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Dissertations / Theses on the topic 'Perméabilité et fluidité membranaire'
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Vo-Van, Quoc-Bao. "Exploration fonctionnelle de la réponse au stress chez des micro-organismes d'intérêt technologique : dynamique de la réponse membranaire suite au stress éthanolique chez Saccharomyces cerevisiae." Thesis, Dijon, 2015. http://www.theses.fr/2015DIJOS057/document.
Full textAbstract:
L’étude de la réponse membranaire suite au stress éthanolique chez Saccharomyces cerevisiae vise à comprendre les mécanismes impliqués dans la survie des eucaryotes aux concentrations en éthanol élevées. La membrane cellulaire, par sa position entre l’environnement intra et extracellulaire, est la première cible des perturbations éthanoliques. Les expérimentations effectuées dans cette étude visent à caractériser le maintien de l’intégrité fonctionnelle en relation avec la composition en stérols membranaires chez la levure S. cerevisiae soumise à différents types de perturbations éthanoliques (augmentation de la concentrations en éthanol dans le milieu de croissance, chocs éthanoliques d’amplitude croissante et suivi au cours du temps ; choc à 20% pendant 15 minutes puis suivi au cours du temps après retour dans un milieu sans éthanol (« pulse » 20% d’éthanol)). Les résultats obtenus démontrent l’importance de l’ergostérol dans le maintien de l’intégrité membranaire et supportent également l’hypothèse du rôle « vecteur » de l’éthanol vis à vis d’une oxydation, dont l’efficacité serait dépendante de la nature des stérols présents au niveau membranaire. Les premiers résultats analysant la cinétique de transcription de gènes impliqués dans la réponse au stress oxydatif suggèrent une formation plus importante de formes réactives de l’oxygène (ROS), induite par le choc éthanol chez un mutant Δerg6, affecté dans la voie de biosynthèse de l’ergostérolThe study of membrane response induced by ethanol stress in Saccharomyces cerevisiae aims to understand mechanisms involved in the survival of eukaryotic cells submitted to high ethanol concentrations. The cell membrane by its position between the intra- and extracellular environment is the first target of ethanolic perturbations. Experiments performed in this study aimed to characterize the maintain of the functional integrity of the membrane in relation to the sterol composition in the yeast S. cerevisiae submitted to different types of ethanolic disturbances: increasing concentrations of ethanol in the growth medium; ethanolic shocks of increasing magnitude; shock 20% ethanol for 15 minutes and then return in a medium without ethanol ("pulse" 20% ethanol)). Our results demonstrate the importance of ergosterol in maintaining membrane integrity and also support the hypothesis of the vector role of ethanol in cell oxidation, whose effectiveness is dependent on the nature of sterols at the membrane level. In addition, our results analyzing the kinetics of transcription of genes involved in oxidative stress response suggest an increased formation of reactive oxygen species (ROS) induced by ethanol in the Δerg6 mutant, affected in the biosynthetic pathway of ergosterol
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Force, André. "Fluidité membranaire et activité énolase dans différentes populations de spermatozoïdes humains." Clermont-Ferrand 1, 2002. http://www.theses.fr/2002CLF1MM05.
Full text
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Winckler, Pascale. "Spectroscopie de corrélation de fluorescence : fluidité membranaire et détection de molécule unique en solution concentrée." Troyes, 2011. http://www.theses.fr/2011TROY0009.
Full textAbstract:
La Spectroscopie de Corrélation de Fluorescence (FCS) est une technique de molécules uniques particulièrement bien adaptée aux études en milieu biologique. Elle est ici mise en œuvre pour analyser localement la membrane plasmique de cellules vivantes. Dans un premier temps, la distribution de la microfluidité membranaire de cellules vivantes a été caractérisée grâce à des mesures de temps de diffusion par FCS. Nous avons ainsi pu établir la loi de distribution de la fluidité membranaire à l’échelle de la cellule unique pour différentes lignées cellulaires (LR73, MCF7, KB3. 1, MESSA et MDCKII). Une simulation Monte-Carlo montre qu’un modèle simple de diffusion à deux dimensions dans une matrice contenant des microdomaines visqueux peut rendre compte de l’allure asymétrique typique des distributions obtenues. Ce résultat a été utilisé pour évaluer les modifications membranaires liées à la surexpression de la P-glycoprotéine, protéine responsable d'un phénomène de résistance à la chimiothérapie. Nous avons également comparé la structuration membranaire de diverses lignées cancéreuses, chacune se déclinant en une version sensible et une version résistante à un médicament : la Doxorubicine. Dans un second temps, nous proposons une nouvelle méthode d’illumination locale basée sur un transfert d’énergie non radiatif. Cette méthode permet de réduire la profondeur de champ du microscope à l’échelle nanométrique. Nous en démontrons ici le potentiel pour l'utilisation de la FCS dans des solutions micromolaires ainsi que pour l'imagerie de l'adhésion cellulaireFluorescence correlation spectroscopy (FCS) is a single molecule technique very well suited for in vivo studies. We have used FCS to explore plasma membrane microfluidity of living cells. Measurements were conducted at the single cell level, which enabled us to get a detailed over-view of the typical plasma membrane microviscosity distribution of each cell line studied (LR73, MCF7, KB3. 1, MESSA and MDCKII). A Monte Carlo simulation based on a 2D diffusion model enables us to link the asymetric fluidity distribution profile with the plasma membrane micro-organization. This result was used to determine the membrane organisation related to the surexpression of the P-glycoprotein (Pgp), a protein implicated in multidrug resistance. We also compare the membrane structuration of various cancer cell lines, each comes in two versions, a sensitive one and a resistant one to a chemotherapeutic drug: the Doxorubicin. Secondly, we propose a new excitation scheme based on a nonradiative energy transfert. This approach allow us to reduce the illumination depth of the microscope at the nanometric scale. We demonstrate its potential through two applications: FCS in micromolar solutions and fluorescence imaging on cells adhesion areas
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Beck, Alain. "Synthèse et étude de sondes phospholipidiques fluorescentes destinées à des mesures de fluidité membranaire localisée." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1989. http://www.theses.fr/1989STR13074.
Full textAbstract:
La synthèse de trois sondes fluorescentes dont deux phospholipidiques portant comme fluorophore un motif diphenylhexatriène (DHP) est décrite. L'une s'apparente à une palmitoylphosphatidylethanolamine acylée en 2 et une seconde à une palmitoylphosphatidyllcholine acylée également en 2. Cette acylation à été mise au point en utilisant le sulfinyl-1,1 bis-imizadole comme agent activant. L'étude biophysique de la première sonde à été réalisée dans une seconde partie.
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Bornet, Charléric. "Perméabilité membranaire et mécanismes de résistance aux antibiotiques chez Enterobacter aerogenes." Aix-Marseille 2, 2004. http://www.theses.fr/2004AIX20654.
Full text
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Moulin, Maryline. "TRAIL et choc thermique : synergie d'induction de l'apoptose des cellules leucémiques." Lyon 1, 2007. http://www.theses.fr/2007LYO10008.
Full textAbstract:
Cette étude montre que la combinaison de traitement par TRAIL (TNF-Related Apoptosis Inducing Ligand) et choc thermique stimule fortement l'apoptose de cellules leucémiques, dont celles de patients atteints de LLC. De plus, ce co-traitement n'est pas toxique pour des lymphocytes normaux, ouvrant donc de nouvelles perspectives dans la recherche d'alternatives aux traitements anti-cancéreux classiques. La stimulation d'apoptose observée dépend de l'activation des caspases, de la formation du DISC mais non d'une néo-synthèse protéique. Elle résulte d'une meilleure fixation de TRAIL aux récepteurs DR4 et DR5 à la surface cellulaire. De plus, les alcools, qui comme le choc thermique fluidifient les membranes, stimulent aussi l'apoptose induite par TRAIL. Ces synergies sont corrélées à une forte production de céramides, totalement inhibée par la drogue D609. La fluidité membranaire et les céramides sont donc 2 paramètres importants lors de la stimulation de l'apoptose induite par TRAIL lors de différents type de stressThis study reveals that TRAIL (TNF-Related Apoptosis Inducing Ligand) and heat shock combined treatment strongly stimulates apoptosis of leukaemia cells including cells from CLL patients. Moreover, this co-treatment is not toxic for normal T-lymphocytes, thus opening new prospects in search for alternatives to traditional anti-cancer therapies. The apoptosis stimulation is caspase- and DISC formation-dependent, but protein neo-synthesis-independent. The phenomenon is correlated with an enhanced recognition of TRAIL death receptors DR4 and DR5 by this cytokine. Moreover, alcohol, which like heat shock induces membranes fluidity, also enhances TRAIL-mediated apoptosis. These synergies correlate with drastic ceramide production, a phenomenon that is completely inhibited by the D609 drug. Membrane fluidity and ceramide are therfore two key parameters of the mechanism involved in stress-induced stimulation of TRAIL apoptosis
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Aloui, Rachid. "Modifications de la fluidité membranaire et de l'activité phosphodiestérase des nucléotides cycliques des leucocytes sanguins au cours des maladies allergiques." Lyon 1, 1989. http://www.theses.fr/1989LYO1T089.
Full text
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Aliche-Djoudi, Fatiha. "Implication du remodelage membranaire induit par les acides gras polyinsaturés de la série oméga 3 dans la toxicité hépatique de l'éthanol : rôle de la fluidité membranaire et des radeaux lipidiques." Rennes 1, 2011. http://www.theses.fr/2011REN1B084.
Full textAbstract:
L’implication du remodelage membranaire dans la toxicité hépatique de l’éthanol a été mise en évidence par les travaux antérieurs de notre équipe. Ainsi, l’augmentation de la fluidité et l’agrégation des radeaux lipidiques participent à la toxicité de l’éthanol via l’activation d’une voie de signalisation radeaux dépendante mettant en jeu la phospholipase C (PLC). Or, les AGPI n-3 ont été décrits comme capables d’altérer la fluidité membranaire et l’organisation des radeaux lipidiques influençant ainsi la signalisation en dépendant. Cependant, l’effet des acides gras polyinsaturés de la série oméga 3 (AGPI n-3), via un remodelage membranaire, sur la toxicité de l’éthanol n’a jamais été étudié. C’est pourquoi l’effet de deux AGPI n-3, l’acide eicosapentaénoïque (EPA, C20 : 5 n-3) et l’acide docosahexaénoïque (DHA, C22 : 6 n-3) a été étudié sur la toxicité (stress oxydant et mort cellulaire) de l’éthanol induite dans les hépatocytes de rat en culture primaire, en s’intéressant particulièrement à l’implication des radeaux lipidiques. Nous avons montré que l’EPA amplifie la toxicité de l’éthanol alors que le DHA protège de celle-ci. Cette différence d’effet entre l’EPA et le DHA est due essentiellement à leur comportement au sein de la membrane. L’EPA, en s’incorporant préférentiellement dans les régions non radeaux favorise l’agrégation des radeaux lipidiques entraînant ainsi l’activation de la voie PLC, impliquée dans la toxicité de l’éthanol. En revanche, le DHA inhibe la signalisation PLC en empêchant l’agrégation des radeaux grâce à son incorporation préférentielle dans ces microdomaines membranairesThe involvement of membrane remodeling in ethanol-induced liver toxicity was previously described by our team. Thus, an increase in membrane fluidity and lipid raft clustering were responsible for ethanol toxicity via the activation of a raft-dependent signaling pathway, implicating phospholipase C (PLC). Omega 3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFAs) have been described as capable of altering membrane fluidity and lipid rafts organization leading to modification of cell signaling. However, the impact of n-3 PUFA induced membrane remodeling on ethanol liver toxicity had never been described. For these reasons, the effect of some n-3 PUFAs, namely eicosapentaenoic acid (EPA, C20: 5 n-3) and docosahexaenoic acid (DHA, C22:6 n-3), on ethanol-induced toxicity (oxidative stress and cell death) has been studied in rat primary hepatocytes, with particular attention to the involvement of lipid rafts. We have shown that EPA enhanced ethanol toxicity while DHA protected from it. This differential effect between EPA and DHA was mainly due to their membrane behavior. EPA, by incorporating preferentially in non-raft domains, promoted lipid raft clustering and consequently, activation of the PLC pathway. In contrast, DHA inhibited PLC signaling by preventing lipid raft aggregation, due to its preferential incorporation in these membrane micro-domains
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Dupont, Myrielle. "Régulation de la perméabilité membranaire et de la sensibilité aux antibiotiques chez les bactéries à gram négatif." Aix-Marseille 2, 2006. http://www.theses.fr/2006AIX20693.
Full textAbstract:
L'émergence de bactéries résistantes à plusieurs drogues pose un réel problème thérapeutique. Parmi ces bactéries, Enterobacter aerogenes et Acinetobacter baumannii sont devenues en l'espace de 10 ans des pathogènes incontournables en milieu hospitalier. Ces bactéries possèdent une grande capacité à coloniser de nouveaux territoires et à acquérir de nouveaux mécanismes de résistance. Ainsi à des mécanismes d’inactivation enzymatiques efficaces, sont associés des processus générant une imperméabilité membranaire et un efflux actif. De telles souches bactériennes sont considérées comme présentant un phénotype de " Multidrug-Resistance " (MDR). Face à cette situation inquiétante, il est devenu indispensable de connaître les éléments à l’origine de cette évolution. Le laboratoire UMR-MD-1 (EA2197) se consacre à l'étude de la perméabilité membranaire bactérienne et à la résistance aux antibiotiques par imperméabilité chez ces pathogènes. Tout d'abord nous avons identifié et caractérisé des protéines de membrane externe : une protéine de type OprD (favorisant le passage des carbapénèmes) chez A. Baumannii et la porine Omp35 chez E. Aerogenes. Par la suite, l'observation chez des isolats cliniques d' E. Aerogenes MDR d'une diminution de l'expression des porines corrélée à une augmentation de l'expression de la protéine OmpX, nous a incité à étudier cette protéine. OmpX, protéine monomérique qui forme un petit canal dans la membrane externe, agirait comme senseur de stress de l'environnement pour la bactérie. L'expression d'OmpX, sous le contrôle de l'opéron mar (multiple antibiotic resistance), est dépendante de la présence dans le milieu extérieur d'antibiotiques, de molécules activatrices du contrôle génétique de la MDR, ainsi que de la pression osmotique. OmpX aurait ainsi un rôle à jouer dans la mise en place de la résistance par imperméabilité membranaire.
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Gaillard, Patrick. "Evaluation des performances de quatre hémodialyseurs de haute perméabilité membranaire. Etude in vivo et ex vivo en hémodialyse et hémodiafiltration." Montpellier 1, 1998. http://www.theses.fr/1998MON11130.
Full text
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Tran, Que-Tien. "Résistance par modification de la perméabilité membranaire chez Proteus et Providencia : Caractérisation des composantes de la membrane externe." Aix-Marseille 2, 2009. http://www.theses.fr/2009AIX20727.
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Lee, Eun-Hee. "Perméabilité membranaire d'"Enterobacter cloacae" aux bêta-lactamines : rôle des porines et identification de gènes régulant leur expression." Paris 11, 1994. http://www.theses.fr/1994PA114814.
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Cattelotte-Brahimi, Julie. "Mécanismes de perméabilité membranaire des cations organiques au travers de la barrière hémato-encéphalique et des barrières hémato-oculaires." Paris 5, 2007. http://www.theses.fr/2007PA05P636.
Full textAbstract:
Au cours de nos recherches nous avons adapté la technique de perfusion carotidienne in situ chez la souris pour la mesure du transport hémato-oculaire et hémato-cérébral de nutriments et xénobiotiques De plus, nous nous sommes intéressés à l’étude du transport du 99mTc-sestamibi. L’effet de trois transporteurs d’efflux: la P-gp, la Mrp1 et la Bcrp, ainsi que l’effet du potentiel de membrane sur son transport au niveau de la BHE ont été évalués. Parmis ces trois transporteurs seule la P-gp modifie le passage cérébral du 99mTc-mibi. De même, nous avons montré l’influence in vivo du potentiel de la membrane sur ce transport. Ce travail nous a permis d’envisager l’hypothèse de la présence de transporteurs de cations organiques, favorisant l’entrée cérébrale du 99mTc-sestamibi. Enfin, nous avons exploré l’influence de trois transporteurs de cations organiques Oct1, 2 et 3 sur le passage cérébral et oculaire du TEA et du MPP+. Si nos études indiquent l’absence de fonctionnalité de ces Octs à la BHE, elles montrent cette influence au niveau oculaire. De plus, nos travaux suggèrent l’existence d’autres transporteurs de cations au niveau de ces barrières, à caractériserWe have adapted the mouse in situ brain perfusion technique for the study of xenobiotics blood/brain and blood/eye transport characteristics. Moreover, we measured 99mTc-sestamibi brain transport, and the influence of 3 efflux transporters: P-gp, Mrp1 and Bcrp and membrane potential on this transport. At the difference of Mrp1 and Bcrp, only P-gp modifies 99mTc-sestamibi brain distribution. Our results also indicated the ability of the membrane potential to influence its distribution. Our results seem to show the capacity of organic cation transporters to support 99mTc-sestamibi brain transport. Finally, we explored the influence of 3 organic cation transporters Oct1, 2 and 3 on TEA and MPP+ brain and eye influx. If our studies indicate the absence of functionality of these Octs at the blood/brain interface, they showed this influence at the ocular level. Moreover, our work suggested the existence of other our data suggested the influence of other organic cation transporters at the level of the brain and eye blood interface that remain to be identified
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Molitor, Alexander. "Régulation de la perméabilité membranaire chez les bactéries à Gram négatif et la relation avec la sensibilité aux antibiotiques." Thesis, Aix-Marseille 2, 2010. http://www.theses.fr/2010AIX20658/document.
Full textAbstract:
La perméabilité membranaire joue un rôle important dans la résistance aux antibiotiques chez lesbactéries à Gram négatif.L’objectif de notre travail était de caractériser la fonction tenue par les deux régulateurs globaux dela perméabilité membranaire chez Enterobacer aerogenes: mar et ram. L’objectif initial futd’identifier le répresseur spécifique de RamA qui manquait en tant qu’élément de la cascade derégulation actuellement définie. La sélection de 60 souches nous a permis de confirmer le rôlecentral joué par RamA dans la régulation, ainsi qu’identifier des mutations pouvant être critiques, auniveau de RamR. Ainsi, l’absence variations observées dans le régulon marRAB et l’expressionmodérée des transcrits montrée par qRT-PCR laisse penser, que RamA a un rôle clef dans larégulation de l’expression des porines et des pompes d’efflux chez E. aerogenes.L’autre partie de notre travail reposait sur l’étude de la translocation des antibiotiques au traversdes porines. L’étude des interactions porine-carbapénèmes s’est faite sur la porine sauvage OmpFd'Escherichia coli et deux mutations. Les résultats indiquent également l'importance de l'aspartateen position 113 dans la sélectivité de translocation des carbapénèmes au sein de la porine OmpF.Ce travail montre ainsi que la translocation des pénicillines est aussi sous la dépendance desinteractions qui se créent entre le substrat et le résidu en position 113 de OmpF et limitent alorsleur passage au niveau du canal porine. Nous avons recherché la contribution attribuée à la porineOmp36 d'E. aerogenes dans la translocation de certaines béta-lactamines. Les mesures ont permisde conclure que les deux beta-lactaminGenetic permeability plays an important role in antibiotic resistance of Gram-negative bacteria.Our work was to characterize and better understand of the genetic regulation of membranepermeability in E. aerogenes. We focused on two global regulators, mar and ram, in about 60clinical isolates. Alterations in the upstream region of ramA and in ramR but no mutations in marAnor marR were observed. Overexpression of ramA or ramR led to an altered antibiotic susceptibilityassociated to decrease of porins expression and over-expression of efflux-pumps. qRT-PCR pointedout the estimated importance of the ram-regulon in the regulation cascade.Another part of this work was to characterize the translocation of compounds through porins andthe role of porins in drug uptake in general. Measurement of the rate of antibiotic action of threecarbapenems in an E. coli strain solely expressing OmpF as porin clearly indicated the importanceof the aspartate at position 113 in antibiotic translocation. A multi-disciplinary three way approachof computer modeling, black-lipid-bilayer assays and measurement of antibiotic action, suggestedthat interactions with residue D113 of E. coli porin OmpF are rate-limiting for transport throughthe porin channel. Combination of biological and biophysical measurements with E. aerogenesporin Omp36 denoted that interactions between the porin channel and the antibiotic facilitate andaccelerate transport
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Madeline, Jean-Baptiste. "Filtration de dispersions agrégées de silice colloïdale : structure, consolidation et perméabilité de dépôts." Toulouse 3, 2005. http://www.theses.fr/2005TOU30155.
Full textAbstract:
Dans les procédés de coagulation/filtration, la récupération des agrégats dans la phase liquide est une étape cruciale pour l'efficacité de la séparation. Une problématique liée à la filtration est qu'en réponse à la contrainte appliquée, le dépôt formé en surface du filtre peut s'effondrer, impliquant une diminution de sa porosité et perméabilité. L'objet de ce travail a été d'étudier les mécanismes de restructuration de dépôts à travers une approche expérimentale multi-échelle afin d'améliorer la maîtrise de leurs propriétés de filtration. Les propriétés mécaniques et structurales de dépôts obtenus à partir de dispersions colloïdales de silice (Ludox et Klebosol) agrégées par un polycation Al137+ ou un cation divalent Ca2+ ont été analysées par DPAN et MET. Ces investigations ont permis de décrire l'effondrement d'un dépôt suivant un mécanisme de restructuration général contrôlé par la force des liaisons. L'étude menée sur l'impact de la restructuration sur les propriétés de filtration des dépôts a montré que la compressibilité et la perméabilité d'un dépôt dépendent principalement de la résistance à la rupture des liaisons interparticulaires plutôt que des propriétés fractales initiales des agrégatsIn coagulation/filtration processes, the separation of aggregated colloids from the liquid is a crucial step for the global operation to be effective. The problems hold in the fact that the cake formed by the accumulation of aggregates at the filter surface during filtration may collapse under the pressure applied, resulting in a lost of porosity and decrease in permeability. The aim of this study was to investigate cake restructuration mechanisms through an experimental multi-scaling approach for a better understanding and control of cake properties. For this purpose, dispersions of spherical silica colloids (Ludox and Klebosol) were aggregated by adding polycation Al137+ or divalent cation Ca2+. Structural and mechanical features of filtration cakes were investigated through SANS and TEM. Investigations have permitted to describe cake collapse through a general compression mechanism mainly controlled by the strength of interparticle bonds. Impact of floc features on cake filtration properties has been investigated and we have been able to show that cake compressibility and permeability primarily result from the breakage resistance of interparticle bonds rather than flocs initial fractal properties
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Mora, Marie-Pierre. "Incorporation de phytostérols dans les kératinocytes humains SVK14 : optimisation et conséquences sur la fluidité membranaire, la péroxydation lipidique due aux UVA et les réponses cellulaires au ionophore calcique." Toulouse 3, 2000. http://www.theses.fr/2000TOU30226.
Full text
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Boom, Alain. "Etude de la perméabilité hydrique de l'épithélium vésical de "Bufo marinus" sensible à l'hormone antidiurétique: rôle des protéines G et de la perméabilité membranaire à l'adénosine monophosphate cyclique (cAMP)." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 2001. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/211527.
Full text
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Fifre, Alexandre. "Mort cellulaire et maladie d'Alzheimer : mécanismes moléculaires impliqués dans l'apoptose neuronale induite par le peptide β-amyloïde (Aβ) sous forme soluble et facteurs protecteurs associés." Nancy 1, 2006. http://www.theses.fr/2006NAN11314.
Full text
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Merle, Pierre-Laurent. "Effets du facteur de croissance basique des fibroplastes (FGF-2) sur la perméabilité membranaire et l'homéostasie calcique de cardiomyocytes de rats." Université Joseph Fourier (Grenoble), 1997. http://www.theses.fr/1997GRE10126.
Full textAbstract:
Le facteur de croissance basique des fibroblastes (fgf-2) participe au developpement embryonnaire des cardiomyocytes et semble etre implique dans l'hypertrophie des cardiomyocytes adultes. Dans differents types cellulaires, les cascades d'activation initiees par les facteurs de croissance passent par une elevation de la concentration intracellulaire en calcium. L'objectif de ce travail a ete d'etudier les effets du fgf-2 sur l'homeostasie calcique de cardiomyocytes de ventricules de rats nouveau-nes et adultes. Nous avons montre que les cardiomyocytes de rats nouveau-nes expriment des recepteurs au fgf-2 dont l'activation entraine une augmentation de l'activite contractile. La technique du patch-clamp nous a permis de mettre en evidence des canaux de la membrane plasmique des cardiomyocytes activables par le fgf-2, permeables au calcium, ayant une faible conductance (15 ps) et insensibles au voltage. L'activation de ces canaux par le fgf-2 est en partie mediee par l'ip3. La mesure, par la technique de spectrofluorimetrie, de la teneur en ca#2#+ montre que le fgf-2 provoque une augmentation progressive de la concentration basale en calcium des cardiomyocytes neonataux. Cette observation est confirmee par visualisation en microscopie confocale laser de la concentration en ca#2#+ dans le cytoplasme et le noyau des cardiomyocytes adultes. En outre, le fgf-2 stimule l'apparition des augmentations locales et transitoires en calcium (sparks). L'ensemble des resultats suggere l'existence, dans la membrane plasmique des cardiomyocytes, de canaux permeables au calcium, dont l'ouverture est stimulee en reponse au fgf-2. Cet influx de calcium semble etre un des elements precoces des cascades d'activation initiees par les facteurs de croissance et pourrait jouer un role important dans le controle de l'expression genetique.
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To, Thi Mai Huong. "Modification de la composition lipidique membranaire chez les bactéries lactiques en conditions de stress : étude du rôle physiologique des Acides Gras Cycliques chez deux modèles : oenococcus oeni ATCC-BAA1163 et Lactococcus lactis MG1363." Phd thesis, Université de Bourgogne, 2010. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00605353.
Full textAbstract:
Les résultats obtenus dans ce travail ont permis de démontrer que chez les deux bactéries lactiques modèles, L. lactis subsp. cremoris et O. oeni, la transcription du gène cfa, codant pour la Cfa synthase, est stimulée lorsque les cellules entrent en phase stationnaire de croissance ou lorque que les cellules sont cultivées en conditions de stress (milieu acide ou présence d'éthanol dans le milieu). Le rôle des CFA a pû être appréhendé par l'analyse physiologique comparative de la souche parentale L. lactis subsp. cremoris et du mutant Δcfa généré chez cette souche. Les forts pourcentages de survie obtenus chez les souches cultivées à pH 5,0, puis subissant un stress acide (pH 3,0), prouvent que la cyclopropanation des acides gras insaturés n'est pas indispensable à la survie de L. lactis subsp. cremoris en conditions de stress acide. En outre, les données d'anisotropie de fluorescence démontrent que la présence de CFAs membranaires ne permet pas de réguler le niveau de fluidité membranaire, en particulier avec les souches cultivées en présence d'éthanol, où une fluidification membranaire est observée dans tous les cas. L'hypothèse d'un équilibre entre les acides palmitoléique / cis-vaccénique / lactobacillique pour réguler la fluidité membranaire chez L. lactis subsp. cremoris est avancée. L'étude du rôle physiologique des CFA chez O. oeni nécessite l'expression du gène cfa de la bactérie en système hétérologue. Les résultats obtenus confirment la fonctionnalité du gène chez la bactérie hôte L. lactis subsp. cremoris, cependant la cyclisation du précurseur acide cis-vaccénique, reste partielle chez la souche mutante complémentée. Un travail de caractérisation biochimique in vitro de l'enzyme Cfa synthase de O. oeni a donc été entrepris afin d'expliquer la faible efficacité de l'enzyme de O. oeni chez la bactérie hôte. Les travaux réalisés ont permis la surproduction et la purification de l'enzyme. Une technique de mesure d'activité in vitro a été également développée. Une stratégie d'expression du gène cfa de O. oeni en système hétérologue dans la bactérie hôte E. coli BL21 Star a permis la surpoduction d'une protéine d'environ 45 kDa, en accord avec la masse moléculaire théorique de la Cfa synthase de O. oeni. A partir de l'extrait protéique, une purification a été réalisée par chromatographie d'affinité sur colonne d'agarose nickel. Les tests d'activité enzymatique in vitro ont pu été réalisés. La température optimale de l'enzyme est de 35,8°C. Son pH optimal est de 5,6. Même en se plaçant dans les conditions physico-chimiques optimales de l'enzyme, nous constatons que la cyclisation in vitro de l'acide cis-vaccénique issu des phospholipides membranaires du mutant L. lactis subsp. cremoris Δcfa reste partielle. Ceci induit une détermination expérimentale de valeurs de KM et Vmax largement supérieures aux données citées dans la littérature. La différence, entre les deux bactéries modèles, de nature et de répartition des phospholipides membranaires pourrait expliquer l'action partielle de la Cfa synthase de O. oeni.
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Martel, Cécile. "Rôle de la perméabilité membranaire mitochondriale, de la phosphorylation de VDAC et de la signalisation de l’apoptose dans la pathogenèse de la stéatose hépatique." Thesis, Paris 11, 2011. http://www.theses.fr/2011PA11T075.
Full textAbstract:
La stéatose hépatique non-alcoolique consiste en une accumulation de lipides dans le cytoplasme des hépatocytes. Longtemps considérée comme une pathologie bénigne, elle peut être à l’origine du développement d’un stade plus sévère : la stéatohépatite non alcoolique (NASH). La NASH s’accompagne de lésions sévères du foie liées à la genèse d’un stress oxydant, d’une inflammation et de la mort cellulaire. Le rôle de la mitochondrie est au centre de cette maladie, bien que les connaissances sur la dysfonction mitochondriale et ses conséquences sur l’apoptose soient encore insuffisantes. En effet, la mitochondrie est responsable de la dégradation des lipides par -oxydation et elle agit comme un centre intégrateur des signaux apoptotiques en déclenchant une perméabilisation des membranes mitochondriales (PMM) aboutissant à la libération de facteurs apoptogènes. Ce processus est considéré comme le point de non-retour de la voie mitochondriale de l’apoptose. Nos travaux ont porté sur la compréhension des mécanismes moléculaires liant l’apoptose hépatocytaire mitochondriale et la stéatose. La combinaison de quatre modèles expérimentaux de stéatose (biopsies de patients, mitochondries isolées de souris obèses ob/ob ou recevant un régime hypercalorique, et lignées cellulaires) a permis de montrer, dans le foie stéatosique, une sensibilité accrue à l’induction de la PMM et une augmentation de la perméabilité de VDAC (voltage-dependent anion channel), protéine formant un canal dans la membrane externe mitochondriale. Ces observations sont associées à une diminution de la phosphorylation de VDAC sur un résidu thréonine et sa perte d’interaction avec la protéine anti-apoptotique Bcl-XL et la kinase GSK3, révélant ainsi une nouvelle voie de signalisation par les lipides. Cette découverte s’est notamment appuyée sur l’utilisation de tests fonctionnels en mitochondries isolées que nous avions développés et validés dans plusieurs études aux stratégies expérimentales variées. En conclusion, notre étude permet de mieux comprendre la fragilité mitochondriale lipo-induite, stade précédant l’apoptose hépatocytaire, et ouvre des perspectives à visée biomédicaleNon-alcoholic steatosis is a liver disease characterized by lipid accumulation in the cytoplasm of hepatocytes. For a long time, it has been considered as a benign condition. Now it is known that it can precede the development of a severe stage, non-alcoholic steatohepatitis (NASH). NASH is accompanied by severe dammages of the liver linked to the genesis of oxidative stress, inflammation and cell death. Mitochondrion is a central player of this disease; however, the knowledge of mitochondrial dysfunction and its consequences on apoptosis is still insufficient. Indeed, mitochondria are responsible for lipid degradation by -oxidation. Mitochondria act as a central integrator of apoptotic signals by triggering the mitochondrial membrane permeabilization (MMP) leading to the release of apoptogenic factors. This process is considered as the point of no return of the mitochondrial pathway of apoptosis. We aimed to better understand the molecular mechanisms linking mitochondrial liver apoptosis and steatosis. Combination of four experimental models of steatosis (human biopsies, isolated mitochondria from ob/ob obese mice, high fat diet-fed mice or hepatic cell lines) displayed, in steatotic livers, increased sensitivity to MMP induction and permeability of VDAC (Voltage dependent anion channel), a protein which forms a channel in the outer mitochondrial membrane. These findings are associated with the hypo-phosphorylation of VDAC on a threonine residue and the loss of its interaction with the anti-apoptotic Bcl-XL and GSK3 kinase, thus revealing a new lipid-induced signaling pathway. Our work is based on the use of functional assays on isolated mitochondria that we have developed and validated in several studies involving various strategies. To conclude, our study increases the knowledge on the lipid-induced mitochondrial weakness preceding hepatic apoptosis and opens perspectives in biomedical applications
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Vincent-Genod, Lucie. "Les dommages membranaires radio-induits comme bio-indicateurs de doses : études des mécanismes et applications pratiques." Paris 11, 2001. http://www.theses.fr/2001PA11T048.
Full textAbstract:
Lors d'une exposition accidentelle aux rayonnements ionisants, l'estimation de la dose reçue en dosimétrie biologique est réalisée en se basant sur les dommages de la molécule d'ADN. Néanmoins, cette technique présente certaines limites, c'est pourquoi nous recherchons de nouveaux bio-indicateurs de dose. Nous avons montré que la membrane est une cible sensible des rayonnements ionisants suite à une exposition in vitro et in vivo. In vitro, l'irradiation induit des altérations de la composition en acides gras des phospholipides membranaires et conditionnent les propriétés biophysiques de la membrane. Ces atteintes participent au processus apoptotique radio-induit. La mesure de la fluidité membranaire permet ainsi d'obtenir une vision intégrée des dommages de la membrane cellulaire. D'autre part, in vivo, en modifiant l'état nutritionnel lipidique des animaux, nos résultats ont mis en évidence l'importance du rôle de la composition en lipides de la membrane dans les altérations membranaires radio-induites. De plus, la régulation physiologique extracellulaire module les effets membranaires radio-induits et en particulier les dommages au niveau du profil en acides gras membranaires. Finalement, nous avons testé l'utilisation de l'index de fluidité membranaire comme bio-indicateur de dose sur des modèles in vivo et des prélèvements sanguins de patients ayant subi une irradiation médicale corporelle totale. Les résultats obtenus sur des modèles animaux suggèrent que ce paramètre puisse être un bioindicateur d'exposition. Cependant, les observations réalisées sur les patients sont difficilement interprétables en raison du traitement combiné : chimiothérapie et radiothérapie. En conclusion, bien que ce paramètre ne soit pas un bio-indicateur d'une exposition à une irradiation utilisable en dosimétrie biologique, il permettrait d'évaluer les dommages radio-induits et leur impact au niveau cellulaire mais également tissulaireAfter an accidental overexposure, the assessment of the received dose in biological dosimetry is performed by a method based on the effects of irradiation on the DNA molecule. But this technique shows some limitations; therefore we tried to find new biosensors of radiation exposure. We have pointed out that membrane is a critical target of ionising radiation after an in vitro and in vivo overexposure. In vitro, these modifications were involved in the radio-induced apoptotic pathway. The measure of membrane fluidity allowed us to obtain an overall view of cellular membrane. Moreover, in vivo, by changing the lipid nutritional status of animals, our results displayed the important role played by membrane lipid composition in radio-induced membrane alterations. Besides, membrane effects were adjusted by the extracellular physiological control and in particular by the damages on membrane fatty acid pattern. Finally, we have tested the use of membrane fluidity index as a biosensor of radiation exposure on in vivo models and blood samples from medical total body irradiated patients. The results achieved on animal models suggested that the membrane fluidity index was a biosensor of radiation exposure. Nevertheless, the observations realised on patients highlight that the effect of the first dose fraction of the radiotherapy treatment had some difficulties to be noticed. Indeed, the combined treatment: chemotherapy and radiotherapy disturbed the membrane fluidity index measures. To conclude, whereas this parameter was not a biosensor of irradiation exposure usable in biological dosimetry, it may allow us to assess the radio-induced damages and their cellular but also tissue impacts
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Velly, Helene. "Etude de l’évolution de l’état physiologique de L. lactis TOMSC161 au cours de la fermentation et de son incidence sur la résistance à la lyophilisation et au stockage." Thesis, Paris, AgroParisTech, 2014. http://www.theses.fr/2014AGPT0050/document.
Full textAbstract:
Les ferments lactiques, d’une importance industrielle considérable, sont très largement commercialisés sous forme concentrée, congelée ou lyophilisée en vue de leur utilisation ultérieure dans les procédés industriels tels que les procédés de production de fromage. Cependant, les procédés de stabilisation (congélation et lyophilisation) engendrent différents stress qui peuvent conduire à de faibles taux de survie et des pertes de fonctionnalités des microorganismes. Dans ce contexte, ce travail de thèse vise à mieux comprendre l’incidence de l’état physiologique des cellules de L. lactis TOMSC161 au moment de la récolte sur leur tolérance à la lyophilisation et au stockage, et de développer des outils simples mais efficaces d’évaluation de l’état physiologique des cellules au cours de la fermentation pour les industriels. Dans une première partie, l’influence de différents paramètres de fermentation (température, pH et phase de croissance) sur la croissance et la résistance de L. lactis TOMSC161 à chaque étape du procédé de lyophilisation et au stockage a été étudiée. Alors que les performances de la souche ne sont pas dégradées après congélation, L. lactis s’est avéré sensible au séchage et au stockage à température ambiante. De plus, la température de fermentation et l’instant de récolte influencent la résistance au séchage de cette bactérie. Ainsi, les cellules de L. lactis TOMSC161 cultivées à 32 °C, pH 6,2 et récoltées tardivement (en phase stationnaire avancée) présentent une croissance optimale et la meilleure résistance à la lyophilisation et au stockage à 4 °C. Dans une seconde partie, une caractérisation approfondie de la membrane de L. lactis TOMSC161 aux niveaux biochimique et biophysique a été réalisée au cours de fermentations à différentes températures (22 et 30 °C) et a été mise en lien avec la résistance des ferments à la lyophilisation et au stockage. La cyclopropanation des acides gras insaturés de L. lactis TOMSC161 au cours de la fermentation est reliée à une rigidification de la membrane et permet d’améliorer la tolérance des cellules à la lyophilisation et au stockage. A l’inverse, la culture des cellules à une température inférieure à la température optimale de croissance induit une adaptation homéovisqueuse de la membrane, mise en évidence par la température de transition lipidique, mais n’a pas induite une amélioration de la résistance à ce procédé de préservation. Dans une troisième partie, la caractérisation de l’état physiologique des cellules de L. lactis TOMSC161 a été complétée au niveau du transcriptome, du protéome et de l’état d’oxydation cellulaire. Le procédé de lyophilisation provoque la formation d’espèces réactives de l’oxygène (ROS) intracellulaires qui dégradent la performance des ferments au cours du stockage. Par ailleurs, l’état d’oxydation des cellules diminue au cours de la fermentation et est expliqué, en phase stationnaire, par un ralentissement du métabolisme énergétique aérobie et une induction des réponses au stress oxydatif. Cette « pré-adaptation » initiale des cellules de L. lactis TOMSC161 au cours de la fermentation permet, là encore, une amélioration de leur tolérance à la lyophilisation et au stockage par une limitation de l’accumulation de ROS lors de ce procédé de préservation. Ce travail se conclut par une vérification des fonctionnalités du ferment lyophilisé, dans les conditions de production optimisées lors de cette thèse, en fabrication fromagère. Malgré l’étape de lyophilisation, les propriétés technologiques de L. lactis TOMSC161 sont conservées, validant ainsi le travail d’optimisation réaliséLactic acid bacteria, which have a significant industrial importance, are widely distributed in frozen or freeze-dried state for further use in industrial processes such as cheesemaking. However, stabilization processes (freezing or freeze-drying) causes different stresses which can lead to low survival rates and functionality losses of microorganisms. In this context, this thesis aimed at better understanding the impact of the physiological state of L. lactis TOMSC161 cells during fermentation on their freeze-drying and storage resistance, and at developing simple but efficient tools to evaluate the cells physiological state during fermentation for industrials.In the first part of this work, the influence of fermentation parameters (temperature, pH and harvesting time) on the growth and resistance of L. lactis TOMSC161 to each step of the freeze-drying process and storage has been investigated While the strain performance was not deteriorated after freezing, L. lactis was sensitive to the drying step and to ambient temperature storage. Moreover, the fermentation temperature and the harvesting time influenced the drying resistance of this bacterium. L. lactis TOMSC161 cells grown at 32 °C, pH 6.2 and harvested late (at late stationary phase) exhibited therefore both an optimal growth and the highest resistance to freeze-drying and storage at 4 °C. In the second part, a deep characterization of the L. lactis TOMSC161 membrane at a biochemical and biophysical level was analyzed during fermentation at different temperatures and was linked to the freeze-drying and storage resistance of starters. The cyclopropanation of unsaturated fatty acids of L. lactis TOMSC161 during fermentation was correlated with a membrane rigidification and allowed an improvement of the cell tolerance to freeze-drying and storage. Conversely, cultivating cells at lower fermentation temperature than the optimum growth temperature induced as expected a homeoviscous adaptation as evidenced by lowered lipid phase transition temperature but did not induce any improvement of resistance to this preservation process.In the third part, the physiological state characterization of L. lactis TOMSC161 cells was completed by investigating at the transcriptomic and proteomic levels as well as the cellular oxidation state. The results proved that the freeze-drying process caused intracellular reactive oxygen species (ROS) formation, responsible of degradation of the starter performance during storage at 25 °C. Furthermore, the cellular oxidation state decreased during fermentation and was explained, in the stationary phase, by a slowdown of the aerobic energy metabolism and the induction of oxidative stress responses. This initial “pre-adaptation” of L. lactis TOMSC161 during fermentation allowed improving their tolerance to freeze-drying and storage by a limitation of ROS accumulation through the whole preservation process.Finally, this work has been concluded by verifying the functionalities of starter freeze-dried in the optimized production conditions defined in this thesis during cheesemaking. Despite the freezedrying step, the technological properties of L. lactis TOMSC161 were preserved, thus validating the performed optimization
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Vaultier, Marie-Noëlle. "Etude de la perception et de la transduction du signal froid chez Arabidopsis thaliana : Implication des voies de signalisation lipidique." Paris 6, 2006. http://www.theses.fr/2006PA066223.
Full text
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Dorn, Daniel. "Contribution à l'optimisation d'un prototype de polarisation de fluorescence adapté à des dosages en biologie cellulaire et clinique." Nancy 1, 1991. http://www.theses.fr/1991NAN10414.
Full textAbstract:
La polarisation de fluorescence suscite un grand intérêt. Des applications ont été développées en biologie cellulaire et clinique. Cette méthode rend compte de la faculté de rotation de sondes fluorescentes dissoutes dans des milieux biologiques et donne ainsi des informations sur la cohésion de leur environnement immédiat. L'objet de ce travail a été l'étude d'un système instrumental permettant des déterminations de faibles émissions de fluorescence a la fois en biologie cellulaire et clinique. La partie optique du système, un montage en T, a été utilisé. Le système a été prévu pour des mesures avec des sondes fluorescentes présentant des caractéristiques spectroscopiques différentes. Les parties photodétection, amplification et traitement des signaux ont été particulièrement étudiés. Un programme informatique a permis de tester la sensibilité et la reproductibilité des résultats. En biologie cellulaire, les tests ont été effectués sur des populations lymphocytiques de souris marquées avec des acides (n-(9-anthroloxy)) stéariques. En biologie clinique, les essais ont porté sur un dosage reposant sur l'interaction gélatine-fibronectine. Le marqueur utilisé étant l'isothiocyanate de fluorescéine (fitc). Ces essais ont montre qu'en ce qui concerne la sensibilité l'objectif prévu était pratiquement atteint. Par contre, une modification du traitement des signaux devrait permettre d'augmenter sensiblement la reproductibilité des résultats
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Jesus, Florence de. "Caractérisation des propriétés de la partie membranaire de l'ATPase-Ca2+ du réticulum sarcoplasmique du muscle squelettique de lapin : étude de la perméabilité passive aux cations monovalents et divalents." Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015), 1995. http://www.theses.fr/1995GRE10229.
Full textAbstract:
L' atpase-ca#2#+ serca-1a initie la relaxation musculaire en pompant activement le calcium cytoplasmique à l'intérieur du reticulum sarcoplasmique. Le domaine transmembranaire de cette protéine a été caractérisé en étudiant les phénomènes de perméabilité passive. L'utilisation de la thapsigargine, un inhibiteur spécifique de la protéine a montré que l'enzyme est permeante aux cations monovalents (k#+ ou na#+), en absence de calcium externe (ca#1#/#2n0,2-0,15 um) et de protons (pk=7,4 a 0c). Cette permeation est inhibée par la thapsigargine et le vanadate qui stabilisent la protéine dans sa conformation e#2. Deux modèles peuvent décrire cette translocation de cations monovalents: - soit l'état e#2 de la protéine correspond à un état perméable qui permet le passage des cations par les sites de transport membranaires lorsque ceux-ci sont libres. - soit le passage des cations monovalents s'effectue lors des transconformations e#1e#2 de la protéine, lorsque les sites calciques sont libres. Ce schema est accrédité par le taux de passage des cations monovalents (0,5 s#-#1) qui est voisine de celle de la transconformation e#2e#1. Physiologiquement, cette perméabilité aux cations monovalents pourrait compenser les effets électriques engendrés par le pompage de calcium. La perméabilité au calcium a été caractérisée sur la protéine dont la partie membranaire a été dissociée du domaine catalytique. Ce découplage a été obtenu en associant une trypsinolyse limitée du domaine cytoplasmique et un traitement thermique. Dans ces conditions, le domaine cytoplasmique de la protéine est majoritairement détruit tandis que le domaine transmembranaire et l'étanchéité des vésicules sont bien conservés. Ainsi traitées, la perméabilité passive au calcium des vésicules réticulaires augmente. Cette perméabilité est régulée par les mêmes agents que celle des cations monovalents. Ces résultats permettent désormais d'appréhender l'activité intrinsèque du domaine membranaire de l'atpase-ca#2#+. Ils seront appliqués à l'étude fonctionnelle des mutants transmembranaires exprimés dans la levure s. Cerevisiae
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Nurbaeti, Siti Nani. "Études biopharmaceutiques et formulation de chloramphénicol et de thiamphénicol pour le traitement ciblé des infections pulmonaires par voie inhalée." Thesis, Poitiers, 2017. http://www.theses.fr/2017POIT1802/document.
Full textAbstract:
L'émergence rapide de bactéries résistantes et l’absence de nouveaux traitements efficaces ont conduit à réutiliser d’anciens antibiotiques. Le chloramphenicol (CHL) et le thiamphenicol (THA) ont ainsi été proposés pour traiter les infections respiratoires multirésistantes. Leur administration directe dans les poumons sous forme d’aérosols thérapeutiques devrait augmenter leur efficacité et minimiser l’exposition systémique responsable d’effets secondaires, en particulier lors de traitements prolongés. Ce travail de thèse a eu pour objectifs de réaliser des étudies biopharmaceutiques et de développer des formulations d’aérosols pour la voie pulmonaire. La perméabilité membranaire du CHL et du THA a été évaluée sur le modèle d’épithélium bronchique Calu-3 et leur pharmacocinétique a été réalisée chez le rat après administrations intratrachéale et intraveineuse. La perméabilité membranaire in vitro du CHL s’est révélée élevée, et intermédiaire pour le THA. Les deux antibiotiques sont substrats de transporteurs membranaires d’efflux. Les études pharmacocinétiques, cohérents avec les études in vitro, ont montré un impact nul de la voie d’administration dans cas du CHL et modéré dans le cas du THA. Par conséquent, pour prolonger l’exposition pulmonaire à ces antibiotiques, des formulations à libération prolongées basées sur des nanoparticules ont été incluses dans des poudres sèches de microsphères pour inhalation. Ces poudres se caractérisent par une teneur optimale, des propriétés aérodynamiques satisfaisantes et un profil de libération prolongée, et sont donc prometteuses pour l’administration pulmonaire de CHL ou de THA sous la forme d’aérosolsThe rapid emergence of resistant bacteria and the lack of new efficient treatments lead to re-use old forgotten, but still effective, antimicrobials. In particular, chloramphenicol (CHL) and thiamphenicol (THA) have been proposed to treat multidrug-resistant pulmonary bacterial infections. Their direct administration into the lungs as therapeutic aerosols should increase their efficiency and minimize whole body exposure responsible for adverse effects, particularly in the case of prolonged treatments. The purpose of these PhD. works was to perform biopharmaceutical studies and to develop an effective aerosol formulation for lung delivery. The membrane permeability of CHL and THA was evaluated in vitro in the Calu-3 bronchial epithelial cell model and pharmacokinetic (PK) studies were carried out in rats after intratracheal and intravenous administration. In vitro membrane permeability of CHL was high, but intermediate for THA. Both compounds were shown to be substrates of membrane efflux transporters. In agreement with these findings, the PK studies showed that the administration route had no impact in the case of CHL and a moderate one in the case of THA. Therefore, in order to prolong lung exposure to CHL and THA, nanoparticle-based formulations with sustained release properties were formulated using the palmitate ester prodrugs of CHL and THA. To ease administration, nanoparticles were included in microsphere-based dry powder for inhalation. These powders showed an optimal content, satisfactory aerodynamic properties and sustained drug release, which make them promising formulations for lung delivery of CHL and THA as aerosols
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Daifi, Amina. "Etude de la perméabilité membranaire à l'adenosine 3'-5'-monophosphate cyclique (AMPc) :rôle du canal anionique sensible au gonflement cellulaire (VSOAC) et des protéïnes associées à la multirésistance aux drogues anticancéreuses (MRP1)." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 2003. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/211270.
Full text
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Dassouli, Abdelilah. "Étude de deux protéines majeures (76 et 14 kDa) libérées au pôle apical des cellules épithéliales de la vessie d'amphibiens : leur rôle dans le contrôle hormonal de la perméabilité hydrique." Paris 11, 1988. http://www.theses.fr/1988PA112195.
Full textAbstract:
L'hormone antidiurétique (ADH) induit, au pôle apical des cellules épithéliales de la vessie d'amphibiens, la mise en place d'agrégats de particules spécifiques, représentant vraisemblabement les canaux hydriques transmembranaires. L'ADH, comme les esters de phorbol ou l'étirement mécanique de la vessie, induit également l'exocytose de granules sous apicaux. Au cours de ce travail, nous avons analysé le matériel protéique libéré dans ces différentes conditions et recherché son implication éventuelle dans le contrôle des propriétés physiologiques de cette barrière épithéliale. L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide des extraits obtenus fait apparaître deux bandes majoritaires de 76 et 14 kDa et leur analyse par chromatographie(HPLC) permet d'isoler deux polypeptides de poids moléculaires apparents 110 et 80 kDa correspondant à la 76 kDa et deux autres, d'un même poids moléculaire (environ 20 kDa), correspondant à la 14 kDa. Seules les protéines 76 kDa sont glycosylées et ont des points isoélectriques (pl) de 6,1 et 5,1. Les deux peptides de 14 kDa ont des pl de l'ordre de 7,4. Ces protéines ne semblent pas impliquées dans la régulation du Ca++ cellulaire et n'affectent pas directement la réponse hydrosmotique à l'ADH. Cependant, le transport basal de Na+ est légèrement augmenté (environ 2. 5 %) sans que la réponse natriférique à l'ADH soit altérée. Si les anticorps anti-76 kDa n'affectent pas la perméabilité hydrique, les anticorps anti-14 kDa réduisent l'intensité de la réponse à l'ADH par un mécanisme complexe qui nécessite la réinternalisation des agrégats contenant les canaux hydriques. En utilisant les anticorps dirigés contre les protéines 76 ou 14 kDa, nous avons localisé, par immunocytochimie, ces deux protéines au niveau apical et au niveau du contengranulaire. Ces résultats suggèrent que les 76 et 14 kDa pourraient participer au renouvellement membranaire et à la mise en place d'un g1ycocalyx riche en mannose ; par ailleurs, une implication plus directe de la protéine 14 kDa dans la régulation de la perméabilité membranaire à l'eau et aux électrolytes n'est cependant pas à écarter.
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Milioni, Dimitra. "Perméabilisation photocontrôlée de la membrane biologique : étude en systèmes modèles et en cellules." Phd thesis, Université Pierre et Marie Curie - Paris VI, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00833272.
Full textAbstract:
La perméabilisation de la membrane lipidique est actuellement un domaine de recherche important, puisque l'optimisation du transport des petites molécules (comme l'ADN ou les protéines) dans les cellules est nécessaire. Dans ce travail, nous tentons une contribution dans ce domaine en proposant une méthode de perméabilisation contrôlée à l'aide des Azobenzene Modified Polymers (AMP). Des copolymères avec un taux d'hydrophobicité modéré ont été montrés dans le passé comme perméabilisant la membrane. Les AMP nous permettraient alors de contrôler cette perméabilisation via le contrôle de leur taux d'hydrophobicité (selon la longueur d'onde de la lumière à laquelle ils sont illuminés). Cette hypothèse a été vérifiée à l'aide des vésicules géantes unilamellaires (GUV) encapsulant des sondes fluorescentes solubles. La cinétique de la fuite de ces sondes en combinaison avec des expériences d'électrophysiologie sur des films noirs (BLM) nous donne accès à une meilleure caractérisation des structures de perméation créées par l'interaction entre l'AMP et les lipides. En outre, des expériences ont été réalisées sur des cellules CHO (Chinese Hamster Overy). La possibilité de faire rentrer dans les cellules des molécules qui a priori n'y sont pas internalisées a été étudiée. Par ailleurs, la fuite de molécules encapsulées dans les cellules et sa cinétique ont été examinées
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Pantel, Alix. "Multirésistance des entérobactéries aux antibiotiques et modulation de l’influx et de l’efflux membranaires chez Escherichia coli ST131." Thesis, Montpellier, 2015. http://www.theses.fr/2015MONTT038/document.
Full textAbstract:
La diffusion des entérobactéries multirésistantes aux antibiotiques (MDR) à l’échelle mondiale constitue une menace de santé publique majeure. Résistantes à au moins trois classes d’antibiotiques, les entérobactéries MDR entrainent des infections échappant aux traitements de première intention. La première partie de ce travail s’intéresse à l’épidémiologie moléculaire des souches d’entérobactéries MDR isolées dans les infections et les colonisations des patients hospitalisés en Languedoc-Roussillon, en France, et dans un pays où cette épidémiologie est encore peu connue, l’Algérie. Nous avons montré, dans notre région et au niveau national, que la résistance aux carbapénèmes était essentiellement liée à des modifications de la perméabilité membranaire (87,4% des entérobactéries résistantes, au niveau national). Dans la deuxième partie de ce travail, nous avons étudié les modulations de la perméabilité membranaire et de l’efflux chez Escherichia coli ST131, l’exemple-type d’un clone MDR. Nous avons montré que ce clone mondial présentait une remarquable adaptabilité à la pression antibiotique. Cette adaptabilité avait un impact significatif sur la virulence et le fitness de E. coli. Les capacités de formation de biofilm et la virulence chez Caenorhabditis elegans étaient augmentées chez les souches de phénotypes « efflux ». Inversement, les souches de phénotypes « imperméabilité » présentaient un faible potentiel de virulence, associé à une diminution significative de la formation de biofilm et de la mobilité par swimmingThe spread of multidrug-resistant (MDR) Enterobacteriaceae is a major public health threat worldwide. Resistant to at least three classes of antibiotics, MDR Enterobacteriaceae cause infections for which first-line treatments are inefficient. The first part of this work focused on the molecular epidemiology of MDR Enterobacteriaceae strains isolated in infections and colonizations of patients hospitalized in Languedoc-Roussillon, in France and in Algeria, a country where few data are currently available. We showed in our region and nationally, that resistance to carbapenems was mainly due to changes in membrane permeability (87.4% of resistant Enterobacteriaceae, nationally).In the second part of this work, we studied the modulation of membrane efflux and permeability in the quintessential example of an international MDR high-risk clone, Escherichia coli ST131. We showed that this global clone had a remarkable adaptability to antibiotic pressure. This adaptability had a significant impact on the virulence and the fitness of E. coli. The biofilm formation and virulence capacities in Caenorhabditis elegans model were increased in strains overexpressing an efflux system. Conversely, the strains with altered porins expression had a low potential virulence, associated with a significant reduction in biofilm formation and swimming mobility
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Alimi, Mickaël. "Nouvelle stratégie de véctorisation d'antibactériens via des métallodrogues : Principe, Synthèse et Activité biologique." Thesis, Paris 5, 2012. http://www.theses.fr/2012PA05P637.
Full textAbstract:
L'enveloppe cellulaire des bactéries à Gram négatif constitue la première ligne de défense contre les antibiotiques. Sous l’effet, d’une part, de la faible perméabilité de la membrane externe qui s'oppose à la pénétration des agents antibactériens, d’autre part des pompes d'efflux qui favorisent leur expulsion, elle empêche nombre de composés potentiellement actifs in vitro d'atteindre leur cible, limitant l’effet antibactérien. Un enjeu important pour restaurer l’activité de ces molécules est de trouver une stratégie pour en augmenter la concentration intracellulaire. L'objectif de cette thèse est de développer des métallodrogues comme nouvelle stratégie de vectorisation de drogues dans les cellules. Cette stratégie repose sur l’association d'une drogue active in vitro, et d’un ligand auxiliaire ayant des propriétés perméabilisantes ou inhibitrices de pompe d’efflux, dans un complexe qui jouera le rôle de chaperone. Les agents antibactériens utilisés sont des inhibiteurs (dérivés d’acides hydroxamiques) de peptide déformylase (PDF) et de méthionine aminopeptidase (MetAP) développés au laboratoire. Tout d’abord, une étude globale de la stratégie de vectorisation a été réalisée (i) étude de stabilité de métallodrogues modèles : en utilisant un acide hydroxamique fluorescent, nous avons montré que, seules, des métallodrogues à Co(III), à la différence de celles à Cu(II) et Fe(III), satisfaisaient aux conditions de stabilité compatibles avec les conditions de tests biologiques. (ii) Etude de la libération de la drogue : nous avons établi par une étude RMN 1H et UV-vis qu’en milieu tampon pH = 7,4, la libération de la drogue se faisait par échange de ligand avec un thiol exogène. Récemment, une nouvelle série d’inhibiteurs de PDF a été synthétisée au laboratoire. Elle est basée sur un squelette hétérocyclique à 5 chaînons fonctionnalisé par une chaîne en C4, puis via un espaceur monocarboné, à un acide hydroxamique. Les meilleurs résultats ont été obtenus avec un oxadiazole (AT002 16 µg/ml sur E. coli en présence de perméabilisant PMBN). Au cours de cette thèse, pour améliorer la lipophilie, des groupements aromatiques ont été fixés sur cet hétérocycle. Les MICs sur la souche d’E. coli sauvage n’ont pas été améliorées mais en présence de PMBN, le dérivé présentant la meilleure activité est le composé AT015 (2 µg/ml sur E. coli en présence de PMBN) qui a donc été choisi pour concevoir des métallodrogues. La métallodrogue réunit autour d’un métal deux parties: (i) un ligand auxiliaire fonctionnalisé via un espaceur par un perméabilisant peptidique analogue de peptide antimicrobien ou par un modulateur de l’efflux (ii) un acide hydroxamique inhibiteur de PDF. Au cours de la SAR réalisée en faisant varier la drogue, le ligand auxiliaire et le métal, nous avons montré que les meilleures métallodrogues permettent d’améliorer l’activité de la drogue sur la souche d’E. coli sauvage d’un facteur 16. Un des ligands auxiliaires fonctionnalisé par un tétrapeptide présente, seul, une activité sur une souche d’E. aerogenes résistante aux fluoroquinolones. Sur ce cas, l’activité biologique a été reliée, par des expériences de mapping par fluorescence, à son accumulation intracellulaire, en utilisant un analogue fluorescent de ce composéThe gram negative bacterias’ cell envelopes are the first line of defense against antibiotics. First thanks to the low permeability of the external membrane that prevents the penetration of the antibiotics, but also thanks to the efflux pumps that help expelling the antibiotics from the cell. These mechanisms prevent many compounds, potentially active in vitro, from reaching their targets, thus limiting the antimicrobial effect. To increase the molecules’ intracellular concentration is one of the means to restore their activity. This thesis’ objective is to develop metallodrugs as a new drug vectorization strategy in cells. We here associate an active drug in vitro and an auxiliary ligand with permeabilization or efflux pumps inhibition abilities in a complex playing the role of a chaperone. We used peptide deformylase (PDF) and methionine aminopeptidase (MetAP) inhibitors (derived from hydroxamic acids) developed at the laboratory as antimicrobial agents. I’ll begin with a global study of the vectorization strategy we’ve adopted (i) Stability study of the metallodrugs models: using a fluorescent hydroxamic acid, we showed that only Co(III) metallodrugs are in agreement with the stability conditions compatible with the biological tests, in opposition with the Cu(II) and Fe(III) ones. (ii) Drug release study: we showed in 1H NMR and UV-vis studies that in a buffer solution pH 7.4, a ligand exchange with an exogenous thiol is responsible for the drug release. Recently, a new series of PDF inhibitors was synthesized at the laboratory. It is composed of a 5 membered heterocyclic skeleton functionalized by a chain in C4 followed by an hydroxamic acid via a monocarbonated spacer. The best results were obtained with an oxadiazole (AT002 16 µg/ml with E. coli and PMBN as permeabilizing agent). During this thesis, to enhance lipophilicity, we attached aromatic groups on the heterocycle. CMIs on the E. coli strain have not been increased but the compounds displaying the best activity in presence of PMBN (AT015, 2 µg/ml with E. coli and PMBN) was chosen to conceive metallodrugs. The metallodrug is composed of a metal center and two other parts: (i) an auxiliary ligand functionalized via a spacer by a permeabilizing peptide, an antimicrobial peptide analogue, or by an efflux modulator. (ii) An hydroxamic acid PDF inhibitor. We showed that the best metallodrugs enhance the drug activity on the wild E.coli strain by a 16 factor, with the SAR we realized, changing the drug, the auxiliary ligand and the metal. One of the auxiliary ligands functionalized by a tetrapeptide show an activity on a fluoroquinolone-resistant E. aerogenes strain while alone. Utilizing a fluorescent analogous of this compound, we linked the biological activity to its intracellular accumulation with fluorescence mapping experiments
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Grare, Marion. "De la genèse d’une nouvelle classe d’antibactériens à base de polyphénols cycliques de type calixarène : études moléculaire(s), cellulaires(s) et structurale(s) en vue de l'identification des cibles d'action : le cas du para-guanidinoéthylcalix[4]arène." Thesis, Nancy 1, 2009. http://www.theses.fr/2009NAN10138/document.
Full textAbstract:
Trois inquiétudes, actuellement, dans le monde de la microbiologie médicale : la fréquence des infections nosocomiales, d'origine bactérienne dans plus de 60% des cas, la multiplication et la dissémination des résistances bactériennes, mais aussi la pénurie annoncée en molécules antibiotiques et antiseptiques. Il est indispensable de trouver de nouvelles molécules antibactériennes, avec un mécanisme d'action innovant. Nous présentons dans cette étude, l'évaluation d'une molécule innovante, calixarène purement synthétique, le para-guanidinoéthylcalix[4]arène (Cx1). Dans une 1ère partie de ce travail, nous avons montré que cette molécule se caractérise par : (i) une activité antibactérienne à large spectre, conservée sur des isolats cliniques tels que les SARM, les ERG ou les EBLSE ; (ii) une activité rapidement bactéricide, concentration-dépendante ; et (iii) une absence de cytotoxicité in vitro. Des interactions de type synergie sont obtenues avec de nombreux antibiotiques (ß-lactamines, fluoroquinolones, rifampicine, acide fusidique, tigécycline…) ; aucun antagonisme n'a été observé. Dans une 2ème partie, nous avons souligné l'absence de sélection de mutants résistants in vitro, après 30 passages, pour S. aureus et P. aeruginosa. Pour E. coli, des mutants résistants stables sont sélectionnés au delà de 15 ou 20 passages, avec un effet inoculum. Enfin, dans une 3ème partie, nous avons recherché la ou les cible(s) du Cx1 par diverses techniques, innovantes (microélectrophorèse, microscopie à force atomique) ou plus classiques (cytométrie en flux, liaison au LPS/LTA). L'ensemble des données recueillies converge vers l'existence d'une cible ou plusieurs cibles pariétales (liaison au LPS et au LTA, à d'autres structures ?). L'activité du Cx1 résulte en une modification des propriétés pariétales (densité de charge de surface, souplesse hydrodynamique, perméabilité membranaire) et en une augmentation de la rigidité bactérienne (pression osmotique). En conclusion, le Cx1 possède un potentiel intéressant en terme de nouvel antibactérien, mais de nombreuses inconnues demeurent encore concernant son mécanisme d'action. Cela laisse ouverte la porte à de nombreuses voies de recherche afin de mieux appréhender les cibles de cette molécule, et d'en optimiser les propriétésThe progressive reduction of the therapeutic effectiveness of the available antibiotics and antiseptics as a result of the spread of antimicrobial resistance underlines the urgency of the development of new classes of drugs for the treatment of infectious diseases. The major challenge is to find drugs that act against multiple multidrug-resistant strains, with a real new mechanism of action. The work presented here is an evaluation of the potential of the para-guanidinoethylcalix[4]arene (Cx1), as a new innovative antibacterial. In the first part of this work, we have demonstrated that Cx1 possess: (i) a broad-spectrum with an activity conserved against multidrug-resistant isolates such as MRSA, VRE or ESBL-producing Enterobacteriaceae; (ii) a rapid bactericidal and concentration-dependant activity; and (iii) an absence of cytotoxicity in vitro. Checkerboard studies have underlined a large number of synergies with numerous antibiotics (ß-lactamins, fluoroquinolones, rifampicin, fusidic acid, tigecycline…) ; no antagonism have been observed. In the second part, we have showed that Cx1 was not able to select resistant mutants with S. aureus and P. aeruginosa. For E. coli, we have observed resistant mutants beyond 15 or 20 passages, with inoculums effect. In the last part of this work, we have used various techniques in order to elucidate mechanism of action of Cx1: innovative techniques (microelectrophoresis, atomic force microscopy),and other more classical (flow cytometry, LPS/LTA sequestration). All data obtained conduct us to confirm our first hypothesis: Cx1 possess one or many targets on bacterial cell wall, and its activity was translated by wall changes (surface charge density, hydrodynamic properties, membrane permeability), and increase of bacterial rigidity (increase of turgor pressure). In conclusion, Cx1 appears as a good candidate as new antibacterial or adjuvant in anti-infectious therapy, but its real mechanism of action remains unknown. Numerous research ways remain to be investigated in order to better understand of targets of Cx1, and to optimize its antibacterial properties
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Legras, Marc. "Diffusion et transport facilité à travers les membranes sulfoniques planes et tubulaires." Rouen, 2000. http://www.theses.fr/2000ROUES013.
Full textAbstract:
Le couplage transport réaction est une des voies possibles pour accroître la permsélectivité d'une membrane ionique (M. E. I) vis-à-vis d'espèces non-ioniques. L'objectif de ce travail est d'étudier le transport facilité (T. F. ) de la phénylalanine (Phe) à travers les M. E. I. Perfluorosulfoniques planes et tubulaires. L'accent a été mis sur l'influence du contre-ion sur les propriétés d'équilibre et de transport. Les études d'équilibre montrent l'importance du rôle de l'eau dans la membrane. Des expériences de sorptions d'eau en microgravimétrie (I. G. A. ), ont montré la complexité des interactions eau/membrane dans les Nafion®. Les études de transport de Phe mettent en évidence l'influence des couches de polarisation (CLD). Dans l'optique d'une amélioration des transferts de matière, nous avons expérimenté l'influence de la configuration de la membrane et des conditions hydrodynamiques, sur les flux de Phe dans un système à symétrie cylindrique. Il en résulte que la présence de turbulateurs, placés périodiquement à la surface d'une fibre creuse, provoque une destruction des CLD et un gain de plus de 50% des débits transmembranaires. Une base théorique permettant le choix des paramètres caractéristiques de la membrane est établie et permet de modéliser les processus de transport d'acide aminé dans les M. E. I. L'étude expérimentale et systématique des flux de Phe, à travers la Nafion® plane et tubulaire, en régime stationnaire - pour divers débits et diverses concentrations sources- a permis d'exploiter ce modèle (la fonction de flux). Le bon accord obtenu entre les prévisions théoriques et les résultats expérimentaux a justifié notre démarche.
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Dé, Emmanuelle. "Etude fonctionnelle de la protéine membranaire OprF de Pseudomonas fluorescens et son implication dans la variation de résistance aux antibiotiques en fonction de la température de croissance bactérienne." Rouen, 1996. http://www.theses.fr/1996ROUES006.
Full textAbstract:
La bactérie psychrotrophe Pseudomonas fluorescens MF0 est plus sensible à la mezlocilline (β-lactamine) à basse température de culture (8°C) qu'à la température optimum de croissance (28°C). Cette modification de la résistance bactérienne serait due à une modulation de la pénétration de l'antibiotique à travers la membrane externe en fonction de la température de culture, via des protéines canaux appelées porines. Après avoir montré que la composition protéique des membranes externes ne présentait aucune différence significative pour des bactéries issues de cultures à 8°C et 28°C, un changement de la structure et de la fonction de la porine majoritaire de la membrane externe a été envisagé pour expliquer ce phénomène. La protéine majoritaire de 32 kDa de P. Fluorescens MF0 a donc été extraite et purifiée à partir de cultures à différentes températures afin de la reconstituer dans les bicouches lipidiques planes. Les résultats montrent que la diminution de la température de croissance bactérienne entraîne une diminution des valeurs de conductances unitaires de cette protéine (250 pS dans NaCl 1 M pour des cultures à 28°C et 80 pS pour des cultures à 8°C). Ce travail a été étendu à une autre bactérie psychrotrophe P. Fluorescens OE 28. 3 isolée du sol et a conduit aux mêmes résultats après reconstitution de la protéine majoritaire OprF extraite de cultures à 8°C et 28°C. La comparaison des porines OprF de P. Fluorescens MF0 et OE 28. 3 (séquences N-terminales, amplification PCR du gène OprF, réactions immunologiques) montrent : 1) une forte homologie de séquence (94% d'identité) pour ces protéines 2) qu'elles sont exprimées à partir d'un seul gène OprF en fonction de la température de culture. Des modifications de structure (ex : interactions avec le LPS) de cette protéine sont envisagées pour expliquer la variation de la taille du canal en fonction de la température de croissance bactérienne.
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Chokki, Jeannette. "Vulnérabilité du procédé couplant charbon actif en poudre et ultrafiltration : vieillissement des membranes et rétention de composés organiques polaires." Thesis, Poitiers, 2019. http://www.theses.fr/2019POIT2275/document.
Full textAbstract:
La dégradation des ressources en eaux par la présence de matières organiques (MO) et de micropolluants nécessite la mise en œuvre de procédés de production d’eau potable robustes. Dans ce contexte, de nombreuses municipalités françaises comme Saint Cloud et Angers ont décidé d’implanter un procédé d’adsorption sur charbon actif en poudre couplé à l’ultrafiltration (CAP/UF). Le CAP est utilisé en amont des membranes afin d’éliminer les traces de micropolluants tandis que les membranes d’UF assurent une qualité d’eau produite excellente et constante au cours du temps. Cependant, les retours d’expérience montrent une dégradation des performances de séparation liée notamment à un vieillissement des matériaux membranaires ainsi qu’une vulnérabilité du procédé vis-à-vis de certains micropolluants émergents tels que les composés organiques polaires (PMOCs). Les travaux réalisés au cours de cette thèse visent à mieux comprendre les conséquences du vieillissement chimique des membranes utilisées dans ces procédés et d’évaluer l’efficacité d’élimination de micropolluants afin de proposer des voies d’optimisation. Plus particulièrement il a été montré que la cause principale de vieillissement est l’exposition au chlore des membranes durant les phases de lavage modifiant les propriétés des matériaux. En effet, les nombreux outils de caractérisation utilisés ont permis de mettre en évidence une corrélation entre la dégradation de l’agent hydrophile des membranes et l'augmentation de la perméabilité lors de l'exposition au chlore. L’étude des performances membranaires a mis en évidence une altération de la résistance au colmatage vis-à-vis de la MO pour les membranes exposées au chlore. Cependant les résultats obtenus pour évaluer les performances de sélectivité des membranes vis-à-vis de virus n’ont pas souligné d’altérations majeures. Les essais d’adsorption ont démontré l’efficacité limitée du CAP pour la rétention des PMOCs. En effet, parmi les molécules testées, les molécules aromatiques les plus hydrophobes sont efficacement adsorbées par le CAP tandis que les plus polaires sont peu éliminées. Finalement, l’utilisation de la nanofiltration ou l’osmose basse pression, présentant des taux de rétention en moyenne supérieurs à 90%, en font des solutions techniques de choix pour l’élimination des PMOCsThe degradation of water resources by the presence of organic matter (OM) and micropollutants requires the implementation of robust drinking water production processes. In this context, many French municipalities such as Saint Cloud and Angers have decided to set up a powdered activated carbon adsorption process coupled to ultrafiltration (PAC/UF). PAC is used upstream of membranes to remove traces of micropollutants while UF membranes provide excellent and constant water quality over time. However, the feedback reveals a degradation of the separation performances related in particular to an aging of the membrane materials and a vulnerability of the process towards some emerging micropollutants such as polar organic compounds (PMOCs).The work carried out during this thesis aims to better understand the consequences of the chemical aging of the membranes used in these processes and to evaluate the micropollutants removal efficiency in order to propose optimization ways. More particularly it has been shown that the main cause of aging is the chlorine exposure of the membranes during washing phases modifying the properties of the materials. In fact, the numerous characterization tools used have made it possible to demonstrate a correlation between the degradation of the hydrophilic agent of the membranes and the increase in the permeability during exposure to chlorine. The study of the membrane performances revealed an alteration of the resistance to fouling towards OM for membranes exposed to chlorine. However, the results obtained to evaluate the selectivity performance of the membranes with respect to viruses have not underlined any major alterations. Adsorption tests have demonstrated the limited efficiency of PAC for PMOCs removal. Indeed, among the molecules tested, the most hydrophobic and aromatic molecules are effectively adsorbed on PAC while the more polar ones are slightly adsorbed. Finally, the use of nanofiltration or low-pressure reverse osmosis, with average rejection rates over 90%, makes them the technological solutions of choice for the removal of PMOCs
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Maitre, Magali. "Le chaperon moléculaire Lo18 de Oenococcus oeni : caractérisation de ses activités en lien avec sa plasticité oligomérique." Phd thesis, Université de Bourgogne, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00907573.
Full textAbstract:
O. oeni est une bactérie lactique responsable de la fermentation malolactique des vins. Un des mécanismes impliqués dans la survie de O. oeni dans ce milieu requière la synthèse de la protéine de stress de faible masse moléculaire (sHsp) Lo18. Cette sHsp exerce une activité de chaperon sur des substrats protéiques et lipidiques.Des variations de pH (5 à 9) ont permis de moduler l'oligomérisation de Lo18 in vitro et de démontrer que sa plasticité oligomérique est un élément clé pour ses activités. Des observations de la sHsp par microscopie électronique ont montré que Lo18 s'organise à pH 5 en un 16-mère composé de deux anneaux superposés ayant comme structure de base probable un dimère.La réponse adaptative de O. oeni a également été caractérisée suite à des stress fluidifiant sa membrane plasmique. Une étude transcriptomique a révélé une augmentation du taux de transcrits pour des gènes dont les produits interviennent dans la biosynthèse des acides gras membranaires saturés et insaturés lors d'un stress à l'alcool benzylique. Des approches physiologique, moléculaire et structurale ont permis de proposer un modèle décrivant l'action chronologique de Lo18 en lien avec ses deux activités de chaperon en réponse à un stress éthanol. Dès l'application du stress, Lo18 est fortement synthétisée et agit préférentiellement à la membrane sous une forme quaternaire simplifiée. O. oeni modifie alors sa composition en acides gras membranaires, affectant ainsi l'affinité de Lo18 pour la membrane ainsi que ses activités.Les résultats obtenus permettent non seulement, de mieux comprendre le fonctionnement et le rôle de Lo18 dans la réponse au stress de O. oeni mais aussi de mettre en exergue les mécanismes d'adaptation préservant l'intégrité de sa membrane cellulaire, élément essentiel dans la survie et la performance des ferments malolactiques dans le vin
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Leclaire, Marie-Eve. "Validation et conditionnement d'un test PAMPA amélioré pour l'évaluation de la perméabilité membranaire de médicaments." Thèse, 2014. http://hdl.handle.net/1866/11948.
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Lebel, Geneviève. "Rôle des boucles interhélicales du domaine I dans la formation de pores transmembranaires par la toxine insecticide Cry1Aa du bacille de Thuringe." Thèse, 2003. http://hdl.handle.net/1866/14921.
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Gagnon, Marilène. "Transport d'eau généré par le cotransport Na+/glucose : nouvelle interprétation basée sur les effets distincts des flux entrants de cations et de glucose." Thèse, 2003. http://hdl.handle.net/1866/14750.
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