Academic literature on the topic 'Leucémie aiguë lymphoblastique de l'enfant'

Dans ce travail, nous nous sommes intéressés aux difficultés pragmatiques qui sont rencontrées dans les études pronostiques biomédicales. A travers l'exemple de la leucémie aiguë lymphoblastique de l'enfant, une maladie létale en l'absence de traitement, mais guérissable dans deux cas sur trois par un traitement adapté, nous nous sommes attachés à évaluer la qualité des études pronostiques. Après une étude exhaustive de la littérature concernant une famille de facteurs pronostiques évaluant la réponse précoce au traitement, nous avons constaté qu'aucune étude ne remplissait les critères de qualité minimaux de Simon et Altman. Nous avons identifié plusieurs difficultés récurrentes dans ces études. La reproductibilité des variables n'est jamais explorée de façon satisfaisante. Le choix des points de césure ne repose pas sur une méthodologie acceptable. Enfin l'apport d'information d’une nouvelle variable pronostique n'est pas évalué. Dans une deuxième partie de ce travail, à partir d'un échantillon de 1545 patients traités par les protocoles Fralle 83, Fralle 87 et Fralle 89, nous avons étudié la variation du risque pour les variables pronostiques continues dans la LAL de l'enfant et nous avons évalué l'apport d'information des variables pronostiques. Notre travail démontre que les variables les plus pertinentes utilisées aujourd'hui dans la leucémie aiguë lymphoblastique apportent peu d'information. L'ensemble de ces résultats encourage à avoir une approche plus rigoureuse concernant le développement des facteurs pronostiques. Un tel constat encourage très vivement à simplifier les classifications thérapeutiques, basées sur de telles études pronostiques, et à élargir les critères d'inclusion des essais thérapeutiques.

La sécrétion de MMP-2 et de MMP-9 par les cellules de cancers solides est depuis longtemps reconnue comme un marqueur de mauvais pronostic et comme un signe ostentatoire de leurs capacités métastatiques. Ce travail regroupe des études dédiées aux mécanismes moins bien connus responsables de l'invasivité des cellules leucémiques. Nous montrons que la sécrétion basale et stimulée de MMP-2 et de MMP-9 par les cellules LAL pré-B provenant de la moelle osseuse (MO) et du sang périphérique (SP) est dépendante du calcium intracellulaire et extracellulaire mobilisée par les canaux calciques dépendant du voltage de type «L». La sécrétion basale de la MMP-9 est plus fréquemment observée que celle de la MMP-2 dans les deux prélèvements cellulaires. Les cytokines, choisies pour leur importance dans la stabilité du microenvironnement de la MO, telles que le SDF-1, le GM-CSF, le bFGF et le VEGF-A, exercent (excepté le SDF-1) des effets stimulateurs différents sur l'activité enzymatique de la MMP-2 et de la MMP-9. La sécrétion de la MMP-9 est contrôlée par les kinases PI-3K et MEK1 et celle de la MMP-2 dépendrait de voies de transduction différentes. Le GM-CSF semble activer des ATPases membranaires de type MDR (multidrug resistance proteins) connues pour leurs capacité d'élimination des xénobiotiques du cytosol. Ensuite, nous démontrons que les VEGFs exercent leurs effets sécrétoires de manière autocrine. Ainsi, les cellules LAL sont capables d'exprimer plusieurs VEGFs et leurs récepteurs spécifiques. Le VEGF-B est le ligand exprimé chez tous les patients. Les ARNm des VEGF-A 121, 165 et 206 sont transcrits par la plupart des cellules provenant de la MO. Le VEGF-C n'est observé que dans 2 prélèvements seulement tandis que le VEGF-D est totalement absent. Certaines cellules peuvent également exprimer les deux récepteurs VEGFR-1 (88%) et VEGFR-3 (76%) alors qu'un plus faible nombre exprime le VEGFR-2 (12%). Le rapport entre l'activité stimulée par le VEGF-A 165 exogène et l'activité basale indiquent que l'amplitude de la réponse induite est inversement proportionnelle au niveau basal. Ceci démontre que les VEGFs endogènes sont capables de stimuler l'activité de la MMP-9 et suggère que la libération basale ne serait pas constitutive mais induite par une boucle autocrine dépendante des VEGFs. Néanmoins, nous n'avons pas réussi à démontrer que l'inactivation de la boucle réduit les taux de libération basale des enzymes et à déterminer des rôles respectifs pour chaque ligand et récepteur. Pour le démontrer nous avons utilisé trois stratégies: i) l'inhibition de l'activité tyrosine kinase des VEGFRs, ii) la neutralisation des récepteurs ou des ligands et iii) l'interférence à ARN. Malheureusement, les résultats obtenus n'ont pas permis de conclure sur le rôle précis de chaque récepteur mais indiquent que l'interférence à ARN semble représenter la stratégie la plus prometteuse. La comparaison de ces données expérimentales avec 4 critères cliniques révèle des corrélations intéressantes. L'activité basale de la MMP-9 est significativement plus importante pour les cellules des patients qui ont un syndrome tumoral. L'activité de la MMP­2, si rarement détectée, est corrélée avec un échec du traitement. La présence de VEGF-A 121 est associée à une bonne réponse au traitement confirmant son rôle d'agoniste partiel. L'expression concomitante du VEGFR-1 et du VEGFR-3 est corrélée avec un taux d'hémoglobine supérieure à 8 g/dI reflétant la rapidité de prolifération des cellules leucémiques au niveau de la MO. L'ensemble de ces résultats démontre que ce mécanisme autocrine est responsable de la sécrétion de la MMP-2 et de la MMP-9 conférant aux cellules leucémiques leur caractère physiopathologique. Des études complémentaires indiqueront si la neutralisation de ces cibles moléculaires pourrait trouver une application clinique dans la réduction de l'agressivité des cellules LAL.

Les LAL-B représentent le 1er cancer de l’enfant. Les mécanismes moléculaires mis en jeu dans le processus de leucémogenèse et dans leur pronostic sont peu connus. L’étude des profils d’expression génique nous a permis d’explorer la pathogénie d’un groupe homogène de LAL-B caractérisée par le transcrit TEL/AML1. Nous avons mis en évidence et validé 14 gènes regroupés en 5 processus biologiques caractérisant ces LAL. Parmi eux, RUNX1 s’est avéré plus représentatif de ce groupe que le transcrit TEL/AML1. Pour la première fois, nous avons mis en évidence le processus de mobilité cellulaire et explorons les mécanismes de régulation épigénétique des deux seuls gènes sous-exprimés. Au sein des LAL-B sans anomalie cytogénétique récurrente, notre étude n’a pu retrouver de profils d’expression en rapport avec les groupes pronostiques clinico-biologiques (âge et leucocytose au diagnostic). Ces données conduisent à rechercher de nouveaux marqueurs de caractérisation et de pronostic des LAL-B<br>B-ALL is a common pediatric malignancy but leucemogenesis and prognostic biological mechanisms still remain uncertain. We explored critical pathways of TEL/AML1 B-ALL with gene expression profile approach. We highlighted 5 enriched Gene Ontology categories characterized by 14 genes, able to discriminate the TEL/AML1 sub-group. Over-expression of RUNX1 was proposed to become a additional surrogate marker of this subgroup. Cell motility was for the first time identified as a representative process of this subgroup and epigenetic regulation of the 2 underexpressed genes is underanalysis. We could not show patterns of expression in pediatric B-ALL lacking common cytogenetic abnormatities that correlated with the NCI risk factors (age and blood cell count). Our results suggest the refinement of existing classification and risk algorithms

Malgré une amélioration de la prise en charge thérapeutique au cours des dernières années, les leucémies aiguës myéloïdes (LAM) pédiatriques sont des hémopathies graves, avec des taux de rechute pouvant atteindre 30% et des taux de survie inférieurs à 75%. Une meilleure description des anomalies moléculaires chez les enfants atteints de LAM est nécessaire pour affiner le pronostic de ces patients. En utilisant le séquençage haut débit ciblé sur 36 gènes et la technique de LD (ligation-dependent) RT-PCR, ce travail décrit le profil moléculaire ainsi que sa signification pronostique chez 385 enfants atteints de LAM de novo inclus dans l’essai clinique prospectif ELAM02. 76 % des patients présentent au moins une mutation parmi les gènes étudiés. Les mutations les plus fréquentes concernent les gènes contrôlant les voies de signalisation des tyrosine kinases (61 %), suivis par les facteurs de transcription (16 %), les suppresseurs de tumeurs (14 %), les modificateurs de la chromatine (9 %), la méthylation de l'ADN (8 %), la cohésine (5 %) et le spliceosome (3 %). De plus, un transcrit de fusion est détecté dans près de la moitié des cas. Au final, les réarrangements impliquant le CBF, les mutations de NPM1 et double-mutations de CEBPA (CEBPA-dm) représentent 37% de la cohorte et définissent un sous-groupe moléculaire au pronostic favorable (survie globale à 3 ans: 92,1%) alors que les fusions impliquant NUP98, les mutations WT1, RUNX1 et PHF6 (15% de la cohorte) constituent un sous-groupe moléculaire au pronostic péjoratif (survie globale à 3 ans: 46,1%). Les réarrangements de KMT2A (21 % de la cohorte) sont associés à un risque intermédiaire. Malgré quelques similitudes, le profil moléculaire et sa signification pronostique diffèrent entre les LAM de l’enfant et de l’adulte. Ces résultats contribuent à affiner la stratification du risque pronostique des LAM pédiatriques et ainsi améliorer leur prise en charge thérapeutique. Cette classification moléculaire reste à valider dans d’autres cohortes pédiatriques indépendantes<br>Despite major treatment improvements over the past decades, pediatric acute myeloid leukemia (AML) is still a life-threatening malignancy with relapse rates up to 30% and survival rates below 75%. A better description of the pattern of molecular aberrations in childhood AML is needed to refine prognostication in such patients. We report here the comprehensive molecular landscape using both high-throughput sequencing focused on 36 genes and ligation-dependent RT-PCR in 385 children with de novo AML enrolled in the prospective ELAM02 trial and we evaluated their prognostic significance. 76% of patients had at least one mutation among the genes we screened. The most common class of mutations involved genes that control kinase signaling (61%) followed by transcription factors (16%), tumor suppressors (14%), chromatin modifiers (9%), DNA methylation controllers (8%), cohesin genes (5%) and spliceosome (3%). Moreover, a recurrent transcript fusion was detected in about a half of pediatric patients. Overall, CBF rearrangements, NPM1 and double CEBPA mutations represented 37% of the cohort and defined a favorable molecular subgroup (3-years overall survival: 92.1%) while NUP98 fusions, WT1, RUNX1 and PHF6 mutations (15% of the cohort) segregated into a poor molecular subgroup (3-years overall survival: 46.1%). KMT2A-rearrangements (21% of the cohort) were associated with an intermediate risk. Despite some overlaps, the spectrum of molecular aberrations and their prognostic significance differ between childhood and adult AML. These data have important implications to contribute in refining risk stratification of pediatric AML and show the need for further validations in independent pediatric cohorts

Les leucémies aiguës lymphoblastiques (LAL) sont le cancer le plus fréquent chez l’enfant et dérivent le plus souvent de précurseurs lymphoïdes B. D’importants progrès thérapeutiques ont permis d’améliorer considérablement le pronostic. Néanmoins, 15 à 20 % des enfants rechutent encore. Ces rechutes peuvent survenir de façon isolée ou combinée dans la moelle osseuse, le site primitif des lymphoblastes, et/ou dans des organes extramédullaires tels que le testicule ou le système nerveux central. Notre équipe a montré que la protéine transmembranaire CD9 jouait un rôle majeur dans la migration des blastes dans ces sites et notamment le testicule, par l’activation de la voie RAC1 en réponse à la stimulation des cellules par le CXCL12. Ici, nous avons mis en évidence qu’un faible niveau d’oxygène, caractéristique commune aux niches médullaire et extramédullaires, régulait positivement l’expression de CD9 aux niveaux transcriptionnel et protéique, via la voie majeure de réponse à l’hypoxie, dépendante du facteur de transcription Hypoxia Inducible Factor 1a (HIF1a). Nous montrons que HIF1a se fixe directement sur le promoteur de CD9 pour induire sa transcription. Nous montrons aussi que la protéine CD9 est essentielle aux propriétés d’adhérence et de migration des blastes dans des conditions de basse oxygénation, et que son action pourrait s’exercer à travers RAC1 comme en normoxie. Nos résultats dans des expériences de xénogreffe à des souris indiquent que la voie HIF1a favorise la dissémination des blastes, possiblement à travers la régulation qu’elle exerce sur CD9. Ainsi, ce travail contribue à mieux comprendre le rôle de CD9 dans la pathogenèse des LAL de l’enfant<br>Acute lymphoblastic leukemia (ALL) are the most frequent cancer in children and derive most often from B-cell precursors. Huge therapeutic improvements have allowed to reach high survival rates near 90% at 10 years from diagnosis. However, 15-20% of children still relapse with a significant risk of death. Relapses can occur in bone marrow and/or extramedullary sites such as testis or central nervous system, usually referred as “sanctuary sites”. Our previous work showed that the transmembrane protein CD9 plays a major role in lymphoblasts migration into these sites, especially in testis, through the activation of RAC1 signaling upon blasts stimulation with C-X-C chemokine ligand 12 (CXCl12). Here, we addressed the question of putative common factors shared by bone marrow and extramedullary niches which could upregulate CD9 expression and function. Consequently, we found that low oxygen levels could actually enhance CD9 expression both at mRNA and protein levels. We further determined that Hypoxia Inducible Factor 1a (HIF1a), the master transcription factor involved in hypoxia response, binds directly CD9 promoter to induce its transcription. We also showed that CD9 protein is crucial for leukemic cell adhesion and migration at low oxygen levels, possibly through its action on RAC1 signaling. Mouse xenograft experiments indicate that HIF1a signaling pathway favors ALL cells dissemination, which may involve CD9 as well. The present work increments our understanding of CD9 implication in ALL pathogenesis

La variabilité interindividuelle dans la biodisponibilité des médicaments est principalement due à l'âge et aux polymorphismes pharmacogénétiques. A- Projet de pharmacologie fondamentale portant sur l'expression du CYP3A/P-gp dans le duodénum humain : - au cours du développement (localisation et ARNm - lors d'une inflammation systémique (maladie de Crohn). B- Projet de pharmacologie clinique et pharmacogénétique chez les enfants atteints de leucémie aigue lymphoblastique (LAL) : - évaluation de la variabilité de l'activité de la thiopurine S-méthyltransférase (TPMT) en cours de traitement de maintenance - estimation des paramètres pharmacocinétiques de population du méthotrexate (MTX) et sélection d'un modèle prédictif avec 2 prélèvements (H24 et H48) - impact des polymorphismes génétiques (enzymes de métabolisme et protéines de transport des anticancéreux) sur la survenue d'effets indésirables: résultats préliminaires obtenus à l'hôpital Robert Debré (France) et Hôtel Dieu de France (Beyrouth)<br>Xenobiotic disposition in the organism is highly variable among individuals and due to the impact of age and pharmacogenetic polymorphisms. A- Fundamental pharmacology project concerning the expression of CYP3A/P-gp complex in the human duodenum : - throughout post-natal development (localization and mRNA expression) - during systemic inflammation (Crohn's disease). Clinical pharmacology and pharmacogenetic project in children with acute lymphoblastic leukemia (LAL) : - evaluation of the variability in thiopurine S-methyltransferase (TPMT) during maintenance therapy - estimation of the pharmacokinetic parameters of methotrexate (MTX) and the proposal of a limited sampling strategy (H24 and H48) - impact of genetic polymorphisms (metabolic enzymes and transport proteins of anti-neoplasic agents) on the occurrence of side effects: preliminary results of two hospitals, Robert Debré (France) and Hôtel-Dieu de France (Beirut)