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Dissertations / Theses on the topic 'Myoblastes – Cultures et milieux de culture'
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Lapointe, Évelyne. "Transformation de cellules souches embryonnaires en myoblastes : première étape du développement d'un traitement de la dystrophie musculaire de Duchenne." Thesis, Université Laval, 2006. http://www.theses.ulaval.ca/2006/23792/23792.pdf.
Full text
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Kalman, Benoît. "Génération et optimisation de microtissus musculaires 3D in vitro." Thesis, Université Grenoble Alpes (ComUE), 2016. http://www.theses.fr/2016GREAI053.
Full textAbstract:
L’ingénierie du tissu musculaire squelettique vise à reconstituer in vitro un tissu fonctionnel aussi physiologique que possible dans le but de mieux comprendre la myogenèse, l’impact de mutations génétiques et tester des médicaments. Ces dernières années, différents modèles de tissus musculaires tridimensionnels ont été développés. Toutefois, l’utilisation prépondérante de cellules murines et la taille de ces modèles restreint leur pertinence pour les études de pathologies humaines et le criblage pharmacologique. Dans le cadre de ce travail de thèse, nous avons donc développé différents modèles de tissus musculaires humains micrométriques pour répondre à ces limitations. Dans un premier temps, nous avons conçu et optimisé par microfabrication une plateforme caractérisée par la présence de microcanaux. Nous avons ainsi généré des tissus musculaires multicouches alignés présentant une organisation proche du muscle natif à partir de myoblastes murins immortalisés C2C12 puis de myoblastes humains immortalisés. Nous avons ainsi montré l’influence de la topographie et de la concentration cellulaire sur l’alignement des myotubes et la maturation du tissu musculaire. Dans un second temps, nous avons développé une plateforme constituée de micropuits contenant chacun deux micropiliers permettant d’analyser la contractilité des tissus. Des microtissus musculaires 3D standardisés ont ainsi été générés avec cette plateforme à partir de myoblastes murins, et de myoblastes C2C12 électroporés avec un gène muté ou non de la desmine. Par la suite, des microtissus ont été générés à partir de myoblastes humains. L’importance du choix de la matrice dans la formation des microtissus et les bénéfices d’une coculture de myoblastes et fibroblastes dans la stabilité des tissus ont ainsi été mis en évidence. La géométrie de micropiliers a aussi été optimisée afin de générer et comparer des microtissus composés de myoblastes isolés de patients sains et malades (dystrophie musculaire de Duchenne). Une preuve de concept démontrant la possibilité d’utiliser cette technologie pour tester des thérapies chimiques et géniques a été établie. Nous avons en effet suivi en temps réel les effets de l’inhibiteur de la kinase Rho-associée Y-27632 sur la contractilité des microtissus, ainsi que la transduction d’un gène rapporteur fluorescent modèle par les cellules composant les microtissus. Les résultats de ce travail de thèse démontrent le potentiel de cette technologie pour l’étude des processus fondamentaux de la myogenèse, l’évaluation des effets fonctionnels de mutations patient-spécifique et le criblage de thérapies chimiques et géniquesSkeletal muscle tissue engineering aims to build functional and physiological tissues in vitro in order to better understand myogenesis, to investigate the impact of genetic mutations and to screen potential therapies. Over the past few years, bi- and tridimensional models of muscle tissue have been developed, but most of these models are based on the use of murine cells and require large amounts of cells, thus limiting their relevance to study pathologies of human muscles and drug screening assays. Here we aimed at developing different models of human muscle microtissues to address these issues. By using microfabrication techniques, we first engineered a microgrooved platform we used to generate aligned multilayered skeletal muscle tissues from murine C2C12 myoblasts and human immortalized myoblasts. We showed the impact of topography and cell density on the maturation and myotube alignment. We then fabricated a microdevice, consisting of microwells containing two micropillars allowing an easy access to the contractility of muscle tissues. We engineered microtissues from C2C12 and C2C12 myoblasts electroporated with a mutated gene of desmin, and showed some limitation of this technique of transduction. Finally, we generated microtissues from human myoblasts. We investigated the role of the extracellular matrix in the tissue formation and evidenced the benefits of coculturing myoblasts and fibroblasts on the stability of muscle microtissues. Furthermore, we optimized the geometry of the micropillars to engineer and compare microtissues composed of human myoblasts isolated from healthy and diseased (Duchenne muscular dystrophy) patients. A proof of concept of the potential of this technology for screening chemical and gene therapies was established. We were indeed able to analyze in real time the effects of the Rho-associated kinase-inhibitor Y-27632 on the tissue contractility, as well as the transduction of a model fluorescent reporter gene. Altogether, the results of this work demonstrate the potential of this technology to study fundamental muscle biology, examine functional effects of patient-specific mutations or screen chemical and gene therapies
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Jouishomme, Hervé. "Culture de lymphocytes et de monocytes humains en milieu défini." Lyon 1, 1990. http://www.theses.fr/1990LYO1T091.
Full text
4
Robert, Fabienne. "Aspects ultrastructuraux et neurochimiques des astrocytes et des neurones en culture : influence des antibiotiques." Orléans, 2003. http://www.theses.fr/2003ORLE2034.
Full textAbstract:
Les cultures d'astrocytes et de neurones sont des modèles couramment utilisés pour l'étude des fonctions du système nerveux central. Le but du présent travail est la recherche de l'influence des conditions de culture sur les astrocytes et les neurones. L'étude ultrastructurale montre la présence de mitochondries difformes et de vésicules multilamellaires dans les cellules. Les antibiotiques utilisés en culture renforcent la présence des vésicules multilamellaires. L'utilisation de traceurs du système endolysosomal montre que ces vésicules sont d'origine lysosomale. Les antibiotiques modifient l'activité de plusieurs fonctions astrocytaires et altèrent l'intégrité membranaire. Par une étude de l'apoptose, nous observons que les antibiotiques ont un effet délétère sur les astrocytes et les neurones. Ces résultats montrent que la culture perturbe le système lysosomal des cellules étudiées. Les antibiotiques amplifient ces modifications et altèrent certaines fonctions cellulaires.
5
Saleil, Véronique. "Développement "in vitro" des apex isolés à partir de deux espèces d'igname, Dioscorea alata et Dioscorea trifida." Montpellier 2, 1986. http://www.theses.fr/1986MON20091.
Full text
6
El, Kouhen Rachid. "Colicine N et porine OmpF, un dialogue dynamique." Aix-Marseille 1, 1995. http://www.theses.fr/1995AIX11035.
Full textAbstract:
La colicine n, bacteriocine produite par e. Coli, est active sur des souches apparentees. Son mode d'action comprend trois etapes: (i) fixation sur la porine ompf a la surface bacterienne, (ii) utilisation de cette meme porine et des proteines tolaq pour traverser la membrane externe (iii) formation de pores voltage-dependant dans la membrane interne. La colicine n (42kda) est organisee en domaines structuraux, chacun etant associe a une etape du mode d'action. Le domaine central r (67-182) est responsable de la fixation sur ompf. Le domaine n-terminal t, est implique dans la translocation a travers la membrane externe ; il peut etre subdivise en deux sous-domaines t1 et t2. Le site recepteur de la colicine n est conserve sur le trimere ompf purifie. L'interaction colicine n-ompf depend de la presence du domaine r. Le trimere purifie est capable de proteger les cellules sensibles contre l'action des colicines a et n. Le niveau de protection depend de l'etat conformationnel de la porine. Cette association recepteur-ligand a la surface bacterienne est visualisee en microscopie electronique. La cinetique de fixation de la colicine n est tres rapide. L'etude de la translocation montre l'existence de deux populations de colicine n: une, correspondant aux colicines internalisees et une autre, accessible a la surface cellulaire, degradee par les differentes enzymes. 10(#1) secondes est le temps qui separe l'addition de la colicine n et de la formation du pore au niveau de la membrane interne. La vitesse maximale d'efflux de k#+ intracellulaire est obtenue a une multiplicite de 300-400: correspond aux colicines protegees
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Le, Marrec-Croq Françoise. "Etablissement de cultures primaires de cellules de bivalves marins." Brest, 1995. http://www.theses.fr/1995BRES2031.
Full textAbstract:
Notre etude se situe dans le cadre d'un programme de recherches mene en partenariat dans le but de mettre au point des cultures cellulaires chez les bivalves marins. Les travaux ont eu pour objectif l'etablissement de cultures primaires de cellules fonctionnelles de coquille st-jacques pecten maximus et d'huitre crassostrea gigas. Ils ont necessite la selection et l'optimisation d'un protocole de dissociation cellulaire et la mise en place d'un procede de decontamination microbienne de certains tissus pour eviter la presence de microorganismes parmi les suspensions cellulaires (branchies notamment). Les essais ont ete realises a partir de cur et de branchies de coquille st-jacques et a partir d'embryons d'huitre. La technique d'isolement des cellules a par la suite ete validee par les resultats des cultures realisees dans un milieu de base que nous avons defini. Certaines cellules adherent en effet systematiquement au support apres deux ou trois jours de culture. Deux types cellulaires sont differenciables, des cellules de type epithelial, peu nombreuses, et des cellules fibroblastiques, largement majoritaires. Les cellules fusiformes adherentes en culture, de type fibroblaste, ont ete caracterisees, dans le cas du cur, par microscopie electronique (presence de myofibrilles) et immunomarquage (reaction positive a l'anti-myosine et anti- tropomyosine) comme etant des myocytes. Cette conclusion est d'ailleurs corroboree par le fait qu'apres environ une semaine de culture, lorsque les cellules sont quasiment confluentes, elles reconstituent des formations plurinucleees de type myotubes qui se contractent spontanement in vitro. Les resultats des cultures, reproductibles dans le cas du cur de coquille st-jacques restent plus variables dans le cas des branchies et des cellules embryonnaires. Ces donnees nous ont donc conduit peu a peu a selectionner les cellules de cur pour les experimentations ulterieures. Diverses techniques analytiques (histoautoradiographie, comptage en scintillation, electrophorese et autoradiographie d'electrophorese, chromatographie sur couche mince et autoradiographie de chromatographie sur couche mince), mises en uvre a differents temps de culture, apres incubation des cellules en presence de precurseurs marques ont montre que les cellules de cur en culture dans le milieu de base neosynthetisent des proteines, de l'adn et des lipides pendant au moins 20 jours (c'est aussi le cas des branchies). Ces activites de biosynthese peuvent d'ailleurs etre stimulees par addition au milieu de base de certains facteurs d'origine marine notamment et des lipides en particulier ce qui prouve que le milieu de culture peut etre encore ameliore. Un protocole de cryopreservation des cellules de cur a pu etre mis au point, permettant d'obtenir des cultures a partir des cellules decongelees. L'activite de biosynthese de ces cellules en culture, evaluee apres sept jours, apparait equivalente, au moins, a celle des cellules temoins non congelees et le profil des proteines et des lipides neosynthetises par les cellules en culture apres congelation-decongelation est comparable a celui obtenu pour les cellules fraiches. De plus, comme pour les cellules non congelees, une differenciation terminale des myoblastes en myotubes est observee en culture. A titre preliminaire, pour une etude de faisabilite, ces modeles experimentaux ont aussi ete utilises comme bioessais pour des tests de cytotoxicite aigue (effet de sels de metaux lourds) et de genotoxicite (effet d'un produit mutagene de reference, l'aflatoxine b1), l'objectif etant de pouvoir proposer a terme, des biotests et biomarqueurs d'effets cytotoxique et genotoxique de xenobiotiques presents dans le milieu marin, completant ainsi la panoplie des tests deja disponibles pour la surveillance de la qualite de l'eau de mer (algues, bacteries, embryons). En conclusion, les donnees acquises au cours de ce travail et les techniques analytiques mises au point ont permis pour la premiere fois: - d'etablir des cultures primaires de cellules de cur de coquille st-jacques dont l'activite de biosynthese a ete verifiee avec rigueur au cours du temps par l'etude de certaines fonctions du metabolisme de base (en l'absence de biomarqueurs specifiques connus), - de congeler des cellules de cur de coquille st-jacques permettant, apres decongelation, d'obtenir des cultures dont l'activite de biosynthese in vitro est conservee. Ces resultats, qui ouvrent sur de larges perspectives vont, en outre, faciliter la mise en place de nouveaux modeles cellulaires chez des invertebres marins
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Esclatine, Audrey. "Interactions du cytomegalovirus humain avec des cellules épithéliales intestinales en culture." Paris 11, 2001. http://www.theses.fr/2001PA114814.
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9
Massart, Catherine. "Culture de thyrocytes humains en monocouches et en follicules : Aspects fondamentaux et appliqués." Rennes 1, 1988. http://www.theses.fr/1988REN1B003.
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10
Chabert, Philippe. "Production d'anticorps monoclonaux par culture cellulaire : applications industrielles." Lyon 1, 1989. http://www.theses.fr/1989LYO10128.
Full textAbstract:
Nous avons développé deux techniques de production d'anticorps monoclonaux par culture cellulaire : une technique de culture en supension en fermenteur et une technique de culture sur fibres creuses. L'étude de la production d'anticorps monoclonaux en fermenteur a conduit au développement d'un système ouvert faisant appel à la perfusion de milieu frais en continu grâce à un module de microfiltration en ligne permettant la séparation cellules - milieu de culture tout au long de la culture. Ce système autorise des productions de 1 à 2 grammes d'anticorps monoclonaux par mois sous des volumes de lot de 10 à 20 litres. La culture cellulaire sur fibres creuses repose sur une compartimentation entre les cellules et le milieu de culture circulant, simulant les conditions d'alimentation en nutriments et en gaz observés "in vivo". Le système, grâce à une double circulation de milieu de part et d'autre des fibres, permet des productions selon le clone, de 7 à 15 grammes d'anticorps par mois pour des volumes de récolte de 2 à 5 litres. Le développement de ces deux procédés de production a nécessité la mise au point de milieux de culture définis pour la croissnce et la sécrétion. Ces deux techniques permettent d'obtenir des immunoglobulines ayant les mêmes caractéristiques et au moins les mêmes potentialités que les anticorps produits sur animal
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Le, Bel Gaëtan. "Impact d'une couche nourricière humaine et du temps post-mortem sur la culture de cellules cornéennes humaines." Doctoral thesis, Université Laval, 2020. http://hdl.handle.net/20.500.11794/70367.
Full textAbstract:
En raison de la pénurie mondiale de cornées de donneurs utilisées pour traiter les pathologies cornéennes, des alternatives visant à restaurer les déficiences visuelles, comme la production de tissus cornéens humains par génie tissulaire, sont envisagées. Pour traiter les dommages affectant plus précisément l'épithélium cornéen, comme la déficience en cellules souches limbiques (DCSL), l'équivalent cornéen doit avoir un épithélium capable d'auto-renouvellement permettant la bonne cicatrisation de la cornée après la greffe. Pour cultiver des cellules épithéliales de cornées humaines (CECH) in vitro, l'utilisation d'une couche nourricière est nécessaire afin de maintenir la sous-population de cellules souches cornéennes essentielle à la bonne prolifération de ces cellules. Les conditions de culture doivent donc permettre le maintien du phénotype souche de ces cellules, tout en favorisant leur prolifération et en évitant leur différenciation terminale. Cependant, d'autres paramètres comme l'intervalle post-mortem du tissu cornéen à partir duquel sont extraites les CECH cultivées, peuvent influencer la réussite de la culture. La caractérisation des cultures de CECH est importante afin d'optimiser la réussite de la greffe. Les travaux présentés dans cette thèse ont permis de démontrer que la co-culture de CECH avec une couche nourricière murine a entraîné une augmentation significative de l'expression et de la liaison à l'ADN de NFI. Cela est causé par une forte expression de l'isoformes NFI-B présentant une stabilité accrue engendrée par une hyper-glycosylation. Le maintien de l'isoforme NFI-B au cours des passages a été corrélé avec une entrée en différenciation plus rapide des CECH en culture. Ces travaux ont également montré que l'effet de cette couche nourricière murine sur les niveaux d'expression et la capacité de liaison à l'ADN des facteurs de transcription Sp1 et NFI a pu être confirmé dans un autre type cellulaire. En effet, la co-culture de cellules endothéliales cornéennes humaines avec la couche nourricière murine a également causé une augmentation significative de l'expression et de la liaison à l'ADN de NFI. Dans cette étude, cela était associé à une amélioration de la morphologie des cellules endothéliales cornéennes humaines. Ces travaux ont aussi montré que l'intervalle post-mortem influençait de manière négative la prolifération des CECH et le maintien des cellules souches lors des cultures en monocouche. De même, lorsque les mêmes populations cellulaires ont été utilisées pour reconstruire une cornée humaine par génie tissulaire, la capacité de cicatrisation des épithéliums cornéens reconstruits a diminué avec l'augmentation de l'intervalle post mortem. L'étude du transcriptome de ces populations cellulaires par biopuce à ADN, a également révélé que l'intervalle post-mortem avait un impact sur le profil transcriptomique pour les cellules cultivées en monocouche. Il a aussi été montré qu'un greffon reconstruit à partir des CECH co-cultivées avec une couche nourricière humaine a permis de cicatriser la surface cornéenne d'un œil atteint de DCSL. Ces différents résultats mettent en lumière que l'utilisation d'une couche nourricière humaine pour la culture des CECH, associée à un intervalle post-mortem court des tissus dont elles sont issues, est à privilégier pour favoriser une bonne prolifération in vitro des CECH cultivées en monocouche.Because of the worldwide shortage of graftable corneas used to treat corneal pathlogies, alternatives to restore visual impairments, such as the production of a human cornea tissues by tissue engineering, have been considered. To treat injuries affecting the corneal epithelium, such as limbal stem cell deficiency (LSCD), the corneal equivalent must have an epithelium able to self-renewal allowing healing of the patient's corneal epithelium after the transplantation. To culture human corneal epithelial cells (HCECs) in vitro, the use of a feeder layer is necessary so as to maintain the subpopulation of corneal stem cells, which is essential for the proper proliferation of these cells. Therefore, the culture conditions must allow the maintenance of the stem phenotype of these cells, while promoting their proliferation and delaying their terminal differentiation. Other parameters, such as the post-mortem interval of the corneal tissue from which the cultured HCECs are derived, can influence the success of the culture. It is therefore important to characterize the cultures of HCECs in order to optimize the success of a transplant, namely, when these cells are transplanted in order to regenerate the injured corneal epithelium of a patient. The work presented in this thesis demonstrates that the co-culture of HCECs with a murine feeder layer resulted in a significant increase in the expression and the binding to DNA of NFI. This was shown to be caused by strong expression of the NFI-B isoform with increased stability due to hyper-glycosylation. The preservation of the NFI-B isoform with cellular passages was correlated with a faster differentiation of the HCECs in culture. This work also shows that the effect of this murine feeder layer on the expression levels and the DNA binding capacity of the transcription factors Sp1 and NFI was confirmed in another cell type. Indeed, the co-culture of human corneal endothelial cells with the murine feeder layer also caused a significant increase in the expression and binding to DNA of NFI. In this study, this was associated with an improvement in the morphology of human corneal endothelial cells. This work also showed that post-mortem interval could have a negative influence on the proliferation of HCECs and on the maintenance of stem cells during monolayer cultures. When the same cell populations were used to reconstruct a human cornea with tissue engineering, the healing capacity of the reconstructed corneal epithelia was decreased by the increase in post-mortem interval. This was notably validated by a study of the transcriptome of these cell populations by DNA microarray. It has also been shown that a graft reconstructed with HCECs co-cultivated with human feeder layer has enabled to heal the corneal surface an eye with LSCD. These different results highlight that the use of a human feeder layer for culture, associated with a short post-mortem interval of the donor tissues, is to be favoured in order to promote a good in vitro proliferation of HCECs cultivated in monolayer.
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Djigo, Aïcha Dede. "Caractérisation de substituts choroïdiens reconstruits par génie tissulaire." Master's thesis, Université Laval, 2017. http://hdl.handle.net/20.500.11794/28145.
Full textAbstract:
Tableau d'honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2017-2018La choroïde est une couche richement vascularisée assurant la nutrition des photorécepteurs. Les échanges avec ces derniers sont contrôlés par l’épithélium pigmentaire rétinien (EPR), la couche externe de la rétine reposant sur la choroïde. La perte de l’intégrité de l’étroite interaction entre l’EPR et la choroïde est à l’origine de la dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA), l’une des principales causes de cécité dans le monde. C’est une maladie complexe qui implique autant des facteurs de risque génétiques qu’environnementaux. Dans cette étude, nous avons reconstruit un stroma choroïdien par génie tissulaire qui servirait à étudier les interactions cellules choroïdiennes - cellules choroïdiennes et/ou cellules choroïdiennes - cellules de l’EPR. Il pourrait aussi servir comme tissu de remplacement lors d’une greffe, un traitement prometteur pour la DMLA. Nous avons d’abord isolé l’EPR et les cellules choroïdiennes à partir de globes de donneurs décédés. Puis, en utilisant la méthode d’auto-assemblage du génie tissulaire, les fibroblastes de la choroïde ont déposé des fibrilles de collagène pour former un feuillet de matrice extracellulaire dont la composition et les propriétés biomécaniques ont ensuite été caractérisées. Les analyses par spectrométrie de masse, immunomarquages, microscopie électronique à balayage et colorations histologiques ont démontré que la composition matricielle des stromas choroïdiens reconstruits (SCR) était semblable au tissu natif. Leurs propriétés biomécaniques ressemblaient également à celles de la choroïde native selon les mesures comparatives d’élasticité, de déformation et de résistance à la traction. Nous avons finalement ensemencé de l’EPR, des cellules endothéliales et des mélanocytes choroïdiens sur/dans les SCR. Ces cellules se sont bien intégrées sur ces derniers et ont adopté une morphologie et un aspect histologique retrouvés in vivo. Nos substituts choroïdiens miment donc les propriétés structurales du microenvironnement dans lequel résident les cellules choroïdiennes de même que plusieurs de ses caractéristiques fonctionnelles.
The choroid is a richly vascularized layer supplying oxygen and nutrients to the photoreceptors. The exchanges are regulated by the retinal pigment epithelium (RPE), the outermost layer of the retina that lies between the neural retina and the choroid. The loss of the normal interaction between the RPE and the choroid is central to the development of age-related macular degeneration (AMD), one of the leading causes of blindness worldwide. AMD is a complex disease involving both genetic and environmental risk factors. In this study, we have engineered a choroidal substitute which could be used in order to study choroidal cells - choroidal cells and/or choroidal cells - RPE interactions as well as serve as replacement tissues in a graft, a promising treatment for AMD. We first isolated RPE and choroidal cells from deceased donor eyes. Then, using the self-assembly approach of tissue engineering, choroidal fibroblasts accumulated collagen fibrils that produced sheets of extracellular matrix whose composition and biomechanical properties were characterized next. Several analyses, such as mass spectrometry, immunostainings, scanning electron microscopy and histological stainings, revealed that the extracellular matrix composition of the tissue-engineered (TE) choroidal stromas was similar to the native tissue. Furthermore, their biomechanical properties were akin to those of the native choroid according to the comparative measurements of elasticity, strain and ultimate tensile strength. Finally, RPE, endothelial cells and choroidal melanocytes were seeded onto the TE choroidal stromas. The cells repopulated the stroma and adopted a morphology and a histological appearance similar to in vivo. Our choroidal substitutes thus recaptured the structural properties of the microenvironment in which choroidal cells reside as well as several of its functional characteristics.
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Baut, François. "Caractérisation de milieux cellulaires par fluorescence." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1992. http://www.theses.fr/1992INPL117N.
Full textAbstract:
En milieu industriel, la rentabilité d'un procédé fermentaire rend indispensable la maitrise rigoureuse du procédé, laquelle passe par la connaissance de la souche en fermentation, d'ou l'intérêt de développer des capteurs d'information cellulaire et/ou fermentaire. Ainsi nous avons, d'une part utilisé ces techniques fluorimétriques pour suivre la fermentation acétonobutylique et nous avons pu caractériser la phase acide de cette fermentation par la fluorescence du nadh contenu dans les bactéries et la phase solvant par l'anisotropie de fluorescence du Dph incubé dans les membranes bactériennes et, d'autre part développé des montages expérimentaux originaux destinés à mesurer l'impact des forces de cisaillement auxquelles sont soumises les cellules en fermentation, par mesure de l'anisotropie de fluorescence de sondes susceptibles de rendre compte de leur environnement moléculaire
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Boucher, Éric. "Effets d'un dextran substitué sur la production de feuillets dermiques et du gel de fibrine sur la qualité des feuillets d'épidermes cultivés." Thesis, Université Laval, 2005. http://www.theses.ulaval.ca/2005/22531/22531.pdf.
Full textAbstract:
L’utilisation de la dispase pour détacher les feuillets épidermiques est une étape
pouvant être améliorée pour faciliter leurs transferts sur les plaies des grands brûlés. La
culture sur colle de fibrine élimine cette étape. Les analyses histologiques et
immunohistochimiques n’ont révélé aucune différence importante entre ces deux types de
feuillets épidermiques. Le gel de fibrine est donc un substrat adéquat pour la production de
feuillets épidermiques greffables. Les équivalents cutanés complets complèteraient le
traitement des grands brûlés. Toutefois, la production de feuillets dermiques est limitée par
leur temps de production. Étant donné que le RGTA accélère la réparation de plusieurs
tissus in vivo, l’effet du RGTA sur la production de feuillets dermiques fut testé. Des
examens physiques et histologiques ont montré que le RGTA26 rendait les feuillets
fragiles. Les ELISAs et les zymogrammes ont montré une modulation de la production
collagénique et des MMPs. L’utilisation du RGTA pour produire les feuillets dermiques
n’apparaît pas justifié.
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Fossoyeux-Comte, Emmanuelle. "Culture de preadipocytes : méthodologie et intérêt." Bordeaux 2, 1988. http://www.theses.fr/1988BOR2P112.
Full text
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Mateos, Diaz Juan Carlos. "Nouveaux outils pour la biocatalyse : criblage, purification et caractérisation de lipases issues de champignons thermophiles." Aix-Marseille 2, 2005. http://theses.univ-amu.fr.lama.univ-amu.fr/NNT.pdf.
Full text
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Hu, Jie. "Culture cellulaire sur des motifs micro et nanoscopiques préparés les méthodes lithographiques et non lithographiques." Paris 6, 2011. http://www.theses.fr/2011PA066315.
Full textAbstract:
Comprendre la culture cellulaire sur des substrats avec des motifs topographiques est importante pour la biologie fondamentale et l’ingénierie tissulaire ainsi que la conception et la réalisation des dispositifs biomédicaux avancés. Ce travail de thèse a été développé basé sur l'observation systématique de culture cellulaire sur une grande variété de motifs micro- et nanoscopiques préparés par les techniques tant lithographiques que non-lithographiques, en incluant la photolithographie UV par contact, la lithographie molle par nano-impression, le moulage à chaud, oxydationanodique d’aluminium et électrodéposition sélective avec moule. Nos résultats montrent que les cellules croisent de préférence dans les zones de nanostructures gravées à cause de l'amélioration de l’échange de médium de culture. Une augmentation de taux de prolifération a été aussi observée avec la diminution de taille de pores lorsque les cellules sont cultivées sur une membrane poreuse fabriquée par l'oxydation anodique d’aluminium. Les cellules cultivées sur les matrices de micro-piliers ont montré des dépendances claires à la largeur et hauteur de piliers, ainsi que la périodicité de la matrice. En outre, une distribution anisotropique de forces d'adhésion a été observée lorsque les cellules sont cultivées sur des matrices de piliers obliques. Enfin, les cellules peuvent être cultivées sur nano-piliers ou tubes métallique à haute densité, qui pourrait être utile pour la caractérisation électrique et électrochimique de cellules àhaute sensibilité
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Bouhout, Sara. "Reconstruction d'un modèle vésical par génie tissulaire et caractérisation." Doctoral thesis, Université Laval, 2015. http://hdl.handle.net/20.500.11794/28390.
Full textAbstract:
Le système urinaire a pour objectif l’élimination des produits du catabolisme sous forme d’urine. Cette fonction permet au sang d’être épuré en permanence et de maintenir ainsi l’équilibre de la composition sanguine (homéostasie). Plus précisément, la vessie est un réservoir extensible et étanche, responsable de l’emmagasinage de l’urine à basse pression, avant qu’elle soit évacuée hors de l’organisme. Diverses pathologies peuvent compromettre ces propriétés et endommager gravement le haut appareil urinaire. La confection d’une néovessie est alors essentielle pour assurer une collecte à basse pression de l’urine. La reconstruction vésicale par les techniques de chirurgie est associée à des complications cliniques significatives, causées principalement par l’absence de protection contre l’urine, normalement assurée par un épithélium hautement spécialisé : l’urothélium. Contrairement aux débuts de l’ingénierie tissulaire, pendant lesquels l’organisation cellulaire et moléculaire étaient relativement négligées, celles-ci sont aujourd’hui fortement prises en compte. C’est pourquoi cette technique fait appel à diverses matrices et aux cellules de l’hôte pour reproduire un substitut aussi conforme que possible au tissu natif. Toutefois, à ce jour, aucun modèle de substitution n’a été en mesure de pallier aux limites précédemment documentées. La complexité du remplacement vésical motive donc notre équipe à rechercher un substitut alternatif plus adapté cliniquement. L’objectif de ce projet de recherche était la mise au point de nouvelles méthodes pour parvenir à l’élaboration d’un substitut vésical comparable à la muqueuse d’une vessie native, puis la caractérisation de notre modèle aussi bien au plan structural que fonctionnel. Á partir de tissu porcin, plusieurs types cellulaires composant la paroi vésicale sont extraits simultanément puis caractérisés in vitro. Les cellules mésenchymateuses et urothéliales évoluent alors dans une culture tridimensionnelle pour former par génie tissulaire un tissu manipulable. La caractérisation de notre modèle vésical légitimise cette méthode qui semble très prometteuse pour répondre aux besoins dans le domaineThe purpose of the urinary tract is to ensure the evacuation of catabolic products in urine form. This function permits to preserve the equilibrium and consistency of the blood components (homeostasis). More precisely, the bladder is a watertight and compliant reservoir in charge of urine storage at low pressure, before its evacuation out of the organism. The bladder is subject to various pathologies, which could compromise its specific properties and damage the upper urinary tract. Therefore, the elaboration of a new reservoir is essential to collect the urine at low pressure. Surgical reconstruction is associated to significant complications, principally due to the lack of protection against urine, physiologically ensured by the highly specialized uro-eptithelium. Contrarily to the beginning of tissue engineering, cellular and molecular organizations are strongly considered nowadays. It is the reason why this discipline needs different matrices and host cells to reproduce a substitute conform to the original organ. But to date, no bioengineered models were able to completely overcome the limitations previously reported. The complexity of the vesical replacement remained a major challenge that led our team to research a more efficient bladder substitute. This project describes the approaches elaborated to achieve a vesical substitute comparable to the bladder mucosa. In addition, the structural and functional properties of our in vitro reconstructed models will be characterized with the use of different techniques. Based on our previous studies, several cellular types were isolated from the bladder wall, and then characterized in vitro. Using specific techniques of tissue-engineering, bladder mesenchymal and urothelial cells evolve in a three-dimensional culture to produce a tissue easy to handle. The maturation degree of our reconstructed models reached satisfactory characteristics to meet the need in the bladder regenerative field, and could led to better post-surgical results.
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Steward, Nicolas. "Physiologie, cinétique et modélisation de cultures de cellules végétales en suspension : comparaison de cultures discontinues et continues : influences de l'environnement sur l'activité cellulaire." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1998. http://www.theses.fr/1998INPL026N.
Full textAbstract:
La présente thèse a pour objectif d'améliorer les connaissances sur la production de biomasse par la culture de cellules végétales en suspension, en prenant une souche modèle de luzerne (Medicago sativa). En premier lieu sont comparés des modes de culture discontinus et continus par leurs productivités en biomasse brute et leurs coûts industriels. Une seconde approche évalue l'impact de différents milieux de culture sur les paramètres cinétiques comme la croissance, le décès et la consommation des substrats. Pour cela est effectué un suivi des milieux intra- et extra-cellulaires, ainsi que la viabilité de la biomasse. Ensuite, une nouvelle méthode basée sur la teneur en estérases de la biomasse est exposée pour déterminer sa viabilité avec d'avantage de rapidité et de précision. La mesure de cette activité enzymatique libérée dans le milieu de culture permet un suivi précis des cinétiques de croissance, de décès et de lyse cellulaire. Les informations recueillies sur le comportement cinétique de la souche sont structurées sous la forme de deux modélisations mathématiques. La première décrit les évolutions extracellulaires, la viabilité de la biomasse et les phénomènes de lyse. La seconde améliore les prédictions du modèle précédent par l'adjonction des évolutions de la composition ionique intracellulaire. Celle-ci résulte d'une entrée des nutriments par diffusion, du catabolisme et de phénomènes d'équilibration avec le milieu de culture quand les cellules décèdent.
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Zaïbi, Mohamed Sghaïer. "Régulation de la sécrétion de protéines dans des cultures de cellules hépatiques de rat : effets de l'insuline et de la metformine sur celle de l'albumine, et de l'insuline et la dexaméthasone sur celle d'une protéine recombinante, l'hGH." Dijon, 1993. http://www.theses.fr/1993DIJOS070.
Full textAbstract:
L'insuline stimule la sécrétion de l'albumine dans les cultures épithéliales de foie de rat nouveau-nés dans des milieux sans sérum (sfm) ou de protéines vectrices. L'association de la metformine (n,n-dimethylbiguanide), n'entraine aucun effet de potentialisation de l'action hormonale sur cette sécrétion. Dans les cultures primaires d'hépatocytes de rat adulte, l'administration de la metformine améliore le taux d'induction de la sécrétion d'albumine par l'insuline d'environ 30%. Sans insuline la metformine n'a aucun effet. L'administration de la metformine pendant 15 j chez le rat (50 mg/kg/j) améliore la viabilité et le nombre d'hépatocytes par foie perfuse et augmente le taux de sécrétion basale de l'albumine et l'induction par l'insuline. Que ce soit in vitro ou in vivo, l'effet de la metformine est coordonne a l'insuline et l'igf-1 mais non dans le cas de la l-thyroxine. La lignée de fibroblastes fzt résulte de la transfection de cellules obtenue par perfusion du foie du rat et maintenues en une monocouche soumise a une agitation réciproque du milieu contenant des liposomes encapsulant les plasmides pEJ et p17hGHneo. Transformée par le ras (pEJ), la lignée prolifère et produit de l'hGH dans le sfm. Cultivées sur microsupports, les cellules secrètent 11 g d'hGH par 10#6 cellules/24 h, après un choc thermique de 3 h a 43c du fait de l'hybridation du gène hGH au promoteur de choc thermique hsp70 (environ 3,7% en poids de protéines cellulaires). La sécrétion d'hGH est négativement modulée par l'insuline et positivement par la dexamethasone
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Gusdinar, Tutus. "Mise au point et validation pharmacologique d'une culture primaire de cellules de la muqueuse gastrique." Montpellier 1, 1990. http://www.theses.fr/1990MON13510.
Full text
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Waffo, Teguo Pierre. "Production de polyphénols du vin par culture de cellules de vitis vinifera : étude structurale et activités biologiques in vitro." Bordeaux 2, 1998. http://www.theses.fr/1998BOR2B005.
Full text
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Vallaeys, Tatiana. "Isolement d'une communauté microbienne dégradant l'acide 2,4-dichlorophénoxyacétique à partir d'un sol de Dijon : caractérisations cinétique et génétique des souches impliquées." Lille 1, 1992. http://www.theses.fr/1992LIL10080.
Full textAbstract:
Une communauté microbienne dégradant l'acide 2,4-dichlorophénoxyacétique a été isolée du sol de Dijon dans un chémostat alimenté par un milieu comprenant du 2,4-D comme seule source de carbone. La dégradation du 2,4-D dans le chémostat était essentiellement due au métabolisme de la molécule par la souche d'Alcaligenes paradoxus TV1. L'utilisation de 2,4-D marqué au carbone 14 a permis de montrer que la présence des trois autres souches de la communauté permettait d'accroître la vitesse de dégradation du 2,4-D par A. Paradoxus. L'apport d'une autre source carbonée à une culture pure d'A. Paradoxus avait le même effet, ce qui suggère que des relations trophiques existent entre les différentes souches. Un plasmide pTV1 d'environ 200 kb a été mis en évidence chez A. Paradoxus TV1. Des fragments de ce plasmide présentaient des homologies avec les gènes de dégradation du 2,4-D portés par le plasmide d'A. Eutrophus JMP134. Le fragment EcoRI «H» de 11,5 kb de pTV1 responsable de l'homologie entre ces deux plasmides a été cloné dans le vecteur pHG327 pour former le plasmide pTV2. La souche JM107 d'E. Coli transformée par ce plasmide n'a présenté aucune activité de dégradation vis-à-vis du 2,4-D. Ce fragment a alors été introduit dans le cosmide à large spectre d'hôte pLAFR3 pour former le plasmide pTV3. Une conjugaison réalisée entre la souche E. Coli JM107 transformée par pTV3 et la souche guérie JMP222 d'A. Eutrophus dépourvue d'activité dégradante a permis de sélectionner une souche d'A. Eutrophus porteuse du plasmide pTV3 pour laquelle la capacité à dégrader le 2,4-D avait été restaurée. Le fragment cloné à partir de pTV1 a alors été utilisé comme sonde pour rechercher l'existence d'homologie avec des souches dégradant le 2,4-D d'origines éloignées (Grande-Bretagne, France, Indonésie, Australie). Une homologie a été mise en évidence entre l'ensemble de ces souches
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Oturan, Nihal. "Interactions de cellules Rinm5f avec des polymères biofonctionnels dérivés du sephadex." Paris 13, 1990. http://www.theses.fr/1990PA132021.
Full textAbstract:
L'étude de la culture des cellules Rinm5f sur des dérivés du sephadex a été réalisée de trois points de vue essentiels: 1) la croissance; 2) la morphologie; 3) la fonctionnalité (l'insulino-sécrétion). Nous avons mis en évidence une relation entre la stimulation de la sécrétion d'insuline et la composition chimique du polymère sur lequel la culture des cellules rinm5f a été effectuée. La composition chimique du polymère a aussi une grande influence sur l'attachement et l'etalement des cellules
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Jean, Jessica. "Applications dermopharmaceutiques : développement d'un modèle de substituts cutanés psoriasiques par génie tissulaire." Doctoral thesis, Université Laval, 2010. http://hdl.handle.net/20.500.11794/22724.
Full textAbstract:
Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2010-2011La méthode d'auto-assemblage permet la production de substituts cutanés sans matériel exogène. L'objectif principal de notre travail a été de modifier cette méthode originale afin de produire un nouveau modèle de substituts cutanés pathologiques fabriqués à partir de cellules psoriasiques. Dans un premier temps, des substituts sains ont été cultivés en présence et en absence de sérum de veau foetal dans le but d'optimiser les conditions de culture. Puis, des analyses histologiques, immunohistochimiques, de perméabilité et des propriétés physico-chimiques ont été réalisées. Les résultats obtenus ont permis de conclure que le retrait du sérum à partir de la culture à l'interface air-liquide ne cause aucun problème majeur au niveau de la différenciation épidermique, de la jonction dermo-épidermique, du derme et de la perméabilité des substituts. De plus, des analyses par spectroscopic infrarouge à transformée de Fourier ont permis d'observer que le retrait du sérum améliore même l'organisation lipidique pour trois des cinq populations cellulaires testées. Parallèlement à cette étude, des substituts psoriasiques ont été produits à partir de cellules psoriasiques dans le but de vérifier si ces derniers allaient permettre la conservation de ce phénotype en culture. Des analyses histologiques et immunohistochimiques ont été effectuées et ont permis d'observer que le phénotype psoriasique (hyperprolifération et différenciation anormale des kératinocytes) est en partie conservé dans les substituts pathologiques. De plus, lors d'un traitement à l'acide rétinoïque, ceux-ci réagissent de façon similaire à ce qui est observé dans les peaux psoriasiques in vivo. Finalement, des substituts produits à partir de cellules non lésionnelles ont été reconstruits pour vérifier s'il existait une différence entre les cellules lésionnelles et non lésionnelles d'un même patient. Les résultats ont permis d'observer que les cellules non lésionnelles ne sont pas totalement «normales» et qu'elles conservent en partie les caractéristiques du psoriasis. En conclusion, ce nouveau modèle de substituts cutanés pathologiques pourrait devenir un puissant outil dermopharmaceutique permettant de tester de nouveaux traitements pour vaincre le psoriasis.
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Fabien, Nicole. "Cellules réticulo-épithéliales thymiques en culture : ultrastructure, marqueurs, hormones thymiques." Lyon 1, 1989. http://www.theses.fr/1989LYO1T023.
Full text
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Gauthier, Lydia. "Effets du sérum lors de la culture de substituts cutanés sains et psoriasiques." Thesis, Université Laval, 2010. http://www.theses.ulaval.ca/2010/27350/27350.pdf.
Full text
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Millecamps, Jean-Luc. "Sélection de chicorées "cichorium intybus l. Var Witloof" résistantes aux sulfonylurées par cultures cellulaires." Lille 1, 1989. http://www.theses.fr/1989LIL10030.
Full textAbstract:
A partir de diverses suspensions cellulaires de Cichorium intybus l. Var. Witllof n'ayant pas subi de traitement mutagène, nous avons isolé, en utilisant la variabilité induite par les cultures in vitro, plusieurs souches de cellules résistantes au chlorsulfuron (matière active d'un herbicide de la famille des sulfonylurees). (. . . )
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Postec, Anne. "Diversité de populations microbiennes thermophiles d'une cheminée hydrothermale océanique : cultures d'enrichissement en bioréacteur et isolement d'espèces nouvelles." Aix-Marseille 1, 2005. http://www.theses.fr/2005AIX11049.
Full textAbstract:
Dans le cadre de l'exploration de la diversité microbienne des sources hydrothermales océaniques profondes, les techniques moléculaires basées sur l'analyse du gène codant pour l'ARN ribosomique 16S ont permis la mise en évidence d'une grande diversité archéenne et bactérienne. Cependant, la diversité des micro-organismes hydrothermaux cultivés à ce jour reste bien inférieure à celle décrite par l'approche moléculaire. Des méthodes innovantes doivent alors être mises en oeuvre pour cultiver de nouveaux micro-organismes, et ainsi déterminer leurs caractéristiques métaboliques et leur rôle potentiel dans l'écosystème. Tel était l'objectif de ce travail : un bioréacteur gas-lift a été utilisé pour réaliser des cultures d'enrichissement en continu, pendant 50 jours, dans des conditions de thermophilie (60°C) et d'hyperthermophilie (90°). Un échantillon de cheminée (site Rainbow, ride medio-atlantique) a servi d'inoculum et a fait l'objet d'une analyse directe de la diversité moléculaire. La diversité des communautés microbiennes enrichies en bioréacteur a été analysée par DGGE, clonage, séquençage et hybridation. La diversité des micro-organismes cultivés en continu en bioréacteur s'est avérée plus grande que celle obtenue par culture classique en flacon (batch). Au sein du bioréacteur, une dynamique de la structure de la population a pu être mise en évidence. Des micro-organismes appartenant a priori à des espèces thermophiles modérées ont été détectés à 90 °C, et des autotrophes ont été obtenus en co-culture avec des hétérotrophes à 60°C. Des échanges de métabolites peuvent expliquer ce dernier résultat. Plusieurs espèces nouvelles, détectées au préalable de façon moléculaire, ont pu être isolées à partir des cultures d'enrichissement en bioréacteur. Une nouvelle espèce de l'ordre des Thermotogales, Marinitoga hydrogenitolerans, a notamment été décrite
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Hirel, Béatrice. "Kératinocytes humains adultes en culture : expression et modulation des marqueurs de différenciation et des enzymes de biotransformation des xénobiotiques." Rennes 1, 1994. http://www.theses.fr/1994REN1B026.
Full text
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Weber, Jean. "Etude des interactions symbiotiques entre Acacia mangium et ses partenaires fixateurs d'azote et mycorhiziens en culture aéroponique et autres systèmes." Nancy 1, 2004. http://www.theses.fr/2004NAN10185.
Full textAbstract:
L'objectif était l'obtention de plants d'Acacia mangium nodulés et mycorhizés en culture aéroponique. Le collage d'inoculum endomycorhizien sur les racines permit d'obtenir des plants fortement mycorhizés. Les taux de nodulation, d'endomycorhization et de P foliaire ont été optimisés par un contrôle des apports en N et P. Contrairement à la culture en sol, l'endomycorhization ne stimula pas la nodulation en culture aéroponique. Les taux de mycorhization furent réduits lors de la co-inoculation avec Bradyrhizobium. Le gain de croissance des plants endomycorhizés se révéla ne pas être uniquement lié à une meilleure nutrition en P. Thelephora ramarioides a été isolé et décrit comme un associé mycorhizien d'A. Mangium. Cette association augmenta les taux d'N et de P racinaire en pots. T. Ramarioides ne forma pas de mycorhizes en culture aéroponique. En pots, son développement fut inhibé en présence de G. Intraradices. Des essais de transfert au champ confirmèrent la possibilité d'utiliser la culture en aéroponie comme moyen de productionThe objective was to obtain Acacia mangium saplings associated with mycorrhizal and nitrogen-fixing partners in aeroponic culture. A new method for sticking AM inoculum on the root yielded high mycorrhization rates. Controlled N and P nutrition achieved optimal rates of nodulation, AM inoculation and P content in plants in the aeroponics. Contrary to soil culture, mycorrhization did not stimulate nodulation in the aeroponics. Previous nodulation limited endomycorrhizal development. Growth benefits of endomycorhization involved mechanisms that were not only linked to P nutrition. Thelephora ramarioides, a fungus associated to A. Mangium was isolated and described as ectomycorrhizal. T. Ramarioides improved P and N uptake within the root system in pot culture. T. Ramarioides did not associate with A. Mangium in the aeroponics and was out-competed by G. Intraradices in pot culture. Plantation trials of bare-root saplings confirmed the feasibility of using aeroponically grown saplings for field plantations
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Ait-Abdelkader, Nadra. "Caractérisation des enzymes saccharolytiques de Zymomonas mobilis et de mutants déficients dans le métabolisme du glucose et du fructose." Aix-Marseille 1, 1993. http://www.theses.fr/1993AIX11048.
Full textAbstract:
L'etude physiologique de la bacterie zymomonas mobilis cultivee en presence de glucose, de fructose ou de saccharose a permis de mettre en evidence trois enzymes saccharolytiques. Ces enzymes sont visualisees apres electrophorese des proteines sur gel de polyacrylamide dans des conditions non denaturantes. Deux de ces enzymes sont extracellulaires (les saccharases b et c), la troisieme est intracellulaire (saccharase a). De plus, la saccharase b presente une activite levane saccharase. Le role de ces trois enzymes dans la croissance de z. Mobilis a pu etre elucide grace a l'isolement d'un mutant incapable de pousser sur un milieu ne contenant que du saccharose comme seule source de carbone. Cette deficience est liee a la perte des activites des saccharases b et c, la saccharase a etant par contre presente chez le mutant. Ces resultats montrent que les saccharases b et c ou l'une d'entre elles sont necessaires a la croissance sur un milieu contenant du saccharose. La deuxieme partie de la these a consiste a mettre au point une methode d'enrichissement dans le but d'obtenir des mutants deficients dans l'utilisation du glucose et du fructose
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Eustache, Isabelle. "Le développement morphologique et fonctionnel des motoneurones craniens d'embryons de rat en culture organotypique avec co-culture musculaire : interactions morphologiques et fonctionnelles." Aix-Marseille 3, 1995. http://www.theses.fr/1995AIX30084.
Full textAbstract:
Dans des cultures organotypiques de tranches de tronc cerebral d'embryon de rat co-cultivees avec un fragment musculaire, les motoneurones survivent, se differencient et deviennent fonctionnels en controlant la contraction de fibres musculaires neoformees. Les motoneurones sont inseres dans un reseau synaptique et developpent des proprietes intrinseques specifiques. La presence d'influences trophiques reciproques, exercees par les motoneurones sur la differentiation des fibres musculaires, et par le tissu musculaire sur la differentiation morphologique des motoneurones est demontree. Le role des afferences synaptiques et de la cible musculaire dans la mise en place de la morphologie et de la fonction du motoneurone est discute
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Mignot, Gérard. "Culture de la lignée cellulaire Vero dans des milieux synthétiques et chimiquement définis : application à la culture sur microsupports en biogénérateurs." Dijon, 1988. http://www.theses.fr/1988DIJOS035.
Full text
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Chateau, Yannick. "Co-culture compartimentée de cellules épidermiques et cellules nerveuses : modèle d'étude des interactions neuro-cutanées." Brest, 2005. http://www.theses.fr/2005BRES3108.
Full textAbstract:
Le traitement de l’information sensorielle suite à un stimulus externe a comme point de départ l’activité d’une population variée de récepteurs cutanés et sous-cutanés. Les corps cellulaires de ces récepteurs se situent dans les ganglions des racines dorsales (GRD). Ils sont reliés à la moelle épinière (ME) par des neurites. Le challenge pour réaliser un modèle d’étude in vitro des interactions neuro-cutanées réside dans la reproduction de la suite physiologique (peau, neurones des GRD, neurones sensitifs de la ME) et dans la formation de connexions entre cellules épidermiques et neurites des neurones pseudo unipolaires en L. Ce modèle doit intégrer dans un même espace l’ensemble de ces constituants et permettre la mise en place de connexions entre cellules nerveuses et cellules épidermiques ce qui n’a pas encore été réalisé avec les “peaux reconstruites”. Nous avons développé un modèle, intégrant cellules nerveuses (neurones en T, cellules de la ME et cellules gliales) et cellules épidermique (kératinocytes, mélanocytes et cellules de Merkel CM). Les résultats obtenus sont une croissance spécifiquement orientée des neurites, des connexions, des terminaisons nerveuses avec les kératinocytes d’une part et les CM d’autre part. Cette co-culture permet la survie des CM et l’enregistrement d’une activité des neurones en T. L’originalité de ce modèle est donc de proposer in vitro une co-culture de cellules nerveuses et de cellules épidermiques permettant leurs connexions. Ces résultats ouvrent de larges perspectives qui proposent, pour la recherche fondamentale comme pour la recherche appliquée en dermatologie, une alternative à l’expérimentation animaleThe skin through its innervation is the support of the fifth sense : the touch. Exogenous stimuli are recognized at the nerve endings which represent avaried population of cutaneous receptors. Cellular bodies of those nerve endings are located in dorsal root ganglion (DRG) and connected at spinal cord by neurites The principal challenge to carry out a model for in vitro studies of the neuro-cutaneous interactions lies in the reproduction orme physiological continuation previously described (skin, neurons 0f the DRG, sensitive neurons of the spinal cord) and in the reconstruction of connections between epidermal cells and neurites of the pseudo-unipolar sensory neurons. This model must integrate in the same space all these components and allow the instatlation of connections between nervous cells and epidermal cells. This feature was not realised before with other “skin equivalent”. We have performed a model, integrating nervous cells (pseudo-unipolar sensory neurons, cells of the spinal cord and glial cells) and epidermal cells (keratinocytes, melanocytes and Merkel cells). We obtained a specifically directed growth of neurites, connections, synapse-like formation with both keratinocytes and Merkel cells. This co-culture allowed the survival of Merkel cells and the recording of an activity of the pseudo-unipolar sensory neurons. The originality of this model is thus to propose an in vitro co-culture of nervous oeIls md epidermal cells allowing their connections. These results open large perspectives from fundamental research to applied research in dermatology, as an alternative to the animal experimentation
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Ouali, Tarak. "Culture d'Escherichia coli B et de Bacillus subtils en forte concentration cellulaire." Compiègne, 1986. http://www.theses.fr/1986COMPI238.
Full textAbstract:
Dans la littérature, les stratégies essentielles suivies pour l’obtention d’une forte densité cellulaire sont les cultures avec addition adéquate de nutriments, y compris l’oxygène, les cultures avec ajout de substrat en fonction d’une valeur constante d’oxygène dissous, l’utilisation de l’oxygène pur avec contrôle de l’oxygène dissous, la dialyse et le recyclage cellulaire. Cependant, les contraintes observées sont : 1) le maintien d’un oxygène dissous (O. D) constant et la toxicité liée à l’utilisation de l’oxygène pur, 2) l’accumulation de métabolites inhibiteurs de la croissance, 3) l’inhibition due à des fortes pressions en CO2. Notre démarche est basée sur la réduction de la production de métabolites (acide acétique), vu qu’ils sont formés même en présence d’un excès d’oxygène, par le contrôle du taux de croissance spécifique « relatif » d’Escherichia coli par la réduction de la concentration de l’extrait de levure et le contrôle d’ajout du glucose à la fin de la culture. La production de métabolites est alors maintenue à un niveau faible et la croissance est prolongée jusqu'à 125 g/l poids sec. Cette biomasse correspond à 51-53 % de la biomasse théorique maximale. Cependant ceci ne peut être généralisé à toutes les espèces bactériennes. En effet, Bacillus subtilis croît en produisant une quantité très importante de métabolites, le rapport acétoïne /biomasse est constant ; par conséquent, la production de métabolites ne peut être contrôlée à des valeurs faibles à fortes biomasses. La biomasse maximale obtenue est de l’ordre de 60 g/l poids sec, des concentrations importantes d’acétoïne et de CO2, à la fin de la culture, sont observées.
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Fritayre, Pascale. "Culture de cellules atriales de coquille Saint-Jacques, Pecten maximus : valeur et limites du modèle. Applications en toxicologie." Brest, 2004. http://www.theses.fr/2004BRES2015.
Full textAbstract:
Des cultures primaires de cellules atriales de coquilles St Jacques Pecten Maximus ont été établies au cours de ce travail. Ces cultures peuvent être obtenues à partir de cellules inoculées dès l'isolement ou après cryopréservation. Une monocouche cellulaire est observée après une semaine de culture. L'utilisation de facteurs matriciels d'origine marine permet de réduire ce temps en facilitant l'adhésion. Différentes méthodes analytiques appliquées aux cultures asynchrones ou à des cellules synchronisés en transition G1/S selon une méthodologie adaptée de la littérature, montrent qu'environ 15 % de cellules inoculées sont aptes à se diviser. La croissance peut être stimulée par addition de certains compléments au milieu sans toutefois permettre l'obtention d'un lignée. Parmi les cellules adhérentes, les cardiomyocytes, que nous avons caractérisés immunocytochimiquement et electrophysiologiquement (récepteurs de type B-adrénergique et cholinergiques de type muscarinique), sont spontanément contractiles in vitro dès huit jours et le restent durant un mois. Ces cellules s'avèrent intéressantes pour étudier la toxicité de xénobiotiques en utilisant en particulier le Patch-clamp comme méthode analytique. Un deuxième type de cellules adhérentes, qui présentent des analogies structurales avec les cellules des glandes péricardiques dont la littérature signale le rôle dans la détoxication, semble intervenir dans les processus de biotransformation de phase de type I et II. Une stimulation de certaines activités enzymatiques par des inducteurs de référence et par certains contaminants du milieu marin a en effet été notée. L'ensemble de ces résultats ouvre des perspectives d'utilisation du bioessai mis en place tant au plan fondamental qu'appliquéIn this study, atrial cells primary cuture of the scallop, Pecten maximus was established. A monolayer culture can already be observed one week following the initial plating of either fresh or cryopreserved cells. Cell attachment was improved and was obtained faster when the cells were plated on marine substrate. Combined analytical techniques, tested in asynchronous cells and synchronised cells in transition G1/S, showed that about 15 % of plated cells are able to proliferate. The growth can be stimulated by supplementation of the medium with various factors but no permanent cell line have been obtained. Among adherent cells, the cardiomyocytes, characterized by both immunocytochemical and electrophysiological features (beta-adrenergic and muscarinic receptors), were able to spontaneously contract in vitro by using especially patch-clamp technique. One another kind of adherent cells, having structural similitaries with pericardial gland cells described to be important in the dexintoxication function, seems to be involved in biotransformation activities of phase I and II. Indeed, we have actually been able to stimulate these enzymatic activities by reference inductors and by some marine contaminants. Taken together, our cellular model demonstrate its potential for fundamental and applied bioessay research studies
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Fregard, Florence. "Rôle des interactions hydrophobes et électrostatiques dans l'adhésion de bactéries méthanogènes aux matériaux de faible énergie de surface." Lille 1, 1991. http://www.theses.fr/1991LIL10047.
Full textAbstract:
L'adhésion bactérienne aux surfaces inertes représente le paramètre déterminant qui gouverne à la fois la vitesse de démarrage et les performances finales des digesteurs de méthanisation. Ce travail constitue une étude des mécanismes impliqués dans l'adhésion initiale de bactéries méthanogènes, ou autres anaérobies, aux matériaux plastiques. Dans cette optique, nous avons caractérisé les propriétés des surfaces bactériennes et polymériques en terme de charge, d'hydrophobicité et de composition chimique à l'aide de méthodologies originales. Nous avons montré que les bactéries méthanogènes filamenteuses, de nature hydrophile, adhéraient 3 a 4 fois moins à l'ensemble des supports que les autres bactéries anaérobies et, dans tous les cas, nous avons observé une adhésion maximale au pvc. Nos essais ont montre l'intervention de l'hydrophobicité et de la charge des surfaces dans la colonisation initiale. Cependant, nos travaux sur supports de faible énergie de surface répondent à la théorie D. L. V. O. Des interactions à longue distance, les bactéries absorbant réversiblement dans le minimum secondaire alors qu'elles adhèrent de façon plus homogène et plus ferme aux supports hydrophiles et aux surfaces traitées par des cations trivalents, à des distances de séparation inférieures. Nous avons par ailleurs observé l'importance de polymères de surface, tels que le lipopolysaccharide ou l'acide lipotéichoide qui interviennent indirectement dans l'adhesion par l'intermédiaire de leurs propriétés de surface. Enfin, nous avons montré qu'il existait une compétition pour l'attachement qui varie en fonction des populations en présence et que la séquence de présentation des bactéries au support intervenait souvent dans l'adhésion subséquente
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Carbonell, Delphine. "Étude de la détoxication des milieux de culture cellulaire : application à l'élimination de l'ammoniaque." Nancy 1, 1992. http://www.theses.fr/1992NAN10171.
Full textAbstract:
Actuellement, la production industrielle de molécules biologiques à haute valeur ajoutée est essentiellement assurée par des cellules animales cultivées in vitro, en mode batch ou fed batch. La productivité des cultures est cependant limitée par la mort rapide des cellules, généralement attribuée à l'épuisement de nutriments et/ou a l'accumulation de métabolites toxiques. L'ammoniaque représente un des principaux composes incrimines dans la toxicité des cultures. Cinq procédés de détoxication, destines à l'éliminer en continu et stérilement des milieux, sont expérimentés: deux procédés biologiques, reposant sur la mise en œuvre d'une réaction catalysée par une enzyme, la glutamate déshydrogénase ou la glutamine synthétase, trois procédés physico-chimiques, représentés par le stripping, l'utilisation de clinoptilolite et l'application de membranes hydrophobes microporeuses. L'examen des résultats obtenus a conduit au développement des deux systèmes les plus performants, bases l'un sur l'élimination des ions ammonium par échange d'ions sur clinoptilolite, l'autre sur l'extraction de l'ammoniac à travers des membranes hydrophobes microporeuses. Leurs paramètres de fonctionnement ont été déterminés de manière à pouvoir maintenir la concentration extracellulaire de l'ammoniaque inferieure à 1 mm. Le couplage de ces deux systèmes de détoxication à des cultures d'hybridomes a permis le maintien de la concentration extracellulaire de l'ammoniaque à des faibles valeurs
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Culard, Jean-François. "Etude des annexines de l'épiderme humain normal et reconstruit in vitro." Montpellier 1, 1992. http://www.theses.fr/1992MON11160.
Full text
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Wang, Li. "Régulation de microenvironnement cellulaire par dispositifs microfluidiques et microstructuration de substrats." Paris 6, 2011. http://www.theses.fr/2011PA066189.
Full textAbstract:
En utilisant les techniques de microfabrication et des dispositifs microfluidiques, nous avons étudié les problèmes liés à la régulation microenvironnementale des cellules en culture. D’une part, plusieurs nouveaux types de dispositifs ont été proposés afin d’obtenir une perfusion à zéro- ou à multi-contrainte de cisaillement microfluidique. Ces dispositifs ont été utilisés soit pour une démonstration de culture à cellules uniques soit pour une analyse de morphologie, expression de gènes, ou toxicité des cellules endothéliales sous multi-contrainte de cisaillement. D’une autre part, les techniques de photolithographie conventionnelle et de micro-contact printing ont été utilisées pour la création de micro-clusters de cardiomyocytes sur une surface ou sur un réseau de multi-électrodes, permettant des mesures optiques ou électriques des excitations ou battements des réseaux de cellules cardiaques. En plus, l'intégration d’une matrice cellulaire à cellule unique dans un dispositif microfluidique a été démontrée pour créer des conditions spécifiques et favorables à la formation de réseaux cellulaires. Finalement, les problèmes de dynamique de population, d’activité de biosynthèse, et de variabilité de phénotype des levures ont été traités en utilisant les techniques de saisir des cellules uniques et de criblage à haut débit
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Nicault, Matthieu. "Prospection et induction de molécules antimicrobiennes par co-cultures entre bactéries (Streptomyces) et champignons (Basidiomycètes)." Electronic Thesis or Diss., Université de Lorraine, 2020. http://www.theses.fr/2020LORR0194.
Full textAbstract:
L’émergence de résistances multiples aux antibiotiques chez les micro-organismes pathogènes constitue une menace importante en santé humaine. L’identification de principes actifs nouveaux avec des cibles cellulaires et des mécanismes originaux est un besoin urgent et en ce sens les micro-organismes du sol (bactéries et champignons) riches en molécules biologiques constituent un réservoir d’intérêt. Au cours de cette thèse, nous nous sommes intéressés à des souches isolées conjointement (communauté) de Streptomyces, des bactéries filamenteuses du sol produisant plus de la moitié des antibiotiques utilisés en médecine. Une analyse conjointe du métabolome et du génome de 8 souches (dont 5 ont été séquencés au cours de cette étude) a montré une diversité importante des voies de biosynthèse de métabolites spécialisés au sein de cette communauté. Afin de stimuler l’expression de nouvelles molécules cryptiques en conditions de laboratoire, la co-culture de ces Streptomyces et de champignons a été réalisée. Un criblage de 64 co-cultures entre 8 souches de Streptomyces et 8 espèces de champignons Basidiomycètes a été réalisé en suivant des activités antimicrobiennes, anti-inflammatoires et anti-oxydantes induites (c’est-à-dire produites en co-culture mais pas dans les cultures seules des bactéries et des champignons). Nos criblages ont révélé deux interactions prometteuses dont les produits ont été analysés par la combinaison d’une approche métabolomique couplant chromatographie gazeuse, spectrométrie de masse (GC-MS), chromatographie liquide et spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS). Un fractionnement guidé par l’activité antimicrobienne a permis d’identifier un ensemble de composés candidats en lien avec l’activité antimicrobienne. En révélant une grande variabilité des gènes de biosynthèse de molécules biologiques, nos résultats ont permis dans un premier temps de circonscrire la communauté comme un cadre d’échantillonnage approprié pour rechercher des molécules biologiques d’intérêt chez les Streptomyces. Ces gènes étant pour la plupart cryptiques en conditions de laboratoire, nous avons pu également souligner l’intérêt de la co-culture comme stimulus biotique permettant leur production, en faisant une approche prometteuse en biotechnologieThe emergence of multiple resistance to antibiotics in pathogenic microorganisms poses a significant threat to human health. The identification of new active ingredients with cellular targets and original mechanisms is an urgent need and in this sense soil microorganisms (bacteria and fungi) rich in biological molecules constitute a reservoir of interest. During this thesis, we were interested in jointly isolated strains (community) of Streptomyces, filamentous bacteria from the soil producing more than half of the antibiotics used in medicine. A joint analysis of the metabolome and the genome of 8 strains (5 of which were sequenced during this study) showed a significant diversity of the biosynthetic pathways of specialized metabolites within this community. In order to stimulate the expression of new cryptic molecules under laboratory conditions, the co-culture of these Streptomyces and fungi was performed. A screening of 64 co-cultures between 8 strains of Streptomyces and 8 species of Basidiomycetes fungi was performed by monitoring induced antimicrobial, anti-inflammatory and anti-oxidant activities (i.e. produced in co-culture but not in cultures only bacteria and fungi). Our screens revealed two promising interactions whose products were analyzed by the combination of a metabolomics approach coupling gas chromatography, mass spectrometry (GC-MS), liquid chromatography and tandem mass spectrometry (LC-MS / MS). Antimicrobial activity-guided fractionation has identified a set of candidate compounds related to antimicrobial activity. By revealing a large variability of genes for the biosynthesis of biological molecules, our results first allowed us to define the community as an appropriate sampling framework to search for biological molecules of interest in Streptomyces. As these genes are mostly cryptic under laboratory conditions, we were also able to underline the interest of co-culture as a biotic stimulus allowing their production, making it a promising approach in biotechnology
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Launay, Franck. "Nouvelles approches de la culture en milieux solide et liquide de mycélium d'un champignon supérieur : la morille." Compiègne, 1989. http://www.theses.fr/1989COMPD185.
Full textAbstract:
L'objectif premier de cette étude était la mise au point d'un mélange aromatique alimentaire constitué de mycélium de morille et de fibres de betteraves. La culture en milieu solide utilisée dans ce but a évolué en cours d'étude vers la mise en œuvre de techniques de culture en milieu liquide du fait des faibles potentialités aromatiques des produits développés jusqu'alors. Afin de déterminer les conditions optimales du développement mycélien (en milieu solide comme en milieu liquide), compte tenu des caractéristiques cinétiques des souches utilisées (faible taux de croissance), la technique des plans d'expériences a été mise en œuvre pour réduire le nombre de manipulations. Nos travaux ont débouché sur la mise au point d'une méthode d'estimation de la croissance mycélienne en milieu solide ainsi que sur la détermination des facteurs limitant ce type de fermentation. La définition d'une technique de conditionnement de la préculture pour le transfert de l'inoculum aboutit à la formation d'une biomasse mycélienne composée de billes de taille homogène lors du développement en milieu liquide. Combiné à l'utilisation d'une technique fermentaire adaptée (fed batch), le broyage contrôle de la préculture permet d'obtenir des concentrations élevées en biomasse de l'ordre de 16 a 17 g/l après 120 heures de culture et ce en fermenteur 20 litres. Nous avons pu établir que les caractéristiques aromatiques des pellets formés, dépendent principalement des constituants du milieu de culture et de la morphologie développée, sans pour autant pouvoir mettre en évidence les mécanismes régissant ces phénomènesMorel mushrooms strains of Morchella have been used to study in submerged and solid state cultures, the production of aromatic compounds. Preliminary results in solid state culture showed, under the studied fermentation conditions, that the desired aroma could not be produced. Therefore studies were focused on the submerged culture. An experimental design planning was employed to study in Erlenmeyer flasks the influence of pellet size and addition of additives on the production of biomass and product. Experiments were then performed in 2 l bioreactors to analyze the pellet development. Furthermore, these culture conditions were scaled up to 20 l fermenters. The results showed an important biomass development in a pellet form up to 17 g/l cell dry weight. The produced aroma intensity was found to be, in organoleptic tests, dependant on the used medium and the produced mycelium form. It seems that a better aroma production is obtained with reduced size pellet forms
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Merlet, Danielle. "Intérêt de la mise en culture de cellules épithéliales tubulaires de reins humains sains et tumoraux, en néphrotoxicité in vitro." Bordeaux 2, 1988. http://www.theses.fr/1988BOR2E001.
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Quesney, Sébastien. "Physiologie de la cellule Vero, cultivée en milieux avec et sans sérum, en biogénérateur." Lyon 1, 2002. http://www.theses.fr/2002LYO10027.
Full textAbstract:
Dans le but d'utiliser des milieux de culture sans matière première d'origine animale, lors de la production de vaccins, notre objectif a été d'méliorer nos connaissances sur le comportement physiologique de la cellule Vero, cultivée en milieu de croissance avec et sans sérum, sur microporteurs en biogénérateur. Nos observations montrent que la croissance plus faible des cellules Vero dans les milieux sans sérum n'est pas liée au cycle de division cellulaire mais aux phases d'adhésion et d'étalement et/ou à une mortalité cellulaire accrue. La mort cellulaire par nécrose semble liée à l'absence de facteurs de protection, alors que l'apoptose semble liée aux déplétions précoces en glutamine et serine en cours de culture. Nous avons déterminé les nutriments essentiels aux cellules Vero et montré l'influence du sérum et de l'oxygénation sur les cinétiques de consommation de nutriments (glucose et acides aminés) et de production de métabolites (lactate,NH4+ et acides aminés). Nous avons par la suite étudié la prolifération de la cellule Vero cultivée à l'échelle industrielle en milieu avec sérum afin d'évaluer l'impact du changement d'échelle de culture sur sa physiologie. Cette étude a été réalisée dans le but de mieux transposer la culture en milieux sans sérum à l'échelle industrielle. Nos résultats montrent que, pour un même milieu avec sérum, les cinétiques de croissance et le comportement métabolique des cellules sont différents de ceux obtenus au laboratoire. Ces différences ne semblent pas liées au changement d'échelle des cultures réalisées, mais plutôt à l'état physiologique des cellules lors de l'ensemencement. L'optimisation et la transposition des milieux sans sérum à l'échelle industrielle doivent tenir compte de cette différence de physiologie cellulaire.
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Gruffat, Dominique. "Etude de l'iodation de la thyroglobuline et de l'hormogenèse dans des cellules thyroi͏̈diennes de porc cultivées sur chambre à fond perméable : régulation par la TSH et autres effecteurs." Aix-Marseille 1, 1992. http://www.theses.fr/1992AIX11004.
Full textAbstract:
La synthese des hormones thyroidiennes a lieu au sein d'unites morphofonctionnelles: les follicules. Ceux-ci sont constitues de cellules polarisees dont le pole apical est oriente vers l'interieur de la cavite dans laquelle la thyroglobuline s'accumule, s'iode et devient le support de l'hormonogenese. L'etude de ces differentes etapes necessite un acces direct et independant au domaine apical des cellules. Dans ce but nous avons utilise des cellules thyroidiennes de porc cultivees en monocouche sur chambre a fond permeable. La composition du compartiment apical est differente de celle du milieu basal qui seul contient du serum de veau. Dans ce systeme la thyroglobuline est secretee majoritairement (90%) dans le milieu apical. En presence de tsh, les cellules captent l'iodure ajoute quotidiennement dans le milieu basal et le concentrent dans le compartiment apical. L'iodation de la thyroglobuline n'a lieu que dans le compartiment apical et n'excede pas 3,5 atomes d'iode/mole lorsque le milieu basal contient du rouge de phenol. Ce dernier traverse la monocouche et inhibe l'iodation proportionnellement a sa concentration apicale; possedant deux cycles phenoliques, c'est un inhibiteur competitif de la thyroperoxydase. En absence de rouge de phenol l'iodation atteint 6 a 8 atomes d'iode/mole. Dans ces conditions la thyroglobuline contient des iodotyrosines (monoiodotyrosine et diiodotyrosine), des hormones (triiodothyronine et thyroxine) et le couplage des iodotyrosines s'effectue avec la meme efficacite qu'in vivo. Des concentrations d'iodure superieures a 0,5 m inhibent les reactions d'iodation et de couplage sans influencer la concentration apicale d'iodure mais en diminuant la formation de diiodotyrosines et la synthese de thyroglobuline. Les dernieres etapes de l'hormonogenese (endocytose de la thyroglobuline iodee et secretion basale des hormones) restent a etudier ainsi que la regulation de l'expression de la thyroperoxydase et du systeme generateur d'h#2o#2 au niveau de la membrane apicale des cellules. Bien que les conditions de culture puissent etre encore ameliorees, le systeme de culture sur chambre a fond permeable ouvre des perspectives sur de nombreuses etudes interessant les parametres lies a la polarite cellulaire, ainsi que sur des etudes pharmacologiques et toxicologiques
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Duque, Fernandez Alexandra. "Validation d'un modèle de substituts cutanés pathologiques pour des études dermopharmacologiques." Thesis, Université Laval, 2008. http://www.theses.ulaval.ca/2008/25576/25576.pdf.
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Verrier, Bernard. "Étude de la transcription des gènes très précoces de l'herpès simplex de type I dans un système non permissif : les cellules de rat XC." Lyon 1, 1985. http://www.theses.fr/1985LYO10497.
Full textAbstract:
L'herpès simplex de type I (HSV-1) se réplique efficacement dans presque tout type de culture cellulaire. Cependant, HSV-1 ne se multiplie pas très bien dans certaines cellules de souris ou de rat in vitro et est incapable de se multiplier dans les cellules XC, cellules de rat, transformées par le virus du sarcome de Rous. Quand HSV-1 infecte et pénètre ces cellules non permissives, des polypeptides viraux sont observés et régulés en cascade comme dans des cellules permissives. Cependant, le cycle viral est bloqué. Pour analyser si l'absence ou la diminution de certaines protéines très précoces étaient repsonsables de ce blocage, l'expression des gènes très précoces dans les cellules XC a été comparée à celle observée dans des cellules permissives, Hep2 par les méthodes suivantes : (i) analyse des polypeptides viraux dans les cellules infectées (ii) hybridation des ARN poly-A nucléaires ou cytoplasmiques avec des fragments d'ADN viral clonés et marqués in vitro, sondes correspondantes aux gènes trè précoces. (iii) capacité des ARN poly-A cytoplasmiques à induire une synthèse de polypeptides viraux in vitro. Normalement, les gènes très précoces engendrent 5 polypeptides désignés ICP4 (175 K), ICP 0 (130 K), ICP 22 (68 K), ICP 27 (62K), ICP 47 (12 K), et des différences mineures sont observées avec 4 protéines entre les deux systèmes, mais ICP 22 (68 K) n'est pas détectable dans les cellules XC infectées. Son messager correspondant est présent dans le noyau et le cytoplasme mais n'est pas fonctionnel puisque le polypeptide correspondant n'est pas synthétisé dans un système de réticulocyte de lapin (1). Comme ce messager subit la même maturation (épissage) que le messager d'ICP 47 et puisque la protéine ICP 47 est synthétisée in vivo, il s'agit probablement d'une incapacité de traduction plutôt que d'un problème de maturation. Ces observations suggèrent l'existence de facteurs cellulaires contrôlant l'expression des gènes très précoces, ainsi qu'une implication possible de la proétine ICP 22, dans le spectre d'hôte du virus de l'herpès Simplex de type I
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Fizet-Arsène-Henry, Dominique. "La protéine P. 4, un nouvel immuno-suppresseur naturel : mise en évidence, isolement et caractérisation d'un inhibiteur de la réaction de cytotoxicité dans l'espèce humaine au cours de la grossesse." Bordeaux 1, 1985. http://www.theses.fr/1985BOR10557.
Full textAbstract:
La proteine p4 (plasma protein protecting pregnancy) presente dans le serum de la femme enceinte est un facteur capable d'inhiber une reaction de cytotoxicite cellulaire entre lymphocytes allogeniques sensibilises in vitro. Cette alphaglycoproteine a une masse moleculaire de 200 000 daltons. Elle semble differente d'autres substances immunosuppressives deja decrites par d'autres auteurs. Le serum de femmes ayant presente des avortements a repetition ne possede pas cet effet inhibiteur ; la proteine p4 est presente mais inactive. Les resultats obtenus chez des femmes sous contraceptifs oraux ou sous traitement progestatif, suggerent que l'activite de la proteine p4 apparait soumise a l'influence de la progesterone
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Kochanowski, Nadine. "Influence des précurseurs de la glycosylation sur la macrohétérogénéité de l'IFN-γ produit en bioréacteur par des cellules CHO." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 2005. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/INPL/2005_KOCHANOWSKI_N.pdf.
Full textAbstract:
L'objectif de ce travail était l'étude des facteurs intracellulaires responsables de la macrohétérogénéité de la glycosylation de l'interféron-gamma humain recombinant (IFN) produit en bioréacteur par des cultures discontinues et semi-continues de cellules CHO (Chinese Hamster Ovary). L'analyse des précurseurs oligosaccharidiques a révélé que la structure des glycannes associés aux dol-PP-oligosaccharides demeure constante tout au long du procédé. En revanche, l'hypothèse d'une limitation quantitative des structures glycanniques pouvait être envisagée. De plus, la diminution précoce des pools intracellulaires de nucléotides triphosphates et de la charge énergétique semblait être reliée à la diminution de la glycosylation. Cette hypothèse est renforcée par le fait que le profil de glycosylation de l'IFN est constant et la charge énergétique maintenue à une valeur élevée durant la phase de production de la glycoprotéine lorsque les cellules sont cultivées dans un milieu de culture richeThe aim of this work was the study of intracellular factors responsible for the macroheterogeneity of recombinant human IFN-gamma (IFN) glycosylation produced in bioreactor during batch and fed-batch cultures of Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. Analysis of oligosaccharide precursors revealed that the structure of the lipid-linked oligosaccharides was constant over the batch process. On the contrary, the hypothesis of a quantitative limitation of the glycan structures could not be excluded. Moreover, the decline in intracellular nucleotide triphosphates and adenylate energy charge could be linked to the decrease in IFN glycosylation. This is supported by an unchanged pattern of IFN glycosylation when the cells displayed a high adenylate energy charge in a rich culture medium