Academic literature on the topic 'Listeria monocytogenes – Lutte contre'

L’objectif de cette étude vise l’évaluation in vitro de l’activité antioxydante, antiproliférative et antimicrobienne des extraits organiques Salvia clandestina du Maroc. L’effet antioxydant est estimé par le test de balayage du radical DPPH. L’activité antiproliférative est évaluée sur deux lignées cellulaires cancéreuses en utilisant le test MTT. L’activité antimicrobienne est évaluée contre Escherichia coli, Staphyloccocus aureus et Listeria monocytogenes. L’extrait d’hexane et de dichlorométhane ont montré des capacités antioxydantes à l’IC50 = 118,28 ± 2,108 et 191,36 ± 2,72 μg/ml, respectivement. Alors que l’extrait méthanolique a montré une remarquable activité antiproliférative contre la lignée RD (IC50 = 86,24 μg/ml). Concernant l’activité antimicrobienne, les extraits hexanique et méthanolique sont plus actifs, alors que Staphylococcus aureus s’est montré la plus sensible. Vu les résultats obtenus, Salvia clandestina pourrait être considérée comme une source importante de molécules bioactives. Cependant, d’autres investigations sont nécessaires regardant les principes actifs responsables des effets pharmacologiques obtenus ainsi que l’investigation de l’action antibactérienne et anticancéreuse.

Les bactériocines de sous-classe IIa sont des peptides à activité anti-Listeria synthétisés par des bactéries lactiques. La sensibilité de Listeria monocytogenes implique le facteur de transcription s54, pour lequel trois activateurs associés ont été identifiés dans le génome, ManR, LacR et CotR. Le facteur s54 et ManR régulent l'expression d'une perméase PTS de la famille mannose, EIItMan, qui joue un rôle crucial dans la sensibilité aux bactériocines IIa. EIItMan est constituée d'une sous-unité cytoplasmique IIABtMan et d'un complexe membranaire IICtMan-IIDtMan. Sa localisation membranaire a suggéré son rôle putatif de récepteur à ces peptides anti-bactériens. Afin d'approfondir, à l'échelle moléculaire, l'implication de s54 et de EIItMan dans la sensibilité aux bactériocines IIa, nous avons développé deux axes de recherche. Dans un premier temps, une étude globale des gènes régulés par s54 a été réalisée. Nous avons mené une analyse comparative transcriptomique et protéomique entre un mutant s54 et la souche sauvage EGDe. Dans nos conditions d'étude, mptACD, codant EIItMan, est l'unique opéron directement contrôlé par s54. Le facteur s54 a un effet principal sur le métabolisme des sucres, probablement orchestré par la répression de mptACD. Dans un second temps, nous avons étudié le rôle de EIItMan dans le mode d'action des bactériocines IIa. L'analyse par RT-PCR de l'expression de mptACD montre une relation entre son niveau d'expression et le degré de sensibilité des mutants. L'expression hétérologue de l'opéron mptACD chez une bactérie insensible, Lactococcus lactis, conduit à une sensibilité de la souche aux bactériocines IIa. Nous avons aussi montré que seule l'expression du gène mptC (codant IICtMan) est nécessaire pour sensibiliser L. Lactis. Ainsi, la sous-unité membranaire IICtMan joue un rôle crucial dans la sensibilité et pourrait être la cible privilégiée des bactériocines IIa<br>Subclass IIa bacteriocins produced by lactic acid bacteria, are peptides active against Listeria. The s54 transcriptional factor is involved in the sensitivity of Listeria monocytogenes to these peptides. Three s54 associated activators were identified in L. Monocytogenes genome, ManR, LacR and CotR. The s54 factor and ManR regulated the EIItMan synthesis, a mannose PTS permease, which is crucial in sensitivity to IIa bacteriocins. EIItMan is composed of a cytoplasmic subunit, IIABtMan, and a membrane complex IICtMan-IIDtMan. Its membrane localization led our group to suggest that it could be a receptor to antibacterial peptides. The role of s54 and EIItMan in sensitivity to IIa bacteriocins was investigated through two approaches. First, we realised a global analysis of genes regulated by s54, by the comparison of the transcriptome and proteome profiles of a s54 mutant and the wild type EGDe strain. In our conditions study, mptACD, encoding EIItMan, is the only operon shown to be directly regulated by s54. The s54 mutation has a main influence on sugars metabolism, may be due to the repression of mptACD. Second, we study the implication of EIItMan in sensitivity mechanism to IIa bacteriocins. The analysis by RT-PCR of the mptACD expression suggested a link between its level expression and the level of sensitivity of L. Monocytogenes mutants. Besides, the heterologous expression of mptACD in an insensitive species, Lactococcus lactis, led to sensitize the strains to IIa bacteriocins. We also show that only the mptC expression (encoding IICtMan) is necessary to induce sensitivity in L. Lactis. Thus, the membrane subunit, IICtMan is crucial for the sensitivity and could be the particular target of IIa bacteriocins

La croissance microbienne à la surface de produits alimentaires est une cause majeure d'altération des aliments et le développement de souches pathogènes telle que L. Monocytogenes pose aujourd'hui encore des problèmes de santé publique. L'élaboration de matériaux d'emballages anti-microbiens et notamment anti-listeria est ainsi un domaine de recherche très prometteur. De plus, essentiellement pour des raisons environnementales, le développement de matériaux biodégradables ou comestibles est en plein essor. C'est dans cet objectif que des films à base d'un dérivé cellulosique, l'hydroxy propyl méthyl cellulose, ont été élaborés et étudiés et que la nisine, bactériocine produite par Lactococcus lactis a été introduite dans la matrice du film afin de synthétiser des bioemballages actifs sur certaines souches pathogènes. Pour limiter les phénomènes de transfert de vapeur d'eau à travers le film, deux approches basées sur l'introduction de lipides dans la matrice du film ou sur la réticulation du polymère cellulosique ont été conduites pour augmenter le caractère hydrophobe du film et diminuer le coefficient de transfert à la vapeur d'eau. Les propriétés mécaniques et la sensibilité des films à l'eau ont été appréhendées dans un double objectif : obtenir d'une part des films mécaniquement résistants et protégeant plus efficacement l'aliment emballé et moduler d'autre part la sensibilité des films à l'eau de façon à élargir leur champs d'utilisation en agro-alimentaire. L'étude de la diffusion moléculaire a montré que la nisine diffuse selon un modèle Fickien et qu'elle reste essentiellement concentrée en périphérie, démontrant l'utilité des films, appliqués en surface, à mieux protéger l'aliment des attaques microbiennes.

L’innocuité microbiologique des surfaces a toujours été d’importance capitale en industrie agroalimentaire. Bien que ce point soit connu de tous, les moyens de lutte sont en constante évolution grâce à la compréhension et à la maîtrise de l‘adhésion, de la croissance et de la dispersion des microorganismes, afin de lutter contre la propagation et la multiplication de microorganismes pathogènes dans de ce type d’industrie. Dans cette étude, on a cherché à confronter un organisme pathogène alimentaire connu, Listeria monocytogenes, à un produit commercial composé d’une matrice détergente classique et d’un consortium bactérien de plusieurs souches de Bacillus sélectionnées par notre partenaire industriel en vue de se rapprocher le plus de la réalité des drains en industrie agroalimentaire. Les études ont été réalisées aux températures de 10, 20 et 30°C, dans un système avec ou sans agitation, dans un milieu riche en nutriments (Infusion cœur cervelle en anglais Brain Heart Infusion) afin que les nutriments ne soient pas une limite à la croissance. Deux concentrations ont été utilisées dans cette étude, pour l’organisme pathogène (3 et 5 log ufc/mL) et pour le produit commercial (consortium bactérien à 3 et 5 log ufc/mL). Des courbes de croissance en culture pure et en conditions compétitives ont été effectuées afin de comparer l’effet du produit commercial sur L. monocytogenes. Un suivi du pH est également réalisé afin d’analyser l’activité microbiologique dans le millieu. On observe que globalement, le produit a la capacité d’inhiber le microorganisme pathogène de plus d’1 log d’ufc/mL. De plus, l’inhibition est favorisée à 10°C lorsque le consortium bactérien est à 5 log ufc/mL et lorsque L. monocytogenes est à 3 log ufc/mL. L’agitation a également un effet positif en amplifiant l’inhibition de l’organisme pathogène en favorisant la croissance de la flore compétitive du produit commercial composée essentiellement de microorganismes aérobiques. C’est pour cela que la plus grande efficacité de la méthode est à 10°C en agitation pour la compétition consortium bactérien (avec matrice) à 5 log ufc/mL et L. monocytogenes à 3 log ufc/mL. Cet effet pourrait être en partie dû à la matrice détergente qui compose le produit. A 10°C : la première compétition est le consortium à 5 log ufc/mL-L. monocytogenese à 5 log ufc/mL, le microorganisme pathogène perd 1 log ufc/mL par rapport aux 5 log d’origine. Le deuxième est le consortium à 5 log ufc/mL- L. monocytogenese à 3 log ufc/mL, dans ce cas il diminue jusqu'à passer sous le seuil de détection; une différence de 9 log ufc/mL sépare le dénombrement la culture pure de L. monocytogenes par rapport à la culture en compétition dans les mêmes conditions. Alors qu’à 10°C en compétition avec L. monocytogenes à 3 et 5 log ufc/mL, lorsque le consortium bactérien est à 3 log ufc/mL cette fois-ci, aucune modification de la croissance de L. monocytogenes n’est observée par rapport à sa croissance en culture pure, que ce soit avec ou sans agitation. Ce système est complexe, les phénomènes contrôlant la croissance de ces bactéries dans le milieu sont multiples et agissent en synergie. Le présent document se propose de détailler ces interactions entre les bactéries qui se compétitionnent et la matrice détergente du produit.<br>The microbiological cleanliness of surfaces has always been of paramount importance in the food industry. Although this is known to all, means of ensuring this are constantly improving due to a better understanding of bacterial adhesion, growth and spread, to fight against the propagation and growthing pathogenic microorganisms in this type of industry. A known foodborne pathogen: Listeria monocytogenes was exposed to a commercial product composed of a conventional detergent matrix and a bacterial consortium of several strains of Bacillus selected by our industrial partner seeking to be close to real drain conditions in industrial food processing plants. The experiments are performed at 10, 20 and 30°C, in a system with or without agitation and in an environment rich in nutrients (Brain Heart Infusion) to avoid cell growth restriction. Two concentrations were used in this study for the pathogen (3 and 5 log cfu/mL) and the commercial product (bacterial consortium at 3 and 5 log cfu/mL). Growth curves of pure culture and culture in competition were produced in order to compare the effect of the commercial product on the pathogen. pH monitoring is also carried out to analyze the microbiological activity in the environment. It was observed that the commercial product is able to inhibit the pathogen. Overall, this inhibition is stronger at 30, than at 10 °C. In addition, the inhibition is favored when the bacterial consortium is at 5 log cfu/mL and when L. monocytogenes is at 3 log cfu/mL. Agitation also has a positive effect by amplifying the inhibition of the pathogen by promoting the growth of competitive flora of the commercial product consisting mainly of aerobic microorganisms. The greatest efficacy is observed at 10 °C with stirring for two competitions, probably because of the inhibitory effect of the matrix itself. The first competition was when the consortium was at 5 log cfu/mL - pathogen log 5 cfu/mL: pathogen cell counts were reduced by 1 log cfu/mL with an initial 5 log cfu/mL at the beginning. The second concentration was with the consortium at 5 log cfu/mL – pathogen 3 log cfu/mL. In this case, L. monocytogenes decrease to go under the detection limit, a difference of 9 log cfu/mL between the pure culture and culture in competition. However, at 10°C in competition, when the bacterial consortium was at 3 log cfu/mL, no change was observed in the growth of L. monocytogenes in relation to its growth in pure culture, whether with or without agitation. This system is complex. Phenomena controlling the growth of these bacteria in the environment are multiple and may act synergistically. This document provides details of these interactions with the competing bacteria and the product’s matrix.

L’environnement opératoire dans les domaines alimentaire et médical permet aux bactéries de se fixer et de se développer sur les surfaces, ce qui entraîne la formation de biofilms bactériens pathogènes et résistants. Ces structures pathogènes sont responsables de plusieurs maladies d'origine alimentaire et d'infections nosocomiales. Par conséquent, pour lutter contre ce fléau de santé publique, une approche possible est l'utilisation des technologies plasma froid pour l’élaboration de revêtements sur différents matériaux. Ce travail présente les différents facteurs influençant l'adhésion bactérienne à un substrat. En outre, les stratégies d’élaboration de revêtements passifs visant à prévenir la formation de biofilms par des traitements de surface par plasma froid sont décrites ainsi que les propriétés antiadhésives des surfaces élaborées. Les aspects généraux du revêtement, y compris les modifications physicochimiques de la surface et l'utilisation des technologies par plasma froid, sont également présentés. Dans ce contexte, une étude a été menée dans le but d'inhiber l'adhésion de la bactérie pathogène Salmonella enterica à la surface de l'acier inoxydable, via son traitement par plasma froid. Dans le but de limiter la formation du biofilm de Salmonella enterica, des revêtements organosiliciés à partir du monomère 1,1,3,3-tétraméthyldisiloxane, mélangé ou non à l’oxygène, ont été élaborés par polymérisation par plasma post-décharge micro-ondes d'azote. L'effet des paramètres du plasma froid sur les propriétés du revêtement, sur la topographie de la surface et sur l'adhésion des cellules Salmonella enterica a été étudié. Les résultats ont révélé que la topographie de la surface influençait de façon significative le taux d'adhésion des bactéries. En effet, les surfaces rugueuses n'ont pas inhibé l’adhésion de Salmonella enterica puisque le nombre de cellules adhérant à ces surfaces variait de 30 ± 4 à 65 ± 4 bactéries par champ microscopique. En revanche, un comportement anti-adhésif vis-à-vis de Salmonella enterica a été mis en évidence pour les surfaces plus lisses. En effet, le nombre de cellules attachées était proche de zéro sur ces revêtements. Une approche complémentaire à cette stratégie passive d'élaboration de surfaces anti-adhésives est le développement de surfaces actives. Les technologies émergentes de revêtements antimicrobiens actifs et efficaces permettent de relever le défi de l'élimination des biofilms pathogènes formés sur les matériaux utilisés dans les milieux hospitaliers et agroalimentaires. L'acier inoxydable est un matériau couramment utilisé dans ces domaines, mais il possède malheureusement des propriétés bio-fonctionnelles insuffisantes, ce qui le rend susceptible à l'adhésion bactérienne et au développement de biofilms. Dans ce contexte, cette thèse présente une revue des revêtements développés en employant des biocides et des peptides antimicrobiens (AMPs) greffés sur l'acier inoxydable. De plus, une nouvelle approche active basée sur l'acier inoxydable revêtu de nisine, un AMP commun accepté comme une alternative sûre pour prévenir le développement de biofilms pathogènes, est développée. Dans cette etude, des surfaces en acier inoxydable ont été fonctionnalisées par la nisine qui a été greffée à la surface soit via son groupe carboxylique ou via son groupe amino. En effet, les surfaces revêtues de nisine greffée via son groupe aminé ont montré une puissante activité antibactérienne tandis que la surface greffée avec la nisine liée par son groupe carboxyle n'a montré aucun effet antimicrobien. Les analyses des propriétés de surface ont permis de mieux comprendre les effets antibactériens, les caractéristiques chimiques et topographiques des surfaces traitées ainsi que la configuration et la quantification de la nisine<br>The operating environment in the food and medical fields allows bacteria to attach and grow on surfaces, resulting in the formation of pathogenic and resistant bacterial biofilms. These pathogenic structures are responsible for several foodborne illnesses and hospital-acquired infections. Therefore, to fight this public health scourge, one possible approach is the use of cold plasma technologies for the development of coatings on different materials. This work presents the different factors influencing bacterial adhesion to a substrate. In addition, strategies for the development of passive coatings to prevent biofilm formation by cold plasma surface treatments are described as well as the anti-adhesive properties of the developed surfaces. General aspects of coating, including physicochemical surface modifications and the use of cold plasma technologies, are also presented. In this context, a study was conducted to inhibit the adhesion of the pathogenic bacterium Salmonella enterica to the surface of stainless steel via cold plasma treatment. In order to limit the formation of Salmonella enterica biofilm, organosilicon coatings based on the monomer 1,1,3,3-tetramethyldisiloxane, mixed or not with oxygen, were elaborated by plasma polymerization with post-microwave nitrogen discharge. The effect of cold plasma parameters on coating properties, surface topography, and Salmonella enterica cell adhesion was studied. The results revealed that the surface topography significantly influenced the adhesion rate of bacteria. Indeed, rough surfaces did not inhibit Salmonella enterica adhesion as the number of cells adhering to these surfaces varied from 30 ± 4 to 65 ± 4 bacteria per microscopic field. On the other hand, an anti-adhesive behaviour towards Salmonella enterica was demonstrated for the smoother surfaces. Indeed, the number of attached cells was close to zero on these coatings. A complementary approach to this passive strategy of anti-adhesive surfaces is the development of active surfaces. Emerging technologies for effective active antimicrobial coatings are addressing the challenge of eliminating pathogenic biofilms formed on materials used in hospital and food processing environments. Stainless steel is a commonly used material in these fields, but unfortunately it has insufficient bio-functional properties, making it susceptible to bacterial adhesion and biofilm development. In this context, this thesis presents a review of coatings developed by employing biocides and antimicrobial peptides (AMPs) grafted onto stainless steel. In addition, a new active approach based on stainless steel coated with nisin, a common AMP accepted as a safe alternative to prevent the development of pathogenic biofilms, is developed. In this study, stainless steel surfaces were functionalized by nisin which was grafted to the surface either via its carboxyl group or via its amino group. Indeed, the surfaces coated with nisin grafted via its amino group showed a potent antibacterial activity while the surface grafted with nisin linked via its carboxyl group showed no antimicrobial effect. Analyses of the surface properties provided insight into the antibacterial effects, chemical and topographical characteristics of the treated surfaces, and the configuration and quantification of nisin

Les bacteriocines sont des proteines bacteriennes synthetisees par voie ribosomique et exercant une activite antibacterienne. Parmi les bacteriocines de bacteries lactiques, celles de la sous-classe iia presentent un motif consensus ygngv et une activite anti-listeria. Afin d'etudier la sensibilite de listeria monocytogenes au niveau moleculaire, des mutants resistants issus d'une banque de transposition ont ete analyses. Pour l'un d'eux, nous avons montre que l'insertion du transposon dans le gene zur, codant un represseur transcriptionnel de la famille fur et implique dans le metabolisme du zinc, n'est pas responsable de la resistance. Pour deux autres mutants, le transposon s'est insere au sein du gene gl2 qui coderait une proteine de surface. De plus, l'expression de gl2 serait controlee par le facteur de transcription 5 4, lui-meme implique dans la sensibilite. Bien que nous n'ayons pu etablir formellement le role de gl2, ce gene semble tout de meme implique dans la sensibilite. Afin d'etablir un lien entre 5 4 et la sensibilite, nous avons recherche dans le genome de l. Monocytogenes des activateurs et des operons associes a 5 4. Nous avons tout d'abord montre que l'inactivation de l'activateur 54 celr induit la resistance de la souche l028 aux bacteriocines. Cet activateur est implique dans la regulation d'une permease d'un systeme pts specifique du cellobiose. D'autre part, l'activateur 5 4 manr controle l'expression de deux permeases de la famille des pts mannose, eii1 m a n et eii2 m a n. Eii2 m a n joue un role essentiel dans la sensibilite de l. Monocytogenes egde et l028 tandis que eii1 m a n intervient dans ce mecanisme uniquement en regulant l'expression de eii2 m a n. Ainsi, nous avons propose que le complexe membranaire iic2 m a n-iid2 m a n de eii2 m a n soit un recepteur des bacteriocines de sous-classe iia. En particulier, nous avons envisage que le domaine supplementaire de la sous-unite iid2 m a n soit la cible des bacteriocines.

Afin de mieux comprendre comment interagissent la Listeria monocytogenes et l'hôte, ainsi que les mécanismes d'activation cellulaire misent en route, nous avons étudié des souris déficientes en récepteurs " Toll-like " (TLR) soit TLR1, TLR2, TLR3, TLR5, TLR6 et TLR9, ainsi qu'en molécules TIRAP et MyD88 impliqué dans leur voies de signalisation. Nous avons aussi étudié le rôle peu connu joué par le TNF membranaire induit lors de l'infection, en se servant de souris incapables de cliver le TNF membranaire pour produire la forme sécrétée. Il a été possible de montrer que l'adaptateur moléculaire TIRAP est nécessaire pour une réponse optimale à l'infection et de confirmer le rôle essentiel joué par MyD88. Concernant l'analyse du rôle des différents TLR nous avons pu montrer que TLR2, en association avec TLR6, et non sous sa forme TLR2/TLR1, joue un rôle protecteur lors de l'infection. En revanche, l'absence de TLR3, TLR5 ou TLR9 n'influe en rien sur la réponse à la Listeria. Notre étude a aussi permis de montrer que le TNF membranaire n'est pas uniquement un précurseur du TNF soluble mais qu'il est actif dans le combat de l'hôte contre l'infection. En effet, le TNF associé à la membrane des cellules est suffisant pour contrôler la synthèse de cytokines et d'autres médiateurs de l'inflammation, et pour protéger des souris lors d'infection pas trop massives. Il a été aussi possible de confirmer que le TNF n'est pas essentiel à la mise en place de la réponse immunitaire adaptative.

Selon un rapport de l’OMS, les maladies infectieuses figurent parmi les 3 causes les plus fréquentes de mortalité en début de vie. En effet, les nouveau-nés présentent une sensibilité particulièrement importante aux infections, de par leur système immunitaire toujours en développement et donc immature. Parmi les particularités de l’immunité néonatale, l’absence de cDCs CD11chigh CD8α+ durant la 1ère semaine de vie rend compte de l’incapacité du nouveau-né à développer des réponses de type Th1 et T CD8+ cytotoxiques, essentielles à la protection contre certains pathogènes comme Listeria monocytogenes (Lm). Mon travail de thèse a porté sur l’ontogénie des DCs conventionnelles CD11chigh CD8α+ et plus particulièrement sur la fonction de cette lignée de DCs en début de vie lors d’une infection par Lm. Au cours de cette étude, nous avons identifié, chez le nouveau-né, une population splénique de cDCs CD11chigh qui expriment les marqueurs CD24, CD205 et Clec9A mais pas le CD8α. Cette population, qui dépend du facteur de transcription Batf3, acquière le CD8α une fois transférée dans une souris adulte. Ces DCs néonatales, que nous nommerons DCs pre-CD8α Clec9A+, constituent donc les précurseurs des DCs CD8α+. L’étude fonctionnelle de ces DCs pre-CD8α Clec9A+ a montré qu’elles étaient capables de phagocyter Lm et de générer des réponses T CD8+ contre cette bactérie. De plus, ces cellules sécrètent de l’IL-12p40 et de manière unique de l’IL-10 en réponse à une stimulation par Lm. Par contre, contrairement aux cDCs CD8α+ adultes, nous n’avons observé aucune production d’IL-12p70 par les DCs pre-CD8α Clec9A+ en conditions physiologiques. Elles ne sécrètent pas non plus d’IL-23. Nous avons également montré que ces sécrétions d’IL-12p40 et d’IL-10 jouaient respectivement un rôle positif et négatif dans l’induction des réponses T CD8+ contre Lm. Ainsi, la génération des réponses T CD8+ contre Lm semble résulter, en début de vie, d’une balance entre la sécrétion de ces 2 cytokines aux propriétés antagonistes. Par ailleurs, nous avons démontré que ces cellules constituaient une cible privilégiée en vue d’améliorer les stratégies vaccinales en début de vie. En effet, l’administration à des nouveau-nés d’une construction anti-Clec9A/OVA, associée au poly(I:C), induit des réponses T CD8+ anti-Lm mémoires protectrices à l’âge adulte. Finalement, nous montrons que le TNF-α produit par les monocytes et les neutrophiles joue un rôle essentiel dans la génération des réponses T CD8+ en régulant notamment le statut et la fonction des DCs pre-CD8α Clec9A+ en début de vie. En effet, cette cytokine modifie, en faveur d’une production d’IL-12p40, la balance IL-12p40/IL-10 sécrétée par celles-ci. L’inhibition de la production d’IL-10 par le TNF-α pourrait s’expliquer au moins en partie par une inhibition de la β-caténine au sein des DCs pre-CD8α Clec9A+. En conclusion, nous avons caractérisé un précurseur des DCs CD8α+ biologiquement actif au sein de la rate du nouveau-né de 3 jours. Celui-ci représente une cible potentielle pour l’amélioration des stratégies vaccinales contre des bactéries intracellulaires ou des virus en début de vie, et ce pour autant que l’on puisse contrôler ses propriétés régulatrices.<br>Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques (Médecine)<br>info:eu-repo/semantics/nonPublished