Dissertations / Theses on the topic 'Placenta – Maladies'

L’herpès virus de type 5 ou cytomégalovirus humain (CMVH) est la 1ère cause d’infection congénitale malformative. Dans le monde, 1 % des nouveau-nés sont infectés par ce virus. L’infection congénitale à CMVH est un problème de santé publique majeur en raison des séquelles sévères chez le foetus et le nouveau-né (microcéphalie, hépatomégalie, avortement spontané) et de l’absence de traitements. A ce jour, les mécanismes de transmission transplacentaire du virus de la mère au foetus restent encore à élucider. Il existe plusieurs molécules (ganciclovir, cidofovir, foscarnet, valaciclovir), actuellement utilisées pour traiter les maladies à CMV (rétinite, pneumonie. . ). Ce sont toutes des inhibiteurs de la polymérase virale pUL54, protéine indispensable à la réplication du virus dans la cellule hôte. Ces traitements deviennent souvent inefficaces suite à l’émergence de mutations de résistance et sont responsables de toxicités cellulaires, les rendant inutilisables chez la femme enceinte. Notre travail a consisté à développer deux modèles d’infection placentaire qui miment l’infection placentaire in situ : un modèle ex vivo et un modèle in vivo chez la souris. Ces modèles ont permis d’une part de suggérer une voie de propagation du virus dans les villosités flottantes du placenta, et d’autre part, de tester l’efficacité de sept nouvelles molécules anti-CMVH. Dans le but de réduire, voire d’éradiquer le virus dans les cellules et de diminuer la probabilité d’émergence de mutations de résistance, nous avons opté pour des combinaisons thérapeutiques de ces nouvelles molécules qui ciblent des stades différents de la réplication virale du CMVH. Six des sept molécules sélectionnées ont montré une forte capacité d’inhibition de l’infection CMVH in vitro et ex vivo. Les combinaisons thérapeutiques améliorent l’efficacité de chaque molécule administrée seule, et peuvent parfois conduire à une inhibition de l’infection de plus de 90 %. Nos résultats sont très encourageants et indiquent que la bithérapie serait une approche thérapeutique particulièrement intéressante à développer et étudier pour éradiquer le CMVH dans la cellule hôte
Herpes virus type 5 or human cytomegalovirus (HCMV) is the first cause of congenital malformation infection. In the world, 1% of newborns are infected with this virus. Congenital HCMV infection is a major public health problem due to severe sequelae in the fetus and newborn (microcephaly, hepatomegaly, spontaneous abortion) and the absence of treatments. So far, mechanisms of transplacental transmission from mother to fetus remain to be elucidated. There are several molecules (ganciclovir, cidofovir, foscarnet, valaciclovir), currently used to treat CMV disease (retinitis, pneumonia. . ). These are all inhibitors of the viral polymerase pUL54, essential protein for virus replication in the host cell. These treatments often become ineffective due to the emergence of resistance mutations and are responsible for cellular toxicity, rendering them unsuitable for pregnant women. Our work consisted in develop two placental infection models that mimic in situ placental infection: an ex vivo model and an in vivo mouse model. These models on one hand mimic a way of spreading the virus in the floating villi of the placenta, and secondly, allowed to test the effectiveness of seven new anti-HCMV molecules. In order to reduce or eradicate the virus in cells and decrease the likelihood of emergence of resistance mutations, we opted for therapeutic combinations of these new molecules that target different stages of the viral replication of HCMV. Six of the seven selected molecules showed strong inhibition of HCMV infection in vitro and ex vivo capacity. Combination therapy improves the efficiency of each molecule administered alone, and can sometimes lead to an inhibition of infection of over 90%. Our results are very encouraging and show that the combination would be particularly interesting to study and develop therapeutic approach to eradicate HCMV in the host cell

Le Cytomégalovirus humain (HCMV) est un membre de la famille des Herpesviridae. L'infection congénitale à HCMV, avec une incidence de 0. 2-2% des naissances vivantes est la première cause d'atteintes neurosensorielles acquises. La transmission materno-fœtale du virus est transplacentaire, hématogène. Le placenta est toujours infecté avant le fœtus et est le siège d'une véritable pathologie qui associe des phénomènes de villite, de fibrose et de nécrose. Elle est peu décrite, notamment en ce qui concerne le mécanisme physiopathologique qui la sous-tend. Notre travail a eu pour objectif de caractériser l'environnement placentaire au cours de l'infection à HCMV. Dans un premier temps, nous avons mis en place un modèle d'histoculture de tissus placentaires. En effet, l'étude de l'infection placentaire sur des modèles animaux est rendu difficile compte tenu de la spécificité d'espèce du HCMV et des particularités anatomiques du placenta humain. Par ailleurs, les modèles in vitro repose essentiellement sur des lignées cellulaires ou des cultures de cytotrophoblastes primaires. Notre modèle, nous a permis d'infecter ex vivo des explants placentaires par une souche clinique de HCMV, le VHL/E et d'étudier ce système complexe sur une durée de 21 jours sans altération anatomique ou fonctionnelle du placenta (Lopez H, Benard M, Davrinche C, Casper C et al. Novel model of placental tissue explants infected by cytomegalovirus reveals different permissiveness in early and term placentae and inhibition of indoleamine 2,3-dioxygenase activity. Placenta. 2011 Jul;32(7):522-30. ) Nous avons ensuite utilisé notre modèle afin d'étudier la pathologie placentaire induite par l'infection à HCMV et en premier lieu la villite. Cette villite est un infiltrat lymphomonocytaire classiquement décrit comme associé à l'infection placentaire à HCMV et susceptible d'être impliqué dans la transmission materno-fœtale. Les mécanismes conduisant à cette villite sont inconnus. A partir de placentas infectés in vivo, ex vivo et de cultures d'HUVECs (cellules endothéliales de veines ombilicales humaines), nous avons montré que le HCMV activait la voie des leucotriènes (LT) et plus précisément la 5-lipoxygénase (5-LO) surtout au niveau des cellules endothéliales chorioniques. La 5-LO est la principale enzyme responsable de la synthèse de LTB4, une puissante chémokine, à l'origine d'une inflammation. Notre étude a montré que la voie des leucotriènes est possiblement impliquée dans les mécanismes à l'origine de la villite (article soumis) Dans un troisième temps, compte tenu de la place des cellules endothèliales à la fois dans le cycle réplicatif du HCMV et dans la constitution de la villite, nous avons étudié l'impact de l'infection à HCMV sur la microvascularisation placentaire. Lors de l'infection à HCMV, nous avons observé une diminution significative de l'expression de CD34, un marqueur de surface présent sur les cellules endothéliales. Cette diminution de la microvascularisation a pu être rattachée à un défaut de migration des cellules endothéliales. Cette anomalie de migration est en rapport avec un stress oxydatif significativement augmenté et une sécrétion très importante d'interleukine-6 (IL-6). Notre étude a permis de mettre en avant le rôle des cellules endothéliales dans la pathologie placentaire provoquée par le HCMV. (manuscrit) Au total, en mettant en place une méthode d'histoculture d'explants placentaires, nous avons étudié le placenta infecté par le HCMV. Nous avons montré que le HCMV est responsable d'une pathologie placentaire avec un remodelage tissulaire, principalement une villite, associée à une activation de la voie des leucotriènes (5-LO/LTB4). Nous avons aussi montré la diminution de la microvascularisation placentaire lors de l'infection, associée à un stress oxydatif et une sécrétion importante d'IL-6
The human cytomegalovirus (HCMV) is a member of the Herpesvirus family. Congenital CMV infection, with an incidence of 0. 2-2 % of live births is the leading cause of acquired sensorineural damage. Maternal-fetal transmission is transplacental, hematogenous. The placenta is always infected before the fetus and is the seat of a real pathology associating villitis, fibrosis and necrosis. Few papers described it, especially regarding the pathophysiological mechanism that underlies it. Our work aimed to characterize the placental environment during CMV infection. At first, we developed an histoculture placental tissue model. Indeed, the study of placental infection in animal models is made difficult due to the CMV species specificity and anatomical features of the human placenta. In addition, in vitro models are based primarily on cell lines or primary cytotrophoblasts cultures. Thanks to our model, we were able to infect ex vivo, placental explants with a clinical strain of CMV, VHL / E and to study this complex system over a period of 21 days without anatomical or functional impairment of the placenta. (Lopez H , Benard M , Davrinche C , Casper C and al. Novel model of placental tissue explants infected by cytomegalovirus reveals different permissiveness in early and term placentae and inhibition of indoleamine 2,3- dioxygenase activity Placenta 2011 Jul ;32 (7):522 -30. ) We then used our model to study the placental pathology induced by CMV infection, mainly the villitis. Villitis is a lymphohistiocytic infiltrates classically described as associated with placental CMV infection and may be involved in maternal-fetal transmission. The mechanisms leading to this villitis are unknown. Using in vivo, ex vivo infected placentas and HUVECs (human umbilical vein endothelial cells) cultures, we showed that CMV activated the leukotrienes (LT) pathway and more specifically the 5-lipoxygenase (5-LO) especially in the chorionic endothelial cells. 5-LO is the main enzyme responsible for the synthesis of LTB4, a potent chemokine that causes inflammation. Our study showed that the leukotriene pathway is possibly involved in the mechanisms underlying the villitis. (submitted) In a third step, given the role of endothelial cells in both the replicative cycle of CMV and the constitution of the villitis, we studied the impact of CMV infection on the placental microvasculature. During CMV infection, we observed a significant decrease in the expression of CD34, a surface marker present on endothelial cells. This decrease in the microvasculature has been linked to a defect in endothelial cell migration. This abnormal migration is related to oxidative stress increased significantly and to a very important secretion of interleukin -6 (IL-6). Our study highlighted the role of endothelial cells in the placental pathology caused by CMV. (manuscript) In total, by implementing a placental explants histoculture method, we studied the CMV-infected placenta. We have shown that CMV is responsible for placental pathology characterized by tissue remodeling, mainly a villitis in connection with activation of the leukotriene pathway (5-LO/LTB4). We also showed the decrease in placental microvasculature during infection, associated with oxidative stress and a significant secretion of IL-6

Chez l'humain, les études épidémiologiques montrent un lien statistique entre la chorioamniotite maternelle et les lésions cérébrales du nouveau-né prématuré. L'inflammation placentaire, secondaire à l'infection, semble déterminante pour la constitution de ces lésions. Actuellement, aucune stratégie thérapeutique pour les prévenir n'est validée. Nous avons élaboré un modèle expérimental sur ce thème : après inoculation intrautérine d'Escherichia Coli chez la lapine gestante, nous observons constamment, dans le tissu cérébral, une mort cellulaire diffuse. . . . . . . Nous avons pu décaler le délai d'apparition de la mort cellulaire : en introduisant une antibiothérapie maternelle précoce, celle ci n'apparaît qu'à partir de 60 heures après l'infection. Une période de latence appelée " fenêtre thérapeutique " est ainsi définie. Nous proposons d'utiliser ce modèle pour préciser les mécanismes des lésions cérébrales associées à l'infection et pour tester des stratégies neuroprotectrices
In the human epidemiological studies, a significant link between an intrauterine infection and the cerebral lesions in the preterm newborns has been reported. The inflammatory placental reaction developed during the infection could have an important contribution for the development of the cerebral lesions. Currently, any preventive strategies for these lesions has been validated. We report an experimental model about this subject: after an intrauterine Escherichia Coli inoculation in the pregnant rabbit, we observe a cerebral cell death with a high reproducibility. . . . . . Cerebral cell death is delayed until 60 hours after the inoculation with a maternal antibiotic treatment which is administered precociously. This delay constitutes a latent period which is a possible "therapeutic window". We proposed to use this model to study the molecular mechanisms of cerebral lesions associated with intrauterine infection and to test neuroprotective strategies

Le placenta humain est un organe indispensable au maintien de la grossesse et au développement fœtal. Son unité structurale et fonctionnelle est la villosité choriale, constituée principalement de cytotrophoblastes qui se différencient selon la voie villeuse endocrine ou extravilleuse invasive. Le développement intense du placenta et ses fonctions multiples requièrent des besoins en énergie importants. La régulation du métabolisme énergétique placentaire passe, en partie, par le contrôle de l’activité mitochondriale.La mitochondrie est l’organelle clé du métabolisme énergétique. Cependant, elle intervient dans de nombreuses autres fonctions cellulaires telles que l’apoptose et la biosynthèse des hormones stéroïdes. Des études récentes suggèrent que les mitochondries sont impliquées dans la différenciation cellulaire.Le récepteur apparenté aux récepteurs des oestrogènes-γ, (ERRγ), est un facteur de transcription qui joue un rôle crucial dans le contrôle du métabolisme énergétique. Des travaux préliminaires ont montré qu’ERR est fortement exprimé dans le placenta humain.Dans ce travail, nous nous sommes intéressés à l’implication d’ERRγ dans le développement placentaire.Dans une première partie, nous avons caractérisé l’expression d’ERRγ dans les trophoblastes de placentas humains de 1er et de 3ème trimestre. Nous avons montré que l’expression d’ERRγ i) augmente au cours de la grossesse et ii) est plus importante dans les cytotrophoblastes villeux en comparaison aux cytotrophoblastes extra-villeux.Dans une seconde partie, nous avons montré que la différenciation des cytotrophoblastes villeux est associée à des modifications du métabolisme énergétique et du contenu mitochondrial. De plus, nous avons clairement démontré qu’ERRγ contrôle positivement la différenciation des trophoblastes villeux en modulant les fonctions mitochondriales.Enfin, nous avons montré qu’ERRγ est moins exprimé dans les placentas issus de retards de croissance intra-utérins en comparaison à des placentas normaux. De plus, la diminution d’ERRγ est associée à une baisse du contenu mitochondrial placentaire.L’ensemble de ce travail a permis de mettre en évidence le rôle clé d’ERRγ et des mitochondries dans le développement du placenta humain
Human placenta is a vital organ for pregnancy support and fetal development. The chorionic villi is the structural and functional unit of the placenta and is mainly constituted by trophoblastic cells. The trophoblast differentiate in villous endocrine and extra-villous invasive trophoblast. Placental development and its numerous functions require the availability of high energy. Placental energetic metabolism control is partially mediated by the regulation of mitochondrial activity.Mitochondria are key organelles of the energetic metabolism. However, mitochondria are involved in numerous other cellular functions such as apoptosis and steroid hormone biosynthesis. Moreover, recent studies suggest that mitochondria are involved in cell differentiation.Estrogen related receptor-γ (ERRγ) is a transcriptional factor implicated in the control of energetic metabolism. Preliminary studies showed that ERRγ is highly expressed in human placenta.In this work, we decided to study ERRγ implication in human placental development.In a first part, we characterized ERRγ expression in trophoblast from first and third trimester human placentas. We showed that ERRγ expression i) increased during pregnancy and ii) was higher in villous than extra-villous trophoblasts.In a second part, we showed that villous trophoblast differentiation was associated with modifications of energetic metabolism and mitochondrial content. Moreover, we clearly demonstrated that ERRγ positively controled villous differentiation by the modulation of mitochondrial functions.In a last part, we showed that ERRγ was less expressed in placentas from intra-uterine growth restriction as compared to non-pathological placentas. Moreover, this down-regulation was associated with a decrease of mitochondrial content.This work thus showed, for the first time, that ERRγ and mitochondria played a key role in placental development

: L’économie de la filière équine repose aujourd’hui sur la production de chevaux athlètes performants sur le long terme. Le métabolisme de la jument gestante peut programmer le développement du poulain, sa santé à long terme et donc ses performances sportives à l’âge adulte. De nombreuses pratiques d’élevage peuvent modifier le métabolisme maternel, telles que la nutrition durant la gestation, la surnutrition durant la vie de la jument (surpoids et obésité) et le nombre de poulains produits par la jument (parité). L’objectif de ce travail était d’étudier les effets du métabolisme maternel durant la gestation sur la fonction et la structure placentaire à terme, la croissance osseuse, le métabolisme énergétique, l’inflammation systémique et le statut ostéoarticulaire des poulains en croissance. Un premier modèle de perturbation nutritionnelle en fin de gestation a été développé en comparant des juments ayant ingéré uniquement des fourrages au cours de la gestation ou bien des fourrages et des concentrés à partir de la mi-gestation. Ce modèle a permis de montrer que la supplémentation en concentrés altérait le métabolisme glucidique maternel, la fonction placentaire ainsi que le statut ostéoarticulaire et la réponse métabolique à un challenge de surnutrition chez le poulain. D’autre part, une perte d’état trop importante associée à une qualité/quantité de foin insuffisante entrainait un retard de maturité des fonctions de métabolisme énergétique et de reproduction mâle chez les poulains. Un deuxième modèle a ensuite été développé pour étudier l’effet de la primiparité. Cette étude a confirmé que la croissance fœtale des poulains issus des juments primipares était réduite et que ces poulains demeuraient plus petits avec un métabolisme glucidique et une maturation testiculaire retardés par rapport aux poulains issus de juments multipares. Le troisième modèle développé s’est intéressé à l’effet de l’obésité maternelle dès la conception. En effet, la prévalence de surpoids et d’obésité est de plus en plus importante au sein de la filière équine. Ce dernier modèle a permis de montrer que l’obésité maternelle associée à une résistance à l’insuline et une inflammation systémique augmentées entrainait une augmentation de la résistance à l’insuline, de l’inflammation systémique et du développement de lésions d’ostéochondrose chez les poulains. L'ensemble de ces résultats met en avant la relation entre la résistance à l’insuline maternelle, l’inflammation maternelle et le développement de lésions d’ostéochondrose chez les poulains durant la croissance, mais également entre sous-nutrition utérine et retard de maturité. Ces observations vont permettre de développer de nouvelles recommandations nutritionnelles pour les poulinières
The economy of the equine industry is based on the production of high performance athlete horses. The metabolism of the pregnant mare can program the development of the foal, its long-term health and therefore its athletic performance at adulthood. Many breeding practices can modify maternal metabolism, such as nutrition during pregnancy, overnutrition during the mare's productive life (overweight and obesity) and the number of foals produced by the mare (parity). The aim of this work was to study the effects of maternal metabolism during pregnancy on placental function and structure, as well as bone growth, energy metabolism, systemic inflammation and osteoarticular status in growing foals. In a first approach, mares fed with forage only during gestation were compared to mares fed forage and concentrates from mid-gestation. Supplementation with concentrates altered maternal carbohydrate metabolism and placental function. In weaned foals, the osteoarticular status and the metabolic response to an overnutrition were also affected by the use of concentrates in maternal nutrition. Conversely, mares fed forage only lost body condition, which led to a delay in the post-natal maturation in terms of energy metabolism and testicular function in foals. In a second approach, the effect of primiparity was studied. Foals born to primiparous mares were growth restricted at birth and had a long-term maturational delay in bone growth, carbohydrate metabolism and testicular function. Finally, given the current high prevalence of overweight and obesity in the equine species, the effects of maternal obesity were studied. Maternal obesity associated with increased maternal insulin resistance and systemic inflammation resulted in increased insulin resistance, systemic inflammation, and increased incidence of osteochondrosis in foals. Altogether, these results highlight the relationship between maternal insulin resistance, maternal inflammation and the development of osteochondrosis lesions in foals during growth, but also between in utero undernutrition and maturation delay. These observations will contribute to adjust nutritional recommendations to broodmares

La restriction de croissance intra-uterine et une croissance postnatale trop rapide sont reconnues comme des facteurs de risques des maladies cardiovasculaires de l'adulte. Les mecanismes qui en sont responsable ne sont pas reellement connus. Au cours de ce travail de these, 2 approches ont ete suivies a l'aide d'un modele rat. La 1ere partie a pour but de caracteriser a l'aide de microarrays des alterations precoces de l'expression de genes du placenta et du rein de ratons hypotrophes. Une vue hierarchique des mecanismes regulant massivement des familles de genes modules ainsi qu'une regulation specifique des facteurs de transcription dans ces 2 organes. La 2eme partie a pour but d'evaluer les effets a tres long terme chez le rat d'une suralimentation postnatale. Une augmentation de la pression arterielle et du nombre de glomerules associee a des alterations de la structure renale ont ete observes chez les ratons hyperalimentes. La caracterisation d'alterations specifiques de l'expression de genes et de leurs regulations au niveau placentaire et renale vise a mieux comprendre les mecanismes impliques dans l'adaptation du fŒtus a des circonstances deleteres. Par ailleurs, la croissance postnatale via des effets renaux autre que le deficit nephronique, pourrait egalement intervenir dans le developpement a long terme des maladies cardiovasculaires. Ainsi la comprehension des mecanismes impliques dans l'origine precoce des maladies de l'adulte ouvre actuellement de nouvelles voies diagnostiques par l'identification de marqueurs precoces de ce risque et pourrait a plus long terme permettre de developper des voies therapeutiques, pharmacologiques ou nutritionnelles
Intra-uterin growth restriction (iugr) and postnatal overfeeding is an important cause of the metabolic syndrome and cardiovascular diseases in adulthood. However, the detailed mechanisms of such programming are still incompletely known. Two experimental approaches in the rat were used in this work of thesis: first, protein depletion during the gestation of rat females has been widely used as a model for human. A transcriptome analysis of control and protein-deprived rat placentas and kidneys was used to better understand the molecular basis of early origin of the diseases in adulthood. Our approach permitted the proposition of hypotheses on a hierarchy of gene inductions/repressions leading to massive transcriptional alterations in the iugr placenta and kidney. Moreover, postnatal growth via renal effects other than glomerular number reduction are likely to contribute to arterial hypertension induced by early postnatal overfeeding. Thus, the comprehension of the mechanisms imply in the early origin of cardiovascular and metabolic diseases in adulthood, currently opens news diagnostic ways by the identification of early markers of this risk and could later on ollow to develop therapeutic, pharmacological or nutritionalways

Le placenta humain est un organe indispensable au bon déroulement de la grossesse. La villosité choriale est l’unité structurale et fonctionnelle du placenta. Elle est constituée essentiellement de cellules trophoblastiques. Les cytotrophoblastes extra-villeux (CTEV) présentent des propriétés invasives et assurent l’ancrage du placenta dans l’endomètre maternel. De plus, une apoptose physiologique assure le renouvellement des cytotrophoblastes tout au long de la grossesse.Le Facteur Préimplantatoire (PIF) est un peptide de 15 acides aminés, sécrété par des embryons viables. Le PIF exerce un effet autocrine positif sur le développement embryonnaire. Le PIF est également impliqué dans le contrôle de l’immunité et de l’inflammation dans divers types cellulaires.Au cours de ce travail de thèse, nous nous sommes intéressés aux rôles du PIF dans le développement placentaire humain. Dans un premier temps, nous avons caractérisé l’expression protéique du PIF dans des placentas humains de 1er et 3ème trimestre de grossesse.Nous avons montré que i) l’expression du PIF diminue au cours de la grossesse et ii) le PIF est majoritairement exprimé dans les CTEV.Dans un second temps, nous avons mis en évidence que le PIF i) favorise l’invasion trophoblaste et ii) inhibe l’apoptose des CTEV en régulant la voie de signalisation de p53.Par ailleurs, des altérations de l’invasion et de l’apoptose trophoblastiques sont associées à des pathologies de la grossesse telles que la pré-éclampsie et le retard de croissance intra-utérin. Ainsi, dans un dernier temps nous avons montré que l’expression du PIF est diminuée dans des placentas humains de 3ème trimestre issus de grossesses pathologiques par comparaison avec des grossesses normales.L’ensemble de ces résultats démontrent que le PIF est un nouvel acteur de la placentation humaine. De plus, le PIF pourrait être considéré comme un nouveau biomarqueur des pathologies de la grossesse
Human placentation is a critical step in the establishment of a successful pregnancy. The chorionic villus constitutes the structural and functional unit of the placenta. The extravillous trophoblast (EVT) is a placental cell type that differentiates from the highly proliferative cytotrophoblast located at the base of the anchoring villous. EVT have invasive properties, essential for placenta anchoring in the endometrium and uterine artery remodeling. Moreover, programmed cell death is an active process required for normal trophoblastic cell turnover during pregnancy.PreImplantation Factor (PIF) is a 15-amino-acid peptide secreted by developing embryos. PIF exerts autotrophic and protective effects on the embryo. PIF is also implicated in the control of immune and inflammatory processes in various cell types.In this work, we aimed to determine the direct effects of PIF on human placental development.In a first part, we characterized PIF protein expression in first and third trimester human placentas. We showed that PIF protein expression i) decreased over the course of the pregnancy and ii) was higher in EVT compared to villous trophoblast.In a second part, we showed that PIF i) enhanced pro-invasive capacities and ii) prevented cell death by regulating p53 signaling pathway in human EVT.Dysregulation of trophoblastic invasion and apoptosis have been associated with pregnancy pathologies. Thereby, in a last part, we showed that PIF protein expression was lower in placentas from preeclampsia and intra-uterine growth restriction as compared with non-pathological placentas. Altogether, we highlighted for the first time, that PIF is a new positive regulator of placental functions. PIF could be considered as a novel biomarker of a favorable outcome of pregnancy

Le dépistage et le diagnostic de l’insuffisance placentaire (IP), qu’il s’agisse du retard de croissance intra-utérin (RCIU) ou de la prééclampsie (PE), sont des enjeux majeurs de santé publique. En pratique clinique, les propriétés mécaniques du placenta ne sont pas explorées, pourtant des modifications de son architecture tissulaire pourraient engendrer des variations d’élasticité. Parmi les méthodes d’élastographie ultrasonore (US), l’élastographie transitoire paraît adaptée pour une telle application. Cette technique consiste à calculer la vitesse de l’onde de cisaillement (Cs) générée par une vibration externe se propageant dans le milieu considéré. Les valeurs d’élasticité obtenues à partir des méthodes US actuelles ne sont calculées qu’à une fréquence unique. Une modification structurelle du tissu pouvant correspondre à une loi de puissance particulière de la dispersion fréquentielle de Cs, nous avons évalué l’intérêt d’une approche multifréquentielle pour distinguer l’élasticité des placentas normaux et celle de placentas présentant des signes d’IP au troisième trimestre de la grossesse. Nous avons développé un dispositif préliminaire en onde plane (pour l’exploration ex vivo) permettant de valider le principe de la méthode proposée, puis un dispositif d’élastographie transitoire 2D (exploration ex vivo et in vivo). Les données sont ajustées au moyen d’un modèle rhéologique fractionnaire dans lequel le comportement en fréquence est modélisé par une loi de puissance (exposant n du modèle). Nous avons montré que les placentas RCIU présentent des valeurs de Cs et n inférieures à celles des placentas normaux ou des PE. Cette diminution de n pourrait s’expliquer par les lésions anatomopathologiques du RCIU et la diminution de Cs est cohérente avec l’étude d’un modèle murin de RCIU par ligature utérine. Enfin, l’analyse de la dispersion fréquentielle est faisable chez la femme enceinte. La valeur ajoutée de la méthode développée devrait désormais être testée lors d’une large étude clinique
Screening and diagnosis of placental insufficiency (PI), whether intrauterine growth restriction (IUGR) or preeclampsia (PE) are major public health issues. In clinical practice, the mechanical properties of the placenta are not explored; however changes in its tissue architecture could cause variations in elasticity. Among the ultrasound (US) elastography methods, transient elastography seemed suitable for such an application. This technique consists in calculating the shear wave speed (Cs) generated by an external vibration propagating in the medium under consideration. Elasticity values obtained from current US methods are calculated at a single frequency. As a structural modification of the tissue may correspond to a particular power law of frequency dispersion of Cs, we evaluated the interest of a multifrequency approach to distinguish the elasticity of healthy placentas and that of placentas with PI signs in the third trimester of pregnancy. We have developed a preliminary plane wave device (for ex vivo exploration) to validate the principle of the proposed method, and then a 2D transient elastography device (ex vivo and in vivo exploration). The data is adjusted using a fractional rheological model where the frequency behavior is modeled by a power law (exponent n of the model). We have shown that IUGR placentas have Cs and n values lower than those of healthy placentas or PE. This decrease in the n value could be explained by histopathological lesions of IUGR. As for the decrease of Cs in cases of IUGR, this result is consistent with the study of an IUGR rat model by uterine ligation. Finally, the frequency dispersion analysis is feasible in pregnant women. The added value of this method should now be tested in a large clinical study

CONTEXTE : les récepteurs activés par les proliférateurs des peroxysomes (PPAR) sont des membres de la superfamille des récepteurs nucléaires qui agissent en tant que facteurs de transcription activés par des ligands. Le PPARgamma joue un rôle essentiel dans la différenciation des adipocytes, le métabolisme des lipides et le développement du placenta. Les phtalates sont des contaminants environnementaux couramment utilisés comme plastifiants dans les produits à base de polychlorure de vinyle (PVC). Récemment, l'exposition de la femme enceinte aux phtalates, qui sont des ligands potentiels de PPARgamma, a été associée à de la prématurité, à des petit poids de naissance et à des interruptions de grossesse. Par ailleurs, des données récentes suggèrent que certaines mutations rares du domaine de liaison du ligand de PPARgamma (LBD) responsables de la lipodystrophie (FPLD3) seraient associées à des complications de la grossesse. OBJECTIFS : notre objectif général était d'évaluer l'activité et le rôle du PPARgamma placentaire durant la grossesse, et en particulier l'impact des phtalates et d'une mutation de PPARgamma associée à FPLD3 (E352Q) dans la différenciation et la fonction des trophoblastes humains in vitro. METHODES : dans ce but, nous avons : 1 / construit des plasmides rapporteurs (PPRE-H2B-eGFP et PPRE-pNL1.3 [secNluc]) pour quantifier l'activité de PPARgamma in vitro ; 2 / étudié l'action du MEHP (mono-2-éthylhexyl-phtalate) sur l'activité de PPARgamma et la différenciation des cytotrophoblastes villeux humains (CTVs) en utilisant des techniques d'immunofluorescence, de mesure de l'activité de PPARgamma, de dosage d'hCG, de western blot et d'analyse lipidomique ; 3 / étudié l'impact de la mutation de PPARgamma (E352Q) sur l'activité de PPARgamma en utilisant un lignée cellulaire NIH/3T3sur la différenciation in vitro des CTVs par analyse fonctionnelle après inactivation avec un siRNA et restitution de l'activité de PPARgamma « wild type » et de PPARgamma muté. RÉSULTATS : les constructions plasmidiques rapporteurs ont permis de quantifier l'activité de PPARgamma dans différents types cellulaires et conditions expérimentales. De plus, nous avons montré que des doses non toxiques de 0,1 µM et 1 µM de MEHP inhibaient significativement l'activité de PPARgamma et la différenciation des CTVs par rapport aux témoins, alors qu'étonnamment, 10 µM avait l'effet opposé. Par ailleurs, l'exposition de CTVs au MEHP inhibe la production d'hCG, altère de manière significative la composition lipidique trophoblastique perturbe sur la voie des MAPK (seul 10 µM de MEHP augmente la pERK alors que 0,1 ,1 et 10 µM diminuent les niveaux de protéine pJNK). Enfin, la mutation E352Q - associée à une grossesse pathologique a non seulement diminué l'activité de PPARgamma, mais également altéré la formation in vitro de syncytiotrophoblastes par fusion des CTVs primaires. CONCLUSION : des études de KO réalisées sur des souris ont montré l'importance de PPARgamma pour le développement du placenta et l'issue de la gestation. En utilisant deux nouveaux systèmes rapporteurs combinés avec un modèle in vitro de différenciation de CTVs, nous avons montré que le MEHP et la mutation E352Q perturbent l'activité de PPARgamma et la physiologie du trophoblaste humain ce qui pourraient expliquer les complications de la grossesse observées in vivo
BACKGROUND: The peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) are members of the nuclear receptor superfamily that act as ligand-activated transcription factors. PPARgamma plays critical roles in adipocyte differentiation, lipid metabolism and placental development. Phthalates are environmental contaminants commonly used as plasticizers in polyvinyl chloride (PVC) products. Recently, exposure to phthalates, which are potential PPARgamma ligands, has been associated with preterm birth, low birth-weight, and pregnancy loss. On the other hand, there is emerging evidence that some rare mutations in PPARgamma ligand binding domain (LBD) responsible of human lipodystrophy (FPLD3), might be associated with pregnancy complications. OBJECTIVES: Our general goal was to assess placental PPARgamma activity and role during pregnancy and in particular the impact of phthalates and of a FPLD3-associated mutation of PPARgamma (E352Q) in trophoblast differentiation and functions in vitro. METHODS: In this purpose we have: 1/ constructed reporter plasmids (PPRE-H2B-eGFP & PPRE-pNL1.3[secNluc]) to monitor PPARgamma activity in vitro; 2/ investigated the action of MEHP (mono-2-ethylhexyl-phthalate) on PPARgamma activity and differentiation of primary human villous cytotrophoblasts (VCTs) by using immunofluorescence, PPARgamma activity and hCG assays, western blotting and lipidomics analyses and; 3/ studied the impact of the mutated-PPARgamma (E352Q) on PPARgamma activity in NIH/3T3-cell line, and on VCT differentiation through functional analysis (fusion index) using siRNA knockdown and functional restitution of PPARgamma and mutated PPARgamma in in vitro models. RESULTS: Constructed reporter plasmids allowed us to quantify PPARgamma activity in different cell types and experimental conditions. Furthermore, we showed that non-toxic doses of 0.1 µM and 1 µM MEHP significantly decreased PPARgamma activity and VCT differentiation compared to controls, while, surprisingly, 10 µM had the opposite effect. Also, MEHP exposure inhibited hCG production, significantly altered trophoblastic lipid composition and had significant effects on the MAPK pathway: only 10 µM MEHP increased pERK, whereas 0.1, 1 and 10 µM decreased pJNK protein levels. Finally, the E352Q mutation - associated with pregnancy complication - not only decreased PPARgamma activity, but also altered the in vitro formation of syncytiotrophoblasts by fusion of primary VCTs. CONCLUSION: PPARgamma KO studies in mice showed the importance of PPARgamma for placental development and gestation outcome. Using two novel PPRE reporter systems combined with in vitro model of VCT differentiation, we showed that MEHP and the E352Q mutation impact PPARgamma activity and disrupt human trophoblast physiology that, which could explain the pregnancy complications observed in vivo

La protéine Prion, PrP, est connue pour son implication dans les encéphalopathies spongiformes transmissibles. Cette protéine appartient à une famille de glycoprotéines membranaires qui comprend également la protéine Shadoo. Le rôle biologique de ces deux protéines reste peu connu. L’objectif de cette thèse a été de d’étudier le rôle de Shadoo par dérégulation de l'expression de son gène chez la souris et le poisson zèbre. Les résultats montrent que les protéines PrP et Shadoo interviendraient chez la souris dans le développement précoce de l’embryon, notamment dans la mise en place du placenta. Chez le poisson zèbre, le gène Shadoo1, exprimé précocement, aurait aussi un rôle dans le développement embryonnaire. Ces données apportent un éclairage nouveau sur le rôle de Shadoo et de la PrP dans le développement embryonnaire des vertébrés
The prion protein, PrP, is known for its involvement in transmissible spongiform emcephalopathies. This protein belongs to a membrane-associated glycoprotein family that comprises also the Shadoo protein. The biological role of these two proteins remains poorly understood. The aim of this thesis was to study the function of Shadoo by deregulating its gene expression in mice and zebrafish. The results indicate that PrP and Shadoo appear to be involved in early mouse embryonic development, and more precisely in the placenta development. In zebrafish, expressed Shaddo1-encoding gene is also involved in early embryogenesis. These data highlight a new role of PrP and Shadoo in vertebrate embryonic development

Les adaptations du fœtus aux stimuli intra-utérins ont des conséquences immédiates puis à long terme sur sa santé après la naissance. Chez l’équin, ce concept connu sous le nom de DOHaD (Developmental Origins of Health and Disease) a été validé à l’aide de croisements inter-races : la taille de la jument, qui conditionne l’environnement maternel pendant la gestation puis la lactation, a un impact crucial sur la croissance postnatale du poulain, mais aussi sur la sensibilité à l’insuline du nouveau-né. L’ostéochondrose, pathologie du cheval en croissance, est responsable de pertes financières majeures pour la filière équine. Elle a été reliée à des anomalies de l’homéostasie glucidique et son origine anténatale est fortement suspectée. Dans cette thèse, nous avons mesuré l’impact de perturbations expérimentales au cours du développement fœtal sur la croissance, l’homéostasie glucidique et la prédisposition à l’ostéochondrose du poulain jusqu’à l’âge de 1 an ½. Un premier modèle de croissance fœtale augmentée versus restreinte a été obtenu par transferts d’embryons inter-races (« poneys dans traits » versus « selles dans poneys », respectivement). L’environnement maternel « enrichi » de la jument de trait versus restreint de la ponette s’est révélé déterminant dans la régulation de la croissance des différents segments osseux, de l’axe thyréotrope, de la fonction des cellules β pancréatiques, de la sensibilité à l’insuline de l’organisme et de la santé ostéoarticulaire du poulain dès la naissance et jusqu’à 1 an ½. Tout en validant le concept de DOHaD chez l’équin, ce modèle souligne le soin qui doit être apporté à la sélection des juments receveuses dans la pratique du transfert d’embryons. En démontrant l’ampleur des effets post-nataux programmés in utero et pendant la lactation, ce modèle alerte aussi l’éleveur sur la gestion des poulinières et ses impacts à long terme. En ce sens, le second modèle est en adéquation avec les préoccupations d’élevage puisqu’une perturbation de l’environnement nutritionnel du fœtus a été induite en apportant un concentré (orge) dans la ration hivernale de la jument gravide versus des fourrages uniquement. A ce jour, l’impact de cette modification anténatale sur l’homéostasie glucidique du poulain avant sevrage semble limité à la période néonatale, tandis que sa croissance n’est pas du tout affectée. En revanche, sa prédisposition à l’ostéochondrose à l'âge de 6 mois semble être accrue, ce qui ne permet pas de présager de la suite car le statut ostéoarticulaire du poulain âgé de 6 mois reste susceptible d’évoluer jusqu’à 1 an ½. Ces travaux devraient permettre d’ajuster les recommandations nutritionnelles chez les poulinières
Fetal adaptations to intra-uterine stimuli have immediate and long term effects on the offspring’s health after birth. In equids, this concept known as the DOHaD (Developmental Origins of Health and Disease) was validated using cross-breeding: the mare’s size which affects the fetal environment throughout gestation and then lactation, has a critical impact on the foal’s post-natal growth, as well as on the neonate’s sensitivity to insulin. Osteochondrosis, a pathology of the growing horse, induces heavy financial losses in the equine industry. It has been associated to abnormalities in glucose homeostasis and its antenatal origin is highly suspected. The present research aimed to evaluate the impact of experimental disturbances during fetal development on growth, glucose homeostasis and predisposition to osteochondrosis in the foal until age 1½ year. Increased versus restricted fetal growth was obtained using between-breed embryo transfers (“ponies in draft horses” versus “saddlebreds in ponies”, respectively). The lush environment of the draft mare versus the restricted environment of the pony mare turned out to be critical in the regulation of bone growth, thyroid hormones secretion, β-cells function, insulin sensitivity and the osteoarticular status of the foal from birth to 1½ year of age. This validates the concept of the DOHaD in equids and shows that recipient mares should be carefully selected in embryo transfer practice. By demonstrating the scope of post-natal effects which were programmed in utero and throughout the lactating period, it also alerts the breeder about the importance of broodmare management and its long term impacts. Thus, the second model was developed to address breeders' practices. A disturbance of the nutritional environment of the fetus was induced by supplementing mares in late pregnancy with concentrated feed (barley). So far, only the neonatal foal's glucose homeostasis was affected, whereas all other studied parameters, including growth, were not affected. The foal’s predisposition to osteochondrosis, however, was increased at 6 months of age, which does not preclude that it will affect the animals afterwards since the osteoarticular status of the 6-month-old foal will evolve beyond weaning time. This research could help adjust nutritional recommendations to broodmares

L’exposition prénatale à différents agents toxiques est généralement étudiée en considérant le placenta comme une barrière entre la mère et le fœtus ; nous le considérons en tant qu’organe cible des agents toxiques. Pour ce faire, nous avons sélectionné un modèle cellulaire de trophoblastes adapté aux études toxicologiques. En clinique, des pathologies de la grossesse sont associées à des modifications de la sécrétion de l’hormone placentaire lactogène hPL et de l’hormone gonadotrope chorionique hCG. Nos travaux in vitro ont permis de faire le lien entre une exposition à des micropolluants (le mono(2-ethylhexyl) phtalate, un perturbateur endocrinien, et le benzo(a)pyrene, un carcinogène) et ces observations cliniques. Les biomarqueurs de sécrétion hormonale (hPL et hCG hyperglycosylée) et de dégénérescence (activation du purinorécepteur P2X7) que nous avons identifiés permettent de détecter l’exposition et le risque suite à une exposition à des polluants
Prenatal exposure to pollutants is commonly evaluated using placenta as a barrier between mother and fetus. Here, we consider placenta as a target organ for toxic agents. To achieve this, we selected a trophoblastic cell model, which is adapted to toxicological studies. In clinical studies, pregnancy pathologies are associated to changes in human placental lactogen (hPL) and human chorionic gonadotropin (hCG) secretions. Our in vitro work links exposure to micropollutants (mono(2-ethylhexyl)phthalate, an endocrine disruptor, and benzo(a)pyrene, a carcinogen) and clinical observations. We identified biomarkers of hormonal secretion (hPL and hyperglycosylated hCG) and degeneration (P2X7 receptor activation), which enable the evaluation of exposure and risk attached to exposure to pollutants

La survenue d’un cancer du sein découvert durant la grossesse est un événement dramatique compliquant entre 1/3000 et 1/10000 grossesses, ce qui en fait le cancer le plus fréquemment rencontré chez la femme enceinte. Sur le plan thérapeutique, certaines molécules anticancéreuses peuvent être utilisées, notamment les taxanes (paclitaxel et docétaxel). Si les études cliniques rétrospectives isolées semblent plutôt rassurantes, les données concernant leur passage transplacentaire sont encore fragmentaires. Quant à leurs effets sur le placenta humain et plus particulièrement sur la fonction de transport placentaire, ils sont pour l’heure inconnus. Nos objectifs étaient de 1) dresser une cartographie de l’expression génique physiologique des différents transporteurs placentaires de médicaments en utilisant un modèle de culture primaire trophoblastique, 2) d’apprécier le passage transplacentaire comparatif des taxanes et leur accumulation placentaire en utilisant le modèle du cotylédon perfusé, 3) d’étudier plus particulièrement les effets du paclitaxel sur le placenta humain et notamment sur l’expression des transporteurs de médicaments, en utilisant en plus des modèles mentionnés, les cotylédons de patientes ayant été traitées par paclitaxel durant leur grossesse. Nos études ont tout d’abord permis de dresser une cartographie originale de l’expression physiologique de plus de 80 transporteurs placentaires de médicaments, et ce comparativement entre le début et la fin de la gestation. De plus, nos expériences ont montré que le passage transplacentaire des taxanes était faible et comparable entre les deux molécules, et que celles-ci semblaient s’accumuler dans les cotylédons placentaires. Enfin, nous avons pu mettre en évidence un effet significatif du paclitaxel sur le placenta humain, notamment sur la modulation de certains transporteurs de médicaments
The occurrence of breast cancer during pregnancy is a dramatic event reaching roughly 1/3000 to 1/10000 pregnancies, this type of cancer being the most frequent in pregnant women. Regarding therapeutic options, some anticancer agents may be used, especially taxanes (paclitaxel and docetaxel). If most of retrospective data appear to be reassuring, little is known regarding their transplacental transfer. Moreover, to our knowledge, potential effects of taxanes on human placenta, especially on placental transport function are unknown. Our aims were to 1) provide a transcriptional expression cartography of various placental drug transporters throughout pregnancy, using primary trophoblast culture model, 2) assess the comparative transplacental transfer of taxanes and their accumulation in cotyledons, using the perfused placental model, 3) assess potential effects of paclitaxel on human placenta, especially on drug transporter expression, not only using above-described models, but also cotyledons from pregnant-cancer patients treated with paclitaxel during pregnancy. Here, we finally provided an original transcriptional cartography of various drugs transporters in human normal placenta all along pregnancy. Moreover, we found a low and comparable transplacental transfer of paclitaxel and docetaxel that led to a moderate accumulation in cotyledons. Finally, we evidenced a significant effect of paclitaxel on human placenta, especially by modulating drug transporter expression

L'infection bactérienne du placenta provoque l'avortement ou la naissance d'un petit infecté congénital. Un modèle souris a été mis au point pour étudier les mécanismes de l'infection foetoplacentaire par trois bactéries qui infectent le placenta humain et des ruminants : brucella, listeria et e. Coli. Ces bactéries inoculées pendant la gestation sont dénombrées par culture de chaque placenta et foetus. L'infection est exprimée en fréquence et intensité. L'aptitude des souches à coloniser les placentas est corrélée avec leur virulence mesurée par d'autres tests sur souris vides. L'inoculation vaginale infecte les placentas par voie descendante. L'inoculation intrapéritonéale ou sous-cutanée plantaire les atteint par voie sanguine, après un relais lymphatique. La colonisation des placentas se fait de manière aléatoire dans la souris. Quelques bactéries se fixent dans chaque placenta et y prolifèrent rapidement. Le placenta peut s'opposer au passage des bactéries vers le foetus. Cet effet barrière diminue avec le temps et l'intensification de l'infection du placenta. La vaccination contre brucella, avant la gestation, par un vaccin vivant, tue, la fraction peptidoglycane ou le lipopolysaccharide, protège placentas et foetus par élévation de l'effet barrière. La protection est transférée par des immunoserums et par les lymphocytes spléniques de type B ou T de donneurs vaccinés. Ni la vaccination, ni le transfert d'immunserum ne protègent les placentas contre listeria ou e. Coli. Des souriceaux infectés naissent à terme de mère infectée par brucella. L'infection congénitale persiste au moins 50 jours.

Le retard de croissance intra-utérin par altérations vasculaires placentaires affecte 4% des grossesses actuelles. Ses mécanismes d’installation encore inconnus ont un impact pédiatrique important responsable d’une mortalité non négligeable. La combinaison d’un retard de croissance intra-utérin et de modifications vasculaires placentaires sur un modèle animal est nécessaire pour comprendre ces mécanismes et envisager une étude thérapeutique ultérieure. Le but de ce projet est de mettre au point dans un premier temps un modèle animal qui associe au retard de croissance intra-utérin les modifications vasculaires placentaires retrouvées dans la physiopathologie humaine. Pour cela, deux modèles animaux murins ont été étudiés : l'hyperthermie en fin de gestation et l’anémie par carence martiale pré et péri-gestationnelle. Une étude qualitative et quantitative par échographie (échographie Doppler et échographie de contraste) associée à une étude anatomopathologique. immuno-histochimiques et spectroscopique des placentas a été réalisée. L’optimisation du modèle animal définitif a requis dans un premier temps la mise au point de repères anatomiques inexistants à l'heure actuelle permettant la reproductivité des mesures échographiques ainsi que la mise en évidence de l’innocuité du produit de contraste échographique utilisé. Une étude placentaire globale nous a permis d’enregistrer des modifications structurelles liées au modèle analysé. L’étude de ces deux modèles animaux nous a permis d’établir un protocole de mesure standardisé et de mettre en évidence l’absence d’effet de l’utilisation du produit de contraste échographique sur la gestation. L’hyperthermie tout comme la carence martiale sont responsables d'un retard de croissance intra-utérin avec un effet dose dépendant. Les modifications vasculaires placentaires retrouvées dans le modèle hyperthermie à type d'ischémie-hémorragique n’apparaissent pas consécutives à des modifications vasculaires installées mais séquellaires de cet incident aigu. Les modifications hémodynamiques enregistrées dans le cadre de la carence martiale sont plutôt en faveur de modifications vasculaires en accord avec la pathologie humaine. L’étude spectroscopique ne met pas en évidence de changement métabolomique particulier. Ces deux modèles permettent donc l’installation d’un retard de croissance intra-utérin corrélé positivement à l’intensité du protocole. Le modèle anémie tend à se rapprocher au mieux de la pathologie humaine ; son étude reste à approfondir sur des effectifs plus conséquents
The intra-uterin growth restriction by placental vascular modifications affects 4% of the current pregnancies. lt’s still unknown installation mechanism has an important pediatric impact with a significant mortality. The association of intra-uterin growth restriction and placental vascular defects on an animal model is necessary to understand this mechanism and envisage a therapeutic study later. The aim of Ibis project is to establish at first an animal model which associates intra-uterin growth restriction and vascular placental modifications found in the human physiopathology For that purpose, two murine models were studied : hyperthermia at the end of the gestation and anaemia by iron deficiency before and during the gestation. A qualitative and quantitative study by ultrasonography (Doppler ultrasonography and contrast ultrasonography) associated with anatomopathological, immune-histochemical and spectroscopic studies of the placentas was realized. The optimization of the definitive animal model required at first anatomical marks development, allowing reproduction of the ultrasonographic measures as well as revelation of the ultrasound contrast product harmlessness. A global placental study allowed us to note structural modifications connected to the analyzed model. The study of these two animals models allowed us to establish a standard measuring protocol and show that ultrasonographic contrast product use had no effect on the gestation. The hyperthermia, as the iron deficiency, is responsible of an intra-uterin growth restriction with a positive effect dose related. The vascular placental modifications found in the hyperthermia model as hemorrhage and ischaemia areas do not appear as the result of vascular modifications but after-effects of this acute incident. The hemodynamical modifications registered within the framework of the iron deficiency are rather in favour of vascular modifications in agreement with the human pathology. The spectroscopic study does not show metabolomic modifications. These two models allow the installation of an intra-uterin growth restriction positively correlated with the protocol intensity. The anaemia model gets closer to the human pathology; its study remains b he continued with more consequent numbers

Human papillomavirus (HPV) is a double-stranded DNA virus, typically infecting mucosal or cutaneous epithelial keratinocytes. Today, more than 118 different HPV types have been formally described. Sexual transmission of mucosal HPVs is very common and generally asymptomatic, but HPV infection can be associated with benign lesions such as condylomata acuminata or, in rare cases, with malignant lesions such as cervical cancer. Two prophylactic vaccines are currently available in Europe, protecting against HPV-16 and HPV-18 (Cervarix&63720;) or against HPV-6, HPV-11, HPV-16 and HPV-18 (Gardasil&63720;). In order to assess the impact of the vaccination program, it is mandatory to obtain geographically widespread date on the baseline HPV prevalence and type distribution in cervical samples from women, presenting or not, normal or abnormal cytologic or histologic results. We undertook an epidemiological study in the Capital Region of Brussels to determine the HPV prevalence and type-distribution in 1526 cervical samples of women presenting a cytology within normal limits (WINL), atypical squamous cells of undetermined significance (ASC-US), low-grade squamous intra-epithelial lesions (LSIL), high-grade squamous intra-epithelial lesions (HSIL) or invasive cervical cancer (ICC). The HPV prevalence was 10.8% (95%CI: 8.8-12.8) for NILM, 34.5% (95%CI: 28.3-40.8) for ASC-US, 54.0% (95%CI: 47.4-60.6) for LSIL and 100% for HSIL and ICC. With an HPV-16 and HPV-18 prevalence of 63.3% (95%CI: 44.1-67.7) and 73.5% (95%CI: 63.0-84.0) in mono-infected HSIL and ICC, respectively, HPV 16/18 L1 VLP vaccines would be expected to significantly reduce the management and treatment of women suffering from HSIL and ICC in the Capital Region of Brussels. We also detected HPV-30, HPV-53, HPV-66 and HPV-68 in mono-infected HSIL and ICC samples, possibly providing arguments for the reconsideration of the carcinogenicity of these types.

Vertical transmission of HPV was also previously reported, but in most cases one could not exclude a placental contamination by HPV positive cells from an infected birth canal. In order to confirm that the placenta can be infected with HPV, we analysed residual cells from 35 transabdominally obtained placental samples from pregnant women undergoing chorionic villous sampling for screening of suspected foetal abnormalities and found that two samples were positive for HPV-16 and HPV-62, respectively. The clinical importance of these results remains to be elucidated, but the previously observed association between placental HPV infection and pregnancy loss might gain further in importance. HPV gene regulation in placental trophoblastic cells has not been studied so far. We studied the HPV-16 early gene expression regulation in transiently transfected monolayer cultured trophoblastic cells with an HPV-16 long control region (LCR) driven reporter plasmid. We observed important differences in constitutive HPV-16 LCR activities between trophoblastic cell lines and could identify progesterone as an important inducer of HPV-16 early gene expression. Steroid hormones are induced during pregnancy and could therefore lead to an enhanced expression of the E5, E6 and E7 proteins upon placental HPV infection. Since these proteins were previously shown to affect trophoblast adhesion, survival, migration and invasion, their enhanced expression might eventually contribute to pregnancy loss. We furthermore found that the transcription of episomally maintained HPV-16 is not regulated by E2 or E1, but by E5, E6 and/or E7.

Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques
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Etude réalisée pendant la gestation chez la rate rendue diabétique par injection de streptozotocine, dans le but d'identifier quelques facteurs impliqués dans le développement de l'hypotrophie foetale: sont évalués le rôle des perturbations hémodynamiques utéroplacentaires, et l'hypertonie du myomètre, avec les facteurs neuro-endocriniens impliqués dans ces modifications

La grossesse est une période de majoration du risque vasculaire, participant à une morbi-mortalité maternelle et fœtale pouvant justifier des mesures de prévention primaire et secondaire. Notre travail évalue l'impact de certains déterminants et l'apport de nouveaux acteurs moléculaires impliqués dans la dysfonction vasculo-placentaire. Le but ultime étant d'optimiser les prises en charge et de développer de nouvelles stratégies thérapeutiques. Nous avons étudié les complications vasculaires placentaires associées à des marqueurs biologiques connus : mutation du facteur V Leiden, mutation du gène de la prothrombine et marqueurs conventionnels du syndrome des anticorps anti-phospholipides (SAPL). Nos résultats montrent que les femmes à antécédents de fausses couches précoces répétitives et porteuses, soit du polymorphisme du facteur V, soit du polymorphisme du facteur II, soit d'un SAPL (traité par héparine et aspirine faible dose), ont un risque élevé de fausse couche tardive lors d'une nouvelle grossesse. Les femmes à antécédent de fausse couche tardive et porteuses des mêmes particularités biologiques, traitées pendant leur grossesse selon les recommandations (héparine pour l'anomalie du facteur V ou II, héparine plus aspirine faible dose pour le SAPL), ont un risque diminué de récidive de perte fœtale tardive mais demeurent, dans le groupe SAPL, fréquemment exposées aux complications tardives de la grossesse malgré la prophylaxie antithrombotique. Nous avons évalué l'apport de nouveaux marqueurs de la dysfonction vasculaire placentaire. Nous montrons que le polymorphisme Ile89Leu du gène de la phosphatase alcaline placentaire (PLAP), enzyme exprimée par les cellules du syncytiotrophoblaste -polymorphisme associé à une augmentation de l'activité PLAP-, exerce un effet protecteur sur l'échec d'implantation et la survenue d'une fausse couche primaire. Un facteur angiogénique (brevet en cours) a également été étudié (génétique, dosage plasmatique, fécondation in vitro) et nous montrons une association de ce marqueur avec les échecs d'implantation et les fausses couches idiopathiques. L'ensemble de ces travaux suggère que ces nouveaux marqueurs moléculaires pourraient contribuer au diagnostic des complications vasculaires de la grossesse et fournir des biomarqueurs d'implantation embryonnaire et/ou de développement placentaire. Ils pourraient suggérer de nouvelles cibles et stratégies thérapeutiques, répondant aux limites des traitements disponibles
Vascular risk increases during pregnancy, contributing to maternal and foetal morbidity and mortality, and potentially justifying primary and secondary preventive measures. Our work evaluates the impact of some determinants and the contribution of new molecular actors implicated in placental vascular dysfunction. The ultimate aim is to optimize management and to develop new therapeutic strategies. We studied the placental vascular complications associated with known biological markers: the factor V Leiden or prothrombin polymorphisms, and conventional markers of the antiphospholipid antibody syndrome (APS). Women with previous recurrent abortions carrying polymorphisms of either factor V or factor II, or with APS (treated with heparin and low-dose aspirin), had an increased risk of foetal loss during subsequent pregnancies. Women with a previous foetal loss carrying these biological markers, treated according to recommendations during a new pregnancy (heparin for the polymorphisms, heparin plus low-dose aspirin for APS) had a lower risk of foetal loss, but an excess of late complications was observed in the APS group despite prophylaxis. We evaluated the contribution of new markers of placental vascular dysfunction. The placental alkaline phosphatase enzyme (PLAP) is synthesized and expressed by syncytiotrophoblastic cells. We found that the Ile89Leu polymorphism of the PLAP gene provides protection against implantation failure and primary miscarriage and induces increased PLAP activity. We also studied (genetics, plasma determinations, in vitro fertilisation) an angiogenic factor (patent application underway), which we showed to be associated with idiopathic implantation failure and miscarriage. These findings suggest that these molecular actors are potentially useful for the diagnosis of placenta-mediated pregnancy complications and may be relevant biomarkers of embryo implantation and/or placental development. They may indicate new targets for relevant therapeutic strategies, potentially overcoming the limitations of the currently available treatments

La grossesse réussie implique une adaptation du système immunitaire maternel à la présence du fœtus, qui peut être considéré, au niveau immunologique, comme une semi-allogreffe. La tolérance de la mère nécessite une immunosuppression locale, à laquelle participe fortement le réseau cytokinique placentaire et utérin. Nous avons étudié les cytokines et chimiokines présentes à l'interface placentaire du premier trimestre et de fin de grossesse humaine. Les composants majoritaire de l’environnement cytokinique placentaire sont, dans notre système d'étude, les chimiokines MIP-lα, MIP-1,1β, RANTES et IL-8, ainsi que les cytokines inflammatoires IL-lβ, IL-6 et TNF-α, et que les facteurs de croissance GM-CSF et CSF-1. Par contre, contrairement à l'hypothèse avancée en 1993, que la grossesse réussie nécessitait un profil de cytokines locales de type 2, nous n'avons pas mis en évidence de sécrétion significative de ces cytokines par les villosités placentaires. Des différences quantitatives existent entre les cytokines produites par le placenta du premier trimestre et le placenta de fin de grossesse, qui pourraient correspondre à des modifications des fonctions métaboliques, hormonales et invasives du placenta. La transmission materno-fœtale du VIH peut avoir lieu in utero et impliquer le passage du virus à travers la barrière placentaire. Pensant que le microenvironnement placentaire pouvait jouer un rôle régulateur de ce passage, nous avons comparé les profils d’expression des différentés cytokines et chimiokines entre les villosités placentaires de mères séropositives pour le Vlll et de mères séronégatives. Nous n'avons pas pu mettre en évidence de différence significative majeure dans la production des cytokines locales entre ces deux types de placentas. Cependant, la population trophoblastique, constituant la première couche cellulaire du placenta en contact avec le sang maternei, pourrait être capable de moduler ses sécrétions de cytokines inflammatoires et de chimiokines sous l'action du virus. Nous en concluons que des variations fines et locales pourraient entrer en jeu dans des processus autocrines impliquant les trophoblastes, et modulant peut-être leurs capacités invasives, métaboliques, ainsi que la réplication virale si ils sont infectés in vivo et la transmission du virus aux couches cellulaires placentaires plus internes
Pregnancy outcome is depending on the capacity of aptation of the maternal immune system to the presence of the semi-allogeneic fetus. Maternal tolerance is mediated, by part, by a local immunosuppression. Placental cytokines and microenvironment are essential components of this tolerance. We have studied the cytokines and chemokines spontaneously secreted by human placental villi and cells, from first trimester or end _of pregnancy. We found expression of chemokines (MIP- Lα. , MIP-lβ, RANTES and IL-8), inflammatory ;cytokines (lL-I β, IL-6 and TNF-α. ), and growth factors (GM­ CSF and CSF-1). Surprising!y, we did not detect important secretion of any type 1 or type 2 cytokines. We could highlighted quantitative differences in the pattern of cytokines and chemokines expression between first trimester and term placentae, which could be related to variations in metabolic, hormonal and invasive functions. Mother-to-child HIV-1 transmission could occur in utero through the placental barrier. We hypothesized that placental microenvironment could influence mechanisms of placental viral transmission, and we compared cytokines and chemokines secretion profiles between term placentae from HIV-seropositive and HIV-seronegativewomen. No major difference could be seen at the level of placental tissue. However, it seems that the first cellular layer in contact with maternal blood (trophoblatic cells) may express differently intlammatory cytokines and chemokines depending on the HIV infection of the mother. Some local variations in cytokines and chemokines may act in an autocrine proccss on proliferative, invasive and hormonal functions of trophoblast, or on HIV replication and spreading in the placenta, if trophoblasts are infected in vivo

LA TRANSMISSION MERE-ENFANT (TME) EST RESPONSABLE DE PLUS DE 90% DU NOMBRE D'ENFANTS INFECTES PAR LE VIH-1. LES ANTIRETROVIRAUX (ARV) ONT PERMIS DE REDUIRE EFFICACEMENT LA TME DU VIH-1 DANS LES PAYS DEVELOPPES. AVANT L'AN 2000, IL N'Y AVAIT PAS DE PROGRAMME DE PREVENTION DE LA TME DU VIH-1 AU CAMEROUN. LES OBJECTIFS PRINCIPAUX DE CETTE THESE ETAIENT DE CONTRIBUER A LA MISE EN PLACE D'UN PROGRAMME DE PREVENTION DE LA TME DU VIH-1 AU CAMEROUN EN UTILISANT LA NEVIRAPINE (NVP) ET D'ETUDIER DES FACTEURS ASSOCIES AU CONTROLE OU NON DE LA TME COMME L'ENVIRONNEMENT CYTOKINIQUE DU PLACENTA ET LES CONFECTIONS PALUSTRES. NOS RESULTATS INDIQUENT QUE LE TAUX DE TME DU VIH-1 AVEC LA NVP ETAIT DE 13% ET CECI DANS UN CONTEXTE DE FORTE DIVERSITE VIRALE ET DE FAIBLE RESISTANCE INITIALE DU VIH-1 AUX ARV (MOINS DE 5%). UNE VARIABILITE IMPORTANTE DES NIVEAUX DE CYTOKINES (ARNM ET SECRETION) ETAIT OBSERVEE DANS LES PLACENTAS DES FEMMES VIH-1 NEGATIVES ET POSITIVES. LORSQUE LES PARAMETRES CLINIQUES ETAIENT PRIS EN CONSIDERATION, DES DIFFERENCES SIGNIFICATIVES ETAIENT OBSERVEES ENTRE LES FEMMES VIH-1 NEGATIVES ET POSITIVES AVEC UNE PREDOMINANCE DU TNF-oc CHEZ LES POSITIVES. LA PARASITEMIE PALUSTRE ETAIT PLUS ELEVEE CHEZ LES FEMMES VIH-1 POSITIVES. NOS RESULTATS INDIQUENT EGALEMENT QUE LE PALUDISME MODULAIT L'ENVIRONNEMENT CYTOKINIQUE PLACENTAIRE. NOUS AVONS MONTRE EN PARALLELE QUE LE TNF-a, QUI EST ELEVE LORS DU PALUDISME, AUGMENTE LA REPLICATION VIRALE DANS DES HISTOCULTURES DE PLACENTAS INFECTES PAR LE VIH-1. CES RESULTATS CONFIRMENT L'EFFICACITE DE LA NVP POUR REDUIRE LA TME DU VIH-1. CEPENDANT LE PALUDISME POURRAIT DIMINUER CETTE EFFICACITE EN MODIFIANT LES PROFILS DE CYTOKINES PLACENTAIRES
More than 90% of hiv-1 infected children acquire the virus through mother-to-child transmission (mtct). Antiretroviral (arv) prophylaxis have greatly reduced mtct of hiv-1 in the developed world. Before 2000, no effective program on the prevention of mtct existed in cameroun. The main objectives of this thesis were to contribute in the initiation of a program on the prevention of hiv-1 mtct in cameroun using nevirapine (nvp) and to study factors associated with the control or not of mtct such as the placental cytokine profiles and malaria confections. We observed a 13% mtct of hiv-1 with nvp prophylaxis in a context of a large hiv-1 diversity in yaounde. Less than 5% of the pregnant women naïve of arv treatment presented resistant mutations to arv. A high variability was observed in the mrna expression and secretion of cytokines in the placentas of both hiv-1 negative and positive women. Analyses considering clinical parameters revealed significant differences between hiv-1 negative and positive women, with tnf-a predominating in the hiv-1 positive group. Malaria parasitemia was significantly higher among hiv-1 positive women. Malaria parasite was observed to greatly alter the placenta cytokine environment. We then showed in parallel that tnf-a, which is associated with malaria, enhanced viral replication on hiv-1 infected placental histocultures. Together, these results show that nvp is efficient in the prevention of hiv-1 mtct and that malaria could alter this efficiency by modulating the placental cytokine environment

Bien que le rôle du P1GF soit encore débattu, des études ont mis en évidence le rôle du P1GF et de son récepteur, le VEGFR-1 dans la croissance tumorale et l'angiogenèse tumorale. Une étude récente a démontré q'un anticorps monoclonal anti-P1GF (aP1GF) inhibe la croissance tumorale et l'angiogenèse tumorale, y compris dans les modèles résistants aux anti-VEGF. La néo-vascularisation tumorale étant caractérisée par des vaisseaux anormaux, nous avons émis l'hypothèse que l'axe P1GFNEGFR-1 pouvait jouer un rôle dans le remodelage vasculaire anormal et que la signalisation du VEGFR-1 pouvait induire in vitro D114 et la forme active de Notch4 dans les HUVECs Notre première étude a montré, dans un modèle de CHC murin, (i) que les taux de P1GF et de VEGFR-1 étaient significativement supérieurs à ceux du VEGF-A et du VEGFR-2, aux stades précoces du CHC coïncidant avec l'initiation des anomalies vasculaires, (ii) que seules les CEs sinusoïdales tumorales expriment le VEGFR-1 et Notch4 et (iii) que la signalisation du VEGFR-1 par le P1GF et le VEGF-A induit l'expression de D114 et de Notch4 activé dans les HUVECs. Dans notre seconde étude, en collaboration avec Peter Carmeliet, nous avons montré dans 2 modèles différents de CHC que le blocage du P1GF par siRNA ou aP1GF inhibant la croissance tumorale et les anomalies vasculaires décrits dans le CHC à savoir l'artérialisation et la capillarisation des sinusoïdes. Dans notre troisième étude, nous avons montré qu'une statine diminuait la croissance tumorale et prolongeait la survie des animaux en diminuant l'angiogenèse et les anomalies vasculaires du CHC. En conclusion, nous mettons en évidence le rôle prépondérant de l'axe P1GFNEGFR-1 dans l'initiation des anoamlies vasculaires du CHC et le rôle de la signalisation du VEGFR-1 dans l'induction de D114 et de Notch4 activé dans les HUVECs
Even if the role of P1GF is still debated, studies have highlighted the role of P1GF and its receptor, VEGFR-1, in tumor growth and angiogenesis. A recent study has shown that a monoclonal antibody, anti-P1GF, inhibits tumor growth and angiogenesis, including models resistant to anti-VEGF treatments. Since tumor neovascularization is characterized by abnormal blood vessels, we hypothesized that the P1GFNEGFR-1 axis could play a role in abnormal vascular remodelling, and that VEGFR-1 signaling could induce D114 and the active form of Notch4 in HUVECs in vitro. Chu- first study carried out in a mutine model of HCC showed that: (i) the level of P1GF and VEGFR-1 were significantly higher than those of VEGF-A and VEGFR-2 at early stages of HCC coincided with the initiation of vascular anomalies, (ii) only the sinusoidal tumor endothelial cells express VEGFR-1 and Notch4 and (iii) VEGFR-1 signaling by P1GF and VEGF-A induces the expression of D114 and the active form of Notch4 in HUVECs. In our second study performed in collaboration with Peter Carmeliet, we have shown in two different models of HCC, that P1GF blockade, using siRNA or anti-P1GF antibodies, inhibited tumor growth and vascular anomalies described in HCC namely arterialization and capillarization of sinusoids. In our third study, we showed that statins decreased tumor growth and prolonged survival of animais by decreasing angiogenesis and abnormal vasculature in HCC. In conclusion, our results evidence the role of P1GFNEGFR-1 axis in the initiation of vascular abnormalities in HCC and the role of VEGFR-1 signaling in the induction of D114 and activated Notch4 in HUVECs

La dysplasie broncho-pulmonaire (DBP), conséquence d’un arrêt du développement du poumon immature, est la principale complication respiratoire de la grande prématurité. L’objectif était d’étudier certains déterminants anténataux et postnataux de la DBP, pour lesquels les études épidémiologiques ne sont pas consensuelles. Les données proviennent de la cohorte en population EPIPAGE 2. Nous avons d’abord étudié le lien entre les pathologies vasculaires gravidiques et la DBP, et montré que le risque de DBP modérée ou sévère à 36 SA était augmenté en cas de pathologie vasculaire compliquée d’un retard de croissance intra-utérin (RCIU), mais pas en cas de symptomatologie hypertensive maternelle sans RCIU associé. Nous avons ensuite analysé le rôle de l’inflammation anténatale, identifiée par une chorioamniotite histologique. Celle-ci n’était pas associée à une augmentation du risque de DBP modérée ou sévère chez les enfants nés prématurément dans un contexte de début de travail spontané à membranes intactes ou de rupture prématurée des membranes. Enfin, nous avons montré une hétérogénéité majeure dans les soins prodigués dès les premiers jours aux grands prématurés dans les unités de néonatologie, sans pouvoir conclure quant à l’impact de cette variabilité sur l’évolution vers une DBP. Les résultats explorant le lien entre deux pathologies fréquentes de la grossesse et la DBP sont en contradiction partielle avec les hypothèses physiopathologiques actuelles. L’exploration des déterminants précoces de la DBP peut contribuer à mieux cibler les sujets à inclure dans les études interventionnelles visant à diminuer l’incidence ou la sévérité de la DBP, et à améliorer les connaissances des praticiens et des familles sur les facteurs de risque de morbidité respiratoire néonatale
Bronchopulmonary dysplasia (BPD), due to disrupted development of the immature lungs, remains a common respiratory morbidity of very preterm birth. Our aim was to study antenatal and postnatal factors possibly associated with BPD at 36 weeks postmenstrual age, about which epidemiological results have been inconsistent. Data from the EPIPAGE-2 cohort study were used. We first studied the associations between placenta-mediated pregnancy complications and BPD. Pregnancies complicated by fetal growth restriction (FGR) were at higher odds of moderate to severe BPD, whereas hypertensive disorders of pregnancy without FGR were not. We then analyzed the impact of antenatal inflammation, defined using histological chorioamnionitis diagnosis. Among very preterm infants born after spontaneous preterm labor with intact membranes or after preterm premature rupture of the membranes, histological chorioamnionitis was not associated with moderate or severe BPD. Lastly, we found wide inter-center variability in care delivered to preterm infants from their very first days. However, we were not able to explain variations of BPD frequency between centers by these differences of care. Our results concerning the associations between two frequent pregnancy complications and BPD are in part contrary to current pathophysiological models. Understanding early BPD risk factors may help to better define patients for inclusion in clinical trials aiming to decrease BPD rates or severity and to improve clinicians and families knowledge about respiratory morbidity of preterm birth

Trypanosoma cruzi est un parasite protozoaire à multiplication intracellulaire, agent de la maladie de Chagas, infectant 16 à 18 millions de personnes en Amérique latine. Il peut être transmis de la mère infectée au fœtus dans 2 à 10 % des cas, mais ses autres effets sur la gestation ont été peu étudiés. Par ailleurs, les cytokines ont des effets sur la gestation. Certaines d’entre elles, comme l’interleukine-1, l’IL-4, l’IL-5, l’IL-10, le GM-CSF et le TGF-b2, sont bénéfiques pour la gestation, tandis que d’autres, comme l’IL-2, l’IL-12, l’IFN-g et le TNF-a ont des effets nocifs sur celle-ci. L’impact de l’infection à T. cruzi, stimulant la production de TNF-a et d’IFN-g, sur l'implantation et la croissance fœtale n’a pas été étudié.

Le but de notre travail était d’étudier les effets de l’infection aiguë à T. cruzi sur la capacité de reproduction de la souris. Nous avons ainsi évalué les effets de cette infection sur la fertilité, le développement et la viabilité des fœtus de souris et le rôle de l’IFN-g et du TNF produits au cours de l’infection sur le développement de la gestation.

Nous avons montré que l’infection aiguë à T. cruzi :i) diminue la capacité de reproduction de la souris ;ii) provoque une mortalité fœtale massive précoce (résorptions), tardive et néonatale associée à un retard de croissance intra-utérin, et ce, iii) en dehors de toute transmission congénitale du parasite.

Par ailleurs nos travaux montrent que la mortalité fœtale/néonatale est associée à une invasion parasitaire massive du placenta qui présente d’importantes lésions à type d’infiltrats inflammatoires, de nécrose ischémique, de dépôts de fibrine et de thromboses vasculaires. Nous avons noté qu’il existe une relation inverse entre la charge parasitaire des unités utéro-placentaires et la viabilité du conceptus, suggérant que ces lésions placentaires contribuent à la mortalité fœtale en limitant les échanges materno-fœtaux.

Enfin, nous avons également étudié le rôle de cytokines abortogènes comme le TNF et l’IFN-g, produites abondamment pendant l’infection aiguë de la souris par T. cruzi. Les taux sanguins maternels d’IFN-g étaient augmentés au 9ième mais pas aux 17ième et 19ième jours de gestation, alors que les taux de TNF sanguin et la production placentaire de cette cytokine augmentaient aux 17ième et 19ième jours de gestation. Afin d’évaluer le rôle de ces deux cytokines dans la mortalité fœtale, des souris ont été traitées par la pentoxifylline, pour inhiber la transcription du gène de TNF-a et diminuer la production d’IFN-g. Ces souris montraient une réduction de la mortalité fœtale à mi-gestation, associée à une diminution de la production du TNF placentaire, sans modifications des taux systémiques et sans effets sur l’IFN-g, suggérant la contribution du TNF dans la mortalité fœtale associée à l’infection aiguë par T. cruzi.

En conclusion, notre travail montre que l’infection aiguë à Trypanosoma cruzi exerce un effet particulièrement néfaste sur la capacité de reproduction et le développement de la gestation chez la souris et que les lésions placentaires liées à l’infection et la production de TNF par le placenta infecté contribuent à cet effet.

Doctorat en sciences biomédicales
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L'obésité maternelle peut prédisposer aux pathologies métaboliques à l'âge adulte. Une perte de poids préconceptionnelle est recommandée aux femmes obèses, mais ses effets sur la croissance fœto-placentaire et la santé de la descendance adulte sont encore peu connus. Les objectifs de cette thèse étaient d’étudier les effets des trajectoires pondérales maternelles sur le phénotype de la descendance à terme et à l’âge adulte, ainsi que sur l’expression génique. Les descendants de mères obèses présentent une restriction de croissance fœtale, associée à des altérations d’expression des gènes de la machinerie épigénétique dans le foie fœtal et le labyrinthe placentaire. Notre étude souligne la sensibilité particulière de la machinerie d’acétylation des histones au métabolisme maternel. À l'âge adulte, les mâles nés des mères obèses développent une obésité aggravée lorsqu'ils sont exposés à un environnement obésogène. La perte de poids maternelle préconceptionnelle améliore la croissance fœtale et normalise le poids à l’âge adulte. Elle est donc bénéfique pour la descendance. Cependant, certains effets de l’obésité, corrigée par l’intervention nutritionnelle, sont conservés car le poids fœtal et l’expression d’une partie de gènes restent altérés. Ce travail apporte des premiers éléments sur les mécanismes du conditionnement développemental par les trajectoires pondérales maternelles
Maternal obesity (OB) impacts fetal growth and adult offspring phenotype. It is still unknown whether the currently recommended preconceptional weight loss (WL) for obese women is beneficial for feto-placental growth and adult offspring health. The objectives of this thesis were to assess the effects of maternal weight trajectories on offspring phenotype at term and in adulthood, as well as gene expression in placenta and fetal liver. At E18.5, fetuses from obese females presented a fetal growth restriction (FGR); this FGR was almost completely abolished by maternal WL. Placental and hepatic expression of epigenetic machinery genes was affected by maternal OB, especially the histone acetylation pathway. Maternal WL normalized the expression of only a subset of these genes. Males born to OB mothers gained weight faster under high-fat diet than males born to control mothers; maternal WL rescued this phenotype. These results show that expression of epigenetic machinery genes and in particular histone acetylation regulators, is highly sensitive to maternal obesity. Preconceptional WL alleviates the effects of OB on fetal and adult weight but some effects of obesity cured by nutritional intervention were retained in offspring phenotype at term. This study is an important step toward understanding the mechanisms linking maternal nutrition to fetal growth and adult health