Dissertations / Theses on the topic 'Lama pacos'

El proceso de criopreservación de espermatozoides es ampliamente usado en los programas de reproducción asistida y de mejora genética de diversas especies. La alpaca es una especie doméstica de importancia económica en nuestro país. Existen diversas técnicas para el manejo de esta especie con la finalidad de realizar un programa de mejora genética. En el caso de la criopreservación de espermatozoides, se ha trabajado tanto con espermatozoides de semen y de epidídimo, siendo más factible para el presente trabajo el uso de espermatozoides del epidídimo. Una característica que presentan los espermatozoides criopreservados en la mayoría de especies es una alteración a nivel de la membrana plasmática la cual conlleva a una reacción del acrosoma prematura, así como el descenso de la movilidad, provocando que el tiempo de vitalidad de estos espermatozoides sea muy reducido, todas estas alteraciones son producto de un tipo especial de capacitación llamada “Criocapacitación” que hasta la fecha, la posible causa, no ha sido definida. El objetivo de este estudio fue demostrar la presencia de un estado de Criocapacitación en espermatozoides criopreservados de alpaca, estudiando principalmente la movilidad, viabilidad, estabilidad de la membrana plasmática, el patrón de proteínas fosforiladas en residuos de tirosina, el estado del sistema Proacrosina-Acrosina y la capacidad de unión a zona pelúcida que tienen estos espermatozoides a diferencia de lo que presentan espermatozoides capacitados in vitro. Los resultados indican que la criopreservación afecta directamente la movilidad, viabilidad e integridad de membrana acrosomal, mostrando que tanto espermatozoides capacitados y criopreservados ofrecen un mismo patrón de proteínas fosforiladas, y que los espermatozoides criopreservados presentan una mayor cantidad de enzima activa (Acrosina) en la región del acrosoma.
-- The process of sperm cryopreservation is widely used in the programs of assisted reproduction and genetic improvement of many species. The alpaca is a domestic species of economic importance in our country. There are many techniques for managing this species in order to carry out a genetic improvement program. For the cryopreservation of sperm, samples of sperm from semen and epididymis have been used, being more feasible for the present study the use of sperm from the epididymis. One feature present in the cryopreserved sperm in most species is a disturbance at the plasma membrane which leads to a premature acrosome reaction, as well as declining mobility, making the lifetime of the sperm very small. All these changes are the result of a special type of process called "Cryocapacitation" that so far, the possible cause, has not been defined. The aim of this study was to demonstrate the presence of a state of cryocapacitation on Alapaca’s cryopreserved spermatozoa, studying mainly mobility, viability and stability of the plasma membrane, the pattern of proteins phosphorylated in tyrosine residues, the state of Proacrosin-Acrosin system and the ability of binding to pellucida zone that have these cryopreserved sperm and compare these results with those from capacitated in vitro sperm. The results indicate that cryopreservation directly affects mobility, viability and integrity of acrosomal membrane, showing that both capacitated in vitro and cryopreserved sperm offered the same pattern of proteins phosphorylated in tyrosine residues and that cryopreserved sperm has an increment of active enzyme (Acrosin) in the acrosome region.
Tesis

Evalúa a la ciclina A1 (CCNA1) cuya expresión ha sido reportada casi exclusivamente en testículos de otros animales incluyendo el hombre y se le atribuye una función crítica en el control del ciclo celular durante la espermatogénesis. Se evalua la expresión del mRNA de CCNA1, mediante RTqPCR, en testículos de alpacas provenientes del Camal Municipal de Huancavelica en edad fértil (n = 35). Estos resultados son correlacionados con parámetros fisiológicos evaluados in vitro. Se encuentra que la expresión de mRNA de CCNA1 en testículos de alpacas con regiones conservadas a nivel nucleotídico. A diferencia de lo que sucede en humanos y otros animales, el mRNA de CCNA1 mostró una baja, pero significativa asociación, con la concentración espermática (p<0.05).
Tesis

Memoria para optar al Titulo Profesional de Médico Veterinario
Se evalúa la hipótesis que camélidos sudamericanos (CS) introducidos en la Región Metropolitana de Chile estén infectados con pestivirus. Para realizar el aislamiento viral se tomaron muestras de 79 CS (42 alpacas vivas, 30 llamas vivas, una llama muerta, un feto de llama abortado, cuatro guanacos vivos y un guanaco muerto) procedentes de cinco rebaños sospechosos de estar infectados con pestivirus. Las muestras se inocularon en cultivos primarios de células de pulmón fetal bovino libre de virus diarrea viral bovina (VDVB) y se hicieron cinco pasajes antes de ser analizados por las pruebas de inmunofluorescencia directa e inmunoperoxidasa indirecta para detectar la presencia de antígenos de pestivirus. Para la caracterización molecular un fragmento de la región no traducida 5’ (5’- UTR) del ARN de cada aislado fue amplificado por transcripción reversa de reacción en cadena de las polimerasas (RT-PCR) y tratado con las enzimas de restricción Pst I, Bgl I y Xho I para identificar la especie de los virus Los resultados muestran que 37 CS (17 alpacas, 16 llamas y cuatro guanacos de los cinco rebaños) estaban infectados con pestivirus. Todos los aislados fueron no citopatogénicos. El VDVB genotipo 1 (VDVB-1) fue aislado de 6 alpacas y VDVB genotipo 2 (VDVB-2) fue aislado de 11 alpacas, 16 llamas y 4 guanacos. Los aislados virales fueron obtenidos de 14 alpacas sanas, 3 alpacas que abortaron, 13 llamas sanas, dos llamas con aborto, una llama muerta sin antecedentes clínicos y tres guanacos con enfermedad respiratoria y uno muerto con enfermedad respiratoria. Se concluye que alpacas, llamas y guanacos de la Región Metropolitana de Chile están infectados con VDVB-1 y VDVB-2
Proyecto Fondecyt 1981193

En las zonas alto-andinas del Perú, donde la agricultura y ganadería común no son viables, la crianza de camélidos, como la alpaca, constituye el único medio de subsistencia y principal actividad económica de las familias campesinas. Por tanto, el estudio de la fisiología reproductiva de la alpaca es indispensable para el establecimiento de proyectos de mejoramiento genético y reproducción asistida. Las proteínas que participan en la interacción de los gametos de las alpacas son desconocidas, es por ello que el presente trabajo planteó determinar la expresión proteica y la caracterización de una proteína de Zona Pelúcida (ZP) que induzca espontáneamente la reacción acrosómica (RA) en ovocitos de alpacas. En la mayoría de mamíferos la ZP está conformada por tres glicoproteínas ZP1, ZP2 y ZP3. En el presente trabajo se demostró que en las alpacas existen también 3 glicoproteínas con pesos moleculares de 110 kDa, 75 kDa y 65 kDa correspondientes a ZP1a, ZP2a y ZP3a, respectivamente. La ZP3 es el agonista natural de la RA en espermatozoides de la misma especie, sin embargo, los resultados obtenidos en el presente trabajo demuestran que ZP3a es capaz de inducir la RA tanto en espermatozoides de ratón como en los de su propia especie. De esta manera, este estudio ayuda al mejor entendimiento de la naturaleza de las glicoproteínas de ZP en alpacas.
--- In areas of high-Andean Peru, where agriculture and livestock are not viable, the breeding of camels, such as alpaca is the only means of livelihood and main economic activity of farm households. Therefore, the study of the reproductive physiology of alpacas is essential to the establishment of projects in assisted reproduction and genetic improvement. The proteins involved in the interaction of the alpaca’s gametes are unknown; therefore the present determined the protein expression and characterization of a zona pellucida (ZP), which induce the spontaneous acrosome reaction (AR) in oocytes of alpacas. In most mammals, the zona pellucida (ZP) is composed by three glycoproteins ZP1, ZP2 and ZP3. In this research demonstrated that in Alpacas there are also 3 glycoproteins with molecular weights of 110 kDa, 75 kDa and 65 kDa corresponding to aZP1, aZP2 and aZP3, respectively. ZP3 is the natural agonist of the acrosome reaction (AR) in spermatozoa of the same species, however, our results obtained in this research showed that aZP3 can also induce RA in mouse sperm and in their own species. Therefore, this study helps to better understand the nature of the zona pellucida glycoproteins in alpacas.
Tesis

The purpose of this study was to enrich the environment for llama (Lama glama) and alpaca (Vicugna pacos) in a zoo. The zoo is located in northern Sweden (Umeå, Mickelträsk). The llama herd consists of three individuals of breed qara, two males and one female and the alpaca herd consists of six individuals of breed huacaya, one male, four females and one foal. The species lived in separate enclosures, they lived outside all year round and they had a shelter for wind and rain protection. They feed on pasture and were fed hay and pellet concentrate. A behavioral-study was carried out in April 2014, a five-day study where each of the species were observed 3 h a day, 1,5 h in morning and afternoon. The behavioral of llama and alpaca were observed individually and each behavior was observed in terms of duration and frequency. The study observed if the animals had a possibility to implement their natural behaviors in their enclosures and whether they showed any abnormal- or stereotypical behaviors that can occur in captivity. The questions I wanted to answer were: (1) what behaviors are occurring, (2) Is it possible to indicate from the behaviors if the animals are doing well or not, (3) Is there a difference in behaviors in the morning and afternoon? (4) Is there a difference between the sexes? (5) What actions should be undertaken to enrich and improve the habitat for llamas and alpacas in a zoo? The results from the study show that llamas and alpacas show many normal and natural behaviors, no abnormal-or stereotypical behaviors were visible. Some behaviors were more common in morning and some in afternoon and there were differences in behaviors between the sexes. Example for some environmental enrichment for the llamas and alpacas in the zoo was to add logs, trees, shrubs and sand piles to the enclosure.

Publicación a texto completo no autorizada por el autor
Establece el perfil bioquímico sanguíneo hepático y renal de los animales clínicamente sanos a través de los valores séricos de Bilirrubina Total (BT), Bilirrubina Indirecta (BI) y Bilirrubina Directa (BD), ALT, AST, Fosfatasa Alcalina, GGT, Proteína Total, Albúmina, Globulina, Urea y Creatinina. Se emplearon 60 animales (30 Adultos y 30 Tuis), procedentes de los poblados de Cochas y Pachacayo, provincia de Jauja, a una altitud de 3.370 m.s.n.m. aproximadamente. Los animales fueron capturados y llevados a un corral, se extrajo 8ml de sangre por punción de la vena yugular, colectadas en tubos estériles rotulados y sin anticoagulantes, para la obtención del suero. Los sueros fueron procesados en el Laboratorio de Patología Clínica de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, los valores encontrados (media ± D.E.) fueron: Bilirrubina Total: 0.62 ± 0.51 mg/dl (0.10 – 0.90); Bilirrubina Directa: 0.13 ± 0.09 mg/dl (0.05 – 0.50); Bilirrubina Indirecta: 0.51 ± 0.52 mg/dl (0.05 – 2.25); ALT 23.27 ± 13.11 UI/L (5.0 – 80.0); AST 197.2 ± 53.74 UI/L (94.0 – 419.0); Fosfatasa Alcalina 159.45 ± 76.6 UI/L (13 – 320.0); GGT 22.35 ± 10.63 (5.0 – 54.0); Proteínas Totales 7.73 ± 1.18 g/dl (6 – 12.2); Albúmina 3.63 ± 0.65g/dl (2.6 – 5.4); Globulina 4.10 ± 1.40 g/dl (1.2 – 9.4); Urea 39.1 ± 9.02 mg/dl (20 – 70) y Creatinina 2.21 ± 0.54 mg/dl (1.3 – 3.7). Se encontró diferencia estadística significativa (p<0.05) con respecto a la variable edad en los análisis estadísticos, para Bilirrubina Total, Indirecta y Fosfatasa Alcalina; pero no hubieron diferencias significativas (p<0.05) para los demás parámetros bioquímicos.
Tesis

Diez microsatélites para alpacas y llamas fueron usados para evaluar parentesco en 47 alpacas registradas de la Estación Experimental IVITA - Maranganí, provenientes de la provincia de Canchis (Cusco - Perú). El análisis se llevo a cabo utilizando dos metodologías: secuenciador automático (ABI 377 DNA sequencersâ) y técnica de tinción con nitrato de plata. Los microsatélites fueron amplificados en tres reacciones de PCR múltiple y diez reacciones de PCR simple. Los 10 microsatélites fueron polimórficos para ambas metodologías. El número de alelos vario entre 4 y 20, las frecuencias alélicas y probabilidad de exclusión (PE) fueron calculadas utilizando el software Cervus 2.0. Todos los loci, a excepción de dos, se encontraron dentro de los rangos publicados por Lang et al. (1996) y Penedo et al. (1998). La probabilidad de exclusión acumulada para los 10 loci de 0.9999. La probabilidad de exclusión acumulada para cada reacción de PCR múltiple fue mayor a 0.90. Ambas metodologías obtuvieron los mismos resultados. Los resultados confirmaron la paternidad en 17 casos, sin embargo, en más de un 22% de los casos, padres alternativos fueron identificados como padres comparando con los registros.
Ten microsatellites for alpacas and llamas were used to evaluate paternity in 47 alpacas registered at IVITA Research Station Maranganí, Canchis Province (Cusco – Perú). Analysis was carried out using both methodologies: Automatic Sequencer (ABI 377 DNA sequencersâ) and silver staining techniques. Microsatellites were amplified in three multiplex reactions and ten single PCR reactions. They were polymorphic for all alpaca samples using both methodologies. The number of alleles varied between 4 and 20, the allelic frequencies and the exclusion probability were calculated using Cervus 2.0. All loci, except for two, were within the range published by Lang et al. (1996) and Penedo et al. (1998). The accumulated exclusion probability for the ten loci was 0.9999. For each multiplex reaction the accumulated exclusion probability was more than 0.90. Both methodologies yielded the same results. It was possible obtain the same results using both methodologies. The results confirmed paternity in 17 cases of parent-offspring pairs, however in a further 22% of cases alternative adults were identified as parents compared with the register.
Tesis

Thesis (Ing.)--Universidad Católica Boliviana "San Pablo". Unidad Acade̕mica Campesina Tiahuanaco, Carrera Ingeniería Zootécnica, 2004.
Reproduced from copy at BYU's Benson Institute. Includes additional t.p. Includes bibliographical references.

This study was done in the subtropical high Andes of Ulla Ulla. Its objectives were to determine the botanical composition, nutritional value, and preferred forages in the wetlands (hydromorphic and mesico) diet, by season (dry and wet), and by botanical family (12 families). Three-hundred sixty samples were collected from 6 alpacas with esophageal fistulations, and from them nutritional value and botanical composition were determined; the latter was compared with the botanical composition of the wetlands to determine preference. The results are highly significant (p<0.01) for botanical families, interaction between season and family, interaction of wetland type and family, and interaction of the season with wetland type and family. Species from the family Juncaceae were the most consumed with 27.78%, followed by moderate consumption of Cyperaceae (21.03%), Gramineae (15.02%), and Rosaceae (12.39%). Lower consumption occurred with Umbeliferaceae and Asteraceae with 6.61% and 5.64%, respectively, and the lowest consumption was of Plantaginaceae, Scrophulariaceae, minor plants, Gentianiaceae, unidentified plants, and Ranunculaceae with 2.86%, 2.50%, 2.17%, 2.08%, 1.03%, and 0.89%, respectively. The botanical families with the greatest preference value (PV) were Gramineae (PV=6.48), Scrophulariaceae (PV=8.75), Gentianiaceae (PV=7.55), and Ranunculaceae (PV=8.16). Proportional preference was observed in Juncaceae (PV=1.49), Cyperaceae (PV= -1.72), Rosaceae (PV=1.82), and Umbeliferaceae (PV= -0.82). The Asteraceae family was classified as a forced preference (PV= -6.29). The average nutritional value of the diet shows high values: 14.69% of raw protein, 14.58% ash, 85.42% organic matter, 21.43% raw fiber, and 31.00% neutral detergent fiber. It was concluded that alpacas efficiently select their diet for nutritional value, however, consumption is not appropriate, which results in negative live weight gain, especially in the dry season. On the other hand, the plants' preference values correspond to the lowest and one of the highest is a forced preference, according to the botanical composition of the wetland, which suggests that the preferred plants are repeatedly consumed in current continual pastures, and that alpacas are forced to consume unpalatable plants. This reflects on bad CANAPAS wetlands management in Ulla Ulla. Consequently, reversing this situation implies changes in pasture management and a reduction of the animal load.

Se aplica la técnica del ADN polimorfico Amplificado al Azar (RAPD) se aplica al estudio molecular de Lama pacos (alpaca), esta metodología se propone debido a que las técnicas de microsatélites y ADN mitocondrial, que actualmente se utilizan, no tienen un uso práctico cuando se trata de analizar gran cantidad de muestras. Para la estandarización del RAPD se utilizo ADN genómico a partir de sangre total y cebadores de 10 nucleotidos siguiendo los protocolos estandarizados modificando básicamente la concentración de MgCl2 a 2.5 mM permitiendo aumentar la intensidad de las bandas y una mejor visualización. Se prosiguió con la identificación de cebadores informativos, de 23 cebadores fueron seleccionados 7 (OPF-05, OPI-04, OPB-03, OPI-18, OPB-11, OPA-18 y OPI-14) por generar numerosas bandas por muestras analizadas. Estos cebadores permitieron obtener perfiles diferentes entre alpacas híbridas y puras; en la muestra poblacional estudiadas no se encontraron alpacas que tuvieran un perfil de bandas similares a los presentados por los animales puros, esto explicaría el grado de hibridación que existe debido a un inadecuado cuidado en el cruce, esto trae como consecuencia, por ejemplo, una baja calidad en la producción de fibra por las alpacas y llamas híbridas disminuyendo el ingreso económico para las familias campesinas. En 8 alpacas los cebadores OPB-03 y OPA-18 mostraron bandas polimorficas de 650 pb y 1000 pb respectivamente, este polimorfismo nos podría indicar alguna mutación o variabilidad intraespecífica, ya que estos animales no presentan diferencias fenotípicas evidentes.
-- The Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) is applied on the molecular study of Lama pacos (Alpaca), this methodology is proposed because the microsatellites and DNA mitochondrial techniques, which are used commonly, don't have a practical utility when is necessary to analyze great quantity of samples. Genomic DNA obtained from total blood and primers of 10 nucleotides were used to standardize the RAPD technique following the standardized protocols, and concentration of MgCl2 was modified at 2.5 mM which allowed an increase at the intensity and a better visualization of the bands. After the standardization, the identification of informative primers was realized, beginning with 23 primers, selecting only 7 (OPF 05, OPI 04, OPB 03, OPI 18, OPB 11, OPA 18 and OPI 14), because the presence of several bands for the analyzed samples. These primers let obtain different profiles between hybrid and pure alapacas; in the sample were not found alpacas with a similar bands profiles to those presented by the pure animals, this would explain the hybridization grade that exists due to an inadequate care in the crossing, this results in, for example a low quality in the fiber production from the hybrid alpacas and llamas, diminishing the economic entrance for the rural families. In 8 alpacas the primers OPB-03 and OPA-18 showed polymorphic bands of 650 pb and 1000 pb respectively, this polymorphism could indicate some mutation or intraespecific variability, since these animals don't present evident phenotypic differences.
Tesis

This investigation was performed in the Altiplano Altoandino sub-humid region in the Ulla Ulla district, Pelechuco township, Franz Tomayo province, department of La Paz, Bolivia. The objective of this study was to quantify and compare the presence of Brucellosis in male and female alpacas (Lama pacos) at ages 2, 3, 4, 5, 6, and 7 years. Blood samples were taken from the jugular vein of 500 alpacas from the Hichucollo, Huacuchani, Ucha Ucha, and Ulla Ulla communities. The serum from each sample was separated and a serological diagnosis was performed by rapid agglutination with Rose Bengal chemical stain. In the Ulla Ulla district, 11.0% of alpacas were suspected of being infected. Of that 11.0%, 9.6% represented female alpacas while the remaining 1.4% represented male alpacas. By community, the overall results were 0.6%, 0.2%, 7.4%, and 2.8% for Hichucollo, Huacuchani, Ucha Ucha, and Ulla Ulla respectively. With regards to gender in each community, 1.4%, 1.6%, 13.3%, and 11.1% of female alpacas and 2.7%, 0.0%, 1.2%, and 1.9 % of male alpacas were suspected of being infected in Hichucollo, Huacuchani, Ucha Ucha, and Ulla Ulla, respectively. According to age, 0.8%, 2.6%, 3.8%, 2.0%, 11.8%, and 0.0% were suspected of Brucellosis in alpacas 2, 3, 4, 5, 6, and 7 years old, respectively in the Ulla Ulla district. The analysis of variance among the results does not present significant differences (p ≥ 0.05), failing to reject the given hypothesis. The final prevalence point found in the Ulla Ulla district was 11.0%. It was concluded that the prevalence of suspected cases of Brucellosis in alpacas is a consequence of the antigenic characteristics of each biotype. Furthermore, the results affirm that the poor management of livestock and livestock health lead to significant problems with alpaca health. It is therefore necessary to implement control strategies as well as disease monitoring in communities by following a detailed program of diagnostic tests for Brucellosis. Also, non-infected flocks must be protected against infection.

El Toxoplasma gondii, agente causal de la toxoplasmosis, es un parásito importante en la salud animal, por ser una de las principales infecciones parasitarias que ocasiona problemas reproductivos, y también constituye una zoonosis muy importante alrededor del mundo. El objetivo del presente estudio fue determinar la seroprevalencia de Toxoplasma gondii en alpacas de la Unidad de Producción de Cochas de la SAIS Túpac Amaru, ubicada en el distrito de Canchayllo, Provincia de Jauja, Departamento de Junín. Para tal fin, se recolectaron sueros sanguíneos procedentes de 200 alpacas entre hembras y machos, en el mes de diciembre de año 2000, para la detección de anticuerpos mediante la técnica de Hemaglutinación Indirecta (HAI). Los resultados generales indicaron que el 21 ± 5.64 % (42/200) de las muestras de alpacas presentaron anticuerpos con títulos que variaron desde 1/16 hasta 1/1024. La seroprevalencia hallada en machos 26.47 10.49 % (18/68) fue mayor que en hembras 18.18 6.57 % (24/132), y por rangos de edad desde los 8 a 12 meses, de 12 hasta 36 meses y más de 36 meses las seroprevalencias fueron 33.33 16.08 %, 15.38 9.81, 20 7.31 respectivamente. Al realizar el análisis estadístico respectivo mediante la Prueba de regresión Logística no se encontró relación estadística significativa entre la presencia de anticuerpos contra T. gondii y el sexo de las alpacas, pero si entre la edad del animal y la infección por T. gondii, siendo las alpacas más jóvenes (8 a 12 meses) aproximadamente 2,9 veces más susceptibles que los otros dos grupos etéreos, este resultado podría deberse a la presencia de anticuerpos maternales, manejo de los animales, factores ambientales y frecuencia del hospedero definitivo. La prevalencia encontrada en el presente estudio fue moderada, por lo tanto, se hace necesario la realización de más estudios a fin de determinar el verdadero rol de este parásito en los problemas reproductivos de las alpacas.
--- Toxoplasma gondii, causative agent of toxoplasmosis, is an important parasite in animal health because it is one of the major parasitic infections that produce reproductive problems, and also it is an important zoonosis worldwide. The objective of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against Toxoplasma gondii in alpacas from the Unit of Production of Cochas of the SAIS Tupac Amaru, located in the district of Canchayllo, Province of Jauja, Departament of Junin, Perú. To this end, sera from 200 alpacas among females and male were gathered in the month of December of 2000, for the detection of antibodies by using the method of Indirect Hemaglutination (IHA). 21 5.64 % (42/200) of the samples showed antibodies, with titles ranging from 1/16 up to 1/1024. The seroprevalence found in males was 26.47 (10.47% (18/64), and it was greater than in females, 18.18 6.57 % (24/132), and for age groups, from the birth until 1 year old, more than 1 up to 2 years old and more than 3 years old; the seroprevalence found was 33.33 16.08%, 15.38 9.8, 20 7.31 respectively. The analysis by using The Logistic regression found that the genus did not represent a risk factor. The age did represent a risk factor, being younger alpacas (8 to 12 months) more susceptible than other age groups. These results are coherent with other studies obtained in different parts of world, however, it is observed that there are differences with recent studies obtained in Peru; this, this could be due to environmental factors, frequency of the definitive host. Prevalence found in the present study was moderate, should be done further studies to determine the real importance of T. gondii in the occurrence of abortion in alpacas.
Tesis

La Zona Pelúcida es la matriz extracelular que rodea a los ovocitos de vertebrados, cumple roles trascendentales en la reproducción, incluyendo el reconocimiento y unión de gametos especie-específico, inducción de la reacción acrosómica (RA) del espermatozoide, el bloqueo de la poliespermia, mantiene la integridad del embrión temprano durante su transición por el oviducto; está constituida por tres glicoproteínas: ZP3 que induce RA; ZP1, estructural, que interconecta a ZP3 y ZP2. ZP2 es la molécula de unión secundaria, interactúa con los receptores espermáticos expuestos después de RA siendo necesaria para mantener la unión del espermatozoide al ovocito, su modificación proteolítica después de la fertilización permite el bloqueo de la poliespermia. ZP2 participa también en la organización, el desarrollo y maduración del ovocito, puesto que mantiene consistente la matriz y la interacción entre las células periféricas y la célula germinal. Se caracterizó y analizó in silico la secuencia codificante parcial de la glicoproteína de Zona Pelúcida tipo 2 (aZP2) en alpacas, se determinó que esta proteína se expresa exclusivamente en los ovarios. Además está secuencia parcial analizada se encuentra conservada, constituyéndose un grupo monofilético entre los Cetarteodactyla. La presente Tesis aporta conocimiento básico sobre la glicoproteína aZP2 en alpacas, proteína implícita en la fecundación, conocerla implícitamente beneficia el mejoramiento de las actuales técnicas biotecnológicas reproductivas tales como la maduración folicular-ovocitaria, criopreservación de gametos y embriones, fertilización in vitro e inyección intracitoplasmática del espermatozoide, técnicas que se intentan aplicar con muchas dificultades en camélidos.
The zona pellucida is a extracellular matriz that surrounds vertebrate oocytes, and plays important roles in the recognition and interaction of gametes specie- specific, induction of Acrosome Reaction (AR) of the spermatozoa, block to polyspermy, keeps th integrity of the early embryo through its transicion by the oviduct; It is composed of three glycoproteins: ZP3 that induces RA; ZP1, structural, crosslink ZP3 and ZP2. ZP2 acts as a secondary sperm receptor that is necessary for the maintenance of sperm binding to the egg, its proteolytical modification after fertilization permits the block to polyspermy ZP2 participates also in the organization, development, maturation of the oocyte beacuse it keeps consistently the matrix and the interaction between peripherical cells with the germ cell. We isolated and analized in silico a partial coding secquence of the glycoprotein of type 2 (aZP2) in alpacas, we determined that this protein is express exclusively in the ovaries. Also this amalized partial secquence is conserved, constituting a monophyletic group between Cetarteodactyla. This thesis work provides basic knowledge on the glycoprotein a ZP2 in alpacas, a protein implicitly involved in fertilization, to know it benefits the improvement of existing reproductive biotechnology techniques such as the follicular-oocyte maturation, cryopreservation of gametes and embryos in vitro fertilization and injection of intracytoplasmic sperm, techniques that are trying to be implemented with many difficulties in camelids.
Tesis

Se reporta el resultado del análisis citogenético realizado en el Laboratorio de Genética Humana de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, en 21 llamas (Lama glama) y 26 alpacas, (Vicugna pacos) procedentes de Huari (Huancavelica) y Acopampa (Junín), con edades entre 4 - 8 años, aparentemente sanos y de ambos sexos. En las dos especies se encontró un número diploide de 74 cromosomas (2n = 74) y la misma morfología en todos los cromosomas, excepto en el par 35 que es metacéntrico en llamas y subtelocéntrico en alpacas y a la fecha es la diferencia cromosómica más notable reportada entre todas las especies de la familia Camelidae. Los cromosomas sexuales son metacéntricos, siendo el X el metacéntrico de mayor Longitud Relativa (LR) y constituye aproximadamente el 5% del genoma, mientras que el Y es el metacéntrico más pequeño del cariotipo y representa alrededor del 0.9% del genoma de llamas y alpacas. Para determinar la ubicación de cada par cromosómico en el cariotipo, estimamos la LR de cada uno en concordancia con Levan et al. (1964), mientras que la morfología fue determinada a partir del Índice Centromérico (IC). La distribución de la heterocromatina constitutiva es centromérica ó pericentromérica en casi todos los cromosomas, pero en algunos de los más pequeños se extiende hasta la región telomérica del brazo corto (p). Nuestros resultados sustentan una diferencia morfológica en el par 35 de llamas y alpacas, adicionalmente, encontramos un heteromorfismo en el p del cromosoma 1 de alpacas que determina 2 tipos de cromosomas 1: 1a y 1b, ampliamente distribuidos en las poblaciones de alpacas analizadas, pero no en las de llamas que son homomórficas para el cromosoma 1 del tipo b: (1b1b). Ambas variables podrían haberse originado a consecuencia de una inversión pericéntrica.
Tesis

La prolactina participa en la regulación de los ciclos de desarrollo del folículo piloso y puede modular directa o indirectamente los ciclos de su crecimiento, caída y muda en animales peludos. Los receptores de prolactina han sido localizados en queratinocitos epidermales y foliculares de rata por hibridación in situ (Ouhtit et al., 1993) y en queratinocitos foliculares y fibroblásticos de la papila dermal de la oveja con un ensayo de unión radioligando (Choy et al., 1995). Los lugares de unión de prolactina que exhiben gran afinidad por el ligando fueron identificados en preparaciones de la membrana de piel de visón, la más alta concentración de lugares de unión fue encontrado durante el ciclo de crecimiento del pelaje en invierno (Rose et al., 1995). La actividad de unión del receptor de prolactina y la expresión del gen del receptor de prolactina en piel de ovinos han sido definidos recientemente (Choy et al., 1997). La prolactina y la expresión del receptor de prolactina durante el ciclo piloso murino no estacional, el cual en contraste con la oveja en comparación con el cuero cabelludo del humano reportan que ambos, prolactina y receptor de prolactina son estrictamente restringidos al epitelio del folículo piloso y son fuertemente dependientes del ciclo del pelo (Foitzik et al., 2003). En ovejas los folículos pilosos productores de lana pueden ser inducidos a su crecimiento cíclico manipulando los niveles de prolactina circulante, la cual altera los patrones de expresión de genes relacionados a queratinas de la lana y además, esta prolactina es generada localmente en el folículo piloso y actúa directamente en forma autocrina y paracrina en las ovejas (Pearson et al., 1999). Por lo tanto, el lugar o lugares de acción de la prolactina en la regulación del crecimiento estacional de la fibra permanecen como una pregunta abierta. Es posible que los efectos diferentes de la prolactina sobre los folículos telógenos y anágenos puedan ser ejercidos por medio de diferentes células blanco (Choy et al., 1997). Todos estos estudios nos indican que existe una regulación en el crecimiento del pelo o lana de tipo endocrino hormonal, y que también debe existir este control en el crecimiento de la fibra de la alpaca. El presente trabajo tiene entonces por objetivo determinar mediante la técnica Inmunohistoquímica la presencia de receptores para prolactina (PRLRs) en células epiteliales de folículos pilosos primarios y secundarios de piel de alpaca (Lama pacos).
Tesis

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario
El virus de la diarrea viral bovina (VDVB) pertenece al género Pestivirus de la familia Flaviviridae. Se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza infectando a animales silvestres y domésticos del orden Artiodactyla. Es el agente causal del complejo diarrea viral bovina/enfermedad de las mucosas, ocasiona enfermedad digestiva y respiratoria, es inmunosupresor y genera importantes pérdidas económicas asociadas a problemas reproductivos como pérdida embrionaria, abortos, mortinatos, defectos congénitos y el nacimiento de animales persistentemente infectados (PI). Presenta una gran variabilidad genómica; dos genotipos (VDVB-1 y VDVB-2), y varios subgrupos genómicos dentro de cada genotipo, han sido identificados. Existen dos biotipos, citopático (CP) y no citopático (NCP), y aunque no presentan serotipos, existen varias variantes antigénicas del virus. En esta memoria se buscó establecer si se manifiestan diferencias significativas a nivel antigénico entre cepas de referencia (NADL, Singer y Oregon) del subgrupo 1a del VDVB-1 y aislados virales de diferentes genotipos y subgrupos del VDVB (VDVB-1b, VDVB-1e y VDVB-2a) recolectados de 3 bovinos, 6 alpacas y 5 llamas de la Zona Central de Chile, y que provenían de rebaños sanos y de rebaños con antecedentes de signos clínicos atribuibles a la enfermedad (abortos, mortinatos, y muerte en adultos). Los aislados de alpacas y llamas corresponden a virus de los subgrupos 1b y 1e del genotipo 1 del VDVB (VDVB-1b y VDVB-1e), y al subgrupo 2a del genotipo 2 (VDVB-2a); mientras que los aislados de bovinos pertenecen a los subgrupos VDVB-1b y VDVB-1e. Para determinar el grado de similitud antigénica entre los aislados y cepas de los distintos subgrupos se realizaron pruebas de neutralización cruzada, empleando antisueros policlonales (elaborados en conejos). Mediante el cálculo del coeficiente de similitud antigénica (R) se pudo detectar la presencia de diferencias antigénicas significativas entre aislados de subgrupos distintos, mientras que los ubicados dentro de un mismo subgrupo mostraron valores de R indicativos de similitud antigénica en casi todos los casos, excepto en la combinación de un virus de alpaca y uno de bovino, ambos del subgrupo 1b, que mostraron diferencias antigénicas significativas
Proyecto Fondecyt 1080130

This study had the principal objective of evaluating the metabolic effect of three protein levels in the nutrition of Alpacas (Lama pacus) in the experimental stations of Brigham Young University, located in the city of Provo, Utah, U.S.A at an altitude of 13696 m.a.s.l., and geographically located at 40°12’ north latitude, and 111°43’ west longitude. The climatic characteristics of the state of Utah, particularly in the city of Provo, during the current season registered the following: 4°C of minimum average temperature, 11.4°C of an average mean temperature, and 19°C of maximum average temperature, 55% of relative humidity, and a mean annual precipitation of 353.1 mm; presenting an arid climate. With the principal objective in mind, the following specific objectives were established: verify the physical condition of the Alpaca through the gain or loss of Live Weight (LV) and the weight of the animal internal organs (heart, liver, lungs, kidneys, spleen, brain, and muscle); quantify the changes of the Blood Components (metabolites): Albumin, Total Plasma Protein (TTP), Creatinine, Fatty Acids, Glucose, and Plasma Urea Nitrogen (PUN); determine Nitrogen retention through laboratory analysis of feces and urine; and determine protein digestibility by calculating the percentage of Nitrogen digestibility. For that effect, two tests were performed, one in corrals and the other in metabolic cages, in order to complement the results.

The aim of the studies in this thesis was to develop a treatment protocol that controlled ovarian follicular growth so that the time of optimum fertility could be predicted in female alpacas. Female alpacas exhibit growth and regression of successive large follicles and typically only ovulate in response to the mating stimulus. Non-pregnant females are sexually receptive most of the time, apparently regardless of the stage of ovarian follicular growth. Conventional breeding results in slow genetic gain because matings occur at random stages of follicular development. Because of the nature of their reproductive physiology, assisted breeding technologies are poorly developed in alpacas and the Australian alpaca industry relies on transport of males and females over relatively large distances to disseminate superior genotypes. The efficiency of this form of genetic improvement would be enhanced if conception rates to a single mating could be increased. Initial studies in this thesis aimed to clarify ovarian follicular growth characteristics in nonpregnant females. An inverse relationship between the diameter of the largest follicle and the number of follicles detected supports the hypothesis that follicular growth in camelids occurs in waves. It was established that the growth characteristics of follicular waves varied within and between females. Wide variation in the interval between successive follicular waves made the use of a mean interwave interval value inappropriate. Non-pregnant alpacas had a follicle in the size range potentially capable of ovulating, but of unknown fertility, on either ovary most of the time. A second objective was to determine the relationships between sexual receptivity, mating behaviour, ovarian follicular state and mating success. It was not possible to correlate mating behaviour or ovarian status with mating success. Matings to optimise pregnancy rates in alpacas need to occur in the presence of an oestrogenic follicle that is capable of ovulation in response to mating. Simple detection of alpacas with follicles in this state was not possible and treatments to control ovarian follicular growth were therefore investigated. Attempts to control ovarian follicular waves in alpacas were focussed on inducing regression of the existing dominant follicle of unknown age and allowing emergence of a new cohort of follicles at a known time after treatment. The induction of ovulation to remove the existing dominant follicle was not considered in these studies. Single intramuscular (i.m.) injections of 1713-oestradiol (oestradiol) or oestradiol benzoate, at different doses and with and without simultaneous injection of progesterone, were unsuccessful in controlling follicular growth to allow emergence of a new follicular wave at a known time. This finding was unexpected given that oestradiol causes the regression of follicles in cattle and sheep. It was concluded that alpacas, and perhaps camelids in general, have different intra- and/or extra-ovarian mechanisms that control follicular growth and regression compared with ruminants that are spontaneous ovulators. Subsequent studies examined the effects of different protocols of progesterone treatment on ovarian follicular growth and regression. Twice daily i.m. injection of25 mg of progesterone for 21 days was effective at inducing regression of the existing dominant follicle and suppressing emergence of a new follicular wave until treatment ceased. To make the treatment more practical and reduce the number of injections required, subcutaneous implants of norgestomet and lower frequency, higher dose progesterone treatments were examined. The most practical and effective protocol for ovarian follicular control in female alpacas was provided by 200 mg progesterone injected i.m. on Days 0, 2 and 4. The majority of females treated with this protocol had a newlyemerged follicle with a diameter capable of ovulation on Day 16, 12 days after progesterone treatment ceased. Mating trials were performed on three commercial alpaca farms to compare pregnancy rates at Day 60 in females treated with the progesterone protocol and mated on Day 16 and females mated at random. Results showed that treated females were capable of ovulation, fertilisation and pregnancy, however, there was no difference in 60-day pregnancy test percentage between females receiving the Day 0-4 progesterone synchronisation protocol and females treated with oil placebo. The oocyte contained in the first dominant follicle following progesterone treatment would need to be of normal fertility in order for the progesterone-based protocol to increase pregnancy rates to a single mating. As a first step to examining oocyte integrity, oocytes were retrieved by ultrasound-guided, transvaginal aspiration on Day 17 in females treated with the progesterone protocol described above involving injections on Days 0, 2 and 4. Half of these females had an injection ofluteinising hormone (LH) on Day 16 to simulate a mating-induced LH surge. Oocytes were examined by light and electron microscopy to observe whether the cellular ultrastructure was indicative of normal maturation. Only oocytes from those females that received LH showed changes to the cellular ultrastructure indicative of normal maturation including meiotic progression (nuclear maturation) from Prophase I to Metaphase I, an increase in the width of the perivitelline space and expansion of the cumulus cells surrounding the oocyte. This finding was interpreted to suggest that the oocyte contained in the first ovulatory follicle after progesterone treatment has a normal capacity for fertilisation and embryo development competency. This thesis presents new information on ovarian follicular wave characteristics in nonpregnant female alpacas and introduces a practical protocol based on progesterone to control ovarian follicular growth. The protocol allows for fixed-time mating. The Australian alpaca industry will benefit from more efficient utilisation of genetically superior males and females and faster dissemination of improved genotypes throughout the national herd. Potential benefits include incorporation of the progesterone protocol into other assisted breeding technologies such as artificial insemination, embryo transfer and possibly the in vivo maturation of oocytes for in vitro fertilisation.

Se evaluó la carga parasitaria y su interacción madre-cría, desde el nacimiento al destete en alpacas (Vicugna pacos) y llamas (Lama glama), en el Centro Investigaciones de Camélidos Sudamericanos CICAS “La Raya”, Cusco. Durante los meses de febrero a setiembre, se utilizaron 15 alpacas madres con sus respectivas crías al igual que en llamas con sus crías, en una ecología de alrededor de 4 000 m.s.n.m. y que no recibieron tratamiento antihelmíntico durante el lapso de estudio, el monitoreo fue desde el nacimiento, cada semana hasta el día del destete. Mediante la técnica de Mc master modificado utilizando una solución de flotación de nitrato de sodio. Se identificó a las siguientes especies de parásitos: Eimera lamae, E. alpacae, E. punoensis, E. macusaniensis y E. ivitaensis, además de los nematodos como Nematodirus spathiger, N. Lamae, Lamanema chavezi, Trichuris ssp, Capillaria ssp y huevos tipo Strongylus en crías y madres de alpaca y llama. Las mayores cargas parasitaria son: Eimeria ssp con 879, 11 716 y 3593 OPG en llama madre y cría y alpaca cría respectivamente, Nematodirus ssp con 21 HPG y 23 HPG en alpacas madre y cría respectivamente, Lamanema chavezi con 26 HPG en llamas madre, HTS con 24 HPG tanto alpaca y llama madre, además hay un significativo efecto de la carga parasitaria de la madre hacia su cría con valor desde 90,15% al 100% de relación en las principales especies parasitarias como son: Eimeria ssp, Nematodirus ssp, Lamanema chavezi y HTS en alpacas y llamas y un efecto menor en Trichuris ssp para alpacas. No se estableció la correlación entre los parásitos de madre y parásitos de su cría.