Dissertations / Theses: 'Lactobacilos'

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Chaves, Maria Manoela Barata de Castro [UNESP]. "Estudo da microbiota vaginal de éguas com ênfase na pesquisa de lactobacilos." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2011. http://hdl.handle.net/11449/98256.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-12Bitstream added on 2014-06-13T19:17:45Z : No. of bitstreams: 1 chaves_mmbc_me_botfmvz.pdf: 1213419 bytes, checksum: c6618d188eefb02feaf360154f766257 (MD5)
Universidade Estadual Paulista (UNESP)
Na égua o ambiente uterino saudável não apresenta microflora, diferente da vagina onde se sabe existir uma flora vaginal rica em microrganismos não patogênicos. Muitas bactérias da flora vaginal normal podem ser deslocadas para o interior do útero, podendo ser esta a causa principal de endometrites em éguas doadoras de embriões. A presença de Lactobacillus spp é considerada importante na flora vaginal de mulheres e tem sido pouco investigada em éguas. O presente trabalho tem como objetivo estudar a flora vaginal de éguas, doadoras de embriões, determinar os principais microrganismos presentes, relacionar os achados microbiológicos vaginais e uterinos, assim como determinar a prevalência de Lactobacillus. No experimento 1 foram utilizadas 77 éguas doadoras de embrião, 33 foram coletadas amostras vaginais e uterinas e 77 apenas vaginais. O experimento 2 contou com dois grupos (36 éguas e 10 mulheres) de swabs vaginais sendo um para cultivo e isolamento de Lactobacillus e outro para extração do DNA e PCR. As bactérias predominantes na vagina foram: Streptococcus zooepidemicus (42%), Escherichia coli (25%), Streptococcus alfa hemolítico (15%) Candida (6%), Enterobacter spp (3%), Bacillus spp (3%), Streptococcus beta hemolítico (3%) e Pseudomonas (3%).. Das 33 amostras coletadas do útero de éguas somente 39% (n=12) não apresentaram crescimento bacteriano ou fúngico. Tendo sido Streptococcus zooepidemicus o mais frequentemente encontrado (26%), seguido de Escherichia coli (15%), Candida spp (9%), Streptococcus alfa hemolítico (6%) e Enterobacter (3%). Os microrganismos isolados da vagina e que estavam concomitantemente presentes no útero de éguas foram: Streptococcus zooepidemicus (21%), Escherichia coli (12%), Candida spp (9%) e Streptococcus alfa hemolítico (6%). Em 83,3% houve concordância entre as amostras negativas na vagina e no útero (p <0,05). Em 73,7%...
Different from the vagina, were a rich microflora is present, the uterine environment is considered free of microorganisms. One possibility for the installation of endometritis in mares is the ascendent contamination from the vagina.The presence of Lactobacillus on vaginal flora is considered important in woman however there is few information on mares. The present experiment aimed to study the vaginal microflora of embryo donnor mares, to correlate the vaginal and uterine finds and also to determine the prevalence of Lactobacillus on vaginal envirioment. On experiment 1 a total of 77 mares were used and vaginal samples collected from 33 of these mares both vaginal and uterine samples were collected. On experiment 2 vaginal swabs from 36 mares and 10 women were collected for culture and isolation of Lactobacillus, DNA extration and PCR. The predominate bacteria isolated from the vagina were: Streptococcus zooepidemicus (42%), Escherichia coli (25%), Streptococcus alfa hemolítico (15%) Candida (6%), Enterobacter spp (3%), Bacillus spp (3%), Streptococcus beta hemolítico (3%) e Pseudomonas (3%). From 33 samples collected from the uterus only 39% (n= 12) did not show any microorganism on culture. Streptococcus zooepidemicus was the most frequent isolated microorganism (26%), followed by Escherichia coli (15%), Candida spp (9%), Streptococcus alfa hemolítico (6%) e Enterobacter (3%). When evaluated the microorganisms isolated from both vaginal and uterine samples Streptococcus zooepidemicus (21%), Escherichia coli (12%), Candida spp (9%) e Streptococcus alfa hemolytic (6%) were the most frequent isolated bacteria. The agreement between swabs taken from both uterus and vagina was 83.3% (p <0,05) for negative cultures and 73,7% for positive cultures (p <0,05). From 35 samples collected on group I Lactobacillus spp was isolated in only two (5,7%) eight (20%) samples showed positive ... (Complete abstract click electronic access below)

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Parolo, Clarissa Cavalcanti Fatturi. "Estudo dos lactobacilos no biofilme dental." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2009. http://hdl.handle.net/10183/26732.

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Abstract:

Lactobacilos são um grupo de bactérias relacionadas com cárie dental. Há falta de estudos sobre a biologia populacional dos lactobacilos na cárie dental. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito das modificações ambientais na composição, diversidade genética dos lactobacilos e Identificar a filogenia dos Lactobacillus paracasei isolados do biofilme. Lactobacilos foram isolados em um modelo de formação de biofilme in situ antes e depois de 28 dias de exposição à solução de sacarose 20%. As colônias foram randomicamente selecionadas do meio Rogosa Ágar e subcultivadas (n=222, 31 antes e 191 após período de exposição à sacarose). Os isolados foram identificados usando o seqüenciamento parcial dos genes pheS ou rpoA. As espécies de lactobacilos predominantes encontradas foram L. paracasei, L. fermentum e L. rhamnosus. A diferença na composição e na diversidade genética de lactobacilos associada às modificações ambientais no biofilme foi analisada através de PCR utilizando palíndromes repetitivos extragênicos (REP-PCR). Após a fase com sacarose, um maior número de lactobacilos pode ser encontrado no biofilme (p=0,001). A prevalência de L.fermentum foi similar na fase sem sacarose (6/11 indivíduos colonizados) e na fase com sacarose (8/11 indivíduos colonizados) (p=0,721). A prevalência de L. rhamnosus e L. paracasei aumentou no biofilme de 2/11 para 8/11 indivíduos (p= 0,028) e de 2/11 para 7/11 indivíduos colonizados (p=0,012) após exposição a sacarose, respectivamente. A prevalência de L. gasseri foi baixa e em ambas as fases (p=1,00). As espécies de Lactobacilos apresentaram maior diversidade na fase com sacarose (2 a 3 espécies por indivíduo) do que na fase sem sacarose (0 a 2 espécies por indivíduo) (p=0,045). Na maioria dos casos, diferentes genótipos estavam presentes na fase sem sacarose em comparação à fase com sacarose (p=0,01). Aqueles lactobacilos identificados como L. paracasei foram também submetidos à tipificação através do seqüenciamento de múltiplos loci (MLST). No MLST, foi obtida a sequência parcial de 7 genes de referência: fusA, ileS, lepA, leuS, pyrG, recA, e recG. Sete indivíduos apresentavam L. paracasei (n=75) e 14 seqüências de tipificação (ST) foram encontradas. Verificou-se que indivíduos não relacionados podem apresentar uma mesma ST e que múltiplas STs estão presentes por indivíduo. Três indivíduos apresentavam STs previamente isoladas de produtos alimentícios lácteos. Resultados conflitantes na comparação entre REP-PCR e MLST foram observados na genotipagem de L. paracasei. Diferentes números de padrões foram obtidos para os L. paracasei de acordo com o método molecular utilizado (14 com MLST versus 25 com REP-PCR). Para algumas cepas, REP-PCR foi mais discriminatório do que MLST. Em outros casos, cepas pertencentes a diferentes STs foram agrupadas pelo REP-PCR, mostrando que o MLST foi mais discriminatório do que o REP-PCR. Em poucos casos, MLST e REP-PCR apresentaram o mesmo poder discriminatório. Em geral, REP-PCR mostrou um maior poder discriminatório em comparação ao MLST, mas pouca concordância foi apresentada entre os dois métodos. Assim, MLST pode contribuir na identificação da diversidade genética obtida pelo REP-PCR em alguns casos. Os dados obtidos permitiram concluir que após exposição a sacarose observa-se (a) aumento no número de lactobacilos e de superfícies colonizadas; e (b) aumento na diversidade genética e de espécies. Além disso, observou-se que (c) alguns lactobacilos orais podem apresentar origem exógena, e que (d) a combinação dos métodos MLST e REP-PCR aumenta o poder discriminatório quanto à diversidade genética de L. paracasei.
Lactobacilli are a group of bactéria related to dental caries. There is a lack of studies on the population biology of this organisms in dental caries. The aim of the study was to evaluate the effect of the environmental changes in the composition, genetic diversity and identify the filogeny of Lactobacillus paracasei isolated from biofilm. Lactobacilli were isolated from a biofilm model, formed in situ prior to and during a 28-day period of exposure to 20% sucrose solution. The lactobacillus colonies were randomly selected from Rogosa Agar medium and subcultured (n=222, 31 prior to and 191 following a sucrose exposure period). The isolates were identified using pheS or rpoA gene sequence analysis. The predominant lactobacilli were L. paracasei, L. fermentum and L. rhamnosus. The difference in composition and genetic diversity of lactobacilli related to environmental changes in biofilm was analysed by repetitive extragenic palindromic PCR (REP-PCR). After the sucrose phase, a higher number of lactobacilli could be found in dental biofilm (p=0.001). The prevalence of L. fermentum was similar in the non-sucrose (6/11 subjects) compared to the sucrose phase (8/11 subjects) (p=0.721). Prevalence of L. rhamnosus and L. paracasei increased in biofilm from 2/11 to 8/11 subjects (p= 0.028) and from 2/11 to 7/11 subjects (p=0.012) after sucrose exposure, respectively. L. gasseri prevalence was low in both phases (p=1.00). Lactobacilli exhibited greater species diversity (2 or 3 species per subject) in the sucrose phase, than those isolated from the non-sucrose phase (0-2 species per subject) (p=0.045). In most of the cases different genotypes were present in the non-sucrose phase in comparison to the sucrose phase. Those lactobacilli identified as L. paracasei were subjected to multilocus sequencing typing (MLST). In MLST, partial sequences of seven housekeeping genes fusA, ileS, lepA, leuS, pyrG, recA, and recG was obtained. Seven subjects harboured L. paracasei (n=75) and these represented 14 sequence types (ST). Comparison of the STs showed that unrelated subjects may harbour the same ST and that individuals harbour multiple STs. Three subjects harboured STs previously isolated from dairy products. There were mixed results among REP-PCR patterns compared with the MLST in the L. paracasei genotyping. Different numbers of patterns were obtained for L. paracasei according to the molecular technique used (14 MLST versus 25 REP-PCR patterns). For some strains, REP-PCR was more discriminatory than MLST. In other cases, strains belonging to different ST were grouped together by REP-PCR, showing that MLST was more discriminatory than REP-PCR. In few cases MLST and REP-PCR presented the same discriminatory power. REP-PCR showed a greater discriminatory power in comparison to MLST, but little agreement was observed between this two methods. Therefore, MLST could enhance the genetic diversity obtained by REP-PCR. The present data support that after sucrose exposure there is (a) an increase in the number of lactobacilli and colonized surfaces; and (b) increase in lactobacilli species and genetic diversity. Also it was found that (c) some oral lactobacilli may be of exogenous origin; and (d) the combination of MLST and REP-PCR increased the discriminatory power in genotyping L. paracasei.

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Brolazo, Eliane Melo. "Prevalencia e caracterização de especies de lactobacilos vaginais em mulheres saudaveis em idade reprodutiva." [s.n.], 2009. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/310509.

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Abstract:

Orientador: Luis Guillermo Bahamondes
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Made available in DSpace on 2018-08-13T11:58:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brolazo_ElianeMelo_D.pdf: 580434 bytes, checksum: 24b8356368950df00b8a139f02ad0fef (MD5) Previous issue date: 2009
Resumo: A microflora vaginal de mulheres saudáveis em idade reprodutiva é composta por uma variedade de bactérias aeróbias e anaeróbias, mas as espécies dominantes são os lactobacilos (bacilos de Döderlein), que exercem significante influência sobre a microbiota local. Além de restringir o crescimento de patógenos competindo pelo espaço e nutrientes, os lactobacilos produzem substâncias antimicrobianas como ácidos orgânicos, peróxido de hidrogênio (H2O2) e bacteriocinas. Esta atividade antagonista é importante na proteção contra várias infecções, principalmente a vaginose bacteriana (VB). Objetivos: Identificar as espécies de lactobacilos isolados do conteúdo vaginal de mulheres saudáveis e assintomáticas e determinar as espécies mais prevalentes e caracterizá-las quanto à produção de ácido láctico, peróxido de hidrogênio (H2O2) e sua capacidade de adesão às células do epitélio vaginal. Métodos: Foram isoladas 83 linhagens de lactobacilos de amostras de conteúdo vaginal de 135 mulheres, sem queixa de corrimento e com diagnóstico laboratorial negativo para infecções vaginais, acompanhadas no ambulatório de Planejamento Familiar da Faculdade de Ciências Médicas - UNICAMP. As linhagens isoladas foram identificadas por PCR multiplex e, quando necessário, submetidas ao sequenciamento do gene RNAr 16S. Foram então avaliadas quanto à produção de ácido láctico, de H2O2, bacteriocinas e a capacidade de adesão às células epiteliais. Resultados: A espécie predominante foi L. crispatus presente em 30,1% das mulheres, seguida de L. jensenii (26,5%), L. gasseri (22,9%) e L. vaginalis (8,4%). As outras espécies isoladas foram L. delbrueckii, L fermentum, L reuteri e L rhamnosus, com duas linhagens cada uma, e L. mucosae e L. salivarius com uma cepa cada. Das 83 linhagens de lactobacilos analisadas, apenas 20 não apresentaram produção de H2O2 detectável pela técnica de cultivo em agar MRS com TMB. Foram selecionadas 37 linhagens para teste de adesão às células epiteliais. Destas, 12 tiveram adesão entre 50% e 69% e 10 igual ou maior a 70%. As linhagens restantes apresentaram pouca capacidade de aderir às células epiteliais. Nenhuma das linhagens testadas produziu bacteriocinas. Conclusões: As espécies de lactobacilos mais prevalentes em mulheres sem vulvovaginites, isoladas em meio de cultura seletivo e identificadas por métodos moleculares, foram L. crispatus, L. jensenii e L. gasseri. Dentre as linhagens analisadas, além de mais frequentes, estas também foram as que atingiram menores valores de pH em meio de cultura e apresentaram melhor produção de H2O2
Abstract: The vaginal microflora of healthy women is composed of a large variety of aerobic and anaerobic bacteria. The dominant species is a group of lactobacilli (Doderlein's bacillus), which has a significant effect on vaginal microbiota, curtailing the growth of pathogens competing for space and nutrients. The lactobacilli specie produces various antimicrobial substances that include organic acids, hydrogen peroxide (H202) and bacteriocins. Objectives: Identify the prevalence of the different species of lactobacilli isolated from the vagina of healthy asymptomatic women, determine the most prevalent species and characterize them regarding the production of lactic acid, hydrogen peroxide (H2O2) and their capacity to adhere to vaginal epithelial cells. Methods: Eightythree strains of lactobacilli were isolated from the vagina of 135 women, with no complaints of vaginal discharge and negative laboratory diagnosis for vaginal infection, who were being followed up at the Family Planning clinic of the Medical school, Unicamp. The isolates were identified using multiplex polymerase chain reaction (PCR) and, when necessary, 16S rRNA gene sequencing. They were then evaluated with regards to the production of lactic acid, H2O2, bacteriocins, and their capacity to adhere to epithelial cells. Results: The predominant species found were L. crispatus (in 30.1% of the women), followed by L. jensenii (26.5%), L. gasseri (22.9%) and L. vaginalis (8.4%). The other species isolated were L. delbrueckii, L fermentum, L reuteri and L rhamnosus (two strains) and L. mucosae and L. salivarius (one strain). Only 20 out of 83 lactobacilli analyzed using the plate technique (in MRS agar with TMB) were found to be non-producers of H2O2. Thirty-seven lineages were selected and tested for their capacity to adhere to epithelial cells. Of these, 12 had an adhesion between 50% and 69% and 10 equal or superior to 70%. The remainder had little capacity to adhere to epithelial cells. None of the strains tested produced bacteriocins. Conclusions: L. crispatus, L. jensenii and L. gasseri were the most prevalent species isolated in selective culture media and identified through molecular techniques. Besides their frequencies, they also presented best H2O2 production and lowest pH in culture media
Doutorado
Ciencias Biomedicas
Doutor em Tocoginecologia

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Mangoni, Josiane. "Potencial probiótico de lactobacilos de origem suína." Universidade Estadual do Oeste do Paraná, 2009. http://tede.unioeste.br:8080/tede/handle/tede/1604.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:48:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Josiane_Mangoni.pdf: 304825 bytes, checksum: 57fa6d5d799ce082b0c419c954f47047 (MD5) Previous issue date: 2009-06-29
Fundação Araucária
The use of probiotic in animal nutrition has been identified for reducing mortality resulting from intestinal colonization by pathogenic micro-organisms, improving the performance and characteristics of production, leaving no residue in meat. The experiment aimed to isolate, from faeces samples from swine in the suckling strains of lactobacilli in order to be identified as probiotics. 92 colonies were isolated, these pre-selected colonies were subjected to the catalase which 60 negatively. The 60 colonies were subjected to negative Gram stain were evaluated where their morphology. Of these, 16 had forms of bacilli. These isolates were compared for their ability to resist pH 3.0, to grow in the presence of bile salts, phenol, lysozyme, its ability to hydrophobicity and antagonistic. Isolates L03, L04, L08 and L15, identified in this study show better for probiotic use, according to show better performance on the acidic conditions, growing in the presence of bile salts and phenol, with high percentage of hydrophobicity and inhibiting Escherichia coli
O uso de probiótico na alimentação animal tem sido indicado, por reduzir a mortalidade resultante da colonização intestinal por micro-organismos patógenos, melhorar o desempenho e as características de produção sem deixar resíduos na carne. O experimento teve como objetivo isolar, a partir de amostras de fezes de suínos na fase de aleitamento, cepas de lactobacilos visando sua utilização como probióticos. Foram isoladas 92 colônias, essas colônias pré-selecionadas foram submetidas à prova de catalase onde 60 negativamente. As 60 colônias negativas foram submetidas à coloração de Gram onde foram avaliadas sua morfologia. Destas, 16 apresentaram formas de bacilos. Esses isolados foram comparados pela sua habilidade em resistirem em pH 3,0, crescer na presença de sais biliares, fenol, lisozima, sua capacidade de hidrofobicidade e antagônica. Os isolados L03, L04, L08 e L15, identificados neste trabalho apresentam melhores características para uso como probiótico, em função de demonstrar melhor comportamento sobre as condições ácidas, crescendo na presença de sais biliares e fenol, apresentando alta percentagem de hidrofobicidade e inibindo Escherichia coli

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Botelho, Lidiane. "Isolamento e identificação de lactobacilos e bifidobacterias em alimentos probioticos disponiveis no mercado brasileiro." [s.n.], 2005. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/256187.

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Abstract:

Orientador: Edir Nepomuceno da Silva
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-08-05T01:10:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Botelho_Lidiane_D.pdf: 2674428 bytes, checksum: 87e73a9d73408a767f62587a3afcade5 (MD5) Previous issue date: 2005
Resumo: No período de março a maio de 2001, várias culturas lácticas foram isoladas de 11 marcas de produtos contendo microrganismos vivos, comercializados na região de Campinas (SP). A amostragem incluiu 3 iogurtes, 5 leites fermentados, 2 bebidas lácteas e 1 mistura simbiótica em pó. As culturas foram identificadas por características fenotípicas e genotípicas. Foram também submetidas a testes para verificação do cumprimento dos pré-requisitos mínimos exigidos para culturas probióticas, que são resistência ao pH, resistência à bile e a produção de bacteriocinas. Os resultados da identificação por características fenotípicas (36 culturas), feita utilizando-se o Kit de identificação API 50CHL (BioMérieux), mostraram as seguintes espécies: 1o) Lactobacillus paracasei subsp. paracasei ¿ isolado de 6 produtos, 2o) Streptococcus thermophilus ¿ isolado de 4 produtos, 3o) Leuconostoc mesenteroides subsp.cremoris ¿ isolados de 3 produtos, 4o) Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus e Lactococcus lactis subsp.lactis ¿ isolados de 2 produtos cada, 5o) Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Leuconostoc lactis e Lactobacillus curvatus subsp. curvatus ¿ isolados de 1 produto cada. Os resultados da identificação por características genotípicas (41 culturas, 36 de produtos e 5 padrão de coleção de culturas), feita utilizando a técnica de ribotipagem automática Riboprinter (Dupont/Qualicon), mostraram os seguintes resultados: duas culturas não se mostraram tipáveis pelo Riboprinter (Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris pelo API 50CHL). Cinco foram tipadas mas não identificadas pelo Riboprinter (Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris e Lactobacillus acidophilus pelo API 50CHL). Três foram identificadas como Lactobacillus apenas até o nível de gênero (Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis e Lactobacillus acidophilus pelo API 50CHL). As demais foram identificadas até o nível de espécie, 63% com o mesmo resultado do API 50CHL e 37% com resultados discordantes. A discordância concentrou-se nas culturas identificadas pelo API 50CHL como Leuconostoc mesenteroides (subsp. cremoris e lactis), Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus e Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus. As culturas com resultados concordantes concentraram-se naquelas identificadas pelo API 50CHL como Lactobacillus rhamnosus e Lactobacillus paracasei subsp. paracasei., enquanto os discordantes concentraram-se naquelas identificadas pelo API 50CHL como Leuconostoc, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus e Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis. Uma cepa de Bifidobacterium bifidum (KCTC 3440) foi corretamente identificada pelo Riboprinter e 1 cepa de Bifidobacterium subtile (ATCC 27537) foi erroneamente identificada como Enterococcus faecium. Na avaliação da resistência ao pH, 36 culturas foram avaliadas e a maioria apresentou completa perda da viabilidade após 1 a 3 hora em pH 1,0 (25 culturas ou seja 69,4%) ou 2,0 (16 culturas ou seja 44,4%). Em pH 3,0 a taxa de sobrevivência foi maior. Dois critérios foram utilizados para a conclusão. De acordo com o primeiro, são consideradas como potencialmente probióticas as culturas que apresentam 80% de sobrevivência (menos de 0,1 reduções) após 3 horas de permanência em pH 3 ou 1% de bile. De acordo com esse critério, nenhuma das culturas isoladas pode ser considerada probiótica. De acordo com o segundo critério, a resistência em pH 3 por 90 minutos e na presença de 0,1% de bile (24h), sem redução na contagem de viáveis, indica culturas potencialmente probióticas. De acordo com esse critério, duas culturas se mostraram potencialmente probióticas, uma de Lactobacillus rhamnosus e uma de Lactobacillus acidophilus. Na avaliação da resistência à bile, 29 culturas foram avaliadas e dois critérios utilizados para a conclusão. De acordo com o primeiro, culturas que apresentam taxa de 80% de sobrevivência (redução menor do que 0,1 log) na presença de 1,0% w/v de bile e pH 3,0 por 3 horas são resistentes. Segundo esse critério, nenhuma das 29 culturas isoladas de produtos mostrou resistência à bile. De acordo com o segundo, culturas que apresentem crescimento em presença de 1% de Oxgall, igual ou superior a 20% daquele obtido no controle, é considerada resistente (redução menor do que 0,7 log). Segundo esse critério, 24% ou seja, 7 das 29 culturas isoladas de produtos mostraram-se resistentes: uma cepa de L.acidophilus, uma de L.rhamnosus, uma de L.paracasei subsp. paracasei, uma de Streptococcus thermophilus, uma de Lactococcus lactis subsp. lactis e duas de Leuconostoc mesenteroides subsp cremoris. Na avaliação da produção de bacteriocinas, 32 culturas foram testadas, todas com resultados negativos. Na avaliação do antagonismo contra algumas espécies de bactérias patogênicas Gram negativas e Gram positivas, uma cepa de L.rhamnosus promoveu a inibição de Listeria e outra cepa de L.rhamnosus promoveu a inibição de Listeria e S. aureus. Não se observou inibição das bactérias Gram-negativas (E. coli e Salmonella)
Abstract: In the period between March and May 2001, a series of lactic cultures were isolated from 11 different brand products purchased from regular retail outlets located in Campinas (SP, Brazil). The sample types collected included 3 yogurts, 5 fermented milks, 2 dairy beverages and 1 symbiotic dry mix. The strains were identified by phenotypic and genotypic characteristics, in addition to being submitted to tests to investigate whether they fulfill the minimum prerequisites for microorganisms to be considered probiotic, i.e. resistance to pH, resistance to bile and bacteriocin production. Phenotypic identification (36 strains) using the API 50CHL Identification Kit (BioMérieux) evidenced the presence of the following species: 1o) Lactobacillus paracasei subsp. paracasei - isolated from 6 products, 2o) Streptococcus thermophilus - isolated from 4 products, 3o) Leuconostoc mesenteroides subsp.cremoris - isolated from 3 products, 4o) Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus and Lactococcus lactis subsp.lactis - isolated from 2 products each, 5o) Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Leuconostoc lactis and Lactobacillus curvatus subsp. curvatus - isolated from 1 product each. Identification on the basis of genotypic characteristics (41 strains, 36 of which isolated from products and 5 standard strains from a culture collection) using an automated ribotyping method RiboPrinter® microbial characterization system, (Dupont/Qualicon) produced the following results: two strains could not be typed by the Riboprinter method (identified as Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris by API 50CHL). Five strains were typed but not identified by the Riboprinter system (identified as Leuconostoc mesenteroides subsp. cremoris and Lactobacillus acidophilus by API 50CHL). Three strains were identified as Lactobacillus only to the genus level (identified as Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis and Lactobacillus acidophilus by API 50CHL). The remaining strains were identified to the species level, 63% with the same results as those obtained with API 50CHL and 37% with discordant results. Most of the discordant results between the two identification methods were generated by the strains identified by API 50CHL as Leuconostoc mesenteroides (subsp. cremoris and lactis), Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus. The strains with concordant results were predominantly those identified by API 50CHL as Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, while the strains producing discordant results were mainly those identified by API 50CHL as Leuconostoc, Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus and Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis. One strain of Bifidobacterium bifidum (KCTC 3440) was correctly identified by the Riboprinter system, whereas 1 strain of Bifidobacterium subtile (ATCC 27537) was incorrectly identified as Enterococcus faecium. Most of the 36 strains evaluated for resistance to pH showed complete loss of viability after 1 to 3 hours at pH 1,0 or 2,0. At pH 3,0 the survival rate was considerably greater. Two criteria were used for drawing conclusions relative to the probiotic potential of the strains. According to the first criterion, strains exhibiting an 80% survival rate (reduction factor smaller than 0.1 log) after exposure for 3 hours to pH 3 or 1% bile. Based on this criterion, none of the strains isolated could be considered probiotic. According to the second criterion, resistance to pH 3 for 90 minutes and in the presence of 0,1% bile (24h), without reduction in viable counts, indicates potentially probiotic strains. Based on this latter criterion, two strains were found to exhibit probiotic potential, one strain of Lactobacillus rhamnosus and another of Lactobacillus acidophilus. A total of 29 strains were evaluated for bile resistance and the conclusions of the test results produced were based on two different criteria. According to the first, strains presenting an 80% survival rate (reduction factor smaller than 0,1 log) after 3 hours exposure to 1,0% w/v bile and pH 3,0 are considered resistant. Based on this criterion, none of the 29 strains isolated was found to be resistant to bile. According to the second criterion, cultures presenting growth in the presence of 1% Oxgall, equal or greater than 20% of that produced by the control, are considered resistant (reduction factor smaller than 0,7 log). Based on this criterion, 7 (24%) of the 29 strains isolated from products were found to be resistant: one strain of L.acidophilus, one of L.rhamnosus, one of L.paracasei subsp. paracasei, one of Streptococcus thermophilus, one of Lactococcus lactis subsp. lactis and two strains of Leuconostoc mesenteroides subsp cremoris. Thirty-two strains were tested for bacteriocin production, all of which gave negative results. The results of the test performed to evaluate antagonism against some species of Gram-negative and Gram-positive pathogenic bacteria showed that one strain of L.rhamnosus inhibited Listeria, while another strain of L.rhamnosus inhibited both Listeria and S. aureus. No inhibition of Gram-negative bacteria (E. coli e Salmonella) was found
Doutorado
Tecnologia de Alimentos
Doutor em Tecnologia de Alimentos

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Zamudio, Malpartida Karin Lucía. "Lactobacilos nativos productores de exopolisacáridos de interés biotecnológico." Bachelor's thesis, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2005. https://hdl.handle.net/20.500.12672/1277.

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Abstract:

El objetivo de este estudio fue obtener lactobacilos nativos productores de exopolisacàridos de interés biotecnológico, que tengan una potencial utilidad en las diferentes industrias como bioespesantes naturales mejorando así las propiedades reológicas de los productos. Para lograr este objetivo se tomaron 30 muestras de alimentos fermentados y de fuentes naturales nativas obteniéndose 15 aislados productores de exopolisacáridos (EPS), luego se seleciono 5 aislados que produjeron la mayor cantidad de EPS. A los aislados seleccionados se les sometió a crecer a diferentes parámetros fisicoquímicos como: temperatura, pH y fuente de carbono, encontrándose que en algunos casos las condiciones óptimas de producción diferían de las de crecimiento. Asimismo los aislados fueron identificados por los métodos fenotípicos y bioquímicos tradicionales y por la prueba molecular denominada reacción en cadena de la polimerasa usando cebadores específicos para el espaciador intergénico entre los genes ribosómicos 16S y 23S. Del estudio se obtuvo que la cepa Q5-3 identificada como Lactobacillus plantarum, produjo 1.535 g/L de EPS y presento la mejor producción de EPS con glucosa a pH 5.5 y 30°C. La obtención de una cepa de Lactobacillus plantarum productora de EPS es un aporte valioso ya que le da un valor agregado a las distintas propiedades ya conocidas de este microorganismo tan utilizado en la industria alimentaria. -- Palabras clave: Bacterias Ácido Lácticas, lactobacilos, espaciador intergénico16S-23S, exopolisacárido.
-- The purpose of the present study was to obtain some original lactobacillus from Perú which had be producers of exopolysaccharide of biotechnology importance with a potential utility to industry as natural biothikeners, improving the rheological properties of the products. To achive this purpose, 30 samples were taken from fermented foods and native nature source, obtaining 15 isolated producers of exopolysaccharide (EPS). Then, 5 isolated were selected because they produced the higher quantity of EPS. All isolated selected were grown to several condition such as temperature, pH and source of carbone. It was found that in some cases the optimus condition of production was different from growth. The isolated were identified by biochemistry and phenotypic traditional methods. In addition, molecular tools as PCR (polimerase chain reaction) were also used to identify the isolated. It was found that the Q5-3 strain, identifying as Lactobacillus plantarum, produced 1.535 g/L of EPS. This strain had the best production of EPS (with glucose) as pH 5.5 and 30°C. The discovery of the Lactobacillus plantarum producer strain of EPS is an important contribution because it provides an addition value to this well-known microorganism. -- Key words: lactic acid bacteria, lactobacilli, intergenic spacer 16S-23S, exopolysaccharides.
Tesis

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Teixeira, Renato da Silva. "Avaliação do efeito de micro-organismos probiótics sobre Haemonchus contortus em ovinos." Universidade de São Paulo, 2011. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/97/97132/tde-22082013-162216/.

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Abstract:

A infecção por Haemonchus contortus é a principal parasitose que afeta a ovinocultura, provocando consideráveis perdas econômicas. Sua patogenia é caracterizada por uma intensa anemia, além de hipoproteinemia e reduções nos níveis séricos de ferro. Devido ao aumento da resistência desse parasito aos anti-helmínticos comumente encontrados no mercado, surge a necessidade de tratamentos alternativos, como por exemplo, o uso de produtos probióticos. Probióticos são alimentos funcionais que contém micro-organismos vivos, que ingeridos, com frequência e em doses adequadas trazem benefícios aos hospedeiros por meio de diferentes mecanismos de ação. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de uma preparação probiótica constituída de diferentes espécies de Lactobacillus (L. casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 e L. acidophilus ATCC 4536) na forma de \"pool\" sobre H. contortus em ovinos. Para tanto foram estudados 40 animais naturalmente infectados e distribuídos em 4 grupos e por 90 dias submetidos a diferentes tratamentos, a saber: Grupo A (controle): os animais não receberam nenhum tratamento, Grupo B os animais receberam em 3 dias por semana (2ª, 4ª e 6ª feiras) uma dose de 10 mL da preparação probiótica, Grupo C os animais receberam, no dia 0 dose única de Diantel® (1 mL para cada 10 Kg de PV) e Grupo D os animais receberam, no dia 0, dose única de Diantel® (1 mL para cada 10 Kg de PV) e após 30 dias passaram a receber em 3 dias por semana 10 mL da preparação probiótica, sendo interrompido no 60° dia. A cada 15 dias foram realizados exames parasitológicos para quantificação de OPG de fezes, hemograma completo, dosagem de proteínas e ferro. Os resultados demonstraram que os animais do Grupo B (probiótico) apresentaram uma eliminação de OPG de fezes significativamente menor (p<0,05) em relação aos demais grupos com uma eficácia de ação máxima de 66,3%, além dos animais se apresentarem em melhores condições fisiológicas. Maiores concentrações de hemoglobina, hematócrito e ferro também foram observadas nesse grupo, que podem ser explicadas pela ação imunomoduladora apresentada pelas espécies de Lactobacillus avaliadas, além de facilitar a absorção de nutrientes pelo animal hospedeiro. Em relação aos animais do Grupo C (Diantel®), após 45 dias ocorreu um aumento significativo (p<0,05) na contagem de OPG de fezes indicando uma maior atividade parasitária, levando a redução dos valores de hemoglobina e hematócrito. O uso do anti-helmíntico no Grupo D apresentou eficácia máxima de 90,3% após 15 dias. A inclusão da preparação probiótica, na dieta dos animais deste grupo após 30 dias, não contribuiu para se evitar a reinfecção, possivelmente devido a sensibilidade das cepas utilizadas ao princípio ativo closantel, tendo sido evidenciada a necessidade de uma nova dosagem do anti-helmíntico após 60 dias, como indicado pelo fabricante.
The infestation by Haemonchus contortus is the main parasitize that affects the ovine farms, causing a significantly economic loss. Its pathogenesis is characterized through an intense anemia, besides hypoproteinemia and blood iron level reduction. Due to the parasite resistance increasing to anti-helmintics usually found in the market, a need of an alternative treatment is evident, as example, the use of probiotics microorganisms. Probiotics are functional food that contains live microorganisms that when ingested in appropriate amount bring benefits to the hosts through different action mechanisms. Thus, this research had as purpose to study the effect of a probiotic preparation formed by a pool of Lactobacillus species (L. casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 e L. acidophilus ATCC 4536) on H. contortus in ovines. Therefore, 40 naturally infected animals were distributed in 4 groups and during 90 days they were submitted to different treatments: Group A (control): the animals did not receive any treatment, Group B: The animals received 3 times a week (2º, 4º, 6º) a 10 ml dose of the probiotic preparation, Group C: the animals received on 0 day, a Diantel single dose (1 ml /10 kg of LW) and in group D: the animals received on 0 day, a Diantel single dose (1 ml /10 kg of LW) and after 30 days they started receiving 3 times a week 10 ml of the probiotic preparation, ending at the 60th day. In each fifteen days parasitological exams were realized to check the amount of EPG of feces, complete blood exam, protein and blood iron analysis. The results showed that the animals in group B (probiotic) had \"EPG\" of feces elimination significantly minor (p 0,05) related to the other groups with a efficacy of 66,3% besides, the animals presented better physiological conditions. An increasing of hemoglobin, hematocrit and blood iron level were also observed in this group, which can be explained by the immunemodulator action presented by the Lactobacillus species, which contribute to the nutrients absorption by the host animal. In relation to group C animals (Diantel), is was observed, after 45 days, a significantly increasing (p 0,05) in the EPG counting, resulting in a major parasitary activity, decreasing the hemoglobin and hematocrit values. The usage of anti-helmintic in group D showed a efficacy of 90,3% after 15 days. The probiotic preparation administered to the animals of group D did not contribute to avoid the re-infestation, probably due to the strains sensibility regarding to the active principle (closantel) of Diantel, being necessary another anti-helmintic dose administration after 60 days as indicated by the manufacturer.

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Salado, Gersislei Antonia. "Viabilidade de implantação e sobrevivência de lactobacilos no trato intestinal de humanos adultos." Universidade de São Paulo, 1990. http://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11141/tde-20181127-155840/.

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Abstract:

Com o objetivo de estudar a viabilidade de implantação e a sobrevivência além da ação dos lactobacilos no trato intestinal de humanos adultos, foram realizados dois tipos de tratamento, com duração de 45 dias ininterruptos. Os indivíduos foram divididos em dois grupos designados grupo A e grupo B. O grupo A consumiu iogurte natural e o grupo B consumiu iogurte natural e leite in natura tipo C. Para avaliar a ação dos lactobacilos sobre a flora intestinal e sua permanência no trato digestivo, foram efetuadas análises microbiológicas periódicas das fezes dos indivíduos. Os resultados obtidos permitem concluir que os lactobacilos podem permanecer no intestino mesmo após a interrupção da ingestão de iogurte, embora em números inferiores aos encontrados durante o período experimental, e que somente com ingestão diária desse produto será possível sua persistência exercendo efeito controlador sobre a flora intestinal.
With the objective of studying the possibility of the implantation and subsequent survival - as well as the action - of lactobacilli in the adult human intestinal tract, two types of treatment were administered during 45 uninterrupted days. The individual were divided into two groups, designated as group A and group B. Group A consumed natural yogurt, while group B consumed natural yogurt plus ordinary milk (called type C, in Brazil). In order to evaluate the effect of the lactobacilli on the intestinal flora and the permanence of such in the digestive tract, microbiological analyses were effected upon the feces of the same individuals. The results obtained permit to conclud that the lactobacilli may remain in the intestine even after interrupting the yogurt intake, though in smaller numbers than previously encontered during the experimental period, and that only with the daily intake of the said product is any permanence made possible, as well as the exercise of any controlling effect upon the intestinal flora.

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Roselino, Mariana Nougalli [UNESP]. "Avaliação do simbiótico fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, à base de extratos aquosos de soja e de yacon (Smallanthus sonchifolius) no controle do desenvolvimento do Diabetes Mellitus." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2012. http://hdl.handle.net/11449/88579.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-22Bitstream added on 2014-06-13T18:09:46Z : No. of bitstreams: 1 roselino_mn_me_arafcf.pdf: 540685 bytes, checksum: 986926f9460c0c09aaf8db6dd51572ca (MD5)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Universidade Estadual Paulista (UNESP)
O presente trabalho avaliou os efeitos do simbiótico fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, à base de extratos de soja e de yacon produzidos em ratos com Diabetes mellitus, cuja indução foi feita quimicamente pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (50mg/kg de peso corporal). Os animais foram divididos em quatro grupos experimentais (n=10): I - animais não diabéticos que receberam somente ração (controle negativo); II - animais diabéticos que receberam somente ração (controle positivo); III – animais diabéticos que receberam ração + dose de 1 mL/Kg de peso corpóreo/dia do produto não fermentado a base de soja e yacon; IV – animais diabéticos que receberam ração + dose de 1 mL/Kg de peso corpóreo/dia do produto fermentado a base de soja e yacon. No produto em estudo foram quantificadas a viabilidade dos microrganismos probióticos e a concentração dos frutanos (FOS e inulina). O período experimental foi de 59 dias e os parâmetros avaliados foram: peso corpóreo dos animais, ingestão hídrica e alimentar, Coeficiente de Eficácia Alimentar (CEA), glicemia, enzimas aspartato aminotransferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT), triglicerídeos, colesterol, HDL, nHDL-C, gorduras epididimal e retoperitonial, músculos sóleo e extensor longo dos dedos, cortes histológicos de fígado, pâncreas e rim e, análise de biomarcadores de estresse oxidativo, TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) e DPPH (2,2 - difenil-1-picril de hidrazila). Não foi observada diferença entre os grupos que receberam os produtos não fermentado e fermentado quando comparado com o grupo de diabéticos que não recebeu tratamento, para consumo de água, ração e peso corporal. O mesmo foi observado para os parâmetros bioquímicos, exceto...
This study evaluated the hypoglycemic effects of synbiotic fermented with Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, based on soymilk and yacon produced in rats with Diabetes mellitus, whose induction was done chemically by intraperitoneal administration of streptozotocin (50 mg/kg body weight). The rats were divided into four groups (n=10): I – non diabetic animals that received only chow diet (negative control), II – diabetic animals that received only chow diet (positive control), III – diabetic animals that received chow diet + 1mL/kg body weight/day of unfermented product of soybean and yacon, IV – diabetic rats that received chow diet + 1mL/kg body weight/day of fermented product of soybean and yacon extracts. In the product under study were quantification viability of microorganisms of the probiotic and the concentration of fructans (inulin and FOS). The experiment was carried out for 59 days and the parameters were evaluated: body weight of animals, feed and water intake, Food Efficiency Ratio (FER), glucose, enzymes aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT), levels of triglyceride, cholesterol, HDL-C nHDL, epididymal and retoperitonial white adipose tissue, soleus and extensor digitorum longus and tissues liver, kidney and pancreas, and analysis of biomarkers of oxidative stress, TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) and DPPH (2,2 - diphenyl-1-picryl of hidrazila). No difference was observed between the groups that received unfermented and fermented products when compared to the diabetic group that not received treatment, for drinking water, feed intake and body weight. The same was observed for the biochemical parameters, except for fractions HDL-cholesterol and triglycerides. With respect to biomarkers there was... (Complete abstract click electronic access below)

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Díaz, Alvarado Tonatzin, and Salgado Ángel Alberto Rubio. "Desarrollo de un Producto de Yogurt Bebible a base de leche de soya con sabor cereza." Tesis de Licenciatura, Universidad Autónoma del Estado de México, 2016. http://hdl.handle.net/20.500.11799/65802.

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Abstract:

El yogurt es un alimento nutritivo, de fácil digestión, alto valor nutricional y con propiedades de regular la digestión. Se elaboró un yogurt bebible a base de leche de soya sabor cereza para ofrecer al consumidor las propiedades del yogurt y de la soya. Para lo cual, se realizaron dos tratamientos, T1 inóculo con yogurt comercial y T2 inóculo marca JOINTEC. Se realizaron análisis microbiológicos (Mesófilos Aerobios, Coliformes Totales, Coliformes Fecales y Psicrótrofos), análisis de viscosidad, análisis físicos (pH y color), análisis fisicoquímicos de calidad para yogurt (Proteína láctea, ácido láctico, grasa butírica y sólidos no grasos) y la viabilidad de Lactobacillus bulgaricus y Streptococcus thermophilus. Se determinó la aceptación de cada tratamiento, mediante un análisis sensorial con consumidores no entrenados (200 consumidores). En el cual se realizaron pruebas Dúo-Trío, comparación por pares, descriptiva cuantitativa y de preferencia. El mejor tratamiento fue el T2. El cual, tuvo mayor aceptación por los consumidores y cumple con las especificaciones microbiológicas, fisicoquímicas de calidad y de viabilidad de BAL para ser denominado como yogurt, en una vida de anaquel de 21 días sin conservadores.
Universidad Autónoma del Estado de México

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Junior, Fernando Eustáquio de Matos. "Avaliação da viabilidade e funcionalidade de microrganismos probióticos microencapsulados em partículas lipídicas recobertas por interação eletrostática de polímeros." Universidade de São Paulo, 2017. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74132/tde-23022018-110245/.

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Abstract:

A microencapsulação tem sido utilizada promissoramente para melhorar a viabilidade de probióticos. Porém, pouco se sabe sobre o impacto desta na manutenção da funcionalidade do probiótico in vivo. Este trabalho teve como objetivo avaliar duas cepas de lactobacilos, encapsular essas cepas por um sistema envolvendo partículas lipídicas recobertas por interação eletrostática de polímeros e avaliar o efeito da encapsulação na manutenção da capacidade imunomoduladora das cepas. Na primeira etapa do estudo L. rhamnosus 64 e L. paracasei BGP1 foram avaliados quanto à resistência à lisozima e aos fluidos gastrointestinais simulados, perfil de hidrofobicidade da parede celular, susceptibilidade a antibióticos, atividade antagonista contra patógenos e capacidade de utilização de prebióticos. Em etapa seguinte as cepas foram encapsuladas e as microcápsulas avaliadas quanto à morfologia, tamanho e distribuição de partículas, umidade, atividade de água e efeito do pH e temperatura em sua estabilidade. Para avaliar a susceptibilidade dos microrganismos ao processo de encapsulação e estresse tecnológico, investigou-se o impacto do efeito da homogeneização com Ultra-Turrax, tolerância à temperatura, salinidade, diferentes pH e fluidos gastrointestinais simulados na viabilidade das bactérias. A viabilidade dos microrganismos durante a estocagem também foi estudada. Por fim, avaliou-se a manutenção da capacidade imunomoduladora dos microrganismos microencapsulados por meio da dosagem de citocinas pró e anti-inflamatórias e determinação da capacidade protetora contra infecção de Salmonella entérica sorovar Typhimurium em modelo animal. Os microrganismos demonstraram resistência à lisozima, com taxas de sobrevivência superiores a 80%. O perfil de hidrofobicidade da parede celular, foi baixo, entre 8,47 e 19,19%. Demonstraram resistência apenas à vancomicina (35 µg) e eritromicina (15 µg). As duas cepas foram capazes de antagonizar o crescimento de Escherichia coli V517, Salmonella enteritidis OMS-Ca, Staphylococcus aureus 76 e Listeria monocytogenes ATCC 15313. Quanto à capacidade de utilização de prebióticos, os microrganismos apresentaram comportamentos inversos, utilizaram preferencialmente inulina, raftilose 95 e lactulose. Nos testes de resistência aos fluidos gastrointestinais simulados constatou-se declínio significativo de células viáveis, com subtração de até 3,37 log UFC/mL. As cápsulas obtidas apresentaram formato típico e tamanhos médios de 80,12 ± 1,89 e 83,92 ± 1,70 µm. Condições de pH extremos (1,5 e 9,0) e temperatura superior a 50 °C comprometeram a estabilidade das cápsulas. A encapsulação melhorou significativamente a tolerância dos microrganismos à altas concentrações de sal e elevação de temperatura. Além disso, favoreceu a resistência dos microrganismos frente aos fluidos gastrointestinais simulados. A estabilidade dos microrganismos durante o período de estocagem também foi favorecida, após 120 dias de estocagem a 7 e 25 °C a concentração de microrganismos viáveis permaneceu superior a 7,0 log UFC/g. Nos testes in vivo para avaliação da manutenção da capacidade de imunomodulação constatou-se através de dosagem de citocinas (IL-2, IL-6, IL-10 e TNF-α) e IgA secretora, que a encapsulação não alterou a resposta imunológica provocada pelas cepas estudas. Concluiu-se que os microrganismos apresentaram comportamento in vitro de acordo com o desejado para candidatos ao uso de probióticos. A microencapsulação foi bem-sucedida, proporcionando as duas cepas maior resistência frente às condições adversas e de estresse tecnológico.
Microencapsulation has been used successfully to improve the viability of probiotics microorganisms. The aim of this work was to evaluate two strains of lactobacilli, to encapsulate these strains by a system involving lipid particles coated by electrostatic interaction of polymers and to evaluate the effect of encapsulation in the maintenance of immunomodulatory capacity of these strains. In the first stage of the study L. rhamnosus 64 and L. paracasei BGP1 were evaluated for resistance to lysozyme and simulated gastrointestinal fluids, cell wall hydrophobicity profile, susceptibility to antibiotics, antagonist activity against pathogens and prebiotic utilization capacity. In the next step, the strains were encapsulated and the microcapsules evaluated regarding morphology, particle size and distribution, moisture, water activity and pH and temperature. The tolerance to temperature, salinity, different pH and simulated gastrointestinal fluids in the viability of the bacteria were also evaluated. The probiotics viability during the storage period was also studied. Finally, the maintenance of the immunomodulatory capacity of the encapsulated microorganisms was evaluated by means of the dosage of pro and anti-inflammatory cytokines and IgA. L. rhamnosus 64 and L. paracasei BGP1 demonstrated resistance to lysozyme, with survival rates above 80%. The hydrophobicity profiles of the cell wall were from 8.47 to 19.19%. Susceptibility to antibiotics also corroborated the literature, demonstrating resistance only to vancomycin (35 µg) and erythromycin (15 µg). The two strains were able to antagonize the growth of Escherichia coli V517, Salmonella enteritidis OMS-Ca, Staphylococcus aureus 76 and Listeria monocytogenes ATCC 15313. As far as the capacity of using prebiotics the two strains of lactobacilli presented inverse behaviors, they used preferably inulin, raftilose 95 and lactulose. In the tests of resistance to the simulated gastrointestinal fluids it was verified a significant decline of viable cells, with subtraction of up to 3.37 log CFU / mL, justifying the application of encapsulation technology. In the encapsulation step the capsules were produced with gum arabic, porcine gelatin and vegetable fat. The obtained capsules presented a typical format and average sizes of 80.12 ± 1.89 and 83.92 ± 1.70 µm. Extreme pH conditions (1.5 and 9.0) and temperature above 50 ° C compromised the stability of the capsules. The encapsulation significantly improved the tolerance of microorganisms to high salt concentrations and elevation of temperature. In addition, it favored the resistance of the microorganisms to the simulated gastrointestinal fluids. The stability of the microorganisms during the storage period was also favored, after 120 days of storage at 7 and 25 ° C the concentration of viable microorganisms remained higher than 7.0 log CFU / g. In the in vivo tests for evaluation of the maintenance of the immunomodulation capacity, the cytokines (IL-2, IL-6, IL-10 and TNF-α) and secretory IgA were determined, that encapsulation did not alter the immunological response by the strains of lactobacilli studied. It was concluded that the microorganisms presented in vitro behavior in accordance with the one desired for probiotic candidates. Microencapsulation was successful, giving both strains greater resistance to adverse conditions and technological stress.

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Souza, Aline Francisca de. "Estudo da viabilidade de microrganismos probióticos encapsulados em matriz polimérica natural contendo ingredientes prebióticos e fibras alimentares." Universidade de São Paulo, 2015. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/97/97132/tde-03122015-154309/.

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Abstract:

A saúde e o bem estar estão diretamente relacionados com a alimentação saudável. O consumo de alimentos funcionais como fibras, ingredientes prebióticos e probióticos pode promover diversos benefícios para a saúde, como a melhoria do funcionamento do organismo e a prevenção de diversas doenças. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo estudar o encapsulamento de Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20 em matriz polimérica natural constituída por alginato e farinhas de banana verde, maracujá, feijão branco, maçã e laranja. Para tanto, foi realizado planejamento fatorial 24 completo visando a identificação dos parâmetros que influenciam na eficiência do encapsulamento em diferentes matrizes poliméricas e na viabilidade celular do micro-organismo probiótico estudado. As variáveis independentes estudadas foram velocidade de agitação, volume de tween 80, alginato e farinhas funcionais. Os resultados demonstraram que a técnica de emulsificação utilizada apresentou alta eficiência de encapsulamento (acima de 80 %) das células de L. delbrueckii UFV H2B20 nas diferentes matrizes poliméricas estudadas. A análise dos resultados mostrou que os principais parâmetros que afetaram a microencapsulação de L. delbrueckii UFV H2B20 foram a velocidade de agitação e a concentração de alginato. Em condições de fluido gástrico simulado (FGS), somente as microcápsulas constituídas de alginato e farinha de banana verde ou maracujá apresentaram sobrevivência média de 60,5 % e 41,0 %, respectivamente, após 30 minutos de exposição ao FGS, sendo selecionadas para os estudos posteriores. A adição de inulina à matriz polimérica contendo alginato e farinha de banana verde ou maracujá apresentou eficiência de encapsulamento acima de 80 %, porém não conferiu proteção às células quando expostas a condições de FGS. Verificou-se também que após 28 dias de armazenamento, a 4°C ou em sorvete a -18°C, a sobrevivência das células de L. delbrueckii UFV H2B20 microencapsuladas em matriz contendo farinha de banana verde ou maracujá foi superior a 90 %. A adição de sacarose ou leite desnatado reconstituído na referida matriz não interferiu significativamente na proteção das células microencapsuladas quando armazenadas a 4° C ou em sorvete a -18°C. Estes resultados revelaram que as farinhas de banana verde e maracujá, quando associadas ao alginato de sódio, são promissoras para a microencapsulação de bactérias probióticas, nas condições do presente trabalho.
Health and wellness are directly related to the consumption of healthy foods containing functional ingredients such as fibers, pre- and probiotics, which promote many health benefits, regarding body functions and prevention of several diseases. Therefore, this work aimed to study the encapsulation of Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20, by emulsification technique, in natural polymeric matrices composed of alginate and flours of pulp of unripe banana, passion fruit husk, integral white beans, bagasse of apple and orange. The experiments were undertaken based on a 24 factorial design in order to identify the parameters that affect the encapsulation efficiency in different polymer matrices and microorganisms viability, as well. It was studied the effect of stirring speed, and concentrations of Tween 80, sodium alginate and the mentioned functional flours. The results showed that the emulsification technique showed high encapsulation efficiency (> 80%) of the Lactobacillus cells in the different polymer matrices evaluated. In addition, the main parameters that affected microencapsulation of L. delbrueckii UFV H2B20 included stirring speed and alginate concentration. Regarding the \"simulated gastric fluid\" (SGF) assays, microcapsules made of alginate, and flours of pulp of unripe banana or husk of passion fruit showed cell survival average than 60,5 % and 41,0 %, respectively, after 30 minutes of exposure to SGF, being selected for further studies. Although the addition of inulin to the polymeric matrix containing alginate and flour of unripe banana pulp or husk of passionfruit presented encapsulation efficiency higher than 80%, they did not show any protection effect to the cells when exposed to SGF. It was also showed, after 28 days of storage at 4 °C or in ice cream at -18 °C, that the cell survival of L. delbrueckii UFV H2B20 microencapsulated in matrices containing flours of unripe banana pulp or husk of passion fruit was higher than 90%. The addition of sucrose or reconstituted skim milk in these matrixes, as thermoprotector, did not interfere significantly in the protection of microencapsulated cells when stored at 4 °C or -18 °C. These results revealed that flours made of unripe banana pulp and husk of passion fruit, when combined with sodium alginate, represent a promising alternative for microencapsulation of probiotic bacteria under the conditions evaluated in this work.

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Lopes, Ângela Romero [UNESP]. "Produção de ácido lático por lactobacilos em diferentes meio de cultivo." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2008. http://hdl.handle.net/11449/94976.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-27Bitstream added on 2014-06-13T20:35:50Z : No. of bitstreams: 1 lopes_ar_me_rcla.pdf: 332770 bytes, checksum: e334997359c17b4bd92d43aaad7eeb65 (MD5)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
O ácido lático é produzido preferencialmente durante o metabolismo fermentativo de carboidratos por bactérias láticas (BAL). Esse processo metabólico anaeróbio gera 2 moles de ácido lático partindo-se de 1 mol de glicose. Procurando-se obtenção de ácido em meios de cultivo de baixo custo, foram avaliados 3 meios de cultivo: CSN a base de caldo de canade- açúcar, MRS modificado (2% de glicose) e o meio Padrão (4% sacarose). Para cada meio utilizou-se 4 Erlenmeyer’s de 250 mL sendo 1 deles o controle e os demais contendo as bactérias. Empregou-se após seleção prévia Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 e linhagem selvagem não identificada na condição estática (30 ± 2°C) e agitada (150 rpm, temperatura de 30 ± 2°C) por 72 h. Os meios foram enriquecidos com extrato de tomate em diferentes concentrações (0; 0,5 ; 2 e 4%). O ácido lático produzido foi quantificado enzimaticamente pelo Accutrend Lactate® e a acidez total por titulometria. Acompanhou-se o consumo da glicose pelo método do ADNS. Verificou-se que 34,35gL-1 de ácido lático foram obtidos em 72 h de fermentação agitada pela linhagem selvagem não identificada, no meio CSN 12 brix acrescido de 4% de extrato de tomate, sendo consumidos 16,1 gL-1 de glicose. A linhagem Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 produziu 27,90gL-1 de ácido lático em meio Padrão, contendo 0,5% de extrato de tomate, durante as 72h de cultivo.
The lactic acid is produced preferably during fermentative metabolism of carbohydrate for lactic acid bacteria (BAL). In this anaerobic metabolic process, two lactic acid molecules are produced from each molecule of glucose. In this study Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 and unidentified wild strain was assayed in three different culture media: modified MRS medium (2% glucose), CSN (sugar-cane juice supplemented with nutrients) and a standard medium (4% sucrose) with agitation or under stationary conditions, enriched with tomato extract (0; 0,5 ; 2 and 4%). The lactic acid produced was measured with the Accutrend Lactate® as well as titration method (verification of acidity); and glucose concentration was determined by ADNS method. The best strain for lactic acid production was unidentified wild strain, presenting 34,35 gL-1 of lactic acid in the CSN 12 brix medium enriched with 4% of tomato extract; 16,1 gL-1 of glucose was consumed, at 30 ± 2°C for 72h, under agitation at 150 rpm.

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Lopes, Ângela Romero. "Produção de ácido lático por lactobacilos em diferentes meio de cultivo /." Rio Claro : [s.n.], 2008. http://hdl.handle.net/11449/94976.

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Abstract:

Resumo: O ácido lático é produzido preferencialmente durante o metabolismo fermentativo de carboidratos por bactérias láticas (BAL). Esse processo metabólico anaeróbio gera 2 moles de ácido lático partindo-se de 1 mol de glicose. Procurando-se obtenção de ácido em meios de cultivo de baixo custo, foram avaliados 3 meios de cultivo: CSN a base de caldo de canade- açúcar, MRS modificado (2% de glicose) e o meio Padrão (4% sacarose). Para cada meio utilizou-se 4 Erlenmeyer's de 250 mL sendo 1 deles o controle e os demais contendo as bactérias. Empregou-se após seleção prévia Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 e linhagem selvagem não identificada na condição estática (30 ± 2°C) e agitada (150 rpm, temperatura de 30 ± 2°C) por 72 h. Os meios foram enriquecidos com extrato de tomate em diferentes concentrações (0; 0,5 ; 2 e 4%). O ácido lático produzido foi quantificado enzimaticamente pelo Accutrend Lactate® e a acidez total por titulometria. Acompanhou-se o consumo da glicose pelo método do ADNS. Verificou-se que 34,35gL-1 de ácido lático foram obtidos em 72 h de fermentação agitada pela linhagem selvagem não identificada, no meio CSN 12 brix acrescido de 4% de extrato de tomate, sendo consumidos 16,1 gL-1 de glicose. A linhagem Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 produziu 27,90gL-1 de ácido lático em meio Padrão, contendo 0,5% de extrato de tomate, durante as 72h de cultivo.
Abstract: The lactic acid is produced preferably during fermentative metabolism of carbohydrate for lactic acid bacteria (BAL). In this anaerobic metabolic process, two lactic acid molecules are produced from each molecule of glucose. In this study Lactobacillus delbrueckii 103.10.2 and unidentified wild strain was assayed in three different culture media: modified MRS medium (2% glucose), CSN (sugar-cane juice supplemented with nutrients) and a standard medium (4% sucrose) with agitation or under stationary conditions, enriched with tomato extract (0; 0,5 ; 2 and 4%). The lactic acid produced was measured with the Accutrend Lactate® as well as titration method (verification of acidity); and glucose concentration was determined by ADNS method. The best strain for lactic acid production was unidentified wild strain, presenting 34,35 gL-1 of lactic acid in the CSN 12 brix medium enriched with 4% of tomato extract; 16,1 gL-1 of glucose was consumed, at 30 ± 2°C for 72h, under agitation at 150 rpm.
Orientador: Dejanira de Franceschi de Angelis
Coorientador: Jonas Contiero
Banca: Marta Cristina Teixeira Duarte
Banca: Octavio Antonio Valsechi
Mestre

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Chaves, Maria Manoela Barata de Castro. "Estudo da microbiota vaginal de éguas com ênfase na pesquisa de lactobacilos /." Botucatu : [s.n.], 2011. http://hdl.handle.net/11449/98256.

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Abstract:

Orientador: Marco Antonio Alvarenga
Banca: Alexandre Secorun Borges
Banca: Eliane Melo Brolazo
Resumo: Na égua o ambiente uterino saudável não apresenta microflora, diferente da vagina onde se sabe existir uma flora vaginal rica em microrganismos não patogênicos. Muitas bactérias da flora vaginal normal podem ser deslocadas para o interior do útero, podendo ser esta a causa principal de endometrites em éguas doadoras de embriões. A presença de Lactobacillus spp é considerada importante na flora vaginal de mulheres e tem sido pouco investigada em éguas. O presente trabalho tem como objetivo estudar a flora vaginal de éguas, doadoras de embriões, determinar os principais microrganismos presentes, relacionar os achados microbiológicos vaginais e uterinos, assim como determinar a prevalência de Lactobacillus. No experimento 1 foram utilizadas 77 éguas doadoras de embrião, 33 foram coletadas amostras vaginais e uterinas e 77 apenas vaginais. O experimento 2 contou com dois grupos (36 éguas e 10 mulheres) de swabs vaginais sendo um para cultivo e isolamento de Lactobacillus e outro para extração do DNA e PCR. As bactérias predominantes na vagina foram: Streptococcus zooepidemicus (42%), Escherichia coli (25%), Streptococcus alfa hemolítico (15%) Candida (6%), Enterobacter spp (3%), Bacillus spp (3%), Streptococcus beta hemolítico (3%) e Pseudomonas (3%).. Das 33 amostras coletadas do útero de éguas somente 39% (n=12) não apresentaram crescimento bacteriano ou fúngico. Tendo sido Streptococcus zooepidemicus o mais frequentemente encontrado (26%), seguido de Escherichia coli (15%), Candida spp (9%), Streptococcus alfa hemolítico (6%) e Enterobacter (3%). Os microrganismos isolados da vagina e que estavam concomitantemente presentes no útero de éguas foram: Streptococcus zooepidemicus (21%), Escherichia coli (12%), Candida spp (9%) e Streptococcus alfa hemolítico (6%). Em 83,3% houve concordância entre as amostras negativas na vagina e no útero (p <0,05). Em 73,7% ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: Different from the vagina, were a rich microflora is present, the uterine environment is considered free of microorganisms. One possibility for the installation of endometritis in mares is the ascendent contamination from the vagina.The presence of Lactobacillus on vaginal flora is considered important in woman however there is few information on mares. The present experiment aimed to study the vaginal microflora of embryo donnor mares, to correlate the vaginal and uterine finds and also to determine the prevalence of Lactobacillus on vaginal envirioment. On experiment 1 a total of 77 mares were used and vaginal samples collected from 33 of these mares both vaginal and uterine samples were collected. On experiment 2 vaginal swabs from 36 mares and 10 women were collected for culture and isolation of Lactobacillus, DNA extration and PCR. The predominate bacteria isolated from the vagina were: Streptococcus zooepidemicus (42%), Escherichia coli (25%), Streptococcus alfa hemolítico (15%) Candida (6%), Enterobacter spp (3%), Bacillus spp (3%), Streptococcus beta hemolítico (3%) e Pseudomonas (3%). From 33 samples collected from the uterus only 39% (n= 12) did not show any microorganism on culture. Streptococcus zooepidemicus was the most frequent isolated microorganism (26%), followed by Escherichia coli (15%), Candida spp (9%), Streptococcus alfa hemolítico (6%) e Enterobacter (3%). When evaluated the microorganisms isolated from both vaginal and uterine samples Streptococcus zooepidemicus (21%), Escherichia coli (12%), Candida spp (9%) e Streptococcus alfa hemolytic (6%) were the most frequent isolated bacteria. The agreement between swabs taken from both uterus and vagina was 83.3% (p <0,05) for negative cultures and 73,7% for positive cultures (p <0,05). From 35 samples collected on group I Lactobacillus spp was isolated in only two (5,7%) eight (20%) samples showed positive ... (Complete abstract click electronic access below)
Mestre

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Damé-Teixeira, Nailê. "Efeito da redução do aporte nutricional na diversidade genotípica e nos fatores de virulência de bactérias cariogênicas isoladas de dentina cariada selada." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2015. http://hdl.handle.net/10183/130444.

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Abstract:

No tratamento de lesões profundas de cárie, a Remoção Parcial de Dentina Cariada (RPDC) e restauração tem sido proposta como alternativa conservadora para evitar perda de tecido dentário e exposição pulpar. Existe uma hipótese de que uma seleção de bactérias ocorre abaixo de restaurações devido a um acesso limitado de nutrientes. No entanto, há falta de conhecimento sobre a diversidade e potencial de virulência das bactérias cariogênicas residuais seladas abaixo de restaurações sobre dentina cariada. O objetivo deste estudo foi caracterizar Streptococcus mutans e lactobacilos isolados de dentina cariada antes e após o estresse nutricional por selamento da cavidade. S. mutans e lactobacilos foram obtidos por cultivo da dentina cariada de lesões cavitadas de quatro e seis pacientes, respectivamente. Duas amostras de dentina cariada foram coletadas e cultivadas por paciente: uma antes e outra após três meses de selamento da cavidade. Colônias de S. mutans e lactobacilos preditos foram selecionadas, isoladas e analisadas por coloração de Gram. Genes “housekeeping” foram utilizados na identificação da espécie (gtfB para S. mutans e pheS/rpoA/groEL/16SrRNA para lactobacilos) e a técnica de AP-PCR foi utilizada para genotipagem. A análise fenotípica (produção de ácido e de tolerância ao ácido) foi realizada. Um total de 48 isolados representativos de S. mutans foram analisados (31 antes e 17 após estresse nutricional por meio do selamento). O número de genótipos diferentes de S. mutans encontrado foi de nove e seis antes e após selamento, respectivamente. Pelo menos um dos genótipos encontrados antes do selamento foi também encontrado na dentina após o estresse nutricional por meio do selamento. Em relação aos lactobacilos, analisou-se 86 cepas, 41 antes e 45 após estresse nutricional. L. paracasei e L. rhamnosus prevaleceram e apenas quatro isolados não pertenciam a estas espécies. Um total de 27 e 15 genótipos de lactobacilos diferentes foram encontrados antes e após selamento, respectivamente. Não houve diferença entre isolados de S. mutans e lactobacilos de dentina cariada antes e após o estresse nutricional na produção de ácido ou tolerância ao ácido. L. paracasei apresentaram menor valor de pH em 48h de crescimento. Em conclusão, a diversidade genotípica diminuiu após o estresse nutricional, mas a virulência de S. mutans e lactobacilos permaneceu a mesma. L. rhamnosus foi selecionado após o estresse nutricional. Algumas espécies de lactobacilos apareceram após o selamento, sugerindo pressão seletiva no sítio antes do selamento pela alta disponibilidade de nutrientes. Mais estudos avaliando outras características de virulência são necessários para entender melhor a cariogenicidade das cepas residuais seladas abaixo de restaurações e para compreender a resistência de L. rhamnosus a este sítio.
A hypothesis exists that a selection of bacteria occurs underneath restoration due to a limited access of nutrients. However, there is a lack of evidence regarding their role in the progression of carious process beneath restorations after Partial Dentin Caries Removal. It still unclear if the diversity and the virulence potential of the sealed bacteria remain the same after sealing. The aim of this study was to characterize Streptococcus mutans and Lactobacillus species isolated from caries dentin before and after starvation stress by cavity sealing. S. mutans and lactobacilli were obtained by culture of carious dentin from four and six patients, respectively. Two carious dentin samples were collected and cultured per patient: 1st before and 2nd after three months of cavity sealing. Presumptive S. mutans and lactobacilli were selected, isolated and analyzed by Gram staining. Housekeeping genes sequencing were used to the species identification (gtfB for S. mutans and pheS/rpoA/groEL/16SrRNA for lactobacilli) and Arbitrary Primer-PCR (AP-PCR) was used for genotyping. Phenotypic analysis (acid production and acid tolerance) was performed. A total of 48 representative S. mutans isolates were genotyped (31 before and 17 after the sealing). The number of different genotypes identified was nine and six before and after sealing, respectively. At least one of the genotypes found before the sealing was also found on dentin after the sealing in all patients. Regarding lactobacilli, it was analyzed 86 strains, 41 before and 45 after starvation stress by sealing. L. paracasei and L. rhamnosus prevailed and only four isolates did not belong to these species. A total of 27 and 15 different genotypes were found before and after sealing, respectively. There was no difference between isolates from carious dentin before and after starvation stress, neither regarding acid production or acid tolerance, although L. paracasei showed lower pH value in 48 h of growth. In conclusion, genotypic diversity of S. mutans decreased after starvation stress, but the virulence traits of S. mutans remained unchangeable. L. paracasei and L. rhamnosus were the most prevalent species of this genus, besides L. rhamnosus was selected after starvation stress. There was a decreased genotypic diversity of lactobacilli at the strains level and an increased diversity of species in sealed carious dentin. More studies evaluating other virulence traits are necessary to better understand the cariogenicity of the residual strains underneath restorations and to understand the resistance of L. rhamnosus to this site.

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Cristóbal, Delgado Ruth Liliana, and Delgado Ruth Liliana Cristóbal. "Lactobacilos productores de bacteriocinas aislados de quesos artesanales provenientes de Lima y provincias." Bachelor's thesis, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2008. http://cybertesis.unmsm.edu.pe/handle/cybertesis/235.

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Abstract:

Con la finalidad de obtener bacterias ácido lácticas productoras de bacteriocinas se recolectaron 33 muestras de quesos artesanales provenientes de Lima y provincias y se aislaron 341 cepas de lactobacilos según los procedimientos establecidos por el Manual de Bergey. Las especies de lactobacilos aisladas con mayor frecuencia fueron Lactobacillus casei 56 % (191) y Lactobacillus plantarum 35.8 % (122). Sólo el 16.42 % (56/341) de los aislados presentaron actividad bacteriocinogénica frente a Lactobacillus acidophilus ATCC 4356. Los sobrenadantes de los cultivos bacteriocinogénicos se ajustaron el pH a 6.5 para descartar la acción de ácidos orgánicos, además se determinó el péroxido de hidrógeno por acción de la catalasa. La constitución bioquímica de las bacteriocinas presentes en los sobrenadantes fue determinada enzimáticamente utilizando pronasa E, a -amilasa y lipasa. El 53 % (30) de las bacteriocinas fueron de naturaleza lipoproteica, 25 % (14) glicolipoproteica, 13 % (7) glicoproteica y 9 % (5) solamente proteica. Por otro lado, los sobrenadantes fueron sometidos a tratamientos térmicos de 60, 80 y 100 °C, a pH 4, 7 y 9, y a temperaturas de conservación de 4, 15 y 32 °C y se encontró que la termoestabilidad fue de 60 a 80 °C, el pH óptimo de 4 a 7 y la temperatura óptima de conservación de 4 a 32 °C. Las bacteriocinas presentes en los sobrenadantes de los diferentes aislados inhibieron el crecimiento de cepas de Bacillus cereus UA05, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 10536, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 10708, Shigella sonnei ATCC 9290 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. Sin embargo, Listeria innocua UP01 fue resistente. El aislado identificado como Lactobacillus plantarum LM1 produjo la bacteriocina con los mejores parámetros fisicoquímicos experimentados y además presentó un amplio espectro de inhibición contra los microorganismos indicadores evaluados. Palabras Clave: bacterias ácido lácticas, bacteriocinas, lactobacilos, Lactobacillus plantarum, quesos artesanales
The aim of this study was to get bacteriocin – producing lactic acid bacteria. For the purpose of this study, thirty three samples of artisanal cheeses from Lima and provinieses were collected, and three hundred and forty one strains of lactobacilli were isolated according to the procedures established by Bergey’s Manual. The most frequently isolated species were Lactobacillus casei 56% (191) and Lactobacillus plantarum 35.8% (122). Only 16.42% (56/341) of the isolates showed bacteriocinogenic activity against Lactobacillus acidophilus ATCC 4356. The supernatants of bacteriocinogenic cultures were adjusted to pH 6.5 to rule out the action of organic acids, and it was determined the presence of hydrogen peroxide by the assay with catalase. The biochemical constitution of the bacteriocins present in the supernatants was determined using enzymatically pronase E, a - amylase and lipase. The 53% (30) of bacteriocins was of lipoproteinaceous nature, 25% (14) of glycolipoproteinaceous nature, 13% (7) of glycoproteinaceous nature, and 9% (5) only of proteinaceous nature. On the other hand, the supernatants were exposed to various heat treatments at 60, 80, and 100°C, to pH variation at 4, 7, and 9, and to storage temperatures at 4, 15 and 32°C, and it was found that the thermostability of bacteriocins was found from 60 to 80°C, the optimum pH was from 4 to 7, and the optimum storage temperature was from 4 to 32°C. The bacteriocins present in the supernatants of the different isolates inhibited the growth of Bacillus cereus UA05, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 10536, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 10708, Shigella sonnei ATCC 9290 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. However, Listeria innocua UP01was resistant. The isolate identified as Lactobacillus plantarum LM1 produced the bacteriocin with the best physicochemical parameters, and showed a broad spectrum of inhibition against the indicator microorganisms. Key words: Lactic acid bacteria, bacteriocins, lactobacilli, Lactobacillus plantarum, artisanal cheeses.
Tesis

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Cristóbal, Delgado Ruth Liliana. "Lactobacilos productores de bacteriocinas aislados de quesos artesanales provenientes de Lima y provincias." Bachelor's thesis, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2008. https://hdl.handle.net/20.500.12672/235.

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Abstract:

Con la finalidad de obtener bacterias ácido lácticas productoras de bacteriocinas se recolectaron 33 muestras de quesos artesanales provenientes de Lima y provincias y se aislaron 341 cepas de lactobacilos según los procedimientos establecidos por el Manual de Bergey. Las especies de lactobacilos aisladas con mayor frecuencia fueron Lactobacillus casei 56 % (191) y Lactobacillus plantarum 35.8 % (122). Sólo el 16.42 % (56/341) de los aislados presentaron actividad bacteriocinogénica frente a Lactobacillus acidophilus ATCC 4356. Los sobrenadantes de los cultivos bacteriocinogénicos se ajustaron el pH a 6.5 para descartar la acción de ácidos orgánicos, además se determinó el péroxido de hidrógeno por acción de la catalasa. La constitución bioquímica de las bacteriocinas presentes en los sobrenadantes fue determinada enzimáticamente utilizando pronasa E, a -amilasa y lipasa. El 53 % (30) de las bacteriocinas fueron de naturaleza lipoproteica, 25 % (14) glicolipoproteica, 13 % (7) glicoproteica y 9 % (5) solamente proteica. Por otro lado, los sobrenadantes fueron sometidos a tratamientos térmicos de 60, 80 y 100 °C, a pH 4, 7 y 9, y a temperaturas de conservación de 4, 15 y 32 °C y se encontró que la termoestabilidad fue de 60 a 80 °C, el pH óptimo de 4 a 7 y la temperatura óptima de conservación de 4 a 32 °C. Las bacteriocinas presentes en los sobrenadantes de los diferentes aislados inhibieron el crecimiento de cepas de Bacillus cereus UA05, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 10536, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 10708, Shigella sonnei ATCC 9290 y Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. Sin embargo, Listeria innocua UP01 fue resistente. El aislado identificado como Lactobacillus plantarum LM1 produjo la bacteriocina con los mejores parámetros fisicoquímicos experimentados y además presentó un amplio espectro de inhibición contra los microorganismos indicadores evaluados. Palabras Clave: bacterias ácido lácticas, bacteriocinas, lactobacilos, Lactobacillus plantarum, quesos artesanales
The aim of this study was to get bacteriocin – producing lactic acid bacteria. For the purpose of this study, thirty three samples of artisanal cheeses from Lima and provinieses were collected, and three hundred and forty one strains of lactobacilli were isolated according to the procedures established by Bergey’s Manual. The most frequently isolated species were Lactobacillus casei 56% (191) and Lactobacillus plantarum 35.8% (122). Only 16.42% (56/341) of the isolates showed bacteriocinogenic activity against Lactobacillus acidophilus ATCC 4356. The supernatants of bacteriocinogenic cultures were adjusted to pH 6.5 to rule out the action of organic acids, and it was determined the presence of hydrogen peroxide by the assay with catalase. The biochemical constitution of the bacteriocins present in the supernatants was determined using enzymatically pronase E, a - amylase and lipase. The 53% (30) of bacteriocins was of lipoproteinaceous nature, 25% (14) of glycolipoproteinaceous nature, 13% (7) of glycoproteinaceous nature, and 9% (5) only of proteinaceous nature. On the other hand, the supernatants were exposed to various heat treatments at 60, 80, and 100°C, to pH variation at 4, 7, and 9, and to storage temperatures at 4, 15 and 32°C, and it was found that the thermostability of bacteriocins was found from 60 to 80°C, the optimum pH was from 4 to 7, and the optimum storage temperature was from 4 to 32°C. The bacteriocins present in the supernatants of the different isolates inhibited the growth of Bacillus cereus UA05, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 10536, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 10708, Shigella sonnei ATCC 9290 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. However, Listeria innocua UP01was resistant. The isolate identified as Lactobacillus plantarum LM1 produced the bacteriocin with the best physicochemical parameters, and showed a broad spectrum of inhibition against the indicator microorganisms. Key words: Lactic acid bacteria, bacteriocins, lactobacilli, Lactobacillus plantarum, artisanal cheeses.
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Roselino, Mariana Nougalli. "Avaliação do simbiótico fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, à base de extratos aquosos de soja e de yacon (Smallanthus sonchifolius) no controle do desenvolvimento do Diabetes Mellitus /." Araraquara : [s.n.], 2012. http://hdl.handle.net/11449/88579.

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Abstract:

Orientador: Elizeu Antonio Rossi
Coorientador: Daniela Cardoso Umbelino Cavallini
Banca: Marla Simone Jovenasso Manzoni
Banca: Regina Celia Vendramini
Resumo: O presente trabalho avaliou os efeitos do simbiótico fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, à base de extratos de soja e de yacon produzidos em ratos com Diabetes mellitus, cuja indução foi feita quimicamente pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (50mg/kg de peso corporal). Os animais foram divididos em quatro grupos experimentais (n=10): I - animais não diabéticos que receberam somente ração (controle negativo); II - animais diabéticos que receberam somente ração (controle positivo); III - animais diabéticos que receberam ração + dose de 1 mL/Kg de peso corpóreo/dia do produto não fermentado a base de soja e yacon; IV - animais diabéticos que receberam ração + dose de 1 mL/Kg de peso corpóreo/dia do produto fermentado a base de soja e yacon. No produto em estudo foram quantificadas a viabilidade dos microrganismos probióticos e a concentração dos frutanos (FOS e inulina). O período experimental foi de 59 dias e os parâmetros avaliados foram: peso corpóreo dos animais, ingestão hídrica e alimentar, Coeficiente de Eficácia Alimentar (CEA), glicemia, enzimas aspartato aminotransferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT), triglicerídeos, colesterol, HDL, nHDL-C, gorduras epididimal e retoperitonial, músculos sóleo e extensor longo dos dedos, cortes histológicos de fígado, pâncreas e rim e, análise de biomarcadores de estresse oxidativo, TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) e DPPH (2,2 - difenil-1-picril de hidrazila). Não foi observada diferença entre os grupos que receberam os produtos não fermentado e fermentado quando comparado com o grupo de diabéticos que não recebeu tratamento, para consumo de água, ração e peso corporal. O mesmo foi observado para os parâmetros bioquímicos, exceto ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: This study evaluated the hypoglycemic effects of synbiotic fermented with Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, based on soymilk and yacon produced in rats with Diabetes mellitus, whose induction was done chemically by intraperitoneal administration of streptozotocin (50 mg/kg body weight). The rats were divided into four groups (n=10): I - non diabetic animals that received only chow diet (negative control), II - diabetic animals that received only chow diet (positive control), III - diabetic animals that received chow diet + 1mL/kg body weight/day of unfermented product of soybean and yacon, IV - diabetic rats that received chow diet + 1mL/kg body weight/day of fermented product of soybean and yacon extracts. In the product under study were quantification viability of microorganisms of the probiotic and the concentration of fructans (inulin and FOS). The experiment was carried out for 59 days and the parameters were evaluated: body weight of animals, feed and water intake, Food Efficiency Ratio (FER), glucose, enzymes aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT), levels of triglyceride, cholesterol, HDL-C nHDL, epididymal and retoperitonial white adipose tissue, soleus and extensor digitorum longus and tissues liver, kidney and pancreas, and analysis of biomarkers of oxidative stress, TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) and DPPH (2,2 - diphenyl-1-picryl of hidrazila). No difference was observed between the groups that received unfermented and fermented products when compared to the diabetic group that not received treatment, for drinking water, feed intake and body weight. The same was observed for the biochemical parameters, except for fractions HDL-cholesterol and triglycerides. With respect to biomarkers there was... (Complete abstract click electronic access below)
Mestre

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Moraes, Joyce Gomes de. "Constipação crônica funcional em crianças: alimentação e ocorrência de bifidobacterium lactobacilos na microbiota fecal." Universidade Federal de Pernambuco, 2014. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/12920.

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Submitted by João Arthur Martins (joao.arthur@ufpe.br) on 2015-04-10T15:12:38Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Joyce Gomes de Moraes.pdf: 1543049 bytes, checksum: 49ce32bd65ac7688e9a25b6740f8b854 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5)
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A Constipação Intestinal Crônica Funcional (CICF) é uma entidade nosológica complexa e multifatorial. Constitui a maior causa de constipação intestinal na população infantil, com frequência significativa em lactentes. Estudos mostram que crianças com CICF apresentam a microbiota alterada, sendo o baixo teor de fibras na dieta considerado como uma possível explicação para esse achado. O nosso objetivo foi: comparar crianças constipadas e não constipadas quanto à microbiota fecal, utilizando como modelo os gêneros Bifidobacterium e Lactobacillus; analisar o consumo de frutas, legumes, vegetais e guloseimas nos dois grupos de crianças e verificar se houve associação do tipo de parto, presença de aleitamento materno, prematuridade, história familiar de constipação e a presença de CICF. As crianças foram recrutadas no Centro de Saúde Antônio Luís de Souza (CSALS), em Camaragibe-PE. Foram considerados casos crianças entre seis e 36 meses de idade que preencheram os critérios de Roma III para CICF. O grupo comparativo tinha a mesma faixa etária. O grupo caso foi formado por 39 crianças e o comparativo, por 40 crianças. As mães das crianças responderam a formulários sobre eventos do pré-natal e pós-natal imediato, aleitamento e condições econômicas. Foi realizada avaliação nutricional e da ingestão alimentar das crianças, sendo a última por intermédio de um questionário de frequência alimentar. As crianças tiveram amostras de fezes coletadas e analisadas por SYBR® Green. Não houve diferença estatística entre o consumo de frutas, legumes, verduras e guloseimas entre os grupos. As crianças constipadas consumiram significativamente mais produtos lácteos (p> 0,001) quando comparadas às crianças não constipadas. Não houve diferença estatística quanto ao teor de Bifidobacterium por miligramas de fezes entre os grupos, as crianças constipadas apresentaram um teor significativamente menor de Lactobacillus por miligramas de fezes (p=0,015) quando comparadas às crianças não constipadas. Foi verificado ainda que entre as crianças constipadas uma maior freqüência de parto cesáreo, menor tempo de aleitamento materno e história familiar para constipação positiva.

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Barreto, Gisela Pizarro de Mattos. "Avaliação de meios de cultura para quantificação de lactobacilos e bifidobacterias e contagem destes microrganismos em produtos lacteos." [s.n.], 2003. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/256177.

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Abstract:

Orientador: Edir Nepomuceno da Silva
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-08-03T09:30:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barreto_GiselaPizarrodeMattos_M.pdf: 25533381 bytes, checksum: e84ba6aa84229a0b693c3922f10e2044 (MD5) Previous issue date: 2003
Resumo: Neste trabalho foi realizado um estudo sobre o comportamento de diferentes cepas de bactérias lácticas ( por exemplo: Lactobacillus acidophilus, L.casei, L. lactis, L. delbruekii subsp. bulgaricus, Streptococcus thermophilus) e de bifidobacterias, utilizando diferentes meios de cultura (MRS, MRS-maltose, MRSsalicina, HHD e LA), para avaliar a similaridade entre eles, a capacidade de recuperação de cada um e a capacidade de quantificar as diferentes cepas. Primeiramente verificamos o comportamento de cepas puras depois, de cepas em diferentes misturas e, por último, de cepas presentes em iogurte e leite fermentado comercializado no mercado brasileiro. Também foi realizado um estudo da viabilidade das bactérias lácticas, presentes em produtos lácticos, durante o armazenamento. De acordo com os resultados obtidos, os quatro meios de cultura se mostraram equivalentes ao MRS na capacidade de recuperação das cepas padrão em cultura pura. O meio de cultura HHD apresentou melhor desempenho em relação a capacidade de recuperação das células, na avaliação com as cepas em diferentes misturas e, presentes em iogurtes e leite fermentado. Através do estudo da viabilidade das bactérias lácticas, presentes nos produtos analisados, verificou-se que os prazos de validade dos produtos se mostraram adequados, do ponto de vista da contagem total de bactérias viáveis. Em relação à contagem de L.acidophilus, somente 62% apresentaram contagem de células viáveis, dentro do valor mínimo requerido de 106 UFC/mL. E, em relação à contagem de bifidobactéria, apenas um produto apresentou contagem dentro do valor mínimo requerido.
Abstract: This is a study about the behaviour of the different strains of lactic acid bacteria (eg: Lactobacillus acidophilus, L. lactis, L. delbruekií susp. bulgaricus, Streptococus thermophilus) and bifidobacteria, with different culture media (MRS, MRS- maltose, MRS -salicin, HHD eLA), in order to evaluate the similarity among them, the capacity of each one to recover and the capacity to enumerate different strains. Firstly we checked the behaviour of the pure strains then the strains in different mixtures and finally the strains existing in the yogurt and fermented milk that are commercialized in Brazilian market. We also study the viability of the lactic acid bacteria in yogurt during refrigerated storage. The results demonstrated that the four culture media were similary to the MRS in the capacity of recovering when the pure strain was checked. The culture media HHD was the best in the capacity of recovering with strains in different mixtures and with the strains existing in the yogurt and fermented milk. Through the study of the viability of the lactic acid bacteria in the products, it showed that the validity was adequate, at least, in the total counting of viable bacteria. However, in the counting of L. acidophilus, only 62% maintained viability of 106 UFC/mL (minimum level]. In The counting of bifidobactéria, only one product maintained viable cells with minimum leveI.
Mestrado
Mestre em Tecnologia de Alimentos

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Pina, Marcos Rogerio Rosa. "Avaliação da eficacia da escovação da lingua sobre a contagem de Estreptococos mutans e Lactobacilos da saliva." [s.n.], 1998. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/289679.

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Abstract:

Orientador: Alcides Guimaraes
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Made available in DSpace on 2018-07-23T08:43:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pina_MarcosRogerioRosa_M.pdf: 1813517 bytes, checksum: 04daec5a8c87d0faff9dbaa009d9b46d (MD5) Previous issue date: 1998
Resumo: Essa pesquisa foi desenvolvida com um grupo de 20 escolares, com 10 anos de idade, do município de Limeira. O estudo compreendeu duas fases. A primeira fase constou de 20 dias de escovação supervisionada da língua e a segunda, iniciada imediatamente após o término da primeira, constou de 20 dias de paralisação da escovação. Nenhuma modificação nas medidas de higiene oral pessoal foi executada a não ser a inclusão da escovação da língua, dividindo-se a mesma em 3 partes (lateral direita, porção central e lateral esquerda). Cada parte foi escovada com 20 movimentos, partindo da região posterior para a anterior, sem retroceder o movimento. Seguidamente à escovação, foi realizado um bochecho, por 5 segundos, com água de abastecimento público. As escovações não continham dentifrício. Para efeitos de padronização, uma escova dental (Oral B, n.o P-30) foi dada a cada um dos componentes do grupo no início da pesquisa. As amostras de saliva foram colhidas nos tempos 0, 20 e 40 dias de pesquisa para avaliações das quantidades de Unidades Formadoras de Colônias (U.F.C.) bacterianas por ml. Para tanto, utilizou-se de um teste simplificado, comercialmente conhecido pelo nome de "CARITEST SM" (para Estreptococos mutans) e "CARITEST LB" (para Lactobacilos). Os resultados obtidos para Estreptococos mutans ressaltam que, dos 20 pacientes estudados, 40% (08) apresentaram diminuição do número de colônias após 20 dias de escovação da língua, 40% (08) mantiveram seus valores iniciais e 20% (04) apresentaram valores maiores que os iniciais. Aos 40 dias do experimento, ou seja, 20 dias após a cessação da escovação da língua, pôde-se verificar que para 50% (10) dos pacientes houve um aumento de seus valores e os restantes 50% (10) mantiveram seus valores iniciais. Dessa mesma forma, verificou-se que, para Lactobacilos, dos 20 pacientes estudados, 30% (06) apresentaram diminuição do número de colônias após 20 dias de escovação da língua, 55% (11) permaneceram nos seus valores iniciais e 15% (03) apresentaram valores maiores que os iniciais. Aos 40 dias do experimento, ou seja, 20 dias após a cessação da escovação da língua, chegou-se a conclusão que para 60% (12) dos pacientes houve um alimento de seus valores, 30% (06) mantiveram seus valores iniciais e 10% (02) apresentaram valores menores que os iniciais
Abstract: This research has been developed with a school group of 20, in the 10 year-old age group, within Limeira City. The study has had two phases. The first consisted of 20 days of supervised brushing of the tongue and the second, of 20 days of nonbrushing, and, the second phase has begun immediately after end of the first one. No modification at the personal oral hygiene measurement has been executed unless the inclusion of the tongue brushing, wich was accomplished in such a way that it has been divided in 3 parts (lateral right, central portion and lateral left). Each part has been brushed with 20, movements from the posterior area to the previous one, without going back the movement. Afterwards, a rinsing was accomplished, for 5 seconds, with the public provisioning water. The brushing didn't contain toothpaste. For standardization effects, a toothbrush (Oral B, n° P-30) was given to each one of the components of the group in the beginning of the research. The saliva samples were picked in the times 0, 20 and 40 days of research for evaluations of the amounts of Colonies Formated Unit (C.F.U.) bacteria for ml. For so much, it was used of na easy test, wellknown commercially for "CARITEST SM' (for Streptococcus mutans) and "CARITEST LB" (for Lactobacilli). The results obtained for Streptococcus mutans, have stood out that, of the 20 studied patients, 40% (08) have presented the number of colonies decrease after 20 days of tongue brushing, 40% (08) have stayed within of their own values and 20% (04) have presented larger values than the previous ones. To the 40 days of the experiment, that is to say, 20 days after the ceasing of tongue brushing, it ean be verified that for 50% (10) of the patients there has been an increase o(their values and the remaining ones 50% (10) have been within of their own values. Thus, it ean be verified that, for Lactobacilli, of the 20 studied patients, 30% (06) have presented the number of colonies decrease after 20 days of tongue brushing, 55% (11) have stayed within of their own values and 15% (03) have presented larger values than the previous ones. To the 40 days of the experiment, that is to say, 20 days after the ceasing of the tongue brushing, it can be verified that for 60% (12) of the patients there has been an increase of their values, 30% (06) have been within of their own values and 10% (02) have presented smaller values than the previous ones
Mestrado
Fisiologia e Biofisica do Sistema Estomatognatico
Mestre em Odontologia

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Paiva, Igor Moura de. "Caracterização estrutural e avaliação da capacidade imunomodulatória de exopolessacarídeos produzidos por lactobacilos isolados de Kefir." Universidade Federal de Minas Gerais, 2013. http://hdl.handle.net/1843/BUOS-96DG2X.

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Abstract:

Kefir grains are characterized as an exopolysaccharide matrix, where a symbiotic community of bacteria and yeast are firmly embedded. The beverage is obtained by fermentation of the microorganisms, which compose the grains, in several possible types of growth medium, highlighting cow milk and aqueous solutions of sucrose. Exopolysaccharide can present one or more types of monosaccharide residues, so that homopolysaccharide synthesis involves only onegene while heteropolysaccharide synthesis involves several genes. These molecules present numerous biotechnology applications even in industry as in biomedical area. In this present work, it was performed identification of exopolysaccharide-producing lactobacilli strains, molecular characterization ofthe genes of the enzymes involved in the polymerization of glycidic residues, as wellas structural characterization and evaluation of immunomodulatory capacity of these biopolymers. Among 53 isolated lactobacilli strains from kefir grains which were utilized, 16 were considered exopolysaccharide-producing strains when cultivatedin MRS medium containing sucrose. Nucleotide sequences of the glucosyltransferases from L. kefiranofaciens 1P3, L. satsumensis10P and 10P2 and L. parafarraginis12P presented high indentity among them and identity of 74-75% with a sequence from the GenBank regarding to same enzyme of a L. hilgardii strain which also were isolated from kefir grains. The five exopolysaccharides which were characterized structurally presented only glucose in their polymeric chain and bound (1,6) e (1,4) in the proportions 92 and 8% respectively, being identified as dextrans (1P3, 10P, 10P2, 12P e 19U) and their molecular weight were greater than 500 KDa. T o evaluate the immunomodulatory capacity of the exopolysaccharides, mice treated with dextrans 1P3, 10P and 10P2 were compared with mice treated with saline. Their immunomodulatory effects under small intestine of the animals were evaluated by IgA production and by expression of the cytokines IL-5,IL-6, IL-10, IL-12p40, IL-17, IFN-, TGF-and TNF-. All dextrans stimulated an increase significant in the production of IgA. Animals which received dextran 1P3 presented reduced production of IL-10 and TGF-, whereas those which received dextran 10P2 had theexpression of TNF- increased.
Os grãos de Kefir são caracterizados por uma matrizexopolissacarídica que abriga uma complexa comunidade simbiótica de bactérias e leveduras. A bebida é obtida a partir da fermentação dos microrganismos, constituintes do grão, nos mais variados tipos de meio em que estes podem ser cultivados, destacando o leite bovino e soluções aquosas de sacarose. Os exopolissacarídeospodem apresentar um ou mais tipos de resíduos de monossacarídeos, de modo que a síntese dos homopolissacarídeos envolve apenas um gene enquantoa dos heteropolissacarídeos envolve vários genes. Estas moléculas apresentam inúmeras aplicações biotecnológicas tanto na indústria quanto na área biomédica. No presente trabalho foi realizada a identificação de cepas de lactobacilos produtores de exopolissacarídeos, a caracterização molecular dos genes das enzimas envolvidas na polimerização dos resíduos glicídicos, bem como a caracterização estrutural e avaliação da capacidade imunomodulatória destes biopolímeros. Dentre os 53 lactobacilos isolados de grãos de kefir que foram utilizados, 16 foram considerados produtores de exopolissacarídeo quando cultivados em meio MRS contendo sacarose. As sequências de nucleotídeo das glicosiltransferases de L. kefiranofaciens1P3, L. satsumensis10P e 10P2 e L. parafarraginis12P apresentaram alta identidade entre si e identidade de 74-75% com uma sequência do GenBank referente à mesma enzima de uma cepa de L. hilgardiique também foi isolada de grãos de kefir. Os cinco exopolissacarídeos que foram caracterizados estruturalmente apresentaram apenas glicose na sua cadeia polimérica e ligações (1,6) e (1,4) nas proporções de 92 e 8% respectivamente, sendo identificados como dextranos (1P3, 10P, 10P2, 12P e 19U) e a massa molecular dos mesmos foi superior a 500 KDa. Para avaliar a capacidade imunomodulatória dos exopolissacarídeos, camundongos tratados com os dextranos 1P3, 10P e 10P2 foram comparados com camundongos tratados com salina. Seus efeitos imunomoduladores no intestino delgado dos animais foram avaliados pela produção de IgA e pela expressão das citocinas IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p40, IL-17, IFN-, TGF- e TNF-. Todos os dextranos estimularam um aumento significativo na produção de IgA. Os animais que receberam dextrano 1P3 apresentaram produção reduzida de IL-10 e TGF-, enquanto os que receberam dextrano 10P2 tiveram aexpressão de TNF-aumentada.

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Oliveira, Felipe Eduardo de. "Efeitos imunomoduladores e atividade anti-Candida de lactobacilos com propriedades probióticas em macrófagos e em modelo invertebrado de Galleria mellonella /." São José dos Campos, 2017. http://hdl.handle.net/11449/150201.

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Abstract:

Orientador: Luciane Dias de Oliveira
Co-orientadora : Mariella Vieira Pereira Leão
Banca: Ana Paula Candido Santos
Banca: Michelle Cardoso de Sousa
Banca: Graziella Nuernberg Back Brito
Banca: Estela Kaminagakura Tango
Resumo: Muitos produtos probióticos são compostos pela associação de lactobacilos no intuito de potencializar seu efeito benéfico. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a imunomodulação e atividade anti-Candida causada por diferentes combinações de suspensões probióticas em macrófagos e em Galleria mellonella. Lactobacillus rhamnosus (LR), L. acidophilus (LA), e L. paracasei (LP) foram suspendidos para obtenção das suspensões LR, LA, LP, LR+LA, LR+LP, LA+LP e LR+LA+LP. Foram utilizadas suspensões de Candida albicans (CA) ATCC 18804, C. krusei (CK) ATCC 6258 e C. glabrata (CG) ATCC 9030. Macrófagos de camundongo (RAW 264.7) foram ativados por cada suspensão de lactobacilos e desafiados por cada uma das cepas fúngicas. Foram investigadas taxa de fagocitose, produção de citocinas e óxido nítrico e a viabilidade celular. A melhor suspensão probiótica para cada cepa fúngica seria usada nos testes in vivo, com G. mellonella, no entanto, devido à baixa virulência das espécies não-albicans, os testes in vivo prosseguiram com CA e LR. Duas cepas clínicas de CA foram acrescentadas: 21 e 60. Suspensões de LR foram injetadas na hemolinfa das larvas 24 h antes do desafio com as cepas fúngicas. Foram determinadas curva de sobrevivência, contagem de UFC/mL das cepas de C. albicans e de hemócitos. Os resultados foram analisados estatisticamente de acordo com a distribuição normal (ANOVA e Tukey ou Kruskal-Wallis e Dunn) e a curva de sobrevivência pelo teste de Log-rank (Mantel-Cox), p<0,05. As ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: Many probiotic products are composed by association of lactobacilli in order to potentiate their beneficial effect. Therefore, the objective of this study was evaluating the immunomodulation and anti-Candida activity caused by different combinations of probiotic suspensions in macrophages and in Galleria mellonella. Lactobacillus rhamnosus (LR), L. acidophilus (LA) and L. paracasei (LP) were suspended to obtain the suspensions LR, LA, LP, LR + LA, LR + LP, LA + LP and LR + LA + LP. Suspensions of Candida albicans (CA) ATCC 18804, C. krusei (CK) ATCC 6258 and C. glabrata (CG) ATCC 9030 were used. Mouse macrophages (RAW 264.7) were activated by each suspension of lactobacilli and then challenged by each fungal strain. Phagocytosis, cytokine and nitric oxide production and cell viability were investigated. The best lacobacilli suspension for each fungal strain would be used in the in vivo assays with G. mellonella, however, because of low virulence of the non-albicans species, in vivo tests were performed with CA and LR. Two clinical strains of CA were added: 21 and 60. LR suspensions were injected into the haemolymph of the larvae 24 h before challenging with fungal strains. Survival curve, CA strains CFU/mL counting and hemocytes were determined. The results were statistically analyzed according to their normal distribution (ANOVA and Tukey or Kruskal-Wallis and Dunn) and the survival curve by Log-rank test (MantelCox), p <0.05. The best suspensions for CA, CK and CG were LR (which obtained the best results in the cytokine profile), LP and LA (which obtained the best results on phagocytosis), respectively. In G. mellonella, LR suspension increased percentage survival and hemocyte counting and decreased CFU/mL counting in all groups, with statistically significant differences in the results. Thus, it can be concluded that the suspensions of lactobacilli have ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Doutor

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Vistoso, Monreal Anette Paulina. "Efecto del consumo de leche enriquecida con probióticos lactobacilos, en la incidencia de lesiones de caries en niños preescolares." Tesis, Universidad de Chile, 2013. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/130016.

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Abstract:

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista
La caries dental es una enfermedad crónica multifactorial que afecta a niños y adultos, tanto a la dentición temporal como a la definitiva. Es un problema de salud pública y es considerada como la enfermedad crónica más prevalente en niños. Es producida por la interacción de diversos factores, como las bacterias presentes en el biofilm, una alta dieta en hidratos de carbono, y factores del huésped, como las características de los dientes y de la saliva. Todo esto influido por las condiciones de vida de las personas que se conocen como los determinantes sociales de la salud.La caries dental en el grupo de preescolares e presenta generalmente en una forma particular denominada Caries Temprana de la Infancia (CTI), asociada a la presencia de Streptococcus mutans en el biofilm. Los probióticos son microorganismos vivos que al ser administrados en cantidades adecuadas, confieren beneficios al huésped. Estudios in vitro y clínicos apoyan la idea de que las bacterias probióticas tienen efectos protectores en la salud oral y que una ingesta regular de ellos disminuye el número de streptococci cariogénicos en saliva. Por lo que al administrar especies como Lactobacillus rhamnosus en vehículos lácteos disminuirían los niveles de Mutans Streptococci (Streptococcus mutans y Streptococcus sobrinus) salivales en niños a corto plazo. El objetivo de este estudio es establecer si existen diferencias, en la prevalencia e incidencia de nuevas lesiones de caries, entre preescolares que consumen leche enriquecida con Lactobacillus rhamnosus LRH08 (probiótico) y aquellos que consumen leche sin probióticos, determinando la prevalencia e incidencia de caries a través del índice ceod al inicio y a los 12 meses del estudio. A este ensayo clínico controlado randomizado por conglomerados triple ciego de 18 meses de duración, se invitaron a participar a 520 preescolares entre 2 y 3 años de edad, que asistían a jardines infantiles de la Fundación INTEGRA. Se conformaron los grupos experimental y control, previo consentimiento informado de los apoderados. Se realizaron exámenes clínicos y microbiológicos al inicio y a los 10 meses de seguimiento.

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Oliveira, Felipe Eduardo de [UNESP]. "Efeitos imunomoduladores e atividade anti-Candida de lactobacilos com propriedades probióticas em macrófagos e em modelo invertebrado de Galleria mellonella." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2017. http://hdl.handle.net/11449/150201.

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Abstract:

Submitted by FELIPE EDUARDO DE OLIVEIRA (felipe.eoliveira@ymail.com) on 2017-04-07T14:51:33Z No. of bitstreams: 1 TESE FELIPE CORRIGIDA.pdf: 5002341 bytes, checksum: 809ad9cdf3b52f15db51efb7247aa675 (MD5)
Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T14:10:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 oliveira_fe_dr_sjc.pdf: 5002341 bytes, checksum: 809ad9cdf3b52f15db51efb7247aa675 (MD5)
Made available in DSpace on 2017-04-17T14:10:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 oliveira_fe_dr_sjc.pdf: 5002341 bytes, checksum: 809ad9cdf3b52f15db51efb7247aa675 (MD5) Previous issue date: 2017-02-08
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Muitos produtos probióticos são compostos pela associação de lactobacilos no intuito de potencializar seu efeito benéfico. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a imunomodulação e atividade anti-Candida causada por diferentes combinações de suspensões probióticas em macrófagos e em Galleria mellonella. Lactobacillus rhamnosus (LR), L. acidophilus (LA), e L. paracasei (LP) foram suspendidos para obtenção das suspensões LR, LA, LP, LR+LA, LR+LP, LA+LP e LR+LA+LP. Foram utilizadas suspensões de Candida albicans (CA) ATCC 18804, C. krusei (CK) ATCC 6258 e C. glabrata (CG) ATCC 9030. Macrófagos de camundongo (RAW 264.7) foram ativados por cada suspensão de lactobacilos e desafiados por cada uma das cepas fúngicas. Foram investigadas taxa de fagocitose, produção de citocinas e óxido nítrico e a viabilidade celular. A melhor suspensão probiótica para cada cepa fúngica seria usada nos testes in vivo, com G. mellonella, no entanto, devido à baixa virulência das espécies não-albicans, os testes in vivo prosseguiram com CA e LR. Duas cepas clínicas de CA foram acrescentadas: 21 e 60. Suspensões de LR foram injetadas na hemolinfa das larvas 24 h antes do desafio com as cepas fúngicas. Foram determinadas curva de sobrevivência, contagem de UFC/mL das cepas de C. albicans e de hemócitos. Os resultados foram analisados estatisticamente de acordo com a distribuição normal (ANOVA e Tukey ou Kruskal-Wallis e Dunn) e a curva de sobrevivência pelo teste de Log-rank (Mantel-Cox), p<0,05. As melhores suspensões para CA, CK e CG foram LR (com melhores resultados no perfil de citocinas), LP e LA (com melhores resultados sobre a fagocitose), respectivamente. Em G. mellonella, a suspensão de LR proporcionou aumento da percentagem de sobrevivência e do número de hemócitos e diminuição da contagem de UFC/mL em todos os grupos com diferenças estatisticamente significantes. Sendo assim, pode-se concluir que as suspensões de lactobacilos possuem potencial imunomodulador cepa dependente mas sua mistura não favorece essa qualidade. Além disso, possuem atividade anti-Candida, demonstrada pela diminuição na contagem de Candida.
Many probiotic products are composed by association of lactobacilli in order to potentiate their beneficial effect. Therefore, the objective of this study was evaluating the immunomodulation and anti-Candida activity caused by different combinations of probiotic suspensions in macrophages and in Galleria mellonella. Lactobacillus rhamnosus (LR), L. acidophilus (LA) and L. paracasei (LP) were suspended to obtain the suspensions LR, LA, LP, LR + LA, LR + LP, LA + LP and LR + LA + LP. Suspensions of Candida albicans (CA) ATCC 18804, C. krusei (CK) ATCC 6258 and C. glabrata (CG) ATCC 9030 were used. Mouse macrophages (RAW 264.7) were activated by each suspension of lactobacilli and then challenged by each fungal strain. Phagocytosis, cytokine and nitric oxide production and cell viability were investigated. The best lacobacilli suspension for each fungal strain would be used in the in vivo assays with G. mellonella, however, because of low virulence of the non-albicans species, in vivo tests were performed with CA and LR. Two clinical strains of CA were added: 21 and 60. LR suspensions were injected into the haemolymph of the larvae 24 h before challenging with fungal strains. Survival curve, CA strains CFU/mL counting and hemocytes were determined. The results were statistically analyzed according to their normal distribution (ANOVA and Tukey or Kruskal-Wallis and Dunn) and the survival curve by Log-rank test (Mantel-Cox), p <0.05. The best suspensions for CA, CK and CG were LR (which obtained the best results in the cytokine profile), LP and LA (which obtained the best results on phagocytosis), respectively. In G. mellonella, LR suspension increased percentage survival and hemocyte counting and decreased CFU/mL counting in all groups, with statistically significant differences in the results. Thus, it can be concluded that the suspensions of lactobacilli have immunomodulatory potential strain-dependent but their association does not favor this quality. Besides, they showed anti-Candida activity, demonstrated by the decrease of Candida counting.

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Nobre, Michelângela Suelleny de Caldas. "Influência da adição de diferentes culturas de lactobacilos sobre as características de soro de queijo de cabra tipo coalho atomizado (pó) reconstituído fermentado." Universidade Estadual da Paraíba, 2015. http://tede.bc.uepb.edu.br/tede/jspui/handle/tede/2482.

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Abstract:

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2016-08-30T12:54:32Z No. of bitstreams: 1 PDF - Michelangela Suelleny de Caldas Nobre.pdf: 1299620 bytes, checksum: 913e06322c3ba929d99335a5d289dcea (MD5)
Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2016-08-31T18:13:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Michelangela Suelleny de Caldas Nobre.pdf: 1299620 bytes, checksum: 913e06322c3ba929d99335a5d289dcea (MD5)
Made available in DSpace on 2016-08-31T18:13:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Michelangela Suelleny de Caldas Nobre.pdf: 1299620 bytes, checksum: 913e06322c3ba929d99335a5d289dcea (MD5) Previous issue date: 2015-08-24
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq
The goat milk whey is a by-product of cheese production and often discharged without any kind of treatment as effluent, becoming a source of pollution. Instead, the use of whey to produce dairy drinks has been a very attractive option, remarkably because of its nutritional value. Probiotic cultures contain microorganisms that bring health benefits to the host by improving its intestinal balance, and they can be used in fermented beverages. This study aimed to evaluate the influence of different potential probiotic lactobacilli cultures on the physicochemical and microbiological features, and also on the pattern of protein degradation on reconstituted and fermented goat Coalho Cheese whey powder. The fermentation process was performed in four trials, C1, C2, C3 and C4, added, respectively, of Lactobacillus casei BGP93, Lactobacillus paracasei BGP1, L. paracasei and Lactobacillus rhamnosus LPC37 LR32, all of them also added of Streptococcus thermophilus TA40 as starter culture. Titratable acidity, pH values, and viability of both S. thermophilus and Lactobacillus sp. were monitored in the reconstituted whey after adding cultures before fermentation (TI), after fermentation (TF), and after 1 (D1) and 7 (D7) days of storage at 4 °C. The use of near infrared spectroscopy (NIR) was evaluated as an alternative method for the determination of Lactobacillus sp. populations. The analyses of proteolysis by the method o-phthaldialdehyde (OPA), ultrafast reversed phase high-performance liquid chromatography (RP- UFLC) and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS- PAGE) were performed to evaluate the protein degradation in samples throughout the processing and storage period. The whey added of L. rhamnosus (C4) obtained the lowest pH (4.83) and the highest acidity (lactic acid 0.637g / 100 g) after 7 days of storage. The viability of Lactobacillus sp. in all trials (C1, C2, C3 and C4) obeyed the Brazilian criteria for probiotic foods, remaining above 9 log CFU in the recommended daily serving portion (200 ml). The calibration procedure for Lactobacillus sp. values in NIR analysis was adequate; however, it is required additional samples of each trial to improve the performance of calibration models and the construction of prediction models to be performed in future studies. The protein content was around 25 mg/g in all treatments over all sampling periods and, therefore, no significant difference between them was verified (p > 0.05). The chromatograms of the reconstituted whey without addition of cultures showed differences from those obtained for the TI, TF, D1 and D7 sampling periods in all trials, probably due to the thermal treatment of samples prior to the addition of cultures. The degree of proteolysis did not differ significantly between treatments (p > 0.05); however, according with the analysis of all the results, including electrophoresis and chromatography data for the C1 trial, in which low molecular weight fraction was formed, there was a trend towards of higher proteolytic activity in goat cheese whey added of the probiotic culture L. casei BGP93.
O soro caprino é um subproduto da produção queijeira e muitas vezes descartado sem nenhum tratamento como efluente, tornando-se uma fonte de poluição. Como alternativa, a utilização de soro de queijo para a produção de bebidas lácteas tem sido uma opção muito atraente, notadamente devido ao seu valor nutricional. Culturas probióticas são constituídas de microrganismos que conferem benefícios à saúde do hospedeiro, melhorando seu equilíbrio intestinal, podendo ser utilizadas em bebidas fermentadas. Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência de diferentes culturas de lactobacilos com potencial probiótico sobre as características físico-químicas, microbiológicas e sobre o padrão de degradação proteica de soro de queijo de cabra tipo coalho em pó reconstituído fermentado. O processo de fermentação foi realizado em quatro tratamentos, C1, C2, C3 e C4, adicionados, respectivamente, das culturas de Lactobacillus casei BGP93, Lactobacillus paracasei BGP1, L. paracasei LPC37 e Lactobacillus rhamnosus LR32, todos eles também adicionados de Streptococcus thermophilus TA40 como cultura starter. Foram monitorados os valores de pH, acidez titulável, S. thermophilus e Lactobacillus sp. no soro reconstituído após a adição das culturas antes da fermentação (TI), depois da fermentação (TF), e após um (D1) e sete (D7) dias de armazenamento a 4 °C. Foi avaliado o uso da espectroscopia de infravermelho próximo (NIR) como método alternativo para a determinação de populações de Lactobacillus sp. As análises de grau de proteólise pelo método o-ftaldialdeído (OPA), cromatografia líquida ultrarrápida de alta eficiência em fase reversa (RP-UFLC) e eletroforese em gel de poliacrilamida-dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) foram realizadas para avaliar a degradação proteica nas amostras ao longo do processamento e armazenamento. O soro contendo o microrganismo L. rhamnosus (C4) foi o que obteve pH mais baixo (4,83) e acidez mais alta (0,637g de ácido lático/100 g) após 7 dias de armazenamento. A viabilidade de Lactobacillus sp. em todos os tratamentos (C1, C2, C3 e C4) obedeceram aos critérios nacionais para alimentos probióticos, mantendo-se acima de 9 log UFC na porção diária recomendada (200 ml). O método NIR mostrou-se adequado no método de calibração para os valores de Lactobacillus sp.; no entanto, faz-se necessária quantidade maior de amostras de cada tratamento para melhorar a performance dos modelos de calibração e na construção de modelos de predição a serem realizados em trabalhos posteriores. O teor proteico foi próximo de 25 mg/g em todos os tratamentos durante todos os períodos de amostragem e, portanto, sem diferenças significativas entre eles (p > 0,05). Os cromatogramas do soro reconstituído sem adição da cultura apresentaram diferenças em relação àqueles obtidos para os tempos TI, TF, D1 e D7 em todos os tratamentos, provavelmente devido ao tratamento térmico aplicado nas amostras antes da adição das culturas. O grau de proteólise não diferiu significativamente entre os tratamentos (p > 0,05); entretanto, pela análise do conjunto de resultados obtidos, incluindo os dados de cromatografia e eletroforese para o tratamento C1, no qual houve o aparecimento de frações com baixo peso molecular, verificou-se uma tendência de maior atividade proteolítica no soro contendo a cultura probiótica L. casei BGP93.

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Cobra, Paulo Falco. "Aplicações de ressonância magnética nuclear em estudos metabolômicos de processos biológicos." Universidade de São Paulo, 2016. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75135/tde-01022017-151437/.

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Abstract:

A RMN é uma das principais técnicas usadas no estudo de perfis metabólicos pois é uma técnica quantitativa, altamente reprodutível e não-seletiva. Desta forma, o objetivo desta tese foi a aplicação da RMN no estudo metabólico em diferentes processos biológicos. A primeira aplicação foi na análise do perfil metabolômico e metabonômico dos agentes causadores da leishmaniose. Para tal, foram analisados extratos celulares das espécies Leishmania major e Leishmania donovani e extratos destas espécies crescidas com os fármacos miltefosina e paromomicina. Os espectros de RMN de 1H foram analisados pelo programa ChenoMX e os espectros de RMN 2D pelo software TopSpin e as bases de dados HMDB e BMRB. Cerca de 50 metabólitos foram identificados, como a adenina, arginina, glutamina, glutamato, manose, isoleucina, leucina e tirosina. Técnicas quimiométricas como PCA, PLS-DA e heatmaps foram utilizadas para investigar os metabólitos responsáveis pela diferenciação das duas espécies bem como entre as culturas com e sem fármacos. O segundo estudo foi com o composto metilglioxal. A presença de metilglioxal em queijos contribui com o escurecimento e deterioração do sabor, mesmo em baixas temperaturas. Por esta razão, foram estudados os produtos da adição de metilglioxal em extrato de queijo parmesão e o comportamento de diferentes espécies de lactobacilos na presença e na ausência de metilglioxal em extrato de queijo parmesão. Os resultados permitiram um entendimento maior das reações envolvidas entre esta molécula e os componentes do queijo, o que ajudará encontrar alternativas para a resolução do problema e aumentar o tempo de prateleira do queijo. O terceiro estudo realizado foi sobre a produção de etanol a partir de biomassa lignocelulósica. O objetivo deste estudo foi modificar geneticamente uma espécie de lactobacilo para a produção de etanol e analisar a vinhaça de planta de etanol pós-fermentação com levedura. Os espectros de RMN de 1H e 1H-13C mostraram que as bactérias modificadas são eficientes na produção de etanol e que dois açucares foram erroneamente identificados por cromatografia como maltose e maltotriose quando na verdade eram trealose e arabinose. Por meio destes destes estudos mostrou-se parte das inúmeras aplicações que a RMN tem na metabolômica e que existem diversas ferramentas estatísticas disponíveis para auxiliar no estudo metabolômico.
NMR is one of the main techniques used in metabolic profile studies because it is a quantitative, highly reproducible and non-selective technique. Thus, the aim of this thesis was the application of NMR in metabolic studies of different biological processes. The first application was the analysis of the metabolomic and metabonomic profile of the causative agents of leishmaniasis. Cell extracts of the species Leishmania major and Leishmania donovani and extracts of these species grown with miltefosine and paromomycin drugs were analyzed. 1H spectra were analyzed by ChenoMX software and 2D spectra by TopSpin software and HMDB and BMRB databases. About 50 metabolites were identified, such as adenine, arginine, glutamine, glutamate, mannose, isoleucine, leucine and tyrosine. Chemometric techniques were used to investigate the metabolites responsible for the differentiation of the two species and between cultures with and without drugs. The second study was with methylglyoxal molecule. The presence of methylglyoxal in cheese contributes to browning and deterioration of flavor, even at low temperatures. For this reason, products of the addition of methylglyoxal in Parmesan cheese extract and the behavior of different species of lactobacilli in the presence and absence of methylglyoxal in Parmesan cheese extract were studied. The results allowed a better understanding of the reactions involved between this molecule and the components of the cheese, which will help find alternatives to solve the problem and increase the shelf life of the cheese. The third study was about the production of ethanol from lignocellulosic biomass. The objective of this study was to genetically modify a lactobacillus species to produce ethanol and analyze the post-fermentation thin stillage. NMR spectra showed that the modified bacteria are efficient in production of ethanol and that two sugars were erroneously being identified by chromatography as maltose and maltotriose when they actually were trehalose and arabinose. These studies showed part of the numerous applications that NMR has in metabolomics and that there are several statistical tools available to assist in metabolomic studies.

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[Orientador], Magali Soares dos Santos Pozza. "Análise da variabilidade genética, susceptibilidade a condições do trato gastrointestinal e fermentação de oligofrutose, inulina e goma acácia por isolados de lactobacilos." Universidade Estadual de Londrina. Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência de Alimentos, 2006. http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000118266.

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Abstract:

O Experimento I foi conduzido para comparar características fenotípicas e genéticas de lactobacilos isolados de fezes de crianças. Para identificação molecular, utilizou-se o RAPD (polimorfismo de DNA amplificado ao acaso). Foram isoladas 75 colônias, sendo pré-selecionados 30 isolados. Na análise de RAPD, verificou-se que os isolados agruparam-se em quatro clusters, sendo em um deles encontrada alta similaridade. O Experimento 2 foi conduzido para avaliar in vitro a capacidade de resistência dos 30 isolados a condições específicas do trato gastrointestinal, como resistência aos sais biliares, a acidez e tolerância ao fenol. Para fins comparativos, duas bactérias probióticas comerciais foram submetidas aos mesmos testes. Foram selecionados oito isolados resistentes aos sais biliares e que apresentaram comportamento diferenciado com relação a tolerância à acidez e fenol, entretanto todos os isolados cresceram na presença de uma concentração de 0,3 % de fenol. O Experimento 3 teve como objetivo verificar a fermentação de oligossacarídeos como também a resistência destas cepas a alguns antibióticos comumente utilizados em humanos. Neste experimento, foi utilizado o caldo MRS, substituindo-se a glicose por 1% de oligofrutose, inulina ou goma acácia. Para o antibiograma, empregou-se o método de difusão em placa. Os resultados obtidos evidenciaram que todas as cepas foram capazes de fermentar oligofrutose, inulina ou goma acácia em caldo MRS, permitindo a utilização em produtos simbióticos. Seis cepas foram sensíveis ao cloranfenicol e a tetraciclina e todos os isolados foram resistentes a estreptomicina, porém não foi determinado se tal resistência era intrínseca ou adquirida.
Three assays were carried out for this study. The aim of the first assay was to compare by genetic and phenotypic parameter the Lactobacillus strains isolated from infant feces. The RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA) technique was applied for molecular identification among seventy isolated colonies, and eight isolates were pre-selected. The RAPD technique results demonstrated that the strains grouped into four clusters, and a high similarity was verified in one of these clusters. The second assay was carried out to evaluate in vitro, the resistance of 30 strains to the specific gastrointestinal tract barriers, like bile salts, acidity and phenol tolerance. Two commercial probiotic bacteria were also compared in the same stress conditions. Eight strains were selected for bile salts resistance; however they demonstrated different levels of phenol and acidity tolerance, but they were able to grow in 0.3% phenol. The aim of the third assay was to verify the oligossacharides fermentation by eigth selected strains, as well as the resistance of these strains to antibiotics commonly used in humans. In this experiment, was used MRS medium, substituting the glucose by 1% of oligofructose, inulin or acacia gum. For the antibiogram, diffusion test was used. The obtained results evidenced that all strains were able to use oligofructose, inulin or acacia gum in MRS broth, allowing the use of those in symbiotic products. Six strains were chloramphenicol and tetracycline sensitive and all isolated were resistant to streptomycin, however it was not determined if these characteristics were intrinsic or acquired.

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Rodrigues, Marcela Zonta. "Obtenção de revestimentos comestíveis a base de pectina como veículo para micro- organismos probióticos e aplicação em cenoura e goiaba minimamente processadas." Universidade Federal de Viçosa, 2017. http://www.locus.ufv.br/handle/123456789/15956.

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Abstract:

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-12-21T11:38:46Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4243684 bytes, checksum: f5b9f5d1f1542cc767288674a7a4710f (MD5)
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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
As culturas probióticas estão disponíveis para o consumidor, principalmente, em produtos lácteos. Contudo o interesse pela incorporação destes micro-organismos em outras bases alimentares é crescente. As matrizes vegetais são boa alternativa para a incorporação destes micro-organismos, no entanto é necessário o desenvolvimento de diferentes técnicas para inserir as bactérias probióticas em vegetais. Esta pesquisa objetivou desenvolver revestimento comestível a base de pectina de baixa metoxilação para veicular micro-organismos probióticos em cenoura e goiaba minimamente processadas. Na primeira etapa do estudo, foi produzido o revestimento a base de pectina de baixa metoxilação, sendo os tratamentos controle e adicionados de bactérias probióticas (Lactobacillus acidophilus LA3, Lactobacillus plantarum (CH6072 e L286), Lactobacillus paracasei BGP1, Lactobacillus acidophilus LA3 em combinação com Lactobacillus plantarum (CH6072 e L286), Lactobacillus acidophilus LA3 em combinação com Lactobacillus paracasei BGP1 e Lactobacillus plantarum (CH6072 e L286) em combinação com Lactobacillus paracasei BGP1). Os revestimentos comestíveis foram avaliados quanto à sua estabilidade microbiológica (viabilidade e resistência às condições gastrointestinais simuladas in vitro das culturas probióticas e atividade antimicrobiana frente à Listeria innocua ATCC33090 e Escherichia coli ATCC11229), física (viscosidade, cor, índice de brancura e turbidez) e química (pH) durante 12 dias de armazenamento. Na segunda etapa do estudo, avaliou-se a aplicação do revestimento comestível em cenoura e goiaba minimamente processadas e a estabilidade dos produtos obtidos armazenados a 4 °C. Cenoura e goiaba minimamente processadas contendo os revestimentos comestíveis foram avaliadas quanto a qualidade microbiológica, viabilidade e resistência às condições gastrointestinais in vitro dos probióticos, microscopia eletrônica de varredura (MEV), perda de massa, firmeza, composição da cor, pH, acidez total titulável e teor de sólidos solúveis totais. O revestimento comestível apresentou-se como bom carreador de bactérias probióticas, além de alguns tratamentos apresentarem atividade antimicrobiana. A adição de bactérias probióticas ao revestimento comestível alterou (p<0,05) pH, cor, índice de brancura e turbidez. As bactérias probióticas apresentaram-se viáveis quando os revestimentos comestíveis foram adicionados as cenoura e goiaba minimamente processadas. A MEV mostrou que as bactérias probióticas apresentaram-se bem distribuídas por toda a superfície da cenoura e goiaba minimamente processadas revestidas. A adição do revestimento cometível às fatias de cenoura e goiaba minimamente processadas não alterou (p>0,05) a qualidade microbiológica e as características físicas e químicas dos produtos avaliados. Portanto, o revestimento comestível a base de pectina de baixa metoxilação contendo bactérias probióticas é uma boa alternativa para veicular estes micro-organismos, através dos vegetais minimamente processados, até o consumidor.
The probiotic cultures are available for the consumer especially in dairy products. However, the interest by the incorporation of these microorganisms in other food bases is growing. The vegetables matrices are a good alternative for the incorporation of these micro-organisms, it is necessary to the development of different techniques to deliver the probiotic bacteria to vegetables. The objective of this research was to develop low methoxylated pectin based edible coating to deliver probiotic microorganisms to minimally processed carrots and guavas. In the first stage of the study, low methoxylation pectin edible coating was produced, control treatment and addition of probiotic bacteria (Lactobacillus acidophilus LA3, Lactobacillus plantarum (CH6072 e L286), Lactobacillus paracasei BGP1, Lactobacillus acidophilus LA3 in combination with Lactobacillus plantarum (CH6072 e L286), Lactobacillus acidophilus LA3 in combination with Lactobacillus paracasei BGP1 e Lactobacillus plantarum (CH6072 e L286) in combination with Lactobacillus paracasei BGP1). The edible coatings were evaluated for their microbiological stability (viability and resistance to simulated in vitro gastrointestinal conditions of probiotic cultures and antimicrobial activity against Listeria innocua ATCC33090 and Escherichia coli ATCC11229), physical (viscosity, color, whiteness index and turbidity) and chemical (pH) for 12 days storage. In the second stage of the study, were evaluated the application of the edible coating in minimally processed carrots and guavas and the stability of the obtained products stored at 4 ° C. Minimally processed carrots and guavas containing the edible coatings were evaluated for microbiological quality, viability and resistance in vitro gastrointestinal conditions of probiotics, scanning electron microscopy (SEM), loss of mass, firmness, color composition, pH, titratable total acidity and total soluble solids content. The edible coating presented as a good carrier of probiotic bacteria, in addition to some treatments presenting antimicrobial activity. The addition of probiotic bacteria to the edible coating altered (p<0.05) pH, color, whiteness index and tubidity. Probiotic bacteria were viable when edible coatings were added to minimally processed carrots and guavas. SEM showed that probiotic bacteria were well distributed throughout the surface of minimally processed coated carrot and guava. The addition of the edible coating minimally processed carrot and guava did not modify (p> 0.05) the microbiological quality and the physical and chemical characteristics of the evaluated products. Therefore, the low methoxylation pectin edible coating containing probiotic bacteria is a good alternative for transference these microorganisms through minimally processed vegetables to the consumer.

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Jin, Su. "Physiological characteristics and applications of Lactobacillus pentosus strains in selected dairy products." AgroParisTech, 2010. http://pastel.archives-ouvertes.fr/docs/00/55/22/70/PDF/These_Su_JIN.pdf.

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Abstract:

Deux souches de Lactobacillus pentosus, Ind1 et Ind3, ont été isolées à partir de « Naigeda », un fromage traditionnel Chinois produit dans la région du Xinjiang. Les propriétés probiotiques de L. Pentosus étant peu connues, la présente étude a été conduite afin de déterminer si ces 2 souches, Ind1 et Ind3, sont susceptibles d’être utilisées comme probiotiques. Les propriétés physiologiques de L. Pentosus Ind1 et Ind3 ont fait l’objet d’essais in vitro afin de déterminer leur tolérance à l’environnement gastro-intestinal et leur adhérence à l’épithélium intestinal. Leurs propriétés de dégradation de 3 substances carcinogènes (phénol, p-crésol et indole ; concentrations comprises entre 50 et 150 µg/mL) ainsi que leur inhibition éventuelle par ces mêmes substances ont été étudiées. Les effets des 2 souches de L. Pentosus sur la microflore intestinale de souris, après administration orale de 109cfu/mL dans 0. 5mL de lait écrémé, ont été analysés. A cet effet, les populations de Lactobacilles, Bifidobactéries, Entérobacilles, Entérocoques et Clostridium perfringens, contenues dans les fèces des souris, avant, pendant et après leur alimentation en probiotiques, ont été considérées. Enfin, les capacités des 2 souches de L. Pentosus à produire de l’acide -amino butyrique ont été étudiées, et les conditions de milieu et de culture assurant la meilleure production définies. Les résultats montrent que les 2 souches de L. Pentosus, Ind1 et Ind3, présentent des taux de survie élevés : plus de 90 % en milieu acide et de 80% dans une solution de bile. Les aptitudes à l’adhérence sont souches dépendantes, avec pour Ind3 un potentiel similaire à celui de souches probiotiques reconnues (NCFM et Lp115). Ind1 et Ind3 ont également montré une bonne résistance aux substances carcinogènes (phénol, p-crésol, indole à 150 μg/mL). Enfin, ces 2 souches permettent un accroissement des concentrations de Lactobacilles et de bifidobactéries, dans le tractus intestinal des souris, tout en inhibant la croissance des Entérobacilles et de C. Perfringens. Ces résultats démontrent les aptitudes potentielles des deux souches de L. Pentosus étudiées pour une utilisation comme souches probiotiques au sein de régimes diététiques ou pour l’élaboration de produits laitiers fermentés
Two Lactobacillus pentosus strains, Ind1 and Ind3, were isolated from a traditional Chinese cheese product called Naigeda, collected from Xinjiang region of China. Since there is little information regarding the probiotic properties of L. Pentosus strains, this study was designed to provide more supporting data for L. Pentosus as a potential probiotic strain application. The physiological properties of the two L. Pentosus strains, Ind1 and Ind3, such as the in vitro test on the intolerance under the gastro-intestinal environment, the ability of adherence on the intestinal epithelium were studied. Their intolerance as well as inhibition and degradation ability under presence of pre-carcinogenic substances existing in human gut such as phenol, p-cresol and indole at different concentrations were also determined. The effects of the two L. Pentosus strains on modulation of the mice intestinal micro flora, by oral administration of 109cfu/ml of strains in 0. 5ml of skim milk, were investigated: the amounts of Lactobacillus spp. , Bifidobacterium spp. , Enterobacilli, Enterococcus and Clostridium perfringens in the feces of mice during and after the feeding of probiotic strains were counted. Furthermore, the technological properties of the two L. Pentosus strains on their GABA producing ability were studied: the medium and process parameters optimization was carried out in order to try to obtain the highest GABA content in the fermented dairy products. Results showed that the two L. Pentosus strains had high survival rates (higher than 90% in acid and 80% in bile solution). The adhesive ability is strain independent: Ind3 adherence was comparable with those of two commercial probiotic strains (NCFM and Lp115). Ind1 and Ind3 showed good resistance mutagenic substances phenol, p-cresol, indole at concentration below 150 μg/mL). Ind1 and Ind3 also showed certain effect on promoting the increase of Lactobacillus and Bifidobacteria counts, and inhibiting the growth of Enterobacilli and Clostridium in mice gut. These results displayed positive properties that the two L. Pentosus strains can be good candidates to be used as probiotic strains potentially used in dietary supplement application or Chinese-style dairy products

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Allain, Thibault. "Rôle des Bile Salt Hydrolases (BSH) des lactobacilles probiotiques dans le contrôle de la giardiose." Thesis, Paris, AgroParisTech, 2016. http://www.theses.fr/2016AGPT0018.

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Abstract:

Giardia duodenalis est le protozoaire responsable de la giardiose, la parasitose intestinale la plus répandue dans le monde. Cette infection se caractérise par une malabsorption intestinale, des diarrhées, une perte de poids et des douleurs abdominales intenses chez l’Homme et de nombreux mammifères. Par ailleurs, cette maladie dont l’impact en santé publique et vétérinaire est reconnu, peut entraîner d’importantes déficiences nutritionnelles en particulier chez les sujets jeunes. L’infection est causée par l’ingestion de kystes de Giardia duodenalis (syn. G. lamblia, G. intestinalis) présents dans les aliments ou l’eau contaminée. Infectieux à très faibles doses, ces kystes survivent pendant plusieurs semaines dans l’environnement et sont résistants aux différents désinfectants. Suite au dékystement, la forme végétative de Giardia, le trophozoïte, adhère à l’épithélium intestinal au niveau des parties supérieures de l’intestin grêle et se multiplie, causant les symptômes. Cette phase se termine par un nouvel enkystement et l’excrétion de kystes par les fèces. Le nombre croissant d’infections liées à la contamination de l’eau potable, à l’émergence de souches résistantes aux médicaments disponibles, à la fréquence des échecs thérapeutiques et à l’importance des effets secondaires associés aux traitements font de cette maladie un sujet d’actualité de plus en plus préoccupant qui nécessite le développement de traitements alternatifs. Il est désormais bien établi que le microbiote et/ou certaines souches de bactéries probiotiques ont un impact bénéfique dans la giardiose. En particulier, la bactérie probiotique Lactobacillus johnsonii La1 (LjLa1) a un rôle protecteur contre la croissance de Giardia in vitro et in vivo. Nous avons cherché dans ce travail de Thèse à décrypter les mécanismes moléculaires associés à l’effet inhibiteur des facteurs sécrétés par LjLa1. Nous avons montré qu’in vitro, LjLa1 agissait en libérant des enzymes de type Bile Salt Hydrolases (BSH) qui modifient alors des composants de la bile non-toxiques pour le parasite (sels biliaires conjugués) en des composants toxiques (sels biliaires déconjugués). Les 3 gènes BSH codés dans le génome de LjLa1 ont été clonés chez Escherichia coli et les protéines taguées histidine purifiées pour étudier leurs propriétés biochimiques et biologiques. Obtenues sous forme active, nous avons pu en définir les spécificités de substrats et montrer qu’elles sont capables d’inhiber significativement la croissance de G. duodenalis in vitro et in vivo, dans un modèle murin de la giardiose (souriceaux OF1 non sevrés). En parallèle, nous avons identifié, à l’issue d’un large criblage de souches de lactobacilles selon leur activité anti-Giardia in vitro, une souche probiotique aux effets inhibiteurs comparables à ceux de LjLa1 : Lactobacillus gasseri CNCM-4884. Administrée in vivo dans le modèle murin de la giardiose, cette souche a réduit de 93% la charge parasitaire dans l'intestin grêle des nouveaux nés et a également réduit de façon significative le nombre de kystes libérés dans l’environnement, permettant ainsi de réduire la transmission de Giardia. Des travaux parallèles ont été réalisés au cours de ce projet de Thèse, notamment le développement d’outils de moléculaire pour l’expression hétérologue de molécules d’intérêt en santé animale chez divers lactobacilles. Le développement de ces « vecteurs mucosaux » permettra à terme de proposer une stratégie de surexpression de BSH par les lactobacilles afin d’accroitre l’activité BSH in vivo, et renforcer ainsi l’élimination du parasite. Ces résultats permettent de proposer de nouvelles pistes thérapeutiques originales contre les giardioses humaines et animales, basées sur l’utilisation de lactobacilles probiotiques ou sur les activités BSH qui en sont dérivées. Ces traitements offrent alors une alternative sérieuse aux antibiotiques et permettront de pallier aux actuels fréquents échecs thérapeutiques
Giardia duodenalis is a protozoan parasite responsible for giardiasis, the most common intestinal parasitic disease worldwide. This infection is characterized by intestinal malabsorption, diarrhea, weight loss and abdominal pain in humans and various mammalian species. Besides, this disease has a high veterinary and public health impact, leading to important nutritional deficiencies in young subjects. The infection is caused by the ingestion of food or water contaminated with infectious cysts of the parasite. Giardia cysts can survive for several weeks in the environment and are highly resistant to disinfectants. Giardia excysts in the intestinal tracts of its host and replicates under the trophozoite stage causing the symptoms. Trophozoites adhere to the intestinal epithelium of the small intestine and multiply, causing the symptoms. The cycle ends by a new encystment and infectious cysts are released in environments with feces. The increasing number of giardiasis cases, mainly due to water contaminations, the emergence of parasite strains resistant to drugs and therapeutic failures, make research on alternative therapeutic strategies and treatments highly needed. Nowadays, it is well known that the microbiota and probiotics play an important role in protection against this parasite. For instance, the probiotic strain Lactobacillus johnsonii La1 (LjLa1) prevents the establishment of Giardia in vitro and in vivo. In this thesis, we have tried to point out the molecular mechanism(s) involved in this inhibitory effect(s). We showed in vitro that LjLa1 was releasing "Bile Salt Hydrolases" (BSH) – like activities that modify some components of bile (conjugated bile salts) into toxic compounds (deconjugated bile salts) for Giardia. We have cloned and expressed each of the three bsh genes present in the genome of LjLa1 in Escherichia coli in order to study their enzymatic and biological properties. Two BSH were obtained as recombinant active enzymes and biochemical tests showed that they have distinct substrate specificities despite similar predicted 3D structures. Moreover, these two BSHs of LjLa1 exhibited anti-giardial effects in vitro and in vivo in a murine model of the giardiasis (OF1suckling mice), comforting the hypothesis of the biological role of active BSH, derived from probiotics, against Giardia. A wide collection of diverse lactobacilli strains was screened to assess their effectiveness to also display both anti-giardial and BSH activities. This screening allowed the identification of several strains exhibiting strong anti-giardial effects such as Lactobacillus gasseri CNCM I-4884. In a murine model of giardiasis, this strain dramatically reduced the parasite burden in the small intestine of treated animals and significantly reduced the number of cysts in the colon, which could contribute to blockage of parasite transmission in environments. Additional studies were realized in parallel in order to explore the potency of lactobacilli to exert beneficial effects on health. For this, molecular tools were successfully developed in various lactobacilli strains to express and deliver therapeutic molecules at mucosal surfaces. The development of these tools will further allow the overexpression of BSH by lactobacilli to increase their in vivo BSH-activity and strengthen the elimination of the parasite. Altogether, this thesis work proposes new original therapeutic strategies against human and animal giardiasis, based on the use of BSH-positive lactobacilli strains or recombinant BSH- derived from probiotic strains, to counteract the frequent therapeutic failures, offering a serious alternative to antibiotics

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Regulski, Krzysztof. "Influence of peptidoglycan metabolism on immunomodulatory properties of Lactobacillus casei." Thesis, Paris 11, 2012. http://www.theses.fr/2012PA112313.

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Abstract:

Le peptidoglycane (PG) est le composant majeur de la paroi des bactéries à Gram positif. Il assure la forme et l’intégrité de la cellule bactérienne. Le PG ou des fragments dérivés sont connus pour être des inducteurs du système d’immunité innée de l’hôte, en particulier au travers des récepteurs Nod2. Au cours de ce travail, nous avons étudié l’influence du métabolisme du PG sur les propriétés immunomodulatrices de Lactobacillus casei BL23, en étudiant principalement sa capacité à moduler la réponse des cellules dendritiques humaines. Nous avons tout d’abord caractérisé les hydrolases du PG (PGHs) majeures de L. casei BL23. Une recherche in silico a révélé que L. casei possède un système de PGHs relativement complexe comprenant treize enzymes putatives avec des domaines catalytiques variés. Une analyse protéomique d’extraits de paroi de L. casei BL23 a permis de détecter la production de sept d’entre elles pendant la croissance bactérienne. Quatre d’entre elles ont été étudié plus en détails. La PGH la plus fortement exprimée, Lc-p75, a une activité de -D-glutamyl-L-lysyl-endopeptidase et est responsable de la séparation des cellules après division. De plus, Lc-p75 associée à la paroi est localisée au niveau des septa cellulaires. Il s’agit également de l’une des protéines majeures secrétée dans le surnageant de culture de L. casei BL23. Lc-p75 possède la particularité d’être une glycoprotéine. La PGH Lc-p40 possède un domaine CHAP doué d’une activité endopeptidase avec un site de clivage situé au niveau des ponts interpeptidiques du PG. Lc-p40 parait localisée au niveau de la paroi latérale des cellules de L. casei. Lc-p45 est une deuxième -D-glutamyl-L-lysyl-endopeptidase avec un rôle dans le maintien de la forme de la bactérie. Enfin nous avons caractérisé deux enzymes de prophages, Lc-Lys et Lc-Lys2, codée par le génome de L. casei BL23, qui possède toute deux un domaine de liaison au PG d’un nouveau type qui possède la particularité de lier spécifiquement le D-Asp amidé présent dans les ponts interpeptidiques du PG de L. casei BL23. La délétion des deux gènes qui codent pour les endopeptidases Lc-p75 et Lc-p45 chez L. casei BL23 conduit à l’absence de disaccharide dipeptide dans la structure du PG du mutant, tandis que la délétion de Lc-p75 seulement conduit à une réduction de la quantité du disaccharide-dipeptide. Ce disaccharide dipeptide est un ligand des récepteurs Nod2. Les deux mutants obtenus par délétion de Lc-p75 ou bien par délétion des deux endopeptidases ont été comparés avec la souche sauvage BL23 pour leur capacité à activer in vitro des cellules dendritiques humaines dérivées de monocytes sanguins. Suite à l’activation des cellules dendritiques par les souches de L. casei, quatre cytokines pro-inflammatoires, les interleukines IL-6, IL-8, IL-12 et le TNF- ont été produites. La quantité de chaque cytokine sécrétée en réponse aux mutants simple Lc-p75 et double Lc-p75/Lc-p45 était diminuée par rapport à celle induite par la souche sauvage L. casei BL23.En conclusion, L. casei BL23 est doté d’un équipement complexe en PGHs. Les PGHs caractérisées au cours de ce travail présentent des caractéristiques uniques et jouent un rôle important dans la division des bactéries ainsi que dans le maintien de leur morphologie. Nos résultats indiquent que la souche sauvage de L. casei Bl23 et les mutants dérivés obtenus par inactivation d’enzymes à activité endopeptidase, qui diffèrent à la fois au niveau de leur contenu enzymatique ainsi qu’au niveau de la structure de leur PG, ont des effets différents sur les cellules dendritiques humaines, avec un caractère anti-inflammatoire plus élevé pour les mutants
Peptidoglycan (PG) is the major component of the Gram-positive bacteria cell wall. It ensures bacterial cell shape and integrity. PG or PG-derived fragments have been shown to stimulate the host innate immune system, through Nod-2 receptors. In this work, we studied the influence of PG metabolism on immunomodulatory properties of Lactobacillus casei BL23, mainly its ability to modulate the response of human dendritic cells (DCs).We have first characterized the main peptidoglycan hydrolases (PGHs) of L. casei BL23. In silico search revealed that L. casei BL23 has a rather complex PGH complement including thirteen predicted PGHs with various catalytic domains. Proteomic analysis of bacterial cell wall extracts revealed the expression of seven of them during bacterial growth. We characterized four of them in details. Lc-p75 is the major PGH with a γ-D-glutamyl-L-lysyl-endopeptidase specificity and is responsible for daughter cell separation. Lc-p75 associated to the cell wall localizes at the cell septa. It is also one of the major secreted proteins of L. casei found in culture supernatant. Besides, we showed that L. casei Lc-p75 is a glycosylated protein. Lc-p40 is a PGH with a CHAP-domain endowed with endopeptidase hydrolytic specificity toward peptidoglycan cross-bridges and appears to localize on lateral cell wall. Lc-p45 is a second γ-D-glutamyl-L-lysyl endopeptidase with a role in cell shape maintenance. We further demonstrated that two prophage endolysins Lc-Lys and Lc-Lys2, encoded in L. casei BL23 genome, share a common novel type peptidoglycan-binding domain that recognizes specifically D-Asn cross-bridge, present in L. casei BL23 peptidoglycan.Deletion of the two endopeptidases, Lc-75 and Lc-p45, resulted in a complete loss ofdisaccharide-dipeptide, which is a ligand of Nod-2 receptor, in the muropeptide structure of L. casei BL23, whereas deletion of Lc-p75 gene led only to a reduction of disaccharide dipeptide. The two PGH-mutants, obtained by deletion of Lc-p75 gene alone or both Lc-p75 and Lc-p45 endopeptidase genes were compared with wild type L. casei BL23 for their capacity to stimulate signaling pathways in vitro in DCs derived from human monocytes. As a consequence of DC activation by L. casei strains, four pro-inflammatory cytokines IL-6, IL-8, IL-12 and TNF-α were produced. The concentrations of secreted cytokines in response to the single Lc-p75 and Lc-p75/p45 double mutant were lower than those induced by wild type L. casei BL23.In conclusion, L. casei BL23 has a complex PGH complement. The PGHs described in this work present unique features and play important role in cell division and morphology of L. casei. Our results indicate that wild type L. casei and endopeptidase-negative mutants, which differ in their PGH content and in their PG structure, have distinct effects on human DCs, with a higher anti-inflammatory character of the endopeptidase-negative mutants

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Lönnermark, Elisabet. "Lactobacilli in the normal microbiota and probiotic effects of Lactobacillus plantarum /." Göteborg : Department of Infectious Medicine, Sahlgrenska Academy, University of Gothenburg, 2010. http://hdl.handle.net/2077/21480.

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Bianchi, Fernanda [UNESP]. "Desenvolvimento e avaliação em simulador do ecossistema microbiano humano de uma bebida simbiótica à base de extratos aquosos de quinoa (chenopodium quinoa willd) e de soja." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2013. http://hdl.handle.net/11449/88333.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-23Bitstream added on 2014-06-13T20:10:48Z : No. of bitstreams: 1 bianchi_f_me_arafcf.pdf: 1595850 bytes, checksum: b0b3350af531af9844bc98a774d86718 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
O conhecimento da população, em relação a uma alimentação mais saudável e nutritiva, tem levado o aumento da procura por alimentos funcionais e que proporcionem uma melhor qualidade de vida. Em função deste interesse, pesquisas que comprovem os benefícios do consumo desses novos produtos tornam-se essenciais. O objetivo do trabalho foi desenvolver uma nova bebida fermentada, potencialmente simbiótica, fermentada com Lactobacillus casei Lc-01 e adicionado de fruto-oligossacarídeo à base de extratos aquosos de quinoa e de soja e avaliar sua ação sob a microbiota intestinal por meio de sistema in vitro. O trabalho foi dividido em duas fazes, na Fase I, cinco formulações com diferentes proporções de extrato aquoso de soja e de quinoa foram testadas. A viabilidade do micro-organismo nas bebidas, assim como os valores de pH e de acidez foram monitorados até o 28º dia de estocagem a 5ºC. Foram também analisadas a composição química dos extratos e das bebidas elaboradas, bem como as propriedades reológicas e sensoriais dos produtos finais. Embora tenha ocorrido um aumento na acidez e um declínio no pH durante os 28 dias de armazenamento das bebidas, o micro-organismo probiótico manteve uma população de 108 UFC.mL-1 para todas as bebidas durante o período experimental. Houve um aumento na viscosidade e na consistência nas bebidas com maior proporção de extrato de quinoa (F1 e F2). A formulação F4 (com 70% extrato de soja- 30% extrato de quinoa) mostrou a menor curva de histerese. As formulações F4 e F5 (com 100% extrato de soja) obtiveram melhor aceitação sensorial e F4 maior intenção de compra. Com relação a composição físico-química, a formulação F3 (com 50% extrato de soja- 50% extrato de quinoa) e F4 mostraram resultados mais próximos aos das bebidas fermentadas à base de soja encontradas na literatura...
The conscience of the population, regarding to a healthier diet, has led to an increase in the demand for functional foods, providing, this way, a better quality of life. Because of this interest, researches demonstrating the benefic consumption of these new products become essential. The aim of this study was to develop a new potentially synbiotic beverage, fermented with Lactobacillus casei Lc-01 and with added fructo-oligosaccharide, based on aqueous extracts of quinoa and soy and to assess its influence on the intestinal microbiota through an in vitro system. The project was divided into two phases, in phase I, five formulations with different proportions of aqueous extract of soy and quinoa were tested. The viability of the microorganism in beverages, as well as the pH and acidity were monitored during 28 days of storage at 5◦C. It was also analyzed the chemical composition of the extracts and beverages as well as the rheological and sensorial properties of the final products. Although there was an increase in acidity and a decline in pH during the 28 days of storage, the probiotic microorganism maintained a population of 108 UFC/mL for all beverage during the experimental period. There was an increase in viscosity and consistency in beverages with higher proportion of quinoa extract (F1 and F2). The formulation F4 (70% soy extract- 30% quinoa extract) showed the lowest hysteresis curve. The formulations F4 and F5 (100% soy extract) obtained the best sensory acceptance, and F4, the higher intention to purchase. Regarding to physical and chemical composition, formulation F3 (with 50% soy extract-50% quinoa extract) and F4 showed the best results compared to similar fermented beverages. Beverage F4 was considered the best beverage developed and, therefore, had its efficacy analyzed from the Simulator Human Microbial Ecosystem (SHIME), phase II of the project... (Complete abstract click electronic access below)

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Harris, Lyle Keenan. "Comparison of plasmids from clinical Lactobacillus strains." University of the Western Cape, 2018. http://hdl.handle.net/11394/6439.

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Abstract:

Magister Scientiae - MSc (Biotechnology)
The vaginal mucosa is dominated by Gram positive, rod shaped lactobacilli which serve as a natural barrier against infection. In both healthy and BV infected women Lactobacillus crispatus and Lactobacillus jensennii has been found to be the predominant Lactobacillus species. Many studies have been conducted to assess factors influencing lactobacilli dominance in the vaginal microbiome. However, no study has evaluated the impact of plasmids on the vaginal lactobacilli. In the present study two plasmids, pLc17 and pLc4, isolated from vaginal Lactobacillus species of both healthy and BV infected women were characterized. pLc4 was present in both Lactobacillus crispatus and Lactobacillus jensennii while pLc17 was only present in Lactobacillus crispatus. pLc17 (16663 bp in size) encoded a ribonucleotide diphosphate reductase (RNR), a filamentation induced by cAMP-like (FIC-like) protein and numerous mobile elements.

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Storelli, Gilles. "Caractérisation de l’interaction mutualiste liant Drosophila melanogaster à son symbionte Lactobacillus plantarum." Thesis, Lyon, École normale supérieure, 2015. http://www.theses.fr/2015ENSL1041.

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Abstract:

Le microbiote a un impact majeur sur la physiologie de son hôte, cependant notre compréhension des mécanismes régulant la relation hôte/microbiote reste limitée. Nous utilisons un hôte modèle simple, la Drosophile, afin de répondre à ces questions. Durant mon doctorat, je me suis attaché à une étape particulière du cycle de vie de la Drosophile, sa phase larvaire. Celle-ci constitue sa phase de croissance et est influencée par le contexte nutritionnel. Le microbiote influence également cette étape: l’association avec la bactérie Lactobacillus plantarum tempère les effets de la carence alimentaire en soutenant un taux de croissance élevé et une maturation rapide, en modulant chez l’hôte l’activité de l’hormone Ecdysone et de l’insuline. En retour, L.plantarum bénéficie de l’association, les larvesassurant sa persistance dans la niche (la niche étant le substrat nutritif, les larves et les bactéries associées). Pour caractériser les mécanismes mis en jeu dans ce mutualisme nous avons décrit les réponses transcriptomiques et métaboliques de la larve et avons également étudié les perturbations métaboliques de la niche. Nos résultats mettent en avant l’optimisation de l’extraction des acides aminés du substrat comme facteur clef du mutualisme. L.plantarum active l’expression des protéases intestinales de l’hôte via la voie IMD/NF-κB, et bénéficierait en retour d’une quantité d’acides aminés plus importante assurant sa persistance. Ainsi, nos travaux contribuent à l’effort de compréhension desmécanismes régulant l’interaction hôte/microbiote et pourraient conduire à de nombreuses applications thérapeutiques, notamment dans le cadre de déséquilibres nutritionnels
Symbiotic bacterial populations (also called the “microbiota”) have a dramatic impact on their host’s physiology. However, our understanding of the mechanisms shaping host/microbes mutualism remains limited. We took advantage of Drosophila tractability to characterize the host’s and the microbial factors engaged in mutualism. During my PhD, I focused on the impact of the microbiota during the Drosophila larval phase, which constitutes its juvenile growth period. Drosophila larval phase is influenced by nutrition, but also by symbiotic microbes: specific association with the bacterium Lactobacillus plantarum buffers the deleterious effects of nutrient scarcity on the host’s juvenile growth, by sustaining greater growth rates and hastening maturation. L.plantarum mediate these effects by modulating the activity of the steroid hormone Ecdysone and the Insulin/Insulin-like Signaling pathway in its host. In return, L.plantarum benefits from Drosophila presence, as larvae ensure its long-term persistence in the niche (the niche being the nutritive substrate, the larvae and the bacteria dwelling on it). To characterize the mechanisms engaged in this mutualistic relationship, we described the host’s transcriptomic and metabolic responses to L.plantarum presence and characterized the metabolic perturbations occurring in the niche. Our results put forward the optimization of amino-acids extraction from the nutritive substrate as a cornerstone of mutualism. L.plantarum activates the expression of the host’s digestive proteases via IMD/NF-κB signaling and would benefit in return from an enhanced AA availability, which would help sustaining its long-term persistence. Altogether, our studies contribute to the understanding of the mechanisms regulating host/microbiota interaction and could lead to numerous therapeutic applications, notably aiming at counteracting the deleterious effects of nutritional imbalances

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Diana, Pérez Marina. "Desarrollo de un pan de masa madre rico en GABA y péptidos IECA." Doctoral thesis, Universitat de Barcelona, 2014. http://hdl.handle.net/10803/284604.

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Abstract:

Existe una relación evidente entre el consumo de sal y el mayor riesgo de padecer hipertensión. La hipertensión es una enfermedad crónica que afecta a algo más del 40% de la población general adulta en España. El pan es uno de los alimentos básicos de la dieta humana siendo en España la principal fuente dietética de sodio en la población adulta. El uso de masa madre produce un pan con una notable mejora de las características nutricionales y sensoriales, incluyendo aroma, sabor, textura de la corteza y miga, así como un alargamiento de la vida útil del pan. En este contexto nace el proyecto de obtener una nueva formulación de pan de masa madre funcionalmente activo, contribuyendo a disponer de un alimento saludable con propiedades beneficiosas para la salud. Para ello, se ha estudiado la posibilidad de sustituir el sodio (Na) por potasio (K) en las formulaciones de pan y la inclusión de moléculas biológicamente activas con un efecto hipotensor científicamente demostrado. El Ácido γ-Amino Butírico (GABA), un amino ácido no proteico, con numerosas funciones fisiológicas entre los que se encuentra el sistema de regulación de la presión arterial. La ingesta de un alimento rico en GABA y una reducción de su contenido en sal pueden ayudar a reducir la tensión arterial. En el proyecto se reúnen por tanto, las dos condiciones básicas para la obtención de un pan, elaborado con una masa madre que realza el sabor del pan, enmascarando posibles defectos asociados a la inclusión de sal potásica y por otra parte, la posibilidad de que esta masa madre contenga además sustancias bioactivas como el GABA y los Inhibidores del Enzima Convertidor de la Angiotensina (IECA). En el primer estudio se aislaron bacterias ácido lácticas de quesos artesanales españoles con el fin de obtener cepas altamente productoras de GABA. Las cepas fueron sometidas a ensayos cualitativos y ensayos cuantitativos para evaluar la habilidad de sintetizar GABA. Tras la selección de la mejor cepa, Lactobacillus brevis CECT 8183, ésta se usó para la producción de una masa madre optimizada para la producción de GABA. Los ensayos se llevaron a cabo a escala laboratorio y a escala piloto. En el estudio II se analizó el contenido de aminoácidos libres de los quesos artesanales con especial interés en conocer el perfil de GABA y ornitina como posibles compuestos bioactivos en los quesos y encontrar relación entre la capacidad de producción de la cepa aislada y el contenido de GABA presente en el queso. En el tercer estudio se obtuvo un pan elaborado con la masa madre rica en GABA que fue comparado con otros panes del mercado en cuanto contenido de aminoácidos, aminas biógenas y acrilamida como principales compuestos derivados del nitrógeno. Finalmente, se hizo una revisión del GABA como molécula bioactiva con gran interés aplicativo en la industria alimentaria. Estos resultados pueden contribuir a mejorar los beneficios para la salud de los panes enriquecidos en GABA y a tener en cuenta la cepa Lactobacillus brevis CECT 8183 como estárter para la producción de alimentos ricos en GABA.
The use of dough containing naturally occurring lactobacilli and yeasts produces bread with a notable improvement in nutritional and sensorial characteristics, including the aroma, taste and texture of both the crust and the crumb, and also increases the useful life of the bread. From this stems the project to obtain a new bread formulation using such a dough that is functionally active and contributes to providing a healthy foodstuff with beneficial properties. To this end we studied the possibility of substituting the sodium (Na) by potassium (K) in bread formulations and the inclusion of biologically active molecules with a scientifically demonstrated hypotensive effect. γ-Aminobutyric acid (GABA) is a non-protein amino acid with numerous physiological functions including playing a role in the regulation of blood pressure. Intake of food rich in GABA and a reduction in its salt content may help reduce blood pressure. Therefore, this project brings together two basic conditions for the production of a bread made using dough containing naturally occurring lactobacilli and yeasts which heightens the taste of the bread and furthermore offers the possibility that this dough also contains bioactive substances such as GABA and angiotensin-converting-enzyme (ACE) inhibitors. In the first study lactic acid bacteria were isolated from Spanish artisanal cheeses in order to obtain strains that produce large amounts of GABA. The strains were subjected to qualitative and quantitative tests to evaluate their capacity to synthesise GABA. After selection of the best strain, Lactobacillus brevis CECT 8183, it was used to produce a dough optimised for the production of GABA. In another study a bread was produced with the experimental dough, rich in GABA, and it was compared with other commercially available breads in terms of amino acid, biogenic amine and acrylamide contents as the main nitrogen-derived compounds. These results could contribute to improving the health benefits of breads enriched in GABA and to raising awareness of the strain Lactobacillus brevis CECT 8183 as a starter ingredient for the production of foodstuffs rich in GABA.

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Sandoval, Valdés María Francisca. "Efecto del consumo de leche enriquecida con probióticos lactobacilos en la concentración salival de Beta Defensina Humana 3 en niños pre-escolares : Ensayo clínico randomizado por conglomerados, triple ciego." Tesis, Universidad de Chile, 2015. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/148882.

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Abstract:

Tesis Magister En Ciencias Odontológicas Con Mención En Cariología
El uso de bacterias probióticas para la prevención de caries se basa en la modulación que hacen estas bacterias de los principales microorganismos cariogénicos presentes en el biofilm oral. Además existe evidencia que a nivel intestinal son capaces de estimular la inmunidad innata, a nivel oral no se conoce si estas bacterias poseen un efecto en los elementos del sistema inmune innato, específicamente en la concentración de HβD-3, es por esto que el objetivo de nuestro estudio fue determinar la concentración salival de HβD-3 en niños pre- escolares que consumieron, durante 14 meses, leche enriquecida con Lactobacillus rhamnosus SP1, y compararlas con niños que consumieron la leche sin el probiótico. En este estudio clínico participaron pre-escolares de 2 a 3 años pertenecientes a Jardines Infantiles de la Fundación Integra del área Metropolitana Nor-Poniente. Cada grupo, control y experimental, estaba formado por 21 niños, ambos consumieron 150 mL de leche en polvo parcialmente descremada al 12% (Macro FoodS.SA.© ), adicionalmente el grupo experimental consumió la leche suplementada con 10⁷ UFC/mL de Lactobacillus rhamnosus SP1. El consumo de la leche fue durante la tarde los 5 días de la semana que los niños asistieron al jardín, y fue preparada previa capacitación, por las manipuladoras de alimentos de cada establecimiento. Al inicio y a los 14 meses de consumo de la leche se recolectaron muestras de saliva no estimulada, la cual fue utilizada para medir la concentración salival de HβD-3, mediante test de ELISA. La concentración salival de HβD-3 se presentó altamente variable en la población, en el grupo control o placebo fue de 373,49 +- 541,82 pg/mL y en el grupo experimental o probiótico fue de 597,91 +- 743,28 pg/mL y a los 14 meses fue de 370 +- 468,97 pg/mL y 126,29 +- 69,3 respectivamente. En el grupo control la concentración salival no varía con el consumo del probiótico (p>0,05) y en el grupo probiótico se produce un descenso de 471,6 +/-745,5 (p<0,05). Nuestros datos sugieren que el consumo regular durante 14 meses de leche enriquecida con Lactobacillus rhamnosus SP1 disminuye la concentración salival de HβD-3.

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Lamarque, Mauld. "Spécificité du transport et de l'hydrolyse des peptides chez les bactéries lactiques : aspects nutritionnel et moléculaire." Lyon 1, 2003. http://www.theses.fr/2003LYO10213.

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Abstract:

Pour se développér dans le lait, les bactéries lactiques possèdent un système protéolytique comprenant une protéiase de surface PrtP, un transporteur d'oligopeptides Opp et des peptidases cytoplasmiques. Pour mieux comprendre le contôle de ce système par des peptides du milieu extracellualire, nous avons étudié la spécificité du transport des peptides chez les lactocoques. Cette spécificité est différente selon les souches et ne repose pas exclusivement sur le système Opp. Elle pourrait dépendre d'un second transporteur, Opt, dont la spécificité recouvre partiellement celle d'Opp et dont la biosynthèse est variable selon les souches. La source de carbone joue aussi un rôle sur l'expression de certains composants du système protéolytique. En effet, chez Lactobacillus bulgaricus, l'expression du géne pepQ est soumise à un mécanisme d'activation catabolique, dépendant d'une protéine CcpA-like (PepR1) et de la séquence cre située en amont du promoteur du géne pepQ.

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Badet, Cécile. "Etude quantitative, par pHmétrie libre et stabilisée, de la production acide de trois lactobacilles d'origine buccale." Bordeaux 2, 1993. http://www.theses.fr/1993BOR2OND2.

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Aoudia, Nabil. "Caractérisation de l'impact de la croissance en biofilm sur l'activité probiotique de souches du genre Lactobacillus." Thesis, Dijon, 2014. http://www.theses.fr/2014DIJOS017.

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Abstract:

Une approche in vitro a consisté à étudier la formation de biofilm de souches d’origine du genre Lactobacillus d’intérêt probiotique. Nous nous sommes également attachés à évaluer l’impact de conditions de stress mimant l’environnement intestinal sur la formation du biofilm pour l’ensemble de ces souches. Les effets antagonistes des surnageants de cultures en biofilm ou en planctonique contre des agents pathogènes alimentaires ont été appréhendés. Non seulement toutes les souches testées forment des biofilms mais ce mode de croissance génère un effet antagoniste accentué pour certaines d’entre elles. Parmi les critères de sélection des bactéries à intérêt probiotique, les effets immunomodulateurs des probiotiques sont souvent recherchés. L. casei ATCC334 connue pour ses effets anti-inflammatoires a été retenue pour notre étude. A l’aide du modèle de lignée cellulaire THP-1 et en présence de LPS, le surnageant de culture de L. casei ATCC334 cultivée en biofilm s’est avéré présenter un effet anti-inflammatoire bien supérieur à celui des cultures planctoniques. Une approche utilisant des techniques biochimique et immunologique a permis d’identifier un des principes actifs responsable de l’effet anti-inflammatoire de cette souche. L’utilisation du modèle poisson zèbre a permis de montrer la colonisation de l’intestin des larves et de confirmer le rôle anti-inflammatoire de L. casei ATCC334 avec une diminution de la production des interleukines pro-inflammatoires et une augmentation de la production d'IL-10. Le recrutement des macrophages fluorescents mesuré en cytométrie de flux est également atténué chez la larve nourrie auparavant par le probotique en présence d’un agent inflammatoire. Le résultat majeur de cette étude est l’identification de la protéine GroEL qui contribue de façon significative à l’effet anti-inflammatoire de la souche L. casei ATCC334 lorsque qu’elle est cultivée en biofilm
An in vitro approach was used to study biofilm formation by bacterial strains with probiotic properties and belonging to the Lactobacillus genus. We also evaluated the impact of stress conditions mimicking the intestinal environment on biofilm formation for all of these strains. The antagonistic effects of supernatants from cultures in biofilm or planktonic conditions against food-borne pathogens were apprehended. This growth mode generates an antagonistic effect accentuated for some of them. Among the selection criteria of interest probiotic bacteria, the immunomodulatory effects of probiotics are often sought. L. casei ATCC334 known for its anti-inflammatory effects was selected for our study. Using the model cell line THP-1 and in the presence of LPS, the culture supernatant of L. casei ATCC334 grown in biofilm was found to have an anti-inflammatory effect much greater than planktonic cultures. An approach using immunological and biochemical techniques has allowed the identification of the active substances responsible for the anti-inflammatory effect of this strain. Using the zebrafish model, we showed the colonization of the gut of the larvae and confirmed the anti-inflammatory role of L. casei ATCC334 with a decreased production of pro-inflammatory interleukins, and increased IL-10 production. Recruitment of fluorescent macrophages measured by flow cytometry was also mitigated in larvae fed previously by probotic in the presence of an inflammatory agent. The major result of this study is the identification of the GroEL protein that contributes significantly to anti-inflammatory effect of the strain L. casei ATCC334 when it is grown in biofilm

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Melo, Maria Julia Araújo Feitosa. "Utilização de aditivos na silagem de capim tanzânia." Universidade Federal de Sergipe, 2015. https://ri.ufs.br/handle/riufs/6384.

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Abstract:

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
Various additives have been used to minimize the negative effects during the fermentation process, including Lactobacillus buchneri and / or nutritional additives such as corn meal, dry molasses, urea and lime for the purpose of improving the nutritional value and aerobic stability silages. Thus, the present study was aimed at the use of additives in silage Tanzania, they were mounted two experiments. In the first study aimed to analyze the chemical composition of grass silage Tanzania treated with different additives. The treatments were: Tanzania grass silage without additive (SSA); silage with 15% corn meal (SFM); silage with 15% molasses powder (EMS); silage inoculant based on Lactobacillus buchneri (SLB); silage additives Association: 7.5% of corn meal, 5% molasses powder, 1.1% urea, 1.1% limestone, 0.30% crushed annatto seeds and inoculant (SA1); silage additives Association: 10% of corn meal; 2.93% powdered molasses, 1.1% urea, 0.65% limestone, 0.32% of annatto seeds and inoculant (SA2). Arranged in a randomized experimental design with five replications. The content of DM (dry matter), NFC (non fibrous carbohydrate), DMS (dry matter digestibility) and TDN (total digestible nutrient) were higher in silages with additives. Silages containing additives SA1 and SA2 associations achieved the largest reductions in NDF and ADF fractions. The additives influenced the ATT where EMS had a higher acidity and lower the SLB. The associations of additives have positive synergistic effect to reduce NDF and ADF, improve NDT end of silage. The second trial was conducted to evaluate the aerobic stability of silage Tanzania treated with chemical and biological additives. The treatments were: silage without additive Tanzania (SSA); silage with 15% corn meal (SFM); silage 15% molasses (EMS); silage 2.17% urea (SUR): silage 2.17% limestone (SCA); Lactobacillus buchneri (SLB); silage Association SA1 additives: 7.5% corn flour, 5% molasses powder, 1.1% urea, 1.1% limestone, 0.30% annatto seeds; silage additives association SA2 (same proportion of SA1 over the inclusion of SLB); silage additives association SA3: 10% corn meal; 2.93% molasses powder, 1.1% urea, 0.65% limestone, 0.32% of annatto seeds; silage Association SA4 additives (same proportion of SA3 over the inclusion of SLB). he use of additives reduced the losses by effluent and gases. There was variation in dry matter values were higher in treated silages. PH results showed the interaction between treatments having desirable initial values. The breakdown of stability occurred 72, 84, 96 and 96 hours after opening the silos for SSA, SME, SLB and SA4, respectively. The combination of additives provides positive synergy and promotes greater resistance to aerobic deterioration of silage.
Diversos aditivos vêm sendo utilizados para minimizar os efeitos negativos durante o processo fermentativo, dentre eles o Lactobacillus buchneri e/ou aditivos nutritivos como fubá de milho, melaço em pó, uréia e calcário com a finalidade de melhorar o valor nutritivo e a estabilidade aeróbia das silagens. Dessa forma, o presente estudo foi realizado objetivando o uso de aditivos na silagem de capim Tanzânia, em foram montados dois experimentos. No primeiro trabalho objetivou-se analisar a composição químico-bromatológica da silagem de capim Tanzânia tratada com diferentes aditivos. Os tratamentos utilizados foram: silagem de capim Tanzânia sem aditivo (SSA); silagem com 15% fubá de milho (SFM); silagem com 15% de melaço em pó (SME); silagem com inoculante à base de Lactobacillus Buchneri (SLB); silagem com associação de aditivos: 7,5% de fubá de milho, 5% melaço em pó, 1,1% uréia, 1,1% calcário, 0,30% sementes de urucum trituradas e inoculante (SA1); silagem com associação de aditivos: 10% de fubá de milho; 2,93% de melaço em pó, 1,1% uréia, 0,65% calcário, 0,32% de sementes de urucum e inoculante (SA2). Dispostos em um delineamento experimental ao acaso com cinco repetições. Os teores de MS (matéria seca), CNF (carboidrato não fibroso), DMS (digestibilidade da matéria seca) e NDT (nutriente digestível total) foram maiores nas silagens com aditivos. As silagens contendo associações de aditivos SA1 e SA2 obtiveram as maiores reduções nas frações FDN e FDA. Os aditivos influenciaram a ATT, onde SME obteve maior acidez e SLB a menor. As associações dos aditivos apresentam efeito sinérgico positivo para reduzir FDN e FDA, melhorar o NDT final da silagem. O segundo ensaio foi realizado objetivando avaliar a estabilidade aeróbia da silagem de capim Tanzânia tratadas com aditivos químicos e biológicos. Os tratamentos utilizados foram: silagem de capim Tanzânia sem aditivo (SSA); silagem com 15% fubá de milho (SFM); silagem 15% de melaço (SME); silagem 2,17% de uréia (SUR): silagem 2,17% de calcário (SCA); Lactobacillus Buchneri (SLB); silagem com associação de aditivos SA1: 7,5% fubá de milho, 5% melaço em pó, 1,1% uréia, 1,1% calcário, 0,30% sementes de urucum; silagem com associação de aditivos SA2 (mesma proporção da SA1 mais a inclusão de SLB); silagem com associação de aditivos SA3: 10% fubá de milho; 2,93% melaço em pó, 1,1% uréia, 0,65% calcário, 0,32% de sementes de urucum; silagem com associação de aditivos SA4 (mesma proporção da SA3 mais a inclusão de SLB). A utilização dos aditivos reduziram as perdas por efluentes e por gases. Houve variação nos teores de matéria seca apresentando maiores valores nas silagens aditivadas. Os resultados de pH apresentaram interação entre os tratamentos havendo valores iniciais desejáveis. A quebra da estabilidade ocorreu 72, 84, 96 e 96 horas após abertura dos silos para SSA, SME, SLB e SA4, respectivamente. A associação dos aditivos apresenta sinergia positiva e promove maior resistência a deterioração aeróbia das silagens.

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Al, Kassaa Imad. "Recherche et caractérisation du potentiel antiviral et probiotique de nouvelles souches de bactéries lactiques d'origine vaginale." Thesis, Lille 1, 2014. http://www.theses.fr/2014LIL10096/document.

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Abstract:

Dans ce travail, nous avons déterminé la composition de la flore vaginale d'un échantillon signatificatif de femmes Libanaises, puis évaluer l’effet antagoniste des souches lactiques notamment des lactobacilles contre certains pathogènes vaginales. Ainsi, sur les 135 prélèvements effectués, 53 isolats ont été identifiés par les méthodes de galerie API50 CH et pyroséquençage des régions variables (V1 et V2) du gène ADNr 16S. Les résultats obtenus ont montré une discordance entre les deux méthodes utilisées et sus-citées. Les résultats de l'effet antagoniste montrent que 7 souches sont antagonistes. L’identification des souches antagonistes a été confirmée par séquençage complet du gène ADNr 16S. En sus du potentiel antagoniste de ces lactobacilles, nous avons regardé d'autres propriétés biologiques de ces souches pouvant permettre une application probiotique. Trois isolats ont montré des propriétés intéréssantes d'hydrophobicité, d'autoaggrégation et dépourvues des caractères pathogènes. Afin d’évaluer l’effet antiviral de ces 3 isolats, des tests de cytotoxicité et d’adhésion sur une lignée cellulaire "Véro cell" ont été effectués. L’activité antivirale a été évaluée in vitro, vis-à-vis du virus herpétique de type-2 (VHS-2) et du virus non enevelopé CVBE4 comme virus contrôle. l'activité antivirale des lactobacilles a été evaluée dans 3 temps d'addition differents (Pre-infection, co-incubation et post-infection). On a choisi la souche qui a montré la meilleure activité anti-VHS-2, il s’agit de L. gasseri CMUL57. L’activité antivirale de cette souche (CMUL57) a été étudiée profondément afin d’expliquer le mécanisme de cette interaction bactérie/virus
The aim of this work is to determine the diversity of Lactobacillus species in vaginal flora in samples from Lebanese women and to evaluate the antagonistic effect of these strains against several vaginal pathogens in women. Thus, of the 135 samples collected, 53 isolates were isolated and identified by the gallery API50 CH (BioMerieux, France) and by pyrosequencing of the variable regions (V1 and V2) of the 16S rDNA gene. The results showed a large discrepancy between the two methods used. The antagonism results obtained showed the presence of 7 antagonistic strains against four pathogenic strains. The complete identification of these strains was confirmed by complete sequencing of the 16S gene (16S rDNA). Note that L. plantarum CMUL140 showed a strong anti-S. aureus activity and was used in a co-culture test. In addition to the potential antagonism of these lactobacilli, we looked at other features that can help in using these strains as probiotics. Therefore, we evaluated their probiotic and safe characteristics. To assess the antiviral effect of these three isolates, cytotoxicity and adhesion tests were performed on a "Vero cell" cell line. The results showed that none of three isolates were cytotoxic and carried a strong adhesion. Antiviral activity in vitro was evaluated against the herpes simplex virus type-2 (HSV-2) and CVBE4 as virus control. In order to investigate the anti-HSV-2 activity of lactobacilli, the strains were added to the infected cells at different intervals: pre-infection, co-incubation and post-infection. L.gasseri CMUL57 showed the strongest anti-HSV-2 activity and showed the capacity to trap HSV-2 on their cell wall

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Zacarchenco, Patricia Blumer. "Leites fermentados por streptococcus thermophilus adicionados de lactobacillus acidophilus e bifidobacterium longum : isolamento diferencial dos microrganismos, multiplicação em diferentes condições e efeitos nas caracteristicas sensoriais dos leites fermentados naturais ou modificados." [s.n.], 2004. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/255590.

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Abstract:

Orientador: Salvador Massaguer Roig
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-08-03T20:56:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zacarchenco_PatriciaBlumer_D.pdf: 905521 bytes, checksum: 6d2849e2b69ed715dda0573bad474ece (MD5) Previous issue date: 2004
Doutorado
Doutor em Tecnologia de Alimentos

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Indelicato, Claire-Emmanuelle. "Caractérisation des mécanismes impliqués dans la promotion de croissance de la Drosophile par Lactobacillus plantarum." Thesis, Lyon, 2017. http://www.theses.fr/2017LYSEN094/document.

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Abstract:

Le microbiote intestinal affecte la plupart des processus physiologiques de l’hôte, et plus particulièrement la digestion et le métabolisme. Cependant, les mécanismes moléculaires en jeu restent encore peu connus. Pour répondre à cette question, nous utilisons un modèle gnotobiotique simple : la larve de Drosophile monoassociée à un de ces symbiont naturel : Lactobacillus plantarum. Notre groupe a montré que L. plantarum promeut la croissance larvaire d’individus soumis à une carence en protéines. En effet, les larves monoassociées à L. plantarum se développent bien plus rapidement que des individus axéniques. Ainsi, L. plantarum tempère l’effet délétère de la carence nutritionnelle. Cette amélioration de la croissance repose en partie sur la hausse du niveau d’expression des protéases digestives de l’hôte ainsi que sur la modulation de la voie de signalisation TOR (Target Of Rapamycin) de la Drosophile par les bactéries symbiotiques. Notre travail s’est focalisé sur la recherche d’autres mécanismes génétiques impliqués dans l’interaction entre la Drosophile et L. plantarum au cours de la croissance larvaire. Nos résultats montrent que les variations génomiques naturelles de la Drosophile affectent l’intensité du bénéfice de croissance conféré par L. plantarum. En outre, les bases de notre étude ont permis de mettre en évidence que le microbiote intestinal a la capacité d'agir comme "tampon génétique" en compensant les défauts de croissance causés par le fond génétique des mouches. De plus, L. plantarum permet de diminuer la variation phénotypique de plusieurs caractères de la mouche tels que la croissance, la taille de certains organes et la durée du cycle larvaire. Nous avons également identifié le gène dawdle, codant un ligand de la voie TGF-β, comme acteur de l’interaction Drosophile-L. plantarum. De plus nous avons montré que Dawdle régule les protéases digestives de la Drosophile dans un contexte nutritionnel de carence en protéine, et cette régulation peut-être activatrice ou bien inhibitrice selon l’environnement microbien
Intestinal microbiota can modulate virtually all aspects of their host physiology, and particularly, digestion and metabolism. However, the molecular mechanisms at play remain largely unknown. To tackle this question, we use a simple gnotobiotic model: Drosophila larvae monoassociated with one of its major natural symbiont, Lactobacillus plantarum. Previous work from our group showed that L. plantarum promotes the juvenile growth of larvae facing a protein scarcity, thereby dampening the deleterious effect of the nutrient deficiency on larval growth. This growth enhancement partially relies on the upregulation of intestinal proteases, as well as on the modulation of the host TOR (Target Of Rapamycin) pathway by the symbionts. My thesis work aimed at unraveling other host genetic mechanisms involved in the interaction between Drosophila and L. plantarum during growth. Our work showed that host natural genomic variations affect the fly physiologic response to L. plantarum. Furthermore, the bases of our work enabled to unveil a novel role of intestinal bacteria, revealing their ability to act as a genetic buffer to compensate the growth impairments due to the fly genetic background. In addition, L. plantarum decreases the phenotypic variations in various host fitness traits (growth, organ size, timing to pupariation) and it also confers robustness to organ patterning. Finally, we showed that the TGF-β ligand, Dawdle plays an important regulatory role on digestive enzymes in a protein-deficient nutritional context, and that this regulation can be inhibitory or activating depending on the microbial environment

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Lagrafeuille, Rosyne. "Activités anti-biofilm de Lactobacillus vis-à-vis de Klebsiella Pneumoniae." Thesis, Clermont-Ferrand 1, 2016. http://www.theses.fr/2016CLF1PP03/document.

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Abstract:

Dans la nature, les micro-organismes sont organisés en communautés agrégées dénommées biofilms, particulièrement adaptées à la survie en milieu hostile. Les difficultés pour prévenir la formation ou éliminer des biofilms matures par des stratégies conventionnelles ont encouragé le développement de nouvelles approches inspirées des mécanismes de compétition entre différents micro-organismes au sein de biofilms naturels. Au cours de ce travail, nous nous sommes intéressés à l'effet anti-biofilm de bactéries bénéfiques appartenant aux genres Lactobacillus et Bifidobacterium. Dans un premier temps, nous avons testé l'effet anti-biofilm de surnageants neutralisés vis-à-vis de deux pathogènes Klebsiella pneumoniae et Staphylococcus epidermidis dans un modèle expérimental statique. Si les extraits des quelques souches de Bifidobacterium testées stimulaient la formation de biofilm par K. pneumoniae sur surface abiotique, la majorité de ceux des 140 souches de Lactobacillus exerçait un effet inhibiteur et nous avons retenu une des souches dont le surnageant de culture entraînait une inhibition majeure (70%), Lactobacillus plantarum CIRM653. Cet extrait s'est également avéré capable de disperser des biofilms préformés à K. pneumoniae sur surface abiotique mais aussi d’inhiber la formation de biofilms sur surface biotique, et ce indépendamment d’un effet bactéricide. La formation de biofilms mixtes formés par L. plantarum et K. pneumoniae dans des modèles expérimentaux cinétiques a permis, comparativement à l'observation de biofilms mono-espèce à K. pneumoniae, de mettre en évidence des défauts de structuration du biofilm associés à une diminution de la biomasse de K. pneumoniae et une augmentation de celle de L. plantarum. Grâce à une approche transcriptionnelle ciblée, nous avons montré que L. plantarum induisait, par le biais de son surnageant, des modifications de l’expression de gènes impliqués dans la formation de biofilm chez K. pneumoniae. Quatre gènes impliqués dans le quorum-sensing (opérons lsr) étaient sous-exprimés et trois gènes de structure du pilus de type 3 étaient sur-exprimés. L'augmentation de la production de pili de type 3 fonctionnels a été validée par Western-blot et des tests d’hémagglutination. Cette surexpression est probablement responsable du niveau élevé des capacités d’adhésion sur surface abiotique d'agrégats de K. pneumoniae issus de la dispersion induite par L. plantarum.Le comportement des deux souches a également été testé in vivo, dans un modèle murin de colonisation intestinale par K. pneumoniae avec administration orale quotidienne de L. plantarum. Le dénombrement du pathogène dans les selles des animaux a montré qu'en présence de L. plantarum, K. pneumoniae maintient des niveaux de colonisation élevés, contrairement au contrôle (sans Lactobacillus) où une diminution graduelle est observée.Enfin, nous avons initié le développement d'un modèle expérimental tripartite permettant d'associer les deux partenaires bactériens avec des cellules épithéliales dans un système en flux continu. La réponse spécifique des cellules eucaryotes a également été abordée : nous avons pu mettre en évidence que L. plantarum exerçait un effet inhibiteur vis-à-vis de la réponse inflammatoire épithéliale pulmonaire induite par K. pneumoniae. En conclusion, la description d'une activité anti-biofilm in vitro ne serait pas synonyme d'une réduction in vivo de la colonisation de surfaces biotiques, mais à une plus grande capacité de dissémination. Ces observations démontrent l’importance d’une expertise précise de l’action des bactéries bénéfiques et de la maitrise du ratio bénéfice-risque pour leur utilisation
In the natural environment microorganisms are organized in aggregated communities called biofilms, which are particularly adapted to the survival in harsh conditions. The difficulties to prevent the formation or elimination of mature biofilms by conventional strategies have encouraged the development of new approaches inspired by competition mechanisms occurring between microorganisms within natural biofilms.In this work, we looked for anti-biofilm effects of beneficial bacteria belonging to Lactobacillus and Bifidobacterium genus. We first tested the anti-biofilm effect of neutralized supernatants against both pathogens Klebsiella pneumoniae and Staphylococcus epidermidis in a static experimental model. The few Bifidobacterium extracts tested led to an increase in biofilm formation by K. pneumoniae on abiotic surface, whereas the majority of the 140 strains of Lactobacillus exerted an inhibitory effect. Lactobacillus plantarum CIRM653 was selected for further experiments because its culture supernatant displayed major inhibition (70%). This extract was also capable of dispersing preformed biofilms of K. pneumoniae on abiotic surface, but also able to inhibit biofilm formation on biotic surface, independently of a bactericidal effect. The formation of mixed biofilm containing L. plantarum and K. pneumoniae in kinetic experimental models highlighted the biofilm structure defects associated with a decrease of K. pneumoniae biomass and an increase of that of L. plantarum, compared to a monospecies K. pneumoniae biofilm. Targeted transcriptional approach was used to assess changes in the expression of genes involved in biofilm formation by K. pneumoniae after contact with L. plantarum supernatant. Four genes involved in quorum-sensing (operons lsr) were under-expressed and three type 3 pili structural genes were over-expressed. The increase of functional surface located type 3 pili was validated by Western blotting and hemagglutination tests. This overexpression was probably responsible for the observed high level of adhesion capacity to abiotic surfaces of K. pneumoniae aggregates recovered after dispersion induced by L. plantarum.The behavior of the two strains was also tested in vivo in a K. pneumoniae murine intestinal colonization model with daily oral administration of L. plantarum. Viable cells counting of the pathogen in the animals’ feces showed that K. pneumoniae maintained high levels of colonization in the presence of L. plantarum, unlike the control (without Lactobacillus) where a gradual decrease was observed.Finally, we initiated the development of a tripartite experimental model allowing the combination of the two bacterial partners with epithelial cells in a continuous flow system. In parallel, the specific response of eukaryotic cells to these bacteria was addressed: L. plantarum exerted an inhibitory effect on the pulmonary epithelial inflammatory response induced by K. pneumoniae.In conclusion, these results highlight the discrepancy between in vitro anti-biofilm activity of L. plantarum and its in vivo behavior leading to increased dissemination of the pathogen. Substantial expertise of beneficial bacteria is therefore necessary to fully assess their benefit-risk ratio

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Trautwetter, Annie. "Caractérisation physique et génétique du phage LL-H." Lyon, INSA, 1986. http://www.theses.fr/1986ISAL0029.

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Abstract:

Les bactéries lactiques jouent un rôle très important dans les industries agroalimentaires et en particulier dans l'industrie laitière. Le problème des bactériophages reste l'un des plus importants à résoudre pour cette industrie. Nous avons étudié l'organisation physique du bactériophage LL-H virulent pour Lactobacillus lactis LL-23. L'information génétique de ce phage est contenue dans la capside sous la forme d'une molécule linéaire d'ADN bicaténaire de 34 Kb. La carte de restriction de l'ADN phagique, réalisée pour les endonucléases EcoRI, Sali, Pstl et BamHI, apparaît circulaire. Les gènes phagiques sont donc permutés circulairement. La réalisation d'une banque de gènes de LL-H dans des vecteurs plasmidiques d'Escherichia coli a permis de détecter par "immunoblotting" l'expression des gènes codant 5 des 7 principales protéines structurales phagiques. Le gène impliqué dans la production de l'endolysine phagique a également été localisé. Le gène de la protéine structurale de 34 KD est fortement exprimé chez Escherichia coli, à partir de son propre promoteur. De même, nous avons montré que les génomes des phages mv4 (tempéré pour L. Bulgaricus) et c3, c5 et 1b4 (virulents sur cette même souche) sont constitués par un ADN bicaténaire linéaire à extrémités S'P protubérantes. Par hybridation ADN-ADN entre les ADN des phages virulents LL-H, 1v (de L. Lactis) c3, c5, 1b4 (de L. Bulgaricus) et tempérés mvl et mv4 (de L. Bulgaricus) on peut distinguer 2 familles : d'une part LL-H, 1v, mv1 et mv4, d'autre part c3, c5 et 1b4. Il existe donc une certaine parenté entre des phages tempérés et virulents de Lactobacilles. De plus, il a été montré que les fragments génomiques de LL-H codant la protéine structurale de 34 KD et l'endolysine hybrident avec des fragments de restriction des phages 1v, mv1 et mv4. Il est donc probable que la protéine structurale de 34 KD commune à ces 4 phages soit codée par une séquence d'ADN très similaire à celle de LL-H. Il en est peut être de même pour le gène de l'endolysine de ces phages
Lactobacilli, as well as lactic streptococci, play a central role in various food fermentation processes. The primary cause of slow acid production by lactic bacteria during industrial fermentation is lysis by bacteriophages. Since an improvement in the prevention of acidification perturbation resides in part in a better knowledge of the phage we have begun molecular biology studies on several phages of Lactobacilli. The first one, LL-H, is a virulent phage of strain Lactobacillus lactis LL 23. A restriction map of the phage genome was constructed, using EcoRI, Sali, Pstl and BamHI. This chromosome has a size of 34 kb and seems to be circularly permuted. A bank of LL-H restriction fragments was constituted using Escherichiacoli vectors such as pBR322 or pBR32S. The expression of S among the 7 main phage particle proteins in E. Coli by immunoblotting experiments, which allowed the mapping on the chromosome of genes coding for phage particule proteins. We have also shown that the gene of the main capsid protein is expressed from its own promoter in Escherichia coli strain. A similar study conducted on phages mv4 (temperate for L. Bulgaricus) and C3, CS and lb4 (virulent on this same strain) has shown that all the phage genomes were constituted by double stranded DNA molecules with 5'P protruding ends. DNA-DNA hybridization experiments led to the distinction of 2 families, on the one hand LL-H, 1v, mv1, and mv4, on the other 1b4 , C3 and CS. There is no DNA sequence homology between the two families, but on the contrary, the members of one family shown homologies between themselves. So, these results suggest that these virulent and temperate phages may have a common phage ancestor. Moreover, temperate phages may ac t as a source of lytic phages in cheese plants

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Bernard, Elvis. "Etude du rôle fonctionnel de l'O-acétylation et de l'amidation du peptidoglycane chez les lactobacilles." Thesis, Paris 11, 2012. http://www.theses.fr/2012PA112084.

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Abstract:

Le peptidoglycane (PG) est le composé majeur de la paroi des bactéries à Gram positif. Il est constitué de chaines de sucres, formées de l’alternance de N-acétyl-glucosamine (GlcNAc) et d’acide N-acétyl-muramique (MurNAc) et reliées entre elles par des chaines peptidiques. Cette structure confère à la bactérie une grande résistance mais aussi une certaine flexibilité qui lui permettent de grandir et de se diviser tout en gardant sa forme. Cette dualité entre rigidité et flexibilité est assurée par un équilibre entre l’activité des enzymes qui polymérisent le PG, les protéines liant la pénicilline (PBP), et de celles qui l’hydrolysent, les hydrolases du PG (PGH). Pendant ou après sa synthèse, la structure du PG peut subir différentes modifications, qui vont moduler l’activité des enzymes de synthèse et dégradation du PG. Au cours de ce travail, nous avons caractérisé les modifications structurales du PG chez deux espèces de lactobacilles et étudié leur rôle fonctionnel. Nous avons identifié la première amidotransférase responsable de l’amidation de l’acide méso-diaminopimélique et montré l’influence de cette modification sur l’activité d’une PGH, la L,D-carboxypeptidase DacB, ainsi que sur la synthèse du PG septal par les PBPs chez Lactobacillus plantarum. Nous avons ensuite mis en évidence pour la première fois une O-acétylation des GlcNAc en plus de l’O-acétylation des MurNAc, ces deux modifications étant réalisées par deux O-acétyl-transférases distinctes, OatA et OatB, qui jouent des rôles antagonistes dans le contrôle de l’activité des PGHs chez L. plantarum. Nous avons aussi révélé l’implication de l’O-acétyl-transférase OatA dans le contrôle de la septation. Enfin, nous avons montré l’influence de l’O-acétylation des MurNAc du PG sur les propriétés anti-inflammatoires d’une souche de Lactobacillus casei
Peptidoglycan (PG) is the major component of the gram positive cell wall. It is composed of glycan chains formed by the polymerization of the N-acetylglucosamine-N-acetyl muramic acid heterodimer, and cross-linked by peptidic stem. This structure confers high resistance to the bacterial cell wall but also some flexibility allowing growth and shape maintenance. This duality between rigidity and flexibility is the result of a steady-state between the PG polymerizing enzymes, the penicillin binding protein (PBP) and the PG hydrolases (PGH). More or less concomitantly with its synthesis, certain modifications can occur on PG structure that will modulate the activity of PG synthesis and degradation enzymes.During this work, we have characterized the PG structural modifications in two lactobacilli species and studied their functional role. We have identified the first amidotransferase involved in meso-diaminopimelic acid amidation and shown the influence of this modification on the activity of the L,D-carboxypeptidase, DacB, and also on the septal PG synthesis by the PBP in Lactobacillus plantarum. Then, we have highlighted for the first time, the presence of O-acetylation on GlcNAc in addition to O-acetylation on MurNAc. These two modifications are catalyzed by two dedicated O-acetyltransferases, OatB and OatA respectively, that control PGH activity in an antagonistic way. We have also demonstrated the implication of the OatA O-acetyltransferase in septation control. Finally, we have shown the influence of PG MurNAc O-acetylation on the anti-inflammatory properties of a Lactobacillus casei strain

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Sarmiento, Rubiano Luz Adriana. "Influencia del consumo de sorbitol en la microbiota intestinal de un modelo animal." Doctoral thesis, Universitat Politècnica de València, 2008. http://hdl.handle.net/10251/2184.

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Abstract:

El sorbitol es un poliol natural que se utiliza ampliamente en la industria de alimentos, como edulcorante, estabilizante, espesante y humectante. Este azúcar alcohol es utilizado por algunas especies del género Lactobacillus y como fuente de carbono por bífidobacterias indígenas del intestino humano. Por esta razón, algunos autores han concluido que el sorbitol podría ser un prebiótico. Sin embargo, existen pocos datos experimentalesque lo confirmen. En este trabajo se han analizado los efectos in vivo del sorbitol sobre la microbiota intestinal de ratas y se han comparado con un reconocido prebiótico como son los fructooligosacáridos (FOS). Se analizó la microbiota intestinal por métodos culturales tradicionales, así como mediante técnicas moleculares tales como PCR-DGGE y PCR cuantitativa. Los resultados mostraron que el consumo de sorbitol y FOS modificó cualitativa y cuantitativamente la microbiota intestinal de manera similar. El sorbitol aumentó y favoreció, respectivamente, la permanencia de Lactobacillus reuteri y Lactobacillus sp. AD102 en el tracto gastrointestinal de las ratas. El análisis de las concentraciones de ácidos orgánicos en el contenido intestinal demostró que la ingestión de sorbitol aumenta los niveles de butirato en el ciego y en el colon. Por lo tanto, podría contribuir al mantenimiento de una mucosa intestinal sana. Se han aislado cinco especies de Lactobacillus del contenido intestinal de ratas. La secuenciación del gen que codifica para el 16S rRNA y su posterior análisis filogenético, han permitido identificarlas como Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus intestinalis, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus murinus y Lactobacillus sp. AD102. Para esta última se llevó a cabo su clasificación taxonómica y ha sido propuesta como una nueva especie denominada Lactobacillus iatae sp. nov.
Sarmiento Rubiano, LA. (2008). Influencia del consumo de sorbitol en la microbiota intestinal de un modelo animal [Tesis doctoral no publicada]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/2184
Palancia

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Dissertations / Theses on the topic 'Lactobacilos'

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