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Dissertations / Theses on the topic 'Greffe de cellules hématopoïétiques'
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Aspert-Houballah, Aurélie. "Impact psychologique de la greffe de cellules souches hématopoïétiques et traumatisme psychique." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05H134.
Full textAbstract:
L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) représente l’un des traitements de la dernière chance des hémopathies à pronostic létal. Entre l’annonce de la maladie grave et les risques liés à la greffe, le risque de mort devient une menace réelle. Cette recherche tente de cerner les conséquences psychologiques de la greffe de CSH, notamment autour de la question du traumatisme psychique, par une analyse psychodynamique. Pour ce faire, elle utilise une évaluation longitudinale et hétérogène, associant psychométrie, tests projectifs et entretiens cliniques. Elle concerne un échantillon de quatorze jeunes adultes allogreffés entre le mois de mai 2009 et le mois de mai 2010. Neuf d’entre eux ont été évalués une fois avant la greffe puis plus d’un an après la greffe. Les résultats montrent une prédominance de la problématique de perte à traitement mélancolique au sein de cette population. La régression et le masochisme semblent apparaître comme des voies de dégagement efficaces. Le traumatisme psychique favorisé par le contexte de menace vitale, semble plutôt lié à cette problématique de perte qu’à l’annonce de la maladie grave ou la greffe de CSH à proprement parler. Le trauma apparaitrait, au sein d’une hypothèse psychosomatique du patient allogreffé, comme une issue possible à la destruction somatique entrainée par la déliaison pulsionnelleHematopoietic stem cell transplantation (HSCT) has been reserved for hematologic life threatening diseases. Between the announcement of the diagnosis and the transplant’s risks, the threat of death becomes real. This study wants to examine the psychological consequences of this « last chance » treatment focusing on psychological traumatism, by means of a psychodynamic analysis. It uses a longitudinal and mixed evaluation combining psychometric tests, projective tests, and clinical interviews. Fourteen patients have been interviewed between May 2009 and May 2010. Nine have been evaluated twice, once before HSCT, and once at least one year after HSCT. The results show a predominance of a mournful problematic in this population. Regression and masochism seems to be good working-off mechanisms. Trauma due to life threatening context seems more associated with the mournful problematic than the announcement of the diagnosis or the HSCT. Trauma could be seen, in a psychosomatic hypothesis, as a possible working-off mechanism from somatic destruction by the defusion of instincts
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Denis, Laure. "Contribution à l'étude de l'alloréactivité NK en greffe allogénique de cellules souches hématopoïétiques : implication des récepteurs KIR." Nantes, 2005. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=13195a70-7d5d-4220-9d93-f5d935ed7f11.
Full textAbstract:
La greffe allogénique de CSH représente un modèle d'alloréactivité cellulaire au cours de la reconstitution hématopoïétique. Les conséquences immunologiques induites peuvent être délétères (rejet et GvHD) ou bénéfique (GvL). Les molécules HLA impliquées dans ces réactions représentent par ailleurs les ligands spécifiques de récepteurs exprimés à la surface des cellules NK de l'immunité innée. Parmi ces récepteurs, les marqueurs KIR, très polymorphes, sont exprimés de manière clonale et contrôlent la réactivité allogénique NK. Au laboratoire, nous nous sommes intéressés à l'alloréactivité NK et à la contribution des interactions KIR/HLA en greffe allogénique de CSH. Les résultats ont révélé des combinaisons génotypes KIR donneur/receveur " à risques " sur la GvHD. Une régulation transcriptionnelle des gènes KIR en reconstitution post-greffe de CSH apparaît déterminante sur la réaction GvH. Enfin, les mécanismes en jeu dans l'alloréactivité NK semblent impliquer l'ensemble des récepteurs activateurs et inhibiteurs exprimés à la surface des cellules NK, dans un contexte HLA déterminéAllogeneic HSCT is a good way to study cellular alloreactivity during haematopoietic reconstitution. Implied immunologic consequences can be either deleterious (reject or GvHD) or beneficial (GvL). HLA molecules are involved in those reactions and moreover, represent the specific ligands of KIR receptors expressed on NK cell in the innate immune system. Among these receptors, polymorphic KIR markers are clonally distributed to control NK allogeneic reactivity. In the laboratry, we focused on NK alloreactivity and KIR/HLA interactions in allogeneic HSCT. Results showed that some KIR genotype combinations between donor and recipient were at risk for GvH reaction. Moreover, KIR gene transcriptional regulation during post-HSCT period appeared to be relevant on GvH reaction. Last, all activating and inhibiting NK expressed receptors seemed to be involved in alloreactivity mechanisms, through a HLA-modulated repertoire
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Béziat, Vivien. "Etude de la différenciation terminale des cellules NK basée sur différents modèles cliniques : rôle du CD16, NKG2A, NKG2C et des KIRs." Paris 6, 2010. http://www.theses.fr/2010PA066369.
Full textAbstract:
Les cellules NK sont des lymphocytes, appartenant au système immunitaire inné, impliquées dans la lutte contre le cancer et les maladies infectieuses. Au cours de cette thèse nous avons réalisé une étude de la reconstitution de la population NK en sortie de greffe de sang placentaire, où l’on suppose qu’elles jouent un rôle prépondérant dans la lutte contre la leucémie. Les données recueillies chez des patients en sortie de greffe de sang placentaire, couplées à de nombreuses expériences complémentaires réalisées in vitro, nous ont permis d’établir un modèle de différenciation des cellules NK basé sur l’expression des marqueurs CD16, NKG2A et KIRs. L’expression du CD16 est un phénomène précoce marquant l’acquisition d’un plein potentiel cytotoxique. La perte de NKG2A associé à l’acquisition des KIRs marque une étape clef de maturation phénotypique et fonctionnelle puisque les cellules CD56dimNKG2A-KIR+ qui en résultent ont comme caractéristique majeure la capacité de répondre à des cibles HLA-E+. Ce phénomène étant potentiellement important dans le contrôle des infections virales, nous avons étendu nos travaux aux infections VHC et VHB qui sont associées à l’augmentation d’une population CD56dimNKG2A-KIR+NKG2C+. Cette sous-population présente un phénotype de cellules très matures et est fortement polyfonctionnelle, notamment contre des cibles recouvertes d’anticorps ou exprimant HLA-E. Nous montrons par ailleurs que cette sous-population est éduquée car sélectionnée sur la base des HLA-I du soi. En conclusion, ce travail nous permet de proposer un modèle de différenciation terminale des cellules NK sur la base de leur évolution phénotypique et fonctionnelle
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Bittencourt, Marcelo de Carvalho. "Approches cellulaires pour l'induction de tolérance en transplantation de cellules souches hématopoi͏̈étiques." Besançon, 2002. http://www.theses.fr/2002BESA3004.
Full textAbstract:
L'objectif de cette étude est le développement des stratégies de modulation de Valloréactivité en transplantation de cellules souches hématopoïétiques (CSH)„ La signalisation via Fas des cellules alloréactives activées pendant une culture mixte lymphocytaire (MLR) permettrait l'élimination par apoptose des lymphocytes alloréactifs. La modification génétique des cellules pour l'expression de FasL s'est avéré techniquement peu fructueuse. Cependant, la génération d'une lignée d'empaquetage produisant un vecteur retroviral pour FasL a résulté dans une augmentation de l'expression de Fas et d'autres marqueurs d'activation cellulaire et aussi une augmentation de la sensibilité à l'apoptose des cellules d'empaquetage après transfection. La transfection d'un gène traceur ou d'un vecteur vide est capable également d'induire le même phénomène. Ces altérations phénotypiques et fonctionnelles étaient dépendantes de la technkwe de transfert génique. 2. Effet de l'administration de leucoc es a o toti ues sur la rise de reffe: Des cellules apoptotiques administrées conjointement aux CSH ont été capables de favoriser une prise d'un greffon médullaire allogénÀue dans un modèle animal. Cet effet n'est pas spécifique: des splénocytes apoptotques issus du donneur, du receveur, d'une tierce partie et de PBMC humains apoptotiques conjointement avec la moelle osseuse augmentent la proportion de prise de greffe dans ce modèle. D'autres méthodes d'induction d'apoptose permettent également une prise de greffe après injection intraveineuse des cellules mourantes conjointement au greffon médullaire. Aucun signe clinique et histologique de GVH n'a été observé après l'administration de splénocytes apoptotiques. Une manipulation de l'apoptose est donc envisageable pour l'induction de tolérance en thérapie cellulaire et greffe d'organesPas de résumé en anglais
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Faivre, Lionel. "Amplification ex vivo et greffe des cellules souches hématopoïétiques du sang de cordon ombilical : Rôle des glycosaminoglycannes." Sorbonne Paris Cité, 2015. http://www.theses.fr/2015USPCC237.
Full textAbstract:
Le microenvironnement a une place centrale dans le bon déroulement de l'hématopoïèse. Les glycosaminoglycannes (GAG) sont nécessaires au bon fonctionnement de ce tissu en raison de leurs interactions avec les cytokines hématopoïétiques. En parallèle, lors de greffe de cellules souches et progénitrices hématopoïétiques (CSPH) du sang de cordon ombilical, il apparait clairement que des améliorations sont nécessaires. De nombreuses solutions ont été proposées, certaines semblent prometteuses mais nécessitent des progrès. Objectifs : Améliorer les protocoles d'amplification en utilisant des GAG mimétiques. Développer une thérapie matricielle de la moelle osseuse lors de la greffe de CSPH. Les résultats d'amplification avec les GAG mimétiques ont pu mettre en évidence une diminution de la migration des CSPH à de fortes concentrations associée à une meilleure viabilité des CSPH. Après greffe dans des souris NOD-SCID/yc-/-, aucune différence n'a été observée. L'irradiation induirait une diminution de la quantité de GAG présent dans les moelles osseuses mais nos tentatives de thérapie matricielles lors de greffe de CSPH n'ont pas montré de résultats probants. En parallèle, une technique de radiomarquage des CSPH au '8F-FDG, a permis de visualiser et de quantifier leur homing en imagerie TEP/CT durant 2,5h après l'injection malgré une forte toxicité cellulaire du radiomarquage. Dans nos conditions, les GAG mimétiques ne présentent pas d'intérêts majeurs dans les protocoles d'amplification ou de greffe des CSPH en remplacement de la matrice dégradée. La biodistribution précoce des CSPH en imagerie TEP/CT z été possible mais nécessite des ajustements techniquesThe microenvironment has a central place in the smooth running of hematopoiesis. Glycosaminoglycans (GAG) are necessary for the proper functioning of this tissue due to their interactions with hematopoietic cytokines. In parallel, in hematopoietic stem and progenitor cells (HSPC) from umbilical cord blood graft, it is clear that improvements are needed. Many solutions have been proposed, some show promise but require progress. Objective: Improve amplification protocols using GAG mimetics. Developing a matrix therapy of bone marrow during transplantation HSPC. The amplification results with GAG mimetics have been able to demonstrate a reduction in the migration of HSPC with high concentrations associated with better viability of HSPC. After transplantation into SCID-NOD yc , no difference was observed. Irradiation would lead to a decrease of GAG present in bone marrow but the matrix therapy attempts for transplant HSPC showed no conclusive results. In parallel, an 18F-FDG radiolabeling technique of HSPC, helped to visualize and quantify their imaging homing with PET/CT for 2. 5 h after injection despite strong cell toxicity of radiolabeling. In our conditions, the GAG mimetics show no major interests in the amplification protocols or HSPC transplantation. Early biodistribution with HSPC PET/CT imaging was possible but requires technical adjustments
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Makanga, Dhon Bérenger Roméo. "Contribution à l'étude des fonctions anti-tumorales des cellules Natural Killer (NK) : Implication en greffe de cellules souches hématopoïétiques et dans le contexte des Immunothérapies." Thesis, Nantes, 2020. http://www.theses.fr/2020NANT1031.
Full textAbstract:
La greffe de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH) haplo-identiques non-T déplétées avec utilisation de Cyclophosphamide Posttransplant (PTCy) pour la prophylaxie de la maladie du greffon contre l’hôte (GvHD) est indiquée pour le traitement des leucémies aigües en l’absence de donneurs HLA identiques. Ces greffes présentent des incompatibilités HLA de classe I entre le donneur et le receveur propices aux alloréactivités des cellules Natural Killer (NK) qui ont une fonction anti-leucémique importante. Cependant, le rôle des cellules NK dans cette modalité de greffe reste à l’heure actuelle peu documenté. Dans ce travail, nous avons montré que les incompatibilités KIR/HLA entre le donneur et le receveur étaient associées à plus de GvHD aigüe et moins de rechute après greffe-PTCy, participant à l’activation et la différentiation plus précoce des cellules NK. Par la suite, nous avons montré que l’association du PTCy avec l’antithymoglobuline (ATG) réduit l’incidence de GvHD aigüe sans augmenter la rechute après greffe-PTCy. Dans le but d’identifier les sous-populations NK avec une forte potentialité anti-leucémique, nous avons défini 9 souspopulations NK sur la base de marqueurs de différentiation des cellules NK et réalisé des études in vitro du potentiel fonctionnel de chacune de ces populations NK contre des cibles leucémiques. Nos résultats montrent que les souspopulations NK NKG2A+ sont les plus efficaces contre les leucémies aigües lymphoïdes (LAL) et représentent les sous-populations NK les plus fréquentes du répertoire de cellules NK. En revanche, les sous-populations NK CD57+ et/ou KIR+, faiblement représentées dans le répertoire de cellules NK, sont les plus efficaces contre les leucémies aigües myéloïdes (LAM). La reconstitution rapide de certaines sous-populations NK, comme celles exprimant le récepteur NKG2A par exemple, semble être associée à la réduction de rechute après greffe-PTCy. Par ailleurs, nous avons développé une autre étude mettant en évidence que le faible nombre de ligands KIR chez des patients atteints de lymphomes Non- Hodgkiniens (LNH) favorise une bonne réponse des cellules NK dépendante du rituximab. En conclusion, nos données peuvent aider, d’une part, à optimiser la sélection de donneurs de CSH et, d’autre part, à renforcer la prédiction des réponses au rituximab chez les patients atteints de LNH en prenant en compte les paramètres immunogénétiques KIR/HLAT cell-replete haplo-identical Hematopoietic Stem Cell Transplantation (HSCT), using Post-transplant Cyclophosphamide (PTCy) as a treatment for Graft-versus- Host-Disease (GvHD), constitute a potential curative treatment for leukemic patients without identical HLA donor. These graft modalities presentHLA class I incompatibilities between donor and recipient that could sustain Natural Killer (NK) cell alloreactivity with an important anti-leukemic function. However, the role of NK cells in this modality of transplantation remains poorly understood. In this work, we showed that KIR/HLA incompatibilities between donor and recipient were associated with more acute GvHD and less relapse after PTCy-HSCT, participating in the activation and earlier differentiation of NK cells. Subsequently, we showed that the association of PTCy with Anti-thymoglobulin (ATG) could reduce the incidence of acute GvHD without increasing relapse after PTCy-HSCT. In order to identify NK cell subsets with high anti-leukemic potential, we defined 9 NK cell subsets based on NK cell differentiation markers and performed in vitro studies of the functional potential of each of these NK populations against leukemic targets. Our results show that NKG2A+ NK cell subsets are the most effective against acute lymphoid leukemia (ALL) targets and represent the most frequent NK cell subsets in the NK cell repertoire. In contrast, CD57+ and/or KIR+ NK cell subsets, poorly represented in the NK cell repertoire, were the most effective against acute myeloid leukemia (AML) targets. The rapid reconstitution of certain NK cell subsets, such as those expressing NKG2A for example, seems to be associated with the reduction of relapse after PTCy-HSCT. Furthermore, we have investigated the influence of KIR/HLA interactions on Antibody Dependant Cellular Cytotoxicity (ADCC) modulation, showing that the low number of KIR ligands in lymphoma patients favors a good rituximab-dependent NK cell responses. In conclusion, our data may help to optimize the selection of HSC donors and improve the prediction of rituximab responses in lymphoma patients by taking into account immunogenetic KIR/HLA parameters
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Rice, Alison Mary. "Caractérisation fonctionnelle des cellules souches sanguines mobilisées par chimiothérapie." Bordeaux 2, 1993. http://www.theses.fr/1993BOR28240.
Full text
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Dalle, Jean-Hugues. "Greffes non apparentées de sang placentaire : résultats en pédiatrie : propriétés phénotypiques et fonctionnelles des cellules NK d'origine placentaire et interactions in vitro avec les antithymoglobulines de lapin utilisées dans le conditionnement de ces greffes." Lille 2, 2005. http://www.theses.fr/2005LIL2S002.
Full textAbstract:
Nos objectifs étaient de confirmer faisabilité et efficacité des greffes de sang placentaire (SP) et d'étudier les propriétés in vitro des cellules NK placentaires et adultes. METHODES : Etude retrospective comparant les résultats des greffes allogéniques de moelle osseuse et de SP non apparentés. Etude in vitro des phénotypes et fonctions des NK en présence ou non d'antithymoglobulines (ATG). RESULTATS : Le recours au SP est plus rapide et aussi efficace que les CSH médullaires. Les NK de SP et adultes diffèrent peu. Cytotoxicité, prolifération et production d'IFN-γ sont identiques. L'addition d'ATG n'entraine pas d'apoptose, n'altère pas prolifération et cytotoxicité et amplifie la production d'IFN-γ. CONCLUSION : le SP non apparenté est une alternative efficace. Les cellules NK de SP sont matures. Nos résultats sont compatibles avec l'hypothèse selon laquelle une T-déplétion lors des greffes de CSH peut révéler un impact positif de l'alloréactivité NKOur aim were to confirm efficacy of unrelated cord blood transplantation (CB) and to study in vitro properties of both umbilical and adult NK cells. METHODS : Retrospective clinical study comparing results of unrelated CB and bone marrow transplantation. In vitro studies of NK cells phenotype and functions with or without antihimoglobulins (ATG). RESULTS : the use of CB was quicker and also effective than adult stem cell use. NK cells from adult and CB do not differ. Cytotoxicity, proliferation and IFN-γ production were similar. ATG does not modify either proliferation, apoptosis or cytotoxicity but dramatically increase IFN-γ production. CONCLUSION : The use of unrelated CB as stem cell source was efficient. Umbilical NK cells were mature. Our results could explain at least partially the efficiency of T-cell depletion in order to obtain positive impact from NK alloreactivity in allogeneic stem cell transplantation
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Cartron, Guillaume. "Etude quantitative et fonctionnelle du compartiment des progéniteurs primitifs après autogreffe de cellules souches hématopoïétiques chez l'homme." Tours, 2003. http://www.theses.fr/2003TOUR3311.
Full textAbstract:
L'intensification thérapeutique avec support de cellules souches hématopoïétiques (AGCS) constitue une thérapeutique de choix en hématologie. Nous avons explorer le compartiment des progéniteurs primitifs (PP) après AGCS sanguine et montré qu'il existait comme après AGCS médullaires, une altération profonde et durable de la reconstitution à long terme in vivo. In vitro, il existait une réduction constante et durable de la fréquence des LTC-IC et de la population CD34+/CD38_ associée à des anomalies fonctionnelles (réduction des potentiels prolifératifs et de différentiation érythroïde des LTC-IC). De même, il existait un déficit prolifératif des cellules CD34+ en réponse à une association de cytokines d'action précoce et une réduction du niveau d'expression de CD34 et de la capacité de c-Kit à fixer le SCF dans la population CD34+. Après AGCS il existe une altération profonde, constante et durable du compartiment des PP. Il s'agit d'anomalies quantitatives et qualitatives qui pourraient rendre compte d'une altération de la capacité d'auto-renouvellement du compartiment des PP après AGCS et compromettre la reconstitution médullaire à long termeIntensive therapy with autologous stem cells transplantation (ASCT) is now widely used in hematology. We have assessed primitive progenitor cell compartment after ASCT using peripheral stem cells and shown a deep and durable decrease of clonogenic progenitor counts in vivo. In vitro studies have demonstrated a constant decrease of LTC-IC frequencies and CD34+/CD38_ counts associated with functional abnormalities (defect in proliferative and érythroïd differentiation of LTC-IC). We have shown also a proliferative defect of CD34+ cells in response to early-acting cytokines and a decrease of both CD34 antigen expression and ability of c-Kit to bind to SCF into CD34+ cell population. After ASCT, there are both quantitative and qualtitative defects of primitive progenitor cell compartment which could led to a impaired self-renewal of this compartment and jeopardize long-lasting marrow reconstitution
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Awada, Sanaa. "Etude pharmacocinétique du DHPG chez des patients greffés de cellules souches hématopoi͏̈étiques atteints par le CMV." Paris 5, 2004. http://www.theses.fr/2004PA05P631.
Full textAbstract:
La pharmacocinétique (PK) du DHPG est étudiée selon 2 protocoles:le premier expérimental réalisé chez le lapin ayant reçu le DHPG en perfusion de 15 et 30 min selon un plan croisé. Le deuxième clinique, réalisé chez 9 patients greffés de cellules souches hématopoi͏̈étiques infectés par le CMV et traités par 5 mg/kg de DHPG 2fois/jour pendant 14 jours. Une analyse PK compartimentale et non est réalisée à J1,J7 et J14. Le dosage plasmatique est réalisé par CLHP et la méthode est validée dans le plasma humain et de lapin. Les résultats montrent que le DHPG n'entraîne pas d'accumulation. Les concentrations décroissent selon une courbe bi-exponentielle et sont > aux CI50 du CMVH. La CLT est fortement corrélée et excède la CLCr (r=0. 93 ;p<0. 0008). Une baisse de la CLT et une prolongation de la Tưb sont observées à l'équilibre. Les concentrations plasmatiques n'étaient pas corrélées aux effets hématologiques toxiques. Le dosage du DHPG intracellulaire s'avère nécessaire et plus prédictif de la toxicitéThe pharmacokinetic (PK) of DHPG were studied by two protocols :The first experimental is realized in rabbit which received DHPG perfused during 15 and 30 min in cross over plan. The second is clinical, realized in 9 hematopoietic stem cell transplants patients with CMV infection and treated by 5 mg/kg q 12 hours during 14 days. A compartmental and none PK analysis were performed in days 1, 7 and 14. Plasma concentrations were determined by HPLC and the method was validated in human and rabbit plasma. Our results suggested that plasma concentrations were described by bi-exponential decay without accumulation. All concentrations are well above the CI50 needed to inhibit HCMV. Total clearance correlated well with and exceeded creatinine clearance (r=0. 93 ; p<0. 0008). A diminution of CLT and prolongation of Tưb were observed at steady state. The plasma concentrations were not correlated with hematological effects. The dosage of intracellular DHPG are needed to explain this induced-toxicity
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Touil, Soumia. "Amplification des fonctions lymphocytaires T effectrices via la déplétion des lymphocytes T régulateurs : application à l'amélioration des infusions de lymphocytes du donneur pour le traitement des rechutes d'hémopathies malignes traitées par greffe de cellules souches hématopoïétiques allogéniques." Paris 6, 2012. http://www.theses.fr/2012PA066478.
Full textAbstract:
De nombreux résultats obtenus dans des modèles animaux ont montré que la déplétion des lymphocytes T régulateurs (Treg) pouvait rétablir l’immuno-surveillance anti-cancéreuse et déclencher une auto-immunité anti-tumorale. Nous développons cette stratégie d’immunothérapie anti-tumorale dans l’injection de lymphocytes du donneur pour le traitement d’hémopathies malignes. Toutefois, la déplétion des Treg sur la base de l’expression du marqueur CD25 pose la question de l’élimination des lymphocytes T (LyT) activés potentiellement responsables d’un effet anti-tumoral puissant. Des données récentes montrent que la molécule CD127 n’est pas ou très peu exprimée à la surface des Treg et que son expression est associée à une fonction mémoire des LyT. Nous avons donc émis l’hypothèse que la sélection positive CD127 au lieu d’une élimination CD25 pouvait permettre une déplétion efficace des Treg et maintenir une fraction de cellules T plus alloréactives. Dans cette étude, nous avons comparé les deux stratégies d’élimination des Treg. Alors que les deux stratégies de déplétions ont montré des efficacités comparables, nous avons observé un enrichissement en cellules activées mémoires lors de la sélection positive CD127. Ces résultats ont pu être corrélés à une amélioration significative de la réponse alloréactive et antigène spécifique des cellules CD127+ in vitro. In vivo, nous avons observé une plus grande et plus rapide division des cellules CD127+ accompagné d’une exacerbation de la GVH chez des souris receveuses. Nos résultats sont en faveur d’une évaluation de la sélection CD127 en remplacement de la déplétion CD25 dans le cadre d’une application clinique des ILDMany results obtained in animal models have shown that depletion of regulatory T cells (Treg) could restore cancer immuno-surveillance and trigger an anti-tumor immunity. We develop this imunotherapeutic strategy in application of donor lymphocyte infusions (DLI) in the treatment of leukemia relapses. However, in humans, the role of CD25- expressing donor T-cells in the outcome of DLI may be more complex, since human CD25+ T-cells contain not only Treg but also recently activated conventional T-cells potentially prone to mediate a strong anti-tumor effect. Recently, two studies have demonstrated that most Treg have weak or absent surface expression of CD127 and that its expression is commonly associated with memory functions of T cells. Therefore, we postulated that CD127 positive selection instead of CD25 elimination could lead to efficient Treg depletion while maintaining a fraction of T cells with putative strong immune response. Based on this hypothesis, we directly compared these two strategies of Treg depletion. While both strategies of Treg depletion have comparable efficacy, we observed an enrichment of activated/memory T cells upon CD127 positive selection. These results were correlated with a significant improvement of both alloreactive and pathogen-specific immune responses of CD127+ cells. In vivo, we observed accelerated donor T cell division and enhanced graft-versus-host disease after adoptive transfer of Treg depleted cells to mice lacking T cells. Our results support the clinical investigation of CD127 positive selection in place of CD25+ cell elimination for clinical applications of Treg-depleted DLI
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Golfier, François. "Greffe in utero de cellules souches hématopoïétiques foetales humaines : purification de cellules CD34+/++ de foie foetal et de moëlle osseuse foetale." Lyon 1, 2001. http://www.theses.fr/2001LYO1T007.
Full text
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Aitouche, Abdelouahab. "Immunité et tolérance de transplantation induite dans le modèle murin par greffe de cellules souches hématopoiétiques fœtales." Lyon 1, 1993. http://www.theses.fr/1993LYO1T157.
Full text
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Perruche, Sylvain. "Approche cellulaire basée sur l'utilisation de cellules apoptotiques pour favoriser la prise de greffe et l'induction de tolérance en allogreffe de cellules hématopoïétiques." Besançon, 2005. http://www.theses.fr/2005BESA3001.
Full textAbstract:
Nous avons montré que l'injection intraveineuse de cellules apoptotiques conjointement à un greffon de cellules médullaires allogéniques, favorisait la prise de greffe, et ce, malgré un greffon médullaire restreint et un conditionnement pré-greffe réduit. Cette approche est basée sur les propriétés immunomodulatrices attribuées aux cellules apoptotiques. L'effet bénéfique sur la prise de greffe est observé quelque soit l'origine des cellules apoptotiques (receveur, donneur, tierce partie et même xénogénique). L'administration simultanée de cellules apoptotiques au greffon médullaire semble intéressante pour favoriser la prise d'un greffon hématopoïétique après un conditionnement pré-greffe réduit. Préalablement à son utilisation en clinique, nous devons répondre à plusieurs questions. Le retard tout comme l'absence d'élimination des cellules apoptotiques sont associés au développement de pathologies auto-immunes systémiques. Cependant, nous n'avons pas détecté d'augmentation des auto-anticorps (Ac anti-ADN simple brin et Ac anti-cardiolipine), ni observé de lésions de type lupiques (glomérulonéphrites). Les cellules apoptotiques constituent une excellente source d'allo-antigènes et pourraient représenter un adjuvant favorisant les réponses immunes contre les cellules viables (ici la moelle osseuse) co-injectées. Nous n'avons pas détecté, par cytotoxicité dépendante du complément et cytométrie, d'allo-anticorps dirigés contre les cellules apoptotiques ou contre la moelle osseuse. Au contraire, lors du rejet de greffe, les cellules apoptotiques protègent le receveur d'une immunisation dirigée contre le donneur de moelle osseuse. Cet effet est lié à la production de TGF-β. Nous avons ensuite remarqué que les cellules apoptotiques étaient prises en charge par les macrophages et les cellules dendritiques au niveau de la rate. La déplétion des cellules phagocytaires du greffon n'altère pas l'effet favorable des cellules apoptotiques sur la prise de greffe. Par contre, l'élimination des macrophages du receveur, mais pas des cellules dendritiques, inhibe cet effet bénéfique tout comme la neutralisation du TGF-β. Le TGF-β et les macrophages du receveur sont impliqués dans l'expansion ou l'induction de lymphocytes T régulateurs après administration de cellules apoptotiques. Ces lymphocytes T CD4+CD25+ présentant un phénotype régulateur (CD62L+, Foxp3fort), exercent une activité suppressive in vitro, et pourraient participer à la prise de greffe. Ainsi, l'administration de cellules apoptotiques avec une allogreffe de cellules hématopoïétiques favorise la prise de greffe via le TGF-β, les macrophages du receveur et l'induction de lymphocytes T régulateurs. L'induction de lymphocytes T régulateurs par les cellules apoptotiques pourrait constituer un mécanisme additionnel de protection contre les réponses auto-immunes que nous souhaitons exploiter en transplantation.
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Kleinclauss, François. "Induction de tolérance en transplantation : utilisation des propriétés immunomodulatrices des cellules apoptotiques." Besançon, 2006. http://www.theses.fr/2006BESAA002.
Full textAbstract:
L'objectif de cette thèse a été d'analyser, dans des modèles d'allogreffes de cellules hématopoïétiques, les mécanismes impliqués dans la modulation de l'alloréactivité induite par l'administration intraveineuse de cellules apoptotiques. Nous avons montré que les macrophages du receveur et la production de TGF-β étaient impliqués dans l'effet favorable de ces cellules sur la prise du greffon hématopoïétique. L'étude phénotypique a montré une expansion de lymphocytes T CD4+CD25+FoxP3+ du donneur, exerçant leur activité régulatrice par contact cellulaire direct et prévenant la maladie du greffon contre l'hôte. Nous avons étudié l'interaction des immunosuppresseurs avec l'administration de cellules apoptotiques et avons montré que les inhibiteurs de la calcineurine bloquent l'effet sur la prise de greffe et inhibent l'expansion de lymphocytes T régulateurs. La rapamycine, le mycophénolate mofétil et un dérivé de la désoxysperguanine, n'altèrent pas l'action des cellules apoptotiquesApoptotic cells infusion is a new cell based therapy approach to modulate allogeneic immune responses. We reported its interest in hematopoietic cell transplantation in mice. The aim of this work was to analyze the mechanisms by which apoptotic cells modulate alloreactivity and facilitate bone marrow engraftment. We demonstrated that donor splenic macrophages and TGF-β production were involved in the effect of apoptotic cel! infusion. Phenotypic analysis showed an expansion of CD4+CD25+FoxP3+ regulatory T cells, exerting their suppressive effects by cell-contact dependant mechanisms. These regulatory T cells allowed delaying acute graft-versus-host disease. We studied the impact of immunosuppressive drugs on the apoptotic cell infusion. We showed that calcineurin inhibitors abolished the favourable effects of apoptotic cell infusion, whereas rapamycin, mycophenolate mofetil and a deoxysperguanin derivative, did not interfere and rather potentate the effects of apoptotic cell infusion
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Glauzy, Salomé. "Etude des progéniteurs lymphoïdes circulants, chez l'homme, en situation de greffe hématopoïétique allogénique." Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077101.
Full textAbstract:
La greffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) allogénique est une thérapie efficace dans de nombreuses pathologies. Les limites de ce traitement sont la longue période de déficit immunitaire qui suit la greffe et la maladie du greffon contre l'hôte (GVHD). Mon travail de thèse a porté sur l'étude de la reconstitution immunitaire après allogreffe et sur l'étude de l'impact de la GVHD sur cette dernière. Nous montrons une mobilisation importante après greffe en absence de GVHD de progéniteurs lymphocytaires, en particulier T définis par le phénotype CD34+Lin CD1O+CD24-. En cas de GVHD aiguë, cette mobilisation est compromise par d'une part, une atteinte de la moelle osseuse et d'autre part, des modifications intrinsèques des progéniteurs. Les progéniteurs T circulants présentent également des réductions d'expression de gènes associés à leur migration vers le thymus et à leur différenciation T en cas de GVHD aiguë. Ensuite, nous avons montré l'impact des GVHD aiguë et chronique sur la reconstitution B à des temps différents et de façon indépendante. La lymphopénie B, en cas de GVHD, a lieu malgré un mécanisme de prolifération compensatoire en particulier des cellules mémoires CD19+CD27+. L'ensemble de nos travaux suggère qu'après allogreffe de CSH chez l'homme, la réaction allogénique de la GVHD provoque une perturbation des environnements médullaire et thymique entrainant une réduction de la mobilisation et de la migration des progéniteurs lymphoïdes. Cette meilleure caractérisation des atteintes des progéniteurs et de leur environnement par lequel la GVHD compromet la reconstitution immunitaire post greffe peut permettre une meilleure adaptation des traitementsAllogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation (HSCT) is an effective treatment for malignant blood diseases. This treatment is limited by the long period of immunosuppression following HSCT and the graft-versus-host disease (GVHD). During my thesis, I studied immune reconstitution after allo-HSCT and the impact of GVHD on it. In a first work, our data demonstrate a strong recovery of CD34±Lin-CD1O+CD24" T lymphoid progenitors 3 months after transplantation. This rebound was abolished in patients who developed GVHD by an attack of bone marrow by on one hand and on the other hand by intrinsic modifications of the progenitors. We observed an important reduction of gene expression in progenitors associated with their migration towards the thymus and with their T cell differentiation in patients with GVHD. In a second work, we observed that acute and chronic GVHD transiently increased B-cell replication but decreased overall B-cell neogenesis with a clear difference in term of kinetics. Moreover, impact of aGVHD in absence of cGVHD was transient, recovering at month 6 similar values than in patients who did not suffer from GVHD. Conversely, impact of cGVHD at month 12 in multivariate analysis was independent of previous aGVHD effect on B-cell output. All our work suggests that after allogeneic HSCT in humans, allogeneic GVHD reaction causes a disturbance of bone marrow and thymic environments resulting in a reduction of the mobilization and migration of lymphoid progenitors. This improved characterization of the attacks of the progenitors and their environment by which the GVHD compromises the immune reconstitution may allow better adaptation of treatment
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Robert-Richard, Elodie. "Transfert de gène dans les cellules souches hématopoïétiques : application à la thérapie génique des porphyries érythropoïétiques." Bordeaux 2, 2006. http://www.theses.fr/2006BOR21341.
Full textAbstract:
La porphyrie erythropoietique congénitale (PEC) est une maladie monogénique hématologique sévère liée à un déficit en uroporphyrinogène III synthase, conduisant à l'accumulation toxique de porphyrines dans les issus hématopoietiques. La greffe allogénique de cellules souches hématopoietiques (CSH) génétiquement modifiées peut être une alternative à l'allogreffe de moelle osseuse en cas d'absence de donneurs HLA compatibles. Dans notre étude, des vecteurs dérivés de lentivirus ont été développés pour obtenir un tranqfert de gène efficace et stable dans les CSH murines et humaines. Ces vecteurs permettent une expression erythroide-spécifique du gène thérapeutique entraînant une correction enzymatique, métabolique et phénotypique complète du modèle murin PEC. L'évaluation de l'efficacité du transfert de gène dans les CSH humaines in vivo dans des souris immunodéficientes NOD/SCID sera un prérequis avant la mise en place d'un protocole clinique de thérapie géniqueCongenital erythropoietic porphyria (CEP) is an hematological genetic disease characterized by an uroporphyrinogen III synthase deficiency, leading to an accumulation of toxic porphyrin in hemotopoietic tissues. Transplantation of genetically modified hematopoietic stem cells (HSCs) could represent an alternative to bone marrow transplantation when a match-HLA graft is not available. In our work, lentiviral vectors were developed to obtain a stable and efficient gene transfer in murine and human HSCs. These vectors allow an erythroid-specific expression of the therapeutic gene leading to a complete enzymatic, metabolic and phenotypic correction of CEP mice. Evaluation of efficiency of gene transfer in human HSCs in an immunodeficient NOD/SCID model is a necessary step before we consider a gene therapy clinical trial for this disease
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Robert, France. "Les facteurs associés au stress, à la fatigue et la vigueur suite à une greffe de cellules souches hématopoïétiques chez des adultes atteints d'un cancer hématologique." Thesis, Université Laval, 2008. http://www.theses.ulaval.ca/2008/25544/25544.pdf.
Full text
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Michonneau, David. "Compartimentalisation anatomique de l'activité cytotoxique des lymphocytes T du donneur après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques." Sorbonne Paris Cité, 2015. http://www.theses.fr/2015USPCC184.
Full textAbstract:
L'allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) est un traitement des hémopathies malignes qui repose sur l'effet du greffon contre la leucémie (GVL). Les complications sont la rechute de l'hémopathie et la réaction du greffon contre l'hôte (GVHD), qui survient lorsque les LT du donneur reconnaissent les tissus sains du receveur. Après une allogreffe HLA-compatible, la GVL et la GVHD sont induites par la reconnaissance des antigènes mineurs d'histocompatibilité (miHAg) du receveur par les LT du donneur. Alors que les miHAg sont exprimés sur la majorité des tissus, la GVHD survient dans le foie, le tube digestif et la peau. Néanmoins, on ignore si l'activité cytotoxique des LT du donneur, et par conséquence leur capacité à exercer un effet GVL efficace, s'exerce de façon homogène dans l'organisme. Au cours de cette thèse, nous avons montré que l'activité cytotoxique des LT à l'encontre d'une cible donnée, varie de façon majeure entre les organes. Cette hétérogénéité est imposée par l'expression différentielle des ligands de PD-1 au sein de différents microenvironnements tissulaires. Enfin, nous avons montré que cette compartimentalisation de l'activité cytotoxique favorise la formation de niches pour l'échappement tumorale, qui peut être limitée par l'utilisation de traitement anti-PD-1. Nos résultats mettent en évidence un mécanisme à l'origine d'une compartimentalisation spatiale de l'activité cytotoxique des LT du donneur après une allogreffe de CSH, imposée par le microenvironnement tissulaire. Ils suggèrent que l'utilisation des traitements anti-PD-1 pourrait limiter cette compartimentalisation et supprimer la formation de niches pour la rechute tumoralesAllogeneic hematopoietic stem-cell transplantation (HSCT) is an important treatment of human malignancies, where donor T cells are responsible for mediating the anti-tumor effect called Graft versus Leukemia (GVL) effect. However, donor T cells are also responsible for the Graft versus Host disease (GVHD) when they recognize alloantigens on healthy recipient cells. In HLA-matched allo-HSCT, both GVL and GVHD are mediated by minor histocompatibility antigen (miHAg) recognition by donor T cells. Whereas miHAg are broadly expressed in most tissues, GVHD mainly affects liver, gut and skin. However, it is still not fully understood if cytotoxic activity of donor CTLs and their ability to mediate GVL is a homogeneous process, especially in organs not targeted by GVHD. The aim of this project was to understand the mechanisms underlying the anatomical features of GVHD and GVL. To achieve this, we used functional assays and in vivo imaging to measure the cytotoxic activity of donor CTLs in different organs after a miHAg-mismatched allo-HSCT. We demonstrated that in vivo cytotoxic activity of donor CTLs directed against a hematological target is strikingly compartmentalized between organs. This segregation was dictated, at least partially, by differential expression of PD-1 ligands in distinct organ microenvironments, and was characterized by a decreased sensitivity of CTLs to antigen. Finally, we showed that compartmentalization of CTLs killing activity enhanced formation of niches for tumor relapses after allo-HSCT, which can be partially reversed by anti-PD-1 treatment. This represents an important novel insight for treatment of relapse after allo-HSCT
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Nguyen, Quoc Stéphanie. "Etude des récepteurs NK et leurs ligands au cours des hémopathies malignes et après greffe des cellules souches hématopoïetiques chez l'homme." Paris 7, 2009. http://www.theses.fr/2009PA077067.
Full textAbstract:
Un effet majeur anti-leucémique (GvL : Graft versus Leukemia) des cellules NK a été rapporté après greffe de cellules souches hématopoiétiques (CSH) haploidentiques chez des patients porteurs de leucémie aiguë myéloide (LAM) avancée (Ruggeri, Science 2002). Le but de notre étude était d'évaluer la reconstitution des cellules NK ainsi que leur effet GvL après greffe de CSH HLA incompatibles. Après greffe haploidentique CD34+ sélectionnée chez des patients greffés pour LAM avancée, les cellules NK avaient des anomalies phénotypiques (augmentation de la population NK CD56bright, diminution de NKpSO, surexpression de CD94/NKG2A) et fonctionnelles évoquant un état d'immaturité prolongé pouvant altérer leur activité GvL. L'interaction entre le récepteur inhibiteur CD94/NKG2A (sur les cellules NK) et son ligand HLA-E (sur les cibles leucémiques) jouait un rôle majeur dans l'inhibition de la lyse des blastes leucémiques par les cellules NK. La production d'IFN-g par la population immature CD56bright augmentait l'expression de HLA-E sur les cibles et favorisait l'interaction avec CD94/NKG2A. La reconstitution NK était meilleure quand le greffon était moins dépiété en cellules T. Cependant, cet effet bénéfique en terme de GvL était contrebalancé par un effet délétère clinique en terme de GvH (Réaction du Greffon contre l'Hôte) T médiée. En revanche, après greffe de sang placentaire, les cellules NK étaient complètement fonctionnelles, en particulier contre les cibles leucémiques, faisant espérer un meilleur effet GvL. Ces anomalies de reconstitution NK post-greffe posent la question de la mise en place d'une tolérance du donneur envers l'hôte dont les mécanismes seront discutésNatural killer (NK) cell alloreactivity is reported to mediate strong GvL (graft versus leukemia) effect in patients after haploidentical stem-cell transplantation (SCT) for acute myeloid leukemia (AML). The aim of our study was to evaluate NK cell reconstitution and their GvL effect after HLA mismatched SCT for advanced malignant hématologie diseases. NK cells generated after haploidentical SCT exhibited an immature state characterized by specific phenotypic features (the cytotoxic CD3"CD56dim subset was small, expression of KIRs and NKpSO was reduced, while CD94/NKG2A expression was increased), and impaired functioning, having potential impact on GvL effect. This impaired lysis was due to the ligation of CD94/NKG2A (on NK celle) with HLA-E, its ligand (on target cells). IFN-g produced by immature CD56bnght NK cells upregulated cell surface expression of HLA-E on AML blasts and this upregulation protected leukemic cells from NK-mediated cell lysis through the mediation of CD94/NKG2A. NK cell reconstitution was better when the graft was less extensively depleted in T cell, leading to a higher level of NK cytotoxicity against AML cells and a better clinical outcome, despite a strong T cell mediated graft-versus-host disease (GvHD) reaction. Following umbilical cord blood transplantation (UCBT), NK cells display not only some phenotypic features associated with maturity but also unique characteristics that make them fully functional against leukemic blasts. As a result, those NK cell might provide GvL effect after UCBT. Ail those results raise the question of the instauration of NK cell tolerance after allogeneic SCT, which mechanisms will be further discussed
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Vinsonneau, Ulric. "Traitement du myélome par double intensification avec autogreffe de cellules souches périphériques CD34+ : à propos de 19 cas, étude non randomisée." Bordeaux 2, 1999. http://www.theses.fr/1999BOR2M040.
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Montcuquet, Nicolas. "Diminution de l'alloréactivité de cellules T cultivées ex vivo : étude in vitro des mécanismes et effet sur la reconstitution immunitaire in vivo dans un modèle de greffe allogénique de cellules souches hématopoïétiques." Besançon, 2008. http://www.theses.fr/2008BESA3004.
Full textAbstract:
Une modulation de l'alloréactivité des cellules T présentes dans un greffon de cellules souches hématopoïétiques (CSH) peut être obtenue par transfert par voie rétrovirale d'un gène "suicide" dans les lymphocytes T (LT) du donneur. Le transfert de gène nécessite notamment une période de 12 jours de culture ex vivo de cellules mononucléées (CMN) activées par des anticorps (Acs) CD3 solubles en présence d'Interleukine (IL)-2 qui est en partie responsable d'une diminution de l'alloréactivité des cellules cultivées (appelées Co). Les hypothèses d'induction d'anergie, de délétion des cellules alloréactives au cours de l'expansion ex vivo ou de mort induite par activation au cours de la reconnaissance de l'allo-antigène, testées pour expliquer cette diminution d'alloréactivité, ont été invalidées (résultats non publiés). L'augmentation d'expression de marqueurs des cellules T régulatrices au cours de l'expansion ex vivo nous a incités à tester l'hypothèse selon laquelle une expansion préférentielle des cellules T régulatrices pourrait être à l'origine de la diminution d'alloréactivité des Co. Les résultats obtenus n'ont pas permis de mettre en évidence une activité suppressive liés à la présence de cellules T régulatrices (Montcuquet N et al. Immunology 2008) et suggèrent que la diminution d'alloréactivité résulte d'un épuisement fonctionnel des LT. - Dans un second temps nous avons cherché à améliorer les conditions de culture afin de maintenir cette alloréactivité. L'activation des CMN a été réalisée par des Acs soluble CD3 ou par des Acs CD3 et CD28 co-immobilisés sur billes, puis les cellules ont été cultivées en présence d'IL-2, d'IL-7 ou d'IL-15. Nous avons observé que le fait de remplacer la stimulation CD3 par une co-stimulation CD3/CD28 conduit à une alloréactivité similaire in vitro mais augmente la prolifération cellulaire et l'alloréactivité testée in vivo dans un modèle xénogénique de réaction du greffon contre l'hôte (GvH). Par ailleurs, le fait de remplacer l'IL-2 par l'IL-7 mais pas par l'IL-15, ou de diminuer les concentrations d'IL-2 et d'IL-7 utilisées lors de la culture, améliore l'alloréactivité des Co, au détriment cependant d'une expansion cellulaire plus faible (Mercier-Letondal P et al. Cytotherapy 2008). Ces résultats posent les bases de futurs protocoles de production de cellules T génétiquement modifiées conservant leur alloréactivité en vue d'obtenir un effet anti-leucémique maximal en situation d'allogreffe hématopoïétique. - La culture ex vivo de CMN entraîne non seulement une diminution d'alloréactivité, mais aussi des modifications phénotypiques se traduisant par l'acquisition par les Co d'un phénotype de LT mémoires. Or, les LT mémoires ont une alloréactivité plus faible que des LT naïfs en termes d'induction de GvH mais sont capables d'accélérer la reconstitution immunitaire. Nous avons pu montrer que, de façon similaire, des LT cultivés issus de splénocytes murins étaient capables d'améliorer la reconstitution immunitaire au même titre que des LT mémoires frais dans un modèle murin d'allogreffe de CSH par un effet indépendant de l'alloréactivité. - Ces résultats posent les bases d'un possible développement des LT cultivés comme nouvel outil de thérapie cellulaire permettant d'accélérer la reconstitution immunitaire dans des contextes de greffe où celle-ci est lente (greffe de sang de cordon, greffe haplo-identique. . . )We have demonstrated previously that retroviral-mediated transfer of a suicide gene into bone marrow (BM) donor T cells allows an efficient control of graft-versus-host disease (GvHD) after allogeneic BM transplantation. However, 12 days of ex vivo culture is required for the production of sufficient gene-modified cells (GMC). This process requires both CD3 monoclonal antibody (MAb) activation and interleukin-2 (IL-2) expansion resulting in a diminution of expanded cells alloreactivity (termed Co). This phenomena is independent of anergy, clonaI deletion during expansion or apoptosis inducing cell death during mixed lymphocyte reaction. - Here, we demonstrate that this phenomena is the result of T-cell functional exhaustion and not due to anypreferential expansion of regulatory T cells in the culture (Montcuquet N et al. Immunology 2008). - Our approach was then to try to improve the ex vivo culture conditions in order to maintain alloreactivity. Peripheral blood mononuclear cells were activated with soluble CD3 MAb or CD3 and CD28 MAb co-immobilized on beads and expanded for 12 days in the presence of IL-2, IL- 7 or IL-15 before analysis of alloreactivity and phenotype. Replacing the CD3 MAb by CD3/CD28 beads led to similar in vitro alloreactivity but improved also expansion and in vivo alloreactivity of GMC. Replacing the IL-2 with IL- 7, but not IL-15, or decreasing IL-2 or IL- 7 concentrations, improved the in vitro alloreactivity of expanded cells but with lower expansion. Indeed, the alloreactivity of expanded cells was negatively correlated with cell expansion and positively correlated with CD4/CD8 ratio and CD8 expression levels (Mercier-Letondal P, Montcuquet N et al. Cytotherapy 2008). - ln a mouse model of Graft-versus-host Disease (GvHD) induction, memory T-cells are less allogeneic than naïve T cells. Memory T-cells also improve immune reconstitution. We examined the potential of expanded T-cells to improve immune reconstitution in the absence of GvHD. Indeed, expanded splenocytes can have the same effects as fresh memory T-cells. - Taken together these results should be useful in designing GMC therapy protocols where alloreactivity is maintained and co-administrated expanded T-cells offer a new cell therapy product
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Caunday, Olivia. "Evaluation de la qualité des soins : approche par indicateur dans les centres européens de greffe de cellules souches hématopoïétiques accrédités JACIE." Thesis, Université de Lorraine, 2012. http://www.theses.fr/2012LORR0016/document.
Full textAbstract:
La démarche d'accréditation JACIE est une démarche volontaire à laquelle se soumettent des programmes de greffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH), couvrant les trois activités partenaires (clinique, prélèvement de cellules et ingénierie cellulaire) et leurs interfaces. L'objectif est d'assurer un niveau minimal de qualité, de gestion des risques et d'harmonisation dans la mise en oeuvre des programmes de greffe de CSH en onco-hématologie. La construction et l'exploitation des indicateurs qualité doivent démontrer des progrès objectifs en matière de qualité et de sécurité des soins en retour des investissements consentis pour la mise en place de la démarche JACIE. Dans ce travail, nous proposons d'identifier et d'évaluer la pertinence des indicateurs mis en place dans le cadre de la démarche JACIE à mesurer des bénéfices tangibles (matériels et immatériels) tant pour les patients receveurs d'une greffe, que pour l'établissement de santé qui contribue à leur prise en charge. Pour cela, une enquête a été diffusée auprès de 82 centres accrédités JACIE en France puis dans les autres pays d'Europe. Dans le cadre de l'évaluation des soins pour laquelle la mis en place d'indicateurs est une approche de gestion des risques, nous avons cherché à déterminer si d'une part la construction des indicateurs dans les centres avait suivi une méthodologie de référence et d'autre part si tous les processus à risque de la greffe de CSH faisaient l'objet d'une surveillanceJACIE relies on transplant programs voluntarily applying for accreditation: it is important to understand that programs, rather than centres, apply meaning that all three infrastructures and teams (cell collection, cell processing and patient care unit) jointly engage in the accreditation process. The purpose of JACIE standards is to ensure a minimal level of quality, and harmonize laboratory and clinical practices in the field of onco-hematology. Implementation and follow-up of indicators do not necessarily reflect on quality and safety of patient care. The first aim of this study is to identify indicators set in place by the programs and to assess how their measure could be translated in qualitative benefit or quantitative benefit for the patient or the hospital. A survey was launched to 82 programs that were holding a valid accreditation, starting with French centres, and then extending to accredited programs in other European countries. Quality indicator is a tool for assessing healthcare delivery and indicator approach is commonly employed for risk management in healthcare systems. Thus, the second aim of this study is to understand whether a method was used to implement efficiently the indicators and to evaluate if all the HSCT processes are monitored
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Jabbour, Jana. "L'impact d'une intervention nutritionelle chez les receveurs de cellules souches hématopoïétiques : résultats d'un essai contrôlé randomisé." Thesis, Aix-Marseille, 2018. http://www.theses.fr/2018AIXM0265/document.
Full textAbstract:
Contexte :Le conditionnement précédant la greffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) a été associé avec des taux élevés de malnutrition meme à 100 jours après la greffe. Objectif: Cette étude évalua l'impact du conseil nutritionel fournie à la sortie de l'hôpital sur l'état nutritionnel,100 jours après la greffe de CSH (dit T4).Conception: Il s'agissait d'un essai contrôlé randomisé monocentrique. Les patients adultes étaient randomisés à un groupe témoin (GT) recevant des soins habituels et un groupe d'intervention (GI) recevant des conseils nutritionnels mensuels après la sortie de l’hôpital. Le résultat principal était le score de l'évaluation globale subjective générée par le patient (PGSGA) à T4. La malnutrition était évalué aussi par le score de la société américaine de nutrition parentérale et entérale/Académie de nutrition et diététique (AND-ASPEN).Résultats: 52 participants ont été randomisés (août 2016 jusqu'en août 2017) et 46 ont été analysés [65% d'hommes, 63% de greffes autologues, GI (n = 22), GT (n = 24)]. Les deux groupes etaient comparable au moment de randomization.A T4, le pourcentage de patients bien nourris n'était pas significativement différent entre les groupes selon le PGSGA (72% GI vs 43% GT, p = 0,063). Le pourcentage de patients bien nourris selon AND-ASPEN s'est améliorré à T4 dans le GI (50% vs 14%, p = 0,02) et non pas dans le GT par rapport aux valeurs d'admission. A T4, le GI avait un apport de protéines et de calories plus élevé que le GT(p<0.05).Conclusion:Le conseil nutritionnel après la greffe de CSH a amélioré l’apport en protéines et calories ainsi que le score AND-ASPEN mais non pas le score PGSGABackground: Conditioning preceding Hematopoietic Stem Cell Transplantation (HSCT) has been associated with elevated rates of malnutrition until 100 days post HSCT.Objective: This study aimed to assess the impact of nutritional counseling provided at hospital discharge on nutritional status 100 days post HSCT (defined as T4). Design: This was a single center randomized controlled trial among adult HSCT patients. Around discharge from the hospital, recruited patients were randomized to a Control Group (CG) receiving usual care and to an Intervention Group (IG) receiving nutritional counseling on a monthly basis post discharge.The primary outcome was the Patient Generated Subjective Global Assessment (PGSGA) scores at T4. Malnutrition was also assessed though the American Society for Parenteral and Enteral Nutrition/ Academy of Nutrition and Dietetics malnutrition score.Results: 52 participants were randomized (August 2016 until August 2017) and 46 were analyzed [65% males, 63% autologous HSCT, IG (n=22), CG (n=24)]. Groups were comparable at randomization. At T4, the percent of well-nourished patients was not significantly different between groups when assessed via PGSGA (72% IG vs. 43% CG, p=0.063).The percent of wellnourished patients as per AND-ASPEN criteria improved in IG at T4 (14% vs. 50%, p=0.02) and remained the same in CG (48% vs. 50%, p=1) compared to admission values. IG had higher protein and caloric intake (p<0.05). Conclusion:Nutritional counseling post HSCT improved patients’ protein and caloric intake and AND-ASPEN score but did not significantly improve PGSGA score
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Lamarthee, Baptiste. "L'interleukine-22 dans la maladie du greffon contre l'hôte après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques." Thesis, Besançon, 2014. http://www.theses.fr/2014BESA0006.
Full textAbstract:
La maladie du greffon contre l’hôte (GVHD) reste la complication majeure de l’allogreffe de cellules soucheshématopoïétiques (allo-CSH). La GVHD résulte de l’activation de la réponse immunitaire et de la reconnaissanced’alloantigènes par les lymphocytes T (LT) du donneur, entrainant ainsi des lésions tissulaires principalement auniveau de la peau, des intestins et du foie. L’interleukine-22 (IL-22) est une cytokine sécrétée par les LT Th1,Th17 et les cellules de l’immunité innée (ILC). Compte tenu des propriétés de l’IL-22 dans les tissus cibles de laGVHD, nous avons évalué sa contribution dans la physiopathologie de la maladie à l’aide de modèlesexpérimentaux murins. Il apparaît que les souris qui reçoivent des lymphocytes T invalidés pour l’IL-22développent une maladie moins sévère, et leur mortalité est diminuée. L’IL-22 issue du greffon participe donc à lasévérité de la GVHD en favorisant l’inflammation systémique, mais aussi locale au niveau des organes cibles. Deplus, dans les intestins, l’IL-22 agit en synergie avec les interférons de type I pour amplifier l’inflammation de typeTh1 au cours de la GVHD. Chez l’homme, la GVHD est associée à une modification du microbiote intestinal.Nous avons montré que l’absence d’IL-22 semble favoriser la colonisation de lactobacilles au détriment declostridiums, ce qui pourrait également participer à la diminution de la GVHD intestinale. Enfin, nous avonsmontré que l’effet anti-tumoral est préservé malgré l’absence d’IL-22. Ces résultats permettent donc d’envisagerde nouvelles perspectives thérapeutiques dans le traitement de la GVHDGraft-versus-host disease (GVHD) is still the major complication after allogeneic stem cell transplantation. GVHDresults from the activation of the immune response and the recognition by donor T cells of alloantigens leading totissue injury, especially in skin, gut and liver. Interleukin-22 (IL-22) is a cytokine secreted by CD4+ T cells Th1 andTh17 but also by innate lymphoid cells (ILC). Given that IL-22 functions in the GVHD target tissues, weinvestigated its contribution in GVHD physiopathology using mouse experimental models. We showed that IL-22deficiency in donor cells reduced the severity of GVHD by limiting systemic and local inflammation. Moreover, inthe large intestine, IL-22 acts in synergy with type I interferon to increase Th1-like inflammation. In humans,GVHD severity is associated with microbiotal modification in the intestine. We demonstrated that IL-22 deficiencyin donor cells seems to favor lactobacillus colonization instead of clostridium. These changes of microbiotacomposition may reduce the severity of intestinal GVHD. Finally, we showed that the antitumor effect is preservedeven in absence of IL-22 donor cells. Overall, our data support the design of new clinical approaches aiming totarget IL-22 pathways in GVHD patients
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Marmier-Savet, Caroline. "Etude de l'impact de la mobilisation des cellules souches périphériques (CSP) mobilisées par le facteur de croissance des granulocytes (G-CSF) sur les donneurs sains et les receveurs après allogreffe de CSP à conditionnement non myélo-ablatif." Besançon, 2009. http://www.theses.fr/2009BESA0025.
Full textAbstract:
La greffe de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH) représente une alternative thérapeutique majeure dans le traitement de certaines hémopathies. Les CSH peuvent être obtenues par mobilisation des cellules souches périphériques (CSP) sanguines par le facteur de croissance des granuleux : le G-CSF. Les effets immunologiques de la mobilisation par G-CSF à court terme chez le donneur sont connus, en revanche, ses effets à long terme le sont moins. Nous avons réalisé une étude sur 24 donneurs afin d'observer les altérations induites par cette mobilisation. Des échantillons sanguins sont prélevés avant, au moment et 1, 3, 6 et 12 mois après la mobilisation. Le nombre de certaines cellules sanguines et de leur capacité à produire des cytokines ou des immunoglobines sont perturbés par la mobilisation mais retrouve des valeurs normales 3 à 6 mois après. En revanche, la mobilisation par G-CSF est associée avec une aneuploidie des cellules CD34- persistante au delà de 6 mois post-mobilisation. Le risque à long terme de l'administration de G-CSF devra être plus amplement étudié. La transplantation de CSP après conditionnement d'intensité réduite entraine moins de toxicité immédiate. Nous avons étudié plusieurs paramètres post-greffe de 20 receveurs. La prise de greffe était rapide, le nombre de cellules CD8 est revenu à une valeur normale 4 mois après greffe alors que la reconstitution des cellules CD4 est beaucoup plus lente. Plusieurs résultats (nombre de TREC, nombre de cellules mémoires. . . ) montrent que ce type de greffe favorise une reconstitution par expansion périphérique des cellules T qui avec d'autres cellules peuvent limiter la survenue d'infectons post-transplantationThe hematopoietic stem cells represent a major therapeutic alternative in the treatment of some disease. The hematopoietic stem cell can be obtained by mobilization of the peripheral stem cells blood (CSP) by the growth factor of the granulocyte : the G-CSF. The short-term immunological effects of the mobilization by G-CSF at the donor are known, on the other hand, the long-term effects are it less. We realized a study on 24 donors to observe the alteration inferred by this mobilization. Blood samples are taken, before, at the moment and 1, 3, 6 and 12 months after the mobilization. The number of certain blood cells and their capacity to produce cytokines or immunoglobulins are perturbed by the mobilization but find normal values 3 in 6 months later. On the other hand, the mobilization by G-CSF is associated with a persistent aneuploidy of CD34- cells beyond 6 months post-mobilization. The long-term risk of the administration of G-CSF must be more amply studied. The peripheral stem cells transplantation after reduced-intensy conditioning regimen lead to less immediate toxicity. We studied several parameters post-graft of 20 recipients. The engrafment was fast, the counts of CD8 cells came back to a normal value 4 months after graft while the reconstruction of CD4 cells is much slower. Several results (number of TREC, number of memory's cells. . . ) show that this type of graft facilitates a reconstruction by peripheral expansion of T cells which the other cells can limit the incidence of severe infection post-graft
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Le, Maux Amélie. "Immunomodulation par les molécules HLA-G solubles dans les syndromes lymphoprolifératifs et la GVHD aïgue : interaction avec des partenaires cellulaires de la réponse immunitaire." Rennes 1, 2008. http://www.theses.fr/2008REN1S016.
Full textAbstract:
Lors de ce travail, l’expression et le potentiel immunomodulateur des molécules HLA-G solubles ont pu être mis en évidence dans deux types de contexte pathologique. Tout d’abord, des patients atteints de syndromes lymphoprolifératifs démontrent un taux plasmatique significativement élevé en molécules HLA-G solubles fonctionnelles, comparé à des sujets sains. Et, lors de la greffe de cellules souches hématopoïétiques du sang périphérique, un faible taux plasmatique en molécules HLA-G solubles est corrélé avec l’occurrence de la maladie du greffon contre l’hôte. Par la suite ont été constatés (i) un lien potentiel entre les molécules HLA-G solubles et les lymphocytes T régulateurs naturels, et (ii) une inhibition par HLA-G de la fonction activatrice des cellules dendritiques sur les NK. Ceci renforce l’implication de ces molécules (a) dans l’échappement des greffes à l’immunosurveillance et (b) dans la mise en place d’un environnement tolérogène bénéfique en transplantationSoluble HLA-G proteins are immunomodulatory molecules expressed in many pathological contexts. Here, we first found that functional soluble HLA-G plasmatic level was significantly increased for patients suffering of lymphoproliferative disorders, compared to healthy subjects. Then, a significant correlation was observed between low soluble HLA-G plasmatic level and Graft-versus-Host Disease occurrence for peripheral haematopoietic stem cells transplanted patients. Furthemore, soluble HLA-G molecules (i) seem to have a link with natural regulatory T lymphocytes ex vivo for transplanted patients and in vitro in mixed leukocyte reaction. And (ii) they display the capacity to inhibit activation of NK cells mediated by dendritic cells. So, these results strengthen the role of soluble HLA-G molecules in peripheral tolerance, their expression being (a) detrimental for cancer immunosurveillance and (b) advantageous against complications in allogeneic transplantation. Soluble HLA-G proteins are immunomodulatory molecules expressed in many pathological contexts. Here, we first found that functional soluble HLA-G plasmatic level was significantly increased for patients suffering of lymphoproliferative disorders, compared to healthy subjects. Then, a significant correlation was observed between low soluble HLA-G plasmatic level and Graft-versus-Host Disease occurrence for peripheral haematopoietic stem cells transplanted patients. Furthemore, soluble HLA-G molecules (i) seem to have a link with natural regulatory T lymphocytes ex vivo for transplanted patients and in vitro in mixed leukocyte reaction. And (ii) they display the capacity to inhibit activation of NK cells mediated by dendritic cells. So, these results strengthen the role of soluble HLA-G molecules in peripheral tolerance, their expression being (a) detrimental for cancer immunosurveillance and (b) advantageous against complications in allogeneic transplantation
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Bernard, Isabelle. "Caractérisation des propriétés alloréactives des sous populations lymphocytaires TCD4 et T CD8 CD45RChigh/CD45RClow : rôle dans l'allogreffe de moëlle osseuse." Toulouse 3, 2006. http://www.theses.fr/2006TOU30070.
Full textAbstract:
L'allogreffe hématopoïétique permet de traiter des maladies cancéreuses de nature hématologique. Mais les lymphocytes T allogéniques présents dans le greffon hématopoïétique sont responsables d'une complication majeure : la réaction du greffon contre l'hôte (GVH). Le développement de nouvelles approches thérapeutiques pour moduler l'alloréactivité des lymphocytes T du greffon est donc nécessaire pour prévenir la GVH. Ce travail montre que la molécule CD45RC exprimée par les lymphocytes T chez le rat et chez l'homme, permet de distinguer des sous populations T ayant des propriétés alloréactives différentes. Les cellules T CD45RChigh contiennent des cellules alloréactives responsables de l'apparition de la GVH, tandis que les cellules T CD45RClow contiennent des cellules régulatrices capables de la contrôler. Ce travail suggère que la molécule CD45RC pourrait être un marqueur prédictif de l'évolution de la GVH chez l'homme, améliorant l'efficacité des allogreffes hématopoïétiquesHaematopoietic allograft is the most powerful treatment against haematological malignancies. But allogeneic mature T lymphocytes present in the haematopoietic transplant are responsible for a major complication: the graft against the host (GVHD). The development of new strategies to modulate the alloreactivity of T cells in the transplant is thus necessary to prevent GVHD. This work shows that CD45RC expressed by T lymphocytes in the rat and in the humans, allows to distinguish distinct T cell subsets with different alloreactive functions. The CD45RChigh subset contains alloreactive lymphocytes responsible for GVHD, while the CD45RClow subset contains regulatory T lymphocytes capable of controlling this disease. This work suggests that D45RC could be a predictive marker of the GVHD evolution, improving the efficiency of this treatment
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Philippe, Michaël. "Modélisation Pharmacocinétique et Pharmacodynamique du Busulfan en Onco-Hématologie Pédiatrique." Thesis, Lyon, 2017. http://www.theses.fr/2017LYSE1331/document.
Full textAbstract:
La greffe de cellules souches hématopoïétiques est parfois le seul traitement curatif dans certaines pathologies pédiatriques telles que les leucémies, les sarcomes, les dédicits immunitaires ou les thalassémies. Le busulfan, un alkylant myéloablatif, fait partie de nombreux protocoles de conditionnement de greffe. C'est un médicament à marge thérapeutique étroite doté d'une forte variabilité pharmacocinétique, qui fait souvent l'objet d'un suivi thérapeutique pharmacologique afin d'optimiser la prise de greffe et d'éviter les risques de maladie veino-occlusive, principale toxicité du busulfan et responsable d'une morbidité et d'une mortalité importante. L'aire sous la courbe, dont il existe un intervalle cible recommandé, est aujourd'hui le paramètre pharmacocinétique utlisé pour effectuer le suivi thérapeutique du busulfan et l'adaptation posologique pendant le conditionnement.L'objectif de notre travail est d'étudier les relations entre la pharmacocinétique du busulfan et ses effets thérapeutiques et toxiques, en particulier la maladie veino-occlusive, et de développer des méthodes d'adaptation posologique pour optimiser l'usage de ce médicament chez l'enfant. Nos travaux ont conduit à plusieurs innovations méthodologiques, avec le développement et la validation d'un modèle pharmacocinétique de population non-paramétrique pour l'adaptation Bayésienne des posologies de busulfan en pédiatrie, et le développement d'une nouvelle méthode de détermination de la dose initiale maximisant la probabilité d'atteindre un intervalle cible d'exposition. Sur le plan clinique, nous avons pu mettre en évidence l'absence de bénéfice clinique de l'utilisation d'un intervalle cible d'exposition plus restreint que celui recommandé. Par ailleurs, nous avons identifié que la survenue de la MVO était liée à la concentration maximale de busulfan, et non à l'aire sous la courbe des concentrations en fonction du temps.L'ensemble de ces résultats est une contribution à l'amélioration de l'utilisation et du suivi thérapeutique pharmacologique du busulfan en onco-hématologie pédiatriqueHematopoietic stem cell transplantation remains the only curative treatment in many pediatric diseases as leukemia, sarcoma, immunodeficiencies or thalassemia. Busulfan, a myeloablative alkylant, is the cornerstone of pre-transplant conditioning. It has a narrow therapeutic index and a large pharmacokinetic variability. For these reasons, therapeutic drug monitoring is required in order to optimize engraftment and avoid veno-occlusive disease, the main toxicity of busulfan which is responsible of significant morbidity and mortality. Today, the area under the curve, of which there is a target range recommended, is the pharmacokinetic parameter used to carry out therapeutic drug monitoring and dose adjustment during conditioning. Our objective is to investigate relationships between busulfan PK and clinical outcomes, especially veno-occlusive disease, and to develop methods of dose adjustment in order to optimize the use of this medication in children.Our work leaded to several methodological innovations, with the development and the validation of a non-parametric pharmacokinetic model for Bayesian dose adjustment of busulfan in pediatrics, and the development of a new method for the first dose determination maximizing the probability of achieving an exposure target range. From a clinical point a view, we highlighted the lack of clinical benefit in using an exposure target range narrower than those recommended. Furthermore, we identified that veno-occlusive incidence was correlated to the maximal concentration of busulfan, contrary to the area under the concentration-time curve.All of these results contribute to improving use and therapeutic monitoring of busulfan in pediatric onco-hematology
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Maniangou, Zonzeka Bercelin. "Etude du polymorphisme allélique KIR pour optimiser la sélection des donneurs de greffes des cellules souches hématopoiétiques." Thesis, Nantes, 2018. http://www.theses.fr/2018NANT1022/document.
Full textAbstract:
Les cellules Natural Killer (NK) jouent un rôle important en greffes de CSH par leur rôle antileucémique. Les fonctions cytotoxiques des cellules NK sont gouvernées principalement par les récepteurs KIR spécifiques des molécules HLA de classe I. Ces récepteurs inhibiteurs ou activateurs sont codés par 15 gènes KIR connus pour être polymorphes au niveau allélique. Ce polymorphisme allélique peut affecter le phénotype et la fonction des cellules NK mais reste difficile à évaluer. Dans ce projet, nous avons développé une approche de séquençage-nouvelle-génération (NGS) pour déterminer les allèles de tous les gènes KIR de donneurs de sang. Les résultats ont montré la fiabilité de notre approche NGS.KIR pour le typage allélique KIR. Le polymorphisme des allèles KIR2DL1/2/3 a été mis en lien avec le phénotype et la fonction des cellules NK. Nos résultats montrent une diversité limitée d’allèles KIR2DL1, KIR2DL2/L3 qui impactent sur le phénotype et la fonction des souspopulations NK KIR2DL+. Le polymorphisme des allèles KIR2DL1/2/3 module également les interactions des récepteurs KIR correspondants avec les molécules HLA-Cw. Ce projet de Thèse contribue à une meilleure connaissance de l’impact du polymorphisme allélique KIR sur la structuration et fonction du répertoire des cellules NK KIR+. Ces données permettront d’affiner la sélection des donneurs de greffes de CSH haplo-identiques non T déplétées pour mieux évaluer le rôle de l’alloréactivité des cellules NK KIR+ sur l’effet antileucémique. La connaissance des allèles KIR peut aussi constituer un outil diagnostic dans certaines infections virales, associations KIR-maladies ou pathologies liées à la grossesseNatural Killer (NK) cells are large granular lymphocytes able to kill leukemic cells after Hematopoietic Stem Cell Transplantation (HSCT). Their cytotoxic functions are governed by many receptors, especially by the KIR receptors that recognize HLA class I molecules. These inhibitory (KIR2DL, KIR3DL) and activating (KIR2DS, KIR3DS) receptors are encoded by a family of 15 genes known to be polymorphic at allelic level. This allelic polymorphism may impact on NK cell phenotype and function, but remains difficult to evaluate by lack of appropriate methods. In this thesis project, we developed a Next- Generation-Sequencing approach to investigate the KIR allele polymorphism in volunteer blood donors. The results showed the reliability of our NGS approach for KIR allele typing. Then, we correlated the KIR2DL1/2/3 allele polymorphism with the phenotype and function of KIR+ NK cells. We found a limited diversity of KIR2DL1 and KIR2DL2/3 alleles that impact the phenotype and function of KIR2DL+ NK cell subsets. This KIR2DL1/2/3 allele polymorphism modulates also the corresponding KIR-HLA-Cw interactions. At the fundamental level, this thesis project improves our knowledge on the impact of KIR allele polymorphism on the structuration and the function of KIR+ NK cell repertoire. Overall these data can help to refine the HSCT donor selection in the context of T replete haploidentical HSCT to unravel the role of alloreactive KIR+ NK cells mediating an antileukemic effect. More broadly, the knowledge of KIR alleles may also constitute a diagnostic tool in some viral infections, KIR associated diseases and pregnancy disorders
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Fève, Frédérique. "Economie et statistique du don de cellules souches hématopoïétiques : contributions à la gestion des registres de donneurs volontaires." Toulouse 3, 2006. http://www.theses.fr/2006TOU30148.
Full text
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Boukouaci, Mohamed Wahid. "Analyse de l'influence de la diversité des gènes et des molécules HLA non classiques sur la survenue de la maladie du greffon contre l'hôte après greffe de cellules souches hématopoïétiques." Paris 7, 2011. http://www.theses.fr/2011PA077018.
Full textAbstract:
La greffe de cellules souches hématopoïétiques (GCSH) s'accompagne souvent, durant la période post greffe, de complications sévères voir fatales, dont beaucoup d'entre elles sont connues pour être sous le contrôle des facteurs immunogénétiques. Ces facteurs génétiques incluent les antigènes majeurs et mineurs d'histocompatibilité ainsi que les polymorphismes des gènes de l'inflammation et de la réponse immunitaire. Etant donné le double rôle des molécules HLA classe I non classiques au niveau de la réponse innée et de la réponse spécifique (adaptative). Ces molécules sont susceptibles d'intervenir dans l'évolution de la GCSH. Dans un premier temps, nous avons évalué si le polymorphisme fonctionnel du gène MICA (MICA-129), ainsi que les taux sériques de MICA soluble (sMICA) et des anticorps anti-MICA (MICA-Ac) avant et après greffe de CSH pouvait influer sur l'incidence de la GVHDc et de la rechute. Nous avons trouvé que le génotype MIC A-129 Val/Val et un taux élevé de MIC As dans les sérums des patients après greffe sont indépendamment associés à l'incidence de GVHDc, alors que la présence des MICA-Ac avant la transplantation confère une protection contre cette complication. Il existe une relation inverse entre les MICA-Ac et MICAs, suggérant une neutralisation ou une séquestration de ces derniers par les anticorps. De même, ces caractéristiques génotypiques et phénotypiques de MICA influent sur l'incidence de la rechute. Ces données, génotypiques et phénotypiques, suggèrent que MICA pourraient être un biomarqueurs pertinents de la GVHDc. Dans un second temps, nous avons analysé l'impact potentiel des polymorphismes fonctionnels HLA-E 0103/OlOlet HLA-G insertion/délétion de 14pb sur la survenue de complications sévères après GCSH en situation géno-identique. Nos résultats suggèrent, d'une part, que l'état homozygote pour l’allèle HLA-E*0103 constitue un facteur génétique de protection contre la GVHDa et la TRM et contribue probablement à une meilleure survie, et d'autre part, que la faible expression de HLA-G liée à la présence de l'allèle Ins +14pb constitue un facteur de risque de la GvHDa sévère chez les patients qui ont reçu une greffe de moelle comme source de cellules souchesThe hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is often, in the post transplant, in the origin of severe or fatal complications, many of them are known to be under the control of immunogenetic factors. These genetic factors include major and minor antigens of histocompatibility and polymorphisms of genes of inflammation and immune response. Given the dual role of HLA class I unconventional at the innate response, and in terms of the specific response (adaptive), they can also intervene in the evolution of the graft. Initially we assessed whether the functional polymorphism of MICA gene (MICA-129), and serum levels of soluble MICA (sMICA) and anti-MICA antibodies (MICA-Ab) before and after HSCT could influence the incidence of cGVHD and relapse. Although the MIC A-129 Val/Val genotype and elevated sMICA sérum levels after HSCT are independently associated with incidence of cGVHD regardless of history of acute GVHD, the presence of MICA-Ab before transplantation confers protection against GVHDc. There is an inverse relationship between the MICA-Abs and sMICA, an antibody-based neutralization of deleterious effects of sMICA. Similarly, these genetic and phenotype characteristics of MICA influence the incidence of relapse. Altogether, these data suggest that the studied MICA genotype and phenotype specificities could be used as relevant biomarkers for cGVHD monitoring. In a second step, we analyzed the potential impact of HLA-E polymorphisms 0103/0101 and HLA-G insertion/deletion 14pb on the occurrence of severe complications after HSCT in geno-identical situation. The results suggest at first that the homozygous for HLA-E*0103 acts as a genetic protection against GVHDa and TRM and likely contributes to improve survival after transplantation, and secondly that the low expression of HLA-G 14pb is a risk factor for the incidence o severe GvHDa patients who received marrow as a source of stem cells
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Bouligand, Jérôme. "Métabolisme in vivo du busulfan et toxicité hépatique au cours des greffes de cellules souches hématopoïétiques." Paris 11, 2006. http://www.theses.fr/2006PA11T078.
Full text
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Bourdieu, Antonin. "Approche fonctionnelle et métabolique des cellules souches et des progéniteurs hématopoïétiques du sang périphérique en homéostasie à travers le modèle side population. Vers une nouvelle source de greffon hématopoïétique ?" Thesis, Bordeaux, 2016. http://www.theses.fr/2016BORD0204/document.
Full textAbstract:
Dans l’optique de produire de maîtriser les conditions d’expansion ex vivo de greffons hématopoïétiques produits à partir de sang périphérique en homéostasie, l’objectif de ce projet a été de caractériser fonctionnellement, métaboliquement et transcriptomiquement les cellules souches hématopoïétiques (CSH). Compte tenu de l’impossibilité technique de sélectionner spécifiquement les CSH humaines, nous avons utilisé un modèle cellulaire enrichi en CSH, le modèle Side Population(SP). Dans un premier temps, nos travaux ont confirmé que les CSH du sang périphérique étaient majoritairement dans la population SP et qu’elles possédaient des caractéristiques fonctionnelles proches des CSH des autres compartiments hématopoïétiques. Nous avons également démontré l’implication des basses concentrations d’O2 sur le maintien des CSH du sang périphérique. Dans un second temps, nos résultats ont prouvé que les CSH du sang périphérique utilisaient à la fois la glycolyse et la phosphorylation oxydative pour produire l’énergie nécessaire à leur maintien. Enfin, ce projet a permis d’apporter des résultats préliminaires concernant les régulations transcriptomiques des CSH du sang périphérique. Ces données montrent donc que le sang périphérique en homéostasie pourrait constituer une source potentielle de cellules pour la production de greffons hématopoïétiques tout en apportant les premiers éléments de compréhension de la physiologie de ces cellules, afin, dans un plus long terme de maîtriser leur maintien ou leur différenciation ex vivoTo evaluate the possibility to control ex vivo expansion conditions, a key point to produce hematopoietic graft from steady state peripheral blood (SSPB), the objective of this project to characterize the functional properties, the metabolism and the transcriptomic regulations of hematopoietic stem cell (HSC) from SSPB. Due to the lack of strong HSC’s marker in human, we choose to use the Side Population (SP) model, previously described as enriched in HSC in other hematopoietic compartments. In a first part of our work, we showed that HSC from SSPB are mainly inside the SP population. Indeed, SP cells from SSPB exhibit functional properties very closed from HSC. In addition, we found they strongly affected by low O2 concentrations, as HSC from bone marrow. In a second part, our results showed that HSC from SSPB use as much glycolysis as oxidative phosphorylation to produce energy they need to maintain their properties. All together, these data give some interesting information about HSC regulation and needs. They also suggest that HSC from SSPB could be considering as a potential source of hematopoietic graft for therapy
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Jourdan, Eric. "Traitement des leucémies aiguës myéloïdes non promyélocytaires du sujet jeune : analyse de la base de données du BGMT." Bordeaux 2, 2004. http://www.theses.fr/2004BOR21189.
Full textAbstract:
Ce travail a porté sur l'analyse d'une base de données de 1000 patients traités pour une leucémie aigüe myéloïde (LAM) entre 1984 et 2001 par le groupe BGMT. Les patients qui ne répondent pas dès la 1ère cure d'induction semblent avoir un pronostic péjoratif. Ils ont été spécifiquement étudiés afin d'optimiser leur traitement de rattrapage et de post-induction. Une fois la rémission complète obtenue, l'autogreffe de cellules souches hématopoïétiques offre des possibilités intéressantes de réduction du risque de rechute. Les résultats d'une étude randomisée visant à définir la meilleure chimiothérapie à réaliser avant l'autogreffe sont présentés. La greffe de moelle allogénique offre la meilleure prévention de la rechute mais au prix d'une toxicité importante. L'analyse des facteurs de pronostic dans l'ensemble de la base de données a permis de construire, à partir du modèle de Cox, un index pronostic pour définir au mieux les indications de l'allogreffe en fonction des risques de rechuteThis work focused on the BGMT database analysis of 1000 patients treated for an acute myeloid leukemia (AML) between 1984 and 2001. Patients who failed to enter complete remission (CR) after 1 course of chemotherapy are of particularly poor prognosis. Their outcome was studied with the aim to improve both salvage and post remission chemotherapy. For patients in CR, autologous stem cell transplantation (ASCT) may decrease the risk of relapse. Results of a prospective randomized study designed to improve chemotherapy before ASCT are shown. Allogeneic bone marrow transplantation has the best antileukemic effect but also a high toxicity. Risk factors for outcome were analyzed and a prognosis index, based on the Cox model, was built. This index may be helpful to stratify allogeneic transplantation indications according risk groups
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Xiong, Yu. "Impact du G-CSF sur le phénotype et les fonctions des cellules NK dans le cadre d’une immunothérapie post-allogreffe de cellules souches hématopoïétiques." Thesis, Université de Lorraine, 2016. http://www.theses.fr/2016LORR0106/document.
Full textAbstract:
Les cellules Natural Killer (NK) sont capables de lyser les cellules tumorales sans la nécessité de reconnaitre un antigène tumoral spécifique. Cette propriété leur confère un avantage par rapport aux lymphocytes T et les rend intéressantes à utiliser en tant que cellules effectrices pour l’immunothérapie adoptive. A ce jour, le potentiel thérapeutique des cellules NK n’a pas été complétement exploré notamment dans le contexte du traitement de la rechute post-allogreffe de cellules souches hématopoïétiques. Actuellement, les patients en rechute post-greffe sont traités avec des injections de lymphocytes du donneur (DLI) parfois issues de petites fractions du greffon de cellules souches hématopoïétiques congelées. Les cellules souches périphériques étant fréquemment utilisées comme source de cellules souches et parfois utilisées comme DLI, nous avons souhaité évaluer l’impact du G-CSF sur le phénotype et les fonctions des cellules NK présentes dans ces fractions. Dans cet objectif, nous avons comparé différentes sources de cellules NK isolées à partir de sang de donneurs sains, de sang mobilisé de donneurs sains ou de patients et observé l’évolution des différentes sous-populations de cellules NK issues de ces prélèvements au décours d’une expansion en présence d’IL-15. Nos résultats ont montré que l’administration de G-CSF diminuait la proportion de cellules NK CD56brightCD16+ au profit d’une population CD16-, diminuait la prolifération des cellules NK lors de l’expansion en culture, et modifiait les propriétés fonctionnelles des cellules NKThe ability of natural killer (NK) cells to kill tumor cells without the need to recognize a tumor-specific antigen provides advantages over T cells and makes them appealing for a use as effectors for adoptive immunotherapy. However, the full therapeutic potential of NK cell-based immunotherapy has not been fully investigated in the context of leukemic relapse after hematopoietic stem cell transplantation. Today, patients relapsing after hematopoietic stem cell transplantation are often treated with donor lymphocyte infusion (DLI) based on small cell fractions frozen at the time of the stem cell transplantation. Since peripheral blood stem cells are increasingly used as stem cell source and as source of cells for DLI, we aimed to evaluate the impact of G-SCF mobilization on NK cell phenotype and functions. Therefore, we compared the expansion capacity, the phenotype and the function of NK cells from blood for healthy donors, from allogeneic HSCT healthy donors or from autologous HSCT from patients. We also determine the impact of G-CSF on NK cell subset repartition before and after expansion in presence of IL-15. Our results showed that G-CSF administration to patients decreases CD56brightCD16+ NK cell population, proliferation and function. Overcoming this impairment in lymphoid capacity may be important to facilitate post-transplant immunotherapy
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Ben, Azouna Nesrine. "Etude phénotypique et fonctionnelle des cellules souches mésenchymateuses et hématopoïétiques du sang placentaire en comparaison avec la moëlle osseuse ou le sang périphérique adulte." Thesis, Tours, 2012. http://www.theses.fr/2012TOUR3321.
Full textAbstract:
Les cellules souches mésenchymateuses (CSM) sont des cellules souches adultes qui sont à l’origine des cellules des lignages ostéoblastique (O), adipocytaire (A) et chondroblastique (C). Les CSM ont initialement trouvées dans la moelle osseuse mais il en existe également dans d’autres tissus comme le sang de cordon ombilical (SCO). Dotées d’un potentiel régénératif, les CSM peuvent utilisées dans diverses pathologies dégénératives dans un but de réparation tissulaire. En outre, leurs propriétés immunosuppressives ont conduit à envisager leur utilisation dans un but d’immunomodulation comme lors des réactions de greffon contre l’hôte dans les greffes de cellules souches hématopoïétiques (CSH) allo-géniques. Le but essentiel de ce travail a été de comparer les caractéristiques des CSM issues du SCO en comparaison de celles issues de la moelle osseuse (MO). Dans l’optique d’applications en médecine régénérative, nous avons tout d’abord testé la possibilité d’utiliser, dans les milieux de culture d’expansion des CSM de SCO et de MO, un lysat plaquettaire d’origine humaine (HPL) comme substitut au sérum de veau fœtal (SVF) source possible de contaminationsThe mesenchymal stem cells (MSC) are adult stem cells which are at the origin of the ostebiastic lignage cells (O), adipocytes (A) and chondrobiasts (C). The MSC are initially found in the bone marrow (BM) but it also exists there in other tissues as the umbilical cord blood (UCB).Endowed with a regenerative potential, MSC can used in diverse degenerative pathologies in a purpose of tissular repair. Besides, their immunosuppressive properties allowed to envisage their use in a purpose of immunomodulation as during the reactions of transplant against the host in allogenic hematopoietic stem cell transplants (HSC). The essential purpose of this work was to compare the characteristics of the MSC derived from the UCB in comparison to those stemming from the bone marrow (BM)
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Malard, Florent. "Rôle des lymphocytes Th17 et des cellules dendritiques plasmocytoïdes dans la réaction aiguë du greffon contre l'hôte après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques." Thesis, Paris 6, 2014. http://www.theses.fr/2014PA066261/document.
Full textAbstract:
L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques limitant le succès de ce traitement.La GVHD aiguë est liée à la reconnaissance et la destruction par les lymphocytes Talloréactifs du donneur des tissus cibles du receveur (peau, tube digestif et foie), aprèsactivation par les cellules dendritiques du receveur. Si le rôle des lymphocytes Th17dans la GVHD aiguë a été mis en évidence dans des modèles murins, leur rôle chezl’homme est moins clair. Nous avons exploré la présence des lymphocytes Th17 dansla muqueuse digestive de 23 patients et dans la peau de 38 patients lors du diagnosticde GVHD aiguë, au moyen de 2 marqueurs des Th17, CCR6 et CD161 et du facteurde transcription des Th17, RORγt. Il existe une augmentation significative descellules CCR6+, CD161+ et RORγt+ dans la muqueuse digestive et la peau des patientsavec une GVHD aiguë. De plus, comme il a été rapporté que les cellules dendritiquesplasmocytoïdes (PDC) favorisent la différenciation des lymphocytes Th17, nousavons voulu quantifier chez ces patients les PDC au moyen des 2 marqueurs, CD123et BDCA2. Il existe une augmentation des PDC dans la muqueuse digestive et la peaudes patients avec une GVHD aiguë. De plus la forte expression de la protéine induitepar l’IFN de type I Mx1 dans la peau des patients avec une GVHD aiguë suggère queles PDC sont fonctionnelles et produisent de l’IFN de type I. L’ensemble de cesrésultats suggère l’existence d’une réponse médiée par les lymphocytes Th17 dans laGVHD aiguë digestive et cutanée ainsi qu’un nouveau lien physiopathologique entreles PDC et les lymphocytes Th17Acute graft-versus-host disease (GVHD) remains a major complication followingallogeneic stem cell transplantation (allo-SCT) limiting the success of the therapy.GVHD is the result of alloreactive donor T cells attacking host tissues: the skin, gutand liver after activation by the recipient dendritic cells. The contribution of Th17cells in acute GVHD has been demonstrated in mouse models. However theircontribution in human acute GVHD remains unclear. We evaluated the presence ofTh17 cells in the intestinal mucosa of 23 patients and the skin of 35 patients atdiagnosis of acute GVHD using CCR6 and CD161, 2 markers of Th17 cells, andRORγt the key transcription factor of Th17 cells. CCR6+, CD161+ and RORγt+ cellswere significantly increased in the intestinal mucosa and the skin of patients withacute GVHD. Since plasmacytoid dendritic cells (PDC) have been reported to drivethe differentiation of the Th17 subset, we quantified PDC using 2 markers CD123 andBDCA. PDC were significantly increased in the intestinal mucosa and the skin ofpatients with acute GVHD. Moreover, we observed a strong expression of the type IIFN-inducible protein Mx1 in the skin of patients with acute GVHD, suggesting thatPDC produce type I IFN. Overall this study provides evidence for a Th17-mediatedresponse and a potential pathophysiological link between PDC and Th17 in humanacute GVHD
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Djaoud, Zakia. "Contribution des cellules NK KIR+ au contrôle de l'infection à cytomégalovirus : implication en greffes allogéniques." Nantes, 2013. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=6eb20d24-693d-4fd3-b684-8b5ac0500d1f.
Full textAbstract:
L'alloréactivité des cellules NK joue un rôle clé dans l'immunité antivirale et antitumorale après une allogreffe de CSH. La réactivation du CMV après la greffe induit une expansion clonale des cellules NK NKG2C+ KIR+. Ce phénomène est également observé chez les individus sains, CMV+. Cependant, la contribution des récepteurs KIR au contrôle cellulaire NK de l'infection à CMV n'a pas encore été explorée. Dans ce travail, nous avons observé une expression préférentielle des KIR2DL sur les cellules NK NKG2C+ amplifiées chez les individus CMV+. Dans un modèle in vitro d'infection d'iDC allogéniques, nous avons montré que les récepteurs KIR2D sont requis pour un meilleur contrôle de l'infection à CMV par les cellules NK. Nos résultats indiquent une contribution fonctionnelle des récepteurs KIR2DL1 et KIR2DL3 au contrôle des iDC C2C2 infectées par le CMV et suggèrent un échappement de celui-ci à la reconnaissance par les cellules NK KIR2DL3+, dans un environnement HLA-C1. Dans un modèle d'amplification des cellules NK in vitro, après stimulation avec des B-EBV exprimant la phophoprotéine pp65, nous avons montré que cette dernière inhibe la prolifération des cellules NK KIR2DL3+. Le rôle des cellules NK dans le contrôle de l'infection à CMV dans la transplantation rénale a aussi été exploré dans un modèle de HAEC infectées par le virus, suggérant un rôle privilégié des cellules NK NKG2C+. Dans ce travail de thèse, nous avons également revisité les spécificités des récepteurs KIR2D, montré que le KIR2DS2 peut reconnaître les molécules HLA-C du groupe C1 et déterminé l'impact fonctionnel des KIR2D sur l'alloréactivité des cellules NK et la formation du répertoire cellulaire NK KIR2D. Ces données contribuent à mieux identifier les populations NK impliquées dans le contrôle de l'infection à CMV qui dépend fortement de la nature de la cible cellulaire infectée par le virus, soulevant l'importance du contexte de la greffe allogéniqueNK cell alloreactivity plays a key role in anti-viral and anti-tumor immunity, particularly in the absence of T cells after allogeneic HSCT. CMV reactivation after transplantation induces clonal expansion of NKG2C+ KIR+ NK cells. This phenomenon is also observed in healthy CMV seropositive individuals. However, KIR contribution in controlling CMV infection is not documented. In this study, we observed that NKG2C+ NK cells amplified in CMV seropositive individuals mainly express KIR2DL receptors. In an in vitro model of allogeneic CMV infected iDC, we showed that KIR2D receptors are required for a better control of CMV infection by NK cells. Our results indicate a functional contribution of KIR2DL1+ and KIR2DL3+ NK cells in controlling CMV-infected C2C2+ iDC and suggest a CMV evasion for KIR2DL3+ NK cell recognition in HLA-C1 environment. Moreover, in an in vitro model of NK cell amplification after stimulation with EBV-B cells expressing pp65 phosphoprotein, we showed that the latter inhibits KIR2DL3+ NK cell proliferation. NK cell role in controlling CMV infection in kidney transplantation has also been explored in a model of HAEC infected by the virus, suggesting a key role of NKG2C+ NK subsets. In this study, we have revisited KIR2D specificities. We showed that KIR2DS2 can recognize HLA-C molecules belonging to C1 group and determined the functional impact of KIR2D engagement with cognate HLA-C ligands on NK cell alloreactivity and KIR2D repertoire formation. Taken together, these data contribute to better identify NK cell subsets involved in controlling CMV infection that is highly dependent on the nature of CMV-infected target cells, raising the importance of allogeneic transplant setting
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Richard, Emmanuel. "Développement de vecteurs lentiviraux : application à la thérapie génique d'un modèle murin de protoporphyrie érythropoi͏̈étique." Bordeaux 2, 2003. http://www.theses.fr/2003BOR21060.
Full textAbstract:
La transplantation de cellules souches hématopoietiques (CSH) génétiquement modifiées peut représenter une alternative à l'allogreffe de moelle osseuse (MO) en cas d'absence de greffon HLA compatible. Dans cette thèse nous avons développé des vecteurs de transfert de gène dérivés de lentivirus (VIH-1) et testé leur capacité à délivrer un gène thérapeutique dans les CSH d'un modèle murin de protoporphyrie érythropoiétique (PPE). La PPE est une maladie génétique liée à un déficit en ferrochélatase (FECH), conduisant à l'accumulation toxique de protoporphyrine associée à une photosensibilité cutanée. Nous démontrons un transfert de gène efficace dans les CSH murines associé à la correction de la photosensibilité à long terme grâce à l'expression du gène FECH dans le compartiment érythroide de la MO. La coexpression du gène FECH et du gène MGMT (méthylguanine ADN-méthyltransférase) permet la correction métabolique et la sélection in vivo des CSH transplantées en l'absence de myéloablation, conduisant à la correction phénotypique à long terme de la maladieTransplantation of genetically modified hematopoietic stem cells (HSCs) could represent an alternative to bone marrow transplantation when a match-HLA graft is not available. In this thesis, we have developed gene transfer vectors based on lentivirus (HIV-1) and tested their ability to deliver a therapeutic gene into HSCs, using a mouse model of erythropoietic protoporphyria (EPP). EPP is a genetic disease characterized by a ferrochelatase (FECH) deficiency, leading to the accumulation of toxic protoporphyrin associated with skin photosensibility. We demonstrate an efficient gene transfer into murine HSCs associated with long term skin photosensibility correction related to erythroid specific expression of the FECH gene. Coexpression of FECH and MGMT (methylguanine DNA-methyltransferase) genes allows metabolic correction and in vivo selection of genetically corrected HSCs transplanted without myeloablation after alkylating drug injection, leading to the long-term phenotypic correction of the disease
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Laverdière, Isabelle. "Découverte de nouveaux marqueurs pharmacogénomiques de la maladie du greffon contre l'hôte en transplantation de cellules souches hématopoïétiques." Doctoral thesis, Université Laval, 2014. http://hdl.handle.net/20.500.11794/26966.
Full textAbstract:
La transplantation de cellules souches hématopoïétiques (CSH) constitue une avenue thérapeutique potentiellement curative pour plusieurs cancers hématologiques comme la leucémie. L’utilisation d’une thérapie immunosuppressive pour prévenir la maladie du greffon contre l’hôte (GvHD) est un déterminant majeur du succès de la greffe. Malgré tout, cette complication survient chez 25 à 50% des transplantés et est une cause majeure de mortalité. L’optimisation du régime d'immunosuppression est un facteur facilement modifiable qui pourrait améliorer le pronostic des patients. Particulièrement, les polymorphismes du génome du donneur ou du receveur dans les voies pharmacogénomiques des immunosuppresseurs pourraient influencer l’exposition et l’action de ces médicaments, de même que le pronostic du patient. Le profilage de 20 pharmacogènes prioritaires chez des paires de donneurs-receveurs en greffe de CSH a permis d’identifier des variations génétiques liées au risque de la GvHD aiguë. Principalement, le statut génétique du receveur pour les protéines ABCC1 et ABCC2, impliquées dans le transport du méthotrexate (MTX), ainsi que des cibles moléculaires de ce médicament (ATIC et MTHFR) ont été associées au risque de GvHD aiguë. Similairement, le NFATc1, codant pour une cible moléculaire de la cyclosporine, augmentait lui aussi le risque de la maladie. Les porteurs de deux génotypes à risque et plus étaient particulièrement prédisposés à développer cette complication. Par surcroît, le statut génétique du donneur influençait également le pronostic du receveur après la greffe. Entre autres, des allèles protecteurs ont été identifiés dans les voies liées au transport (SLC19A1) et à l’action du MTX (DHFR). Inversement, NFATc2 a été associé à une augmentation du risque de GvHD aiguë. Afin de mieux comprendre les associations observées entre ces marqueurs génétiques et le risque de GvHD aiguë, une étude prospective innovante est en cours chez des greffés de CSH. Cette étude permettra d’étudier comment la génétique du patient ou du donneur peut influencer la pharmacocinétique et la pharmacodynamie des immunosuppresseurs, de même que leurs liens avec la GvHD aiguë. Ces paramètres sont quantifiés grâce à des approches analytiques que nous avons mises au point afin de répondre aux besoins spécifiques et uniques de cette étude. Les approches proposées dans cette thèse sont complémentaires aux méthodes classiques de suivi des immunosuppresseurs et pourraient aider à optimiser la pharmacothérapie du patient. Une meilleure identification des patients à haut risque de GvHD aiguë avant la greffe, basée sur des marqueurs pharmacogénomiques identitaires, pourrait guider le choix de la prophylaxie immunosuppressive, et ainsi améliorer l’issue clinique de la greffe.Hematopoietic stem cells transplantation (HSCT) is a potentially curative therapy for several hematological cancers such as leukemia. Following transplantation, effective immunosuppression prophylaxis is mandatory to prevent the graft-versus-host disease (GvHD) and improved the clinical outcome. However, GvHD still occurs in 25-50% of transplanted patient and is associated with high mortality rate. Optimization of immunosuppressive therapy is an easily modifiable factor that can improve the prognosis of patient after HSCT. In particular, polymorphisms of recipient and donor in genes with functions related to drugs transport, metabolism and action might influence the exposure and the efficacy of immunosuppressive therapy, and thus the clinical outcome. The evaluation of 20 candidate pharmacogenes in donor-recipient pairs of HSCT identified genetic polymorphisms associated with the risk of GvHD. Recipient genetic status for ABCC1 and ABCC2, related to methotrexate (MTX) transport, as well as polymorphisms in genes encoding molecular targets (ATIC and MTHFR) of this drug, exhibit a remarkable influence on acute GvHD prevalence. Similarly, the cyclosporin molecular target NFATc1 also increases the risk of GvHD. Importantly, the presence of ≥2 of these SNPs was found to be associated with high risk of developing severe grade of acute GvHD. In donor, we identified protective alleles in pathways related to transport (SLC19A1) and action (DHFR) of MTX. Conversely, NFATc2 enhances the risk of acute GvHD. To improve our understanding of the process behind these associations, we have an ongoing prospective study in HSCT. This innovative study will provide the opportunity to evaluate the influence of such genetic markers on the pharmacokinetic and pharmacodynamic of immunosuppressive drugs, as well as their relation with the risk of GvHD. For the specific needs of our study, we have developed two analytical methods based on mass spectrometry. The approaches we proposed in this thesis are complementary to conventional monitoring method and are promising tools to optimize drug therapy in HSCT. Identification of such biomarkers assessed before transplantation can help personalized patient care in order to prevent GvHD and improve survival.
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Bensoussan-Lejzerowicz, Danièle. "Déficits congénitaux de l'immunité cellulaire et thérapie cellulaire : l'apport de la thérapie cellulaire dans la prévention des complications survenant au décours des allogreffes de cellules souches hématopoïétiques." Nancy 1, 2007. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/SCD_T_2007_0156_BENSOUSSAN-LEJZEROWICZ.pdf.
Full textAbstract:
L'apport de la Thérapie cellulaire dans la prévention des complications survenant au décours des allogreffes de Cellules souches hématopoïétiques. L'allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) est, à ce jour, le seul traitement curatif des déficits immunitaires (DI) héréditaires sévères. Cependant, les complications des allogreffes parmi lesquelles les infections et la réaction du greffon contre l'hôte sont parfois létales. Ce travail s'attache, à travers trois modèles de déficit immunitaire héréditaire - les syndromes hyper IgM (HIGM), le syndrome de Wiskott Aldrich (W AS) et le Syndrome de DiGeorge (cDGS) - à montrer qu'une bonne connaissance du DI et de ses complications d'une part ainsi que l'adaptation du protocole d'allogreffe accroissent les chances de succès de cette thérapeutique. Dans le cadre des infections survenant au décours des allogreffes de CSH, nous rapportons comment la déplétion en lymphocytes B du greffon permet de prévenir efficacement la survenue d'un lymphome EBV-induit après allogreffes. Puis, nous décrivons l'effet bénéfique de l'allogreffe de CSH sur une infection à Cryptosporidium parvum chez deux enfants atteints d'un HIGM lié à l'X. Il semble que cet effet ne soit obtenu que lorsque les atteintes hépatiques engendrées par ce parasite ne sont pas trop avancées. Nous étudions ensuite la prévention de la réaction du greffon contre l'hôte (GVHD) par manipulation du greffon de CSH. Nous rapportons les limites de la sélection positive CD34+ chez un patient atteint de W AS puis nous exposons les techniques de déplétion alloréactive permettant de conserver le capital anti-infectieux du greffon. Enfin, dans le contexte particulier du cDGS, nous montrons comment simplifier la procédure d'allogreffe en ne réinjectant que les cellules d'intérêt et en s'affranchissant du conditionnement et de ses effets secondairesAllogeneic hematopoietk stem cell transplantation (HSCT) is the only way to cure severe Primary Immune Deficiencies (PID). However, HSCT is, sometimes complicated by infections or Graft vers us Host disease (GVHD) which can lead to patient death. In this work we illustrate how, for three PIDs, Hyper IgM syndrome (HIGM), Wiskott Aldrich Syndrome (WAS) and DiGeorge syndrome (cDGS), expert knowledge of the disease and its complications together with optimal management of the allogeneic HSCT procedure both increase the chances for a successful outcome. Analysing post-HSCT infections, we explain how B-cell depletion is very effective in preventing EBV -related lymphoproliferative syndromes. We also report the successful treatment of a pre-transplant Cryptosporidium parvum infection in two children with X-linked HIGM by an allogeneic HSCT that led to cure of the CD40L deficiency. Nevertheless, such an effective result seems to be favored by the absence of severe hepatic impairment at the time of transplant. We then study how to prevent GVHD by graft manipulations. We report CD34-positive selection limits in a patient with W AS and we also present different alloreactive depletion methods to prevent GVHD while preserving graft anti-infectious capacity. Finally, in the specifie case of cDGS, we report on the effectiveness of unmanipulated peripheral blood mononuclear cell infusion to avoid a conditioning regimen and to simplify allogeneic transplantation procedure
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Hurot, Vincent. "Intérêt des facteurs de croissance hématopoi͏̈étique chez des patients ayant subi une greffe allogénique de cellules souches hématopoi͏̈étiques." Paris 5, 1999. http://www.theses.fr/1999PA05P048.
Full text
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Hammoud, Mohammad. "Effet de l’association des basses concentrations d’O2 et des cellules stromales mésenchymateuses sur l’expansion ex vivo des cellules souches et progénitrices hématopoïétiques." Thesis, Besançon, 2012. http://www.theses.fr/2012BESA3008/document.
Full textAbstract:
Afin d’améliorer au mieux le greffon placentaire, nous suggérons de réaliser sa culture d’expansion ex vivo dans des conditions proches de l’environnement des cellules souches hématopoïétiques in vivo. Ainsi, nous proposons que la co-culture de cellules CD34+ placentaires avec des cellules stromales mésenchymateuses (CSM) à basses concentrations d’O2 (BC-O2) pourrait contribuer à équilibrer les processus d’autorenouvellement et de différenciation afin d’obtenir un greffon optimisé. Sur le plan fonctionnel, nos résultats confirment un effet bénéfique de notre modèle expérimental par rapport aux conditions où figure la culture simple et/ou l’oxygénation atmosphérique (20%) en termes du maintien de progéniteurs (PH) primitifs (pré-CFC) et de cellules souches Scid-Repopulating Cells (SRC). Sur le plan quantitatif, l’amplification des cellules CD34+ et des PH engagés, bien qu’elle soit en retrait dans nos conditions de référence par rapport à la condition de 20% d’O2, elle demeure néanmoins importante. Par ailleurs, le rôle de l’IL-3 exogène se montre crucial à BC-O2 notamment en co-culture à 1,5% d’O2 où elle permet non seulement de préserver mais aussi d’amplifier le taux de SRC par rapport au témoin de cellules CD34+ de J0. Enfin, l’étude de la sécrétion des facteurs solubles et l’expression des marqueurs phénotypiques sur les CSM montre que l’IL-6, le VEGF et l’IL-8 sont plus sécrétés et les CD146, CD49a, CD54, CD200 et CD105 sont plus exprimés après incubation à 5% d’O2. Cependant, l’implication réelle de ces facteurs et antigènes dans l’effet paracrine et/ou de contact cellulaire direct menés par les CSM dans notre protocole requiert de nouvelles investigationsTo optimize at best the hematopoietic engraftment, we suggest in this work to improve the ex vivo expansion conditions by moving them closer to physiology. Indeed, we propose to culture placental CD34+ (HSC/PH) on MSC layer in combination with LO2-C to ensure the amplification of HP together with the maintenance/expansion of HSC. Compared to the single culture and/or atmospheric oxygenation, our experimental model allows a better maintenance of primitive HP (Pre-CFC) and HSC together with a quite good amplification of total cells, CD34+ cells and committed HP despite of lower than control condition. Moreover, exogenous IL-3 shows crucial effect in co-culture at LO2-C (1.5% O2) since its addition better preserves and even increases the number of HSC compared to the CD34+ cells control from D0. We then studied the secretion of soluble factors in culture supernatants and found that IL-6, VEGF and IL-8 were present in larger quantities at LO2-C in both co-culture and MSC culture. Finally, the CD146, CD49a, CD54, CD200 and CD105 membrane antigens appear to be up-regulated in MSCs when incubated at 5% O2. However, the involvement of these factors and antigens in paracrine effect and/or direct cell to cell contact mechanisms at LO2-C requires further investigations. In conclusion, the combination of LO2-C and MSC would be promising in the field of HSC/PH grafts expansion to achieve its main objective of reducing the post-transplant cytopenia period together with maintaining the long-term graft potential
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Aveni-Piney, Maud D'. "Le rôle immunomodulateur dans la réponse allo-immune de cellules hématopoïétiques mobilisées par du G-CSF." Thesis, Paris 11, 2015. http://www.theses.fr/2015PA11T021.
Full textAbstract:
L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques (CSH) reste à l’heure actuelle la seule thérapie curative de nombreuses hémopathies malignes. Les lymphocytes T (LT) du donneur constituent une immunothérapie contre les cellules de la leucémie (ou lymphome) appelé effet « GVL » pour « Graft versus Leukemia ». Malheureusement cet effet est intimement lié à la maladie du greffon contre l’hôte appelée « GVH » pour « Graft versus Host » (destruction des cellules saines du receveur par les LT du donneur). L’allogreffe de CSH est de plus en plus souvent réalisées avec des greffons mobilisés par du G-CSF. Quelques publications identifient des cellules immunosuppressives avec un phénotype peu précis CD11b+ Gr1+ induites par le G-CSF pouvant regrouper plusieurs sous-types cellulaires et sans trouver de contre-partie humaine ou avec un mécanisme d’action peu clair. Nous avons démontré que le G-CSF mobilise chez l’homme, dans la fraction CD34+ du greffon, une population monocytaire. Lorsqu’elle représente plus de 12% des CD34+, les receveurs ont une incidence moindre de la GVH aiguë. Cette même population est phénotypiquement et fonctionnellement conservée chez la souris. En réponse à l’IFN-γ relargué par les LT allogéniques, elle produit de l’Oxyde Nitrique capable d’induire l’apoptose de ces LT in vitro. In vivo, nous avons pu décortiquer (chez la souris uniquement) les mécanismes de régulation de la GVH aiguë. Les LT apoptotiques phagocytés par les macrophages capables alors de devenir tolérogènes en produisant du TGF-β et ainsi d’induire des LT régulateurs. Dans le modèle murin d’allogreffe de CSH, le transfert adoptif de cette population purifiée protège le receveur de la GVH aiguë. Nous pensons que si cette population peut être cultivée et expandue ex vivo, elle pourrait être une thérapie cellulaire préventive contre la GVHAllogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation (Allo-HSCT) is the most effective immunotherapy for acute leukemia, due to the development of graft-versus-leukemia (GVL) effect mediated by alloreactive donor T cells. However, donor T cells specific for recipient alloantigens are also responsible for graft-versus-host disease (GVHD), a life-threatening complication that frequently occurs after allo-HSCT. The administration of Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) is routinely performed to collect Peripheral Blood Stem Cells (PBSC) from healthy donors for allo-HSCT. Few studies identified that G-CSF can induce myeloid suppressive cells in mice (CD11b+ Gr1+) with no human counterpart. We demonstrated in our study that G-CSF can induce a new population named CD34+Monocyte. The cumulative incidence of acute grade II to IV GVHD following allo-HSCT was lower in patients receiving grafts containing CD34+ monocyte frequencies above 12% of the CD34+ population. In mice, we demonstrated that G-CSF mobilized a highly conserved CD34+ monocyte population. CD34+Monocytes require T cell-mediated IFN-γ to produce Nitric Oxide that inhibits T cell activation and proliferation. In vivo, we report that CD34+ monocyte-derived NO regulates the alloreactive response by inducing T cell apoptosis and subsequently, the induction of regulatory T cells. In fact, uptake of apoptotic T cells by macrophages triggers them to produce high levels of TGF-β that drives the expansion of Tregs and induces immune tolerance. Such tolerogenic monocytes could represent a good candidate for the development of novel immunoregulatory and therapeutic cellular therapies
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Yakoub-Agha, Ibrahim. "Etude des sous-populations lymphocytaires T naïves et mémoires centrales, effectrices et de différentiation terminale dans le cadre de l'allogreffe de cellules souches hématopoïétiques." Lille 2, 2007. http://www.theses.fr/2007LIL2S009.
Full textAbstract:
L'allogreffe de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH) est une véritable immunothérapie adoptive. Les lymphocytes contenus dans le greffon, non seulement jouent un rôle dans la prise de greffe et la reconstitution immunologique post-greffe, mais aussi sont responsables de deux réactions allogéniques : L'une « délétère », représentée par la réaction du greffon contre l'hôte (GVH, Graft Versus Host) notamment aiguë, qui est une complication majeure de l'allogreffe de CSH et est responsable d'une morbidité et d'une mortalité très importantes. Et l'autre « bénéfique » représentée par le combat immunologique du greffon contre la maladie maligne, appelé effet GVL (Graft Versus Leukemia). Le compartiment lymphocytaire T mémoire est très hétérogène où les cellules diffèrent par leurs possibilités effectrices et fonctionnelles d'une part et par leur capacité de distribution tissulaire d'autre part. Les dernières avancées scientifiques permettent d'identifier le profil fonctionnel des cellules T mémoires par l'intermédiaire de l'étude de leur phénotype en utilisant les techniques de marquage multiple (CD4, CD8, CCR7, CD45RA, CD28). Résultats de nos travaux : Le but principal était d'étudier les lymphocytes T naïfs, mémoires centrales et mémoires effectrices, du greffon de CSH et de suivre la reconstitution immunologique chez le receveur et d'évaluer la survenue d'une GVH aiguë ou chronique et de sa sévérité, d'un rejet de greffe ou d'une rechute de la pathologie maligne initiale. En étudiant l'impact de la composition du greffon en cellules T naïves et mémoires, sur le devenir des receveurs, nous avons pu démontré qu'une proportion élevée de lymphocytes T CD4+CCR7+ du donneur était un facteur de risque indépendant de la survenue, la précocité et la sévérité de la GVH aiguë dans le cas des allogreffes à partir d'un donneur HLA-identique. A partir des résultats observés avec le premier travail, nous avons évalué et démontré l'impact des caractéristiques (sexe, âge, antécédents d'infections. ) du donneur sur la composition du greffon. Nous avons également démontré que l'examen du sang périphérique avant le début de la procédure du prélèvement de CSH prédisait la composition du greffon notamment pour ce qui concerne la proportion de lymphocytes T CD4+CCR7+. Nous avons poursuivi nos travaux par l'étude de la reconstitution immunologique post-greffe et l'évaluation des relations éventuelles entre la reconstitution immunologique, le chimérisme et le devenir de la greffe. Là aussi nous avons pu démontré l'interdépendance de l'effet GVL et la GVH notamment chronique. Ainsi, les patients capables de générer des lymphocytes T CD8+/CD28neg dès j30 post-greffe sont à risque élevé de développer une GVH chronique contrairement à ceux incapables de générer ces lymphocytes et qui sont, eux, à risque élevé de rechute.
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Latis, Eleonora M. T. "Exploring immunological mechanisms of human graft-versus-host disease after hematopoietic stem cell transplantation." Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. https://theses.md.univ-paris-diderot.fr/LATIS_Eleonora_va.pdf.
Full textAbstract:
L’allogreffe de cellules souches hématopoïétiques est un traitement curatif pour de nombreuses maladies hématologiques. Cependant, le succès de cette procédure est entravé par la maladie du Greffon-contre-l’Hôte (GVH), une complication potentiellement fatale induite par l’attaque des tissues de l’hôte par les cellules T alloreactives du donneur. La GVH a une prévalence de 40 à 80%, selon les caractéristiques de la transplantation. La GVH est la cause principale de mortalité post-greffe en dehors des rechutes et, en dépit des nombreuses avancées dans le domaine de l’allogreffe, la physiopathologie de cette maladie est encore mal comprise à ce jour, en particulier chez l’homme. Dans cette étude, nous nous sommes concentrés sur la caractérisation phénotypique et moléculaire du système immunitaire des patients greffés et de leurs donneurs. L’objectif de l’étude est de déterminer les facteurs liés à la reconstitution du système immunitaire et au développement de la GVH aigüe. Nous avons collecté le sang de 101 couples donneur /receveur apparentés HLA-identique provenant de trois cohortes indépendantes : avant transplantation pour les donneurs, à l’apparition des premiers symptômes chez les patients atteint de la GVH aigüe et 30 ou 90 jours post-greffe pour les patients non atteints. Nous avons caractérisé le profil cellulaire de ces échantillons par cytométrie spectrale et analysé leur profil transcriptomique.L’immunophenotypage des patients nous a permis de montrer que la reconstitution du compartiment des cellules T est incomplète, avec une inversion du rapport CD4/CD8 après la greffe. De plus, le compartiment cellulaire T est enrichi en cellules possédant un phénotype effecteur/mémoire tandis que le réservoir des cellules T naïves est appauvri. La reconstitution des cellules NK est caractérisée par un enrichissement du sous-type CD56bright et celle des monocytes par l’enrichissement des cellules CD16+. A l’apparition de la GVH, une augmentation de la fréquence des cellules possédant un phénotype semblable aux cellules souches mémoire est observée, par rapport aux patients non-atteints. Ces cellules pourraient représenter un réservoir cellulaire de la maladie, maintenant la production de cellules T alloréactives. Le profilage transcriptomique montre que les cellules T du donneur réagissent à l'environnement de l’hôte en acquérant un phénotype activé, avec une surexpression des gènes associés à l’activation, l’adhésion, la migration et les fonctions effectrices. Au commencement de la maladie, on observe que les cellules T surexpriment des gènes médiateurs de l’inflammation ainsi que des gènes impliqués dans la transduction du signal cytokinique et la migration cellulaire. Nos données démontrent que l’analyse de la distribution des sous-types cellulaires par cytométrie associée au profilage transcriptomique peut contribuer à élucider les mécanismes impliqués dans la reconstitution immunitaire et dans le développement de la GVH humaineAllogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is a curative treatment for many hematologic malignancies. However, its success is hindered by graft-versus-host disease (GVHD), a potentially fatal complication deriving from alloreactive donor T cells attacking recipient tissues. Acute GVHD (aGVHD) prevalence lies between 40 and 80% depending on transplant characteristics. GVHD is the main cause of non-relapse morbidity and mortality after HSCT and despite the advances in the field, disease processes in humans remain poorly understood.In this study we investigated the phenotypic and molecular characteristics of immune cells in patients after HSCT and in their HLA-identical sibling donors, with the goal of defining immune parameters associated with the recovery of donor-derived immunity and with the development of acute GVHD. We analysed 101 donor-recipient pairs in three independent cohorts for which blood was collected from the donors before transplantation and for the recipients either at aGVHD onset, before any treatment, or at day 30 or 90 post-HSCT for recipients that did not develop GVHD. On the donors’ and recipients’ samples we performed cellular profiling using spectral flow cytometry as well as gene expression analysis.Immunophenotyping reveals an incomplete reconstitution of the T cell compartment in the recipients, with an inversion of the CD4/CD8 ratio, both at one and three months after HSCT. Moreover, the reconstituting T cell compartment is characterized by a shift in the effector/memory phenotype of these cells, with a parallel depletion of the naïve T cell pool. NK cell reconstitution is characterized by an expansion of the CD56bright subset, while monocytes undergo an expansion of CD16+ cells. At aGVHD onset recipients have an increase of cells with a T stem cell memory-like (TSCM-like) phenotype compared to recipients without aGVHD. These cells may represent a cellular reservoir for GVHD, maintaining the production of alloreactive T cells in the presence of host persistent antigens. Molecular profiling shows that donor T cells react to the environment of the host by acquiring an activated phenotype, with upregulation of genes associated with T cell activation, adhesion, migration and effector functions. T cell transcriptome profiling at aGVHD onset shows upregulation of inflammatory mediators as well as genes involved in cytokine signal transduction, cell migration and cell trafficking.Our data demonstrate that comprehensive analysis of the distribution of different immune cell subsets with flow cytometry together with gene expression profiling can contribute to elucidate the processes involved in immune reconstitution and acute GVHD development in humans. In the future, studies with new technologies will hopefully bring insights into the mechanisms underlying GVHD development that will help design new preventive and therapeutic strategies to be applied in the clinics
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Chevallier, Patrice. "Infection par l'herpesvirus humain de type 6 (HHV-6) après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques : influence de la nature du greffon sur la réactivation virale." Nantes, 2013. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=76376e2b-15e7-4bfd-a3f2-cd60005a1fde.
Full textAbstract:
Le nombre de greffe de sang placentaire chez les adultes n’a cessé d’augmenter ces dernières années, exposant les patients à un risque théoriquement accru d’infections. Au cours d’une étude rétrospective, nous avons comparé l’incidence des infections virales à CMV, EBV et HHV-6 après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques provenant soit d’un donneur non apparenté soit d’un sang de cordon. Une augmentation très significative de la fréquence et de l’intensité des infections HHV6 a été observée chez les sujets receveurs d’un greffon placentaire. Pour expliquer cet accroissement, nous avons ensuite déterminé la composition cellulaire et l’expression du CD46 (récepteur membranaire ubiquitaire de l’HHV-6) au sein de plusieurs types de greffons. Ces données, obtenues par analyse multiparamétrique en cytométrie de flux, montrent notamment un déficit quantitatif très significatif en cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDCs, cellules impliquées de manière professionnelle dans la défense antivirale de l’organisme par production d’interféron de type 1) et une moindre expression du CD46 sur les cellules dans les greffons placentaires. Finalement, pour préciser les effets éventuels du virus sur les fonctions cellulaires, nous avons effectué des essais préliminaires d’infection in vitro de pDCs triées à partir du sang périphérique de donneur sains. Ces premières données montrent une modulation de l’expression du CD80 et du CD86 sur les pDCs et une stimulation importante de la sécrétion d’IFN alpha par ces dernières. L’influence significative de l’origine placentaire du greffon sur la réactivation HHV-6 après allogreffe reste pour le moment inexpliquéeCord blood (CB) is increasingly used as an alternative source of graft in adults with hematologic malignancies, predisposing patients to a theoretical increased risk of infections. In a retrospective study, we compared the incidence of CMV, EBV and HHV-6 viral infections after allogeneic transplantation using stem cells issued from either unrelated donor or cord blood (CB). A very significant increase in the frequency and intensity of HHV6 infections was observed in patients receiving CB grafts. To explain this phenomenon, we then determined the cellular composition and the CD46 (ubiquitous HHV-6 membrane cell receptor) expression in several types of blood and graft sources. These data, obtained by multi-parametric flow cytometry analyses, showed a very significant deficiency in plasmacytoid dendritic cells (pDCs, cells professionally involved in antiviral defense of the organism through production of type 1 interferon) and lower CD46 cells expression in CB grafts. Finally, to clarify the possible effects of the virus on cell functions, we performed preliminary in vitro experiments consisting on HHV-6 infection of sorted human peripheral pDCs issued from healthy donors. These early data showed a modulation of CD80 and CD86 expressions on pDCs associated with a significant stimulation of type 1 IFN-alpha secretion by these cells. So far, the significant influence of cord blood graft source on HHV-6 reactivation after allogeneic transplantation remains to be elucidated
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Guerino, Cunha Renato Luiz. "Corrélations pronostiques entre les polymorphismes génétiques de la réponse immunitaire et les résultats des greffes de sang de cordon ombilical et placentaire." Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077183.
Full textAbstract:
Introduction. Il y a aucune données sur l'importance des polymorphismes pour les receveurs da la greffe de sang de cordon ombilical et placentaire (UCBT). Objectifs. Évaluer l'influence du polymorphisme génétique de le receveur de UCBT et/ou de l'unité de cordon ombilical et placentaire (CBU) dans les résultats de UCBT. Méthodologie. Les gènes candidats sélectionnés sont les suivants: NLRP, TIRAP, IL-10, REL, TNF, CTLA-4. Grâce à une étude de cohorte rétrospective, 851 échantillons de CBU et 173 échantillons de receveurs ont été génotypés. Après les génotypes ont été évalué avec les données cliniques existant dans la base de données européenne Eurocord. Résultats. L'analyse multivariée a montré, pour les receveurs de CBU avec génotype GG de CTLA4, les suivant résultats inférieurs : survie globale (HR 1,36; Cl 95% 1,03-1,80; p=0,03), la survie sans progression de maladie (n=696; HR 1,41; Cl 95% 1,06-1,88; p=0,02), la mortalité liée à la greffe (HR 1,41; Cl 95% 1,24-1,59 , p=0,01) et la récupération des neutrophiles (HR 1,25; Cl 95% 1,10-1,41; p=0,01). En outre, pour les receveurs de CBU avec le génotype TT de IL-10 a montré une meilleure récupération des neutrophiles (HR 0,77; Cl 95% 0,68-0,87; p=0,03) et des plaquettes (HR 0,66; Cl 95% 0,59-0,75; p<0,01). Les receveurs de CBU avec le génotype GG de TNF ont été une récupération plaquettaire inférieure (HR 2,15; Cl 95% 1,90 - 2,43; p <0,01). Conclusion. CTLA4, IL-10 et TNF ont démontré modifier le cours d'UCBT selon le génotype de la CBU. Les résultats du CTLA4 sur la survie et mortalité lié a la greffe peut indiquer que ce polymorphisme doit être considéré dans le moment de choix de la CBUIntroduction. There is no data showing the importance of polymorphisms for umbilical cord blood transplantation (UCBT) recipients. Objectives. Evaluate the influence of genetic polymorphism of UCBT recipient and/or umbilical cord blood unit (CBU) in the results of UCBT. Methodology. Candidate genes selected are: NLRP, TIRAP, 1L-10, REL, TNF, CTLA-4. Through a retrospective cohort study, 851 CBU samples and 173 recipient samples were genotyped. Further, genotypes were evaluated with existing clinical data on Eurocord database. Results. The multivariate analysis showed, for recipients of CBU with GG genotype of CTLA4, the following inferior outcomes for: overall survival (HR 1. 36; 95% Cl 1. 03-1. 80; p=0. 03), disease free survival (n = 696; HR 1. 41; 95% Cl 1. 06-1. 88; p=0. 02), transplant related mortality (HR 1. 41; 95% Cl 1. 24-1. 59, p=0. 01) and neutrophil engraftment (HR 1. 25; 95% Cl 1. 10-1. 41; p=0. 01). In addition, for recipients of CBU with TT genotype of IL-10 showed better neutrophil engraftment (HR 0. 77; 95% Cl 0. 68¬0. 87; p=0. 03) and platelets engraftment (HR 0. 66; 95% CI 0. 59-0. 75; p<0. 01). Recipients of CBU with GG genotype for TNF had lower platelet engraftment (HR 2. 15; 95% CI 1. 90-2. 43; p<0. 31). Conclusion. CTLA4, IL-10 and TNF have shown to modify UCBT outcomes according to the CBU genotype. Results of CTLA4 on survival and transplant related mortality suggest that this polymorphism should be considered for CBU choice algorithm
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Davaine, Eolia. "Implication de l'axe CX3CL1/CX3CR1 dans la physiopathologie de la réaction aiguë du greffon contre l'hôte en allogreffe de cellules souches hématopoïétiques." Thesis, Paris 6, 2014. http://www.theses.fr/2014PA066385/document.
Full textAbstract:
La physiopathologie de la GVHa implique de nombreux mécanismes aboutissant à ces lésions tissulaires responsables d'une comorbidité majeure en allo-CSH. L'objectif principal de notre étude a été d'identifier des marqueurs précoces de GVHa et d'explorer leurs rôles dans la physiopathologie de ce phénomène. Quarante-deux cytokines ou chémokines, ont été étudiés à J0 dans le sérum de 109 patients allogreffés avec un conditionnement d'intensité réduite. Nous avons complété ce travail par une étude cinétique à différents temps de l'allo-CSH et une étude histologique de biopsies coliques de patients atteints de GVHa. A J0 de l'allo-CSH, seule la mesure de CX3CL1 J0 était significativement plus élevée chez les patients développant par la suite une GVHa en comparaison aux patients indemnes de GVHa (P=0 ,04). Cette observation persistait à J30 et J50 post allo-CSH mais pas à J100 (P=0,02, P=0,03 et P=0,12, respectivement). L'étude des dosages sériques avant le conditionnement (J-30) ne retrouvait pas de différence significative entre ces 2 groupes. L'analyse phénotypique des différents types cellulaires a mis en évidence une augmentation signification de la proportion de lymphocytes CD8+CX3CR1+ chez les patients présentant une GVHa (P=0,01). L'analyse histologique de biopsies coliques (n=12) montrait une nette augmentation de l'expression de CX3CL1 au niveau des cellules épithéliales de la muqueuse intestinale en cas de GVHa ainsi que la présence de cellules mononuclées CX3CR1+ aux contacts de ces cellules épithéliales. Les résultats de cette étude suggèrent fortement l'implication de CX3CL1 et de son récepteur CX3CR1 dans la physiopathologie de la GVHaThis study investigated the role of cytokines and chemokines in acute graft-versus host disease (aGVHD) incidence and severity in 109 patients who underwent reduced-intensity conditioning allogeneic stem cell transplantation (HSCT). Among the 42 cytokines tested at day 0, only CX3CL1 levels at day 0 was significantly associated with grades II to IV aGVHD development (P=0.04). Increased levels of CX3CL1 at day 30 and day 50 post-HSCT were also significantly associated with aGVHD (P=0.02 and P=0.03, respectively). No such association was found before conditioning regimen or at day 100 post-HSCT. Because the receptor for CX3CL1 is CX3CR1, the number of CX3CR1+ cells was determined by flow cytometry. The CX3CR1+CD8+T cell proportion was significantly higher in patients with aGVHD than those without aGVHD (P=0.01). To investigate the distribution of the CX3CL1/CX3CR1 axis in the anatomic sites of aGVHD, CX3CL1 and CX3CR1 levels were studied using an in situ immunohistochemical analysis on gastro-intestinal biospsies of patients with intestinal aGVHD. CX3CL1 expression was significantly increased in the epithelial cells and mononuclear cells of the lamina propria. CX3CR1+ cells mononuclear cells were identified in close contact with epithelial cells. These findings strongly suggest the implication of the CX3CL1/CX3CR1 axis in the pathogenesis of aGVHD