Academic literature on the topic 'Progestérone – Métabolisme'

Les modifications phénotypiques du métabolisme de la prgestérone ont été étudiées, d'une part dans les diverses fractions tissulaires obtenues tout au long des étapes de mise en culture, et d'autre part dans les cellules épithéliales isolées par trypsination après culture primaire propagation en lignées sur un milieu nutritif additionné ou non de sérum

Etude des effets de la progesterone(p) sur l'oxydation de glucose-1-**(14)c en presence de concentrations intracellulaires d'ampc augmentees. Recherche des effets de la p sur l'accumulation de l'ampc dans les adipocytes et la specificite de cette action. Recherche d'un effet de la gestation et du traitement a la p de rattes ovariectomisees sur l'accumulation intracellulaire d'ampc. Mise en evidence de l'action de p sur l'activite de l'adenylate cyclase des membranes plasmiques d'adipocytes

L'ontogenese des enzymes de biotransformation hepatiques a ete etudiee chez la brebis lacaune aux stades ftal, neonatal (1 et 4 semaines), de croissance (7 mois), en gestation (11 mois) et adulte (7 ans). Bien que le cytochrome p450 microsomal n'ait pu etre detecte par spectrophotometrie chez le ftus de 3 mois, les isoenzymes p450iib et p450iiia reconnus par western blotting etaient exprimes a ce stade. Le p450 total augmentait regulierement apres la naissance, comme la dealkylation de l'aminopyrine, de l'ethylmorphine et de l'ethoxycoumarine ou l'hydroxylation du benzopyrene. En raison de leur presence dans le foie ftal et de leur evolution plus precoce, le cytochrome b5, la p450 reductase et l'aniline hydroxylase se differenciaient du p450 total par leur ontogenese. La p450iib etait faiblement exprime dans le foie ovin alors que le p450iiia constituait la forme majeure au cours des premieres semaines de la vie postnatale. Cette isoenzyme etait correlee aux activites erythromycine n-demethylase et progesterone 6 et 16-hydroxylases. Les transferases hepatiques montraient un mode de developpement different de celui de monooxygenases. L'udp glucuronyltransferase detectee chez le ftus atteignait une activite de conjugaison du p-nitrophenol maximale au cours des 7 premiers mois, puis elle diminuait chez l'adulte. Concernant la glutathion s-transferase acceptant le 1-chloro-2,4-dinitrobenzene, des activites similaires etaient obtenues chez le ftus et les jeunes animaux mais des valeurs 5 a 10 fois plus elevees etaient enregistrees a partir de 11 mois. La n-acetyltransferase de la sulfamethazine n'evoluait pas de facon significative mais de grandes differences interindividuelles existaient quel que soit l'age des ovins considere, cette caracteristique pourrait correspondre a un polymorphisme genetique deja observe chez d'autres especes

Les stéroïdes sexuels ne sont pas impliqués uniquement dans la reproduction, ils sont également actifs dans le système nerveux où ils exercent des effets neuroprotecteurs. La mitochondrie a un rôle central dans la synthèse de l’énergie cellulaire et le contrôle du stress oxydant. Ces fonctions mitochondriales seraient une cible potentielle des effets des stéroïdes sexuels dans le cerveau. Deux approches ont été développées au cours de ce travail de thèse : une approche physiologique avec l’étude de l’influence des stéroïdes endogènes sur la fonction mitochondriale cérébrale et une approche thérapeutique en utilisant le modèle expérimental de l’ischémie cérébrale et du traitement par la progestérone. Pour analyser l’influence des stéroïdes endogènes, nous avons comparé le fonctionnement de la phosphorylation oxydative (consommation d’oxygène ou « respiration » et activités enzymatiques) ; le niveau du stress oxydant (pool de glutathion mitochondrial et inactivation oxydative de l’aconitase mitochondriale) et les taux cérébraux de stéroïdes dans des groupes de souris mâles et femelles soit jeunes adultes intactes ou gonadectomisées (3 mois) ; soit âgées (20 mois). Nous avons montré que la respiration NADH-dépendante est plus importante et que le stress oxydant mitochondrial est moins important chez les femelles que chez les mâles jeunes. Cette différence n’existe plus chez les souris âgées et est abolie après ovariectomie mais pas après orchidectomie, ce qui démontre l’influence des stéroïdes ovariens. Les taux cérébraux importants de prégnènolone et de progestérone chez les souris jeunes femelles par rapport aux jeunes mâles pourraient être impliqués dans le dimorphisme sexuel observé.Les modifications de la respiration mitochondriale induites par l’ischémie cérébrale sont également différentes entre les mâles et les femelles dans notre modèle. La respiration NADH-dépendante est diminuée dans les deux sexes, mais la respiration FADH2-dépendante est diminuée spécifiquement chez les femelles. Le stress oxydant mitochondrial est augmenté dans les deux sexes. L’administration de progestérone permet de restaurer la respiration FADH2-dépendante chez les femelles et la respiration NADH-dépendante ainsi que le pool de glutathion mitochondrial dans les deux sexes. Ce travail a permis de mettre en évidence des différences de fonctionnement mitochondrial cérébral chez les souris mâles et femelles jeunes et d’identifier la phosphorylation oxydative et le stress oxydant mitochondrial comme cibles d’action des effets neuroprotecteurs de la progestérone lors de l’ischémie cérébrale
Besides the reproduction control, sex steroids also act on nervous system and exert neuroprotective effects. The mitochondria are centrally involved in cellular energy synthesis and oxidative stress regulation and constitute a potential target of steroids effects on brain. The aim of our study was twofold: (1) to study the influence of endogenous steroids on brain mitochondrial function in physiological conditions ; (2) to determine the effects of progesterone on mitochondrial function when used as therapeutic agent in an experimental model of cerebral ischemia. To analyze the influence of endogenous sex steroids, the oxidative phosphorylation system (oxygen consumption or “respiration” and enzymatic activities) and mitochondrial oxidative stress (glutathione pool and mitochondrial aconitase oxidative inactivation) were analyzed in brain mitochondria of young adult male and female mice (3-month-old), intact and after gonadectomy, and of aged male and female mice (20-month-old). Our results showed that young adult females have lower oxidative stress and a higher NADH-linked respiration rate as compared to young adult males. This sex difference was suppressed by ovariectomy but not by orchidectomy and no longer existed in aged mice. Concomitant analysis of brain steroids suggest that the major male/female differences in brain pregnenolone and progesterone levels may contribute to the sex differences observed in brain mitochondrial function.We have also shown that the decrease of brain mitochondrial respiration induced by ischemia is different according to sex in our experimental model. The NADH-linked respiration decreased after ischemia in males and female but a decrease of FADH2-linked respiration only occurred in females. Ischemia induced oxidative damages in both males and females. Progesterone restored NADH-linked respiration in both sexes and FADH2-linked respiration in females. Progesterone also preserved mitochondrial glutathione pool in both sexes. Our findings point to a sex difference in brain mitochondrial function of young male and female mice and identify the oxidative phosphorylation system and the mitochondrial oxidative stress as targets of the neuroprotective effects of progesterone

La mise sous forme de nanocapsules de principes actifs de lipophilie varie est susceptible d'en modifier la diffusion et le métabolisme. Il est donc important de mettre au point des préparations d'échantillons fiables pour contrôler les suspensions de nanocapsules et poursuivre l'étude du métabolisme. Deux molécules ont été ici choisies : la progestérone, en raison de sa mauvaise biodisponibilité par voie orale et la phénylbutazone compte tenu de ses nombreux effets secondaires. Sur le plan analytique, la préparation des échantillons a permis de différencier le principe actif resté en solution dans la phase aqueuse et le principe actif encapsulé. Pour l'étude du métabolisme, une méthode originale de dosage simultané de la phénylbutazone et de ses métabolites a été mise au point et validée avec des conditions permettant de préserver l'équilibre entre le métabolite -hydroxyle et la lactone correspondante. Sur le plan galénique, les formulations des suspensions de nanocapsules ont été optimisées. Sur le plan du métabolisme, la prise de phénylbutazone sous forme de nanocapsules montre une augmentation de ce principe actif et de ses métabolites dans les excreta et une augmentation de la biodégradation de la phénylbutazone.

La progesterone diminue le metabolisme glucido-lipidique de l'adipocyte, cette action tres rapide (20 min. ) ne cecessite pas de synthese proteique nouvelle et semble donc due a des mecanismes d'action non-genomiques; une intervention des seconds messagers a donc ete recherchee. Etude de l'effet: de la concentration du calcium extracellulaire et intracellulaire; des flux ioniques transmembranaires; de la calmoduline ainsi que de la proteine kinase-c. Etant donne que le complexe calcium-calmoduline est necessaire a l'action de la progesterone et que le steroide augmente l'amp cyclique de l'adipocyte, son action pourrait se situer sur un systeme enzymatique calcium-dependant regulant le taux d'amp cyclique

La gestation provoque chez la femme, comme chez l'animal, des perturbations du metabolisme glucido-lipidique, avec apparition d'une insulino-resistance, en partie attribuees a la progesterone. Des traitements par des steroides ovariens naturels (estradiol, progesterone) ou de synthese (promegestone), seuls ou associes, effectues pendant les periodes de 6 a 12 semaines, chez des rates ovariectomisees, ont revele une disparition de cette insulino-resistance. L'installation avec l'age d'une certaine obesite chez les temoins castres la masque peut-etre. Au niveau cellulaire, la progesterone inhibe le metabolisme glucido-lipidique de l'adipocyte isole de rate, par une action extremement rapide (15 minutes). Le steroide induit, par l'intermediaire de l'adenosine endogene, une baisse de l'accumulation de l'ampc, a la fois par une inhibition de l'activite de l'adenylyl-cyclase par l'intermediaire des recepteurs a#1 et une augmentation de l'activite de la phosphodiesterase ampc-dependante. La lipolyse et la lipogenese sont egalement diminuees par le steroide en presence d'adenosine endogene. Cependant, l'effet inhibiteur de la progesterone sur la lipolyse, bien que medie par l'adenosine, ne passe pas par une activation des recepteurs a#1 du nucleoside. L'hypothese d'une double action non genomique, peut-etre membranaire, et genomique de la progesterone est emise. En effet, le steroide stimule la synthese de sept proteines differentes de l'adipocyte, mais seules deux d'entre elles ne sont pas affectees par l'actinomycine d. Ces deux proteines pourraient etre impliquees dans l'effet inhibiteur sur le metabolisme glucido-lipidique

Le contexte scientifique de cette thèse considère l’étude de la voie de signalisation Mos-MEK-MAPK dans l’ovocyte de Xenopus laevis au cours de la transition G2/M du cycle cellulaire. Une approche interdisciplinaire a conduit à l’élaboration d’une analyse, tant expérimentale que théorique de la voie Mos-MEK-MAPK. Une étude bibliographique du sujet a permis d’identifier des articles de référence dans ce domaine. Les articles de Huang, Ferrell (1998) et Angeli et al. (2004) ont procuré une base théorique pour la description des interactions au sein de la voie. Une approche critique du modèle proposé par Angeli et collaborateurs a été produite, au moyen d’une résolution analytique des équations différentielles qui le constitue. Ainsi, l’importance du choix du type de cinétique et des termes qui composent les équations a été démontrée, en particulier pour représenter l’évolution temporelle de Mos. De plus, nous avons démontré que le comportement de la cascade Mos-MEK-MAPK peut être interprété via une approche analytique dans un cadre particulier de valeurs de paramètres. En outre, des résultats inédits quant à l’évolution temporelle de Mos sur de longues périodes de culture après stimulation par la progestérone, ont été observés en présence d’un inhibiteur de MEK, l’U0126. Par ailleurs, la maturation des ovocytes de Xenopus laevis a été stimulée par injection de cytoplasme contenant du MPF en présence ou non de U0126. Des analyses par western blot ont permis d’évaluer l’accumulation au cours du temps de la protéine Mos, et des états de phosphorylation de MEK, MAPK, ainsi que de la cycline B2. Il a été mis en évidence l’importance de l’activation du MPF pour l’accumulation de Mos. Le MPF peut être activé en absence de MAPK et jouer un rôle prépondérant pour l’initiation de la voie de signalisation. Aussi, suite à ces observations expérimentales et l’analyse des modèles existants, un nouveau modèle de la cascade a été proposé, qui prend en compte trois formes différentes de la protéine kinase Mos : une forme inactive instable, une forme active instable et une forme active stable. Aux côtés de la boucle de rétro-contrôle de MAPK qui stabilise la forme active instable, l’interaction entre la forme active instable de Mos et le MPF, qui le stabilise, a été considérée. Cette dernière n’avait jamais pas été utilisée auparavant pour la modélisation de la cascade Mos-MEK-MAPK. Cette approche constitue la première proposition de modèle biologiquement et physiquement réaliste de ce réseau. La paramétrisation du modèle s’est fondée sur trois sources distinctes : (1) des mesures expérimentales trouvées dans la littérature, (2) un choix arbitré par la connaissance du comportement du modèle, (3) des estimations théoriques, à partir de plages fixées expérimentalement. Une analyse des équilibres du modèle par bifurcation a permis de discuter de l’influence des valeurs des paramètres sur le comportement de la cascade. Cette approche permet de produire une prédiction sur le comportement de la cascade en fonction de la variation de concentration de MPF ainsi que sur l’influence de l’intensité de l’interaction entre MAPK et la forme active instable de Mos. Les résultats de simulation obtenus avec le modèle ont été confrontés aux observations issues des expériences. Une bonne corrélation a été observée dans une optique qualitative
The scientific context of this thesis is based on the study of the signaling pathway Mos-MEK-MAPK in Xenopus laevis ovocytes during the G2/M transition of the cell cycle. An interdisciplinary approach from the biological and physical sciences led us to an experimental and theoretical analysis of the pathway. A bibliographical study identified the key articles related to this field. The articles of Huang, Ferrell (1998) and Angeli et al. (2004) gave us a theoretical basis to describe the interactions within the pathway. A critical analysis of the latter paper has been performed by means of an analytical solution of the differential equations defining the model proposed by Angeli and colleagues. Thus, the importance of the kinetic formulation type and the choice of the mathematical terms of the equations has been underlined ; especially in regard to the time variation of the Mos protein. Moreover, we have proposed an interpretation of the Mos-MEK-MAPK cascade behavior via an analytical approach within the context of the experimental parameter values given by Angeli. In addition, new results regarding to the long time evolution of Mos protein have been recovered when the ovocytes are stimulated with progesterone in presence of MEK inhibitor U0126. Furthermore, ovocytes of Xenopus laevis were stimulated by MPF in presence or absence of U0126. Western blot analysis gave information about the time evolution of Mos accumulation and the states of MEK, MAPK and cyclin B2 phosphorylation. Data showed the importance of MPF in Mos accumulation. In absence of MAPK, MPF is produced and plays an important role in the initiation of the signaling pathway. In contrast to other models, our model has been proposed to take into account three forms of the Mos protein : an unstable inactive state, an unstable active state and a stable active state. The model considers the influence of either MPF and MAPK on the accumulation of the active stable of Mos. The influence of MPF has never been used in previous model of the Mos-MEK-MAPK signaling pathway. Our model is based on a biological and physical point of view. The parametrization of the model is based on : (1) experimental values found in literature, (2) arbitrary values constraints by the known system behavior, (3) theoretical estimations from interval of experimental values. Bifurcation analysis of the system indicated the influence of the parameters values on the system behavior and equilibrium states. This approach produces a prediction for the behavior of the cascade in function of the MPF concentration value. It produces also a discussion for the strength of the interactions between MAPK and the active non-stable form of Mos protein. Simulation results from our model were compared with the experimental observations from our experiments. A good qualitative agreement was found