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Dissertations / Theses on the topic 'Lymphocytes B – Différenciation'
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Pignarre, Amandine. "Caractérisation de la différenciation terminale des lymphocytes B humains." Thesis, Rennes 1, 2018. http://www.theses.fr/2018REN1B059/document.
Full textAbstract:
La génération de plasmocytes (PC) à longue durée de vie sécrétant des anticorps hautement affins spécifiques de l’antigène, caractéristique de la réponse immune adaptative, est l’étape ultime de la différenciation des lymphocytes B au sein des centres germinatifs des organes lymphoïdes secondaires. La transition d’un lymphocyte B naïf vers un PC est associée au passage d’un programme transciptionnel des gènes de l’identité B vers l’expression des gènes de l’indentité plasmocytaire. Ce travail de thèse s’est concentré sur la caractérisation de cette étape terminale de la différenciation lymphocytaire B humaine tant au niveau transcriptomique qu’épigénétique. A l’aide d’un modèle de différenciation in vitro à partir de lymphocytes B naïfs humains, nous avons identifié les cellules engagées dans ce processus. Ces précurseurs des plasmablates sont notamment caractérisés par une répression de la voie de signalisation de l’IL-4 aboutissant à la perte du marqueur CD23, le récepteur de faible affinité à l’IgE mais aussi à l’apposition de 5hmC, l’hydroxyméthylcytosine, au niveau des gènes de l’identité PC. L’étude de cette marque épigénétique dans un contexte pathologique, le myélome multiple, a fait l’objet du second axe de recherche de notre projet et a révélé le rôle du gène FAM72D dans la prolifération cellulaire<br>The generation of long-lived plasma cells (PCs) secreting protective, antigen-specific, high-affinity antibodies as a part of adaptative immunity, is the ultimate step of the terminal differentiation of B cells within germinal centers of secondary lymphoid organs. The transition of a naïve B cell into a PC is associated with the switch from a B cell identity programm to PC identity programm. The focus of this thesis project was to characterise the transcriptomic and épigenetic profile of cells commited to this ultimate step of the B cell differentiation. Thanks to an in vitro model of human naïve B cell differentiation into PCs, we identify cells commited to this process. These plasmablasts founder cells are caracterised by a downregulation of the IL-4 pathway leading to the loss of CD23, the low-affinity receptor for IgE, but also to the hydroxymethylation (5hmC apposition) of PC identity genes. The study of 5hmC in multiple myeloma samples was the subject of the second research axis of our project and revealed the role of FAM72D gene as a marker of cell proliferation
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Forest, Audrey. "Surexpression d'XBP1S dans les lymphocytes B, et différenciation plasmocytaire." Thesis, Université Laval, 2007. http://www.theses.ulaval.ca/2007/24760/24760.pdf.
Full text
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Gervais-St-Amour, Catherine. "Étude de la différenciation des lymphocytes B mémoires en milieu sans sérum." Thesis, Université Laval, 2013. http://www.theses.ulaval.ca/2013/30245/30245.pdf.
Full textAbstract:
Les infections opportunistes sont l’une des principales causes de mortalité associées à la greffe de cellules souches. Afin d’aider à reconstituer le système immunitaire des patients greffés, nous proposons d’exploiter les plasmocytes autologues générés in vitro dans notre modèle de culture basé sur l’interaction CD40-CD154. Pour ce faire, les milieux de culture doivent être exempts de protéines animales. Deux milieux sans sérum ont été préalablement développés à Héma-Québec. Notre hypothèse est qu’il serait maintenant possible de promouvoir la différenciation des lymphocytes B et de maintenir la survie des plasmocytes en modifiant la composition de ces milieux sans sérum. Nos résultats montrent que notre milieu sans protéines animales permet de générer un grand nombre de plasmocytes et que ceux-ci ont un profil d’expression de CD38 qui est stabilisé par la vitamine A. En conclusion, la formulation de ce milieu représente un progrès quant à la possibilité d’utiliser ces plasmocytes en immunothérapie.
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Le, Gallou Simon. "Caractérisation et modélisation de la différenciation lymphocytaire B chez l'Homme." Rennes 1, 2010. http://www.theses.fr/2010REN1S025.
Full textAbstract:
La différenciation lymphocytaire B mature s'effectue dans les organes lymphoïdes secondaires, au sein d'une structure spécialisée appelée centre germinatif (CG). Les centroblastes et les centrocytes sont les deux sous-populations B présentes dans cette structure. Chez l’Homme, le marqueur CD77 qui servait à séparer ces deux populations a montré ses limites au cours de ces dernières années, suggérant la nécessité d'une révision phénotypique. Les données récentes obtenues chez la souris ont démontré que les cellules B du CG présentent une expression membranaire différente pour le récepteur de chimiokine CXCR4. En nous basant sur ces données, nous avons étudié l'expression de ce récepteur à la surface des cellules B du CG chez l’Homme. Ainsi, nous avons pu montrer que ce marqueur permet la ségrégation de deux compartiments, les centroblastes exprimant à leur surface CXCR4, contrairement aux centrocytes qui en sont dépourvus. Le second axe de recherche de notre projet a consisté à mettre au point un système de différenciation in vitro à partir de lymphocytes B naïfs humains. Ce système a permis de mimer les évènements survenant lors de la différenciation B<br>Mature B-cell differentiation occurs in secondary lymphoid organs, within specialized structures called germinal centers (GC). This differentiation leads to the generation of memory B cells or Ig-secreting plasma cells, which are the effectors of humoral response. Centroblasts and centrocytes are the two B-cell subsets of the GC, respectively present in the dark and light zones. In human, the CD77, which was used to identify these populations, showed recently limitations, prompting phenotypical revision. Recent data obtained in mouse studies, showed that the B-cell position in GC depends on the expression of the chemokine receptor CXCR4. Based on these data, we studied the surface expression of this receptor in human GC B cells. Thus, we were able to discriminate and characterize the two GC B subsets. CXCR4 is expressed on centroblasts whereas centrocytes are negative for membrane expression. The next part of the project consisted to set up an in vitro model of naïve B cells differentiation. This model allowed us to mimic the events, as class switch recombination or Ig secretion, which occur during in vivo differentiation
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Sellars, MacLean. "The role of the Ikaros transcription factor in B cell development, activation; and immunoglobulin class switch recombination." Strasbourg 1, 2008. http://www.theses.fr/2008STR13105.
Full textAbstract:
Le facteur de transcription, Ikaros, est crucial au linéage B. Nous avons étudié comment Ikaros régule le développement, l’activation et la commutation isotypique des cellules B. Premièrement, nous avons montré qu’Ikaros contribue à la différenciation des cellules B en induisant l’expression du récepteur de l'Interleukine 7 dans les cellules pro-B. Puis, nous avons révélé qu'Ikaros régule la prolifération des cellules B en contrôlant l'activation des protéines kinases ERK et p38 après stimulation du récepteur des cellules B. Ces données suggèrent qu'Ikaros joue un rôle central dans la signalisation du récepteur des cellules B. Enfin, nous avons montré qu’Ikaros réprime la commutation de classe vers les isotypes IgG2b et IgG2a et induit la commutation vers tous les autres isotypes. De plus, Ikaros contrôle la commutation de classe et spécifie le choix des isotypes par un mécanisme de compétition transcriptionelle entre les gènes codants pour les regions constantes des immunoglobulines<br>The Ikaros transcription factor is a critical regulator of the B lineage. Here we have elucidated mechanisms by which Ikaros controls B cell development, activation and class switch recombination (CSR). First, we show that Ikaros contributes to B cell development by promoting the expression of the Interleukin 7 receptor on pro-B cells. Second, we demonstrate that Ikaros deficient B cells hyper-activate the ERK and p38 mitogen activated protein kinases (MAPK) after B cell receptor stimulation, and that this leads to increased proliferation. These results establish Ikaros as a central regulator of B cell receptor signaling. Third, we show that Ikaros suppresses CSR to IgG2b and IgG2a, and promotes CSR to all other isotypes. Further we show that Ikaros mediates this affect on isotype choice by controlling transcriptional competition between constant region genes in individual cells for CSR and we reveal this competition as a critical and general mechanism for isotype specification
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Chemin, Karine. "Etude du rôle du facteur de transcription Ets-1 dans la différenciation lymphoïde T et B." Paris 7, 2006. http://www.theses.fr/2006PA077043.
Full textAbstract:
La différenciation lymphoïde est caractérisée par une succession d'étapes qui permet à une cellule souche de se différencier en un grand nombre de cellules T, NK et B immunocompétentes. L'expression des récepteurs pré-T, TCR, pré-B et BCR est indispensable aux processus de différenciation lymphoïde T et B. Les travaux de cette thèse ont été consacrés à l'étude du rôle du facteur de transcription Ets-1 dans la différenciation lymphoïde T et B grâce aux souris déficientes pour Ets-1. Nos travaux montrent que l'activité des Ets-1 est nécessaire aux étapes du développement T et B dépendantes de l'expression respective des récepteurs pré-T, pré-B et BCR. De plus, Ets-1 inhibe le développement des cellules T activées. Enfin, Ets-1 semble être impliqué dans le contrôle de la différenciation plasmocytaire ainsi que dans la commutation isotypique vers lgG2a. L'ensemble de ces données révèle le rôle joué par Ets-1 à plusieurs étapes de la différenciation lymphoïde T et B<br>Lymphocytes develop from multipotent stem cells through a regulated sequence of events that controls the production of functional T, B, and natural killer cells. Expression of the pre-TCR, the TCR, the pre-BCR and the BCR play critical roles in T and B-cell development. The aim of this thesis was to investigate the role of the Ets-1 transcription factor in T and B cell differentiation using an Ets-1 deficient mouse model. Inactivation of the Ets-1 transcription factor impairs multiple aspects of B cell development. Similarly, Ets-1 plays a critical role in the functions of the pre-TCR. Furthermore, our last results demonstrate an inhibitory role for Ets-1 in the development of activated T cells. At last, preliminary results suggest a function for Ets-1 in plasma cell differentiation and lgG2a class switch recombination. Altogether, our results clearly demonstrate an important function of the Ets-1 transcription factor at different stages of lymphopoiesis
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Bich-Thuy, Lê Thi. "Mécanisme d'action de l'interleukine-2 dans l'activation, la prolifération et la différenciation des lymphocytes humains non activés par des agents exogènes." Lyon 1, 1987. http://www.theses.fr/1987LYO1H070.
Full text
8
Arpin, Christophe. "Production et caractérisation de plasmocytes et lymphocytes B à mémoire humains." Lyon 1, 1997. http://www.theses.fr/1997LYO10085.
Full textAbstract:
Suite a la stimulation par un antigene thymo-dependant, les lymphocytes b matures naifs des organes lymphoides secondaires proliferent dans les zones extra-folliculaires. A l'issue de cette phase d'expansion les lymphocytes b peuvent se differencier en plasmocytes secretant des immunoglobulines de faible affinite ou coloniser les follicules, au sein desquels ils induisent la reaction du centre germinatif. La reaction du centre germinatif conduit a la generation de plasmocytes et de lymphocytes b a memoire exprimant des imunoglobulines de forte affinite. La premiere partie de ce travail a ete centree sur l'identification et la caracterisation de differentes sous-populations de lymphocytes b matures humains des amygdales. Ces sous-populations comprennent, deux populations de lymphocytes b naifs, deux populations de lymphocytes b du centre germinatif, les lymphocytes b a memoire et les plasmocytes. De plus, cette etude a permis : i) l'identification d'une nouvelle population de lymphocytes b initiant la reaction du centre germinatif, ii) la decouverte d'une voie de differenciation des lymphocytes b, utilisant une commutation isotypique vers l'igd, et conduisant a la generation de plasmocytes secretant uniquement cet isotype. Les cellules utilisant cette voie de differenciation pourraient servir de cible a une transformation maligne, puisqu'elles partagent plusieurs caracteristiques avec les myelomes a igd. Dans la deuxieme partie de ce travail, nous nous sommes interesses aux signaux moleculaires impliques dans la differenciation des lymphocytes b matures en plasmocytes ou en lymphocytes b a memoire. Nous avons pu montrer que la molecule cd40 represente l'aiguillage entre ces deux voies de differenciation. L'engagement prolonge de cette molecule par son ligand induit les lymphocytes b du centre germinatif a se differencier en lymphocytes b a memoire et l'interruption de cette interaction est necessaire pour qu'ils se differencient en plasmocytes. Par ailleurs, nous avons pu montrer que l'engagement de la molecule cd40 inhibe egalement la differenciation en plasmocytes des lymphocytes b naifs et a memoire. Toutefois, les lymphocytes b a memoire sont predestines a se differencier en plasmocytes. Ainsi, les capacites de differenciation intrinseques a certains lymphocytes b, controlent l'equilibre homeostatique du repertoire recirculant.
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Burdin, Nicolas. "Rôle des cytokines endogènes dans la prolifération et la différenciation des lymphocytes B humains." Lyon 1, 1996. http://www.theses.fr/1996LYO1T006.
Full text
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Hussein, Mourad. "Caractérisation des mécanismes cellulaires, génétiques et épigénétiques de la différenciation terminale des lymphocytes B chez l’homme." Thesis, Rennes 1, 2013. http://www.theses.fr/2013REN1S198.
Full textAbstract:
Ces dernières années ont été marquées par une progression importante dans la connaissance de la physiologie des cellules B in vivo et de leur différenciation en plasmocytes, grâce aux modèles murins et à l'imagerie intravitale. La transposition à l'Homme des connaissances acquises chez la souris soulève cependant des difficultés, telles que le manque d'outils pour visualiser les évènements qui se déroulent dans les organes lymphoïdes humains. Dans l'optique d'apporter une réponse à cette problématique, nous avons développé au sein du laboratoire un modèle in vitro en deux étapes, permettant la différenciation des lymphocytes B naïfs humains en plasmocytes. Ce modèle est particulièrement adapté pour étudier l'induction, au cours de la différenciation terminale B, des voies de signalisation, des facteurs de transcription et des grands processus cellulaires tels que la prolifération ou la mort programmée. A l'aide de ce modèle, nous avons mené deux études relatives à la différenciation B dans le centre germinatif: (i) La caractérisation sur le plan phénotypique et fonctionnel des populations cellulaires générées in vitro. Par une approche transcriptomique, nous avons comparé le profil d'expression et identifié les gènes et fonctions biologiques spécifiques à chacune de ces populations différenciées. Nous nous sommes concentrés sur l'étude de l'expression et de l'activité de l'enzyme AID, notamment au travers de la mesure des fréquences des hypermutations somatiques à chaque stade de la différenciation. (ii) L'étude des mécanismes cellulaires (cycle cellulaire, apoptose), génétiques et épigénétiques menant à la transition des cellules du centre germinatif vers le stade de plasmablastes. Cette étude a permis de caractériser au plus près une population cellulaire fondatrice à l'origine des cellules différenciées. En outre, nous avons mis en évidence l'importance de la méthylation de l'ADN, en particulier la 5-hydroxyméthylation, dans le contrôle de la différenciation terminale B<br>Within the past few years there has been a significant increase in the knowledge of B cell physiology in vivo and their differentiation into plasma cells through the implementation of murine models and intravital imaging. However, the transposition of this knowledge from mouse to man raises difficulties such as the lack of tools available to visualize the ongoing events in human lymphoid organs. In order to overcome this issue, we have developed in our laboratory, a two-step in vitro model allowing naive B cell differentiation into plasma cells. This model is particularly suitable for studying the induction of signaling pathways, transcription factors and major cellular processes such as proliferation or programmed cell death. Using this model, we conducted two studies on B cell differentiation in the germinal center: (i) phenotypic and functional characterization of cell populations generated in vitro. This study involved a transcriptomic approach which identified and compared the expression profile of specific genes and their biological functions within each of these differentiated populations. Specifically, we focused on the expression and activity of the AID enzyme through the measurement of somatic hypermutation frequency at each stage of differentiation. (ii) The study of cellular (cell cycle, apoptosis), genetic and epigenetic mechanisms leading to the transition of the germinal center B cells into plasmablasts. This study allowed us to characterize a founder cell population of the in vitro generated plasmablasts. In addition, we have highlighted the importance of DNA methylation, in particular 5- hydroxymethylation in controlling terminal B cell differentiation
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Li, Yue Sheng. "Signaux de transduction impliqués dans l'activation, la prolifération et la différenciation des lymphocytes B murins." Lyon 1, 1992. http://www.theses.fr/1992LYO1T024.
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Tremblay, Rochette Josiane. "Une niche pour la différenciation : La réponse in vitro des lymphocytes B à mémoire aux cytokines de leur environnement." Thesis, Université Laval, 2011. http://www.theses.ulaval.ca/2011/28343/28343.pdf.
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Rossi, Benjamin. "Le récepteur pré-B au cours de la différenciation précoce des lymphocytes B chez l'homme : étude de sa structure et de son mode d'activation." Aix-Marseille 2, 2005. http://www.theses.fr/2005AIX22001.
Full text
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De, Luca Karelle. "CONTRIBUTION DES RÉCEPTEURS À DOMAINE DE MORT ET DES RÉCEPTEURS DE LA FAMILLE TOLL À L'HÉMATOPOÏÈSE HUMAINE." Phd thesis, Université Claude Bernard - Lyon I, 2006. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00140434.
Full textAbstract:
La voie de signalisation des récepteurs à domaine de mort (RDM) intervient dans l'hématopoïèse. En effet, l'invalidation de FADD, la molécule adaptatrice des RDM, dans le compartiment lymphocytaire murin résulte en une absence totale de lymphocytes B en périphérie. Nos travaux ont révélé que l'invalidation de la fonction FADD inhibe profondément la production de cellules hématopoïétiques humaines à la fois B et non-B. Ces données suggèrent une implication de FADD dans l'expansion des CSH et des progéniteurs hématopoïétiques humains. Outre les RDM, les récepteurs Toll (TLR), dévolus à la reconnaissance des pathogènes, sont également capables de recruter FADD. Ceci nous a conduit à nous intéresser au rôle des TLR dans l'hématopoïèse humaine. Nous avons montré que les CSH et les progéniteurs hématopoïétiques humains expriment des TLR fonctionnels (TLR1, 2, 3 et 6 notamment). Nos résultats démontrent que la stimulation des TLR sur les CSH et les progéniteurs hématopoïétiques humains est susceptible de remodeler le développement hématopoïétique en favorisant l'engagement myéloïde au détriment du développement lymphocytaire B. Ce processus pourrait contribuer au renforcement du bras de l'immunité innée au cours des infections microbiennes
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Stubbe, Muriel. "Lymphocytes T CD4 et réponses vaccinales: du processus de différenciation à la mémoire immunologique." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 2007. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/210593.
Full textAbstract:
Les lymphocytes T CD4 (LT CD4) jouent un rôle central dans la régulation des réponses immunitaires vis-à-vis des agents infectieux et des vaccins. Cependant, leur différenciation in vivo est encore mal comprise et les caractéristiques des LT CD4 capables de persister à long terme tout en assurant une réponse immunitaire protectrice sont mal définies. L’approfondissement de ces connaissances est indispensable pour le développement de nouveaux vaccins. <p>Pour approcher cette question, nous avons utilisé deux approches expérimentales. La première est un suivi de la différenciation des LT CD4 au cours de la réponse immune primaire chez des sujets vaccinés contre l’hépatite B ;la deuxième est la caractérisation phénotypique et fonctionnelle des LT CD4 mémoires antigène(Ag)-spécifiques pendant la phase d’état. Cette analyse a été réalisée au sein des LT CD4 spécifiques d’Ag vaccinaux, l’Ag de surface du virus de l’hépatite B (HBs) et la toxine tétanique (TT), ainsi que ceux spécifiques des Ag du cytomégalovirus (CMV). Les LT CD4 Ag-spécifiques ont été mis en évidence par cytométrie de flux après marquage intracytoplasmique du ligand du CD40 (CD40L) exprimé en réponse à une stimulation de courte durée par l’Ag. Des expériences basées sur la stimulation par la toxine du syndrome du choc toxique et le marquage du segment Vbeta2 du récepteur des LT ont démontré la bonne sensibilité et spécificité de cette méthode.<p>Le suivi de la réponse primaire chez 11 donneurs jusqu’à plus d’un an après immunisation par le vaccin anti-hépatite B a permis d’établir un modèle de différenciation des LT CD4 Ag-spécifiques in vivo chez l’homme. Nous avons mis en évidence des LT CD4 spécifiques d’un nombre limité de peptides immunodominants de la protéine HBs suggérant une réponse de type oligoclonale. Grâce à l’utilisation d’un cytomètre neuf couleurs, nous avons mené une analyse détaillée de l’hétérogénéité de la population mémoire HBs-spécifique. L’expression du CCR7 permet de distinguer des cellules de type mémoire centrale (LTCM, CCR7+) et effectrice (LTEM, CCR7-) se distinguant notamment par leur capacité à migrer vers les ganglions lymphatiques ainsi que par leurs propriétés fonctionnelles. Nous avons montré l’existence de ces deux sous-populations au sein des cellules HBs-spécifiques mais par opposition à leur définition initiale, ces LTCM sont capables de produire des cytokines effectrices. La proportion importante de LTCM exprimant le Ki67 témoigne d’une activité proliférative persistante in vivo et suggère la capacité de ces cellules à s’auto-renouveler et éventuellement à alimenter le pool des LTEM. La proportion importante de LTCM exprimant la chaîne alpha du récepteur à l’IL-7 (CD127) suggère que ces cellules sont sensibles aux signaux émanant de l’IL-7, une cytokine dont le rôle dans le maintien de la mémoire lymphocytaire T est connu. Compte tenu de la relevance potentielle de ces caractéristiques uniques pour le développement de vaccins et de l’accumulation de travaux montrant l’avantage sélectif des LTCM à conférer une immunité protectrice, nous avons focalisé la dernière partie de ces recherches sur cette sous-population. Une étude transversale des LTCM spécifiques de plusieurs types d’Ag (éliminés (HBs et TT) ou persistants (CMV)) a été menée. Nos résultats montrent une hétérogénéité, variable selon l’Ag, de la capacité de ces cellules à produire des cytokines effectrices et de leur phénotype de différenciation. Cette donnée nouvelle soulève la possibilité que les LTCM soient hétérogènes dans leur capacité à conférer une immunité protectrice. L’acquisition du marqueur KLRG1 par une fraction des LTCM s’associe à une capacité accrue à produire des cytokines effectrices et à une expression élevée du CD127. La possibilité que ces cellules soient particulièrement aptes à conférer une immunité protectrice et durable est discutée, tout comme les mécanismes menant à leur génération et l’intérêt de ces connaissances pour la conception de nouveaux vaccins.<p><br>Doctorat en Sciences médicales<br>info:eu-repo/semantics/nonPublished
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Brun, Susana. "Quel rôle pour l'IL-21 dans la maladie lupique ? : étude de la différenciation plasmocytaire." Strasbourg, 2011. http://www.theses.fr/2011STRA6109.
Full textAbstract:
Le lupus érythémateux disséminé (LED) est une maladie autoimmune caractérisée par l’hyperactivité des cellules B conduisant à la production d’autoanticorps dont certains exercent une action délétère. Récemment, l’IL21 est apparue comme jouant un rôle clé dans la différenciation des cellules B (CB) en plasmocytes (PC) dans un contexte non-autoimmun. Toutefois, qu’en est-il de son rôle dans la progression de la maladie lupique? Tel était l’objectif de mon projet de thèse: étudier le rôle de l’IL21 dans la différenciation des CB en PC au cours du LED. Des souris NZB/W dont les femelles développent spontanément une pathologie similaire au LED humain ont été utilisées. Nos résultats montrent une augmentation des taux sériques d’IL21 et de l’expression de son récepteur par les CB au cours du LED. De plus, les CB des souris NZB/W semblent être plus sensibles à la signalisation induite par l’IL21, ce qui se traduit par une production d’IgG augmentée. Nous avons également observé l’accroissement d’une sous-population de lymphocytes T (LT), source d’IL21, au sein du centre germinatif: les LT folliculaires. Ces données semblent valider l’implication de l’IL21 dans la réponse B au cours du LED. Nous avons également mis en place des expériences de co-culture de LB et TCD4+ issus de souris NZB/W présentant un stade plus au moins avancé de la maladie, afin d’analyser la différenciation plasmocytaire dans un contexte physiopathologique. Nous avons identifié deux populations in vitro, l’une pouvant correspondre à des PC et l’autre pouvant correspondre à des plasmoblastes. L’apparition de cette dernière population est affectée par l’inhibition de l’interaction de l’IL21 avec son récepteur<br>Systemic lupus erythematosus (SLE) is a chronic autoimmune disease characterized by B cell hyperactivity leading to the production of autoantibodies, some of which have a deleterious effect. Recently, IL-21 was shown to play a key role in the differentiation of B cells into plasma cells (PC) in a non-autoimmune context. But what about its role in the progression of lupus disease? This was the aim of my thesis project, which consisted in studying the role of IL-21 in PC differentiation in this autoimmune setting. For that purpose, we chose to work with NZB/W female mice, which spontaneously develop a disease similar to human SLE. Our results show an increase in serum IL-21 levels and in the expression of IL-21 receptor by B cells during SLE development. In addition, NZB/W B cells appear to be more sensitive to the signal induced by IL-21, which leads to increased IgG production. We also observed expansion of a T cell subset, which is one of the main sources of IL-21 within the germinal centers, i. E. Follicular helper T cells. Our data seem to confirm the involvement of IL-21 in the B cell response in SLE. In order to analyze plasma cell differentiation in a pathophysiological context, we also set up B cells / CD4+ T cells co-culture experiments using cells isolated from NZB/W mice harboring different stages of the disease. These experiments allowed us to identify two populations in vitro, one which may correspond to PC (B220lowCD138hi) and the other one which may be plasmablasts (B220+CD138int). The differentiation of the latter population is affected when the interaction of IL-21 with its receptor is blocked
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Symington, Hannah Lucy. "Mechanism of IL-2 mediated BACH2 regulation in the control of Human naive B cell differentiation into plasma cells." Thesis, Rennes 1, 2016. http://www.theses.fr/2016REN1B009.
Full textAbstract:
La différenciation terminale des lymphocytes B qui se déroule dans les centres germinatifs des organes lymphoïdes secondaires est l’étape ultime de la réponse T dépendante et aboutit à la production de plasmocytes (PC) à longue durée de vie qui sécrètent des anticorps hautement affins spécifiques de l’antigène et caractéristiques de la réponse immune adaptative. La transition d’une cellule B naïve vers un PC est gouvernée par un réseau de régulation génique bien décrit et est largement influencée par l’intégration de stimuli externes qui contrôlent le devenir des cellules B tels que l’interaction BCR-antigène et les cytokines produites par les cellules T. La stimulation précoce des lymphocytes B humains activés par IL-2, induit la différenciation en PC via une signalisation ERK prolongée entraînant la baisse d’expression de BACH2, un facteur de transcription clef des cellules B. La répression transitoire de BACH2 est suffisante pour déclencher la différenciation en plasmablastes en l’absence d’IL-2, suggérant ainsi qu’il joue un rôle de « verrou moléculaire » de la différenciation en PC. Il est à noter que cette répression forcée de BACH2 aboutit à la production de plasmablastes caractérisés par un phénotype lymphoplasmocytaire. Ce travail de recherche s’est focalisé sur la caractérisation des mécanismes moléculaires régulant l’expression de BACH2 via la voie de signalisation ERK induite par IL-2. Nous avons identifié ELK-1 comme un médiateur de la répression de BACH2 par la voie IL-2/ERK, comme l’atteste sa capacité à se lier avec un élément de régulation d’un enhancer localisé dans l’intron 1 de BACH2, induisant ainsi la répression de l’enhancer et déverrouillant la différenciation en PC. La caractérisation de cet enhancer de BACH2 a confirmé qu’il est régulé de manière dynamique au cours de la différenciation terminale B et qu’il est localisé dans une région sujette aux mutations suggérant qu’il pourrait être impliqué dans la lymphomagenèse<br>The terminal differentiation of B cells, which takes places within germinal centres of secondary lymphoid organs, is the ultimate step of a T cell dependent response and results in the generation of long-lived plasma cells (PCs) that secrete protective, antigen-specific, high-affinity antibodies as part of adaptive immunity. The transition of a naive B cell into a PC is governed by a well-characterised gene regulatory network and is heavily influenced by the integration of externally received signals, including BCR-antigen binding and T cell help, such as cytokines which guide B cell fate. The early IL-2 priming of human primary activated B cells triggers PC differentiation through sustained ERK signalling resulting in the down regulation of B cell transcription factor BACH2. Transient BACH2 repression is sufficient to trigger plasmablast differentiation in the absence of IL-2 suggesting that it acts as a key lock of PC differentiation. Importantly, this enforced BACH2 repression results in the generation of plasmablasts with a lymphoplasmacytic phenotype. The focus of this thesis was to characterise the molecular mechanisms regulating BACH2 expression via the IL-2 ERK transduction pathway. We identify ELK-1 as the mediator of IL-2 ERK induced BACH2 downregulation as it binds to a regulatory enhancer element located within intron 1 of BACH2 instigating its repression and unlocking the PC programme triggering differentiation. The characterisation of this BACH2 enhancer confirms that it is dynamically regulated during PC differentiation and is located within a region targeted for mutation suggesting that it may have a potential role in lymphomagenesis
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Fecteau, Jessie-Farah. "Étude comparative de la réponse des lymphocytes B humains naïfs et mémoires in vitro." Thesis, Université Laval, 2007. http://www.theses.ulaval.ca/2007/24431/24431.pdf.
Full textAbstract:
L’immunité humorale, que les lymphocytes B chapeautent via la production d’anticorps, fournit à l’organisme des armes solubles et spécifiques permettant de combattre une infection en cours, et d’en conserver une mémoire immunologique. Traditionnellement, on associe la réponse des lymphocytes B naïfs à la première apparition d’un antigène et celle des cellules mémoires à l’apparition subséquente d’un antigène déjà rencontré. Ces deux sous-populations, pouvant être distinguées par l’expression différentielle de la molécule CD27, circulent simultanément en périphérie chez l’humain. Au cours de ce projet de doctorat, la réponse in vitro des lymphocytes B naïfs (CD27) et mémoires (CD27+) isolés du sang a été étudiée, dans un système exploitant l’interaction CD40-CD154, normalement médiée par les lymphocytes T, en présence de facteurs solubles. Cette étude a mis en évidence la réponse distincte des cellules naïves et mémoires lorsque stimulées séparément, reflétant la disparité de leurs besoins. La comparaison de leur stimulation simultanée ou séparée a mis au jour une possible interaction entre les cellules B naïves et mémoires, suggérant une vision nouvelle de l’initiation de la réponse primaire in vivo. De plus, cette étude a permis l’identification d’une sous-population de cellules mémoires distinctes en périphérie, au phénotype CD27-IgG+, remettant en question l’utilisation du CD27 comme marqueur de cellules B mémoires chez l’humain. La comparaison des populations stimulées suggère qu’un rôle régulateur pourrait être associé à ces cellules mémoires, pouvant contribuer à contenir la réponse des cellules naïves une fois l’infection prise en charge. En bout de ligne, ce projet a permis de modéliser la réponse humorale primaire et secondaire en tenant compte de cette nouvelle sous-population mémoire, ainsi que des interactions entre cellules B pouvant intervenir in vivo.<br>Humoral immunity, managed by B lymphocytes and their antibody production, provides to the body soluble and specific weapons to clear current infections and to preserve an immunological memory. Traditionally, naive B cell response is associated with the first encounter with an antigen, while memory cell response is related to its subsequent appearance. Both populations, circulating in human peripheral blood, can be distinguished by the differential expression of the CD27 molecule. During this project, the in vitro response of peripheral naive (CD27) and memory B cells (CD27+) was studied, in a system exploiting CD40-CD154 interaction, normally provided by T cells, in the presence of soluble factors. This study highlighted a distinct response from naive and memory cells when separately stimulated, reflecting their different requirements. Comparison between their stimulation, together and separately, also underlined possible B-B cell interactions, suggesting a new vision of primary response initiation in vivo. Furthermore, this study conducted to the identification of a distinct memory cell subset in periphery, displaying a CD27IgG+ phenotype, which questions the use of CD27 as a memory B cell marker in humans. A potential regulatory role has also been suggested for the CD27-IgG+ memory subset, presumably aimed to suppress naive cell response once the infection is controlled. Overall, this project supports the elaboration of a model for primary and secondary humoral responses, taking into account the new memory subset identified and the interactions among B cells that likely occur in vivo.
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Gay, Chantal. "Activités des IgG placentaires et de leurs fragments FC et FAB dans la différenciation des lymphocytes B humains." Lyon 1, 1988. http://www.theses.fr/1988LYO1T089.
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Proulx, Julie. "Étude de l'expression de XBP-1 chez les lymphocytes B humains et de son rôle lors de la différenciation." Thesis, Université Laval, 2006. http://www.theses.ulaval.ca/2006/23723/23723.pdf.
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Pandrau, Dominique. "Étude de la prolifération et de la différenciation in vitro des précurseurs leucémiques lymphoïdes B de l'enfant." Lyon 1, 1993. http://www.theses.fr/1993LYO1T056.
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Itoua, Maïga Rayelle. "Étude de la différenciation in vitro de lymphocytes B humains en plasmocytes. Microenvironnement et caractérisation des plasmocytes générés." Thesis, Université Laval, 2013. http://www.theses.ulaval.ca/2013/30140/30140.pdf.
Full textAbstract:
Les plasmocytes, cellules responsables de la sécrétion d’anticorps, sont au cœur de la réaction immunitaire humorale. Cette caractéristique en fait des cellules intéressantes en thérapie cellulaire pour offrir une protection humorale aux patients immunosupprimés suite à une transplantation de cellules souches hématopoïétiques. Afin d’obtenir ces cellules, notre équipe à Héma-Québec propose d’utiliser la capacité de différenciation des lymphocytes B mémoires in vitro. Notre hypothèse est qu’il serait possible de différencier ces derniers en contrôlant leur microenvironnement de culture. Ce projet porte donc sur l’étude de l’interaction cellulaire CD27-CD70 combinée aux facteurs de survie APRIL et CXCL12. Les résultats montrent que cette interaction induit une différenciation rapide des lymphocytes B tandis que l’addition des facteurs solubles n’a pas d’impact sur la survie cellulaire. De plus, l’utilisation des marqueurs de surface CD31 et CD39 a permis de mettre en évidence l’hétérogénéité des plasmocytes générés in vitro et ceux retrouvés in vivo.
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Chesneau, Mélanie. "Analyse de la différenciation et de la régulation des lymphocytes B chez des patients tolérant un greffon rénal." Nantes, 2015. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=9bc7bafe-9990-4ce1-853d-d7f61d4ade25.
Full textAbstract:
La transplantation rénale est le traitement de choix de l'insuffisance rénale terminale. Cependant elle nécessite l'administration d‘un traitement immunosuppresseur au long cours afin de pallier au rejet du greffon. Malgré les avancées importantes réalisées dans la recherche sur les traitements immunosuppresseurs, ces traitements induisent de nombreux effets secondaires (cancers, néphrotoxicités, infections…). Une tolérance opérationnelle a été décrite chez quelques patients rares. Ces patients présentent une fonction stable de leur greffon après arrêt de leur traitement immunosuppresseur. Les études réalisées sur ces patients tolérant une greffe rénale ont mis en évidence un profil transcriptionnel spécifique des lymphocytes B (LB). Cependant, le rôle joué par les LB dans cette tolérance n'a pas encore été décrite. Cette thèse porte donc sur l'étude de cette population de LB chez les patients tolérants afin d'essayer de mieux comprendre les mécanismes impliqués dans la tolérance opérationnelle. Dans un premier temps l'analyse de la capacité de différenciation des LB en plasmocytes (cellules sécrétrices d'anticorps néfastes en transplantation) a permis de mettre en évidence in vitro chez les patients tolérants un défaut dans la capacité de différenciation tardive des LB en plasmocytes. Dans un deuxième temps, l'analyse de la fonction régulatrice des LB montre une fonction régulatrice chez les patients tolérants non modifiés. L'étude de cette population de LB régulant in-vitro la prolifération des LT effecteurs a permis de mettre une évidence un phénotype proche des plasmocytes et une fonction dépendante du contact LT/LB et de la sécrétion de Granzyme B<br>Kidney transplant is the treatment of choice of kidney terminal failure. However, transplantation requires administration of long term immunosuppression to avoid rejection. Despite progress in research in immunosuppression, these treatments induced side effects (cancer, nephrotoxicity, infections…). Operational tolerance has been described in rare patients. These patients present a stable graft function after immunosuppression withdrawal. Studies on these patients reveal a whole blood transcriptional B cell signature. However, the role of B cells in tolerance was not described yet. This thesis studies B cell population in tolerant patients, to try to better understand a part of the mechanisms involved in operational tolerance. At first, analysis in vitro of B cell differentiation abilities into plasma cells (antibody secreting cells with damaging effect in transplantation) allows to highlight a defect in late stage of plasma cell differentiation in B cells from tolerant patients. And secondly, analysis of regulatory function of B cells shows unmodified regulatory function of B cells in tolerant patients compared to healthy donor and stable patients. Study of this B cells that inhibit effector T cell proliferation in vitro allowed the characterization of plasma cell like phenotype that exert regulatory properties in contact and Granzyme B dependant manner
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Cresson, Charlotte. "Étude de la régulation et de la fonction des deux isoformes A et B de Pax5 : oncogène majeur de la lignée B." Toulouse 3, 2013. http://thesesups.ups-tlse.fr/2659/.
Full textAbstract:
Pax5 est un facteur clé de la différenciation lymphoïde B. Son action régulatrice sur un grand nombre de gènes en fait le gardien de l'identité cellulaire B. Finement régulé au cours de l'ontogénie, il est exprimé dès les étapes précoces de la lymphopoïèse B jusqu'aux cellules B matures, puis son expression s'éteint pour permettre la différenciation plasmocytaire. Les dérégulations de l'expression de Pax5 se traduisent par un défaut de la lymphopoïèse B pouvant résulter en une lymphopénie ou une hémopathie maligne. Une régulation fine de Pax5 est donc nécessaire au bon déroulement de la différenciation B. Le gène Pax5 est sous le contrôle de deux promoteurs alternatifs (1A et 1B) et d'un enhancer intragénique spécifique de la lignée B conduisant à la production de deux isoformes majeures Pax5A et Pax5B. Afin de déterminer les éléments régulant la balance d'expression entre ces deux isoformes, nous avons utilisé des lignées cellulaires lymphoïdes B bloquées à différents stades de maturation. Nous avons tout d'abord montré que ces lignées n'exprimaient pas les deux isoformes dans les mêmes rapports. Par analyse transcriptomique et RT-qPCR nous avons pu corréler la présence de certains facteurs de transcription avec la production des deux isoformes. Nous avons ensuite cartographié précisément les régions régulatrices actives par analyse des profils d'acétylation des histones H3. Ceci a permis d'établir une corrélation entre l'activation du promoteur 1B et celle de l'enhancer intragénique. Afin de vérifier si les deux isoformes sont interchangeables nous avons complémenté des cellules pro-B Pax5-/- (n'exprimant ni Pax5A, ni Pax5B et présentant une incapacité à se différencier plus avant) par Pax5A ou par Pax5B. Ces cellules complémentées ont été étudiées dans un système de différenciation ex vivo. Nous avons ainsi montré que les deux isoformes de Pax5 sont capables de complémenter le défaut en Pax5 et de restaurer une différenciation B efficace. Nous avons également montré que l'isoforme Pax5B confère un avantage prolifératif aux cellules B. Parallèlement à cette étude, j'ai pu mettre en évidence le caractère oncogénique de deux nouvelles translocations impliquant la tyrosine kinase RET chez deux patients atteints de leucémie myélo-monocytaire chronique (LMMC). Nous avons montré que ces deux nouvelles fusions BCR-RET et FGFR1OP-RET entrainent une activation constitutive de RET, sont capables de transformer les cellules hématopoïétiques et biaisent le programme de différenciation hématopoïétique vers la lignée monocytes / macrophages<br>Pax5 is a key factor of B Lymphoid differentiation by regulating a wide variety of genes involved in B cell commitment. For this reason, Pax5 has been named the guardian of B cell identity. Finely regulated during the B cell ontogeny, PAX5 is expressed from the premature stages of the B lymphopoiesis up to mature B cells, and its expression has to be turned off to allow the plasmacytic differentiation. The deregulations of Pax5 expression result in a defect of the B lymphopoiesis leading to lymphopenia or hematological malignancies. A fine regulation of Pax5 is thus crucial for a proper process of B cell differentiation. The Pax5 gene is under the control of two alternative promoters (1A and 1B) and a specific intragenic enhancer of the B lineage leading to the production of two major isoforms Pax5A and Pax5B. To decipher the regulation of the expression balance between these two isoforms, we used lymphoid B cell lines blocked at various steps of maturation. First we showed that these two isoforms are differentially expressed in lymphoid B cells lines. By transcriptomic analysis and RT-qPCR we were able to correlate the presence of some transcription factors with the presence of each isoforms. Then we mapped precisely the active regulating regions by the histone H3 acetylation profile analysis. This allowed us to establish a correlation between the activation of the 1B promoter and the activation of the intragenic enhancer. In order to determine if both isoforms are able to complement the defect of Pax5-/- pro-B cells (not expressing neither Pax5A nor Pax5B and unable to further differentiate) we have infected Pax5 deficient cells by Pax5A or by Pax5B. These complemented cells were studied in an ex vivo differentiation system. We showed that both isoforms of Pax5 are able to complement the defect in Pax5 deficient cells and restore an efficient B cell differentiation. We have also shown that Pax5B isoform confers a proliferative advantage on infected B cells. In parallel, we were able to demonstrate the oncogenic feature of two new translocations involving the RET tyrosine kinase cloned from two patients affected by a chronic myelo-monocytic leukemia (CMML). We showed that this two new fusions BCR-RET and FGFR1OP-RET lead to a constitutive activation of RET, and are capable of transforming hematopoietic progenitor cells and skew the program of differentiation towards the monocytes / macrophages lineage
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Duperray, Christophe. "Etude de la lymphopoi͏̈èse B dans le myélome multiple." Montpellier 2, 1989. http://www.theses.fr/1989MON20191.
Full textAbstract:
Dans une neoplasie affectant les cellules plasmocytaires (cellules les plus differenciees, de la lignee lymphoide b et secretant des immunoglobulines, nous avons analyse les differents compartiments des cellules precurseurs des plasmocytes: les lymphocytes pre-b et les lymphocytes b. Par double marquage en immunofluorescence analysee en cytometrie de flux nous avons montre que l'expression quantitative de l'antigene cd24 permettait de distinguer nettement ces deux populations. Dans la moelle osseuse de malades atteints de myelome multiple les proportions de lymphocytes b sont normales alors que celles de cellules pre-b sont significativement diminuees. Par ailleurs, les cellules pre-b pratiquement inexistants dans le sang circulant des donneurs normaux ne sont pas augmentees dans le myelome multiple
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Bessette, Anne-Marie. "Analyse du trafic intracellulaire d'adénovirus chimériques dans des lymphocytes B humains normaux et une lignée plasmocytaire." Thesis, Université Laval, 2012. http://www.theses.ulaval.ca/2012/29195/29195.pdf.
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Santamaria, Kathleen. "Etude de l’hétérogénéité des centrocytes humains à travers l’expression du CD23 : différenciation en plasmablastes et expression d’une signature minimale transcriptionnelle au niveau cellule-unique comportant DEC2." Thesis, Rennes 1, 2020. http://www.theses.fr/2020REN1B038.
Full textAbstract:
La différenciation terminale des lymphocytes B à travers le centre germinatif conduit à la production de cellules sécrétrices d’anticorps : les plasmocytes (PC) à longue durée de vie et de haute affinité pour l’antigène. Cette réaction implique la formation d’une microstructure anatomique qui comprend une zone sombre : lieu d’intenses proliférations des centroblastes et de maturation d’affinité de leur BCR, et une zone claire dans laquelle ont lieu les commutations de classes isotypiques du BCR et la sélection des centrocytes (CC). Ce processus est finement contrôlé par les lymphocytes T folliculaires auxiliaires (Tfh) notamment à travers la production de molécules comme l’IL-4, le CD40L et l’IL-21. Ce travail de thèse s'intéresse à l'expression du CD23 à la surface des CC lors de leur métamorphose en PC. J'ai d’abord montré que l'expression de ce récepteur de faible affinité aux IgE est régulée par les signaux Tfh : CD40L et IL-4. De plus j'ai mis en évidence que les CC humains exposés aux signaux Tfh mais négatifs pour le CD23 sont capables de se différencier en PC. Dans ce cadre, la signature transcriptionnelle de ces progéniteurs de PC a été étudiée à l'échelle de la cellule unique et a permis d’identifier un gène jusqu’alors jamais décrit dans les PC qui code pour le facteur de transcription DEC2 et dont la fonction reste à déterminer. J'ai par ailleurs étudié l'expression du CD23 dans le lymphome folliculaire et mis en évidence qu’il existe des différences entre les populations tumorales positives et négatives pour le CD23, suggérant que les cellules CD23neg ont un avantage de survie et une capacité de différenciation supérieure en culture que les cellules CD23pos<br>Terminal B cell differentiation through the germinal center leads to the production of antibody-secreting cells: plasma cells (PC) with a long lifespan and high affinity for the antigen. This reaction involves the formation of an anatomical microstructure that includes a dark zone: site of intense proliferation and affinity maturation of the BCR of the centroblasts, and a light zone in which the class switch recombination of the BCR and centrocyte (CC) selection take place. This differentiation is finely controlled by follicular helper T cells (Tfh) that produce molecules such as IL-4, CD40L and IL-21. This phD work focus on the CD23 expression on the surface of CC during their metamorphosis into PC. Firstly, I showed that the expression of the low affinity IgE receptor is regulated by Tfh derived IL-4 and CD40L. Moreover, I showed that CC exposed to Tfh signals and which do not express the CD23 were the ones that have the ability to differentiate into PC. In this context, I identified at the single cell level a transcriptional signature expressed specifically by these cells which contains a gene never described in PC, encoding the transcription factor DEC2 whose function remains to be determined. In addition, I studied CD23 expression in follicular lymphoma and showed the existence of differences between these two populations, suggesting a preferential survival and differentiation of CD23neg cells compared to CD23pos cells
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Kirstetter, Peggy. "Etude du rôle du facteur de transcription Ikaros au cours du développement et de la fonction des lymphocytes B." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2002. http://www.theses.fr/2001STR13009.
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Nguyen, Hai Vu. "Etude de la fonction du facteur de transcription ETS-1 dans la différenciation des lymphocytes B chez la souris." Paris 7, 2011. http://www.theses.fr/2011PA077096.
Full textAbstract:
Le développement des lymphocytes B repose sur l'activité d'un ensemble de récepteurs qui contrôlent la prolifération, la survie ou la différenciation cellulaire. Ainsi, chez la souris, l'engagement du récepteur à l’interleukine 7 (IL-7) induit l'activation du facteur StatS et l'expression d'un programme génétique, qui assure la survie des cellules B précoces, leur prolifération et la recombinaison des gènes des immunoglobulines (Ig). De même, en périphérie, la stimulation antigénique des cellules B et l'action de facteurs solubles comme l'interféron-y (IFNy), induit l'expression du facteur de transcription T-bet qui promeut la commutation de classe sur le gène IgG2a. Malgré l'importance de ces processus pour la mise en place et l'efficacité du système immunitaire, les mécanismes moléculaires, qui les régulent, restent encore mal connus. Dans la première partie de mon travail, j'ai montré que le facteur de transcription Ets-1 est nécessaire à la prolifération des cellules B précoces en réponse à l'activation de la voie IL-7/Stat5 par la régulation de l'expression de c-myc et de cycline D2. En outre, Ets-1 favorise le recrutement de StatS sur l'enhancer intronique du gène IgK dont il inhibe l'expression et les réarrangements dans les cellules pro-B. Ces résultats démontrent un rôle nouveau d'Ets-1 dans le contrôle de la fonction de StatS au cours de la prolifération et de la différenciation des cellules pro-B en réponse à l'IL-7. Dans une seconde partie, je me suis intéressé aux mécanismes moléculaires qui régulent la sécrétion des IgG2a. J'ai pu établir que l'inactivation d'Ets-1 (Ets-l") inhibe la production d'IgG2a in vivo et in vitro. La transcription germinale du gène y2a, qui est initiée à partir du promoteur Iy2a, et qui cible cette région à la commutation de classe, est inhibée dans les splénocytes Ets-l"A. En réponse aux stimulations par l'IFNy ou IL-27, Ets-1 coopère avec le facteur Stat1 pour activer l'enhancer du locus T-bet, induire l'expression de ce gène et permettre la commutation sur l'isotype IgG2a. Ces résultats révèlent une fonction majeure du facteur de transcription Ets-1 dans la régulation de l'immunité humorale chez la souris L'ensemble de mon travail révèle un rôle nouveau du facteur de transcription Ets-1 dans la régulation de la fonction de plusieurs membres de la famille des facteurs STAT au cours du développement des cellules B chez la souris<br>The development of B lymphocytes is regulated by several receptors that control the proliferation, the survival and the differentiation of precursor cells. In mice, engagement of the interleukin-7 receptor (IL-7R) induces activation of the Stat-5 transcription factor and the expression of genetic program that insures survival and proliferation of early cells B and the proper regulation of immunoglobulin (Ig) gene recombination. Once in the periphery, stimulation of antigen activated B cells with soluble factors such as interferon-y (IFN-y) or interleukine-27 (IL-27) induces expression of the T-bet transcription factor which promotes the class switch recombination to IgG2a. Despite of the importance of these processes for the development and function of the immune System, the molecular mechanisms which regulate them remain still unknown. In the first part of my work, I demonstrated that the Ets-1 factor transcription is necessary for the proliferation of pro-B cells in response to IL-7 stimulation. In response to IL-7, Ets-1 déficient (Ets-1-/-) pro-B cells inefficiently up-regulated expression of c-myc and cyclin D2. Furtheremore, Ets-1 triggered the recruitment of Stat-5 to the intronic enhancer of the Ig kappa locus. The cooperation between Ets-1 and Stat-5 inhibited expression and rearrangement of Igk in pro-B cells. These results demonstrate a new role of Ets-1 in the control of Stat-5 function during the proliferation and the differentiation of pro-B cells in response to IL-7. The second part of my work focused on the molecular mechanisms that regulate secretion of IgG2a. I showed that inactivation of Ets-1 (Ets-1-/ -) inhibits the production of IgG2a in vivo and in vitro. Germline expression of the y2a locus, which is initiated from the Iy2a promoter and targets this region for class switch recombination (CSR), is inhibited in Ets-1-/- splenocytes. In response to stimulation by IFN-y or IL-27, Ets-1 cooperates with the Stat1 transcription factor to bind and activate the enhancer of the T-bet locus. In turn, expression of T-bet contributes to induce CSR to the IgG2a isotype. These results identify an essential function of the Ets-1 transcription factor in the regulation of humoral response in mice. Altogether, my work reveals a new role of the transcription factor Ets-1 in regulating the function of several members of the family of STAT factors in the development of B cells in mice
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Hermann, Patrice. "Recherche du ligand du CD40 : étude du rôle de son interaction avec le CD40 dans la réponse lymphocytaire B." Lyon 1, 1995. http://www.theses.fr/1995LYO1T120.
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Richard, Yolande. "Hétérogénéité des lymphocytes B humains : multiplicité des signaux de compétence et de progression." Paris 6, 1987. http://www.theses.fr/1987PA066601.
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Boeglin, Emmanuelle. "Contrôle de la prolifération et de la différenciation des lymphocytes B murins par des signaux de l'immunité innée et de l'immunité adaptative." Strasbourg, 2010. http://www.theses.fr/2010STRA6260.
Full textAbstract:
La différenciation terminale des cellules B nécessite deux signaux : un signal provenant de la reconnaissance de l’antigène par le récepteur des cellules B (BCR) spécifique et un signal fourni par l’interaction de la molécule CD40 exprimée sur les cellules B avec son ligand CD40L exprimé par les cellules T activées. Mais récemment, il a été montré qu’un troisième signal provenant de la reconnaissance du pathogène par les TLR (Toll-Like Receptor) pouvait être important voire même nécessaire pour le développement d’une réponse immunitaire humorale. Ainsile rôle des TLR, mais également de deux NLR (NOD-Like Receptor), seuls ou associés à un signal de l’immunité adaptative (CD40L + BCR) sur l’activation et la différenciation des cellules Ba été évalué. Nous avons montré que tous les agonistes des TLR, à l’exception des TLR3 et 9, induisent la prolifération, l’activation et la différenciation des cellules B, et que l’ajout d’un signal de l’immunité adaptative aux agonistes des TLR permettait d’augmenter soit l’activation et la prolifération des cellules B (TLR3, 4, 9) soit la différenciation de ces cellules en cellules sécrétrices d’anticorps (TLR1/2, 2/6, 4, 7) soit le développement de cellules B mémoires. De plus, nous avons montré que le ligand de Nod1 n’induit pas de différenciation des cellules B mais son association avec un signal CD40 permet de l’augmenter. Ainsi, nous avons montré que les pathogènes seuls ou en association avec des signaux de l’immunité adaptative peuvent déclencher et contrôler la réponse des cellules B. Ces différents stimuli peuvent induire le développement soit de plasmocytes soit de cellules B mémoires, ce qui pourrait être intéressant pour le développement de nouveaux vaccins<br>Terminal differentiation of B cells requires two signals: a signal deriving from the recognition of the antigen by the specific B cell receptor (BCR) and a signal provided by the interaction between the CD40 molecule expressed on B cells and its ligand CD40L expressed by activated T cells. Nevertheless, it has been recently shown that a third signal deriving from the pathogen recognition by Toll-Like Receptors (TLR) could be important and even necessary for the development of a humoral immune response. Thus the role of TLRs, but also of two NLR (NOD-Like Receptor), alone or combined with a signal of adaptive immunity (CD40L + BCR) on the activation and differentiation of B cells have been investigated. We have demonstrated that all TLR agonists, with the exception of TLR3 and 9, induce proliferation, activation and differentiation of B cells. Moreover, the addition of a signal from adaptive immunity to TLR agonists can increase B cell activation and proliferation (TLR3, 4, 9), differentiation of these cells into antibody secreting cells (TLR1/2, 2/6, 4, 7), and the development of memory B cells. Furthermore, we showed that the Nod1 ligand does not induce B cell differentiation but its association with a CD40 signal can enhance it. Thus, we have shown that pathogens alone or combined with signals of adaptive immunity can trigger and control the B cell response. These different stimuli can induce the development of either plasma cells or memory B cells, this could be an important asset for the development of new vaccines
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Descatoire, Marc. "Les cellules B de la zone marginale chez l’homme : un lignage NOTCH 2 dépendant." Thesis, Paris 5, 2013. http://www.theses.fr/2013PA05T045/document.
Full textAbstract:
Les lymphocytes B de la zone marginale (MZB) dérivent d’une voie de différenciation indépendante du centre germinatif chez la souris, mais cette question reste controversée chez l’homme. Chez la souris, la différenciation de ces cellules s’effectue dans la rate en utilisant la voie Notch2. Un précurseur lymphoïde murin a été identifié, et sa différenciation en MZB par des signaux Notch2 a été démontrée in vitro. Nous avons cherché un tel précurseur dans le compartiment B IgD+ CD27- splénique chez l’homme. Sur la base de sa capacité à acquérir in vitro les marqueurs des cellules MZB en réponse à un signal donné par le ligand de Notch, Delta Like One (Dll1), nous avons identifié dans la rate humaine deux populations de cellules B potentiellement précurseurs. La première présente un taux de mutations somatiques se rapprochant du taux des MZB et semble engagée dans une voie de différenciation plus mature qui reste à préciser ; la deuxième très peu mutée parait être un précurseur très précoce des MZB. In vitro cette population acquière un programme qui la rapproche des MZB, ce qui est confirmé par l’induction de gènes que nous avons identifié comme spécifiquement exprimés par les MZB (comme le facteur de transcription SOX7) comparés aux cellules B mémoires. Cette population est majoritairement présente durant l’enfance puis diminue fortement. Nous avons aussi identifié, dans la rate de jeunes enfants, des cellules non-lymphoïdes exprimant DLL1 à la périphérie de la zone marginale. Pour confirmer ces résultats, nous avons analysés le sang de trois patients présentant une mutation génétique invalidant un des deux allèles du gène NOTCH2 (Syndrome d’Alagille). Contrairement aux contrôles sains, ces patients présentent un taux de cellules MZB dans le sang 2 à 3 fois diminué en comparaison du taux de cellules B mémoires. Ce phénotype rappelle celui des souris haploinsuffisantes pour Notch2, ce qui semble bien confirmer que, chez l’homme comme chez la souris, la population zone marginale représente un lignage cellulaire spécifique dont la mise en place est indépendante du centre germinatif<br>Marginal zone B cell (MZB) is a specific B cell lineage in mice. The existence of such a lineage in human remains controversial. In mice, MZB differentiation takes place in the spleen and is under the control of a Notch2 signal. A marginal zone B cell precursor (MZP) has been identified in mice and its in vitro differentiation into MZB cell requires a Notch2 signaling. We have looked for such a precursor among IgD+ CD27- splenic B cell compartment in human. Based on its ability to acquire MZB cell markers in vitro after a Notch signaling, provided by the Notch ligand Delta Like One (Dll1), we identified in human spleen two B cell subsets that could be putative precursors. One shows a mutational rate close to the rate found in MZB and seems already engaged in an unidentified mature differentiation stage. The second population appears almost unmutated and seems to be a very early precursor for MZB. In vitro, this population acquires a transcriptional program resembling the MZB program. This is confirmed by the induction of genes specifically expressed by MZB (like SOX7) compared to B cell memory. Putative MZP is found in a higher proportion in children compared to adults and we also identified in children spleen non-lymphoid cells expressing DLL1 at the marginal zone border. To confirm all these results, we analyzed blood samples of three patients that are mutated in one of the two NOTCH2 alleles and suffering from the Alagille syndrome. Contrarily to healthy controls, the 3 Alagille patients showed a 2 to 3 fold decrease in MZB level compared to memory B cell level. Interestingly this phenotype is similar to mice showing a Notch2 haploinsufficiency, thus confirming that MZB population is, as in mice, a specific B cell lineage in human
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Bossy, David. "La différenciation précoce des lymphocytes B humains : structure et expression des gènes lambda-like EY du récepteur mu-pseudo-chaîne légère." Aix-Marseille 2, 1993. http://www.theses.fr/1993AIX22014.
Full textAbstract:
Les genes lambda-like et v#p#r#e#b sont exprimes au stade precoce de l'ontogenese des lymphocytes b humains. Les proteines codees par ces genes sont susceptibles de participer avec la forme membranaire de la chaine lourde mu au controle de la differenciation des pro-b. Nous avons d'abord etudie l'organisation et l'expression des trois genes lambda-like; 14. 1, 16. 1 et f-lambda-1. Nous avons montre que seul le gene 14. 1 contenait trois exons homologues a ceux du gene lambda-5 murin. Les genes 14. 1 et f-lambda-1 ont ete localises a proximite du gene bcr majeur et le gene 16. 1 a ete localise en position plus distale sur le chromosome 22. Les transcrits du gene 14. 1 sont les seuls detectes dans le foie ftal et dans les precurseurs b chez l'adulte. Toutes les cellules qui n'ont rearrange que le locus des chaines lourdes transcrivent les genes lambda-like et v#p#r#e#b. Ces genes sont aussi exprimes dans les progeniteurs b avant les rearrangements de chaines lourdes et ils peuvent etre co-exprimes avec une chaine legere conventionnelle dans les cellules au stade intermediaire pre-b/b. A l'aide d'anticorps anti-peptides diriges contre v#p#r#e#b et lambda-like, nous avons analyse ces proteines et les complexes multi-moleculaires qu'elles forment dans des lignees leucemiques representatives des stades pre-b, intermediaire pre-b/b et b. V#p#r#e#b et lambda-like forment une pseudo-chaine legere qui peut s'associer avec des chaines lourdes mu d'immunoglobulines. La chaine mu et la pseudo-chaine legere forment un recepteur a la surface des cellules pre-b et sont co-exprimees avec mu-kappa a la surface des cellules intermediaires pre-b/b. Sur ces differentes cellules, les recepteurs pre-b ou b sont aptes a declencher des signaux de transduction apres stimulation par un anticorps dirige contre la chaine lourde. Ces observations suggerent que la pseudo-chaine legere a une fonction en association avec mu a la surface des precurseurs b et que cette fonction necessite une interaction avec un ligand. La reconstitution par transfection du recepteur pre-b soluble a ete engagee, elle permettra de determiner les contraintes structurales liees a l'association des sous-unites et de rechercher un ligand physiologique de ce recepteur sur des cellules du stroma medullaire
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Lescale, Chloé. "Etude des mécanismes impliqués dans la diminution de la lymphopoïèse B au cours du vieillissement." Paris 7, 2011. http://www.theses.fr/2011PA077095.
Full textAbstract:
Le vieillissement s'accompagne d'un déclin des fonctions immunes lié notamment à une diminution de la lymphopoïèse B. Au cours de cette étude, nous avons montré que la capacité des cellules souches hématopoïétiques (CSH) à générer des cellules B diminue progressivement avec l'âge et que cette perte de potentiel B est directement liée à une diminution de l'expression des facteurs de transcription B spécifiques EBF et Pax5 dans les progéniteurs lymphoïdes. Nos travaux ont également montré une diminution de la phosphorylation de STAT5 en réponse à l'IL-7 dans les progéniteurs B. Ces résultats montrent qu'une diminution de l'expression de EBF, associée à une altération de la signalisation de l'IL-7, diminue la fréquence avec laquelle les progéniteurs hématopoïétiques s'engagent vers la lignée B, sans altérer leur potentiel à générer des cellules myéloïdes. Les CSH résident dans la moelle osseuse au sein de niches hématopoïétiques qui participent à la régulation de leur quiescence, leur auto-renouvellement et leur différenciation. Or, avec l'âge, il y a des modifications du microenvironnement hématopoïétique, et notamment un remodelage osseux accru associé à une diminution de la formation osseuse. Nous avons cherché à déterminer s'il existait un lien entre ces altérations du microenvironnement et la diminution de la lymphopoïèse B avec l'âge. Dans un modèle murin de perte osseuse par décharge mécanique, nous avons observé une diminution de la génération des cellules B semblable à ce qui est observé au cours du vieillissement, suggérant que les modifications du microenvironnement osseux avec l'âge pourraient altérer les niches hématopoïétiques, et donc la lymphopoïèse B<br>Aging is accompanied by a decline of immune functions related in particular to a decrease in B lymphopoiesis. In this study, we have shown that the ability of murine hematopoietic stem cells (HSC) to generate B cells gradually decreases with age and that this age-related decrease in B cell potential is directly associated with reduced expression of the B-lineage specifying factors EBF and Pax5 in lymphoid progenitors. We also found a decrease in IL-7-mediated phosphorylation of STAT5 in B cell progenitors. Taken together, these results show that reduced expression of EBF with age, associated with impaired STAT5-mediated IL-7 signaling, decreases the frequency with which multipotent hematopoietic progenitors commit to a B-cell fate, without altering their potential to generate myeloid cells. HSC reside in the bone marrow in specialized niches involved in the regulation of their quiescence, self- renewal and differentiation. With age, changes in the bone marrow microenvironment are observed, in particular enhanced bone remodeling associated with impaired bone formation. We sought to determine whether these alterations in the hematopoietic microenvironment could be involved in the decrease of B lymphopoiesis during aging. In a mouse model of bone loss by mechanical hindlimb unloading, we observed a decrease in the generation of B cells, similar to that observed with age. These results suggest that changes in the bone marrow microenvironment during aging could alter the hematopoietic niches and consequently B lymphopoiesis
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Ghamlouch, Hussein. "La différenciation des cellules B de la LLC en cellules sécrétrices d'anticorps : conséquences sur notre compréhension de la physiopathologie de la LLC." Amiens, 2014. http://www.theses.fr/2014AMIED002.
Full textAbstract:
Les cellules B sont des vecteurs importants de l'immunité humorale. Le plasmocyte ou cellule sécrétrice d’anticorps (CSA) est la cellule effectrice résultante de la différenciation terminale de la lignée B. Les cellules B de la leucémie lymphoïde chronique (LLC) ont été utilisées comme modèle pour étudier la différenciation des cellules B humaines. La leucémie lymphoïde chronique de type B est la leucémie la plus fréquente chez les adultes dans le monde occidental. Il s'agit d'une maladie hétérogène caractérisée par la prolifération clonale et l'accumulation de lymphocytes B matures CD5+. Le microenvironnement tumoral joue un rôle central dans la pathogenèse de la LLC. Plusieurs études montrent l'importance de la stimulation CD40L, les toll-like receptor (TLRs), la stimulation antigénique et cytokiniques existante dans le microenvironnement tumoral de la LLC. Toutefois, les effets de ces molécules sur la différenciation des cellules B de la LLC ne sont pas pleinement étudiés. Dans cette étude, nous avons caractérisé les CSAs générées à partir des cellules B de la LLC après exposition à des stimulations qui pourraient se retrouver dans leur microenvironnement tumorale. Nous avons montré que la combinaison de plusieurs cytokines qui pourraient exister dans le microenvironnement de la LLC améliore significativement la survie des cellules B de la LLC in vitro. En outre, nous avons constaté que les cellules B de la LLC ne sont pas figées mais au contraire dotées d’une certaine plasticité. En effet, ces cellules ont étés capables de se différencier en cellules sécrétrices d’immunoglobulines de type IgM. Ces IgM présentent dans certains cas (essentiellement non mutés) une poly/autoréactivité. Ces données permettent de suggérer que les cellules B de la LLC sont plutôt liées aux lymphocytes B B1 ou aux cellules B de la zone marginale. La caractérisation phénotypique et moléculaire indique que les CSAs générées dans nos modèles de cultures ressemblent à un stade transitionnel de la différenciation terminal B appelé préplasmablaste. En conclusion, l’étude des modulations phénotypiques et moléculaires au cours de la différenciation des cellules B de la LLC pourrait être pertinente pour la compréhension de la physiopathologie de la LLC et la définition de la contrepartie normale.
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Moraes, Cabe Carolina. "Rôle et fonction du facteur de transcription Ets-1 dans le développement précoce des lymphocytes B." Sorbonne Paris Cité, 2016. http://www.theses.fr/2016USPCC030.
Full textAbstract:
Le développement des cellules B est conduit par l'action combinée de facteurs de transcription, de facteurs solubles et d'interactions cellulaires, qui régulent leur engagement et différenciation. La signalisation par l'IL-7R et le pré-BCR régule la prolifération et la survie des cellules B précoces, en même temps qu'elle coordonne l'expression et le réarrangement des Ig. Un des facteurs de transcription impliqués dans le développement des cellules B est Etsl, un facteur fortement exprimé dans les lignées lymphoïdes, où il contrôle la différenciation des cellules B, T et NK. Son inactivation altère le développement des cellules B, en particulier dans la différenciation des cellules pro-B à pré-B. La dérégulation du processus de différenciation des cellules B est à l'origine des leucémies. La Leucémie Aiguë Lymphoblastique (LAL) est une prolifération clonale qui se développe à partir d'une cellule lymphoïde bloquée à un stade précoce de différenciation. Il existe plusieurs formes de LAL ayant des altérations génétiques diverses, parmi elles la translocation t(9,22), qui induit l'expression de la protéine oncogénique BCR-ABLI et est associée à un mauvais pronostic. BCR-ABL I active constitutivement STAT5, et contribue à leucémogenèse à travers la voie de signalisation JAK/STAT. L'objectif de cette thèse est d'étudier la fonction du facteur de transcription Etsl dans le développement des cellules B précoces. Nos résultats montrent une nouvelle fonction de Etsl dans la régulation de l'activité de STAT5 dans le développement des cellules B et dans le contrôle du programme de transcription en aval de BCR-ABLI pendant les étapes initiales de leucémogenèse dans les cellules pré-B<br>B-cell development is driven through combined actions of transcription factors, soluble factors and cellular interactions, which regulate the commitment and differentiation of B tells. Signaling through IL-7R and pre-BCR regulates the transcription of genes involved in proliferation and survival of early B tells, while it coordinates the expression and rearrangement of Ig genes. One of the transcription factors involved on B tell development is Etsl, which is a member of the ETS family of transcription factors and it is highly expressed in the lymphoid lineages where it controls the differentiation of B, T and NK tells. Its inactivation impairs B tell development, particularly during the differentiation of pro-B into pre-B tells. Deregulation of the process of B tells development causes leukemia. Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a clonai proliferation that develop from a lymphoid tell blocked at an early stage of differentiation. This can be due to diverse genetic alterations, among them the t(9,22) translocation induces the expression of an oncogenic fusion protein, called BCR-ABL1, which is associated with poor prognosis. BCR-ABL1 activates constitutively STAT5 and thus likely contributes to leukemogenesis by signaling via the JAK/STAT pathway. The aim of this thesis is to study the role and function of Ets I transcription factor in early B tell development. These findings demonstrate a nove] function for the Etsl transcription factor in the regulation of STAT5 activity during early B-tell development and in the control of the transcription program downstream BCR-ABL1 during the initial steps of leukemogenesis in pre-B tells
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Boiron, Jean-Michel. "Différentiation B et action de cytokines hématopoi͏̈étiques dans le myélome multiple humain." Bordeaux 2, 1995. http://www.theses.fr/1995BOR28369.
Full text
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Jung, Sophie. "Agents infectieux et rupture de tolérance lymphocytaire B : étude des processus de maturation d'affinité et de différenciation plasmocytaire au cours d'une infection bactérienne dans un nouveau modèle knock-in autoréactif." Thesis, Strasbourg, 2013. http://www.theses.fr/2013STRAJ067.
Full textAbstract:
Les maladies auto-immunes, qui touchent plus de 5% de la population, sont induites par une perte de la tolérance aux antigènes du Soi. Ces pathologies, généralement multifactorielles, résultent de l’effet combiné de plusieurs allèles de susceptibilité et de différents facteurs environnementaux. Les agents infectieux ont été tout particulièrement incriminés, mais les mécanismes en jeu restent encore mal élucidés. Les lymphocytes B, qui jouent un rôle central dans la pathogénie de nombreuses maladies auto-immunes, sont susceptibles d’être activés selon différents mécanismes au cours d’un processus infectieux et cette activation peut englober des cellules autoréactives. On ne sait cependant pas si cette activation peut entraîner la production d’auto-anticorps pathogènes de forte affinité et d’isotype IgG à partir du pool de cellules productrices d’auto-anticorps naturels de faible affinité, qui sont présentes de façon constitutive dans le répertoire B de l’individu sain. Nous avons mis au point un nouveau modèle murin knock-in pour des lymphocytes B présentant une affinité intermédiaire pour leur auto-antigène, la protéine HEL2X mutée (Hen-Egg Lysozyme). Ce modèle autoréactif d’affinité intermédiaire SWHEL X HEL2X, élaboré sur un fond génétique non autoimmun, permet de suivre le processus de maturation d’affinité des cellules B anti-HEL en présence de leur auto-antigène HEL2X au cours de l’infection chronique par la bactérie Borrelia burgdorferi. L’infection induit au niveau ganglionnaire une prolifération ainsi qu’une activation lymphocytaire B incluant des cellules anergiques. Certains clones autoréactifs sont capables de gagner les centres germinatifs ganglionnaires, de commuter vers l’isotype IgG et présentent des mutations somatiques au niveau de la région variable de la chaîne lourde de leur immunoglobuline, dans la zone d’interaction avec HEL2X, indiquant un processus de sélection par l’auto-antigène. Malgré un taux augmenté d’auto-anticorps d’isotype IgM, ces animaux ne produisent pas de plasmocytes capables de sécréter des auto-anticorps d’isotype IgG. Nos observations suggèrent l’existence de mécanismes de tolérance périphérique intrinsèques mis en place en particulier au niveau du centre germinatif. Un premier point de contrôle va éliminer les lymphocytes B autoréactifs ayant commuté de classe et présentant des mutations somatiques leur conférant une affinité augmentée pour l’auto-antigène tandis qu’un second point de contrôle va empêcher la différenciation en plasmocytes IgG+.Chez l’individu non prédisposé génétiquement, des mécanismes pourraient ainsi permettre de prévenir le développement d’une auto-immunité pathogène au cours d’un épisode infectieux<br>Autoimmune diseases, affecting more than 5% of the population, reflect a loss of tolerance to selfantigens. These multifactorial diseases result from the combined effect of several susceptibility alleles and different environmental factors. Infectious agents have been particularly incriminated but there is no clear understanding of the underlying mechanisms. B lymphocytes, that appear central to the pathogenesis of several autoimmune diseases, may be activated by several mechanisms during infectious processes and this activation can encompass autoreactive cells. Whether or not the lattercan induce the production of high-affinity pathogenic IgG isotype auto-antibodies from the naturally present low-affinity self-reactive B cells is still unknown. To gain further insight into this question, we created a new intermediate affinity autoreactive mouse model called SWHEL X HEL2X. In these mice, knock-in B cells express a B cell receptor highly specific for Hen-Egg Lysozyme (HEL) that recognizes HEL2X mutated auto-antigen with intermediate affinity. This model, generated on a non-autoimmune-prone genetic background, allows the following of anti-HEL B cells affinity maturation process in presence of their auto-antigen during Borrelia burgdorferi chronic bacterial infection. The infection leads to lymph nodes lymphoproliferation and B cell activation including anergic cells. Some autoreactive clones are able to form germinal centers, toswitch their immunoglobulin heavy chain and to introduce somatic mutations in the heavy chain variable regions on amino-acids forming direct contacts with HEL2X, suggesting an auto-antigen-driven selection process. Despite increased levels of IgM autoantibodies, infected mice are unable to generate IgG autoantibody secreting plasma-cells. These observations suggest the existence of intrinsic peripheral tolerance mechanisms operating mainly at the level of germinal centers. The first checkpoint eliminates switched autoreactive B cells with increasing affinity mutations while a secondcheckpoint avoids IgG+ plasma-cell differentiation. Thus, in genetically non predisposed individuals, tolerance mechanisms may be set-up to prevent the development of pathogenic autoimmunity during the course of an infection
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Dubois, Bertrand. "Mise en évidence in vitro d'un dialogue entre cellules dendritiques et lymphocytes B : rôle dans la régulation de la réponse immunitaire humorale chez l'homme." Lyon 1, 1999. http://www.theses.fr/1999LYO10082.
Full textAbstract:
Lors d'une reponse humorale contre un antigene thymo-dependant, les lymphocytes b naifs proliferent et se differencient en plasmocytes et en lymphocytes b a memoire au sein des organes lymphoides secondaires. La coculture de lymphocytes b humains et de cellules dendritiques generees in vitro, en presence d'une lignee fibroblastique exprimant le cd40l (signal t) nous a permis de demontrer une contribution directe des cellules dendritiques dans la regulation de la reponse humorale. Les cellules dendritiques augmentent la proliferation des lymphocytes b et stimulent fortement la production d'immunoglobulines par les lymphocytes b a memoire. De plus, les cellules dendritiques, en rendant les lymphocytes b naifs sensibles a l'il-2, induisent leur differenciation en plasmocytes secreteurs d'igm. Par ailleurs, elles permettent l'expansion des cellules b du centre germinatif et favorisent la commutation isotypique vers igg 1, en presence d'il-2, et vers iga, en presence d'il-10 et de tgf. Des experiences visant a identifier les molecules impliquees dans ces effets demontrent que l'il-12, produite par les cellules dendritiques, joue un role critique, en particulier dans la differenciation des lymphocytes b naifs en plasmocytes, en presence d'il-2. La comparaison de differentes sous-populations de cellules dendritiques, obtenues in vitro ou purifiees a partir divers tissus, demontre que cette activite est restreinte aux cellules dendritiques de type interstitiel telles que les cellules dendritiques derivees de monocytes ou isolees des follicules b, et qu'elle n'est pas partagee par les cellules de langerhans. L'ensemble de ces resultats suggere que certaines sous-populations de cellules dendritiques pourraient participer directement au developpement et au controle de la reponse humorale, en delivrant directement aux lymphocytes b des signaux impliques dans les phenomenes de proliferation, de differenciation et de commutation isotypique.
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Eyquem, Stéphanie. "Caractérisation des mécanismes moléculaires contrôlant le développement des cellules lymphoïdes." Paris 7, 2004. http://www.theses.fr/2004PA077063.
Full text
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Armand, Marine. "Régulation transcriptionnelle et épigénétique de la différenciation B normale et tumorale : rôle des enzymes Tet et du facteur de transcription SPI1 TET2 Deficiency Causes Germinal Center Hyperplasia, Impairs Plasma Cell Differentiation and Promotes B-Cell Lymphomagenesis A Recurrent Activating Missense Mutation in Waldenström Macroglobulinemia Affects the DNA Binding of the ETS Transcription Factor SPI1 and Enhances Proliferation." Thesis, université Paris-Saclay, 2020. http://www.theses.fr/2020UPASL035.
Full textAbstract:
L’ontogenèse des lymphocytes B (LB) comporte une première phase de différenciation, dans la moelle osseuse en l'absence de toute stimulation antigénique spécifique, aboutissant au LB immature. La seconde phase, d’activation et de maturation finale, est dépendante des antigènes et se déroule dans les organes lymphoïdes secondaires, au sein de structures transitoires appelées centres germinatifs (CG). Elle génère des plasmocytes et des cellules B mémoires spécifiques d’un antigène.Ce travail de thèse s’intéresse à différents acteurs impliqués dans la régulation épigénétique et transcriptionnelle de la différenciation lymphoïde B terminale : les enzymes TET2 et TET3 et le facteur de transcription (FT) SPI1/PU.1. Des mutations affectant les gènes codant pour ces protéines sont trouvées dans les hémopathies chez l’Homme et nous avons cherché à déterminer leurs conséquences fonctionnelles en utilisant des modélisations in vivo et in vitro.J’ai d’une part analysé l’impact de la perte de fonction de TET2 sur la différenciation et la maturation des cellules B. Les résultats montrent un blocage de la différenciation plasmocytaire associé à une hyperplasie des CG et une augmentation du pourcentage et du nombre absolu des LB du CG (BGC). L’analyse par PCR quantitative de l’expression des FT importants pour la différenciation des BGC et des plasmocytes a montré que les cellules déficientes pour TET2 présentent une répression du gène Prdm1 codant pour BLIMP1, un régulateur essentiel de la différenciation plasmocytaire. Je me suis ensuite intéressée à TET3, autre protéine de la famille TET exprimée dans la lignée B. Les modèles Tet3-déficients in vivo et in vitro n’ont pas montré d’altération marquée de la différenciation B terminale.J’ai par ailleurs étudié une mutation somatique de SPI1/PU.1, identifiée par notre équipe chez des patients atteints de maladie de Waldenström (MW). Dans plus de 95% des cas, la mutation activatrice L265P du gène MYD88 est également présente. Nous avons montré que la mutation de SPI1, bien que n'empêchant pas sa liaison à l’ADN, modifie son affinité de liaison sur les sites normalement reconnus par la forme sauvage. La mutation semble faire adopter à cette protéine ETS de classe III un comportement qui ressemble à celui d'une classe I/IIa. J’ai ensuite cherché à documenter les bases de la coopération oncogénique entre SPI1 et MYD88 de deux façons. La première, en étudiant la prolifération et la différenciation de lymphocytes B naïfs issus d’un modèle murin knock-in pour la mutation SPI1 développé dans l’équipe, transduits avec un rétrovirus apportant la mutation de MYD88. Les résultats montrent une augmentation de la prolifération dans la condition double mutante ainsi qu’une augmentation de la différenciation terminale. La seconde approche consiste à modifier la lignée humaine BCWM1 de MW par CRISPR/Cas9 afin d’y introduire la mutation de SPI1 en même temps que l’expression de la GFP. Ce modèle sera notamment utilisé pour réaliser des expériences de ChIP-seq afin d’identifier les cibles de la protéine mutante dans un contexte MW-like.En conclusion, le respect des programmes transcriptionnels est essentiel pour le bon déroulement de la différenciation B terminale et peut être impacté soit directement, par des mutations affectant des FT comme SPI1, soit indirectement lorsque le profil de méthylation de gènes codant pour des FT (PRDM1) est altéré suite à des mutations affectant des enzymes comme TET2<br>B-cell development involves a first phase of differentiation in the bone marrow, in the absence of any specific antigenic stimulation, leading to immature B-cells. The second phase, staging activation and final maturation, is antigen-dependent and takes place in the secondary lymphoid organs, within transient structures called germinal centers (GC). It generates antigen-specific plasma cells and memory B cells.This thesis work focuses on different actors involved in the epigenetic and transcriptional regulation of B-cell differentiation: the enzymes TET2 and TET3 and the transcription factor (TF) SPI1/PU.1. Mutations in genes encoding these proteins are found in human neoplasms, we used in vivo and in vitro models to determine their functional consequences.I analyzed the impact of TET2 loss of function on the differentiation and maturation of B-cells. The results show an impaired plasma cell differentiation associated with GC hyperplasia and an increase in the percentage and absolute number of GC B-cells (BGC). Quantitative PCR analysis of the expression of key BGC and plasma cell TF showed that Tet2-deficient cells exhibit repression of the Prdm1 gene encoding BLIMP1, a master regulator of plasma cell differentiation. I then turned my attention to TET3, another TET family protein expressed in the B-cell lineage. In vivo and in vitro Tet3-deficient models show that the loss of TET3 does not significantly affect terminal B differentiation.In addition, I studied a somatic mutation of SPI1/PU.1, identified by our team in patients with Waldenström's disease (WM). In more than 95% of cases, the L265P activating mutation of MYD88 gene is also present. We have shown that SPI1 mutation, although not preventing its binding to DNA, alters its binding affinity at sites normally recognized by the wild-type form. The mutation appears to cause this class III ETS protein to behave in a manner similar to a class I/IIa ETS protein. I then sought to document the basis for oncogenic cooperation between SPI1 and MYD88 in two ways. First, by studying the proliferation and differentiation of naïve B-cells from a locally developped mouse model knock-in for the SPI1 mutation, transduced with a retrovirus carrying the MYD88 mutation. The results show an increase in proliferation in the double mutant condition as well as an increase of the terminal differentiation. Second, by modifying the human BCWM1 WM cell line by CRISPR/Cas9 in order to introduce the SPI1 mutation at the same time as the expression of the GFP. This model will be used in particular to perform ChIP-seq experiments to identify the targets of the mutant protein in a MW-like context.In conclusion, compliance to transcriptional programs is essential for the smooth progress of B-terminal differentiation and can be impacted either directly, by mutations affecting TF such as SPI1, or indirectly when the methylation profile of key TF-encoding genes (PRDM1) is altered following mutations in enzymes such as TET2
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Larousserie, Frédérique. "Analyse de l'expression d'une nouvelle cytokine, l'interleukine-27, dans les lymphocytes normaux et tumoraux et de son rôle au cours de la différenciation lymphocytaire B normale." Phd thesis, Université René Descartes - Paris V, 2005. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00101553.
Full textAbstract:
L'interleukine (IL)-27, constituée de EBV-induced gene 3 (EBI3) et de p28, joue un rôle important dans la régulation des réponses T. Son rôle dans la réponse B est peu connu. EBI3 est une protéine induite in vitro par l'oncogène viral LMP1 via l'activation de NF-kB. Ce travail montre qu'EBI3 est également induite par l'oncogène Tax du virus HTLV-1, de façon dépendante de NF-kB, et est exprimée in situ par les cellules tumorales dans les lymphomes EBV+ LMP1+ et dans certains lymphomes associés à l'HTLV-1, en l'absence de détection de p28. Nous montrons que l'IL-27 a des effets directs sur le lymphocyte B humain, modulés au cours de la différenciation et dépendants du type de co-stimulation. EBI3, mais pas p28, est exprimée par des cellules B du centre germinatif (CG) et par les cellules tumorales de lymphomes B d'origine du CG. Ces résultats suggèrent un rôle d'EBI3 indépendamment de son association à p28.
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Ait, Ghezali Lamia. "Expression des pompes calcique de type SERCA dans l’épithélium du plexus choroïde normal et tumoral et au cours de la différenciation précoce des lymphocytes B." Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2017. http://www.theses.fr/2017USPCD015/document.
Full textAbstract:
L’ion calcium est un second messager qui intervient dans de nombreux processuscellulaires dont la prolifération, la différenciation et l’apoptose. Ainsi, l’homéostasiecalcique constitue un point central de régulation de la signalisation cellulaire. En effet, laconcentration calcique cytosolique de calcium subit des oscillations, qui suivant leuramplitude ou leur fréquence, vont être capables d’activer spécifiquement certains facteursde transcription. La régulation de ces oscillations implique entre autres les ATPases de typeSERCA (Sarco/Endoplasmic Reticulum Calcium ATPase) qui accumulent le calcium dansle réticulum endoplasmique. L’objectif de ce travail de thèse a été l’étude des SERCAs aucours de la différenciation lymphocytaire B et dans l’épithélium du plexus choroïde ; ceci,afin de mieux comprendre le profil d’expression de ces pompes et les mécanismes derégulation impliqués.Au cours de la différenciation de lignées de leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) nousavons observé que l’expression de l’isoforme SERCA2 restait stable ou augmentaitlégèrement alors que celle de l’isoforme SERCA3 était toujours fortement induite, pouvantatteindre des niveaux observés dans les cellules lymphoïdes matures. Nous avons égalementobservé que l’inhibition de l’activité des SERCAs altère la différenciation cellulaire qui estdépendante de la voie des PKC. Ces données indiquent que SERCA3 pourrait être utiliséecomme marqueur de la différenciation lymphocytaire B. Une régulation de l’expression desSERCAs a également été mise en évidence au cours de la différenciation de l’épithélium duplexus choroïde normal ou tumoral. SERCA3 est fortement exprimée dans l’épithéliumnormal, mais on retrouve une baisse ou une perte de son expression dans l’épithéliumtumoral, cette baisse est corrélée à la perte de la différenciation selon le grade des tumeurs.L’étude de l’expression des SERCAs dans les cellules primaires du plexus choroïde traitépar des agents cyto-différenciateurs (acides gras à chaîne courte), montre que ladifférenciation est associée à une surexpression de SERCA3. SERCA3 peut donc égalementêtre un marqueur de la différenciation de l’épithélium du plexus choroïde.L’ensemble de ce travail a montré que la différenciation cellulaire est associée à la régulationde protéines impliquées dans la régulation de l’homéostasie calcique : les SERCAs. On peutainsi proposer SERCA3 comme un nouveau marqueur phénotypique utile pour l’analyse dela différenciation du plexus choroïde normale et néoplasique, ainsi que pour celle de ladifférenciation lymphoïde pré-B leucémique<br>Cellular calcium is involved in a multitude of biological processes including thecontrol of cell proliferation, differentiation and programmed cell death, and constitutestherefore a keconcentration calcique cytosolique de calcium subit des oscillations, qui suivant leuramplitude ou leur fréquence, vont être capables d’activer spécifiquement certains facteursde transcription. La régulation de ces oscillations implique entre autres les ATPases de typeSERCA (Sarco/Endoplasmic Reticulum Calcium ATPase) qui accumulent le calcium dansle réticulum endoplasmique. L’objectif de ce travail de thèse a été l’étude des SERCAs aucours de la différenciation lymphocytaire B et dans l’épithélium du plexus choroïde ; ceci,afin de mieux comprendre le profil d’expression de ces pompes et les mécanismes derégulation impliqués.Au cours de la différenciation de lignées de leucémie aiguë lymphoblastique (LAL) nousavons observé que l’expression de l’isoforme SERCA2 restait stable ou augmentaitlégèrement alors que celle de l’isoforme SERCA3 était toujours fortement induite, pouvantatteindre des niveaux observés dans les cellules lymphoïdes matures. Nous avons égalementobservé que l’inhibition de l’activité des SERCAs altère la différenciation cellulaire qui estdépendante de la voie des PKC. Ces données indiquent que SERCA3 pourrait être utiliséey element in cell signaling. Calcium levels vary in a dynamic mannerdepending on the state of activation of the cell, and can display oscillations the amplitudeand frequency of which can convey specific signals to various transcription factors.Sarco/Endoplasmic Reticulum Calcium ATPases (SERCA enzymes) accumulate calciumfrom the cytosol into the endoplasmic reticulum (ER). By modulating the spatiotemporalcharacteristics of calcium signals and oscillations, SERCA pumps constitute an importantand unique point of control of calcium-dependent cell activation. In this work weinvestigated SERCA expression during early B lymphoid differentiation and in normal,tumoral and hyperplastic choroid plexus epithelial cells.We have shown that SERCA3 expression is markedly increased during thepharmacologically induced differentiation of immature B acute lymphoblastic leukemiacells, whereas the expression of the simultaneously expressed SERCA2 isoform is notmodified significantly. SERCA3 expression during this differentiation process can reachlevels observed in mature B lymphoid cells, and is dependent on the activation of proteinkinase C. Moreover, the direct pharmacological inhibition of SERCA-dependent calciumtransport interferes with the differentiation process.Our investigations on the choroid plexus show, that whereas SERCA3 is highly expressedin normal choroid plexus epithelium, expression is strongly decreased in benign choroidplexus tumors and is lost in carcinoma, whereas expression is retained in hyperplasia. Inaddition, treatment of primary normal choroid plexus epithelial cells by short chain fattyacid-type cell differentiation-inducing agents in vitro leads to the induction of SERCA3expression.Our observations when taken together indicate that ER calcium homeostasis is remodeledduring the differentiation of immature B lymphoid cells and in the choroid plexus due to theinduction of SERCA3 expression. We show that a cross-talk exists between SERCA functionand the control of differentiation in B cells, that SERCA3 constitutes a new phenotypicmarker for the study of early B cell differentiation, and that the lack of SERCA3 expressionmay be useful for the identification of choroid plexus tumors
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Alouche, Nagham. "Impact d’un gain de fonction de CXCR4 sur la différenciation et la biologie plasmocytaire." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2018. http://www.theses.fr/2018SACLS450.
Full textAbstract:
Le récepteur CXCR4 et son ligand chimiokinique CXCL12 jouent un rôle essentiel dans le développement des cellules B et contribuent à la migration des plasmocytes (PCs) vers la moelle osseuse (MO) où ces cellules persistent dans des niches particulières et produisent des anticorps au long cours. Des mutations hétérozygotes du gène codant CXCR4 ont été identifiées dans un déficit immunitaire rare appelé le syndrome WHIM (SW) et récemment dans la macroglobulinémie de Waldenström (MW), un lymphoplasmacytome B caractérisé par l’expansion d’un clone IgM+ qui s’accumule dans la MO. Ces mutations affectent l’étape de désensibilisation du récepteur en réponse à CXCL12 et mènent donc à un gain de fonction. Mes travaux de thèse ont porté sur l’étude de l’impact du gain de fonction de Cxcr4 sur la biologie plasmocytaire par le moyen d’un unique modèle murin porteur de la mutation Cxcr4+/1013 précédemment identifié chez certains patients. Afin de mieux comprendre un défaut de vaccination présent chez les patients atteints du SW, la première partie de ma thèse s’est basé sur l’étude de la réponse humorale Thymo-dépendent du modèle murin Cxcr4+/1013. Nous avons mis en évidence un défaut de maintien de la réponse vaccinale probablement lié à l’absence des PCs spécifiques de l’antigène dans la MO des souris mutantes. En revanche, une population de plasmablastes (PBs) immatures dérivée de la réponse extra-folliculaire (EF), s’accumulent de façon aberrante suggérant une occupation des niches qui pourrait être à l’origine de la réponse vaccinale défectueuse. D’une autre part, dans la MW, les mutations CXCR4 sont toujours retrouvées en association avec des mutations gain de fonction du gène MYD88, la deuxième partie de ma thèse a donc porté sur l’étude de la réponse Myd88-dependante dans le modèle Cxcr4+/1013. Nos résultats révèlent une entrée en cycle accrue des cellules B Cxcr4+/1013 qui s’accompagne d’une augmentation de la différentiation plasmocytaire après activation de Myd88. De plus, nos résultats suggèrent, que le gain de fonction de Cxcr4 affecte la maturation des PBs ainsi que leur code migratoire ce qui pourrait expliquer leur migration exacerbée vers la moelle osseuse. L’ensemble de mes travaux a permis de mettre en évidence que la désensibilisation de Cxcr4 était un mécanisme clé régulant la réponse EF ainsi que la différentiation et la maturation plasmocytaire<br>CXCR4 plays an essential role in B cell development and controls partially plasma cell (PCs) homing to the bone marrow (BM). Heterozygous gain-of-function mutations of CXCR4 affecting its desensitization in response to the chemokine CXCL12 have been reported in a severe immune-deficiency disorder called WHIM syndrome (WS) and recently identified in Waldenström’s macroglobulinemia (WM), a B lympho-plasmacytoma characterized by the expansion of proliferative clonal malignant lymphoplasmacytic cells which secrete IgM Abs and mainly persist in the BM. Here we used a unique knock-in mice harboring the mutation Cxcr4+/1013 previously described in patients to assess how a gain-of-Cxcr4-function impacts PC biology and antibody (Ab) production. Following vaccination, WS patients mount a normal immune response but fail to maintain Ab titers over time. Therefore, the first part of my PhD was focused on studying the T-dependent humoral response in Cxcr4+/1013 mice. We showed that a strong reduction of antigen (Ag)-specific long-lived PCs in the BM of Cxcr4+/1013 mice could be the cause of the defective maintenance of Ab titers. Moreover, an aberrant accumulation of extra-follicular (EF) derived immature plasmablasts (PBs) was observed in this tissue potentially hampering the homing or maintenance of the Ag-specific PCs. Interestingly, in WM, mutations of CXCR4 are systematically associated with MYD88 mutations. Thus, the second part of my PhD focused on the study of the MyD88-dependent response in Cxcr4+/1013 mice. We showed that the Cxcr4 gain of function led to an increased cell cycle entry of splenic B cells that was associated with an enhanced PC differentiation. Finally, our findings showed that the desensitization of Cxcr4 is an essential break limiting the EF response as well as PC differentiation and maturation and suggest that an accumulation of mutated PB in the BM is not only due to the gain of function of Cxcr4 but to a more global change in the migratory code of these cells controlled by the exacerbated Cxcr4/Cxcl12 signaling
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Decaudin, Camille. "Impacts fonctionnels et conséquences sur la différenciation hématopoïétique d’une mutation somatique récurrente du gène PU.1/SPI1 identifiée dans la macroglobulinémie de Waldenström A Recurrent Activating Missense Mutation in Waldenström Macroglobulinemia Affects the DNA Binding of the ETS Transcription Factor SPI1 and Enhances Proliferation." Thesis, université Paris-Saclay, 2020. http://www.theses.fr/2020UPASL004.
Full textAbstract:
Le facteur de transcription PU.1/SPI1 de la famille ETS est un régulateur majeur de l'hématopoïèse, et de la différenciation des cellules souches, myéloïdes et lymphoïdes. Précédemment identifié comme un suppresseur de tumeur dans les malignités myéloïdes humaines, nous avons identifié une mutation somatique récurrente faux sens (Q226E) du gène PU.1 dans la macroglobulinémie de Waldenström, un syndrome lymphoprolifératif à cellules B. La mutation affecte la liaison à l'ADN de la protéine et permet au mutant de se lier et d'activer plus fréquemment les régions promotrices par rapport à la protéine de type sauvage. La liaison du mutant aux promoteurs active la transcription de gènes généralement activés par d'autres facteurs ETS, comme Ets1, entraînant une prolifération accrue dans les modèles de lignées cellulaires et les lymphocytes B primaires de souris. Pour analyser les propriétés du mutant dans des conditions physiologiques, nous avons développé un modèle de souris portant un allèle conditionnel Pu.1 Q226E Knock-In. L'utilisation d'un transgène CD19-Cre induit l'expression de la protéine mutée dans la lignée lymphoïde B. L'analyse du développement précoce des cellules B montre une augmentation de la réponse des cellules pré-B à l'IL-7, entraînant l'amplification de cette population in vivo. La protéine mutante stimule la prolifération cellulaire des lymphocytes B et augmente la différentiation des lymphocytes B en plasmocytes (CD138+). Plus précisément, ce mutant de Pu.1 semble augmenter précocement l'expression des facteurs de transcription spécifiques des plasmocytes, comme Blimp1 et Xbp1, et augmente l'activation de la voie UPR, permettant une différenciation plus importante des cellules B matures en plasmocytes. Ces résultats décrivent un mécanisme de subversion oncogénique de la fonction d’un facteur de transcription suite à la modification subtile de la spécificité de liaison à l'ADN de la protéine, qui affecte la prolifération et la différenciation<br>The ETS transcription factor PU.1/SPI1 is a major regulator of hematopoiesis. It is implicated in HSC, myeloid but also lymphoid biology and has been described as a tumor suppressor in human myeloid malignancies. We identified a PU.1 activating missense mutation in Waldenström macroglobulinemia (Q226E), a B-cell lympho-proliferative neoplasm, highlighting new oncogenic features for this transcription factor. This mutation affects the DNA-binding affinity of the protein and allows the mutant to more frequently bind to promoter regions with respect to wild-type protein, resulting in transcriptional activation of gene sets typically regulated by other ETS factors, such as ETS1, resulting in enhanced proliferation in model cell lines and murine primary B-cells. To analyze the properties of the mutant protein in physiological conditions, I developed mouse model carrying a Pu.1 Q226E Knock-In conditional allele. The use of a CD19-Cre transgene triggers the expression of the mutated protein in the B lymphoid lineage. Analysis of the early B cells development shows an increase response of pre-B cells to IL-7, associated to the accumulation of this population in vivo. I confirmed that the mutant protein stimulates B cell proliferation and showed that it also increases the differentiation of B cells into plasma cells (CD138+). Specifically, Pu.1 mutant induce an early increase of the expression of plasma-specific transcription factors, such as Blimp1 or Xbp1, and increases activation of the UPR pathway, which likely increases differentiation of mature B cells into plasma cells. These results describe a mechanism of oncogenic subversion of the function of a transcription factor as a result of the subtle modification of the DNA binding specificity of the protein, which affects proliferation and differentiation
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Wallon, Christine. "Étude des mécanismes d'activation des lymphocytes T au cours d'une réponse anticorps in vitro chez l'homme vis-a-vis de l'antigène TNP-PAA." Paris 11, 1986. http://www.theses.fr/1986PA112094.
Full textAbstract:
Dans un modèle de réponse anticorps spécifique in vitro chez l'homme, induite par un antigène synthétique particulaire le TNP-PAA, nous avons étudié le rôle et les mécanismes d'activation des lymphocytes T. La réponse anti-TNP est de type IgM, spécifique de l'haptène TNP. Les monocytes ne jouent pas le rôle de cellules présentant l'antigène. Cette réponse est T-dépendante, sans restriction allogénique apparente pour la coopération monocytes-cellules T et cellules T-B. Seuls les lymphocytes T4 ont un effet amplificateur. Dans ce modèle, il existe une prolifération T mais nos résultats n'apportent aucun argument en faveur d'une activation T antigène induite, antigène-spécifique. Le rôle de différentes molécules de surface a été étudié de façon indirecte à l'aide d'anticorps monoclonaux, en analysant leur effet fonctionnel dans l'activation T. Les anticorps OKT4A et anti-DR inhibent de façon parallèle la réponse anti-TNP, la prolifération T non induite par l'antigène et la RML autologue, mais sont sans effet sur une prolifération T induite par les mitogènes. Ces résultats montrent que l'activation T non spécifique est dépendante d'une interaction entre la molécule T4A portée par les lymphocytes T et les cellules non T DR+ et proche de celle observée au cours d'une RML autologue. Nous montrons également que des anticorps dirigés contre la chaine Œ de la molécule LFA1 inhibent la réponse anti-TNP et plusieurs arguments suggèrent que cette molécule joue un rôle non spécifique dans l'interaction cellulaire directe T-B. Enfin l'effet amplificateur des lymphocytes T peut être donné aux lymphocytes B par des lymphokines non spécifiques, indépendamment du signal spécifique donné directement par l'antigène aux lymphocytes B.
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Simand, Célestine. "Fonction d’Ikaros dans la transformation des progéniteurs des cellules B1." Thesis, Strasbourg, 2019. http://www.theses.fr/2019STRAJ097.
Full textAbstract:
Le développement lymphocytaire B murin comprend 2 lignages, B1 et B2, différentiables par leurs progéniteurs, leurs fonctions et leurs localisations. Le facteur de transcription Ikaros, codé par le gène Ikzf1, a un rôle essentiel dans le développement lymphocytaire B2. Cependant, son rôle dans le développement lymphocytaire B1 reste à déterminer. Les altérations génétiques d’IKZF1 sont souvent associées aux leucémies aiguës lymphoblastiques B (LAL-B) de haut risque. Considérant que la lymphopoïèse s’établit par une vague fœtale, majoritairement de type B1, puis une vague adulte, majoritairement de type B2, les progéniteurs B1 pourraient-être à l’origine de certaines LAL-B pédiatriques.En utilisant un modèle murin avec une délétion conditionnelle du gène Ikzf1 dans les progéniteurs B (Ikzf1f/f Mb1-Cre), nous avons montré qu’Ikaros est nécessaire à la différenciation lymphocytaire B1 de manière équivalente à la différenciation B2. En utilisant l’oncogène BCR-ABL, nous avons également montré que les progéniteurs B1 peuvent être à l’origine de LAL-B chez les murins et qu’Ikaros a un rôle suppresseur de tumeur dans ces cellules.La poursuite de ce travail consistera à déterminer si des LAL-B de type B1 existent chez l’Homme<br>Murine B cell development comprises 2 main B cell lineages, B1 and B2, with distinct progenitors, functions and localization. The transcription factor Ikaros, encoded by the Ikzf1 gene, is a major regulator of lymphopoiesis and plays a crucial role in B2 cell differentiation. However, the role of Ikaros in B1 cell differentiation is unclear. Genetic alterations of IKZF1 are a hallmark of high-risk B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (BCP-ALL). Considering that lymphopoiesis takes place in distinct fetal and adult waves, with B1 cell lymphopoiesis predominating in fetuses and neonates and B2 cell progenitors predominating in adults, some pediatric BCP-ALL cases may originate from B1 cell progenitors. Using a mouse model with a conditional deletion of Ikzf1 in B cell progenitors (Ikzf1f/f Mb1-Cre), we show that Ikaros is critical for normal B1 cell differentiation, similarly to B2 cell differentiation. Using the BCR-ABL oncogene, we show that B1 progenitor can induce BCP-ALL in the murine model and that Ikaros has a tumor suppressor function in these cells. Further studies are required to determine if B1 cell progenitors can contribute to B1-like BCP-ALL in human
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Parant, Marc. "Mise en évidence d'une activité protéine kinase C atypique dans une lignée de myélome multiple humain, RPMI 8226." Montpellier 2, 1990. http://www.theses.fr/1990MON20234.
Full textAbstract:
L'orientation d'une cellule vers sa proliferation ou un etat differencie est souvent due a l'emission de signaux intracellulaires. Parmi ceux-ci, la proteine kinase c (pkc) est particulierement impliquee et sa sur-expression cellulaire ou un dereglement de son activite sont directement relies a des processus de transformations cellulaires. Nous avons, dans un premier temps, montre que l'activite pkc presente dans les lymphocytes b leucemiques de cobaye l2c est spontanement activee et parait necessaire a la proliferation de ces cellules transformees. Cette observation nous a amene a mettre au point un dosage semi-automatise de l'activite pkc et de la liaison des esters de phorbols a cette enzyme. L'interet de l'elucidation d'un mecanisme aboutissant a la cancerisation cellulaire etant a nos yeux une eventuelle application therapeutique, nous avons recherche un modele cellulaire humain presentant des caracteristiques pkc proches de celles observees dans les lymphocytes l2c de cobaye. La lignee de myelome multiple humain rpmi 8226 s'est revelee particulierement interessante. Nous avons tout d'abord mis en evidence un comportement anormal de l'activite pkc presente dans les cellules (faible dependance pour le calcium et les phospholipides et forte localisation membranaire (40%). L'approfondissement des travaux a alors permis de montrer la nature atypique de cette activite pkc, caracterisee par: des proprietes d'activation par le calcium et les phospholipides particulieres, une inhibition differentielle par des inhibiteurs connus de la pkc, une absence complete d'inhibition par des peptides analogues de la sequence autoinhibitrice de la pkc, une down-regulation non conventionnelle par les esters de phorbols. Ces travaux ont permis, pour la premiere fois a notre connaissance, de mettre en evidence la presence d'une activite pkc atypique dans un systeme cellulaire tumoral. Ces resultats sont du p
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Sawaf, Matthieu. "Le récepteur co-inhibiteur BTLA au cours du lupus érythémateux disséminé (LED) : aspects fondamentaux et implications thérapeutiques." Thesis, Strasbourg, 2018. http://www.theses.fr/2018STRAJ016.
Full textAbstract:
Le lupus érythémateux disséminé (LED) est une maladie auto-immune systémique caractérisée par une inflammation provoquant des lésions dans de nombreux organes tels que les reins, les poumons ou la peau. Dans cette pathologie, une activation excessive du système immunitaire conduit à la production d’auto-anticorps dirigés, le plus souvent, contre du matériel nucléaire. La différenciation des lymphocytes B (LB) en cellules productrices d’anticorps requiert une communication entre les LT et les LB. Ce dialogue est régulé par de nombreux acteurs cellulaires et moléculaires afin de permettre la mise en place d’une réponse humorale efficace en cas d’infections, mais aussi de prévenir le développement de maladies auto-immunes. Mon projet de thèse a consisté à étudier l’implication de deux de ces acteurs, l’un favorisant la différenciation des LB en plasmocytes, à savoir, les cellules T folliculaires auxiliaires (TFH) et le second régulant négativement l’activation lymphocytaire, le récepteur co-inhibiteur BTLA (pour B and T Lymphocyte Attenuator) dans le LED chez l’Homme. Au cours de cette étude, nous avons d’une part amélioré les connaissances concernant les sous-populations de TFH circulantes humaines, en décrivant que parmi les cellules TFH CXCR3-CCR6- sont retrouvées des cellules aux propriétés suppressives. De plus, nous avons suggéré que la contraction des TFH1 (CXCR3+CCR6-) au profit des TFH2 (CXCR3-CCR6-), observées chez les patients lupiques, pourrait être le reflet d’une migration des TFH1 vers les organes inflammés. D’autre part, nous avons mis en évidence un défaut fonctionnel de BTLA dans les LT CD4+ de patients lupiques. Ce défaut, restauré en normalisant le métabolisme lipidique des LT CD4+, semble associé à la sévérité de la pathologie. En parallèle de ces observations, nous avons démontré un défaut d’expression de BTLA sur les LB et les LT CD4+ régulateurs de patients lupiques. L’ensemble de nos données sont prometteuses et ouvrent de nouvelles perspectives thérapeutiques pour le traitement du LED<br>Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is an autoimmune disease characterized by lesions in several organs such as kidneys, lungs and skin for instance. In this pathology, an excessive activation of the immune system leads to the production of autoantibodies targeting mainly nuclear antigens. B cell differentiation into antibody-secreting cells requires a close collaboration between T and B cells. This cross-talk is regulated by various cellular and molecular factors in order to mount an efficient humoral response in case of infection, but also to prevent autoimmune disease development. The aim of my thesis was to study two regulating factors of the B cell response, one promoting the B cell differentiation into plasma cells, i.e the follicular helper T cells (TFH) and the other one inhibiting lymphocyte activation, i.e a co-inhibitory receptor called BTLA (« B and T Lymphocyte Attenuator ») in human SLE. In this study, we first improved our knowledge concerning human circulating TFH cells, by describing among the CXCR3-CCR6- TFH cell subset, a population with suppressive capacities. Moreover, we suggested that the decreased frequency of TFH1 in lupus patients’ blood could be explained by the migration of these cells into inflamed tissues. We also highlighted a BTLA functional deficiency in lupus CD4+ T cells. This deficiency, which can be restored by normalizing the lipid metabolism, seems to be associated to disease severity. Furthermore, we described an altered expression of BTLA in lupus B cells and regulatory T cells. Altogether, our data show promising results and suggest new potential therapeutic strategies for lupus treatment