Dissertations / Theses: 'Glutathion peroxydase'

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Furling, Denis. "Séléno-glutathion peroxydase-1 et neuroprotection." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1997. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk3/ftp04/nq25406.pdf.

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Gamain, Benoît. "Mise en evidence d'une glutathion peroxydase endogene chez plasmodium falciparum." Lille 2, 1997. http://www.theses.fr/1997LIL2T007.

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Chabory, Eléonore. "Caractérisation fonctionnelle de la glutathione peroxydase 5 murine." Phd thesis, Université Blaise Pascal - Clermont-Ferrand II, 2009. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00725945.

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Abstract:

La maturation épididymaire est un élément clé dans le développement de l'aptitude du gamète mâle à féconder l'ovocyte. Parmi, les nombreux composants impliqués dans ce processus, les espèces oxygénées réactives (EOR) sont essentielles car bénéfiques par certains aspects, cependant elles sont toxiques en excès. GPx5, une forme épididymaire de la glutathion peroxydase, pourrait jouer un rôle dans le contrôle redox de l'environnement spermatique. Une production in vitro de GPx5 par un baculovirus recombinant a été réalisée, mais le virus s'est révélé très instable et n'a donc pas permis d'analyser biochimiquement cette protéine. Une approche in vivo initiée par immunisation passive n'a pas montré d'altération de la fertilité des souris. Elle a été complétée par le dévelopement d'une étude plus générale basée sur la production de souris inactivées pour le gène gpx5. Ces dernières ont une fertilité normale, toutefois, des altérations développementales sont observées dans la descendance de mâles âgés. Des perturbations sont associées à des changements de l'expression de nombreuses enzymes antioxydantes comme les GPxs et la catalase, mais seulement dans la queue de l'épididyme. De plus, un accroissement des dommages oxydatifs à l'ADN est visualisé dans l'épithélium de la queue de l'épididyme et dans les spermatozoïdes de cette région. Une carence en sélénium a été initiée pour contrecarrer une éventuellle compensation fonctionnelle provenant des autres GPx épididymaires. Une initiation des voies apoptotiques est observée chez les animaux KO pour gpx5 et carencés dans la queue de l'épididyme. De façon surprenante, des perturbations redox sont aussi visualisées dans d'autres organes comme le foie et le testicule.

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ROCHER, CORINNE. "Expression et activite enzymatique de mutants de la glutathion peroxydase seleniee." Paris 7, 1992. http://www.theses.fr/1992PA077169.

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Abstract:

La segpx est une proteine cytosolique eucaryote constituee par 4 sous-unites identiques. Chaque sous-unite contient au site actif un atome de selenium sous forme d'un residu selenocysteine (secys). Cet acide amine selenie est incorpore dans la chaine polypeptidique selon un mecanisme co-traductionnel. Il est specifie par un codon uga habituellement reconnu comme un codon d'arret de la synthese proteique. Notre objectif initial etait de produire le segpx dans un hote heterologue afin d'en etudier le mecanisme d'action et le role pharmacologique. La bacterie e. Coli a la capacite de synthetiser une selenoproteine, la formate dehydrogenase (fdh). Dans un premier temps, nous avons construit des plasmides pour exprimer la segpx dans e. Coli. Ces constructions nous ont permis d'obtenir la synthese, a un haut niveau, de mutants de la glutathion peroxydase. Dans ces mutants, le codon secys (uga) a ete remplace soit par un codon cysteine (ugc ou ugt) soit par un codon serine (tca). Cependant, la synthese de la molecule seleniee a partir de la sequence contenant le codon uga n'a pu etre detectee. Ces resultats nous ont conduit a conclure que le mecanisme d'incorporation de la selenocysteine n'etait pas conserve entre procaryotes et eucaryotes. La deuxieme partie de ce travail a ete consacree a la purification et la caracterisation des mutants de la segpx. Dans les tests mettant en evidence l'activite glutathion peroxydase, seul le mutant cysteine est capable de reduire les hydroperoxydes en utilisant le glutathion comme substrat reducteur. L'etude de l'activite catalytique du mutant cysteine nous a permis de mieux comprendre le role essentiel du selenium au sein du site actif de l'enzyme

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Faucher, Karine. "Clonage de l'ADN complémentaire de la glutathion peroxydase cytosolique humaine, effets de la surexpression de l'enzyme : -in vitro : cellules endotheliales et musculaires lisses - in vivo : souris transgeniques APOE-/-." Limoges, 2001. http://www.theses.fr/2001LIMO105E.

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Navrot, Nicolas Jacquot Jean-Pierre. "Etude fonctionnelle des glutathion peroxydases de peuplier, une famille de peroxydases thiorédoxine-dépendantes." [S.l.] : [s.n.], 2006. http://www.scd.uhp-nancy.fr/docnum/SCD_T_2006_0132_NAVROT.pdf.

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Roche-Lestienne, Catherine. "Caractérisation génétique et moléculaire d'une glutathion peroxydase séléno-dépendante de Schistosoma mansoni." Lille 1, 1995. http://www.theses.fr/1995LIL10124.

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Abstract:

Le clonage et la caractérisation du gène déterminant la synthèse d'une glutathion peroxydase de Schistosoma mansoni (SmGSHpx) révèlent la présence d'un codon TGA en phase de lecture ainsi qu'une structure secondaire conservée de la région 3' non-codante. Ces deux éléments permettent l'incorporation d'une sélénocystéine au sein de SmGSHpx. La comparaison de la séquence du gène de la SmGSHpx avec celle déterminant la synthèse de la phospholipide hydroperoxyde GSHpx (PHGSHpx) de porc montre 55% d'identité et une organisation génomique très similaire. Par ailleurs, l'élaboration d'une phylogénie moléculaire des GSHpx révèle que ces deux gènes sont étroitement apparentes. Une protéine présentant une activité PHGSHpx a été purifiée chez S. Mansoni. Elle est reconnue par des anticorps dirigés contre l'extrémité C-terminale de la SmGSHpx. L'expression in vitro de la SmGSHpx a été réalisée au sein de cellules d'insectes. Cette protéine recombinante est enzymatiquement inactive. In vivo, la localisation unique de la SmGSHpx dans les cellules vitellines de la femelle est mise en évidence. La protéine n'est pas retrouvée chez la larve malgré la présence de l'ARNm spécifique à ce stade. Une approche dans l'analyse fonctionnelle de la région promotrice de la SmGSHpx a été réalisée.

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Vaugeois, Florence. "Glutathion péroxydases : intérêt en physiopathologie." Paris 5, 1994. http://www.theses.fr/1994PA05P257.

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Saudrais, Élodie. "Mécanismes de neuroprotection liés au glutathion dans la barrière sang - liquide céphalorachidien choroïdienne au cours du développement périnatal." Thesis, Lyon, 2019. http://www.theses.fr/2019LYSE1026/document.

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Abstract:

Plus de 50 % des handicaps neurodéveloppementaux sont dus à une exposition périnatale à des stress toxiques ou oxydants. Comprendre comment le cerveau est protégé au cours du développement périnatal et pourquoi ses mécanismes de défense sont dépassés lorsque l’enfant est soumis à un stress important est donc crucial. La barrière sang – liquide céphalorachidien (LCR), localisée au niveau des plexus choroïdes, présente une capacité de détoxification élevée et pourrait donc avoir un rôle prépondérant dans la protection du cerveau au stade périnatal. Nous avons étudié la capacité de plusieurs enzymes choroïdiennes à protéger l'environnement liquidien cérébral pendant la période postnatale chez le rat, et évalué si leurs activités pouvaient être induites par la voie du nuclear factor erythroid-2-related factor 2 (Nrf2). Le facteur Nrf2 peut en effet moduler l’expression de différents gènes codant pour des enzymes de détoxification. Nous avons montré que les glutathion transférases (Gst) et les glutathion peroxydases (Gpx), intervenant respectivement dans l’inactivation des molécules toxiques et dans la régulation du stress oxydant, présentaient des activités choroïdiennes élevées pendant la période postnatale, et avons caractérisé fonctionnellement leur capacités de neuroprotection. Le traitement des ratons avec du diméthylfumarate (DMF), inducteur de la voie Nrf2, induit la migration nucléaire de Nrf2, augmente l’activité choroïdienne Gst, et réduit de 40 % le passage cérébral de toxiques substrats des Gst. Ces données montrent la capacité neuroprotectrice précoce des plexus choroïdes, et indique qu’elle peut être induite pharmacologiquement
More than 50 % of intellectual or sensory-motor deficits in children are due to perinatal exposure to oxidative stress or toxicants. Understanding brain protection mechanisms during development is crucial to design therapeutic strategies to address these disabilitating disorders. The choroid plexuses, forming an interface between the blood and the cerebrospinal fluid (CSF), have a high detoxifying capacity, suggesting their involvement in neuroprotection. The nuclear factor erythroid-2-related factor 2 (Nrf2) pathway can modulate the expression of several genes encoding for antioxidant proteins and detoxifying enzymes. We studied the ability of several choroidal enzyme families to protect the brain fluid environment during the postnatal period in rat and explored whether this protection can be enhanced by Nrf2 pathway. We focused on glutathione transferases (Gsts), which conjugate toxic compounds to glutathione, and glutathione peroxidases (Gpxs), which detoxify reactive oxygen species. Gst and Gpx specific activities were high during the postnatal period in choroid plexuses compared to the cerebral cortex, and their neuroprotective functions were efficient. The Nrf2 factor is expressed in choroid plexuses during the perinatal period. Treatment of rat pups with Nrf2 activator dimethylfumarate induced Nrf2 nuclear translocation and increased Gst activities in choroid plexus tissues. The dimethylfumarate treatment resulted in a large decrease of the blood-to-CSF permeability of a prototypical Gst substrate. These data substantiate the early neuroprotective functions of choroid plexuses, which can be enhanced upon treatment with clinically used pharmacological compounds

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Januel, Caroline. "Stress oxydant au niveau des plaquettes sanguines humaines dans le contexte du diabète : étude du glutathion et de la glutathion peroxydase 4." Lyon, INSA, 2003. http://theses.insa-lyon.fr/publication/2003ISAL0024/these.pdf.

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Abstract:

Les plaquettes sanguines jouent un rôle prépondérant dans les complications cardiovasculaires chez le diabétique. En raison de l’hyperglycémie, la glycosylation non enzymatique ou glycation des protéines est augmentée. Des travaux ont déjà mis en évidence la glycation de la glutathion peroxydase cytosolique (cGPx ou GPx1) plaquettaire chez les diabétiques de type 1 ce qui entraîne une diminution de l’activité enzymatique. De plus, la concentration plaquettaire du glutathion (GSH), est diminuée. Dans ce contexte, notre étude a porté sur deux antioxydants plaquettaires : le GSH et la « phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase » (PHGPx ou GPx4). Le rôle protecteur et détoxifiant du GSH résulte principalement de sa fonction de cosubstrat des GPx ; la GPx4 catalyse la réduction des hydroperoxydes lipidiques contenus dans les membranes. La finalité est d’apporter ou de compléter des connaissances fondamentales sur l’équilibre pro/antioxydant des plaquettes de diabétiques. Nous avons mis en évidence que le GSH peut être glyqué in vitro ; l’adduit formé n’est plus cosubstrat de la GPx1, ce qui pourrait ainsi contribuer à la diminution des défenses antioxydantes que nous avons observée dans les plaquettes des diabétiques. Nous avons caractérisé la GPx4 plaquettaire et étudié sa localisation subcellulaire par une double approche (dosage enzymatique et immunodétection). La synthèse d’un substrat spécifique de l’isoforme 4 des GPx (les hydroperoxydes de phosphatidylcholine) et le dosage enzymatique plaquettaire ont été mis au point. Ceci a permis de mettre en évidence une activité GPx4 dans les plaquettes de sujets sains, distincte et fonctionnellement complémentaire de l’activité GPx1 déjà connue. Nous observons 83,5% de l’activité GPx4 totale plaquettaire dans le cytosol, et respectivement 8,9% et 7,6% dans les fractions membranaire et mitochondriale. Parmi plusieurs cosubstrats testés (dérivés du GSH et dithiol), le GSH reste le cosubstrat de la GPx4 le plus utilisé. Enfin, nous avons étudié le métabolisme lipidique et le statut pro/antioxydant des plaquettes sanguines dans le diabète. Malgré un bon contrôle glycémique et en absence de manifestations cliniques de complications cardiovasculaires, un stress oxydant est observé dans les plaquettes sanguines des diabétiques (augmentation du taux de MDA, diminution du taux d’α-tocophérol et des activités GPx). Une augmentation du taux de TXB2 basal ainsi qu’une hyperagrégabilité ont été observées dans les plaquettes des diabétiques. La possibilité que l’hyperactivité plaquettaire observée dans le diabète soit médiée, entre autres, par une augmentation de la libération d’AA via une activation de la phospholipase A2 cytosolique est également discutée
Platelets contribute to the pathogenesis and progression of vascular complications in diabetes. One of the consequences of hyperglycaemia is oxidative stress which accelerates glycation of proteins. The glycation of platelet cytosolic glutathione peroxidase (cGPx or GPx1) has been reported in type 1 diabetics and results in a decreased activity. Moreover, platelet glutathione (GSH) concentration has been found to be lower. In this context, two platelet antioxidant species, GSH and “phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase” (PHGPx ou GPx4) were studied. GSH is a major endogenous antioxidant and is a cosubstrate of several enzymes including GPx. GPx4 catalyzes reduction of diverse hydroperoxides including phospholipid hydroperoxides and thus protects membranes against oxidative damage. The aim of our study is to better understand the pro/antioxidant balance in diabetic platelets. The present study shows that in vitro GSH can be glycated and interestingly, the glycated GSH fails to be a cosubstrate for GPx1. Thus, glycation of GSH might contribute to the platelet decreased antioxidant defenses that we have observed in diabetics. In addition, we have characterized platelet GPx4 and studied its subcellular localization by several methods (enzymatic assay and immunodetection). Setting up the synthesis of a specific substrate of GPx4 (hydroperoxy derivatives of phosphatidylcholine), the platelet GPx4 activity assay and western blot analyses allowed us to provide the evidence of GPx4 in human platelets. In addition, our data show a cytosolic, membrane and mitochondrial localization. Although GPx4 activity has been detected using either with cysteine, mercaptoethanol or dithiols as cosubstrate, our results support that GSH is the most effective cosubstrate. Finally, we have examined lipid metabolism and pro/antioxidant status of diabetic platelets. Despite a good glycemic control and in the absence of any cardiovascular complications of diabetic patients, an increased platelet oxidative stress was detected (increase of platelet MDA levels, decrease of vitamin E level and GPx activities). Moreover, our results show an increased platelet aggregation and basal arachidonic acid metabolism. It could be hypothesized that an increased of arachidonic acid release, via an activation of cytosolic phospholipase A2, mightly partly be responsible for platelet hyperactivity is diabetes

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Cossette, Chantal. "Rôle de la glutathion peroxydase dans la réponse cellulaire aux rayons ultraviolets B." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1997. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk3/ftp05/mq25535.pdf.

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Isabelle, St-Pierre. "Étude des glutathion peroxydases dans le placenta de femmes atteintes de prééclampsie." Master's thesis, Université Laval, 2006. http://hdl.handle.net/20.500.11794/18802.

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Billmann, Michel. "Activités biologiques et intérêts thérapeutiques du sélénium." Strasbourg 1, 1986. http://www.theses.fr/1986STR10572.

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De, Oliveira Bouvière Jessica. "Rôle de la sélénoprotéine P et de la glutathion peroxydase 3 dans le phénotype des macrophages et la régénération musculaire." Thesis, Lyon, 2019. http://www.theses.fr/2019LYSE1167/document.

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Abstract:

Les macrophages peuvent transiter entre les états pro et anti-inflammatoires, un processus appelé de polarisation. Les molécules sécrétées par les macrophages sont capables d'induire différents profils métaboliques. Les analyses transcriptomiques de macrophages pro et anti-inflammatoires humains ont identifié nouvelles molécules avec un peptide sécrétoire. Parmi ces candidates, les sélénoprotéines étaient l’une des plus exprimés dans les macrophages anti-inflammatoires. Ainsi, nous évaluons l’impact des sélénoprotéines sur la polarisation des macrophages, secondaires à l’inflammation et leur implication au cours de la régénération musculaire. Une fois établi que les cytokines stimulent les transitions des macrophages, nous avons utilisé IFN-gamma et IL10 pour explorer ces différents profils inflammatoires in vitro. Les macrophages dérivés de la moelle osseuse de WT et de sélénoprotéines KO ont été polarisés avec les deux cytokines pour obtenir un phénotype pro et anti-inflammatoire, respectivement. Nos résultats ont montré que, en absence de sélénoprotéines, les macrophages réduisaient leur capacité à migrer d'un état d'activation à l’autre par rapport au contrôle, soulignant ainsi l'importance de ces molécules pour contrôler les états d’alternance des macrophages. Le modèle de lésion en réponse à la cardiotoxine a été utilisé pour examiner, in vivo, la capacité des macrophages à modifier leur phénotype au cours de la régénération du muscle squelettique. Trois jours après une lésion, la population pro est remplacé par une anti-inflammatoire, comme l'a déjà montré l'analyse par cytométrie en flux. Cependant, les modèles de macrophages pro-inflammatoires sélénoprotéines KO étaient présent trois fois plus nombreux relativement à la population anti-inflammatoire, indiquant que ces macrophages n’ont pas acquis le phénotype anti-inflammatoire. De plus, nous évaluons la fonction des macrophages en absence de sélénoprotéines. Suite à la polarisation avec les cytokines, décrites ci-dessus, les expériences ont démontré que les macrophages anti-inflammatoires WT favorisaient la fusion des myoblastes, alors que les sélénoprotéines KO n'étaient pas en mesure de maintenir cette fusion. En conclusion, les sélénoprotéines modulent la polarisation des macrophages, impliquant leur capacité à acquérir différents phénotypes in vitro et in vivo, ainsi que leurs effets sur la fusion des myoblastes
Macrophages can go through transitions between pro and anti-inflammatory states, one process called polarization skewing. Molecules secreted by macrophages are able to induce different metabolic profiles. Transcriptomic analyses of human pro and anti-inflammatory macrophages identified new molecules with a secretory peptide. Selenoproteins were one of the most expressed in anti-inflammatory macrophages. Thus, we evaluate the respective roles of selenoproteins on macrophage polarization parameters in inflammation and their implication in regenerative processes. Once established that cytokines largely spur macrophage transitions we used IFN-gamma and IL10 to explore these different inflammatory profiles in vitro. Bone marrow derived macrophages from WT and selenoproteins KO models were polarized with both cytokines to obtain a pro and anti-inflammatory phenotype, respectively. Our results showed that without selenoproteins, macrophages had impairment of their capacity to switch from one activation state to another as compared with the control, emphasizing the importance of these molecules to control macrophage transitional states. The cardiotoxin injury model was use to in vivo examine the macrophages capability to switch their phenotype during skeletal muscle regeneration. Three days after an injury pro is replaced by anti-inflammatory population, as has already been shown by flow cytometry analysis. However, macrophages from selenoproteins KO presented three-fold increase of pro-inflammatory macrophages while anti-inflammatory population decreased, indicating that they did not acquire an anti-inflammatory phenotype. In addition, we evaluate the macrophage function in absence of selenoproteins. After polarization with cytokines, experiments demonstrated that WT anti-inflammatory macrophages promoted myoblast fusion, whereas selenoproteins KO were not able to sustain their fusion. In conclusion, selenoproteins modulate macrophage polarization implicating their ability to acquire different phenotypes in vitro and in vivo as well as their effects on myoblast fusion

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Hamdi, Yosr. "Interactions entre les gènes des enzymes antioxydantes et leurs relations avec le cancer du sein." Thesis, Université Laval, 2008. http://www.theses.ulaval.ca/2008/25881/25881.pdf.

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Cossu-Leguille, Carole. "Activités de systèmes antioxydants chez Unio tumidus, bivalve dulçaquicole en conditions physiologiques et de stress chimique." Metz, 1996. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/UPV-M/Theses/1996/Leguille_Cossu.Carole.SMZ9654.pdf.

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Abstract:

Cette recherche a été conduite dans le but de déterminer si les systèmes antioxydants pouvaient constituer des biomarqueurs de toxicité intéressants et de bons indices capables de refléter l'éventuelle contamination d'un site. Le stress oxydant implique la formation d'espèces radicalaires très réactives pouvant être générées au cours de processus physiologiques mais également lors de la métabolisation de certains xénobiotiques. Nous sommes intéressés aux systèmes de défense antioxydants et avons étudié les activités d'enzymes telles les glutathion peroxydases, la gluthation réductase et la catalase, associées aux mesures des taux de glutathion réduit et oxyde. Ces différentes activités antioxydantes ont été étudiées chez Unio tumidus, bivalve dulcaquicole, en conditions physiologiques mais également chez des individus soumis à un stress chimique dans des conditions environnementales et expérimentales. Nous n'avons pas mis en évidence de différences significatives entre les activités antioxydantes mesurées chez les individus mâles et femelles, ni entre les femelles au cours de la période de reproduction. Les saisons (printemps et automne) ne semblent pas influencer les paramètres antioxydants suaf pour (i) l'activité glutathion réductase au niveau hépatique et (ii) l'activité catalase au niveau branchial qui sont toutes deux plus faibles au printemps qu'à l'automne. Les activités antioxydantes ont des niveaux globalement plus faibles dans les branchies que dans les glandes digestives. Lorsque les individus sont soumis à un stress chimique, au laboratoire ou in situ, nous avons remarqué que les activités glutathion réductase, glutathion péroxydase sélénium-dépendante et les taux de glutathion réduit semblaient sensibles et répondre rapidement à la présence de polluants. Ils pourraient donc constituer des indicateurs intéressants de l'état précaire des individus. Ces trois paramètres étaient fortement diminues dans les branchies et dans les glandes digestives lors de l'intoxication des individus au laboratoire avec du cuivre et du thiram, mais également lors des etudes de terrain chez des bivalves transférés sur un site fortement pollué par les hydrocarbures aromatiques polycycliques (haps) et les polychlorobiphényles (pcbs). La déplétion de ces activités antioxydantes semblent traduire des effets de toxicité induits par les contaminants et pourraient être utilisés comme biomarqueurs de toxicité. Mais il est indispensable d'étudier les relations entre les réponses des systèmes antioxydants et les niveaux de contaminations pour pouvoir à plus long terme connaître la signification d'une induction ou d'une inhibition de ces systèmes
The subject of this research concerned the use of biomarkers for the control of the health of exposed populations in the aquatic environment. We have been involved in the study of antioxidant systems as biomarkers for toxicity. Antioxidant systems can neutalize chemical reactive species produced by the endogenous metabolism, but also by xenobiotics. The different antioxidant parametres we have been studying are the activities of glutathione peroxidase, glutathione reductase, catalase and reduced and oxidized glutathione levels. Those different antioxidant activities were measured in frehwater bivalves, Unio tumidus, in physiological conditions and during a stress induced by chemicals. There were no significant differences between the basal levels measured in the males and the femelles. The season (spring and automn) did not seem to have any influence on the antioxidant parameters, except for (i) the glutathione reductase activities in the digestive glands and (ii) the catalase activities in the gills ; both were weaker during the spring than during the automn. The antioxidant activities were generaly smaller in the gills compared to the digestive glands. When the bivalves were exposed to a stress, in the laboratory or in situ during field experimentations, we have noticed that glutathione peroxidase selenium-dependent and glutathione reductase activities as well as reduced glutathione levels were sensitives and may be candidates as biomarkers for toxicity. Those parameters were decreased in the digestives glands as in the gills when bivalves were exposed in the laboratory to chemicals as copper and thiram, but also during field experimentations when the organisms were transfered in areas polluted by polycyclic aromatic hydrocarbons (pahs) and polychlorobiphenyls (pcbs). The decreases of those parametres may traduce some toxic effects due to xenobiotics. But it is necessary to study the relationships between the antioxidant responses and the contamination levels in oder to know the meaning of the induction or the inhibition of those antioxidant activities

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Pons, Eric. "Etude des mécanismes moléculaires du contrôle transcriptionnel de l'expression du gène de la glutathion peroxydase 5 dans l'épididyme murin." Clermont-Ferrand 2, 2003. http://www.theses.fr/2003CLF21439.

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Abstract:

Dans le cadre de l'étude de la spécification hormono-dépendante du contrôle de l'expression des gènes, nous avons poursuivi les travaux sur gpx5, le modèle du laboratoire Epididyme et Maturation du Gamète. Ce gène est exprimé strictement dans la tête de l'épididyme de la souris adulte sous contrôle androgénique. Effectivement, des éléments de réponse fonctionnels pour les facteurs de transcription PEA3 et le récepteur des androgènes avaient déjà été localisés dans son promoteur. Après avoir mis en évidence et exploré la fonctionnalité in vitro de motifs cis de type WGATAR dans le promoteur proximal de gpx5, nous avons démontré l'expression de deux facteurs de transcription dans l'épididyme murin, GATA-4 et 6, d'importants acteurs de la différençiation gonadique. Par des expériences de transfections transitoires ex vivo en système hétérologue, nous avons démontré que GATA-4 transactive le promoteur de gpx5, probablement par les motifs conservés en -824 et/ou -937 relativement au site d'initiation de la transcription. GATA-6 inhibe cette activité ex vivo. Parallèment, l'exploitation de lignées murines transgéniques nous a permis de démontrer que les 1 800 paires de bases proximales du promoteur de gpx5 suffisent à induire l'expression ubiquiste d'un rapporteur GFP. Par comparaison avec l'expression restreinte à la tête de l'épididyme d'une construction de 5 000 paires de bases nous suggérons que la région -1800/-5000 du promoteur de gpx5 contient des éléments cis ciblant la transcription dans l'épididyme murin et un silencer modulant celle-ci

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Boutet, Marianne. "Étude des glutathion peroxydases -1 et -4 dans les circulations sanguines des femmes prééclamptiques et de leurs fœtus." Master's thesis, Université Laval, 2009. http://hdl.handle.net/20.500.11794/20583.

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Abstract:

La prééclampsie est une pathologie obstétricale complexe caractérisée par de l'hypertension et de la protéinurie. Un facteur de risque majeur serait une placentation inadéquate. Plusieurs évidences lient la progression et le maintien de cette maladie à un déséquilibre entre les agents prooxydants et antioxydants. Les enzymes antioxydantes, les glutathion peroxydases (GPx), pourraient jouer un rôle crucial dans cette pathologie. Cinq formes de GPx sont connues, mais aucune n'a été étudiée spécifiquement dans la circulation sanguine des femmes prééclamptiques. Dans cette étude, l'analyse de l'expression des GPx-l et -4 a été faite dans le sang des femmes prééclamptiques et de leur foetus en comparaison avec un groupe contrôle de grossesses. Les niveaux d'ARNm et de protéines des GPx-l et -4 sont plus élevés en prééclampsie et cela, spécifiquement dans les lymphocytes/monocytes sanguins maternels. Ce travail suggère que le groupe atteint de prééclampsie a des défenses antioxydantes accrues dans le but, probablement, de contrer le stress oxydatif caractérisant cette pathologie.

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Gouaze, Valérie. "Rôle de la glutathion peroxydase-1 dans la signalisation cytotoxique : relations stress oxydant-voie du céramide." Toulouse 3, 2001. http://www.theses.fr/2001TOU30124.

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Barrière, Guislaine. "Effets de la transfection des cellules HT29 clone 19A par l'ADNc de glutathion peroxydase phospholipidique humaine sur le métabolisme de l'acide arachidonique." Limoges, 2001. http://www.theses.fr/2001LIMO104D.

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Bilodeau, Jean-François. "Étude des effets de l'hyperoxie sur le cycle cellulaire dans des cellules surexprimant la glutathion peroxydase-1." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1998. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk1/tape10/PQDD_0022/NQ51250.pdf.

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Selles, Benjamin. "Les glutathion peroxydases et protéine disulfure isomérases de peuplier : potentialités du repliement thiorédoxine pour la catalyse des réactions redox." Thesis, Nancy 1, 2011. http://www.theses.fr/2011NAN10028/document.

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Abstract:

La formation de ponts disulfure constitue une modification post-traductionnelle des protéines importante pour de nombreux processus physiologiques, jouant un rôle particulier dans le repliement, la catalyse et la régulation de leur activité. Ce travail concerne l'étude des relations structure-fonction d'oxydoréductases de peuplier appartenant à deux familles de la superfamille des thiorédoxines, les glutathion peroxydases (Gpxs) et les protéine disulfure isomérases (PDIs).L'étude biochimique fine de la Gpx5 a permis de montrer que cette peroxydase réduit le peroxynitrite, propriété inconnue pour ce type de Gpx et de détailler plusieurs étapes du mécanisme catalytique (formation de l'acide sulfénique, changement structural entre formes réduites et oxydées, régénération par les Trxs). La dimérisation de la Gpx5 n'est pas requise pour son activité mais pourrait jouer un rôle dans la reconnaissance de certains substrats. Enfin, l'inactivation de la cystéine peroxydatique par suroxydation suggère que les Gpxs pourraient également avoir une fonction dans la signalisation en réponse aux peroxydes.Concernant les PDIs, suite à une analyse phylogénétique détaillée amenant à proposer une nouvelle classification en 9 classes chez les organismes photosynthétiques, la caractérisation biochimique de plusieurs isoformes présentant des organisations modulaires distinctes et appartenant à trois classes de PDIs a été entreprise. Aucune activité enzymatique typique n'a été identifiée pour la PDI-A, alors que les PDI-L1a et -M possèdent à la fois une activité oxydase et réductase. Les deux modules a de la PDI-M catalysent des réactions spécifiques, de réduction ou d'oxydation
Protein activity and folding can be regulated by post-translational modifications that can impact on their physiological functions. One of these is the formation/reduction of disulfide bridges. The aim of the present work is to study the structure-function relationship of protein members of the thioredoxin superfamily, the protein disulfide isomerases (PDI) and the glutathione peroxidases (Gpx).A precise biochemical study has allowed us to demonstrate that this enzyme is an efficient peroxynitrite scavenger, a new finding for this type of protein and allowed investigating several steps of the Gpx5 catalytic mechanism (i.e. sulfenic acid formation, structural changes between reduce dand oxidized forms, Trx-mediated recycling). We also demonstrate that the dimer form of Gpx5 is not absolutely required for peroxide reduction but probably involved in peroxide specificity. Finally, the capability of the peroxidatic cysteine to be overoxidized brings some new clues in favor of an additional signaling function for Gpx5.Concerning PDIs, a detailed phylogenetic analysis of photosynthetic organisms allowed us to identify 9 classes of PDIs and to propose a new nomenclature that fits all these organisms. The biochemical characterization of isoforms of interest has allowed us to highlight some specificity of PDI-L1a and PDI-M in terms of reduction or oxidation reactions catalyzed. A detailed analysis of PDI-M isoform also indicates that the two Trx modules of this protein show differential oxidation or reduction capacities. We could not detect any activity for PDI-A isoforms, leaving us to wonder whether this enzyme is simply active or possesses highly specific protein partners

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Zhang, Ting. "Expression différentielle de la GPx5, un membre de la famille multigénique des glutathion peroxydases de mammifères." Phd thesis, Université Blaise Pascal - Clermont-Ferrand II, 2009. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00725529.

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Abstract:

En utilisant des approches moléculaires variées, nous avons montré que le gène gpx5 possède au moins trois transcrits dans l'épididyme de souris adulte. A coté d'un messager long codant pour la protéine GPX5 mature, existent en effet deux transcrits tronqués. Les variants de la protéine GPx5, qui correspondent à ces transcrits courts, subissent dans l'épididyme de souris, une maturation post-transcriptionnelle qui repose essentiellement sur des processus de O-glycosylation. Ce travail a aussi permis de préciser que l'expression du gène gpx5 dépasse le territoire épididymaire puisque les transcrits gpx5 peuvent détectés à des niveaux faibles dans d'autres tissus de la sphère génitale chez la souris adulte. C'est le cas par exemple au niveau du testicule ou de la prostate. L'obtention, par des gestations datées, d'embryons de souris à différents stades, a permis de mettre en évidence une expression du gène gpx5 pendant les phases précoces du développement embryonnaire. Cette expression embryonnaire de gpx5 concerne un quatrième variant dont la séquence 3' UTR n'a pu être précisée. Des analyses immunohistochimiques complémentaires sont nécessaires pour confirmer la détection de la protéine GPx5 dans l'embryon précoce de souris et sa localisation dans l'endoderme pariétal.

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Moumen, Radouane. "Sclérose latérale amyotrophique sporadique et stress oxydatif." Caen, 2001. http://www.theses.fr/2001CAEN2067.

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Abstract:

La sclérose latérale amyotrophique est une dégénérescence des motoneurones centraux et périphériques d'étiologie inconnue. La découverte, dans certains cas de SLA héréditaire, de mutations du gène codant pour la Cu-Zn-superoxyde dismutase (SOD1) a attiré l'attention sur le rôle possible du stress oxydatif dans cette affection. Nous avons exploré cette hypothèse en mesurant d'abord chez des sujets atteints se SLA sporadique les activités sérique et érythrocytaire de plusieurs enzymes du système antioxydatif. Nous avons constaté dans le plasma une élévation de l'activité SOD, une diminution de l'activité (à concentration normale) de la glutathion peroxydase (GPX) et une augmentation du taux de malone-dialdéhyde (indice de la lipoperoxydation). Une étude de confirmation a permis de préciser que la variété de SOD impliquée était l'isoenzyme extra-cellulaire (Ec-SOD). Une troisième étude a confirmé la diminution de l'activité GPX et l'augmentation de l'activité Ec-SOD mais non la SOD1, et montré en outre une augmentation des activités xanthine oxydase (XO) et glutathion-S-transférase (GST). Les taux plasmatiques de phosphore et de manganèse, et les taux plasmatiques et érythrocytaires d'aluminium et de cadmium étaient plus élevés chez les patients que chez les témoins, avec des perturbations analogues dans le LCR [etc]

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Conti, Marc. "Effet du DL-alpha-tocophérol sur différents systèmes antioxydants dans des cultures de fibroblastes humains." Paris 11, 1994. http://www.theses.fr/1994PA114834.

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Lahsaini, Ahmed. "Impacts fonctionnels de l'anoxie sur les neurones glutamatergiques de l'hippocampe chez des souris trasgéniques surexprimant la glutathion peroxydase humaine /." Thèse, Trois-Rivières, Université du Québec à Trois-Rivières, 1998. http://www.uqtr.ca/biblio/notice/resume/03-2188431R.html.

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Lahsaini, Ahmed. "Impacts fonctionnels de l'anoxie sur les neurones glutamatergiques de l'hippocampe chez des souris trasgéniques surexprimant la glutathion peroxydase humaine." Thèse, Université du Québec à Trois-Rivières, 1998. http://depot-e.uqtr.ca/3780/1/000649065.pdf.

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Koh, Cha San. "Poplar oxidoreductases involved in the oxidative stress response : a crystallographic snapshot towards the understanding of the catalytic mechanism." Thesis, Nancy 1, 2008. http://www.theses.fr/2008NAN10028/document.

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Abstract:

La structure de trois oxydoréductases (la glutathion peroxydase (Gpx), la thiorédoxine (Trx) et la glutarédoxine (Grx)) de Populus trichocarpa × deltoides (le peuplier) a été caractérisée par diffraction des rayons X. Les Gpxs forment un groupe d’enzymes qui régulent la concentration des espèces réactives de l'oxygène (ROS) dans les cellules, et qui les protègent des effets d’un stress oxydant. Contrairement à leurs homologues d’origine animale, les Gpxs végétales ne dépendent pas du glutathion (GSH) mais des Trx pour leur fonctionnement. Dans cette étude, j'ai résolu les structures des formes réduite et oxydée de la Gpx5 de peuplier et montré que des changements conformationnels drastiques sont nécessaires pour passer d’une forme à l’autre. Les Trxs régulent diverses protéines cibles par la réduction de leur pont disulfure. Mon objectif était de comprendre le mécanisme catalytique d’une nouvelle isoforme, la PtTrxh4, dont la capacité à accepter des électrons de la Grx a été récemment démontrée. Cette PtTrxh4 contient trois cystéines, la première localisée dans une extension en position N-terminale (Cys4) et deux situées dans le site actif classique (WC1GPC2) de la Trx. Les résolutions des structures de l’enzyme sauvage et du mutant C4S m’ont permis de proposer un mécanisme catalytique en quatre étapes en accord avec les études enzymatiques. Les Grxs sont des protéines qui utilisent des électrons du GSH en particulier pour catalyser des réactions d'échange de thiol-disulfure. Ici, je présente la structure de la PtGrxS12 (en complexe avec le GSH), la première structure de la Grx végétale de sous-classe 1 ayant un site actif de motif atypique 28WCSYS32
Three oxidoreductases (glutathione peroxidase, GPX; thioredoxin, Trx and glutaredoxin, Grx) from Populus trichocarpa × deltoides (poplar tree) were characterized using X-ray crystallography approach. GPXs are a group of enzymes that regulate the levels of oxygen species in cells, and protect them against oxidative damage. In this study, I have determined the crystal structures of the reduced and oxidized form of poplar GPX5 (PtGPX5). Comparison of both redox structures indicates that a drastic conformational change is necessary to bring the two distant cysteine residues together to form an intramolecular disulfide bond. Trxs regulate various protein partners through the thiol-disulfide(s) reduction. The aim of this study is thus to precisely describe the catalytic mechanism of a new isoform of Trx, PtTrxh4, since it has been demonstrated recently to be reduced by Grx. PtTrxh4 contains three cysteines; one localized in an N-terminal extension (Cys4) and two in the usual Trx active site (WC1GPC2). Two crystal structures of PtTrxh4 solved in this study, wild-type and C61S mutant, allow us to propose a four-step disulfide cascade catalytic mechanism in accordance with enzymatic studies. Grxs are highly conserved redox-proteins that utilize electrons from GSH particularly to catalyze thiol-disulfide exchange reactions. Here, I present the structure of glutathionylated PtGrxS12, the first structure of plant Grx of subclass 1 with an atypical 28WCSYS32 active site. Protein structures solved here shed lights to our understanding of the redox mechanism in plant and to the enzyme-substrate interactions

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Barbier-Faure, Emmanuelle. "Le sélénium en pathologie inflammatoire." Paris 5, 1997. http://www.theses.fr/1997PA05P054.

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Lemaître, Dominique. "Régulation de la glutathion peroxydase par les acides gras polyinsaturés, en particulier l'acide docosahexaénoïque, au niveau des plaquettes sanguines humaines." Lyon, INSA, 1996. http://www.theses.fr/1996ISAL0094.

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Abstract:

Le rôle des acides gras polyinsaturés sur la glutathion peroxydase (GPx) de plaquettes sanguines humaines a été étudié. La GPx plaquettaire est une enzyme qui réduit les hydroperoxydes lipidiques formés en dérivés alcools correspondants et régule de ce fait, la formation des eicosanoïdes. Parmi les acides gras polyinsaturés testés, les acides gras d'origine marine (acides gras de la série n-3), et en particulier l'acide docosahexaénoïque (DHA), induisent une augmentation d'activité de la GPx. Par "Western blotting", nous avons mis en évidence une augmentation de la quantité immunoréactive de l'enzyme en présence de DHA. Ces augmentations sont supprimées en présence de cycloheximide, inhibiteur de synthèse protéique. Ceci suggère que l'augmentation de l'activité GPx est due à une augmentation de sa quantité. Dans nos conditions expérimentales, le DHA, acide gras fortement polyinsaturé, induit un stress oxydant modéré (augmentation du dialdéhyde malonique et diminution de la vitamine E). La présence d'un antioxydant tel que l'épicatéchine abolit le stress oxydant et les augmentations d'activité et de quantité de la GPx. Ce stress pourrait être à l'origine de l'augmentation d'activité GPx. Au cours de l'incubation des plaquettes avec le DHA, celui-ci est principalement incorporé dans les phospholipides et la quantité d'acide arachidonique (AA) non estérifié est augmentée. Nous avons montré que l'AA induit également une augmentation de l'activité de la GPx, cet acide gras pouvant être impliqué dans l'activation de la GPx. En présence de DHA la ou les formes actives (DHA, AA ou métabolites) qui induisent la synthèse de GPx restent à définir. Cependant, le mécanisme de stimulation de la GPx semble résider dans l'augmentation de la protéine enzymatique, ce qui compte tenu de l'absence de noyau dans les plaquettes évoque un mécanisme post-transcriptionnel
The role of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) on human platelet glutathione peroxidase GPx) was studied. GPx catalyzes the reduction of lipid hydroperoxides into their corresponding alcohol derivatives and regulates the formation of eicosanoids. Among all polyunsaturated fatty acids tested, PUFAs of marine origin (n-3 PUFAs), especially docosahexaenoic acid (DHA), induced a significant increased GPx activity. Such an increase was associated with an enhanced immunoreactive amount of GPx as assessed by the "Western blotting" procedure. The effects of DHA on GPx were abolished by cycloheximide, an inhibitor of translation, suggesting an increased protein synthesis at the origin of the effect observed. The incorporation of DHA in platelets induced a significant oxidative stress as assessed by both increased malondialdehyde level and decreased vitamin E content in the cells. The flavonoid epicatechin suppressed the DHA-induced oxidative stress and also abolished the enhancement of GPx amount and activity. These results suggest that the oxidative stress induced by DHA might induce an increased GPx expression. After the 2-hour incubation of platelets with DHA, this fatty acid was incorporated in membrane phospholipids while the amount of unesterified arachidonic acid (AA) was higher. AA was also able to increase the GPx activity which suggests that this fatty acid could be: involved in the GPx activation. The-active form (DHA, AA or derived metabolites) responsible for the induced GPx synthesis remains to be defined. The mechanism of GPx stimulation could result from the increased protein mass and suggests a post-transcriptional effect, considering the absence of nucleus in platelets

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Herbette, Stéphane. "Etude des glutathions peroxydases (GPX) chez les végétaux supérieurs : rôle dans la réponse au stress." Clermont -Ferrand 2, 2004. http://www.theses.fr/2004CLF22494.

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Abstract:

Le système antioxydant joue un rôle clef dans la réponse de la plante au stress. Parmi ce système antioxydant, les expressions de gènes codant des protéines similaires aux glutathions peroxydases (GPX) sont activées chez Helianthus annuus infecté par Plasmopara halstedii, agent du mildiou du tournesol, et chez Lycopersicon esculentum suite à une stimulation mécanique. Le travail présenté dans ce mémoire consiste à mieux comprendre le rôle de ces protéines notamment dans la réponse au stress. Pour cela plusieurs approches complémentaires ont été envisagées : 1) la caractérisation de l'expression de différents gènes de GPX dans des conditions de stress biotiques et abiotiques ; 2) la caractérisation des activités enzymatiques in vitro de ces protéines ; 3) l'étude de leur distribution tissulaire et leur localisation cellulaire ; 4) l'analyse de la réponse aux stress de plantes transgéniques dont l'expression de gènes codant pour des isoformes de GPX est modifiée

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Perquin, Magali. "Etude épidémiologique et moléculaire des voies métaboliques associées au glutathion dans le cancer du sein." Nancy 1, 2000. http://www.theses.fr/2000NAN11322.

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Abstract:

Thèse de doctorat en génie biologique et médicale. Les glutathion 5-transférases (GST) et peroxydases (GPX) associées à la glutathion réductase (GSSR) catalysent des réactions essentielles dans la prbtection des cellules contre les molécules toxiques comme les agents anticancéreux et les espèces réactives du stress oxydant. Centrées Sur le glutathion (GSH), les voies métaboliques ainsi composées sont activées dans la plupart des tumeurs et associées au phénotype résistant. Deux approches sont développées dans ce travail. 1)Une étude épidémiologique sur 41 patientes a permis de constater l'élévation des teneurs en glutathion et l'augmentation des activités associées dans le tissu mammaire cancéreux, améliorant nettement les conditions redox intracellulaires. Les nombreuses corrélations entre les composantes du système du GSH dans le sein non malade suggèrent une organisation hautement coordonnée, mais ayant totalement disparu dans le sein cancéreux. Les niveaux de GSH et des enzymes associées sont corrélés à divers facteurs pronostiques associés à la prolifération cellulaire, suggérant l'incidence de ces inductions dans la résistance et l'agressivité du cancer mammaire. 2)Une étude moléculaire a été menée sur des lignées d'adénocarcinome mammaire humain MCF-7 sensibles ou résistantes à la doxorubicine et à la vincristine. Les niveaux d'activité et d'expression des GST et GPX sont augmentés proportionnellement au degré de résistance, alors que la GSSR et les taux de glutathion suivent une évolution inverse. Nous avons focalisé notre attention sur le rôle de la GPX que nous avons induite sélectivement par le sélénium, mais sans amélioration visible de la protection antioxydante, et sur la sous-unité GSTT2, induite dans la lignée résistante à la vincristine et dont la région 5' régulatrice du gène a été isolée en vue d'étudier son expression. Le phénotype résistant résulterait donc de la modification concomitante de voies métaboliques parallèles distincte de la réponse adaptative précoce à un cytotoxique donné
Glutathione S-transferases (GST) and glutathione peroxidases, (GPX), together with glutathione reductase (GSSR) catalyse essential reactions for cell defence from toxic agents such as anticancer drugs and/or reactive oxygen species. With glutathione as the central component, this metabolic pathway is activated in most tumours and linked to resistant phenotype. Two approaches have been developed in this work. 1) An epidemiological study, on 41 patients, showed higher glutathione contents and an increase of the above-mentioned glutathione-dependent enzymes in the breast tumours, resulting in the improvement of the intracellular redox status. The numerous correlations between the components of the glutathione system observed only in non-cancerous breast suggest a highly coordinated and organised system that is disrupted in cancerous breast. The increased levels of GSH contents and its related enzymes activities are correlated with various prognostic factors linked to cell proliferation, suggesting the incidence of these inductions in resistance and tumour aggressiveness in breast cancer. 2) A molecular study was performed on human breast adenocarcinoma cell line MCF-7 sensitive or resistant to doxorubicin and/or vincristine. GST as well as GPX activities and expressions were increased according to cellular resistance levels, whereas GSSR and glutathione contents decreased. We focused on the one hand on the role of GPX, that we selectively induced with selenium, which nonetheless did not improve the antioxidative defence and, on the other hand, on GSTT2 subunit overexpressed in vincristine resistant cells and whose 5' regulatory gene region was isolated in order to further study its expression. Resistant phenotype could result from a concomitant variation of parai lei metabolic pathways, distinct from the early adaptive response to a defined cytotoxic agent

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Rejraji, Hanae. "La Glutathion Peroxydase 5 murine : modèle d'étude de l'activité sécrétoire de l'épididyme et des mécanismes de transport et d'association protéiques au spermatozöide." Clermont-Ferrand 2, 2003. http://www.theses.fr/2003CLF21438.

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Abstract:

Chez la souris, GPX5 est fortement synthétisée et sécrétée dans la tête de l'épididyme. Elle est retrouvée par la suite associée à la tête des spermatozoi͏̈des. GPX5 est présente dans la lumière de la tête et de la queue épididymaires à trois localisations : libre et soluble dans le fluide, fixée fortement à la membrane spermatique et associée à des structures lipidiques lui conférant une protection contre des digestions protéolytiques. Nous avons isolé des structures vésiculaires à partir de fluide épididymaire de souris que nous avons nommées épididymosomes. Nous avons localisé la protéine GPX5 dans ces vésicules. Les épididymosomes sont des vésicules de taille et de contenu hétérogènes. Ils présentent une forme sphérique et sont composés d'une membrane bilamellaire. Ils semblent être originaires de l'épithélium épididymaire, principalement de sa région proximale. La membrane spermatique semble se fluidifier. Nous n'observons pas d'échange direct de lipides entre les spermatozoïdes et les épididymosomes mais l'évoltion inversée de la fluidité de leurs membranes est en faveur de leur interaction

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Assem, Mahfoud. "Évolution du système antioxydant et du système apoptotique au cours de l'initiation et du développement d'une insuffisance cardiaque induite par ligature de l'artère coronaire gauche chez le rat." Dijon, 2000. http://www.theses.fr/2000DIJOMU01.

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Abstract:

Au cours de l’ischémie expérimentale se développe un infarctus du ventricule gauche qui mine la situation observée en Clinique humaine. Dans ce processus, les effets délétères des radicaux libres ont été mis en cause. Dans ce travail utilisant le modèle expérimental de création d’une insuffisance cardiaque par ligature de l’artère coronaire gauche pendant une durée allant de 6 à 48 heures, nous avons apprécié au niveau des ventricules gauches (infarcis) et droit (sains), 1) l’évolution du système antioxydant de type enzymatique représenté par les Superoxyde dismutases, les catalases et les glutathions peroxydases en analysant les activités enzymatiques et les expressions de leurs gènes respectifs par RT-PCR, 2) l’évolution du processus apoptotique mis en jeux et des principaux régulateurs de la mort cellulaire programmée (p53, bcl-2, bax et fas) par l’analyse de la fragmentation de l’ADN génomique sur gel et in situ et par l’analyse de l’expression de ces gènes par RT-PCR et par immunohistochimie. Nos résultats confirment que l’ischémie myocardique 1) est associée à un stress oxydatif radicalaire avec une importante modification des systèmes antioxydants cardiaques tant au niveau du ventricule gauche qu’au niveau des territoires sains représentés principalement par le ventricule droit. 2) s’accompagne d’une mort cellulaire programmée de type apoptotique concernant les cellules cardiomyocytaires et à un plus fort degré les cellules infiltrant le ventricule gauche. Cette apoptose se déclenche également, mais dans une moindre mesure, dans le ventricule droit.

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SCHWAAB, TOURLONIAS VERONIQUE. "Clonage et caracterisation du gene de la glutathion peroxydase plasmatique murine analyse de l'expression de gpx3 dans l'epididyme et dans le rein." Clermont-Ferrand 2, 1998. http://www.theses.fr/1998CLF22045.

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Abstract:

L'acquisition et le maintien de la fertilite male sont des processus complexes encore loin d'etre elucides. Depuis son lieu d'elaboration, le testicule, jusqu'a l'ovule, le spermatozoide doit traverser les voies genitales males et femelles. C'est dans les premieres et principalement dans l'epididyme, que le spermatozoide est mature (acquisition de proprietes nouvelles lui permettant de feconder l'ovule). Non fecondant a la sortie du testicule, le spermatozoide devient fecondant apres son passage dans l'epididyme. En dehors des processus de maturation, le spermatozoide va trouver dans l'environnement epididymaire les elements essentiels a sa protection et au maientien de son integrite. Parmi les menaces rencontrees par le spermatozoide, les especes oxygenees reactives (ros), issues du metabolisme de l'oxygene, occupent une place importante dans la physiologie du gamete male. Ces ros, si elles ne sont pas contrecarrees par les systemes de defenses (enzymatiques ou autres), vont provoquer des dommages irreversibles au spermatozoide. Paradoxalement, le spermatozoide genere lui-meme ces ros. Ces dernieres annees, il semble de plus en plus clair qu'en dehors de leurs effets deleteres, les ros auraient un role physiologique positif, notamment dans les voies genitales femelles lors des processus de reconnaissance de la zone pellucide et de la fusion des gametes. Le role des systemes de defense anti-radicalaire est donc de maintenir un equilibre tres subtil des concentrations en ros compatibles avec le maintien de l'integrite du spermatozoide dans les voies genitales males et l'initiation de processus enzymatiques indispensables a la fecondation dans les voies genitales femelles. Le volet enzymatique de ces systemes de defense est represente essentiellement par trois enzymes : les superoxydes dismutases, les catalases et les glutathion peroxydases.

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Tondreau, Maxime. "Étude du dimorphisme sexuel des sélénoprotéines antioxydantes au cours du développement pulmonaire murin." Thesis, Université Laval, 2011. http://www.theses.ulaval.ca/2011/28098/28098.pdf.

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Camoin, Luc. "Analyse protéomique de l'effet d' un stress salin chez le citronnier : caractérisation de la protéine majoritairement exprimée." Paris 7, 2005. http://www.theses.fr/2005PA077011.

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Brault, Charlène. "Modulation du stress oxydant par le virus de l'hépatite C et identification de propriétés pro virales de l'antioxydant GPx4." Thesis, Lyon 1, 2013. http://www.theses.fr/2013LYO10095.

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Abstract:

L’infection par le virus de l’hépatite C (VHC) évolue généralement vers le développement d’une hépatite C chronique, fréquemment associée à des perturbations métaboliques, (insulinorésistance et stéatose), et de la structure hépatique (fibrose et cirrhose), favorisant le développement d’un hépatocarcinome. Le stress oxydant semble étroitement lié à la progression de ces pathologies, notamment l’insulino-résistance. Or, les mécanismes moléculaires par lesquels le VHC module le stress oxydant restent confus, ainsi que l’effet réciproque du stress oxydant sur la réplication virale. Jusqu’à récemment, la modulation de ce stress a été étudiée in vitro dans des modèles non réplicatifs du VHC ou dans des modèles d’expression ectopiques des protéines virales. Peu d’études ont encore tenté de caractériser l’effet d’une infection complète et productive dans les cellules cibles naturelles du VHC, les hépatocytes. Mes travaux de recherche ont donc consisté à étudier la modulation de la balance redox cellulaire dans un modèle d’infection complet de type HCVcc, et dans les cellules hépatocytaires Huh7.5. Cette étude a permis de caractériser le stress oxydant dans ce modèle, mais surtout d’identifier un antioxydant à activité pro-virale, la glutathion peroxydase 4 (GPx4). En effet, nous avons observé une stimulation viro-induite de l’expression et de l’activité de GPx4, seule enzyme capable de détoxifier les lipides membranaires oxydés. L’expression de cette enzyme semble nécessaire à la réplication ainsi qu’à l’infectivité virale. Son importance pour le VHC résiderait dans son activité catalytique permettant de maintenir l’intégrité des lipides cellulaires nécessaire au cycle viral
Chronic infection with Hepatitis C virus (HCV) is frequently associated with metabolic disturbances (insulin-resistance and steatosis) as well as with changes to hepatic structure (fibrosis and cirrhosis) that favor hepatocellular carcinogenesis. Insulin resistance is in particular linked to oxidative stress, which is thought to play a key role in driving disease progression. However, molecular mechanisms by which HCV regulates oxidative stress are still unclear and reciprocally, the effect of oxidative stress on viral life cycle is not well understood. Until recently, induction of oxidative stress by HCV has mainly been investigated in non replicative in vitro models or in cell systems expressing viral proteins alone. Few studies have yet investigated oxidative stress in the context of productive HCV infection. My work consisted of studying the modulation of the cellular redox system using the HCVcc infection model, based on a replicative HCV isolate and the hepatoma cell line Huh7.5. This work provided a broad characterization of how HCV induces and prevents oxidative stress and identified glutathion peroxidase 4 (GPx4) as a pro-viral antioxydant enzyme. Indeed, we observed an HCVinduced upregulation of expression and activity of GPx4. We also demonstrated that GPx4 expression is required for viral replication and infectivity. As GPx4 possesses a particular catalytic activity, which is the detoxification of oxidized membrane lipids, we investigated the impact of the accumulation of oxidized lipids on HCV replication. These studies showed that GPx4 is an important host factor for HCV life cycle by maintaining membrane lipid integrity in an oxidative cellular environment

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Noblanc, Anaïs. "Contrôle des dommages oxydants au noyau spermatique : Apports des modèles murins knock-out pour des glutathion peroxydases." Phd thesis, Université Blaise Pascal - Clermont-Ferrand II, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00910253.

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Abstract:

Les spermatozoïdes acquièrent leur pouvoir fécondant et leur mobilité lors de leur transit le long de l'épididyme. Paradoxalement, cette maturation épididymaire nécessite la présence d'espèces oxygénées réactives (EOR) pour condenser la chromatine spermatique afin de mieux protéger l'ADN de ces mêmes molécules. Nous avons étudié la façon dont l'épididyme parvient à assurer l'équilibre entre un déficit et un excès d'EOR en caractérisant le phénotype épididymaire de souris dont la production de deux enzymes antioxydantes glutathion peroxydases a été invalidée, GPx5 et snGPx4. L'épididyme de ces souris génère une réponse antioxydante élevée et augmente l'activité de pontage disulfure sur les gamètes en modulant l'expression génique d'enzymes antioxydantes (Trx, Prx, GST, SOD3, catalase) et de protéines disulfide isomérases (Pdia). Bien que ce sursaut d'activité soit efficace pour protéger les membranes du tissu et des spermatozoïdes, la chromatine des spermatozoïdes présente un défaut de condensation, laissant l'ADN spermatique vulnérable face aux EOR. Les gamètes présentent alors des dommages oxydants dans le noyau qui s'aggravent avec la diminution de l'activité antioxydante lors du vieillissement. Des approches immunologiques et biochimiques ont montré que les dommages oxydants se produisent préférentiellement sur l'ADN spermatique situé à la périphérie du noyau, qui est enrichi en nucléosomes persistants et qui est associé à la matrice nucléaire. Afin de déterminer s'il est possible de diminuer ces atteintes oxydantes sur les gamètes, nous avons étudié les effets d'une supplémentation orale antioxydante sur des souris sauvages et sur l'un de nos modèles murins mutant.

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Thérond, Patrice. "Rôle de la vitamine E et de la glutathion péroxydase dans la formation des hydropéroxydes des espèces moléculaires de la phosphatidyléthnolamine et de la phosphatidylcholine sous l'action de la lipoxygénase : étude de la membrane érythrocytaire chez des enfants atteints de mucoviscidose." Paris 11, 1993. http://www.theses.fr/1993PA114829.

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Benabdeslam, Hassiba. "Exploration du statut nutritionnel et peroxydatif dans une population de 76 sujets traités pour mucoviscidose." Lyon 1, 1998. http://www.theses.fr/1998LYO1T010.

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Pey, Alexis. "Réponses biochimiques et physiologiques des symbioses marines tempérées face aux changements climatiques." Nice, 2012. http://www.theses.fr/2012NICE4009.

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Abstract:

Le changement climatique global induit des réactions significatives sur les écosystèmes marins pouvant conduire, chez les espèces sessiles, à des épisodes de mortalités massives. En Méditerranée nord-occidentale, de récents événements de mortalités ont sévèrement touchés les communautés de gorgonaires, menaçant ainsi leur survie mais également toue la biodiversité qui est associée. La mise en place de stratégies de conservation nécessite l’acquisition préalable des connaissances, que ce soit en écologique, génétique évolutive, physiologique, biochimique et génomique. Dans ce cadre ambitieux, ces études doctorales ont visé à mieux définir les réponses face à des stress thermiques de deux Cnidaires symbiotiques méditerranéens, la gorgone blanche Eunicella singularis et l’anémone de mer Anemonia viridis. Une première partie des travaux a été menée sur deux populations de gorgone blanche, associée à leurs symbiotes photosynthétiques (zooxanthelles), issues de deux zones géographiques aux profils thermiques contrastés. Cette étude nous a permis d’identifier les limites supérieures de thermorésistance des populations et d’évaluer les liens possibles entre les diversités génétiques des hôtes, et des symbiotes, et leur résistance thermique. Des études complémentaires ont ensuite permis d’identifier chez cette gorgone symbiotique des indices moléculaires précoces de réponse à l’hyperthermie, impliquant des défenses antioxydantes globales et l’ubiquitination des protéines. Enfin, des études menées sur l’anémone de mer ont permis d’approfondir les connaissances développées sur ce modèle concernant les enzymes antioxydantes et en particulier les glutathion peroxydases (GPx). Les mesures des activités GPx dans les différents compartiments de l’holobionte n’ont pas révélé de modifications majeures lors des stress, mais l’apparition d’une bande d’activité induite par l’hyperthermie pourrait représenter un nouvel indicateur potentiel de stress
Global climate change leads significant reactions on marine ecosystems which, when dealing with sessile species, can drive to episodes of mass mortalities. In the north-western Mediterranean Sea, recent events of mortalities severely impacted gorgonian communities, threatening their survival, but also all the associated biodiversity. The implementation of strategies of preservations requires preliminary acquisitions of the knowledge at ecological, evolutionary, physiological, biochemical, genomic and genetics levels. In this ambitious framework, these doctoral studies aimed to better define the answers induced by thermal stress of two Mediterranean symbiotic Cnidarians : the white gorgonian Eunicella singularis and the sea anemone Anemonia viridis. A first part of the works was carried out of two populations of the white gorgonian, associated with their photosynthetic symbionts (zooxanthelles), collected at two geographical zones with contrasted thermal profiles. This study allowed us to identify the superior limits of thermal resistance of the populations and to estimate the possible links between the genetic varieties of the hosts and the symbionts, and their thermal resistance. Complementary studies then allowed identifying, on this symbiotic gorgonian early molecular indicators induced by a hyperthermia, implying the global antioxidant defences capacities and the degree of protein ubiquitination. Finally, our studies led on the sea anemone allowed to deepen our knowledge developed on this model concerning the antioxidant enzymes and in particular the glutathione peroxidases (GPx). The measures of the GPx activities in the different holobiont compartments did not reveal major modifications during the stress, but the appearance of one activity band induced by the hyperthermia could represent a new potential marker of stress

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Picaud, Thierry. "Fonction et régulation des oxydoréductases à disulfure : étude comparative des interactions entre le cycle isoalloxazine et son environnement." Paris 11, 2003. http://www.theses.fr/2003PA112029.

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Abstract:

Ce manuscrit présente une étude sur les facteurs structuraux qui modulent les différences d'activité enzymatique et de comportement vis-à-vis de métaux lourds de certaines oxydoréductases à disulfure et nicotinamide (Glutathion réductase (GR), Thiorédoxine réductase (TrxR), et NADH peroxydase (NPX)). Des approches complémentaires combinant des expériences de biochimie à des spectroscopies d'absorption électronique et diffusion Raman de résonance (DRR) ont été utilisées. La réduction de la GR à deux électrons par le substrat (NADPH) ou par le produit (GSH)de la réaction aboutit à la formation de deux espèces différentes. L'étude par DRR de ces deux états réduits a montré que le noyau isoalloxazine du FAD imposait à l'enzyme un contrôle redox et une régulation de son activité via une modulation de la force d'une liaison hydrogène sur l'atome N5. L'inhibition provoquée par l'association de sels métalliques (Hg2+, Cd2+) au dithiol du site actif de la GR est expliquée par le découplage des deux centres redox de la GR (dithiol et FAD) et par une forte distorsion du noyau isoalloxazine, qui engendre des modifications profondes dans les interactions FAD-protéine. Les effets sont tout aussi importants sur la TrxR puisque l'association de ces sels déplace fortement la seconde réduction du FAD de 1 à 3 équivalents de NADPH. Elle permet également de stabiliser beaucoup plus facilement une forme semiquinonique bleue, qui serait un intermédiaire dans une voie de régulation pour cette classe d'enzymes. Les spectres de DRR des différentes espèces redox de la NPX montrent que le cycle isoalloxazine possède connue dans la GR une densité électronique faible. Elle permet la stabilisation de l'acide cystéine-sulfénique et celle du complexe de transfert de charge formé après la réduction de l'enzyme par le NADH
This manuscript presents a study on the characterization of structural factors modulating enzymatic activity and reactivity with metallic ions from members of the pyridine nucleotide disulfide-oxidoreductase family (Glutathione reductase (GR), Thioredoxin reductase (TrxR) and NADH peroxidase (NPX). Complementary techniques combining biochemical experiments, electronic absorption and resonance Raman (RR) spectroscopies have been used. The two-electron reduction of GR by the substrate (NADPH) or the product (GSH) of the enzyme reaction gives rise to the formation of two different species. RR studies of these two-electron reduced states show that isoalloxazine ring of the FAD imposes a redox control and a regulation, of enzyme activity via a hydrogen bond modulation on the N5 atom of FAD. The enzyme inhibition induced by the binding of metallic ions (Hg2+, Cd2+) on the active site dithiol of GR is explained by both an elimination of the redox coupling between the two active centers of GR (dithiol and FAD) and a strong out-of-plane distortion of isoalloxazine moiety that generates strong alterations in FAD-protein interactions. Association of the heavy metal to TrxR produces a displacement of the second redaction step of FAD from 1 to 3 equivalents of NADPH. Moreover, the formation of a blue semiquinone is stabilized. The stabilization of this radical is proposed to be a regulation way for this enzyme class. RR spectra obtained for different redox states of NPX show that the isoalloxazine ring has a low electronic density, as in the case of GR. A direct consequence is the stabilization, of the cysteine-sulfenic acid as well as a charge transfer complex formed after the enzyme redaction by NADH. For the three enzymes, this study showed an intimate electronic coupling between the two redox centers for the two electron-reduced enzymes

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Simiuc, Dana. "Sensibilité de cellules cancéreuses au stress oxydatif : approche systémique pour étudier le couplage entre le métabolisme et le stress oxydatif." Thesis, Lille 1, 2020. http://www.theses.fr/2020LIL1R041.

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Abstract:

Les cellules vivantes, lorsqu'elles sont constamment exposées au stress, sont capables de réagir de manière complexe en faisant intervenir divers réseaux de régulation intracellulaire. Leur régulation contrôle par exemple le devenir cellulaire en réponse à un stress oxydatif. Lorsque les mécanismes défensifs parviennent à faire face au stress, une rétroaction négative est impliquée et la cellule survit, sinon la cellule meurt. L'un des principaux mécanismes défensifs repose sur l'interaction entre le flux métabolique et le stress oxydatif, exploitant le rôle dualiste du peroxyde d'hydrogène, agissant à la fois comme une molécule de signalisation et de dommages. Nos travaux visent à identifier les molécules clés impliquées dans le devenir cellulaire et à suivre leur dynamique au niveau de la cellule unique, à l'aide de la microscopie de fluorescense. Dans un premier temps, nous concevons un système expérimental inspiré des études de chimiotaxie pour contrôler en permanence la dose appliquée de peroxyde d'hydrogène (H2O2) à la lignée cellulaire du cancer du sein (MCF7). Le choix de la méthode de stimulation joue un rôle important dans notre étude. En effet, afin de délivrer une concentration constante de stimulus aux cellules de mammifères, un milieu de culture cellulaire H2O2 non réactif avec H2O2 est choisi. En utilisant un système fluidique, le taux de production intracellulaire de H2O2 est contrôlé en faisant varier la concentration externe de H2O2. La délivrance et l'élimination du stimulus sont ainsi effectuées assez rapidement (plus rapidement que la consommation cellulaire) pour étudier les réponses cellulaires dynamiques. Lors d'une stimulation constante, une dynamique d'adaptation est observée, ce qui suggère que des rétroactions négatives sont impliquées dans la protection cellulaire contre le stress. La variabilité d'une cellule à l'autre est observée et quantifiée à l'aide de paramètres d'adaptation identifiés. Des résultats préliminaires de la dépendance de la modulation du pH par l'état métabolique cellulaire sont discutés. Les caractéristiques d'adaptation ne sont pas représentées lorsque les sources de carbone sont complètement éliminées du milieu externe. Ce résultat souligne le rôle du glucose dans le mécanisme de défense cellulaire. Un autre résultat important est celui de la dynamique de rétroaction qui dépend de la dose de H2O2 appliquée aux cellules: une stimulation plus forte implique une réponse plus forte. C'est un premier facteur limitant que nous avons identifié lors de la quantification de la réponse de mort cellulaire au stress H2O2. Les résultats de la réponse à la dose de mort cellulaire suggèrent que le destin de la cellule (survie ou mort) dépend également à la fois du contrôle du stimulus et de l'état métabolique cellulaire. Afin d'identifier les voies métaboliques impliquées dans la rétroaction négative induite par le stress oxydatif, des molécules clés régulant la voie Phosphate Pentose (PPP) sont modulées. Nous concluons que l'orchestration du réseau moléculaire est plus complexe et que le PPP n'est pas le seul réseau impliqué dans la défense cellulaire. Nous concluons que l'orchestration du réseau moléculaire est plus complexe et que PPP est le réseau principal mais pas le seul impliqué dans la défense cellulaire. Dans ce manuscrit, une conception expérimentale est présentée afin d'étudier les réponses d'adaptation au stress oxydatif observée en temps réel. Nos expériences confirment la cinétique d'adaptation rapide du NAD(P)H déjà observée dans la littérature. Nous identifions, pour la première fois, un deuxième mécanisme de régulation où le système de glutathion se rétablit en 30 min pendant la stimulation contrôlée par H2O2. Le métabolisme du glucose soutient la régénération de ce système antioxydant et le réseau PPP est ainsi identifié comme le principal retour négatif dans l'adaptation moléculaire observée ici
Living cells, when constantly exposed to stress, are able to respond in a complex manner involving various intracellular regulation networks. Their regulation controls for instance the cellular fate outcome in response to an oxidative stress. When defensive mechanisms manage to cope against stress, a negative feedback is involved and cell survive, otherwise cell dies. One of a key defensive mechanism relies on the interplay between metabolic flux and oxidative stress exploiting the dualistic role of hydrogen peroxide, acting both as signalling and damaging molecule. Our work aims to identify key molecules involved in cellular fate and to monitor their dynamics at the single cell level, using fluorescent microscopy. In a first step, we design an experimental system inspired by chemotaxis studies to constantly control the dose applied to breast cancer cell line (MCF7). The choice of the stimulation method plays an important role in our study. Indeed, in order to deliver a constant concentration of stimulus to mammalian cells, non-consuming H2O2 cell culture medium is chosen. Using a fluidic system, the intracellular H2O2 production rate is controlled by varying the external H2O2 concentration. Stimulus delivery and removal is thus performed fast enough (faster than cellular consumption) to study the dynamical cellular responses. During constant stimulation, adaptation dynamics are notified, suggesting that negative feedbacks are involved in the cellular protection against stress. Cell-to-cell variability is observed and can be quantified using identified adaptation parameters. The fluorescent signal is processed and preliminary results of pH modulation dependence by the cellular metabolic state are discussed. The adaptation features are not depicted when the carbon sources are completely removed from external medium. This result underlines the role of glucose in the cellular defensive mechanism. Another important result is that the feedback dynamics is depending by the H2O2 dose applied to cells: stronger stimulation implies stronger response. It is a first limiting factor we identified while quantifying the cell death response to H2O2 stress. The results of cell death dose response are suggesting that the cell fate (survival or death) is also depending by both the control of the stimulus and the cellular metabolic state. In order to identify the metabolic pathways involved in the negative feedback induced by the oxidative stress, key molecules regulating the Phosphate Pentose Pathway (PPP) are modulated. We conclude that the orchestration of molecular network is more complex and PPP is the main but not the only network involved in the cellular defense. In this manuscript an experimental design is presented in order to study the adaptation responses to oxidative stress in real time. Our experiments are confirming the fast adaptation kinetics of NAD(P)H already observed in literature. We identify, for the first time, a second regulation mechanism where the glutathione system is restoring within 30 min during controlled H2O2 stimulation. The glucose metabolism is supporting the regeneration of this antioxidant system and PPP network is thus identified as the main negative feedback in the molecular adaptation here observed

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Simiuc, Dana. "Sensibilité de cellules cancéreuses au stress oxydatif : approche systémique pour étudier le couplage entre le métabolisme et le stress oxydatif." Electronic Thesis or Diss., Université de Lille (2018-2021), 2020. http://www.theses.fr/2020LILUR041.

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Abstract:

Les cellules vivantes, lorsqu'elles sont constamment exposées au stress, sont capables de réagir de manière complexe en faisant intervenir divers réseaux de régulation intracellulaire. Leur régulation contrôle par exemple le devenir cellulaire en réponse à un stress oxydatif. Lorsque les mécanismes défensifs parviennent à faire face au stress, une rétroaction négative est impliquée et la cellule survit, sinon la cellule meurt. L'un des principaux mécanismes défensifs repose sur l'interaction entre le flux métabolique et le stress oxydatif, exploitant le rôle dualiste du peroxyde d'hydrogène, agissant à la fois comme une molécule de signalisation et de dommages. Nos travaux visent à identifier les molécules clés impliquées dans le devenir cellulaire et à suivre leur dynamique au niveau de la cellule unique, à l'aide de la microscopie de fluorescense. Dans un premier temps, nous concevons un système expérimental inspiré des études de chimiotaxie pour contrôler en permanence la dose appliquée de peroxyde d'hydrogène (H2O2) à la lignée cellulaire du cancer du sein (MCF7). Le choix de la méthode de stimulation joue un rôle important dans notre étude. En effet, afin de délivrer une concentration constante de stimulus aux cellules de mammifères, un milieu de culture cellulaire H2O2 non réactif avec H2O2 est choisi. En utilisant un système fluidique, le taux de production intracellulaire de H2O2 est contrôlé en faisant varier la concentration externe de H2O2. La délivrance et l'élimination du stimulus sont ainsi effectuées assez rapidement (plus rapidement que la consommation cellulaire) pour étudier les réponses cellulaires dynamiques. Lors d'une stimulation constante, une dynamique d'adaptation est observée, ce qui suggère que des rétroactions négatives sont impliquées dans la protection cellulaire contre le stress. La variabilité d'une cellule à l'autre est observée et quantifiée à l'aide de paramètres d'adaptation identifiés. Des résultats préliminaires de la dépendance de la modulation du pH par l'état métabolique cellulaire sont discutés. Les caractéristiques d'adaptation ne sont pas représentées lorsque les sources de carbone sont complètement éliminées du milieu externe. Ce résultat souligne le rôle du glucose dans le mécanisme de défense cellulaire. Un autre résultat important est celui de la dynamique de rétroaction qui dépend de la dose de H2O2 appliquée aux cellules: une stimulation plus forte implique une réponse plus forte. C'est un premier facteur limitant que nous avons identifié lors de la quantification de la réponse de mort cellulaire au stress H2O2. Les résultats de la réponse à la dose de mort cellulaire suggèrent que le destin de la cellule (survie ou mort) dépend également à la fois du contrôle du stimulus et de l'état métabolique cellulaire. Afin d'identifier les voies métaboliques impliquées dans la rétroaction négative induite par le stress oxydatif, des molécules clés régulant la voie Phosphate Pentose (PPP) sont modulées. Nous concluons que l'orchestration du réseau moléculaire est plus complexe et que le PPP n'est pas le seul réseau impliqué dans la défense cellulaire. Nous concluons que l'orchestration du réseau moléculaire est plus complexe et que PPP est le réseau principal mais pas le seul impliqué dans la défense cellulaire. Dans ce manuscrit, une conception expérimentale est présentée afin d'étudier les réponses d'adaptation au stress oxydatif observée en temps réel. Nos expériences confirment la cinétique d'adaptation rapide du NAD(P)H déjà observée dans la littérature. Nous identifions, pour la première fois, un deuxième mécanisme de régulation où le système de glutathion se rétablit en 30 min pendant la stimulation contrôlée par H2O2. Le métabolisme du glucose soutient la régénération de ce système antioxydant et le réseau PPP est ainsi identifié comme le principal retour négatif dans l'adaptation moléculaire observée ici
Living cells, when constantly exposed to stress, are able to respond in a complex manner involving various intracellular regulation networks. Their regulation controls for instance the cellular fate outcome in response to an oxidative stress. When defensive mechanisms manage to cope against stress, a negative feedback is involved and cell survive, otherwise cell dies. One of a key defensive mechanism relies on the interplay between metabolic flux and oxidative stress exploiting the dualistic role of hydrogen peroxide, acting both as signalling and damaging molecule. Our work aims to identify key molecules involved in cellular fate and to monitor their dynamics at the single cell level, using fluorescent microscopy. In a first step, we design an experimental system inspired by chemotaxis studies to constantly control the dose applied to breast cancer cell line (MCF7). The choice of the stimulation method plays an important role in our study. Indeed, in order to deliver a constant concentration of stimulus to mammalian cells, non-consuming H2O2 cell culture medium is chosen. Using a fluidic system, the intracellular H2O2 production rate is controlled by varying the external H2O2 concentration. Stimulus delivery and removal is thus performed fast enough (faster than cellular consumption) to study the dynamical cellular responses. During constant stimulation, adaptation dynamics are notified, suggesting that negative feedbacks are involved in the cellular protection against stress. Cell-to-cell variability is observed and can be quantified using identified adaptation parameters. The fluorescent signal is processed and preliminary results of pH modulation dependence by the cellular metabolic state are discussed. The adaptation features are not depicted when the carbon sources are completely removed from external medium. This result underlines the role of glucose in the cellular defensive mechanism. Another important result is that the feedback dynamics is depending by the H2O2 dose applied to cells: stronger stimulation implies stronger response. It is a first limiting factor we identified while quantifying the cell death response to H2O2 stress. The results of cell death dose response are suggesting that the cell fate (survival or death) is also depending by both the control of the stimulus and the cellular metabolic state. In order to identify the metabolic pathways involved in the negative feedback induced by the oxidative stress, key molecules regulating the Phosphate Pentose Pathway (PPP) are modulated. We conclude that the orchestration of molecular network is more complex and PPP is the main but not the only network involved in the cellular defense. In this manuscript an experimental design is presented in order to study the adaptation responses to oxidative stress in real time. Our experiments are confirming the fast adaptation kinetics of NAD(P)H already observed in literature. We identify, for the first time, a second regulation mechanism where the glutathione system is restoring within 30 min during controlled H2O2 stimulation. The glucose metabolism is supporting the regeneration of this antioxidant system and PPP network is thus identified as the main negative feedback in the molecular adaptation here observed

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Gama, Filipe. "Les glutarédoxines : de la réduction des peroxyrédocines de type II aux systèmes d'assemblage des centres fer-souffre." Thesis, Nancy 1, 2010. http://www.theses.fr/2010NAN10116/document.

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Abstract:

Les variations de l'environnement peuvent influer sur le métabolisme de la plante, notamment à travers la formation des espèces oxygénées réactives (EOR) nocives à forte concentration. Des systèmes enzymatiques vont dégrader ces EOR mais aussi réparer les molécules oxydées par ces réactifs. Ils sont composés notamment de peroxydases (glutathion peroxydases utilisant les thiorédoxines comme réducteur, et les peroxyrédoxines utilisant les glutarédoxines et les thiorédoxines pour leur régénération) dont l'activité s'appuie sur des échanges dithiol-disulfure. Ces systèmes présentent une complexité liée à l'existence de familles multigéniques. Des hybrides Prx-Grx actifs ont été produits de façon recombinante, donnant des indications sur les interactions entre Prx et Grx. Les études enzymatiques réalisées sur les Prx IIF et IIE ont montré qu'elles sont capables de réduire de nombreux substrats autres que le peroxyde d'hydrogène avec des efficacités variables. De plus, leurs localisations tissulaires sont différentes ainsi que leurs réactions en réponse à divers stress oxydant. Outre leur fonction de réducteurs, les glutarédoxines pourraient participer aussi à la signalisation par le mécanisme de glutathionylation, impliqué dans la protection de cystéines critiques par fixation d'une molécule de glutathion. Un rôle nouveau est apparu, elles aident à la formation et l'intégration des centres fer-soufre et participent donc à la maturation des protéines fer-soufre. Les Grxs chloroplastiques S14 et S16 intègrent de façon naturelle un centre fer-soufre et complémentent des mutants de levure déficients en Grx5, une glutarédoxine CGFS nécessaire pour l'assemblage des centres fer-soufre. Enfin, la GrxS14 est capable de transférer efficacement son centre à une molécule acceptrice. Ces résultats nous permettent de mieux comprendre la redondance des ces familles : ces systèmes modulent différents processus physiologiques, dont certains encore inconnus, en réponse au stress oxydant
Environment variations can modify plant metabolism in particular by production of reactive oxygen species (ROS) which are harmfull at high level. Enzymatic systems are to degrade these ROS but also repair oxidized molecules. They are composed by peroxidases (thioredoxins-reduced glutathione peroxidases and thioredoxin or glutaredoxin-reduced peroxiredoxins) using dithiol exchange for their activity. These systems present a complexity according to their multigenic family origin. Recombinant Prx-Grx hybrids have been produced giving clue to interactions between Prx and Grx. Enzymatic studies showed Prx IIF and IIE can reduced a wide range of substrates other than hydrogen peroxide, with variable activity. Furthermore they are not found identically in plant tissue and react to oxidative stress in different ways. Besides reducing properties Grx could participate in cell signalling by glutathionylation, mechanism which protects cystein by fixating a molecule of GSH. A new role appeared recently, they help production of iron-sulfur cluster and play a role in iron-sulfur proteins maturation. Plastidials S14 and S16 Grxs can naturally bind an iron-sulfur cluster and complement Grx5 (CGFS Grx known entering in iron-sulfur proteins maturation) deficient mutants yeast. Finally GrxS14 is able to transfer efficiently his cluster to accepting molecule. These results allow us understanding better these multigenic families regulating several physiological processes, some still unknown, in oxidative stress

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El, Chartouni Léa. "Conditions françaises de l'intéraction entre Mycosphaerella graminicola, agent de la septoriose du blé, et le blé : diversité et structure d'une population du champignon et modalités de la résistance et de la tolérance chez le blé." Littoral, 2009. http://www.theses.fr/2009DUNK0249.

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Abstract:

Nous avons étudié les particularités françaises de l’interaction entre le blé et M. Graminicola. Dans un premier temps, l’étude de la diversité et de la structuration de sous-populations françaises du champignon a été effectuée sur 364 souches provenant de 17 départements, en utilisant 4 marqueurs microsatellites (ST1A4, ST1E3, ST1E7 et ST1D7) et deux séquences partielles des gènes d’actine et de β-tubuline analysées par PCR-SSCP. Les résultats obtenus ont confirmé le potentiel adaptatif du champignon en France, avec un faible flux de gène et une différenciation génétique modérée. La population française du champignon s’est avérée plus structurée que les populations précédemment étudiées et nous suggérons la présence de deux populations fondatrices avec une région d’admixion. Dans un second temps, nous avons étudié aux niveaux cytologique et biochimique les mécanismes de défenses chez 5 cultivars de blé français possédants différents profils de résistance (R) ou de tolérance (T) vis-à-vis de M. Graminicola. Nous avons constaté que la R est liée à la présence de rares papilles, la sensibilité (S) est caractérisée par un développement intercellulaire du champignon alors que la T ne présente aucun impact sur le processus infectieux du champignon. Au niveau biochimique, les activités lipoxygénase (LOX), peroxydase (PO) et glutathion-S-transférase (GST) ne discriminent pas, à elles seules, les profils de R ou de T. Les études de corrélations entre les observations cytologiques et biochimiques et les différents profils permettent de lier la nécrose à l’activité LOX chez les cultivars NT, l’enroulement du tube germinatif autour du stomate à l’activité PO chez les cultivars R et les pénétrations directes à l’activité de la GST chez les cultivars S. En outre nous discriminons les cultivars S par leurs profils de T
We studied the interaction wheat-M. Graminicola in the French conditions. At first, we looked at the diversity and the structure of M. Graminicola French populations. 364 strains collected from 17 counties were investigated using 4 microsatellite markers (ST1A4, ST1E3, ST1E7 et ST1D7) and 2 actin and β-tubuline partial sequences analyzed with PCR-SSCP. The obtained results confirmed the fungus high adaptation potential in France. We revealed a moderate genetic differentiation with a low gene flow. The population was found to be more structured than previously investigated ones, with 3 groups corresponding to 2 major clusters and a zone of admixture. We then looked at this interaction at cytological and biochemical level. We investigated 5 French wheat cultivars presenting different resistance (R) and tolerance (T) profiles towards M. Graminicola. We noticed that R was linked to rare papillae formation, susceptibility (S) was characterized by intercellular mycelial growth, whereas T presented no impact on the fungal infection process. Lipoxygenase (LOX), peroxidase (PO), and glutathione-S-transferase (GST) activities did not discriminate between R and T profiles. Correlations between cytological and biochemical data with the different R and T profiles revealed that necrosis correlates with LOX in NT cultivars, mycelia surrounding of stomata correlates with PO in R cultivars and direct penetrations correlates with GST in S cultivars. Moreover, we discriminated between S cultivars according to their T profile

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Elbe, Yveline. "Radicaux libres et défenses de l'organisme : recherches bibliographiques, incidence de surcharges et carences vitaminiques A et E (chez le rat) : essai personnel." Bordeaux 2, 1995. http://www.theses.fr/1995BOR2P111.

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Rahbari, Oskoui Farid. "Stress oxydatif, vieillissement et maladie de Parkinson." Bordeaux 2, 1997. http://www.theses.fr/1997BOR2M024.

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St-Pierre, Isabelle. "Étude des glutathion peroxydases dans le placenta de femmes atteintes de prééclampsie." Thesis, Université Laval, 2006. http://www.theses.ulaval.ca/2006/23405/23405.pdf.

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Dissertations / Theses on the topic 'Glutathion peroxydase'

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