis espécies analisadas, e como consequência, a formação de sacos embrionários reduzidos é comprometida. Adicionalmente, em C. hirta observa-se apomixia gametofítica apospórica e em L. melastomoides, embrionia adventícia. A reprodução sexuada parece ser um evento pouco comum nas espécies investigadas, que podem ser classificadas como apomíticas obrigatórias, ou seja, que se reproduzem apenas por apomixia. Drusas na parede da antera madura são relatadas em 89 dos 180 representantes analisados e pode ser usada para delimitar alguns clados. A ocorrência destes cristais parece distinguir o gênero Blakea (Blakeeae), a tribo Henrietteeae e um subclado dentro de "Conostegia s.l." (Miconieae) de grupos proximamente relacionados. O papel das drusas na parede da antera é incerto. O tegumento externo do óvulo, formado por duas camadas celulares, é o estado de caráter mais comum na família, presente em 11 dos 14 grupos amostrados. Variação é observada em Melastomeae, Merianieae e Miconieae. Em Melastomeae, no clado "Marcetia & allies" a ocorrência de óvulos com tegumento externo formado por três camadas de células é apontada como uma sinapomorfia para o grupo. Em Miconieae, a ocorrência de três camadas no tegumento externo do óvulo é o estado de caráter mais comum, mas a ocorrência de mais de três camadas foi observada em linhagens com sementes grandes. Na tribo, a espessura do tegumento externo pode estar relacionada a presença de frutos endozoóricos. Ainda em Miconieae, o gênero Physeterostemon e um subclado dentro de "Conostegia s.l." foram delimitados pela ocorrência de duas camadas no tegumento externo do óvulo. A comparação dos dados embriológicos obtidos em diferentes linhagens de Melastomataceae evidencia a importância deste tipo de estudo para a sistemática da família e fornece informações para futuras discussões evolutivas
Abstract: Melastomataceae comprise ~4,500 species found in tropical and subtropical regions. This is the sixth largest family of flowering plants in Brazil. The group has been highlighted for its high proportion of apomictic species, clearly concentrated in Miconieae. Despite of the supported monophyly of the family, their intrafamily relationships and morphological evolution are still now poorly understood. The objectives of this study were twofold. The first aim was to investigate the apomixis type and to verify the occurrence of sexual reproduction in six species of Miconieae: Clidemia hirta, Leandra aurea, L. melastomoides, Miconia leucocarpa, Ossaea amygdaloides and O. confertiflora. Sporogenesis, gametogenesis and embryogenesis anatomy, and pollen grain viability and germination measurement were used. The second aim of this study was to test the systematic importance of two embryological characters in Melastomataceae: druses occurrence in the anther wall cells and the thickness of the outer ovule integument from 180 and 144 species, respectively. For this purpose, we used anatomical analyses from herborized and spirit samples. The results show abnormal meiosis and heterochrony as cause of pollen inviability. Diplosporic apomixis was observed in all species and thus, the sexual embryo sac development is affected. Furthermore, aposporic apomixis was observed in C. hirta and adventitious embryony in L. melastomoides. Sexual reproduction appears to be an uncommon event in the investigated species, which can be classified as obligate apomitics. Druses in the anther wall cells were observed in 89 from 180 analysed species. The druses occurrence delimits Blakea (Blakeeae), Henrietteeae and a subclade in "Conostegia s.l." (Miconieae). The role of druses in the anther wall is uncertain. The bi-layered outer ovule integument was the most common character state in the family, observed in 11 from 14 sampled groups. Variations were detected in Melastomeae, Merianieae and Miconieae. The three-layered outer integument is pointed as a synapomorphy for "Marcetia & allies" (Melastomeae) and it is a character state most common in Miconieae, although more than three layers were observed in lineages with large seeds. We propose that the outer ovule integument may be related to the endozoochorous fruits in Miconieae. A bi-layered outer integument delimits Physeterostemon and a subclade in "Conostegia s.l." (Miconieae). The embryological data comparison for different groups of Melastomataceae highlights the importance of this study in the systematic works and provides information for future evolutionary discussions
Doutorado
Biologia Vegetal
Doutora em Biologia Vegetal

Orientador: Nelson Sabino Bittencourt Júnior
Resumo: Compreender a diversidade das Nymphaeales, considerado como o segundo ramo da filogenia das angiospermas, é de considerável interesse como modelo da evolução inicial das angiospermas. Este trabalho objetivou investigar a ontogenia da antera, dos óvulos e sementes em espécies de Nymphaea. Ovários e sementes de N. amazonum Mart. & Zucc. subsp. amazonum, N. caerulea Savigny e N. lotus L. e, anteras de N. amazonum Mart. & Zucc. subsp. amazonum e N. caerulea Savigny, em diversos estádios de desenvolvimento, foram fixados, infiltrados em historesina e as secções obtidas com 1-4 µm foram coradas com azul-de-toluidina O ou submetidas a testes histoquímicos. O desenvolvimento da parede do androsporângio é do tipo básico. Após a meiose, a citocinese simultânea dá origem a tétrades tetraédricas de andrósporos nas quais já são detectáveis a intina e a primexina, há um atraso na liberação dos andrósporos das tétrades em N. caerulea. A partir do estádio de andrósporos livres observa-se uma abertura anelar equatorial e, no estádio de andrósporos vacuolados observa-se o ‘pollenkitt’ na superfície da esporoderme. A mitose do andrósporo ocorre perpendicularmente à esporoderme e, a intina se espessa, principalmente abaixo da abertura, onde há a contribuição da endexina para a formação do oncus. O tapete de N. amazonum e N. caerulea é secretor e não apresenta ciclos invasivo como relatado para N. colorata. O tipo básico de desenvolvimento do androsporângio também foi relatado para Amborella tric... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: Understanding the diversification of Nymphaeales, the second branch in the angiosperm phylogenetic tree, has a considerable interest to propose models of early evolution of the angiosperms. This work aims to analyze the anther and ovule ontogeny in species of Nymphaea. Ovaries and seeds of N. amazonum Mart. & Zucc. subsp. amazonum, N. caerulea Savigny and N. lotus L. and, anthers of N. amazonum Mart. & Zucc. subsp. amazonum and N. caerulea Savigny, in several development stages, were fixed infiltrated in historesin and the sections with 1-4 µm were stained with toluidine blue O or submitted to histochemical tests. The androsporangium wall follows the basic type of development. After meiosis, a simultaneous cytokinesis give rise a tetrahedral tetrad of androspores, the intine and primexine is detectable in this stage and, in N. caerulea occurs a delay in the release of androspores from the tetrads. We observe an equatorial ring-like aperture in the free androspores stage and, in vacuolated androspores the ‘pollenkitt’ is visualized in the sporoderm surface. The mitosis of the androspore occurs perpendicularly to sporoderm and, the intine begins to thicken beneath the aperture and, together with the endexine originate the oncus. The tapetum of Nymphaea amazonum and N. caerulea are secretor and do not show invasive cycles as reported to N. colorata. The basic type of androsporangium wall development also are reported to Amborella trichopoda, Nuphar pumila and for the species of ... (Complete abstract click electronic access below)
Doutor

L’estudi de la morfologia embrionària usant mètodes convencionals de microscòpia, ha estat històricament l’eina utilitzada pels embriòlegs per estudiar la viabilitat dels embrions. Ara, aquesta disciplina es suma als nous mètodes d’avaluació aportats pels sistemes time-lapse que s’han incorporat recentment als laboratoris de fecundació in vitro (FIV) de tot el món. Cada cop està més estandarditzat l’ús del time-lapse com a mètode d’avaluació i selecció embrionària conjuntament amb l’avaluació morfològica convencional, però més enllà del seu ús clínic, aquesta nova tecnologia aporta una nova perspectiva dels embrions en cultiu que obre un ventall de possibilitats a l’hora d’estudiar el desenvolupament embrionari preimplantacional, el coneixement del qual és fonamental per assolir l’èxit en els cicles de FIV. En aquest context, la present tesi doctoral ha volgut aprofundir en l’avaluació dels embrions des del punt de vista morfocinètic amb l’objectiu d’ampliar els coneixements sobre el desenvolupament embrionari preimplantacional, sempre prenent com a referència l’avaluació morfològica. Per a valorar la fiabilitat d’aquestes avaluacions basades només en la morfologia embrionària, existeixen estudis que evidencien la fiabilitat de les avaluacions morfològiques realitzades entre diferents embriòlegs. En la mateixa direcció i amb l’objectiu de demostrar la fiabilitat de les mesures preses amb els sistemes time-lapse, així com de donar solidesa als dos treballs següents, aquesta tesi doctoral inclou un primer estudi sobre la concordança entre les mesures preses amb els sistemes time-lapse per diferents observadors. En aquest treball es conclou que l’ús de la tecnologia time-lapse és fiable a l’hora de valorar el patró morfocinètic dels embrions en desenvolupament, així com que aquesta fiabilitat és extensible i independent del grau de formació o experiència dels embriòlegs, exceptuant la valoració de tPB2 que és fiable només si la duu a terme un sol observador (concordança intra-observador). Per altra banda, donada l’evidència científica que afirma que els primers temps de divisió cel·lular estan relacionats amb la viabilitat embrionària, en la present tesi doctoral s’inclou un segon estudi en el qual s’ha usat la tecnologia time-lapse per avaluar com afecta la vitrificació d’oòcits al patró morfocinètic dels embrions resultants i per tant sobre llur qualitat i viabilitat. En ell es conclou que la vitrificació d’oòcits no afecta al patró morfocinètic dels embrions en desenvolupament fins a dia 3. Finalment la present tesi doctoral inclou un tercer treball on amb el mateix objectiu que l’anterior s’ha utilitzat la tecnologia time-lapse per avaluar com afecta l’activació oocitària assistida (AOA) sobre la morfocinètica dels embrions i per tant sobre la seva viabilitat. En ell es conclou que l’aplicació de AOA accelera el desbloqueig meiòtic i l’extrusió del segon corpuscle polar però que, exceptuant les mesures de tPB2 i t3, el patró morfocinètic dels embrions derivats de cicles d’ICSI amb AOA no es mostra significativament diferent al dels embrions procedents de cicles ICSI sense AOA, estant això en concordança amb els resultats reproductius, els quals només mostren diferències significatives en comparar la taxa de fecundació entre les dues cohorts estudiades. En conjunt, els resultats d’aquesta tesi mostren com l’ús de la tecnologia time-lapse al laboratori de FIV, no només és útil per a realitzar avaluacions embrionàries a nivell clínic, sinó que també és una tecnologia fiable i útil per aprofundir en l’estudi de diferents aspectes del desenvolupament embrionari preimplantacional.
El estudio de la morfología embrionaria usando métodos convencionales de microscopía, ha sido históricamente la herramienta utilizada por los embriólogos para estudiar la viabilidad de los embriones. Ahora, esta disciplina se suma a los nuevos métodos de evaluación aportados por los sistemas time-lapse que se han incorporado recientemente a los laboratorios de fecundación in vitro (FIV) de todo el mundo. Cada vez está más estandarizado el uso del time-lapse como método de evaluación y selección embrionaria juntamente con la evaluación morfológica convencional, pero más allá de su uso clínico, esta nueva tecnología aporta una nueva perspectiva de los embriones en cultivo que abre un abanico de posibilidades para estudiar el desarrollo embrionario preimplantacional, cuyo conocimiento es fundamental para alcanzar el éxito en los ciclos de FIV. En este contexto, la presente tesis doctoral ha querido profundizar en la evaluación de los embriones desde el punto de vista morfocinético con el objetivo de ampliar los conocimientos sobre el desarrollo embrionario preimplantacional, siempre tomando como referencia la evaluación morfológica. Para valorar la fiabilidad de estas evaluaciones basadas sólo en la morfología embrionaria, existen estudios que evidencian la fiabilidad de las evaluaciones morfológicas realizadas entre diferentes embriólogos. En la misma dirección y con el objetivo de demostrar la fiabilidad de las medidas tomadas con los sistemas time-lapse, así como dar solidez a los dos trabajos siguientes, esta tesis doctoral incluye un primer estudio sobre la concordancia entre las medidas tomadas con los sistemas time-lapse por diferentes observadores. En este trabajo se concluye que el uso de la tecnología time-lapse es fiable para valorar el patrón morfocinético de los embriones en desarrollo, así como que esta fiabilidad es extensible e independiente del grado de formación o experiencia de los embriólogos, exceptuando la valoración de tPB2 que es fiable sólo si la lleva a cabo un único observador (concordancia intra-observador). Por otro lado, dada la evidencia científica que afirma que los primeros tiempos de división celular están relacionados con la viabilidad embrionaria, en la presente tesis doctoral se incluye un segundo estudio en el que se ha usado la tecnología time-lapse para evaluar cómo afecta la vitrificación de ovocitos al patrón morfocinético de los embriones resultantes y por lo tanto a su calidad y viabilidad. En él se concluye que la vitrificación de ovocitos no afecta al patrón morfocinético de los embriones en desarrollo hasta el día 3. Finalmente, la presente tesis doctoral incluye un tercer trabajo donde con el mismo objetivo que la anterior se ha utilizado la tecnología time-lapse para evaluar cómo afecta la activación ovocitaria asistida (AOA) sobre la morfocinética de los embriones y por lo tanto sobre su viabilidad. En él se concluye que la aplicación de AOA acelera el desbloqueo meiótico y la extrusión del segundo corpúsculo polar pero que, exceptuando las medidas de tPB2 y t3, el patrón morfocinético de los embriones derivados de ciclos de ICSI con AOA no se muestra significativamente diferente al de los embriones procedentes de ciclos de ICSI sin AOA, estando ello en concordancia con los resultados reproductivos, los cuales sólo muestran diferencias significativas al comparar la tasa de fecundación entre las dos cohortes estudiadas. En conjunto, los resultados de esta tesis muestran como el uso de la tecnología time-lapse en el laboratorio de FIV, no sólo es útil para realizar evaluaciones embrionarias a nivel clínico, sino que también es una tecnología fiable y útil para profundizar en el estudio de diferentes aspectos del desarrollo embrionario preimplantacional.
The study of embryonic morphology using conventional methods of microscopy has historically been the tool used by embryologists to study the viability of embryos. Now, this discipline is being added to the new assessment methods provided by time-lapse systems that have recently been incorporated into in vitro fertilization (IVF) laboratories around the world. The use of time-lapse as a method of embryo evaluation and selection in conjunction with conventional morphological evaluation is increasingly standardized, but beyond its clinical use, this new technology provides a new perspective on the embryos in culture, which opens a range of possibilities while studying the preimplantation embryonic development, the knowledge of which is fundamental to achieving success in IVF cycles. In this context, the present doctoral thesis has sought to deepen the evaluation of embryos from a morphokinetic point of view with the aim of expanding knowledge on preimplantation embryonic development, always taking as a reference the morphological evaluation. To assess the reliability of these assessments, based only on embryonic morphology, existing studies demonstrate the reliability of morphological assessments performed among different embryologists. In the same direction and with the aim of demonstrating the reliability of the measures taken with time-lapse systems, as well as giving solidity to the next two works, this doctoral thesis includes a first study on the concordance between the measures taken with time-lapse systems by different observers. This thesis concludes that the use of time-lapse technology is reliable in assessing the morphokinetic pattern of embryos in development, as well as that this reliability is extensible and independent of the degree of training or experience of embryologists, except for the assessment of tPB2 which is reliable only if it is carried out by a single observer (intra-observer agreement). On the other hand, given the scientific evidence that states that the first times of cell division are related to embryonic viability, this doctoral thesis includes a second study in which time-lapse technology has been used to evaluate how oocyte vitrification affects the morphokinetic pattern of the resulting embryos and therefore on their quality and viability. It concludes that oocyte vitrification does not affect the morphokinetic pattern of developing embryos until day 3. Finally, the present doctoral thesis includes a third study where, with the same objective as the previous, time-lapse technology has been used to evaluate how assisted oocyte activation (AOA) affects on the morphokinetics of embryos and therefore on their viability. It concludes that the application of AOA accelerates meiotic unblocking and extrusion of the second polar corpuscle but that, except for tPB2 and t3 measurements, the morphokinetic pattern of embryos derived from ICSI cycles with AOA is not significantly shown different from the one of embryos from ICSI cycles without AOA, this being in agreement with the reproductive results, which only show significant differences when comparing the fertilization rate between the two cohorts studied. Taken together, the results of this thesis show how the use of time-lapse technology in the IVF laboratory is not only useful for conducting embryonic evaluations on a clinical level, but is also a reliable and instrumental technology for deepening the study of different aspects of preimplantation embryonic development.

Orientador: Luis Antonio Violin Dias Pereira
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-23T06:06:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Justino_MariliaLopes_M.pdf: 4973879 bytes, checksum: 876805a44e4e574031c6f8adea9f285d (MD5) Previous issue date: 2013
Resumo: O termo e-learning abrange a utilização de ferramentas eletrônicas para mediar o processo de ensino e afeta, portanto, a comunicação entre alunos e professores. Para o cenário da educação presencial a incorporação do e-learning deu origem ao conceito de educação presencial aprimorada, prática que tem sido incitada para educação de nível superior. A percepção desse contexto instigou a possibilidade de aplicação de novas estratégias complementares ao modelo de aula expositiva presencial no ensino de embriologia humana. Aos estudantes da área da saúde essa ciência é particularmente importante por permitir a compreensão de questões de saúde reprodutiva e as bases dos defeitos congênitos, no entanto, como ocorre em geral para as disciplinas da etapa pré-clínica, a retenção de seu conteúdo é bastante pobre. Esse estudo se baseou na utilização do software Embriologia Clínica Humana como recurso didático em disciplinas de graduação da UNICAMP para os cursos de Fonoaudiologia, Enfermagem e Medicina, para os anos de 2010, 2011 e 2012. Foram estabelecidas três estratégias de utilização do software que se diferenciam pelo momento e forma de interferência na dinâmica de aula: (I) com o professor como o único usuário ativo do software em aula expositiva; (II) inicialmente com professor utilizando o software em aula expositiva e retomada desse material pelo aluno para revisão de conteúdo; (III) inicialmente com o aluno utilizando o software para introdução de conteúdo e retomada deste material pelo professor através de exposição dialogada. Para o curso de Medicina empregou-se ainda a utilização do software em estratégias de aprendizagem individual (II/III) e colaborativa (II'/III'). A avaliação do desempenho cognitivo imediato baseou-se no cálculo de valores de ganho normalizado (g) a partir de questões do pré e pós-testes realizados a cada aula. Os desempenhos cognitivos em curto e médio prazo foram dados pela análise de variância (ANOVA) de avaliações somativas das disciplinas e de retenção em médio prazo, respectivamente. Para a cognição imediata, a estratégia I mostrou-se superior as demais. Em curto prazo houve equivalência entre as estratégias e em médio prazo, as estratégias que favorecem comportamentos de aprendizagem ativa (II/II' e III/III') destacaram-se positivamente. A investigação da percepção de estudantes baseou-se em instrumentos de percepção com asserções que compunham uma escala de Likert, itens tipo Likert, e entrevistas semi-estruturadas. A percepção do professor responsável pelas disciplinas de graduação envolvidas no estudo foi coletada através de entrevista. Com relação ao material utilizado e a coerência das atividades, as percepções apresentadas foram positivas. Na percepção dos estudantes diante das estratégias de aula propostas foi notada resistência às estratégias que desconstruíam o modelo de aula expositiva. A estratégia III/III' foi alvo de maior oposição, embora, na percepção do professor responsável, essa tenha sido a estratégia mais motivadora, por valorizar a importância do professor frente aos alunos. A experiência relatada e os resultados obtidos destacam ainda que a introdução de novos métodos de ensino exige o envolvimento íntimo de membros do corpo docente, um aspecto fundamental da qualidade da educação e para o sucesso de qualquer estudante
Abstract: The term e-learning covers the use of electronic tools to mediate the learning process, affecting communication among students and teachers. For the face to face educational scenario, the incorporation of e-learning gives rise to the enhanced learning, a practice that has been encouraged on higher education. The perception of this context instigated the possibility of implementing new strategies to complement the lecture style often adopted in human embryology classes. Students of health science should be particularly interest in this topic, since it allows the understanding of reproductive health issues and the basis of birth defects, however, as occurs in general for the disciplines of pre-clinical stage, the retention of its content is quite poor. This study were based on the use of the software Clinical Human Embryology as a teaching resource in graduate courses at UNICAMP for courses in speech therapy, nursing and medicine, for the years 2010, 2011 and 2012. It was established three strategies using software that differ by time and form of interference in the class' dynamics: (I) with the teacher as the only active user of the software during lecture presentation; (II) initially using the software with teacher during lecture presentation and then by the student to review content; (III) initially with the student using the software to introduce the content and then by the teacher during exposure dialogue. To the medical course it was also possible to use the software trough individual (II / III) and collaborative (II '/ III') learning strategies. The immediate assessment of cognitive performance was based on the calculation of values of normalized gain (g) based on the score of pretests and posttests performed for each class. Cognitive performance in the short and medium term was given by analysis of variance (ANOVA) of summative evaluations and retention assessments, respectively. For immediate cognition, the strategy I figured out with the higher socres. In the short term there was equivalence between strategies and at medium-term the strategies that promote active learning behaviors (II / II 'and III / III') positively stood out. The investigation of the students' perception was based on instruments of perception with assertions that comprised a Likert scale, Likert type items, and semi-structured interviews. The perception of the teacher responsible for undergraduate disciplines involved in the study was collected through an interview. With regard to the material used and the coherence of the activities, perceptions presented were positive. In the perception of the students for the proposed strategies there was noted a resistance to the ones that deconstruct the lecture model. The strategy III / III' was subject to greater opposition, though, in the perception of the teacher in charge, this was the most motivating strategy for valuing the importance of the teacher front students. The reported experience and the results highlight that the introduction of new teaching methods requires the intimate involvement of faculty members, a key aspect of quality of education and to the success of any student
Mestrado
Histologia
Mestra em Biologia Celular e Estrutural

The establishment of the embryonic axis in the Drosophila embryo relies on four maternal systems. Anterior and posterior axes rely on morphogens located at the poles that will generate a gradient of activity along the embryo. In contrast, terminal and dorsoventral system rely on cues that are generated by follicle cells in the egg chamber to induce the restricted activation of their receptors, Torso and Toll respectively. In the case of the terminal signaling, the torso (tor) gene encodes for a tyrosine kinase receptor uniformly localised all around the membrane of the embryo but exclusively activated at the poles upon the activity of the Torso-like (Tsl) protein. Restricted activation of the Torso receptor at the embryonic poles relies on the tsl gene. Indeed, Tsl is expressed at the poles of the egg chamber during oogenesis and, in embryogenesis, accumulates at both poles of the inner side of the vitelline membrane, the innermost eggshell layer, by means of three protein encoded by the Nasrat (f(s) N), Polehole (f(s) Ph) and Closca (clos) genes. f(s) N, f(s) Ph and clos encode for proteins that localise in the vitelline membrane and are involved in the crosslinking of the vitelline membrane converting the eggshell into a stiff and insoluble layer. Indeed, females bearing mutations in any of these genes produce collapsed eggs due to defects in their eggshell. fs(1)N12, fs(1)ph1901 and clos1 are the only point mutation alleles which do not abolish the integrity of the vitelline membrane but cause the lack of terminal structures. The main objective of this work was to shed light on the role of Tsl, Nasrat, Polehole and Closca in ensuring restricted of Tor activation at the embryonic poles. In the case of Tsl, we found that, during oogenesis, it accumulates at the vitelline membrane while, in embryogenesis it localises at both ends of the embryonic plasma membrane probably at egg activation. These results suggest a a mechanism to transfer the Tsl from the egg chamber to the early embryo. This mechanism relies on the initial anchoring of Tsl at the vitelline membrane as it is secreted by the follicle cells, followed by its later translocation to the egg plasma membrane. In the case of Nasrat, Polehole and Closca,we found that embryo laid by fs(1)N12, fs(1)ph1901 and clos1 mutant females display defects in dorsoventral patterning specification besides their terminal phenotype. Nasrat, Polehole and Closca, are required for proper anchorage and activity of Nudel, a protease acting both in embryonic dorsoventral patterning and vitelline membrane integrity, thus providing a mechanism for the role of Nasrat, Polehole and Closca in vitelline membrane cross linking and dorsoventral patterning. Therefore, the dorsoventral and terminal systems, hitherto considered independent, share a common extracellular mechanism constituted by the Nasrat, Polehole and Closca proteins. Moreover, we found that these proteins have a new Tsl-independent role in terminal signaling. In the embryonic terminal system, Tor is activated only at the poles by its ligand Trunk while, in Drosophila larvae, Tor is also expressed and activated by another ligand called Prothoracicotropic hormone (PTTH) in the Prothoracic Gland. Ectopic expression of PTTH in the embryo is able to activate Tor ectopically even in the absence of Tsl but requires Nasrat, Polehole and Closca. From these results, we propose that a Nasrat/Polehole/Closca complex acts as a multifunctional hub to anchor various proteins synthesized at oogenesis, ensuring their spatial and temporal restricted function. These findings shed light on the eggshell not just as protective layer but as a specialised extracellular matrix that regulates the spatial and temporal control of early embryonic developmental processes.
El eje antero-posterior del embrión de Drosophila se especifica por acción de tres sistemas maternos: el sistema anterior, el sistema posterior y el sistema terminal. En el sistema terminal el receptor tirosina quinasa Torso (Tor) está localizado uniformemente en la membrana del embrión temprano pero se activa sólo en los polos por acción de la proteína Torso-like (Tsl). Aunque el papel de Tsl en la activación de Tor no está del todo claro, se ha descrito que Tsl es la única proteína de todo el sistema terminal localizada en los polos. De hecho, Tsl se acumula en la cara interna de la membrana vitelina (MV), anclado a las proteínas Nasrat, Polehole y Closca. El papel molecular de estas proteínas es poco conocido, pero análisis genéticos han demostrado que se necesitan para una correcta estructura de la MV y también para la activación de Tor. En esta tesis, nos hemos focalizado en la función de las proteínas Tsl, Nasrat, Polehole y Closca y su papel en la activación de Tor en los polos. Respecto a Tsl, descubrimos que esta proteína se acumula en la MV durante la oogénesis y, al principio de la embriogénesis, transloca de la MV a la membrana plasmática del embrión. En cuanto a Nasrat, Polehole y Closca descubrimos que estas proteínas se necesitan también para la correcta localización y función de Nudel, una proteína involucrada en la especificación del eje dorso ventral del embrión. Además encontramos que Nasrat, Polehole y Closca tienen una función adicional en el sistema terminal independiente de Tsl. De los resultados aquí descritos proponemos que un complejo formado por las proteínas Nasrat, Polehole y Closca podría funcionar en la MV como un centro multifuncional para anclar proteínas importantes por la especificación de los ejes del embrión.

Orientador: Fosca Pedini Pereira Leite
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-03T15:02:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Turra_Alexander_D.pdf: 7645434 bytes, checksum: b7aa49b635500eb97b45ea4361570ed1 (MD5) Previous issue date: 2003
Resumo: O presente estudo foi realizado com o objetivo de ampliar o conhecimento sobre a história natural de espécies de caranguejos ermitões (Crustacea, Decapoda, Anomura) com ocorrência no sudeste brasileiro. Para tanto, experimentos foram realizados enfocando aspectos comportamentais, reprodutivos e da ecologia destes animais. Um estudo inicial sobre o período de atividade de algumas espécies (Clibanarius antillensis, C. sclopetarius, C. vittatus e Pagurus criniticornis) mostrou que o padrão de atividade varia entre espécies e pode ser regido por estímulos circadianos e circamereais, embora todas as espécies tenham apresentado alta atividade no período noturno. O comportamento reprodutivo destas espécies também foi avaliado e não revelou alterações marcantes frente a descrições prévias para as espécies, gêneros ou famílias estudados. Entretanto, demonstrou-se a existência de novos comportamentos bem como a possibilidade de indivíduos intersexo das três espécies de Clibanarius, com característica tanto de machos como de fêmeas, copularem com sucesso como machos. Estes indivíduos foram mantidos em laboratório para acompanhar o destino dos poros genitais e, com base em informações morfológicas, comportamentais e populacionais, foi elaborada uma discussão sobre uma eventual possibilidade de hermafroditismo sequencial protogínico em ermitões. Um estudo descritivo sobre o desenvolvimento embrionário destas espécies de ermitão revelou que o tamanho dos embriões e o tempo de duração do desenvolvimento varia entre espécies, bem como algumas características morfológicas como c1ivagem e momento do surgimento da mancha ocelar. No entanto, sete estágios puderam ser identificados com base em características morfológicas e três em função da duração relativa desses. A relação entre o tamanho de ermitões e conchas selecionadas revelou que eles utilizam conchas sub-ótimas na natureza e que nem o tipo de concha (arquitetura) nem a espécie de ermitão têm influência sobre as relações entre suas dimenções (exceto para medidas da abertura das conchas). A hipótese do modelamento, ou seja, do efeito da experiência prévia dos ermitões com determinados tipos de concha na forma e padrões futuros de seleção de concha, foi comprovada. Ermitões criados em conchas com abertura estreita tomam-se dorso-ventralmente achados e tendem a selecionar estas conchas com mais frequência que indivíduos mantidos em conchas com abertura arredondada. Também foi demonstrado o efeito da partilha de recursos nos padrões de utilização de conchas por duas espécies simpátricas de ermitões, C. antillensis e P. criniticornis, bem como a influência de diferentes estratégias competitivas (exploração e interferência) na dinâmica de troca de conchas entre elas. Demonstrou-se ainda que P. criniticornis é um bom explorador, apresentando grande capacidade de resposta a eventos simulados de predação de gastrópodes. Entretanto, esta espécie perde as conchas recentemente obtidas para C. antillensis, o qual o domina em brigas por conchas. Por fim, verificou-se que a predação de caramujos por caranguejos quebradores de conchas pode influenciar positivamente a disponibilidade de conchas e sua futura utilização por ermitões, mas que este efeito depende da espécie de concha (diferentes graus de proteção) e de predador (diferentes estratégias e habilidades de predação), do tamanho do predador e do tamanho da presa em relação ao predador
Abstract: This study was conducted to furnish information on the natural history of hermit crab species (Crustacea, Decapoda, Anomura) from South-eastern Brazil. Some experiments were designed to focus behavioral, reproductive and ecological aspects of the biology of these organisms. A study on the periods of activity of some hermit crab species (C. antillensis, C. sclopetarius, C. vittatus and Pagurus criniticornis) showed that the activity patterns vary among species and may be related to circadian and circatidal cues, although all species presented high nocturnal activity. The reproductive behavior of these species was also evaluated and did not reveal marked differences in relation to previous descriptions for the studied species, genera and families. However, new behaviors were described as well as the possibility of intersex individuals of the three species of Clibanarius, with both mal e and female external characteristics, copulate successfully as males. Such intersex individuals were maintained in the laboratory to follow the fate of the gonopores and, based on morphological, behavioral and populational information, a discussion about an eventual possibility of sequential protogynic hermaphroditism in hermit crabs was elaborated. A descriptive study on the embryonary development of these species revealed that egg size and developmental time varied among species as well as some morphological characteristics as cleavage and the time the eye pigment appeared. However, seven stages were identified based on morphological characteristics and three on their relative duration time. The relationship between the sizes of hermit crabs and selected shells revealed that the crabs are using sub-optimal shells in nature and that neither shell (architecture) nor hermit crab species influence the size relationships between crabs and selected shells (except for measures of shell aperture). The molding hypothesis, i.e., the effect of previous utilization of certain shell types on form and future patterns of shell selection in hermit crabs, was corroborated. Hermit crabs maintained in narrow-aperture shells become dorso-ventrally compressed and tend to select such shells in a higher frequency than individuals maintained in rounded-aperture shells. The effect of resource partitioning on the shell utilization patterns of two sympatric hermit crab species (C. antillensis and P. criniticornis) was also demonstrated, as well as the influence of different competitive strategies (exploitation and interference) in shell exchange dynamics between them. It was shown that P. criniticornis is a good exploiter, presenting high ability to attend gastropod simulated predation events, but looses such newly acquired shells to C. antillensis, which dominates the former species in shell fights. Finally, the positive influence of shell-breaking crabs on shell availability and its future utilization by hermit crabs was demonstrated to be dependent on shell (variable protective degrees) and predator species (different predatory strategies and abilities), predator size and relative prey-predator size
Doutorado
Doutor em Ecologia

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências Médicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2012.
Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-06-13T19:00:09Z No. of bitstreams: 1 2012_FlaviaTuanyRodriguesdeLima.pdf: 3678028 bytes, checksum: ef638ab8eda642020f478cee775fd9e2 (MD5)
Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-06-20T13:58:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_FlaviaTuanyRodriguesdeLima.pdf: 3678028 bytes, checksum: ef638ab8eda642020f478cee775fd9e2 (MD5)
Made available in DSpace on 2016-06-20T13:58:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_FlaviaTuanyRodriguesdeLima.pdf: 3678028 bytes, checksum: ef638ab8eda642020f478cee775fd9e2 (MD5)
Este trabalho teve como objetivo avaliar as crioinjurias causadas pelo processo de vitrificacao utilizando dois diferentes dispositivos de congelamento (OPS e Cryotop) de ovocitos bovinos imaturos e maturados in vitro. Um novo protocolo de congelamento foi testado e avaliado pela capacidade pos-vitrificacao do ovocito atingir o estagio de metafase II e produzir embrioes in vitro. Os resultados obtidos mostram que ovocitos bovinos imaturos vitrificados pelo Cryotop apresentam maiores taxas do que os maturados in vitro. Os ovocitos utilizados foram obtidos de ovarios de vacas mesticas em abatedouros. Os complexos cumulus oophorus (CCO) foram aspirados e selecionados de foliculos entre 2mm e 8mm. Os CCOs foram colocados em gotas de meio coberto com oleo mineral e mantidos em estufa de cultivo a 39°C em atmosfera de 5% de CO2 e 95% de umidade relativa por ate 24hs. Os CCOs selecionados foram aleatoriamente distribuidos nos diferentes grupos. A vitrificacao foi realizada conforme protocolo descrito por Vajta et al. (1998), em que se utilizam duas solucoes de vitrificacao e uma palheta especial denominada OPS (open pulled straw). E o processo de vitrificacao dos ovocitos por Cryotop foi realizada de acordo com um novo protocolo de vitrificacao proposto a partir de mudancas testadas na rotina do laboratorio de biotecnologia da reproducao da UNB. Apos a vitrificacao dos ovocitos, iniciou-se o processo de desvitrificacao dos ovocitos e a seguir retornaram ao cultivo ate completarem 24horas. Apos a maturacao, alguns dos ovocitos foram pelo desnudados e fixados em etanol e acido acetico por 48h. A seguir foram corados pelo corante lacmoide (SIGMA®). Para determinacao do estadio da meiose, os ovocitos foram observados em microscopio de contraste de fase (Olympus®) em aumento de 1000x. Os ovocitos foram classificados de acordo com a configuracao nuclear em vesicula germinativa (VG), metafase I (MI), anafase I (AI), telofase I (TI) e metafase II (MII). Os demais ovocitos seguiram para a fecundacao e cultivo in vitro e os achados do grupo controle positivo (nao vitrificados), apresentaram maior taxa de maturidade do que os ovocitos imaturos vitrificados por OPS. Em contrapartida foi verificado taxas semelhantes de maturidade (MII) entre o controle + e os grupos Cryotop imaturos e maduros assim como o grupo de CCOs maduros vitrificados por OPS. Quanto a producao embrionaria, Para todas as variaveis estudadas, as taxas para os ovocitos vitrificados foram significativamente menores do que as do grupo-controle (P<0,05), com excecao do grupo de ovocitos imaturos vitrificados por cryotop que apresentou taxas semelhantes. Os ovocitos imaturos vitrificados com o Cryotop (15,1%), quando comparados aos demais grupos de ovocitos vitrificados, apresentaram as maiores taxas embrionarias. Os ovocitos vitrificados com Cryotop apresentaram maiores taxas de clivagem e blastocisto quando comparado ao metodo OPS. Os resultados deste estudo mostraram a superioridade do dispositivo Cryotop para vitrificacao de ovocitos bovinos imaturos com o novo protocolo proposto em relacao a producao in vitro de embrioes bovinos. Indicando que a combinacao dos crioprotetores, os tempos de equilibrio ou ate mesmo os procedimentos de vitrificacao realizados foram mais eficazes na preservacao da integridade dos ovocitos do que os ja descritos na literatura, os quais nao encontraram tal eficiencia na producao de embrioes a partir de ovocitos bovinos imaturos e maturados in vitro vitrificados com uso dos mesmos crioprotetores e hastes. ______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT
The aim of this study, was to evaluate the cryoinjuries caused by the vitrification process using two different freezing devices (Cryotop and OPS) of immature and in vitro matured bovine oocytes. A new freezing protocol was tested and evaluated by the ability of the oocyte after vitrification to reach the metaphase II stage and produce in vitro embryos. The results showed that immature bovine oocytes vitrified by Cryotop have higher rates than those matured in vitro. The oocytes used were obtained from ovaries of crossbred cows in slaughterhouses. The cumulus oophorus (CCO) were aspirated and selected of follicles from 2mm to 8mm. CCOs were placed on drops of 200ul of medium covered with mineral oil and maintained in an incubator at 39 ° C in 5% of CO2 and 95% of relative humidity for up to 24h. The CCOs selected were randomly distributed into different groups. Vitrification protocol was performed as described by Vajta et al. (1998), which were used two vitrification solutions and a special pick called OPS (open pulled straw). The oocytes vitrification process by Cryotop was performed according to a new vitrification protocol proposed by changes tested in the routine of reproductive biotechnology lab at UNB. After oocyte vitrification, the process of devitrification of oocytes was done and then returned to culture until they reached 24 hours. After maturation, some oocytes were denuded and fixed in ethanol and acetic acid for 48 hours. The sections were stained by lacmoide (SIGMA ®). To determine the stage of meiosis, the oocytes were observed by phase-contrast microscope (Olympus ®) increased by 1000x.The oocytes were classified according to the nuclear configuration of germinal vesicle (GV), metaphase I (MI), anaphase I (AI), telophase I (TI) and metaphase II (MII) . The rest of oocytes went to fertilization and in vitro culture .The findings of positive control group (nonvitrified) showed greater maturation than the immature oocytes vitrified by OPS. However was found similar rates of maturation (MII) between positive control and Cryotop groups immature and mature as well. The embryo production, of all variables studied, the rates for vitrified oocytes was significantly lower than the control group (P<0,05), except for the immature oocytes group vitrified by cryotop which showed similar rates. The immature oocytes vitrified with Cryotop (15.1%) when compared to other groups of vitrified oocytes showed the highest embryonic rates. The vitrified oocytes with Cryotop showed higher rates of cleavage and blastocyst when compared with the OPS. The results of this study showed the superiority of Cryotop device for vitrification of immature bovine oocytes with a new proposed protocol for the production of in vitro bovine embryos. Indicating that the combination of cryoprotectants, the equilibration times or even the vitrification procedures performed were more effective in preserving the integrity of the oocyte than those already described in the literature, that did not found such efficient production of embryos from immature bovine oocytes in vitro matured and vitrified using the same cryoprotectants and stems.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas.
Made available in DSpace on 2012-10-18T10:09:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T23:09:57Z : No. of bitstreams: 1 175714.pdf: 14310733 bytes, checksum: 205068e85d823d001873fc9ca4a6d86e (MD5)
Ocotea catharinensis Mez. é uma espécie florestal nativa da Mata Atlântica, de importância econômica e em risco de extinção. Um sistema de embriogênese somática foi desenvolvido para esta espécie. Entretanto, a taxa de germinação dos embriões somáticos é baixa. O objetivo deste trabalho foi a avaliação do crescimento in vitro das culturas embriogênicas, em diferentes condições de cultura e realizar análises bioquímicas, morfológicas e histoquímicas de embriões somáticos em diferentes estágios de desenvolvimento. O aumento em matérias fresca e seca nas culturas embriogênicas foi lento nas duas primeiras semanas, as quais apresentaram crescimento máximo na quarta semana. Nas duas primeiras semanas, estas culturas apresentaram níveis superiores de proteínas totais e açúcares solúveis totais enquanto que níveis superiores de amido foram observados nas três últimas semanas. Embriões somáticos no estágio globular acumularam maiores níveis de proteínas totais e menores níveis de açúcares solúveis totais e amido. Os embriões somáticos maduros apresentaram cotilédones grandes, com a protoderme bem formada e feixes vasculares diferenciados. O eixo embrionário não apresentou organização completa, mas foi observado um meristema apical da raiz bem formado. Também foram observadas células meristemáticas na região do meristema apical do ramo.

O ácido retinóico (AR) é essencial para a embriogênese. A principal enzima sintetizadora de AR durante o desenvolvimento é a ALDH1A2 (RALDH2), uma retinaldeído desidrogenase que converte retinaldeído a AR. Para entendermos como o gene da aldh1a2 é regulado identificamos regiões evolutivamente conservadas (ECRs) em vertebrados e testamos seu potencial regulatório. Identificamos uma ECR localizada no intron1 da aldh1a2, conservada em anfíbios, aves e mamíferos que atua como um enhancer em estruturas derivadas de ectoderme, endoderme e mesoderme. Animais transgênicos transientes e permanentes mostram a ativação desse enhancer na região da placa do teto do tubo neural e epicárdio, local onde esse enhancer é ativado em células derivadas do órgão pro-epicárdico após o contato e/ou proximidade com células do miocárdio. A identificação de um enhancer conservado no gene da aldh1a2 suporta a idéia de que esse gene possui uma regulação modular e mostra que a abordagem evolutiva é uma eficiente ferramenta para a identificação de mecanismos de controle desse gene.
Retinoic acid (RA) is essential for embryogenesis. The key RA synthetic enzyme during early development is ALDH1A2 (RALDH2), a retinaldehyde dehydrogenase that converts retinaldehyde into RA. To understand how aldh1a2 is regulated we screened the gene for evolutionary conserved regions (ECRs) among vertebrates and assayed their regulatory potential. We describe an aldh1a2 intron 1 ECR (identified as RALDH2.2) that is conserved in amphibians, avians and humans and acts as an enhancer in derivatives of ectoderm, endoderm and mesoderm. Transient and stable transgenesis in mice reveal strong activity of the raldh2 intron 1 enhancer at the roof plate of the neural tube and at the growing epicardium. Transgenic mice indicate that the enhancer is activated in proepicardium-derived cells by contact and/or close proximity to the myocardium. The identification of an aldh1a2 conserved enhancer supports the idea of a modular regulation and shows that the evolutionary approach is an efficient tool to identify control mechanisms of the aldh1a2 gene.

The inherent complexity of development of a new human being, especially when related to a lack of teaching-learning resources, makes the process of teaching-learning in the area of Human Embryology often difficult and abstract. The possibility of using and/or producing three-dimensional concrete models is recognized as an alternative capable of promoting the understanding of the different stages of human embryogenesis. Trying to evaluate, qualitatively and quantitatively, the educational potential of such macroscopic tools, three-dimensional models were used as intervention in Human Embryology lessons concerning the discipline taught to the second semester of undergraduate Biological Sciences, at Federal University of Santa Maria (UFSM), RS. To collect data, a knowledge test with illustrated and, in most of cases, closed questions was applied three times, what consisted in a pre-test, a post-theory test and a post-intervention test. The knowledge test and the models used were referring to the first four weeks of human embryogenesis. The pre-test helped in the first moment to survey the prior knowledge of the sample on the topic and, in a second moment, as a reference for comparison with the results of subsequent applications. Qualitative analysis of the tests resulted in categories of responses and quantitative analysis, in frequencies of each category and average score. Such analysis showed that the performance of the sample in the post-intervention test was considerably higher than in previous applications, what means that intervention models contributed significantly to the process of teaching and learning of the sample, what resulted in a better acquisition of knowledge about human embryonic development. The evaluation made by the sample also contributed to this statement. In this sense, it s highlighted the importance of using such pedagogical alternatives in initial and continuing teacher training, so such tools may be effectively used at different levels of science teaching.
A complexidade inerente ao desenvolvimento de um novo ser, principalmente quando aliada à falta de recursos didático-pedagógicos, torna, muitas vezes, o processo de ensino-aprendizagem, na área de Embriologia Humana, árduo e abstrato. A possibilidade de utilizar e/ou produzir modelos concretos tridimensionais é, reconhecidamente, uma alternativa capaz de favorecer o entendimento das diferentes fases da embriogênese humana. Buscando avaliar, qualitativa e quantitativamente, o potencial pedagógico de tais ferramentas macroscópicas, modelos didáticos tridimensionais foram utilizados, de forma interventiva, em aulas de Embriologia Humana referentes à disciplina ministrada ao segundo semestre da graduação em Ciências Biológicas da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), RS. Para a coleta de dados, um teste de conhecimentos com questões ilustradas e, em sua maioria fechadas, foi aplicado em três momentos distintos, constituindo um pré-teste, um teste pós-teoria e um teste pós-intervenção. O teste de conhecimentos e os modelos utilizados foram referentes às quatro primeiras semanas da embriogênese humana. O pré-teste serviu, inicialmente, para o levantamento dos saberes prévios da amostra acerca do tema em questão e, em um segundo momento, de referência para comparação com os resultados das aplicações posteriores. A análise qualitativa dos testes resultou em categorias de respostas, e a análise quantitativa nas frequências de cada categoria e na média geral de acertos. Tais análises demonstraram que o desempenho da amostra no teste pós-intervenção foi consideravelmente maior do que nas aplicações anteriores, o que permite considerar que a intervenção com os modelos contribuiu, de forma significativa, para o processo de ensino e aprendizagem da amostra, resultando, assim, em uma maior apropriação dos conhecimentos referentes ao desenvolvimento embrionário humano. A avaliação da metodologia realizada pela própria amostra também levou a esta constatação. Nesse sentido, destaca-se a importância da utilização de tais alternativas didáticas na formação inicial e continuada de professores da área, para que tais ferramentas venham a ser, efetivamente, utilizadas nos diferentes níveis do Ensino de Ciências.

Orientador: Luis Antonio Violin Dias Pereira
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-08T19:30:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Duarte_AnaGrabrielaEsteves_M.pdf: 3755388 bytes, checksum: b5d334a7ff4149571dfe118d2a23282f (MD5) Previous issue date: 2007
Resumo: O entendimento da Embriologia Humana é fundamental para o diagnóstico e tratamento corretos das malformações congênitas, que são responsáveis pela maioria das mortes na primeira infância em países desenvolvidos e cuja prevalência pode chegar a 21%. No entanto, as disciplinas tradicionais de Embriologia Humana exigem do aluno um rápido entendimento de uma série de mudanças que ocorrem simultaneamente em uma escala macro e microscópica no embrião e, como conseqüência, os estudantes têm dificuldade em compreender os conceitos apresentados e criar mentalmente imagens tridimensionais dos processos envolvidos. O uso de recursos multimídia auxilia na aprendizagem, estimula o conhecimento e a criatividade e possibilita soluções para problemas. Entretanto, pouca atenção tem sido dada ao desenvolvimento, utilização e avaliação dessas estratégias e à real participação do estudante no processo ensino/aprendizado. Sabendo-se que os testes de múltipla escolha, quizzes, são métodos objetivos comumente usados como ferramenta auxiliar de aprendizado, neste estudo foram desenvolvidos quizzes eletrônicos e uma metodologia para a utilização dos mesmos, visando o ensino de Embriologia Humana. Os quizzes eletrônicos correlacionaram conceitos de Embriologia básica com a gênese, o diagnóstico e o tratamento dos defeitos congênitos mais freqüentes e foram construídos de maneira a apresentar uma parte teórica seguida de uma ou mais questões de múltipla escolha, quizzes. A parte introdutória teórica foi composta por animações e esquemas ilustrativos, desenvolvidos no software Flash MX (Macromedia), imagens macroscópicas e microscópicas de embriões, fetos e neonatos encaminhados para autópsia, bem como de recém-nascidos e crianças portadores de defeitos congênitos, e de seus exames de imagens (ultrassons e radiografias). As questões de múltipla escolha foram desenvolvidas de maneira que o aluno pudesse verificar a extensão do seu conhecimento e as suas deficiências, uma vez que os quizzes indicam o porquê das alternativas erradas. O material didático foi organizado e disponibilizado em um ambiente interativo, o qual foi usado durante as monitorias pelos alunos do primeiro ano do curso de Medicina da UNICAMP matriculados nas disciplinas Morfofisiologia Humana I e II, no ano de 2006. Ao final de ambas as disciplinas, os quizzes eletrônicos e a metodologia utilizada foram avaliados pelos alunos, através de instrumentos quantitativos e qualitativos. A avaliação teve como objetivo determinar se os quizzes eletrônicos constituem uma ferramenta importante para o ensino de Embriologia Humana, para o desenvolvimento de raciocínio clínico e para a integração das áreas básica e clínica. Analisando-se os resultados pode-se observar que 98,8% dos alunos tiveram um nível de atitude no mínimo positiva em relação à metodologia de ensino desenvolvida. Enfatizaram que, quanto à qualidade, os quizzes eletrônicos são bons, apresentando parte introdutória clara com animações e imagens de casos clínicos que permitem a resolução das questões de múltipla escolha propostas, sem abordar conteúdo em excesso. Quanto ao objetivo pedagógico, os quizzes eletrônicos estimularam o raciocínio, permitiram fixar e testar os conhecimentos adquiridos em aula, acrescentaram informações novas, tornaram mais interessantes os assuntos complexos de Embriologia, aproximaram a área básica da clínica, abordaram assuntos relevantes à formação profissional e desenvolveram habilidades na resolução de problemas clínicos, o que nos permite concluir que os quizzes eletrônicos constituem sim uma ferramenta complementar adequada para o ensino de Embriologia Humana
Abstract: The Human Embryology understanding is essential for appropriate diagnosis and treatment of congenital anomalies, which are responsible for the majority of the deaths in the first infancy and whose prevalence can reach up to 21% in North America. Traditional Human Embryology courses require students to rapidly understand the various changes that occur simultaneously on a macro and on a microscopic scale in embryos. Thus, the students have difficulties to understand the concepts presented and to create three-dimensional mental images of the processes involved. The use of multimedia assists in the learning process, stimulates the understanding and the creativity, and makes possible solutions to problems proposed. However, little attention has been given to the evaluation of these strategies and to the real commitment of the student to the education/learning process. Multiple-choice tests, called quizzes, are among the most common methods used as an auxiliary learning tool. In this study, there was developed an education methodology for Human Embryology based on electronic quizzes. The quizzes have correlated concepts of basic Embryology with the genesis, diagnosis, and treatment of the more frequent congenital defects. The electronic quizzes were constructed in a way to present a theoretical part, followed by one or more multiple-choice questions regarding the considered subject. The theoretical introductory part involved texts, animations developed by Flash MX (Macromedia), and macro and microscopical digital documentation of embryos, fetuses and neonates referred to autopsy. Newborn babies with inherit disorders were also photographed, at the nursery. The multiple-choice questions were developed for verifying the students¿ knowledge extension and deficiency since the quizzes indicated the reasons why they have chosen the false statements. The didactic material was organized on an educational software used by the students at the first year of UNICAMP Medicine¿s course, attending the Human Morpho-Physiology module, in 2006. At the end of the module, the methodology was considered, using quantitative and qualitative instruments, an important tool for the education of Human Embryology, the development of clinical reasoning, and the integration of the basic and clinical areas. Analyzing the results, one can observe that 98.8% of the students had had an attitude at least positive in relation to the electronic quizzes. Concerning its quality, they had emphasized that the electronic quizzes are good, presenting a clear introductory part with animations and images of clinical cases that allow them to solve all the multiple-choice questions without approaching excessively the content. With regard to the pedagogical goal, the electronic quizzes stimulate the reasoning, allow one to retain and to test the acquired knowledge in classes, add new information, turn some complex subjects of Embryology more interesting, colligate the basic and the clinical areas, deal with relevant concepts concerning the professional formation, and develop abilities in solving clinical problems. Thus, the arguments previously mentioned allow us to conclude that the electronic quizzes constitute an adequate complementary tool for the education of Human Embryology
Mestrado
Biologia Celular
Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-04Bitstream added on 2014-06-13T20:00:06Z : No. of bitstreams: 1 almeida_iro_me_botib.pdf: 1159803 bytes, checksum: 8b692d8d747287b1fa84a1b81e1c3540 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Este projeto de pesquisa teve como objetivo analisar o desenvolvimento de embriões provenientes dos cruzamentos interespecíficos entre as espécies de teleósteos neotropicais, pintado (Pseudoplatystoma corruscans) e jandiá (Leiarius marmoratus). As coletas foram realizadas no Centro Nacional de Pesquisa e Conservação de Peixes Continentais - CEPTA/ICMBIO, Pirassununga – SP e na Piscicultura Muriti, Nova Mutum – MT. A reprodução foi feita através de indução hormonal, utilizando extrato bruto de hipófises de carpa. Os ovos foram incubados em incubadoras verticais e coletados desde o momento da fertilização até a eclosão das larvas. Os ovos dos parentais P. corruscans e L marmoratus e seus híbridos, são esféricos, demersais, córion nítido e espaço perivitelínico pequeno após a hidratação, não sendo observada a presença de gota de óleo na vesícula vitelínica durante todo o desenvolvimento embrionário. A média do espaço perivitelínico do L. marmoratus foi de 215,9μm, do P. corruscans foi de 352,5μm, do híbrido I foi de 561μm e do híbrido II foi de 247,2μm. O diâmetro médio do ovo do L. marmoratus foi de 589,6μm, do P. corruscans foi de 867,3μm, do híbrido I foi de 765,3μm e do híbrido II foi de 581μm. O período de incubação do P. corruscans e do híbrido I foi de 13 horas, à temperatura média de 28,7°C respectivamente. Já para o L. marmoratus e do híbrido II foi de 14 horas para o parental e 12 horas para o híbrido, a uma temperatura média de 28,3°C. Sendo estabelecidos os seguintes estágios embrionários: zigoto, clivagem, gástrula, organogênese e eclosão e estes divididos em fases. O estágio de clivagem foi dividido nas fases de 2, 4, 8, 16, 32, 64 células e na fase de mórula. O estágio de gástrula apresentou as fases de 25%, 50%, 75%, 90% e 100% do movimento morfogenético de epibolia e o estágio de organogênese...
The main of this research project was analyze the embryos development from the inter-specific crossing between the neotropical teleostei species, pintado (Pseudoplatystoma corruscans) e jandiá (Leiarius marmoratus). The samples were realized in the National Research and Conservation Nucleus of Continental Fishes – CEPTA/ICMBIO, Pirassununga – SP in the Buriti Fish Farming, Nova Mutum – MT. The reproduction was made through the hormonal induction, using gross extract of pituitary from carpa. The eggs were incubated in vertical incubators and collected since the fertilization time until the larval hatching. The eggs of the parents P. corruscans e L. marmoratus and their hybrids, are spherical, demersal, distinct chorion and small perivitelline space after the hydration without observation of the presence of drop oil in the vitelline vesicle during all embryonic development. The mean of the perivitelline space of the L. marmoratus was 215,9μm, in the P. corruscans was 352,5μm, in the hybrid I was 589,6μm and 247,2μm in the hybrid II. The mean diameter of the egg in L. marmoratus was 589,6μm, in P. corruscans was 867,3μm, in the híbrido I was 765,3μm and 581μm in the hybrid II. The incubation period of P. corruscans and the híbrido I was 13 hours , in the mean temperature of 28,7°C. However in L. marmoratus and Hybrid II was 14 hours for the parental and 12 hours for the hybrid in the mean temperature of 28,3°C. It was established the following embryonic stages: zygote, cleavage, gastrula, organogenesis and hatching and this divided in phases. The cleavage stage was divided in the phases 2, 4, 8, 16, 32, 64 cells and in the morula phase. The gastrula stage showed the phases 25%, 50%, 75%, 90% and 100% of morphogenetic movements of epiboly and the organogenesis stage was divided in the neurula, segmentation and larval phases... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006Bitstream added on 2014-06-13T18:46:35Z : No. of bitstreams: 1 pyles_escs_dr_botfmvz.pdf: 345793 bytes, checksum: f8cd21a8887d03897e049aa3fce53820 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Neste estudo vitrificou-se em OPS ovócitos (Experimentos 1, 2 e 3) e embriões bovinos (Experimentos 4, 5 e 6) em três soluções de vitrificação distintas: Experimentos 1 e 4) 20%EG + 20%DMSO + 0,5M sacarose; Experimentos 2 e 5) 20%DF + 20%EG + 0,5M sacarose; Experimentos 3 e 6) 20%DF + 20%DMSO + 0,5M sacarose. Os embriões foram vitrificados na presença ou não de citocalasina B. Os ovócitos foram vitrificados ou somente expostos aos crioprotetores imaturos (G0h e G0hexp), ou após 6 horas (G6h e G6hexp), 12 horas (G12h e G12hexp) ou 22 horas de MIV (G22h e G22hexp). Após a exposição ou aquecimento, parte dos ovócitos completou as 22 horas de MIV e foi destinada à PIV, para avaliação da capacidade de se desenvolverem até blastocisto. No restante avaliou-se o estágio de maturação nuclear e a distribuição dos grânulos corticais e das mitocôndrias. Observou-se que a exposição dos ovócitos imaturos (0 ou 6 horas de MIV) aos crioprotetores nos experimentos 1, 2 e 3 resultou em perda substancial de viabilidade, avaliada pelas taxas de clivagem (GC=79,4%; 1G0hexp=37,1%; 1G6hexp=51,1%; 2G0hexp=33%; 2G6hexp=52,5%; 3G0hexp=36,2%; 3G6hexp=49,8%), o que foi menos notável nos ovócitos expostos após 12 ou 22 horas de MIV (1G12hexp=59,1%; 1G22hexp=71,1%; 2G12hexp=61,5%; 2G22hexp=62,5%; 3G12hexp=58,8%; 3G22hexp=68,6%). A realização da MIV antes da vitrificação foi benéfica. Apesar de nenhuma das soluções de crioprotetores ter sido capaz de promover proteção adequada aos ovócitos submetidos à vitrificação em qualquer momento da MIV, no Experimento 1 foi observada clivagem (1G12h=7,3%; 1G22h=4,2%) indicando que a mistura de crioprotetores EG+DMSO foi a mais eficiente nas condições utilizadas. Entretanto, não houve produção de blastocistos em nenhum experimento. Nos Experimentos 4, 5 e 6 notou-se que em todos os grupos...
In this study bovine oocytes (Experiments 1, 2 and 3) and embryos (Experiments 4, 5 and 6) were vitrified in OPS using 3 different cryoprotectant solutions: Experiments 1 and 4) 20%EG + 20%DMSO + 0,5M sucrose; Experiments 2 and 5) 20%DF + 20%EG + 0.5M sucrose; Experiments 3 and 6) 20%DF + 20%DMSO + 0.5M sucrose. Embryos were vitrified in the presence or not of cytocalasin B. Oocytes were vitrified or just exposed to the cryoprotectant solutions after 0h (G0h and G0hexp), 6h of IVM (G6h and G6hexp), 12h of IVM (G12h and G12hexp) and 22h of of in vitro maturation (IVM) (G22h and G22hexp). Oocytes from groups 0 and 6h were considered immature and from 12 and 22h groups were considered mature. After exposure to cryoprotectants or warming, part of the oocytes that completed 22h of IVM were submitted to IVF to evaluate their developmental ability. Another part of the oocytes were used to evaluate nuclear maturation in the distribution of mitochondria and cortical granules. The results showed that the exposure of immature oocytes (0 and 6 hours of MIV) to cryoprotectants reduce their viability, since cleavage rates of all groups were significantly lower compared to control group (GC=79.4%; 1G0hexp=37.1%; 1G6hexp51.1%; 2G0hexp=33%; 2G6hexp=52.5%; 3G0hexp=36.2%; 3G6hexp=49.8%). This effect was less evident in the groups of mature oocytes submitted to IVM for 12 or 22 hours (1G12hexp=59.1%; 1G22hexp=71.1%; 2G12hexp=61.5%; 2G22hexp=62.5%; 3G12hexp=58.8%; 3G22hexp=68.6%). The previous IVM is beneficial to vitrification. Although none of the cryoprotectant solutions utilized were totally efficient in protecting the oocytes form cryodamage, in Experiment 1 cleavage was observed (1G12h=7.3%; 1G22h=4.2%) indicating that the combination of EG+DMSO was more effective than the other two. However in none of the groups blastocyst was formed. When embryos... (Complete abstract click electronic access below)

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009.
Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-03-19T18:35:48Z No. of bitstreams: 1 2009_EmivaldoSiqueiraFilho.pdf: 2750634 bytes, checksum: fab5082eeb2ad7b70158ed164d8d33b8 (MD5)
Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-04-01T02:12:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_EmivaldoSiqueiraFilho.pdf: 2750634 bytes, checksum: fab5082eeb2ad7b70158ed164d8d33b8 (MD5)
Made available in DSpace on 2010-04-01T02:12:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_EmivaldoSiqueiraFilho.pdf: 2750634 bytes, checksum: fab5082eeb2ad7b70158ed164d8d33b8 (MD5) Previous issue date: 2009-05-29
Apesar do enorme crescimento obtido pela técnica de produção in vitro de embriões nos últimos anos, uma limitação continua evidente, os embriões são mais susceptíveis à criopreservação que embriões produzidos in vivo. Pesquisadores buscam melhorar a qualidade do embrião produzido in vitro ou alterar os sistemas de criopreservação visando obter melhores resultados no procedimento de criopreservação. O presente trabalho teve como objetivo definir os melhores parâmetros para o uso da pressão hidrostática como nova ferramenta no processo de criopreservação de embriões bovinos produzidos in vitro e avaliar ultraestruturalmente e pela análise de expressão gênica os efeitos causados pela pressão hidrostática e pelo procedimento de criopreservação nestes embriões. Os resultados indicaram que a pressurização de embriões a partir de 80 MPa passou a ser deletéria para o desenvolvimento embrionário. Mas o uso da pressão no nível de 60 MPa por 1 hora promoveu um incremento na taxa de eclosão dos embriões após a vitrificação comparado ao grupo apenas vitrificado (79% vs 66%). E que 1 hora após a pressurização seria o melhor momento para a vitrificação, com melhores taxas de re-expansão, eclosão (90% e 74%, respectivamente), maior velocidade de re-expansão após vitrificação/desvitrificação e maior abundância de transcritos do gene ERG 25 nesse momento comparados com grupo controle, imediatamente e 2 horas após a pressão. Ultraestruturalmente embriões submetidos a pressão apresentavam maior quantidade de microvilosidades e aumento de mitocôndrias tipo hooded que os embriões controle. No grupo de embriões vitrificados após a pressão observou-se uma maior quantidade de núcleos por área de MCI quando comparados ao grupo apenas vitrificado. Determinados níveis de tratamento com pressão hidrostática melhoraram a sobrevivência in vitro de embriões bovinos vitrificados. Células embrionárias reagem em resposta ao estresse, aumentando a expressão de genes específicos, como o ERG 25 e alterando sua ultraestrutura, o que pode promover uma maior resistência a outros processos estressantes, como a vitrificação. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT
Despite the enormous growth achieved by the technique of bovine embryo in vitro production in recent years, a limitation is still evident, these embryos are more susceptible to cryopreservation than their counterparts in vivo produced. To obtain better results in the cryopreservation procedure, researchers are seeking improve embryos in vitro produced quality or change cryopreservation systems. The aim of this work was to define parameters for the use of hydrostatic pressure as a new tool in the process of vitrification of bovine embryos produced in vitro by evaluating the effects of it on ultrastructurally and gene expression on these embryos. The results indicated that embryo pressurization at 80 MPa had become deleterious to embryonic development. But pressure level at 60 MPa for 1 hour improved hatching rate after embryo vitrification compared to only vitrified group (79% vs 66%). And 1 hour after pressurization would be the best time to vitrification, with higher rates of re-expansion, hatching (90% and 74% respectively), increased speed of re-expansion after vitrification/devitrification and higher abundance of ERG 25 transcripts at this time, compared with the control group, immediately and 2 hours after the pressure. Ultrastructurally, embryos submitted to pressure had greater amount of microvilli and increased mitochondria hooded that control embryos. In the group of vitrified embryos after pressure there were a greater number of nuclei per area when compared to the only vitrified group. Certain levels of hydrostatic pressure treatment improved the in vitro survival vitrified bovine embryos. Embryonic cells react in response to stress, xiii increasing the expression of specific genes, such as ERG 25, and changing ultrastructure, which may promote increased resistance to other stressful procedures, such as vitrification.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2013.
Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-01-13T13:31:39Z No. of bitstreams: 1 2013_PauloCesarAlvesdeSousa.pdf: 2751877 bytes, checksum: eb53f7827fae946f8607c11f3efa17d0 (MD5)
Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2014-01-13T14:30:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_PauloCesarAlvesdeSousa.pdf: 2751877 bytes, checksum: eb53f7827fae946f8607c11f3efa17d0 (MD5)
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Este trabalho teve como objetivo desenvolver a organogênese e embriogênese somática e avaliar o uso do óleo mineral na propagação e conservação in vitro de Piper aduncum e Piper hispidinervum, bem como avaliar a estabilidade genômica dos acessos regenerados. Plantas germinadas in vitro foram utilizadas como material vegetal. Inicialmente, as sementes passaram por processo de desinfestação, antes da inoculação em meio de crescimento. Para os testes de germinação foram utilizados os meios de cultura de MS e WPM, com incubação nas temperaturas de 25 ºC e 30 ºC, nas condições de luz e escuro. Foi avaliada a taxa de germinação (%), o tempo médio de germinação e a velocidade de germinação. Os resultados sobre a germinação das sementes cultivadas em meio de cultura de MS e WPM a 25 ºC foram: taxa de Germinação = 84% e 81% (P. aduncum MS/WPM), 100% e 100% (P. hispidinervum MS/WPM); tempos médios de germinação = 253,429 e 240,593 horas (P. aduncum MS/WPM), 202,320 e 190,320 horas (P. hispidinervum MS/WPM); velocidades médias de germinação = 3,94 h-1 e 4,14 h-1 (P. aduncum MS/WPM); 4,94 h-1 e 5,25 h-1 (P. hispidinervum MS/WPM). As médias de germinação ficaram com valores próximos em ambos os meios de cultura testados. A germinação das sementes cultivadas em meio WPM a 25 ºC e 30 ºC foram: taxa de Germinação = 81% e 74% (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC), 100% e 96% (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC), tempo médio de germinação = 240,593 e 333,081 horas (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 190,320 e 215,250 horas (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC), velocidades médias de germinação = 4,14 h-1 e 3,00 h-1 (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 5,25 h-1 e 4,64 h1 (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC). A temperatura de 25 ºC proporcionou maior percentagem de germinação dentro do menor espaço de tempo para ambas as espécies. Nos testes de micropropagação foi avaliado o cultivo de microestacas em meios de cultura com diferentes concentrações de sais de MS e WPM (50, 70 e 100%), e em outra etapa, o cultivo em meio de MS adicionado de diferentes concentrações dos reguladores BAP (6-benzilaminopurina) e KIN (Cinetina) (0,00; 0,01; 0,05; 0,1; 0,5; 1,0 e 2,0 mg.L-1). Na primeira etapa os dados apresentaram diferenças significativas no que diz respeito ao número de formação de gemas e à altura em ambas as espécies. P. aduncum apresentou melhores resultados, tanto no número de gemas quanto na altura, quando cultivada em meio com concentrações de 50% e 75% de sais de MS e em 75% e 100% de sais de WPM, enquanto P. hispidinervum apresentou melhor desempenho quando cultivada em meio de WPM nas concentrações de 75% e 100%. Com relação ao meio de cultura adicionado dos reguladores de crescimento, P. aduncum apresentou melhores resultados nos tratamentos com 0,50 mg.L-1 de KIN e 0,05 mg.L-1 de BAP, com maior número de brotos; para P. hispidinervum as concentrações dos reguladores foram significativas apenas quando se utilizou o BAP, com melhores resultados obtidos na concentração de 1,0 mg.L-1. Para se determinar um protocolo visando a embriogênese somática a partir de explantes foliares de P. hispidinervum e P. aduncum foram realizados testes combinando diferentes concentrações de ANA (ácido α-naftalenoacético) e BAP adicionados ao meio de MS, formando 5 tratamentos: T1 (5 mg.L-1 de ANA + 0 mg.L-1 de BAP), T2 (10 mg.L-1 de ANA + 0 mg.L-1 de BAP,) T3 (0 mg.L-1 de ANA + 2,5 mg.L-1 de BAP), T4 (5 mg.L-1 de ANA + 2,5 mg.L-1 de BAP) e T5 (10 mg.L-1 de ANA + 2,5mg.L-1 de BAP). Aos 60 dias de cultivo, no escuro, o tratamento T4 proporcionou os melhores resultados para a indução de calos primários em P. aduncum com 80% de formação de calos. A transferência dos calos primários para o meio T5 (10 mg.L-1 de ANA + 2,5mg.L-1 de BAP) ocasionou a formação de calos embriogênicos e surgimento de embriões somáticos. De maneira geral, a regeneração dos embriões somáticos teve início 15 dias após a transferência para meio de crescimento de MS, sob condições de luz. As plantas regeneradas a partir dos embriões de P. aduncum apresentaram crescimento mais lento, portanto, apenas as plantas regeneradas a partir dos embriões de P. hispidinervum foram pré-aclimatizadas e levadas para casa de vegetação. A citometria de fluxo foi utilizada verificar a estabilidade genômica das plantas de P. hispidinervum regeneradas, no que diz respeito à quantidade de DNA. Os resultados revelaram que o conteúdo médio estimado de DNA de P. hispidinervum provenientes de plantas da embriogênese somática e da casa de vegetação foi de 1,8329 ± 0,02 pg e 1,8666 ± 0,05 pg, respectivamente, não havendo existência de instabilidade genômica nas plantas avaliadas. Para a conservação de germoplasma in vitro foi testada a estratégia de conservação por de imersão em óleo mineral (OM). Microestacas de P. aduncum e P. hispidinervum foram inoculadas em tubos de ensaio e cobertas completamente com óleo mineral, sendo cultivadas durante 30 e 180 dias. Aos 30 dias de cultivo, as estacas de P. aduncum e P. hispidinervum submersas em óleo mineral (OM) apresentaram taxa de 100% e 80% de sobrevivência, respectivamente. As estacas vivas foram transferidas para meio de crescimento e após 120 dias de cultivo apenas as estacas de P. aduncum apresentaram sobrevivência (30 %). Na etapa de 180 dias de cultivo, apenas as estacas de P. aduncum sobreviveram, obtendo taxa sobrevivência 40%. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT
This study aimed to develop the organogenesis, somatic embryogenesis and mineral oil as in vitro propagation and conservation strategies of Piper aduncum and Piper hispidinervum as well as assess the genomic stability of regenerated plants. Germinated seeds passed through the process of disinfecting before inoculation into the growth medium. In order for germination tests were used MS and WPM growing medium, with incubation at 25 º C and 30 º C, under the conditions of light and dark. It was evaluated the rate of germination (%), the germination mean time and the speed of germination. The measures of seed germination grown on MS and WPM medium at 25 °C were: rate of germination= 84% and 81% (P. aduncum MS/WPM), 100% and 100% (P. hispidinervum MS/WPM); germination mean time= 253,429 and 240,593 hours (P. aduncum MS/WPM), 202,320 and 190,320 hours (P. hispidinervum MS/WPM); speed of germination= 3,94 h-1 and 4,14 h-1 (P. aduncum MS/WPM); 4,94 h-1 and 5,25 h-1 (P. hispidinervum MS/WPM). The measures germination have demonstrated similar values in both growing medium. The measures of seed germination grown on WPM medium at 25 °C and 30 ºC were: rate of germination= 81% and 74% (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC), 100% and 96% (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC); germination mean time= 240,593 and 333,081 hours (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 190,320 and 215,250 hours (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC); speed of germination= 4,14 h-1 and 3,00 h-1 (P. aduncum 25 ºC / 30 ºC); 5,25 h-1 and 4,64 h-1 (P. hispidinervum 25 ºC / 30 ºC). The temperature 25 °C had proportioned higher percentage of germination into the shortest time in both species. In the micropropagation tests were evaluated microshoots growing in MS and WPM medium with different concentrations of salts (50, 70 and 100%), and in another step, the culture in MS medium supplemented with different concentrations of BAP (6-benzylaminopurine) and kinetin regulators. (0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1.0 and 2.0 mgL-1). In the first step the results showed significant differences regarding the number of bud formation and height in both species. P. aduncum achieved better results, as numbers of buds as height when grown in medium with 50%, 75%, 100% MS and 50%, 75% and 100% WPM salts concentrations, on the other hand, P. hispidinervum showed the best performance when cultivated in 75% and 100% WPM medium concentrations. Regarding to the culture medium supplemented with regulators, P. aduncum achieved better results in the treatments with 0.50 mgL-1 kinetin and 0.05 mgL-1 BAP which resulted in larger number of shoots, for P. hispidinervum concentrations of regulators were significant only with the use of BAP, and the best results obtained in the concentration of 1.0 mg.L-1. In order to determine a protocol aiming the formation of callus from leaf explants of P. hispidinervum and P. aduncum tests were conducted by combining different concentrations of NAA (α-naphthaleneacetic acid) and BAP added to MS medium, forming 5 treatments: T1 (5 mg.L-1 NAA + 0 mg.L-1 BAP), T2 (10 mgL-1 NAA + 0 mg.L-1 BAP) T3 (0 mg.L-1 + NAA 2.5 mg.L-1 BAP), T4 (5 mg.L-1 + NAA 2.5 mg.L-1 BAP) and T5 (10 mg.L-1 NAA + 2.5 mg.L-1 BAP). Treatment T4 showed the best result in the primary callus induction after 60 days of culture in the dark (P. aduncum with 80% and P. hispidinervum 32% of primary callus formation). The transfer of calluses primary for the treatment T5 (10 mg.L-1 de NAA + 2.5 mg.L-1 de BAP) resulted in the formation of embryogenic callus and somatic embryo emergence. The regeneration of the embryos began 15 days after transfer to growth medium with salts and nutrients of MS and cultivation under light conditions. Plants regenerated from the embryos of P. aduncum grew slower, so only the plants regenerated from the embryos of P. hispidinervum were pre-acclimatized and taken to a greenhouse. The flow cytometry was used to verify the stability of the genome of P. hispidinervum plants regenerated with regard to the amount of DNA. The results showed that the estimated DNA contents of P. hispidinervum from somatic embryogenesis and greenhouse (1.8329 ± 1.8666 ± 0.02 pg and 0.05 pg) with a coefficient of variation below 5% leads to the conclusion about the absence of genomic instability in plants obtained by somatic embryogenesis. For Germplasm in vitro conservation was tested conservation strategy by immersion in mineral oil (MO). Microshoots from P. aduncum and P. hispidinervum were inoculated into sampling tubes and completely covered with mineral oil and cultured for 30 and 180 days. After 30 days of culture, the stakes of P. aduncum and P. hispidinervum submerged in mineral oil (MO) had a survival rate of 100% and 80% respectively. The live cuttings were transferred to growth medium and after 120 days of cultivation only cuttings of P. aduncum showed a survival rate (30%). In the stage 180 days of cultivation, cuttings P. aduncum and P. hispidinervum submerged in mineral oil (MO) had survival rates of 40% and 0% respectively.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2017.
Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-01T17:02:44Z No. of bitstreams: 1 2017_AnaLuizaSilvaGuimarães.pdf: 1865058 bytes, checksum: 038ca84fb0206df2d9c2d9e242c09491 (MD5)
Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-03-09T20:29:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_AnaLuizaSilvaGuimarães.pdf: 1865058 bytes, checksum: 038ca84fb0206df2d9c2d9e242c09491 (MD5)
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).
O presente estudo objetivou determinar o melhor sistema de cultivo individual a ser utilizado e a quantidade relativa de RNAm de genes candidatos à marcadores de competência em biópsias de células do cumulus (CC) imaturas e maturadas de ovócitos com alta e baixa capacidade de produzir embriões in vitro. Foram realizados dois experimentos, sendo que no primeiro foram testados o efeito de dois tipos de cultivo individual (microgotas 20 μL e Cell Tak) na produção de embriões, o uso de ácido fólico como antioxidante em diferentes concentrações (0, 10, 20, 50 e 500 μM) na produção embrionária e no padrão de metilação de regiões do α- satélite e IGF2 e, o uso de ácido fólico isolado ou conjugado com ITS durante o cultivo em sistema individual na produção e qualidade dos embriões. Já no segundo foi determinada a quantidade relativa de RNAm para os genes GPC4, PTGS2, LUM, ALCAM, FSHR, PGR, GPX3, SERPINE2, HAS2, PRDX3, por PCR em tempo-real (qPCR) em biópsias de CC imaturas e maturadas. As biópsias utilizadas para o qPCR foram agrupadas conforme o resultado da produção de embriões em: CCOs que formaram blastocisto em D7(embrião); CCOs que não clivaram (não clivado) e, CCOs que clivaram, mas que não chegaram a blastocisto (clivado). No primeiro experimento, foi observado que o grupo Cell Tak apresentou menor taxa de clivagem (P≤0,05) e menor produção de embriões (P≤0,05) em D7 e D8 em relação ao grupo controle e microgotas de 20 μL. Em relação às diferentes concentrações de ácido fólico, o grupo 500μM apresentou uma redução nas taxas de clivagem em D6 (P≤0,05) em relação aos demais. Em D7, não houve diferença entre os grupos quando comparados ao grupo controle. Em relação a metilação da região α- Satélite, os grupos Controle, 20 μM e 500 μM apresentaram padrão semelhantes (P>0,05), que era hipometilado. Já para a região do éxon 10 do gene IGF2, o padrão de metilação foi diferente nos grupos 20 μM e 500 μM em relação ao controle (P ≤0,05). Quanto ao uso de ácido fólico e ITS, isolados ou associadosdurante o cultivo individual, foi observado que somente no grupo individual na presença de ITS, produção de embriões foi semelhante ao cultivado em grupo (P>0,05). No segundo experimento, dos 10 genes avaliados nas biópsias de CCs imaturas e maturadas, 2 genes apresentaram diferenças no nível de RNAm entre os grupos. O gene LUM mostrou-se mais expresso (P=0,02), enquanto que FSHR mostrou-se menos expresso (P= 0,09), ambos em CC maturadas de CCOs que desenvolveram em embrião, comparado as do grupo que não desenvolveu embrião. Conclui-se que o cultivo em gotas na presença de ITS proporcionou as melhores taxas de embriões e, que apesar do ácido fólico não afetar a produção altera o padrão de metilação do DNA. A expressão dos genes LUM e FSHR, em CCs maturadas está associada a capacidade do ovócito de formar embrião, podendo ser utilizados como marcadores não invasivos da competência ovocitária.
The present study aimed to determine the best individal culture system to be used in vitro embryo production and to determine the quantity of genes transcrits in immature and matures cumulus (CC) cells biopsies obtained from cumulus-oocytes-complexes (COCs) with high and low capacity to produce embryos. Two experiments were carried out, in the first one the effect of two types of individual culture (microdroplets 20 μL and Cell Tak) on embryo production, the use of folic acid at different concentrations (0, 10, 20, 50 and 500 μM) on embryo production and methylation pattern, and the use of folic acid alone or in combination with ITS during individual culture on embryo production and quality were evaluated. In the second experiment, the relative amount of mRNA for GPC4, PTGS2, LUM, ALCAM, FSHR, PGR, GPX3, SERPINE2, HAS2 and PRDX3 genes was determined by real-time PCR (qPCR) in immature and mature CC biopsies. The biopsies were pooled according to the embryo production results as CCOs that formed blastocyst in D7 (embryo); CCOs that did not cleave (not cleaved) and CCOs that cleaved but did not reach the blastocyst (cleaved). On the first experiment, it was observed that the Cell Tak group presented lower cleavage at D2 and blastocyst rates at D7 and D8 compared to the control and the 20 μL microdroplets groups. Regarding the different concentrations of folic acid, the 500μM group showed lower rates of cleavage and blastocyst at D6 (P≤0.05), compared to the others groups. On D7, no differences were observed between the groups and the control. As for methylation, α-Satellite region, all treatments were similar, (P> 0.05) and presented a hypomethylated pattern. For the exon 10 region of the IGF2 gene, it observed that, the groups exposed to acid folic, either 20 μM or 500 μM, had a difference methylation pattern compared to the control group (P ≤0.05). The results for the use of folic acid and ITS isolated or in combination during individual culture, showed that only the individual group exposed to ITS had similar embryo production to the control group (P> 0.05). In the second experiment, from 10 genes evaluated in CCs biopsies, two genes had differences in mRNA levels. The LUM gene was more expressed (P = 0.02), whereas FSHR was less expressed (P = 0.09) in maturated CC obtained from CCOs that developed into embryo, compared to the ones that did not. It can be concluded that individual culture in microdrops in the presence of ITS gave the highest embryo production and that although folic acid does not increase embryo development it changes their methylation pattern. In addition, the expression of the LUM and FSHR genes in CC is associated with the ability of the oocyte to form an embryo and can used as noninvasive markers of oocyte competence.

Mestrado em Toxicologia e Ecotoxicologia
A embriogénese somática (ES) é uma técnica de propagação in vitro muito utilizada para a regeneração de plantas. A ES apresenta algumas vantagens relativamente a outras técnicas de micropropagação e tem sido bastante reconhecida em programas de melhoramento. O sobreiro (Quercus suber L.) é uma espécie lenhosa com um grande valor económico em Portugal, tendo já sido alvo de estudos de indução de ES. Contudo, algumas fases da ES necessitam ainda de ser optimizadas, e por outro lado, desconhece-se o que medeia a transição de tecido não-embriogénico (TNE) para tecido embriogénico (TE). Pretende-se estudar a) o stress oxidativo e b) a dinâmica do ciclo celular durante a indução de ES de sobreiro, comparando TNE vs. TE. Para indução de TE e TNE, embriões somáticos dicotiledonares maturos foram isolados e colocados em meio de cultura MS com 1,0 mg l-1 2,4-ácido diclorofenoxiacético e 2,0 mg l-1 Zeatina. Para avaliar o nível de stress oxidativo na indução de ES, procedeu-se ao estudo de enzimas antioxidantes, como catalase (CAT), dismutase do superóxido (SOD) e peroxidase do guaiacol (G-POX) assim como de outros parâmetros de monitorização de stress oxidativo (peróxido de hidrogénio, prolina, malonildialdeído). Para avaliar o efeito dos tratamentos (meio de indução ou expressão) ao nível do ciclo celular recorreu-se à técnica de citometria de fluxo (FCM). Além das diferenças morfológicas, verificou-se que a actividade das enzimas antioxidantes diferem entre ambos os tecidos, sendo estatisticamente diferentes apenas para SOD. SOD e G-POX apresentaram tendência para valores mais elevados no TNE, enquanto CAT mostrou maior actividade no TE relativamente ao TNE. Apesar de não ter revelado diferenças significativas, TE mostrou maior tendência para níveis mais elevados de malonildialdeído e prolina. Da análise do ciclo celular verificou-se que a maioria dos núcleos se encontrou na fase G0/G1 independentemente do tecido e do tratamento. Não foram observadas diferenças significativas entre as fases S e G2. Este é o primeiro estudo que contempla a monitorização do stress oxidativo e do ciclo celular durante a indução de ES em sobreiro. Em conclusão, a partir dos dados apresentados neste estudo, existem algumas suspeitas quanto a possíveis diferenças entre TE e TNE durante a indução de ES em sobreiro relativamente ao stress oxidativo e ciclo celular, mas que necessitam de ser confirmadas, por exemplo aumentando o número de amostras para cada ensaio. Desta forma, é necessário proceder a mais estudos de modo a conhecer melhor o possíveis papeis do stress oxidativo durante a ES (causa/efeito), aprofundando o conhecimento deste processo para aplicação da produção de plantas em larga escala. ABSTRACT: Somatic embryogenesis (SE) is a technique for in vitro propagation which is used for regeneration of whole plant. The SE has some advantages over other techniques of micropropagation and has been recognized in breeding programs. Cork oak (Quercus suber L.) is a woody species with a great economic value in Portugal and has also been the subject of several studies in SE induction. However, some SE stages still require optimization and, on the other hand, factors that might mediate the transition from non-embryogenic tissue (NEC) to embryogenic tissue (EC) are still unknown. It was evaluated a) the oxidative stress status and b) cell cycle dynamics during cork oak SE induction, comparing NEC vs. EC. For the induction of EC and NEC, mature dicotyledonary embryos were isolated and placed onto a MS culture medium supplemented with 1.0 mg l-1 2,4- Dichlorophenoxyacetic acid and 2.0 mg l-1 Zeatin. To access the level of oxidative stress in SE induction, it was proceeded the study of antioxidant enzymes such as catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and guaiacolperoxidase (G-POX) as well as other parameters for oxidative stress monitoring (hydrogen peroxide, proline, malonyldialdeyde). To evaluate the effects of treatments (induction or expression medium) on cell cycle, flow cytometry (FCM) was performed. Besides the morphological differences, it was found that the activity of antioxidant enzymes differ in both tissues, being statistically different only for SOD. SOD and G-POX showed a bias to higher values in NEC, while CAT revealed greater activity in EC than NEC. Although no significant differences were detected, EC showed a bias to higher levels of proline and malonyldialdeyde. Analysis of cell cycle highlighted a largest amount of nuclei in G0/G1 phase regardless of the tissue and treatment. No significant differences were observed between S and G2 phases. This is the first study that addresses the monitoring of oxidative stress and cell cycle during cork oak SE induction. In conclusion, from the data presented in this study, there are some clues that may indicate differences between NEC and EC during SE induction in cork oak in relation to oxidative stress and cell cycle. However, this study should be confirmed in e.g. by increasing samples amount in each assay. Moreover, more studies should be fulfilled to unveil the possible roles of oxidative stress during SE (cause/effect), deepening the knowledge of the process to improve plant large-scale production.

The complex changes that take place in the mature Xenopus oocyte and early embryo are orchestrated in the absence of transcription. Until zygotic transcription starts, after the mid-blastula transition, cells rely on tight spatiotemporal translational regulation. Some maternal mRNAs accumulate during oocyte growth and are stored, translationally silent. Upon stimuli, stored, silenced mRNAs become cytoplasmically polyadenylated and, subsequently, engage in translation. The timing and extent of translational activation are dictated by a complex code of 3’UTR motifs recognized by RNA-binding proteins. In meiotic maturation, at least three sequential polyadenylation waves occur. First, in response to progesterone, a single Aurora kinase A phosphorylation triggers CPEB1-directed cytoplasmic polyadenylation of mRNAs that are required for Cdk1 activation and meiotic progression. Second, activated Cdk1 targets CPEB1 for degradation, triggering a second polyadenylation surge that is necessary for the MI-MII transition. Last, CPEB4, synthesized from the first wave and activated by Cdk1 and ERK2 upon meiotic progression, drives a third wave during the second meiotic division that is required for the metaphase-II arrest. Unlike the well-studied roles of CPEB1 and CPEB4, the roles of the remaining family members, CPEB2 and CPEB3, remain uncharacterized. In this thesis we have performed a systematic investigation of the CPEB-family of RBPs in meiotic maturation in order to elucidate their combinatorial contribution to gene expression regulation. We have determined that CPEB1 and the CPEB2-4 subfamily differ in their expression dynamics, concentration and regulation. Like CPEB4, CPEB2 and CPEB3 are regulated by N-terminal hyperphosphorylation that causes dissolution of the CPEB-condensates. Furthermore, we have found that all CPEBs co-localize and are proximal to mRNA repression and storage proteins, probably reflecting their inclusion within large repressive mRNPs in the oocyte. We have also found that all CPEBs bind a highly overlapping subset of mRNAs, although CPEB1 and CPEB2-4 could differentially regulate a small subset of targets. All in all, we have contributed to the understanding of how the multiple CPEBs co-exist and how their activities are coordinated in the cell to dictate complex expression patterns.
La maduración meiótica y la embriogénesis temprana de Xenopus se dan en ausencia de transcripción. Hasta la transición materno-cigótica – después de la 12ª división embrionaria - la transcripción no se re-inicia y todos los cambios en expresión génica ocurren por mecanismos post- transcripcionales, entre los cuales destaca la poliadenilación citoplasmática. Durante su crecimiento, el oocito produce grandes cantidades de mRNA que mantiene silenciados, con una cola de poly(A) corta. En la maduración y embriogénesis, ciertos mRNAs son poliadenilados y traducidos. Cuando y cuanto cada mRNA es movilizado depende de la combinación de señales presentes en su 3’UTR y de las proteínas de unión al RNA que las reconocen. En la maduración meiótica se dan, al menos, tres olas secuenciales de poliadenilación. La primera es iniciada en respuesta a progesterona. Concretamente, la fosforilación por Aurora quinasa A causa la remodelación del complejo de represión de CPEB1 a complejo de activación, permitiendo la expresión de genes necesarios para la progresión meiótica, como Cdk1. Seguidamente, Cdk1 participa en la degradación de CPEB1 generando una segunda ola que es necesaria para la interkinesis. Por último, CPEB4, producida en la primera ola de poliadenilación y activada por fosforilación por Cdk1 abandera una tercera ola que posibilita la expresión de proteínas que mantienen el arresto en metafase-II. A diferencia de sus homólogos CPEB1 y CPEB4, los papeles de CPEB2 y CPEB3 en maduración meiótica siguen sin caracterizar. Por ello y para entender como esta familia de proteínas de unión al RNA se coordina para dictar la expresión génica hemos realizado una investigación sistemática y comparativa de las CPEBs en maduración meiótica.

A sinalização pelo ácido retinóico (AR) é fundamental para o correto desenvolvimento embrionário. A principal enzima responsável pela síntese do AR durante o desenvolvimento é a Raldh2 (Aldh1a2), cujo padrão de expressão é bastante dinâmico. Apesar dos padrões de expressão da raldh2 e seus papéis durante o desenvolvimento já estarem bem estabelecidos, pouco se conhece sobre sua regulação. Estudos de bioinformática identificaram no gene raldh2 um elemento não-codante conservado (CNE), presente de anfíbios até humanos, denominado Raldh2.2. Utilizando ensaios de eletroporação e análise de camundongos transgênicos, nós mostramos que o CNE Raldh2.2 é um enhancer responsável por ativar a expressão da raldh2 na medula espinhal dorsal de tetrápodes e que seu padrão de atividade coincide em aves e camundongos. Através de ensaios de deleções e mutações sítio-direcionadas desse enhancer, identificamos quatro elementos cis regulatórios responsáveis por ativá-lo na placa do teto e em interneurônios dorsais da medula espinhal. A regulação positiva da atividade desse enhancer ocorre de maneira redundante por três sítios Tcf-homeobox, enquanto sua inibição nos interneurônios ventrais da medula espinhal se dá por dois sítos repressores, um Lim-homeodomínio e um Tgif. Neste trabalho, utilizando hibridação in situ dupla para raldh2 e math1/cath1, descrevemos um novo território transiente de expressão da raldh2, os interneurônios dorsais 1. Esses interneurônios dão origem a circuitos ascendentes e a interneurônios comissurais intraespinhais, sugerindo papéis para a sinalização pelo ácido retinóico na ontogenia dos circuitos proprioceptivos espinocerebelar e intraespinhal.
Retinoic acid (RA) signaling is crucial for correct embryonic development. Raldh2 is the major enzyme involved in retinoic acid synthesis during early development and its expression pattern is dynamic. Raldh2 expression patterns and its roles during development are well known, but little is known about its regulation. Bioinformatic analysis identified a conserved non-coding element (CNE) in the raldh2 gene conserved from amphibians to humans, called Raldh2. Using electroporation assays and transgenic mice analysis we showed that CNE Raldh2.2 is an enhancer that activates raldh2 in the dorsal spinal cord in tetrapods and that its activity pattern is the same in chicken and mice. Using deletions assays and site-directed mutagenesis, we identified four cis regulatory elements that activate this enhancer in the roof plate and dorsal interneurons of the spinal cord. This enhancer is activated by a redundant mechanism through three predicted Tcf-homeobox biding sites and it is repressed in ventral interneurons via two repressors sites, a Lim-homeodomain and a Tgif. In this thesis, using in situ hybridization, we described a new transient territory of raldh2 expression, the dorsal interneurons 1. These interneurons give rise to ascending circuits and intraspinal commissural interneurons, suggesting roles for retinoic acid signaling in the ontogeny of spinocerebellar and intraspinal proprioceptive circuits.

Body axis elongation is a hallmark of the vertebrate embryo, which also comprises the morphogenesis of the caudal neural tube (NT). The contribution of bipotential neuromesodermal progenitors (NMPs) to the cranio-caudal elongation of the embryo is beginning to be understood. However, the signalling pathways and tissue remodelling events required for shaping the caudal NT from NMPs remain largely unknown, even though the failure in this process generates caudal neural tube defects (NTDs). The caudal NT in amniote embryos forms by a process termed secondary neurulation (SN). SN shapes a secondary neural tube (SNT) through the lineage restriction and the mesenchymal-to-epithelial transition (MET) of NMPs into neural progenitor cells (NPCs), and the concomitant opening of a lumen de novo in the centre of the tissue. In human embryos, the development of the lumbar, sacral, coccygeal and equinal cord largely involves SN. The limited availability of human tissue to perform histological analyses at different developmental stages reinforces the need to use animal models to understand the events shaping the SNT, particularly since NTDs rank among the most common categories of birth defects, affecting 1 in every 1000 established pregnancies worldwide. Here, we combine the genetic manipulation of the chick embryo with an in vivo imaging technique to decipher the cellular events driving SNT formation and to demonstrate that TGF-b/SMAD3 signalling is required for proper SN, since its inhibition results in NTDs with multiple lumens. Our analysis demonstrates that the lineage restriction and the MET of Sox2+ T/Bra+ mesenchymal NMPs into Sox2+ T/Bra- epithelial neural progenitor cells (NPCs) are independent of SMAD3 activity. In the developing SNT, both the neural restriction and the MET tightly associate to the growing basement membrane (BM), which assembles in a dorso-ventral fashion. Hence, the first cells to adopt a neural identity and to undergo MET are those contacting the BM, located in the dorsal periphery of the medullary cord. On the contrary, centrally located cells remain mesenchymal, even to the very end of the process. It is between these two cell populations that small cavities of varied size and shape form, always at a one-cell distance from the BM, being SMAD3 also dispensable for lumen initiation. We found that the resolution of a single, centrally positioned continuous lumen in the SNT takes place through the intercalation of central cells, rather than through their programmed cell death. Indeed, results show an important novel activity for TGF-b/SMAD3 in the intercalation of central cells during lumen resolution. Notably, cell intercalation is always preceded by a cell division, either a symmetric II, which generates two intercalating daughter cells, or an asymmetric IC, which generates one intercalating and one central daughter cell. These two modes of division associate to different cranio-caudal levels, with II occurring cranially to IC. In addition, a third mode of division, the symmetric CC division, occurs in the caudal tail bud in order to generate two central mesenchymal NMPs and to expand the progenitor pool driving body axis elongation. Finally, we found lengthened primary cilia in sh-SMAD3 electroporated NPCs, a ciliopathy that might compromise the sensory functions of this organelle and ultimately contribute to the failure in central cell intercalation. Altogether, here we describe the cellular events driving SNT formation in the chick embryo and found a TGF-b/SMAD3-associated NTD. We anticipate our findings to be relevant to understand human SN and the embryonic origin of closed NTDs.
El alargamiento del eje del cuerpo es un sello distintivo del embrión de vertebrados. Los progenitores neuro-mesodérmicos (NMPs) llevan a cabo este proceso, incluyendo la morfogénesis del tubo neural caudal. En amniotas, éste se forma por el proceso conocido como neurulación secundaria (SN). El papel de los NMPs en el alargamiento del eje cráneo-caudal se conoce en mayor medida. Sin embargo, las vías de señalización y los eventos celulares que conforman el tubo neural secundario (SNT) se mantienen ampliamente desconocidos, aun cuando fallos en la SN producen defectos de tubo neural (NTDs). Aquí combinamos la manipulación genética del embrión de pollo con técnicas de imagen in vivo para descifrar los eventos celulares que conducen la formación del SNT y demostrar también que la vía de señalización TGF-beta/SMAD3 juega un papel muy importante en este proceso. Así, si ésta es inhibida durante el desarrollo del SNT se generan NTDs caracterizados por la presencia de múltiples lúmenes. Nuestro análisis demuestra que los eventos iniciales de la SN como la restricción de los NMPs en células progenitoras neurales (NPCs) y la subsecuente transición mesénquima-epitelio (MET) son independientes de la actividad de TGF-beta/SMAD3. No obstante, la resolución de un único lumen central, posible gracias a la intercalación de las células centrales, requiere la actividad de TGF-beta/SMAD3. Por todo ello, creemos que los hallazgos aquí presentados son relevantes para entender el proceso de SN en humano y así desentrañar el origen embrionario de los NTDs.

Resumo: Este projeto de pesquisa teve como objetivo analisar o desenvolvimento de embriões provenientes dos cruzamentos interespecíficos entre as espécies de teleósteos neotropicais, pintado (Pseudoplatystoma corruscans) e jandiá (Leiarius marmoratus). As coletas foram realizadas no Centro Nacional de Pesquisa e Conservação de Peixes Continentais - CEPTA/ICMBIO, Pirassununga - SP e na Piscicultura Muriti, Nova Mutum - MT. A reprodução foi feita através de indução hormonal, utilizando extrato bruto de hipófises de carpa. Os ovos foram incubados em incubadoras verticais e coletados desde o momento da fertilização até a eclosão das larvas. Os ovos dos parentais P. corruscans e L marmoratus e seus híbridos, são esféricos, demersais, córion nítido e espaço perivitelínico pequeno após a hidratação, não sendo observada a presença de gota de óleo na vesícula vitelínica durante todo o desenvolvimento embrionário. A média do espaço perivitelínico do L. marmoratus foi de 215,9μm, do P. corruscans foi de 352,5μm, do híbrido I foi de 561μm e do híbrido II foi de 247,2μm. O diâmetro médio do ovo do L. marmoratus foi de 589,6μm, do P. corruscans foi de 867,3μm, do híbrido I foi de 765,3μm e do híbrido II foi de 581μm. O período de incubação do P. corruscans e do híbrido I foi de 13 horas, à temperatura média de 28,7°C respectivamente. Já para o L. marmoratus e do híbrido II foi de 14 horas para o parental e 12 horas para o híbrido, a uma temperatura média de 28,3°C. Sendo estabelecidos os seguintes estágios embrionários: zigoto, clivagem, gástrula, organogênese e eclosão e estes divididos em fases. O estágio de clivagem foi dividido nas fases de 2, 4, 8, 16, 32, 64 células e na fase de mórula. O estágio de gástrula apresentou as fases de 25%, 50%, 75%, 90% e 100% do movimento morfogenético de epibolia e o estágio de organogênese... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: The main of this research project was analyze the embryos development from the inter-specific crossing between the neotropical teleostei species, pintado (Pseudoplatystoma corruscans) e jandiá (Leiarius marmoratus). The samples were realized in the National Research and Conservation Nucleus of Continental Fishes - CEPTA/ICMBIO, Pirassununga - SP in the Buriti Fish Farming, Nova Mutum - MT. The reproduction was made through the hormonal induction, using gross extract of pituitary from carpa. The eggs were incubated in vertical incubators and collected since the fertilization time until the larval hatching. The eggs of the parents P. corruscans e L. marmoratus and their hybrids, are spherical, demersal, distinct chorion and small perivitelline space after the hydration without observation of the presence of drop oil in the vitelline vesicle during all embryonic development. The mean of the perivitelline space of the L. marmoratus was 215,9μm, in the P. corruscans was 352,5μm, in the hybrid I was 589,6μm and 247,2μm in the hybrid II. The mean diameter of the egg in L. marmoratus was 589,6μm, in P. corruscans was 867,3μm, in the híbrido I was 765,3μm and 581μm in the hybrid II. The incubation period of P. corruscans and the híbrido I was 13 hours , in the mean temperature of 28,7°C. However in L. marmoratus and Hybrid II was 14 hours for the parental and 12 hours for the hybrid in the mean temperature of 28,3°C. It was established the following embryonic stages: zygote, cleavage, gastrula, organogenesis and hatching and this divided in phases. The cleavage stage was divided in the phases 2, 4, 8, 16, 32, 64 cells and in the morula phase. The gastrula stage showed the phases 25%, 50%, 75%, 90% and 100% of morphogenetic movements of epiboly and the organogenesis stage was divided in the neurula, segmentation and larval phases... (Complete abstract click electronic access below)
Orientador: Fábio Porto Foresti
Coorientador: Alexandre Ninhaus Silveira
Banca: José Augusto Senhorini
Banca: Rosicleire Verissimo Silveira
Mestre

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2006.
Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-11-25T16:38:05Z No. of bitstreams: 1 tese TANIA MARIA DE ANDRADE RODRIGUES.pdf: 1596619 bytes, checksum: 19f1be4f615d67ff61d6579d7d4262ba (MD5)
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Doenças cardíacas tanto congênitas quanto adquiridas apresentam alta morbi-mortalidade, constituindo no Brasil a primeira causa de óbito (29,9%). O impacto sócio-econômico dessas patologias repercute no sistema de saúde e em uma realidade de escassez de recursos e necessidade de priorização em sua alocação, direcionando para a primacia de investimentos em ciências básicas. Este estudo de cardiogênese experimental é de extrema importância para a compreensão dos mecanismos envolvidos na formação do coração, e o modelo de camundongos geneticamente modificados constitui valiosa ferramenta investigativa. Camundongos com deleção do gene Ringer finger 4 (rnf4) foram gerados com o objetivo de avaliar a repercussão nos embriões recessivos negativos das alterações anátomo-patológicas, visando entender a função deste gene na formação do coração. RNF4 é um fator de transcrição que é expresso no coração durante a embriogênese. Foram utilizados camundongos das linhagens BALBc e C57Bl6. Foram dissecados 825 embriões, sendo 423 BALBc e 402 C57Bl6, distribuídos entre as seguintes faixas etárias: de 11 a 17 dias de desenvolvimento embrionário, animais com menos de um dia de vida e animais com 21 dias pós-natal. Os resultados demonstraram que 34.6% dos camundongos com deleção total do rnf4, a partir do décimo terceiro dia de desenvolvimento embrionário, apresentaram defeito do septo ventricular, paredes ventriculares finas e desorganização das camadas ventriculares, ocasionando repercussão hemodinâmica e clínica sugestiva de insuficiência cardíaca congestiva. Além disso, nenhum animal foi viável. Conclui-se que a deleção do gene rnf4 é letal para os embriões de camundongos por ser essencial na formação do coração. Esses resultados contribuem para entendermos os mecanismos moleculares envolvidos na embriogênese. Ademais, serão úteis no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para as doenças cardíacas. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT
Cardiac diseases, whether congenital or acquired, show a high mortality rate worldwide and in Brazil, they represent the major cause in natural deaths with 29.9% of the cases. The social and economical impact of those pathologies on the Brazilian Public Health System is particularly worsened due to the lack of resources and the need to optimize the scarce resource allocation, leading to the prioritization of investments towards the basic sciences. For all the above reasons, research in experimental cardiogenesis is of vital importance to the understanding of the mechanisms involved in the heart formation, where models using genetically altered mice constitute an invaluable tool in the investigation for cures. Our study was conducted by deleting the Ring Finger 4 (Rnf4) mouse genes and observing the effects the absence of such gene has in the formation of their hearts. RNF4 is a transcription factor which is expressed in the heart during embryogenesis. In that sense, mice of lineage BALBc and C57B6 which presented the Rnf4 deletion were selected for our experiments. A total of 825 embryos were dissected, where 423 were of the BALBc lineage and 402 of the C57B16 lineage. In either case, the embryos were separated into age groups: 1) 11 to 17 days of embryonary development; 2) less than 1 day old; and 3) 21-day old specimens. The results show that 34.6% of the mice with deletion of the Rnf4 gene presented ventricular septal defect (VSD), thin ventricular walls, and disorder of the ventricular layers, leading to hemodynamic and clinical pathologies that suggest congestive heart failure (CHF). Moreover, animals which lack of functional Rnf4 gene die due to cardiac defect. We concluded that deletion of the rnf4 gene is lethal for mice embryos, since such gene is apparently essential in the heart formation. These results will contribuite to understand the molecular mecanisms involved in the heart embryogenesis. In addition, it will be helpful to development new therapeutical strategies to heart diseases.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009.
Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-03-05T17:48:19Z No. of bitstreams: 1 2009_AnaClaudiadeMeloValeriano.pdf: 348938 bytes, checksum: 1dacb40fa7251b2be3b866121a3a4eab (MD5)
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Estudos baseados em genes candidatos buscam identificar polimorfismos e a prospecção de genes candidatos que estão envolvidos no processo de ovulação são ferramentas de importantes quando se pretende incrementar a eficiência reprodutiva de rebanhos e melhorar as respostas das biotécnicas de multiplicação animal. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi sequenciar e detectar polimorfismos em parte do “exon” 10 do gene do receptor do hormônio folículo estimulante (FSHR); genotipar doadoras de embriões para um SNP nos genes receptor de estrógeno (ER) e FSHR; analisar se esses genes podem ser usados como marcadores moleculares para a resposta superovulatória em bovinos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT
Candidate gene based studies intend to identify polymorphisms and to prospect candidate genes evolved in ovulation process are important tools to increase the cattle reproduction efficiency and to improve animal biotechnology response. Thus, the aim of this study was to sequence and to detect polymorphisms present in exon 10 from follicle stimulation hormone receptor (FSHR) gene; to genotype estrogen receptor gene (ER1) and FSHR SNPs in embryo donors; and to verify the possibility to use these genes as molecular markers to assess the bovine ovullatory response.