Academic literature on the topic 'Histological diagnostics'

Myeloproliferative neoplasms (MPN), Essential Thrombocythemia (ET), Polycythemia Vera (PV) and primary myelofibrosis (PMF), are clonal disorders of the hematopoietic stem cell. In the recent years, somatic mutations of JAK2, CALR and MPL genes have been found in these diseases. However, these mutations do not allow the discrimination between the different diseases, being present in more than one form. World Health Organization (WHO) criteria, in fact, request in addition to the molecular study, a complete bone marrow histological evaluation. Pediatric ET is a rare disorder with an incidence about 60 times lower than the adult form albeit with similar blood finds. In children with ET, the incidence of JAK2V617F and CALR mutations is significantly lower than in adults, while hereditary cases characterized by MPL mutations are relatively more common. So far the histological evaluation of the bone marrow has not been exhaustively explored in this setting of patients. The aim of the present study was to evaluate the adequacy of current WHO criteria in pediatric ET exploring both the incidence of driver mutations and bone marrow features in a large cohort of children with a clinical diagnosis of ET. Our study was built in two steps: (i) a biomolecular study of a pediatric population with a clinical diagnosis of ET performed by Italian pediatricians, expert in hematological disorders and (ii) a histological evaluation strictly adherent to WHO criteria of BM features of a sub group of these children. Firstly, biomolecular studies of 89 children with a clinical diagnosis of ET, all having a sustained increase in platelet count (>450 x10^9/L) with no demonstrable reactive or secondary cause and no familial history of MPN or thrombocytosis, were evaluated to our central laboratory. In the second phase of our work we collected naïve bone marrow (BM) biopsies of 20 children with a clinical diagnosis of ET (PedET) and, as controls, BM of 6 children (PedST) with reactive/secondary thrombocytosis, 18 children (Norm) with a normal BM histology and 36 adults (AdsET) with WHO-diagnosed ET. All BM biopsies were reviewed by two MPN’s expert pathologists, blinded to the cause of each child’s thrombocytosis. In the biomolecular study we found that 23 patients (25,8%) had a clonal disease. The JAK2V617F mutation was identified in 14 children, 1 child had the MPLW515L mutation, and 6 had CALR mutations. The HUMARA monoclonal X-chromosome inactivation pattern was demonstrate in 6 patients (two with JAK2V617F and two with CALR mutations). The other 66 patients (74,2%) had persistent thrombocytosis with no clonality. There were no clinical or hematological differences between the clonal and non-clonal patients. From the histological point of view, while cellularity was increased in all pediatric cases compared to adults (p<0.001), megakaryocytes (MK) density was higher in PedET (37.5 MK/mm2) than in PedST (9.2 MK/mm2) (p<0.001). Moreover, MK clusters (100%) and BM fibrosis (30%) were observed only in PedET but not in PedST and in Norm. The BM histology was similar in PedET and AdsET. On a whole, BM histology confirmed the diagnosis of ET in 15 children, suggested a PV in 1 child, a PMF in 3 (1 grade 1 and 2 grade 0) and secondary thrombocytosis in one. Our study shows that children with ET are mostly non-clonal, however, the relative proportion of ET-specific mutations in the clonal children was much the same as in adults. Histological WHO criteria are able to identify ET, PMF and PV and distinguish ST from primary thrombocytosis, also in pediatric population. Therefore, WHO criteria seem suitable in all age groups, making both complete biomolecular evaluation and BM assessment mandatory in children with suspected ET.<br>Le Neoplasie Mieloproliferative (MPN), sono disordini clonali della cellula staminale emopoietica, caratterizzate dalla proliferazione di una o più linee mieloidi e sono Trombocitemia Essenziale (ET), Policitemia Vera (PV) e Mielofibrosi Idiopatica (PMF). I criteri diagnostici per le MPN dell’adulto si sono evoluti nel tempo di pari passo con l’acquisizione di nuove conoscenze clinico-laboratoristiche e biomolecolari di tali patologie. Negli ultimi anni sono state descritte mutazioni somatiche a carico dei geni JAK2, CALR e MPL, tuttavia queste mutazioni non consentono una distinzione accurata in quanto presenti in più di una MPN. Nei più recenti criteri diagnostici WHO, di conseguenza, accanto allo studio biomolecolare, è necessaria una completa valutazione della biopsia osteo-midollare (BOM). La ET pediatrica è una malattia rara con un’incidenza stimata di circa 60 volte inferiore alla forma dell’adulto. L’incidenza delle mutazioni di JAK2 e di CALR è significativamente inferiore nei bambini con ET rispetto agli adulti, mentre sono relativamente più numerosi i casi ereditari caratterizzati da mutazioni di MPL. Ad oggi in questi pazienti non è stata ancora esplorata esaustivamente la rilevanza della valutazione istologica del midollo. Lo scopo del nostro studio è stato quello di verificare l’adeguatezza dei criteri WHO nella popolazione pediatrica esplorando sia l'incidenza delle mutazioni principali che le caratteristiche della BOM in un'ampia casistica di bambini con diagnosi clinica di ET. Il nostro lavoro è stato costruito in due momenti: (i) uno studio biomolecolare in bambini con diagnosi clinica di ET fatta da Pediatri Italiani esperti in disordini ematologici e (ii) una valutazione istologica della BOM in un sottogruppo di questi bambini, applicando rigorosamente i criteri WHO. Nella prima parte dello studio abbiamo valutato 89 bambini con diagnosi clinica di ET con un incremento prolungato della conta piastrinica (>450 x10^9/L) in assenza di cause secondarie o reattive e senza familiarità per MPN o trombocitosi. I campioni stati sono stati centralizzati presso il nostro laboratorio per lo studio biomolecolare completo. Nella seconda fase, abbiamo collezionato le BOM di 20 bambini con diagnosi clinica di ET (PedET) e, come controlli, di 6 bambini con trombocitosi reattiva (PedST), 18 bambini (Norm) con istologia midollare nella norma e 36 adulti con diagnosi di ET in accordo con in criteri WHO (AdsET). Tutte le BOM sono state rilette in cieco da due patologi esperti in MPN. Nello studio biomolecolare in 23 pazienti (25,8%) è stata dimostrata la presenza di un marker di clonalità: 14 bambini erano positivi per la mutazione JAK2V617F, 1 bambino aveva la mutazione MPLW515L e 6 avevano mutazioni di CALR. Inoltre, sei pazienti sono risultate clonali allo studio dell’inattivazione del cromosoma X (due portatrici anche la mutazione JAK2V617F e due con mutazioni di CALR). Gli altri 66 pazienti (74,2%) presentavano una trombocitosi persistente senza evidenza di clonalità. Non sono state dimostrate differenze clinico-ematologiche tra i pazienti clonali e non clonali. Dal punto di vista istologico, la cellularità è risultata più alta in tutti i casi pediatrici rispetto agli adulti (p <0.001), mentre la densità megacariocitaria (MK) è risultata più alta nei PedET (37,5 MK/mm2) rispetto a PedST (9.2 MK/mm2) (p <0,001). Inoltre, i cluster di MK (100%) e la fibrosi midollare (30%) sono stati osservati solo in PedET, essendo sostanzialmente assenti sia in PedST che Norm. L’istologia della BOM è risultata pressoché sovrapponibile in PedET e AdsET. Tra i bambini con PedET, l’istologia della BOM ha confermato in 15 casi la diagnosi di ET, in 1 caso è risultata suggestiva per PV, in 3 casi per PMF (1 grado 1 e 2 grado 0) ed in un caso per trombocitosi secondaria. Il nostro studio conferma che, sebbene la maggior parte dei bambini non presenti un marker di clonalità, le mutazioni classiche delle MPN sono presenti anche nella ET pediatrica con una proporzione simile a quella delle forme dell’adulto. I criteri istologici WHO sono in grado, anche nella popolazione pediatrica, di identificare ET, PV e PMF e di distinguere forme primitive e secondarie di trombocitosi. In conclusione, i criteri WHO sembrano adeguati per tutte le fasce d’età. Ciò impone una completa valutazione biomolecolare ed istologica anche nei bambini con sospetta ET.

Orientadores: Luiz Carlos Zeferino, Sylvia Michelina Fernandes Brenna<br>Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas<br>Made available in DSpace on 2018-08-05T02:57:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guedes_AnaClaudia_D.pdf: 139207 bytes, checksum: e90f74673c9eab6caf07ac631112c52b (MD5) Previous issue date: 2005<br>Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar as taxas de regressão, progressão, persistência e recidiva da neoplasia intra-epitelial cervical grau 2 (NIC 2) através do tratamento expectante. Foi realizado um ensaio clínico randomizado em mulheres com diagnóstico de NIC 2, selecionadas no Ambulatório de Patologia do Trato Genital Inferior do Hospital Maternidade Leonor Mendes de Barros, Secretaria de Saúde do Estado de São Paulo, no período de outubro 2002 a janeiro de 2005. O tamanho amostral foi calculado em 90 mulheres. Elas foram alocadas em dois grupos de 45 cada, um para tratamento expectante e outro para tratamento imediato com cirurgia de alta freqüência. Nesta tese estamos mostrando apenas os resultados parciais de 70 casos (40 de conduta expectante e 30 de CAF), como estudo de coorte, com enfoque no seguimento das mulheres sem tratamento. Os critérios de inclusão foram mulheres com diagnóstico histopatológico (biópsia) de NIC 2, independentemente do resultado da citologia. Foram excluídas as mulheres com diagnóstico de carcinoma na citologia, sorologia positiva para HIV, qualquer situação de imunossupressão, mulheres histerectomizadas, mulheres já tratadas anteriormente por lesões pré-neoplásicas do colo do útero. A porcentagem de regressão espontânea total da NIC 2 foi de 45%, de regressão parcial foi de 34% e de persistência foi 8%. A progressão para NIC 3 ocorreu em 13% e não houve um único caso de evolução para carcinoma escamoso. A média de idade das mulheres com regressão foi aproximadamente 30,6 anos, e daquelas em que a doença persistiu ou progrediu foi de 38,1 anos (p 0,03). A taxa de subdiagnóstico de NIC 3 pela colposcopia foi de 37%. Concluímos que existe regressão espontânea da NIC 2 e que a conduta expectante pode ser adotada em casos individualizados, principalmente em pacientes jovens com desejo de engravidar<br>Abstract: The aim of this study was to evaluate rates of regression, progression, persistence and relapse of cervical intraepithelial neoplasia grade 2 (CIN 2) in expectant follow-up. This was a clinical trial randomized study, which included women with CIN 2, attending the outpatient service of Cervical Pathology of Maternity Hospital Leonor Mendes de Barros, State Health Department, São Paulo, SP, in the period from october 2002 to january 2005. The calculated sample size was 90 women. Women were randomized to two groups of 45 patients each, one of then to be expectant follow-up and one to LLETZ. This report includes the partial results of 70 cases (40 expectant follow-up and 30 LLETZ), with focus in the group of the expectant follow-up. The inclusion criteria were women with biopsy-confirmed CIN 2, regardless of the cytologic diagnosis. The exclusion criteria were cytological diagnosis of carcinoma, HIV infection, imunossupression, previous hysterectomy and previous treatment for cervical intraepithelial neoplasia. Total regression was observed in 45% of cases, partial regression in 34% and persistence in 8%. The results showed progression to CIN 3 in 13% of cases and no progression to squamous carcinoma was observed. The mean age of women with regression was 30.6 years and for those with progression or persistence it was 38.1 years.The rate of underdiagnose for CIN 3 was 37% when only colposcopy was used. Concluded It was spontaneous regression of CIN 2, and the expectant follow-up could be used. Individualizing the cases can offer a better outcome for the women, mainly for younger<br>Doutorado<br>Tocoginecologia<br>Doutor em Tocoginecologia

Orientadores: Luiz Carlos Zeferino, Sophie Françoise Mauricette Derchain<br>Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas<br>Made available in DSpace on 2018-08-04T01:14:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_SamaraMariaMessiasda_M.pdf: 777021 bytes, checksum: 49930d735f179a3acb68caa9e661bdc9 (MD5) Previous issue date: 2004<br>Resumo: INTRODUÇÃO: A baixa correlação citoistológica é uma característica que confere fragilidade à colpocitologia oncológica (CO). Além disso, a interpretação desse exame é observador-dependente e, de modo geral, há baixa concordância entre os observadores. OBJETIVO: Avaliar se há critérios morfológicos presentes na CO anormal que sejam preditivos do diagnóstico histológico de neoplasia intra-epitelial cervical. MÉTODO: Foram selecionados os laudos dos exames anatomopatológicos de 282 mulheres atendidas no Ambulatório de Patologia do Trato Genital Inferior do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas, no período de outubro de 2001 a janeiro de 2004, encaminhadas por CO anormal. Foram constituídos quatro grupos, de acordo com o exame histológico final. O grupo 1 foi constituído por 74 mulheres sem neoplasia, o grupo 2 por 69 mulheres com NIC 1, o grupo 3 por 62 mulheres com NIC 2 e o grupo 4 por 77 mulheres com NIC 3. A associação dos critérios morfológicos com o diagnóstico histológico foi avaliada através de odds ratio. A análise da interação dos critérios morfológicos com a predição do diagnóstico histológico foi feita através de modelos de regressão logística múltipla. Todas as análises foram realizadas com intervalo de confiança igual a 95% (IC 95%). Para construir uma estrutura preditiva entre os critérios morfológicos e o diagnóstico final foi utilizada a Chi-square Automatic Interative Detection (CHAID). RESULTADOS: A média de idade das mulheres foi de 32,3 anos. Os critérios citomorfológicos independentemente associados com o diagnóstico histológico de NIC 1, em relação aos casos sem neoplasia, foram distribuição irregular da cromatina (OR 11,2 IC 95% 2,32 a 54,08), aumento da relação núcleo-citoplasmática (RNC) (OR 5,8 IC 95% 1,5 a 23,0) e espessamento citoplasmático periférico (OR 3,4 IC 95% 1,4 a 8,4). O critério citomorfológico independentemente associado com o diagnóstico histológico de NIC 2, em relação ao NIC 1, foi a atipia em célula metaplásica madura (OR 5,2 IC 95% 2,4 a 11,3). Os critérios citomorfológicos independentemente associados com o diagnóstico histológico de NIC 3, em relação ao NIC 2, foram membrana nuclear irregular (OR 3,8 IC 95% 1,2 a 11,6) e membrana nuclear espessa (OR 4,9 IC 95% 2,0 a 12,2). A presença de membrana nuclear irregular (OR 4,72 IC 95% 2,1 a 13,0) e o aumento do volume das células metaplásicas (OR 2,6 IC 95% 1,2 a 5,5) distinguiram os casos agrupados de NIC 2 e 3 dos NIC 1. Utilizando a técnica de CHAID, a variável independente que apresentou maior valor preditivo para NIC 3 foi o aumento acentuado da RNC (77,2%). Quando considerados os diagnósticos de NIC 2 e NIC 3, e estudada a anisocariose junto com o acentuado aumento da RNC, o valor preditivo para estes diagnósticos foi de 98,3%. Quando o aumento foi discreto ou moderado, o segundo critério com maior poder discriminador para NIC 3 foi a atipia em célula metaplásica. Não foram encontrados critérios morfológicos únicos para a discriminação dos diagnósticos de NIC 1 ou NIC 2. CONCLUSÕES: O aumento da RNC é o critério morfológico que mais pode predizer e discriminar os graus de neoplasia intra-epitelial cervical. Secundariamente, foram identificados a anisocariose e as células metaplásicas alteradas<br>Abstract: INTRODUCTION: The poor cito-histologic correlation is an inherent flaw of Pap smear. Moreover, Pap results are dependent on the observer opinion and interobserver concordance is generally low. OBJECTIVE: to evaluate which Pap smear morphologic criteria can predict the histological diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia. METHODS: The histological results of 282 women referred to Diseases of Genital Inferior Ambulatory of CAISM due to abnormal Pap tests, between October 2001 and January 2004, were compiled. Patients were allocated to four distinct groups according to their pathological diagnosis. Group 1 comprised 74 women with normal/no neoplasia histological diagnosis, Group 2 consisted of 69 women with CIN1, Group 3 was formed by 62 women with CIN 2 and Group 4 of 77 women with CIN 3. The associations of morphologic criteria with histological results was assessed through the odds ratios and the interaction between morphologic criteria and pathological findings was rendered by logistic multiple regression. The Chi-square Automatic Interative Detection (CHAID) was used to construct a predictive structure of morphological criteria and histological diagnosis. All calculations were performed within 95% confidence intervals (95% CI). RESULTS: Patients¿ mean age was 32.3 years old. Cytomorphologic criteria that were independently associated with CIN 1 were: irregular chromatin distribution (OR 11,2 95% CI 2,32 a 54,08), increased nuclear/cytoplasmic ratio (NCR) (OR 5,8 95% CI 1,5 a 23,0), peripheral rim of thickened cytoplasm (OR.3,4 95% CI 1,4 A 8,4). The cytomorphologic criterium of cellular alteration in mature metaplastic cell differentiated between CIN 2 and CIN 1(OR 5,2 95% CI 2,4 a 11,3) and irregular nuclear membrane (OR 3,8 95% CI 1,2 a 11,6) and thickened nuclear membrane(OR 4,9 95% CI 2,0 a 12,2) allowed the distinction between CIN 3 and CIN 2. The presence of irregular nuclear membrane (OR 4,72 95% CI 2,1 a 13,0) and increased volume of metaplasic cells (OR 2,6 95% CI 1,2 a 5,5) distinguished between the grouped CIN 3/CIN 2 and CIN 1. The CHAID technique ascertained a predicted value of 77.2% to severely increased NCR for the diagnosis of CIN 3, while the association of increased nuclear/cytoplasmic ratio and anisokaryosis attained a predictive value of 98.3% for CIN 3. When only mild or moderate increase in nuclear/cytoplasmic ratio was present, only cellular alteration in metaplastic cell auxiliated in the diagnosis of CIN 3. There were no stand-alone cytomorphologic criteria associated with the histological diagnosis of CIN 1 or CIN 2. ONCLUSIONS: The increased NCR is the cytomorphological criteria that most can predict and discriminate the grades of CIN. Secondly, anisokaryosis and alteration in metaplastic cells were identified.<br>Mestrado<br>Tocoginecologia<br>Mestre em Tocoginecologia

Orientadores : Marcelo Alvarenga, Jose Guilherme Cecatti<br>Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas<br>Made available in DSpace on 2018-07-28T08:52:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marussi_EmilioFrancisco_D.pdf: 298031 bytes, checksum: 44f5734d2fa6568df2103d822913b1c6 (MD5) Previous issue date: 2001<br>Doutorado

It is reported that the echo intensity of B-mode ultrasound images increases when human elbow flexors are damaged by eccentric exercise. However, it is unknown what causes the increase in echo intensity, and its relationship to histological changes is unexplored. This study tests the hypothesis that infiltration of inflammatory cells in damaged muscle fibres causes an increase in the echo intensity of B-mode ultrasound images. The study is carried out by injecting bupivacaine hydrochloride (BPVC), which is known to result in infiltration of mononuclear cells, into rat hind limb muscles. This study was approved by the Institutional Animal Research Ethics Committee. BPVC (0.5 % of 0.5 ml) or saline (0.9 % NaCl of 0.5 ml) was injected to the tibialis anterior muscle (TA) of 14-19 wk male Wistar rats (n=12). Ultrasound images were taken from the muscles before, 0, 2, 4, 6, 9, 12, 24, 48, 72, 120, 168, and 336 hours after the injections using a 7.5 MHz probe connected to an Image Point HX® (HP, USA). The images were analysed by an Image J (NIH, USA) to assess the changes in echo intensity of a region of interest, and changes in the intensity were compared between BPVC and controlled conditions. In the subsequent study, the rats (n= 16) were sacrificed before and 0, 2, 6, 12, 24, 48, and 168 hours after BPVC or saline injection into the TA after assessing changes in the echo intensity up to the time of sacrifice in the same time course of the first study. "Histological changes in the muscle after the injection were observed and compared with the ultrasound images. Changes in the echo intensity in the TA after BPVC injection were compared between the control (non and saline injection) and injected limbs by a two-way analysis of variance with repeated measures. The echo intensity did not change significantly in muscles that did not receive an injection. BPVC injection induced greater (P