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Dissertations / Theses on the topic 'Protéines de liaison de la somatomédine'
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Naville, Danielle. "Purification et caractérisation partielles d'une protéine liant IGF1 et appartenant au complexe de 145K circulant dans le plasma humain : étude de son activité biologique sur les cellules de Leydig de porc immature en culture en présence de IGF1." Lyon 1, 1988. http://www.theses.fr/1988LYO1T120.
Full text
2
Fouque, Denis. "Physiopathologie de l'insulin-like growth factor (IGF)-1 en insuffisance rénale chronique humaine : applications thérapeutiques." Lyon 1, 1996. http://www.theses.fr/1996LYO1T018.
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3
Carter, Sophie. "Caractérisation d'IGFBP-2 comme biomarqueur intégrateur de la santé cardiométabolique." Doctoral thesis, Université Laval, 2015. http://hdl.handle.net/20.500.11794/26978.
Full textAbstract:
Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2015-2016La protéine de liaison aux facteurs de croissance analogues à l’insuline (IGFBP)-2 est une protéine circulante fortement associée à la résistance à l’insuline qui module les effets métaboliques d’IGF-I et IGF-II en s’y associant directement, et qui exerce aussi des actions IGF-indépendantes via sa liaison à la matrice extracellulaire et aux intégrines. Chez l’homme, de faibles niveaux d’IGFBP-2 sont associés à un profil lipidique délétère, ainsi qu'à une augmentation de la masse grasse et de la résistance à l’insuline. Les travaux décrits dans cette thèse montrent chez l’humain et la souris que les niveaux d’IGFBP-2 sont associés de manière indépendante aux composantes du risque cardiométabolique. Chez l’homme, de faibles niveaux d’IGFBP-2 sont associés à la dyslipidémie athérogène. Une valeur seuil d’IGFBP-2 de 221.5 ng/mL a permis de discriminer entre les sujets métaboliquement sains et ceux répondant aux critères du syndrome métabolique. En plus de son association avec la résistance à l’insuline et les composantes du profil lipidique, de faibles niveaux d’IGFBP-2 sont associés à une fonction cardiaque diminuée chez les patients atteints de sténose aortique, tel qu’évaluée par le volume d’éjection indexé, un indice de fonction global du ventricule gauche qui intègre la fonction pompe et le remodelage du tissu. Chez l’homme, des niveaux d’IGFBP-2 élevés sont associés à un tissu adipeux brun plus volumineux ainsi qu’à une activité métabolique plus importante de ce dernier. Ces observations, telles qu’évaluées par PET/CT, sont aussi validées chez les souris surexprimant la forme humaine d’IGFBP-2. Nos travaux démontrent que les niveaux d’IGFBP-2 sont fortement associés au métabolisme des lipoprotéines et des lipides, à la fonction cardiaque ainsi qu’à l’activité du tissu adipeux brun. L’influence des niveaux d’IGFBP-2 par différentes altérations métaboliques menant à l’augmentation du risque cardiométabolique pourrait faire de ce dernier un biomarqueur précoce et intégrateur. Les travaux exposés dans la présente thèse soulignent aussi un rôle mécanistique potentiel pour IGFBP-2 dans la protection contre certaines altérations du métabolisme.
Insulin-like growth factor binding protein (IGFBP)-2 is a circulating protein strongly associated with insulin resistance. IGFBP-2 modulates the metabolic actions of IGF-I and IGF-II by direct binding, but can also exert IGF-independent effects through extracellular matrix and integrin binding. In humans, lower IGFBP-2 levels are associated with a deleterious lipid profile, increased fat mass and decreased insulin sensitivity. Causal links between IGFBP-2 levels and surrogate markers of cardiometabolic risk and the potential of IGFBP-2 as a biomarker of metabolic alteration have been scarcely studied. The work presented herein shows in humans and mice that IGFBP-2 levels are independently associated with components of the metabolic syndrome. In men, low IGFBP-2 levels are associated with atherogenic dyslipidemia. A cut-off value for IGFBP-2 at 221.5 ng/mL allowed us to identify subjects with or without the metabolic syndrome. In addition to its association with insulin resistance and the components of the lipoprotein-lipid profile, low IGFBP-2 levels are linked to decreased cardiac function in aortic stenosis patients, as assessed by stroke volume index, a global marker of left ventricle function and remodeling. In men, high IGFBP-2 levels are associated with a more important volume of brown adipose tissue and an increased activity. These observations, as assessed by PET/CT, were also confirmed in mice overexpressing the human form of IGFBP-2. Our results show that IGFBP-2 levels are strongly associated to lipid metabolism, cardiac function and brown adipose tissue activity. The combined influence of different metabolic alterations on IGFBP-2 levels could make it an early and integrative biomarker. The work presented here highlights a potential mechanistic role for IGFBP-2 in the protection against certain metabolic alterations.
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Li, Zhuo. "Modulation of IGFBP2 upon aging, obesity and insulin resistance in mice and humans." Thesis, Université Laval, 2011. http://www.theses.ulaval.ca/2011/28371/28371.pdf.
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5
Tran, Cong Dung. "La consommation de fruits et de légumes, les apports en antioxydants et le facteur de croissance analogue à l'insuline-I (IGF-I) et sa principale protéine porteuse (IGFBP-3)." Master's thesis, Université Laval, 2006. http://hdl.handle.net/20.500.11794/18372.
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6
Diorio, Caroline. "Les facteurs de croissance analogues à l'insuline, les apports en vitamine D et en calcium et la densité mammaire." Thesis, Université Laval, 2005. http://www.theses.ulaval.ca/2005/23164/23164.pdf.
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7
Grellier, Pascale. "Rôle des protéines de liaison des "insulin-like growth factors" (IGFBP) dans la prolifération cellulaire." Paris 11, 1999. http://www.theses.fr/1999PA11T028.
Full textAbstract:
Les IGF sont des facteurs de croissance impliqués dans la prolifération et la différenciation de nombreux types cellulaires. Ils interagissent avec un famille de protéines de liaison de haute affinité, les IGFBP, dont 6 espèces moléculaires sont actuellement bien caractérisées. Les IGFBP sont synthétisées de façon ubiquiste, avec un profil d'expression propre à chaque type cellulaire. Leur rôle principal est de moduler la biodisponibilité des IGF et de réguler ainsi leur activité biologique. Ce travail a pour but d'analyser les relations existant entre IGF et IGFBP et d'en étudier les conséquences sur la prolifération et la différenciation cellulaires dans différents modèles. Dans un premier temps, nous avons caractérisé l'expression des IGFBP dans différentes lignées de cellules stromales de mœlle osseuse de souris et dans les cellules mésangiales glomérulaires humaines en culture. Nous avons étudié leur régulation par différents facteurs de croissance potentiellement impliqués en pathologie tels que le TGF-, l'IGF-1 ou un agoniste de l'AMPc. Dans un deuxième temps, nous avons analysé le rôle de l'IGFBP-6 dans la prolifération de cellules dérivées de neuroblastome. Nous avons montré que l'expression d'IGFBP-6 apparaît concomitante de l'arrêt de la rolifération cellulaire. La surexpression constitutive d'IGFBP-6 par des cellules IGR-N-91, dérivées de neuroblastome humain, s'accompagne d'une diminution de la prolifération induite par les IGF-1 ou -II et du pouvoir tumorigène de ces cellules après injection chez des souns nude. Le mécanisme impliqué semble être la diminution de la biodisponibilité des IGF par la surexpression locale d'IGFBP-6. Cette hypothèse est renforcée par la présence de larges plages de cellules apoptotiques au sein de xénogreffes de très faibles volumes qui ne se sont pas développées. Par ailleurs, l'analyse des IGFBP dans le milieu conditionné par ces cellules et dans les xénogreffes montre qu'en présence d'IGFBP-6, les quantités d'IGFBP-2 sont diminuées. Ces résultats suggèrent l'existence d'un équilibre complexe entre les différentes IGFBP qui, chacune, possèdent des caractéristiques propres.
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Angelloz-Nicoud, Patricia. "Rôle de l'Insulin-like Growth Factor Binding Protein-3 (IGFBP-3) dans la prolifération autocrine des cellules PC-3 dérivées d'un adénocarcinome prostatique humain : implication de protéases." Compiègne, 1996. http://www.theses.fr/1996COMPD889.
Full textAbstract:
La lignée PC-3 dérivée d'un adénocarcinome prostatique humain a la capacité de proliférer en l'absence de tout facteur ajouté. Cette prolifération autocrine importante est due, au moins en partie, aux Insulin-like Growth Factors sécrétés (essentiellement IGF-II). Outre les IGFs, ces cellules sécrètent plusieurs de leurs protéines de liaison, les IGFBP-2, -3, -4 et -6. Les IGFBPs régulent l'action cellulaire des IGFs le plus souvent en l'inhibant, parfois en la potentialisant. L'IGFBP-3 ajoutée au milieu de culture des cellules PC-3 stimule leur prolifération, et notre objectif a été d'en déterminer le mécanisme. Nous avons montré que cet effet mitogène implique les IGFs de deux façons : - 1) l'IGFBP-3 a la propriété d'adhérer à la surface cellulaire, ce qui lui permet de concentrer l'IGF qui lui est associé à proximité de son récepteur. - 2) elle subit une dégradation limitée sous l'effet de la plasmine générée au contact des cellules. Cette altération structurale favorise la dissociation de l'IGF lié et son accès au récepteur, provoquant ainsi une stimulation de la prolifération. Nous avons pu démontrer la réalité de ce phénomène aussi bien pour l'IGFBP-3 exogène que pour celle sécrétée par les cellules. La reproduction in vitro de la protéolyse limitée de l'IGFBP-3 recombinante par la plasmine, rend compte du phénomène de potentialisation observé. En effet, le principal fragment protéolytique correspondant aux deux-tiers N-terminaux de la protéine n'a qu'une affinité très faible pour les IGFs et stimule la prolifération des cellules PC-3. Un autre fragment encore incomplètement caractérisé et ayant une affinité nulle pour les IGFs, se comporte en inhibiteur de la croissance, ce qui suggère une action intrinsèque. Il résulte de nos données que la modulation par l'IGFBP-3, de l'action mitogène des IGFs sur les cellules PC-3, est en rapport avec sa protéolyse limitée et met en jeu des domaines distincts de la protéine. Compte tenu de la sécrétion accrue de protéases par les cancers prostatiques, les phénomènes observés dans la lignée PC-3 pourraient contribuer in vivo aux processus invasif et métastatique.
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Twungubumwe, Novat. "Relations entre les niveaux plasmatiques des hormones de croissance analogues à l'insuline I et II et le risque de cancer du colon/rectum, du poumon et de la prostate." Thesis, Université Laval, 2006. http://www.theses.ulaval.ca/2006/23671/23671.pdf.
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Roche, Didier. "Intérêts des dosages de l'IGF-1 et de la SHBG dans l'évaluation du statut nutritionnel de la personne âgée." Bordeaux 2, 1994. http://www.theses.fr/1994BOR2M221.
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11
Bermont, Laurent. "Rôle de l'IGF-I dans la régulation de l'expression du VEGF et la libération d'IGFBP-3 : étude dans des cellules d'adénocarcinome d'endomètre humain." Besançon, 1999. http://www.theses.fr/1999BESA3704.
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Schalon, Claire. "Comparaison in silico de sites de liaison de protéines." Strasbourg 1, 2008. http://www.theses.fr/2008STR13091.
Full textAbstract:
Après la sélection de différents ensembles de protéines d'intérêt pharmacologique (banque sc-PDB) et l'identification de leur site de liaison, ces ensembles ont été utilisés pour valider et faire des criblages avec un programme d'alignement structural, SiteAlign. SiteAlign utilise une sphère discrétisée et des scores normalisés pour comparer deux sites de liaison. Un protocole de score puis les applications possibles du programme, ont été déterminés. SiteAlign peut être utilisé pour l'annotation fonctionnelle de protéines génomiques, pour la prédiction de réactivités croisées, et la prédiction de cibles pour des ligands (validation expérimentale des calculs). SiteAlign a ensuite été utilisé, dans le cadre de la chémogénomique, pour étudier en 3D les récepteurs couplés aux protéines G et proposer des ligands pour des récepteurs orphelins, ainsi que pour comparer l'espace structural des sites de la sc-PDBAfter the selection of different sets of proteins with a pharmacological interest (sc-PDB databank) and the identification of their binding sites, these sets have been used to validate and to do screenings with a structural alignment program, SiteAlign. SiteAlign use a discretized sphere and normalized scores to compare two binding sites. A scoring protocol, then the possible applications of the program have been determined. SiteAlign can be used for functional annotations of genomic proteins, for predictions of cross reactivity and predictions of ligands targets (experimental validation of this calculation). SiteAlign has then been used, in the chemogenomic part of the project, for studying in 3D the G-coupled protein receptors and for suggesting new ligands for orphan receptors. Last, SiteAlign has been used to compare the structural space of sc-PDB sites
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Rajoelina, Jasmin Armand. "Essai de purification et de caractérisation d'un facteur de croissance de petit poids moléculaire à partir de fractions sanguines humaines (FC-PPM)." Nancy 1, 1987. http://www.theses.fr/1987NAN10354.
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Crave, Jean-Charles. "Régulation in vivo et in vitro de la synthèse de la sex steroid-binding protein (SBP) : rôles de l'insuline et de l'insulin-like growth factor-I (IGF-I)." Lyon 1, 1996. http://www.theses.fr/1995LYO1T148.
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Lecomte, Marc A. "Etude de la liaison covalente d'eicosanoides aux protéines des plaquettes." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 1992. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/212939.
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Carpentier, Gabriel, and Gabriel Carpentier. "Transport du silicium par les aquaporines animales." Doctoral thesis, Université Laval, 2015. http://hdl.handle.net/20.500.11794/26450.
Full textAbstract:
Cette thèse de doctorat porte sur le transport du silicium (Si) par les aquaporines animales. Le Si est un élément abondant dans la nature où il joue des rôles im-portants, chez les plantes notamment. Il jouerait également des rôles importants en physiologie animale en contribuant à l’intégrité osseuse, à la santé tégumen-taire et au maintien du collagène. Bien que des transporteurs de Si soient déjà connus chez les diatomées et les plantes, aucun n’a encore été décrit chez l’animal. Toutefois, la compartimentalisation du Si au sein de l’organisme et son assimilation nutritionnelle suppose l’existence de tels transporteurs. En raison de l’homologie qu’elles partagent avec les transporteurs de Si chez les plantes, les aquaporines (AQPs) animales correspondent à des candidats pertinents. Dans ce contexte, les objectifs de la thèse étaient de déterminer si les AQPs sont per-méables au Si et, le cas échéant, de caractériser le rôle physiologique du trans-port en Si par les AQPs et d’identifier des résidus qui permettent à ces canaux d’agir ainsi. Nos travaux ont permis de constater que les AQP3, AQP7, AQP9 et AQP10 humaines, connues sous le nom d’aquaglycéroporines (AQGPs), peuvent toutes agir comme des transporteurs de Si ou plus spécifiquement de l’acide or-thosilicique qui permet à l’atome d’exister sous forme soluble. Le transport obser-vé est de nature michaelienne, sensible à la phlorétine (AQP7 et AQP9) mais in-sensible aux changements de pH et d’osmolalité extracellulaire. Aussi, la distribu-tion tissulaire de ces transporteurs concorde avec celle du Si, et l’expression des AQP3, AQP7 AQP9 dans le petit intestin de la souris est augmentée avec une diète faible en Si. Par ailleurs, nous avons démontré que la région des AQPs connue sous le nom de filtre aromatique/Arginine joue un rôle important dans la sélectivité à l’OSA, et que les résidus L84 chez AQP1 et N208 chez AQP10 jouent un rôle dans la sélectivité à l’eau et au Si respectivement. Ces travaux ont mené à la première description de transporteurs de Si chez l’animal, et à une meilleure compréhension de la physiologie de l’atome chez les mammifères.Cette thèse de doctorat porte sur le transport du silicium (Si) par les aquaporines animales. Le Si est un élément abondant dans la nature où il joue des rôles im-portants, chez les plantes notamment. Il jouerait également des rôles importants en physiologie animale en contribuant à l’intégrité osseuse, à la santé tégumen-taire et au maintien du collagène. Bien que des transporteurs de Si soient déjà connus chez les diatomées et les plantes, aucun n’a encore été décrit chez l’animal. Toutefois, la compartimentalisation du Si au sein de l’organisme et son assimilation nutritionnelle suppose l’existence de tels transporteurs. En raison de l’homologie qu’elles partagent avec les transporteurs de Si chez les plantes, les aquaporines (AQPs) animales correspondent à des candidats pertinents. Dans ce contexte, les objectifs de la thèse étaient de déterminer si les AQPs sont per-méables au Si et, le cas échéant, de caractériser le rôle physiologique du trans-port en Si par les AQPs et d’identifier des résidus qui permettent à ces canaux d’agir ainsi. Nos travaux ont permis de constater que les AQP3, AQP7, AQP9 et AQP10 humaines, connues sous le nom d’aquaglycéroporines (AQGPs), peuvent toutes agir comme des transporteurs de Si ou plus spécifiquement de l’acide or-thosilicique qui permet à l’atome d’exister sous forme soluble. Le transport obser-vé est de nature michaelienne, sensible à la phlorétine (AQP7 et AQP9) mais in-sensible aux changements de pH et d’osmolalité extracellulaire. Aussi, la distribu-tion tissulaire de ces transporteurs concorde avec celle du Si, et l’expression des AQP3, AQP7 AQP9 dans le petit intestin de la souris est augmentée avec une diète faible en Si. Par ailleurs, nous avons démontré que la région des AQPs connue sous le nom de filtre aromatique/Arginine joue un rôle important dans la sélectivité à l’OSA, et que les résidus L84 chez AQP1 et N208 chez AQP10 jouent un rôle dans la sélectivité à l’eau et au Si respectivement. Ces travaux ont mené à la première description de transporteurs de Si chez l’animal, et à une meilleure compréhension de la physiologie de l’atome chez les mammifères.
The subject of this Ph.D. thesis is the transport of silicon (Si) by animal aqua-porins. Si is an abundant element in nature where it plays important roles, namely in plants. It also appears to play important physiological roles in animal physiolo-gy, by contributing to bone integrity, tegumentary health and collagen mainte-nance. Even though Si transporters have already been identified in diatoms and plants, none have been described in animals thus far. However, compartmentali-zation of Si throughout the mammalian body and nutritional assimilation suggest the existence of such transporters. Given the homology that they share with the Si transporters of plants, the mammalian aquaporins (AQPs) correspond to relevant candidates. In this context, the thesis’ objectives were, to determine whether AQPs are permeable to Si, and if so, to characterize the physiological role of Si transport by the AQP and to identify residues that allow these channels to act as such. Our work has allowed us to observe that human AQP3, AQP7, AQP9 and AQP10, also known as aquaglyceroporins (AQGPs), can all act as transporters for Si or more specifically for orthosilicic acid (OSA) that allow Si to be soluble in this form. The observed transport is michaelian in behavior, sensitive to phloretin (AQP7 and AQP9), but insensitive to changes in pH and extracellular osmolality. Also, tissular distribution of these carriers concords with that of Si, and expression of AQP3, AQP7 and AQP9 in the small intestine of mice is upregulated through a Si-poor diet. Otherwise, we have demonstrated that the region within the AQP that is knows as that aromatic/arginine filter (ar/R) plays an important role in OSA selec-tivity, and that residues L84 in AQP1 and N208 in AQP10 plays an important role in water permeability and Si permeability respectively. These results have led to the first description of Si transporters in animals, and a better understanding of the role played by this atom in mammalian physiology.
The subject of this Ph.D. thesis is the transport of silicon (Si) by animal aqua-porins. Si is an abundant element in nature where it plays important roles, namely in plants. It also appears to play important physiological roles in animal physiolo-gy, by contributing to bone integrity, tegumentary health and collagen mainte-nance. Even though Si transporters have already been identified in diatoms and plants, none have been described in animals thus far. However, compartmentali-zation of Si throughout the mammalian body and nutritional assimilation suggest the existence of such transporters. Given the homology that they share with the Si transporters of plants, the mammalian aquaporins (AQPs) correspond to relevant candidates. In this context, the thesis’ objectives were, to determine whether AQPs are permeable to Si, and if so, to characterize the physiological role of Si transport by the AQP and to identify residues that allow these channels to act as such. Our work has allowed us to observe that human AQP3, AQP7, AQP9 and AQP10, also known as aquaglyceroporins (AQGPs), can all act as transporters for Si or more specifically for orthosilicic acid (OSA) that allow Si to be soluble in this form. The observed transport is michaelian in behavior, sensitive to phloretin (AQP7 and AQP9), but insensitive to changes in pH and extracellular osmolality. Also, tissular distribution of these carriers concords with that of Si, and expression of AQP3, AQP7 and AQP9 in the small intestine of mice is upregulated through a Si-poor diet. Otherwise, we have demonstrated that the region within the AQP that is knows as that aromatic/arginine filter (ar/R) plays an important role in OSA selec-tivity, and that residues L84 in AQP1 and N208 in AQP10 plays an important role in water permeability and Si permeability respectively. These results have led to the first description of Si transporters in animals, and a better understanding of the role played by this atom in mammalian physiology.
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Bernier, Sarah C. "Caractérisation structurale et de la liaison membranaire de la RGS9-1 Anchor Protein (R9AP)." Doctoral thesis, Université Laval, 2019. http://hdl.handle.net/20.500.11794/66409.
Full textAbstract:
La vision est rendue possible grâce à la conversion du signal lumineux en un signal électrique par la cascade de phototransduction visuelle, qui implique plusieurs protéines incluant la phosphodiestérase (PDE). L’inactivation des différentes protéines de la phototransduction est primordiale pour que les photorécepteurs retrouvent leur sensibilité aux changements d’intensité lumineuse. Au cours de ce processus, un complexe de protéines incluant la R9AP (RGS9-1 Anchor Protein) inactive la PDE. La R9AP permet l’ancrage d’un complexe protéique à la membrane des disques des photorécepteurs via son segment C-terminal hydrophobe. Des mutations au niveau de la séquence de la R9AP mènent à une maladie appelée bradyopsie qui se caractérise notamment par une photophobie et une difficulté à suivre des objets en mouvement. Cette maladie peut être causée par la perte de la liaison membranaire de la R9AP en raison de mutations menant à une modification de la séquence en acides aminés de son segment C-terminal. La liaison membranaire de la R9AP joue donc un rôle majeur dans l’inactivation de la PDE. Par contre, aucune donnée de liaison membranaire et structurale n’est disponible pour cette protéine. Nous avons donc initié la caractérisation de la structure et de la liaison membranaire de différentes formes de la R9AP, soit la protéine avec et sans son segment C-terminal (∆TM, R9AP∆TM) ainsi que le segment C-terminal seul. Afin d’obtenir la R9AP pure, nous avons cloné, surexprimé et purifié la R9AP∆TM en fusion avec différentes étiquettes de solubilisation/purification. Les protéines recombinantes ont été produites à l’aide d’un système d’expression bactérien. En plus de permettre d’obtenir la R9AP pure pour caractériser sa structure et sa liaison membranaire, ces travaux ont significativement contribué à faire avancer les connaissances à propos de l’utilisation des étiquettes de purification/solubilisation en fusion avec une protéine d’intérêt. En effet, nous avons effectué une étude systématique pour étudier l’impact de la conception des protéines de fusion sur la solubilité, l’expression et la purification de protéine d’intérêt. Il s’agit de la première étude systématique évaluant l’effet du positionnement et de l’identité des différentes étiquettes de purification/solubilisation sur ces paramètres. Également, la production des protéines recombinantes a permis d’identifier un site alternatif d’initiation de la traduction dans la séquence de l’étiquette GST (glutathione S-transférase) qui cause l’expression d’une protéine de fusion tronquée. Cette observation aura certainement un fort impact compte tenu de l’utilisation répandue de l’étiquette GST. Concernant les résultats obtenus avec la R9AP, des données de centrifugation ont montré que la protéine complète est beaucoup moins soluble que la R9AP∆TM, ce qui suggère un rôle important du segment C-terminal hydrophobe dans la solubilité de cette protéine. Ainsi, seulement la structure et la liaison membranaire de la R9AP∆TM ont pu être investiguées dans le cadre de cette thèse. Des mesures par dichroïsme circulaire et spectroscopie infrarouge ont montré que la R9AP∆TM ainsi que le peptide C-terminal sont majoritairement constitués d’hélices alpha, ce qui appuie les prédictions structurales de cette protéine et un rôle d’ancrage membranaire de son segment C-terminal. Également, les mesures de liaison membranaire à l’aide des monocouches de Langmuir ont montré que ce segment C-terminal seul possède une forte affinité pour la majorité des phospholipides qui sont représentatifs de la composition lipidique des photorécepteurs. En revanche, la R9AP sans son segment transmembranaire a montré une faible affinité pour la majorité de ces phospholipides. Ainsi, nos travaux suggèrent fortement que la spécificité de liaison membranaire de la R9AP est en majorité dictée par son segment C-terminal, ce qui supporte son rôle important dans l’ancrage du complexe protéique aux membranes des disques des photorécepteurs et dans la bradyopsie.Visual phototransduction involves many proteins including phosphodiesterase, which leads to photoreceptor hyperpolarization and then signal transmission to the brain. Inactivation of the different proteins involved in this process is essential such that photoreceptors remain sensitive to changes in light intensity. In the course of this inactivation, a protein complex including R9AP (RGS9-1 Anchor Protein) inactivates phosphodiesterase (PDE). R9AP anchors a protein complex to disk membranes of the photoreceptor outer segments most likely by use of its C-terminal hydrophobic domain. Mutations in the coding sequence of R9AP lead to a visual disease called bradyopsia, which results in problems with adjusting to light variations and difficulties to follow moving objects. This disease can be caused by the loss of the membrane binding of R9AP as a result of mutations that modify the amino acid sequence of its C-terminal domain. Membrane binding of R9AP thus plays a major role in the inactivation process of PDE. However, membrane binding and structural data are still lacking for this particular protein. We have thus initiated the characterization of the structure and membrane binding of R9AP, including the fulllength protein, R9AP without its C-terminal domain (R9AP∆TM), as well as its Cterminal domain alone. In order to get pure R9AP, we have cloned, overexpressed and purified R9AP∆TM in fusion with solubility-enhancing/purification tags. Recombinant proteins were expressed using a bacterial expression system. This study allowed us to develop a procedure to obtain pure R9AP∆TM as well as to significantly improve our understanding of the use of fusion proteins. Indeed, we have performed a systematic analysis of the impact of the design of fusion proteins on their solubility, expression and purification. This study was the first one to evaluate the effect of both the identity and the position of the tags on the solubility, expression and purification of proteins of interest. Also, the production of R9AP∆TM recombinant proteins allowed us to identify an alternative translation initiation site in the coding sequence of the GST (glutathione S-transferase) tag, which results in the expression of a truncated fusion protein. This finding will certainly have an important impact when considering the extensive use of the GST tag. Results have shown that the R9AP∆TM protein is much more soluble than the fulllength protein, which suggests a major role of the C-terminal domain of R9AP for its solubility. Thus, the structure and the membrane binding of R9AP∆TM have been investigated within the scope of this thesis. Infrared spectroscopy as well as circular dichroism measurements have allowed determining that R9AP∆TM as well as the C-terminal domain adopt an alpha-helical structure, which is in good agreement with both the predicted structure of R9AP and the transmembrane role of its C-terminal domain. Also, Langmuir monolayer measurements revealed that the C-terminal segment has a high affinity for most of the phospholipids found in photoreceptor membranes. In contrast, R9AP∆TM has a low affinity for these phospholipids. Thus, our results demonstrate that the membrane binding of R9AP is highly dependent on its C-terminal segment, which is consistent with its important role in anchoring the protein complex to disk membranes of the photoreceptor outer segments and in bradyopsia.
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Noblecourt, Isabelle. "Les protéines plasmatiques de liaison des facteurs de croissance insulino-mimétiques." Paris 5, 1993. http://www.theses.fr/1993PA05P193.
Full text
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Prévèreau, Audrey-Anne. "Liaison membranaire et étude spectroscopique de la GCAP1." Master's thesis, Université Laval, 2014. http://hdl.handle.net/20.500.11794/25622.
Full textAbstract:
Les protéines activatrices de la guanylate cyclase (GCAPs) font partie de la famille des neuroprotéines sensibles au Ca²⁺ (NCS) et celle des protéines à EF-Hand. Il a été proposé que le mécanisme de Ca²⁺-myristoyl switch avait lieu chez toutes les protéines de la famille des NCS. Les travaux présentés dans ce mémoire permettent de déterminer si ce mécanisme est observé chez la GCAP1. En effet, des travaux de liaison membranaire à des monocouches de Langmuir effectués avec la GCAP1 ont permis d’observer ce mécanisme. De plus, l’utilisation d’un analogue du myristoyle, le 13-oxa-myristoyle, a aussi permis d’observer un Ca²⁺-myristoyl switch chez la GCAP1. Effectivement, des mesures en résonance magnétique nucléaire (RMN) ont démontré que la présence de cet analogue favorise l’extrusion du myristoyle. Finalement, différentes analyses par RMN ont été effectuées afin de déterminer si cette méthode pourrait permettre de déterminer la structure de la forme active de la GCAP1.
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Lacombe, Thierry. "Origine de l'ubiquitine et déubiquitination : rôle du précurseur Ubi3p, liaison du zinc aux UBP." Montpellier 2, 2003. http://www.theses.fr/2003MON20068.
Full text
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Herrou, Julien. "Etude du régulateur central de la virulence, BvgA/S, chez Bordetella pertussis, l'agent de la coqueluche." Lille 2, 2008. http://www.theses.fr/2008LIL2S038.
Full textAbstract:
La régulation de la virulence chez Bordetella pertussis, l'agent de la coqueluche, est sous la dépendance d'un système à deux composants complexe appelé BvgA/S. Ce système est composé d'une protéine senseur membranaire appelée BvgS et d'un régulateur transcriptionnel cytoplasmique, BvgA. En présence d'activateurs de la virulence (non encore définis), BvgS s'autophosphoryle, l'accepteur terminal du phosphate étant BvgA qui est alors actif et va réguler la transcription des gènes impliqués dans la virulence. Par contre, lorsque la bactérie est en présence d'inhibiteurs de la virulence, comme l'acide nicotinique ou le MgSO4, il y a absence d'autophosphorylation de BvgS, BvgA n'est plus activé et les gènes réprimés lors de la virulence sont actifs. Malgré toutes ces informations, nous ne connaissons pas encore les domaines de BvgS impliqués dans la perception des signaux environnementaux activateurs ou inhibiteurs de la virulence. Nous nous sommes donc intéressés à deux domaines de BvgS qui pourraient être impliqués dans ce mécanisme. Le premier domaine est le domaine périplasmique de BvgS homologue à des PBP (Periplasmic Binding Protein). Il pourrait intervenir dans la fixation de ligands activateurs ou inhibiteurs de la virulence. Le deuxième domaine, cytoplasmique, est appelé domaine PAS. Il est très répandu chez les eucaryotes et procaryotes et est impliqué dans l'adaptation du métabolisme de la cellule à des variations de conditions environnementales (comme des variations de potentiel redox, de luminosité ou à la en présence d'oxygène ou de fer. . . ). Ce domaine pourrait intervenir dans la fixation d'inhibiteur ou d'activateur de la virulence. Ce travail permettra donc d'avoir une meilleure compréhension du fonctionnement du complexe BvgAS dans la régulation de la virulence, d'identifier les domaines impliqués dans la perception des signaux positifs ou négatifs de la virulence, et de connaître l'identité de ces différents signaux
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Pattano, Nathalie. "Liaison des médicaments aux protéines plasmatiques : application à la toloxatone (Humoryl ®)." Paris 5, 1990. http://www.theses.fr/1990PA05P224.
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Giorgi, Laurent Jean-Paul. "Cartographie structurale et fonctionnelle de la liaison entre la peptidyl-ARNt hydrolase et son substrat." Palaiseau, Ecole polytechnique, 2010. http://www.theses.fr/2010EPXX0087.
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Pierre, Alice. "Les bone morphogenetic proteins dans l'ovaire : contribution à l'étude de leurs mécanismes d'action dans les cellules de la granulosa." Tours, 2004. http://www.theses.fr/2004TOUR4051.
Full textAbstract:
Ce travail de thèse s'inscrit dans le cadre de l'étude des mécanismes physiologiques de contrôle de la fonction ovarienne et en particulier, du nombre d'ovulations. La mise en évidence de deux gènes, bmpr-1b et bmp-15, dont des mutations sont responsables des phénotypes hyper-prolifiques des brebis Booroola et Inverdale respectivement, a permis de désigner la voie de signalisation des bone Morphogenetic proteins (BMPs) comme essentielle dans le contrôle de la fonction ovarienne. Le but de cette thèse était de décrire d'une part, la nature et la localisation ovarienne des molécules BMPs et de leur récepteurs et d'autre part, de mettre en évidence leurs rôles et leurs mécanismes d'action au sein de l'ovaire, en utilisant des cultures de cellules de granulosa de brebis et de rate comme modèles expérimentaux. Nous avons mis ainsi en évidence une action inhibitrice des BMPs sur la secrétion de progestérone et stimulatrice sur la prolifération de ces cellules. Les BMPs agiraient comme un "frein" de la différenciation terminale des cellules de granulosaFrom recent accumulating in vivo and in vitro evidence, it appears that members of the Bone Morphogenetic Proteins (BMP) family of cytokines and their receptors are strongly implicated in ovarian function, controlling folliculogenesis and ovulation rate. To evaluate the role of the BMP pathway on folliculogenesis, the action of ligands was studied on primary cultures of rate and ovine GCs in vitro. We observed that BMPs strongly inhibited progesterone secretion and stimulated proliferation by GCs. Then we have investigated the mechanism of action by which BMP-4 exerted an inhibitory action on basal as well as FSH-induced progesterone secretion. We purpose that BMP-4 modulates progesterone by inhibiting the steroidogenic factor-1 (SF-1) transcriptional activity on steroidogenic gene promoters. In FSH-induced condition, this mechanism is reinforced by an inhibition of adenylate cyclase activity. BMP factors regulate GCs differentiation, particularly in delaying the luteinization process
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Labat, Laurence. "Relations structure-activité des dérivés arylpropioniques antiinflammatoires non stéroi͏̈diens appliquées à leur liaison aux protéines plasmatiques et à leur liaison aux tissus." Bordeaux 2, 1997. http://www.theses.fr/1997BOR2B005.
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Galvez, Thierry. "Oligomérisation et activation des récepteurs couplés aux protéines G : ce que révèle l'étude du récepteur GABAb." Montpellier 2, 2001. http://www.theses.fr/2001MON20068.
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Yerima, Hélène Alibada. "Purification et caractérisation des protéines membranaires entérocytaires de liaison de la vitamine B12." Nancy 1, 1995. http://www.theses.fr/1995NAN10436.
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Tapparo, Aurélie. "Purification de protéines de liaison du myo-inositol hexakisphosphate chez l'amibe Dictyostelium discoideum." Université Joseph Fourier (Grenoble), 1998. http://www.theses.fr/1998GRE10202.
Full textAbstract:
Dans la plupart des cellules eucaryotes, l'inositol hexakisphosphate (insp#6, acide phytique) est le phosphoinositol le plus abondant. Chez l'amibe dictyostelium discoideum, la concentration d'insp#6 est de 0,7 mm et se maintient lors du cycle de differenciation de l'amibe. La fonction intracellulaire de cet inositol polyphosphate n'est pas clairement elucidee, toutefois un role regulateur de l'insp#6 dans le processus d'endocytose a recepteurs a ete propose chez les mammiferes. Un test de liaison de l'insp#6 radioactif a ete tout d'abord mis au point afin de pouvoir suivre les proteines capables de lier ce phosphoinositide, lors de purifications a partir d'extraits solubles de d. Discoideum. En combinant cette methode avec un test immunologique permettant de detecter les chaines lourdes des adaptines (proteines impliquees dans l'endocytose a recepteurs), le protocole de purification a permis de mettre en evidence cette proteine chez l'amibe. L'adaptine chez d. Discoideum ne semble pas fixer l'insp#6 contrairement a la situation dans les cellules de mammiferes. Une purification des proteines cytosoliques de liaison de l'insp#6 a permis l'identification de trois proteines non decrites jusqu'a present chez l'amibe : une nouvelle isoforme de cyclophiline et les proteines ribosomales s4 et s10. Le clonage de leur gene respectif ainsi que l'etude de leur expression au cours du developpement de l'amibe ont ete entrepris. Les trois genes sont specifiques du stade vegetatif : leur niveau de transcription s'effondre apres le commencement de la differenciation. La cyclophiline b purifiee est capable de lier la ciclosporine a et possede une extension n-terminale qui est clivee apres traduction de la proteine. Cette sequence signal permet son adressage vers le reticulum endoplasmique : la cyclophiline peut se trouver dans ce compartiment ou dans une vesicule de la voie de secretion, en effet aucun signal de retention dans le reticulum n'a ete trouve dans sa sequence. Une autre isoforme de cyclophiline localisee dans la mitochondrie a ete obtenue par chromatographie par affinite pour la ciclosporine a.
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Fargin, Annick. "Le site de liaison des antioestrogènes : solubilisation, caractérisation et recherche d'une méthode de purification." Toulouse 3, 1987. http://www.theses.fr/1987TOU30311.
Full textAbstract:
Une synthese bibliographique de la pharmacologie des antioestrogenes utilises pour le traitement des cancers du sein suggere le role important de l'interaction de ces molecules avec leur site de liaison specifique (abs: antiestrogen binding site), different du recepteur des strogenes. Les travaux experimentaux rapportes par l'auteur lui ont permis de s'avancer dans la caracterisation de ce site de liaison. Une methode de solubilisation efficace et non denaturante a ete obtenue pour les abs microsomaux d'uterus de rate. Elle fait appel au detergent 3(3-cholamidopropyl) dimethylammonio-1-propane sulfonate (chaps) inclus dans un tampon de haute force ionique. Les sites sont extraits en totalite et conservent leurs caracteristiques de liaison vis a vis des divers antistrogenes etudies. Leur specificite de liaison a egalement ete etudiee pour une famille de molecules nouvellement synthetisees et derivees du motif structural phenoxyethanamine. Deux de ces molecules se lient avec affinite et representent des outils biochimiques potentiels. Il s'agit d'un azoture photoactivable dont les conditions de couplage covalent aux abs ont ete mises au point, et d'un derive biotinyle qui nous permettra d'envisager la purification des sites par chromatographie d'affinite dans un systeme avidine-biotine. La taille de la proteine abs a egalement ete etudiee. Dans les conditions les plus dissociantes, les complexes detergent-proteine se caracterisent par un coefficient de sedimentation s#2#0#,#w de 5,2 s. Cette valeur est en bon accord avec celle de la masse moleculaire des abs qui a ete determinee par l'auteur in situ dans les membranes en utilisant la technique d'inactivation par les radiations
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Poirier, Hélène. "Localisation et régulation nutritionnelle de trois protéines impliquées dans le transport des lipides au niveau intestinal : le FAT, la I-FABP et la L-FABP." Dijon, 1996. http://www.theses.fr/1996DIJOS065.
Full textAbstract:
Les rôles énergétiques, structuraux et fonctionnels qu'exercent les acides gras a longue chaine (AGLC) au niveau de l'organisme dépendent de leur biodisponibilité intestinale. Du fait de leur caractère lipophile, une diffusion passive à travers la membrane plasmique était jusqu'à présent la seule hypothèse envisagée. Cependant, ce concept est à présent discute puisque plusieurs protéines membranaires (FAT, FABPPM) présentant une forte affinité pour les AGLC ont été identifiées au niveau de l'intestin. Une fois dans le cytoplasme des enterocytes, les AGLC sont pris en charge par deux FABPS (I-FABP et la L-FABP) responsables de leur transport dans la cellule. Afin de mieux comprendre les phénomènes mis en jeu lors de l'absorption des lipides nous avons étudié simultanément la localisation et la régulation du fat, de la I-FABP et de la L-FABP au niveau intestinal. La distribution de ces trois protéines selon l'axe cephalo-caudal de l'intestin n'est pas homogène. Le FAT et la L-FABP ont un profil d'expression identique caractérise par un taux d'ARNm maximal dans le jejunum et qui décroit dans l'iléon ce qui n'est pas le cas de la I-FABP. Chez la souris, l'expression du gène de la L-FABP est silencieux dans l'iléon terminal. Ces trois protéines ont une expression maximale au sommet des villosités et inexistante dans les cryptes. Le FAT est une protéine membranaire retrouvée au niveau des microvillosités de l'enterocyte. La consommation de régimes hyperlipidiques déclenchent aussi bien chez le rat que chez la souris une augmentation du taux d'ARNM du FAT et de la L-FABP dans la partie proximale de l'intestin. En revanche, aucune modification n'apparait pour la I-FABP. Ceci suggère que le fat et la L-FABP sont impliqués dans l'absorption des AGLC contrairement à la I-FABP. Par des approches in vivo et in vitro, il a été démontré que la régulation nutritionnelle du gène de la L-FABP est déclenchée par les AGLC satures et insaturés. Cette induction trouvée au niveau intestinal et hépatique, est directe, nécessité une néo-synthese protéique et est d'origine transcriptionnelle. Des études préliminaires suggèrent que le mécanisme moléculaire a l'origine de cette régulation fait intervenir des récepteurs nucléaires de la famille des PPARs formant un hétérodimére avec la transprotéine RXR
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Papuga, Jessica. "Role of the Arabidopsis LIM proteins in the regulation of the actin cytoskeleton organisation and dynamics." Strasbourg, 2011. http://www.theses.fr/2011STRA6022.
Full textAbstract:
L’organisation et la dynamique du cytosquelette d’actine sont régulées par de nombreuses protéines de fixation à l’actine (« actin-binding proteins »). Récemment, les protéines à deux domaines LIM (LIMs) ont été caractérisées comme de nouvelles protéines impliquées dans le pontage (« crosslinking ») des filaments d’actine chez les animaux et les végétaux. Chez ces derniers, les protéines LIMs peuvent être classées en deux sous-familles dont les profils d’expression diffèrent. Les membres de la sous-famille WLIM sont largement exprimés dans les tissus végétatifs alors que les membres de la sous-famille PLIM sont abondamment et quasi exclusivement exprimés dans le pollen. Une question centrale était de savoir pourquoi les plantes possèdent plusieurs protéines LIMs et si les différents membres d’une même famille possèdent ou non les mêmes fonctions. Afin d’aborder cette question, nous avons caractérisé et comparé les activités régulatrices du cytosquelette d’actine des six membres de la famille des protéines LIMs d’Arabidopsis. L’analyse par microscopie confocale de plantes d’Arabidopsis exprimant chacune des protéines LIMs fusionnée à la « Green Fluorescent Protein » (GFP-LIM) ainsi que des analyses biochimiques in vitro démontrent que les protéines LIMs d’Arabidopsis sont toutes de véritables « actin-binding proteins » capables d’interagir directement avec le cytosquelette d’actine. De plus, les six protéines LIMs d’Arabidopsis stabilisent les filaments d’actine et induisent la formation d’épais câbles d’actine in vitro ainsi que dans les plantes exprimant les GFP-LIMs. Par ailleurs, des investigations in vitro ont suggéré que les membres des sous-familles WLIM et PLIM sont régulés de façon différente. Ainsi, seules les protéines PLIMs sont inactivées pas des valeurs de pH et/ou de [Ca2+] élevées. Ces résultats ont pu être confirmés par des expériences dans des cellules d’Arabidopsis dont le pH et la [Ca2+] cytoplasmiques ont été artificiellement modifiés. Enfin, le domaine C-terminal a été identifié comme le domaine régulateur conférant aux protéines PLIMs une sensibilité au pH et au Ca2+Actin cytoskeleton organisation and dynamics are regulated by different types of actin-binding proteins. Recently, novel actin filament crosslinkers involved in the formation of parallel bundles have been characterized in both plants and animals: the two LIM domain-containing (LIM) proteins. In plants, these proteins can be divided into two sub-families whose members differ in their expression pattern. The WLIM sub-family members are widely expressed in vegetative tissues (WLIMs) whereas the PLIM subfamily members (PLIMs) are highly and almost exclusively expressed in pollen grains. An important question that remained to be answered is: why do plants have several proteins of this family and are the different members functionally distinct, or do they share one or several functions? To address these issues, we characterised and compared the actin regulatory activities of all six LIM proteins from Arabidopsis. Confocal analyses of transgenic Arabidopsis plants expressing individual GFP- fused LIM proteins and in vitro biochemical assays demonstrate that all the Arabidopsis LIM proteins are “true” actin-binding proteins able to directly interact with the actin cytoskeleton. In addition, all six Arabidopsis LIM proteins retain the ability to stabilize actin filaments and to trigger the formation of thick actin bundles in vitro as well as in transgenic LIM-expressing plants. Interestingly, in vitro investigations suggest that the members of WLIM and PLIM subfamilies are differentially regulated. Indeed, only PLIM respond to changes in pH and [Ca2+]. Whereas the modification of these parameters has no significant effects on WLIM activities, an increase of pH or [Ca2+] markedly inhibits PLIM activities. These data are strongly supported by live cell experiments in which we artificially modulated the cytoplasmic pH and [Ca2+] of cells derived from the transgenic LIM-overexpressing plants. The C-terminal domain of PLIMs has been identified as necessary for their regulation by pH and Ca2+
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Jalaguier, Stephan. "Caractérisation du domaine de liaison de l'hormone du récepteur humain des minéralocortici͏̈des." Montpellier 2, 1995. http://www.theses.fr/1995MON20269.
Full textAbstract:
Le recepteur des mineralocorticoides (mr) appartient a la famille des recepteurs des steroides, elle-meme membre de la superfamille des recepteurs nucleaires. A l'image de tous les membres de la superfamille, il possede une structure modulaire composee de cinq domaines. Le mr, sous sa forme ne liant pas l'adn, est associe a diverses proteines: la hsp90, la hsp70, la hsp56 et probablement la p23. L'objectif de notre etude est la caracterisation des fonctions du domaine e (ou hbd) du mr, domaine presume de liaison de l'hormone. L'incubation dans du lysat de reticulocytes d'une proteine purifiee, la mbp-hbd, prealablement exprimee dans escherichia coli nous a permis de demontrer que le domaine e stricto sensu (aa 729-984) est le domaine minimal de liaison de l'hormone. Cette etude nous a egalement permis de demontrer que le domaine e est suffisant pour assurer la liaison de la hsp90. Nous avons mis en evidence la propriete du domaine e a lier l'actine. L'interaction mbp-hbd/actine est directe et modulable par les ligands mineralocorticoides. Nous avons egalement participe a la mise en evidence des differents changements structuraux du domaine e induits par les agonistes d'une part et les antagonistes d'autre part et determine qu'ils s'operaient dans la structure heterooligomerique. Nous caracterisons actuellement un anticorps monoclonal dirige contre le hbd. Enfin, nous determinons les sequences primaires du hbd responsables de la specificite mineralocorticoide du recepteur
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Fraiture, Malou Cécile. "Molecular mechanisms of TEP1-dependent killing of Plasmodium in the mosquito Anopheles gambiae." Strasbourg, 2009. https://publication-theses.unistra.fr/restreint/theses_doctorat/2009/FRAITURE_Malou_Cecile_2009.pdf.
Full textAbstract:
Avec plus de deux milliards de personnes exposées et un million de morts infantiles par an, le paludisme est une maladie dévastatrice. L’agent infectieux Plasmodium est transmis par la piqûre d’un moustique. Lors du développement dans le vecteur principal Anopheles gambiae, le parasite, ingéré avec le repas sanguin, traverse l’épithélium intestinal pour rejoindre le côté basal. À ce stade, il subit une perte drastique en nombre causée par l’immunité du moustique. Les bases moléculaires de cette défense restent peu comprises. La protéine à thioester TEP1, similaire au complément, est un facteur immunitaire important, induisant la mort d’une vaste majorité de parasites. Elle est sécrétée dans l’hemolymphe (sang), où elle se lie aux parasites, provoquant ainsi leur lyse. Dans ce travail, nous avons intégré de nouveaux acteurs dans le mécanisme d’élimination TEP1-dépendant des parasites. Deux protéines à LRR (répétitions riches en leucine) ont été caractérisées en tant que facteurs de contrôle du complément, stabilisant TEP1 en circulation et empêchant sa fixation sur les tissus du soi avant qu’elle ait pu se lier aux parasites envahissants. De plus, nous avons identifié la protéine nucléaire conservée IMAF, qui module la capacité de liaison de TEP1 et joue ainsi un rôle capital dans le contrôle de la charge parasitaire. L’invalidation d’IMAF par ARNi sera utilisée à présent comme outil pour disséquer la régulation de l’efficacité de liaison de TEP1. Pour la première fois, nous avons pu montrer que des protéines immunes essentielles agissent dans une voie unique pour assurer conjointement l’élimination des parasites en interagissant de façon directe ou indirecte avec TEP1With more than two billion people at risk and one million child deaths per year, malaria is a devastating infectious disease. The causative agent Plasmodium is transmitted through a mosquito bite. During the development in its major vector Anopheles gambiae, the parasite, ingested with the blood meal, crosses the midgut epithelium to reach the basal side. Here, it undergoes dramatic losses caused by mosquito immunity. The molecular basis of this defence remains poorly understood. The complement-like thioester-containing protein TEP1 is an important immune factor, which induces killing of a vast majority of rodent P. Berghei parasites. It is secreted into the haemolymph (blood), where it binds to parasites, promoting their lysis. In this work, we integrated novel players within the TEP1-dependent killing mechanism. Two antiparasitic LRR (leucine-rich repeat) proteins were characterised as complement-control factors stabilising TEP1 in circulation and preventing its uncontrolled deposition on self-tissues before it could bind to invading parasites. Moreover, we identified a novel highly conserved nuclear protein, IMAF (intracellular mosquito anti-Plasmodium factor), which modulates the TEP1-binding capacity and therefore plays an essential role in controlling parasite loads. Silencing of IMAF by RNAi will at present be used as a tool to dissect the regulation of TEP1-binding efficiency. For the first time, we could show that key immune proteins act in a single pathway to jointly promote parasite killing by either directly or indirectly interacting with TEP1
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Welsch, Carole Alice. "Identification des voies métaboliques et cibles moléculaires impliquées dans le mécanisme d'action de l'immunosuppresseur FTY720 dans le système modèle de la levure Saccharomyces cerevisiae." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2002. http://www.theses.fr/2002STR13086.
Full textAbstract:
FTY720 est une nouvelle substance immunossuppressive dérivée par synthèse du composé naturel, la myriocine. Nous avons cherché à comprendre son mécanisme d'action moléculaire à partir du système modèle pour l'étude des cellules eucaryotes que représente la Levure de Boulanger, Saccharomyces cerevisiae. Ainsi, nous avons pû isoler des cellules rendues résistantes au composé par surexpression de gènes de librairies d'ADN génomique de Levure cloné dans des vecteurs à haut nombre de copies. Parallèlement, des mutants génomiques résistants à FTY720 ont été isolés et caractérisés. Les données obtenues indiquent que la dégradation des protéines impliquant le système de l'ubiquitine ainsi que des transporteurs d'acides aminés seraient impliqués dans le mécanisme d'action de l'immunosuppresseur. Plusieurs modèles sont proposés pour replacer les gènes candidats. En outres, une analyse de profile d'expression des gènes ainsi qu'une analyse du protéome sont venus compléter ces études génétiquesFTY720 is a novel immunosuppressor synthetically derived from the natural compound, myriocin. We identified molecular targets and pathways involved in FTY720's mechanism of action using the baker's yeast, Saccharomyces cerevisiae as a model system for eukaryotic cells. We isolated cells that were resistant to the drug by simple gene overexpression from yeast genomic DNA libraries cloned into high copy vector. In addition, genomic mutants resistant to FTY720 were isolated and characterised. Data indicated that ubiquitin-mediated protein degradation as well as amino acid transporters were involved in the mechanism of action of the compound. Several models are proposed to replace our candidate genes. In parallel, gene expression profiles and a proteome-wide analysis were performed to complete the previous genetic studies
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Mavoungou, Donatien. "Hypertension et protéines de transport de l'aldostérone et du sulfate de DHEA." Lyon 1, 1986. http://www.theses.fr/1986LYO10033.
Full textAbstract:
Chez l'hypertendu noir africain, l'activite de la renine plasmatique est basse ou completement supprimee et les taux de sulfate de dehydroepiandrosterone sont eleves. Les diuretiques se sont reveles tres efficaces dans le traitement de base. On trouve une prevalence plus elevee de l'hypertension chez les pygmees. On trouve une capacite de liaison de l'aldosterone a abg diminuee chez des sujets atteints de cancer
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Bédard, Mikael. "Caractérisation du domaine de liaison à l'ARN de p54nrb." Thesis, Université Laval, 2011. http://www.theses.ulaval.ca/2011/28423/28423.pdf.
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Ubelmann, Florent. "Fonctionnalité et dynamique des microvillosités intestinales : rôles clés des protéines de liaison à l'actine." Phd thesis, Université Pierre et Marie Curie - Paris VI, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00836921.
Full textAbstract:
Les microvillosités apicales des cellules intestinales, sont de fines expansions membranaires structurées par un réseau de filaments d'actine organisé par plusieurs protéines de liaison à l'actine. L'objectif de ce travail de thèse consiste à mieux comprendre comment ces protéines de liaison à l'actine régulent deux fonctions critiques de ces organelles : leur fonctionnalité et leur plasticité. Ttrois protéines de liaison à l'actine organisent le réseau de microfilaments soutenant les microvillosités : villine, espine et plastine 1. Nous avons montré que ces protéines ne sont pas essentielles à la formation des microvillosités. En revanche, elles assurent l'agencement d'une fine architecture d'actine qui est requise pour la rétention à la membrane des microvillosités des protéines nécessaires pour la physiologie intestinale. En plus de sa fonction structurale, la villine fragmente les filaments d'actine, suggérant un rôle central dans la dynamique du cytosquelette de la microvillosité. Celles-ci sont en effet sujettes à des réorganisations morphologiques majeures lors de stress intestinaux. Nous avons apporté les preuves définitives montrant que la villine joue un rôle critique au cours de la réparation tissulaire en participant au processus de migration cellulaire par l'initiation du désassemblage du pôle apical. Le pool d'actine microvillositaire est alors remobilisé pour assurer la formation de structures migratoires efficaces. Ces travaux de thèse documentent ainsi deux aspects importants de la biologie de la cellule épithéliale intestinale: l'établissement de la fonctionnalité du pôle apical et son remodelage dynamique permettant une réponse rapide à un stress.
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Bussières, Sylvain. "Étude de l'activité enzymatique, de la structure secondaire et de la liaison membranaire de la lécithine : rétinol acyltransférase." Thesis, Université Laval, 2011. http://www.theses.ulaval.ca/2011/28574/28574.pdf.
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Guitard, Estelle. "Etude du rôle de deux protéines bifonctionnelles apparentées aux protéines de liaison aux ARNs, Sam68 et G3BP, dans la prolifération cellulaire." Paris 11, 2000. http://www.theses.fr/2000PA11T014.
Full textAbstract:
Les protéines ribonucléiques hétérogènes nucléaires (ou hnRNPs : beterogenous nuclear ribonucleonrotein) bifonctionnelles sont des protéines capables de lier à la fois des partenaires nucléiques et des partenaires protéiques impliqués dans différentes voies de signalisation cellulaire. Les protéines humaines de liaison aux ARNs Sam68 (. Src- ssociated ifl. Mitosis 68) et G3BP (RasGAP-SHJ Binding frotein) appartiennent à cette famille de protéines. Sam68 est le principal substrat et partenaire du produit de l'oncogène src au cours de la mitose. G3BP est le premier partenaire du domaine SH3 de la protéine RasGAP, effecteur de l'oncoprotéine Ras. L'interaction RasGAP/G3BP est dépendante de l'état d'activation de Ras sous forme liée au GTP, ce qui suppose que la protéine G3BP ait une fonction dans la transmission des signaux de prolifération cellulaire en aval de Ras. Etant donné le rôle supposé des protéines Sam68 et G3BP dans la transmission des signaux de prolifération cellulaire en aval des molécules Src et RasGAP, nous avons décidé de préciser par quels mécanismes moléculaires elles pouvaient jouer un rôle sur la régulation de la prolifération cellulaire. Nous avons identifié un variant d'épissage de la protéine Sam68, Sam68ΔKH, délété de son domaine KR de liaison aux ARNs. En inhibant la transition G1/S du cycle cellulaire et l'expression de la cycline Dl , Sam68ôKH régule négativement la prolifération cellulaire et se comporte comme un dominant négatif de Sam68. Ces résultats mettent pour la première fois en évidence un rôle de la protéine Sam68 dans la régulation du cycle cellulaire, pendant la phase G1. Nous avons ensuite démontré que Sam68 interagit avec la protéine RasGAP de façon dépendante des domaines SH3 et/ou SH2 de RasGAP, et que cette interaction a lieu exclusivement pendant la mitose. Ces résultats indiquent que Sam68 pourrait également avoir des fonctions mitotiques, et que celles-ci participeraient aux cascades non seulement en aval de Src, mais aussi en aval de la protéine RasGAP. Nous avons aussi étudié les protéines de la famille G3BP. Nous avons tout d'abord cloné l'ADNe codant une protéine humaine homologue à G3BP, G3BPh, puis montré que cette protéine, codée par un autre gène, possède des éléments de séquence et des propriétés qui divergent de G3BP, suggérant que les deux isoformes ont, au moins en partie, des fonctions différentes. Par les techniques de western blot et northem blot, nous avons montré que la protéine G3BP est surexprimée dans un grand nombre de tumeurs et de lignées cellulaires tumorales humaines. Nous avons observé que cette surexpression est indépendante des caractéristiques des différentes tumeurs ainsi que de l'évolution des patients. Nous avons aussi mis en évidence que G3BP stimule la transition G1/S du cycle cellulaire de façon dépendante de son domaine de liaison aux ARNs. Ainsi, nous proposons que les protéines des familles Sam68 et G3BP, qui constituent un lien entre les molécules de la signalisation cellulaire et le métabolisme des ARNs, exercent un contrôle du cycle cellulaire au travers de leurs interactions avec leurs ARNs cibles. Nous proposons aussi que la protéine G3BP soit un nouveau marqueur de détection des cancers humains.
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Flayhan, Ali. "Reconnaissance phage-bactérie dans le système phage T5 - E. Coli : Caractérisation biochimique et structurale du complexe FhuA-pb5 et de la protéine caudale pb9." Paris 7, 2012. http://www.theses.fr/2012PA077164.
Full textAbstract:
Au cours de cette thèse, j'ai abordé la première étape de l'infection dans le système E. Coli -phage T5. Mes travaux se sont focalisés sur la caractérisation du complexe formé entre pb5, la protéine de liaison au récepteur (RBP) de T5 et son récepteur FhuA à la surface d'E. Coli. J'ai montré que le complexe est très stable et identifié le domaine «bouchon» de FhuA comme un nouveau site d'interaction de pb5. La formation du complexe n'induit pas de réarrangements des structures de pb5 et/ou de FhuA. Seuls des changements de conformation subtils lors de la formation du complexe, au niveau de structures secondaires, ont été décelés et attribués à pb5. Ces derniers seraient à l'origine de la transmission du signal au reste du phage. Des cristaux 3D (8 A) et 2D (3 A) ont été obtenus. Des études de diffusion de neutrons et de rayons X aux petits angles ont permis d'obtenir une enveloppe de pb5 seule ou dans le complexe, en accord avec la structure à basse résolution de pb5 et du complexe, obtenues par microscopie électronique. Ces modèles montrent que l'interface de liaison couvre toute la section extracellulaire de FhuA. Pb5 se lie à FhuA par l'une de ses extrémités de telle manière que son grand axe et l'axe du tonneau de FhuA soient alignés. Contrairement aux différentes RBP décrites, pb5 semble composée d'un domaine unique et est présente en une seule copie au bout distal de la fibre droite de T5. Par ailleurs, je me suis intéressé à la surexpression, purification, caractérisation et structure de pb9, une protéine localisée dans la partie conique de la queue de T5. Une première carte expérimentale est obtenue et la résolution de sa structure atomique est en coursThis thesis approached the first step of infection in the System E. Coli - phage T5. My research has focused on the characterization of the complex formed between pb5, the receptor binding protein (RBP) of T5 and its receptor FhuA, on the surface of E. Coli. I showed that the complex FhuA-pb5 is very stable and determined the "plug" domain of FhuA as a novel interaction site of pb5. Complex formation does not induce major rearrangements of pb5 and/or FhuA. Only subtle conformational changes during complex formation, at the secondary structures level, were identified and assigned to pb5. These changes would be at the origin of the signal transmission to the phage. 3D crystals (8 À) and 2D crystals (3 À) were obtained. Small-angle neutron and X-ray scattering studies yielded a model of pb5 isolated and within the complex. These models are in agreement with the low resolution structure of pb5 and the complex, obtained by electron microscopy, and show that the binding interface covers the entire extracellular section of FhuA. Pb5 binds to FhuA by one of its ends in a way that its major axis and the axis of the FhuA barrel are aligned. Unlike the various RBPs described so far, pb5 seems composed of a single domain and is present in one copy at the distal end of the T5's straight fiber. Furthermore, I worked on the overexpression, purification, characterization and the structure of pb9, a protein that was located in the conical part of the tail of T5. The first experimental electron density map is obtained and the resolution of its atomic structure is underway
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Sarramegna, Valérie. "Solubilisation et purification du récepteur u-opoi͏̈de humain surexprimé dans la levure méthylotrophe pichia pastoris." Toulouse 3, 2002. http://www.theses.fr/2002TOU30034.
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Thomas, Christian. "Détermination d'un rythme circadien de la rétinol-binding protein chez l'homme." Aix-Marseille 2, 1989. http://www.theses.fr/1989AIX20364.
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Dantzer, Robert. "La RBP sanguine : rôles physiologiques, dosages, intérêts cliniques." Paris 5, 1997. http://www.theses.fr/1997PA05P219.
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Mertani, Hichem Claude. "Le récepteur de l'hormone de croissance : expression et mécanisme d'internalisation." Lyon 1, 1996. http://www.theses.fr/1996LYO1T069.
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Roussin-Pascaud, Anne. "Mise en évidence et régulation du couplage entre le récepteur des opioides de type "Op" du cerveau de grenouille (Rana ridibunda) et une protéine G de transduction." Toulouse 3, 1989. http://www.theses.fr/1989TOU30172.
Full textAbstract:
Dans des membranes de cerveau de grenouille, la liaison d'un agoniste aux sites opioides de type op, en presence d'ions sodium, conduit a la formation d'un complexe agoniste-site op qui, apres solubilisation par la digitonine, sedimente plus rapidement en gradient de densite (forme lourde) que le site qui a lie un antagoniste ou qui a ete solubilise en absence de ligand (forme legere. Sous l'action des nucleotides a guanine, la forme lourde du site op disparait au profit de sa forme legere. Ces resultats suggerent que le site op est present dans des membranes de cerveau de grenouille, a l'etat de repos, sous une forme non couplee avec une proteine g de transduction. Seule la liaison d'un agoniste au site recepteur est capable d'induire ce couplage pour conduire a la reponse cellulaire. Nous avons tente d'apporter une preuve directe de l'interaction entre le recepteur op et une proteine g, en utilisant la technique d'adp-ribosylation par la toxine de bordetella pertussis. L'hypothese de depart etait qu'apres adp-ribosylation quantitative des proteines g membranaires, l'agoniste s'avererait incapable d'induire le couplage entre le recepteur op et une proteine g. Si nous avons mis en evidence que les membranes de cerveau de grenouille possedent la proteine go en quantite tres superieure a gi, nous nous sommes toutesfois heurtes au faible taux d'adp-ribosylation des proteines g membranaires (a la difference des proteines g solubilisees par la digitonine)
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Bonnet, Sylvie. "Contribution à l'étude de protéines impliquées dans le contrôle de la stabilité des ARNm chez le xénope." Rennes 1, 2002. http://www.theses.fr/2002REN10063.
Full textAbstract:
La protéine EDEN-BP se lie au motif EDEN riche en U/purine et est impliquée dans la désadénylation d'ARNm. EDEN-BP présente 3 motifs de liaison à l'ARN (RRM, RNA Recognition Motif). Les 2 premiers RRM sont situés en N-terminal et une région "linker" les séparent du troisième RRM situé en C-terminal. La cartographie des domaines d'EDEN-BP nécessaires à la reconnaissance spécifique d'EDEN a été réalisée à l'aide de protéines recombinantes en utilisant la technique du transfert de marquage. Les RRM1 et 2, et une information de séquence dans le "linker" sont nécessaires à la fixation d'EDEN-BP à l'EDEN. Des expériences de gel-retard et de double hybride indiquent que la forme active du complexe EDEN/EDEN-BP contient un dimère d'EDEN-BP. Par ailleurs, la chromatographie d'affinité avec ligand ARN a été mise au point pour purifier des facteurs impliqués dans la déstabilisation des ARN présentant un motif AUUUA chez le xénope. 6 facteurs spécifiques de ce motif ont été observés.
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Rappailles, Aurélien. "Détermination et caractérisation des cibles de DSP1 chez Drosophila melanogaster." Orléans, 2005. http://www.theses.fr/2005ORLE2056.
Full textAbstract:
Les protéines des groupes Polycomb (PcG) et Trithorax (TrxG) établissent une mémoire cellulaire en maintenant l'état transcriptionnel de nombreux gènes par un remodelage de la chromatine. Chez la drosophile, ces protéines agissent au sein de complexes multimèriques qui se lient à des unités fonctionnelles appelées Modules de Mémoire Cellulaire (CMM). Quels sont les gènes cibles des protéines PcG/TrxG ? Quels sont les moyens de recruter spécifiquement ces protéines ? Sont deux questions auxquelles nous avons voulu répondre. Notre équipe travaille sur une protéine à boîtes HMG de drosophile : DSP1. L'objectif du travail que nous présentons ici est de rechercher des gènes cibles de DSP1 et son rôle dans la régulation de l'expression de ces gènes. Plusieurs cibles ont été identifiées par la technique d'immunoprécipitation de la chromatine pontée (ChIP). Nous avons étudié le rôle de DSP1 sur le CMM Fab-7 qui régule le gène Ultrabithorax. Nous montrons par des expériences de transgenèse que la fixation de DSP1 est indispensable à l'activité du CMM. Par ailleurs, nous montrons pour la première fois que DSP1 est un recruteur précoce des protéines PcG. Nous montrons également que DSP1 intervient en tant que protéine du groupe TrxG dans l'activation du gène Sex combs reduced. Dans ce cas, DSP1 est essentielle au cours de la vie larvaire. Enfin, nous montrons que DSP1 régule l'expression du gène knirps et participe à l'établissement de son profil d'expression plutôt qu'à son maintien.
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Silvente-Poirot, Sandrine. "Le récepteur pancréatique de la cholécystokinine : étude et identification des sites de liaison des agonistes et des antagonistes." Toulouse 3, 1993. http://www.theses.fr/1993TOU30070.
Full textAbstract:
Des radioligands cck, agonistes et antagonistes, ont ete synthetises pour etudier et identifier les sites de liaison du recepteur cck a pancreatique. Le marquage de photoaffinite avec l'agoniste #1#2#5i-asd-(thr28-ahx31)-cck-25-33 confirme que le recepteur correspond a un monomere de 85-100 kda et que sa partie saccharidique est heterogene et represente 40 a 50% de sa masse. L'antagoniste #1#2#5i-bh-jmv 179 revele une population heterogene de sites competitifs, de pharmacologie cck a, dont le nombre total est quatre fois celui de l'agoniste #1#2#5i-bh-(thr28-ahx31)-cck-25-33. La totalite de ces sites lie les agonistes, avec une forte ou une faible affinite, ces deux etats d'affinite etant regules par les proteines de liaison des nucleotides a guanine. L'identification des sites antagonistes par marquage de photoaffinite avec le #1#2#5i-asa-jmv 179 revele le recepteur de 85-100 kda et une glycoproteine distincte de 47-50 kda non detectee directement par l'agoniste, de pharmacologie cck a. La cartographie peptidique montre que cette derniere correspond au recepteur cck a tronque de la partie n-terminale extra-cytoplasmique. La presence du recepteur tronque pourrait expliquer le nombre important et l'heterogeneite des sites antagonistes. L'analyse biochimique du recepteur cck a marque suggere un domaine de liaison commun pour les agonistes et les antagonistes, qui serait inclus sur la sequence primaire du recepteur, entre les residus 86 et 202. Ces travaux, et d'autres observations, indiquent que le site de liaison des agonistes et des antagonistes est extrinseque, celui des agonistes serait plus complexe et impliquerait la partie n-terminale extra-cellulaire
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Vidal, Vincent. "Caractéristiques moléculaires et fonctionnelles d'une protéine mitochondriale de choc thermique de type hsp70 chez Phaseolus vulgaris." Toulouse 3, 1992. http://www.theses.fr/1992TOU30087.
Full textAbstract:
Au laboratoire, sont etudies les problemes lies a l'intervention du calcium dans la chaine de transduction de signaux extracellulaires chez les vegetaux. Dans ce contexte, a partir d'une banque d'adnc de haricot, un travail de clonage de calciproteines a ete entrepris. Le but de cette these a ete de caracteriser le produit d'un de ces clones sur les plans structural et fonctionnel. Le clone retenu code pour une proteine de choc thermique de masse moleculaire de 70 kda ou hsp70 qui comprend une extension de sequence en n-terminal. A l'aide d'experiences d'import dans des organites isoles des produits de transcription-traduction in vitro, il a ete demontre que le clone code pour le precurseur d'une hsp70 mitochondriale ou mthsp70. L'immunodetection, a l'aide d'anticorps site-specifique, a montre que cette proteine s'accumule dans la matrice sous forme de complexes de 270 et 420 kda. L'expression de mthsp70 est constitutive, cependant, lors d'un choc thermique, son expression est regulee au niveau post-transcriptionnel car le taux de son arnm augmente fortement sans variation apparente de la quantite de mthsp70. La caracterisation fonctionnelle a montre que mthsp70 est d'une part, phosphorylee de maniere calcium dependante, la forme phosphorylee etant un oligomere de 170 kda, d'autre part, affine pour l'atp et le calcium suggerant un mecanisme d'autophosphorylation. Ainsi, une hsp70 codee par un gene nucleaire et specifiquement vectorisee vers les mitochondries a ete caracterisee. Par son aptitude a s'associer a des proteines, elle pourrait intervenir dans les mecanismes de protection d'enzymes-cles, l'interaction reversible etant sous controle de la phosphorylation
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Grillo, Sophie. "Étude du rôle des protéines phosphatidyl inositol 3 kinase et protéine kinase B dans le transport de glucose stimulé par l'insuline." Nice, 2000. http://www.theses.fr/2000NICE5446.
Full textAbstract:
L'insuline stimule le transport de glucose en recrutant les transporteurs de glucose Glut4, d'un compartiment intracellulaire vers la membrane plasmique. L'activité PI 3 kinase est nécessaire à ce mécanisme. Mais certains stimuli qui l'activent ne stimulent pas le transport de glucose, indiquant l'implication d'une autre voie en réponse à l'insuline. Nous avons recherché si la PI 3 kinase était suffisante pour le transport de glucose. L'expression d'une forme constitutivement active de la PI 3 kinase entraîne la translocation de Glut4 dans les adipocytes de rats isolés. L'activité de la PI 3 kinase serait donc suffisante au transport de glucose. Nous avons ensuite étudié le rôle potentiel des protéines PDK1 et PKB dans ce mécanisme. PDK1 active PKB de manière dépendante de la PI 3 kinase en réponse à l'insuline. PDK1 et PKB possèdent un domaine PH qui interagit avec les PI3,4,5P3. La liaison du domaine PH de PKB avec les PI3,4,5P3 entraîne sa translocation du cytosol vers les membranes et sa phosphorylation par PDK1. Les surexpressions de PDK1 ou de PKB constitutivement active induisent la translocation de Glut4 en absence de stimulation par l'insuline, de plus l'expression de PDK1 sans domaine PH inhibe cette translocation stimulée par l'insuline. Cela suggère un rôle de PDK1 et PKB dans la stimulation du transport de glucose par l'insuline. Pour mieux comprendre le mécanisme d'activation de PKB, nous avons étudié la localisation subcellulaire de PDK1 lors de l'activation par l'insuline et le peroxovanadate, un agent insulino-mimétique. (. . . )