Dissertations / Theses: 'Ingénierie tissulaire – Dissertations universitaires'

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Gérard, Catherine. "Intérêt des hydrogels polysaccharidiques en ingénierie du cartilage." Nancy 1, 2005. http://www.theses.fr/2005NAN11313.

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Abstract:

Notre travail de thèse a pour objectif de promouvoir un cartilage cicatriciel de bonne qualité dans une lésion focale expérimentale du cartilage. La thématique de recherche repose sur trois axes principaux complémentaires : la cellule (le chondrocyte), le biomatériau (matrice extracellulaire) et la contrainte biomécanique (méchanotranduction). Chacun de ces axes joue un rôle dans le processus de réparation, individuellement, mais surtout en synergie. Pour cela, différentes techniques ont été mises au point pour optimiser le biomatériau, stimuler les cellules et caractériser le tissu de réparation. Ainsi un système de culture chondrocytaire 3D en bille d'alginate avec acide hyaluronique a été développé, en soulignant l'influence favorable des contraintes mécaniques. La synthèse des composants matriciels a été appréhendée par électrophorèse capillaire de zone. Dans une seconde partie, une caractérisation moléculaire (qPCR) des chondrocytes en bille a été réalisée en soulignant les différences d'expression de rnRNA entre un cartilage hyalin et un fibrocartilage, tout comme l'influence des contraintes mécaniques et d'une transfection par le TGFIβ et la BMP. Enfin, l'implantation de chondrocytes dans une bille d'alginate dans une lésion focale du cartillage rotulien chez le rat, suggère bien le rôle important de la synergie chondrocyte / matrice extra-cellulaire pour obtenir une réparation de qualité du cartilage et une bonne bio-intégration en zone de contrainte
Our thesis work aims to promote a good repair process for a focal chondral lesion. This workpackage associates three main axis : the cell component (the chondrocyte), the biomaterial (extracellular matrix) and the biomechanical constraint (mechanotransduction). Each actor plays a main role in the repair process, at least individually, but mostly in synergy. To this end, various techniques have been developed in order to optimize the biomaterial, to stimulate cells, and fmally to characterize the repair tissue. Three-dimensional chondrocyte culture in alginate plus hyaluronate have thus been developed, to underline the favorable influence of cyclic mechanical constraints. Extracellular matrix component synthesis has been assessed with Capillary Zone Electrophoresis. Secondly, a molecular characterization of encapsulated chondrocytes has been performed by using qPCR in hyaline cartilage versus fibrocartilage. Both lineages did not express the same level of cartilage-dedicated genes, either in basal conditions or after mechanical stimulation or transfection (TGF, BMP). Finally, in vivo implantation in the rat knee during a dedicated calibrated lesion in the patella suggest the favorable influence of a good collaboration between encapsulated chondrocytes and extracellular matrix to promote a good cartilage repair and a good biointegration in a biomechanical-constraint zone

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Josse, Jérôme. "Impact de l'infection à Staphylococcus aureus sur le microenvironnement osseux." Thesis, Reims, 2016. http://www.theses.fr/2016REIMP204/document.

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Abstract:

Les infections ostéo-articulaires à Staphylococcus aureus sont des pathologies fréquentes dont les conséquences peuvent aller de la simple altération cellulaire à un retard de la réparation osseuse ou une réponse inflammatoire excessive. Afin d’étudier ce phénomène, nous avons, dans un premier temps, développé deux modèles d’infections in vitro faisant interagir Staphylococcus aureus et des cellules osseuses primaires issues d’explants chirurgicaux humains. Ces cellules ont été préalablement cultivées dans un milieu standard ou un milieu ostéogénique afin d’obtenir 2 populations à des stades de maturation différents. L’étude de l’internalisation de Staphylococcus aureus, de la mortalité cellulaire et de la production de médiateurs inflammatoires pour ces 2 populations a permis d’établir si l’impact de Staphylococcus aureus variait en fonction de la maturation cellulaire. Dans un second temps, nous avons étudié l’impact de Staphylococcus aureus sur des cellules souches mésenchymateuses dérivées du cordon ombilical. En effet, dans le cadre d’une régénération osseuse en site infecté, les cellules souches mésenchymateuses pourraient être amenées à interagir avec Staphylococcus aureus. Nous avons donc caractérisé la capacité de ces cellules à internaliser Staphylococcus aureus, à survivre face à l’infection et à produire des médiateurs inflammatoires dans notre modèle in vitro d’infection aiguë. Ce projet nous a permis de valider nos modèles d’infection in vitro et de caractériser l’impact de Staphylococcus aureus sur différentes cellules du microenvironnement osseux, donnant ainsi de nouvelles pistes pour le développement de stratégies pour la lutte antibactérienne et l’ingénierie tissulaire osseuse
Staphylococcus aureus-related bone and joint infections are common diseases whose consequences can range from simple cell damage to delayed bone repair or excessive inflammatory response. To study this phenomenon, we have developed two models of in vitro infection with Staphylococcus aureus and primary bone-forming cells derived from human surgical explants. These cells have been previously cultured in a standard medium or osteogenic medium to obtain two populations at different stages of maturation. The study of Staphylococcus aureus internalization, cell death and production of inflammatory mediators in these 2 populations allowed us to establish whether the impact of Staphylococcus aureus varied depending on cell maturation. We also studied the impact of Staphylococcus aureus on mesenchymal stem cells derived from umbilical cord. In case of bone regeneration in infected site, mesenchymal stem cells may have to interact with Staphylococcus aureus. Therefore, we characterized the ability of these cells to internalize Staphylococcus aureus, to survive against the infection and to produce inflammatory mediators in our in vitro model of acute infection. This project allowed us to validate our in vitro infection models and to characterize the impact of Staphylococcus aureus on different cells in the bone microenvironment, providing new approaches for the development of antibacterial strategies and bone tissue engineering

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Hattar, Susan. "Concept de surfaces biomimétiques pour stimuler in vitro l'ostéogenèse." Paris 7, 2004. http://www.theses.fr/2004PA07A001.

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Abstract:

En chirurgie dentaire, le praticien est souvent confronte à des pertes osseuses suite a des extractions dentaires ou des parodontites. Depuis longtemps, des tentatives ont été réalisées pour trouver le substitut idéal de Vos qui ~OUIT3 remplacer non seulement la structure mats aussi la fonction du tissu osseux. Grâce aux progrès de l'ingénierie tissulaire de l'utilisation des surfaces biomimétiques, de nouvelles perspectives thérapeutiques émergent. Parmi ces matériaux. Les matériaux qualifiés de bioactifs ont été proposés pour stimuler l'ostéogenèse. Malgré le fait que ces matériaux soient largement utilisés dans les applications cliniques, le mécanisme exact d'action de ces matériaux reste mal connu. L'objectif de notre travail, a été dans un premier temps, d'essayer d'approfondir nos connaissances sur les effets de tels matériaux sur le comportement des cellules ostéoblastiques in vitro. Plus précisément, nous nous sommes proposés à étudier l'influence des verres bioactifs 45S5 sur l'expression de gènes clés du phénotype ostéoblastique afin de voir l'influence sur la différenciation cellulaire, au niveau génétique Dans un deuxième temps, nous avons voulu tester l'effet de la modification des surfaces de biomatériaux afin de voir si nous pouvions améliorer la bioactivité de ces verres. Une première étude a consisté à étudia l'influence des verres bioactifs seuls ou incubés dans un tampon de tris (pour préfabriquer la couche bioactive) sur les cellules de la lignée humaine MG63. Nos résultats morphologiques elles analyses par RT-PCR montrent un maintien du phénotype ostéoblastique et une expression quasi équivalente dans les cultures bioactives comparés au témoin bioinerte. Dans un deuxième temps nous avons cultivé des cellules murines de la lignée MC3T3. E1 en présence de verres bioactifs seuls ou recouverts de protéines amélaires (Emdogain® ) Nos résultats morphologiques montrent une différenciation cellulaire ainsi qu'une minéralisation plus importante dans les cultures bioactives. D'autre part, le taux de protéines s'est avéré plus important, au 20ème jour, lorsque les granules de verres bioactifs étaient associés à l'Emdogain®. Les résultats par Northern Blot montrent une expression plus importante des gènes clés tels que Runx2, BSP et l'ostéocalcine dans les deux cultures bioactives par rapport au témoin. La dernière partie de ce travail a consisté à évaluer l'effet d'une nouvelle génération de verres bioactifs issues de la technique de solgel sur l'ostéogenèse, à partir de cultures ostéoblastiques primaires murines. Ces verres possèdent une bioactivité plus importante à cause de leur composition et leur structure hautement poreuse. Les résultats démontrent une stimulation des paramètres de différenciation ostéoblastique. Cela a été confirmé par une formation plus précoce et plus importante des nodules osseux dans les cultures solgel par rapport aux verres bioinertes. De plus, l'expression des marqueurs phénotypique principaux, tels que la phosphatase alcaline, la bone sialoprotéine et surtout l'ostéocalcine a été stimulée dans les cultures solgel. L ‘ensemble de ces résultats montre que les verres bioactifs sont capables de stimuler l'ostéogenèse in vitro Cet effet a été démontré plutôt au niveau de l'expression des gènes clés du phénotype ostéoblastiques. Par ailleurs, il semblerait que la combinaison des verres bioactifs à l'Emdogain® stimule davantage les paramètres de différenciation.

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Kökten, Tunay. "L'innervation en ingénierie dentaire." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ073/document.

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Abstract:

Notre approche biomimétique permet de régénérer une dent entière. Un protocole en deux étapes à partir de réassociations de cellules dentaires embryonnaires permet le développement de la couronne in vitro et, après implantation, la différenciation fonctionnelle des cellules, l’initiation du développement radiculaire et la vascularisation dentaire. Cependant, l’absence d’innervation a nécessité des expériences complémentaires :- La co-implantation de réassociations cellulaires avec un ganglion trigéminal permet la croissance d’axones autour de la dent formée, mais pas dans le mésenchyme dentaire.- Pour tenter de résoudre ce problème, la régénération axonale a été testée dans un contexte immunodéprimé en utilisant la cyclosporine A (CsA). Dans ces conditions, des fibres nerveuses entrent dans la pulpe dentaire, jusqu’aux odontoblastes. Cependant, la CsA a aussi un effet direct sur la croissance axonale.- Des co-implantations chez des souris immunodéprimées (Nude) montrent que l’immunomodulation seule suffit pour l’innervation de la dent.- Dans la dent, les axones assurent différentes fonctions en interagissant avec les cellules voisines. Les relations entre axones et autres cellules (odontoblastes, cellules endothéliales, péricytes et cellules gliales) ont été analysées dans les mésenchymes dentaire et péri-dentaire de réassociations implantées et comparées à ce que l’on observe pour une molaire physiologique à un stade similaire.Ce travail décrit les conditions permettant l’innervation des dents régénérées. Des expériences préliminaires encourageantes ont été réalisées avec des cellules souches pour remplacer la CsA
Our biomimetic approach allowed the regeneration of a whole tooth. Using embryonic dental cells, a two-steps protocol allowed crown formation in vitro and, after implantation, functional cells differentiation, initiation of root formation and tooth vascularization. However, the teeth were not innervated, which led to complementary experiments:- The co-implantation of cell re-associations with a trigeminal ganglion allowed axonal growth around the forming teeth, but not in the dental mesenchyme. - To try to solve this point, axonal regeneration was tested in immunodepressed conditions, using cyclosporin A (CsA). In these conditions, nerve fibers entered the dental pulp and reached odontoblasts. However, CsA shows multiple effects, including direct ones on nerve growth. - Co-implantations were performed in immunocompromised Nude mice allowed axons to reach the odontoblast layer, thus showing that immunomodulation is sufficient.- Axons in the dental mesenchyme interfere with several functions by interacting with neighbor cells. Relationships between axons and other cells (odontoblasts, endothelial cells, pericytes and glial cells) were analyzed in the peridental and dental mesenchymes of implanted reassociations and compared to the physiological situation in developing molars at similar stage. This work describes conditions allowing the innervation of engineered teeth. Preliminary encouraging attempts have been made to replace CsA by using stem cells

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Offner, Damien. "Régénération des lésions osseuses maxillo-faciales : épidémiologie, stratégies innovantes au service des patients, qualité et réflexions éthiques." Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ094/document.

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Abstract:

Les traitements actuels des lésions osseuses maxillo-faciales ont été éprouvés. La greffe autogène présente les propriétés idéales, mais montre des inconvénients : douleurs chroniques, infection… Certains comblements proposés ne permettent pas une néoformation vasculaire, garante de la viabilité des tissus régénérés pour des lésions importantes. Il faut alors développer des implants avec les caractéristiques recherchées et trouver les moyens de lutter contre le risque infectieux. Ce travail présente les résultats de recherches menées sur la fabrication d’implants nanofibreux mimant la MEC du tissu osseux, dotés d’une porosité favorable à une formation vasculaire et pouvant être fonctionnalisés par des facteurs de croissance / des cellules. Une réflexion éthique est menée sur le développement de ces avancées et sur leurs applications afin de garantir qu’elles constituent un réel progrès pour les patients. Il est aussi montré que l’on peut améliorer la sécurité des soins dans le traitement des lésions osseuses maxillo-faciales en développant des équipements dans le champ de l’hygiène et par la mise en place de procédures visant à évaluer leur efficacité
Current treatments of maxillofacial bone defects have now been proven. Only the autogenous graft presents the ideal properties but shows complications: chronic pain, infection... Some bone filling techniques that are currently available do not allow the formation of blood vessels, guaranteeing the sustainability of the regenerated tissue for large lesions. It is then necessary to develop implants in that way, and to find ways to fight effectively the risk of infection. This work presents the results of research conducted on the fabrication of nanofibrous implants mimicking the ECM of bone tissue, with a porosity that is favorable to a vascular formation. These implants can be functionalized with growth factors / cells. Ethical considerations are provided on the development of these advances, but also on their applications to ensure that these developments constitute a real progress in the interest of patients. Moreover, this work shows that it is possible to improve the safety of care in the treatment of maxillofacial bone defects, with the development of equipment in the field of hygiene and the establishment of procedures to assess their effectiveness

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Wagner, Quentin. "Optimisation de dispositifs médicaux thérapeutiques implantables pour l'ingénierie tissulaire osseuse et cartilagineuse." Thesis, Strasbourg, 2017. http://www.theses.fr/2017STRAJ114/document.

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Abstract:

Notre équipe a optimisé la formulation de dispositifs médicaux implantables pour l’ingénierie tissulaire osseuse et cartilagineuse. A ces fins, nous nous sommes basés sur des implants nanostructurés d’origine naturelle ou synthétique conçus au sein du laboratoire par la méthode d’électrospinning, pour imiter la matrice extracellulaire du compartiment osseux, et un hydrogel composé d’alginate et d’acide hyaluronique imitant la composition du compartiment cartilagineux. Dans une première partie de mon travail, pour la régénération osseuse, nous avons optimisé la formulation d’un implant nanostructuré à base de chitosane pour une accélération de cette régénération. Ceci a été possible en rendant actif ce dispositif médical implantable par incorporation de nanoparticules de silice, conférant à la construction nanocomposite des propriétés mécaniques accrues, et une excellente biocompatibilité avec le tissu hôte. Une autre étude pour la même visée a permis d’élaborer une nouvelle stratégie d’ensemencement de dispositif implantable synthétique et nanostructuré par des microtissus cellulaires, remplaçant un ensemencement de cellules isolées et permettant des performances de minéralisation accrues à l’intérieur de l’implant. Dans un deuxième temps, pour la régénération de l’unité ostéoarticulaire, nous avons proposé deux implants bi-compartimentés et hybrides comportant des microtissus de cellules souches mésenchymateuses. Ces implants sont composés d’un hydrogel contenant les cellules souches permettant la régénération du cartilage, et d’une membrane collagénique naturelle (Bio-Gide®) ou synthétique (membrane de polycaprolactone), dotée de nanoréservoirs (technologie brevetée par le laboratoire) de facteur de croissance ostéogénique (BMP-7) pour une régénération du socle osseux (os sous-chondral) de l’unité os-cartilage. La troisième partie de mon travail a concerné la vascularisation des implants osseux et particulièrement l’accélération du recrutement vasculaire. Dans ce cadre plus vasculaire, nous avons proposé une stratégie qui vise à doter un implant synthétique nanostructuré de facteur de croissance angiogénique (VEGF), puis à lui appliquer un ensemencement séquentiel de cellules mésenchymateuses adultes « ostéoblastes humains» et de cellules endothéliales humaines (HUVECs). Cette stratégie a permis un recrutement et une hiérarchisation accrue des cellules endothéliales dans l’implant. En conclusion, l’optimisation des implants développés au laboratoire permettra sans nul doute de proposer dans un futur proche de nouveaux dispositifs médicaux implantables (DMI) thérapeutique combinés de type DMI-MTI (Médicaments de Thérapie Innovante) pour l’ingénierie tissulaire osseuse et cartilagineuse en particulier en médecine régénérative ostéo-articulaire
Our team optimized the formulation of implantable medical devices for bone and cartilage tissue engineering. To that end, we based our work on nanostructured implants, either natural or synthetic, made in the laboratory by electrospinning process, to mimic bone extracellular matrix, and hydrogel of alginate/hyaluronic acid to mimic cartilage extracellular matrix. First, concerning bone regeneration, we optimized the formulation of a nanostructured scaffold composed of natural chitosan to enhance bone regeneration. This was made possible by doping this implantable medical device with silica nanoparticles, offering this nanocomposite better mechanical properties, and excellent biocompatibility with host tissue. Another study with the same aim allowed elaborating a new cell seeding strategy, to seed these implantable medical devices with cell microtissues instead of single cells, offering higher mineralisation efficiencies within the implant. Consequently, for the regeneration of the osteochondral unit, we proposed two compartmented and hybrid implants comprising mesenchymal stem cells microtissues. Those implants are made of a hydrogel containing the stem cells, allowing the regeneration of cartilage, and a membrane, either natural (collagenic Bio-Gide®) or synthetic (electrospun polycaprolactone) equipped with nanoreservoirs (technology patented by the laboratory) of osteogenic growth factor (BMP-7) for the regeneration of osseous stand (the subchondral bone) of the bone-cartilage unit. Finally, to study the improvement in vascular recruitment, we proposed a new strategy combining the modification of an implantable device with angiogenic growth factor (VEGF), prior to its sequential seeding with mesenchymal cells “human osteoblasts” and human endothelial cells (HUVECs). This strategy allowed higher recruitment and structuration of endothelial cells within the implant. To conclude, the implant optimisation strategies developed in the laboratory will certainly allow proposing in the near future new combined Advanced Therapy Medicinal Products (ATMPs) and Implantable Medical Device for bone and cartilage regeneration, in particular in the field of osteoarticular regenerative nanomedicine

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Bécavin, Thibault. "Développement d'implants actifs et nanostructurés à des fins de régénération dentaire." Thesis, Lille 2, 2015. http://www.theses.fr/2015LIL2S070/document.

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Abstract:

L’ingénierie tissulaire a vu émerger, dans la dernière décennie, la nanomédecinerégénérative combinant non seulement les cellules souches mais aussi les facteursde croissance. Le but de ce travail a été d’utiliser les techniques de l’ingénierieosseuse et pulpaire pour améliorer ou créer des implants actifs et vivants.L’ingénierie tissulaire vise à remplacer ou à réparer des tissus endommagés del’organisme par des implants bioactifs imitant les tissus naturels. Ainsi, il est nécessairede développer en premier lieu des matériaux biocompatibles, c’est-à-direacceptés par l’organisme, et capables d’interagir avec les cellules au site del’implantation du dit matériau afin d’aider à la fonction de l’implant. Pour cette raison,de nombreuses méthodes visent le développement de biomatériaux implantablesimitant le mieux possible la matrice extracellulaire. Dans cette étude,l’"électrospinning" a été utilisé afin de concevoir des membranes nanofibreuses. Ellesont ensuite été fonctionnalisées et associées à des germes de 1re molaire mandibulairede souris afin d'en favoriser le développement. Après une revue de littératures'intéressant à l'ingénierie tissulaire en chirurgie dentaire, deux axes de rechercheseront développés. Le premier concerne la régénération de l’unité os/dent et le deuxièmel'innervation de la dent
In the last decade, regenerative nanomedicine emerged from tissue engineeringby combining stem cells and growth factors. The aim of this work was to use thebone and dental pulp tissue engineering technics to improve or create new living andactive implants. Tissue engineering aims to replace or repair damaged tissues withbioactive implants mimicking natural tissue. Thus, it is necessary to develop in a firstplace, new biocompatible materials. These materials should be well accepted by theorganism and capable to interact with the cells present in the implantation site to helpthe implant integration. In this study, Electrospinning was used to create nanofibrousmembrane which size and organization are comparable to the extracellular matrix.These membranes were functionalized and associated with first molar embryologicalgerms to promote their development. After a literature review about tissue engineeringin dental surgery, two research thematics will be developed. The first thematic isto regenerate the bone/tooth unit and the second is to innervate the tooth

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Shafy, Abdel. "Nouveaux traitements de l'insuffisance cardiaque : de la pharmacologie aux cellules souches et à l'ingénierie tissulaire." Paris 11, 2010. http://www.theses.fr/2010PA11T084.

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Dan, Pan. "Nouvelles approches en ingénierie vasculaire basées sur un scaffold fonctionnalisé, une matrice extracellulaire naturelle et une cellularisation intraluminale : de la caractérisation à la validation chez l’animal." Thesis, Université de Lorraine, 2016. http://www.theses.fr/2016LORR0304/document.

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Palomino, Durand Carla. "Hydrogels injectables et éponges à base de complexe polyélectrolytes (chitosane/polymère de cyclodextrine) pour une application en ingénierie tissulaire osseuse." Thesis, Lille 2, 2019. http://www.theses.fr/2019LIL2S006/document.

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Abstract:

La reparation de defauts osseux par les techniques de l’ingenierie tissulaire osseuse (ITO) est consideree comme une alternative aux greffes conventionnelles. L’objectif de ce projet de these fut de developper des materiaux destines a servir de scaffolds pour le comblement et la regeneration osseuse, ces derniers etant sous la forme d’hydrogels injectables d’une part, et d’eponges, d’autre part. Ces deux types de materiaux ont ete obtenus par melange de chitosane (CHT, cationique), et de polymere de cyclodextrine reticule par l’acide citrique (PCD, anionique), interagissant via des liaisons ioniques et formant des complexes polyélectrolytes. La premiere partie de la these a ete consacree au developpement et caracterisation d’une eponge CHT/PCDs qui a ete chargee avec le facteur de croissance de l’endothelium vasculaire (VEFG) dans le but de favoriser sa vascularisation. Le second volet de la these a eu pour objectif d’optimiser la formulation d’un hydrogel injectable destine a la chirurgie mini-invasive, compose de CHT et de PCD sous sa forme soluble (PCDs) et insoluble (PCDi) [CHT/PCDi/PCDs]. L'etude a ete concentree sur l’optimisation et la caracterisation des proprietes rheologiques de l’hydrogel. Enfin, une etude prospective sur le developpement de l'hydrogel/eponge composite en ajoutant une phase minerale - l'hydroxyapatite (HAp) dans la formulation a ete realisee afin d'ameliorer les proprietes mecaniques et osteoconductrices.L’eponges CHT/PCDs a ratio 3 :3 a ete obtenue par lyophilisation des hydrogels et a subi un traitement thermique (TT) afin d’ameliorer leur stabilite par la formation des liaisons covalentes. L’eponge CHT/PCDs avec un TT a 160°C a montre des proprietes de gonflement eleve (~600%) et une biodegradation ralenti induite par le lysozyme (~12% perte masse dans un mois). Sa microstructure, ses proprietes mecaniques de compression et sa cytocompatibilite avec deux types de cellules (pre-osteoblastes (MC3T3-E1) et endotheliales primaires (HUVECs) ont ete etudiees. Une porosite elevee (~87%) avec des pores interconnectes a ete observee par microtomographie de rayons X, ainsi qu’une bonne adhesion et colonisation cellulaire au sein de l’eponge par microscopie electronique a balayage (MEB). Le VEGF a ete incorpore dans l’eponge, et son profil de liberation a ete suivi, ainsi que la bio-activite du VEGF libere. La liberation du VEGF a ete rapide pendant les trois premiers jours, puis ralenti jusqu'a devenir non-detectable par la methode ELISA jusqu’a 7 jours. Le VEGF libere pendant les deux premiers jours a montre un effet pro-proliferation et pro-migration significatif sur les HUVECs.Les hydrogels injectables de CHT/PCDi/PCDs a differents ratios ont ete optimises et caracterises en fonction de leurs proprietes rheologiques, leur injectabilite, et leur cytotoxicite. L’impact de l’ajoute du PCDi dans l’hydrogel a ete clairement observe par analyses rheologiques Ainsi, l'hydrogel CHT/PCD, compose a parts egales de PCDi et de PCDs, a demontre le meilleur compromis entre stabilite structurelle, proprietes rheofluidifiantes et autoreparantes, et injectabilite. En plus, l’hydrogel a montre une excellente cytocompatibilite vis-avis les cellules pre-osteoblastes MC3T3-E1.Bases sur la formulation optimisee, l’HAp a ete incorporee a differentes concentrations dans l’hydrogel. L’ajout de la phase minerale n’a pas perturbe la formation ni la stabilite structurelle des hydrogels, mais a ameliore les proprietes viscoelastiques. Les eponges composites, elaborees par lyophilisation de ces hydrogels, ont montre que les particules de HAp etaient dispersees de maniere homogene dans la structure macroporeuse de l'eponge. Ces resultats encourageants ont montre qu'il etait possible de fournir un hydrogel injectable ou une eponge composite comme scaffold pour l’ITO [...]
Repair of bone defects by bone tissue engineering (BTE) methods is considered as an alternative to conventional grafts. The aim of this PhD project was to develop two types of BTE scaffolds for bone regeneration: one is in the form of injectable hydrogel, and the other is in the form of sponge. Both scaffolds based on the formation of polyelectrolyte complexes by mixing chitosan (CHT, cationic) and polymer of cyclodextrin (PCD, anionic). Besides developing the sponge scaffold, the vascularization of 3D scaffold (a challenge of BTE) was specially investigated in the first part of the work, for which vascular endothelial growth factor (VEFG) was loaded on the CHT/PCDs sponge to promote the vascularization. The second part of the thesis was dedicated to the elaboration of an injectable CHT/PCD hydrogel, which was intended for minimally invasive surgery. The formulation optimization of hydrogel was performed by tuning the composition ratios of two PCD components: soluble-form PCD (PCDs) and insoluble-form PCD (PCDi), in order to better reach the specific requirement (e.g. rheological properties) of injectable hydrogel for regenerative medicine. Finally, a prospective study on developing the composite hydrogel/sponge by adding a mineral phase - hydroxyapatite (HAp) in the formulation was realized to improve the mechanical and osteoconductive properties.CHT/PCDs sponges were obtained by freeze-drying the hydrogels CHT/PCDs 3:3. The thermal treatment (TT) at different temperatures was further applied on the sponge to improve the mechanical stability. The CHT/PCDs sponge treated at 160°C was opted for further study thanks to high swelling capacity (~ 600%) and moderate lysozyme-induced biodegradation rate in vitro (~ 12% mass loss 21 days). This sponge of choice was further evaluated for the microstructure, the mechanical property (compressive strength) and the cytocompatibility with pre-osteoblasts (MC3T3-E1) and endothelial cells (HUVEC). Results of X-ray microtomography showed a high porosity (~87%) in the sponge with interconnected pores. Good cell adhesion and in-growth (colonization) in the sponge were observed by scanning electron microscopy (SEM). After loading VEGF on the sponge, the release profile of VEGF and the bioactivity of released VEGF were thoroughly studied. It showed that the release of VEGF was rapid (burst) during the first two days, then slowed down up to non-detectable by ELISA method after 7 days. The released VEGF during the first two days showed a significant pro-proliferation and pro-migration effect on HUVECs.For the injectable CHT/PCDi/PCDs hydrogels, optimization of composition ratio was based on evaluating their rheological properties, injectability, and cytotoxicity. The beneficial effect of combining both PCDi and PCDs in the formula of the hydrogel was clearly observed on the properties of hydrogel. Namely, the CHT/PCD hydrogel, composed of equal quantity of PCDi and PCDs, demonstrated the best compromise between structural stability, shearthinning and self-healing properties, and injectability. An excellent cytocompatibility with preosteoblast cells (MC3T3-E1) was also confirmed for the hydrogel with this composition.Based on the optimized formulation, HAp was incorporated at different concentrations, which didn’t disturb the formation or the structural stability of the hydrogels, but improved the viscoelastic properties. The composite sponges, elaborated by lyophilization of these hydrogels, showed that the HAp particles homogeneously dispersed within the macroporous structure of the sponge. These encouraging results showed the feasibility of providing an injectable hydrogel or a composite sponge for BTE scaffold [...]

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Vignaux, Olivier. "Imagerie tissulaire myocardique par résonance magnétique nucléaire." Paris 5, 2002. http://www.theses.fr/2002PA05CD05.

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Abstract:

L'exploration par imagerie d'un patient ayant une pathologie cardiaque connue ou suspectée devrait inclure idéalement une étude globale du coeur associant morphologie et fonction ainsi qu'une caractérisation du tissu myocardique afin de rechercher son éventuel remplacement par une cicatrice, des substances ou des tissus anormaux, évaluer sa perfusion, et en cas d'ischémie déterminer sa viabilité. La caractérisation tissulaire repose sur le fait que certains phénomènes tissulaires (fibrose, inflammation, œdème, dépôts lipidiques) induisent une modification des temps de relaxation en Imagerie par Résonance Magnétique (IRM) et donc de l'intensité du signal du tissu myocardique. L'IRM permet également l'étude tridimensionnelle des anomalies globales ou segmentaires de la contractilité, conséquences possibles de ces phénomènes tissulaires, ainsi que l'étude de la perfusion myocardique et de la viabilité myocardique grâce à l'utilisation de produits de contraste spécifiques (complexes de gadolinium). L'objectif de ce travail a été de démontrer les possibilités de caractérisation tissulaire et d'analyse fonctionnelle de l'IRM pour l'exploration non-invasive du myocarde. Ces propriétés d'imagerie tissulaire du myocarde ont été appliquées à l'ischémie myocardique et à certaines myocardiopathies spécifiques
Magnetic Resonance Imaging of myocardical tissue. In patients with known or suspected cardiac desease, an "all-in-one" cardiac imaging modality should theoretically include morphological and functional analysis of the heart, but also information on myocardical tissue in order to detect its infiltration by abnormal tissues or substances and to study its perfusion and viability in ischemic disease. The specific magnetic properties with changes of relaxations times (and thereby increased or decreased signal intensities) induced by some tissues such as fatty infiltration, fibrosis, edema or inflammation allow a characterization of the myocardical tissue. Magnetic Resonance (MR) imaging also offers the potential for a complete functional study of the myocardium including contractility as well as perfusion and viability using cotrasts agents (Gadolinium-DTPA). The aim of this work was to demonstrate the ability of MR imaging to non-invasively characterize myocardical tissue and to assess its function. MR capacities of imaging the myocardical tissue have been applied to myocardical ischemia and to some specific cardiomyopathies

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Simon, Etienne. "Etude des possibilités d'extension tissulaire sous l'effet d'une traction uni-axiale et applications cliniques." Nancy 1, 2005. http://www.theses.fr/2005NAN11311.

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Abstract:

L'extension tissulaire, basée sur l'aptitude qu'a la peau de se laisser distendre lorsqu'on lui applique une force de traction, est une propriété essentielle à la vie. Si l'extension pluri-axiale est bien connue en chirurgie, sa forme uni-axiale, après de nombreuses controverses notamment sous forme de pré-suture, semble intéressante lorsqu'on l'applique sous forme progressive. Après étude de la tolérance de la peau à subir une traction d'intensité croissante, force est de constater qu'une contrainte d'intensité modérée permet, par répétition des phénomènes de contrainte et de relaxation, d'obtenir un gain cutané non négligeable. L'expérience clinique confirme cette étude lorsqu'il s'agit de redistribuer les tissus mais également lorsqu'une croissance tissulaire doit être obtenue. Ce procédé, bien que fort utile dans notre série au niveau des membres et du tronc, reste discutable au niveau du visage où les techniques classiques et microchirurgicales doivent rester la règle.

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Mechiche, Houria Nadia. "Contribution à l'étude de l'expression de facteur tissulaire par les cellules présentatrices d'antigènes : identification d'une expression de facteur tissulaire par une sous population lymphocytaire B et au cours de syndromes lymphoprolifératifs." Reims, 2002. http://www.theses.fr/2002REIMM208.

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Abstract:

Le facteur tissulaire (FT) est un récepteur des cytokines de type II exprimé par de nombreuses cellules. Initiateur de la coagulation sanguine avec son ligand principal le facteur VII(a), le FT est un véritable récepteur, impliqué dans de nombreux processus tels que l'adhésion et la migration cellulaire, l'embryogénèse, l'angiogénèse, la transduction de signal. Nos résultats montrent qu'une sous-population de lymphocytes B CD19+ CD40+CD38+ CD23- CD5- est capable d'exprimer le FT en réponse au PMA. Le FT est fonctionnel puisqu'il possède une activité procoagulante. Dans la seconde partie du travail, nous avons recherché une expression de FT au niveau de lignées cellulaires et au cours de syndromes lymphoprolifératifs chroniques. La lignée Jurkat (T) exprime le FT, ce qui conforte les données de la littérature. Une lignée lymphocytaire B transformée par l'EBV (B-EBV) n'exprime pas le FT. Au cours de la LLC, on observe une expression de FT par les lymphocytes monoclonaux bien que leur phénotype soit différent de celui de la sous-population lymphocytaire B normale, exprimant le FT en réponse au PMA
Identification of tissue factor expression by subpopulation of B lymphocytes and during lymphoproliferative disorders. Tissue factor is cytokine type II receptor expressed by many cells. TF is thecrucial trigger of coagulation via its ligation to Factor VII(a). TF is to be considered as a true receptor involved in many processes such as cell migration , embryogenesis, signal transduction. Ours results show that a subpopulation of lymphocytes CD19+CD40+CD38+CD23-CD5- can express TF in response to PMA. TF is functional as shown by its procoagulante activity. In the second part of this work, we have identified a TF expression in cell lines and proliferative disorders. T cell line Jurkat can express TF as suggested by previous publications. On contrary EBV-immortalized B cell line cannot express TF. In chronic lymphocytic leukaemia (CLL), monoclonal lymphocytes do express TF

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Mbika-Binzangi, Jean-Pierre. "Etude du rôle de la sarcolectine dans le développement tissulaire et le système immunitaire." Paris 5, 2006. http://www.theses.fr/2006PA05S008.

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Abstract:

La sarcolectine (SCL) a été isolée pour la première fois en 1968. C’est une protéine de 55 kDa composée de 469 acides aminés. Elle fut d’abord appelée TAI (Tissue Antagonist of Interferon) parce qu’elle lève l’activité antivirale établie de l’interféron. La sarcolectine se trouve en quantité anormalement élevée dans beaucoup des tumeurs et outre l’inhibition de l’activité antivirale établie de l’interféron, elle se fixe sur de nombreux sucres et maintient en culture des lignées cellulaires dans un milieu exempt de sérum de veau fœtal. La sarcolectine est donc un facteur de croissance qui active l’ADN cellulaire et induit la prolifération cellulaire. Dans ce travail, nous avons exploré le rôle qu’elle peut jouer dans le système immunitaire humain. Le traitement de 30 échantillons de cellules mononucléaires de sang périphérique avec la SCL montre que certains répondent faiblement et d’ autres fortement. Le pic d’activation qui survient entre 6 et 7 jours de culture de ces cellules nécessite la présence des monocytes/macrophages car en leur absence les lymphocytes T ne prolifèrent pas. La SCL augmente aussi l’expression membranaire du récepteur de l’IL-2 (CD25), du récepteur CD28 de co-stimulation des lymphocytes T4, et active les lymphocytes T4 mémoires de phénotype CD3+CD4+CD45RO+. Cette activation du récepteur CD25 de l’IL-2 ne s’accompagne pas de la sécrétion de l’IL-2 dans le milieu de culture. Le traitement des cellules mononucléaires du sang périphérique avec la SCL et les anticorps anti-CD3 et anti-CD28 montre une inhibition totale ou partielle de prolifération des lymphocytes T. Nous avons aussi constaté que la SCL est un bon inducteur des cytokines pro et anti-inflammatoires. Elle induit aussi l’augmentation des ARNm qui codent pour l’IFN- et l’IFN-, ainsi que la sécrétion de ces cytokines dans le milieu de culture des cellules mononucléaires de sang périphérique. Cette production des IFN dans le milieu de culture est précoce quand les cellules sont activées en présence de l’IL-2 exogène. ’autre part, nous avons aussi établi que la SCL active les récepteurs de la réponse immunitaire innée présents à la surface membranaire des cellules du système immunitaire, plus spécialement les récepteurs de type Toll ou TLRs et en l’occurrence TLR-3 et TLR-9. TLR-3 reconnaît les dsRNA viraux, tandis que TLR-9 reconnaît les motifs CpG non méthylés des ADN bactériens et viraux. Le traitement prolongé des cellules mononucléaires de sang périphérique montre également la sécrétion de novo de la SCL qui agit en feed-back contre l’interféron produit dans le milieu de culture, formant une boucle d’activation/inhibition du système immunitaire. En résumé, la SCL peut être considérée comme un immunomodulateur qui stimule les cellules immunitaires, active les TLRs 3 et 9 et produit des cytokines pro et anti-inflammatoires
Sarcolectin (SOL) is a 55 kDa protein with 469 aminoacids, isolated in the first time in 1968. Abnormally elevated in most tumors, SCL is a cell growth factor which activates cell DNA, induces cell proliferation, and antagonises antiviral effect of interferon. In this issue, we explored the SCL effects on the human immune system. The SCL treatment cf 30 peripheral blood mononuclear samples (PBMC) showed two types of celI stimulation: a low and a hight one. This cell stimulation picked up after 6 or 7 days of culture in the presence of monocytes/macrophages, because in the absence of these cells, no effect was observed. The SCL-stimulated PBMC exhibited CD3+CD4+CD45RO+ memory T4 lymphocytes proliferation with CD25 and CD28 celI surface receptor over-expression, and with pro and anti-inflammatory cytokines including IFN-α/β and TLR-3 and TLR-9 mRNA over-expression. TLR-3 recognises viral double-stranded RNA and TLR-9 senses un-methylated CpG DNA

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Dubus, Marie. "S2RM - Nouvelles matrices pour la régénération tissulaire." Thesis, Reims, 2018. http://www.theses.fr/2018REIMM201/document.

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Abstract:

La perte de l’organe dentaire entraine une perte de substance de l’os alvéolaire. Les techniques mises en place pour reconstruire l’os alvéolaire préalablement à la pose d’implant utilisent des membranes (seules ou associées à une greffe osseuse), faisant d’une part office de barrière vis-à-vis des tissus mous environnants, et permettant d’autre part le maintien d’un espace nécessaire à l’ostéogénèse. Ce travail de thèse pluridisciplinaire vise à développer des matrices innovantes destinées à la régénération osseuse. Inspirés par la nature hybride du tissu osseux, des revêtements à base de phosphates de calcium et de polymères organiques (chitosane et acide hyaluronique) ont été élaborés par pulvérisation simultanée de solutions d’espèces réactives. La construction de ces revêtements a permis la précipitation d’un composé à base d’apatite carbonatée et de brushite sur des lamelles de verre (preuve de concept), tandis qu’un composé hybride complexe (brushite, phosphate octocalcique et apatite nanocristalline) a été construit sur des membranes de collagène d’origine porcine, utilisées en régénération osseuse. Sur le verre, les revêtements semblent posséder les propriétés intrinsèques (rugosité, élasticité) en faveur d’une différenciation ostéoblastique, ce qui a été confirmé par une différenciation ostéoblastique précoce des cellules souches. Sur la membrane, le revêtement n’induit pas de différenciation mais stimule les propriétés ostéo-immunomodulatrices des cellules souches, nécessaires à la régénération osseuse. De plus, le revêtement a démontré dans les deux cas une activité antibactérienne, le rendant très attractif pour des applications en régénération osseuse. Enfin, le développement d’un dispositif médical de classe II à partir de la gelée de Wharton a été envisagé. Cette source allogénique semble prometteuse en médecine régénératrice osseuse
Bone loss following tooth extraction requires pre-implantory surgery techniques to regenerate bone. These techniques use an occlusive membrane positioned over a bone graft material or not, providing space maintenance and enabling to seclude soft tissue infiltration to promote bone regeneration. This pluridisciplinary thesis work aims at developing innovative biomaterials for bone regeneration applications. Inspired by bone hybrid composition, coatings made of calcium phosphates and organic polymers (chitosan and hyaluronic acid) were developed using simultaneous spray coating of interacting species process. Coating build-up led to precipitation of a compound made of carbonated apatite and brushite on glass coverslip (proof of concept), whereas a complex hybrid compound (brushite, octacalcium phosphate and nanocrystalline apatite) was formed on collagen membrane. Coating on glass coverslip seems to possess required properties (roughness, elasticity) for osteoblastic differentiation, which was confirmed by stem cells early osteoblast commitment. However, coating on collagen membrane did not induce osteoblastic differentiation, but stimulated stem cells osteo-immunomodulatory properties, required for bone regeneration. Interestingly, coating demonstrated in both cases antibacterial activities, which makes it very attractive for bone regeneration applications. Finally, Wharton’s jelly from umbilical cord was suggested as an innovative source for new biomaterials, to replace xenogeneic membranes

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Foucré, Dominique. "Contribution a l'etude des activateurs du plasminogene de type tissulaire et de type urokinase et de leurs inhibiteurs specifiques dans le cancer du sein." Paris 5, 1991. http://www.theses.fr/1991PA05S005.

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Abstract:

Au cours du processus metastatique, la migration de la cellule tumorale necessite plusieurs proteolyses tissulaires. Nous avons choisi d'etudier, dans le cancer du sein, 2 proteases, les activateurs du plasminogene de type tissulaire (tpa) et de type urokinase (upa) ainsi que leurs inhibiteurs specifiques pai-1 et pai-2. De plus, nous avons compare les 2 pa a une autre protease, la cathepsine d (cath. D). Les dosages immuno-enzymatiques des concentrations de tpa et d'upa et les deux pai ont ete effectues dans les cytosols de 31 glandes mamaires normales, de 43 tumeurs du sein benignes et de 87 tumeurs du sein malignes. Les valeurs moyennes des concentrations et des activites enzymatiques dans ces 3 types tissulaires sont comparees statistiquement. Les variations des 3 proteases dans ces differents tissus montrant des differences quantitatives, de sens variables. Les concentrations d'upa, comme celles de cath. D, sont significativement plus elevees dans les tumeurs malignes que dans les tumeurs benignes. En revanche, les concentrations et activite tpa ne varient pas significativement. D'autre part, les concentrations d'upa dans les tissus tumoraux sont significativement plus elevees que dans les tissus normaux. Celles de tpa sont superieures, significativement dans les tissus benins et non significativement dans les tissus malins, alors que les activites sont significativement plus faibles. Pour la cath. D, seules les concentrations dosees dans les tumeurs malignes sont significativement plus elevees que celles des tissus normaux. Les inhibiteurs, pai-1 et pai-2, sont beaucoup plus concentres dans les tumeurs malignes que dans les tumeurs benignes. Par rapport aux tissus normaux, leurs concentrations sont moins elevees dans les tumeurs benignes alors qu'elles sont plus elevees dans les tumeurs malignes. Les 2 pa et leurs inhibiteurs sont localises, par immunohistochimie, dans les tissus normaux et tumoraux. Ils sont presents dans le cytoplasme des cellules epitheliales, sans difference tissulaire. Ils sont aussi presents dans l'endothelium vasculaire et dans le tissu conjonctif. La seule difference evidente entre les tumeurs benignes et les tumeurs malignes est observee pour le marquage fibroblastique de tpa et de l'upa qui est augmente dans les tumeurs malignes. Ces travaux montrent que les proteases ne varient pas toutes de la meme facon dans le processus tumoral. Ainsi ils suggerent un role privilegie de l'upa par rapport au tpa dans le processus metastatique. D'autre part, les pai semblent intervenir dans le processus tumoral selon un shema qui differe en fonction du type de tumeur. Par ailleurs, il se pourrait que les fibroblastes cooperent au processus metastatique.

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Ntayi, Carole. "Implication des metalloprotéinases matricielles-1 et -2 dans l'invasion du mélanome : régulation par le collagène de type I et les peptides d'élastine." Reims, 2003. http://www.theses.fr/2003REIMM204.

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Abstract:

L'objectif de notre travail a été d'étudier (i) l'implication des MMP-1 et MMP-2 dans le potentiel invasif de cellules de mélanome au sein d'une matrice tridimensionnelle de collagène de type I, et (ii) l'influence des peptides d'élastine dans ce processus. Nos résultats montrent que l'invasion in vitro d'une matrice tridimensionnelle de collagène de type I par des cellules de mélanome est corrélée à l'activation des MMP-1 et MMP-2, et à une diminution concomitante des TIMP-1 et TIMP-2. L'ajout de peptides d'élastine à la matrice collagénique a pour effet de potentialiser les capacités invasives de la lignée de mélanome la plus invasive, en augmentant préférentiellement l'activation de la MMP-2 via le récepteur de l'élastine
@In this study, we investigated the role of MMP-1 and MMP-2 in melanoma cells invasion through a three-dimensional type I collagen matrix, and regulation by elastin peptides in vitro. We showed that melanoma cells invasion through a three-dimensional type I collagen matrix was correlated with MMP-1 and MMP-2 activation, and a concomitant decrease of TIMP-1 and TIMP-2. Adding elastin-derived peptides to the collagen matrix, enhanced invasive potential of the highly metastatic melanoma cells via elastin binding protein by up-regulating MMP-2 activation

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Andréoletti, Olivier. "Pathogenèse de la tremblante des ovins : effet du génotype PRP sur la dissémination tissulaire de la PrPsc, la contamination placentaire et les modalités de transmission périnatale." Paris 11, 2006. http://www.theses.fr/2006PA114846.

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Abstract:

Dans ce travail, nous avons développé et validé des techniques immunoistochimiques de détection de la PrPsc et d'antigènes cellulaires permaettant une cyto-localisation précise de la protéine rpion anormale chez les ovins. Ces outils et un modèle naturel ovin d'infection ont été utilisés afin d'établir le schéma de dissémination de la PrPsc dans l'organisme et les relais cellulaires mis en jeu, entre la contamination initiale et le déclenchement des signes cliniques. L'effet du polymorphisme monoallélique A136/V136 sur la pathogénie de la maladie naturelle a été établi. Nous avons également étudié le phénomène de contamination périnatale des ovins afin de confirmer ou d'infirmer la possibilité d'une contamination verticale, et de préciser le rôle du placenta dans la dissémination de l'agent infectieux. Parallèlement nous nous sommes intéressés, dans différents modèles murins et naturels d'ESTs, aux relations entre la neuro-invasion et la suvenue d'un stress oxydatif cérébral.

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Arbesu, Y. Miar Anais. "Cellule interstitielle de valve et sténose aortique : impact de la voie du facteur tissulaire." Thesis, Lille 2, 2015. http://www.theses.fr/2015LIL2S062/document.

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Abstract:

Définie comme étant le rétrécissement de la valve, la sténose aortique (SA) est la 3ème pathologie cardiovasculaire dans les pays industrialisés. Touchant essentiellement les personnes âgées de plus de 65 ans, cette pathologie représente un véritable problème de santé publique compte tenu du vieillissement de la population. Considérée initialement comme issue d’un processus passif de dégénérescence, il est désormais établi que la sténose aortique est une pathologie dite « atherosclerosis-like » caractérisée par les processus d’inflammation, de fibrose, de néo-angiogenèse et de calcification. Certaines protéines de la voie de coagulation tel que le facteur tissulaire (FT) sont connues pour avoir un rôle pro-fibrotique et participent activement au développement des lésions athéroscléreuses. Leurs rôles dans la SA semblent donc probables et restent à être identifiés.Composante cellulaire majeure de la valve aortique, les VICs présentent 5 sous-populations distinctes : les cellules progénitrices embryonnaires (EPCs), les cellules progénitrices (pVICs), quiescentes (qVICs), activées (aVICs) et ostéoblastiques (obVICs). Au cours de la valvulogenèse, les EPCs permettent la cellularisation de la valve en se différenciant en qVIC. Celles-ci maintiennent l’homéostasie valvulaire et, en cas de lésion, s’activent (aVICs) pour réparer efficacement le tissu valvulaire. L’inflammation valvulaire et l’activation des VICs initient la sécrétion de protéines pro-calcifiantes induisant la différenciation des aVICs en obVICs. Enfin, les pVICs, naturellement présentes au sein de la valve (appelées résidantes) ou issues de la circulation sanguine (appelées hématopoïétiques), semblent favoriser le renouvellement cellulaire et peuvent être impliquées dans les processus angiogénique et ostéoblastique.Bien que décrites, la validation de la culture primaire des VICs par le suivi de ces sous-populations n’avait pas été réalisé et à constituer notre premier objectif. Nous avons ensuite étudié l’implication des voies de signalisation du FT dans le développement de la SA.Dans le cadre du suivi longitudinal des VICs depuis les valves aortiques humaines contrôles et pathologiques jusqu’à la culture in vitro réalisée sur plastique et sur collagène, nous avons tout d’abord montré que les différentes sous-populations étaient présentes au sein de ces valves avec des localisations et des proportions différentes selon l’état physiopathologique du tissu. Après digestion enzymatique de la valve, elles sont toutes retrouvées mais lors de la mise en culture, les pVICs hématopoïétiques ont disparu, quel que soit le support. Nous avons ainsi validé le modèle de culture primaire des VICs tout en mettant en lumière ses limites : absence des pVICs hématopoïétique, activation et différenciation ostéoblastique spontanée des VICs au cours de la culture.Dans le cadre de l’’étude de l’implication du FT dans le développement de la SA, nous avons montré sa colocalisation avec la thrombine et les calcifications de valves pathologiques. A partir de la culture primaire de VICs issues de valves humaines contrôles et pathologiques, nous avons montré que l’expression et l’activité du FT étaient constitutivement plus importantes pour les VICs pathologiques et que son expression pouvait être induite par l’IL1β. De plus, l’activation du FT, en présence de son ligand le facteur VII, induit, directement et via le récepteur PAR2, différentes voies de signalisation impliquées dans la prolifération cellulaire et les processus de fibrose et de calcification. Cette étude suggère ainsi que le FT produit par les VICs est un médiateur clef dans le développement de la sténose aortique
Defined as the narrowing of the aortic valve, aortic stenosis (AS) is the third cardiovascular pathology in industrialized countries. Affecting mainly people aged over 65 years, AS represents a major public health problem because of the aging of the population. After initially been considered as a passive degenerative process, it is now established that AS is an "atherosclerosis-like " disease characterized by the processes of inflammation, fibrosis, neo-angiogenesis and calcification. Some proteins of the coagulation pathway such as tissue factor (TF) are known to have a pro-fibrotic role and actively participate in the development of atherosclerotic lesions. Their implication in AS seems, therefore, probable and remain to be identified.Prevalent cellular component of the aortic valve, VICs have five distinct subpopulations: embryonic progenitor cells (EPCs), progenitor cells (pVICs) quiescent (qVICs), activated (aVICs) and osteoblastic (obVICs). During the valvulogenesis, EPCs allow the cellularization of the valve, differentiating into qVICs. These cells maintain the valvular homeostasis and, in case of damage, are activated (aVICs) to effectively repair the valve tissue. The valvular inflammation and VICs activation initiate the secretion of pro-calcifying proteins inducing the differentiation of aVICs into obVICs. Finally, pVICs, naturally present within the valve (called resident) or from the blood circulation (called hematopoietic), seem to promote cell renewal and may be involved in the angiogenic and osteoblastic processes.Although described, these subpopulations have never been studied longitudinally, in respect to their behavior in vitro. Our first objective was to perform this investigation. Our second objective was to study the potential role of TF pathway in the deleterious mechanisms of AS.As part of the longitudinal follow-up of VICs from control and pathological human aortic valves to the in vitro culture performed on plastic and collagen, we first showed that different subpopulations were present in these valves with different locations and proportions according to the pathophysiological state of the tissue. After enzymatic digestion, all subpopulations are found but, in culture, hematopoietic pVICs disappeared, whichever the support. Thus, we validated the primary culture model of VICs while highlighting its limitations: lack of hematopoietic pVICs, spontaneous osteoblastic differentiation and activation of VICs in culture.As part of the study the involvement of FT in the AS development, we showed its colocalization with thrombin and calcifications of pathological valves. We showed that the expression and activity of TF were constitutively more important in VICs from fibrocalcified valves than control ones and that IL-1β for pathological VICs and that its expression could be induced by IL1 beta. In addition, TF activation in the by its ligand FVII, induced, directly and via the PAR-2 receptor, different signaling pathways involved in cell proliferation and the processes of fibrosis and calcification. Thus, our findings suggest that the FT expressed by VICs mediates fibrocalcific processes of aortic stenosis

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Chauvier, David. "Camptothécine versus homocamptothécine : approche moleculaire et cellulaire. Induction de l'apoptose et modulation de la résistance multiple." Reims, 2001. http://www.theses.fr/2001REIMP206.

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Abstract:

La spectrofluorimètrie a permis de suivre l'hydrolyse de l'homocamptothécine (hCPT), en absence et présence de topoisomérase I (top1) et/ou ADN. La stabilisation du complexe de clivage par hCPT impliquerait un système de complémentarité stérique de son cycle E avec un site du complexe ADN-top1, plutôt qu'une réaction d'ouverture du cycle E comme pour les camptothécines (CPTs). HCPT/CPT ont été détectées dans le cytoplasme des cellules MCF7 et HT29 par microspectrofluorimètrie confocale laser en excitation bi-photonique. L'induction de l'apoptose par hCPT dans les cellules HT29 implique la dissipation du Djm, acidification du cytosol, production d'espèces réactives de l'oxygène, libération du cytochrome C, activation de la caspase-3, régulation transcriptionelle, une production de novo de céramide. Enfin, hCPT/CPT sont des substrats de MRP1 mais pas de Pgp. Utilisées à des concentrations sub-toxiques en association avec la daunorubicine (DNR), hCPT/CPT potentialisent la cytotoxicité de la DNR en inhibant l'activité d'efflux de MRP1, restaurant l'accumulation nucléaire de DNR dans des lignées K562 et MCF7 résistantes aux anthracyclines
Homocamptothecin (hCPT), a topoisomerase I (top1) inhibitor, combines higher cytotoxicity and lactone stability in aqueous buffer than camptothecin (hCPT). Spectrofluorometry has allowed the real-time investigation of its hydrolysis kinetic in absence and presence of top1 and/or ADN. The stabilisation of the cleavable complex by hCPT implies steric contacts of the b-hydroxylactone ring with the DNA-top1 complex, rather than opening of the lactone ring, as observed for CPTs. HCPT/CPT have been detected in the cytoplasm of MCF7 and HT29 cancer cells by 2-photon laser confocal microspectrofluorometry,. The induction of apoptosis by hCPT is mediated in HT29 cells by DYm disruption, cytosolic acidification, reactive oxygen species, cytochrome C release, caspase-3 activation, gene expression, de novo synthesis of ceramide. HCPT/CPT have been identified to be substrates of MRP1 but not Pgp proteins. Sub-toxic doses of hCPT/CPT potentiated daunorubicin (DNR) cytotoxicity by inhibition of MRP1 activity, in correlation with increase of the nuclear accumulation of DNR in anthracyclins-resistant K562 and MCF7 cells

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Cabon, Philippe. "Maintien de la vigilance et gestion du sommeil dans les systemes automatises : recherche de laboratoire applications aux transports ferroviaires et aeriens." Paris 5, 1992. http://www.theses.fr/1992PA05S022.

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Abstract:

Ce travail a pour objectif d'ameliorer la fiabilite des systemes homme-machine par des methodes de maintien de la vigilance et par une gestion optimisee du sommeil. La premiere partie du travail porte sur une recherche de laboratoire ayant pour objet d'evaluer une methode de maintien de la vigilance au cours d'une tache de surveillance monotone. Elle repose sur l'introduction de modifications du contenu de la tache pendant de courtes periodes. Le jour, ces ruptures de monotonie permettent un maintien de la performance se caracterisant par un nombre d'omissions constant. La nuit, malgre les interruptions de monotonie, la degradation des performances est sensible en raison des diminutions importantes du niveau d'eveil des sujets. Dans la seconde partie de cette recherche, deux applications aux transports ferroviaires et aeriens sont presentees. Ces travaux, realises en situations reelles, ont pour objectifs d'etudier les facteurs diminuant le niveau d'eveil des operateurs, ainsi que l'impact des horaires de travail sur la duree et la qualite du sommeil. La methode repose sur le recueil de l'eeg et de l'eog pour l'evaluation du niveau d'eveil et de l'activite motrice pour l'etude des durees de sommeil. Pour les agents de conduite de train, les resultats montrent que les episodes d'hypovigilance surviennent frequemment, associes a des phases monotones de conduite. Des privations importantes de sommeil atteignant 50 % de la duree normale ont ete observees au cours des repos tant au domicile qu'hors du domicile. Avec les pilotes d'avions, les evaluations ont essentiellement porte sur des vols long-courriers de durees egales et superieures a 8 heures. Les veilles prolongees en croisiere entrainent un nombre important de periodes d'hypovigilance. Ces episodes surviennent plus frequemment au cours de vols en equipage a deux, parfoirs simultanement pour les deux pilotes dans des phases monotones de vol et a des plages horaires particulieres du nyethemere : debut d'apres-midi et milieu de la nuit. Des recommandations visant a reduire le nombre de baisses de vigilance et a ameliorer la gestion du sommeil dans les situations automatisees sont envisagees a la lumiere des resultats de nos travaux.

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Toussaint, Jean-François. "Rôle de la résonance magnétique nucléaire dans la caractérisation tissulaire de l'athérosclérose et l'évaluation de la rupture de plaque." Paris 5, 1995. http://www.theses.fr/1995PA05CD12.

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Abstract:

L'athérosclérose reste en 1995 la première cause de mortalité des pays développés. Cependant rien ne nous permet actuellement de prédire le potentiel évolutif des plaques qui en constituent le substratum histopathologique. Les arguments morphométriques issus des techniques angiographiques n'y suffisent pas : une imagerie descriptive de la composition biochimique est désormais indispensable car elle seule permet de comprendre les mécanismes déterminant la rupture de plaque, première étape de l'ischémie artérielle conduisant à l'infarctus. Dans ce but nous avons utilisé la Résonance Magnétique, récente technique d'analyse et d'imagerie biochimique, pour réaliser une caractérisation tissulaire non-invasive des lésions athéromateuses. Utilisant la spectroscopie RMN du carbone 13, celle du proton, l'imagerie de diffusion, l'imagerie en contraste T1, en densité de spin, et plus encore en contraste T2, nous avons démontré que la Résonance Magnétique permet de suivre la progression des lésions en analysant leur contenu en acides gras et esters de cholestérol, mais surtout qu'elle permet d'étudier la stabilité des plaques en discriminant les régions lipidiques molles (athéroma) des structures fibreuses (sclérose). Nous avons ensuite prouvé que cette distinction pouvant également se faire in vivo, ouvrant la voie à de très nombreuses possibilités d'études de progression, de régression, et de stabilisation de cette redoutable maladie
In 1995 atherosclerosis still remains the first cause of mortality ans morbidity in developed countries. However, we cannot yet predict the evolution of its histopathological substratum, the atheromatous plaque, for the morphological parameters available from angiography do not provide this information. A biochemical imaging technology is now necessary to improve our understanding of the in vivo mechanisms of plaque rupture leading to arterial ischemia and infarction. With this goal we have used Magnetic Resonance to realize a non-invasive tissue characterization of atheromatous lesions. Using carbon-13 MR spectroscopy, proton spectroscopy, diffusion imaging, T1 contrast, psin density, and especially T2 contrast imaging, we have demonstrated that Magnetic Resonance allows to study atherosclerosis progression by analyzing fatty acid and cholesteryl ester content, and to investigate plaque stability by discriminating soft lipid regions (atheroma) from fibrous structures (sclerosis). We have also proven that MR can discriminate thesqe components in vivo, which provides a new and powerful way to study regression or stabilization of this dresdful disease

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Poitevin, Stéphane. "Activation des monocytes par le collagéne de type I : libération de cytokines de gélatinase B et d'urokinase. Implication de protéine kinases et de NF-kB." Reims, 2003. http://www.theses.fr/2003REIMM205.

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Abstract:

Les processus inflammatoires impliquent la transmigration des monocytes à travers l'endothélium jusqu'aux tissus conjonctifs composés majoritairement de collagène de type I. L'étude de l'interaction monocytes/collagène de type I montre une augmentation de la production d'ions O2- mesurée par la technique de réduction du NBT, de la sécrétion de TNF-a, d'IL-1b, d'IL-6 (ELISA), de gélatinase B et d'urokinase déterminée par zymographies. La sécrétion de ces 2 protéinases est stimulée de façon autocrine par le TNF-a et l'IL-1b. L'intégrine axb2, impliquée dans l'interaction monocytes/collagène, stimule une voie de signalisation p60Src/PI-3 kinase/p38 MAP Kinase mise en évidence par l'utilisation d'inhibiteurs et par immunoprécipitations et immunodétections. Enfin, l'utilisation d'inhibiteurs (PDTC, NAC, curcumin) et des expériences de retard sur gel montrent que NF-kB est activé et est responsable de l'expression de TNF-a, d'IL-1b, d'IL-6, de gélatinase B et d'urokinase
Inflammatory processes involve the transmigration of peripheral blood monocytes through the endothelium into connective tissue, which is mainly composed of type I collagen fibers. Our results show an activation of monocytes during interaction with type I collagen: O2- production measured by NBT and cytochrome c reduction is enhanced, cytokines secretion (TNF-a, IL-1b, IL-6), gelatinase B and urokinase production are upregulated. TNF-a and IL-1b stimulate gelatinase B and urokinase production by an autocrine mechanism as determined by neutralizing antibodies. Monocytes interact with type I collagen through axb2 integrin which activate a signalling pathway involving p60Src, PI-3 kinase and p38 MAP Kinase as determined by specific inhibitors, immunoprecipitation and western-blot. Finally, NF-kB inhibitors (PDTC, curcumin, NAC) incubations and gel shift experiments demonstrate NF-kB activation which participate to TNF-a, IL-1b, IL-6, gelatinase B and urokinase expression

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Madaoui, Hocine. "Prédiction structurale et ingenierie des assemblages macromoléculaires par bioinformatique." Paris 7, 2007. https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00553875.

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Abstract:

La caracterisation a haut debit des interactions proteines-proteines a permis d'etablir les premieres cartes d'interactions de differents organismes modeles, y compris l'homme. Cependant, la caracterisation structurale des assemblages proteiques reste limitee a un nombre tres faible de ces interactions. En mettant en evidence une pression de selection evolutive specifique aux interfaces de complexes proteiques, ce travail a permis d'elucider certains mecanismes evolutifs essentiels a l'association entre proteines qui n'avaient pas ete decrits jusqu'a present. Sur cette base, une nouvelle approche bioinformatique, nommee scotch (surface complementarity trace in complex history), a ete developpee pour predire la structure des assemblages macromoleculaires. Couplee a un programme d'amarrage moleculaire, tel que scotcher, egalement developpe au cours de cette these, cette approche a permis de predire efficacement la structure d'un grand nombre de complexes. Ce travail de these s'est egalement concentre sur l'inhibition des interactions proteiques par des mini-proteines, conÇues de faÇon rationnelle sur la base des structures de complexes. Les resultats obtenus pour deux exemples, celui du complexe asf1 - histone h3/h4 et du complexe gp120 - cd4 temoignent du fort potentiel du design rationnel d'interfaces de complexes pour le developpement de nouvelles strategies therapeutiques
The high-throughput characterization of the protein-protein interactions networks laid the bases for the first interaction maps in all model organisms, including human. In contrast, the structures of the protein assembles are still restricted to a very limited set of interactions. In this work, a specific evolutionary pressure that is exerted at protein interfaces has been revealed. To our knowledge, no such effect had been previously described. Based on this finding, a novel bioinformatic approach, called scotch (surface complementarity trace in complex history) has been developed to predict the structures of protein assembles. Coupled to a docking program, such as scotcher also developed in this work, this approach was shown to predict efficiently the structures of many complexes. This work also focuses on the inhibition of protein interactions by synthetic peptides, rationally designed on the basis of the complex structure. The results obtained for two examples, the asf1 - histone h3/h4 and the gp120 - cd4 complexes emphasize the high interest of rational design of complex interface for the development of novel therapeutic strategies

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Bresson, Lucie. "Autologuous cell-ladened hydrogel sheet for prevention of post-surgical abdominal adhesion." Thesis, Lille 2, 2017. http://www.theses.fr/2017LIL2S033/document.

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Abstract:

Introduction :Les adhérences abdominales post-opératoires représentent les complications les plus fréquentes de la chirurgie abdominale et sont un enjeu de santé publique– douleurs abdominales chroniques, occlusions intestinales et infertilité féminine- et coût de prise en charge. Elles se développent après une mauvaise cicatrisation du péritoine –séreuse composée d’une monocouche de cellules mesothéliales. Leur prévention pourrait passer par des techniques de thérapie cellulaire ou tissulaire, visant à fabriquer un « néo »peritoine alliant des cellules du patient à une « scaffold » ou « échaffaudage ». Les cellules mesothéliales, différenciées, fonctionnelles sont indispensables, mais en nombre limité, potentiellement malades et leur prélèvement invasif. Elles pourraient être remplacées par des cellules souches adipocytaires qui ont un potentiel de différenciation. D’autre part, les polymères d’hydrogels comme biomatériau pour notre substitut sont attractifs par leur tolérance et leurs propriétés de ressemblance à la matrice extra cellulaire native.Les étapes majeures de notre projet de médecine régénérative sont de comparer la thérapie cellulaire à la thérapie tissulaire utilisant une « scaffold », de comparer les deux cellules sources potentielles, d’étudier les qualités de l’hydrogel BD-Purastat® et enfin de transplanter notre substitut cellularisé dans un modèle préétabli d'adhérences chez le rat.Matériel et méthode :La première étape validait le modèle animal d’adhérences post opératoires comparant plusieurs dommages péritonéaux. Puis les cellules étaient comparées en terme d'isolement, de culture, de caractérisation et de différenciation. Une étude de preuve de concept était réalisée afin de comparer les techniques de thérapie cellulaire aux techniques de thérapie tissulaire avec la greffe de péritoine lui-même. Ensuite, BD-Purastat® était testé grâce à une collaboration avec le laboratoire 3D Matrix. Enfin l’implantation in vivo d’une plaque d’hydrogel chargée de cellules autologues était évaluée sur le modèle de rat mis au point.Résultats :Deux modèles d'adhérences post-opératoires étaient validés chez le rat. Les deux techniques étaient efficaces et pertinentes pour l'application clinique. Les cellules mésothéliales présentaient un aspect typique polygonal avec des bords brillants et exprimaient les marqueurs intra-cellulaires de la vimentine et des cytokeratines. Elles présentaient une sénescence précoce comme attendu pour des cellules adultes bien différenciées. Les cellules souches adipocytaires étaient allongées et fines, stellaires, avec une bonne capacité d'expansion, se différenciaient en ostéocytes et en adipocyte et formaient des colonies comme attendu pour des cellules souches. L'étude de preuve de concept a permis de montrer que les cellules mésothéliales contribuaient à la repéritonéalisation seulement si elles étaient bien orientées et transplantées au sein d’un tissu. Ainsi, l’ajout d'une « scaffold » était crucial. Concernant le choix des biomatériaux, BD-Purastat® présentait de bonnes propriétés mécaniques, de biocompatibilité et implanté seul permettait déjà une réduction des adhérences postopératoires. L'implantation du substitut cellularisé n'avait pas permis d’améliorer les résultats obtenus avec le gel seul.Conclusion et perspectives :Notre étude permettait de montrer que des cellules mésothéliales au sein d'une « scaffold » étaient la clé du succès de la repéritonéalisation pour la prévention des adhérences postopératoires en charge abdominale. La différenciation des cellules souches adipocytaires vers le phénotype mésothélial avait encore besoin d'être prouvée. BD-Purastat® diminuait l’étendue des adhérence postopératoires. Le comportement des cellules dans cette « scaffold » nécessitait d'être étudié pour pouvoir obtenir l'efficacité clinique du substitut péritonéal de cellules autologues et d'hydrogel
Introduction: Postoperative abdominal adhesions are a major complication leading to medical and economical problems. Replace injured peritoneum, which is composed of a monolayer of mesothelial cells (MC), using cell-therapy or cell-laden scaffold are two promising strategies to prevent adhesions. MC as functional and differentiated cells are crucial. However, adipose stem cells (ASCs) could replace MCs thanks to their potential of differentiation. Furthermore, hydrogel polymers are attractive scaffolds mimicking the properties of the native ECM. So, milestones of our project of regenerative medicine are comparison of cell-laden scaffolds and cell-therapy, choice of cell source and biomaterial, and finally transplantation of the cell-laden hydrogel scaffold, in a pre-established rat model of adhesion.Materiel and Method: Firstly, models of adhesion were compared usingdifferent peritoneal injuries. Then, MCs and ASCs were compared for isolation, culture, characterization, and differentiation. Nextly, cell-therapy using MC intra peritoneal injection (IP) or cell-sheet technology was compared with tissue-therapy using peritoneal grafts through a proof of concept study. BD-Purastat® hydrogel was tested in collaboration with 3D Matrix firm. Cell-laden hydrogel gels were implanted and assessed on adhesion prevention.Results: Two animal models of adhesion were validated and both techniques were effective and clinically relevant. MCs and ASCs were isolated from respectively tunica vaginalis and subcutaneous inguinal fat pad. MCs, with typical cobble-stone morphology and bright edges, were positively stained for vimentin and cytokeratin. Senescence arrived after only three passages for these adult well-differentiated cells. Spindle-shaped ASCs had a good capacity of expansion, were able to differentiate in osteocytes and adipocytes, and to form colonies as expected for stem cells. Autologuous peritoneal grafts prevented postoperative abdominal adhesions in the rat model. As the mechanism of this prevention, the MC survived and contributed to reperitonealization, only when they were transplanted as a part of the autologous peritoneal grafts and were located on the surface exposed to the abdomen. Cell sheet technology and MCs IP injection failed in the adhesion prevention. BD-Purastat® presented good mechanical properties and biocompatibility. Alone, it reduced significantly adhesion extent. But, cell encapsulation into BD-Purastat® did not improve this prevention.Conclusion and perspectives: Our study supported that MCs and scaffold are both needed to succeed in peritoneum’s engineering to prevent adhesion. ASCs differentiation into MCs phenotype has still to be shown. BD- Purastat® decreases adhesion extent and behavior of the cell into this scaffold needs to be studied to improve the effectiveness of the cell-laden hydrogel application

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Li, Li. "Evaluation d’un effet anti-apoptotique du fibroblaste gingival et étude des mécanismes impliqués : contribution au développement d’une thérapie cellulaire de l’anévrisme de l’aorte abdominale." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T023.

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Abstract:

L’anévrisme de l’aorte abdominale est une pathologie vasculaire qui se caractérise par une dégradation de la matrice extracellulaire et s’accompagne d'une diminution du nombre de cellules musculaires lisses (CML). Les travaux précédents du laboratoire ont montré dans un modèle de culture d'artère ex vivo que le fibroblaste gingival (FG) inhibe la dégradation des fibres élastiques. Cet effet est lié à une stimulation par le fibroblaste gingival de la synthèse de TIMP-1 par les CML de la paroi aortique (Gogly, 2007). Dans le but de développer une thérapie cellulaire avec les FGs, il est donc important de savoir si FGs ont aussi un effet protecteur pour les cellules de la paroi artérielle. Nous avons d’abord montré que la présence de FG en co-culture avec des fragments d'aortes, conduit à une diminution du nombre de cellules en apoptose dans la paroi aortique. Le milieu conditionné par les FGs a un effet similaire. Pour étudier les mécanismes de cet effet anti-apoptotique, nous avons utilisé des cellules en monocouche (une lignée de fibroblaste humain Wi26 et des HUVEC). Les FGs inhibent l’activité des Caspases 3 et 9. L’inhibition de l’activité de la Caspase 9 a démontré que les FGs modulent la voie mitochondriale de l'apoptose. Ceci est confirmé par les études du potentiel membranaire mitochondrial (Δψm) et de la libération du cytochrome c. L'analyse de l'expression des protéines pro- (Bax) et anti-apoptotiques (Bcl-2, Bcl-xl, Hsp27) par Western blots a aussi montré une augmentation de l’expression de Bcl-2 et une inhibition de Bax. Nous avons également montré que la surexpression de Bcl-2 induite par le milieu conditionné par les FGs passe par la voie de signalisation FAK/Pi3K, et une induction de la phosphorylation de la MAP Kinase Erk1/2. Enfin, parmi les différents facteurs sécrétés par les FGs nous avons analysé les effets du TIMP-1 et du TGF-beta1 en utilisant des anticorps bloquants. Les résultats ont montré une inhibition de l'expression de Bcl-2 par l’anticorps anti-TIMP-1 et une inhibition de l'expression de Bcl-2 accompagné d’une diminution de la phosphorylation de Erk1/2 par l’anticorps anti-TGF-beta1. Le TIMP-1 et le TGF-beta1 contribuent donc, au moins en partie, aux effets antiapoptotiques des FGs. Ce travail de recherche nous permet d’avoir une meilleure compréhension des mécanismes d’inhibition du processus apoptotique par les FGs, et contribue au développement d’une nouvelle stratégie de thérapie cellulaire basée sur l'utilisation de fibroblastes gingivaux
The abdominal aortic aneurysm is a vascular disease characterized by a degradation of the extracellular matrix. It is accompanied by a decrease of smooth muscle cells (SMCs). Previous work performed in the laboratory showed that the gingival fibroblast (GF) inhibits the degradation of elastic fibers in an ex vivo artery culture model. This effect is linked to the stimulation of the synthesis of TIMP-1 by SMCs of the aortic wall by gingival fibroblast (Gogly, 2007). In order to contribute to the development of a cell therapy with GFs, it is important to know whether GFs also have a protective effect on the arterial wall cells. We first showed that the presence of GFs in co-culture with fragments of aorta, lead to a decrease of the number of apoptotic cells in the aortic wall. The treatment of aorta segments with GFs conditioned medium gave similar results. To study the mechanisms of this anti-apoptotic effect, we used cells in monolayer (a line of human fibroblast Wi26 and HUVEC). The GFs inhibit the activity of caspases 3 and 9. The inhibition of the caspase 9 activity showed that GFs modulate the mitochondrial pathway of apoptosis. This is confirmed by studies of mitochondrial membrane potential (Δψm) and the release of cytochrome c. The analysis of pro- (Bax) and anti-apoptotic (Bcl-2, Bcl-xl, Hsp27) protein expression also showed an increase of the expression of Bcl-2 and an inhibition of Bax. Next, we showed that overexpression of Bcl-2 by the GFs conditioned medium go through the FAK/Pi3K signaling pathway and the induction of phosphorylation of MAP kinase Erk1 / 2. Finally, among the various factors secreted by the GFs, we analysed the effects of TIMP-1 and TGF-beta1 using blocking antibodies. The results showed an inhibition of the expression of Bcl-2 by anti-TIMP-1 and an inhibition of the expression of Bcl-2 accompanied by a decrease of the phosphorylation of Erk1 / 2 by the antibody anti-TGF-beta1. Therefore the TIMP-1 and the TGF-beta1 contribute, at least partially, to the anti-apoptotic effects of GFs. Thus, this research permits to have a better understanding of the mechanisms of these anti-apoptotic effects of GFs and contributes to the development of a new cell therapy strategy based on GFs

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Jantet-Keravel, Francine. "Influence de l'environnement graphique et colore sur la perception des formes : application a la lecture sur ecran couleur." Paris 5, 1991. http://www.theses.fr/1991PA05S007.

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Abstract:

Ce travail a pour objectif d'apporter une contribution a la conception des presentations d'information visuelle a partir de l'influence constatee de certains parametres physiques et psycho-physiologiques sur le reperage de formes alphabetiques isolees. Il apporte des donnees concretes sur les caracteristiques graphiques et colorees d'une image observee pour faciliter ce reperage. Afin d'approcher au mieux des conditions psycho-physiologiques des utilisateurs d'ecran de visualisation en milieu de travail, la population choisie est adulte et exerce une activite professionnelle bureautique. L'analyse objective du reperage visuel est realisee a partir de l'observation en temps reel des deplacements de la fovea retinienne lors d'une exploration en champ central, ceci grace a l'utilisation d'un ophtalmoscope a balayage par faisceau laser (scanning laser ophtalmology slo). Elle identifie la mise en jeu d'un systeme saccadique avec retro-controle de la premiere saccade et deux axes de deplacement privilegie : l'un vertical ascendant, l'autre horizontal gauche droit). Une approche subjective de l'utilisation de la couleur etudie les reponses orales d'identification de formes alphabetiques presentees sur un ecran de visualisation a tube cathodique, a l'aide d'un generateur electronique programmable de couleur et de luminance (gepco). Les fonds ambre, cyan et ceux impliquant la stimulation de plusieurs canaux de perception, facilitent le reperage des attributs saillants de l'image observee, a l'oppose des fonds bleu ou rouge. L'approche psycho-socilogique des sujets vis-a-vis des couleurs complete cette analyse et illustre notamment l'absence de relation entre les preferences colorees et l'efficience physiologique. Apres discussion des methodes et des resultats obtenus, ces constatations relatives au choix, a la localisation et a la couleur du fond de presentation d'un graphisme, peuvent contribuer a la meilleure connaissance des facteurs humains pour les recherches relatives a la signaletique et la fiabilite de prise d'information visuelle.

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Watbled, Ludivine. "Impact des dispositifs techniques sur l'activité de production, transmission de courriers de sortie d'hospitalisation." Thesis, Lille 2, 2018. http://www.theses.fr/2018LIL2S013/document.

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Abstract:

Dans notre société, les dispositifs techniques sont envisagés pour augmenter la qualité et la rapidité d'exécution des tâches. Le domaine de la santé n'y échappe pas. Les établissements de santé investissent beaucoup pour se doter de dispositifs techniques capables d'atteindre des objectifs de performance. Quand les Hautes Autorités de Santé (HAS) recommandent de diminuer les délais d'envoi du courrier de sortie, les hôpitaux numérisent l'activité de production et de transmission du courrier. Mais aucun n'a envisagé en amont de son introduction un quelconque effet négatif sur la réalisation du courrier avec par exemple, des délais augmentés. Or il est légitime de s'interroger sur les effets des dispositifs techniques pour l'activité de production-transmission du courrier de sortie. D'autant que ce courrier assure une fonction importante puisqu'il assure la continuité des soins et la sécurité du patient.Nous avons alors cherché à déterminer l'effet de dispositifs techniques sur le délai d'envoi du courrier. Pour répondre à cette question, nous avons étudié toute la situation de travail (les dispositifs techniques, les organisations et les acteurs, individuellement et dans leurs interactions) par une approche centrée facteurs humains, en partant du constat qu'il est difficile d'interpréter les résultats des études scientifiques mesurant l'effet de ces dispositifs sans la prise en compte et la connaissance des caractéristiques techniques, organisationnelles et des acteurs peu ou pas décrites dans les études.Pour répondre à notre question de recherche, nous avons identifié et décrit les caractéristiques techniques, organisationnelles et liées aux acteurs. Et nous avons analysé leurs effets sur l'indicateur de délais d'envoi du courrier. Dans notre démarche, nous avons tout d'abord envisagé d'utiliser l'indicateur IPAQSS que les hôpitaux publics français recueillent. Mais celui-ci a été écarté de notre recherche, ne le considérant pas comme valide et ne correspondant pas à la réalité. Nous avons choisi de mesurer des délais intermédiaires, à chaque étape du processus de production - transmission du courrier pour être au plus près de la réalité et répondre ainsi à notre question de recherche. Les analyses statistiques ont porté sur 440 courriers pris dans 7 services du CHRU de Lille.Les principaux résultats montrent qu'un dispositif technique numérique ne garantit pas systématiquement une diminution des délais de réalisation des tâches. Il est nécessaire de s'intéresser à ses caractéristiques techniques pour déterminer ces délais. De plus, les mesures de délais varient sous l'effet des variables contextuelles (organisationnelles et liées aux acteurs) et pas uniquement sous le seul effet d'un dispositif technique. Par ailleurs les résultats mettent en évidence que la connaissance de la situation de travail permet d'interpréter les mesures obtenues. Avec cette connaissance, il devient possible d'agir sur les caractéristiques techniques, organisationnelles ou liées aux acteurs pour atteindre les objectifs fixés par les hôpitaux et les institutions. Notre approche centrée facteurs humains permet ainsi de proposer une méthodologie pour accompagner les hôpitaux et les institutions en vérifiant si un dispositif technique peut atteindre l'objectif escompté, en contrôlant les variations de l'effet de ce dernier sous l'influence des déterminants identifiés
In today’s society, technical devices are expected to increase the quality and speed of task execution. The healthcare field is no exception. Healthcare establishments are investing heavily in technical devices capable of achieving certain performance objectives. When France’s High Commission for Healthcare (Haute Autorité de Santé) recommended that discharge letters should be sent out more rapidly, hospitals digitized the production and dispatching of this document. However, none of the hospitals planned ahead of time for potential negative effects of the digitization of discharge letter production (longer delays, for example). In fact, one can legitimately question whether technical devices improve discharge letter production. This matter is especially important because discharge letters ensure continuity of care and the patient’s safety.We therefore sought to determine the effect of technical devices on the speed of discharge letter production and dispatching. To address this question, we studied the work situation as a whole (i.e. technical devices, organizations, stakeholders, and their interactions) using a human factors approach. Our starting hypothesis was as follows: it is difficult to accurately interpret scientific studies of the effects of these devices without taking account of and understanding technical, organizational and stakeholder-related characteristics that are rarely described in the literature.To address the research question, we identified and described all the technical, organizational and stakeholder-related characteristics, and analyzed their effects on the speed of discharge letter production and dispatching. We first considered using the IPAQSS data that French public-sector hospitals have to collect. However, we had to exclude this variable from our research because it is not valid and does not adequately reflect reality. We therefore decided to measure the time intervals at each step in the letter production/dispatching process, in order to be as close as possible to the true situation and thus answer our research question. We performed statistical analyses on a total of 440 letters generated by seven departments at Lille University Medical Centre.Our main results showed that a digital device does not necessarily accelerate thesteps in discharge letter production; it is essential to focus on the device'stechnical characteristics when seeking to determine whether or not production isfaster.Moreover, the time intervals for the steps vary as a function of contextual variables (i.e. organizational and stakeholder-related factors) and not just under the influence of the technical device per se.Furthermore, our results showed that knowledge of the work context enables one to interpret the data obtained. This knowledge makes it possible to modify technical, organizational and stakeholder-related factors and achieve the objectives set by hospitals and institutions. Our human factors approach generated a methodology for helping hospitals and institutions to check whether a technical device can achieve the expected objectives, i.e. by monitoring the influence of the above-mentioned variables on the device’s effect

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Hafian, Hilal. "IMAGERIE CELLULAIRE ET TISSULAIRE DE BIO-MARQUEURS TUMORAUX : EXCITATION MULTI-PHOTONIQUE DE QUANTUM DOTS CONJUGUES AVEC DES ANTICORPS DE DOMAINE SIMPLE." Thesis, Reims, 2016. http://www.theses.fr/2016REIMP201.

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Abstract:

Les conjugués QD-sdAbs sont des nano-sondes qui associent un quantum dot (QD) et des anticorps de domaine simple (sdAbs). Ces nano-sondes fluorescentes permettent des immunomarquages sur coupes tissulaires et sur cellules. L’objectif de ce travail est de montrer l’intérêt de l’excitation multi-photonique pour la détection et la localisation très spécifiques de biomarqueurs tumoraux.L’excitation multi-photonique des nano-sondes QD570-sdAb anti-CEA a été étudiée, sur coupes d’appendice et de carcinome du côlon humains pour optimiser le rapport signal/auto-fluorescence. L’utilisation du QD comme capteur d’énergie d’excitation dans un modéle de FRET QD-fluorophore organique a été démontré. Un modéle innovant pour une détéction ultra spécifique du CEA sur cellules MC38 CEA par double immunomarquage spécifique pour un transfert d’énergie résonnant entre QD et Alexa Fluor à été mis en oeuvre.Les résutats montrent l’intérêt de l’excitation multi-photonique par rapport à l’excitation à 458,9 nm pour la discrimination et l’optimisation du rapport signal/auto-fluorescence. Il est 40 fois supérieur en excitation à 800 nm qu’à 458,9 nm sur les coupes étudiées.L’utilisation des conjugués QD556-sdAb anti-CEA et d’un anticorps monoclonal permet un double immunomarquage du CEA membranaire sur cellules MC38 CEA. L’utilisation du QD comme nano-capteur d’énergie d’excitation multi-photonique permet une séléctivité d’excitation et un FRET entre QD et Alexa Fluor. Ce schéma permet une détéction spectrale aisée du FRET et une localisation très spécifique et sensible du CEA membranaire. Ceci est conforté par la diminution du temps de déclin du QD556 donneur d’énergie non radiative
The QD-sdAbs conjugates are nano-sensors that combine a quantum dot (QD) and single domain antibodies (sdAbs). These fluorescent nanoprobes allow immunostaining on tissue sections and cells. The objective of this work is to show the interest of the multi-photon excitation for the detection and highly specific location of tumor biomarkers.Multi-photon excitation of anti CEA QD570-sdAb nanoprobes was investigated on human appendix and colon carcinoma slides for specifical detection and an optimization of the signal/auto-fluorescence emission ratio. The use of QD as excitation energy sensor for a QD-organic fluorophore FRET model has been shown. An innovative model for ultra-specific detection of CEA on MC38 CEA membrane cells by double immunostaining for a resonant energy transfer between QD and Alexa Fluor has been implemented.Our results shows the great interest of the multi-photon excitation compared to 458.9 nm excitation for discrimination and optimization of the signal / autofluorescence. It is 40 times higher at 800 nm two photon excitation has 458.9 nm one photon excitation on the studied sections.The use of conjugated QD556-sdAb anti-CEA and a conventional monoclonal antibody allows a double immunostaining on CEA on MC38 CEA membrane cells. The QD is use as multi-photon excitation energy nano-sensor enables an excitation selectivity and FRET between QD and Alexa Fluor. This configuration enables easy spectral detection of FRET and a very specific and sensitive location of membrane CEA. This is reinforced by the decrease in decay time of QD556 as donor of non radiative energy

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Jesel-Morel, Laurence. "Sénescence, remodelage tissulaire et membranaire, risque thrombotique au cours de la fibrillation auriculaire." Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ051/document.

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Abstract:

Nos travaux montrent qu’au cours de la fibrillation atriale (FA), les microparticules (MP) reflètent et contribuent à un état d’hypercoagulabilité et pro-inflammatoire. Leurs concentrations similaires dans les deux oreillettes de patients en FA témoignent d’une absence de différence de statut pro-thrombotique entre ces deux cavités cardiaques. Au cours des procédures d’ablation de FA, les concentrations de MP évoluent parallèlement à l’augmentation de l’activation cellulaire et plaquettaire. Nous avons également montré dans l'altération tissulaire des oreillettes en FA, l'importance de la sénescence qui évolue avec la progression du trouble du rythme. Nous avons caractérisé un modèle cellulaire de sénescence réplicative de cellules endothéliales auriculaires de porc permettant d'identifier l'apparition d'un phénotype pro-thrombotique, pro-inflammatoire, pro-adhésif et de mieux comprendre la physiologie de la cellule endothéliale atriale sénescente et le rôle majeur du système rénine-angiotensine dans ces mécanismes
Our data evidence that during atrial fibrillation (AF), microparticles (MP) contribute to an enhanced hypercoagulable and pro-inflammatory state. Similar concentrations of MP measured in left and right atria of AF patients highlight the absence of chamber-specific enhanced thrombogenic status. During AF ablation procedures, MP concentrations progress in parallel with cell and platelet activation. We also showed that AF progression is strongly related to human atrial senescence burden pointing toward a possible network that links in human atrium, senescence burden, endothelial dysfunction, thrombogenicity and atrial remodeling. We also developed a model of left atrium endothelial cell replicative senescence providing compelling evidences indicating that atrial endothelial senescence promotes thrombogenicity, inflammation and proteolysis. These data underline the major role of renin-angiotensin system in endothelial atrial cell senescence

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Vargas, Valderrama Alejandra. "Différenciation des cellules souches pluripotentes humaines en cellules endothéliales et cellules hématopoïétiques via une population du type hémangioblastique Efficient hPSC differentiation into endothelial and hematopoietic cells via a hemangioblast-like population." Thesis, université Paris-Saclay, 2020. http://www.theses.fr/2020UPASQ021.

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Abstract:

Les cellules endothéliales (CE) et les cellules hématopoïétiques dérivées des cellules souches pluripotentes humaines (CSPh) sont un outil prometteur pour l'ingénierie tissulaire, la thérapie cellulaire et pour la découverte de nouveaux médicaments. Les CE assurent la formation des vaisseaux sanguins, tandis que les cellules hématopoïétiques matures sont impliquées dans le transport de l'oxygène, l'hémostase et la réponse immunitaire entre autres. Dans cette étude, nous avons différencié des CSPh en une population bipotente de type hémangioblastique pour générer des populations pures de ces deux lignages in vitro. Cette population CD144+CD309+CD34+CD143+CD31+ donne une population intermédiaire in vitro, les colonies blastiques (CB), qui exprime le marqueur CD43 à 90%. Les CB se différencient en colonies hématopoïétiques myéloïdes et érythroïdes et expriment des facteurs de transcription impliqués dans l'hématopoïèse définitive (RUNX1c, GATA2, SCL, HOXB4). D’autre part, la différenciation endothéliale du progéniteur hémangioblastique génère une population à plus de 95% de CE CD309+CD34+CD144+CD31+ fonctionnelles in vitro, exprimant des marqueurs spécifiques des CE artérielles et veineuses. In vivo, nous avons démontré que la population hémangioblastique génère une reconstitution hématopoïétique faible mais détectable chez des souris immunodéficientes. Les CE transplantées dans un modèle murin d’ischémie dans une chambre dorsale se sont incorporées à l’endothélium des vaisseaux de la souris, démontrant leur potentiel angiogénique. Enfin, et comme preuve du concept, nous avons utilisé des CE et des hépatoblastes dérivées de la lignée de CSPh dans le but de créer des organoïdes hépatiques vascularisés in vitro
Endothelial cells (ECs) and hematopoietic cells derived from human pluripotent stem cells (hPSc) are a promising tool for tissue engineering, cell therapy and drug discovery. ECs are involved in blood vessel formation, while mature hematopoietic cells participate in oxygen transport, hemostasis and immune response. In this study, we have differentiated hPSCs into a bipotent hemangioblast-like population to generate pure populations of these two lineages in vitro. This CD144+CD309+CD34+CD143+CD31+ population gives rise to an intermediate population in vitro, the blast colonies (BCs), which expresses the CD43 marker at 90%. BCs differentiate into myeloid and erythroid hematopoietic colonies and express transcription factors involved in definitive hematopoiesis (RUNX1c, GATA2, SCL, HOXB4). On the other hand, endothelial differentiation of the hemangioblast-like progenitors generates a population of more than 95% of functional CD309+CD34+CD144+CD31+ ECs in vitro, expressing arterial and venous specific markers of ECs. In vivo, we showed that the hemangioblast-like population generates a low but detectable hematopoietic reconstitution in immunodeficient mice. ECs transplanted in a mouse model of ischemia on a dorsal chamber were localized in the endothelium of the mouse blood vessels, suggesting an angiogenic potential of these cells. Finally, and as a proof of concept, ECs and hépatoblasts derived from hPSCs were cocultured to generate vascularized hepatic organoids in vitro

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Hinkel, Isabelle. "Plasticité des cellules cancéreuses coliques : impact du facteur d'identité tissulaire Cdx2." Phd thesis, Université de Strasbourg, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00871086.

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Le facteur de transcription homéotique Cdx2 est un suppresseur de tumeurs et son expression est réduite de manière hétérogène dans les tumeurs coliques. Or, le cancer colorectal demeure un problème de santé publique par sa fréquence et sa gravité. Au travers de 3 sous-projets, cette thèse visait à comprendre le mode d'action de Cdx2. Premièrement, la cadhérine Mucdhl a été identifiée et caractérisée en tant que nouvelle cible de Cdx2 : Mucdhl inhibe la croissance des cellules cancéreuses coliques et s'oppose à l'activité de la -caténine. Deuxièmement, un effet inattendu de Cdx2 sur le cytosquelette et la rigidité cellulaire a été montré. Ceci pourrait expliquer comment Cdx2 intervient dans l'organisation structurale des entérocytes ou la migration. En parallèle, une lignée cellulaire rapportrice de l'expression de Cdx2 a été créé qui, après validation, sera un outil précieux pour l'étude des mécanismes moléculaires qui conditionnent l'hétérogénéité tumorale. Par la mise en évidence de nouvelles fonctions et cibles de Cdx2, cette thèse permet de mieux appréhender son rôle physiologique et son action de suppresseur de tumeurs dans l'intestin.

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Al, Rifai Rida. "ASPIC - Analyse du site d’implantation de produit de thérapie cellulaire dans un modèle d’ischémie critique des membres inférieurs." Thesis, Reims, 2018. http://www.theses.fr/2018REIMM206/document.

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Abstract:

L’artériopathie oblitérante des membres inférieurs (AOMI) est une affection vasculaire obstructive athéroscléreuse. Elle touche 20% des plus de 70 ans. L’ischémie critique des membres inférieurs (ICMI) est le stade ultime et nécessite une revascularisation. La thérapie cellulaire (TC) tente de promouvoir l’angiogenèse chez les patients en impasse thérapeutique. Les cellules souches mésenchymateuses (MSCs) sont un bon candidat, car elles associent des propriétés angiogéniques et immunomodulatrices. L’objectif de cette thèse a été 1), d’évaluer dans un modèle murin d’ischémie de la patte, l’efficacité de deux types de MSCs: les MSCs indifférenciées et les MSCs « endothelial like » (MELs) en les comparant aux cellules dérivées de la moelle osseuse; 2) d’analyser le membre ischémié par spectroscopie Raman.Les MELs et les MSCs ont induit une restauration complète du flux et une amélioration fonctionnelle du membre. Aucune nécrose n’a été signalée après administration des MELs. Histologiquement, les MELs ont induit les taux les plus élevés de néoangiogenèse et de régénération musculaire. Les acquisitions spectrales ont révélé que la spectroscopie Raman peut différencier un membre ischémié d'un membre sain et indique une augmentation du ratio lipide/protide au cours de l’ischémie.Notre étude indique que les MELs de patients ICMI rétablissent le flux sanguin et permettent la réparation musculaire. La spectroscopie Raman peut être utilisée pour évaluer l'ischémie chez les patients atteints d’ICMI
Peripheral artery disease (PAD) is an atherosclerotic obstructive disease affecting lower limbs arteries. It affects nearly 20% of over 70s. Critical limb ischemia (CLI) is the ultimate stage and requires revascularization. Cell therapy (CT) has been proposed for patients with CLI. Clinical trials were encouraging but failed to establish efficacy. Mesenchymal stem cells (MSCs) may be a better option as they combine angiogenic and immunomodulatory properties. MSCs can be obtained from BMCs of CLI-patients. The aim of this study was first to evaluate, in a murine hindlimb ischemia model, the efficacy of two types of MSCs: undifferentiated mesenchymal stem cells (MSCs) and “endothelial like” MSCs (MELs) in comparison with currently used BMCs. Secondly, the objective was to perform a non-invasive analysis of ischemic limb using Raman Spectroscopy. MELs and MSCs induced complete perfusion restoration whereas BMCs did not. The complete flow recovery was significantly earlier with MELs in comparison with MSCs. Both MSCs and MELs improved functionality more efficiently than BMCs. Interestingly, complete limb salvage was observed in the MELs treated group exclusively. In muscles, MELs induced the highest rate of neoangiogenesis and the best muscle repair as shown by the presence of regenerated myofibers. Spectral acquisitions revealed that Raman spectroscopy can discriminate ischemic limb from healthy limb and can grade ischemia over time.Our study brings evidence that MELs obtained from CLI-patients can restore blood flow and provide muscle repair. Moreover Raman spectroscopy could be used clinically to assess ischemia in CLI-patients

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Charton, Antoine. "Effets de l'eau enrichie en oxygène sur l'oxygènation tissulaire : études expérimentales chez l'animal et application chez l'homme." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ042.

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Abstract:

La mise au point récente d’une nouvelle technique permettant l’enrichissement de l’eau en oxygène par électrolyse relance l’intérêt de recherches sur les bénéfices potentiels de cette modalité d’oxygénation. Dans ce contexte, nos objectifs étaient de caractériser les effets de cette eau enrichie en oxygène sur la respiration mitochondriale, l’oxygénation tissulaire périphérique lors d’un état de stabilité hémodynamique, et sur la performance et la production de stress oxydant lors d’un exercice physique. Les résultats mettent en évidence un effet de l’administration de l’eau enrichie en oxygène par électrolyse au niveau cellulaire et tissulaire.Le mécanisme, expliquant à la fois une meilleure affinité de la mitochondrie pour l’oxygène et les effets sur l’oxygénation périphérique, pourrait être dû à un effet qualitatif sur la diffusion de l’oxygène au niveau tissulaire
The recent development of a new technique for enriching water in oxygen by electrolysis relaunch the research interest on the potential benefits of this modality of oxygenation. In this context, our objective was to characterize the effects of 02-water on mitochondrial respiration, peripheral tissue oxygenation during a state of hemodynamic stability, and on the performance and the production of oxidative stress in a sub-maximal exercise. The results show an effect of the administration of water enriched in oxygen by electrolysis at the cellular and tissue level. The mechanism explaining both a better affinity of mitochondria for oxygen and the effects on peripheral oxygenation could be due to aqualitative effect on the diffusion of oxygen at the tissue level

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Marcilly, Romaric. "Towards a usability knowledge base to support health information technology design and evaluation : Application to Medication Alerting Systems." Thesis, Lille 2, 2014. http://www.theses.fr/2014LIL2S037/document.

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Abstract:

Les Technologies de l’Information en Santé (TIS) sont de plus en plus utilisées pour améliorer la qualité des soins et la sécurité du patient. Cependant, certains problèmes d’utilisabilité peuvent amenuiser leur impact et peuvent même induire de nouveaux problèmes dont la mise en danger du patient. Pour éviter ces effets négatifs, il est notamment nécessaire d’améliorer l’utilisabilité des TIS ce qui requiert l’application de connaissances d’utilisabilité éprouvées. Les connaissances en utilisabilité appliquée aux TIS sont rares, éparpillées à travers diverses supports et peu utilisables. Par ailleurs, leur couverture en termes de problèmes d’utilisabilité est peu connue. Ce travail a deux objectifs: (i) participer à l’amélioration de l’accumulation de la connaissance en utilisabilité pour les TIS, (ii) fournir une connaissance structurée sur l’utilisabilité des TIS et dont la couverture est établie. Le domaine d’application est celui des systèmes d’alerte médicamenteux.Méthode. Deux analyses indépendantes de la littérature ont été menées : d’un côté, identifier et organiser les problèmes d’utilisabilité des systèmes d’alerte médicamenteux ainsi que leurs conséquences ; de l’autre, identifier et synthétiser les principes d’utilisabilité spécifiques à ces systèmes. Les résultats de ces analyses ont été croisés afin de connaitre la couverture desdits principes en termes de problèmes d’utilisabilité.Résultats. La revue systématique a identifié 13 types de problèmes d’utilisabilité dans les systèmes d’alerte médicamenteux. Les conséquences de ces problèmes sur le clinicien et son système de travail sont variées et ont un grand pouvoir de nuisance (e.g., fatigue, erreur d’interprétation). Au total, 63 principes d’utilisabilité permettent de rendre compte de tous les problèmes d’utilisabilité identifiés. Ils sont organisés en 6 thèmes : améliorer le ratio signal-bruit, être en adéquation avec l’activité des cliniciens, supporter le travail collaboratif, afficher les informations pertinentes, rendre le système transparent et fournir des outils utiles. Le croisement des deux ensembles de données révèle une bonne correspondance entre les principes d’utilisabilité énoncés et les problèmes d’utilisabilité réellement observés.Discussion. Une liste structurée des principes d’utilisabilité illustrés par des exemples réels de leur violation a été développée à partir de ce travail. Cette liste peut aider les concepteurs et les experts en Facteurs Humains à comprendre et à appliquer les principes d’utilisabilité durant la conception et l’évaluation de systèmes d’alerte médicamenteux. L’utilisabilité appliquée aux TIS est une discipline relativement récente qui souffre d’un déficit de structuration et de capitalisation de ses connaissances. Ce travail montre qu’il est possible d’accumuler et de structurer les données d’utilisabilité des TIS. Ce travail pourrait être poursuivi en développant une base de connaissance en utilisabilité appliquée aux TIS afin de tendre vers une « utilisabilité fondée sur les preuves »
Health Information Technology (HIT) is increasingly implemented to improve healthcare quality and patient safety. However, some usability issues may reduce their impact and even induce new problems (including patient safety issues). To avoid those negative outcomes, amongst other actions, HIT usability must be improved. This action requires applying validated usability knowledge. However, usability knowledge applied to HIT is scattered across several sources, is not structured and is hardly usable. Moreover, its coverage regarding related usability flaws is not known. This work has two aims: (i) to participate in improving the accumulation of usability knowledge for HIT and (ii) to provide synthetic structured easy-to-use HIT usability knowledge with a clear coverage. Those aims are applied to medication alerting systems.Method.Two independent analyses of the literature have been performed. On the one hand, usability flaws and their consequences for the clinicians and the work system have been searched and organized; on the other hand, existing usability design principles specific to medication alerting systems have been synthesized. Results of both analyses have been matched together. Results.A systematic review identified 13 types of usability flaws in medication alerting systems. Consequences on the clinicians and the work system are varied: they greatly impede the clinicians and negatively impact the work system (e.g., alert fatigue, alert misinterpretation). Sixty-three usability design principles dedicated to medication alerting systems are identified. They represent six themes: improve the signal-to-noise ratio, fit clinicians’ workflow, support collaborative work, display relevant information, make the system transparent and provide useful tools. The matching between usability flaws and principles is quite good.Discussion.As a result of this work, a list of usability design principles illustrated by actual instances of their violation has been developed. It may help designers and Human Factors experts understand and apply usability design principles when designing and evaluating medication alerting systems. Usability applied to HIT is a recent research field that suffers from a deficit of structured knowledge. This work shows that it is possible to accumulate and structure usability knowledge. It could be carried on by developing a usability knowledge base dedicated to HIT in order to strive towards “evidence-based usability”

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Malak, Abbas. "Role of vascular microparticles in endothelial senescence : study of their pro-coagulant properties and pharmacological modulation in a porcine model of replicative senescence." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ130.

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Abstract:

Ce travail est consacré au rôle pléotropique des microparticules endothéliales dans la réponse et l'homéostasie vasculaire. Un modèle de sénescence réplicative a été caractérisé en utilisant des cellules endothéliales de coronaires de porc en culture primaire. Ce modèle a mis en évidence des changements drastiques du phénotype endothélial avec la production de ROS, la dépolarisation de la membrane mitochondriale et la surexpression de régulateurs clés du cycle cellulaire incluant p53, p21 et p16. La sénescence a transformé le phénotype endothélial vers un statut procoagulant indiqué par la libération de microparticules (MP). L'induction d'activité Facteur Tissulaire (FT) et une réduction drastique de l'inhibition de l'agrégation plaquettaire due à la sécrétion réduite de NO endothélial. Simultanément, une augmentation importante des protéines du système de l'angiotensine à la surface des cellules sénescentes et des MPs qu'elles émettent a été mesurée. D'autres résultats obtenus avec les MPs circulantes de patients transplantés ou atteints de syndrome coronarien suggèrent l'existence dune boucle d'amplification des effets délétères des MPs au travers de la signalisation Redox et l'altération des fonctions vasculaires résultant d'une sénescence exacerbée. En plus de ses qualités reconnues d'immunosuppresseur, la cyclosporine A (CsA) est un inhibiteur puissant de l'ouverture des pores mitochondriaux (mPTP). Certaines études ont présenté le traitement bref et contrôlé par CsA comme un moyen de limiter les dommages vasculaires de l'ischémie reperfusion.Nos données suggèrent une possible modulation de la sénescence endothéliale induite par les MPs grâce au préconditionnement avec des concentrations faibles de CsA. nos résultats suggèrent aussi que de faibles doses de Cs A peuvent avoir un effet bénéfique dans les pathologies cardiovasculaires lorsque la sénescence est exacerbée et contribue les fonctions vasculaires de l’endothélium
This scientific work has tackled the issue of the pleitropic role mediated by endothelial microparticles function and homeostasis. A replicative model of senescence using coronary endothelial cells was set showing drastic phenotype changes characterized by ROS production, mitochondrial membrane depolarization and the up-regulation of key regulators of cell cycle arrest including p53, p21 and p16.Replicative senescence shifted the coronary endothelial phenotype toward a procoagulant status as evidenced by (i) procoagulant MP shedding (ii) enhanced tissue factor (TF) expression and (iii) a marked decrease in the endothelial NO-mediated inhibition of platelet aggregation. In parallel, a drastic up regulation of the angiotensin system could be evidenced at the surface of senescent cells or derived MP. Results obtained with MPs from patients with acute coronary artery syndrome and from grafted patients,suggested a feedback loop disseminating the deleterious effect of circulating MPs redox signaling and alteration of vascular function owing to exaggerated senescence. In addition to its well-known immunosuppressive properties, cyclosporine A (Cs A) is a potent inhibitor of the opening of the mitochondrial permeability transition pore (mPTP), and several reports have indicated that a brief and timely administration of Cs A can limit ischemia-reperfusion injuries. Our data evidenced the possible pharmacological modulation of endothelial MP-mediated senescence by cell preconditioning with low concentrations of Cs A. our data are thus suggestive of a beneficial effect of CsA in cardiovascular disorders where senescence is altering the endothelial vascular functions

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Goula, Agathi Vasiliki. "Implication des lésions oxydantes et du mécanisme de réparation par excision de base dans la sélectivité tissulaire de l'instabilité somatique des répétitions CAG dans la maladie de Huntington." Phd thesis, Université de Strasbourg, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00868694.

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Abstract:

La maladie de Huntington (MH) est une maladie neurodégénérative fatale, causée par l'expansion des répétitions CAG du gène de Huntingtine. La longueur de l'expansion est instable et proportionnelle à la gravité de la maladie. L'instabilité varie selon les tissus, p.ex. le striatum est très instable et dégénère, alors que le cervelet a une instabilité limitée et est épargné par la maladie. Nous avons étudié le rôle des lésions oxydantes et du mécanisme de réparation par excision de base (BER) dans la sélectivité tissulaire de l'instabilité dans ces deux tissus de souris R6/1. Le niveau des lésions était similaire dans ces tissus, alors que les niveaux et les activités des principales protéines BER étaient globalement diminués dans le striatum. L'efficacité de réparation dépendait de la stoechiométrie de BER, la position de la lésion et la séquence d'ADN. Nos résultats suggèrent une faible coopération entre les activités BER associée à la spécificité tissulaire de l'instabilité de la MH.

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Eap, Sandy. "Développement d'implants nanofibreux actifs pour la régénération osseuse." Thesis, Strasbourg, 2014. http://www.theses.fr/2014STRAJ053/document.

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Abstract:

Notre équipe a développé une stratégie innovante de fonctionnalisation d’implants nanofibreux synthétiques à base de nanoréservoirs actifs pour la médecine régénérative osseuse. Notre objectif essentiel est de proposer un implant synthétique, biodégradable, et nanostructuré permettant d’accélérer la réparation du tissu osseux. Ces nouveaux implants synthétiques représentent un choix alternatif aux membranes de collagène d’origine animale. Notre stratégie consiste à construire des nanoréservoirs de chitosane, contenant des facteurs ostéoinducteurs tels que la BMP-2 afin d’enrober les nanofibres de nos implants. L’implant synthétique et biomimétique a été conçu à partir du le poly(ε-caprolactone) (PCL),polymère biocompatible et biodégradable approuvé par la FDA, et élaboré grâce à la technique de l’electrospinning afin de mimer la matrice extracellulaire. L’optimisation de ce procédé a permis la mise en oeuvre d’implants d’épaisseurs différentes (jusqu’à 10mm). La double fonctionnalisation de l’implant a permis de le rendre bioactif et vivant en utilisant la combinaison de facteur de croissance et de cellules souches mésenchymateuses. L’efficacité de la double fonctionnalisation des implants de PCL a ainsi été mise en évidence par l’accélération de la régénération osseuse in vivo.L’activité de ces implants fonctionnalisés de nanoréservoirs bioactifs est en cours d’analyse dans le cadre de tests précliniques pour une application maxillo-faciale, parodontale et orthopédique en vu d’obtenir un marquage CE. De plus, une start-up (ARTiOS NanoMed) basée sur cette nanotechnologie a été crée. En conclusion, nous pensons que la technologie développée par notre laboratoire a permis une avancée dans le domaine de la régénération osseuse et que cette technologie présente un fort potentiel d’application en clinique
Our team has developped a novel and unique strategy to functionnalize nanofibrous and synthetic implants based on active nanoreservoirs for bone regeneration. We propose a new synthetic biodegradable and nanostructured implant to accelarate restoration of bone tissue. These new implants could replace collagen membranes from animal origin. The nanoreservoirs are based on chitosan containing osteoinductive growth factors such as BMP-2. Poly(ε-caprolactone) (PCL) is a biodegradable and biocompatible polymer approved by FDA and has been used to produce the synthetic and biomimetic implants by electrospinning in order to mimic the bone extracellular matrix. Optimization of this process has allowed the elaboration of nanofibrous implants with different thicknesses reaching 10 mm. Using the combination of growth factors and mesenchymal stem cells in a double functionalization created a bioactive and living implant. This strategy has been validated in vitro and in vivo thanks to bone site implantation in murin model. Acceleration of bone regeneration in vivo has brought to light the efficiency of the double functionalization onto the PCL implants.The functionalized implants bioactivity is still currently in study for pre-clinical trials in order to obtain authorization for applications in maxillo-facial, parodontal, and orthopaedic fields. Moerover, astat-up (ARTiOS NanoMed) based on this nanotechnology has been founded.To conclude, we believe that our nanotechnology could lead to a new generation of engineered bone implants which has a great potential to be used in the clinic

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Koubar, Khodor. "Amélioration du calcul de la masse osseuse par micro-tomodensitométrie X : prise en compte des phénomènes physiques." Phd thesis, Université de Strasbourg, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01062827.

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Abstract:

Suite à l'allongement de la survie des patients atteints de la mucoviscidose (CF), des études ont montré la présence d'une perte osseuse chez les patients CF. Dans ce travail de thèse, une étude de l'évolution de la densité minérale osseuse chez des souris atteintes de mucoviscidose a été effectuée en utilisant un système de micro-tomodensitométrie X. Afin d'améliorer les précisions des mesure, deux méthodes de correction de deux phénomènes physiques ont été appliquées. La première méthode est une correction du durcissement de faisceau X et basée sur une segmentation de l'objet reconstruit après une première reconstruction et en utilisant des courbes d'atténuations précalculées. La deuxième méthode est une méthode de correction de la diffusion des rayons dans l'animal basée sur l'estimation des projections des diffusés en utilisant des noyaux de diffusion précalculées. Des améliorations au niveau de la qualité de l'image et les mesures de densité osseuses ont été obtenues.

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Dissertations / Theses on the topic 'Ingénierie tissulaire – Dissertations universitaires'

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