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Dissertations / Theses on the topic 'Haploïdie'
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Ghaemi, Maryam. "Androgenèse in vitro chez le blé dur (Triticum turgidum L. ) : études des facteurs génétiques et environnementaux : [thèse en partie soutenue sur un ensemble de travaux]." Toulouse, INPT, 1994. http://www.theses.fr/1994INPT021A.
Full textAbstract:
Le ble dur est considere comme une espece recalcitrante a l'androgenese. Etant donne le faible taux de plantules obtenues par l'androgenese, l'utilisation de cette methode reste limitee pour cette espece. Nos travaux de recherche consistaient a etudier d'une part, l'influence des facteurs genetiques et, d'autre part, l'effet de quelques facteurs externes sur la culture d'antheres du ble dur. Les resultats issus des etudes genetiques peuvent etre resumes de la facon suivante: parmi les genotypes de ble dur testes, ensat-508 et dicoccoides noir se sont reveles les plus performants. L'androgenese est influencee par le noyau, le cytoplasme et leur interactions. Le genome d provenant de t. Taushii ameliore la regeneration chlorophyllienne chez le ble dur. Les chromosomes 1a, 7a, 1b, 5b, 1d et 2d sont impliques dans l'embryogenese ; 2d et 7d dans la regeneration chlorophyllienne et le chromosome 2d dans la regeneration totale. La regeneration chlorophyllienne a ete ameliore chez les hybrides f1 provenant des croisements entre les bles tetraploides et hexaploides. Les etudes concernant les facteurs externes ont revele que l'embryogenese, chez le ble dur, peut etre amelioree par l'emploi du milieu solide p2 en y additionnant de l'acide phenylacetique du nitrate d'argent ou du sulfate de cuivre et par utilisation de l'ancymidol en milieu liquide. Un pretraitement au froid des epis suivi d'une mise en culture des antheres sur milieu liquide p2, semble favoriser la regeneration chlorophyllienne. Par ce traitement, une plantule verte pour 100 antheres a ete obtenue pour le genotype ensat-508. Nous pouvons conclure que l'androgenese chez le ble dur peut etre amelioree par le biais des facteurs genetiques et par les facteurs externes
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Song, Yuan-Chun. "Sac embryonnaire et embryons zygotiques chez le maïs (Z. Mays) : méthode d'isolement in vitro et recherche de marqueurs protéiques." Lyon 1, 1991. http://www.theses.fr/1991LYO10058.
Full textAbstract:
Une mise au point bibliographique sur les techniques de transfert direct d'adn dans les cellules vegetales et les possibilites de regeneration in vitro des cereales montre que la microinjection ou la biolistique sont deux techniques a privilegier pour transferer des genes. L'identification des gametes femelles realisee par observation cytologique a necessite l'isolement du gametophyte viable (sac embryonnaire) par voie enzymatique. Des sacs embryonnaires (3000) et des embryons viables a divers stades de developpement ont ete prepares et stockes. Ceci a permis une premiere caracterisation biochimique (extraction et electrophorese des proteines, sds-page et ief) du sac embryonnaire et des embryons. Nos resultats montrent qu'il existe, des proteines specifiques des gametophytes femelles (ief: trois bandes, pi 5. 2-6. 5, pi 8. 6-9. 3) et de quelques stades embryonnaires, 5, 5-10, 60 jours apres pollinisation (jap) (5 jap: pi8. 45, deux bandes 30-67 kd; 5-10 jap: pi 5. 85; 60 jap: deux bandes pi 6. 85-8. 15, six bandes 15-67 kd)
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Devaux, Pierre. "Les plantes haploïdes chez l'orge, avec extension au blé : méthodes d'obtention et relations avec l'organisation de leur génome." Lille 1, 1998. https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Th_Num/1998/50376-1998-153.pdf.
Full textAbstract:
Notre recherche a ete realisee sur les haploides doubles d'orge et, dans une moindre mesure, sur ceux du ble tendre. Pour assurer la production reguliere de plantes haploides doublees d'orge a partir d'un fond genetique et environnemental variable, il est demontre que les techniques d'haplodiploidisation, que sont le croisement interspecifique avec hordeum bulbosum l. (methode h. Bulbosum) et la culture d'antheres, sont a utiliser en parallele. Chez le ble, par contre, le croisement intergenerique avec le mais a montre un avantage extraordinaire. Cette technique peut donc etre utilisee seule pour une production importante d'haploides doubles. Cette premiere partie methodologique nous a amene a approfondir les deux methodes d'haplodiploidisation chez l'orge en tant que systeme genetique dans trois domaines de la genetique moleculaire, la mutation, la methylation de l'adn et la cartographie comparee. Le taux de mutation ponctuelle induit lors de la production des haploides doubles est inferieur a 0,25 10##5. Par contre, le niveau de methylation de l'adn est altere dans les lignees haploides doublees obtenues par culture d'antheres et, a un moindre degre, dans celles issues de la methode h. Bulbosum. La cartographie comparee d'haploides doubles obtenus par voie male (culture d'antheres) et femelle (methode h. Bulbosum) degage un exces de recombinaison dans la meiose male par rapport a la meiose femelle. Nous avons enfin montre que les phases de culture in vitro agissent sur la distribution des genotypes de gametophytes a la suite de la selection gametophytique et/ou sporophytique. En effet, les lignees haploides doublees obtenues par culture d'antheres presentent davantage de segregations deviees que celles obtenues par la methode h. Bulbosum. Dans le contexte de l'amelioration, ce phenomene nous apparait comme indesirable, mais il nous a permis d'identifier des marqueurs moleculaires de genes intervenant dans l'aptitude a la culture d'antheres chez l'orge.
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El, Mokadem Hoda. "Haploi͏̈disation des rosiers, comportement des dihaploi͏̈des de Rosa Hybrida L. Et utilisations à des fins de sélection et d'analyses génétiques." Toulouse, INPT, 2001. http://www.theses.fr/2001INPT003A.
Full textAbstract:
L'haploi͏̈disation du rosier cultivé tétraploi͏̈de, R. Hybrida L. , est essentielle pour : faciliter l'accès aux ressources génétiques contenues dans les espèces diploi͏̈des, apporter de nouvelles connaissances notament en matière de reproduction sexuée et de génétique. Trois étapes ont été développées : 1) Les essais d'optimisation de la méthode d'haploi͏̈disation par parthénogénèse in situ induite par du pollen irradié ont montré l'intérêt d'un traitemnet des embryons par le froid et surtout du choix des rosiers tétraploi͏̈des de départ, une corrélation a été établie entre l'aptitude à la parthénogénèse et la fécondité de génotypes donneurs. Des Plantes gynogénétiques (4x) ont été obtenues chez Rosa canina L. Par cette même méthode. 2) Au cours de la méiose mâle, les seules anomalies observées ont porté sur des co-orientations des fuseaux achromatiques conduisant à la formation de diades ou de triades puis de 2n-pollen de type FDR (First Division Restitution). Les hybridations des dihaploi͏̈des avec 6 espèces sauvages diploi͏̈des et des rosiers tétraplod͏̈es ont confirmé l'existence de 2n-pollen et révélé la formation de 2n-ovules, accompagnés d'ovules 3n ou 4n. La distribution des ovules selon leurs niveaux de ploi͏̈die a defini un profil caractéristique de chaque génotype dihaploi͏̈de. Il est apparu qu'une forte pression de sélection avantageait les 2n-gamètes, notamment lorsque le partenaire sexuel est tétraploi͏̈de. 3) Des hybrides entre dihaploi͏̈des et chacune des 6 espèces sauvages ont été obtenus. Leur fertilité et leur production de 2n-gamètes ouvrent de larges perspectives pour leur utilisation dans le cadre de programme de sélection au niveau diploi͏̈de avant d'envisager un retour au niveau tétraploi͏̈de par polyploi͏̈disation sexuelle. Les familles hybrides ont pu être utilisées pour l'étude de l'héridité de quelques caractères phénotypiques. Un matériel végétal original, nombreux et diversifié peut être exploité à des fins de sélection et d'analyse génétique et moléculaire.
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Lanaud, Claire. "Nouvelles données sur la biologie du cacaoyer (Theobroma cacao L. ) : diversité des populations, système d'incompatibilité, haploides spontanés : leurs conséquences pour l'amélioration génétique de cette espèce." Paris 11, 1987. http://www.theses.fr/1987PA112294.
Full textAbstract:
Plusieurs aspects de la biologie du cacaoyer impliqués dans son amélioration ont été abordés dans cette étude. Les techniques d'électrophorèse enzymatique ont été développées pour acquérir de nouveaux marqueurs génétiques, et ont permis d'identifier 9 loci polymorphes représentant 31 allèles possibles. Les études de diversité, faites sur différentes populations de cacaoyers sauvages et cultivés de provenances variées, ont montré la variabilité importante rencontrée dans l'espèce, et notamment parmi celles originaires de Haute Amazonie, ainsi que l'originalité d'autres populations. Des premières observations ont pu être faites sur la fixation possible, et plus ou moins complète de certains allèles dans de vraies populations sauvages observées en Guyane et au Venezuela. L'étude du fonctionnement du système d’incompatibilité, de type garréto-sporophytique, met en évidence la nature quantitative de la réaction d'incompatibilité: les interactions, créées par un mélange de pollen compatible et incompatible, en traînent une levée partielle de la réaction d’incompatibilité. Leur intensité dépend à la fois de la nature génétique et des proportions d'allopollen compatible et d'autopollen incompatible apportés en mélange sur les fleurs. En champs semenciers biclonaux où de telles pollinisations mixtes sont fréquentes, nous avons pu observer à l'aide des marqueurs enzymatiques, des taux souvent élevés de fèves, issues de l'autofécondation des géniteurs habituellement auto incompatibles lorsqu'ils ne sont pollinisés, de façon contrôlée, qu’avec leur propre pollen. L'étude des haploïdes spontanés de cacaoyer montre que leur origine est en partie liée à un phénomène de semigamie. A l’état haploïde doublé, des effets défavorables, dus probablement à leur état homozygote, peuvent se manifester sur tous les caractères, mais ne semblent pas être transmis aux descendants. Les haploïdes doublés issus d'un même génotype hétérozygote sont très variables et permettent la sélection de géniteurs plus performants que le parent d'origine; cependant, leur utilisation dans les pr0granmes d’amélioration se heurte encore à l'absence d'une méthode d'obtention d'haploïdes plus efficace. Ces résultats apportent des informations à la fois pour l'orientation des schémas de sélection et la diffusion du matériel végétal sélectionné; ils mettent l'accent sur la faible part de diversité génétique exploitée jusqu'à présent, et sur l'originalité du système d’incompatibilité chez le cacaoyer; ils montrent la nécessité d'un contrôle rigoureux des phénomènes d'incompatibilité dans les conditions naturelles de champs semencier, si l'on veut valoriser au maximum les sélections faites. Enfin, ils permettent une meilleure connaissance de la structure des populations et des conséquences que cela implique pour la gestion des ressources génétiques de cette espèceSome aspects of the biology of cocoa tree were studied for their breeding implications. Isozymes electrophoresis was developed to obtain new genetic markers. 9 polymorphic loci and 31 alleles were identified. Studies on the diversity between wild and cultivated populations from various origins revealed large species variability, particularly among Upper Amazon populations. A study on the mechanisms of incompatibility showed different levels of expression when a mixture of incompatible and compatible pollen was used, a partial inhibition of incompatibility, due to their interactions, was observed. The degree of inhibition depended both on the genetic constitution and on the relative proportions of compatible and incompatible pollen mixed on the flowers. In hybrid seeds gardens, where mixed pollinations were frequent, the use of isozymes demonstrated a high level of self-fertilized seeds in progenitors usually incompatible when only pollinated with their own pollen. The origin of spontaneous haploids depended partially on semigamy. Probably due to hamozygosity, depressive effects appeared in many characteristics for doubled haploids, but this was not transmitted in progeny. Different doubled haploid were obtained from a heterozygous genotype thus allowing the opportunity to choose better progenitors than the parent. Meanwhile the use of haploids in a breeding program was limited by a lack of efficiency to obtain them. Results obtained gave information to design new breeding schemes and to assure the multiplication of selected seeds. They emphasize the small part of the genetic diversity of cocoa tree used hitherto. Because of the originality of incompatibility system and in order to valorize cocoa breeding a rigorous control in biclonal seeds gardens must be applied. A better knowledge of population genetics was obtained and consequences for genetic resources management for this species were discussed
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Ricci, Sébastien. "Stratégies d’hybridation entre rosiers sauvages et cultivés : approches génétique, cytologique et moléculaire." Aix-Marseille 3, 2008. http://www.theses.fr/2008AIX30025.
Full textAbstract:
Les flux de gènes entre espèces sauvages et cultivées nécessitent chez le rosier le contournement des différences de niveaux de ploïdie. L’utilisation d’un intermédiaire triploïde fertile en tant que pont génétique semble prometteuse. Ces individus présentent une méiose particulière (production de gamètes haploïdes et diploïdes simultanément), et le transfert de gènes issus du parent sauvage via des gamètes diploïdes a été prouvé. Le doublement chromosomique in vitro d’espèces sauvages diploïdes, ainsi que l’haploïdisation de cultivars tétraploïdes sont génotypes-dépendants, les taux de réussite restant faibles. L’utilisation de gamètes non réduits semble être une voie intéressante, malgré la complexité et la variabilité du caractère. Des gènes de cyclines, RhCYCB1;1 et RhCYCB2;1, potentiellement impliqués dans la régulation de mécanismes méiotiques, ont été isolés. Ils pourraient être de bons marqueurs pour étudier l’effet des conditions environnementales sur la microsporogénèseGene flow between diploid wild rose species and tetraploid cultivars, requires to overcome ploidy barriers. Use of fertile triploid hybrid as genetic bridge seems to be promising. These hybrids show particular meiosis (production of both haploid and diploid pollen), and allow gene flow between diploid parent and tetraploid descendants via diploid gametes. In vitro chromosome doubling of diploid wild species, or haploïdisation of tetraploid cultivars appeared genotype-dependent, and success rates are still low. Use of unreduced gametes produced by diploid genotypes seems to be an attractive way, despite the complexity and the variability of this trait, which is largely susceptible to environmental conditions. Genes coding for cyclins, RhCYCB1;1 and RhCYCB2;1, potentially involved in meiosis control, were isolated. These could allow studies of how environmental conditions affect microsporogenesis
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Rivera, Nava Juana Laura. "Stratégie mère porteuse chez Cupressus dupreziana A. Camus (cyprès du Tassili) : analyse, conséquences et perspectives." Aix-Marseille 3, 2008. http://www.theses.fr/2008AIX30019.
Full textAbstract:
La reproduction par apomixie paternelle a été mise en évidence chez une des espèces ligneuses les plus menacées du monde, le cyprès du Tassili (Cupressus dupreziana A. Camus, 233 individus dans l'aire naturelle), originaire du plateau du Tassili N'Ajjer en Algérie. Les descendances issues de graines de C. Dupreziana récoltées dans l'aire naturelle ou en collection dans le sud-est de la France ont été caractérisées pour leur morphologie, leur niveau de ploïdie, leur génotype microsatellite nucléaire, la production et la viabilité des cônes mâles, la croissance et la phyllotaxie. Environ 50% des descendants issus de pollinisation libre de C. Dupreziana ex-situ sont des cyprès du Tassili. Les autres descendants sont des cyprès verts, C. Sempervirens, soit haploïdes soit diploïdes, ces derniers étant le plus souvent homozygotes. Les individus haploïdes proviennent d'une androgenèse in planta à partir du pollen haploïde du cyprès vert. Ils se caractérisent par un allongement faible, des entre-nœuds très courts et un passage plus rapide de la phyllotaxie verticillée par 4 à celle verticillée par 3 et par 2. Les individus diploïdes homozygotes seraient issus d'une haplo-diploïdisation spontanée ou de la fusion de deux gamètes mâles. Leur déficit de vigueur est moins prononcé. Ces cyprès verts androgénétiques expriment aussi des anomalies de microsporogenèse et sont de bons candidats pour la sélection de variétés non pollinisantes. L'analyse de la diversité génétique chez C. Dupreziana met en évidence une très faible diversité entre arbres et une très forte hétérozygotie individuelle. Ce résultat inhabituel chez une espèce menacée est révélateur d'une reproduction par apomixie. Le cyprès du Tassili est une espèce en sursisPaternal apomixis was demonstrated in one of the most endangered woody species in the world, Tassili cypress (Cupressus dupreziana A. Camus, 233 individuals in the natural area), which originates from Tassili N'Ajjer plateau in Algeria. Offspring produced by C. Dupreziana seeds harvested from the natural area or from collections in south eastern France were characterized by their morphology, their ploidy level, their nuclear microsatellite genotype, the production and viability of their male cones, their growth and phyllotaxy. Approximately 50% of progeny from ex-situ open-pollinated C. Dupreziana were Tassili cypress. The other half were common cypress (C. Sempervirens) seedlings, either haploid or diploid, the latter being most often homozygous. Haploid individuals were produced by in planta androgenesis from haploid pollen of common cypress. They were characterized by a weak elongation, very short internodes and an earlier switch from whorled phyllotaxy 4 to whorled phyllotaxy 3 and 2. The more vigorous diploid homozygous individuals probably derive either from a spontaneous haplo-diploidisation or from the fusion of two male gametes. These androgenic common cypress individuals also expressed microsporogenesis anomalies and are good candidates for the selection of pollen-free varieties. The genetic diversity analysis in C. Dupreziana showed a very weak diversity among trees and a very strong individual heterozygosity. This unusual result for an endangered species is indicative of reproduction by apomixis. The Tassili cypress is living on borrowed time
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Sauton, Annie. "Recherche d'haploi͏̈des chez le melon (Cucumis melo L. ) : étude et application à la sélection de la parthénogénèse induite par du pollen irradié." Montpellier 2, 1987. http://www.theses.fr/1987MON20045.
Full textAbstract:
Cette etude porte sur la recherche, chez le melon, d'une methode d'hhaplodiploidisation produisant un rendement en haploides doubles suffisant et regulier pour etre utilisable en selection. Trois voies ont ete experimentees : l'androgenese in vitro, la gynogenese in vitro, la parthenogenese induite in situ par du pollen irradie. En culture d'anthere, des structures pluricellulaires ont ete observees dans les microspores mais n'ont pas poursuivi leur developpement. En culture d'ovules non fecondes, aucune induction gynogenetique n'a ete revelee. L'utilisation du pollen irradie aux rayons gamma a permis l'induction de la parthenogenese haploide. La dose d'irradiation necessaire pour empecher la fecondite est de 30 krads
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Esteves, Patricio. "Optimisation de la culture de microspores isolées chez les orges de printemps à six rangs." Thesis, Université Laval, 2014. http://www.theses.ulaval.ca/2014/30476/30476.pdf.
Full textAbstract:
Les plantes haploïdes doublées (HD) sont des individus complètement homozygotes qui peuvent être obtenus via l’androgenèse in vitro. Les HD sont très appréciés comme outils de recherche en génétique et en amélioration végétale. La culture de microspores isolées (CMI) est le moyen le plus efficace de produire des HD. Malheureusement, les orges de printemps à six rangs, le type prédominant cultivé dans l’Est du Canada, sont considérées comme récalcitrantes à cause d’une faible embryogenèse et d’une propension à l’albinisme. Notre objectif était de développer un protocole CMI adapté à ce type d’orge. Nous avons entamé des travaux exploratoires sur quatre cultivars : ACCA et Léger (six rangs, printemps), Gobernadora (deux rangs, printemps) et Igri (deux rangs, hiver). Dans une première phase, nous avons évalué l’impact de quatre facteurs physiques. Nous avons trouvé que l’optimisation du stade de récolte des tiges pouvait augmenter de 2 à 4 fois la récolte de microspores embryogéniques. Deuxièmement, deux des prétraitements (0,3 M mannitol pendant 2 jours et une combinaison de froid et de chaleur pendant 15 jours) ont tous deux été significativement plus productifs qu’un prétraitement très largement employé (28 jours à 4 °C). Troisièmement, l’ajout de mannitol au milieu d’induction a permis de doubler le nombre de plantes vertes obtenues. Finalement, la densité des microspores à l’étalement a eu un impact significatif sur l’obtention de plantes vertes, 106 microspores/ml s’étant avéré optimal. Dans une deuxième phase, nous avons exploré l’utilisation de régulateurs de croissance alternatifs tant dans le milieu d’induction (thidiazuron et dicamba) que de régénération (meta-topoline). Comparativement à des milieux témoins contenant principalement la 6-benzyl-aminopurine, nos milieux d’induction ont produit 5,1 fois plus de plantes vertes, principalement par réduction de l’albinisme. Notre milieu de régénération amélioré a permis d’obtenir 2,9 fois plus de plantes vertes que le témoin. Finalement, ces résultats ont été validés avec succès sur des génotypes F1 d’un programme d’amélioration. Au terme de ce travail, nous avons ainsi réussi à améliorer substantiellement l’efficacité de la CMI chez les orges de printemps à six rangs.Doubled haploid (DH) plants are completely homozygous individuals that can be generated via in vitro androgenesis. DHs are useful as research tools both for genetic studies and in plant breeding. Isolated microspore culture (IMC) is the most efficient way to produce DHs. Unfortunately, six-row spring barley genotypes, the main type produced in Eastern Canada, are considered recalcitrant because of a low embryogenesis and a high rate of albinism. Our objective was to develop an IMC protocol more suitable to this type of barley. We carried out exploratory work on four barley cultivars: ACCA and Léger (six-row, spring), Gobernadora (two-row, spring) and Igri (two-row, winter). In a first phase, we explored four factors. First, we found that a 2-4-fold increase in the yield of embryogenic microspores is possible by optimizing the harvest stage for each genotype. Second, two pretreatments (0.3M mannitol for 2 days or a combination of cold and heat over 15 days) both performed significantly better than the commonly used cold pretreatment (28 days at 4°C). Third, an induction medium containing mannitol doubled green plant regeneration. Fourth, we observed a marked effect of microspore plating density on the number of green plants obtained, with 106 microspores/ml yielding the best results. In a second phase we explored the use of alternative growth regulators both in the induction medium (thidiazuron and dicamba) and in the regeneration medium (meta-topoline). Compared to control media containing 6-benzyl-aminopurine, our improved induction medium lead to a 5.1-fold increase in green plant production, mainly achieved by reducing albinism. Similarly, our regeneration medium yielded 2.9-fold more green plants than the control. Finally, these results were successfully validated using F1 genotypes from a breeding program. On the whole, we have succeeded in substantially improving the efficiency of IMC in this type of recalcitrant barley.
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Chair, Hâna. "Transformation génétique de protoplastes de variétés méditerranéennes de riz (Oryza sativa L. )." Montpellier 2, 1995. http://www.theses.fr/1995MON20014.
Full textAbstract:
Dans le but de transformer les varietes mediterraneennes de riz, deux techniques ont ete testees. La technique d'electroporation n'a pas permis d'avoir des expressions transitoires reproductibles. Par contre, une technique de transfert direct de genes utilisant le polyethylene-glycol (peg) a ete adaptee aux protoplastes haploides des varietes ariete et miara. Elle a permis l'obtention de plantes transformees a des frequences de 0. 1 a 3. 2 10#-#6. Afin d'augmenter la frequence d'integration et d'expression des genes transferes, differents facteurs ont ete etudies. La comparaison des systemes de selection bases sur une resistance a la geneticine, a l'hygromycine et au glufosinate d'ammonium conferee par le transfert des genes de selection nptii, hph et bar a montre que les frequences de transformation les plus elevees sont obtenues quand le gene bar est utilise. L'activite de differents promoteurs, utilises actuellement pour la transformation des cereales, a ete comparee dans les protoplastes par mesure de l'activite transitoire de la b-glucuronidase. Cette etude a montre une plus grande efficacite du promoteur ubiquitine du mais mais egalement une activite elevee du promoteur 6are-4ocs-adh-adh1. La strategie de cotransformation utilisant un rapport 2/1 entre le gene rapporteur et le gene marqueur a permis d'obtenir les efficacites de cotransformation les plus elevees, avec des frequences de coexpression des 2 genes de 60%. Apres analyse par cytometrie en flux des plantes transgeniques, il est apparu que le traitement au peg des protoplastes induit une augmentation de leur niveau de ploidie. Les profils d'integration des genes transferes dans les plantes, analyses par la technique southern blot, se sont reveles aussi complexes que ceux obtenus apres transformation de materiel d'origine somatique ou obtenus par d'autres methodes de transfert
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Geoffriau, Emmanuel. "Aptitude de l'oignon (Allium cepa L. ) à la gynogenèse et analyse de facteurs impliqués dans le processus d'haplodiploi͏̈disation." Toulouse 3, 1996. http://www.theses.fr/1996TOU30275.
Full textAbstract:
Etant donne les contraintes biologiques de l'espece, l'haplodiploidisation est un outil unique pour l'obtention de lignees chez l'oignon. L'objectif de ce travail est d'etudier les faceurs intervenant dans l'aptitude a la gynogenese, et d'ameliorer le procede pour une utilisation en creation varietale. Les experimentations de gynogenese s'effectuent in vitro, sur des varietes d'oignon de jours longs. Les taux d'embryons et de regeneration restent globalement faibles (2,5 et 1,3% respectivement), et aucun traitement n'a permis de supprimer l'effet variete tres marque (0 a 17% d'embryons). Au sein des varietes, un effet genotype de la plante est mis en evidence. Une augmentation significative du taux d'obtention d'embryons et de plantules gynogenetiques est obtenue par l'ajout de polyamines dans le milieu d'induction. Dans nos conditions, les teneurs en polyamines des boutons floraux constituent un marqueur de l'aptitude a la gynogenese, qui serait liee a leur regulation. Un ratio put+ohput+homospd/spd+spm faible semble caracteriser les varietes plus reactives. Deux methodes de doublement chromosomique in vitro ont ete mises au point, sur explants de multiplication ou sur plantules individuelles. L'efficacite de doublement depend du genotype et peut atteindre 72%. Les clones diploides spontanes presentent une reduction legere de vigueur et de fertilite par rapport aux varietes donneuses. En presence de polymorphisme, nous avons verifie pour certains leur origine gynogenetique, grace aux marqueurs esterases et rapd. La qualite agronomique des lignees haploides doubles produites permet d'envisager l'utilisation de la gynogenese dans les schemas de selection. Des pistes d'ameliorations sont proposees afin de valoriser pleinement l'haplodiploidisation chez l'oignon
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Mezzarobba, Antoine. "L'androgénèse "in vitro" chez le tournesol cultivé (Helianthus annuus L. )." Montpellier 2, 1988. http://www.theses.fr/1988MON20057.
Full textAbstract:
L'isolement in vitro d'antheres de tournesol cultive (helianthus annuus l. ) a un stade jeune du developpement de la microspore, a permis d'obtenir des embryons a des frequences elevees. Un traitement thermique a 35#oc et a l'obscurite pendant les 12 premiers jours de culture des antheres, augmente significativement le rendement en embryons. Le developpement de ces embryons a fourni des plantes diploides, haploides et mixoploides. . .
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Houdan, Aude. "Cycle biologique et stratégies de développement chez les coccolithophores (Prymnesiophyceae, Haptophyta) . Implications écologiques." Phd thesis, Université de Caen, 2003. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00009000.
Full textAbstract:
Les coccolithophores sont des microalgues calcifiées constituant un des principaux groupes phytoplanctoniques marins. Ces organismes restent cependant encore mal connus, du fait du peu d'espèces cultivées. Dans ce travail, les connaissances sur la biologie et l'écologie de ce groupe ont été approfondies à travers l'étude du cycle de vie et de ses implications écologiques pour quatre coccolithophores en culture : Coccolithus pelagicus, Calcidiscus leptoporus, Coronosphaera mediterranea et Emiliania huxleyi. Un cycle digénétique haplo-diplophasique hétéromorphe a d'abord été démontré par différentes techniques. Des expériences écophysiologiques sur des facteurs abiotiques (température, lumière, turbulence, nutriments) ont ensuite permis d'émettre des hypothèses sur l'influence du cycle digénétique sur l'écologie de ces espèces et d'établir un cycle écologique. Enfin, une étude préliminaire de la toxicité a été réalisée, démontrant la toxicité de cinq espèces côtières de coccolithophores.
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Doré, Claire. "Intégration de la culture in vitro dans les méthodes de sélection de plusieurs espèces potagères." Paris 11, 1987. http://www.theses.fr/1987PA112402.
Full textAbstract:
Pour traduire les progrès de la biologie végétale sous forme d’innovations pratique pour l’amélioration de plusieurs espèces potagères, nous avons utilisé diverses méthodes de culture in vitro en les adaptant à chaque espèce, en recherchant leur niveau optimal d’intégration et leur intérêt réel dans la méthodologie de la sélection. Une première partie concerne différentes méthodes de production de génotypes d’élite : 1) L’haplodiploïdisation a été mise au point et pratiquée depuis la culture d'anthères in vitro jusqu'à l'évaluation agronomique. Chez l'Asperge, on obtient des plantes femelles et des plantes supermâles. Ces dernières permettent d'obtenir des hybrides F1 mâles dont l'intérêt est confirmé ici. Chez le Chou, l'originalité et la valeur des lignées haploïdes doublées ont pu être également démontrées. 2) La culture d'embryons immatures de Ph. Vulgaris x Ph. Angustissimus et leur traitement à la colchicine in vitro ont permis d’obtenir amphiploïde correspondant. De même, l'amphiploïde Allium cepa x A. Psekemense a été obtenu. 3) La culture de pétioles de Chou inoculée par Agrobacterium rhizogenes a permis de régénérer des plantes transformées ayant intégré un fragment de la région TL du plasmide Ri. Une deuxième partie concerne des méthodes de multiplication végétative pour des génotypes d'élite. La ré acquisition des potentialités juvéniles chez l'Asperge conduit à l'induction des griffes in vitro et le clonage des géniteurs a permis de diffuser un nouveau type de variété. Le retour de l'état préfloral à l'état végétatif est un préalable à la multiplication active chez des espèces où le prélèvement est tardif (Poireau et Laitue). L'entretien de l'activité des méristèmes axillaires latents du plateau basal des plantules d'Allium permet de réaliser des cycles successifs de multiplication. L'intérêt, le coût, les limites et les perspectives sont ensuite discutés pour chaque méthode. L'utilisation pratique des cultures in vitro est donc devenue une réalité dans les méthodes de sélection de plusieurs espèces potagères qui se traduit par des innovations variétales notammentTo express plant biology progresses into practical innovations for the improvement of several vegetable crops, we used different in vitro culture methods. Therefore, we adapted them to each species, looked for their best integration level and their real interest within breeding methodology. The first part is devoted to several methods to produce elite genotypes: 1) Haplodiploidization was found out and practiced from in vitro anther culture until agronomical evaluation. In Asparagus, female and supermale plants were achieved. Supermale plants allowed to obtain male F1 hybrids the interest of which was here confirmed. In Cabbage, originality and worth of doubled haploid lines could be also demonstrated. 2) Immature embryo culture of Ph. Vulgaris x Ph angustissimus and in vitro colchicine treatment allowed to achieve the corresponding amphiploid. Samely, amphiploid Allium cepa x A. Psekemense was obtained. 3) Cabbage petiole culture inoculated with Agrobacterium rhizogenes allowed to regenerate transformed plants, with a TL region of the Ri plasmid. The second part concerns vegetative multiplication method for elite genotypes. In Asparagus, reacquiring juvenile potentialities led to induce crowns in vitro, and genitor cloning made possible the release of a new type of variety. The return from prefloral state to vegetative state is a preliminary for active multiplication for species where picking is necessarily late (Leek and Lettuce)Maintaining the activity of latent axillary meristems located on basis of Allium plantlet bulbs allowed to achieve successive multiplication cycles. The interest, cast, limits and future prospects are then discussed for each method. So in vitro culture practical use has become a reality for several vegetable crop improvement, expressed especially by variety innovations
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Meunier, Élisabeth. "Comportement en autofécondation et en croisement de lignées haploïdes doublées issues par androgénèse, gynogénèse et croisement interspécifique d'une lignée haploïde doublée d'orge (Hordeum vulgare)." Paris 11, 1985. http://www.theses.fr/1985PA112254.
Full textAbstract:
Par trois haplométhodes différentes nous avons obtenu à partir d'une lignée haploïde doublée gynogénétique issue de la variété lignée pure d'orge de printemps Bérénice, dix-neuf lignées haploïdes doublées quatre par androgenèse, deux par gynogenèse et treize par croisement avec l'espèce d'orge sauvage Hordeum bulbosum. Quinze d'entre elles se sont révélées différentes de la lignée gynogénétique témoin. Aucune ne manifestait de performance inférieure à celle du témoin. Il n'apparaît pas de type de variation particulier chez ces lignées en fonction de la méthode utilisée pour les obtenir. Les variations mises en évidence sont de second ordre par rapport à celles manifestées par une lignée androgénétique issue directement de Bérénice. D'après les résultats d'un croisement diallèle réalisé entre huit parents dont Bérénice, la lignée gynogénétique témoin et six lignées haploïdes doublées issues respectivement de chacune d'elle, les variations observées chez la lignée androgénétique issue de Bérénice seraient d'origine nucléaires celles observées chez les autres lignées haploïdes doublées seraient pour une grande part liées à des modifications cytoplasmiquesThree different haplomethods were used on a doub1ed haploid line obtained through ovary culture from Bérénice pure line variety (spring barley). Of the 19 doubled haploid lines obtained, four were by another culture, two by ovary culture and 13 through an interspecific cross with Hordeum bulbosum, a wild barley species. 15 were different from their original source line; none of them was inferior to it. No particular type of variation could be detected among these lines as to the way they were obtained. The observed variations were much less important than those observed on an androgenetic line directly obtained from Bérénice. A diallel cross was carried out between 8 parents: Bérénice, the gynogenetic source line, and 6 doubled haploid lines which were obtained from the two former lines. This suggests that the variations observed in the androgenetic line from Bérénice are of nuclear origin, while those observed in the other lines are mostly due to cytoplasmic modifications
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Chambon, Catherine. "Application de biotechnologies végétales au genre lavandula, en vue de l'amélioration génétique du lavandin." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1992. http://www.theses.fr/1992INPL083N.
Full textAbstract:
Ce travail présente, chez le genre lavandula, l'établissement de plusieurs biotechnologies en vue de l'amélioration du lavandin. La micropropagation conforme in vitro à partir d'apex a donc été obtenue par détermination des milieux de culture et étude des capacités morphogénétiques de divers génotypes de lavandes et lavandins. L'efficacité de la technique a permis la production et l'implantation de 45 000 vitroplants. Leur conformité vis-à-vis du matériel de départ a été vérifiée au niveau de l'aspect, des performances agronomiques et des composantes chimiques. Un programme de rediversification génétique a aussi été entrepris par maitrise de la néoformation de bourgeons à partir de tissus et de cals. La variabilité de composition chimique a été mise en évidence chez ces individus, et l'on peut espérer des clones nouveaux et performants. Dans une troisième partie consacrée à l'haploidisation, trois méthodes ont été abordées: croisements interspécifiques, puis androgenèse et gynogenèse in vitro. Cette dernière voie s'est avérée la plus prometteuse et les étapes les plus favorables au développement des ovaires ont été déterminées. Par ailleurs, pour disposer en permanence de matériel fleuri, les conditions contrôlées de la mise à fleur ont également été définies
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Casado, Marie. "Studies of HEI10 dosage effect on the regulation of meiotic recombination in 2 Brassicaceae allopolyploid crops (C. sativa and B. napus)." Electronic Thesis or Diss., université Paris-Saclay, 2024. http://www.theses.fr/2024UPASB056.
Full textAbstract:
La méiose est un processus essentiel pour le maintien de la fertilité mais aussi la création de diversité par la génération de nouvelles combinaisons alléliques via les cross-overs (CO). Récemment, de plus en plus d’éléments insistent sur l’importance du dosage des protéines méiotiques dans la régulation de la formation des CO. Allant dans ce sens, j’ai étudié pendant ma thèse l’effet dosage de la protéine méiotique HEI10 sur la formation du nombre de CO, chez 2 Brassicacées allopolyploïdes : le colza et la cameline, présentant respectivement 5 et 3 copies d’HEI10. J’ai ainsi pu montrer qu’HEI10 est indispensable à la formation des CO de classe I chez la cameline ainsi que confirmer son effet dosage. Des résultats inattendus ont été obtenus pour de faibles doses d’HEI10, insistant sur l’apport des espèces polyploïdes pour de telles études. J’ai aussi travaillé sur la génération de lignées inductrices d’haploïdes, outils utiles pour l’étude de la recombinaison homéologues, chez ces 2 espèces en générant des lignées mutées dmpMeiotic regulation is an essential process not only for maintaining fertility, but also for creating diversity through the generation of new allelic combinations via cross-overs (CO). Recently, more and more evidence has emerged in support of the importance of meiotic protein dosage in the regulation of CO formation. With this in mind, during my thesis, I studied the effect of meiotic protein HEI10 dosage on CO formation in 2 allopolyploid Brassicaceae: rapeseed and camelina, with carry 5 and 3 copies of HEI10 respectively. I was thus able to show that HEI10 is essential for the formation of class I CO in camelina, and to confirm its dosage effect. Unexpected results were shown for low doses of HEI10, emphasizing the contribution of polyploid species for such studies. I also worked on the generation of haploid-inducing lines, useful tools for the study of homoeologous recombination, in these 2 species by generating dmp mutated lines
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Rescan, Marie. "Evolution des cycles de vie : modélisation et évolution expérimentale sur la levure Saccharomyces cerevisiae." Thesis, Paris 6, 2016. http://www.theses.fr/2016PA066523/document.
Full textAbstract:
La reproduction sexuée conduit à l'alternance d'une phase haploïde et d'une phase diploïde, dont la durée relative est très variable entre taxons. La proportion du cycle de vie passée en phase haploïde et en phase diploïde a d'importantes conséquences sur de nombreux processus adaptatifs. Cette thèse combine des approches théoriques qui explorent l'effet de facteurs génétiques et écologiques sur l'évolution des cycles de vie, et un travail expérimental sur l'effet de la ploidy sur l'évolution de l'isolement reproducteur entre populations. La partie théorique a consisté à intégrer des composantes écologiques dans des modèles génétiques pour l'évolution des cycles de vie. En particulier, j'ai exploré l'interaction entre la différenciation de niche entre haploïdes et diploïdes (qui favorise le maintien de cycles biphasiques, impliquant le développement des deux phases) et l'effet d'allèles délétères (qui favorisent soit l'haploïdie, soit la diploïdie). Tandis que la différentiation de niche (ou plus simplement, une différence de valeur sélective intrinsèque entre phases) stabilise les cycles intermédiaires, la présence d'allèles délétères conduit souvent à un branchement évolutif, avec la coexistence stable d'allèles codant pour l'haploïdie et la diploïdie. Cependant, des fluctuations temporelles de l'habitat permettent d'empêcher ce branchement et de stabiliser les cycles biphasiques. La partie expérimentale a consisté à comparer la dynamique de l'isolement reproducteur entre petites populations de levure haploïdes et de diploïdes avec de taux de mutations élevés. Les résultats montrent que tandis que les hybrides haploïdes ont une valeur sélective plus faible que leurs parents, les hybrides diploïdes bénéficient du phénomène d'hétérosis en génération F1, et ont encore une valeur sélective plus élevée que leurs parents en génération F2. La variance de la valeur sélective des hybrides était cependant beaucoup plus élevée chez les haploïdes, avec la production de certains génotypes très performantsSexual reproduction leads to an alternation between haploid and diploid phases, whose relative length varies widely across taxa. The proportion of the life cycle spent in the haploid and diploid phase has important consequences on a number of adaptive processes. This thesis combines theoretical approaches exploring the effect of genetic and ecological factors on the evolution of life cycles, and experimental work on the effects of ploidy on the evolution of reproductive isolation between populations. The theoretical part consisted in integrating ecological components into genetic models for the evolution of life cycles. In particular, I explored the interplay between niche differentiation between haploids and diploids (known to favour the maintenance of biphasic life cycles, involving development in both phases) and the effect of deleterious alleles (known to favour either haploid or diploid life cycles). While niche differentiation (or more simply intrinsic fitness differences between phases) stabilizes biphasic cycles, the presence of deleterious alleles often lead to evolutionary branching and to the stable coexistence of alleles coding for haploid and diploid cycles. Branching is prevented, however, when temporal environmental fluctuations are included into the model. The experimental part consisted in comparing the dynamics of reproductive isolation between small populations of haploid and diploid yeasts with elevated mutation rate. The results show that while haploid hybrids tend to have a lower fitness than their parents, diploid hybrids benefit from heterosis in the F1 generation, and still have a higher fitness than the diploid homozygous parents in the F2 generation. However, the variance of hybrid fitness was much higher in haploids, with the production of some highly fit genotypes
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Chalak, Lamis. "Haplodiploi͏̈sation et cultures cellulaires chez le kiwi (Actinidia deliciosa Cv. Hayward) : caractérisation préliminaire de matériels obtenus." Montpellier 2, 1995. http://www.theses.fr/1995MON20278.
Full textAbstract:
L'objet de cette these a ete d'etudier les possibilites d'haplodiploidisation et de cultures cellulaires chez le kiwi dans une optique a long terme d'integrer ces methodes dans les programmes de diversification varietale chez cette espece. La parthenogenese in situ induite par du pollen irradie aux rayons gamma a ete experimentee chez le cv. Hayward. Des plantes trihaploides ont pu etre obtenues par germination directe en serre. Le rendement en plantes trihaploides s'est revele largement different entre les deux pollens utilises. Pour le pollen le plus favorable et sans recourir a la culture in vitro, ce rendement peut etre estime a environ 100 trihaploides pour 100 fleurs pollinisees. Une etude moleculaire a l'aide de marqueurs isoenzymatiques et rapd a confirme l'origine maternelle des plantes trihaploides. Certains genotypes trihaploides, demeures stables in vivo, ont presente un doublement spontane a la suite d'une propagation par regeneration adventive a partir de petioles, alors que d'autres sont restes stables dans les memes conditions. Un trihalploide stable a fait l'objet de traitements antimitotiques in vitro de tiges et de feuilles, par la colchicine et l'oryzaline. Des plantes mixoploides, hexaploides et dodecaploides ont ete obtenues. L'application d'oryzaline a 5 m associee au processus de regeneration adventive est apparue comme un traitement optimal pour obtenir des doublements chromosomiques complets. Les experimentations de cultures cellulaires ont vise a obtenir et a maitriser la regeneration de plantes a partir de suspensions cellulaires et de protoplastes du cv. Hayward et de trois de ses genotypes trihaploides stables. Des plantes entieres ont ete regenerees a partir de protoplastes de cals de hayward, mais ce resultat a ete rare et aleatoire. Concernant les protoplastes trihaploides, le meilleur resultat s'est limite a la formation de colonies d'une dizaine de cellules. En revanche, la regeneration a partir de suspensions cellulaires a ete maitrisee et pourrait etre exploitee. L'ensemble de ces travaux a conduit en definitive a creer une variabilite a partir du cv. Hayward. Les materiels obtenus ont commence a faire l'objet d'une caracterisation (phenotype, stabilite, origine) qui devra etre poursuivie
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Bikond, Nkoma Geneviève. "Acétylation des histones et fragilité génétique dans le gamète mâle haploïde." Mémoire, Université de Sherbrooke, 2009. http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3961.
Full textAbstract:
Lors de la phase haploïde de la spermatogenèse (spermiogenèse) des mammifères, un important remodelage de la chromatine est nécessaire à la compaction de l'ADN. Au cours de ce remodelage, les histones sont remplacées successivement par les protéines de transition, puis finalement par les protamines. Ce processus implique une succession encore peu connue de modifications post-traductionnelles des histones telles que l'acétylation et la méthylation.Lors de récents travaux, notre laboratoire a montré des évidences suggérant que l'hyperacétylation de l'histone H4 (H4h) semble impliquée dans ce remaniement de la chromatine et fournirait un contexte favorable à l'apparition de cassures de l'ADN. Puisque le contexte chromatinien d'une spermatide diffère de celui d'une cellule somatique, la mise au point de techniques pouvant établir la distribution de H4h dans cette cellule germinale haploïde serait un atout précieux pour établir l'association de cette modification post-traductionnelle à la formation des cassures. Ce mémoire présente ainsi une démarche bipartite visant la mise au point d'approches microscopiques de même que le développement d'une approche d'immunoprécipitation de la chromatine pouvant s'appliquer à la chromatine particulière des spermatides. Grâce à la mise au point de la technique d'immunoprécipitation de la chromatine combinée à l'utilisation de biopuces d'ADN (ChIP-on-chip), nous tentons d'établir la cartographie de H4Ac sur une portion du chromosome X utilisé en guise de sentinelle. Avec la cartographie simultanée de [gamma]-H2AX (H2AFX) en tant que marqueur des cassures bicaténaires de l'ADN, nous tentons de vérifier, au niveau moléculaire, l'hypothèse d'une relation entre l'hyperacétylation des histones et l'apparition des cassures dans les spermatides allongeantes. La compréhension de la formation des cassures est importante puisque la réparation de l'ADN, dans cette cellule haploïde, ne peut compter sur la recombinaison homologue; l'instabilité génétique associée à ce phénomène pourrait fournir l'étiologie d'anomalies génétiques idiopathiques associées au développement de l'embryon. A l'aide d'anticorps couplés à des billes d'or, la microscopie électronique nous permet d'obtenir les premiers résultats d'une double détection de l'histone H4 hyperacétylée et des cassures de l'ADN au sein des noyaux des cellules germinales de la spermatogenèse. Les travaux d'immunoprécipitation de la chromatine dévoilent une répartition hétérogène de l'hyperacétylation de l'histone H4 au niveau du chromosome X, suggérant que l'hyperacétylation du génome lors de la spermiogenèse est progressive. Nous démontrons aussi qu'il existe une interaction entre cette chromatine et le variant d'histone [gamma]-H2AX. Les différences entre les patrons de distribution des deux histones ne permettent pas d'établir si l'hyperacétylation de la chromatine serait à l'origine du dépôt de [gamma]-H2AX, par le biais des cassures double brin.
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Krueger-Hadfield, Stacy A. "Structure des populations chez l'algue rouge haploïde-diploïde Chondrus crispus : système de reproduction, différenciation génétique et épidémiologie." Paris 6, 2011. http://www.theses.fr/2011PA066511.
Full textAbstract:
L'étude de la structure genetique des populations, qui met en evidence les mouvements de genes it differentes echelles spatiales, nous renseigne sur les patrons et les processus micro-evolutifs. L'objectif de cette these etait d'etudier ces processus chez l'algue rouge intertidale Chondrus crispus. Son cycle est caracterise par l'altemance d' individus tetrasporophyte diploide et gametophytes haploides. Les objectifs de Ia these etaient d'explorer les consequences de ce type de cycle sur le systeme de reproduction, la dispersion des propagules et les reponses differentielles aux endophytes. Les methodes directes (analyse de patemite) et indirectes (F-statistics) montrent que Ia reproduction de C. Crispus est essentiellement sexuee. La structure genetique des populations revele (i) une forte consanguinite inter-gametophytes, (ii) un effet significatif du paysage sur les flux geniques et (iii) une absence d' isolement par Ia distance a grandes echelles. Par ailleurs, les ratios equilibres d'individus haplokles/diplokies dans les populations les morns infectees par l'endophyte Acrochaete sp. Ainsi que les experiences d'infection croisee suggerent que les diplokles sont plus sensible que les haplordes. Enfin, l'effet du paysage faconnant les mouvements de genes entre les niveaux hauts et bas de l'estran a tie demontre, permettant ainsi des phenomene d'adaptation locale. Alin de mieux comprendre ces processus d'adaptation locale ainsi que les effets de la dispersion des spores haplokles et diploides sur la structure genetique, d'autres etudes complementaires seraient necessairesThe study of population genetic structure by elucidating the movement of genes at a range of spatial scales provides insight into microevolutionary patterns and processes. The purpose of this study was to explore these processes in the intertidal red alga Chondrus crispus. The life cycle of C. Crispu alternates between free-living diploid tetrasporophytes and free-living haploid gametophytes and many of the populations surveyed have been found to be gametophyte-biased. The aims of the thesis were to explore the consequences of the alternation of haploid and diploid individuals on the patterns of mating system, propagule dispersal and differential responses to endophytic infections. C. Crispus reproduces mainly sexually, where high levels of intergametophytic selling were using direct (paternity analyies) and indirect (F-statistics) methods. The unique pattern of genetic structure was characterized by (i) strong intergametophytic selfing, (ii) a significant effect of the shore seascape and (iii) the absence of isolation by distance at a larger scale. In the field, populations which exhibited less infection were found to be closer to equilibrium frequency suggesting differential susceptibility may play an important role in haploid to diploid ratios. Cross infection experiments showed that tetrasporophytes were more susceptible to infection. The effect of this seascape shaping gene movement between high and low locations within the intertidal was established and is supposed t favor local adaptation. Further studies are needed to understand more about the process of local adaptation as well as the effect of haploid and diploid dispersal on genetic structure
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Bilang, Mariyati. "Relation entre la structure des phosphopeptidomannannes et la floculation chez Kluyveromyces lactis (souches haploïdes)." Nancy 1, 1995. http://www.theses.fr/1995NAN10100.
Full textAbstract:
La floculation des levures Kluyveromyces lactis haploïdes: floculante k. 1 5c, non floculante k. 1 5a, faiblement floculante k. 1 6d et très faiblement floculante k. 1 6a fait intervenir des lectines et des phosphopeptidomannannes de la paroi cellulaire. Les phosphopeptidomannannes ont été obtenus par traitement des cellules fraiches par autoclavage dans un tampon citrate pH 7. L’estimation des masses moléculaires des extraits phosphopeptidomannannes obtenus ainsi que leur composition chimique globale ne révèlent aucune corrélation directe avec le degré de floculation des levures étudiées. Cependant, des essais biochimiques utilisant des lectines isolées et des cellules fraiches défloculées indiquent une différence dans ce phénomène de reconnaissance. L’acétolyse des phosphopeptidomannannes cellulaires des quatre levures libéré cinq fractions correspondant a des mono, di, tri, penta et hexasaccharides. L’analyse structurale par 1h rmn de ces oligosaccharides, révèle la présence de mannose, de deux types de mannobioses, deux types de mannotrioses et deux types de mannotétraoses portant des glucosamines. Le phénomène de la floculation chez les levures k. Lactis haploïdes implique les phosphopeptidomannannes en tant que ligands de lectines. Les chaines latérales de ces polymères pariétaux doivent porter des structures alpha-(1,3) pour être reconnus par la lectine
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Mattar, Dominique. "Établissement de cultures cellulaires haploïdes, diploïdes et transformées de ginkgo biloba par diverses stratégies variabilisantes." Tours, 1994. http://www.theses.fr/1994TOUR3805.
Full text
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Hanifi, Leïla. "Contribution à l'étude de l'hétérosis et de l'interêt des F1, F2 et lignées haploïdes doublées chez l'orge." Lille 1, 1999. https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Th_Num/1999/50376-1999-465.pdf.
Full textAbstract:
Différents aspects de la production des HD par la méthode bulbosum, de la génétique des hordéines et de l'hétérosis chez l'orge (Hordeum vulgare) ont été abordés, mais parmi ces trois thèmes, l'hétérosis en est le principal, et il est vu sous l'angle de l'amplitude et de la prédiction. L'étude des facteurs de production des HD a montré l'influence des génotypes d'H. Vulgare et d'H. Bulbosum sur les taux de nouaison et d'embryons. La période optimale de pollinisation va du 10 au 30 avril. Les analyses caryologiques effectuées vérifient l'état haploïde et haploïde double de notre matériel végétal. L'étude comparée des profils polypeptidiques en SDS-PAGE de 46 grains F2 et de grains 40 HD (cv Motan x CM 67) montre que l'allèle du locus Hor 1 est identique chez les deux parents et leurs descendants, que les allèles des loci Hor 2 et Hor 3 sont différents, indépendants, et ne sont pas sélectionnés par la technique bulbosum. Quant à l'hétérosis, onze caractères sont évalués au champ sur un croisement diallèle 8 x 8. L'hétérosis moyen est faible pour les caractères agronomiques au niveau de la plante. Par contre au niveau du maître-brin, il apparaît bien une vigueur hybride pour le rendement en grain (13%) et ses composantes. Des croisements hétérotiques pour le rendement en grain et en paille sont observés avec une influence de la distance génétique entre parents. Cependant, l'hétérosis économique est très faible pour les principaux caractères agronomiques (3% pour le rendement en grain). Les analyses de Griffing, Hayman et l'étude des corrélations montrent une forte additivité pour différents caractères. Pour un croisement étudié, il apparaît que les lignées HD peuvent être un moyen rapide d'obtention de lignées aussi bonnes que la F1 pour la plupart des caractères. Les tests au niveau des lignées HD montrent un effet d'épistasie pour de nombreux caractères liés au rendement. Des effets de compétition sont aussi apparus dans tous les tests impliquant la F2.
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Debec, Alain. "Etude génétique de lignées cellulaires de Drosophila melanogaster." Paris 6, 1986. http://www.theses.fr/1986PA066180.
Full textAbstract:
Etude de 25 systèmes isoenzymatiques dans 18 lignées de cellules embryonnaires de d. M. ; 7 lignées permanents ont été établies in vitro à partir d'embryons létaux haploïdes. A partir d'un clone haploïde, une lignée cellulaire résistante au cadmium a été sélectionnée. Ces cellules présentent un niveau de métallothionéine 22 fois plus élevé que le clone d'origine. Clonage du cdna d'une métallothionéines. Une lignée haploïde présente des anomalies mitotiques (absence de centriole observée en microscopie électronique).
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Fiorini, Sarah. "Effet de l'augmentation de la pression partielle du dioxyde de carbone et de la température sur le phytoplancton calcifiant (coccolithophoridés)." Paris 6, 2009. http://www.theses.fr/2009PA066586.
Full textAbstract:
L’effet de l’augmentation de la pression partielle du CO2 (pCO2) et de la température (T) a été étudié sur les coccolithophoridés Emiliania huxleyi, Calcidiscus leptoporus et Syracosphaera pulchra. Il s’agit du premier travail réalisé sur S. Pulchra et sur le stade haploïde de ce groupe. A pCO2 élevée, chez les trois espèces la croissance a augmenté (entre 2 et 27%) et la calcification n’a pas été affectée; chez certaines souches de E. Huxleyi (CCMP371, AC472, NZEH) la calcification est réduite par forte irradiation. Les cellules haploïdes (N) répondent de manière similaire aux cellules diploïdes (2N); cette réponse est souvent accentuée. L’analyse de la composition lipidique et isotopique cellulaire (∂13C) a confirmé la réponse accentuée du stade N et a déterminé des marqueurs lipidiques spécifiques des Calcidiscaceae (18:1ω7c/16:0) et des Syracospheraceae (16:1ω7c/16:0). Enfin, la production primaire de S. Pulchra a diminué de 25% (2N) et 45% (N) a pCO2 élevée et de 46% (N) à pCO2 et T élevées. Les valeurs futures de pCO2 et T océaniques affectent la physiologie de coccolithophoridés. S’ils n’arrivaient pas à s’adapter, la richesse du groupe serait limitée aux types les plus résistants et la modification de la niche écologique des certaines espèces se produirait.
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Cuny, Florence. "Processus d'induction d'embryons haploïdes par du pollen irradié chez le melon (cucumis melo l. ) : réponses du pollen à l'irradiation gamma." Avignon, 1992. http://www.theses.fr/1992AVIG0301.
Full textAbstract:
La réponse du pollen de melon à l'irradiation gamma est etudiée dans l'optique de la détermination du processus d'induction d'embryons haploïdes. Quelles que soient les doses d'irradiation comprises entre 0,15 et 2,5 kgy, l'induction d'embryons haploïdes, d'origine maternelle, est toujours présente. L'étude histologique indique que le melon possède un mégagamétophyte de type polygonum à huit noyaux et sept cellules, chacune montrant une forme différente de spécialisation structurale. La fécondation s'achève trois jours après la pollinisation avec la formation du zygote dont la différenciation de type crucifère ne s'amorce que deux jours après. Lorsque le pollen est irradié, l'albumen forme une masse compacte cellularisée dépourvue d'haustorium. Gééeralement, les pseudo-zygotes, vacuolisés et chargés en amidon, se divisent et évoluent en proembryons anormaux qui avortent. Parfois, l'oosphère se développe en un embryon haploïde selon un processus de pseudogamie. Le pollen de melon bicellulaire germe in vitro à un taux de 98%. Des doses d'irradiation supérieures à 2,5 kgy sont nécessaires pour réduire significativement la vitesse de croissance du tube pollinique et affecter la division de la cellule génératrice. Ainsi, tant que le pollen est capable de germer correctement, l'induction d'embryons haploïdes se réalise. Les tubes polliniques sont caractérisés par une zonation ultrastructurale qui témoigne de spécialisations fonctionnelles. Les vésicules golgiennes chargées en precurseurs polysaccharidiques migrent vers l'apex du tube pollinique où leur fusion avec la membrane plasmique contribue à l'élongation apicale de ce tube et à l'édification de la couche pariétale pecto-cellulosique. La voie exocytaire réalisée entre le réticulum endoplasmique et la membrane plasmique est responsable de la mise en place de la couche pariétale interne callosique. La vacuolisation de la zone distale est assurée par les profils réticulaires et par les provacuoles golgiennes. Lorsque le pollen est irradié à forte dose, la vacuolisation est faible et la croissance pariétale fortement affectée. L'altération du système membranaire limite les processus exocytiques de reconnaissance indispensables à la croissance du tube pollinique. Le sporoderme du grain de pollen semble constituer une protection efficace contre le rayonnement gamma
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Yean-San, Lean-Han. "Gynogenèse "in vitro" : variabilité des haploïdes doublés issus d'androgenèse, de gynogenèse "in vitro" et de croisement interspécifique chez Hordeum vulgare L." Paris 11, 1987. http://www.theses.fr/1987PA112179.
Full textAbstract:
L'étude de la gynogenèse "in vitro" chez l'orge, Hordeum vulgare, L. Et chez le blé, Triticum aestivum L. , fait l'objet de la 1ère partie de cette thèse. C'est chez l'orge que nous avons réussi, pour la 1ère fois (SAN 1976), à obtenir des plantes haploïdes par culture in vitro d'ovaires non fécondés. Le stade physiologique du gamétophyte femelle constitue un des facteurs importants pour l'induction gynogénétique. Les autres facteurs qui influencent la réponse gynogénétique sont étudiés : prétraitements, milieux de culture, positions de l'ovaire sur le milieu, génotypes. On peut obtenir une ou plusieurs plantes haploïdes par ovaire. Le développement et l'origine cellulaire ainsi que les caractéristiques des plantes gynogénétiques sont décrits. La seconde partie concerne l'étude des descendances des haploïdes doublés issus d'une lignée d'orge de printemps "Bérénice" par trois voies d'haploïdisation. Une variabilité est mise en évidence sur 4 générations d'autofécondation étudiées. Cette variabilité est plus importante chez les haploïdes androgénétiques que chez les haploïdes doubles gynogénétiques ou que chez les haploïdes doublés issus de croisement interspécifiques. L'analyse génétique (études des F1 et des 6F2, du croisement diallèle entre les haploïdes doublés androgenétiques, des haploïdes doublés gynogénétiques et leur lignée mère est effectuée. L'existence des "effets épigenique" (effets maternels) et d'une relation entre les effets mâle et femelle d'un même génotype suggère un rôle important du cytoplasme et des interactions nucléocytoplasmiques dans le conditionnement des variations après haplodiploïdisation " in vitro". L'action spécifique de la culture "in vitro" associée à l'état de différenciation des cellules au moment de la mise en culture serait à l'origine de cette variabilité. On constate que L'androgenèse ''in vitro" induit une variabilité plus large que la gynogenèse "in vitro" ou que l'haploïdisation par croisement interspécifique et que la culture in vitro provoque des modifications aussi bien au niveau de l'expression de gènes nucléaires qu'à celui des facteurs cytoplasmiques ou épigéniquesIn vitro gynogenesis on barley, Hordeum vulgare, L. And on wheat, Triticum aestivum, L. Is presented in the first part of this work. Obtaining haploid plants from non fertilized ovaries cultured in vitro has been reported, in the first instance, in barley (SAN 1976). Physiological stage of female gametophyte is an important factor for gynogenesis induction. The other factors influencing gynogenesis development are reported pretraitements, culture media, environmental conditions, ovary positions on sol id medium, genotypes. One or sereral plants can be obtained from one ovary. Development cell origin and caracteristic of gynogenetic plants are described. In the second part we compared the doubled haploid plants of the barley spring cultivar "Bérénice" produced by three different methods, in vitro androgenesis, in vitro gynogenesis and haploidization by interspecific hybridization of Hordeum vulgare, L. And Hordeum bulbosum, L. Some variability was observed in barley doubled haploid plants on 4 selfing generations. This variability is more important in androgenetic doubled haploid plants than in gynogenetic ones or than in the ones from interspecific hybridization with Hordeum bulbosum, · Genetic analysis on F1 and on 6F2 from diallele cross between androgenetic doubled haploids, gynogenetic doubled haploids and the control line (source line) showed :-important effects of general combining ability-important "epigenic effects" (maternal effects) and a relation between male effects and female effects of the same genotype; they indicate an important action of cytoplasm and nucleocytoplasmic interaction on the in vitro haploidiploidization variation. The in vitro culture and the particular cell physiological stage before the culture would be at the origin of variability. In vitro androgenesis induced more variability than in vitro gynogenesis or than haploidization from interspecific cross ; in vitro culture induced modification on nuclear gene expression as well as cytoplasmic or epigenic expression
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Bordes, Jacques. "Création de lignées haploïdes doublées de maïs par gynogenèse induite in situ : amélioration de la méthode et intégration dans les schémas de sélection." Phd thesis, Université Blaise Pascal - Clermont-Ferrand II, 2006. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00688812.
Full textAbstract:
L'amélioration de la technique, permettant d'induire in situ la gynogenèse afin de fiabiliser la production de lignées haploïdes doublées (HD) de maïs, a été entreprise. L'intérêt de son intégration dans les schémas de sélection, par rapport aux méthodes conventionnelles a été évalué. Le pourcentage moyen de plantes haploïdes obtenues, est passé d'environs 2,5 à environs 5 , puis 7. Dans une très large variabilité génétique il n'a généralement pas été observé de génotypes ne répondant pas à l'induction de la gynogenèse. Les lignées HD ont des phénotypes très semblables à ceux des lignées obtenues par autofécondation. Pour le rendement, la variance génétique des lignées HD est presque deux fois supérieure à celle des familles S1 dont elles sont issues. Par cycle de sélection récurrente, les lignées HD sont plus efficaces que les familles S1. L'haplométhode, mise au point au cours de ce travail, peut donc être considéré comme efficace et intéressante pour la selection d'hybrides de maïs.
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Zhang, Yong Xiang. "Recherche in vitro de plantes haploïdes chez le pommier cultivé (Malus x domestica Borkh. ) : androgenèse, gynogenèse, parthénogenèse in situ induite par du pollen irradié." Paris 11, 1988. http://www.theses.fr/1988PA112343.
Full textAbstract:
Trois méthodes d'haploïdisation ont été étudiées : Androgenèse in vitro par culture d'anthères, Gynogenèse in vitro par culture d'ovules non fécondés et Parthénogenèse in situ induite par du pollen irradié suivie de la culture in vitro des embryons immatures. La culture d'anthères a conduit à l'obtention d'embryons androgénétiques chez « Topred », «Starking » et « Rr » ainsi que de cals androgénétiques chez d'autres génotypes. Cette étude a révélé que la réussite de l'androgenèse dépend du génotype, du prétraitement au froid et du milieu de culture, dont l'influence est due principalement à la qualité ainsi qu'à la quantité des phytohormones et des sucres. La difficulté majeure rencontrée est le blocage in vitro des embryons obtenus. La culture d'ovules non fécondés a conduit à la formation de 2 embryoïdes chez "R1-49" et de cals chez 2 autres génotypes. Cette expérience préliminaire montre que le meilleur mode de mise en culture est celui d'ovaires excisés dont les ovules restent attachés au tissu placentaire. Des plantes haploïdes issues du développement parthénogénétique in situ ont été induites chez « Erovan » grâce à l'emploi de pollen irradié et avec recours à la culture in vitro des embryons immatures. Cette méthode a également permis d'obtenir de nombreux embryons encore en évolution chez d'autres génotypes. La dose d'irradiation du pollen à 500 Gy s'avère être un bon compromis; le meilleur stade de prélèvement des fruits pour la mise en culture des embryons immatures se situe 3 mois après la pollinisation. En conclusion, parmi les 3 méthodes étudiées, la Parthénogenèse in situ induite par du pollen irradié paraît très prometteuse pour la création de plantes haploïdes chez le pommierThe cultivated apple (Malus X domestica Borkh, 2n = 2x = 34) is an allogametic perennial, propagated by vegetative methods. It has a high degree of heterozygosity, and a complex genomic constitution. It can be described as a secondary polyploid. The production of haploid plants in such species therefore presents multiple interests concerning cytogenetics and mutagenesis as well as breeding of cultivars. Three haploidization methods have been studied in this thesis: in vitro androgenesis by anther culture, in vitro gynogenesis by unfertilized ovule culture, and in situ parthenogenesis induced by irradiated pollen followed by in vitro culture of immature embryos. - Anther culture has produced a number of androgenetic embryos in three genotypes ('Topred', 'Starking' and 'Rr') and androgenetic calli in three other genotypes ('Golden Delicious', 'R8-16' and 'Doubled Haploid'). Cytological observations showed that androgenetic development has been induced mainly by a diversion of the 1st pollinic mitosis leading to 2 identical nuclei. Our studies have shown that several factors could influence in vitro androgenesis: * The genotype plays a determining role in androgenetic embryo formation * A cold pretreatment (≥ 5 weeks at 2 to 6°C) applied to the flower bud before anther culture has proved to be necessary for embryo formation; 2 to 6 weeks of the same treatment can significantly increase the rate of callogenesis. .
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Reiffers, Isabelle. "Mises au point de quelques méthodes de multiplication végétative et de doublement chromosomique du riz : appplication à des haploïdes androgénétiques et à des hybrides interspécifiques (O. Sativa x O. Longistaminata)." Paris 11, 1985. http://www.theses.fr/1985PA112002.
Full textAbstract:
Dans le cadre du programme d’haplodiploïdisation de riz, une étape essentielle reste à franchir, à savoir le passage du niveau haploïde au niveau diploïde, ceci dans le but d’obtenir des lignées homozygotes. Le doublement chromosomique d’hybrides interspécifiques stériles à caractères d’allogamie devrait aboutir à des allotétraploïdes fertiles. Un nombre important de plantes étant nécessaire pour les essais de doublement chromosomique, nous avons été amenés à envisager la multiplication végétative de notre matériel. Le bouturage de nœuds « in vitro » et en serre des plantes haploïdes et hybrides a donné des résultats très satisfaisants. Les essais de doublement du stock chromosomique sont menés in vitro (microbouturage sur milieux synthétiques contenant de la colchicine) et in situ (immersion de bourgeons et trempage des racines et plateau de tallage de plantes entières dans des solutions de colchicine). Appliquée aux haploïdes androgénétiques, la « méthode de trempage » nous a permis de doubler le stock chromosomique de près de 90% des plantes. Parallèlement à ces essaies, un contrôle cytologique permanent du matériel traité est assuré. Enfin, l’étude cytogénétique des hybrides interspécifiques O. Sativa x O. Longistaminata a donné lieu à quelques interprétations des observations relatives à la stérilité de ces hybrides.
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Shekafandeh, Nobawdegani Akhtar. "Régénération par gynogenèse in vitro chez le blé dur (Triticum durum) et l'orge (Hordeum vulgare) : obtention de plantes selon diverses modalités d'application de stress salins." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1998. http://www.theses.fr/1998INPL070N.
Full textAbstract:
La culture d'ovaires non fécondés, gynogenèse, des 6 génotypes de blé dur (Triticum durum) : Cham 1, Cocorit, Isly, Jori, Oued Zenati et Sarif a été élaborée, et des plantes haploïdes ont été obtenues, tant sur cette espèce (Pl/Ov = 21,8%) que sur l'orge (Hordeum vulgare) (Pl/Ov = 18,3%). Dans chacun des cas des souches régénérantes ont été établies pour plusieurs cultivars (plus de 10 repiquages chez Triticum durum). Des plantes gynogénétiques ont été régénérées, d'une part, à partir de souches non sélectionnées (plus de 700 plantes chez le blé dur et 150 plantes chez l'orge) et aussi, de souches ayant subi des stress salins (NaCl), par application, soit directe, soit progressive. La seconde procédure a permis de garder la viabilité et la régénération des souches malgré l'introduction dans le milieu de quantités de sel allant jusqu'a 9 g/L chez Triticum durum et jusqu'a 15 g/L chez Hordeum vulgare. Après doublement des chromosomes, les descendances d'autofécondation ont été récoltées principalement chez l'orge.
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Gilles, Laurine. "Dissection moléculaire et cellulaire de la gynogenèse in vivo chez le maïs." Thesis, Lyon, 2018. http://www.theses.fr/2018LYSEN069.
Full textAbstract:
Chez le maïs, la création de nouvelles variétés repose largement sur la technologie des plantes Haploïdes Doublées. Celle-ci s’appuie sur l’utilisation du pollen de lignées particulières, dites «inductrices d’haploïdes», qui déclenchent un processus de gynogenèse in vivo. Ce mécanisme permet la production d’embryons haploïdes contenant uniquement les informations génétiques maternelles. Après doublement des stocks chromosomiques des plantules haploïdes générées, il est possible d’obtenir des lignées fixées en seulement quelques générations, réduisant ainsi considérablement les schémas de sélection. Bien que les déterminismes génétiques à l’origine de la gynogenèse in vivo soient restés énigmatiques pendant près de soixante ans, nos travaux ont permis le clonage positionnel et l’identification du gène majeur causal de l’induction d’haploïdes. Ce gène, exprimé spécifiquement dans les grains de pollen, code pour une phospholipase A2, nommée NOT LIKE DAD (NLD). Il s’avère que chez l’ensemble des lignées inductrices le gène NLD présente une insertion de quatre paires de bases, conduisant à la formation d’une protéine tronquée responsable de la gynogenèse in vivo. Cette mutation n’entraine pas un défaut spatial ou temporel de l’expression du gène mais une délocalisation de la protéine. La protéine sauvage localise au niveau de l’unité mâle germinative, sur la membrane d’origine végétative entourant les deux cellules spermatiques, alors que la protéine tronquée perd cette localisation. Des approches pharmacologiques et de mutagenèses dirigées ont permis de révéler un adressage de NLD à la membrane grâce à des ancrages lipidiques et des interactions électrostatiques entre la membrane et la protéine. En parallèle, il a pu être observé que la troncation de NLD, en plus de conduire à la formation d’haploïdes maternels, entraînait de nombreux phénotypes de grains anormaux. Le génotypage des produits de fécondations (albumens et embryons) résultant de croisements avec des lignées inductrices ont permis de mettre en évidence l’existence d’anomalies chromosomiques paternelles, pouvant expliquer ces différents phénotypes de grains anormaux. L’ensemble de ces résultats indiquent que la phospholipase NLD intacte est nécessaire pour le bon déroulement de la reproduction sexuéeIn maize, plant breeding mainly relies on double haploid technology. The main principle of this technology is the use of special lines called “inducer lines”, which induce in vivo gynogenesis. This mechanism allows haploid embryos production which only contain maternal genetics information. After chromosome doubling of the haploid seedlings, it is possible to obtain fixed lines in only few generations, thus considerably reducing breeding cycles. Although genetic determinants behind in vivo gynogenesis remained enigmatic for nearly sixty years, our work allowed the positional cloning and the identification of the major gene controlling haploid induction. This gene, specifically expressed in pollen grain, encodes for a phospholipase A2 called NOT LIKE DAD (NLD). It turns out that in all the inducer lines the NLD gene has a 4-bp insertion, leading to the formation of a truncated protein responsible for gynogenesis in vivo. This mutation did not result in a spatial or temporal defect in the expression of the gene but in the delocalization of the protein. The wild type protein localizes at the male germ unit on the vegetative membrane surrounding the two sperm cells, while the truncated protein loses this location. Pharmacological and mutagenic approaches revealed that NLD is targeted to the membrane through lipid anchoring and electrostatic interactions between membrane and protein. In parallel, it has been observed that the truncation of NLD; in addition to leading to the formation of maternal haploids; led to many pleiotropic phenotypes of abnormal kernels. The genotyping of fertilization products (endosperms and embryos), shows the existence of paternal chromosomal anomalies, which can explain these different phenotypes of abnormal kernels. All these results indicate that the intact NLD phospholipase is therefore necessary for the proper course of sexual reproduction
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Wessels, Elsabet. "Ontwikkeling van ’n koringkwekery met gestapelde, spesie-verhaalde roesweerstand." Thesis, Stellenbosch : University of Stellenbosch, 2010. http://hdl.handle.net/10019.1/5459.
Full textAbstract:
Thesis (MSc (Genetics))--University of Stellenbosch, 2010.Includes bibliography.
ENGLISH ABSTRACT: Wheat rust is a significant contributor to the total impact of diseases on sustainable wheat production. Genetic resistance, produced by using resistance genes from wheat and other related wild species, is the simplest and most cost-effective way to guard against these diseases. The pyramiding of resistance genes in a single line is a vital practice in bringing about durable resistance. This study aimed to develop a series of doubled haploid (DH) wheat lines containing combination's of wild species genes for rust resistance. Rust resistance genes Lr19 (7BL), Sr31/Lr26/Yr9/Pm8 (1BS) and Lr54/Yr37 (2DL) were combined by means of crossing. Breeders. lines which have complex resistance including Lr24/Sr24 (3DL), Lr34/Yr18 (7D), Sr36 (2BS) and Sr2 (3BS), were used. Marker assisted selection (MAS) was used to type populations for the above mentioned genes. Using the DH method (maize pollination technique), an inbred population was developed from the selected lines, after which the lines were characterised molecularly for the resistance gene translocations which they contain. The study produced 27 lines with diverse genetic profiles. Seven lines contain four translocations (Lr24/Sr24, Lr34/Yr18, Sr2 and Lr19 or Sr31) each, 11 lines contain three genes each, six lines contain two genes each and only three lines contain a single translocation (Lr24/Sr24). The reality that rust pathogens have already overcome three of the resistance genes in the final population . Lr19, Sr31 and Sr24 . is a clear indication of the value of using non-major gene resistance for bringing about durable resistance. The focus should fall ever more greatly upon the application of quantitative trait loci (QTL) for this purpose, which will result in MAS contributing to the development of more durable resistance. The value of the integration of MAS and DH in combination with conventional breeding practices in breeding programmes has already been illustrated internationally for increasing the rate of cultivar development and this is reaffirmed by this study.
AFRIKAANSE OPSOMMING: Koringroes lewer jaarliks .n beduidende bydrae tot die totale impak van siektes wat volhoubare koringverbouing belemmer. Die mees eenvoudige en koste-effektiewe verweer teen hierdie siektes is genetiese weerstand, wat deur weerstandsgene vanaf koring, sowel as wilde verwante spesies, bewerkstellig word. Die stapeling van weerstandsgene in .n enkele lyn word as .n onontbeerlike praktyk om duursame weerstand tot stand te bring, geag. Hierdie studie het ten doel gehad om .n reeks verdubbelde haploiede (VH) koringlyne te ontwikkel wat kombinasies van wilde spesie gene vir roesweerstand bevat. Roesweerstandsgene Lr19 (7BL), Sr31/Lr26/Yr9/Pm8 (1BS) en Lr54/Yr37 (2DL) is deur middel van kruisings gekombineer. Telerslyne wat oor komplekse weerstand beskik wat Lr24/Sr24 (3DL), Lr34/Yr18 (7D), Sr36 (2BS) en Sr2 (3BS) insluit, is gebruik. Merker-bemiddelde seleksie (MBS) is gebruik om populasies vir bogenoemde gene te tipeer. .n Ingeteelde populasie is vanaf die geselekteerde lyne met behulp van die VH metode (mielie-bestuiwing tegniek) ontwikkel, waarna die lyne molekuler vir die weerstandsgeentranslokasies waaroor hul beskik, gekarakteriseer is. Die studie het 27 lyne met diverse genetiese profiele opgelewer. Sewe lyne bevat vier weerstandsgeentranslokasies (Lr24/Sr24, Lr34/Yr18, Sr2 en Lr19 of Sr31) elk, 11 lyne beskik oor kombinasies van drie gene elk, ses bevat twee gene elk en slegs drie lyne beskik oor .n enkele translokasie (Lr24/Sr24). Die realiteit dat die roespatogene reeds drie van die weerstandsgene in die finale populasie . Lr19, Sr31 en Sr24 . oorkom het, benadruk die waarde van die gebruik van nie-hoofgeenweerstand vir die daarstelling van duursame weerstand. Die fokus behoort toenemend meer op die aanwending van kwantitatiewe kenmerk-loci (QTL) vir hierdie doel te val en sal sodoende teweegbring dat MBS bydra tot die ontwikkeling van meer duursame weerstand. Die waarde van die integrasie van MBS en VH in kombinasie met konvensionele telingsmetodiek is reeds internasionaal vir die versnelling van kultivarontwikkeling aangetoon en word ook deur hierdie studie herbevestig.
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Paris, Jessica. "Identification of molecular mechanisms subtending bread wheat androgenesis : A chemical biology approach." Electronic Thesis or Diss., université Paris-Saclay, 2024. http://www.theses.fr/2024UPASB012.
Full textAbstract:
Le blé tendre (Triticum aestivum L.) est un pilier de la nutrition mondiale : il représente un cinquième des calories et pro-téines consommées par l'homme, et constitue une source essentielle de fibres, de vitamines et de minéraux dans le monde entier. Le développement d'hybrides de blé à haut rendement et avec une bonne qualité meunière est fondamental pour préserver les ressources limitées de notre planète face aux défis du changement climatique. La capacité à produire des haploïdes doublés est cruciale dans les processus de sélection car elle permet de fixer en une seule génération plusieurs traits agronomiques d'intérêt. Dans ce contexte, l'amélioration des méthodologies de culture in vitro et la compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans l'androgenèse sont essentielles pour le déploiement d'un programme de sélection du blé de grande ampleur.Ce projet de recherche collaboratif visait à l'identification de molécules bioactives qui augmentent l'efficacité du processus de production d'embryons gamétophytiques à partir de microspores de blé tendre. Suite à la mise au point d'un proto-cole robuste de production d'haploïdes à partir de microspores isolées, un criblage robotisé de 1539 molécules a parmi d'identifier deux familles de molécules impactant positivement la réponse in vitro des cultures. En parallèle, le transcrip-tome de cultures de microspores a été étudié (RNAseq), a des stades clés de l'initiation de l'androgénèse. Ces profils de transcription ont été comparés à des données transcriptomiques déjà publiées, en blé et autres espèces d'intérêt agrono-mique. Enfin, les potentiels modes d'action d'une des molécules candidate ont été étudiés en comparant les signatures transcriptomiques de suspensions de microspores, en présence ou en l'absence de cette molécule candidate. Ce travail a permis d'identifier des biomarqueurs de l'androgénèse et d'améliorer la production d'haploïdes doublés de bléBread wheat (Triticum aestivum L.) is the most widely cultivated cereal grain, representing a fifth of all calories and proteins in the average human diet. Because modern wheat cultivars are inbred, major improvement may be obtained through modern breeding techniques, in particular the development of hybrids, derived from a specific cross between two agro-nomically sound parental lines to exploit heterosis. To speed up selection programs, wheat breeders have relied for dec-ades on the production of doubled haploid plants, also known as haplodiploids, for the creation of novel varieties. Hap-lodiploidization is an invaluable strategy to accelerate breeding because the haplodiploids are fixed as pure homozygotes within a single generation, thereby avoiding the more conventional, time consuming, self- or backcrossing selection schemes.This collaborative research project aimed at identifying bioactive molecules that enhance the recovery of gametic embryos from bread wheat isolated microspore cultures. Following the development of a robust protocol for producing micro-spore-derived haploids, we used an automated platform to screen 1539 bioactive molecules and identified two families of potential androgenesis enhancers. In parallel, we studied the transcriptome (RNAseq) of induced miscrospores at key stages of androgenesis initiation. These profiles were interpreted in comparison with previously published data, in wheat, other crops, and model plant species. Finally, we investigated the plausible mode of actions of one of the identified en-hancers by comparing transcript profiles of microspore suspensions that were exposed or not to the bioactive molecule. This work enabled the characterization of androgenesis biomarkers and leads to improved methods for the production of doubled haploid bread wheat regenerants