Dissertations / Theses on the topic 'Hormone chorionique gonadotrope (hCG)'

Après un rappel de la nature biochimique et des propriétés histologiques et immunologiques de l' hormone chorionique gonadotrope (hCG) l' auteur expose la technique de production des antigènes monoclonaux et la technique du dosage immuno-radiométrique de hCG et de ses sous-unités libres alpha et bêta utilisant les mêmes antigènes monoclonaux. A la lumière d' une étude de 125 patients porteurs de tumeurs malignes digestives comparée à une série de 139 sujets sains, il apparaît qu' hCG n'est pas un marqueur des cancers digestifs. La signification clinique et biologique de la détection de l' hCG dans le sérum et les tissus humains normaux et pathologiques est discutée, conduisant à la remise en question du concept de "sécrétion ectopique" de hCG et de ses sous-unités. Ce travail est la première étape d' une étude prospective visant à sélectionner une sous-population de tumeurs sensibles au traitement par le platine.

La glycosylation est l’addition de glycanes sur une protéine, appelée alors glycoprotéine. C'est l'une des modifications post-traductionnelles les plus courantes et elle a un impact sur l'activité et la stabilité de la protéine. L’hormone chorionique gonadotrope humaine (hCG), appelée communément hormone de grossesse, est une protéine hautement glycosylée, composée de deux sous-unités, hCGα et hCGβ, ayant au total quatre sites de N- et quatre sites de O-glycosylation, conduisant à un nombre très élevé de glycoformes. Or, l’état de glycosylation de cette hormone essentielle de la grossesse a été associé à certaines pathologies de celle-ci. C'est pourquoi il est nécessaire de pouvoir analyser les glycoformes de la hCG présentes dans des échantillons biologiques. Dans ces travaux, de nouvelles méthodes ont été développées pour l'analyse à l’échelle intacte des glycoformes de la hCG par nanochromatographie en phase liquide (nanoLC) couplée à la spectrométrie de masse (MS). Le format miniaturisé de la séparation a permis une augmentation de la sensibilité de la méthode et son couplage avec un analyseur de haute précision et haute résolution en masse, un Orbitrap, a permis de détecter et de semi-quantifier plusieurs glycoformes de la sous-unité α dans des médicaments à base de hCG, mais aussi d’une autre gonadotrophine partageant la même sous-unité α, l'hormone folliculo-stimulante (FSH). L’optimisation d'une étape de préconcentration en amont de la nanoLC-MS et du gradient de phase mobile et de sa nature ont permis ensuite de détecter des glycoformes de la hCGβ pour la première fois et d'un plus grand nombre de glycoformes de la hCGα. Puis, cette méthode analytique utilisant soit de l'acide formique soit de l'acide trifluoroacétique comme additif de la phase mobile a été évaluée pour la détection des glycoformes des sous-unités α et β de différents médicaments à base de gonadotrophines d’origine recombinante ou urinaire. Enfin, dans le but de déterminer les glycoformes de la hCG dans le sérum de femmes enceintes, c'est-à-dire dans des échantillons biologiques complexes plutôt que dans des médicaments concentrés et relativement purs à base de gonadotrophines, il a été nécessaire de développer une étape d'extraction sélective des glycoformes de la hCG avant leur analyse par nanoLC-MS. Ainsi, des immunoadsorbants ont été synthétisés en immobilisant deux anticorps anti-hCG différents sur un support solide. Les premières expériences d'immunoextraction de la hCG ont donné des résultats prometteurs<br>Glycosylation is the attachment of glycans to a protein, so-called a glycoprotein. It is one of the most common post-translational modifications and it impacts protein activity and stability. Human chorionic gonadotropin (hCG) is a highly glycosylated protein, composed of two subunits, hCGα and hCGβ, having in total four N- and four O-glycosylation sites, leading to a very high number of glycoforms. However, the glycosylation state of this hormone essential for pregnancy was associated with some pregnancy pathologies. For this reason, it is necessary to be able to analyze the hCG glycoforms present in biological samples. In this work, new analytical methods for the analysis at the intact level of hCG glycoforms by nano liquid chromatography (nanoLC) hyphenated with mass spectrometry (MS) were developed. The miniaturization of the separation allowed an increase in sensitivity and its coupling with a high mass accuracy and high mass resolution analyzer, an Orbitrap, allowed the detection and semi-quantification of several α-subunit glycoforms in hCG-based drugs, but also of another gonadotropin sharing the same α-subunit, the follicle-stimulating hormone (FSH). The optimization of both a preconcentration step in the nanoLC-MS set-up and of the mobile phase gradient and nature allowed the detection of hCGβ glycoforms for the first time and also of a higher number of hCGα glycoforms. Next this analytical method using either formic acid or trifluoroacetic acid as mobile phase additive was evaluated for the detection of the α- and β-subunits of different recombinant or urinary gonadotropin-based drugs. Finally, with the aim to determine hCG glycoforms in serum of pregnant women, i.e complex biological samples, rather than in concentrated and fairly pure gonadotropin-based drugs, it was necessary to develop a selective extraction step of hCG glycoforms before their analysis in nanoLC-MS. This is why, immunosorbents were synthesized by immobilizing two different anti-hCG antibodies on a solid sorbent. The primary experiments of hCG immunoextraction showed promising results

Durant la grossesse humaine, l'assise trophoblastique supporte la majorite des fonctions placentaires. La differenciation du cytotrophoblaste en syncytiotrophoblaste est fondamentale au developpement et au fonctionnement placentaire et ftal. Les premieres etapes de la formation du syncytium sont mal connues, de meme que les facteurs modulant ce phenomene de differenciation. Nous avons etudie les proprietes membranaires du trophoblaste humain lors de sa differenciation et particulierement la communication jonctionnelle et les permeabilites membranaires. Puis, nous avons recherche l'action de molecules susceptibles d'intervenir dans la differenciation par des mecanismes autocrines ou paracrines. Grace a la complementarite des techniques ultrastructurales, immunohistochimiques, biochimiques, cytofluorimetrique et electrophysiologiques nous avons mis en evidence les points suivants. La presence de jonctions gap et une communication jonctionnelle lors des premiers stades de la fusion conduisant au syncytiotrophoblaste a ete demontree. Ce passage par une etape de communication jonctionnelle est indispensable a la differenciation. La disparition de la communication jonctionnelle apparait etre un critere objectif et physiologique de la differenciation trophoblastique. L'hormone hcg, produite par le trophoblaste, stimule la communication jonctionnelle, augmente l'expression de cx43 et accelere le processus de differenciation trophoblastique. Elle emprunte la voie de l'ampc-pka. Par ailleurs, la voie de la pkc semble egalement etre impliquee. Le facteur de croissance tgf beta1 inhibe la communication inter-trophoblastique et la secretion d'hcg et ralentit la differenciation trophoblastique. Un glucocorticoide de synthese, la dexamethasone, possede une action stimulante sur la production d'hcg, sur l'expression d'hcs, sur la communication jonctionnelle et sur la differenciation morphologique. Le potentiel membranaire de repos n'evolue pas en fonction de la differenciation trophoblastique. Par contre, l'hormone hcg active une conductance chlorure au niveau du syncytium

Several cancers are associated with abnormal serum concentrations of tumor markers such as prostate specific antigen (PSA) in prostate tumor diseases, alfa-fetoprotein (AFP) or human chorionic gonadotrophin (hCG) in germ cell tumors or persistent gestational trophoblastic diseases (GTD). Cancer treatment should induce decline of serum tumor marker concentrations. The predictive values of many kinetic parameters supposed to characterize tumor marker declines such as nadir, time-point cutoff, half-life, time to normalization etc..., have been reported in previous studies. However very few of them have been used in routine due to the lack of outcome reproducibility. Population pharmacokinetic approach-based modeling is already used in pharmacokinetic studies. It might be helpful to characterize tumor marker decline equations dynamically and overcome limitations of previous studies. The feasibility and the relevance of this approach were assessed in 4 studies involving: PSA titers in patients with prostate adenoma or cancer treated with surgery; hCG-AFP in non-seminomatous germ cell tumor patients treated with BEP regimen (Bleomycin-Etoposide-Cisplatin) and hCG in GTD patients treated with methotrexate. Tumor marker decline modeling was feasible in all studies provided the methodology was adjusted to marker specificities. Apparent clearance of hCG and PSA might enable identification of patients with unfavorable decline profiles and thereby with high risk of relapse. Confirmatory studies with independent cohorts of patients are warranted

L’exposition prénatale à différents agents toxiques est généralement étudiée en considérant le placenta comme une barrière entre la mère et le fœtus ; nous le considérons en tant qu’organe cible des agents toxiques. Pour ce faire, nous avons sélectionné un modèle cellulaire de trophoblastes adapté aux études toxicologiques. En clinique, des pathologies de la grossesse sont associées à des modifications de la sécrétion de l’hormone placentaire lactogène hPL et de l’hormone gonadotrope chorionique hCG. Nos travaux in vitro ont permis de faire le lien entre une exposition à des micropolluants (le mono(2-ethylhexyl) phtalate, un perturbateur endocrinien, et le benzo(a)pyrene, un carcinogène) et ces observations cliniques. Les biomarqueurs de sécrétion hormonale (hPL et hCG hyperglycosylée) et de dégénérescence (activation du purinorécepteur P2X7) que nous avons identifiés permettent de détecter l’exposition et le risque suite à une exposition à des polluants<br>Prenatal exposure to pollutants is commonly evaluated using placenta as a barrier between mother and fetus. Here, we consider placenta as a target organ for toxic agents. To achieve this, we selected a trophoblastic cell model, which is adapted to toxicological studies. In clinical studies, pregnancy pathologies are associated to changes in human placental lactogen (hPL) and human chorionic gonadotropin (hCG) secretions. Our in vitro work links exposure to micropollutants (mono(2-ethylhexyl)phthalate, an endocrine disruptor, and benzo(a)pyrene, a carcinogen) and clinical observations. We identified biomarkers of hormonal secretion (hPL and hyperglycosylated hCG) and degeneration (P2X7 receptor activation), which enable the evaluation of exposure and risk attached to exposure to pollutants