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Dissertations / Theses on the topic 'Protozoaire'

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Brotherton, Marie-Christine. "Études protéomiques chez le parasite protozoaire Leishmania." Thesis, Université Laval, 2013. http://www.theses.ulaval.ca/2013/29748/29748.pdf.

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DEVILLARD, ESTELLE. "Enzymes fibrolytiques d'un protozoaire cilie du rumen, polyplastron multivesiculatum." Clermont-Ferrand 2, 2000. http://www.theses.fr/2000CLF22206.

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Abstract:
Le role des bacteries et des champignons dans la degradation des parois vegetales dans le rumen a ete largement demontre, mais celui des protozoaires n'a pu etre clairement etabli. Notre travail avait pour but d'etudier l'equipement fibrolytique d'un protozoaire cilie du rumen, par une approche moleculaire. Une banque d'adnc a ete construite, a partir de polyplastron multivesiculatum, et a ete criblee pour les activites xylanase et cellulase. Quatre clones ont ainsi ete isoles. Les adnc des clones xyna et xynd codent pour des xylanases de la famille 11. Le clone xynb exprime une enzyme constituee d'un domaine homologue aux domaines thermostabilisants et d'un domaine catalytique de xylanase (famille 10). Cela associe un domaine d'endoglucanase et un domaine de pectine methylesterase. Les 4 genes presentent les caracteristiques du genome des protozoaires (contenu en at tres eleve, usage des codons largement biaise). Xyna et xynb ont ete plus particulierement etudiees et l'origine de leur gene a ete prouvee. Des etudes phylogenetiques ont montre que xyna et xynb ont des homologies plus elevees avec les xylanases de bacteries a gram-positif qu'avec celles d'autres micro-organismes, suggerant un transfert horizontal de genes. Les parametres enzymatiques optimaux de xyna et xynb, exprimees chez e. Coli, ont ete mesures. Le domaine stabilisant de xynb ne participe que faiblement a la thermostabilite de l'enzyme, mais il deplace de 2 unites le ph optimal de l'enzyme et aurait un role dans sa stabilite au ph. Nous avons egalement montre que deux autres genres de protozoaires cilies du rumen expriment des genes homologues a ceux isoles de polyplastron multivesiculatum. Par ce travail, nous prouvons pour la premiere fois que les cilies du rumen possedent leur propre equipement fibrolytique et ont donc le potentiel enzymatique pour contribuer a la degradation des parois vegetales dans le rumen.
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Muyombwe, Anthony. "Approches moléculaires pour le développement des vaccins vivants contre le parasite protozoaire Leishmania." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1998. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk2/ftp03/MQ31768.pdf.

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McNicoll, François. "Étude des mécanismes de régulation génique stade-spécifique chez le parasite protozoaire Leishmania." Thesis, Université Laval, 2006. http://www.theses.ulaval.ca/2006/23820/23820.pdf.

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Cloutier, Serge. "Régulation du facteur de traduction elF2alpha au cours du développement du parasite protozoaire Leishmania." Thesis, Université Laval, 2012. http://www.theses.ulaval.ca/2012/29011/29011.pdf.

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Sekkat, Najoua. "Contribution à l'étude de l'écotoxicité de produits purs et en mélanges complexes par le bioessai protozoaire Colpidium campylum." Rouen, 1992. http://www.theses.fr/1992ROUES018.

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Abstract:
Les protozoaires sont des organismes dont la position prépondérante dans la chaîne trophique en fait un matériel biologique particulièrement intéressant pour l'évaluation au laboratoire de l'écotoxicité des produits chimiques. Le bioessai Colpidium campylum a été optimisé en réduisant sa durée d'exécution de 5 a 2 jours et en confirmant que sa culture sur eau ultra-pure ne modifiait en rien sa sensibilité et sa reproductibilité par rapport au protocole initial sur milieu minéral. L'étude de la toxicité de produits chimiques purs et de produits complexes naturels représentés par les lixiviats de déchets et des effluents industriels a ensuite été réalisée. Par analyse statistique multifactorielle, il a été démontré que la réponse du bioessai protozoaire est complémentaire de celle relevée avec d'autres bioessais d'écotoxicologie couramment pratiqués. La méthode des plans factoriels a permis de mettre en évidence une synergie d'effet entre le cadmium et le ferbame. Cette méthode, appliquée aux effluents en intégrant le milieu récepteur et le temps de contact, a montré que ces deux paramètres ont un rôle prépondérant sur la toxicité des effluents. Couplée à l'analyse en composantes principales, elle a permis de mettre en évidence les principaux paramètres physico-chimiques responsables de la toxicité des effluents. Par étude des relations structure-activité, une relation entre la toxicité de 5 chlorophénols et l'indice de connectivité a été démontrée
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Mazet, Muriel. "Culture in vitro et caractérisation d'enzymes hydrogénosomales chez Histomonas meleagridis, protozoaire flagellé parasite de gallinacés." Phd thesis, Université Blaise Pascal - Clermont-Ferrand II, 2007. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00718217.

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Abstract:
Le protozoaire flagellé Histomonas meleagridis est responsable d'une maladie chez les oiseaux galliformes, nommée histomonose. La culture in vitro de ce parasite anaérobie est qualifiée d'agnobiotique car il y a présence d'une flore bactérienne non déterminée. L'identification des bactéries dans cette flore montre l'existence d'une flore très diversifiée. Des essais de culture axénique et monoxénique suggèrent que les bactéries sont essentielles au développement in vitro du parasite. Par des stratégies de PCR, RT-PCR et RACE-PCR, nous avons les gènes complets codant trois protéines intervenant dans le métabolisme énergétique chez H. meleagridis : une enzyme malique, la sous-unité alpha de la succinyl coenzyme A synthétase et une hydrogénase à fer. Ces trois protéines sont localisées dans des organites particuliers à double membrane, produisant de l'énergie sous forme d'ATP, appelés hydrogénosomes. Une partie du travail a porté sur le suivi d'élevages de dindes pour surveiller l'apparition éventuelle d'histomonose et sur la réalisation de tests anti-parasitaire à base de produits naturels
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8

El, Fadili Amal. "Étude du mécanisme de polyglutamylation des folates et antifolates chez le parasite protozoaire Leishmania tarentolae." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 2001. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk3/ftp04/MQ60715.pdf.

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9

Mahet, Mathilde. "Processus photochimiques primaires de la photophobie du protozoaire cilié Blepharisma japonicum : étude par pectroscopie ultrarapide." Paris 6, 2005. http://www.theses.fr/2005PA066603.

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Lamontagne, Julie. "Identification d'une copie du mini-exon différenciellement polyadénylée au stade amastigote du parasite protozoaire Leishmania donovani." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1998. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk2/ftp03/MQ38129.pdf.

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Dzierszinski, Florence. "Deux enzymes glycolytiques du protozoaire parasite Toxoplasma gondii : clonage, expression différentielle des gènes, caractérisation enzymatique et phylogénie." Lille 1, 2000. https://pepite-depot.univ-lille.fr/RESTREINT/Th_Num/2000/50376-2000-282.pdf.

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Abstract:
L'interconversion du tachyzoite virulent et du bradyzoite quiescent est un processus important dans la pathogenese du protozoaire parasite toxoplasma gondii. Les bases moleculaires impliquees dans cette differenciation parasitaire ne sont pas definies. Une technique d'induction in vitro de la differenciation, conjuguee a la construction d'une banque soustractive, a permis de caracteriser des transcrits regules selon les stades parasitaires. Deux fragments d'adnc presentant de fortes homologies avec les enzymes glycolytiques glucose-6-phosphate isomerase (g6pi) et enolase (eno1) ont ete isoles. Nous avons alors clone les adnc complets codant ces deux enzymes. Les deux adnc complementent des mutants bacteriens deficients en g6pi et enolase, et generent des enzymes recombinantes actives produites chez e. Coli. Le gene eno1 est exclusivement transcrit chez le bradyzoite, alors que le transcrit du gene g6pi est retrouve dans les deux stades parasitaires avec un niveau d'expression plus important chez le bradyzoite. En revanche, les proteines g6pi et eno1 sont exclusivement exprimees par le bradyzoite. Les analyses structurales et phylogeniques montrent que les g6pi et enolases de t. Gondii et p. Falciparum sont tres proches de leurs homologues chez les plantes
Une etude structure-fonction de deux boucles peptidiques, typiques des enolases de t. Gondii et p. Falciparum et de celles de plantes superieures, demontre leur influence sur l'activite et la stabilite de l'enzyme. Enfin, nous avons egalement isole l'adnc codant une seconde enolase. Le gene eno2 est preferentiellement transcrit chez le tachyzoite virulent. L'isoforme eno2 est specifique de cette forme. Les caracteristiques enzymatiques des deux isoformes d'enolases de t. Gondii ont ete comparees, et leurs differences d'activites pourraient temoigner du maintien de la glycolyse en accord avec les besoins specifiques des deux stades asexues de t. Gondii dans le metabolisme des carbohydrates
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Ahmed, Ouameur Amin. "Caractérisation de la famille des transporteurs de folate et de la bioptérine (FBT) chez le parasite protozoaire Leishmania." Thesis, Université Laval, 2011. http://www.theses.ulaval.ca/2011/28244/28244.pdf.

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Delorme, Violaine. "Propriétés mobiles du protozoaire toxoplasma Gondii : contribution du flux de phosphate aux caractéristiques fonctionnelles du complexe Actine/Toxofiline." Paris 7, 2003. http://www.theses.fr/2003PA077033.

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Chou, Marie-Noëlle. "Caractérisation du complexe protéique eIF2a impliqué dans la régulation de l'initiation de la traduction chez le parasite protozoaire Leishmania." Thesis, Université Laval, 2005. http://www.theses.ulaval.ca/2005/22822/22822.pdf.

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Abstract:
Leishmania est un parasite protozoaire dimorphique causant la leishmaniose à travers le monde. Puisque aucune régulation transcriptionnelle n’a été décrite chez ce parasite, l’étude de la régulation de la traduction est devenue essentielle. Il a été décrit chez les eucaryotes supérieurs que le facteur d’initiation de la traduction, eIF2α, lorsqu’il est phosphorylé en condition de stress, est capable d’inhiber la traduction. Les objectifs de ce travail étaient de 1) déterminer si le facteur eIF2α est phosphorylé chez Leishmania au cours de la différenciation ou à la suite de certains stress et 2) de caractériser une des eIF2α kinases, la PKR. Cette kinase est activée, entres autres par la présence d’ARN double brins et s’autophosphoryle. Par des expériences d’immunoprécipitation, de précipitation à l’aide d’ARNdb et d’immunobuvardage, il semble que, dans les deux cas (le facteur eIF2α et la kinase PKR), soit majoritairement phosphorylés au stade amastigote intracellulaire du parasite. Les stress de pH et de température, qui mimiqueraient l’environnement du macrophage, et de la drogue thapsigargine, qui induit un stress du RE, ne semblent pas affecter l’expression de ces facteurs mais auraient un effet sur leur phosphorylation. De plus, ces protéines sont aussi associées particulièrement aux monosomes suggérant un rôle dans l’initiation de la traduction.
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ESSODAIGUI, MOHAMED. "La multidrug resistance dans les cellules tumorales et le parasite protozoaire leishmania : analyse spectrofluorimetrique des mecanismes d'efflux actifs impliques." Paris 6, 1998. http://www.theses.fr/1998PA066659.

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Abstract:
Le traitement des parasitoses et de nombreux cancers s'appuie principalement sur la chimiotherapie. Malheureusement, l'emergence de la resistance, simple ou multiple, aux medicaments est devenu un obstacle majeur a l'efficacite de ces traitements. Une meilleure connaissance des mecanismes de resistance aux medicaments est cruciale pour developper des outils de detection precoce de la resistance, pour suggerer de nouvelles utilisations d'agents chimiotherapeutiques et pour trouver de nouvelles cibles afin de developper la recherche de nouveaux agents antitumoraux ou antiparasitaires. La multidrug resistance (mdr) dans les cellules tumorales est due a la surexpression de deux proteines membranaires de la famille des abc transporteurs : la p-gp et la mrp1. Ces deux proteines peuvent etre surexprimees simultanement dans la meme lignee cellulaire et constituent de veritables pompes a medicaments capables d'effluer de maniere energie-dependante une large gamme d'antitumoraux, diminuant de la sorte leur concentration intra-cellulaire et, donc, leur efficacite. La mise au point au laboratoire d'un protocole spectrofluorimetrique simple et tres fiable nous a permis de realiser l'etude comparative directe in vitro de ces deux abc transporteurs, et a la determination des parametres cinetiques de leurs efflux actifs respectifs. D'autre part, l'adaptation de ce protocole a l'etude du parasite protozoaire leishmania nous a permis de mettre en evidence pour la premiere fois dans trois souches sauvages distinctes des mecanismes d'efflux actifs similaires a ceux des cellules tumorales surexprimant la mrp1. Nous avons egalement demontre l'efficacite et la specificite d'inhibiteurs classiques de la mdr pour bloquer l'efflux actif chez ces parasites. Cette etude a ete accomplie grace a une precieuse collaboration avec des chercheurs des pays-bas, du bresil et du venezuela et apportera, je l'espere, une meilleure comprehension des mecanismes cellulaires impliques dans la resistance aux antitumoraux et/ou aux antileishmaniens.
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CLAYET, FREDERIC. "Contribution a l'etude des cellulases et des hemicellulases d'epidinium ecaudatum forme caudatum (crawley) : protozoaire cilie du rumen de mouton." Clermont-Ferrand 2, 1994. http://www.theses.fr/1994CLF21565.

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Abstract:
L'equipement enzymatique fibrolytique du cilie entodiniomorphe epidinium ecaudatum forme caudatum (crawley) a ete etudie a partir de cellules prelevees dans le rumen de mouton a faune controlee, debarrassees des bacteries et champignons contaminants puis broyees. Les enzymes cellulolytiques et hemicellulolytiques ont ete detectees parmi les proteines solubles du broyat et leurs proprietes physico-chimiques ont ete determinees ainsi que certaines de leurs proprietes biochimiques. Les ph optimaux de toutes ces activites sont acides (entre 5 et 6) et leurs temperatures optimales sont comprises entre 40 et 50c. Les enzymes de type beta-1,3-glucane glucanohydrolasique, endo-beta-1,4-d-glucane glucanohydrolasique et beta-1,4-d-xylane xylanohydrolasique sont des proteines dont les masses moleculaires sont inferieures a 60 kda. Les activites de type glycosidasique sont toutes portees par un complexe de tres forte masse moleculaire. Des purifications partielles de ces enzymes ont ete realisees par des methodes de chromatographie, d'electrophorese et d'isoelectrofocalisation. Les produits majeurs de degradation du xylane par les enzymes xylanolytiques d'epi. Ecaudatum ont egalement ete determines. Le cilie epi. Ecaudatum est un microorganisme cellulolytique vrai, capable de degrader la cellulose cristalline en glucose
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Combe, Audrey. "Entrée et développement des sporozoïtes de plasmodium dans les cellules hôtes." Paris 7, 2008. http://www.theses.fr/2008PA077196.

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Abstract:
Le paludisme demeure une des maladies infectieuses les plus meurtrières au monde. La phase sanguine symptomatique de l'infection est précédée par une phase, dite pré-érythrocytaire, qui se déroule principalement dans le foie de l'hôte. Durant celle-ci, la forme sporozoïte du parasite est injectée dans la peau de l'hôte par un moustique, envahit les hépatocytes, et y génère la forme mérozoïte du parasite qui envahit les globules rouges. Durant ma thèse, je me suis intéressée à différents aspects de l'entrée et du développement des sporozoïtes de Plasmodium dans les cellules hôtes, en utilisant un modèle rongeur d'infection. Nous avons caractérisé une nouvelle protéine nécessaire à la mobilité des sporozoïtes et à leur invasion des glandes salivaires du moustique. Cette protéine, TREP, est un nouveau membre de la famille de protéines qui lient le substrat au moteur du parasite. Nous avons ensuite examiné le rôle de l'actine de la cellule cible pendant l'entrée des zoïtes d'Apicomplexes. Contrairement au modèle communément accepté selon lequel la cellule hôte ne joue pas de rôle actif durant l'entrée des zoïtes, nos résultats ont montré que les zoïtes induisent une polymérisation de l'actine cellulaire spécifiquement à la jonction zoïte-cellule. Enfin, nous avons développé une approche de mutagenèse conditionnelle chez Plasmodium, utilisant le système flp/FRT de la levure, afin d'étudier la fonction, aux stades pré-érythrocytaires, de gènes essentiels du parasite. Grâce à cette technique, nous avons montré que la protéine MSP-1, essentielle à l'invasion du globule rouge par le mérozoïte, est essentielle à la formation des mérozoïtes au stade intra-hépatocytaire du parasite
Malaria remains one of the most deadly infectious diseases in the world. The symptomatic phase is due to the multiplication of the parasite inside red blood cells of the host. This blood phase is preceded by the so-called pre-erythrocytic phase, which occurs mostly in the liver of the host. During the latter phase, the sporozoite stage of the parasite is injected into the host skin by a mosquito, invades hepatocytes and generates the merozoite stage that invades erythrocytes. During my thesis, I focused on various aspects of entry and development of the Plasmodium sporozoite in host cells, using a rodent model of infection. First, we characterized a novel protein that is necessary for the motility of the sporozoite and its capacity to invade the mosquito salivary glands. This protein, called TREP, is a new member of the family of proteins that link the substrate to the parasite motor. Second, we examined the role of actin in the host cell during the entry of Plasmodium sporozoites and Toxoplasma tachyzoites. In contrast to the commonly accepted model of a host cell playing no active role during zoite entry, our results showed that zoites induce actin polymerization in the host cell specifically at the zoite-host cell junction. Finally, we established a new conditional mutagenesis procedure in Plasmodium, based on the Flp/FRT System of yeast, for addressing the function of parasite essential genes in the pre-eryhtrocytic stages (sporozoite and intra-hepatocytic). Using this technique, we showed that the MSP-1 protein, which is essential for merozoite invasion of erythrocytes, is also essential for the formation of merozoites from the intra-hepatocytic stage of the parasite
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Chou, Marie-Noëlle. "Caractérisation du complexe protéique eIF2[alpha] impliqué dans la régulation de l'initiation de la traduction chez le parasite protozoaire Leishmania." Québec : Université Laval, 2005. http://www.theses.ulaval.ca/2005/22822/22822.pdf.

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Leprohon, Philippe. "Caractérisation de la famille des protéines ABC et étude transcriptomique de la résistance à l'antimoine chez le parasite protozoaire Leishmania." Thesis, Université Laval, 2008. http://www.theses.ulaval.ca/2008/25561/25561.pdf.

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Abstract:
Les parasites protozoaires du genre Leishmania sont responsables de différentes pathologies et représentent une cause importante de morbidité et de mortalité au niveau mondial. En absence de vaccins, le contrôle de la leishmaniose repose sur l’administration d’agents chimiothérapeutiques. Les médicaments disponibles sont peu nombreux et la plupart d’entre eux sont associés à des facteurs limitants, comme une toxicité relative à leur administration ou un coût trop élevé pour être utilisés de routine au niveau des zones endémiques les plus pauvres. Les composés à base d’antimoine pentavalent sont utilisés en thérapie depuis plusieurs décennies et demeurent encore aujourd’hui un traitement de première ligne contre les différentes formes de leishmanioses. Cependant, l’augmentation du nombre d’infections réfractaires au traitement, associée à la présence de foyers épidémiques de résistance, amenuisent le potentiel thérapeutique de ces molécules. Les mécanismes impliqués dans la résistance sont partiellement élucidés et ont révélé l’importance de la famille des protéines ATP-binding cassette (ABC) dans la résistance. De plus, l’étude de mutants résistants sélectionnés en laboratoire indique la présence de mécanismes de résistance supplémentaires, pour lesquels les gènes impliqués n’ont pas encore été identifiés. Les objectifs de cette thèse étaient i) de définir la famille des protéines ABC chez Leishmania et d’en effectuer l’analyse phylogénique, pour ensuite ii) étudier l’implication de la sous-famille ABCC dans la résistance à l’antimoine chez ce parasite, et finalement iii) de profiter de la disponibilité de la séquence du génome de Leishmania pour évaluer le profil d’expression génique associé au phénotype de résistance à l’antimoine à l’échelle génomique. L’analyse phylogénique a d’abord permis de démontrer la diversité de la famille des protéines ABC chez Leishmania, qui semble avoir évoluée par des événements de duplication génique suite à la divergence évolutive du parasite. Ensuite, des études de localisation protéique, associées à des expériences de surexpression génique, ont permis de déterminer la localisation intracellulaire de l’ensemble des protéines appartenant à la sous-famille ABCC chez Leishmania et de démontrer l’implication de deux d’entre elles dans la résistance à l’antimoine chez ce parasite. Enfin, une étude transcriptomique a confirmé l’importance du gène MRPA dans la résistance à l’antimoine et a permis d’identifier les mécanismes de recombinaison homologue impliqués dans son amplification chez une souche de L. infantum hautement résistante. Finalement, l’analyse transcriptomique a également révélé la présence de chromosomes aneuploïdes chez différents mutants résistants à l’antimoine, alors que la sélection d’une souche révertante partielle a permis d’observer une bonne corrélation entre les niveaux de résistance et le nombre de copies des chromosomes aneuploïdes.
The parasite Leishmania is responsible for considerable morbidity and mortality around the world. No effective vaccine is yet available against this parasite and treatment thus relies on chemotherapy. Few drugs are available and most of them are associated with limitations such as toxicity and high cost. Pentavalent antimonials have been used for decades in the treatment of leishmaniasis and remain the mainstay against all forms of Leishmania infections in most endemic regions. However, the efficacy of these compounds is compromised by the selection of resistant parasites that are now described on a frequent basis in several endemic regions. The mechanisms involved in antimony resistance are partly understood and have pinpointed the role of ATP-binding cassette (ABC) proteins. Moreover, drug resistance studies with different in vitro-selected mutants have suggested the presence of unidentified mechanisms involved in antimony resistance. The objectives of this thesis were i) to define the complete ABC protein family in Leishmania and to analaze their evolution by phylogenetic analyses, ii) to assess the role of the entire ABCC subfamily in antimony resistance, and iii) to take advantage of the availability of the Leishmania genome sequence to study the gene expression profile associated with an antimony resistance phenotype at the genomic level. Phylogenetic analyses revealed the magnitude of the ABC gene family in Leishmania, which seemed to have undergone gene duplication events following the divergence of the Leishmania lineage. Moreover, subcellular localization experiments indicated that the entire ABCC protein subfamily is located to intracellular compartments in Leishmania, and gene overexpression experiments revealed the involvement of two of these proteins in antimony resistance. Finally, a whole-genome transcriptomic study confirmed the involvement of MRPA in antimony resistance and revealed the recombination events associated with its amplification in the highly resistant L. infantum Sb2000.1 mutant. More importantly, the transcriptomic study revealed the presence of aneuploid chromosomes in at least two different antimony-resistant mutants and selection of a partial revertant strain allowed the observation of a good correlation between the antimony resistance levels and the copy number of the aneuploid chromosomes.
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Leclerc, Annouck. "Faisabilité d'un test de biodiagnostic environnemental basé sur l'utilisation d'un biomarqueur moléculaire de toxicité chez le protozoaire cilié Tetrahymena pyriformis." Saint-Etienne, EMSE, 2005. http://www.theses.fr/2005EMSEA003.

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Abstract:
La détection de substances polluantes toxiques constitue un enjeu majeur pour atteindre un bon état chimique et écologique des eaux. Notre projet vise à exploiter la sensibilité d'un modèle cellulaire pour détecter de manière précoce et fiable la présence de concentrations cytotoxiques de polluants. La faisabilité d'un test de biodiagnostic environnemental, basé sur l'utilisation du gène codant la Métallothionéine en tant que biomarqueur moléculaire de toxicité a été envisagée chez le protozoaire cilié Tetrahymena pyriformis. L'expression du gène MT a été analysée par RT-PCR pour vérifier la pertinence de ce gène en tant que biomarqueur moléculaire de toxicité. Quatre polluants reconnus dangereux ont été testés: le cadmium, le mercure, le nonyl- et l'octylphénol. Parmi les technologies transposables sur le terrain, les organismes transformés constituent des outils performants afin de détecter de faibles concentrations de substances cytotoxiques dans l'eau. Nous avons cherché à mettre au point des cellules T. Pyriformis transformées par une construction constitutive ou par une construction inductible par les polluants. La région du gène histone H4I a été clonée, et celle du gène MT devra être clonée pour développer un modèle cellulaire transgénique capable de renseigner sur la présence de concentrations cytotoxiques de polluants dans l'eau
The detection of toxic chemicals constitutes a major stake to reach a good chemical and ecological state of environmental water. Our project aims to exploit the sensitivity of a cellular model to detect in an early and reliable way the presence of cytotoxic concentrations of pollutants. The feasibility of an environmental test, based on the induction of the Metallothionein gene as a molecular toxicity biomarker, was investigated in the ciliate protozoan Tetrahymena pyriformis. The expression of the MT gene was analysed by RT-PCR to check the relevance of this gene as a molecular biomarker of toxicity. Four dangerous pollutants were tested: cadmium, mercury, the nonyl- and the octyl-phenol. Among technologies transposable in the field, genetically transformed organisms constitute powerfull tools to detect weak concentrations of chemicals in the water. We aim to develop T. Pyriformis cells transformed with a constitutive or pollutants-inducible construction. The region of the histone H4I gene was cloned, and the region of the MT gene has to be cloned to develop transgenic cells able to inform about weak concentrations of pollutants in the environmental water
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Marchal, Laurence. "Interaction cellule-hôte/parasite : analyse de la réponse de la cellule mammifère à l'invasion par le protozoaire Apicomplexe Toxoplasma gondii." Paris, Muséum national d'histoire naturelle, 2000. http://www.theses.fr/2000MNHN0012.

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Abstract:
Le tachyzoïte de T. Gondii dirige activement sa propulsion dans la cellule-hôte en prenant appui sur celle-ci après avoir établi une jonction impliquant les membranes des deux cellules. Les molécules composant ces jonctions ne sont pas encore identifiées. Nous avons posé l'hypothèse que les jonctions puissent impliquer, du côté de la cellule-hôte, des molécules issues des plaques focales préexistantes. Leur recrutement pourrait contribuer à la déstabilisation locale et transitoire des structures focales et rendre ainsi compte de la de-adhésion observée. L'objectif principal a été d'évaluer quels étaient les effets de l'attachement et de l'internalisation sur les propriétés adhésives des cellules-hôtes. J'ai dans un premier temps mis au point la méthodologie la plus appropriée pour analyser les variations de de-adhésion des cellules-hôtes à leur substrat en présence de tachyzoïtes. Puis, dans un second temps, j'ai testé des paramètres sur l'amplitude de la de-adhésion induite par le parasite puis observé l'état de viabilité des cellules-hôtes avant et après leur de-adhésion. Ceci a permis de mettre en évidence que le contact entre des tachyzoïtes invasifs et la cellule-hôte induit une de-adhésion dont l'amplitude augmente avec le nombre de contacts. La grande majorité des cellules-hôtes ayant de-adhèré présentent une permilibilisation importante de leur membrane plasmique. Ces deux observations ont conduit à proposer que cette de-adhésion soit la conséquence d'un effet cytotoxique traduisant une perturbation de la structure protéo-lipidique de la membrane plasmique de la cellule-hôte. Dans un deuxième temps, j'ai recherché si des protéines de cellules-hôtes participent aux jonctions lors de la phase d'attachement du parasite, et lors de son internalisation : A partir de cellules interagissant avec des tachyzoites, j'ai préparé des fractions membranaires enrichies en jonctions. Deux bandes d'environ 46 et 50 kD sont observables de manière reproductible dans ces fractions. L'identification conjointe des deux peptides ainsi mis en évidence dans la fraction associée aux membranes lorsque des jonctions cellules-hôtes/parasites sont présentes, permettra d'initier une analyse sur les molécules recrutées au cours de l'invasion et a partir desquelles le parasite développé une force motrice invasive.
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Chou, Marie-Noëlle. "Caractérisation du complexe protéique eIF2[alpha] impliqué dans la régulation de l'initiation de la traduction chez le parasite protozoaire Leishmania." Master's thesis, Université Laval, 2005. http://hdl.handle.net/20.500.11794/18072.

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Abstract:
Leishmania est un parasite protozoaire dimorphique causant la leishmaniose à travers le monde. Puisque aucune régulation transcriptionnelle n'a été décrite chez ce parasite, l'étude de la régulation de la traduction est devenue essentielle. Il a été décrit chez les eucaryotes supérieurs que le facteur d'initiation de la traduction, eIF2[alpha], lorsqu'il est phosphorylé en condition de stress, est capable d'inhiber la traduction. Les objectifs de ce travail étaient de 1) déterminer si le facteur eIF2[alpha] est phosphorylé chez Leishmania au cours de la différenciation ou à la suite de certains stress et 2) de caractériser une des eIF2[alpha] kinases, la PKR. Cette kinase est activée, entres autres par la présence d'ARN double brins et s'autophosphoryle. Par des expériences d'immunoprécipitation, de précipitation à l'aide d'ARNdb et d'immunobuvardage, il semble que, dans les deux cas (le facteur eIF2[alpha] et la kinase PKR), soit majoritairement phosphorylés au stade amastigote intracellulaire du parasite. Les stress de pH et de température, qui mimiqueraient l'environnement du macrophage, et de la drogue thapsigargine, qui induit un stress du RE, ne semblent pas affecter l'expression de ces facteurs mais auraient un effet sur leur phosphorylation. De plus, ces protéines sont aussi associées particulièrement aux monosomes suggérant un rôle dans l'initiation de la traduction.
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Durocher, Alicia. "Dynamique de la formation des corps multilamellaires et de l'enrobage de bactéries par différents protozoaires." Master's thesis, Université Laval, 2020. http://hdl.handle.net/20.500.11794/66435.

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Abstract:
Plusieurs protozoaires, des eucaryotes unicellulaires ubiquitaires, sont des prédateurs de bactéries. Cependant, les relations bactéries-protozoaires sont complexes et peuvent donner lieu à des interactions particulières. Certains protozoaires, dont l’amibe sociale Dictyostelium discoideum, peuvent produire des corps multilamellaires (CML) lorsqu’ils digèrent des bactéries. Ces structures avaient initialement été identifiées comme des déchets métaboliques, mais il a été suggéré qu’elles pourraient avoir des rôles supplémentaires. Ce ne sont pas toutes les bactéries qui sont digérées par tous les protozoaires, et certaines bactéries résistantes à la digestion peuvent être enrobées dans les corps fécaux de ces protozoaires. Les corps fécaux partagent des similitudes avec les CML. Ce projet de maîtrise visait à éclairer certains aspects des interactions bactéries protozoaires,en caractérisant la voie phagocytique d’amibes sociales environnementales afin d’examiner leur production potentielle de CML, et en analysant l’impact de différentes caractéristiques bactériennes sur la morphologie de l’enrobage par des ciliés. Ces objectifs furent atteints en cultivant les protozoaires d’intérêt en présence de bactéries digestibles(pour la production de CML) ou non (pour l’enrobage) et en faisant appel à diverses méthodes de microscopie. Nos résultats montrent que les quatre isolats d’amibes sociales environnementales, qui appartiennent tous au genre Dictyostelium, mais qui présentent des caractéristiques différentes, peuvent produire des CML lorsque cultivés sur bactéries digestibles. Pour l’étude de la morphologie de l’enrobage de bactéries, les résultats suggèrent que l’hydrophobicité de surface et la taille de l’espèce bactérienne seraient les caractéristiques ayant le plus fort impact sur la morphologie des corps fécaux. Toutefois, il n’est pas exclu que d’autres facteurs interviennent également, incluant des facteurs qui n’étaient pas à l’étude dans ce projet. Ces résultats approfondissent notre compréhension des relations bactéries-protozoaires, mais de nombreuses autres questions sont toujours sans réponse et le développement de méthodes d’analyse plus raffinées sera primordial pour répondre à ces questions.
Many protozoa, ubiquitous unicellular eukaryotes, are predators of bacteria. However, bacteria-protozoa relationships are complex and can lead to some particular interactions. Some protozoa, including the social amoeba Dictyostelium discoideum, can produce multilamellar bodies (MLBs) upon digesting bacteria. These structures were initially identified as metabolic waste, but it has been suggested that they could have additional roles. Not all bacteria can be digested by all protozoa, and some digestion-resisting bacteria can be packaged into the fecal bodies produced by protozoa. These fecal bodies share similarities with MLBs. This master’s project was meant to shed a light on some aspects of bacteria-protozoa interactions, by characterizing the phagocytic pathway of some environmental social amoebae and by analyzing the impact of bacterial characteristics on the morphology of bacteria packaging. These objectives were met by cultivating the protozoa species of interest with either digestible bacteria (for MLB production) or undigestible bacteria (for packaging) and using diverse microscopy methods. Our results show that the four environmental isolates of social amoebae, belonging to the Dictyostelium genus but presenting distinct characteristics, can produce MLBs upon growth on digestible bacteria. As for the study of bacteria packaging morphology, results suggest that a bacteria’s surface hydrophobicity and cell size are the characteristics impacting packaging morphology the most. However, it is not excluded that other factors may intervene as well, including some not considered in this project. These results bring new understanding to bacteria protozoa relationships, but many questions remain. The development of more refined analysis method will be paramount to answering these.
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HERVIO, DOMINIQUE. "Contribution a l'etude de bonamia ostreae (ascetospora), protozoaire parasite de l'huitre ostrea edulis (bivalvia), et a l'analyse des interactions hote-parasite." Clermont-Ferrand 2, 1992. http://www.theses.fr/1992CLF21387.

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Abstract:
Le protozoaire bonamia ostreae, parasite intrahemocytaire de l'huitre plate ostrea edulis, est responsable d'une endemie particulierement importante pour l'ostreiculture europeenne. La purification du parasite a permis sa caracterisation par des techniques originales en pathologie des mollusques. Plusieurs activites enzymatiques ont ete identifiees. Des anticorps polyclonaux et monoclonaux ont ete prepares et appliques a la caracterisation antigenique de b. Ostreae et a son immunodiagnostic. Le clonage de l'adn genomique et l'etablissement de sequences nucleiques ont conduit a la synthese d'amorces oligonucleiques utilisables pour amplifier specifiquement l'adn parasitaire. Les interactions hote-parasite ont ete etudiees sur la base d'infections experimentales in vitro d'hemocytes de o. Edulis (espece sensible) et de c. Gigas (refractaire). La phagocytose, essentiellement dirigee par l'hote, ne semble specifique ni d'un type hemocytaire, ni de l'espece d'huitre. La reconnaissance parasite-hemocyte, analysee en considerant l'implication depitopes membranaires de b. Ostreae ou de facteurs seriques met en evidence des differences minimes entre o. Edulis et c. Gigas. Pour ces deux especes, la phagocytose du parasite ne s'accompagne pas d'une activite metabolique respiratoire des hemocytes, alors qu'une telle activite est mise en evidence lors de la phagocytose du zymosan. In vitro les hemocytes montrent une viabilite limitee et une perte rapide de leurs capacites microbicides, ce qui revele les limites des systemes in vitro pour l'etude du devenir intrahemocytaire du parasite, tant chez l'espece sensible que chez l'espece refractaire. Les interactions hote-parasite ont ete etudiees in vivo. C. Gigas est refractaire a l'infection experimentale. Chez o. Edulus la reproduction de la bonamiose a ete standardisee. La dose infectieuse 50% a ete estimee pour des conditions experimentales determinees. Les infections ont des cinetiques de developpement variant en fonction de la dose, des individus et de la souche geographique
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Julia, Valérie. "Analyse du role des lymphocytes tcd4+ dans la susceptibilite des souris balb/c a l'infection par le protozoaire intracellulaire leishmania major." Nice, 1999. http://www.theses.fr/1999NICE5301.

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Abstract:
Au cours de ma these, je me suis attachee a etudier le role des lymphocytes t auxiliaires chez des souris balb/c infectees par l. Major. Dans un premier temps, j'ai montre que l'antigene parasitaire lack constituait une des cibles preferentielles de la reponse immunitaire chez les souris infectees. J'ai ensuite demontre que les lymphocytes t anti-lack jouaient un role determinant dans la susceptibilite au parasite. Ainsi, le simple fait de rendre des souris balb/c tolerantes pour lack est suffisant pour permettre a ces souris d'eliminer le parasite. Dans un deuxieme temps, j'ai essaye de comprendre ce qui differencie les lymphocytes t anti-lack de ceux reagissant avec d'autres antigenes parasitaires. Je me suis egalement interessee aux mecanismes d'action de ces cellules et aux raisons pour lesquelles elles jouent un role determinant dans la susceptibilite a l. Major. Parallelement au groupe de jacques louis, j'ai montre que les lymphocytes t anti-lack produisent tres rapidement de l'il-4 chez les souris balb/c infectees par l. Major. Cette reponse acceleree est due a l'existence d'un phenomene de mimetisme moleculaire entre lack et des antigenes de la flore intestinale. En effet, les lymphocytes t anti-lack reagissent avec des extraits bacteriens, et l. Major n'induit pas la production rapide d'il-4 chez des souris balb/c depourvues de germes. Toutefois, la production rapide d'il-4 par les lymphocytes t anti-lack ne permet pas d'expliquer le role determinant de ces cellules dans la susceptibilite au parasite. En effet, des souris balb/c depourvues de germes restent susceptibles a l. Major, et les lymphocytes t anti-lack produisent rapidement de l'il-4 chez les souris b10. D2 qui sont resistantes.
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Guinet, Françoise. "Chromosome 12 de P. Falciparum : caractérisation d'une mutation du développement sexué et identification d'un locus impliqué dans la variation antigénique." Paris 7, 1997. http://www.theses.fr/1997PA077351.

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Abstract:
Des études génétiques dans le parasite Plasmodium falciparum ont été rendues possibles par la réalisation et la caractérisation de croisements en laboratoire (Walliker et al. , Science (1987) 236:1661; Wellems et al. , Nature (1990) 345:253). L'utilisation de l'approche génétique a conduit à l'identification des gènes var d'importance fondamentale pour la pathogénicité et le cycle de transmission de parasite, ainsi qu'à la définition d'un locus lié au développement sexué mâle du parasite. Une région de 300 kb liée à la chloroquino-résistance avait été définie sur le chromosome 7 de P. Falciparum par analyse de liaisons génétiques et cartographie de positionnement (Wellems et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1991) 88: 3382). Une analyse de cette région par cartographie de restriction et séquençage extensif a conduit à l'identification d'un groupe de ≥ 5 gènes apparentés composés de deux exons et portant desmotifs proches des domaines de liaison impliqués dans la reconnaissance de l'antigène Duffy à la surface des GR par les stades mérozoïtes. Les 3 gènes appartiennent à une famille beaucoup plus vaste, composée de 50 - 150 membres. Des travaux réalisés dans d'autres laboratoires (Baruch et al. , Cell (1995) 82:77; Smith et al. , Cell (1995) 82:101) ont confirmé que les gènes membres de cette famille, nommée famille var, codent pour les protéines de la variation antigénique et de la cytoadhérence (protéines PfEMPl). Parmi les transcrits var identifiés par criblages de banques cDNA dans le clone Dd2, l'un d'eux, le transcrit var7 a été complètement séquence» Un groupe de ≥ 3 gènes var7 a été identifié sur le chromosome 12 de P. Falciparum à 600kb du télomère, soit en position interne dans le chromosome, par cartographie physique de basse résolution. Des remaniements dans le groupe de gènes ont été mis en évidence par sous-clonages, et des travaux actuellement en cours dans le laboratoire indiquent qu'ils sont associés à une commutation de l'expression var. La cartographie physique du chromosome 12 associée à des analyses de liaisons génétiques a conduit à la définition sur ce chromosome d'un locus de 800 kb portant une mutation affectant la production de gamètes mâles m vitro dans le clone Dd2 de P. Falciparum. Le défect s'était initialement manifesté, au cours du croisement réalisé au laboratoire entre le clone Dd2 et le clone HB3, sous la forme d'une diminution de la production d'oocystes chez le moustique et a été par la suite associé à une réduction de la production de gamètes mâles. Une étude phénotypique de la mutation dans le clone Dd2 et dans un clone de type sauvage dont il est dérivé a montré que la mutation était survenues in vitro, et qu'elle s'accompagnait de désordres sévères de la maturation sexuée dans les globules rouges avec réduction de la production relative de gamétocytes mâles. Il s'agit donc d'une mutation développementale (et non par exemple, d'un défaut de relargage des gamètes mâles), la seule rapportée à ce jour qui implique de façon prédominante ou exclusive l'un des deux sexes et la seule pour laquelle une approche génétique soit possible vers la définition moléculaire de la mutation. Une comparaison des fragments de restriction du chromosome 12 de la paire isogénique mutée/sauvage n'a pas mis en évidence de remaniements génétiques majeurs (≥ 20-50kb) à l'origine de la mutation.
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BAMDAD, MORAD-HASSEL MAHCHID, and C. A. GROLIERE. "Etude de la toxicite de la nigericine, antibiotique polyether carboxylique, en relation avec ses proprietes ionophores, sur le protozoaire cilie tetrahymena pyriformis." Clermont-Ferrand 2, 1991. http://www.theses.fr/1991CLF21356.

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Abstract:
La nigericine, antibiotique polyether carboxylique, tres toxique pour le protozoaire cilie tetrahymena pyriformis gl, a la propriete de complexer et de transporter preferentiellement les ions de k+, dans le sens du gradient, a travers la membrane cellulaire et cet echange est simultanement equilibre par un apport d'ion h+. Dans ce travail nous avons aborde l'etude de l'action de la nigericine, antiport h#+/k#+, en relation avec ces proprietes ionophores par la mesure du ph intracellulaire (phi) qui necessite la connaissance du nombre du cilie et leur volume cellulaire. En presence d'une culture de t. Pyriformis en phase exponentielle de croissance, nous avons constate que la nigericine a faible concentration (10 mg/l), entraine une inhibition des divisions cellulaires, une acidification du milieu intracellulaire suivi d'une augmentation du volume de ces cilies qui a leur tour reequilibre le ph cytoplasmique. Puis 140 min apres l'addition de la nigericine, ces cellules reprennent leurs divisions et retrouvent leur volume cellulaire temoin. En presence d'une forte dose de nigericine, 30 mg/l (dose sublethale), la cinetique des echanges h#+/k#+ etant tres rapide, 80% environ des cilies eclatent du a une augmentation tres brusque du volume cellulaire, 45 min apres le contact avec cet antibiotique. Il reste dans le milieu de culture des petits cilies arrondis qui reprennent leur division 24 heures plus tard. Cette reprise de la division cellulaire nous a conduit a l'etude d'une biotransformation de cet antibiotique par ces cilies. La nigericine a forte concentration, 30 mg/l, est biotransforme en plusieurs produits. L'obtention de l'un des produits (n1) est nettement amelioree grace au mecanisme d'induction, par des concentrations plus fortes de nigericine (50 ou 100 mg/l) et la presence d'une biomasse importante de cilies. L'etude structurale de n1 par la spectrometrie de masse et la r. M. N. Montre qu'on est en presence d'un antibiotique epimere, l'epinigericine, environ deux fois moins toxique que la nigericine. L'etude de l'action de l'epinigericine sur les populations, le volume cellulaire et le ph intracellulaire de t. Pyriformis ont confirme que cet antibiotique est moins toxique que la nigericine et dans ce cas, la bioconversion de la nigericine par tetrahymena peut etre consideree comme un mecanisme de detoxification
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Gofti-Laroche, Leila. "Évaluation du risque microbiologique hydrique : validation épidémiologique des fonctions dose-réponse du risque viral et parasitaire : étude EMIRA." Université Joseph Fourier (Grenoble), 2001. http://www.theses.fr/2001GRE18001.

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Iounes, Nadia. "Contribution à l'étude de l'impact des chlorophénols sur des espèces représentatives de l'environnement." Rouen, 1991. http://www.theses.fr/1991ROUE5030.

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Abstract:
Les effets écotoxicologiques du phénol et de 5 isomères de chlorophénols ont été étudiés à l'aide de trois bio-essais: un protozoaire (Colpidium campylum), une plante (Vicia lens) et un mammifère (souris). Les résultats de toxicité aiguë obtenus, sont étroitement corrélés à ceux fournis par d'autres bio-essais utilisant des organismes aquatiques, terrestres et des bactéries. L'étude de la pénétration des chlorophénols dans la lentille terrestre a montré que ces substances sont bien absorbées par la lentille et se trouvent sous forme libre et surtout conjuguée. Il a été également montré que ces substances organochlorées interfèrent dans la synthèse de certains constituants phénoliques naturels fondamentaux de la plante. Un essai original de toxicité cumulée chez les mammifères (souris Swiss), intéressant par sa courte durée (5 jours), a été mis au point. Il permet de renseigner sur les effets cumulatifs ou protecteurs d'une substance chimique. Les résultats montrent que le parchlorophénol et le dichlorophénol ne confèrent aux souris, ni effet cumulatif, ni effet protecteur. Le phénol et les chlorophénols supérieurs tri-, tétra- et pentachlorophénol confèrent par contre aux animaux un effet protecteur qui est d'autant plus important que la molécule est plus chlorée. L'impact hépatique, traduit par une hypertrophie hépatique, correspond à l'induction enzymatique reconnue pour ces substances
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Dibao-Dina, Alfred. "Élaboration d’un système in vitro de suivi en continu par spectroscopie d’impédance électrique de l’infection d’une lignée de cellules cancéreuses par un protozoaire parasite : Cryptosporidium parvum." Thesis, Lille 1, 2015. http://www.theses.fr/2015LIL10002/document.

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Abstract:
Le Cryptosporidium est la principale cause d’épidémies d’origine hydrique provoquées par des protozoaires parasites dans le monde. Dans cette thèse, nous montrons qu’il est possible d’utiliser la spectroscopie d’impédance électrique pour obtenir in vitro des informations sur le cycle de vie du Cryptosporidium infectant des cultures cellulaires et pour quantifier l’infectivité d’un inoculum. Des cellules HCT-8 (adénocarcinome humain) ont été cultivées dans des puits contenant un réseau d’électrodes interdigitées planaires jusqu’à confluence pendant 76 heures, puis infectées par le Cryptosporidium parvum pendant 60 heures. La réponse impédimétrique a été mesurée entre 100Hz et 1MHz avec une période d’échantillonnage de 7min. Au cours de l’infection, le signal d’impédance présente une série de pics distincts et reproductibles à 12, 23 et 31h post infection (PI) et de minima à 9, 19 et 28h PI. Une modélisation électrique par circuit équivalent révèle que ces variations peuvent être en partie expliquées par l’effet des interactions hôte-parasite sur les zones intercellulaires. En outre, nos données présentent pour la première fois un suivi en temps réel du développement précoce et homogène du parasite, où les phases de prédominance de formes invasives (i.e. zoïtes) et prolifératives (i.e. mérontes) s’alternent et sont respectivement observées aux pics et minima du signal impédimétrique. Finalement, en quantifiant l’amplitude de la réponse en impédance, nous montrons que ce dispositif peut également être utilisé comme un capteur d’infectivité, dont la réponse dès 12h PI s’avère au moins 4 fois plus rapide que d’autres techniques à l’état de l’art
Cryptosporidium is the main origin of worldwide waterborne epidemic outbreaks caused by protozoan parasites. In this thesis, we show that an in vitro electrical impedance-based device is able to get insights on Cryptosporidium life cycle on a cell culture and to quantify sample infectivity. HCT-8 cells (human adenocarcinoma) were grown to confluency on interdigitated microelectrode arrays during 76 hours and then infected by Cryptosporidium parvum during 60 hours. The impedimetric response was measured at frequencies ranging from 100Hz to 1MHz and a 7min sampling period. As the infection progresses, the impedance signal shows a reproducible distinct succession of peaks at 12, 23 and 31h post infection (PI), and minima at 9, 19 and 28h PI. An electrical equivalent circuit modeling-based approach indicates that these features can be partly explained by the effects of host-parasite interactions on intercellular areas. Furthermore, our data present for the first time a real-time monitoring of early homogeneous parasitic stage development with alternating invasive (i.e. zoites) and proliferative (i.e. meronts) form predominances, observed respectively at peaks and minima in the impedimetric signal. Finally, by quantifying the magnitude of the impedimetric response, we demonstrate this device can also be used as an infectivity sensor as early as 12h PI, thus being at least 4 times faster than other state of the art techniques
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Lantier, Louis. "Les cellules dendritiques CD103+ intestinales : maîtres d'oeuvres du contrôle naturel de la cryptosporidiose et cibles de choix pour l'immunostimulation protectrice contre la maladie." Thesis, Tours, 2013. http://www.theses.fr/2013TOUR4051.

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Abstract:
A la naissance, le système immunitaire des nouveau-nés est encore en plein développement. La première partie du travail de thèse a consisté à étudier les spécificités du système immunitaire intestinal des nouveau-nés qui conduisent à leur plus grande susceptibilité à l’infection par Cryptosporidium parvum. Ce protozoaire constitue un excellent modèle pour étudier les réponses immunitaires mucosales. En effet, son développement est restreint à l’épithélium intestinal et est strictement relié au statut immunitaire de son hôte ce qui explique que cet agent zoonotique affecte tout particulièrement les nouveau-nés et les immunodéficients. Nous avons démontré que les cellules dendritiques (DC) CD103+ étaient indispensables au contrôle de la phase aigüe de l’infection et que leur faible représentation dans la lamina propria de l’iléon chez les nouveau-nés était responsable de leur susceptibilité à l’infection. Nous avons identifié avec précision le mécanisme CXCR3 dépendant permettant le recrutement des DC CD1O3+ dans la muqueuse infecté et leur capacité à produire de l’IL-12 et de l’IFNdz, deux cytokines majeures impliquées dans le mécanisme de protection. La deuxième partie de ce travail a consisté à utiliser une stratégie d’immunostimulation basée sur l’utilisation de ligands de TLR capables d’activer fortement les cellules dendritiques du nouveau-né. Cette approche permet un contrôle rapide et très efficace d’une infection par C. parvum
At birth, the neonatal immune system is still developing. In the first part of the thesis we investigated the characteristics of the intestinal immune system of neonates that lead to their greater susceptibility to infection by Cryptosporidium parvum. This protozoan is an excellent model for studying mucosal immune responses. Indeed, its development is restricted to the intestinal epithelium and is strictly related to the immune status of its host which explains the particular susceptibility of neonates and immunocompromised to this zoonotic agent. We have demonstrated that CD103+ dendritic cells (DC) are essential for the control of the acute phase of infection and their low representation in the ileal lamina propria of neonates was responsible for their higher susceptibility to infection. We have accurately identified the CXCR3-dependent mechanism for the recruitment of DC CD1O3+ in the infected mucosa and their ability to produce IL -12 and IFNdz, two major cytokines involved in the mechanism of protection. The second part of this work was to use an immunostimulatory strategy based on administration of TLR ligands that can strongly activate neonatal DC of the intestine. This approach allows a fast and highly effective control of an ongoing C. parvum infection
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Rhalem, Abdelkébir. "Propriétés immunologiques des antigènes de deux parasites intestinaux (Nippostrongylus brasiliensis "nématode" et Eirmeria falciformis "protozoaire" rôle des antigènes de surfaces dans l'induction de l'immunité protectrice de la souris /." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376180297.

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Bogaerts, Philippe. "Utilisation du protozoaire cilie tetrahymena pyriformis comme agent de transformation d'un polluant organique, le lactoserum, et comme biotest permettant d'evaluer la toxicite de molecules chimiques et d'echantillons naturels." Clermont-Ferrand 2, 1998. http://www.theses.fr/1998CLF22054.

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Abstract:
Le protozoaire cilie tetrahymena pyriformis a ete utilise dans un double objectif. Le premier est de diminuer par voie biologique le pouvoir polluant du lactoserum, ceci afin de limiter son impact lors du rejet dans l'environnement. Des experiences en enceintes fermees (500 ml) ont montre les capacites des cilies a croitre sur ce substrat, a le biotransformer et a abaisser fortement sa dco. Les performances en bioreacteurs de deux litres sont similaires a ceux obtenus en erlen. Le deuxieme objectif a ete de mettre au point un biotest (test fda) permettant d'evaluer rapidement la toxicite de micro-polluants. Nous avons utilise les activites esterasiques non specifiques comme biomarqueur de toxicite. Les mesures de ces activites a l'aide d'un substrat fluorogenique, le diacetate de fluoresceine, nous ont permis d'evaluer la toxicite de treize ions metalliques et de vingt-deux substances organiques. La confrontation des resultats obtenues a l'aide de ce test a ceux acquis avec deux autres bioessais : le test microtox et le test d'inhibition du developpement des populations chez tetrahymena met en evidence une bonne sensibilite du test fda. Seule une forte correlation a ete observee pour les molecules organiques entre les resultats des deux tests utilisant le modele eucaryote. Les eventuelles relations entre certaines caracteristiques ioniques des metaux (capacite a se lier aux atomes de soufre, d'oxygene ou d'azote des biomolecules) ou entre le caractere hydrophobe des molecules organiques determine par le coefficient de partage 1-octanol/eau (k#o#w) et leur toxicite ont ete recherchees. Les trois tests ont ete appliques a l'etude des relations structure-toxicite dans le cas du diuron et de six de ces produits de bio et/ou phototransformation, ainsi qu'a l'etude du risque de pollution d'une riviere par les rejets d'une station d'epuration.
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Rhalem, Abdelkébir. "Proprietes immunologiques des antigenes de deux parasites intestinaux (nippo-strongylus brasiliensis nematode et eimeria falciformis protozoaire) : role des antigenes de surfaces dans l'induction de l'immunite protectrice de la souris." Paris 6, 1988. http://www.theses.fr/1988PA066508.

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Abstract:
Etude des antigenes de surface de nippostrongylus brasiliensis susceptibles d'induire une reaction immunitaire. L'immunisation de souris par ces antigenes induit une immunite protectrice. Deux proteines p43, p14 sont plus particulierement impliquees dans l'immunisation. Un protocole de vaccination identique a ete transpose avec succes chez la souris avec des antigenes de eimeria falciformis
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Brazard, Johanna. "Photoactivation femtoseconde de deux nouvelles protéines de la famille des cryptochrome/photolyase, issues de l'algue verte Ostreococcus tauri : photocycle ultrarapide et état signalant de la photophobie du protozoaire Blepharisma japonicum." Paris 6, 2009. https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-03184590.

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Abstract:
L’étude de la photoactivité de deux nouvelles flavoprotéines (OtPCF1 et OtCPF2) de l’algue verte Ostreococcus tauri, appartenant à la famille des cryptochromes et photolyases (CPF), a mis en évidence un transfert d’électron ultrarapide (OtCPF1 : 390 fs ; OtCPF2 : 590 fs) après excitation du chromophore flavine adénine dinucléotide (FAD) oxydée. Nous avons caractérisé un tryptophane comme donneur d’électron. Nous expliquons les étapes ultérieures par des transferts d’électron le long d’une chaîne de trois tryptophanes. Nous avons aussi analysé le transfert d’énergie au sein de OtCPF2. Des analyses par modélisation par homologie nous ont permis de rationaliser les résultats de spectroscopie transitoire ultrarapide. Le photocycle ultrarapide de OBIP - photorécepteur supposé du protozoaire cilié Blepharisma japonicum - a été expliqué par un modèle original impliquant un équilibre entre un état localement excité du chromophore (Oxyblépharismine) en interaction par liaison hydrogène avec un résidu proche et un état à transfert de charge intermoléculaire. Nous avons proposé que l’état signalant de la photophobie serait la forme déprotonée du chromophore.
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Travier, Laetitia. "CARACTERISATION DES PROTEINES DE GRANULES DENSES DE TOXOPLASMA GONDII :Etude des interactions protéiques et lipidiques et du rôle des hélices alpha-amphipatiques de GRA2." Phd thesis, Université Joseph Fourier (Grenoble), 2007. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00182730.

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Abstract:
A l'interface avec la cellule hôte, la vacuole parasitophore du parasite intracellulaire Toxoplasma gondii comprend plusieurs systèmes membranaires, dont un réseau de nanotubes formé suite à la sécrétion de la protéine de granules denses GRA2. Mes travaux ont montré, par des approches biochimiques, que les protéines GRA membranaires forment des complexes oligomériques qui pourraient expliquer leur solubilité dans les granules denses et lors de leur sécrétion dans la vacuole. Par des approches moléculaires et cellulaires, j'ai analysé l'importance relative des trois hélices alpha-amphipatiques de GRA2 dans son association post-sécrétoire au réseau de nanotubes, via la liaison potentielle de la protéine à des phosphoinositides, et dans la tubulation du réseau induite par GRA2. Ces travaux ont permis de proposer un modèle d'interaction de GRA2 avec les membranes et de formation des tubules membranaires du réseau de nanotubes.
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Vidal, Sophie. "La transmission transplacentaire des protozoaires." Paris 5, 1988. http://www.theses.fr/1988PA05P145.

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Pavlou, Georgios. "Toxoplasma gondii, un champion de course et un redoutable envahisseur. Etude des forces motrices et invasives." Thesis, Université Grenoble Alpes, 2020. http://www.theses.fr/2020GRALV023.

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Abstract:
Toxoplasma gondii est un microorganisme unicellulaire cosmopolite du phylum des Apicomplexa. Ce protozoaire a adopté un mode de vie parasitaire obligatoire et colonise un vaste répertoire d'animaux à sang chaud. Son succès se vérifie chez la population humaine chez laquelle il persiste après une phase aigue et de manière quasi-asymptomatique essentiellement dans les tissus des systèmes nerveux central et périphérique ou dans les muscles. Environ un tiers de la population humaine est ainsi à risque de complications sérieuses de toxoplasmose, essentiellement lors de dysfonctionnements du système immunitaire qui promeuvent une phase de multiplication microbienne non contrôlée. Le stade de développement responsable des dommages tissulaires s’appelle le tachyzoïte. Il s’agit d’une cellule polarisée mesurant plusieurs micromètres, caractérisée par un appareil apical composé de cytosquelettes et de vésicules sécrétoires spécifiques. C’est par son pôle apical que le tachyzoïte pénètre dans la cellule en injectant un complexe protéique qui s’insère dans la membrane plasmique et le cortex de la cellule hôte. Le complexe, considéré ici comme un nanodispositif invasif, définit une interface étroite ou jonction circulaire entre la membrane de la cellule hôte et le tachyzoïte. Cette jonction sert de porte d'entrée mais aussi de point d'ancrage à la force invasive que le parasite doit exercer pour se propulser au sein d’un bourgeon issu de la membrane plasmique hôte.Le travail de thèse documente des propriétés biomécaniques de la cellule tachyzoïte ayant trait au développement des forces exercées par cette dernière pour (i) se déplacer sur des substrats ou au sein de matrices en trois dimensions (3D) selon un mode de glissement ultra rapide, (ii) pénétrer en quelques secondes au sein d’un bourgeon membranaire dans la cellule hôte qui en fin d’invasion s’individualise comme une vacuole abritant le tachyzoïte.La première partie du travail s’appuie sur une combinatoire d’approches en microscopie, avec de la vidéomicroscopie ultra rapide en temps réel, de la mesure de force et de l’analyse des distances entre le substrat et la surface cellulaire, ceci aux échelles nanométrique et de la milliseconde. Les résultats ont mis en évidence l'intégration spatio-temporelle d'une plateforme d’adhésion apicale à partir de laquelle sont générées des forces de traction qui impliquent le système actomyosine du parasite.L’énergie produite par le couple actomyosine conduit à une force de type ressort suite à la torsion et relaxation des microtubules, et rend compte du glissement hélicoïdal à grande vitesse du tachyzoïte.La deuxième partie de la thèse s'appuie sur l'imagerie quantitative à haute vitesse en temps réel et sur un ensemble de lignées cellulaires conçues pour exprimer des marqueurs fluorescents d'intérêt, ainsi qu'à des tests d'invasion innovants conçus pour analyser l'étape d’individualisation de la vésicule d'entrée. Ces approches ont permis d'identifier la rotation particulière du tachyzoïte qui dirige la fermeture du dispositif invasif circulaire favorisant ainsi à la fois l'étanchéité et la libération de la vésicule d'entrée. Cet évènement de fission membranaire se produit en amont du nanodispositif et est indépendante des mécanoenzymes dynamines des cellules hôtes, une famille de protéines principalement impliquée dans la naissance des endosomes. L’ensemble des données étaye l'idée que le tachyzoïte a développé un nanodispositif invasif multifonctionnel qui, associé au torque final, imite l'activité de fission des dynamines. Enfin, la visualisation d’une réorganisation rapide des marqueurs de la membrane plasmique post-torsion a permis de proposer que celle-ci puisse également agir comme signal mécanique pour opérer la transition du mode de vie extracellulaire à celui intracellulaire.Les concepts et techniques introduits dans cette thèse pourront servir de base pour des études futures sur le comportement mobile et invasif de T.gondii
Toxoplasma gondii is a cosmopolite obligate intracellular Apicomplexa parasite that infects a wide repertoire of warm-blooded animals and virtually all nucleated cells. About a third of the human population carries the persistent stage of T. gondii, and is known at risk for life-threatening toxoplasmosis in case of immune-dysfunction. The invasiveness of the T. gondii tachyzoite developmental stage is a key determinant for expansion of the parasite population and accounts for the initiation of acute tissue damages associated with the disease. The tachyzoite is a several micrometer size bow-shaped cell that displays a robust polarity and is equipped with a typical apical apparatus made of cytoskeletal arrangements and specific secretory vesicles. With these attributes, the tachyzoite contact the host cell surface with the apical side and enters within a second time-scale into a budding entry vesicle by injecting a protein complex into and beneath the facing plasma membrane. The complex, seen here as an invasive nanodevice, defines a tight zoite-cell interface that bridges both cells through a circular junction. This tight Zoite-Cell Junction (ZCJ) serves therefore as a door of entry but also as an anchor point to withstand the parasite invasive force required to actively enter the host cell. In addition, its tightness acts as a molecular sieve to select for components from the plasma membrane able to flow into the budding entry vesicle.The PhD thesis brings new insights on the forces underlying (i) the peculiar mode of locomotion called helical gliding of free tachyzoite (ii) the host cell invasion event in particular at the end of the process thereby introducing conceptual and experimental biophysics framework. The first part combines high-speed quantitative live microscopy with force microscopy and Reflection Interference Contrast Microscopy and use micropatterning. These quantitative approaches have allowed unveiling the spatiotemporal integration of a unique polar anchoring adhesion and the traction-spring-torque triad forces that set the Toxoplasma thrust force required for high-speed helical gliding.The second part of the PhD relies on the quantitative high speed live imaging and on a set of both parasite and host cell lines engineered to express fluorescent markers of interest, in particular related to the ZCJ element, together with innovative invasion assays designed to monitor in detail the poorly documented pinching off step of the budding entry vesicle. Indeed this membrane fission event promotes the birth of a bona fidae sub-cellular compartment enclosing the tachyzoite, and further remodeled to support parasite growth. These approaches have allowed identifying the peculiar rotation of the tachyzoite along the long axis which imposes a twisting motion on the parasite basal pole and directs closure of the circular invasive device therefore promoting both sealing and release of the entry vesicle. Importantly membrane fission occurs upstream the site of the nanodevice insertion and is independent of the host cell mechanoenzymes dynamins, a protein family primarily involved in pinching off of the endocytic pits and thus in endosome birth. Overall, the work supports the view that the tachyzoite has evolved a multifunction invasive nanodevice, which together with the final torque mimics the fission activity of the dynamins. Finally, monitoring distinct host cell plasma markers and their rapid reorganization upon the tachyzoite twist allowed proposing that the latter could also act as an initial mechanical trigger for the transition to the intracellular lifestyle.In conclusion, this PhD work has succeeded in implementing new biophysics-based concepts and techniques to start unraveling the biomechanics of the T. gondii tachyzoite, in particular in the context of essential behaviors including (i) the navigation on 2D and within 3D substrates and (ii) the host cell invasion process
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Grattepanche, Jean-David. "Trophodynamisme des protozoaires microzooplanctoniques en Manche orientale." Littoral, 2011. http://www.theses.fr/2011DUNK0300.

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Abstract:
Le premier objectif de cette thèse est de caractériser la structure et la variabilité de la communauté des protistes hétérotrophes en Manche orientale, en relation avec les blooms phytoplanctoniques printaniers récurrents. Le second objectif est d’appréhender les relations trophiques existantes entre ce compartiment et les compartiments phyto-et zooplanctoniques. Dans un premier temps, un suivi de 2,5 ans (de février 2007 à juillet 2009) a été réalisé et a permis d’identifier (1) la variabilité saisonnière des protistes hétérotrophes liée à la dynamique des communautés phytoplanctoniques (bottom-up control) ; (2) leur variabilité d’une année à l’autre liée à l’amplitude du bloom de Phaeocystis globosa ainsi qu’à la durée de ce bloom ; (3) le rôle des dinoflagellés comme consommateurs principaux du phytoplancton en particulier de diatomées et de colonies de P. Globosa (<100 µm). Ce suivi a également suggéré le rôle des copépodes en tant que prédateurs des protistes hétérotrophes (top-down control). Dans un second temps, des expériences de dilution (printemps 2009) ont permis de confirmer les hypothèses du suivi. La consommation du microzooplancton était équivalente voire supérieure à la production phytoplanctonique. Les expériences ciblées sur les spectres de taille du phytoplancton ont montré un broutage de tailles de proies différentes pour les ciliés (<10 µm) et les dinoflagellés (>10 µm) suggérant alors une absence de compétition trophique. L’importance de l’hétérotrophie en Manche orientale a été confirmée par une expérience en microcosme (19 jours) entreprise à l’obscurité (14 jours). Le développement des protistes a été suivi, une semaine après, par les métazoaires. Ceci a mis en évidence les temps de réponse de ces deux compartiments planctoniques à leur ressource trophique et confirmé le rôle de la communauté des protistes hétérotrophes comme consommateurs de phytoplancton. Cette expérience a également permis d’estimer l’impact des métazoaires (en particulier des rotifères) sur les protozoaires microzooplanctoniques (prédation/compétition)
This PhD firstly aims to characterize the structure and variability of the heterotrophic protists community in the Eastern English Channel, in relation to the phytoplankton recurrent spring blooms and secondly to understand their trophic link with both phyto- and zooplankton. In situ survey was carried out from February 2007 to July 2009 and allowed to assess (1) the seasonal variability of heterotrophic protists related to the phytoplankton succession (bottom-up control) ; (2) the year to year variability in relation with Phaeocystis globosa bloom magnitude and duration ; (3) the importance of dinoflagellates as major consumers of phytoplankton, particularly of diatoms and P. Globosa colonies (<100 μm). This survey also suggested the top-down control on heterotrophic protists by copepods. Dilution ets carried out throughout the spring 2009 confirmed in situ observations. In fact, microzooplankton consumption often equalled or exceeded phytoplankton production. Results from size-fractionated dilution experiments revealed different size class of prey for ciliates (< 10 μm) and dinoflagellates (> 10 μm) suggesting the lack of trophic competition. The PhD then focused on the importance of heterotrophy in the Eastern English Channel via a dark microcosms experiment (19 days). This experiment confirmed that heterotrophic protists communities were efficient consumers of phytoplankton. Metazoans peaked one week delay after protists, suggesting time lag response to available trophic resource for these two groups. This experiment allowed to estimate the metazoan impact (particularly rotifers) on microplanktonic protozoans (predation/competition)
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Le, scanf Cécile. "Etude moléculaire et immunologique de deux variants antigéniques de Plasmodium falciparum induisant une réponse immune spécifique chez le singe Saimiri sciureus." Toulouse, INSA, 1996. http://www.theses.fr/1996ISAT0016.

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Abstract:
L'infection experimentale du singe saimiri sciureus a permis de montrer que la protection induite apres une premiere infection par un variant de plasmodium falciparum est specifique de variant. Dans ce travail, nous avons caracterise deux variants antigeniques (denommes o et r) de la lignee palo alto adaptee au singe splenectomise. Nos resultats indiquent que l'ultrastructure de la membrane du globule rouge infecte est differente pour ces deux variants, de meme que les proprietes d'adhesion (rosetting et autoagglutination) et le serotype de surface. Dans le but d'identifier des cibles de l'immunite specifique de protection, deux approches ont ete mises en uvre. (i) l'analyse de la composition antigenique des deux variants a montre qu'ils different par l'expression de pfemp1 et par le niveau d'expression d'au moins deux autres antigenes associes avec la membrane du globule rouge infecte: pfemp3 plus abondant chez les parasites r ; hrp1 plus abondant chez les parasites o. (ii) une analyse moleculaire fondee sur le criblage differentiel d'une banque genomique d'expression a permis d'isoler de nombreux clones exprimant des motifs antigeniques detectes preferentiellement par les serums anti-r. Seule une fraction de ces clones reagit avec les anticorps elues de la surface des globules rouges parasites. Parmi ceux-ci, des clones codant pour pfemp3 et pour des motifs riches en asparagine ont ete identifies. Nous avons montre que l'un des genes qui code pour une proteine riche en asparagine (celui defini par le clone 13) n'est exprime que par les parasites r. L'ensemble de ces resultats indique que le passage du phenotype o au phenotype r est associe a l'expression d'un nouvel antigene variant (pfemp1), a l'activation du gene 13, a l'augmentation des taux de pfemp3, et a la baisse des taux de hrp1. Ces donnees suggerent qu'en plus de l'antigene variant, la modulation de l'expression d'autres antigenes conserves participe a l'acquisition de l'immunite specifique de variant
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Potiron, Laurent. "Rôle des phagocytes mononuclées dans la réponse immunitaire innée contre cryptosporidium parvum." Thesis, Tours, 2016. http://www.theses.fr/2016TOUR3809.

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Abstract:
Les nouveau-nés (enfants, ruminants) sont particulièrement sensibles à l’infection intestinale par le parasite Cryptosporidium parvum car leur système immunitaire est encore en cours de développement. Peu de solutions de contrôle existent à ce jour. Il n’existe pas de vaccin et seule une molécule l’Halocur™ possède une AMM pour les veaux mais l’utilisation du traitement est contraignante et il peut présenter une toxicité pour l’animal. Le développement de nouvelles alternatives immunoprophylactiques requiert de mieux comprendre les mécanismes immunitaires mis en jeux lors de l’infection. L’immunité innée joue un rôle prépondérant pour le contrôle de la phase aigüe de l’infection et nous avions montré au laboratoire que les phagocytes mononucléés CD11c+ sont des acteurs déterminant dans le processus protection. Lors de cette thèse nous avons confirmé le rôle des cellules dendritiques (DC) CD103+ en utilisant des souriceaux BatF3-/- chez qui le développement des deux sous-populations CD103+CD11b+ et CD103+CD11b- est altéré au niveau intestinal ce qui rend les animaux beaucoup plus sensibles à l’infection
Newborns (children, ruminants) are particularly susceptible to intestinal infection by the parasite Cryptosporidium parvum because their immune system is still developing. To date, parasite control methods are limited. There is no vaccine and the only molecule which possess a marketing authorization for calves, Halocur ™, presents toxicity at 2 times the therapeutic dose. The development of new immunoprophylactic methods requires better understanding of the immune mechanisms occurring during infection. Innate immunity plays a major role in controlling the acute phase of infection and we previously demonstrated in the laboratory that intestinal mononuclear phagocytes CD11c+ are key players in the protection process. In this thesis, we confirmed the role of dendritic cells (DC) CD103+ using mice BatF3-/- in which the development of the two DC subsets CD103+CD11b+ and CD103+CD11b- is altered in the intestine making these animals more susceptible to infection. This high susceptibility can be partially mitigated by preventive administration of IL-12 to Batf3-/- neonatal mice. Batf3-/- adult mice which are only deficient for the CD103+CD11b- DC subset were transiently susceptible to infection in contrast to conventional mice that are highly resistant
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Le, Dû Anne. "Application de tests protozoaires dans l'évaluation du risque en milieu aquatique." Rouen, 1992. http://www.theses.fr/1992ROUEO7TP.

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Abstract:
Les études menées ont permis d'optimiser le test protozoaire d'eau douce Colpidium campylum. Compatible avec les exigences de l'analyse en routine, d'apprentissage facile, discriminant et sensible sur les échantillons naturels, c'est un test qui pourrait avantageusement compléter les tests normalisés appliqués au milieu aquatique. Cependant, face à la complexité des phénomènes de pollution dans le milieu naturel, inhérents surtout à la persistance, la dégradation et le mélange des toxiques, il est apparu essentiel de développer une voie d'investigation plus informative que la mesure ponctuelle de toxicité. Appliqués aux mesures biologiques et chimiques, les plans factoriels couplés à l'analyse de données permettent de mettre en évidence des phénomènes interactifs. Cette démarche, applicable à tout test miniaturisé, permet de hiérarchiser au sein des rejets et aux eaux réceptrices les acteurs responsables du risque de pollution. Des priorités de traitement peuvent alors être efficacement établies, notamment sur la base de critères écotoxicologiques de qualité des eaux. Enfin, afin de limiter en partie les lacunes en milieu marin, le développement d'un test protozoaire marin Pseudocohnilembus marinus, a été initié. Le protocole établi offre la possibilité d'aborder l'évaluation du risque en estuaire et à la côte telle que nous l'avons définie pour l'eau douce
Tis study allowed us to optimize the freshwater protozoan test Colpidium campylum Compatible with routine work, easy to learn, discriminant ont the natural samples, it is bioassay which could advantageously complete the standard protocols used for aquatic toxicity detection. But, in front of the complexity of the pollution phenomena in the environment, mostly due to the persistence, the degradation and the mixture of toxicants, it is appared important for us to develop a way of study more informative than the ponctual acute toxicity measure. Applied to the biological and chemical measures, the factorial experiments and the data analysis allow to detect interactions between variables studied. The kind of invesitigation, aplicable to all miniaturezed bioassay, gives the ability to grade in the waste such as inn the receiving waters, the main factors responsible of the risk in the aquatic environment. Priorities of treatment could be established efficiently on the base of ecotoxicological criteria. At least, in order to limit the lack in the marine environment about tests, we have tried to develop a marine protozoan test Pseudocohnilembus marinus. The protocol defined gives the ability to evaluate the risk in the estuary and near the coast such as we have done for the fresh water
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Gay, Andrieu Françoise. "Apport de la cytométrie en flux à l'étude des interactions hôtes-protozoaires." Lyon 1, 2001. http://www.theses.fr/2001LYO1T097.

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Palos, Ladeiro Mélissa. "Interactions protozoaires – moule zébrée (Dreissena polymorpha) : implication en biosurveillance sanitaire et environnementale." Thesis, Reims, 2014. http://www.theses.fr/2014REIMS005/document.

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Abstract:
L'évaluation de la contamination des cours d'eau par les agents parasites protozoaires est fondamentale puisqu'on estime qu'une personne sur deux dans le monde est ou a été infectée par une zoonose d'origine parasitaire. Les trois principaux parasites responsables d'épidémies hydriques sont Cryptosporidium parvum, Giardia duodenalis et Toxoplasma gondii. Actuellement, seule la matrice eau est utilisée pour analyser la présence de ces parasites dans l'environnement aquatique. Peu reproductible et chronophage, cette méthode ne permet pas de mettre en place une surveillance de routine. Le projet de thèse propose l'utilisation de la moule zébrée, Dreissena polymorpha, comme un nouvel outil complémentaire pour évaluer la qualité biologique des milieux d'eau douce. Au travers d'expérimentations combinant différentes approches in vivo, ex vivo et in situ, le potentiel de la dreissène à accumuler les parasites protozoaires ainsi que leurs cinétiques d'accumulation dans les tissus ont été déterminés. Utilisée comme espèce sentinelle des contaminations chimiques, l'effet d'un stress biologique dû aux protozoaires a été évalué au laboratoire sur les cellules clefs de l'immunité des bivalves, les hémocytes. Ainsi, le projet permet de placer l'organisme Dreissena polymorpha dans une double stratégie de biosurveillance : une biosurveillance sanitaire liée à l'utilisation de la dreissène en tant que vecteur de parasites considérés comme enjeux de santé publique et une biosurveillance environnementale liée à la compréhension des facteurs de confusion avec les réponses biologiques utilisées comme biomarqueurs
Assessment of the water biological contamination by protozoa is crucial since one in two person of the world population is or has been infected by a parasitic zoonosis. The main protozoa responsible of waterborne outbreaks are Cryptosporidium parvum, Giardia duodenalis and Toxoplasma gondii. Currently, protozoa detection is only based on water analysis. Irrelevant and time consuming, water analysis do not permit accurate biomonitoring. These project aims to use the freshwater mussel, Dreissena polymorpha, as a new complementary tool for biological quality analysis of freshwater. Through in vivo, ex vivo and in situ experiments, we determine the utility of zebra mussel for protozoa accumulation and their accumulation pattern within mussel tissues. Already use as a sentinel specie for chemical contamination, biological stress caused by protozoa has been determined in laboratory experiments on key cells of bivalve immunity, the hemocytes. Hence, Dreissena polymorpha could be involved in a twofold biomonitoring tactics: sanitary biomonitoring related to the use of zebra mussel as vector to protozoa with public health issue and environmental biomonitoring on understanding of the confounding factors in biological responses used as biomarkers
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Diogon, Marie. "Contribution à l'étude du cytosquelette et de son rôle dans la morphogenèse corticale chez les Ciliés Paramecium et Tetrahymena." Clermont-Ferrand 2, 2002. http://www.theses.fr/2002CLF21336.

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Abstract:
Le cortex de nombreux protozoaires Ciliés renferme un squelette membranaire complexe dont l'élément majeur est l'épiplasme, localisé sous la membrane alvéolaire interne. Le travail présenté dans ce mémoire est une contribution à l'étude des constituants protéiques du squelette membranaire et de leur rôle dans la morphogenèse corticale chez les deux Ciliés Tetrahymena et Paramecium. La première partie porte sur la caractérisation de composants non-épiplasmiques chez Tetrahymena, c'est-à-dire, les centrines (membres de la famille des protéines EF-Hand liant le calcium) et les antigènes E6 (protéines péricinétosomiennes). Nous montrons une réorganisation des structures impliquant ces protéines lors de la stomatogenèse, en particulier lors du processus de transformation microstome-macrostome chez T. Paravorax. Dans une seconde partie, nous avons réalisé des tests immunologiques avec différents anticorps monoclonaux dirigés contre les protéines du squelette membranaire des deux Ciliés T. Pyriformis et P. Tetraurelia. Les résultats suggèrent l'existence de protéines communes au squelette membranaire des deux Ciliés. Notamment, nous montrons des parentés antigéniques entre les protéines péricinétosomiennes de Tetrahymena (antigènes E6) et certaines protéines épiplasmiques de Paramecium. Deux gènes homologues codant pour les protéines épiplasmiques de P. Tetraurelia ont été clonés et séquencés. Les deux protéines sont caractérisées par la répitition de deux motifs QXVV et QPVQ et ne présentent aucune homologie avec les séquences répertoriées dans les banques de données
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Vinckier, Daniel. "Différentiation cellulaire chez les microsporidies : étude ultrastructurale du développement de Nosemoides vivieri V.D. et P. et Nosema apis Zander et mise en évidence de l'évolution des systèmes membranaires par la technique de cryofracture." Lille 1, 1990. http://www.theses.fr/1990LIL10050.

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Abstract:
Les microsporidies Nosemoides vivieri et nosema apis sont des protozoaires parasites intracellulaires obligatoires, dont tous les stades du cycle sont en contact direct avec le cytoplasme de la cellule-hôte. Ce cycle est caracterisé par l'alternance de deux phases: une phase végétative (ou mérogonie) à structure cellulaire non specialisée pendant laquelle le parasite croît et se multiplie activement, et une phase sporogonique (ou sporogonie) aboutissant a la formation de la spore qui montre une structure complexe hautement différenciée. En effet celle-ci contient le germe infectieux ou sporoplasme, mais aussi tout l'appareil nécessaire à son inoculation dans la cellule-hôte. L'étude ultrastructurale des différents stades du cycle : mérontes, sporontes, sporoblastes et spores montre le rôle primordial des vésicules golgiennes et du réticulum endoplasmique dans la genèse des différents organites de la spore : sac polaire, filament polaire, polaroplaste, vacuole postérieure. La cryofracture confirme, chez Nosema apis, les résultats obtenus en ultrastructure classique et met en evidence l'évolution des systèmes membranaires tout au long du cycle du parasite, en particulier les modifications intervenant au niveau de la membrane plasmique au cours de la transformation sporoblastique
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Geba, Elodie. "DROPPE - la DReissène comme Outil éPurateur des Protozoaires dans les Effluents de STEP." Thesis, Reims, 2019. http://www.theses.fr/2019REIMS041.

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Abstract:
Les effluents de station d’épuration (STEP) sont le siège de nombreuses contaminations chimiques et biologiques avec des traitements mis en place inefficaces pour certaines d’entre elles. Parmi les contaminants biologiques, certains font l’objet de nouvelles recherches, comme c’est le cas pour trois parasites protozoaires pathogènes de l’espèce humaine : Toxoplasma gondii, Cryptosporidium parvum et Giardia duodenalis. En effet, ces protozoaires sont clairement identifiés comme des priorités de santé publique puisqu’ils correspondent aux trois principaux parasites responsables d’épidémies hydriques. Ce travail de thèse a pour but d’étudier l’utilisation de Dreissena polymorpha, un mollusque bivalve d’eau douce (moule zébrée), en tant qu’outil de bioremédiation des protozoaires en effluent de STEP. Pour cela, la cinétique d’accumulation et de dépuration des dreissènes vis-à-vis de ces trois protozoaires d’intérêt a été caractérisée sur 21 jours, afin d’évaluer leur capacité de bioextraction. La survie et le maintien des moules zébrées en effluent de STEP ont également été évalués in situ. Ces expérimentations ont permis de montrer que la dreissène survit en effluent de STEP mais est également capable d’extraire et d’intégrer sur le long terme les protozoaires présents dans le milieu. Des expériences complémentaires ont été réalisées afin de mieux comprendre le devenir des parasites bioaccumulés par la dreissène en terme de viabilité et d’infectiosité. Ce travail souligne l’intérêt de Dreissena polymorpha en tant qu’outil de bioremédiation des protozoaires, en particulier en effluent de station d’épuration
Wastewater treatment plant (WWTP) effluents are the source of many chemical and biological contaminations, and the treatments used are inefficient for some of them. Among biological contaminants, some are the focus for new research, such as three human pathogenic protozoan parasites: Toxoplasma gondii, Cryptosporidium parvum and Giardia duodenalis. Indeed, these protozoa are clearly identified as public health priorities since they correspond to the three main parasites responsible for waterborne outbreaks. The aim of this doctoral work is to investigate the use of Dreissena polymorpha, a freshwater bivalve mollusc (zebra mussel), as a tool for bioremediation of protozoa in WWTP effluent. For this, the kinetics of protozoa accumulation and depuration by zebra mussel were characterized over 21 days, in order to evaluate the bioextraction capacity of this bivalve. The survival and health status of zebra mussels in WWTP effluent were also assessed in situ. These experiments showed that mussels survived in WWTP effluent and were also capable of extracting and integrating the protozoa present in the environment. Additional experiments were carried out to better understand the fate of parasites bioaccumulated by D. polymorpha as regards viability and infectivity. This work highlights the interest of Dreissena polymorpha as a tool for bioremediation of protozoa, particularly in wastewater treatment plant effluent
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Palka, Laurent. "Rôle des protozoaires bactériophages du sol dans la minéralisation de l'azote en conditions gnobiotiques." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37617299q.

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Palka, Laurent. "Role des protozoaires bacteriophages du sol dans la mineralisation de l'azote en conditions gnotobiotiques." Clermont-Ferrand 2, 1988. http://www.theses.fr/1988CLF21150.

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Abstract:
Dans le cadre de populations experimentales comprenant un couple predateur-proie. C. Aspera et p. Fluorescens, l'etude du role du protozoaire dans la mineralisation de l'azote a montre que les cilies n'excretent pas de n-nh::(4)**(+), quelle que soit la densite bacterienne. Ils rejetent 70 a 90% de l'azote bacterien ingere, ainsi ils assurent un recyclage de l'azote immobilise dans la biomasse bacterienne et activent sa mineralisation
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Hohweyer, Jeanne. "Contamination des mollusque bivalves et des végétaux par les protozoaires Cryptosporidium, Giardia et Toxoplasma." Thesis, Reims, 2013. http://www.theses.fr/2013REIMM203/document.

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Abstract:
Les infections d'origine alimentaire constituent un problème de santé publique majeur et présentent un impact économique important. Les agents pathogènes incriminés peuvent être d'origine bactérienne, virale ou parasitaire. Les conséquences de ces infections sur la santé des consommateurs peuvent être majeures, en fonction du statut immunitaire de chaque individu et de la provenance de l'agent infectieux, la mondialisation ayant accru les risques de dissémination de pathogènes viables virulents. Les denrées à risque sont principalement les aliments frais consommés crus ou peu cuits. Ceux-ci sont irrigués en continu durant leur croissance par des eaux pouvant être potentiellement contaminées par des agents infectieux.Au cours de ce travail, nous avons développé une stratégie d'extraction et de détection des parasites Toxoplasma gondii, Cryptosporidium et Giardia à partir de basilic et de framboise. Nous avons pour cela développé une technique d'immuno-capture des oocystes de Toxoplasma gondii grâce à un anticorps monoclonal dirigé contre la paroi des oocystes ainsi que des techniques de détection des trois parasites par qPCR. Ces protocoles ont été validés par des essais inter-laboratoires avec la participation de quatre laboratoires partenaires de ce projet. Nous avons par la suite cherché à mieux appréhender les risques réels pour les consommateurs en réalisant une étude mettant en parallèle une Reverse transcriptase PCR avec des essais in vivo, permettant ainsi de mettre en corrélation la viabilité des parasites avec leur infectiosité.Ce travail contribue à mieux maitriser les risques sanitaires liés à la présence de parasites dans lesdenrées alimentaires , par le biais d'une stratégiesusceptible d'être proposée aux industriels et normalisée
Foodborne infections are a major public health problem and have a significant economic impact. Pathogens implicated in these outbreaks can be bacteria, viruses and parasites. Their impact on the consumer's health can be significant, depending on the immune status of the person and the pathogen source. Globalization has increased the risk of spreading of viable and virulent . The food at risk is mainly fresh food, eaten raw or undercooked, which has been widely irrigated by potentially contaminated waters during production. In this study, we have developed methods to extract and detect Toxoplasma gondii, Cryptosporidium and Giardia parasites from basil and raspberry with techniques able to detect the three parasites by qPCR. In this aim, we have developed a technique for the immuno-capture of Toxoplasma gondii oocysts using a monoclonal antibody directed against the oocyst wall. These protocols have been validated by interlaboratory trials with the participation of four laboratories involved in the same project. We have subsequently sought to better understand the real risks for consumers by undertaking a study of Reverse transcriptase PCR in parallel with in vivo, thus allowing to correlate the viability of parasites with their infectivity. This work contributes to a better control of health risks associated with food and presence of parasites, through a strategythat could be standardized and offered to industrial partners
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