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Dissertations / Theses on the topic 'Hybridation somatique'
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MASSON, JEAN. "Hybridation somatique chez la pomme de terre." Paris 11, 1990. http://www.theses.fr/1990PA112211.
Full textAbstract:
Un procede de regeneration de plantes a partir de protoplastes de mesophylle de clones diploides a ete mis au point. La culture in vitro des plantes-meres, sous un eclairement d'intensite 120 microe?m##2?s##1, et de photoperiode 13 heures, a permis d'obtenir des taux de division des protoplastes de 50%. Le procede de regeneration fait appel a quatre milieux de culture differents permettant: 1) l'obtention de divisions de protoplastes; 2) le developpement de colonies; 3) le developpement de cals; 4) la regeneration de plantes. La composition de ces differents milieux a ete optimisee. Cette methode a permis la regeneration de plantes a partir de protoplastes pour 17 clones diploides sur les 19 etudies. Des conditions de transfert direct de genes par electroporation de protoplastes ont ete mises au point. Elles permettent l'obtention de frequences de transformation de 0,5% a 2%. Trois clones diploides transformes ont ete regeneres: 217, resistant a la kanamycine, 90, resistant a l'hygromycine, et 71, resistant au chlorsulfuron. Des protoplastes des clones transformes 217 et 90, 217 et 71, 90 et 71 ont ete fusionnes. Des colonies possedant la combinaison des resistances des deux parents ont ete selectionnes. Des plantes tetraploides ont ete regenerees a partir de ces colonies, pour les 3 fusions somatiques. Des hybridations moleculaires avec des sondes portant des sequences codant pour des arn ribosomiques ont montre que les plantes tetraploides etaient des hybrides somatiques
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Chapel, Marc. "Hybridation somatique par électrofusion de protoplastes chez Nicotiana." Grenoble 2 : ANRT, 1987. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37603813n.
Full text
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LEFRANCOIS, CATHERINE. "Hybridation somatique chez la tomate (lycopersicon esculentum mill. )." Paris 6, 1992. http://www.theses.fr/1992PA066221.
Full textAbstract:
Un protocole de regeneration de plantes entieres a partir de protoplastes de differentes especes sauvages de lycopersicon (l. Chilense, l. Pennelli, l. Peruvianum et solanum lycopersicoides) a ete mis au point. Il est envisage que les organites (chloroplastes et mitochondries) aient un role dans les caracteres de resistance aux stress portes par les especes sauvages de lycopersicon. Malheureusement, en raison des incompatibilites sexuelles existant entre ces especes et la tomate lorsque celle-ci est employee comme parent male, il est impossible de placer le noyau tomate en situation d'alloplasmie. L'obtention d'hybrides somatiques et de cybrides de tomate pourrait permettre l'etude du role eventuel des organites vis-a-vis des caracteristiques de tolerance aux stress. Des experiences d'hybridation somatique par fusion de protoplastes de l. Esculentum et l. Peruvianum ont ete effectuees. L'utilisation d'un genotype transgenique de tomate s'est revelee satisfaisante, et plusieurs hybrides somatiques possedant differents niveaux de ploidie sont actuellement en cours d'etude. En parallele, la recherche d'un materiel pouvant conduire a la production in vitro de cybrides de tomate a ete effectuee
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VERMEULEN, AGNES. "Recherche de sterilite male cytoplasmique chez la chicoree par hybridation somatique." Paris 11, 1993. http://www.theses.fr/1993PA112113.
Full textAbstract:
Une methode efficace de transformation genetique des chicorees via agrobacterium a ete mise au point, notamment pour introduire un marqueur selectionnable in vitro tel que le gene neo permettant la selection des produits de fusion issus d'hybridation somatique. Une analyse du comportement des protoplastes de chicoree en fonction des conditions de culture des plantes meres et de la composition des milieux de culture des protoplastes a ete effectue. Quatre genotypes sur onze ont regenere des plantes a partir de la culture de protoplastes. La culture de protoplastes d'une chicoree chioggia manifestant une deficience chlorophyllienne dont le determinisme est d'origine cytoplasmique a permis de regenerer des plantes entierement albinos. Des experiences d'hybridation somatique ont ete realisees avec plusieurs especes appartenant a des genres distincts de la famille des asteracees sans toutefois obtenir la regeneration d'une plante issue de produits de fusion. Une etude, de type rflp, du genome mitochondrial du complexe d'especes composant le genre cichorium et de plusieurs autres especes appartenant a la tribu des chicoraceae (asteraceae) a revele une variabilite mitochondriale au sein du genre cichorium et precise les relations entre ce genre et les genre supposes apparentes
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FISCHER, CHRISTIANE. "Protoplastes de tournesol (helianthus annuus l. ) : regeneration de plantes fertiles et hybridation somatique." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1993. http://www.theses.fr/1993STR13128.
Full textAbstract:
Un systeme de regeneration reproductible de plantes fertiles a partir de protoplastes de cotyledons et d'hypocotyles d'h. Annuus a ete mis au point. Ces etudes ont montre le role determinant de certains facteurs pour l'obtention de cals organogenes. Ce sont la nature organique de la source d'azote apportee au milieu de culture, l'inclusion des protoplastes dans une matrice semi-solide, le genotype. Un seul genotype, au cours d'un criblage de 18 genotypes, a regenere des pousses. Pour pallier aux difficultes d'enracinement des pousses regenerees in vitro, un systeme original a ete developpe: la greffe de ces pousses sur des porte-greffes. Les plantes regenerees, ainsi acclimatees en serre, ont produit des graines. Un systeme de regeneration de plantes a partir de protoplastes d'h. Rigidus, une espece sauvage, est en bonne voie. Des pousses ont ete obtenues par organogenese indirecte. Elles sont encore anormales. Les facteurs determinants pour la regeneration mis en evidence par cette etude sont: le conditionnement des plantes sources de protoplastes, la culture en milieu liquide des protoplastes, l'agitation et les dilutions des cultures a intervalles reguliers. L'hybridation somatique a ete abordee en fusionnant deux genotypes d'h. Annuus. Des cals ont ete obtenus, qui resultent d'une fusion symetrique. Leur obtention a necessite la mise en place d'outils techniques. Les protoplastes sont fusionnes par voie chimique (peg). Les produits de fusion sont identifies sur des criteres morphologiques. Ils sont isoles manuellement du melange de fusion par l'intermediaire d'un microcapillaire actionne par un micromanipulateur. Pour permettre une culture a faible densite des heterocaryons, un nouveau systeme a ete concu, base sur la presence de cellules nourricieres. Il permet l'induction de la division des heterocaryons, malgre leur faible nombre, puis la formation de cals. L'analyse isoenzymatique de ces cals a confirme le caractere hybride d'un certain nombre d'entre eux
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Fritz-Coupat, Régine. "Contribution à l'obtention d'hybrides somatiques et à leur caractérisation chez Lycopersicon." Paris 11, 1989. http://www.theses.fr/1989PA112269.
Full textAbstract:
In the first part of this thesis is described the characterization of plants issued from somatic hybridization between tomato (Lycopersicon esculentum> and Solanum pennellii protoplasts. The cytological, biochimical and molecular analysis performed, showed that these plants are diploid (2n = 24) as their parents, and expressed some nuclearly encoded traits from their parents. Chloroplastic and mitochondrial DNA restriction patterns indicate that their cytoplasm are identical to the tomato cytoplasm. The second part concerned the import of chloroplasts from Solanum nigrum (confering a resistance to the triazine), into the L. EscuLentum and the L. Peruvianum cytoplasms by somatic hybridization. A method for obtaining protoplasts able to divide, and subsequent regeneration of plants is described. Plants regenerated from s. Nigrum and L. Peruvianum protoplasts only were obtained. Somatic hybridization between L. EscuLentum and s. Nigrum, and L. Peruvianum and S. Nigrum were performed by proto piast electrofusion. Irradiation of S. Nigrum (350 or 1000 Gy) favoured asymetric hybridizations. All the plants regenerated from a fusion between L. EscuLentum and S. Nigrum have the S. Nigrum phenotype, and display triazine resistance. The plants regenerated from a fusion between L. Peruvianum and irradiated S. Nigrum have the L. Peruvianum phenotype. Triazine resistance tests will allow us to screen the plants having S. Nigrum chloroplasts<br>La première partie de notre travail concerne la caractérisation de plantes obtenues lors d’expériences d’hybridation somatique entre la tomate cultivée, (L. Esculentum) et S. Pennellii. Les quatre types d’analyses réalisées, cytologique génétique, biochimique et moléculaire indiquent que les plantes régénérées sont diploïdes, (2n=24), comme les parents et possèdent des caractères nucléaires des deux partenaires. L’étude des profils de restriction des ADN chloroplastique et mitochondrial de ces plantes, permet de conclure que leur cytoplasme est identique à celui de la tomate cultivée. La seconde partie de notre travail est consacrée au transfert des chloroplastes de S. Natrum, conférant la résistance aux thiazines, dans le cytoplasme de. L. Esculente, puis de L. Peruvianum, par la technique d’hybridation somatique. Un protocole d’obtention et de division des protoplastes, suivi de la régénération de plantes est mis au point. Des régénérations ne peuvent être obtenues qu’à partir de protoplastes de S. Nigrum et L. Peruvianum. Les expériences d’hybridation somatique entre L. Esculentum et S. Nigrum, puis entre L. Peruvianum et S. Nigrum sont réalisées par électrofusion de protoplastes des deux partenaires. L’irradiation de S. Nigrum par rayon Ƭ à des doses de 350 ou 1000 Gy, permet de favoriser les hybridations asymétriques. Les plantes régénérées lors d’expériences d’hybridation entre. L. Esculemtum et S. Nigrum, ont toutes le phénotype de S. Nigrum et sont résistantes aux triazines. En ce qui concerne L. Peruvianum et S. Nigrum irradié, les plantes régénérées possèdent le phénotype de L. Péruvianum, des tests de résitances aux triazines permettront de sélectionner d’éventuels transferts de chloroplastes
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Téoule, Evelyne. "Élargissement de la variabilité génétique chez Medicago sativa L. Par hybridation somatique : intérêts et limitations." Paris 11, 1987. http://www.theses.fr/1987PA112433.
Full textAbstract:
Le genre Medicago appartient à la famille des Légumineuses; il comprend plus de 50 espèces largement réparties dans le monde. Une faible part de richesse génétique est exploitée. En effet l’espèce M. Sativa et dans une moindre mesure l’espèce M. Falcata constituent la base génétique de l’espèce cultivée. La sélection classique a donné beaucoup de résultats mais actuellement certains problèmes tels l’amélioration du rendement sont difficiles à résoudre. C’est pourquoi un travail sur l’augmentation de la variabilité génétique au sein de l’espèce cultivée a été entrepris. L’objectif était l’exploitation des espèces sauvages, la plupart de celles-ci ne se croisant pas avec M. Sativa, l’hybridation somatique a été choisie comme outil de travail. Une collection d’espèces sauvages a été testée pour l’aptitude à la culture de protoplastes. Des régénérations de plantes ont ainsi été obtenues sur des espèces proches de M. Sativa (M. Varia, M. Tianshanica, M. Falcata, M. Hemicycla and M. Coerulea). Sur les espèces plus éloignées, les résultats vont de l’absence de divisions à la formation de cals. Chez M. Sativa plusieurs variétés sont aptes à la culture de protoplastes. Des hybridations somatiques ont été tentées pour 47 combinaisons entre des types sativa (ou proches) et des types sauvages. Des plantes ont été obtenues à partir de 6 combinaisons de fusion différentes: M. Sativa et M. Arborea. M. Sativa et M. Polymorpha, M. Sativa et M. Jupulina, M. Sativa et M. Romanica. M. Sativa et M. Falcata. L’analyse de marqueurs morphologique et d’isoenzymes ainsi que les critères de fertilité n’ont pas permis de conclure à la nature hybride de ces plantes. Toutefois de fortes perturbations morphologiques et chromosomiques (polyploïdie) ont été observées. Des hybrides somatiques M. Sativa + M. Falcata précédemment obtenus ont été observées en champ et en serre. Il ressort de ces études un comportement particulier des hybrides au niveau somatique (instabilités phénotypiques ponctuelles) et au niveau reproducteur (difficultés de croisement). Par ailleurs un caractère d’intérêt agronomique (production de stolons) absent chez les 2 parents et chez l’hybride sexué est apparu chez un des hybrides somatiques. Une réflexion sur l’intégration de l’hybridation somatique en amélioration des plantes est ensuite envisagée en tenant compte de l’ensemble de ces résultats<br>Genus Medicago belongs to leguminous tribe; it includes more than 50 species widely scattered all over the world. A small part of this genetic wealth is used. For the species M. Sativa and ln a lower part M. Falcata compose the genetic basis of the cultivated species. Classical plant breeding has given a lot of results but presently some problems like yield improvement are difficult to solve. It is the reason why a work dealing with genetic variability increase within the cultivated species has been under taken. The main aim is utilization of species, most of them don't cross sexually with M. Sativa, so somatic hybridization is the tool we used. Wild species of a collection were tested for protoplast culture. Plant regeneration has been obtained with some species akin to M. Sativa (M. Varia, M. Tianshanica, M. Falcata, M. Hemicycla and M. Coerulea). With remote species we obtained callus, or just some divisions or even no divisions. Plant regeneration from protoplast can be obtained with several cultivars of M. Sativa. Somatic hybridization has been tried on 47 combinations of saliva types and wild types. Plants have been obtained from 6 different ones: M. Sativa and M. Arborea. M. Sativa and M. Polymorpha, M. Sativa and M. Jupulina, M. Sativa and M. Romanica. M. Sativa and M. Falcata. Morphological markers, isoenzymes were analysed either was fertility: nothing allowed us to identify somatic hybrids. Yet we noticed great disorders in morphology and ploïdy level. Somatic hybrids we got previously have been studied in field and in greenhouse. Their behaviour is quite special on somatic level (punctual phenotypic instabilities) and on reproductive level (troubles in crossing). Otherwise an interesting agronomy feature, (stolons production), has appeared on one of the somatic hybrids although missing on the 2 parents an on the sexual hybrid. Consideration about introducing somatic hybridization ln plant breeding is done lacking ail these results into account
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Hassanpour-Estahbanati, Abolghassem. "Régénération de plantes à partir de protoplastes et après hybridation somatique dans le genre lycopersicon." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37598234v.
Full text
9
Téoule, Evelyne. "Elargissement de la variabilité génétique chez Medicago sativa L. par hybridation somatique intérêts et limitations /." Grenoble 2 : ANRT, 1987. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376102693.
Full text
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AIT, BARHOUCH JALILA. "Developpement des protoplastes et hybridation somatique chez les ectocarpales (fucophycees). Caracterisation des produits de fusion." Paris 6, 1996. http://www.theses.fr/1996PA066451.
Full textAbstract:
La mise en oeuvre de l'hybridation somatique chez les fucophycees necessite une bonne maitrise des mecanismes d'isolement, de regeneration des protoplastes et de selection des produits de fusion. Deux ectocarpales filamenteuses, pylaiella littoralis et ectocarpus siliculosus, ont ete choisies pour realiser ce travail grace aux avantages qu'ellespresentent dans des etudes fondamentales et a finalite biotechnologique : structure du thalle simple, cultures axeniques, taux eleve d'isolement et de regeneration des protoplastes. L'optimisation des conditions d'isolement a permis d'obtenir de facon repetitive une grande quantite de protoplastes viables aptes au developpement chez les deux especes. Les modalites de regeneration suivies par les protoplastes de ces deux souches sont identiques. Les protoplastes se divisent et regenerent selon trois modeles differents qui peuvent etre mis en relation avec leur cellule d'origine et leur etat morphogenetique au sein du thalle. Deux techniques, electrique et chimique (peg), ont ete utilisees pour fusionner les protoplastes de p. Littoralis. La chelation par le citrate de sodium des ions calcium presents dans toutes les solutions de traitement des protoplastes est necessaire pour induire la fusion. Seule la methode chimique a permis d'obtenir des produits de fusion viables. Ces derniers sont selectionnes apres regeneration sur des caracteres phenotypiques et analyses par cytometrie en flux. Les histogrammes obtenus apres analyse en cytometrie en flux des niveaux de plodie des produits de fusion revelent des pics correspondant a la population tetraplode majoritaire temoignant que la fusion est effective. Differentes approches ont ete abordees pour obtenir des souches possedant des marqueurs biochimiques ou moleculaires permettant, dans le cadre d'un programme de fusion, de realiser un tri precoce des hybrides putatifs intergeneriques entre p. Littoralis et e. Siliculosus. C'est dans cette optique que nous avons mis en oeuvre, chez les protoplastes de p. Littoralis, la transformation par la strategie biolistique et la mutagenese par irradiation au uv. La technique rapd, developpee chez ces deux ectocarpales, s'est revelee efficace pour discriminer ces especes en fournissant des marqueurs moleculaires detectant un polymorphisme d'adn interspecifique.
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Hassanpour-Estahbanati, Abolghassam. "Régénération de plantes à partir de protoplastes et après hybridation somatique dans le genre lycopersicon." Paris 11, 1986. http://www.theses.fr/1986PA112097.
Full textAbstract:
Cette étude présente la mise au point d’une technique de régénération et de l’hybridation somatique dans le genre Lycopersicon, afin d’introduire une information génétique de résistance à la salinité et/ou à la sécheresse chez la tomate cultivée : L. Esculentum. La régénération de plantes à partir de protoplastes de L. Pennellii, L. Chilense et L. Esculentum a été obtenu. Les plantes issues d’une expérience d’hybridation somatique interspécifique entre L. Escelentum et L. Pennellii sont analysées. L'étude ’cytologique et morphologique montre que : « ces plantes sont issues de fusion de deux protoplastes et elles présentent des caractères morphologiques des deux parents. » Enfin, une stratégie d’utilisation de ces techniques dans le genre Lycopersion, tant sur le plan fondamental que sur le plan de l’amélioration des plantes, est discutée<br>This thesis sought to identify a procedure for regeneration and somatic hybridization in the genus Lycopersicon, in order to introduce salt and/or drought resistance from wild species in cultivated tomatoes. The effect of explant, genotype, and physiological stage of protoplasts source plant and culture technique were studied. Plant regeneration was achieved from protoplasts of L. Pennellii, L. Chilense and L. Esculentum. The regenerated plants after an interspecific somatic fusion between L. Esculentum and L. Pennellii were analyzed. Cytological and morphological studies demonstrate that:"These plants are issued from fusion of two protoplasts and they have a morphological intermediate between two parents. " Finally, the use of these techniques in the genus Lycopersicon, for fundamental questions or in plant breeding is discussed
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Cabasson, Cécile. "Régénération de la mandarine commune (Citrus deliciosa Ten. ) par embryogénèse somatique en milieu liquide : Fusions somatiques et essais de transformation génétique." Montpellier 2, 1993. http://www.theses.fr/1993MON20257.
Full textAbstract:
Un procede de culture cellulaire en milieu liquide a ete developpe pour une espece modele, la mandarine commune (citrus deliciosa ten. ). La recherche des facteurs permettant d'orienter a volonte les cultures cellulaires de la multiplication indifferenciee vers l'embryogenese somatique, a montre que la diminution de la densite cellulaire au moment de l'inoculation est 60 fois plus efficace que le remplacement du saccharose par le galactose. La difference de comportement des cellules, placees sur galactose ou sur saccharose, se determine tres tot comme en temoignent les differences de consommation de 4 principaux macroelements (calcium, phosphore, potassium, magnesium). La modification des conditions de l'environnement hydrique, avec l'utilisation de systeme a immersion temporaire, favorise la morphogenese des embryons et leur aptitude a la germination. Disposant d'un systeme de culture cellulaire efficace, les manipulations genetiques ont pu etre envisagees. Deux techniques complementaires ont ete abordees: fusion de protoplastes et transfert de genes dans des protoplastes, tous deux induits par le polyethylene glycol. Apres fusion somatique, des jeunes plantes ont ete regenerees tandis que l'etape de regeneration a echoue dans les experimentations de transformation genetique
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Mejjad, Meftaha. "Isolement et régénération de protoplastes de 4 souches de Pilayella littoralis (L. ) Kjellm d'origines géographiques différentes ; application à l'hybridation somatique." Paris 6, 1992. http://www.theses.fr/1992PA066250.
Full textAbstract:
Pilayella littoralis (L. ) Kjellm, une Phéophycée filamenteuse primitive a été choisie comme un modèle pour l'analyse des mécanismes d'isolement et de régénération des protoplastes d'algues marines en raison de particularités biologiques et expérimentales ; organisation cellulaire simple, cycle de développement haplodiplophasique, cultures axéniques, informations disponibles au niveau moléculaire. Les protoplastes ont été isolés à partir de quatre souches d'origine géographique différente cultivés au laboratoire dans les mêmes conditions axéniques. Les rendements en protoplastes sont différents en fonction de la souche d'origine, de l'état du développement des thalles et de la concentration, de la solution enzymatique et en citrate de sodium, un chélateur des ions calcium impliqués dans la cohésion de la matrice alginique de la paroi. Tous les protoplastes peuvent régénérer un thalle. L'une des souches, régulièrement fertile en culture, porte des zoïdocystes pluri et uniloculaires. Après digestion enzymatique, les protoplastes de cellules végétatives et les zoïdes sont identifiables et montrent des modalités de développement différentes. Les différences observées entre les quatre souches peuvent être considérées comme génotypiques en raison de leur stabilité phénotypique, y compris après régénération des protoplastes, confirmée partiellement par des différences au niveau des profils de restriction de l'ADN chloroplastique et le polymorphisme de longueur des segments d'ADN amplifiés par PCR. Les souches identifiées ont été utilisées à la mise en œuvre de l'hybridation somatique par électrofusion des protoplastes
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Aslane-Chanabe, Christel. "Regénération de plantes à partir de photoplastes chez le genre Helianthus et hybridation somatique entre le tournesol cultivé et les tournesols sauvages." Toulouse, INPT, 1991. http://www.theses.fr/1991INPT004A.
Full textAbstract:
L'amelioration genetique du tournesol cultive necessite l'introduction de caracteres agronomiquement interessants provenant des tournesols sauvages. En raison de la difficulte des croisements interspecifiques, l'hybridation somatique a ete retenue pour resoudre ce probleme. Cette technique requiert la maitrise de la regeneration de plantes entieres a partir de protoplastes, la mise au point d'un protocole de fusion performant et d'une methode de selection des produits de fusion. L'etude a porte sur divers tournesols cultives ainsi que sur trois tournesols sauvages. Les protoplastes ont ete isoles a partir d'hypocotyles et un protocole standard d'isolement, de purification et de culture a ete mis au point. La culture apres inclusion des protoplastes dans l'agarose, en presence de faible teneur en acide 2,4-dichlorophenoxyacetique conduit, simultanement, au developpement de colonies classiques et d'embryoides. Chez helianthus petiolaris, ce systeme a permis, et ce pour la premiere fois dans le genre helianthus, la regeneration de plantules a partir de protoplastes. Au niveau de l'hybridation somatique, la methode d'electrofusion avec agregation prealable des protoplastes par le peg a ete retenue. L'application de cribles de selection sur les protoplastes parentaux a permis d'obtenir essentiellement des heterocaryons dans les melanges fusionnnes qui ont ete conduits jusqu'au stade cal. Les analyses isoenzymatiques de ces cals semblent confirmer la nature hybride des produits de fusion
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Debeaujon, Isabelle. "Contribution a la mise au point d'une methode de transfert de genes par hybridation somatique asymetrique chez le melon (cucumis melo l)." Paris 11, 1991. http://www.theses.fr/1991PA112248.
Full textAbstract:
Un protocole conduisant a la regeneration de plantes entieres a partir de protoplastes (p) de melon (cucumis melo) cantaloup charentais est decrit. Les protoplastes sont isoles a partir de feuilles et de cotyledons preleves sur des plantes cultivees in vitro. La sequence de culture comprend quatre milieux (m) destines a l'induction des divisions des protoplastes (m. 1), a la croissance des microcolonies (m. 2), a l'induction morphogenetique (m. 3) et au developpement des structures neoformees (m. 4). L'inclusion des protoplastes dans l'agarose ameliore les taux de viabilite et de divisions. Ces derniers, releves apres 14 jours de culture en m. 1 a une densite de 10#5 p. Ml##1, sont en moyenne de 60% et 30% quel que soit l'organe. La modulation de l'equilibre auxine/cytokinine exogene au niveau du m. 3 permet d'orienter la morphogenese vers une embryogenese somatique (4,5 m de 2,4-d et 0,4 m de bap) ou une caulogenese (2,2 m de bap et 2,3 m de kin). Le maltose se montre superieur au saccharose pour le developpement des nodules caulogenes en bourgeons sur m. 4. Des conditions d'electrofusion de protoplastes de c. Melo avec des protoplastes de c. Metuliferus ou de cucurbita pepo prealablement irradies aux rayons gamma ont ete mises au point. Trois plantes tetraploides ont ete regenerees a l'issu d'une experience de fusion entre c. Melo et c. Metuliferus. Leur morphologie ainsi que les zymogrammes des peroxydases, de la glutamate oxaloacetate transaminase, de la phosphoglucomutase et de la malate deshydrogenase sont identiques a ceux du parent melon. Les origines possibles de ces plantes sont discutees
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Sot, Véronique. "Étude de croisements interspécifiques au sein d'espèces du genre Medicago : comparaison entre les hybrides issus de fusion somatique et de croisements sexués." Paris 11, 1988. http://www.theses.fr/1988PA112001.
Full textAbstract:
Nous présentons une étude de la variation induite par hybridation interspécifique sexuée et somatique au sein du genre Medicago. Trois formes diploïdes de M. Falcata L. Et M. Sativa L. Sont caractérisées morphologiquement et leurs descendances F1 intra-et interspécifiques analysées selon un plan diallèle Les variations, supérieures au niveau interspécifique, portent essentiellement sur les aptitudes générales à la combinaison. Les hybrides sur cytoplasme M. Falcata L. Manifestent plus de vigueur. Par ailleurs, des plantes tétra-et octoploïdes, issues d'hybridation somatique entre deux génotypes tétraploïdes de M. Sativa L. Et M. Falcata L. , sont comparées aux hybrides sexués correspondants, à ploïdie équivalente. Les hybrides sexués et témoins octoploïdes sont obtenus par doublement à la colchicine. Contrairement aux plantes octoploïdes les tétraploïdes ont, en moyenne, des valeurs agronomiques inférieures à celles des hybrides sexués et du témoin-variété. Des niveaux de ploïdie variables et des modifications morphologiques sont observés chez les descendants des plantes octoploïdes. Les perspectives d'utilisation de ces techniques d'hybridation pour améliorer la luzerne cultivée, M. Sativa L. , sont examinées<br>We present a study of the variation induced by sexual and somatic interspecific hybridization in the genus Medicago. Three diploid forms of M. Falcata L. And M. Sativa L. Are morphologically characterized and their intra-and interspecific F1 progenies analysed according to a diallelic plane. The main variations concern the general combining ability and are greater at interspecific level. The hybrids on M. Falcata L. Cytoplasm are more vigorous. On the other hand, tetra-and octoploid plants that were issued from somatic hybridization between two tetraploid genotypes of M. Sativa L. And M. Falcata L. , are compared with corresponding sexual hybrids to same ploidy level. The octoploid sexual hybrids and controls are obtained by colchicine doubling. Contrary to octoploid plants, tetraploids have lower agronomies values on average than that of sexual hybrids and standard variety. Variable ploidy levels and morphological modifications are observed among the cross progenies of octoploïd plants. Prospects from these hybridization techniques for breeding of the cultivated alfalfa, M. Sativa L. , are examined
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Thomas, Clément. "Etude du rôle de l'acide indole-3-acétique dans le système de morphogenèse alternative des embryons zygotiques immatures du tournesol (Helianthus annuus L. )." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2003. http://www.theses.fr/2003STR13234.
Full textAbstract:
La régénération de novo d'une plante peut se faire selon deux voies de morphogenèse différentes : l'organogenèse ou l'embryogenèse somatique. Le système expérimental de morphogenèse alternative des embryons zygotiques immatures (EZI) de tournesol offre la possibilité unique d'induire l'une ou l'autre voie de morphogenèse à partir des mêmes cellules. La BAP, seule hormone du milieu de culture, est indispensable à l'induction de la morphogenèse dont l'orientation dépend de la concentration en saccharose du milieu. Les études présentées dans ce mémoire visent à mieux définir le rôle de l'AIA endogène dans l'induction et l'orientation de la morphogenèse. Le dosage et l'immunolocalisation de l'AIA ont permis de montrer qu'un pulse d'AIA s'établit dans les EZI au cours des premières heures de culture. Le dépassement d'un seuil critique déclencherait l'embryogenèse somatique. Lorsque ce seuil ne serait pas atteint, l'organogenèse serait induite. Ces hypothèses ont été vérifiées en étudiant les effets sur la réponse morphogène d'une modulation expérimentale de la teneur en AIA endogène, au moyen d'applications locales d'AIA. Afin d'obtenir des données sur la sensibilité à l'AIA des cellules réactives, l'expression du gène ABP1, codant pour un récepteur putatif de l'AIA, a été étudiée au cours de la culture des EZI. Les résultats ont révélé que les transcrits ABP1 s'accumulent dans les cellules réactives dès le début de la culture et que cette accumulation est plus soutenue en conditions embryogènes qu'en conditions organogènes. Ainsi, la réactivité des cellules pourrait s'expliquer par une capacité particulière à percevoir l'AIA. En conditions embryogènes, un phénomène d'hypersensibilité à l'AIA pourrait renforcer l'aptitude d'une teneur en AIA élevée à déclencher l'embryogenèse somatique. Enfin, la compétence embryogène des EZI cultivés sur différents milieux de culture a été étudiée par l'analyse de l'expression du gène marqueur Somatic Embryogenesis Receptor-like Kinase<br>Plant regeneration can occur via two different pathways, i. E. Shoot organogenesis or somatic embryogenesis. The alternative morphogenesis experimental system of immature zygotic embryos (IZE) of sunflower offers the unique opportunity to induce both morphogenic pathways from the same cells. The BAP is the sole hormone included in the culture medium and is required for the induction of the morphogenic response whose orientation depends on the sucrose concentration of the medium. The work presented in this thesis aimed to define the role of endogenous IAA in the induction and the orientation of morphogenesis. Quantification and immunolocalisation of IAA showed that an internal IAA pulse occurred in IZE during the first hours of culture. When a critical threshold is reached, embryogenesis would be induced, while shoot organogenesis would be induced when IAA concentration remains low. These hypotheses were confirmed by investigating the effects on the morphogenic response of experimental IAA concentration modulation, using local application of IAA. To investigate the sensitivity to IAA of reactive cells, the expression of the ABP1 gene, which encodes a putative IAA receptor, was studied during IZE culture. Results led us to hypothesize that the reactivity of the cells could be a result of their particular responsiveness to IAA conferred by ABP1 expression and that, under embryogenic conditions, cellular hypersensitivity to IAA could reinforce the ability of a high IAA concentration to induce somatic embryogenesis. Finally, the competence of IZE cells to form somatic embryos was investigated using the Somatic Embryogenesis Receptor-like Kinase gene as a marker of embryogenic competence. Results suggested that, whatever the morphogenic conditions, reactive cells developed an identical embryogenic competence. This competence would be expressed by yet unknown factors specifically activated in response to the strong auxin signal generated in embryogenic culture conditions
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COLLONNIER, CECILE. "Contribution a l'analyse des combinaisons genomiques obtenues par hybridation somatique entre l'aubergine (s. Melongena l. ) et des especes voisines apparentees resistantes a des maladies telluriques." Paris 11, 2001. http://www.theses.fr/2001PA112005.
Full textAbstract:
Le seul moyen de lutte veritablement efficace contre les deux principales maladies de l'aubergine, que sont le fletrissement bacterien (ralstonia solanacearum) et la verticilliose (verticillium dahliae), est le developpement de materiel genetique resistant. Cette etude a eu pour objet d'analyser les possibilites de transfert de genes de resistance a ces maladies telluriques par fusion somatique interspecifique. Des hybrides somatiques symetriques ont ete produits par electrofusion de protoplastes entre solanum melongena et trois especes apparentees resistantes : s. Aethiopicum, s. Torvum et s. Sisymbrifolium. Apres determination de leur niveau de ploidie par cytometrie en flux, le caractere hybride des plantes regenerees a ete demontre par des analyses morphologiques, biochimiques (isoenzymes), cytogenetiques (hybridation genomique in situ) et moleculaires (rapds, microsatellites, capss). La fertilite des hybrides produits est apparue inversement proportionnelle a la distance phylogenetique separant les partenaires de fusion. Des tests d'inoculation in vitro ont ete adaptes a l'aubergine, et ont montre que plusieurs hybrides exprimaient des niveaux de resistance, aux deux races de ralstonia solanacearum et a la souche de verticillium dahliae testees, proches de ceux des especes apparentees ou intermediaires entre leurs deux parents. Des tests au champ ont confirme la resistance au fletrissement bacterien des hybrides d'aubergine et de s. Aethiopicum. Les hybrides somatiques symetriques les plus fertiles ont ete ramenes a l'etat dihaploide par androgenese in vitro en utilisant la culture d'antheres et de microspores. Les dihaploides produits, dont la morphologie et les niveaux de resistance presentaient une assez grande variabilite, ont conserve une fertilite suffisante pour permettre le retrocroisement des plus resistants d'entre eux sur l'aubergine. Afin d'ameliorer la fertilite des hybrides obtenus entre s. Melongena et les deux especes eloignees s. Torvum et s. Sisymbrifolium, des experiences de fusion asymetrique ont ete realisees par irradiation aux rayons uv des protoplastes du parent donneur. Les analyses moleculaires et les tests de resistance realises n'ont pas ete suffisants pour confirmer l'hybridite des plantes regenerees. Celle-ci n'a pu etre que suggeree par leur difficulte de developpement in vitro et en serre, et leur niveau de ploidie.
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SERRAF, ISABELLE. "Evaluation des combinaisons genomiques obtenues par hybridation somatique entre la pomme de terre (solanum tuberosum l. ) et des solanacees de plus ou grandes affinites phylogenetiques." Paris 11, 1991. http://www.theses.fr/1991PA112267.
Full textAbstract:
Le comportement cultural et l'electrofusion de protoplastes ont ete etudies chez differentes solanacees, particulierement chez la pomme de terre. Des hybrides somatiques interspecifiques et intergeneriques ont ete obtenus entre la pomme de terre (solanum tuberosum cv bf15 ou nicola) et respectivement s. Berthaultii et lycopersicon pennellii. L'etat hybride des plantes regenerees a ete confirme par analyse des isoenzymes (electrophorese) et determination des niveaux de ploidie (cytometrie en flux, comptages chromosomiques). La morphologie des plantes a ensuite ete suivie en culture sous tunnel. L'introgression de caracteres interessants apportes par les especes sauvages (resistance aux insectes pour s. Berthaultii; tolerance au sel pour l. Pennellii) a ete quantifiee chez les hybrides par l'utilisation de diverses techniques (evaluation de la densite en trichomes de type a, mesure de l'activite des polyphenoloxydases, etude de la croissance et de l'enracinement in vitro en presence de nacl). Les 2 hybrides intergeneriques obtenus sont tetraploides, a priori steriles, mais capables de tuberiser. Un de ces hybrides presente une tolerance au sel comparable a celle du parent sauvage. Apres hybridation interspecifique, les hybrides tetraploides resistants aux insectes sont morphologiquement plus proches de l'espece sauvage que de l'espece cultivee. Par contre, les hybrides hexaploides sont proches de la pomme de terre et 2 d'entre eux presentent un niveau de resistance superieur a celui du parent cultive
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JADARI, RACHIDA. "Contribution a l'etude chez la pomme de terre de la resistance au verticillium dahliae kleb et a son introgression par hybridation somatique chez un clone sensible." Paris 11, 1993. http://www.theses.fr/1993PA112089.
Full textAbstract:
Le present travail s'integre dans le cadre de l'etude de la resistance de la pomme de terre a la verticilliose. Dans une premiere partie, l'analyse au champ de l'action de 4 souches marocaines de v. Dahliae sur 3 varietes de pomme de terre (nicola, desiree et kathadin) a ete faite en etudiant differentes composantes de la resistance de la pomme de terre au v. Dahliae critere de croissance, de symptomes foliaires et critere de production. Chez les 3 varietes, toutes les composantes ont ete touchees a des degres plus ou moins eleves. Chacune des varietes a manifeste cependant une reponse propre en fonction de la souche et du critere concerne. L'essai in vitro a porte sur les memes varietes infectees par les filtrats des memes souches, dans le but de mettre au point un test precoce in vitro pour l'evaluation de la resistance de la pomme de terre au v. Dahliae. Une bonne correlation a ete etablie entre la sensibilite au filtrat in vitro et les pertes du rendement en tubercules au champ. Dans une seconde partie, nous avons tente d'evaluer la possibilite de transfert des genes de la resistance au v. Dahliae par le biais de la fusion de protoplastes. Des hybrides somatiques interspecifiques ont ete obtenus entre solanum tuberosum cv nicola h#1 et s. Torvum. L'etat hybride des plantes regenerees a ete confirme. Des back-fusion ont ete effectuees entre l'hybride (s. Torvum+nicola h#1) et nicola h#1
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Perronnet, Christine. "Recherche de nouvelles méthodes d'obtention de souches productrices de métabolites secondaires par hybridation somatique : fusion de protoplastes de catharanthus roseus ; mise au point d'une technique d'électrofusion ; enrichissement et essais de culture des produits hybrides." Tours, 1989. http://www.theses.fr/1989TOUR3801.
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Fock-Bastide, Isabelle. "Introduction de la resistance au fletrissement bacterien chez la pomme de terre (solanum tuberosum l. ) par hybridation somatique avec deux especes apparentees, s. Phureja et s. Stenotomum." Paris 11, 2000. http://www.theses.fr/2000PA112334.
Full textAbstract:
La lutte contre le fletrissement bacterien cause par ralstonia solanacearum passe par l'utilisation ou la creation de materiel resistant adapte aux souches locales. Dans le but d'introduire des caracteres de resistance a la maladie, des hybrides somatiques interspecifiques ont ete obtenus, par electrofusion de protoplastes, entre solanum tuberosum, cv bf15, et deux especes sauvages phylogenetiquement proches de la pomme de terre (s. Phureja et s. Stenotomum). Apres determination des niveaux de ploidie, l'etat hybride des plantes regenerees est confirme par l'analyse des isoenzymes (esterases et peroxydases) et par celle des adn nucleaire et chloroplastique. Outre les caracteres morphologiques intermediaires entre celui des parents de fusion, les hybrides somatiques presentent une vigueur particuliere (croissance plus importante, taille plus grande, activite rubisco plus elevee que celles des parents). L'evaluation de la resistance au fletrissement bacterien a necessite la mise au point et la validation d'un test in vitro. La methode d'inoculation in vitro se revele fiable car elle donne des resultats comparables a ceux obtenus avec la methode standard en chambre climatique. L'interaction plante/r. Solanacearum a egalement pu etre caracterisee par l'etude des cinetiques des fuites d'electrolytes engendrees par les tissus infiltres par la bacterie, y compris ceux issus de vitroplants. Les cinetiques sont alors significativement differentes selon la nature de l'interaction (compatible ou incompatible). L'introduction de resistance au fletrissement bacterien a partir de s. Phureja et s. Stenotomum est un succes. Le comportement des hybrides obtenus avec s. Phureja, face aux souches reunionnaises, est identique a celui du parent sauvage (tolerance a la souche de race 1 mais sensibilite moyenne a celle de race 3). Les hybrides de s. Stenotomum semblent plus prometteurs car resistants a la souche de race 1 et tolerants a celle de race 3.
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Lizard, Gérard. "Modifications phénotypiques associées aux papillomavirus : analyse "in vitro" des possibilités de l'hybridation somatique entre des fibroblastes de souris 3T3.4E et des kératinocytes de verrue des mains et contribution des lignées tumorales humaines HeLa et CaSki." Lyon 1, 1989. http://www.theses.fr/1989LYO1H081.
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GERUNGAN, REVFLY. "Production et analyse des combinaisons genomiques obtenues par hybridation somatique entre la pomme de terre (solanum tuberosum l. ) et deux especes tuberiferes apparentees, solanum tarijense hawkes et solanum berthaultii hawkes, resistantes au fletrissement fongique et bacterien." Paris 11, 2001. http://www.theses.fr/2001PA112233.
Full textAbstract:
En vue de l'introduction des caracteres de resistance au fletrissement fongique et bacterien, et aussi d'evaluer leurs performances, des hybrides somatiques intra- et interspecifiques ont ete produits, par electrofusion de protoplastes, d'une part, en combinant divers clones dihaploides de pomme de terre (solanum tuberosum l. ), et d'autre part, en associant s. Tuberosum dihaploides avec deux especes tuberiferes apparentees, s. Tarijense et s. Berthaultii. Les 5 plantes issues de fusion intraspecifique aminca + bf15 sont tetraploides. Parmi les 18 plantes issues de fusion interspecifique s. Tarijense + s. Tuberosum, 14 sont tetraploides, 3 hexaploides, et 1 mixoploide. Pour les plantes selectionnees du couple s. Berthaultii + s. Tuberosum, 4 sont tetraploides et 1 aneuploide. L'etat hybride des plantes selectionnees a ete confirmee par l'examen des isoenzymes, et aussi par l'analyse de l'adn nucleaire et cytoplasmique a l'aide des marqueurs microsatellites. Les hybrides somatiques sont morphologiquement intermediaires et fertiles. Ils presentent une vigueur importante qui se traduit au niveau de la morphologie generale des plantes, de la croissance en hauteur et de la taille des feuilles, ainsi qu'au niveau de la tuberisation. En particulier, des evaluations au champ realisees au maroc ont montre que certains clones hybrides intraspecifiques ont donne un rendement en tubercules 2-3 fois superieur a celui des varietes tetraploides. Des tests d'inoculation in vitro ont revele que les hybrides s. Tarijense + s. Tuberosum exprimaient des niveaux de resistance au filtrat brut de culture de verticillium dahliae, intermediaires ou similaires a ceux du parent sauvage resistant. Le comportement des hybrides avec s. Berthaultii, vis a vis de ralstonia solanacearum, est similaire a celui du parent sauvage, qui s'est montre tolerant au pathogene.
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Turpin, Christian. "Hybridations somatiques partielles en vue d'introduire une stérilité mâle cytoplasmique chez la tomate cultivée, L. esculentum." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376016426.
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Turpin, Christian. "Hybridations somatiques partielles en vue d'introduire une stérilité mâle cytoplasmique chez la tomate cultivée (L. Esculentum)." Paris 11, 1986. http://www.theses.fr/1986PA112348.
Full textAbstract:
Nous avons élaboré un plan expérimental pour introduire une stérilité mâle chez la tomate: a- transfert de la stérilité mâle par: 1) fusion de protoplastes et caractérisation des produits de fusion 2) transfert de mitochondries par des fusions de plus en plus dirigées. B- élargissement du programme aux transferts d'autres organites: 1) les chloroplastes 2) les noyaux
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Gehrke, Christophe. "Hybridation in situ fluorescente à l'aide de sondes alphoïdes des chromosomes x et y : intérêt dans l'étude du chimérisme hématopoïétique après greffe allogénique de moelle osseuse." Bordeaux 2, 1997. http://www.theses.fr/1997BOR2P006.
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Bettane-Casanova, Myriam. "Déterminisme du sexe masculin chez l'homme : approches sérologique, génétique et moléculaire." Paris 7, 1985. http://www.theses.fr/1985PA077006.
Full textAbstract:
Chez les mammifères, le sexe génétique de l'embryon est déterminé au moment de la fécondation, selon la répartition des chromosomes X et Y dans l'oeuf. La constitution des chromosomes sexuels est homogamétique (XX) chez la femelle et hétérogamétique (XY) chez le màle. Des données cytogénétiques établies de longue date indiquent que le déterminisme de la différenciation sexuelle masculine repose sur le capital génétique porté par le chromosome Y. Tout organisme normal pourvu de ce chromosome est destiné à subir irrévocablement une longue succession de phénomènes de différenciation. Ces phénomènes déterminent dans un premier temps l'organisation et la nature des cellules germinales et des gonades développées au cours de l'embryogénèse, puis dans un second temps, les processus qui permettent d'aboutir à l'établissement du sexe phénotypique, seul définissable à la naissance. Nous sommes partis de l'hypothèse émise par Wachtel et Ohno, selon laquelle un facteur émis ou contrôlé par le chromosome Y et dénommé antigène H-Y orienterait vers une différenciation testiculaire l'évolution d'une ébauche gonadique, qui, en son absence, aboutirait à un ovaire. D'après des analyses sérologiques utilisant un test radioimmunologique quantitatif, que nous avons mis au point, associées à des analyses cliniques, cytogénétiques et physiologiques, nous avons tenté d'élucider le rôle de l'antigène H-Y dans la détermination primaire du sexe masculin chez l'homme. L'analyse de différents individus porteurs d'anomalies de la différenciation sexuelle révèle que si l'expression de l'antigène H-Y parait effectivement impérative au développement de testicules, observé même dans un contexte génétique ou physiologique apparemment paradoxal, elle n'entraîne cependant pas nécessairement la masculinisation. Il nous apparait aujourd'hui plus logique de proposer que l'antigène H-Y, dont la présence ou l'absence ne suffisent pas à elles seules à distinguer un organisme mâle d'un organisme femelle, soit en fait un antigène de différenciation embryonnaire, exprimé à un taux optimal au niveau de certaines cellules, à un stade particulier de l'embryogénèse. Par la suite, sa persistance n'étant plus nécessaire, il pourrait cesser d'être exprimé à un taux élevé, d'où les difficultés rencontrées tant dans la mise au point de tests quantitatifs que dans l'obtention d'anticorps monoclonaux.