To see the other types of publications on this topic, follow the link: Immunothérapie cancer.
Dissertations / Theses on the topic 'Immunothérapie cancer'
Create a spot-on reference in APA, MLA, Chicago, Harvard, and other styles
Consult the top 50 dissertations / theses for your research on the topic 'Immunothérapie cancer.'
Next to every source in the list of references, there is an 'Add to bibliography' button. Press on it, and we will generate automatically the bibliographic reference to the chosen work in the citation style you need: APA, MLA, Harvard, Chicago, Vancouver, etc.
You can also download the full text of the academic publication as pdf and read online its abstract whenever available in the metadata.
Browse dissertations / theses on a wide variety of disciplines and organise your bibliography correctly.
1
Moussel, François. "L'interleukine-2 en immunothérapie anticancéreuse." Montpellier 1, 1990. http://www.theses.fr/1990MON11125.
Full text
2
Faure, Olivier. "Hsp70 : un antigène du soi pour l'immunothérapie du cancer." Paris 5, 2003. http://www.theses.fr/2003PA05N106.
Full textAbstract:
La mise au point d'un vaccin anti-tumoral efficace requiert l'identification de nombreux antigènes associés aux tumeurs, dont l'expression est fréquente dans des tumeurs d'origines histologiques variées. La protéine de choc thermique Hsp70 inductible (ou Hsp72) est fréquemment sur-exprimée dans les tumeurs humaines malignes d'origines variées, telles que le carcinome du sein, du poumon, du colon, du col de l'utérus et les ostéosarcomes. Afin d' établir l'intérêt de Hsp70 comme antigène associé aux tumeurs, trois peptides de Hsp70 ont été sélectionnés pour leur haute affinité pour HLA-A*0201. Ces peptides induisent des lymphocytes T cytotoxiques anti-tumoraux "in vivo" dans des souris transgéniques pour HLA-A*0201 et "in vitro" à partir de PBMC des donneurs sains HLA-A0201+. Ces épitopes sont la cible d'une réponse immunitaire. .The design of a broad application tumor vaccine requires the identification of tumor antigens expressed in a majority of tumors of various origins. The major stress-induccible heat shock protein Hsp70 (a. K. A Hsp72) is frequently overexpressed in human tumors of various histological origin, such as breast, lung, colorectal, cervical carcinoma and osteosarcoma. To assess the value of Hsp70 as a tumor associated antigen, three peptides from Hsp70 were selected for their high affinity for HLA-A*0201. These peptides were able to trigger anti-tumor cytotoxic T lymphocytes "in vivo" in HLA-A*0201-transgenic HHD mice and "in vitro" in HLA-A*0201+ healthy donors. These epitopes are tagets of an immune reponse in many HLA-A0201+ breast cancer patients. Hsp70 is thus a valuable tumor antigen for broad application tumor immunotherapy
3
Dadvar, Ehsan. "Characterization of cancer/testis antigen MAGE-A11 for immunotherapy of prostate cancer." Master's thesis, Université Laval, 2014. http://hdl.handle.net/20.500.11794/26789.
Full textAbstract:
Les antigènes testiculaires du cancer sont des cibles idéales pour l’immunothérapie du cancer car ce sont des protéines immunogéniques dont l’expression est restreinte aux cellules germinales et au cancer. Le but de cette étude est d’évaluer le potentiel de MAGE-A11, un antigène testiculaire du cancer, comme cible pour développer un vaccin contre le cancer de la prostate. Pour ce faire, l’anticorps monoclonal 5C4 qui a la capacité de reconnaître la présence de MAGE-A11 dans les tissus fixés et inclus en paraffine a été produit. De plus, l’expression de MAGE-A11 a été analysée sur plusieurs lignées de cellules cancéreuses. Il a été démontré que MAGE-A11 est exprimé dans plusieurs types de cancers notamment dans le cancer du côlon et du cerveau. Finalement, nous avons identifié trois épitopes du CMH classe II HLA-DR1 dans la protéine MAGE-A11 confirmant ainsi l’immunogénicité de cet antigène et son potentiel comme cible pour l’immunothérapie du cancer.Cancer/testis antigens are ideal targets for cancer immunotherapy because of their limited expression in normal tissues, aberrant expression in malignancies and their immunogenic properties. The aim of this study was to evaluate the potential of cancer/testis antigen, MAGE-A11, as an immunotherapeutic target for development of a prostate cancer vaccine. To accomplish this, we produced the monoclonal antibody 5C4 that is capable of recognizing MAGE-A11 in formalin-fixed paraffin-embedded tissues. We also investigated the expression of MAGE-A11 in a wide variety of cancer cell lines to determine the scope of its expression in cancer. It was shown that MAGE-A11 is widely expressed in malignancies. The highest MAGE-A11 expression was observed in colon cancer and astrocytoma brain tumors. Finally, we identified three naturally processed MHC class II HLA-DR1 epitopes in MAGE-A11 protein, thus confirming its immunogenicity and its potential as a target for cancer immunotherapy.
4
Duffour, Marie-Thérèse. "Immunisation antitumorale à l'aide d'un vecteur adénoviral codant pour l'antigène de tumeur P815A." Paris 5, 1998. http://www.theses.fr/1998PA05P074.
Full text
5
Zennadi, Rahima. "Immunothérapie des cancers colorectaux : contribution à l'étude de quelques problèmes." Nantes, 1992. http://www.theses.fr/1992NANTO9VS.
Full text
6
Calmels, Bastien. "Immunothérapie non-spécifique et immuno-monitoring pour le traitement du cancer." Paris 7, 2004. http://www.theses.fr/2004PA077185.
Full text
7
Kishi, Masae. "Strategies of Cancer Immunotherapy : Model of Triple Negative Breast Cancer." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2019. http://www.theses.fr/2019SACLS070.
Full textAbstract:
Les cellules souches cancéreuses (CSC) sont à l’origine de la progression tumorale, des métastases et rechutes tardives. Elles ont été identifiées dans de nombreux cancers, comme le cancer du sein triple négatif (TNBC) et cancers de grade III-IV. Elles sont résistantes aux chimiothérapies et radiothérapie et résident dans une niche immuno-répressive. Cette étude vise à évaluer une stratégie d’immunothérapie qui cible sélectivement les CSC dans le modèle murin 4T1-GFP-Luc mimant le TNBC. Le phénotype/ génotype des mamosphères a été initialement caractérisé. Basée sur l’analyse génomique des CSC, nous avons développé une immunothérapie active associée à des agents immuno-modulateurs. Nous avons mesuré la taille des tumeurs et suivi l’apparition des métastases par bioluminescence. Une étude immunologique et analyse génomique de la tumeur a été réalisée. La combinaison thérapeutique provoque le recrutement dans la tumeur de lymphocytes T (CD4 +, CD8 +) et lymphocytes B par augmentation de CXCL13, une réduction des lymphocytes T reg et cellules myéloïdes suppressives. Cette induction de réponse immunitaire provoque la diminution de la taille de la tumeur et des métastases. Cette nouvelle immunothérapie active de type vaccinale pourra être utilisée en association avec les traitements actuels pour des mesures prophylactiques et curatives dans une grande variété de cancersCancer stem cells (CSCs) are responsible for tumor progression, metastases, and late relapses. They have been identified in many cancers, such as triple negative breast cancer (TNBC) and grade III to IV cancers. They are resistant to chemotherapy and radiotherapy and reside in an immuno-repressive niche.This study aims to evaluate a immunotherapy strategy that selectively targets CSCs in the mouse model 4T1-GFP-Luc mimicking TNBC. The phenotype / genotype of mammosphere was initially characterized. Based on genomic analysis of CSC, we have developed an active immunotherapy associated with immunomodulatory agents. We measured the size of tumors and monitored the appearance of metastases by bioluminescence. We performed an immunological study and genomic tumor analysis. The therapeutic combination causes the recruitment of CD4 + and CD8 + T lymphocytes and B lymphocytes with increased CXCL13, the reduction of T reg cells and suppressive myeloid cells in the tumor. This induction of intra-tumor immune response leads to a decrease in tumor size and metastases.This new active immunotherapy can be used in combination with current treatments for prophylactic and curative measures in a wide variety of cancers
8
Royer, Pierre-Joseph. "Production de cellules dendritiques pour une immunothérapie anti-tumorale." Nantes, 2006. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=a7110036-4fc2-40d2-a380-11963abceb55.
Full textAbstract:
L'identification d'antigènes tumoraux reconnus par les lymphocytes T permet d'envisager l'immunothérapie des cancers. Les cellules dendritiques (DC), capables de présenter les antigènes et d'initier des réponses immunes, sont aujourd’hui largement utilisées dans les approches d’immunothérapie active. Les premiers essais chez l'homme montrent néanmoins la nécessité d'améliorer la méthodologie de production ex vivo des DC. Une raison de l’efficacité relative des vaccinations consiste dans la variabilité d’obtention des populations de DC, consécutive aux conditions de génération. Ainsi, une connaissance approfondie de la biologie des DC, associée à leur modalité de production est devenue primordiale. Ce travail a pour objectif de développer les conditions de culture favorables à l'obtention des DC et à en déterminer les conséquences sur leur activation. Il est à l'origine de deux protocoles cliniques d’immunothérapie dans la leucémie aiguë myéloblastique et le carcinome hépatocellulaireIdentification of tumour antigens recognized by cytotoxic T lymphocytes enables the development of cancer immunotherapy. Dendritic cells (DC) are professional antigen presenting cells that elicit T-cell responses. They are nowadays largely used in active immunotherapy strategy. However, first clinical trials highlight the need to improve ex vivo DC generation. Large DC population variability can be observed according to production mode. Thus, DC biology and production mode must be thoroughly understood. The aim of this study is to elaborate favourable culture conditions for DC generation and to determine the impact on DC activation. Two clinical vaccination protocols in acute myeloid leukaemia and hepatocellular carcinoma were developed from this work
9
Laroche, Adrien. "Un nouveau type d'anticorps bispécifique avec une activité de déplétion ciblée de facteurs solubles pro-tumoraux du microenvironnement tumoral pour la thérapie du cancer." Thesis, Montpellier, 2019. http://www.theses.fr/2019MONTT047.
Full textAbstract:
L'objectif de cette thèse est de concevoir un nouveau type d’anticorps thérapeutiques bispécifiques pour éliminer de manière ciblée des facteurs solubles pro-tumoraux du microenvironnement tumoral selon un mécanisme de sweeping antibody via le ciblage du récepteur de la transferrine (TfR1). Le TfR1 est un récepteur surexprimé dans de nombreuses tumeurs. Il permet l’apport cellulaire en Fer selon un mécanisme FcRn-like. Le facteur soluble à éliminer choisi pour cette preuve de concept est l’interleukine (IL-6), une cytokine multifonctionnelle impliquée dans la progression tumorale. Trois formats d’anticorps différents bispécifiques ont été conçus à partir d’anticorps antagonistes internalisants ciblant le TfR1 et d’un anticorps anti-IL-6 non neutralisant à liaison pH-dépendante. Nous avons mis en évidence que (1) les 3 formats d’anticorps bispécifiques conservent les propriétés de liaison à l’IL-6 (liaison à pH physiologique mais pas à pH acide) et au TfR1 des anticorps parentaux (blocage de l’internalisation du ligand holo-transferrine via le TfR1) et (2) qu’ils permettent l’internalisation de l’IL-6 via le TfR1. L’activité sweeping a été évaluée in vitro par une comparaison des activités inhibitrices des anticorps bispécifiques et de la combinaison des anticorps parentaux sur des lignées cellulaires à croissance IL-6 dépendante (myélome XG-6 et XG-7) ou non (lymphome RAJI). L’élimination de l’IL-6 a également été mise en évidence in vivo en monitorant la concentation d’IL-6 dans le plasma de souris xénogreffées avec une lignée de cancer du pancréas productrice d’IL-6. Les résultats de cette thèse montrent qu’il est possible d’obtenir une activité sweeping TfR1-dépendante ce qui ouvre un large panel d’applications thérapeutiques dans le ciblage de facteurs solubles pro-tumoraux par l’utilisation de récepteurs tumeurs spécifiques-TfR1-likeThe objective of this thesis is to design a new type of bispecific therapeutic antibodies to selectively eliminate soluble pro-tumoral factors from the tumor microenvironment by a sweeping antibody mechanism by targeting the transferrin receptor (TfR1). TfR1 is an overexpressed receptor in many tumors. It allows iron cell supply by a FcRn-like mechanism. The soluble factor chosen for this proof of concept is interleukin (IL-6), a multifunctional cytokine involved in tumor progression. Three different bispecific antibody formats have been developed based on internalizing antagonistic antibodies targeting TfR1 and a pH-dependent non neutralizing anti-IL-6 antibody. We highlight that (1) the 3 formats of bispecific antibodies retain the binding properties to IL-6 (binding at physiological pH but not at acidic pH) and TfR1 of parental antibodies (blocade of holo transferrine internalization) and (2) allow the internalization of IL-6 via TfR1. Sweeping activity was evaluated in vitro, by comparing the inhibitory activities of bispecific antibodies and the combination of parental antibodies on cell lines with IL-6 growth dependent (myeloma XG-6 and XG-7) or not (lymphoma RAJI). IL-6 elimination was also demonstrated in vivo by monitoring IL-6 elimination in the plasma of xenografted mice with an IL-6-producing pancreatic cancer line. The results of this thesis show that it is possible to obtain a TfR1-dependent sweeping activity, which opens up a wide range of therapeutic applications in the targeting of pro-tumor soluble factors by the use of specific TfR1-like tumor receptors
10
Besancon, Marjorie. "Immunothérapie non-spécifique du cancer de la vessie : développement de nouvelles approches basées sur la combinaison d'agents thérapeutiques." Doctoral thesis, Université Laval, 2017. http://hdl.handle.net/20.500.11794/27996.
Full textAbstract:
Le cancer de la vessie est au niveau mondial le 9ème cancer en importance avec 430 000 nouveaux cas diagnostiqués en 2014. Les tumeurs vésicales infiltrant le muscle représentent environ 25% des tumeurs au premier diagnostic, alors que les tumeurs vésicales non infiltrant le muscle représentent environ 75% de ces tumeurs. Ces dernières sont généralement associées à un bon pronostic mais sont caractérisées par un taux élevé de récidive et de progression, alors que les premières sont d’emblée agressives et présentent un risque élevé de progression vers les stades avancés de la maladie. Parmi les différentes thérapies disponibles pour la prise en charge des tumeurs vésicales on retrouve l’immunothérapie non-spécifique par le Bacillus de Calmette-Guérin (BCG) pour les tumeurs non-infiltrant le muscle et, depuis peu, les inhibiteurs de point de contrôle immunologique (PCI) pour les tumeurs à des stades avancés. Le cancer de la vessie est un des rares cancers à bien répondre à l’immunothérapie, mais malgré cela ces traitements ne sont pas optimaux. L’objectif principal de mon projet était de développer de nouvelles approches immunothérapeutiques plus efficaces pour lutter contre les cancers de la vessie. Pour ce faire, trois approches complémentaires ont été investiguées dans des modèles murins de cancer de la vessie. Dans un premier temps, nous avons évalué in vitro et in vivo le potentiel du poly(I:C), un agoniste du TLR3, utilisé seul ou en combinaison avec le BCG. Alors que le poly(I:C) a induit une diminution de la prolifération et une induction de l’apoptose dans des cellules de cancer de la vessie traitées in vitro, la combinaison poly(I:C)/BCG a induit, in vivo, une régression tumorale complète chez 28% des souris traitées. Par la suite, nous avons évalué le potentiel de deux combinaisons d’inhibiteurs de PCI dans deux modèles murins différents de cancer de la vessie. La première combinaison étudiée est celle du blocage simultané des PCI PD-1 et TIM-3 testée dans le modèle MBT-2 puisque que la caractérisation des tumeurs MBT-2 a montré que ces deux récepteurs étaient des PCI fréquemment exprimés dans ces tumeurs. Le blocage in vivo de ces voies de signalisation a révélé que, dans les tumeurs MBT-2, PD-1 est associé à une activité pro-tumorale, alors que de façon étonnante, TIM-3 est associé à une activité anti-tumorale, révélant des fonctions opposées de ces deux PCI dans ces tumeurs. La seconde combinaison étudiée est celle des PCI PD-1 et LAG-3 testée cette fois-ci dans le modèle MB49. La caractérisation des tumeurs MB49 a démontré que PD-1 et LAG-3 étaient des PCI importants dans ces tumeurs. L’étude in vivo a démontré que l’inhibition conjointe des voies PD-1 et LAG-3 doublait le taux de survie, puisque 67% des souris démontraient une régression tumorale complète alors que les taux de survie étaient respectivement de 33% et 0% lorsque les anti-PD-1 et anti-LAG-3 étaient administrés en monothérapie. Finalement, puisque les androgènes semblent jouer un rôle important dans le cancer de la vessie, nous avons testé une approche combinant l’inhibition de PD-1 et du récepteur aux androgènes (AR). Nous avons démontré que l’enzalutamide et le seviteronel, des anti-androgènes de deuxième génération, induisaient in vitro une diminution de la prolifération des cellules de cancer de la vessie humaines et murines. In vivo, la combinaison d’enzalutamide et d’anti-PD-1 a démontré un taux de survie de 66%, soit un taux bien supérieur au taux de 16% observé lors de l’utilisation de l’enzalutamide ou de l’anti-PD-1 utilisés en monothérapie. Ces études ont ainsi permis d’identifier différentes avenues possibles, pour augmenter la réponse immune anti-tumorale, qui pourraient être testées en essais cliniques. Elles démontrent également que la combinaison d’approches thérapeutiques est très prometteuse pour l’avenir de l’immunothérapie du cancer de la vessie.Bladder cancer (BCa) is the ninth most common cancer in the world, with 430 000 new cases diagnosed in 2014. Muscle-invasive bladder cancer represents about 25% of bladder tumors, while non-muscle-invasive bladder cancer represents about 75% of these tumors. The latter are usually associated with a favorable prognosis but are characterized by a high rate of recurrence and progression while the former are aggressive from the onset and are at high risk of progression toward advanced disease. Among the various therapies available for the management of bladder tumors is non-specific immunotherapy using bacillus Calmette-Guerin (BCG) for the treatment on non-muscle invasive bladder tumors and, more recently, inhibitors of immune checkpoint (IC) for the treatment of advanced bladder tumors. BCa is one of the rare cancers to respond well to immunotherapy but, nevertheless, these treatments are suboptimal. The main objective of my project was to develop new immunotherapeutic approaches to fight more efficiently against BCa. To achieve this, three complementary approaches were investigated in murine BCa models. We first assessed in vitro and in vivo the potential of poly(I:C), a TLR3 agonist, used alone or in combination with BCG. While poly(I:C) induced anti-proliferative and apoptotic effects on BCa cells in vitro, the combination of poly(I:C) and BCG induced in vivo a complete tumor regression in 28% of treated mice. Then, we evaluated the potential of two combinations of IC inhibitors in two murine BCa models. The first combination studied was that of the simultaneous blockade of PD-1 and TIM-3 tested in the MBT-2 model because the characterization of the MBT-2 tumors showed that these two receptors where frequently IC expressed in these tumors. In vivo blockade of these pathways revealed that in MBT-2 tumors, PD-1 is associated to a pro-tumoral activity, whereas, TIM-3 is associated with anti-tumoral activity, revealing opposite functions of these IC in these tumors. The second combination studied was that of PD-1 and LAG-3 tested in the MB49 BCa model. The characterization of MB49 tumors showed that PD-1 and LAG-3 were important IC in these tumors. The in vivo study showed that the simultaneous blockade of PD-1 and LAG-3 increased the survival rate, since 67% of mice showed a complete tumor regression while the survival rates were 33% and 0% when anti-PD-1 and anti-LAG-3, respectively, were used in monotherapy. Finally, since androgens seem to play an important role in BCa, we tested an approach combining the inhibition of PD-1 and of the androgen receptor (AR). We showed that enzalutamide and seviteronel, two second generation antiandrogens, induced in vitro a decrease of the proliferation of human and murine BCa cells. In vivo, the combination of enzalutamide with anti-PD-1 showed a 66% overall survival rate, a rate that is much higher than the 16% rate observed when enzalutamide or anti-PD-1 were used alone. Thus, these studies allowed us to identify various possible ways to increase anti-tumor immune response that could be tested in clinical trials. They also show that the combination of therapeutic approaches is very promising the future of BCa immunotherapy.
11
Duault, Caroline. "L'IL-33 en immunothérapie anticancéreuse par les lymphocytes T Gamma Delta." Thesis, Toulouse 3, 2015. http://www.theses.fr/2015TOU30021/document.
Full textAbstract:
Les lymphocytes T Vgamma9Vdelta2 humains constituent la sous-population majoritaire de lymphocytes Tgammadelta dans le sang chez l'adulte sain et représentent 1% à 4% des cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC). Ce sont des lymphocytes T non conventionnels activés par des antigènes non peptidiques, les phosphoantigènes (PAgs) sans nécessité de restriction par les molécules du CMH. Ils jouent un rôle essentiel dans l'immunité anti-infectieuse et antitumorale, notamment en sécrétant des cytokines pro-inflammatoires et des molécules lytiques au contact de leurs cellules cibles. L'efficacité des lymphocytes T Vgamma9Vdelta2 en immunothérapie anticancéreuse est aujourd'hui démontrée mais reste fortement limitée en raison de la grande toxicité de l'IL-2 requise pour leur expansion. Toutes les cytokines de la famille de l'IL-2 possèdent la même toxicité intrinsèque, en raison de la chaîne gamma commune à tous les récepteurs de cette famille. Il est donc nécessaire de trouver une molécule alternative à l'IL 2, moins toxique mais tout aussi efficace, dont la transduction du signal ne dépend pas de la chaîne gamma. L'IL-33 est une cytokine de la famille de l'IL-1 appartenant au groupe des alarmines, dont le récepteur ST2/IL-1 RAcP est gamma chain-indépendant. Elle est naturellement présente dans le microenvironnement tumoral et son récepteur ST2 est exprimé sur de nombreuses cellules de l'immunité innée et adaptative. L'IL-33 est une cytokine pluripotente, pouvant induire à la fois des réponses immunitaires de type Th2 ou Th1. Néanmoins, aucune donnée n'était disponible quant à la bioactivité de l'IL-33 sur les lymphocytes T Vgamma9Vdelta2. Mes travaux de thèse ont donc consisté à déterminer si l'IL-33 pouvait potentialiser les fonctions anticancéreuses des lymphocytes T Vgamma9Vdelta2. Au cours de cette étude, nous avons montré que l'IL-33 associée à un PAg induit la prolifération et l'amplification des lymphocytes T Vgamma9Vdelta2 au sein des PBMC. Après amplification, les lymphocytes T Vgamma9Vdelta2 induits avec de l'IL-33 sécrètent des cytokines de type Th1 INF-gamma et TNF-alpha et ont une activité cytotoxique semblable à ceux induits avec de l'IL-2. De plus, nous avons mis en évidence que la prolifération des lymphocytes T Vgamma9Vdelta2 induite par l'IL-33 est issue d'un mécanisme complexe dépendant d'une interaction avec les lymphocytes T CD4. L'ensemble de ces résultats suggère que l'IL-33 pourrait représenter une bonne alternative à l'IL-2 dans les protocoles d'immunothérapie anticancéreuse impliquant des lymphocytes T Vgamma9Vdelta2Human Vgamma9Vdelta2 T cells represent the most prominent subset of gammadelta T cells in the blood of healthy adults, representing 1 to 4% of peripheral blood mononuclear cells (PBMC). These cells are non-conventional lymphocytes activated by non peptidic antigens, the phosphoantigens (PAgs), without restriction by MHC molecules. They are very important actors of anti-infectious and antitumor immune responses. Indeed, their activation upon a contact with their target cells lead them to secrete pro-inflammatory cytokines and lytic granules mediating cell cytotoxicity. Their efficacy in cancer immunotherapy is now demonstrated but appears strongly limited by the toxicity of IL-2 which is essential for their expansion. All the cytokines of the IL-2 family have the same toxicity owing to the gamma chain shared by all the receptors of the family. Therefore, it appears crucial to find as effective but safer alternative to IL-2 which signaling does not depend on the gamma chain. IL-33 is a member of IL-1 family belonging to the alarmins which its receptor ST2/IL-1RAcP does not require the gamma chain. It is naturally present in the tumor microenvironment and ST2 is expressed on numerous innate and adaptive immune cells. IL 33 is a multipotent cytokine able to sustain both Th2 and Th1 immune responses. However, its bioactivity on Vgamma9Vdelta2 T cells has never been studied. The aim of my PhD thesis consisted in determining if IL-33 could promote Vgamma9Vdelta2 T cell anticancer functions. We found that IL-33 enhances the proliferation and the amplification of PAg-activated Vgamma9Vdelta2 T cells. Moreover, we found that IL-33-induced Vgamma9Vdelta2 T cells display the same anticancer functions than those induced by IL-2, through their secretion of Th1 type cytokines and to their cytotoxic activity towards cancer cells. Interestingly, we found that Vgamma9Vdelta2 T cell proliferation induced by IL-33 is due to a complex mechanism requiring interaction with CD4 T cells. Altogether, these results suggest that IL-33 represents a potential alternative to IL-2 in Vgamma9Vdelta2 T cell-based immunotherapies
12
Benoit-Lizon, Isis. "Etude du rôle de STING dans la biologie des lymphocytes T CD4 : application en immunothérapie anticancéreuse." Thesis, Bourgogne Franche-Comté, 2021. http://www.theses.fr/2021UBFCI002.
Full textAbstract:
La reconnaissance des signaux de danger par les récepteurs PRR exprimés par les cellules immunitaires innées est cruciale pour la mise en place d’une réponse immunitaire adaptative efficace. STING (Stimulator of Interferon genes) est une protéine localisée dans le réticulum endoplasmique caractérisée en 2008 comme étant indispensable pour la détection des ADN cytosoliques et l’établissement d’une réponse immunitaire antivirale médiée par les Interférons (IFN) de type I. La protéine STING joue également un rôle clé dans la mise en place des réponses immunitaires antitumorales spontanées et l’administration de ligands de STING chez des souris porteuses de tumeurs permet le contrôle de la croissance tumorale. Ces observations sont vérifiées dans le cadre d’essais cliniques chez des patients atteints de mélanome, illustrant le potentiel thérapeutique de l’activation de STING en immunothérapie anticancéreuse.Toutefois, les mécanismes expliquant l’efficacité antitumorale des ligands de STING restent peu clairs. In vivo, les ligands de STING conduisent à l’activation des cellules dendritiques qui sont ensuite responsables de la mise en place de la réponse immunitaire adaptative. Si les lymphocytes T CD8 cytotoxiques présentent de fortes propriétés antitumorales, les lymphocytes T CD4, dits auxiliaires, sont également essentiels pour la mise en place d’une réponse immunitaire antitumorale efficace. La voie de signalisation STING a surtout été décrite dans les cellules myéloïdes. Néanmoins, plusieurs études ont montré que celle-ci était fonctionnelle au sein des lymphocytes T. Le rôle intrinsèque de STING sur les propriétés effectrices et antitumorales des lymphocytes T CD4 reste cependant mal caractérisé.Mes travaux ont permis de montrer que les ligands de STING augmentent respectivement la sécrétion d’IL-9 et d’IFN-γ par les lymphocytes TH9 et TH1, deux sous-types de cellules T CD4 dotés d’une forte activité antitumorale, et ce de manière dépendante de STING. Au niveau moléculaire, j’ai pu établir que STING module les fonctions effectrices de ces deux sous types à travers différents mécanismes : un axe IRF3-IFN-β pour les cellules TH1 et un axe indépendant des IFN type I pour les cellules TH9, mais dépendant de la voie mTOR. Les effets antitumoraux in vivo du ligand de STING 2’3’-cGAMP semblent impliquer les lymphocytes T CD4 ainsi que les cytokines effectrices spécifiques des TH1 et TH9, l’IFN-γ et l’IL-9 respectivement. Enfin, dans un contexte de transfert adoptif passif chez des animaux porteurs de mélanome, l’activation de STING permet d’augmenter les effets antitumoraux des cellules TH9. Ces données indiquent un nouveau rôle intrinsèque pour STING dans la modulation de la différenciation des lymphocytes T CD4 et de la mise en place de la réponse immunitaire adaptative antitumoraleRecognition of danger signals by intracellular or extracellular receptors expressed by innate immune cells is crucial for the establishment of an effective adaptive immune response. STING (Stimulator of Interferon Genes) is a protein located in the endoplasmic reticulum discovered in 2008 as being essential for the detection of cytosolic DNAs and the establishment of antiviral immune response mediated by type I interferons (IFNs). The STING protein also plays a key role in spontaneous anti-tumor immune responses and the administration of STING ligands in tumor-bearing mice favors tumor growth control. These observations have been verified in clinical trials in patients with melanoma, illustrating the therapeutic potential of activating STING in cancer immunotherapy.However, the mechanisms explaining the antitumor efficacy of STING ligands remain unclear. In vivo, STING ligands lead to dendritic cell activation. Dendritic cells are then responsible for setting up the adaptive immune response. While cytotoxic CD8 T lymphocytes have strong anti-tumor properties, helper CD4 T lymphocytes are also essential for the establishment of an effective anti-tumor immune response. The STING signaling pathway has mainly been described in myeloid cells, however several studies have shown that STING signaling pathway is functional in T lymphocytes. However, the intrinsic role of STING on the effector and antitumor properties of CD4 T lymphocytes remains unclear.My work reveals that STING ligands respectively increase the secretion of IL-9 and IFN-γ by TH9 and TH1 lymphocytes, two CD4 T cell subsets ascribed with potent anti-tumor activity, in a STING-dependent manner. Mechanistically, I was able to establish that STING modulates the effector functions of these two subtypes through different mechanisms: an IRF3-IFN-β axis for TH1 cells and an IFN-β-independent but mTOR-dependent axis for TH9 cells. In vivo antitumor effects of the STING ligand 2'3'-cGAMP involves CD4 T cells as well as the specific effector cytokines of TH1 and TH9, IFN-γ and IL-9 respectively. Finally, in the context of passive adoptive transfer in melanoma-bearing animals, activation of STING increases the antitumor effects of TH9 cells. These data indicate a new intrinsic role for STING in the modulation of the differentiation of CD4 T lymphocytes and the development of the adaptive anti-tumor immune response
13
Decobert, Marc. "Facteurs prédictifs de l'issue de l'immunothérapie au BCG des tumeurs superficielles de la vessie." Thesis, Université Laval, 2007. http://www.theses.ulaval.ca/2007/24953/24953.pdf.
Full text
14
Ballet, Carolne. "Vectorisation de galactosylcéramides par des archaeosomes et des liposomes en immunothérapie du cancer." Rennes, Ecole nationale supérieure de chimie, 2014. http://www.theses.fr/2014ENCR0022.
Full textAbstract:
Les galactosylcéramides possèdent une activité immunostimulante, conséquence directe de l’activation des cellules iNKT, qui contribue notamment au contrôle de la progression tumorale. Le KRN7000 (α-GalCer) est l’analogue synthétique le plus puissant, actuellement en phase clinique II en immunothérapie anticancéreuse. Il est néanmoins peu spécifique de la réponse antitumorale, possède une faible solubilité en milieu physiologique, et conduit à l’anergie des cellules iNKT. Ces travaux de thèse visent à pallier ces inconvénients par la vectorisation de l’α GalCer au voisinage des tumeurs via un anticorps. L’objectif est la potentialisation de l’immunostimulation induite par l’α GalCer couplé à l’anticorps, soit directement (glycoconjugué), soit formulé dans des nanocapsules lipidiques de type archaeosome ou liposome. Les préparations des partenaires α GalCer et archaeolipides ont été optimisées à l’échelle de la centaine de milligrammes. La synthèse de l’α GalCer repose sur la N acylation d’une galactosphingosine, obtenue par couplage glycosidique entre un fluorogalactosyle et une phytosphingosine. Les lipides synthétiques ont été préparés via l’introduction, sur le squelette tétraéther, de chaînes poly(éthylène glycol) (PEG) munies à une extrémité d’une fonction maléimide permettant l’accroche de l’anticorps. Les glycoconjugués et les formulations de l’α GalCer par des archaeosomes et des liposomes PEGylés ont ensuite été caractérisés. Les tests biologiques in vivo préliminaires réalisés sur les vecteurs ont permis de montrer le maintien de l’activité de l’α GalCer véhiculé par ceux-ci. Des travaux complémentaires sont envisagés afin d’optimiser ces systèmesGalactosylceramides possess an immune system stimulation which contributes, for instance, to tumor remission. This immunological response results from the activation of iNKT cells, a subpopulation of T lymphocytes, which are important contributors to the autoimmune response regulation. The most powerful synthetic analogue is KRN7000 (α GalCer), currently under phase II clinical trials in immunotherapy towards cancer. But it is not specific enough for antitumoral response, it is poorly soluble in physiological solution and leads to an anergic state of iNKT cells. With this work, we proposed to overcome these drawbacks by selectively deliver the glycolipid in the tumor environment by mean of an antibody targeting system. The main purpose is to increase the immunostimulating effect of an antibody coupled α GalCer administered whether directly (glycoconjugates), or loaded into lipid vesicles such as archaeosomes and liposomes. The synthesis of each partner was optimized up to a hundred of milligrams. α GalCer was obtained from N acylation of a galactosphingosin, which was synthesized by glycosidic coupling between a fluorogalactosyl donor and a phytosphingosin. Preparation of the synthetic lipids was based on the introduction of poly(ethylene glycol) (PEG) chains on tetraether skeleton. One end of this polymer possesses a maleimide, a suitable function to bind to the antibody. Glycoconjugates and α GalCer loaded PEGylated archaeosomes and liposomes were then characterized. Preliminary in vivo biological tests carried out on the vectors showed the preservation of immune activity of α GalCer loaded vesicles. New studies have to be done in order to optimize these systems
15
Tougeron, David. "Etude de la réponse immunitaire dans les cancers colorectaux." Rouen, 2012. http://www.theses.fr/2012ROUENR05.
Full textAbstract:
It is now clearly established that the immune system plays an important role in tumor growth control, and a strong conflation between the presence of tumor infiltrating lymphocytes (TIL) in colorectal cancers (CRC) and patients' overall survival has been shown. The activation and expansion of tumor antigen-specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) in vitro, followed by their administration to the patients, is a very promising approach for cancer treatment (adoptive immunotherapy). Artificial antigen-presenting cells (AAPC), allowing a powerful stimulation of CTL in all individuals sharing the same HLA class I molecule, were generated from murine fibroblasts. AAPC expressing carcinoembryonic antigen (CEA) failed to induce a specific CTL response against CEA (Article 1). The tolerance phenomena potentially involved in the lack of response observed against CEA led us to study neo-antigens, for which less tolerance phenomena are expected, in the context of CRC with RER+ (Replication errors) phenotype. The RER+ phenotype is found in 15% of CRC and is associated with an inactivation of DNA mismatch repair (MMR) system leading to genetic instability affecting repeated nucleotide sequences. This genetic instability causes mutations shifting the reading frame of genes carrying coding nucleotide repeat sequences. These shifts are responsible for the emergence of neo-antigens that may be immunogenic. Moreover, this phenotype is associated with a more important TIL density which is correlated with better patients' survival. In 61 RER+ CRC, we have demonstrated a correlation between infiltrating T cell (CD3+) density and mutation of two target genes: ASTEI and PTEN (Article 2). Currently, we are increasing the number of analyzed RER+ CRC (n=78) and we try to better characterize the tumor infiltrating cells (cytotoxic and regulatory T cells) using "Tissue microarray" (TMA). We have demonstrated a correlation beetween ASTEI, PTEN, and BAX mutations, and CTL (CD8+), but not regulatory T cell (FoxP3+) infiltrate. Neo-proteins corresponding to these mutations are therefore attractive targets to develop a cytotoxic T cell adoptive immunotherapy strategy in RER+ CRC. In parallel, we evaluated the immune response prognostic value in CRC RER+ and we demonstrated a correlation between the early metastatic invasion (venous emboli and lymphatic and perineural invasion) and regulatory T cell (FoxP3+) infiltration density (Article 3 in preparation). In addition, we implemented a clinical study on the prognostic value of lymphocyte infiltration in operated CRC in order to find a link with tumor recurrence at 2 years (TIL study). We have also begun an analysis of the cutaneous inflammatory response (acneiform papulo-pustular rash) associated with anti-EGFR (Epidermal growth factor receptor) treatment used in metastatic CRC (CUTACETUX study). This cutaneous toxicity is strongly correlated with treatment response. The study objective is to find a correlation between treatment response and skin inflammatory markers. Initial results show a Th17 cytokine expression increase in the skin. The ultimate aim of this work is a better understanding of the immune response mechanisms in CRC and the identification of tumor antigens for the development of adoptive immunotherapy strategy based on in vitro autologous CTL stimulation with our AAPCIl est aujourd'hui évident que le système immunitaire joue un rôle important dans le contrôle du développement des tumeurs, et une corrélation forte a été montrée entre la présence d'un infiltrat lymphocytaire dans les cancers colorectaux (CCR) et la survie des patients. L'activation et l'expansion de lymphocytes T cytotoxiques (LTC) spécifiques d'antigènes tumoraux in vitro, puis leur réinjection chez le patient est une approche très prometteuse pour le traitement des cancers (immunothérapie adoptive). Nous avons généré des cellules présentatrices d'antigène artificielles (CPAA) stables, permettant une stimulation très puissante des LTC chez tout individu partageant la même molécule HLA de classe I. L'utilisation de CPAA exprimant l'antigène carcino-embryonnaire (ACE) n'a pas permis d'induire une réponse lymphocytaire T cytotoxique spécifique contre l'ACE (article 1). Le rôle potentiel de la tolérance dans cette absence de réponse nous a conduit à étudier des néo-antigènes, pour lesquels moins de phénomènes de tolérance sont attendus, dans le cadre de CCR présentant un phénotype RER+ (Replication errors). Le phénotype RER+ est retrouvé dans 15% des CCR et est lié à l'inactivation du système de réparation MMR (Mismatch repair) de l'ADN à l'origine d'une instabilité génétique touchant les séquences répétées. Cette instabilité provoque l'apparition de mutations, décalant le cadre de lecture de gènes portant des séquences répétées codantes, à l'origine de l'apparition de néo-antigènes qui pourraient être immunogènes. Ce phénotype est associé à un infiltrat lymphocytaire tumoral plus important et à une meilleure survie. Dans 61 CCR RER+, nous avons mis en évidence une corrélation entre l'infiltrat lymphocytaire T (CD3+) et la mutation de deux gènes cibles : ASTE1 et PTEN (article 2). Ensuite, nous avons augmenté le nombre de patients avec un CCR RER+ analysés (n-78) et surtout nous avons mieux caractérisé les populations T (LT cytotoxiques et LT régulateurs) grâce à l'utilisation du «Tissue micro-array» (TMA), véritable système de "puces" tissulaires. Nous avons mis en évidence une corrélation des mutations de ASTE1, PTEN, et BAX, avec l'infiltrat T cytotoxique (CD8+), mais pas avec l'infiltrat T régulateur (FoxP3+). Les néo-protéines correspondant à ces mutations sont donc des cibles intéressantes pour développer une stratégie d'immunothérapie adoptive T cytotoxique des CCR RER+. Parallèlement, nous avons évalué le rôle pronostique de la réponse immunitaire dans les CCR RER+ et nous avons montré une corrélation entre l'invasion métastatique précoce (embols vasculaires, invasions lymphatiques et engainements péri-nerveux) et le taux de LT régulateurs (FoxP3+, article 3 en préparation). De plus, nous avons mis en place une étude clinique sur l'intérêt pronostique de l'infiltrat lymphocytaire dans les cancers colorectaux opérés afin de rechercher le lien avec la récidive tumorale à 2 ans (étude TIL). Nous avons également débuté une analyse de la réponse inflammatoire cutanée (rash cutané papulo-pustuleux acnéiforme) associée aux anti-EGFR (Epidermal growth factor receptor) utilisés dans le traitement des CCR métastatiques (étude CUTACETUX). Cette toxicité cutanée est fortement corrélée avec la réponse au traitement. L'objectif de l'étude est de rechercher une corrélation entre la réponse aux anti-EGFR et les marqueurs inflammatoires cutanés. Les premiers résultats mettent en évidence une augmentation des cytokines Th17 au niveau cutané. Le but ultime de ces travaux est une meilleure compréhension des mécanismes de la réponse immunitaire dans es CCR et l'identification d'antigènes tumoraux utilisables dans une stratégie d'immunothérapie adoptive basée sur la timulation in vitro de LTC autologues avec nos CPAA
16
Angel, Juliette. "Stratégies innovantes de vectorisation d'antigènes dans les cellules dendritiques." Grenoble 1, 2007. http://www.theses.fr/2007GRE10256.
Full textAbstract:
Problème de santé mondial, le cancer tue chaque année des milliers de personnes en France, malgré de réels progrès dans les traitements médicaux. Parmi ceux-ci, l'immunothérapie qui vise à stimuler le système immunitaire afin qu'il reconnaisse et élimine les cellules tumorales, fait l'objet de nombreuses études, notamment depuis la découverte de lymphocytes T spécifiques d'antigènes tumoraux. Bien que les premiers essais d'activation de lymphocytes T cytotoxiques réalisés in vitro et in vivo chez l'animal avec des peptides tumoraux ou des cellules tumorales aient été encourageants, les essais cliniques de vaccination qui ont succédé ont globalement échoué. Un nouvel axe de recherche est apparu avec l'amélioration des connaissances sur la biologie des cellules dendritiques myéloïdes (mDC), dont le rôle est primordial. En effet, les mDC sont capables d'initier les réponses immunes spécifiques car elles peuvent activer les lymphocytes T naïfs et restimuler les lymphocytes mémoires avec une grande efficacité. Les mDC sont, dès lors, devenues les candidates idéales pour l'immunothérapie anti-tumorale et les essais se sont multipliés. A nouveau, alors que les expériences réalisées in vitro et in vivo chez l'animal étaient très encourageantes, les essais cliniques ont été décevants ; l'injection de mDC chargées avec des antigènes tumoraux sous différentes formes n'induit que peu de réponses cliniques. Notre hypothèse est que l'efficacité de la vaccination anti-tumorale pourrait être améliorée par une optimisation du ciblage des antigènes tumoraux vers les DC in vivo. Dans ce travail, nous avons développé de nouvelles stratégies visant à vectoriser les antigènes tumoraux pour les délivrer efficacement, voire spécifiquement aux cellules dendritiques. Dans un premier temps, nous avons ciblé le récepteur au mannose, exprimé par les mDC, grâce à un vecteur chimique (le RAFT) qui permet d'accrocher à la fois des résidus mannose et des antigènes tumoraux (melan-A). Nous avons montré que le RAFT(Man)16-melan-A était efficacement endocyté par les mDC et que le peptide tumoral était cross-presenté aux lymphocytes T spécifiques. Dans un second temps, nous avons opté pour une stratégie permettant d'améliorer la stabilité de l'antigène tumoral et de le délivrer dans le cytosol des cellules en utilisant des virosomes. Les virosomes sont des particules dérivées du virus de l'Influenza, dont le matériel génétique a été retiré mais qui ont conservé les protéines membranaires du virus, et qui ont la particularité de pouvoir encapsuler des peptides ou des protéines. Grâce à la présence de l'hémagglutinine, ils peuvent être endocytés et ainsi délivrer leur contenu dans le cytoplasme de la cellule. Nous avons testé un virosome encapsulant le peptide tumoral melan-A et nous avons montré que les mDC étaient capables de présenter l'antigène tumoral aux lymphocytes T et de les activer efficacement. Parallèlement, nous avons réalisé la même étude sur une autre population de cellules dendritiques, les cellules dendritiques plasmocytoïdes (pDC). Ces cellules, encore largement méconnues, jouent un rôle unique dans l'immunité anti-virale grâce à la sécrétion d'IFN-α. Dans ces expériences, réalisées avec une lignée de pDC développée dans notre laboratoire à partir des cellules d'un patient atteint d'une leucémie à pDC (lignée GEN2. 2), nous avons montré que les pDC sont également capables de présenter un antigène encapsulé dans un virosome et d'activer efficacement les lymphocytes T spécifiques. Nous avons, par ailleurs, approfondi notre étude sur les fonctions biologiques des pDC dans l'immunité antivirale, notamment leur capacité à cross-présenter des antigènes issus de l'endocytose de cellules traitées par un virus. Dans notre modèle, nous avons montré que des lymphocytes B incubés avec le virus de l'Influenza inactivé étaient phagocytés par les pDC, que les pDC étaient alors activées et que les antigènes viraux cross-présentés activaient des lymphocytes T spécifiques. Cette caractéristique confère un rôle potentiel dans l'initiation des réponses immunes au même titre que son homologue myéloïde, et un rôle intéressant dans l'immunité anti-tumorale. Ainsi, à travers ce travail, nous avons développé des stratégies innovantes de vectorisation d'antigènes sur les cellules dendritiques en utilisant de nouveaux outils chimiques, viraux ou cellulaires. La validation in vitro de ces outils devra permettre, dorénavant, de mettre en place des expérimentations chez l'animal pour démontrer l'efficacité in vivo de ces stratégiesLn the aim of immunotherapy, we developped innovative strategies of antigen vectorization into dendritic cells. First, we targeted the mannose receptor expressed on myeloid dendritic cells with a chemical vector (RAFT) wich enables both graft mannose residues an tumoral antigens (melan-A). We demonstrated that RAFT(Man)wmelan-A was efficiently endocyted by mDG and that tumoral peptide wa crosspresented to specifie T cells. Secondly, we worked with influenza virus derived particles, called virosomes, wich genetic material has been removed and membrane proteins conserved. Virosomes can encapsulate proteins or antigens in their lumen. We demonstrated thé pDG can present virosome encapsulated antigens and activate specifie T cells. Finally, we explored biological functions of pDG in the context of antiviral immunity. Ln our model, we showed that inactivated influenza virus treated B lymphocytes were phagocyted by pDOl and that pDC were activated. Besides, we observed that viral antigens were crosspresented to specifie T cells
17
Goguet-Surmenian, Émilie. "Étude préclinique d’Immunothérapie des métastases osseuses expérimentales par la fractalkine." Thesis, Nice, 2014. http://www.theses.fr/2014NICE4131.
Full textAbstract:
Les métastases osseuses représentent un enjeu majeur de santé publique en raison de leur impact négatif sur la qualité de vie des patients mais également en raison de l’absence de traitements curatif. De nouvelles pistes thérapeutiques sont explorées dont l’immunothérapie anti-cancéreuse. En tant que principales responsables du recrutement leucocytaire, les chimiokines représentent des outils potentiels dans cette approche thérapeutique. La chimiokine fractalkine (CX3CL1) est impliquée dans de nombreux mécanismes physiologiques et pathologiques, dont le métabolisme osseux, la réponse immunitaire anti-tumorale mais également l’adressage et le développement tumoral, et ce de manière différentielle selon la forme considérée de cette chimiokine. En effet, CX3CL1 a la particularité d’exister sous deux formes : membranaire atypique (propriétés d’adhésion cellulaire) et soluble, typique des chimiokines (propriétés de chimioattraction). La mise en place d’un modèle syngénique murin de métastases osseuses expérimentales de carcinome pulmonaire nous a permis d’étudier l’effet de la forme soluble de CX3CL1 sur le développement métastatique en site osseux. L’expression ectopique de CX3CL1 soluble dans les cellules tumorales pulmonaires a conduit à une diminution de leur potentiel tumorigénique, une diminution de la résorption osseuse associée à une modification du ratio OPG/RANKL en faveur d’un phénotype ostéoblastique et à une modification du recrutement leucocytaire intratumoral en faveur d’une réponse immunitaire anti-tumorale. Outre l’importance de CX3CL1 dans le remodelage osseux, ce travail souligne le rôle essentiel du microenvironnement immunitaire dans la progression tumorale. Dans ce contexte, la forme soluble de CX3CL1 pourrait représenter un outil prometteur dans l’arsenal thérapeutique des métastases osseusesBone metastases represent a major public health issue due to their negative impact on patient’s quality of life as well as the current lack of curative treatment. New therapeutic leads are being investigated, among which is the anti-cancer immunotherapy. As the main molecules responsible for leukocyte recruitment, chemokines appear as potential tools for this therapeutic approach. The chemokine fractalkine (CX3CL1) is implicated in numerous physiological and pathological mechanisms, including bone metabolism, antitumor immune response as well as tumor homing and proliferation, in a differential manner depending on the considered form of CX3CL1. Indeed, the particularity of CX3CL1 is that it can exist under two forms: an atypical membrane-bound form (strong cellular adhesion) and a chemokine typical soluble form (chemoattraction). The development of a mouse syngeneic model of lung cancer experimental bone metastases allowed us to study the effect of the soluble CX3CL1 on metastatic development in a skeletal location. The ectopic expression of soluble CX3CL1 in the lung cancer cells led to a decrease of their tumorigenic potential, a decrease of bone resorption associated with a shift of the OPG/RANKL ratio toward an osteoblastic phenotype and a modification of leukocyte tumor infiltration in favor of an antitumor immune response. In addition to the importance of CX3CL1 in bone remodeling, this study underlines the essential role of the immune microenvironment in bone tumor progression. In this context, the soluble CX3CL1 could represent a promising tool in the therapeutic arsenal of bone metastases
18
Gautier, Fabien. "Vaccinothérapie des cancers coliques par les corps apoptotiques : identification et clonage de rBard1 [rat(BRCA1 associated RING domain)protein-1]." Nantes, 1999. http://www.theses.fr/1999NANT21VS.
Full text
19
Massé, Delphine. "Immunité antitumorale par les cellules présentatrices d'antigènes après phagocytose de corps apoptotiques." Nantes, 2002. http://www.theses.fr/2002NANT20VS.
Full textAbstract:
Le constat de l'efficacité relative des traitements actuel des cancers au stade avancé est à l'origine du regain d'intérêt pour l'immunothérapie. Les perspectives dans ce domaine résident principalement dans l'activation des lymphocytes par des antigènes tumoraux afin de déclencher une réponse efficace dans le rejet tumoral et la mise en place d'une surveillance immunitaire. Le concept d'immunothérapie active est basé sur l'idée que les cellules cancéreuses expriment des antigènes tumoraux identifiés ou non identifiés. Quand les antigènes associés aux tumeurs sont définis, il est possible de réaliser des vaccins spécifiques contre ces antigènes. Pour la majorité des cancers, les antigènes associés aux tumeurs ne sont pas connus, nous avons envisagé une vaccinothérapie nouvelle utilisant un large spectre d'antigènes tumoraux issus de cellules apoptotiques. Il a été démontré dans le laboratoire, sur un modèle animal, qu'une immunothérapie curative par injection de corps apoptotiques dérivés de cellules tumorales entraîne la régression de tumeurs établies et favorise la mise en place d'une mémoire immunitaire (Boisteau et al, 1997). .Resistance to chemotherapy and radiotherapy is an important impediment constraining the successful treatment of cancers. Manipulation of the immune system appears to have a positive effect on cancer. Priming with antigen presenting cells for the generation of tumor-specific responses usually requires prior definition of tumor-derived antigen and characterisation of the epitopes involved. With the exception of melanoma and renal cell carcinoma, however, few tumor-associated antigens have been defined and cloned thus far. The advantage of the injection of apoptotic cells is that the processing of tumor antigens from these bodies leads to the production of a wide panel of antigens and consequently to a diverse immune response. In our laboratory, we have developed a vaccination protocol based on the injection of apoptotic bodies plus IL-2 into the peritoneal cavity of rats before challenge with viable tumor cells. .
20
Corvaisier, Murielle. "Caractérisation de lymphocytes infiltrant les tumeurs coliques et implication du récepteur CD94/NKG2A dans l'immunité anti-tumorale." Nantes, 2006. http://www.theses.fr/2006NANT2043.
Full textAbstract:
Dans la perspective de développer des immunothérapies, j'ai étudié les lymphocytes T infiltrants les tumeurs coliques, en particulier 2 clones T, γ9. 2 et. β, spécifiques de la lignée tumorale autologue. J'ai montré: 1/ que le clone γ92 tue spontanément une majorité de lignées tumorales coliques, de façon TCR, LFA-3 et NKG2D dépendante et que tous les lymphocytes γ92 partagent cette propriété, suggérant l'intérêt de ces cellules en immunothérapie et 2/ que le clone. β co-exprime CD8β CD4 et sécrète un panel de cytokines potentiellement régulateur (TNF, IL-2, IL-4, TGF). Parallèlement, j'ai étudié le rôle de HLA-E, ligand du récepteur CD94/NKG2A, dans la réponse anti-mélanome. J'ai montré 1/ que HLA-E est exprimé par les mélanocytes et les mélanomes primaires mais est perdu ou fortement diminué dans les mélanomes métastatiques et 2/ la production, par les mélanocytes et les mélanomes métastatiques, d'une forme soluble de HLA-E, augmentée par l'IFN, mais dont le rôle est inconnuWith the perspective to develop immunotherapies of colorectal cancer, I studied the lymphocyte infiltrate (TIL) of these tumors, especially the phenotype and function of 2 clones: a 92 and an , specific for the autologous tumor cell line. I showed that : 1/ the 92 clone killed spontaneously the majority of colon carcinoma cell lines in a TCR- LFA-3- and NKG2D-dependant manner; 2/ all the 92 T cells shared this property, suggesting their interest for immunotherapy; 3/ the clone co-expressed CD8 and CD4 and secreted an array of cytokine of potential regulatory function (TGF-, IL-4, IL-2, TNF-). I also studied the role of HLA-E, the CD94/NKG2A receptor ligand, in the anti melanoma response. I showed that 1/ HLA-E is expressed in vivo by melanocytes and most primary melanoma tumor cells but fe metastatic ones; 2/ melanocytes and melanoma cell lines spontaneously shed a soluble form of HLA-E undescribed so far, of unknown function and upregulated by IFN-γ
21
Douillard, Jean-Yves. "Immunothérapie des cancers coliques : étude expérimentale dans un modèle d'adénocarcinome colique chimio-induit chez le rat." Nantes, 1993. http://www.theses.fr/1993NANT10VS.
Full text
22
Limagne, Emeric. "Implication des cellules myéloïdes immunosuppressives (MDSC) et des lymphocytes TH17 dans l’efficacité des chimiothérapies et de l’immunothérapie." Thesis, Paris Sciences et Lettres (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017PSLEP004/document.
Full textAbstract:
L’oncologie actuelle est encore confrontée à la résistance et à la progression rapide des cancers. Les mécanismes de résistance intrinsèque développés par les cellules tumorales peuvent compromettre l’efficacité des chimiothérapies et des immunothérapies. Il est maintenant admis que l’état de la réponse immunitaire de l’hôte détermine en partie l’issue thérapeutique des patients. L’objectif de notre équipe de recherche est donc de caractériser cette réponse et d’étudier l’impact des thérapies conventionnelles sur celle-ci dans le but d’identifier les mécanismes liés à un échappement futur de la tumeur. Dans ce contexte, nous avons montré qu’une chimiothérapie (5-FU, oxaliplatine, anti-VEGF (« Vascular Endothelium Growth Factor » : FOLFOX-bevacizumab) provoque chez certains patients une chute des gMDSC (cellules myéloïdes immunosuppressives granulocytaires) périphériques qui est associée à une meilleure réponse thérapeutique. Comme chez la souris, cet effet sur les gMDSC provoque néanmoins une élévation des Th17, une population pro-angiogénique, qui limite l’efficacité de la chimiothérapie. La suite de notre travail a eu pour objectif de tester l’effet « anti-Th17 » de l’activation de l’histone désacétylase SIRT1. SIRT1 est une enzyme capable de perturber l’acétylation de STAT3, un facteur essentiel à la différenciation des Th17. Nous avons montré que l’utilisation d’agonistes pharmacologiques de SIRT1 (resvératrol, SRT1720, metformine) inhibe la polarisation des Th17 par la désacétylation de STAT3 et que cet effet permet de limiter la croissance tumorale dans un modèle de cancer colique et de mélanome chez la souris (B16F10, CT26). Nous avons validé ce concept chez l’homme, ce qui suggère qu’il est possible de cibler les Th17 par cette stratégie en complément de la chimiothérapie. Le dernier volet de ce travail est consacré à la comparaison du profil immunologique périphérique de volontaires sains à celui d’une cohorte prospective de cancers bronchiques non à petites cellules. Cette étude nous a permis de mettre en lumière les altérations immunitaires induites par la tumeur et de lier ces altérations à la réponse au nivolumab (anti-PD-1). Un premier modèle prédictif de réponse a pu être généré grâce aux données d’un panel d’analyse des cellules myéloïdes. Ce modèle révèle une fois encore que les cellules gMDSC ont un rôle prédictif défavorable, alors que les populations présentatrices d’antigènes (cellules dendritiques et monocytes) exprimant PD-L1 ont un bon rôle prédictif. Les données présentées dans cette partie sont préliminaires et devront être confirmées avec la cohorte de validation qui est en cours d’inclusion. L’ensemble de ce travail a permis de montrer qu’il est essentiel de cibler spécifiquement les cellules myéloïdes immunosuppressives et les Th17 pour favoriser l’efficacité des chimiothérapies et de l’immunothérapie dans le cancerActual oncology is still facing resistance and rapid progression of cancer. Intrinsic resistance mechanisms developed by tumor cells determine chemotherapy and immunotherapy efficacy. It is now recognized that the host immune response status is in part implicated in the therapeutic outcome of patients. The aim of our research team is to characterize this response and to study the impact of therapies in order to identify the mechanisms associated with future exhaust of the tumor. In this context, we have shown that chemotherapy (5-FU, oxaliplatin, anti-VEGF: FOLFOX-bevacizumab) in some patients causes a drop in devices gMDSC (granulocytic myeloid derived suppressive cells) that is associated with better therapeutic response. Nevertheless, as in mice, this effect on gMDSC causes an elevation of Th17, a pro-angiogenic population, which limits the effectiveness of chemotherapy. The result of our work was aimed to test the effect "anti-Th17" activating SIRT1 deacetylase histone. SIRT1 is an enzyme capable of disrupting the acetylation of STAT3, a key factor in the differentiation of Th17. We have shown that by using pharmacological agonists SIRT1 (resveratrol, SRT1720, metformin) inhibits Th17 polarization by deacetylation of STAT3 and that this effect can limit tumor growth in colorectal and melanoma murine models (B16F10, CT26). We validated this concept in humans, suggesting that it is possible to target Th17 cells by this strategy in addition to chemotherapy. The final component of this work is devoted to the comparison of peripheral immunological profile of healthy volunteers to a prospective cohort of non-small cell lung cancer. This study has allowed us to highlight the immune alterations induced by the tumor and to link these changes in response to nivolumab (anti-PD-1). A first response predictive model could be generated using data from a panel analysis of myeloid cells. This model proves once again that gMDSC have a negative predictive role, while antigen presenting (dendritic cells and monocytes) expressing PD-L1 has a good predictive role. Data presented in this section are preliminary and must be confirmed with the validation cohort that is currently included. All of this work has shown that it is essential to specifically target immunosuppressive myeloid cells and Th17 to promote the efficacy of chemotherapy and immunotherapy in cancer
23
Lequeue, Charlotte. "Expression et fonction de la protéine de costimulation immune BTN3A : identification du ligand de BTN3A2 pour immunothérapie en cancérologie." Thesis, Aix-Marseille, 2018. http://www.theses.fr/2018AIXM0768.
Full textAbstract:
Des molécules sont présentées aux T Vγ9Vδ2 par une protéine de co-stimulation immune BTN3A.Le membre BTN3A2 est surexprimé dans 4 cancers, et pourrait agir comme récepteur leurre.Récemment, l’isoforme BTN3A2 a été décrite comme régulant la localisation membranaire du BTN3A1 grâce à une hétérodimérisation.L’objectif de mon projet était d’identifier le ligand de BTN3A2 pour une immunothérapie.Ainsi, nous avons tout d’abord sélectionné, par des études de liaison utilisant la cytométrie en flux, quelques lignées cellulaires T exprimant le ligand de BTN3A2. Puis basé sur notre sélection, la comparaison du profil d’expression génique a été effectuée, nous permettant d’établir une liste de protéines membranaires candidats du ligand de BTN3A2,les molécules HLA de classe II. Après génération de lignées cellulaires surexprimant les candidats potentiels de la méthode transcriptomique, ces cellules ont été utilisées pour des tests de liaison avec le BTN3A2-Fc qui se sont révélés négatifs dans les différentes conditions.De plus, la technologie de transfections transitoires puis tests de liaison, a été utilisée pour identifier les récepteurs partenaires potentiels de BTN3A2.Les quatre produits géniques restants ont été sélectionnés, PLPP3, SEMA6A, SEMA6C et MSR1 mais non validés.Finalement, nous avons utilisé un agent de capture avec trois bras, permettant une liaison covalente, qui a montré que BTN3A1 était le candidat potentiel. Dans notre projet, nous avons confirmé l’hétérodimérisation de BTN3A1/A2 et nous avons démontré la forme existante d’hétérodimérisation pour former une voie de signalisation activant les cellules T Vγ9Vδ2Molecules are presented to Vγ9Vδ2 T cells by immune costimulatory protein BTN3A.BTN3A2 which is devoid of a functional intracellular domain, is overexpressed in 4 cancers. Recently, BTN3A2 was described as regulator of subcellular localization of BTN3A1 thanks to heterodimerization. The aim of our project, was to identify the ligand of BTN3A2 for immunotherapy. Therefore, we have first selected by binding studies using flow cytometry, few T cell lines expressing BTN3A2 ligand.Based on the selection, a gene expression profile comparison was performed and allowed us to establish a list of membrane proteins expressed only in positive cell lines, BTN3A2 ligand candidates. The highest FC were found for HLA class II molecules. Cell lines overexpressing potential candidates of transcriptomic method were used for binding assays using BTN3A2-Fc, but were negative in all conditions. Then cell microarray technology was used to identify potential receptor partners of BTN3A2. 4 remaining gene products were selected, PLPP3, SEMA6A, SEMA6C and MSR1. The validation of these candidates was not done after transient transfection and binding test with BTN3A2-Fc (using flow cytrometry). Moreover, chemoproteomic experiments were performed to isolate and identify by mass spectrometry (MS) BTN3A2 ligand. Therefore, we used an original capture reagent (TFR) with three moieties, allowing covalent binding, which showed clearly BTN3A1 as a potential candidate. In our project, we have confirmed the heterodimerization of BTN3A1/A2 and we have demonstrated an existing form of heterodimerization that could interact with other proteins, to form a signaling pathway activating Vγ9Vδ2 T cells
24
Capietto, Aude-Hélène. "Immunothérapie anti-cancéreuse et lymphocytes T-Vgamma9Vdelta2 : stratégies contre l'échappement tumoral." Toulouse 3, 2010. http://thesesups.ups-tlse.fr/996/.
Full textAbstract:
Chez l'homme, les lymphocytes T-Vgamma9Vdelta2 stimulés par les phosphoantigènes (PAg), exercent une puissante activité cytolytique anti-tumorale. L'activité de ces lymphocytes est actuellement évaluée dans plusieurs essais cliniques d'immunothérapie anti-cancéreuse. Cependant, certaines tumeurs et leur microenvironnement produisent des molécules immunosuppressives susceptibles de contribuer à l'échappement tumoral. Cette thèse décrit notamment la contribution du TGF-beta dans l'échappement tumoral à ce type d'immunothérapie. Cependant, nous montrons que la combinaison des anticorps monoclonaux thérapeutiques aux lymphocytes T-Vgamma9Vdelta2 activés améliore la cytotoxicité anti-tumorale, et peut également contrecarrer l'effet inhibiteur du TGF-beta. Nous illustrons ce concept de combinaison thérapeutique ciblée avec un modèle de xénogreffe de carcinome mammaire Her2/neu. L'ensemble de ces résultats démontre l'intérêt de telles stratégies thérapeutiques en cancérologiePhosphoantigen-stimulated human TCR-Vgamma9Vdelta2 gamma eltaT lymphocytes exert a potent antitumor cytolysis. Their activity is currently assessed in several clinical trials of cancer immunotherapies. Some cancers and their microenvironment produce suppressive molecules however, which might contribute to tumor escape. This PhD thesis deals with the contribution of TGF-beta to cancer immunoevasion, and means to avoid it. We show that the combination of therapeutic monoclonal antibodies to lymphocytes activated TCR-Vgamma9Vdelta2 gamma delta T cells improves anti-tumoral immunologically-mediated killing and may counter TGF-beta-mediated immunosuppression. We illustrate this concept of targeted therapeutic combination in a murine model of Her2/neu mammary carcinoma xenografts. Together, our results demonstrate the potential of such therapeutic strategies in cancer
25
Bouchaud, Grégory. "Caractérisation structurale et fonctionnelle du complexe formé entre la chaîne Alpha soluble du Récepteur de l'Interleukine 15 Humaine et l'Interleukine-15 : implication en immuno-cancérologie." Nantes, 2009. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=73b03bed-e0da-4f75-a33c-58e52cdf2a1b.
Full textAbstract:
L'Interleukine-15 (IL-15) est une cytokine qui présente des activités semblables à celles de l'IL-2 in vitro du fait de l'utilisation commune des chaînes réceptrices IL-2Rβ et γc, la spécificité d'action étant conférée par une chaîne réceptrice α. L'IL-15Rα existe sous forme soluble après clivage protéolytique de la forme membranaire. Dans cette étude, nous avons caractérisé les mécanismes moléculaires régulant les activités agonistes et antagonistes des formes solubles de la chaîne IL-15Rα. Nous avons mis en évidence que le domaine du sIL-15Rα codée par l’exon 3 et, située à l'extrémité C-terminale du domaine sushi liant la cytokine, participe à la forte affinité du complexe IL-15/sIL-15Rα et est indispensable à la fonction antagoniste du récepteur soluble. Nous avons également montré le rôle primordial du complexe IL-15/sIL-15Rα dans des pathologies cancéreuses et inflammatoires grâces au pouvoir pro-inflammatoire induit par le sIL-15Rα dans les cancers de la tête et du cou et son implication dans la réponse thérapeutique à l'infliximab (anti-TNF) dans la maladie de Crohn. Ce travail montre que le sIL-15Rα est une composante importante dans la régulation des activités de l'IL-15 et pourrait conduire à différentes applications thérapeutiquesThe Interleukin-15 (IL-15) is a cytokine which outlines similar activities as those of IL-2 in vitro because of the common use of IL-2Rβ and γc chains. The specificity of action is conferred by a private α chain (IL-15Rα). The α chain exists in soluble form after proteolytic cleavage of the membrane anchored IL-15Rα. In this study, we characterized the molecular mechanisms regulating the agonistic and antagonistic activities of the soluble forms of IL-15Rα (sIL-15Rα). We highlighted that the exon 3 encoded domain of the sIL-15Rα, located at the C-terminal end of the IL-15 binding domain (sushi) which participates to the high affinity of the IL-15/sIL-15Rα complex and is necessary for the antagonistic function of the soluble receptor. We also showed the vital role of this complex in cancer and inflammatory diseases through the capacity to escape to immunity of tumor with sIL-15Rα in head and neck cancers and it involvement in the therapeutic response to infliximab in Crohn disease. This work shows that the sIL-15Rα is an important component in the regulation of IL-15 and could lead to different therapeutic applications
26
Patry, Yaël. "Élaboration de protocoles d'immunothérapie dans un modèle de carcinome colique de rat." Nantes, 1996. http://www.theses.fr/1996NANT08VS.
Full text
27
Meichenin, Marc. "L'antigène Tk : un nouvel antigène glycannique associé aux fumeurs, cible potentielle pour l'immunothérapie des cancers coliques." Nantes, 1999. http://www.theses.fr/1999NANT18VS.
Full text
28
Mornex, Françoise. "La radioimmunothérapie : applications thérapeutiques des anticorps monoclonaux radiomarqués en cancérologie." Lyon 1, 1990. http://www.theses.fr/1990LYO1T151.
Full text
29
Desfrancois-Noel, Juliette. "Les lymphocytes Tαβ CD4+CD8+ : de nouveaux acteurs de la réponse anti-tumorale dans le cancer du sein et le mélanome." Nantes, 2009. http://www.theses.fr/2009NANT2063.
Full text
30
Eymard, Jean-Christophe. "Innovation thérapeutique dans le cancer du sein et de la prostate : de la tentative d'optimisation d'une stratégie thérapeutique conventionnelle à l'exploration d'un nouveau concept d'immunothérapie cellulaire." Reims, 2008. http://theses.univ-reims.fr/exl-doc/GED00000868.pdf.
Full textAbstract:
La @chimiothérapie des cancers au stade métastatique reste largement non curative malgré l'amélioration de la survie globale des patients. Ce constat justifie la recherche de progrès thérapeutiques par l'optimisation de traitements standard et l'exploration de nouvelles stratégies. Dans cet esprit, ce travail regroupe les résultats de quatre études menées sur le plan de la ~atholo~aiuep rès de patients porteurs d'un cancer de la prostate ou du sein. L'étude de phase II conduite chez des patients avec un cancer prostatique hormonorésistant a évalué l'addition d'estramustine sur l'efficacité de la chimiothérapie standard par docetaxel. Une réponse biologique nettement augmentée a été objectivée avec l'association, sans bénéfice apparent sur la survie globale. Par ailleurs, les travaux entrepris pour améliorer les performances vaccinales des cellules dendritiques à visée thérapeutique ont établi clairement des conditions de culture et de maturation qui favorisent leurs propriétés invasives, facilitant de la sorte leur migration chez le patient après injection. Ces cellules ont été utilisées pour explorer ex vivo une stratégie innovante visant à potentialiser la fonction adjuvante des cellules dendritiques et à amplifier ainsi la réponse immune anti-tumorale qu'elles induisent. Le principe consiste à activer la réponse lymphocytaire d'un patient par des cellules dendritiques allogéniques provenant d'un donneur sain. Les résultats démontrent pour la première fois la supériorité du contexte allogénique qui se traduit par une forte amplification des réponses anti-tumorales. Ces données nouvelles ouvrent de multiples perspectives sur le plan fondamental comme au niveau clinique.
31
Fauquembergue, Emilie. "Nouvelles stratégies d'immunothérapie cellulaire adoptive anti-tumorale basée sur l'activation de lymphocytes T cytotoxiques spécifiques : application aux cancers colorectaux." Rouen, 2012. http://www.theses.fr/2010ROUENR08.
Full textAbstract:
L'immunothérapie adoptive basée sur l'activation et l'expansion in vitro de lymphocytes T cytotoxiques (LTC) spécifiques d'antigènes tumoraux est une approche très prometteuse dans le cadre des cancers. Dans ce contexte, nous utilisons une stratégie basée sur l'activation de LT périphériques par des cellules présentatrices d'antigène artificielles (CPAA). Afin d'appliquer cette stratégie aux cancers colorectaux, dont la mortalité est très élevée, ce travail a consisté à sélectionner et évaluer la capacité de différents antigènes à monter une réponse T cytotoxique spécifique dans le contexte de la molécule HLA-A*0201. Nous nous sommes, dans un premier temps, intéressés à l'antigène carcino-embryonnaire (ACE), cible potentielle pour l'immunothérapie du fait de sa fréquente surexpression dans les carcinomes humains. Notre étude a montré que CAP1, un peptide dérivé de cet antigène restreint à HLA-A*0201, n'est pas présenté efficacement par les cellules tumorales et que l'antigène ACE, quel que soit l'épitope envisagé, ne semble pas être une cible appropriée pour le développement d'une stratégie d'immunothérapie dans le contexte de la molécule HLA-A*0201. Le rôle potentiel de la tolérance dans cette absence de réponse nous a conduit à étudier des néo-antigènes, pour lesquels moins de phénomènes de tolérance sont attendus, dans le cadre de cancers colorectaux présentant un phénotype d'instabilité microsatellitaire, liés à un défaut de réparation de l'ADN et caractérisés par un infiltrat lymphocytaire T (TIL) important et un meilleur pronostic. Afin de caractériser les néo-antigènes capables de monter une réponse T cytotoxique dans ces tumeurs, nous avons analysé, dans 80 cancers colorectaux RER+, la fréquence des mutations décalant le cadre de lecture de 19 gènes cibles avec une analyse comparative par PCR multiplexes fluorescentes. Les quatre gènes les plus fréquemment mutés étaient ACVR2 (90,9%), TAF1B (83,5%), ASTE1/HT001 (80,2%) et TGFBR2 (78,2%). Nous avons corrélé la présence de ces mutations avec le taux de TIL (CD3 et CDS) des tumeurs et nous avons montré que ce taux était associé avec les mutations de trois gènes cibles : ASTE1/HT001, PTEN (CD3 et CD8) et BAX(CD8). Ces résultats sont en faveur de l'évaluation de ces antigènes dans notre système de CPAAAdoptive immunotherapy, based on in vitro tumor antigen-specific cytotoxic T cell (CTL) activation and expansion, is a promising approach for cancer treatment. In this context, we used a strategy based on peripheral T cell activation with artificial antigen presenting cells (AAPC). To apply this strategy to colorectal cancer, that have a high mortality, the aim of this work was to select and assess the ability of various antigens to induce a specific cytotoxic response in HLA-A*0201 context. First, we were interested by carcinoembryonic antigen (CEA), a potential target for immunotherapy because of its frequent overexpression in human carcinoma. We show that CAP1, a HLA-A*0201-restricted CEA-derived peptide, was not efficiently presented by tumor cell and that CEA, regardless of the epitope, is flot an appropriate target for T cell-based immunotherapy, in the HLA-A*0201 context. The potential role of tolerance mechanisms in this absence of response, led us ta study neoantigens, for which less tolerance mechanisms are expected, in colorectal cancer with microsatellite instability due ta a repair defect of DNA and characterized by a high immune infiltrate and a botter prognosis. In order ta characterize the frameshift mutations inducing a cytotoxic T cell response in these tumors, we analyzed in 80 CRC MSI+ the frequency of frameshift mutation of 19 target genes by fluorescent multiplex PCR comparative analysis. The four most frequently mutated genes was ACVR2 (90,9%), TAF1B (83,5%), ASTE1/HT001 (80,2%) and TGFBR2 (78,2%). We correlated the presence of these mutations with infiltrating T cell rate (CD3 and CD8) in tumors and we have shown that this rate was associated with the presence of frameshift mutations within three target genes: ASTE1MT001 and PTEN (CD3 and CD8) and BAX (CD8). These results argue for the evaluation of these antigens in our system of AAPC
32
Bérubé, Cooey Laurence. "Développement d'une immunothérapie spécifique contre le cancer de la vessie : caractérisation de l'immunogénicité de l'antigène tumoral MAGE-A9." Master's thesis, Université Laval, 2012. http://hdl.handle.net/20.500.11794/25963.
Full textAbstract:
Le cancer superficiel de la vessie (CSV) est caractérisé par un taux de récidive élevé (60%). L’immunothérapie non-spécifique au BCG est actuellement le traitement le plus utilisé pour contrer les récidives du CSV. Un vaccin ciblant spécifiquement un antigène tumoral pourrait être plus efficace que le traitement BCG. Nous avons montré que l’antigène tumoral MAGE-A9 est exprimé dans 63% des tumeurs superficielles et que son expression était associée à la récidive et à la progression. Cette étude visait à mieux caractériser l’immunogénicité de MAGE-A9 en identifiant les épitopes reconnus par les lymphocytes T CD4+ et en analysant la séroprévalence anti-MAGE-A9 chez des patients atteints de CSV. Des peptides candidats, identifiés in silico, ont été testés en essais de prolifération avec des T CD4+ de souris transgéniques HLA-A2/DR1 présensibilisées à l’antigène. Pour analyser la séroréactivitié anti-MAGE-A9, la protéine a été produite et purifiée à partir du système d’expression Baculovirus. Les résultats obtenus et les réactifs développés au cours de ce travail seront utiles pour l’élaboration d’une immunothérapie contre le CSV.
33
Joalland, Noémie. "Immunothérapie anti-tumorale par transfert adoptif de LT Vγ9Vδ2 : utilisation préclinique de LT Vγ9Vδ2 humains allogéniques en immunothérapie anti-tumorale dans des modèles murins de xénogreffes orthotopiques." Thesis, Nantes, 2018. http://www.theses.fr/2018NANT1031/document.
Full textAbstract:
Le cancer est une pathologie caractérisée par la prolifération anarchique de cellules tumorales. Malgré de nombreuses avancées technologiques en terme de dépistage, d’imagerie médicale, de chirurgie et de traitements, le cancer représente encore un challenge thérapeutique. Depuis quelques années, le développement d’immunothérapies, telles que le transfert adoptif cellulaire, fait l’objet de nombreuses études. Les Lymphocytes T Vγ9Vδ2 (LT Vγ9Vδ2) font partie des effecteurs immunitaires candidats du fait de leurs nombreuses fonctions effectrices et de leur nonalloréactivité. En effet, la reconnaissance de leurs cibles n’est par restreinte au complexe majeur d’histocompatibilité, il est donc possible de créer une banque cellulaire de LT Vγ9Vδ2 allogéniques qui pourront être administrés aux patients sans risque de réaction allogénique contre l’hôte. De plus, cette reconnaissance peut être induite grâce à des molécules pharmacologiques telles que le zolédronate. L’objectif de cette thèse a donc été d’évaluer l’efficacité thérapeutique de LT Vγ9Vδ2 humains allogéniques dans des modèles murins précliniques de xénogreffes orthotopiques. Deux modèles ont été mis en place : (i) un modèle de cancer épithélial de l’ovaire incluant le traitement standard des patientes par chirurgie et chimiothérapie, suivie d’une rechute avec carcinose péritonéale ; (ii) un modèle de glioblastome multiforme basé sur l’implantation intracérébrale de cellules tumorales primaires. Ainsi, le bénéfice thérapeutique du transfert adoptif de LT Vγ9Vδ2 humains allogéniques, associés ou non au zolédronate, a pu être démontré dans plusieurs modèles précliniques, ouvrant la voie vers un transfert en cliniqueCancer is a pathology characterized by uncontrolled proliferation of tumor cells. Despite many technological advances in terms of screening, medical imaging, surgery and treatments, cancer is still a therapeutic challenge. In recent years, development of immunotherapies, such as adoptive cell transfer, has been the aim of many studies. Vγ9Vδ2 T lymphocytes are interesting immune effectors because of their numerous effector functions and their nonalloreactivity. In fact, their targets recognition is not restricted to the major histocompatibility complex, so it is possible to create allogeneic Vγ9Vδ2 T cell banks that could be used to treat patients without risk of allogeneic reaction against the host. Moreover, this recognition can be induced by pharmacological molecules such as zoledronate. The aim of this thesis was to evaluate the therapeutically efficacy of allogeneic human Vγ9Vδ2 T lymphocytes in preclinical mouse models of orthotopic xenografts. Two models have been developed: (i) a model of epithelial ovarian cancer including standard treatment of patients by surgery and chemotherapy, followed by relapse with peritoneal carcinosis ; (ii) a model of glioblastoma multiforme based on intracranial injection of primary tumor cells. Thus, the therapeutically efficacy of adoptive transfer of allogeneic human Vγ9Vδ2 T lymphocytes, whether or not associated with zoledronate, has been demonstrated in several preclinical models, paving the way for clinical transfer
34
Dessarthe, Benoît. "Rôle des nectines dans la reconnaissance des cellules tumorales par les lymphocytes T yδ." Phd thesis, Université Rennes 1, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00795222.
Full textAbstract:
Les lymphocytes T qui expriment un TCR γδ (lymphocytes T γδ) sont des lymphocytes T non conventionnels qui reconnaissent des antigènes indépendamment du CMH (complexe majeur d'histocompatibilité). Chez l'homme, la sous-population T Vγ9Vδ2, majoritaire dans le sang périphérique, joue un rôle important dans l'immunité antitumorale. Les lymphocytes T Vγ9Vδ2 reconnaissent les cellules tumorales grâce à leur TCR et/ou leurs récepteurs NK. Le travail de thèse s'est focalisé sur l'un de ces récepteurs : CRTAM et le rôle de son interaction avec son ligand Necl-2 exprimé par des cellules tumorales. Nous avons montré que les lymphocytes T Vγ9Vδ2 activés expriment CRTAM de manière transitoire. Afin d'étudier l'interaction CRTAM avec son ligand Necl-2, nous avons développé des modèles de cellules tumorales exprimant Necl-2 après transduction rétrovirale. Nous avons observé que l'interaction des lymphocytes T Vγ9Vδ2 avec des cellules tumorales Necl-2+ entraînait une diminution de l'expression de CRTAM à la surface des lymphocytes. De manière concomitante, les cellules tumorales Necl-2+ acquièrent CRTAM par un mécanisme de trogocytose. Contrairement aux lymphocytes T CD8 et les cellules NK, nous n'avons pas observé d'impact de l'interaction CRTAM/Necl-2+ sur la capacité cytotoxique et la sécrétion d'IFN-γ des lymphocytes T Vγ9Vδ2. Par contre, cette interaction induit la mort des lymphocytes T Vγ9Vδ2 par un mécanisme de type autophagique. Nos résultats suggèrent que l'expression de Necl-2 par les cellules tumorales serait un mécanisme leur permettant d'échapper à une réponse des lymphocytes T Vγ9Vδ2.
35
Leclerc, Marine. "Rôle de la Neuropiline-1 dans les fonctions effectrices des lymphocytes T CD8 antitumoraux." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2018. http://www.theses.fr/2018SACLS458.
Full textAbstract:
De récents progrès dans la compréhension de la régulation de l'interaction moléculaire entre les lymphocytes T CD8 (LT CD8) et les cellules tumorales ont donné lieu à de nouvelles immunothérapies contre le cancer. En effet, les anticorps monoclonaux anti-CTLA-4 et anti-PD-1 (mAb), ciblant des récepteurs inhibiteurs à la surface des LT CD8, ont démontré des bénéfices de survie dans de nombreux cancers. Malheureusement, seule une partie des patients répond à ces traitements. Il est donc crucial de caractériser l'influence d'autres facteurs moléculaires régulant la migration et les activités fonctionnelles des LT CD8 afin d'améliorer les traitements actuels du cancer. Un candidat potentiel impliqué dans cette immunosuppression est le récepteur Neuropiline-1 (Nrp-1), qui a été initialement identifié dans le système nerveux. Nous avons identifié une large population de LT CD8 infiltrant le mélanome murin (lignée tumorale B16 greffée à des souris C57BL/6), qui exprime des niveaux élevés de Nrp-1. La présence de cette population augmente pendant la croissance tumorale, mais reste indétectable dans les organes lymphoïdes (rate et ganglion lymphatique drainant la tumeur). De plus, les LT CD8 infiltrant la tumeur exprimant Nrp-1 montre des caractéristiques d’épuisement. En parallèle, l’inhibition de la Nrp-1 avec un anticorps neutralisant augmente la capacité des LT CD8 à migrer, et à tuer les cellules tumorales autologues ex vivo. D’autre part, l’inhibition de la Nrp-1 in vivo agit en synergie avec la neutralisation du récepteur PD-1 pour le contrôle de la croissance tumorale et l’amélioration des fonctions effectrices des LT CD8. Nos résultats montrent donc comment le microenvironnement tumoral induit l'expression de la Nrp-1 sur les LT CD8 et comment ce récepteur neuronal peut participer à la régulation des fonctions effectrices des LT CD8 antitumoraux, avec de potentielles implications comme biomarqueur/cible pour une immunothérapieRecent advances in understanding the regulation of molecular interaction between CD8 T cell and tumor cells gave rise to novel cancer immunotherapies. Indeed, monoclonal antibodies against CTLA-4 and PD-1 (mAb), targeting inhibitory receptors on the surface of CD8 T cells, have demonstrated survival benefits in many cancers. Unfortunately, only a fraction of patients responds to these treatments. Therefore, it is crucial to characterize the influence of additional molecular factors regulating the migration and the functional activities of CD8 T cells, in order to improve current cancer treatments. A potential candidate involved in this immunosuppression function is the Neuropilin-1 (Nrp-1), which was originally identified in the nervous system. We identified a large subset of CD8 T cells infiltrating B16 melanoma (mouse model), which expresses high levels of Nrp-1. The frequency of Nrp-1+ CD8 T cells increased during tumor growth, but was undetectable in lymphoid organs (spleen and tumor-draining lymph node). Moreover, Nrp-1+ CD8 tumor-infiltrating lymphocytes (TIL) displayed features of T cell exhaustion. Importantly, blocking of Nrp-1 with a neutralizing mAb, increases the capacity of CD8 T cells to migrate and to kill autologous tumor cells. In addition, the blockade of Nrp-1 in vivo acts synergistically with the neutralization of the inhibitory receptor PD-1 to control tumor growth and restore TIL function. Our findings show how the tumor microenvironment induces Nrp-1 expression on CD8 T cells and how this neuronal receptor may participate in regulating antitumor CD8 T cell response, with potential implications as a biomarker/target for immunotherapeutic intervention
36
Rinaldi, Anne-Sophie. "Immunociblage de la gankyrin avec des fragments d'anticorps recombinants humains dans un contexte intracellulaire." Strasbourg, 2010. http://www.theses.fr/2010STRA6242.
Full text
37
Boutin, Lola. "Caractérisation fonctionnelle de molécules TCE activant les lymphocytes T gamma delta humains en comparaison avec les lymphocytes T alpha beta." Thesis, Nantes, 2019. http://www.theses.fr/2019NANT1027.
Full textAbstract:
Les approches d'immunothérapies antitumorale sont en essor constant, répondant aux limites des traitements conventionnels. Parmi celles-ci, l'utilisation d'anticorps monoclonaux pour cibler spécifiquement des antigènes tumoraux ou lever des signaux co-inhibiteurs sur des effecteurs immunitaires, font partie des plus prometteuses. Les progrès de l'ingénierie des protéines ont conduit à l'émergence d'anticorps et anticorps-like bispécifiques, parmi lesquels les T cell engager (TCE) redirigent une activité de lymphocytes T (LT) cytotoxiques contre une cellule tumorale. Les LT sont au centre de l'immunité adaptative et transitionnelle du système immunitaire, dont font partie respectivement les LT conventionnels; les Natural Killer T invariants (iNKT) et LT . L'objectif de cette thèse est de caractériser et de comparer la réponse fonctionnelle de ces différentes populations de LT dans un modèle de tumeur solide induite par des TCE. Des molécules TCE ont été construites en associant deux VHH, modules de reconnaissance d'antigène dérivés d'anticorps de camélidés. Leurs effets sur les différentes populations de LT ont été investigués en détail par différentes techniques dans un modèle tumoral in vitro en 2D et 3D. Les résultats de cette étude indiquent que le choix de la population T à cibler dans une stratégie d'immunothérapie par TCE pourrait avoir un impact significatif sur l'issue thérapeutique et l'induction de mécanismes immunosuppresseursAnti-tumor immunotherapies approaches are in constant expansion, answering the limits of conventional treatments. Among them, the use of monoclonal antibodies to specifically target tumor antigens or to raise co-inhibitory signals on immune effectors, are among the most promising. Advances in protein engineering have led to the emergence of bispecific antibodies and antibodieslike, among which the T cell engage (TCE) redirect cytotoxic T cell activity against a tumor cell. T lymphocytes are at the center of the adaptive and transitional immunity of the immune system, of which are, respectively the conventional T cells; the invariant Natural Killer T (iNKT) and T cells. The objective of this thesis is to characterize and compare the functional response of these different populations of T lymphocytes in a solid tumor model induced by TCE. TCE molecules were constructed by combining two VHHs, antigen recognition modules derived from camelid antibodies. Their effects on different T populations were investigated in detail by different techniques in an in vitro 2D or 3D tumoral model. The results of this study indicate that the choice of the T population to target in a TCE immunotherapy strategy could have a significant impact on the therapeutic outcome and the induction of immunosuppressive mechanisms
38
Paczesny, Sophie. "Réponses immunitaires chez les patients atteints d'un mélanome métastatique après vaccination par des cellules dendritiques dérivées de progéniteurs CD34+." Paris 7, 2004. http://www.theses.fr/2004PA077135.
Full text
39
Monge, Audrey. "Conséquences fonctionnelles et structurales de l'association de deux mutations du récepteur des androgènes dans le cancer de la prostate." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2008. https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2008/MONGE_Audrey_2008.pdf.
Full textAbstract:
Avec plus de 62 000 nouveaux cas par an, le cancer de la prostate (CaP) représente le premier cancer de l’homme en France devant le cancer du poumon, et arrive au deuxième rang des décès par cancer chez l’homme dans les pays occidentaux après le cancer bronchique. La voie de signalisation des androgènes, en soutenant la prolifération et la survie des cellules cancéreuses, est impliquée dans le CaP. Cette dépendance vis-à-vis des androgènes est mise à profit dans l’hormonothérapie des CaP. Dans 70 à 80% des cas, les patients répondent bien à l’hormonothérapie mais tous les patients rechutent après une durée médiane de rémission de 12 à 18 mois. La physiopathologie de cet échappement à la privation androgénique est encore mal connue et peut faire appel à plusieurs types de mécanismes. L’un deux est l’émergence de mutations au niveau du gène du récepteur des androgènes (RA), permettant aux cellules cancéreuses de survivre et de proliférer malgré le faible taux d’androgènes. Le RA mutant T575A/T877A a été détecté au laboratoire à partir d’un échantillon prostatique provenant d’un patient en échappement hormonal. Mon travail de thèse a consisté à étudier les propriétés fonctionnelles apportées au RA par ces deux mutations, mais également les conséquences de la mutation T575A sur la structure du DBD et sur la reconnaissance de l’ADN par le RA mutant. Les conséquences fonctionnelles de la mutation T877A étant connues, le RA simple mutant T575A a été étudié en parallèle au RA double mutant afin d’appréhender les modifications des propriétés du RA dues à cette mutation dans le contexte double mutant T575A/T877A. Les études fonctionnelles et structurales du RA mutant T575A/T877A ont permis de mettre en lumière une coopération de deux mutations présentes au sein du même RA. Nous avons également vu que la mutation T575A induit un changement de spécificité du RA vis-à-vis des différents éléments de réponse aux hormones présents dans le promoteur / enhancer de gènes cibles, en orientant le RA vers des séquences non spécifiques des androgènes. Nous proposons un modèle selon lequel le RA mutant T575A pourrait reconnaître des séquences de liaison du RA différentes de celles reconnues habituellement par le RA sauvage au niveau du promoteur / enhancer de gènes cibles, mais également des séquences de liaison du RA localisées au niveau de promoteurs / enhancers de gènes non reconnus naturellement par le RA sauvage, et conduire ainsi à une expression différentielle de gènes nécessaires à la survie des cellules tumorales. De plus, les études structurales de la mutation T575A indiquent que la présence de la mutation T575A au sein du DBD du RA ne modifie pas drastiquement la structure de ce dernier, mais en revanche entraîne une différence de protonation d’un résidu en contact avec le squelette phosphate de l’ADN, expliquant en partie les effets cellulaires observés. Par ailleurs, la présence de la mutation T877A associée à la mutation T575A dans le RA du patient a certainement un impact sur le fonctionnement de ce RA. En effet, nous avons vu une coopération des deux mutations, or la mutation T877A est connue pour élargir le spectre de sensibilité du RA vis-à-vis des hormones stéroïdes, et pour empêcher le recrutement de NCoR en présence d’un anti-androgène. L’association des propriétés structurales et fonctionnelles de chacune des mutations T575A et T877A pourrait jouer un rôle déterminant dans la progression du CaP et dans l’échappement à la privation androgénique. Cette étude montre l’importance d’un seul résidu au sein du DBD du RA vis-à-vis de ses interactions avec l’ADN, bien qu’il n’entraîne pas de modifications conformationnelles. Ce travail s’inscrit dans une étude plus vaste visant à améliorer les connaissances sur les relations structure-fonction de ce récepteur, dans le but final de permettre la conception de nouvelles stratégies thérapeutiques, ciblées et adaptées au phénotype tumoral présent chez chaque patient atteint d’un CaP, permettant ainsi de prolonger le contrôle hormonal de la maladie et de retarder le recours aux chimiothérapies cytotoxiques.
40
Sola, Caroline. "Immunomodulation des fonctions effectrices des cellules NK par le contrôle des intéractions de leurs récepteurs inhibiteurs avec les molécules du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) de classe I." Thesis, Aix-Marseille, 2013. http://www.theses.fr/2013AIXM4082.
Full textAbstract:
Les cellules Natural Killer (NK) sont des lymphocytes capables de tuer les cellules tumorales avec une expression altérée des molécules du Complexe Majeur d’Histocompatibilité (CMH) de classe I . Chez l’homme, cette reconnaissance de “l’absence du soi” est relayée par l’absence d’engagement des antigènes des leucocytes humains (HLA) par les récepteurs inhibiteurs des cellules NK. Chez l’homme, ces récepteurs inhibiteurs incluent les récepteurs KIR qui ont comme analogues fonctionnels chez les rongeurs les lectines Ly49. Certaines tumeurs échappent à la surveillance des NK en augmentant leur expression des molécules HLA. Donc, bloquer les interactions entre les molécules KIR et HLA est une stratégie anti-tumorale intéressante qu’INNATE PHARMA a décidé d’explorer en développant l’anticorps thérapeutique anti-KIR 1-7F9. Mais, ces interactions sont nécessaires pour l’acquisition des fonctions des NK, i.e leur éducation. De plus, elles sont impliquées dans la tolérance aux cellules du soi par les cellules NK. Anticiper la toxicité de 1-7F9, évaluer ses propriétés anti-tumorales et son impact sur l’éducation des NK étaient les objectifs de notre travail. Deux modèles murins ont été développées à ces fins. Le premier, est basé sur les souris B6 : les récepteurs inhibiteurs Ly49 C/I ont pour ligand les molécules H-2b. Le second modèle est basé sur des souris transgéniques pour un unique récepteur KIR et son ligand, en l’absence des molécules endogènes de CMH de classe I murines. Ces deux modèles ont montré que le blocage des récepteurs inhibiteurs n’altère pas la tolérance au soi des NK et est une stratégie anti-tumorale efficace qui n’altère pas la fonctionnalité des NKNatural Killer cells (NK cells) are lymphocytes able to kill tumors with aletered expression of Major Histocompatibility Complex (MHC) class I molecules. This “missing self” recognition is mediated by the lack of engagement of Human Leukocytes Antigens (HLA) with NK inhibitory receptors that include Killer Immunoglobulin like Receptors (or KIR) in humans. In rodents, the functional analogues of KIR are Ly49 lectins. Some tumors escape NK cell immune surveillance by increasing the expression of HLA molecules on their surface. So, blocking interactions between KIR and HLA molecules constitutes an interesting therapeutic strategy that INNATE PHARMA decided to explore, developing the anti-KIR monoclonal antibody 1-7F9. Nevertheless, these interactions are necessary for the acquisition of NK functional properties, i.e for their “education”. They are also involved in self-tolerance on educated NK cells. For the pre-clinical development of 1-7F9, it was necessary to anticipate anti-KIR mAb safety and toxicity, evaluate its anti-cancer potential and its impact on NK education. A first part of our work was performed in a surrogate B6 mouse model:Ly49 C/I inhibitory receptors have H-2b molécules as endogenous ligand. Their interactions were blocked with anti-Ly49 C/I monoclonal antibody. In a second part, we report the generation of transgenic mice expressing a single inhibitory KIR in the context of its HLA ligand and in absence of endogenous mouse MHC class I molecules. Both models showed that the blockade of NK inhibitory receptors interactions with their endogenous ligands did not break self tolerance, had a strong anti-tumor effect and did not abrogate NK functionality
41
Isambert, Nicolas. "Etude des mécanismes d'action d'une immunothérapie par un triacyl lipide A chez l'homme." Phd thesis, Université de Bourgogne, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00967908.
Full textAbstract:
L'immunothérapie en agissant au niveau de la tumeur primitive et en empêchant le développement des métastases constitue une des stratégies du traitement des patients atteints de cancer. Afin d'améliorer l'efficacité de celle-ci, il est nécessaire de comprendre comment est induit la mort des cellules tumorales. Dans le laboratoire, il a été observé la guérison de rats BDIX porteurs de tumeurs PROb par un triacyl lipide A. Il a été montré que cet effet impliquait le système immunitaire en mettant en jeu des interactions avec les TLR présents sur de nombreuses cellules tumorales et de l'immunité innée comme les neutrophiles.Dans ce travail, nous avons étudié l'implication éventuelle des neutrophiles dans l'activité anti tumorale du triacyl lipide A chez l'homme.Dans une étude de phase 1 chez des patients porteurs de tumeurs solides réfractaires, nous avons montré que le triacyl lipide A était bien toléré et qu'il induisait la sécrétion de cytokines impliquées dans la réponse immunitaire et notamment dans le recrutement des neutrophiles. Nous avons ensuite, dans un second temps démontré l'implication éventuelle des neutrophiles dans cette réponse immunitaire en vérifiant leur présence dans des tumeurs coliques humaines et en analysant leur proximité avec les cellules tumorales, ces deux facteurs déterminant leur cytotoxicité vis-à-vis des cellules tumorales. Nous avons ensuite fait une analyse comparative par rapport au tissu sain pour rechercher si ces neutrophiles étaient activés et comparer l'expression de chimio attractants.
42
Graber, Nils. "La vacuna, une innovation cubaine : immunothérapie du cancer, essais cliniques et soins primaires aux marges de la globalisation." Thesis, Paris, EHESS, 2019. http://www.theses.fr/2019EHES0122.
Full textAbstract:
Depuis son émergence dans les années 1980, l’industrie des biotechnologies de Cuba développe des médicaments destinés à la fois à être exportés et à alimenter le système de santé national. Parmi les projets d’innovation, l’immunothérapie du cancer détient une place centrale. Ce domaine de la thérapie anticancéreuse est centré sur la mobilisation des mécanismes immunologiques pour tenter de détruire ou d’endiguer la tumeur. Depuis 2010, plusieurs traitements sont rendus accessibles à large échelle dans le pays par la mise en œuvre d’essais cliniques étendus aux centres de santé primaire, les polycliniques, où travaillent notamment des médecins généralistes. Outre la politique d’accès, l’objectif de cette intervention est d’évaluer la transformation du cancer (avancé) en une maladie chronique. Il s’agit d’un dispositif tout à fait inédit. Sur le plan international, si l’immunothérapie du cancer figure aussi parmi les domaines les plus à la pointe de l’oncologie, il s’agit de traitements particulièrement chers, dont l’accès, réservé au niveau hospitalier, se heurte à des problèmes de financement. Associant observations ethnographiques et études des réseaux de collaboration, ce travail explore le processus d’innovation en immunothérapie du cancer à Cuba dans la tentative de conciliation de la politique industrielle et des objectifs de santé publique. En mobilisant le terme local de vacuna employé pour se référer à ce type de traitement, il s’agit d’interroger la spécificité épistémique et les multiples compréhensions de l’immunothérapie du cancer, entre chercheurs industriels, oncologues et professionnels de la santé primaire. La vacuna prend forme au travers de pratiques, ancrées dans les institutions publiques, visant constamment à concilier des dimensions en tension, entre objectifs économiques et de santé publique, biomédecine et soins primaires, entre suivi des normes globales et prise en compte des particularités locales, ce qui est source d’innovations multiples et modulables, susceptibles de circuler dans les pays du Sud et du NordSince its emergence in the 1980s, the Cuban biotechnology industry has developed pharmaceuticals designed to both export and integration into the national health system. Among innovative projects, cancer immunotherapy stands as one of the main areas. This domain of cancer therapy attempts to act upon immunological mechanisms to destroy or contain the tumour. Since 2010, some of these treatments have been made accessible for a wide-spread use in the country through the implementation of clinical trials expanded to primary health centres, called polyclinics, where notably general practitioners are working. The aim of this intervention is to transform (advanced) cancer into a chronic disease. It is an unprecedented intervention. At the international level, where immunotherapy also stands as a cutting-edge oncology treatment, these new drugs are only available at the hospital level, and wide access is threatened due to high prices. Combining ethnography with the study of collaborative networks, this work explores the innovation process in the development of cancer immunotherapy in Cuba, in its attempts to conciliate industrial policies and public health goals. The use of the local term vacuna is part of an examination of epistemic specificity as well as of the multiple understanding of cancer immunotherapy among industrial researchers, oncologists and primary healthcare professionals. The vacuna is taking shape through practices embedded within public institutions, which attempt to constantly conciliate conflicting dimensions, between economic and public health goals, biomedicine and primary care, respect of global norms and attention to local particularities, which is a source of multiple and modular innovations, likely to circulate among both global South and global North
43
Berger, Hélène. "Etude de la régulation transcriptionnelle des lymphocytes T CD4 dans un contexte de cancer : application en immunothérapie anticancéreuse." Thesis, Dijon, 2015. http://www.theses.fr/2015DIJOS002/document.
Full textAbstract:
La surveillance immunologique des tumeurs repose sur la capacité des cellules effectrices du système immunitaire à détecter et à éliminer les cellules cancéreuses. Nonobstant ce constat, la régression complète et spontanée de cancers établis n’est observée que dans de très rares cas. L’échec de la résolution des cancers par le système immunitaire pourrait résulter de la conjonction de plusieurs facteurs : i) une réponse immune inadéquate liée au manque d’immunogénicité des tumeurs, ii) l’incompétence du système immunitaire consécutif à des immunodéficiences acquises ou induites et iii) la sélection de variants tumoraux résistants capables de déjouer la surveillance opérée par le système immunitaire ou de subvertir ses effets. Ainsi, le développement de stratégies visant à potentialiser les réponses antitumorales de l’hôte revêt un enjeu crucial en cancérologie.Au laboratoire, notre travail de recherche a pour objectif de mieux caractériser les liens entre réponse immunitaire et cancer. Mon travail de thèse vise précisément à comprendre les mécanismes moléculaires impliqués dans la différenciation des lymphocytes T CD4 et à déterminer le rôle de ces cellules dans l’immunité antitumorale. Au cours de ma thèse, nous nous sommes particulièrement attachés à explorer les mécanismes moléculaires qui sous tendent la différenciation des populations lymphocytaires Th17, Th9 et TFh pour mieux appréhender et moduler leurs fonctions effectrices afin d’optimiser les réponses antitumorales. Ces travaux s’inscrivent dans une démarche d’application potentielle en immunothérapie anticancéreuse, un domaine de recherches qui connaît actuellement des avancées spectaculaires.Nous avons tout d’abord étudié l’influence de l’acide docosahexaénoïque (DHA), un acide gras à longue chaîne de la série n 3, sur la différenciation des cellules Th17. Nous avons mis en évidence le mécanisme moléculaire responsable de l’inhibition directe de la polarisation cellulaire Th17 par le DHA. L’activation de PPARγ par le DHA induit l’expression de SOCS3 qui agit comme un répresseur intrinsèque de la différenciation Th17. Dans deux modèles de cancers murins, nous avons également montré que l’activité anticancéreuse du DHA était dépendante de sa capacité à inhiber la sécrétion d’IL 17 par les cellules T CD4 in vivo. Nous avons ainsi caractérisé l’un des mécanismes impliqués dans l’effet anticancéreux du DHA.Dans un deuxième travail, nous avons caractérisé les effets de l’interleukine 1β sur le programme moléculaire des cellules Th9. Nous avons montré que les cellules Th9 différenciées en présence d’IL-1β possédaient de puissantes propriétés anticancéreuses dépendantes de l’IL-21 reposant sur l’activation du facteur de transcription IRF1. Au niveau moléculaire, nous avons démontré que l’IL-1β induisait la phosphorylation de STAT1 elle même responsable de l’activation d’IRF1 qui est alors capable d’interagir sur les promoteurs de l’Il9 et de l’Il21 pour induire l’expression de ces gènes dans les cellules Th9.Le dernier projet porte sur la régulation transcriptionnelle du facteur de transcription IRF1 sur la réponse T folliculaire auxiliaire et cherche à en évaluer les retombées potentielles en immunothérapie anticancéreuse. Notre étude met en évidence l’activation précoce d’IRF1 dans la différenciation TFh et suggère que ce facteur de transcription semble initier le développement de ces cellules. Des approches de transfert adoptif révèlent que les TFh semblent posséder des propriétés anticancéreuses capables de limiter efficacement la croissance des tumeurs dans des modèles murins. Enfin, après caractérisation phénotypique nous montrons que les cellules TFh sont présentes dans des tumeurs mammaires chez l’Homme et validons la présence d’IRF1 dans ces lymphocytesImmune surveillance of tumors is based on the ability of effector cells of the immune system to detect and eliminate the cancer cells. Notwithstanding, the complete and spontaneous regression of established cancers was observed only in very few cases. The failure of cancer resolution by the immune system could result from the combination of several factors: i) inadequate immune response related to a low tumor immunogenicity, ii) incompetent immune system consecutively to induced or acquired immunodeficiencies and iii) the selection of resistant tumor variants able to thwart immune surveillance or subverting immune responses. Developing novel cancer immunotherapy strategies leading to potentiation of the host antitumor responses is thus a key challenge in oncology.We aim to better characterize the relationships between immune response and cancer. My work is precisely to understand the molecular mechanisms involved in CD4 T cell differentiation and to determine the role of these cells in antitumor immunity. I am particularly committed to explore the molecular mechanisms underlying the Th17, Th9 and TFh cell differentiations. The goal is to better understand and adjust their effector functions to optimize antitumor responses. This work is part of a potential application in cancer immunotherapy approach, an area that is experiencing dramatic advances and is likely to grow in the years ahead.We first studied the influence of the n 3 polyunsaturated fatty acid docosahexaenoic acid (DHA) on Th17 cell differentiation. We unraveled the molecular mechanism responsible for the direct inhibition of Th17 cell polarization by DHA, explaining one way of DHA to exert its anticancer activity. TH17 cells induced in vitro displayed increased SOCS3 expression and diminished capacity to produce interleukin 17 following activation of PPARγ by DHA. In two different mouse cancer models, DHA prevented tumor outgrowth and angiogenesis in an IL 17 dependent manner. Altogether, our results uncover a novel molecular pathway by which PPARγ induced SOCS3 expression prevents IL 17 mediated cancer growth.Then, we characterized the effects of interleukin 1β (IL-1β) on Th9 cells molecular program. We found that the transcription factor IRF1 enhanced the effector functions of Th9 cells and dictated their anticancer properties. Under Th9 skewing conditions, IL-1β induced phosphorylation of the transcription factor STAT1 and subsequent expression of IRF1, which bound to Il9 and Il21 gene promoters and enhanced their secretion by Th9 cells. In addition, IL-1β induced Th9 cells exerted potent anticancer functions in an IRF1 and IL 21 dependent manner. Thus, our findings identify IRF1 as a target for controlling the function of Th9 cells.We are currently investigating the transcriptional regulation of IRF1 on follicular helper CD4 T (TFh) cell program. We address the question whether TFh cells could be beneficial in cancer immunotherapy. Our study highlights the early activation of IRF1 during the TFh cell polarization and suggests that IRF1 appears to initiate the development of these cells. Adoptive transfer approaches show that TFh lymphocytes seem to habor anticancer properties by limiting efficiently tumor outgrowth in mouse models of cancer. Finally, phenotypic characterization of TFh cells points out that they infiltrate human breast tumors and express IRF1
44
Épaulard, Olivier. "Immunothérapie anti-tumorale par vecteur bactérien vivant : utlisation du système de sécrétion de type III de pseudomonas aeruginosa." Université Joseph Fourier (Grenoble), 2006. http://www.theses.fr/2006GRE10146.
Full textAbstract:
Le système de sécrétion de type III (SSTT) de P. Aeruginosa est un facteur de virulence permettant à la bactérie d'injecter des toxines directement dans le cytoplasme de cellules-cibles. Nous avons étudié l'utilisation de ce système comme mode de délivrance d'antigène non bactérien aux cellules présentatrices d'antigène (dont les cellules dendritiques)(CD), dans le but de déclencher une réaction lymphocytaire T cytotoxique spécifique. En effet, un vecteur basé sur le SSTT devrait déclencher à la fois l'activation des CD du fait de la nature bactérienne du vecteur, et la présentation par les molécules de classe 1 du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH-I) du fait de la topographie de délivrance de l'antigène. Nous avons utilisé une souche de P. Aeruginosa dont les gènes des toxines du SSTT avaient fait l'objet d'une délétion. La sécrétion des antigènes d'intérêt a été obtenue par fusion transcriptionnelle de la séquence de l'antigène avec celle de la région N-terminale (non toxique) d'un effecteur du SSTT, ExoS. Des souches contrôles produisant l'antigène sans le sécréter ou incapables de le délivrer en intracellulaire ont également été élaborées. Ln vitro en modèle murin, l'interaction de CD avec la souche délivrant l'ovalbumine permet l'activation subséquente d'un clone lymphocytaire T CD8+ spécifique de l'ovalbumine par les CD. Ln vivo, l'injection sous-cutanée de la même souche est associée à la génération de lymphocytes T CD8+ anti-ovalbumine (la réaction humorale contre l'antigène vectorialisé apparaissant minime) ; et les animaux ayant reçu 2 injections sous-cutanées de cette même souche sont résistants à l'implantation d'une tumeur exprimant l'ovalbumine, le mélanome syngénique B 16OV A. Chacun de ces évènements est dépendant de la délivrance de l'antigène par le SSTT. Dans un modèle tumoral in vivo utilisant une tumeur non modifiée (le glioblastome syngénique GL26) et des antigènes tumoraux natifs (gplOO et Trp2), l'injection du vecteur délivrant la gp 100 permet une protection relative contre l'implantation de la tumeur en sous-cutanée. Lors de l'implantation intracérébrale de la tumeur GL26, la survie n'est pas modifiée; des expériences d'immunohistochimie sont en cours pour rechercher des stigmates de réaction lymphocytaire T locale. Ln vitro en modèle humain, l'interaction de cellules dendritiques avec la souche délivrant la protéine Ml du virus Influenza permet l'activation de lymphocytes T CD8+ anti-Ml. Par ailleurs, des mutants atténués (auxotrophisme pour les acides aminés aromatiques, délétion des gènes du quorum sensing) ont été élaborés afin de disposer de vecteurs à l'innocuité maximale. Ce travail fait donc la preuve du concept de l'utilisation de vecteurs bactériens vivants basés sur le SSTT en immunothérapie anti-tumoralePseudomonas aeruginosa type III secretion system (TTSS) is a virulence factor allowing direct translocation of bacterial toxins from bacteria to eukaryotic cell cytoplasm. We took advantage of TTSS to elaborate a system of non-bacterial antigen delivery to antigen-presenting cells (among them dendritic cells (DCs)) to trigger a specifie CD8+ T lymphocyte response. Indeed, a TTSS-based vector may allow 1) DCs activation (being a bacteria) and 2) major histocompatibility complex class 1 (MHC-I)-restricted antigen presentation by DCs (because of the intracytoplasmic antigen delivery). We used a P. Aeruginosa strain which TTSS toxin genes had been deleted. Antigen secretion was obtained by transcriptionnal fusion of antigen coding sequence with the TTSS effector ExoS N-terminal (non-toxic) coding sequence. TTSS negative control (producing but not delivering antigen or secreting but not translocating the antigen) were elaborated. Ln an in vitro murine model, interaction of DCs with ovalbumin-delivering vector allows DC activation and CMH-I restricted presentation by DCs of peptide originating from ovalbumin. Ln an in vivo murine model, subcutaneous injection of ovalbumin-delivering vector was associated with an elevation of splenic antiovalbumin CD8+ T lymphocytes, and a poor (if any) anti-ovalbumin antibody generation. After two injections of this vector, animais were highly resistant to a challenge with the ovalbumin-expressing melanoma 816OVA in prophylactic and curative assays. These results were not obtained using TTSS negative controls. Ln an unmodified tumor (glioblastoma GL26) murine model, injection of vector delivering GL26 spontaneous antigen (gp100 and Trp2) was associated with a partial protection against subcutaneous GL26 challenge (with gp100) but not against intracerebral GL26 challenge. Immunohistochemistry is currently performed to assess local CD8+ T lymphocyte tumoral infiltration. Ln a human in vitro model, a vector delivering Influenza virus protein M1 induces the activation by DCs of anti-M1 CD8+ T lymphocytes. Moreover, attenuated vectors (auxotrophic for aromatic aminoacids and/or lacking key quorum sensing genes) have been elaborated. This work demonstrates that TTSS-based vectors may be considered as useful in anti-tumor immunotherapy
45
Godefroy, Emmanuelle. "La présentation croisée de la métalloprotéase matricielle-2 par les cellules de mélanome génère un épitope T spécifique de ce cancer." Nantes, 2004. http://www.theses.fr/2004NANT2077.
Full textAbstract:
La plupart des tumeurs expriment des antigènes susceptibles d'être reconnus par des lymphocytes T CD8 cytotoxiques. Néanmoins, les essais d'immunothérapies réalisés chez l'homme, ciblant différents antigènes reconnus par des lymphocytes T, ont montré une efficacité limitée. L'une des voies possibles pour améliorer ces traitements consiste à identifier de nouveaux antigènes tumoraux. Dans ce but, nous avons étudié la spécificité de lymphocytes T ayant infiltré les mélanomes de 22 patients. Ce criblage a permis d'identifier un nouvel antigène de tumeur reconnu par un clone T CD8 dans le contexte HLA-A*0201 : la métalloprotéase matricielle-2 (MMP-2). Nous avons également montré que l'épitope MMP-2560-568 n'était pas présenté par la voie endogène classique, mais par présentation croisée. L'apprêtement original de MMP-2, utilisé exclusivement par les cellules de mélanome, et ses fonctions pro-tumorales en font un candidat idéal à cibler en immunothérapie anti-mélanomeMost tumor cells express antigens that can be recognized by cytotoxic T CD8 lymphocytes. Nevertheless, immunotherapeutic trials, targeting various human tumor cell antigens recognized by T lymphocytes, have shown limited efficacy. To improve these treatments, it is necessary to identify new tumor antigens. With this aim, we studied the specificity of melanoma infiltrating lymphocytes from 22 patients. This screening allowed us to identify a new tumor antigen recognized by a CD8 T cell clone in the HLA-A*0201 context : the matrix metalloproteinase-2 (MMP-2). We also showed that the MMP-2560-568 epitope is not processed by the classical endogenous pathway, but by cross-presentation. The original processing of the MMP-2 epitope, only used by melanoma cells, and the pro-tumoral functions of MMP-2 make of this new antigen an ideal target for immunotherapy, and opens the way to new innovative therapeutic strategies to treat HLA-A*0201 melanoma patients
46
Le, Mercier Isabelle. "Caractérisation des altérations fonctionnelles des cellules dendritiques plasmacytoïdes et myéloïdes dans les tumeurs mammaires murines." Phd thesis, Université Claude Bernard - Lyon I, 2009. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00876658.
Full textAbstract:
Les cellules dendritiques (DC) sont des cellules présentatrices d'antigènes qui jouent un rôle central dans l'immunité en initiant et en orientant les réponses T primaires. Parmi elles, les cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC) sont des cellules clé de la réponse anti-virale et sont également impliquées dans l'induction de tolérance. Dans le cancer du sein, la présence de pDC et de lymphocytes T régulateurs (Treg) dans les tumeurs sont des facteurs de mauvais pronostic. Nous avons développé un modèle murin de tumeur mammaire dans lequel l'échappement des tumeurs à l'immuno-surveillance semble associé à leur infiltration par des pDC et des Treg reproduisant ainsi la pathologie humaine. Les DC myéloïdes associées aux tumeurs (TAmDC) et les TApDC sont immatures et conservent leur capacité à internaliser des antigènes in vivo. De façon importante, les TApDC sont spécifiquement altérées pour leur capacité à produire des cytokines et chimiokines inflammatoires en réponse aux ligands du Toll Like Receptor (TLR)-9 mais conservent une réponse normale aux ligands du TLR7. En revanche, les TAmDC produisent spontanément de grandes quantités d'IL-10 mais ne sécrètent pas d'IL-12. Enfin, les deux sous populations sont bloquées pour leur capacité à induire l'activation des lymphocytes T CD4+. En parallèle, les pDC normales sont capables d'internaliser des corps apoptotiques de cellules tumorales à condition que celles-ci soient infectées par un virus. Ces résultats suggèrent que les pDC et les mDC sont différemment altérées dans l'environnement tumoral et fournissent de nouvelles pistes pour des stratégies d'immunothérapie dans le cancer du sein
47
Coulon, Le Moignic Aline. "Développement d'une stratégie de vaccination thérapeutique antitumorale basée sur l'utilisation de lipopolyplexes à ARN ciblant les cellules dendritiques." Thesis, Paris 6, 2017. http://www.theses.fr/2017PA066048/document.
Full textAbstract:
L'élimination des cellules tumorales par le système immunitaire repose sur la capacité des cellules dendritiques à correctement présenter l'antigène aux cellules effectrices. Nous avons donc développé une stratégie de vaccination thérapeutique basée sur des lipopolyplexes à ARNm (LPRs) : l'ARNm codant pour l'antigène est associé à un complexe de polylysine histidylée, et incorporé dans un liposome trimannosylé afin de mieux cibler les cellules dendritiques. En effet, les cellules dendritiques expriment largement les lectines de type C, qui sont des récepteurs reconnaissant principalement des résidus mannose. Dans le travail présenté ici, nous montrons que les LPR trimannosylés sont capables de fixer les cellules dendritiques humaines et murines. De manière très intéressante, nous montrons aussi que les LPR trimannosylés injectés chez la souris induisent le recrutement et l'activation de cellules dendritiques dans le ganglion drainant. De plus, quand les LPR trimannosylés vectorisent un ARNm codant pour l'antigène tumoral E7, ils sont capables d'induire une réponse T spécifique d'E7 au niveau systémique. Enfin, les LPRs trimannosylés permettent une réponse thérapeutique lorsqu'ils sont utilisés dans trois différents modèles de tumeurs : le modèle TC1 de carcinome exprimant E7, le modèle B16 de mélanome exprimant MART1 et le modèle EG7 de lymphome exprimant OVA. Cette stratégie apparaît donc prometteuse comme thérapie innovante anti-cancerElimination of cancer cells requires an efficient cytotoxic immune response. In order to obtain such a response, antigens need to be uptaken by dendritic cells (DCs) and correctly presented to effector cells. We developed a strategy based on RNA lipopolyplexes (LPRs): antigenic mRNA is associated with a histidine-polylysine polyplexe and incorporated in a trimannosylated liposome to better target dendritic cells (DCs) in vivo, as DCs express several C-Type lectin receptors that preferentially bind to mannose. Here, we report that trimannosylated LPRs are efficient to target both human and murine DCs. Interestingly, in vivo experiments reveal that trimannosylated LPRs not only target DCs but also induce their recruitment and activation in draining lymph nodes. Furthermore, when combined with mRNA encoding E7 oncoprotein from HPV16, trimannnosylated LPRs trigger specific T-cell response against E7. Finally, when used as therapeutic vaccines in three different tumors models, LPRs promote curative therapeutic responses in E7-expressing TC1 tumor, in OVA-expressing EG7 lymphoma and in MART-1-expressing B16 melanoma, when combined with E7, OVA or MART-1 mRNA, respectively. Altogether, these results comfort us to considerate the use of this strategy for anti-cancer vaccine therapies
48
Giraud, Véronique. "Étude des effets dépressogènes des immunothérapies chez des patients atteints de cancers du rein métastatiques : rôle de certains facteurs psychologiques, biologiques et sociaux : une recherche exploratoire en psychologie de la santé." Bordeaux 2, 2004. http://www.theses.fr/2004BOR21100.
Full textAbstract:
Le diagnostic de cancer du rein métastatique et les traitements qui lui sont associés constituent des événements hautement stressants dans la vie d'un homme ou d'une femme. Le cancer est actuellement l'une des principales causes de décès en France. Depuis une vingtaine d'années, les recherches menées en psychoneuroimmunologie démontrent l'existence d'un large réseau de communication bidirectionnel entre le système immunitaire et le cerveau. Les cytokines, molécules libérées par les cellules immunitaires lors de la réponse de l'hôte à l'agent infectieux, constituent les principaux médiateurs de cette communication qui s'établit entre la périphérie et le système nerveux central. De par leur action immunomodulatrice, les cytokines ont été utilisées à des fins thérapeutiques, pour le traitement de diverses formes de cancer. Cependant, ce type de traitement s'accompagne fréquemment d'effets secondaires qui peuvent perturber son efficacité et affectent la qualité de vie du patient traité. Les complications psychiatriques qui s'installent durant le traitement sont mal définies et restent imprévisibles. Les principaux objectifs de notre étude sont, d'une part, de voir si certains facteurs psychosociaux et des transactions différencient les sujets, et d'autre part, d'identifier un style cognitif comportemental précis, spécifiques aux patients atteints d'un cancer, au début du traitement par immunothérapie, et développant une symptomatologie dépressive. L'étude s'est déroulée dans un centre anticancéreux, et au CHU de Bordeaux sur des patients présentant un cancer du rein métastatique traité par IL-2 et/ou IFN-α, et avec un modèle d'étude de psychologie de la santé (Bruchon-Schweitzer et Dantzer, 1994). Nos principaux résultats démontrent que l'administration de cytokines s'accompagne de symptômes dépressifs. Dès la seconde semaine de traitement, certains patients présentent une symptomatologie dépressiveThe diagnosis of renal cell carcinoma and the treatment associated, are highly stressful events in the life of a man or a moman. Nowadays, neoplasm is one of the first cause of mortality in France. During the last twenty years, psychoneuroimmunology has demonstrated an intricate network of bidirectional relationships between the immune system and the brain. Cytokines that are released by immune cells during the host response to infection, represent the main mediators of the communication between the immune system and the central nervous system. By their potent immunomodulatory effects, cytokines are used for the treatment of several forms of cancers. However, cytokines therapies are often accompanied by several side effects that impair the patient's quality of life, and limit the continuation of immunotherapy. Psychiatric disturbance that occur during cytokine treatment are undefined and impredictable. The principal objectives of our study are, in one hand, to show that subjects are differencied by psychosocial factor and transaction, and in the other hand, to identify a cognitive comportemental specific pattern, for cancerous patients at the beginning of immunotherapy. The study was carried out on patients suffering from metastatic renal cell carcinoma and receiving cytokine immunotherapy, (Institut Bergonié and CHU of Bordeaux) with the Health Psychology model Study of Bruchon-Schweitzer and Dantzer (1994). The main results show that cytokine therapy is accompanied by depressive symptoms. As soon as the first and second week of immunotherapy, patients treated display depressive symptomatology
49
Veith, Irina. "Lung Cancer On-Chip for Immunotherapy Response Profiling Apoptosis Mapping in Space and Time of 3D Tumor Ecosystems Reveals Transmissibility of Cytotoxic Cancer Death." Thesis, université Paris-Saclay, 2020. http://www.theses.fr/2020UPASL036.
Full textAbstract:
Le cancer du poumon non à petites cellules (CPNPC) est l'une des rares maladies tumorales, avec mélanome et carcinome vésical, pour lesquelles les médicaments immuno-oncologiques ont conduit à une révolution thérapeutique. Seuls 20 à 30% des patients atteints de CPNPC bénéficient de la monothérapie avec inhibiteurs des points de contrôle immunitaires (ICP) avec des réponses durables, tandis que les combinaisons ont conduit à réponse longue dans jusqu'à 40% des patients. Notre étude vise à mieux caractériser la modulation du microenvironnement tumoral lors d'un traitement ICP, plus ou moins une chimiothérapie concomitante, afin de guider des stratégies d'immunothérapie plus convaincantes. Inspiré par la technologie d'organes sur puce, nous avons reconstitué ex vivo un microenvironnement de tumeur pulmonaire immunocompétent simplifié en réalisant des co-cultures 3D dans des dispositifs microfluidiques. Cette approche nous a permis de réaliser une imagerie en direct et une quantification des effets de l'ICP sur l'écosystème tumoral. L’architecture de la puce se compose de trois micro-chambres parallèles, séparées par des micro-piliers qui permettent le confinement d'un hydrogel biomimétique dans le canal central par capillarité. En co-cultivant des cellules CPNPC et des lymphocytes T cytotoxiques autologues (récoltés à partir des TIL du même patient et amplifiés ultérieurement in vitro), nous pourrions récapituler, visualiser et quantifier une activité cytotoxique efficace et spécifique des cellules T contre les cellules cancéreuses autologues. Pour cela, nous avons développé un nouvel algorithme qui pourrait localiser les cellules cancéreuses et, grâce à un rapporteur fluorescent de l'activité caspase, mesurer leur mort d'une manière spécifique au temps et à l'espace. Dans ces co-cultures 3D, l'activité cytotoxique des cellules T a été renforcée par le traitement avec l'inhibiteur PD-1 et l'inhibiteur PD-L1, reconstituant ainsi sur puce une réponse ICI. De plus, cette méthode nous a permis d'extraire un paramètre, le potentiel d'induction de la mort, qui estime mathématiquement la «contagiosité de la mort» en calculant la proximité dans l'espace et le temps des signaux de mort. Fait intéressant, cette analyse nous a révélé que la mort des cellules cancéreuses causée par la chimiothérapie ou par les cellules T cytotoxiques est contagieuse, alors que dans les conditions témoins, la mort des cellules cancéreuses est stochastique. Cette observation peut avoir des implications biologiques et cliniques, par exemple en ce qui concerne « l'effet spectateur », observé après un traitement de radiothérapie. De plus, afin d'avoir un aperçu moléculaire de l'impact de la co-culture sur les cellules T, en présence ou en l'absence d'ICI, nous avons analysé par cytométrie de flux l'expression de plusieurs marqueurs de cellules T. Après 3 jours de co-culture sur puce, les lymphocytes T ont montré une expression accrue des marqueurs d'activation, tels que CD69 et CD25, ainsi qu'une augmentation de l’expression des marqueurs d'épuisement, notamment PD-1, TIGIT, TIM-3, LAG- 3, CD137 et OX-40. Le couplage de l'analyse d'image et de l'étude de la plasticité des lymphocytes T, nous a permis d'associer pour la première fois l'activité cytotoxique finement quantifiée des lymphocytes T avec leur statut d'activation / épuisement et de décrire un phénotype réactif aux immunothérapies. Dans cette thèse, nous avons démontré que la tumeur-sur-puce peut être exploité pour évaluer l'efficacité des inhibiteurs de points de contrôle immunitaires, potentiellement pour déterminer l'effet de médicaments combinés et enfin pour étudier les mécanismes de résistance primaire des cellules cancéreusesNon-small cell lung cancer (NSCLC) is one of the few tumor diseases, with melanoma and vesical carcinoma, for which immuno-oncology drugs led to a therapeutic revolution. Only 20 to 30% of the NSCLC patients benefit from immune checkpoint inhibitors (ICI) monotherapy with durable responses, while combinations led up to 40% of long responder patients. Our study aims to better characterize the modulation of the tumor microenvironment upon ICI treatment, plus or minus concurrent chemotherapy, in order to guide more compelling immunotherapy strategies. Inspired by the organ-on-a-chip technology, we implemented the reconstitution ex vivo of a simplified immunocompetent lung tumor microenvironment by performing 3D co-cultures in microfluidic devices. This approach allowed us to perform live-imaging and quantification of the effects of ICI on the tumor ecosystem.The design of the chip consists of three parallel micro-chambers, separated by micro-pillars that allow the confinement of a biomimetic hydrogel in the central channel by capillarity. By co-culturing autologous NSCLC cells and cytotoxic T lymphocytes (harvested from the TILs of the same patient and furtherly amplified in vitro) we could recapitulate, visualize and quantify an efficient and specific cytotoxic activity of the T cells against the autologous cancer cells. For this purpose, we developed a novel algorithm that could localize the cancer cells and, thanks to a fluorescent reporter of the caspase activity, measure their death in a time- and space-specific manner. In these 3D co-cultures the cytotoxic activity of T cells was enhanced by the treatment with PD-1 inhibitor and PD-L1 inhibitor, therefore reconstituting on-chip an ICI response. Furthermore, this method allowed us to extract a parameter, the potential of death induction, which mathematically estimates the “contagiousness of death” by computing the proximity in space and time of death signals. Interestingly, this analysis revealed us that the death of cancer cells caused by either chemotherapy or cytotoxic T cells is contagious, whereas in control conditions the cancer cells death is stochastic. This observation may have biological and clinical implications, for instance regarding the bystander effect, observed after radiotherapy treatment. Furthermore, in order to have a molecular insight on the impact of the co-culture on T cells, in presence or absence of ICI, we analyzed by flow cytometry the expression of several T cell markers. After 3 days of co-culture on chip, the T cells showed an increased expression of activation markers, such as CD69 and CD25, as well as an increased expression of exhaustion markers, notably PD-1, TIGIT, TIM-3, LAG-3, CD137 and OX-40. The coupling of image analysis and the study of T cell plasticity, allowed us to associate for the first time the finely quantified cytotoxic activity of the T cells and their activation/exhaustion status and describe a responsive phenotype to immunotherapies. In this thesis, we demonstrated that the tumor-on-chip is suitable to evaluate the efficacy of immune checkpoint inhibitors, to potentially assess the effect of combined drugs and to study the mechanisms of cancer cell primary resistance
50
Ouisse, Laure-Hélène. "Immunothérapie des cancers : tentative de mise en évidence d'un nouvel antigène tumoral chez l'homme et développement préclinique d'un agent thérapeutique." Nantes, 2011. http://www.theses.fr/2011NANT2040.
Full textAbstract:
Le développement de traitements d'immunothérapie des cancers nécessite la découverte de nouveaux antigènes tumoraux. Une première partie de ma thèse a consisté à déterminer l'antigène reconnu par un clone lymphocytaire T issu de tumeur colique humaine. Cette étude n'a pas abouti à la mise en évidence d'un nouvel antigène mais a souligné l'importance de la molécule ICAM-1 dans la co-stimulation de ce clone T particulier, de part son phénotype CD4+CD8+. Ce clone reconnaît un antigène partagé par un grand nombre de lignées, voire ubiquitaire et pourrait avoir un rôle régulateur. L'un des obstacles aux traitements d'immunothérapie est la mise en place de réponses immunitaires régulatrices. Une deuxième partie de mon travail avait pour but l'étude des mécanismes d'inactivation fonctionnelle des lymphocytes T régulateurs murins par les bactéries E. Coli xprimant la listeriolysine-O(LLO). Chez la souris, l'injection de ces bactéries induit une réponse anti-tumorale forte en traitement préventif ou curatif qui a été corrélée avec une réponse cytotoxique forte, favorisée par une perte de la fonction des lymphocytes régulateurs (Tregs). L'objet de cette étude était de rechercher les mécanismes impliqués. Les cellules dendritiques (DC) sont les effecteurs de cette inhibition et les résultats démontrent le rôle essentiel de l'inhibition de la sécrétion d'IL-10 par les DC infectées E. Coli/LLO. Des expériences d'infection menées sur des DC humaines montrent un effet similaire sur l'expression d'IL-10, ouvrant la possibilité d'utiliser ces bactéries recombinantes dans des protocoles d'immunothérapie chez l'hommeThe development of cancer immunotherapy treatment requires the discovery of new tumor antigens. The first part of my thesis was to determine the antigen recognized by a specific T cell clone derived from human colon tumor. This study did not lead to the discovery of a new antigen but to emphasize the importance of ICAM-1 in the costimulation of this T cell clone CD4 + CD8 +. This clone recognizes an antigen shared by a large number of cell types and may have a regulatory rôle. One obstacle to immunotherapy treatments is the development of regulatory immune responses, and the second part of my work was to study the mechanisms involved in the functional inactivition of murine T regulatory cells (Tregs) by the bacteria E. Coli expressing the Listeriolysin-O (LLO). In mice, injection of these bacteria induces a strong anti-tumor response in preventive of curative protocols that has been correlated with a strong cytotoxic response, favored by a loss of Tregs function. Dendritic cells (DC) are the mediators of this inhibition. In addition, the data demonstrate the essential role of the inhibition of IL-10 secretion in DC infected with E. Coli/LLO and the rôle of this inhibition in Tregs function. Infection experiments on human DC show a similar effect on the expression of IL-10 suggesting the possibility of the utilisation of these recombinant bacteria in humans immunotherapy protocols