Dissertations / Theses: 'Pommier – Multiplication in vitro'

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Belaizi, Mohamed. "Multiplication du pommier (Pyrus malus L. ) par diverses techniques de culture in vitro (micropropagation, organogenèse adventive et embryogenèse somatique)." Compiègne, 1989. http://www.theses.fr/1989COMPD228.

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Abstract:

La micropropagation du pommier (Pyrus malus L. ) est réalisée à partir d'apex prélevés sur des tiges herbacées. Les facteurs qui influencent le taux de multiplication et d'enracinement ont été déterminés puis adaptés pour améliorer les rendements, et ainsi maitriser cette technique de culture in vitro. Le milieu de multiplication contenant la benzyladénine (4,4 m) et l'A. I. B. (0,49 m) a permis une augmentation du nombre de pousses axillaires à la température de 27°C. L'incorporation de la phloridzine dans le milieu nutritif a produit 9,7 pousses axillaires par explant, après 7 semaines de culture. Le milieu d'introduction racinaire additionné d'A. I. A. Ou d'A. I. B. , donne les meilleurs pourcentages de rhizogenèse. L'optimum de réponse à l'enracinement est obtenu sur le milieu d'enracinement enrichi de phloroglucinol. L'organogenèse adventive et l'embryogenèse somatique ont été exploitées pour disposer de nouvelles méthodes de multiplication. La néoformation de bourgeons a été obtenue à partir d'entre-nœuds. Le TIBA (1 m) associé à la BA (4,4 m) a permis l'induction de bourgeons néoformés. Des bourgeons adventifs et des embryons somatiques ont été produits séparément ou simultanément à partir d'embryons zygotiques. Le choix de l'auxine, la dose auxinique et la bensyladénine favorisent la régénération adventive. Les explants immatures réagissent plus vigoureusement en organogenèse adventive que les explants matures. L'origine des néoformations adventives ou embryogènes est située au niveau des cellules épidermiques et sous-épidermiques
Micropropagation of apple (Pyrus malus L. ) is realized from the apex isolated for the herbaceous stem. We have studied the factors which influence the rate of multiplication and rooting in order to improve the yields and to master this in vitro culture technique. In multiplication medium containing benzyladenine (4,4 m) and IBA (0,49 m) has permitted to increase the number of axillary buds at the temperature of 27°C. Addition of phloridzine in the medium has produced 9,7 axillary buds per explants, after 7 weeks of culture. The root inducing medium having IAA or IBA gives the best percentage of rhizogenese. Optimal rooting response is obtained with the rooting medium containing phloroglucinol. Adventitious organogenesis and somatic embryogenesis has been exploited to promote new techniques of multiplication. The neoformation of buds has been obtained from internodal explants. TIBA (1 m) with BA (4,4 m) has permitted the induction of buds. The adventitious buds and somatic embryos have been obtained separately or simultaneously from zygotic embryos. The high concentration of auxin and benzydadenine stimulate adventitious regeneration. Immature explants react more vigorously for adventitious organogenesis then the mature explants. Origin of neoformed adventitious buds or embryos is situated at the level of epidermal or sub-epidermal cells

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Zhang, Yong Xiang. "Recherche in vitro de plantes haploïdes chez le pommier cultivé (Malus x domestica Borkh. ) : androgenèse, gynogenèse, parthénogenèse in situ induite par du pollen irradié." Paris 11, 1988. http://www.theses.fr/1988PA112343.

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Abstract:

Trois méthodes d'haploïdisation ont été étudiées : Androgenèse in vitro par culture d'anthères, Gynogenèse in vitro par culture d'ovules non fécondés et Parthénogenèse in situ induite par du pollen irradié suivie de la culture in vitro des embryons immatures. La culture d'anthères a conduit à l'obtention d'embryons androgénétiques chez « Topred », «Starking » et « Rr » ainsi que de cals androgénétiques chez d'autres génotypes. Cette étude a révélé que la réussite de l'androgenèse dépend du génotype, du prétraitement au froid et du milieu de culture, dont l'influence est due principalement à la qualité ainsi qu'à la quantité des phytohormones et des sucres. La difficulté majeure rencontrée est le blocage in vitro des embryons obtenus. La culture d'ovules non fécondés a conduit à la formation de 2 embryoïdes chez "R1-49" et de cals chez 2 autres génotypes. Cette expérience préliminaire montre que le meilleur mode de mise en culture est celui d'ovaires excisés dont les ovules restent attachés au tissu placentaire. Des plantes haploïdes issues du développement parthénogénétique in situ ont été induites chez « Erovan » grâce à l'emploi de pollen irradié et avec recours à la culture in vitro des embryons immatures. Cette méthode a également permis d'obtenir de nombreux embryons encore en évolution chez d'autres génotypes. La dose d'irradiation du pollen à 500 Gy s'avère être un bon compromis; le meilleur stade de prélèvement des fruits pour la mise en culture des embryons immatures se situe 3 mois après la pollinisation. En conclusion, parmi les 3 méthodes étudiées, la Parthénogenèse in situ induite par du pollen irradié paraît très prometteuse pour la création de plantes haploïdes chez le pommier
The cultivated apple (Malus X domestica Borkh, 2n = 2x = 34) is an allogametic perennial, propagated by vegetative methods. It has a high degree of heterozygosity, and a complex genomic constitution. It can be described as a secondary polyploid. The production of haploid plants in such species therefore presents multiple interests concerning cytogenetics and mutagenesis as well as breeding of cultivars. Three haploidization methods have been studied in this thesis: in vitro androgenesis by anther culture, in vitro gynogenesis by unfertilized ovule culture, and in situ parthenogenesis induced by irradiated pollen followed by in vitro culture of immature embryos. - Anther culture has produced a number of androgenetic embryos in three genotypes ('Topred', 'Starking' and 'Rr') and androgenetic calli in three other genotypes ('Golden Delicious', 'R8-16' and 'Doubled Haploid'). Cytological observations showed that androgenetic development has been induced mainly by a diversion of the 1st pollinic mitosis leading to 2 identical nuclei. Our studies have shown that several factors could influence in vitro androgenesis: * The genotype plays a determining role in androgenetic embryo formation * A cold pretreatment (≥ 5 weeks at 2 to 6°C) applied to the flower bud before anther culture has proved to be necessary for embryo formation; 2 to 6 weeks of the same treatment can significantly increase the rate of callogenesis. .

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Perrin, Adrien. "Transmission des marques épigénétiques lors de la multiplication sexuée et de la propagation asexuée chez le pommier (Malus domestica)." Thesis, Angers, 2020. http://www.theses.fr/2020ANGE0010.

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Abstract:

Par son mode de propagation clonale(greffage), le pommier est un modèle intéressant pour les études épigénétiques. On observe en effet, une variabilité phénotypique au sein d’une même variété,suggérant une contribution de mécanismes épigénétiques. Au début de cette thèse les mécanismes de transmission de marqueurs épigénétiques, tel que la méthylation de l’ADN,étaient encore peu étudié chez les plantes pérennes.Pour mieux comprendre comment les marques épigénétiques sont transmises et contribuent à des traits phénotypiques, nous avons défini deux axes de recherche principaux: (i) En utilisant la technologieCRISPR-Cas9 nous avons créé des lignées de pommier afin d’obtenir une diminution systématique de la méthylation de l’ADN. (ii) Afin d'évaluer la transmission des marques épigénétiques lors de la reproduction sexuée et asexuée, nous avons comparé les épigénomes d’arbres adultes, de greffons et de semis obtenus par autofécondation sur une lignée modèle double-haploïde. Les analyses à l’échelle de génomes complets ont montré une absence de modification globale au niveau de la méthylation de l’ADN entre un arbre adulte, un greffon et un semis de pommier.Cependant nous avons détecté des régions spécifiques présentant une différence de méthylation de l’ADN (DMRs). Fait intéressant, nous avons détecté plus de DMRs entre le semis et le greffon ou l'arbre qu’entre l'arbre et le greffon, ce qui suggère que l'arbre et le greffon sont plus proche au niveau épigénétique. Nos résultats de phénotypage,d’analyses transcriptomique et de méthylome confirment la différence entre arbre adulte et semis.Mais également que les greffons sont à l’interface entre juvénilité et maturité
Thanks to its clonal propagation (grafting), apple tree is an interesting model for epigenetic studies. Indeed, phenotypic variability can be observed within the same variety, suggesting a potential contribution of epigenetic mechanisms. At the beginning of this thesis, the mechanisms of transmission of epigenetic marks, such as DNA methylation, were still little studied in perennial plants.To better understand how epigenetic marks are transmitted and contribute to phenotypic traits, we have defined two main axes of research: (i) UsingCRISPR-Cas9 technology we have created apple mutant lines in order to obtain a systematic decrease in DNA methylation. (ii) In order to assess the transmission of epigenetic marks during sexual and asexual reproduction, we compared the epigenomes of adult trees, grafts and seedlings obtained by self-fertilization on a model doubled-haploid line. Analyses at the whole epigenome level indicated that there is no overall change in DNA methylation between an adult tree, a grafted tree and an apple seedling. However, we were able to detect specific regions that are differentially methylated (DMRs). Interestingly, more DMRs were detected between seedlings and grafted tree or adult tree than between the tree and grafted tree, suggesting that the tree and grafted tree are closer epigenetically. Our phenotypic, transcriptomic and methylome analysis results confirm the difference between adult trees and seedlings. They also confirm that grafted tree is at the interface between juvenility and maturity

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Maarri, Khalil al. "Micropropagation in vitro du pommier (M9), du poirier ("williams" et "passe crassane") et du cognassier de Provence : problèmes posés par l'état physiologique du matériel." Paris 6, 1986. http://www.theses.fr/1986PA066057.

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Abstract:

Au cours du travail présenté dans ce mémoire, nous sommes parvenus à obtenir, de façon systématique, la micropropagation in vitro et l'acclimatation ex vitro non seulement des poiriers juvéniles issus de pépins de "passe crassane", mais aussi du cognassier de Provence et de deux cultivars de poirier, "williams" et "passe crassane". Les conditions de culture concernant les différentes phases de la micropropagation et l'acclimatation ont été étudiées. Plusieurs problèmes d'ordre physiologique (dormance des bourgeons in vitro, anomalie des pousses formées, nécrose des apex) ont pu être surmontés ou limités.

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Lavieville, Laurence. "Étude de la microtubérisation in vitro de la Pomme de terre (Solanum tuberosum L. )." Amiens, 1991. http://www.theses.fr/1991AMIE0100.

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Abstract:

La microtubérisation de la Pomme de terre (variétés Bintje, Ténor, Dominor et Brettor) est effectuée à partir de boutures nodales prélevées sur des plantes axéniques cultivées à 24°C et sous une photopériode de 16 heures. Les conditions "standard" de tubérisation sont définies par le maintien des cultures réalisées en bocaux (20 ou 30 nœuds/bocal), à 19°C et à l'obscurité durant 5 semaines. L'influence de l'état physiologique des plantes mères sur la microtubérisation ultérieure est évaluée à partir d'une étude des milieux de multiplication, de l'origine des explants ou de l'âge des cultures. L'apport glucidique du milieu de tubérisation détermine la production de microtubercules qui ne peut être améliorée par l'addition d'autres composés. L'influence du rapport sucre/azote est mis en évidence. L'effet d'un éventuel pouvoir inducteur du saccharose est discuté. Une méthode, simple et rapide, est proposée pour la production massale de microtubercules. Après une phase primaire de multiplication durant 2 semaines, un milieu enrichi en saccharose (130 g/l) est ajouté aux cultures qui sont alors placées à l'obscurité. Les ratios obtenus sont proches de 1, et 85 à 95% des microtubercules présentent un diamètre supérieur à 5 mm. Un suivi de l'évolution des explants en condition de tubérisation est mené sur 92 jours. Une étude cytologique en microscopie photonique, a mis en évidence le "swelling" caractéristique de la tubérisation, et la présence d'amidon et de protéines dès le 4ème jour de culture. Des variations de taux de matière sèche et de teneurs en sucres (doses par HPLC) interviennent également au cours de la culture

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Kunothaï-Muhsin, Ariya. "Apport de la morphogenèse et de la culture in vitro dans la connaissance de la verticilliose chez la pomme de terre causée par Verticillium dahliae Kleb : essai de mise au point d'un test précoce in vitro de la résistance au champignon." Paris 11, 1988. http://www.theses.fr/1988PA112080.

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Abstract:

La verticilliose de la Pomme de terre est causée par des champignons imparfaits du genre Verticillium dont le Verticillium dahliae Kleb. Afin de pouvoir disposer de clones résistants ou tout au moins tolérants à cet agent pathogène, nous avons choisi de travailler sur 3 variétés de Pomme de terre, plus ou moins sensibles à ce parasite et sur 3 souches du champignon en utilisant des techniques de culture in vitro. A partir des 3 souches de Verticillium dahliae, cultivées in vitro, ont été mises au point des méthodes permettant l'obtention et la conservation, sans perte de la toxicité, du filtrat. On a alors testé in vitro la sensibilité des variétés retenues au filtrat de ces souches convenablement dosé et constaté qu'il existait une bonne corrélation avec la sensibilité de ces variétés à l'attaque de ces souches en conditions de serre. L'étude a montré que l'interaction plante hôte - agent pathogène était modulée par 2 facteurs importants : l'environnement et le temps c'est à dire l'âge physiologique de la plante. On ne peut trouver de corrélation entre la toxicité du filtrat in vitro et le pouvoir pathogène du champignon sur la plante en serre ou en champ que si ces deux facteurs ont été parfaitement maitrisés. L'étude a également révélé une particularité morphogénétique des plantes de variétés tolérantes (telles que BF 15 et Katahdin) : accélération de la croissance chez ces plantes inoculées par le champignon leur conférant une plus grande précocité. Des néoformations ont été produites à partir de cals après action ou non de la pression de sélection imposée par le filtrat d'une des souches. Les clones néoformés ainsi produits vont être testés in vitro pour leur sensibilité au filtrat
Verticillium wilt in potato is caused by some imperfect fungi of the genus Verticillium particularly Verticillium dahliae, Kleb. In order to obtain resistant or tolerant clones to this pathogen, we studied three varieties of potato varied in their susceptibility to this parasite and three strains of this fungus by using in vitro culture techniques. Based on the three strains of Verticillium dahliae. Je, cultivated in vitro, we clarified some methods which allowed the production of the filtrates and their conservation without loosing the toxicity. The susceptibility of these varieties to filtrate treatments was tested in vitro and we noted a good correlation with their susceptibility to the fungi in the greenhouse conditions. The study showed that the interaction host-pathogen was modulated by two important factors: the environment and the Ume which mean the physiological age of plant. We cannot find any correlation between the toxicity of m v1tro filtrate and the pathogenesis of the fungus in the greenhouse or in the field, unless the two factors were perfectly controlled. The study also revealed one morphogenetical particularity of the tolerant varieties (as in BF 15 and Katahdin): the growth acceleration in inoculated plants by the fungus which gives them a higher precocity. The regenerated plants were produced from calli after or without the pressure of selection imposed by the filtrate of one strain. These regenerated clones will be then tested in vitro for their susceptibility to the filtrate

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Cournac, Laurent. "Contribution à l'étude des échanges gazeux photosynthétiques et respiratoires chez les végétaux de type C3 : apport des cultures "in vitro"." Montpellier 2, 1992. http://www.theses.fr/1992MON20298.

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Abstract:

L'aeration des bocaux de culture ameliore la croissance de vitroplants de solanum tuberosum en supprimant les contraintes de confinement et permet de realiser la culture en mode photoautotrophe. La photosynthese nette et la croissance des vitroplants photoautotrophes sont stimulees par une augmentation de l'eclairement ou de la concentration en co#2. En mesurant a l'aide de #1#8o#2 les echanges d'oxygene, nous avons observe que la stimulation de la photosynthese brute par l'eclairement est plus elevee, et la depression de photosynthese brute au point de compensation en co#2 moins forte, chez des vitroplants eleves sous un eclairement de 300 micro moles photons. M#-#2. S#-#1 que chez ceux eleves a 80 micro moles photons. M#-#2. S#-#1. Une modelisation des echanges d'oxygene permettant d'acceder in vivo aux proprietes cinetiques de la rubisco et d'estimer l'importance relative des differentes voies de prise d'oxygene sous lumiere a ete realisee afin de preciser la nature des phenomenes a l'origine de ces adaptations. Plusieurs hypotheses quant aux composantes de la prise non photorespiratoire peuvent expliquer les niveaux des echanges d'oxygene observes. Une autre approche experimentale a ete entreprise dans le but de preciser l'origine du co#2 produit a la lumiere. En utilisant une culture cellulaire photoautotrophe de plante superieure, caracterisee par une faible activite anhydrase carbonique, nous avons mis en evidence un marquage a l'oxygene 18 du co#2 produit en conditions photorespiratoires lorsque les cellules sont eclairees en presence de #1#8o#2

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Yahyaoui, Tarek. "Etude de la morphogénèse in vitro des ébauches d'inflorescences de vigne." Dijon, 1998. http://www.theses.fr/1998DIJOS051.

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Abstract:

Devant l'insuffisance des connaissances sur la physiologie du développement des inflorescences dans les bourgeons latents de la vigne, il a paru intéressant d'étudier les mécanismes de régulation hormonale de la morphogenèse de ces inflorescences. Pour cela, nous avons procédé par la culture in vitro des ébauches d'inflorescences de trois variétés de vigne durant la période de repos végétatif (novembre - avril). Cette étude comporte deux grandes parties correspondant a deux séries d'expériences réalisées sur des ébauches d'inflorescences de vigne cultivées in vitro. La première partie est destinée à présenter leur développement in vitro, illustré par le cas du pinot noir et du chardonnay, ainsi que les facteurs susceptibles de l'influencer. Les données recueillies au cours de cette première partie nous ont conduit à la notion de voies morphogénétiques (au nombre de six). Leur analyse a permis de comprendre que le phénomène en question se déroule en définitive selon trois voies morphogénétiques principales, induites chacune par un type de régulateurs de croissance particulier. La deuxième partie de ce mémoire rassemble les résultats de la deuxième série d'expériences. Les connaissances précédemment acquises vont être approfondies dans l'espoir de parvenir à la maitrise de la régulation hormonale de chaque étape de la morphogenèse in vitro des ébauches d'inflorescences. Dans cet objectif, un cépage apyrène appelé Madina a été utilisé pour mettre en évidence un éventuel effet favorable de son génotype. Par ailleurs, un retardateur de croissance (le chlorure de chlorocholine) a été choisi pour jouer sur l'état initial des ébauches d'inflorescences. Enfin, d'autres événements observés in vitro sont décrits tels que l'abscission florale, la réversion vers le développement végétatif et la senescence des ébauches d'inflorescences.

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Louerguioui, Ali. "Techniques de multiplication par clonage "in vitro" du genre eucalyptus." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37615472r.

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Chevre, Anne Marie. "Recherches sur la multiplication végétative in vitro chez le Châtaignier." Bordeaux 2, 1985. http://www.theses.fr/1985BOR10624.

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Boccara, Michel. "Multiplication végétative de l'Achimenes longiflora D.C. caulogenèse et tubérisation in vitro." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37596094p.

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Lafontaine, Nadège. "Elaboration de systèmes de multiplication in vitro chez des algues marines." Caen, 2011. http://www.theses.fr/2011CAEN2095.

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Abstract:

Chez les Rhodophytes et les Chlorophytes, certaines espèces sont des algues d’intérêt dermocosmétique. Elles sont actuellement récoltées ce qui entraîne des problèmes d’approvisionnement, d’hétérogénéité du matériel et de préservation des ressources naturelles. Pour produire toute l’année de la biomasse algale de qualité, différents systèmes de multiplication in vitro ont été évalués chez sept espèces. Pour quatre d’entre elles, des systèmes de micropropagation tenant compte de leurs particularités morphologiques, physiologiques et biochimiques et de leur comportement in vitro ont été mis au point. Une souche-mère in vitro à croissance lente chez une Chlorophyte a été mise en place par bouturage et les conditions physico-chimiques permettant à partir de la souche-mère d’établir des souches à croissance rapide ont été identifiées, seules ces dernières produisant des protoplastes. Chez une autre Chlorophyte, un système en boucle s’affranchissant complètement de la récolte a été réalisé à partir de prairies in vitro issues de protoplastes. La culture d’explants sur milieu solide chez deux Rhodophytes a mis en évidence leurs potentialités morphogénétiques dont la régénération de bourgeons. Chez une de ces deux Rhodophytes, la voie des protoplastes est également possible, la production de protoplastes a été optimisée mais seule la régénération sporadique de la paroi a été observée. Par contre, pour deux autres Rhodophytes, des protoplastes ont été obtenus suggérant la faisabilité de cette voie à condition de contourner l’intolérance à l’immersion pour l’une et de définir un protocole d’axénisation pour l’autre
Among Rhodophyta and Chlorophyta, some species have a dermocosmetic interest. For the time being seaweeds are harvested from wild populations leading to problems of supply, heterogeneous biomass and preservation of natural resources. In order to produce an algal biomass of quality throughout the year different systems of micropropagation were evaluated for seven species. For four of them systems of in vitro propagation based on their morphological, physiological and biochemical properties and their in vitro behavior were developed. A slow-growing stock culture of one Chlorophyta was initiated by cuttings and the physicochemical parameters were identified allowing to the establishment of fast-growing cultures. Protoplasts were produced only from these fast-growing cultures. A closed-loop system of micropropagation was elaborated from ‘in vitro seaweed beds’ of another Chlorophyta produced from protoplasts. Tissue culture on solid medium of two Rhodophyta showed their morphogenetic potentialities in particular the regeneration of shoots. The system of in vitro propagation from protoplasts is also possible for one of these Rhodophyta, the production of protoplasts was improved but only the sporadic regeneration of the cell wall was observed. Protoplasts were also obtained from two other Rhodophyta suggesting the feasibility of developing protoplast technology provided to bypass the intolerance of the immersion for the one and to elaborate the sterilization treatment for the other

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Alskeif, Oussama. "La multiplication végétative in vitro par l'embryogenèse somatique chez Carica candamarcensis." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 1997. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/212147.

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Basbaa, Ali Khamis. "Etude sur la multiplication végétative du Févier d'Amérique (Gleditsia Triacanthos L. )." Aix-Marseille 3, 1991. http://www.theses.fr/1991AIX30020.

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Abstract:

Gleditsia triacanthos l. , cesalpiniae arborescente polygame de region temperee produit des gousses riches en proteines qui peuvent servir de fourrage pour ovins, et a ete utilise comme modele experimental pour de nombreuses etudes de morphogenese. L'acquisition de la maitrise de sa culture et de sa multiplication in vitro presente donc un grand interet de ce double point de vue. C'est le but de ce present travail. Une methode de microbouturage pour des explants issus de plantules et suivie sur quatre generations a ete mise au point. Elle necessite, pour chaque generation l'usage successif de deux milieux differents, le premier contenant une auxine favorisant la rhizogenese, le second sans auxine et contenant eventuellement une cytokinine favorisant la croissance tant racinaire que caulinaire. La transposition de la methode a des explants issus d'arbres de dix ans, seuls utilisables pour une selection portant sur leur rendement en gousses, n'est pas possible sans un rajeunissement prealable du materiel par greffage in vitro sur plantule. Une methode faisant intervenir un pretraitement du greffon et du porte-greffes sur milieu avec auxine a ete mise au point

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Lavarde-Guignard, Françoise. "Culture in vitro et rejuvénilisation chez les ligneux : application au cas particulier de l'Aulne Glutineux (Alnus glutinosa Gaertn)." Paris 11, 1987. http://www.theses.fr/1987PA112237.

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Abstract:

Dans le cadre du programme d'amélioration génétique de l'aulne glutineux conduit à l'Ecole Nationale du Génie Rural des Eaux et des Forêts, la maîtrise de la culture "in vitro" avait deux objectifs fondamentalement différents mais en fait très dépendants. La production de variétés polyclonales implique de pouvoir multiplier en quantité importante du matériel parfois en quantité limitée, en particulier des hybrides issus de croisements contrôlés. D'autre part il serait très intéressant de pouvoir multiplier des arbres adultes, sélectionnés en forêt pour leurs caractéristiques exceptionnelles. Or la plupart des programmes d'amélioration des ligneux se heurtent à l'impossibilité de multiplier végétativement de tels arbres. Les travaux réalisés au cours des dernières années ont mis en évidence l'influence de la culture in vitro sur les phénomènes de rajeunissement. Il semble donc intéressant d'analyser plus finement les processus impliqués, en particulier en recherchant des marqueurs permettant de caractériser l'état de juvénilité du matériel et son évolution lors du passage "in vitro". Après avoir affiné le protocole de multiplication conforme du maté riel juvénile, les essais ont porté sur le matériel adulte. Des résultats pro metteurs ont été obtenus. Des techniques originales comme la culture d'apex d'aulne ont également été mis au point. La recherche de marqueur de juvénilité a été un peu limitée mais des approches par les profils flavonoïques ou l'activité mitochondriales devraient donner des résultats intéressants. Il ressort de ces études que la culture in vitro reste un outil de laboratoire très performant même si son utilisation pour la sortie variétale est limitée
During the last decade micropropagation of trees proved to be a very interesting tool especially for breeding program. Therefore it appeared to be necessary to micropropagate black aider in order to improve vegetative propagation and also in order to study rejuvenation processes. Alder micropropagation was first described in 1983 but only with juvenil matértal. Studies of the different parameters influencing micropropagation enabled to improve the protocole and first results concerning micropropagation of old trees are rather encouraging. New methods, especially apex tissue culture were also used and were successfull with juvenile material. Trying to understand cellular differenciation and the processes of rejuvenation is a very thorough study and only hints were studied. Nonetheless some were rather unusual, such as flavonoïd spectra and mitochondrial activities. This study al so underlines the hurdles met with micropropagation and one may conclude that micropropagation of trees is not ready for industrial scale

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Palma-Lutjens, Béatriz. "Contribution à l'étude de certains aspects de la multiplication de l'Acacia senegal (L. ) Willd." Aix-Marseille 3, 1990. http://www.theses.fr/1990AIX30075.

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Abstract:

L'acacia senegal, est un ligneux de zones arides de grande importante economique, puisque producteur exclusif de la gomme arabique, substance d'interet industriel majeur. Ont ete etudiees: sa germination, la capacite de regeneration apres amputation de l'appareil aerien de plantules et de l'appareil racinaire de plantules et de vitro-plant, l'induction de la dormance chez les jeunes adultes et les possibilites de sa propagation par culture in vitro. Les principaux resultats obtenus concernent: 1) la determination des conditions optimales de germination; 2) l'induction de la dormance des bourgeons par des conditions defavorables de l'environnement; 3) les caracteristiques de la croissance et de la regeneration apres amputation des racines de jeunes plants; 4) les essais de multiplication d'apex; soit par culture directe (echec), soit par microgreffage (succes). Ces resultats permettent d'envisager une strategie de reforestation clonale de zones saheliennes

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Schall, Serge. "La Multiplication de l'avocatier, Persea americana Mill. cv Fuerte, par microbouturage in vitro." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376010776.

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Label, Philippe. "Hormones endogènes et multiplication végétative in vitro chez le merisier (Prunus avium L.)." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376148284.

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Label, Philippe. "Hormones endogenes et multiplication vegetative in vitro chez le merisier (prunus avium l)." Paris 6, 1988. http://www.theses.fr/1988PA066337.

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Abstract:

Mesure des teneurs en substances de croissance dans des explants au cours de la micropropagation in vitro du merisier. Deux etapes sont plus particulierement etudiees, la reactivation de croissance des bourgeons axillaires et l'enracinement donnant lieu a la neoformation de racines

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BOUVIER, LYDIE. "Haploidie chez le pommier (malus domestica borkh. ) et le poirier (pyrus communis l. ). Criteres de selection d'haploides spontanes. Parthenogenese in situ induite par du pollen irradie. Androgenese in vitro chez le pommier." Paris 6, 1993. http://www.theses.fr/1993PA066320.

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Abstract:

Plusieurs methodes d'obtention de plantes haploides de pommier et de poirier ont ete explorees. En ce qui concerne le poirier, un phenotype caracteristique des plantes haploides spontanees a ete mis en evidence: une tige grele, des entre-noeuds courts, des feuilles allongees, etroites, vert pale a port retombant. Le transfert in vitro de ces plantes haploides de poirier a ete reussi. Trois methodes d'haploidisation induite ont ete etudiees. La parthenogenese in situ induite par du pollen irradie aux rayons gamma a ete approfondie chez le pommier. L'utilisation d'un clone issu de premiere generation d'autofecondation, r1-49 ameliore les rendements en embryons haploides par rapport a la variete etudiee golden delicious". Une etude histologique a montre que l'origine de ces plantes haploides est soit le noyau de l'oosphere soit celui d'une synergide. Cette methode de parthenogenese a ete experimentee chez le poirier: des plantes haploides issues du genotype doyenne du comice ont ete obtenues. Les doses d'irradiation optimum sont de 200 et 500 gy comme pour le pommier. Le blocage du developpement des embryons haploides obtenus par culture d'antheres de pommier a ete aborde. Un choc osmotique sur un milieu contenant 50 g/l de mannitol suivi d'un transfert sur un milieu contenant du thidiazuron a 5,5 mg/l engendre dans certains cas la regeneration de bourgeons adventifs sur ces embryons haploides. La culture de microspores isolees a ete experimentee pour la premiere fois chez le pommier. Malgre les contaminants internes, levures et bacteries, le protocole de mise en culture a pu etre etabli et des cals ont ete produits. Les plantes haploides cultivees in vitro ont fait l'objet d'etudes de doublement chromosomique et d'enracinement. Le doublement a pu etre reussi en utilisant l'oryzaline a des doses de 5 et de 15 m. L'enracinement a ete ameliore en ajoutant de l'acide citrique dans le milieu d'elongation des racines. Une vingtaine de plantes haploides de pommier et aussi de poirier sont maintenant cultivees in vitro

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Arnolin, Richard. "Bouturage in vitro, en vue de la production de plants chez l'igname Dioscorea Sp. L." Paris 11, 1985. http://www.theses.fr/1985PA112374.

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Abstract:

Dans le présent travail les possibilités de multiplication par bouturage in vitro, de trois cultivars d’igname présentant un grand intérêt économique ont été étudiées, et le comportement des vitroplantules ainsi obtenues a été observé. Les explants primaires doivent être prélevés sur des parties jeunes de plantes conduites en serre. Les auxines sont favorables à l’enracinement de boutures ; une cycokinine comme la benzyl adénine est plutôt favorable à la caulogenèse. D. Cayenensis rotundata, c. V. V17/2, donne le meilleur coefficient de multiplication, sur le milieu 169, dérivé du milieu M. S. Par C. Martin, soit 164 000 en 12 mois ; mais c’est aussi le cultivar qui présente le plus de difficultés au moment du transfert au champ. L’allongement de la longueur du jour permet la production de plants de V17/2, avec un coefficient de multiplication théorique de 484 000 sur deux ans. D. Trifida (c. V. INRA 5-20) et D. Alata (c. V. Belep) sont plus rustiques, quant à leur transfert au champ, qui nécessite tout de même une bonne brumisation. INRA 5-20 semble acquérir une amélioration de son comportement au champ, par le simple bouturage in vitro
In the present work the possibilities of multiplication through in vitro cutting of three yam cultivars of high economical value, have been studied, and the field behaviour of the in vitro plantlets thus obtained has been observed. The primary explants must be taken from young parts of plants cultivated in green house. Auxins are favorable for rooting of cuttings: a cytokinin like benzyladenin is rather favorable to shoot organogenesis. D. Cayenensis rotundata cv V17/2 give the best multiplication ration with the medium 169 derived from M. S. By C. Martin, reaching 164 000 after 12 months; but this cultivar proved to be also the most difficult to transfer to the field. With the lengthening of daylight a production of V17/2 seed-tuber reaches a theorical ratio of 484 000 over two years. D. Trifida cv INRA 5-20 and D. Alata cv Belep are more hardy refering to their transfer to the field, which however need a good mist. INRA 5-20 has seemingly its field behavior improved through the simple in vitro cutting technic

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Deglene, Laurence. "Déterminisme génétique de la résistance du tournesol (Helianthus Annuus L. ) a Phomopsis helianthi (Diaporthe Helianthi Munt-Cvet. Et al. ) et mise au point d'un test de selection in vitro." Toulouse, INPT, 1999. http://www.theses.fr/1999INPT016A.

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Abstract:

Les objectifs de ce travail sont de contribuer à la connaissance du déterminisme génétique de la résistance à Phompsis/Diaporthe helianthi Munt-Cvet et al. Chez le tournesol et de mettre au point une méthode de sélection alternative aux méthodes classiques. La culture in vitro de cellules et de tissus peut être utilisée comme outil de sélection rapide, simple et fiable. Les techniques in vitro mises en oeuvre dans ce travail sont basées sur la formation de cals et sur la viabilité des protoplastes, en réponse à des filtrats de culture partiellement purifiés de P. Helianthi, utilisés comme agents sélectifs. Le déterminisme génétique de la résistance au phomopsis en conditions de contamination naturelle, de la formation des cals et de la viabilité des protoplastes chez le tournesol, ainsi que la modification de ces deux derniers paramètres par les filtrats du pathogène, ont été étudiés dans un dispositif de plan factoriel. Nos résultats montrent que la résistance des plantes adultes de tournesol au phomopsis en conditions naturelles est controlée essentiellement par des gènes à effets additifs avec cependant des effets de dominance partielle. D'autre part, nous avons établi que la formation de cals est un paramètre à forte variabilité génétique, qui semble controlé principalement par des gènes à effet additifs, bien que les interactions inter-alléliques soient également significatives. L'apport de filtrats de culture à la dose de 5% a globalement entraîné une augmentation de la formation de cals. L'étude du niveau de mortalité des protoplastes après 48 h de culture montre que celle-ci varie en fonction du génotype et augmente significativement en présence du filtrat de culture. Le contrôle génétique de la mortalité des protoplastes, aussi bien sur le milieu témoin que sur le milieu sélectif, est apparu simplement additif. Il ressort également de cette étude que la présence de filtrats du pathogène dans le milieu de culture modifie l'expression des gènes impliqués aussi bien dans la formation des cals que dans la viabilité des protoplastes, ce qui se traduit par des valeurs différentes des aptitudes générales à la combinaison et des aptitudes spécifiques à la combinaison de plusieurs lignées et hybrides, par rapport au milieu témoin.

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Godet, Xavier. "Biologie du colchique (Colchicum autumnale L.) multiplication végétative par voie traditionnelle et in vitro /." Grenoble 2 : ANRT, 1987. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37605485w.

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Callac, Philippe. "Recherche de nouvelles méthodes de multiplication conforme in vitro chez l'artichaut, Cynara scolymus L." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37612365g.

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Godet, Xavier. "Biologie du colchique (colchicum autumnale l. ) : multiplication vegetative par voie traditionnelle et in vitro." Clermont-Ferrand 2, 1987. http://www.theses.fr/1987CLF2D189.

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Abstract:

Examen des cycles biologiques de la plante adulte et de la plante juvenile: les exigences thermiques, les potentialites du bourgeon vegetatif accessoire, variabilite individuelle pour la production de graines et d'alcaloides. Une methode de multiplication vegetative est recherchee: en pepiniere ou in vitro, possibilite de fragmenter les cornus; caulogenese in vitro. La possibilite d'une biosynthese d'alcaloides par des cellules de colchique cultivees in vitro est evoquee

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Callac, Philippe. "Recherche de nouvelles méthodes de multiplication conforme in vitro chez l'artichaut : Cynara scolymus L." Paris 11, 1988. http://www.theses.fr/1988PA112287.

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Abstract:

In vitro multiplication of globe artichoke is based on shoot apices culture and micropropagation. However, this method cannot be extended to mass production. To try and find new methods, we considered two different approaches somatic embryogenesis and adventive organogenesis. A great number of different explants were cultivated to find out which organs and which stages are the most suitable for callogenesis or organogenesis. Neither organic nor embryogenic calli were obtained. On the other hand, rhizogenesis was obtained from organs such as cotyledons and stamens; caulogenesis was obtained from young receptacles and isolated flowers. It was possible to regenerate plants from shoots produced by these last two organs. In a second step, we studied the way of obtaining shoots from isolated flowers in vitro and their micropropagation. This technique uses a sequence of media, the first being inductive. Histological studies showed that adventive structures originated from axil of sepals. Even though the number of organogenic flowers may be important, only a few produced good quality shoots. This process allows regeneration of virus and bacteria free plants. Yield and conformity problems were considered. Potential applications of this new technique are pointed out
In vitro multiplication of globe artichoke is based on shoot apices culture and micropropagation. However, this method cannot be extended to mass production. To try and find new methods, we considered two different approaches somatic embryogenesis and adventive organogenesis. A great number of different explants were cultivated to find out which organs and which stages are the most suitable for callogenesis or organogenesis. Neither organic nor embryogenic calli were obtained. On the other band, rhizogenesis was obtained from organs such as cotyledons and stamens ;caulogenesis was obtained from young receptacles and isolated flowers. Lt was possible to regenerate plants from shoots produced by these last two organs. In a second, step, we studied the way of obtaining shoots from isolated flowers in vitro and their micropropagation. This technique uses a sequence of media, the first being inductive. Histological studies showed that adventive structures originated from axil of sepals. Even though the number of organogenic flowers may be important, only a few produced good quality shoots. This process allows regeneration of virus and bacteria free plants. Yield and conformity problems were considered. Potential applications of this new technique are pointed out

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Montagu, Monique. "Étude de la fluorescence appliquée à l'analyse quantitative, qualitative d'alcaloïdes dans des cultures végétales in vitro : fluorodensitométrie et fluorescence synchrone." Tours, 1989. http://www.theses.fr/1989TOUR3806.

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Chevalier, Claire. "Contribution à l'étude des effets de N-glycannes non conjugués sur le développement de la tomate (Lycopersicon esculentum, Mill. )." Limoges, 1996. http://www.theses.fr/1996LIMO0041.

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Abstract:

Les n-glycannes constituent, habituellement, la partie oligosaccharidique des proteines n-glycosylees. Ils interviennent dans le maintien de leur structure, dans leur mobilite ou encore leur conferent une activite enzymatique. Des n-glycannes ont aussi ete trouves a l'etat non conjugue dans des milieux de culture de suspensions cellulaires. Des travaux anterieurs ont montre qu'ils sont capables d'induire des reponses physiologiques particulieres lorsqu'ils sont utilises a des concentrations inferieures a la micromole, pour traiter des organes, ce qui a permis de les assimiler a des oligosaccharines. Ces considerations ont servi de base pour developper une experimentation appliquee au cas de la tomate, en raison des donnees deja acquises et de l'importance economique de cette plante. Les n-glycannes utilises dans ce travail sont un xylomannoside (man#5(xyl)gicnac#2(fuc)) et un oligomannoside (man#5glcnac). Au cours de cette etude, des effets induits par ces 2 n-glycannes ont d'abord ete releves sur le developpement de tomate avec pour objectif initial d'effectuer des traitements sous serre afin de controler precisement la formation et de la maturation des fruits. Les differents essais destines a preciser le developpement vegetatif ont ete conduits sur des jeunes plants issus de germination. Les mesures de l'allongement des hypocotyles effectuees sur des plants 7 et 35 jours apres la mise en germination montrent que les oligosaccharides ont des effets stimulants peu marques sur l'appareil aerien alors qu'ils peuvent se reveler inhibiteurs de la croissance racinaire. La faible amplitude des effets observes est certainement liee au fait que les oligosaccharides sont presents naturellement chez la tomate. Les essais ont aussi porte sur les neoformations de bourgeons a partir de fragments d'organes: entre-nuds et disques foliaires. Leur action n'est alors mise en evidence qu'en presence de cytokinine dans le milieu de culture. Les reponses obtenues sont tantot des synergies, tantot des antagonismes vis-a-vis de la cytokinine. Les nombreux traitements realises sur les fruits dans differentes configurations de culture donnent des resultats differents de ceux cites dans la litterature. Pour etayer l'argumentation a la base de la discussion une analyse statistique des resultats a ete realisee en faisant appel a des tests non parametriques compte-tenu des effectifs de chaque echantillon et de l'heterogeneite de la distribution des valeurs obtenues

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Massot, Bastien. "Étude de la production de furanocoumarines linéaires par des cultures in vitro de Ruta graveolens L." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 2001. http://www.theses.fr/2001INPL013N.

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Abstract:

Ruta graveolens L. Présente à l'état naturel de fortes concentrations en furanocoumarines, sa culture en conditions in vitro à des fins de production a été envisagée. Les tiges feuillées cultivées en milieu liquide possèdent des niveaux de synthèse élevés (de l'ordre du milligramme de furanocoumarine totale par gramme de matière sèche). L'optimisation des conditions de culture ont permis d'améliorer significativement la production de furanocoumarines. Ce résultat est du à un effet biomasse, les niveaux de synthèse des molécules dans les tissus s'étant révélés peu inductibles contrairement à la croissance des tiges feuillées. La seconde étape du travail consistait à provoquer l'excrétion des molécules des tissus vers le milieu de culture. L'utilisation du Tween 20 a permis de récupérer une partie des molécules sans sacrifier la biomasse. Les étapes de croissance et de perméabilisation ont constitué les bases d'un "process" dont la faisabilité technique a été testée sur des enceintes de culture simplifiées et des bioréacteurs classiques. La productivité est encourageant (0,051 mg. G-1. J-l contre 0,008 mg. G-l. J-l pour les plantes cultivées en champ).

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Czechowiak, Caty. "Culture in vitro de méristèmes de Pelargoniums." Lille 1, 1988. http://www.theses.fr/1988LIL10064.

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Abstract:

Contrairement à la production massive de boutures contribuant à augmenter l'extension des virus et bactéries (Xanthomonas), la culture de méristèmes de pélargonium ensemencés sur du milieu de base additionné de faibles quantités hormonales peuvent régénérer des plantes exemptes de maladies. Cependant en cas de trop fortes concentrations en hormones, le méristème peut produire un cal organogène générateur d'une dérive génétique. La méthode basée sur deux variétés: super rose (P. Hederaefolium) et topscore (P. Hortorum) a ensuite pu être généralisée.

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Clastre, Marc. "Purification et caractérisation de la géranyl diphosphate synthétase de cellules de Vitis vinifera L. Cv. Muscat de Frontignan cultivées in vitro." Toulouse, INPT, 1993. http://www.theses.fr/1993INPT013A.

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Abstract:

Les cultures de cellules et tissus vegetaux produisent des quantites negligeables de metabolites secondaires, souvent inferieures a 1% par rapport au taux que l'on trouve dans les plantes entieres. Ll en est ainsi des cellules de vitis vinifera l. Cv. Muscat de frontignan qui se montrent incapables de biosynthetiser les monoterpenes responsables de la flaveur musquee du raisin. Ce phenomene peut s'expliquer par une eventuelle repression de la voie de biosynthese des terpenes, en particulier des etapes qui menent de l'acide mevalonique au geranyl diphosphate, compose considere comme le precurseur universel des monoterpenes. C'est pourquoi, nous nous sommes essentiellement interesse a l'elaboration de cette molecule. L'existence d'une geranyl diphosphate synthetase specifique, assurant la biosynthese du geranyl diphosphate a partir d'isopentenyl diphosphate et de dimethylallyl diphosphate, a d'abord ete mise en evidence. La proteine a ensuite ete purifiee a homogeneite par precipitation au sulfate d'ammonium, chromatographies liquides sur colonnes deae-sephacel, hydroxylapatite, mono q, phenyl superose, superose 12 et electrophorese preparative en conditions non denaturantes. L'enzyme synthetise du geranyl diphosphate. En aucun cas, le neryl diphosphate (l'isomere en cis du geranyl diphosphate) et le farnesyl diphosphate ne sont produits. Sa masse moleculaire native est de 685 kilodaltons. En gel de polyacrylamide, en conditions denaturantes elle migre avec une masse moleculaire de 662 kilodaltons. Les constantes de michaelis pour l'isopentenyl diphosphate et le dimethylallyl diphosphate sont respectivement de 8,5 m et de 56,8 m. L'enzyme requiert la presence des cofacteurs manganese et magnesium et son activite est stimulee par le triton x-100. Un analogue du substrat, le diphosphate d'aminophenetyle ainsi que les produits de la reaction, le pyrophosphate inorganique et le geranyl diphosphate ont des effets inhibiteurs

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Mansouri, Lhouceine. "Extraction et purification de certaines saponines triterpéniques pentacycliques d'espèces végétales du groupe de la gypsophile : plantes entières et cultures in vitro ; contribution à l'étude de leur biosynthèse." Toulouse, INPT, 1995. http://www.theses.fr/1995INPT016A.

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Abstract:

Notre travail a consiste en l'etude de la structure chimique de trois groupes de saponines dans les plantes ou ils sont principalement presents pour tenter d'elucider leur presence et leur role physiologique dans la plante. Dans la premiere partie chimique, nous avons ameliore l'extraction et la determination quantitative de l'acide oleanolique-saponines et de l'hederagenine-saponines dans les differents organes de lierre (tiges, feuilles et fruit) au cours de differentes periodes physiologiques de la plante. Cette etude a montre que l'ac. Oleanolique-saponines etaient principalement presentes en periode vegetative et inversement la premiere etape d'oxydation de l'hederagenine-saponines se realisait surtout au cours de la periode de floraison de la plante. La deuxieme partie chimique de ce travail traite l'extraction et la purification du gypsogenine-saponines de differentes matieres premiere vegetales: saponine blanche pure merck, les racines et cultures cellulaires de gypsophila paniculata et saponaria officinalis. Dans la 3eme partie physiologique, nous avons poursuivi une selection de souches productrices de saponines de quatre especes de gypsophila sp confirmant ainsi les resultats du maintien de la production de saponines (avec 0,7% pour les cellules en suspension de g. Pa. 6r). Les parties aeriennes multiples de g. Pa. 7h cultivees in vitro se sont reveles etre productrices de saponines, alors que cette production est reservee aux racines dans la plante entiere. Dans la 4eme partie biochimique, nous avons etudie la premiere etape de la chaine de biosynthese de ces saponines triterpeniques. Nous avons montre l'effet inhibiteur et stimulateur du gypsogenine-3,0-glucuronide et de la decaline respectivement sur la biosynthese des saponines

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Guedira, Idrissi-Aydi Mouna. "Organogenèse et embryogenèse somatique directe à partir de pièces florales de Cichorium (Asteraceae) cultivées in vitro." Lille 1, 1988. http://www.theses.fr/1988LIL10093.

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Chambon, Catherine. "Application de biotechnologies végétales au genre lavandula, en vue de l'amélioration génétique du lavandin." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1992. http://www.theses.fr/1992INPL083N.

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Abstract:

Ce travail présente, chez le genre lavandula, l'établissement de plusieurs biotechnologies en vue de l'amélioration du lavandin. La micropropagation conforme in vitro à partir d'apex a donc été obtenue par détermination des milieux de culture et étude des capacités morphogénétiques de divers génotypes de lavandes et lavandins. L'efficacité de la technique a permis la production et l'implantation de 45 000 vitroplants. Leur conformité vis-à-vis du matériel de départ a été vérifiée au niveau de l'aspect, des performances agronomiques et des composantes chimiques. Un programme de rediversification génétique a aussi été entrepris par maitrise de la néoformation de bourgeons à partir de tissus et de cals. La variabilité de composition chimique a été mise en évidence chez ces individus, et l'on peut espérer des clones nouveaux et performants. Dans une troisième partie consacrée à l'haploidisation, trois méthodes ont été abordées: croisements interspécifiques, puis androgenèse et gynogenèse in vitro. Cette dernière voie s'est avérée la plus prometteuse et les étapes les plus favorables au développement des ovaires ont été déterminées. Par ailleurs, pour disposer en permanence de matériel fleuri, les conditions contrôlées de la mise à fleur ont également été définies

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Javouhey, Marc. "Application industrielle de la culture in vitro : cas de l'asperge (Asparagus officinalis L.)." Grenoble : ANRT, 1985. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37594828m.

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Dufour, Magali. "Callogénèse et organogénèse in vitro chez des variétés greffons de pommier cultivé (Malus x domestica Borkh. ) et des variétés porte-greffes (Malus spp. )." Montpellier 2, 1988. http://www.theses.fr/1988MON20203.

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Abstract:

Cette etude constitue la mise au point d'un systeme efficace de regeneration pour l'etude de la variation somaclonale (organogenese apres callogenese) ou pour l'utilisation dans les techniques modernes d'amelioration genetique (organogenese directe). La premiere partie consiste en l'amelioration du microbouturage et de l'enracinement in vitro afin de disposer d'explants en bonnes conditions physiologiques pour les etudes de callogenese et d'organogenese. La callogenese a ensuite ete mise au point et optimisee sur differents types d'explants. Les cals ont ete caracterises morphologiquement et histologiquement. On les a repartis en 5 classes. La presence d'auxine est necessaire a l'induction, et l'utilisation d'une cytokinine ameliore le taux de callogenese. Plusieurs facteurs ont ete testes: hormonaux, trophiques, physiques et physiologiques. Une etude particuliere a porte sur l'entretien des cals dans des conditions destabilisantes: cultures en presence de 2,4-d pendant un temps eleve. Enfin, un troisieme type de resultats porte sur l'obtention de neoformations a partir de cals ou directement sur limbes. Un large effet genotype a ete note: les varietes porte-greffes sont plus recalcitrantes que les varietes greffons. Le facteur hormonal semble primordial dans tous les cas, mais d'autres facteurs peuvent entrer en jeu. L'organogenese a ete induite sur des cals de racines, des cals primaires ou secondaires de limbes et des cals primaires d'entre-nuds. La regeneration directe a partir de limbes a pu etre obtenue sur: gala, golden delicious, granny smith et cepiland. La variete greffon gala donne la meilleure reponse; un traitement permet en particulier d'obtenir 100% d'explants organogenes. Une etude histologique a ete menee pour suivre l'origine de l'organogenese. Mille plantes neoformees a partir d'explants de gala ont ete acclimatees avec succes et seront plantees au ch

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Pages, Marielle. "Effets et mécanismes d'action de l'ozone utilisé comme moyen de lutte contre des champignons pathogènes du pommier : études in vitro et in vivo." Thesis, Toulouse, INPT, 2015. http://www.theses.fr/2015INPT0102.

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Abstract:

Les pommiers sont la cible de nombreux ravageurs et maladies fongiques, à l’origine de pertes économiques importantes. Les agriculteurs sont dans l’obligation de traiter les micro-organismes responsables des maladies fongiques, notamment à l’aide de pesticides. Les produits phytosanitaires sont aujourd’hui très controversés. Ainsi, les pouvoirs publics, français et européens, contrôlent leur emploi par de nombreuses règlementations. Par conséquent, il apparaît nécessaire de proposer une alternative peu rémanente permettant de contrôler le développement fongique. L’objectif de cette thèse est d’évaluer l’efficacité d’une alternative innovante basée sur l’emploi d’eau chargée en ozone contre quatre espèces fongiques à l’origine des principales maladies du pommier : Venturia inaequalis, Botrytis cinerea, Neofabraea alba et Phytophthora syringae. Dans un premier temps, ce travail de thèse a permis de vérifier l’action anti-fongique de l’ozone sur les suspensions de spores des quatre espèces fongiques ainsi que sur différents stades de développement des spores de V.inaequalis. Il a été mis en évidence une différence de sensibilité selon l’espèce et le stade de développement considérés. Par ailleurs, l’altération de la membrane sous l’action de l’ozone a été observée par plusieurs expérimentations : quantification du degré de peroxydation des phospholipides membranaires, observations des spores au Microscope Electronique à Balayage et au Microscope Optique après colorations. Dans un second temps, l’effet de l’eau chargée en ozone a été évalué sur des jeunes plants de pommiers préalablement contaminés par les spores de V.inaequalis. Cette étude a confirmé l’action anti-fongique de l’eau chargée en ozone. Il a également été observé l’importance des quantités d’eau et d’ozone apportées qui doivent être maîtrisées pour optimiser l’efficacité du traitement. Ces résultats permettent de valider la candidature de l’ozone comme fongicide alternatif à l’emploi de produits phytosanitaires. Les modalités d’application devront faire l’objet de recherches supplémentaires en vue du transfert de la technologie du laboratoire au verger
Apple trees are the target of a lot of pests and fungal diseases, responsible for many economic losses. Farmers treat these micro-organisms mainly with pesticides. Plant-protection products are today very controversial. French and European authorities control their use by means of numerous regulations. Therefore, an alternative solution with a low remanence must be found in order to limit fungal diseases. The aim of this thesis is to evaluate the innovative process efficiency based on the use of ozonated water against four fungal species: Venturia inaequalis, Botrytis cinerea, Neofabraea alba and Phytophthora syringae. Firstly, this work of thesis verified the ozone antifungal action on spores suspensions of the four fungal species and on different stages of development of V.inaequalis spores. According to the species and stages of development considered, a difference of sensibility was detected. Moreover, alteration of the membrane, due to ozone action, was observed thanks to several experimentations: quantification of phospholipids peroxidation, spore observations with Scanning Electron Microscopy and with Optical Microscopy after staining. Secondly, the ozonated water effects on seedlings previously contaminated by V.inaequalis spores were evaluated. This study confirmed the anti-fungal action of water containing ozone. It was also observed the importance of the water and of ozone quantities supplied. These quantities must be controlled to optimize the antifungal action of the treatment. These results validated the ozone application as a fungicide alternative of use of pesticides. Additional researches will be made concerning the treatment modalities: the aim is to transfer the technology from the laboratory to the orchard

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Piola, Florence. "Micropropagation des conifères : étude physiologique et moléculaire du microbouturage du cèdre (Cedrus libani Loudon) et apport de la symbiose mycorhizienne à l'embryogenèse somatique du mélèze (Larix x eurolepis Henry)." Lyon 1, 1996. http://www.theses.fr/1996LYO10146.

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Abstract:

Le theme de cette these comporte deux volets: la contribution a une methode de micropropagation du cedre du liban (cedrus libani loudon) a partir de graines et l'etude de l'apport de la mycorhization controlee sur la qualite du systeme racinaire des plantules produites in vitro. La desinfection des graines bloque leur germination. Nous avons reussi a introduire ce conifere in vitro, avec des explants desinfectes issus de germinations non steriles. Deux obstacles ont ete systematiquement rencontres: l'arret de croissance de tous les bourgeons inities in vitro et l'inaptitude des microboutures a produire des racines. Le developpement des bourgeons a ete obtenu par une elevation de 24c a 30c de la temperature de culture. Nous avons dose aux deux temperatures de culture, les differentes hormones impliquees dans la regulation des organogeneses caulinaire et racinaire in vitro. La quantite d'aba des microboutures cultivees a 24c est significativement plus importante qu'a 30c et la repartition tissulaire est differente. Nous proposons l'hypothese d'une inhibition de la croissance des bourgeons a 24c par l'aba contenu dans les aiguilles. Par ailleurs, les proteines synthetisees par les microboutures sont de nature differente a ces deux temperatures, ce qui peut traduire une modification de l'expression genetique des cellules. Le dosage d'aia n'a pas mis en evidence de gradient apico-basal et les concentrations sont uniformement faibles. L'absence d'enracinement y trouve peut-etre la son explication. Par rapd, l'homogeneite genetique au sein des clones de cedre a ete mise en evidence ainsi qu'une diversite interclonale. Cela permettra, a terme, de disposer de marqueurs genetiques. Enfin, face a l'inaptitude des microboutures de cedre a former des racines, l'effet de la mycorhization controlee sur un modele different, des plantules de meleze hybride (larix x eurolepis henry) issues d'embryogenese somatique et pourvues donc d'un pole racinaire pre-forme a ete analyse, avec 4 champignons ectomycorhiziens: laccaria laccata, hebeloma cylindrosporum, pisolithus tinctorius et suillus grevillei. Les trois premiers ameliorent significativement la croissance du systeme racinaire des plantules. Une etude ultrastructurale demontre que la symbiose a bien ete initiee pour deux d'entre eux

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Umboh, Magdalena Irène. "Utilisation de techniques de culture in vitro pour la multiplication végétative de Pinus merkusii Jungh et de Vriese." Paris 11, 1985. http://www.theses.fr/1985PA112034.

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Abstract:

La multiplication végétative in vitro de Pinus merkusii a été réalisée à partir de la culture d'explants de plantes issues de germination, ou de plantules prélevées dans les graines non germées. La technique comprend 4 étapes nécessitant des traitements différents : obtention et développement des bourgeons, croissance des pousses feuillées, enracinement et sevrage. La formation de bourgeons et la rhizogénèse nécessitent une induction préalable par des régulateurs de croissance (BAP seule ou combinée avec ANA pour les bourgeons, ANA pour la rhizogénèse), alors que la croissance des pousses feuillées et l'élongation des racines sont favorisées par la présence de charbon actif dans un milieu minéral simple. En conditions de serre, le sevrage dans de la vermiculite donne de bons résultats. Dans ce cas, le système racinaire des boutures est plus développé que celui des individus issus de semis
The vegetative propagation of Pinus merkusii in vitro had been carried out starting from plants issued from either seed germination, or from plantlets of ungerminated seeds. Four steps of different treatments are necessary to realize this technique: the obtaining and development of buds, leaflets growth, root establishment, and transplantation. Bud formation and rhizogenesis require previous induction of growth substances (BAP only or in combination with NAA for bud formation, NAA for rhizogenesis), while leaflets growth and root elongation are promoted by the presence of active charcoal in simple mineral medium. At green-house conditions, the transplantation in the vermiculite shows good results. In this case the root system of cutting is better developed than those obtained from seeds

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Sellin, Claudine. "Recherche de chicorées à café (Cichorium intybus L. Var. Magdebourg) résistantes aux herbicides (glyphosate et glufosinate) par cultures cellulaires." Lille 1, 1991. http://www.theses.fr/1991LIL10118.

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Abstract:

Les aptitudes de Cichorium intybus L. Var. Magdebourg en culture in vitro ont été contrôlées. A partir de racines tubérisées matures ainsi que de feuilles cotylédonnaires issues de germination, il est possible d'obtenir une callogenèse importante, d'installer des suspensions cellulaires et d'induire la formation de bourgeons. En exploitant la variabilité induite par la culture in vitro, deux souches de cals résistantes au glyphosate et une souche résistante au glufosinate ont été isolées. Comparées aux souches sensibles, elles prolifèrent respectivement sur des doses 25 et 7,5 fois plus élevées. Il a été montré que les souches résistantes au glyphosate ont une activité EPSP synthase plus élevée que les souches sensibles (4,4 et 4 fois) alors que l'enzyme est inhibée de la même manière par l'herbicide. Ceci laisserait supposer l'existence d'un mécanisme d'amplification génique. A partir de ces souches, des plantes ont été obtenues mais après acclimatation en serre une seule souche s'est montré viable. Du cal a été initié à partir de ces plantes. Les tests in vitro ont montré que la résistance est conservée partiellement (18 fois) et que l'activité enzymatique a légèrement diminué (3,3 fois). Ces plantes sont totalement autoincompatibles, mais par croisement avec des plantes sensibles des graines ont été obtenues. Les traitements en serre effectués sur des jeunes plantules ont montré que toutes les plantes F1 sont sensibles au glyphosate. Les tests in vitro ont confirmé ces résultats. L'activité enzymatique des plantes F1 in vivo et in vitro est comparable à celles des plantes sensibles. Deux hypothèses sont envisageables, il s'agit soit d'un caractère récessif soit d'un variant épigénique

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Bourgaud, Frédéric. "Etude de la biologie de plantes du genre Psoralea (légumineuses), productrices de furocoumarines à intêrét pharmaceutique : essais de cultures in-vitro." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1990. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/INPL_T_1990_BOURGAUD_F.pdf.

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Abstract:

Nous avons étudié des plantes australiennes du genre Psoralea (légumineuses) qui synthétisent des métabolites secondaires du type furocoumarines (psoralènes). Les expériences conduites en conditions contrôlées ont permis d'obtenir un cycle de développement complet, depuis la germination jusqu'a la récolte des semences, pour les trois espèces retenues: P. Cinerea, P. Plumosa et P. Martinii. Nous avons pu ainsi démontrer le rôle fondamental des bactéries symbiotiques (Bradyrhizobium) dans la croissance des Psoralées. L'étude de la distribution des furocoumarines dans les plantes a révélé la présence d'angélicine et de psoralène, qui sont principalement localisées dans les organes reproducteurs (fruits immatures et semences). Les concentrations en furocoumarines sont apparues étroitement dépendantes d'un ensemble de paramètres reliés à la plante (espèce, organe végétal) ou aux facteurs du milieu (conditions de la nutrition azotée, température). Les furocoumarines semblent également jouer le rôle de phytoalexines chez les Psorallées. Les essais concernant la culture in vitro ont montré que les Psoralées sont un matériel bien adapté à l'obtention de cultures de cellules isolées ou de cals. L'étude de la synthèse des furocoumarines par des suspensions cellulaires de Psorales peut donc être envisagée favorablement

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Mérot, Bertrand. "Études de l'embryogenèse somatique de la canne à sucre (Sacharum sp. ) : optimisation de la production : application aux cultures de cellules et de protoplastes : analyses cytologiques, biochimiques et hormonales." Paris 11, 1988. http://www.theses.fr/1988PA112367.

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Abstract:

Après un rappel des principales caractéristiques biologiques et agronomiques de la canne à sucre, les possibilités de sélection classiques présentées au regard des exigences permanentes en nouveaux cultivars. L’intérêt d’un recours aux cultures in vitro est donc discuté au sein d’une revue bibliographique et étendue aux graminées dans leur ensemble en présentant les perspectives de manipulation génétique. Le premier axe de recherches poursuivi dans cette thèse fût l’amélioration de la production d'embryons somatiques en tant que matériel source pour les cultures de cellules et de protoplastes. Les facteurs des milieux de culture ont été étudiés. L’agarose et le nitrate d’argent ont eu un effet positif. Les facteurs génétiques se sont révélés plus importants que les facteurs physiologiques. La production a ainsi pu être augmentée de 5 à 50% permettant les premiers essais positifs d’enrobage d’embryons somatiques. Seule, l'initiation directe en milieu liquide des explants embryogènes a permis l'établissement de suspensions de microcals aptes à régénérer et qui fournissent une grande quantité de protoplastes. Les densités de culture et le niveau de dissociation des structures cellulaires sont apparus décisifs sur l'évolution des suspensions. Dans le but de mieux comprendre la régulation de l'embryogenèse somatique chez une graminée comme la canne à sucre, des études cytologiques et des analyses biochimiques comparatives ont été menées entre cals embryogènes et cals non embryogènes. L'organisation générale des cals et la nature des parois se sont révélées très différentes. La présence de réserves est caractéristique des cals embryogènes, de même qu'une tendance nette à la lignification. Des différences quantitatives et qualitatives importantes ont été mises en évidence dans les teneurs endogènes en régulateurs de croissance, notamment au niveau de l'ABA et du métabolisme des cytokinines. Une grosse glycoprotéine majoritaire s'est révélée spécifique des cals embryogènes, ainsi que l'activité d'isozymes et la composition en acides aminés. Les différentes natures possibles de cette protéine sont discutées, ainsi que la régulation du métabolisme protéique en relation avec les régulateurs de croissance et la voie des polyamines. Ces résultats ont été confrontés aux acquis de la culture in vitro, permettant ainsi de proposer quelques protocoles expérimentaux et tentant de contribuer à une meilleure compréhension de l'embryogenèse somatique chez les graminées
In order to increase the yield of sugarcane somatic embryos, the culture media factors were studied. Agarose and Silver nitrate had a positive effect. Genetical factors appeared most important than physiological factors. Thus, the yield was increased from 5% to 50% allowing the first positive trials of encapsulation of somatic embryos, and the application to cell and protoplast cultures. The very compact structure of embryogenic calli remained an obstacle. The establishment of microcallus suspension cultures has been allowed only by direct initiation in liquid medium of embryogenic expiant. These suspensions were able to regenerate plants and to give a great quantity of protoplasts. Some cytological studies and biochemical analysis were carried out to compare embryogenic and non embryogenic calli. Callus structure and cellwall behavior appeared very different. A lignification of embryogenic callus was pointed out. Some very important qualitative and quantitative differences were exhibited in endogenous growth regulators and particularly in ABA and cytokinin metabolism. A specific protein of embryogenic calli and some differences of isozymes and amino-acids were also showed. The whole of these results are discussed in taking the results of in vitro culture into account for a best understanding of gramineous somatic embryogenesis

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Moyne, Anne-Laure. "Contribution à l’étude de l’embryogenèse somatique directe à partir de protoplastes d'Helianthus annuus L." Paris 11, 1989. http://www.theses.fr/1989PA112137.

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Abstract:

Le développement des cultures de tissus d'Héliantus annuus contribue à l'élargissement de la variabilité génétique disponible pour l'amélioration de cette espèce. Dans le but d’introduire des gènes par transformation directe ou par fusion nous avons défini une technique de culture des protoplastes. Des divisions ont été obtenues à partir de protoplastes d'hypocotyles d'Hélianthus annuus de différentes variétés cultivées et de protoplastes de feuilles d'Hélianthus pétiolaris. Différents facteurs qui conditionnent la division des colonies cellulaires, sont étudiés. Parmi ceux-ci, la gélification du milieu de culture avec de l'agarose s’est avéré indispensable pour le maintien des divisions et l'obtention de cals. L'évolution des protoplastes d'hypocotyles de tournesol conduit à observer simultanément la formation de structures proembryoides et de microcals après 21 jours de culture. Ces structures proembryoides sont identiques à celles obtenues dans des cultures d'hypocotyles en milieu liquide. Plusieurs paramètres favorisant la formation de ces structures sont précisés. Le pourcentage maximum de protoplastes, qui donnent naissance à des structures proembryoides, est de 30% dans un milieu solidifié par de l'agarose (sigma 0,7%) et contenant de la BAP (4,4 μM) et de l'ANA (5,4 μM). L'obtention d'une embryogénèse directe à partir de protoplastes d'hypocotyle, indique que les cellules sont capables d'exprimer leurs potentialités embryogènes même après digestion de la paroi
Developing tissue culture for Helianthus annuus L. Provides new options for gene or organelle transfer to overcome natural sterility barriers and producing new nucleo-cytoplasmic combinations. Ln order to introduce genes by direct gene transfer or by protoplasts fusion we developed a protoplast culture. Cell division has been obtained from hypocotyl protoplasts of Helianthus annuus and leave protoplasts of Helianthus petiolaris. The addition of agarose to the protoplast culture medium was an absolute requirement for substaining cell division and microcalli formation. Hypocotyls protoplasts gave rised to embryoid like-structures similar to those observed in hypocotyl liquid cultures. Ln the resultant culture a mixed population of calli and proembryoid structures was noticed. Factors affecting the developmental pattern of embryogenesis from protoplats are studied. The frequeny of embryoid like-structure formation reached 30 % of the total plated protoplasts when they are cultivated in a solidified medium supplemented with BAP (4,4 μM) et de l'ANA (5,4 μM). For sunflower, embryogenesis occurs from hypocotyl protoplasts, indicating that cells when converted to protoplasts are potentially responsive to redetermination via embryogenesis

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Maarri, Khalil al. "Micropropagation in vitro du pommier (M9), du poirier ("Williams" et "Passe Crassane") et du cognassier de Provence problèmes posés par l'état physiologique du matériel." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb375993122.

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Zhang, Yong Xiang. "Recherche in vitro de plantes haploïdes chez le pommier cultivé (Malus x domestica Borkh) androgénèse, gynogénèse, parthénogénèse in situ induite par du pollen irradié /." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376193802.

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El, Badaoui Houriya. "Comparaison entre différentes techniques de culture in vitro de Solanum paludosum Moric. Pour la production de solamargine, glycoalcaloi͏̈de principal." Toulouse, INPT, 1993. http://www.theses.fr/1993INPT015A.

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Abstract:

Ce travail porte sur un arbuste tropical: solanum paludosum moric pour la production en glycoalcaloides qui entrent dans l'hemisynthese des hormones steroidiques. Les fruits issus de plantes obtenues par culture in vitro produisent autant de solamargine que les fruits des plantes meres d'origine. Les teneurs sont de 2%. La production des glycoalcaloides par la culture de cals et des cellules desorganisees est faible. Les teneurs sont environ de 0,015%. En revanche la culture de parties aeriennes multiples a permis d'obtenir 0,05% de solamargine alors que les parties aeriennes des plantes entieres ne produisent pas ces glycoalcaloides. La mise au point de la composition des macroelements du milieu de culture in vitro adapte aux besoins de la plante apres analyse minerale a permis d'augmenter 3 fois la production de la biomasse des parties aeriennes multiples et 2 fois la production de la solamargine par ces cultures. La culture des racines in vitro a ete tentee. La biomasse necessaire au dosage de solamargine s'est averee insuffisante ceci confirme les resultats obtenus par d'autres auteurs sur des especes ligneuses comme l'est solanum paludosum

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Bister-Miel, Françoise. "Biotransformation de la papavérine, de l'isopapavérine et d'analogues, par des suspensions cellulaires végétales non productrices d'alcaloïdes." Paris 11, 1987. http://www.theses.fr/1987PA114824.

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Abstract:

Quatre suspensions non productrices d'alcaloïdes de Silene alba, Cardamine pratensis, Digitalis purpurea et Centella asiatica ont été initiées et stabilisées. Leurs capacités de biotransformation ont été testées vis-à-vis de substrats isoquinoléiques : papavérine, isopapavérine, tétradéméthylpapavérine et chlorobenzylisoquinoléine (PV2). Excepté avec la Digitale, il a été mis en évidence une capacité générale à oxyder ces molécules, avec formation de formes cétoniques et de N-oxydes. Le Silène présente en outre la propriété de déméthyler régiosélectivement ainsi que de déshalogéner (cas du PV2). La production d'une molécule combinée a été obtenue avec une souche accoutumée à la papavérine. L'utilisation d'une culture mixte de Silène et de Digitale s'est montrée viable mais n'a pas permis de mettre en évidence de nouveau métabolite. Bien que les rendements de biotransformation soient faibles, les résultats obtenus ouvrent la voie à l'exploitation des capacités de bioconversion du Silène en particulier, à l'utilisation du phénomène d'accoutumance à un substrat pour induire certains métabolites.

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Lecoublet, Sophie. "Études cliniques et immunologique de la babésiose canine chez le chien infecté expérimentalement par Babesia canis : Texte imprimé." Rouen, 1998. http://www.theses.fr/1998ROUEO1NR.

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Abstract:

Une enquête épidémiologique dans neuf régions de France a permis de recueillir quarante isolats de Babesia canis et d'obtenir des données cliniques. La mise au point d'une culture continue a pu être obtenue. Une méthode de détermination in vitro de la sensibilité de B. Canis aux anti-babésiens par incorporation d'hypoxanthine tritiée a été évaluée. Elle a montré que l'imidocarbe et la phénamidine étaient très efficaces. L'inoculation de plusieurs isolats de B. Canis à des chiens splénectomisés ou non splénectomisés a montré le rôle de la rate dans la protection contre le parasite. Les chiens splénectomisés ont développé une babésiose aiguë avec coma et mort en moins de cinq jours alors que les chiens non splénectomisés ont survécu et acquis une résistance à des inoculations ultérieures. Les réponses en anticorps IgG, IgG1, IgG2, IgA et IgM ont été déterminées par l'immunofluorescence indirecte et les concentrations en cytokines: TNFalpha,. IFNy, IL1 beta, IL2, IL4, IL6 et IL10 par ELISA. Aucune réponse en anticorps n'a été détectée chez les chiens splénectomisés et les concentrations en cytokines étaient variables. Chez les non splénectomisés, les anticorps IgG2 étaient protecteurs, apparaissant un mois après l'inoculation et persistant un an. Une activité inhibitrice des plasmas des chiens inoculés sur la culture in vitro du parasite a été mise en évidence. Ces plasmas inhibaient non seulement la culture de différents isolats de B. Canis, mais aussi celles de B. Divergens et de P. Faiciparum. Nous avons également montré que des anticorps monoclonaux IgG1 et IgG3 ainsi que les cytokines TNFalpha, IFNy et I,10 avaient in vitro une activité anti-parasitaire. Enfin, nous n'avons pas trouvé d'inhibition cellulaire dépendante des anticorps (ADCI) sur la multiplication du parasite in vitro.

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Mévy, Jean-Philippe. "Régulation, caractérisation de l'activité des invertases et mise en évidence d'une activité myrosinase dans les cellules d'Armoracia rusticana G. , cultivées in vitro." Aix-Marseille 1, 1993. http://www.theses.fr/1993AIX11013.

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Abstract:

Le but de ce travail est d'etudier la regulation, la caracterisation des invertases, et de mettre en evidence une activite myrosinase a partir de cultures cellulaires d'armoracia rusticana. Ces deux marqueurs biologiques sont, respectivement, des enzymes du metabolisme du saccharose et des glucosinolates. Deux types d'invertase acide sont mis en evidence a partir de suspensions cellulaires: l'une intra-cellulaire et l'autre, extra-cellulaire, secretee dans le milieu de culture. Cette derniere, hydrolyse le saccharose exogene, qui ne peut etre utilise directement par nos cellules. La technique d'immobilisation retarde la croissance cellulaire, et reduit l'amplitude de l'activite des invertases intra et extra-cellulaires, atteignant, respectivement, 63 et 54%. L'activite de l'invertase extra-cellulaire est regulee a la fois par le glucose ou le saccharose et par les lumieres rouges, via le phytochrome. Il est montre que nos cellules sont chlorophylliennes en lumiere blanche, rouge proche et bleue. Les differentes etudes chromatographiques qui ont ete menees, traduisent une homogeneite des deux formes d'invertase. En effet, ce sont des -fructofuranoside fructohydrolases (e. C 3. 2. 1. 26), glycosylees, de masse moleculaire voisines de 100 kda avec des points isoelectriques voisins de 4,8. Les possibilites d'expression d'un metabolisme secondaire a partir de cellules indifferenciees sont aussi etudiees. Il est montre que les cals et les racines contiennent, respectivement, 6 et 4 formes de glucosinolates. L'activite de la myrosinase depend de l'age des cals mais, celle-ci est absente des suspensions cellulaires. Dans ce dernier cas, l'immobilisation cellulaire et l'initiation d'embryons somatiques induisent l'activite de la myrosinase

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Gadzovska, Sonja. "Production de métabolites secondaires par les cultures de cellules et de tissus d'Hypericum perforatum L : effets de divers facteurs exogènes." Orléans, 2005. http://www.theses.fr/2005ORLE2005.

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Abstract:

Les pousses feuillées, les cals et les suspensions cellulaires d'Hypericum perforatum L. Cultivés in vitro ont été utilisés comme des modèles expérimentaux pour l'étude des effets de quelques facteurs exogènes sur la production de métabolites secondaires. Les méthodes analytiques développées dans ce travail ont permis le dosage de l'hypéricine, de la pseudohypéricine et d'autres métabolites secondaires extraits des explants cultivés in vitro. Afin de déterminer si la production de métabolites secondaires pouvait être augmentée, des cultures in vitro ont été soumises à des phytohormones (auxines et cytokinines) et des éliciteurs chimique (acide jasmonique, acide salicylique, pectine et chitine). Afin d'évaluer les réponses aux éliciteurs biotiques, les suspensions cellulaires ont été traitées avec des extraits de mycélium de trois champignons Fusarium oxysporum, Phoma exigua et Botrytis cinerea. Les pousses feuillées produisent des métabolites secondaires. Les cals et les suspensions cellulaires répondent rapidement à l'application d'éliciteurs exogènes. Les éliciteurs fungiques, les acides jasmonique et salicylique sont des éliciteurs efficaces pour la productions de métabolites secondaires dans des suspensions cellulaires d'Hypericum. La production de métabolites secondaires par des cellules d'Hypericum peut être partiellement modifiée par l'addition d'éliciteur. Des cultures bien contrôlées pourraient éventuellement être utilisées comme une source pour une production rapide et accrue d'hypéricine et de pséudohypericine.

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Dissertations / Theses on the topic 'Pommier – Multiplication in vitro'

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