Dissertations / Theses on the topic 'Poliomavirus'

nÃo hÃ<br>O poliomavirus tipo BK tem sido associado à nefropatia nos pacientes transplantados renais com uma incidÃncia variando entre 3 - 4% e em 60% dos casos podendo levar à perda do enxerto. Diversos estudos tÃm demonstrado a importÃncia do achado da cÃlula decoy na urina destes pacientes como primeira triagem para a replicaÃÃo viral fazendo o diagnÃstico diferencial entre a rejeiÃÃo celular aguda e a nefropatia pelo BK vÃrus. Neste contexto, o presente estudo objetivou detectar a presenÃa do BKV atravÃs da observaÃÃo da cÃlula decoy na urina dos transplantados renais, correlacionando este achado com os nÃveis sÃricos de urÃia e creatinina e o aspecto histopatolÃgico atravÃs da biÃpsia renal. Para tanto, a urina de 50 pacientes transplantados renais (28 homens e 22 mulheres) atendidos em dois hospitais de Fortaleza (Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio e Hospital Geral de Fortaleza) foram analisadas quanto à presenÃa de cÃlulas decoy detectadas atravÃs da citologia urinÃria pela coloraÃÃo de Papanicolau. As citologias foram analisadas e classificadas em negativa e positiva (&#8805; 1 cÃlula decoy). Resultado: Das 50 citologias urinÃrias analisadas 28 pacientes eram do sexo masculino e 22 do sexo feminino, receptores de doador vivo (n = 43) ou cadavÃrico (n = 7) com positividade para cÃlula decoy de 24% (12 pacientes). NÃveis de creatinina e urÃia aumentados, isoladamente, nÃo foram Ãteis para suspeitar da nefropatia pelo BKV ou rejeiÃÃo do transplante (p > 0,05). A correlaÃÃo dos nÃveis alterados de urÃia e creatinina, com a presenÃa ou ausÃncia das cÃlulas decoy, foi estatisticamente significativa (p < 0,05). A biÃpsia revelou nefropatia pelo BKV em cinco (20%) dos pacientes com cÃlulas decoy na urina e os achados histolÃgicos mais freqÃentes foram fibrose e infiltrado inflamatÃrio mononuclear. A imunossupressÃo mais empregada nos pacientes em estudo foi o esquema 1 (50%) (ciclosporina / azatioprina / zenapx), seguidos por esquemas 2 (16%) (MMF/FK 506 / zanapax) 1 esquema 3 (16%) (ciclosporina / prednizona / azatioprina). ConclusÃo: A positividade para cÃlulas decoy neste estudo (24%) à coincidente com a literatura (8 -26%) sugerindo infecÃÃo ativa. A presenÃa das cÃlulas decoy na urina foi Ãtil para definir os grupos de pacientes com possÃvel nefropatia pelo BKV daqueles com nefropatia por rejeiÃÃo, pois a negatividade para cÃlulas decoy na urina afasta em 100% dos casos a nefropatia pelo BKV, e a sua presenÃa serve de guia para avanÃar na investigaÃÃo de nefropatia pelo BKV. A biÃpsia confirmou em 5 dos 12 casos com cÃlulas decoy positivas na urina (20%) a nefropatia pelo poliomavirus sendo que um deles veio a perder o enxerto. O esquema de imunossupressÃo utilizado pelos pacientes em estudo e a presenÃa de nefropatia pelo BKV nÃo foi o que mais se relaciona na literatura. TambÃm os pacientes com nefropatia pelo BKV que utilizaram esquemas menos associados a esta condiÃÃo tiveram evoluÃÃo pior. Estes Ãltimos resultados indicam a necessidade de novos estudos com maior nÃmero de pacientes, tempo de acompanhamento maior e estudo das cepas virais.<br>The polyomavirus type BK has been associated to the nephropathy in the patients transplanted renal with an incidence varying among 3 - 4% and in 60% of the cases could take to the loss of the graft. Several studies have been demonstrating the importance of the discovery of the decoy cells in these patients' urine as first selection for the viral replication making it diagnose differential between the sharp cellular rejection and the nephropathy for the BK virus. In this context, the present study aimed at to detect the presence of BKV through the observation of the decoy cells in the urine of the transplanted renal, correlating this discovery with the serum urea levels and creatinine and the histopathology features through the renal biopsy. For so much, the 50 transplanted patients' urine renal (28 men and 22 women) assisted at two hospitals of Fortaleza (Academical Hospital Walter CantÃdio and General Hospital of Fortaleza) they were analyzed as for the presence of decoy cells detected through the urinary cytology by the coloration of Papanicolau. Were the cytology analyzed and done classify in negative and positive (&#8805; 1 decoy cell). Result: Of the 50 cytology analyzed urinary 28 patients they were male and 22 female, alive donor's receivers (n = 43) or cadaverous (n = 7) with assertiveness for decoy cells of 24% (12 patient). Creatinine levels and increased urea, separately, they were not useful to suspect of the nephropathy for BKV or rejection of the transplant (p > 0,05). The correlation of the altered levels of urea and creatinine, with the presence or absence of the decoy cells, was significant for the statistics (p < 0,05). The biopsy revealed nephropathy for BKV in five (20%) of the patients with cells decoy in the urine and the more frequent histological discoveries were fibrose and infiltrated inflammatory mononuclear. The most employed immune suppression in the patients in study was the outline 1 (50%) (ciclosporina / azatioprina / zenapx), following for outlines 2 (16%) (MMF/FK 506/zanapax) 1 outline 3 (16%) (ciclosporina / prednizona / azatioprina). Conclusion: The assertiveness for decoy cells in this study (24%) it is coincident with the literature (8 -26%) suggesting active infection. The presence of the decoy cells in the urine was useful to define the patients' groups with possible nephropathy for BKV of those with nephropathy for rejection, because the negativity for decoy cells in the urine moves away in 100% of the cases the nephropathy for BKV, and his/her presence serves as guide to move forward in the nephropathy investigation for BKV. The biopsy confirmed in 5 of the 12 cases with decoy cells positive in the urine (20%) the nephropathy for the polyomavirus and one of them vein to lose the graft. The immunosuppressive outline used by the patients in study and the nephropathy presence for BKV was not it that more it links in the literature. Also the patients with nephropathy for BKV that used less associated outlines this condition had worse evolution. These last results indicate the need of new studies with larger number of patients, time of larger attendance and study of the stumps turn.

MAIA, Tânia Maria Cavalcante. Estudo citológico em urina de pacientes transplantados renais para pesquisa do poliomavirus humano tipo BKV. 2008. 91 f. Dissertação (Mestrado em Patologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2008.<br>Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-02T16:06:06Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_tmcmaia.pdf: 4424925 bytes, checksum: 20b0c14cbdb0b814f695b573a1f5e50f (MD5)<br>Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T15:50:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_tmcmaia.pdf: 4424925 bytes, checksum: 20b0c14cbdb0b814f695b573a1f5e50f (MD5)<br>Made available in DSpace on 2012-02-02T15:50:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_tmcmaia.pdf: 4424925 bytes, checksum: 20b0c14cbdb0b814f695b573a1f5e50f (MD5) Previous issue date: 2008<br>The polyomavirus type BK has been associated to the nephropathy in the patients transplanted renal with an incidence varying among 3 - 4% and in 60% of the cases could take to the loss of the graft. Several studies have been demonstrating the importance of the discovery of the decoy cells in these patients' urine as first selection for the viral replication making it diagnose differential between the sharp cellular rejection and the nephropathy for the BK virus. In this context, the present study aimed at to detect the presence of BKV through the observation of the decoy cells in the urine of the transplanted renal, correlating this discovery with the serum urea levels and creatinine and the histopathology features through the renal biopsy. For so much, the 50 transplanted patients' urine renal (28 men and 22 women) assisted at two hospitals of Fortaleza (Academical Hospital Walter Cantídio and General Hospital of Fortaleza) they were analyzed as for the presence of decoy cells detected through the urinary cytology by the coloration of Papanicolau. Were the cytology analyzed and done classify in negative and positive (≥ 1 decoy cell). Result: Of the 50 cytology analyzed urinary 28 patients they were male and 22 female, alive donor's receivers (n = 43) or cadaverous (n = 7) with assertiveness for decoy cells of 24% (12 patient). Creatinine levels and increased urea, separately, they were not useful to suspect of the nephropathy for BKV or rejection of the transplant (p > 0,05). The correlation of the altered levels of urea and creatinine, with the presence or absence of the decoy cells, was significant for the statistics (p < 0,05). The biopsy revealed nephropathy for BKV in five (20%) of the patients with cells decoy in the urine and the more frequent histological discoveries were fibrose and infiltrated inflammatory mononuclear. The most employed immune suppression in the patients in study was the outline 1 (50%) (ciclosporina / azatioprina / zenapx), following for outlines 2 (16%) (MMF/FK 506/zanapax) 1 outline 3 (16%) (ciclosporina / prednizona / azatioprina). Conclusion: The assertiveness for decoy cells in this study (24%) it is coincident with the literature (8 -26%) suggesting active infection. The presence of the decoy cells in the urine was useful to define the patients' groups with possible nephropathy for BKV of those with nephropathy for rejection, because the negativity for decoy cells in the urine moves away in 100% of the cases the nephropathy for BKV, and his/her presence serves as guide to move forward in the nephropathy investigation for BKV. The biopsy confirmed in 5 of the 12 cases with decoy cells positive in the urine (20%) the nephropathy for the polyomavirus and one of them vein to lose the graft. The immunosuppressive outline used by the patients in study and the nephropathy presence for BKV was not it that more it links in the literature. Also the patients with nephropathy for BKV that used less associated outlines this condition had worse evolution. These last results indicate the need of new studies with larger number of patients, time of larger attendance and study of the stumps turn.<br>O poliomavirus tipo BK tem sido associado à nefropatia nos pacientes transplantados renais com uma incidência variando entre 3 - 4% e em 60% dos casos podendo levar à perda do enxerto. Diversos estudos têm demonstrado a importância do achado da célula decoy na urina destes pacientes como primeira triagem para a replicação viral fazendo o diagnóstico diferencial entre a rejeição celular aguda e a nefropatia pelo BK vírus. Neste contexto, o presente estudo objetivou detectar a presença do BKV através da observação da célula decoy na urina dos transplantados renais, correlacionando este achado com os níveis séricos de uréia e creatinina e o aspecto histopatológico através da biópsia renal. Para tanto, a urina de 50 pacientes transplantados renais (28 homens e 22 mulheres) atendidos em dois hospitais de Fortaleza (Hospital Universitário Walter Cantídio e Hospital Geral de Fortaleza) foram analisadas quanto à presença de células decoy detectadas através da citologia urinária pela coloração de Papanicolau. As citologias foram analisadas e classificadas em negativa e positiva (≥ 1 célula decoy). Resultado: Das 50 citologias urinárias analisadas 28 pacientes eram do sexo masculino e 22 do sexo feminino, receptores de doador vivo (n = 43) ou cadavérico (n = 7) com positividade para célula decoy de 24% (12 pacientes). Níveis de creatinina e uréia aumentados, isoladamente, não foram úteis para suspeitar da nefropatia pelo BKV ou rejeição do transplante (p > 0,05). A correlação dos níveis alterados de uréia e creatinina, com a presença ou ausência das células decoy, foi estatisticamente significativa (p < 0,05). A biópsia revelou nefropatia pelo BKV em cinco (20%) dos pacientes com células decoy na urina e os achados histológicos mais freqüentes foram fibrose e infiltrado inflamatório mononuclear. A imunossupressão mais empregada nos pacientes em estudo foi o esquema 1 (50%) (ciclosporina / azatioprina / zenapx), seguidos por esquemas 2 (16%) (MMF/FK 506 / zanapax) 1 esquema 3 (16%) (ciclosporina / prednizona / azatioprina). Conclusão: A positividade para células decoy neste estudo (24%) é coincidente com a literatura (8 -26%) sugerindo infecção ativa. A presença das células decoy na urina foi útil para definir os grupos de pacientes com possível nefropatia pelo BKV daqueles com nefropatia por rejeição, pois a negatividade para células decoy na urina afasta em 100% dos casos a nefropatia pelo BKV, e a sua presença serve de guia para avançar na investigação de nefropatia pelo BKV. A biópsia confirmou em 5 dos 12 casos com células decoy positivas na urina (20%) a nefropatia pelo poliomavirus sendo que um deles veio a perder o enxerto. O esquema de imunossupressão utilizado pelos pacientes em estudo e a presença de nefropatia pelo BKV não foi o que mais se relaciona na literatura. Também os pacientes com nefropatia pelo BKV que utilizaram esquemas menos associados a esta condição tiveram evolução pior. Estes últimos resultados indicam a necessidade de novos estudos com maior número de pacientes, tempo de acompanhamento maior e estudo das cepas virais.

CATALÀ:<br/><br/>El medi aquàtic presenta concentracions molt variables de virus que constitueixen part de la comunitat microbiana. En zones properes a nuclis urbans el medi aquàtic rep aportacions amb elevades càrregues víriques excretades per l'home i els animals. Aquesta aigua a la vegada pot entrar en contacte altra vegada amb la població humana ja sigui per consum, per aigües de bany, etc. La qualitat de l'aigua i per tant la salut de la població es veu afectada per la presència de microorganismes patògens presents en l'aigua residual que entra en contacte amb l'aigua superficial.<br/>En aquesta tesi s'ha estudiat el possible rol dels poliomavirus i els adenovirus humans com a indicadors de la contaminació vírica d'origen humà. La tesi ha estat dividida en tres blocs.<br/>En el primer bloc s'ha estudiat el possible rol de SV40 com a virus humà i com a contaminant ambiental. SV40 es un virus de simi que va ser descobert com a contaminant de la vacuna de la poliomielitis distribuïda entre 1953 i 1963. Poc després es va veure que el virus era capaç de generar tumors en alguns animals, per això existeix la controvèrsia de si aquest virus pot generar aquest tipus de patologia en humans. En primer lloc es va estudiar l'excreció d'aquest virus per una colònia de micos naturalment infectats pel virus. Es va veure que els individus es seroconverteixen durant la joventut quan es mantenen en grups grans. L'anàlisi de les mostres ambientals de les gàbies va demostrar que SV40 es excretat per aquests micos en concentracions variables. En segon lloc es van analitzar mostres d'aigua residual del nord de la India, on la població humana coexisteix amb l'hoste natural del virus, per comprovar si realment SV40 es pot transmetre entre la població humana. Una de 30 mostres va ser positiva per SV40 però aquesta mostra contenia també contaminació fecal originada pels micos per la qual cosa no es pot concloure que la població humana excreti aquest virus.<br/>El segon bloc de la tesi esta enfocat al desenvolupament i aplicació de mètodes de concentració de poliomavirus i adenovirus humans a partir de mostres d'aigua superficial i de beguda. Es van comparar diversos mètodes per la concentració de virus a partir de diferents volums de usant mostres dopades amb quantitats conegudes de virus. El mètode que va presentar major eficiència es va aplicar en mostres de diferents punts de tres plantes de tractament d'aigües de beguda. La detecció i quantificació dels virus es va realitzar per PCR quantitativa. Les concentracions de virus es van usar per calcular l'eficiència d'eliminació de virus de les plantes. La quantificació d'adenovirus i poliomavirus humans usant PCR quantitativa va demostrar ser una eina útil per avaluar l'eficiència d'eliminació de virus en plantes potabilitzadores i com a índex de la qualitat virològica de l'aigua.<br/>El tercer bloc està centrat en l'anàlisi de la cinètica d'infecció del poliomavirus humà JC en diversos tipus de cultiu cel·lular. La transmissió d'aquest virus encara no ha estat definitivament establerta i també falta informació sobre sistemes eficients per la seva multiplicació in vitro. També es va explorar la possible interacció entre aquest virus i altres virus (adenovirus humans, poliomavirus BK i SV40). Es va veure que JC no interacciona amb adenovirus 2 en cèl·lules de càncer de colon, en canvi es va veure un efecte facilitador per part del poliomavirus BK en la infecció de JC en cèl·lules SVG (línia fetal glial humana), donant una possible explicació del perquè JC encara que és més freqüentment excretat que BK, infecta la població humana després que BK.<br><I>Water quality and public health is affected by the presence of pathogens present in wastewater which can be in contact with ground water used for recreational purposes or for consumption. The possible role of human polyomaviruses and adenoviruses as indicators of human viral faecal contamination has been the main objective of this thesis. The work has been divided in three thematic sections.<br/>The first section has been centred on the study of the possible role of SV40 as a human virus and as an environmental contaminant. SV40 is a simian virus discovered as a contaminant of the polio vaccine administered to millions of people between 1953 and 1963 and some studies have associated this virus with human cancer. The analysis of environmental samples in cages of a naturally infected macaque colony determined that it is excreted in variable concentrations. Waste water from northern India (where human population coexists with the natural host of the virus) was analyzed. SV40 is not excreted by the human population with the same pattern as human polyomaviruses do and it is not detected in the urban sewage analyzed.<br/>The second section is focused on developing and applying virus concentration methods from surface and drinking water. Several concentration methods were compared. The method that presented better performances was used to sample several steps of three drinking-water treatment plants for the presence of JC polyomavirus and human adenoviruses and the virus removal efficiencies of the plants. The quantification of human adenoviruses and JC Polyomavirus using quantitative PCR has showed to be a useful tool to evaluate the removal efficiency of viruses in drinking-water treatment plants.<br/>The third section is focused on the analysis of the multiplication kinetics of JC polyomavirus in different cell cultures. There is a lack of efficient in vitro multiplication systems of the virus. The possible interaction of JC and other viruses was studied. A significant BK helper function was observed when co-infecting SVG (human foetal glial cells) cells with JC that could be related to the fact that JC, being more frequently excreted, does not infect the human population until later that BK. </I>

I virus tumorali inducono oncogenesi nel loro ospite naturale o in sistemi animali sperimentali, manipolando diverse vie cellulari. Ad oggi, sono stati identificati sette virus capaci di causare specifici tumori umani. Inoltre HPV, JCV ed SV40, sono stati associati con un grande numero di tumori umani in sedi corporee non convenzionali, ma, nonostante molti anni di ricerca, nessuna eziologia virale è stata ancora confermata. Lo scopo di questo studio è stato di valutare la presenza ed il significato sia di JCV ed SV40 in tumori ossei umani, e di HPV nel carcinoma della mammella (BC), galattoforectomie (GF), secrezioni mammarie patologiche (ND) e glioblastoma multiforme (GBM). Tecniche di biologia molecolare sono state impiegate per esaminare campioni di tessuto tumorale di 70 tumori ossei (20 osteosarcomi [OS], 20 tumori a cellule giganti [TCG], 30 condrosarcomi [CS]), 168 BCs , 30 GFs, 59 GBM e 30 campioni di ND. Il genoma di SV40 e JCV è stato trovato nel 70% dei CS + 20% degli OS, e nel 13% dei CS +10% dei TCG, rispettivamente. Il DNA di HPV è stato rilevato nel 30% dei pazienti con BC, nel 27% dei campioni GF e nel 13% dei NDs. HPV16 è stato il genotipo maggiormente osservato in tutti questi campioni, seguito da HPV18 e HPV35. Inoltre, il DNA di HPV è stato trovato nel 22% dei pazienti con GBM, in questo tumore HPV6 era il tipo più frequentemente rilevato, seguito da HPV16. L’ ISH ha mostrato che il DNA di HPV è situato all’interno di cellule tumorali mammarie e di GBM. I nostri risultati suggeriscono un possibile ruolo di JCV, SV40 e HPV in questi tumori, se non come induttori come promotori del processo neoplastico, tuttavia diversi criteri devono ancora essere soddisfatti prima di chiarirne il ruolo.<br>Tumor viruses induce oncogenesis in their natural host or in experimental animal systems by manipulating an array of different cellular pathways. To date, seven human viruses have been identified to cause or contribute to specific human cancers. Furthermore some viruses such as HPV, JCV and SV40, have been associated with a large number of human cancers in non conventional body sites; but, in spite of many years of research, no viral etiology have been confirmed for these tumors. The aim of this study was to evaluate the presence and significance of both JCV and SV40 in human bone tumors, and HPV in breast carcinoma (BC), galactophorectomy (GF), pathological nipple discharge (ND) and glioblastoma multiforme (GBM). Molecular biology techniques (PCR) and chromogenic in situ hybridization (ISH) were employed to examine specimens of tumor tissue from 70 bone tumors (20 Osteosarcomas[OS], 20 Giant Cell Tumors [TCG], 30 Condrosarcomas [CS]), 168 BCs, 30 GFs, 59 GBMs and 30 specimens of ND. SV40 and JCV genomes were found in70% of CS + 20% of OS, and in 13% of CS +10% of TCG, respectively. HPV DNA was detected in 30% of BC patients, in 27% of GF specimens and in 13% of NDs. HPV16 was the most common type observed in all these samples, attended by HPV18 and HPV35. In addition, HPV DNA was found in 22% of patients with GBM; in this tumor HPV6 was the most frequent type detected, followed by HPV16. ISH data showed that HPV DNA was located in breast and GBM tumor cells. Our results suggest a possible role of JCV, SV40 and HPV in the induction of these different tumors. However, detection of viruses in human tumors does not prove that they cause those malignancies. Several different criteria need to be met before viral etiology could be established.

I virus tumorali inducono oncogenesi nel loro ospite naturale o in sistemi animali sperimentali, manipolando diverse vie cellulari. Ad oggi, sono stati identificati sette virus capaci di causare specifici tumori umani. Inoltre HPV, JCV ed SV40, sono stati associati con un grande numero di tumori umani in sedi corporee non convenzionali, ma, nonostante molti anni di ricerca, nessuna eziologia virale è stata ancora confermata. Lo scopo di questo studio è stato di valutare la presenza ed il significato sia di JCV ed SV40 in tumori ossei umani, e di HPV nel carcinoma della mammella (BC), galattoforectomie (GF), secrezioni mammarie patologiche (ND) e glioblastoma multiforme (GBM). Tecniche di biologia molecolare sono state impiegate per esaminare campioni di tessuto tumorale di 70 tumori ossei (20 osteosarcomi [OS], 20 tumori a cellule giganti [TCG], 30 condrosarcomi [CS]), 168 BCs , 30 GFs, 59 GBM e 30 campioni di ND. Il genoma di SV40 e JCV è stato trovato nel 70% dei CS + 20% degli OS, e nel 13% dei CS +10% dei TCG, rispettivamente. Il DNA di HPV è stato rilevato nel 30% dei pazienti con BC, nel 27% dei campioni GF e nel 13% dei NDs. HPV16 è stato il genotipo maggiormente osservato in tutti questi campioni, seguito da HPV18 e HPV35. Inoltre, il DNA di HPV è stato trovato nel 22% dei pazienti con GBM, in questo tumore HPV6 era il tipo più frequentemente rilevato, seguito da HPV16. L’ ISH ha mostrato che il DNA di HPV è situato all’interno di cellule tumorali mammarie e di GBM. I nostri risultati suggeriscono un possibile ruolo di JCV, SV40 e HPV in questi tumori, se non come induttori come promotori del processo neoplastico, tuttavia diversi criteri devono ancora essere soddisfatti prima di chiarirne il ruolo.<br>Tumor viruses induce oncogenesis in their natural host or in experimental animal systems by manipulating an array of different cellular pathways. To date, seven human viruses have been identified to cause or contribute to specific human cancers. Furthermore some viruses such as HPV, JCV and SV40, have been associated with a large number of human cancers in non conventional body sites; but, in spite of many years of research, no viral etiology have been confirmed for these tumors. The aim of this study was to evaluate the presence and significance of both JCV and SV40 in human bone tumors, and HPV in breast carcinoma (BC), galactophorectomy (GF), pathological nipple discharge (ND) and glioblastoma multiforme (GBM). Molecular biology techniques (PCR) and chromogenic in situ hybridization (ISH) were employed to examine specimens of tumor tissue from 70 bone tumors (20 Osteosarcomas[OS], 20 Giant Cell Tumors [TCG], 30 Condrosarcomas [CS]), 168 BCs, 30 GFs, 59 GBMs and 30 specimens of ND. SV40 and JCV genomes were found in70% of CS + 20% of OS, and in 13% of CS +10% of TCG, respectively. HPV DNA was detected in 30% of BC patients, in 27% of GF specimens and in 13% of NDs. HPV16 was the most common type observed in all these samples, attended by HPV18 and HPV35. In addition, HPV DNA was found in 22% of patients with GBM; in this tumor HPV6 was the most frequent type detected, followed by HPV16. ISH data showed that HPV DNA was located in breast and GBM tumor cells. Our results suggest a possible role of JCV, SV40 and HPV in the induction of these different tumors. However, detection of viruses in human tumors does not prove that they cause those malignancies. Several different criteria need to be met before viral etiology could be established.

A relação entre os diferentes genótipos do VJC e a patogênese da LEMP permanece ainda uma questão controversa. O presente estudo visou a caracterização genotipica do vírus JC (VJC) e sua associação com a leucoencefalopatia multifocal progressiva (LEMP) em pacientes com aids em São Paulo, no período de 2000 a 2008. Foram avaliadas 51 amostras de líquor de pacientes com LEMP e 47 amostras de pacientes com aids sem LEMP positivas para os genes T e VP1 pela reação em cadeia por polimerase (PCR). Foram identificados, através do sequenciamento genômico os genótipos 1, 2, 3, 4 e 6, sendo que os mais prevalentes foram os genótipos 2 (33%), 1 (27%), seguidos pelo genótipo 3 (23%). O genótipo 1 e mostrou associação positiva com a LEMP (p<0,05), enquanto que o genótipo 3 mostrou associação inversa à LEMP. Durante a internação em que foi diagnosticada LEMP observamos evolução para óbito em 27 (59%) pacientes e alta em 19 (41%). Não houve associação entre os genótipos do VJC ou carga viral liquórica e a evolução para óbito, mas houve associação significante entre o número de linfócitos TCD4+ e o óbito. No presente estudo, uma mutação no sítio 91 do gene VP1 com substituição da leucina para isoleucina ou valina, não descrita anteriormente, foi encontrada exclusivamente em pacientes com LEMP. Substituições nos sítios 123, 128 e 134 foram observadas mais frequentemente nos casos de LEMP. Não foram encontradas diferenças filogenéticas entre as sequências obtidas dos casos e dos controles. A PCR em tempo real padronizada mostrou sensibilidade e especificidade diagnósticas de 89% e 100%, respectivamente.<br>The relationship between the different genotypes of VJC and the pathogenesis of progressive multifocal leukoencephalopathy remains a controversial issue. This study aimed to genotypic characterization of JC virus (JCV) and its association with progressive multifocal leukoencephalopathy (PML) in AIDS patients in Sao Paulo, from 2000 to 2008. We analyzed 51 CSF samples from patients with PML and 47 samples of AIDS patients without PML positives for the T and VP1 genes by polymerase chain reaction (PCR). Were identified by genomic sequencing genotypes 1, 2, 3, 4 and 6, and were the most prevalent genotypes 2 (33%), 1 (27%), followed by genotype 3 (23%). Genotype 1 showed a positive association with PML (p <0.05), while genotype 3 was inversely associated with PML. Overall in-hospital mortality was 59% (27 patients). No association between the genotypes of VJC or CSF viral load and progression to death, but there was a significant association between number of CD4 + and death. In this study, a mutation in site 91 of VP1 gene with substitution of leucine for isoleucine or valine, not described previously, was found exclusively in patients with PML. Substitutions at sites 123, 128 and 134 were observed more frequently in cases of PML. No differences were found between phylogenetic sequences obtained from cases and controls. The real-time PCR showed standardized diagnostic sensitivity and specificity of 89% and 100%, respectively.

The relevance of viral infections in allograft lesion development is still unclear, although some viruses such as HCMV, EBV, VZV, HHV6, HHV8, seem to have a particular role especially during the first months after transplantation, and the polyomavirus BK (BKV), JC (JCV) and the parvovirus B19, have been implicated in the occur of kidney injury after more time following transplant. In this study we investigated systemic and intrarenal viral infections in kidney transplant young recipients and we analysed the association of these data with the risk of acute rejection and chronic allograft injuries predictive of long-term dysfunction. The presence of DNA sequences of human herpesviruses, polyomaviruses, and parvovirus B19 was analysed in renal allograft biopsies performed at baseline, for acute renal dysfunction and for follow-up during the first two years post transplant. We evaluated le presence of viral sequences in 69 transplanted children and young adult who underwent kidney transplant from 2000 to 2006: donor age was less than 6 year in 15 cases. These results regarding the genomic viral presence in these patients were correlated with clinical data, viral DNAemia, renal function tests and allograft histology analysed at the same time points of the follow-up. Taken as a whole, viral DNA was detectable in 46% baseline biopsies and in 70% follow-up biopsies of kidney allografts, where it generally persisted. The most frequently detected viruses were B19 and HHV-6, already present in donor kidneys, and BKV and EBV, usually involving the allograft during follow-up. Among viruses, only the intrarenal persistence of B19 DNA and B19 DNAemia was associated with the development of chronic allograft injury: these kind of data were never demonstrated before in literature. Regarding HCMV DNAemia, it was considered a risk factor for acute rejection as already suggested in many works from the literature. So, we conclude that parvovirus B19 seems to electively target the kidney and its intrarenal persistence is associated with chronic kidney allograft injury. In the second part of this work, in order to identify new markers for a rapidly identification of viral infections occur early after transplantation and are often transmitted from the graft, we investigated whether EBV, HCMV, BKV, and parvovirus B19 genome sequences could be detected in kidney grafts, preservation and washing solutions before implantation, and whether they correlated with the occurrence of viral infections in the recipient. The investigation of different donor graft samples (i.e., biopsy, preservation and washing solutions) that we wholly named “Kidney Unit” (KU), increased the sensitivity of viral DNA testing, but also gave clues to the mechanism of viral transmission through the kidney graft while the different samples are enriched from different cells from the donor: resident kidney cells or circulated blood cells. Viral genome sequences were frequently detected in donor renal graft units, especially in preservation and washing solutions. Overall, viral DNA was detected in at least one type of sample, including biopsy, preservation and washing solutions, in 51/75 (68%) kidney grafts and B19 was the most frequently detected virus (47%). In agreement with their ability to establish latency in B lymphocytes and in monocytes progenitor cells, respectively, EBV and HCMV were probably carried by circulating blood cells, since viral DNA was generally detected in preservation and washing solutions, which are contaminated by blood cells, but not in kidney biopsies; whereas B19 DNA was often detected in kidney graft biopsies, besides in preservation and washing solutions, thus suggesting the virus probably infected resident kidney cells, which might be important sources of transmission to the recipient. BKV is supposed to have tropism for the kidney and to achieve latency in renal tubular epithelial cells; however, we detected BKV DNA only in one donor kidney biopsy, whereas viral DNA was generally detectable in the allograft during follow-up, where it persisted, as we previously demonstrated. The prevalence of EBV, HCMV, and BKV DNA was higher in preservation and washing solutions than in biopsies, indicating they were mainly carried by blood cells, whereas B19 was consistently detected in biopsies and solutions, suggesting virus was also present in resident kidney cells. Detection of viral DNA in kideny grafts was a significant risk factor for symptomatic infections in seronegative recipients in the early post-transplant period. In particular, EBV DNA-positive donor grafts were significantly associated with the risk of EBV infection in seronegative recipients, whereas the presence of B19 DNA in kidney grafts was a risk factor for B19 infection and/or DNAemia both in B19-seronegative and seropositive recipients. At variance, molecular testing for HCMV and BKV in donor graft had poor diagnostic utility. In conclusion, this study demonstrates that detection of viral nucleic acids in preservation and washing solutions of a solid organ, i.e., the kidney, before implantation could be a useful test to identify recipients with increased risk of infections, especially symptomatic infections, in the early post-transplant period. The sensitivity and specificity of the test depends on viral tropism for cells and tissues of the graft.<br>Il ruolo dell’infezione virale nell’insorgenza di lesioni nel rene trapiantato non è stato ancora del tutto precisato sebbene alcuni virus come HCMV, EBV, VZV, HHV6, HHV8, in una fase più precoce, e il poliomavirus BK (BKV) e JC (JCV) e al parvovirus B19, dopo più tempo dal trapianto, sembrano avere una precisa funzione nel determinare danni a carico del rene trapiantato. Infatti, tutti questi virus sono stati già descritti come importanti patogeni con tropismo renale. Nel presente studio sono state investigate le infezioni virali, intrarenali e sistemiche, in una casistica di bambini e giovani adulti che sono stati sottoposti a trapianto di rene dal 2000 al 2006. Più esattamente sono stati analizzati i dati della prevalenza delle sequenze genomiche virali intrarenali e delle infezioni sistemiche (DNAemia) in associazione con il rischio di insorgenza di rigetto acuto e/o di lesioni croniche del rene trapiantato. La presenza delle sequenze genomiche virali dei virus erpetici umani, dei poliomavirus e del parvovirus B19 è stata analizzata a livello della biopsie di rene eseguite al momento del trapianto, biopsie baseline, in presenza di disfunzioni renali acute e durante i primi due anni dal trapianto seguendo i tempi del protocollo di follow-up cioè a 6, 12 e 24 mesi post trapianto. Sono stati studiati 69 riceventi pediatrici, bambini e giovani adulti, con un’età media pari a 13 anni che avevano ricevuto il rene da donatore deceduto in 65 casi e in 4 casi da famigliare vivente: l’età dei donatori era inferiore a 6 anni in 15 casi. I risultati di questa prima parte dello studio, relativi alla prevalenza del DNA virale intrarenale sono stati correlati con i dati clinici, i dati di viremia (DNAemia), di funzionalità del rene trapiantato e con le valutazioni istologiche dello stesso momento del follow-up. Globalmente, il DNA virale è stato ritrovato nel 46% delle biopsie baseline e nel 70% delle biopsie di follow-up, dove generalmente persiste nelle biopsie successive. I virus più frequentemente identificati sono il parvovirus B19 e l’herpesvirus HHV6, già presenti a livello delle biopsie di rene del donatore. Mentre la presenza delle sequenze genomiche dei virus EBV e BKV è stata associata alla comparsa di lesioni acute nel rene trapiantato. Tra tutti i virus studiati e ritrovati a livello del rene del ricevente, soltanto il DNA del parvovirus B19 e le relativa DNAemia sono state associate con lo sviluppo di lesioni croniche del rene trapiantato: tale dato non era mai stato dimostrato in precedenti studi della letteratura. Per quanto riguarda il HCMV, la relativa DNAemia è stata considerata un fattore di rischio per la comparsa di episodi di rigetto acuto: dato, questo, già dimostrato e confermato con il nostro studio. Quindi è possibile concludere che il parvovirus B19 sembra preferire, in modo particolare, il rene come possibile bersaglio da infettare e la sua persistenza intrarenale è associata con la comparsa di lesioni croniche del rene trapiantato. Nella seconda parte del presente studio, con l’intento di identificare nuovi marcatori del rischio di infezione del ricevente trapiantato di rene, è stata valutata la presenza delle sequenze genomiche virali di EBV, HCMV, BKV, e del parvovirus B19 nel rene del donatore prima dell’impianto; più precisamente sono state analizzate le biopsie, le soluzioni di conservazione e di lavaggio dell’organo prima che questo venga trapiantato. È stato osservato poi se la presenza del DNA virale nell’unità rene (ovvero l’insieme dei diversi campioni derivati dal donatore: biopsia, soluzione di conservazione e di lavaggio) correlava con la comparsa dell’infezione virale nel ricevente. L’ indagine condotta a livello dei diversi campioni dell’unità rene del donatore, consente di aumentare la sensibilità del test molecolare, ma anche da maggiori indicazioni relative al meccanismo di trasmissione dell’infezione virale mediante il rene trapiantato dal momento che i diversi campioni dell’unità rene sono arricchiti di più frazioni cellulari del donatore: sono presenti sia le cellule residenti del rene a livello della biopsia, ma anche le cellule del sangue circolante soprattutto nel liquido di lavaggio. Le sequenze genomiche virali sono frequentemente identificate nell’unità rene del donatore, soprattutto nelle soluzioni di conservazione e di lavaggio. Globalmente, il DNA virale è stato identificato, in almeno un tipo di campione dell’unità rene, in 51 su 75 reni donati (68%) e il virus più ritrovato è il B19 (47%). In accordo con la loro capacità di definire uno stato di latenza dei linfociti B e nei monociti, il DNA dei virus EBV, nel primo caso, e HCMV nel secondo, sono stati identificati principalmente nelle soluzioni di lavaggio e di conservazione, poiché tali virus sono probabilmente veicolati dalle cellule del sangue periferico. Mentre, nel caso del parvovirus B19, il DNA virale è stato trovato spesso nelle biopsie del rene del donatore: questo suggerisce che il virus probabilmente infetta le cellule residenti del rene, le quali potrebbero essere un importante sorgente di trasmissione dell’infezione al ricevente. Il poliomavirus BK si pensa abbia un particolare tropismo per il rene e che vada in latenza nelle cellule epiteliali tubulari del rene: ciononostante nel presente studio il DNA di BKV è stato identificato solo in una biopsia di rene del donatore mentre è stato più volte ritrovato, anche in maniera persistente, nelle biopsie di follow-up. In generale, è stato possibile constatare che la presenza del DNA virale nel rene del ricevente è un importante fattore di rischio di infezione sistemica per il ricevente sieronegativo nel primo periodo successivo al trapianto. In particolare, la presenza del DNA di EBV nell’ unità rene donata comporta un più elevato rischio di infezione da EBV nel ricevente sieronegativo, mentre la persistenza di B19 nel rene del ricevente è un fattore di rischio di infezione e/o di DNAemia da B19 per il ricevente sia sieropositivo che sieronegativo. Al contrario questo tipo di indagine molecolare dell’unità rene del donatore, condotta per il HCMV e per BKV non mostra una valida utilità diagnostica. Concludendo, con questo studio è stato possibile dimostrare che l’identificazione di acidi nucleici virali a livello delle soluzioni di lavaggio e di conservazione del rene da trapiantare potrebbe essere un test molecolare particolarmente utile per riconoscere i riceventi con un maggior rischio di infezione, soprattutto sistemica. La sensibilità e la specificità di tale test molecolare dipende però dal tropismo del virus per le cellule o per il tessuto dell’organo da trapiantare.

Polyomaviruses are suspected to cause cancer in humans although to date Merkel cell polyomavirus (MCPyV) is the only proven human carcinogen. Potential associations of up to nine polyomaviruses with 468 lymphoproliferative disorders, 1135 bladder cancer and 359 chronic lymphocytic leukemia (CLL) subjects using three case-control studies in Spain has been explored. Viral exposure was measured as seroreactivity against these viruses by virus-like-particles enzyme linked immunosorbent assay and fluorescent bead-based multiplex serology technology. In explored lymphomas, only diffuse large b-cell lymphoma (DLBCL) showed a significant six-times higher MCPyV seroprevalence (OR=6.10; 95%CI=1.88-19.75) than controls. Bladder cancer cases showed significant higher seroreactivities against BKPyV (OR= 1.37; 95%CI=1.04-1.80) and MCPyV (OR=1.48; 95%CI=1.16-1.88). In CLL, lower seroprevalences for the nine polyomaviruses tested were obtained (OR range=0.21-0.70). The serological patterns obtained in DLBCL and bladder cancer cannot exclude reactive patterns due to disease. Confirmation by means of prospective and molecular studies is required to adequately interpret the associations obtained. Our results in CLL are inconclusive for carcinogenesis due to strong lower seroreactivities. It is unlikely the polyomaviruses explored could play a role in CLL.<br>Es sospita que els Polyomaviruses causen càncer en humans però només el poliomavirus de cèl•lules de Merkel (MCPyV) es carcinògen humà confirmat. Fins a nou poliomavirus en 468 trastorns limfoproliferatius, 1135 càncers de bufeta i 359 leucèmies limfocítica crònica (LLC) s’han explorat mitjançant tres estudis cas-control a Espanya. L’exposició viral es va mesurar mitjançant enzyme linked immunosorbent assay amb virus-like-particles i tecnologia múltiplex de serologia fluorescent basada en beads. Dels limfomes explorats, nomes el limfoma difús de cèl•lules b grans (LDCBG) va mostrar una MCPyV seroprevalença significativament 6-cops mes alta (OR=6.10; 95%CI=1.88-19.75) versus controls. Els casos de càncer de bufeta van mostrar elevades seroreactivitats envers BKPyV (OR= 1.37; 95%CI=1.04-1.80) i MCPyV (OR=1.48; 95%CI=1.16-1.88). En LLC, es van observar seroprevalences més baixes per als 9 poliomavirus mesurats (OR rang=0.21-0.70). Els patrons serològics obtinguts en LDCBG y càncer de bufeta no permeten descartar que siguin deguts a la malaltia. Es necessita confirmació mitjançant estudis prospectius i moleculars per interpretar correctament les associacions obtingudes. Els resultats en LLC son inconclusius respecte carcinogènesi donades les baixes seroreactivitats observades. Es poc probable que els poliomavirus estudiats juguin algun paper en LLC.

O Vírus Polioma (Py), induz a formação de múltiplos tumores em camundongos, e causa transformação maligna em cultura, levando à menor dependência de soro e ancoragem para crescimento. Dentre as proteínas codificadas pelo vírus polioma, o antígeno MT (Middle T), isoladamente, é capaz de transformar linhagens celulares imortalizadas e gerar tumores quando injetadas em camundongos, sendo que este caráter transformante está relacionado à sua capacidade de se ligar e modular a atividade de diversas proteínas, muitas das quais relacionadas com o controle do ciclo celular. Para melhor compreender os mecanismos moleculares da transformação maligna mediada por MT e do controle do ciclo celular, o objetivo deste trabalho foi identificar e caracterizar novas vias de transdução de sinal e novos genes regulados por MT. Para a busca de genes regulados pela atividade de MT, comparou- se o perfil da expressão gênica da linhagem que expressa MT (MTWT) com o da linhagem controle (PLJ) através de três metodologias: membranas de nylon comerciais (Atlas Mouse Cancer 1.2 - Clontech), bibliotecas subtrativas de cDNA construídas através da técnica de RDA (Análise de Diferença Representacional) e lâminas comercias de microarrays (CodeLink Bioarrays - GE Healthcare). As três metodologias permitiram a identificação de cerca de 1.200 genes-candidatos a serem regulados por MT, dos quais 84 genes foram selecionados para terem sua expressão diferencial analisada por Real-Time PCR. Para identificar possíveis vias de transdução de sinal relacionadas à regulação dos genes analisados utilizou-se, como template, além do cDNA proveniente das linhagens PLJ e MTWT, cDNAs de linhagens que expressam a proteína MT mutada nas tirosinas 315, 322, 250 e 315/322. Após confirmação por Real-Time PCR, dois genes foram selecionados para analise funcional: Dlk1 (Delta Like-1 homolog) que, apesar de não ter relação direta com o controle do ciclo celular, está ligado à formação de alguns tumores, e MN1 (Meningioma 1), um gene pouco caracterizado que já foi relacionado à formação de leucemias mielóides e meningiomas. - I - RESUMO Para caracterizar o papel de MN1 na linhagem PLJ, foram geradas linhagens PLJ que superexpressam RNAi de MN1. A análise dos parâmetros de crescimento, em substrato sólido e semi-sólido, da linhagem PLJ parental e PLJ expressando o RNAi de MN1 não apresentou alterações estatisticamente significativas. Para o estudo do efeito de Dlk1 na transformação mediada por MT, foram geradas linhagens MTWT que superexpressam Dlk1, o que levou a um aumento estatisticamente significativo na taxa de divisão celular, quando comparada com a linhagem controle (vetor vazio), indicando um possível papel de Dlk1 no sinal desencadeado por MT e no controle do ciclo celular. Visando identificar novas vias de regulação entre os genes analisados, os níveis de expressão gênica dos demais genes foram avaliados por Real-Time PCR e analisados através de correlação de Pearson, aplicada a cada par de genes. Após a análise, foram identificadas 64 possíveis vias de regulação, sendo que 13 destas foram descritas pela primeira vez no presente trabalho e as demais, por já estarem descritas na literatura, permitiram validar o modelo estudado.<br>Polyomavirus (Py) induces multiple tumors in mice and malignant transformation in culture, leading to a lower serum and anchorage dependence. Among the proteins coded by the polyomavirus genome, the MT antigen (Middle T) alone is able to transform immortalized cell lines and to generate tumors when injected into animals. This transforming ability is related to its capacity of bind to and modulate several proteins, many of which are related to cell cycle control. Aiming at a better understanding not only of the molecular mechanisms of malignant transformation mediated by MT, but, also, of the processes underlying cell cycle control, the objectives of this work were to identify and characterize novel genes and signal transduction pathways regulated by MT. For screening of the MT regulated genes, the gene expression profiles of the MT expressing MTWT cell line and of the PLJ control cell line were compared using three methodologies: commercial nylon membranes (Atlas Mouse Cancer 1.2 - Clontech), subtracted cDNA libraries constructed using the RDA methodology (Representational Difference Analysis) and commercial microarrays (CodeLink Bioarrays - GE Healthcare). These three methodologies allowed us to identify about 1,200 candidate genes as being regulated by MT, from which 84 genes were selected to have their differential expression analyzed by Real- Time PCR. In an attempt to identify possible signal transduction pathways related to these genes, we used as templates, in addition to cDNAs from the PLJ and MTWT cell lines, cDNAs from cell lines which express MT mutated in tyrosines 315, 322, 250 and 315/322. After confirmation by Real-Time PCR, two genes were selected for further functional analysis: Dlk1 (Like-1 Delta homolog), which is related to the differentiation process and to formation of some tumors, and MN1 (Meningioma 1), a newly identified gene, which can induce leukemia and meningioma tumor formation. To characterize the functional role of MN1, we generated PLJ cell lines in which MN1 was knocked-down by RNAi. The growth characteristics in solid and semi-solid substrates of control PLJ and of - III - ABSTRACT MN1 knocked down PLJ cells did not present any statistically significant alteration. To study the effect of Dlk1 in MT mediated cell transformation, we generated MTWT cell lines overexpressing Dlk1, which induced a significant increase in cell division rate when compared to the empty vector control cell line, indicating a possible role of Dlk1 in the MT induced signals and in cell cycle control. Aiming at identifying new regulatory pathways among the genes analyzed, the Real-Time PCR results were subjected to analysis by Pearson correlation, applied to each pair of genes, allowing us to identify 64 possible regulatory pathways, 13 of which were described, for the first time, in the present work. The other pathways, which had previously been described in the literature, allowed us to validate the model studied.

Introdução - O cancro colo-retal (CCR) é o segundo tipo de cancro mais prevalente em Portugal, em ambos os sexos e o terceiro a nível mundial, apenas no sexo masculino. Julga-se que a infeção pelo poliomavírus humano JC (JCV) estimula o desenvolvimento tanto de CCR como de outros tipos de cancro. Esta infeção surge na infância, podendo persistir durante toda a vida do indivíduo. A medula óssea é um reservatório bastante importante do JCV e é o local mais provável da transformação neurotrópica deste (Tan et al., 2009). A expressão do genoma do JCV, em diversos ensaios com animais, resultou na indução de vários tumores. O antigénio-T (Ag-T) e a agnoproteína, proteínas virais, cooperam juntas para a oncogénese do JCV. A maioria dos adenocarcinomas do cólon expressa proteínas virais (Del Valle & Khalili, 2010). As mutações no genoma da p53 são das alterações genéticas mais comuns no desenvolvimento do CCR (Iacopetta, 2003). Objetivos - Estudar polimorfismos da p53 em CCR com JCV e tentar relacionar lesão e vírus. Material e métodos - Em amostras de tecido fresco de CCR e de mucosa adjacente e não adjacente a este (n=66) (grupo de estudo) e de mucosa normal (n=21) (grupo controlo), avaliou-se a presença de sequências de DNA do JCV, pela técnica de Nested-PCR e estudaram-se polimorfismos da p53, pelas técnicas de PCR, purificação e sequenciação. Resultados e discussão - A estimativa de um maior “risco” de sequências de DNA do JCV ocorre: em adenocarcinoma (RC=14.40; IC95%=3.286-63.11), em mucosa adjacente (RC=6.857; IC95%=1.265-6.481) e em mucosa não adjacente (RC=4.333; IC95%=1.155- 16.25) versus mucosa normal (grupo-controlo); tendencialmente, em adenocarcinoma e em mucosas, adjacente e não adjacente, mais do que em mucosa normal. Conclusões - Na mucosa colo-retal, a presença de JCV é a exceção em grupo-controlo e a regra em grupo com adenocarcinoma, parecendo haver tropismo do vírus JC por esta lesão. Ao confirmar-se a tendência para um maior número de mutações da p53 em adenocarcinoma e em mucosas, adjacente e não adjacente a esta lesão, as terapias génicas profiláticas, moduladoras e curativas podem ser muito importantes.<br>Introduction - The colorectal cancer (CRC) is the second most prevalent type of cancer in Portugal, in both sexes, and the third of the worldwide level, only in males. It is believed that infection with the human polyomavirus JC (JCV) stimulates the development of both CRC as well as other types of cancer. This infection appears in childhood and may persist throughout the life of the person. Bone marrow is a reservoir that is very important and the most likely location of the transformation of neurotropic JCV (Tan et al., 2009). Expression of the genome of JCV, in various tests with animals, resulted in the induction of various tumors. The T-antigen (Ag-T) and the agnoprotein, are viral proteins, that cooperate together to oncogenesis of JCV. The majority of colon adenocarcinomas expresses viral proteins (Khalili & Del Valle, 2010). Mutations in the genome of p53 are the most common genetic alterations in the development of CRC (Iacopetta, 2003). Objectives - Study the p53 polymorphisms in CRC with JCV and try to connect the lesion and the virus. Materials and Methods - In samples of fresh tissue of CRC and normal mucosa, adjacent and not adjacent to this lesion (n = 66) (study group) and normal mucosa (n = 21) (control group), evaluated the presence of JCV DNA sequences by nested PCR technique and were studied polymorphisms of p53 by PCR, purification and sequencing. Results and discussion - The estimative of the biggest “risk" of DNA sequences of JCV occurs: in adenocarcinomas (OR=14.40; CI95%=3.286-63.11), in adjacent mucosa (OR=6.857; CI95%=1.265-6.481) and in non-adjacent mucosa (OR=4.333; CI95%=1.155- 16.25) versus normal mucosa (control group); tendentiously, in adenocarcinoma and mucosa, adjacent and non-adjacent, more than in normal mucosa (control group). Conclusions - In the colorectal mucosa, the presence of JCV is the exception in the control-group and the rule in the group with adenocarcinoma, there seems tropism of JC virus by this lesion. By confirming the trend for an increased number of mutations in p53 adenocarcinoma and mucosa, adjacent and non-adjacent to this lesion, the prophylactic, modulators and curative gene therapies can be very important.

Trabalho final de mestrado integrado em Medicina, área cientifica de Dermatologia, apresentado á Faculdade de Medicina da Universidade de Coimbra<br>O carcinoma de Merkel é uma neoplasia cutânea rara, de provável origem neuroendócrina, que exibe um comportamento biológico agressivo. Nas últimas décadas assistiu-se a um aumento significativo da sua incidência. Apesar de serem apontados como factores de risco a imunossupressão, idade superior a 50 anos e a exposição à radiação solar, o processo de oncogénese permanece por esclarecer. Neste sentido, vários estudos genéticos e moleculares descrevem associações com alterações cromossómicas, vias apoptóticas e proliferação celular. Recentemente, na base da hipótese de uma infecção viral poder actuar como factor oncogénico, é identificado material genómico de um novo poliomavírus humano – poliomavírus das células de Merkel - integrado no DNA das células tumorais em cerca de 70-80 % dos casos, sustentando assim uma relação entre a infecção pelo referido vírus e o processo de oncogénese. Um outro aspecto relevante é o facto da maioria das lesões se localizarem frequentemente em áreas foto-expostas e a existência de casos de aparecimento síncrono e/ou metácrono deste tumor e outros tumores cutâneos cuja etiologia é fortemente atribuída à radiação ultravioleta. Assim, este trabalho propõe apresentar uma revisão sobre o papel deste poliomavírus na oncogénese do carcinoma de Merkel, abordando ainda, a questão da radiação ultravioleta como factor concorrente para o mesmo. Para a execução desta revisão, foi realizada uma pesquisa bibliográfica baseada sobretudo nas fontes médicas Pubmed/MedLine desde Janeiro de 2000 até Dezembro de 2011<br>Merkel cell carcinoma is a rare cutaneous neoplasia, of probable neuroendocrine origin, that shows an aggressive biological behavior. In the last few decades a significant increase of its incidence was observed. Although imunosupression, age over 50 years-old and sun exposure are pointed as risk factors, the process of oncogenesis remains unclear. Some genetic and molecular studies describe associations with chromosomal alterations, apoptotic ways and cellular proliferation. Recently, based on the hypothesis of a viral infection being an oncogenic factor, genomic material of a new human polyomavirus – Merkel cells’ polyomavirus - was integrated in tumor cells’ DNA in about 70 - 80% of the cases, supporting a relationship between viral infection and the oncogenic process. On the other hand, the majority of lesions are located in photo-exposed areas and there are cases of synchronous and/or metachronous occurrences of this tumor and other cutaneous tumors whose etiology is strongly attributed to UV radiation. This issue presents a revision on the role of this polyomavirus in the oncogenic process of Merkel cell carcinoma, as well as UV radiation as competing factor for the same. For the execution of this work a bibliographical research mostly based in medical sources Pubmed/MedLine was carried through, since January of 2000 until December of 2011.