Academic literature on the topic 'Récepteur β-adrénergique'

Introduction: Adenosine 5′-triphosphate (ATP) is a ubiquitous cellularenergy source. We evaluated the effect of ATP and its analogueson nonadrenergic and noncholinergic relaxation in precontractedhuman corpus cavernosal smooth muscle (HCCSM).Methods: We obtained specimens of human corpus cavernosum(HCC) from patients undergoing penile prosthesis surgery (patientage 46–70 yr, n = 17) with prior approval from the local institutionalreview board. Isolated HCC strips were placed in organbaths containing Krebs solution and functional experiments wereconducted. Immunohistochemical localization studies were performedto establish the presence of purinergic P2X1, P2Y1 andP2Y2 receptors in HCC.Results: The amplitude of relaxation induced by electrical-fieldstimulation (EFS) on HCC was significantly increased after exposureto ATP (P2X and P2Y agonists), 2-MeSATP (P2Y1 agonist), and uridine5’ triphosphate (P2Y2 agonist), but not α,β-methylene ATP(P2X1 agonist). The P2X1 antagonist pyridoxal-5’-phosphate-6-azophenyl-2’, 4’-disulfonate, and the nonspecific P2Y antagonist,reactive blue 2, did not inhibit the potentiated response of EFS onHCC. Although immunoreactivity for both P2Y1 and P2Y2 receptorswas localized abundantly in HCC, there was only low-levelimmunostaining for the P2X1 receptor.Conclusion: These data demonstrate that nerve-mediated relaxation ofHCCSM strips precontracted with phenylephrine in organ bath preparationsis amplified by stimulating purinergic P2Y1 and P2Y2 receptors.Although nucleotides are important regulators of HCCSM tone, theseobservations suggest an independent purinergic relaxing mechanismin the HCC, separate from the better known nitrergic system.Introduction : L’adénosine 5’-triphosphate (ATP) est une sourced’énergie cellulaire générale. L’effet de l’ATP et de ses analoguessur le relâchement non adrénergique et non cholinergique du musclelisse précontracté du corps caverneux a été évalué.Méthode : Des échantillons de corps caverneux humains (CCH)ont été obtenus à partir de patients porteurs d’une prothèse pénienne(âgés de 46 à 70 ans, n = 17) avec l’approbation préalabledu comité d’éthique de l’établissement. Des bandes isolées deCCH ont été placées dans des bains organiques contenant unesolution de Krebs et des expériences fonctionnelles ont ensuite étéréalisées. On a eu recours à des tests de localisation immunohistochimiquepour déceler la présence des récepteurs purinergiquesP2X1, P2Y1 et P2Y2 dans les échantillons de CCH.Résultats : L’ampleur du relâchement produit par stimulation électriquedes échantillons de CCH a été significativement accrue aprèsexposition à l’ATP (agoniste des récepteurs P2X et P2Y),à la 2-MeSATP (agoniste du récepteur P2Y1) et à l’UTP (agonistedu récepteur P2Y2), mais pas à la α,β-MeATP (agoniste du récepteurP2X1). L’antagoniste du récepteur P2X1, le pyridoxal-5'-phosphate-6-azophényl-2’, 4’-disulfonate, et l’agoniste nonspécifique du récepteur P2Y, le bleu chimiquement réactif, n’ontpas inhibé la réponse potentialisée par stimulation électriquedes bandes de CCH. Même si une immunoréactivité des récep teursP2Y1 et P2Y2 a été grandement notée dans les bandes de CCH, onn’a obtenu qu’une faible immunocoloration pour le récepteur P2X1.Conclusion : Ces données montrent que le relâchement par voienerveuse des bandes de CCH précontractées par phényléphrinedans des bains organiques est amplifié par la stimulation des récepteurspurinergiques P2Y1 et P2Y2. Bien que les nucléotides constituentdes facteurs importants de régulation du tonus des CCH,ces observations portent à croire à l’existence d’un mécanismeindépendant de relâchement purinergique distinct du système nitrergiquemieux connu.

RésuméDes lès premières années d'utilisation clinique des antidépresseurs, les neurones à sérotonine (5-HT) et à noradrénaline (NA) ont été considérés comme les sites d'action privilégiés de ces médicaments.En vingt ans, les idées sur leurs mécanismes d'action ont évolué parallèlement à la progression des connaissances et à l'obtention de nouvelles molécules actives :- Tout d'abord, les effets présynaptiques des traitements aigus (inhibition des monoamines oxydases et inhibition de la recapture des monoamines par les antidépresseurs tricycliques) ont paru expliquer l'effet clinique de ces substances.- Plus tard, les effets post-synaptiques des traitements chroniques (désensibilisation des récepteurs β-adrénergiques et, dans la plupart des cas, la désensibilisation des récepteurs 5-HT2) se sont avérés être une action biochimique commune de ces traitements.- Récemment, les effets synaptiques homologues - en l'occurrence la desensibilisation des récepteurs α2-adrénergiques - ont été considérés comme un préalable à la désensibilisation des récepteurs β-adrénergiques post-synaptiques.- Enfin, les effets synaptiques hétérologies sont proposés comme pouvant rendre compte de Taction clinique des antidépresseurs.C'est la stimulation - directe ou indirecte - des récepteurs sérotoninergiques (5-HT2) qui serait nécessaire à l'obtention d'un découplage β lors d'une stimulation des récepteurs β-adrénergiques.Les molécules antidepressives n'auraient d'action thérapeutique qu'à condition d'agir de façon synergique sur les transmissions sérotoninergique et noradrénergique.

Le récepteur β-adrénergique des érythrocites de dinde a été identifié et caractérisé par deux approches, l'une biochimique et l'autre immunochimique et des nouveaux outils ont été développés pour l'étude des relations structure-fonction du récepteur. Le récepteur β-adrénergique des membranes d'érythrocites de dinde a été identifié par le ligand photoactivable iodocyanopindolol-diazirine marqué à l'iode 125. Deux polypeptides de masse moléculaire apparente 50kDa et 42kDa ont été marqués de manière spécifique. Le polypeptide de 42kDa provient du polypeptide de 50kDa par une protéolyse qui s'accompagne de la perte de la chaine glycosylée située sur l'extrémité N-terminale de la forme 50 kDa. Après solubilisation par la digitonine, le polypeptide de 42kDa a été purifié à homogénéité en deux étapes : par chromatographie d'affinité sur un gel où a été immobilisé l'antagoniste alprénolol, puis par électroélution d'un gel de polyacrylamide. Le site de fixation du ligand photoactivable iodocyanopindolol-diazirine a pu être localisé dans la région contenant les domaines transmembranaires VI et VII et serait un résidu acide aspartique. Des anticorps ont été produits contre les récepteurs β-adrénergiques. Après immunisation avec du récepteur β₁-adrénergique partiellement purifié à partir des érythrocites de dinde, un anticorps monoclonal a été sélectionné; celui-ci immunoprécipite le récepteur marqué par affinité et reconnait le récepteur en immunoempreinte. Il semble dirigé contre un épitote intramembranaire ou cytoplasmique. Après la détermination des séquences des récepteurs β₁-adrénergiques de dinde et des récepteurs β₁ et β₂-adrénergiques humains, des anticorps ont été produits contre des peptides synthétiques dérivés de ces séquences. Ces peptides sont situés sur des boucles intra-ou extracellulaires d'après le modèle de repliement transmembranaire des récepteurs β-adrénergiques qui a été proposé d'après le profil d'hydropathicité de ces protéines. Ces anticorps reconnaissent les récepteurs entiers dénaturés. Les anticorps dirigés contre la deuxième boucle extra-cellulaire du récepteur β₁-adrénergique humain interfèrent avec la liaison du ligand agoniste isoprotérénol sur le récepteur. Ces anticorps anti-peptides, ainsi que le marquage par affinité, ont été utilisés pour caractériser les récepteurs β-adrénergiques exprimés dans la bactérie Escherichia coli après fusion des génes codant pour les récepteurs β-adrénergiques avec le gène lamB codant pour la protéine de la membrane externe de la bactérie LamB. Ainsi ont également pu être localisés la protéine de fusion et le récepteur actif dans les différents compartiments cellulaires de la bactérie.

L'expression fonctionnelle du récepteur β3-adrénergique dans le myocarde humain a récemment été décrite. La stimulation de ce récepteur provoque une diminution de la force de contraction, réponse opposée à celle de la stimulation β1- et β2-adrénergique. Cet effet inotrope négatif implique une protéine Guo sensible à la toxine pertussique (PTX). Nous avons montré que cet effet contractile résulte de l'activation d'une NO synthase (NOS) et de l'augmentation du taux de GMPc intracellulaire. Dans un système d'expression recombinant, nous avons identifié le premier effecteur canal ionique du récepteur β3-adrénergique, le canal chlore CFfR (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator). La régulation de CFfR par le récepteur β3-adrénergique est indépendante de la voie AMPc/PKA, mais implique une protéine Giio sensible à la PTX. Nos résultats suggèrent que cette régulation ne nécessite pas l'activation d'une NOS, ni la présence d'une protéine cytosolique, le NHE-RF (Na+IH+ Exchanger Regulator Factor). L'activation du courant chlore CFfR pourrait expliquer, au moins en partie, la diminution de la durée du potentiel d'action induite par la stimulation B3-adrénergique. Par une approche pharmacologique, nous avons également mis en évidence l'expression fonctionnelle du récepteur β3-adrénergique dans l'aorte de rat. Sa stimulation induit une vasorelaxation dépendante de l'endothélium, de l'activation d'une NOS endothéliale et d'une augmentation du taux de GMPc intracellulaire. La caractérisation du récepteur β3-adrénergique dans le système cardio-vasculaire nous a permis de mettre en évidence de nouvelles voies de signalisation de ce récepteur
A functional β3-adrenoceptor has been recently described in the human heart. The β3- adrenoceptor stimulation, in contrast to that of β1- and β2-adrenoceptors, decreases cardiac contractility through a pertussis toxin (PTX) sensitive Guo protein. We have shown that this negative inotropic effect involves a NO Synthase (NOS) activation and an increase in intracellular cGMP level. For the first time, a channel, CFfR (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator), is described as a β3-adrenoceptor effector. Furthermore, we have shown, in a heterologous mammalian expression system, that the regulation of CFfR chloride conductance by the β3-adenoceptor is independent of the cAMP/PKA pathway, but involves a PTX sensitive Giio protein. We also suggest that this regulation is not mediated by NOS and does not imply the cytosolic protein NHE-RF (Na+IH+ Exchanger Regulator Factor). Activation of CFfR could explain in part the decrease in action potential duration induced by the β3-adrenoceptor stimulation. Pharmacological tools allowed us to demonstrate that the β3-adrenoceptor is expressed in the rat aorta. The β3-adrenoceptor stimulation induces a vasorelaxation which depends on the endothelium and is mediated through the activation of a NOS pathway and an increase in intracellular cGMP level. The β3-adrenoceptor characterization in the cardiovascular system provides new cellular coupling pathways for this receptor

Dans le cœur, l’activation aiguë de la voie AMPc/PKA via la stimulation des récepteurs β-adrénergiques (β-ARs) permet de réguler la contraction cardiaque alors que l’activation chronique de cette voie est délétère, car elle est source de survenue d’arythmies cardiaques et de remodelage hypertrophique du cœur. Au niveau des cardiomyocytes, Il existe principalement deux sous-types de récepteurs β-ARs ; β1- et β2-ARs, qui exercent des effets différents sur la fonction cardiaque.Dans une première partie de ma thèse, je me suis intéressé à l’étude du rôle des récepteurs β1- et β2-ARs dans la régulation différentielle de l’activité PKA cytoplasmique et nucléaire. J’ai ainsi pu montrer que contrairement aux récepteurs β1-ARs qui ont la capacité d’activer la PKA au niveau du cytoplasme et aux noyaux, les récepteurs β2-ARs activent la PKA uniquement au niveau du cytoplasme, et ce indépendamment de la capacité des récepteurs β2-ARs à induire une augmentation des niveaux d’AMPc dans les noyaux. En accord avec ces résultats, les récepteurs β1- mais pas β2-ARs activent le facteur pro-apoptotique régulé par la PKA, ICER.Dans une seconde partie de ma thèse, je me suis intéressé aux différents mécanismes responsables de l’incapacité des récepteurs β2-ARs à activer la PKA au niveau des noyaux. Mes résultats soulignent le rôle de la localisation des récepteurs β2-ARs au niveau des cavéoles, leurs couplage aux protéines Gi, leurs désensibilisation par la GRK2 ainsi que la dégradation de l’AMPc généré par ces récepteurs par la PDE3 et 4 dans la régulation de la signalisation PKA cytoplasmique et pointent vers la PDE4 comme un régulateur central permettant de limiter l’activation de la PKA holoenzyme responsable des réponses PKA nucléaires. Mes résultats montrent également que la mAKAP est un élément clé dans la transduction de la signalisation PKA nucléaire induite par les récepteurs β2-ARs et à un moindre degré, les récepteurs β1-ARs. Dans la dernière partie de ma thèse, j’ai étudié le remodelage de la signalisation PKA nucléaire induite par les récepteurs β1- et β2-ARs au cours de l’insuffisance cardiaque. J’ai ainsi pu montrer qu’en plus de la diminution de la signalisation PKA nucléaire induite par les récepteurs β1-ARs, il existe une signalisation PKA nucléaire de novo induite par les récepteurs β2-ARs dans les cardiomyocytes de rat adulte insuffisants.En conclusion, ce travail a mis à jour une nouvelle différence entre les récepteurs β1- et β2-ARs dans la signalisation PKA au niveau des noyaux des cardiomyocytes de rat adultes, et souligne le rôle important de la PDE4 et de la mAKAP dans la régulation de la signalisation PKA nucléaire induite par les récepteurs β2-ARs
In the heart, acute activation of the cAMP/PKA pathway upon stimulation of β-adrenoceptors (β-ARs), plays a fundamental role in the regulation of cardiac function, whereas chronic activation of this pathway is deleterious, as it is responsible for cardiac arrhythmias and hypertrophic remodeling of the heart. In cardiac myocytes, there are mainly two subtypes of β-ARs: β1- and β2-ARs, which exert different effects on cardiac function.In the first part of my thesis, my work was focused on understanding the role of β1- and β2-ARs in the differential regulation of cytoplasmic and nuclear PKA activity. Hence, I have showed that unlike β1-ARs which have the capacity to induce the activation of PKA in the cytoplasm and the nucleus, β2-ARs induce the activation of PKA only in the cytoplasmic compartment, regardless of their ability to induce an increase in cAMP in the nuclei. Consistently, β1- but not β2-ARs were able to induce the activation of the pro-apoptotic factor regulated by PKA, ICER.The second aim of my thesis was to decipher the different mechanisms involved in the inability of β2-ARs to activate PKA in the nucleus. I concentrated my efforts on investigating the role of the localization of β2-ARs in caveolae, their coupling to Gi proteins, their desensitization by GRK2 as well as the hydrolysis of cAMP by PDE3 and 4 in the regulation of β2-AR-induced cytoplasmic PKA activity. My results point to PDE4 as a central regulator which limits the activation of the PKA holoenzyme pool involved in the nuclear PKA responses. My results also show that mAKAP is a key component of nuclear PKA signaling induced by β2-ARs and to a lesser extent by β1-ARs. In the last part of my thesis, I have studied the remodeling of nuclear PKA signaling induced by β1- and β2-ARs that occurs during heart failure. I showed that, besides a decrease in β1-AR-induced nuclear PKA signaling, there is a de novo β2-AR-induced nuclear PKA signaling in cardiomyocytes from rat with heart failure.In conclusion, this work uncovers a new difference in PKA signaling between β1- and β2-ARs at the nuclear compartment of adult rat cardiomyocytes and underlines the importance of PDE4 and mAKAP in the regulation of β2-AR-induced nuclear PKA signaling

Différents modèles de souris transgéniques surexprimant une des protéines du système -adrénergique (récepteur -ar, protéine gs ou -ark) dans le cur, ont été établis dans le cadre d'études des cardiomyopathies. Notre modèle de souris transgéniques (f28) porte le gène du 2-ar humain sous le contrôle de son promoteur naturel. Il a été produit dans le but d'avoir un modèle d'étude in vivo chez lequel on retrouve une distribution des 2-ars qui ressemble le plus possible a celle decrite chez l'homme. Dans une première partie de notre étude nous avons caractérisé chez les souris f28 l'expression du transgène dans plusieurs tissus cibles des catécholamines, en les comparants aux souris contrôles. Nous avons montré que le transgène est transcrit en messagers h2-ars spécifiques, dans le cur, le muscle, le poumon, le cerveau et le foie de souris f28, mais pas dans le rein et la rate. Leur profil de distribution tissulaire diffère de celui des arnm 2-ars de souris (m2-ars), et leur taille est supérieure à celle des messagers décrits chez l'homme et la souris. Ces messagers sont traduits en protéines, et les récepteurs transgéniques sont exprimés dans tous les organes de souris f28 exprimant les arnm transgéniques. L'expression la plus élevée est celle observée dans le foie ou les 2-ars représentent près de 95% des -ars totaux. Dans une deuxième partie de notre travail, nous avons montré dans le foie, que les récepteurs transgéniques sont capables d'interagir normalement avec les protéines gs de souris, et d'induire l'activation de l'adenylyl cyclase suite à la stimulation par l'agoniste -ar isoproterenol. Chez le rat, l'expression des 2-ars dans le foie varie en fonction de l'ontogenèse : elle est élevée chez le nouveau-né et faible chez l'adulte. Comme les 2-ars jouent un rôle physiologique très important dans cet organe, nous avons effectué une étude ontogénique du système -ar (-ars, protéine g, adenylyl cyclase). Nous avons montré que chez la souris contrôle on retrouve le même profil ontogénique d'expression des 2-ars et d'activité de l'adenylyl cyclase que ceux décrits chez le rat. En revanche, chez la souris f28, les 2-ars hépatiques sont fortement exprimes à tous les âges, tant chez le nouveau-né que chez l'adulte, et les réponses de l'adenylyl cyclase induites par l'agoniste, sont aussi fortement augmentées. Les souris f28 semblent présenter non seulement des altérations métaboliques mais aussi des altérations phénotypiques : une mortalité élevée des nouveau-nés, un déficit pondéral et un problème de coordination des mouvements des pattes arrière. Nous avons pu montrer que le phénotype de déficit pondéral est dû à l'expression du transgène, en particulier à la surexpression des 2-ars dans le foie. Finalement, nous avons utilise ce modèle de souris transgéniques pour mettre en évidence le rôle des 2-ars dans la régulation des phénomènes d'apoptose dans le foie. Il a été décrit que l'augmentation des taux d'ampc pouvait contrôler l'apoptose dans certains types cellulaires. Nous avons montre que les souris f28 qui surexpriment des 2-ars dans le foie, sont protégées contre l'apoptose induite par un anticorps anti-fas. Quant aux souris contrôles qui, normalement meurent suite à l'injection de cet anticorps, elles acquièrent une protection suite à l'administration de l'agoniste 2-ar clenbuterol. Le modèle de souris f28 est un outil de choix pour étudier l'impact physiopathologique de la modification de l'expression des 2-ars dans le foie, mais également dans d'autres tissus.

Les catécholamines induisent la synthèse d’AMPc par une stimulation des récepteurs β-adrénergiques et contrôlent ainsi la fonction cardiaque en activant une pléiade de voies de signalisation intracellulaires. Les protéines Epac sont des facteurs d’échange pour les petites protéines G et sont directement activés par l’AMPc. Devant l’importance de la voie β-adrénergique dans la physiopathologie cardiaque et dans le but de mieux comprendre la régulation des processus cellulaires dépendants de l’AMPc dans le cœur, il apparaît essentiel de caractériser le rôle des facteurs d’échange Epac dans le myocarde. Dans une première partie, cette étude démontre que les effets de Epac sur l’hypertrophie des cardiomyocytes ventriculaires de rats nouveaux nés requièrent les GTPases H-Ras et Rap2B. Epac active la voie PLC/IP3/Ca2+ qui est nécessaire pour l’activation de H-Ras. Au niveau transcriptionnel, Epac induit l’export nucléaire de HDAC4 permettant l’activation d’un programme génique d’hypertrophie. Dans une deuxième partie, cette étude révèle l’implication de Epac1 dans l’hypertrophie des cardiomyocytes in vivo, chez la souris. La délétion de Epac1 protège du remodelage cardiaque induit par l’activation prolongée des récepteurs β-adrénergiques et améliore la fonction cardiaque. La surexpression de Epac1 spécifiquement dans le myocarde entraîne une hypertrophie des cardiomyocytes. Par ailleurs, la voie β-AR/Epac1 induit l’accumulation de protéines ubiquitinylées et provoque l’activation du processus d’autophagie in vitro et in vivo. L’autophagie protège des effets délétères de la voie β-adrénergique/Epac en participant à l’élimination des agrégats protéiques et en contrant les effets hypertrophiques de Epac1. Ces résultats ouvrent de nouvelles perspectives pour le traitement de l’hypertrophie et de l’insuffisance cardiaque
Catecholamines regulate cardiac function by stimulating β-adrenergic receptors (β-AR), leading to cAMP production and activation of a multiplicity of signaling pathways. Epac proteins are exchange factors for small G proteins which are directly activated by cAMP. Given the importance of the β-adrenergic pathway in cardiac physiopathology, it becomes essential to characterize functions of Epac protein in myocardium. In a first part, this study shows that H-Ras and Rap2B GTPases are involved in Epac-induced neonatal rat cardiac myocytes hypertrophy. Epac induces activation of the PLC/IP3/Ca2+ pathway which is necessary for H-Ras activation. At the transcriptional level, Epac causes HDAC4 nuclear export leading to activation of a hypertrophic gene program. In a second part, this study reveals implication of Epac1 in cardiac hypertrophy in vivo. Deletion of Epac1 in mice protects from cardiac remodeling induced by chronic isoproterenol infusion and enhances cardiac function. Cardiac specific overexpression of Epac1 in mice induces cardiac myocytes hypertrophy. Interestingly, β-AR/Epac1 pathway triggers ubiquitinated proteins accumulation and activation of autophagy both in vitro and in vivo. By eliminating aggregates and by counteracting hypertrophic effects of Epac, autophagy protects from deleterious effects of the β-AR/Epac pathway. These results open news insights into the treatment of cardiac hypertrophy and heart failure

La mucoviscidose (CF) est une maladie génétique due à des mutations dans le gène cftr (cystic fibrosis transmembrane conductance regulator). La mutation la plus fréquente est la délétion de la phénylalanine en position 508 (F508del). Il est admis que CFTR est régulé par les récepteurs β-adrénergiques (β-AR). Seuls β1 et β2-AR ont été décrits dans les poumons humains avec une majorité de β2-AR. Dans les voies aériennes de patients CF, une diminution des β-AR a été rapportée sans distinction des sous-types. De plus, β2-AR interagit physiquement avec CFTR via la protéine NHERF1 (Na+/H+ exchanger regulatory factor 1). Le 1er objectif de ce travail a été de caractériser la présence des 3 sous-types de β-AR dans les bronches humaines : nous montrons pour la 1ère fois que β3-AR est exprimé en plus de β1 et β2-AR dans les bronches humaines. Le 2nd objectif a été de comparer l'expression des β-AR et de NHERF1 sur des bronches de patients non-CF et CF : chez les patients CF, il est observé une diminution de l'expression de β2-AR et NHERF1 alors que β3-AR est surexprimé. A partir de ces résultats, le 3ème objectif a été de comparer les effets de stimulations chroniques β2 ou β3-AR sur l'expression des 3 sous-types de β-AR et sur l'expression de l'activité de CFTR dans des cellules épithéliales bronchiques humaines exprimant le CFTR sauvage (16HBE14o-) ou F508del (CFBE41o-) : les traitements augmentent l'activité basale du CFTR-F508del sans modifier l'expression des β-AR. La surexpression de NHERF1 restaure l'expression du CFTR-F508del in vitro. Le 4ème objectif a été d'étudier les effets de la surexpression de NHERF1 sur l'expression de CFTR chez la souris homozygote F508 del
Cystics fibrosis (CF) is a genetic disease due to mutations in the cftr (CF transmembrane conductance regulator) gene. The most frequent mutation is the delection of phenylalanine at the position 508 of the protein (F508del). It has been described that CFTR is regulated by β-adreno ceptors (β-ARs). Only β1 and β2-AR has been observed in human airway with β2-AR being the predominant subtype. In CF bronchi a decrease of global β-ARs expression has been reported without distinction of subtypes. Moreover, β2-AR physically interact with CFTR via NHERF1 (NA+/H+ exchanger regulatory factor 1), a chaperone protein. The 1st aim of this study is to characterize the expression of all β-ARs subtypes in human bronchi samples : we show for the first time that β3-AR is expressed in human lung as well as β1 and β2-ARs. The 2nd aim is to compare β-ARs and NHERF1 expression in non-CF and CF bronchi samples : in CF bronchi sample, we demonstrate an under-expression of β2-AR and NHERF1 but a β3-AR over-expression. From those results, the 3nd aim of this study is to compare the effects of chronic β2 or β3-AR stimulations on all β-ARs subtypes expression and on CFTR expression and activity in human bronchial epithelial cell lines expressing wild-type (16HBE14o) or F508del-CFTR (CFBE41o-) : both treatments increase F508del-CFTR basal activity but do not affect β-ARs expression. As our team has reported that NHERF1 over-expression restores F508del-CFTR expression in vitro, the 4th aim of this thesis is to assess the effects of NHERF1 over-expression on CFTR expression in a mouse model homozygous for F508del

Il est maintenant clairement etabli que la desipramine, en administration repetee chez le rat, induit une hyposensibilite des recepteurs beta-adrenergiques centraux. Cependant, une meilleure caracterisation de ces recepteurs s'avere necessaire pour tenter d'identifier le mode d'action de cet antidepresseur. Deux sous-types de recepteurs beta-adrenergiques, betal et beta2, coexistent dans le systeme nerveux central. Nos travaux sur neurones et astrocytes isoles a partir d'encephale de rat montrent que leur repartition est variable suivant les regions cerebrales mais egalement suivant le type cellulaire. Les recepteurs beta1-adrenergiques sont minoritaires dans le cervelet (10%), majoritaires dans le cerveau (85%) ou ils representent 81% des sites astrocytaires et 66% des sites neuronaux. Les recepteurs beta-adrenergiques peuvent presenter deux etats conformationnels de basse et haute affinites pour les agonistes beta-adrenergiques. La conformation de haute affinite du recepteur est regulee par le gtp, elle est donc sous la dependance des proteines g. Notre etude sur cellules isolees indique que seuls les recepteurs beta-adrenergiques neuronaux presentent ces deux etats de conformation ; les recepteurs beta-adrenergiques astrocytaires sont tous en etat de basse affinite. Ces resultats suggerent que les recepteurs beta-adrenergiques sont differemment couples a ces proteines dans les neurones et les astrocytes. La destruction selective de l'un ou l'autre type cellulaire montre que la stimulation de l'adenylate cyclase par les agonistes beta-adrenergiques est essentiellement gliale, elle serait donc induite par des sites de basse affinite. Les recepteurs beta-adrenergiques neuronaux qui interagissent avec les proteines g pourraient donc etre couples a un autre effecteur que l'adenylate cyclase dans ces cellules. Celui-ci serait implique dans le mecanisme d'action des antidepresseurs puisque les resultats obtenus demontrent que l'administration chronique de desipramine chez le rat affecte aussi bien les recepteurs beta-adrenergiques astrocytaires que neuronaux

Parmi les modifications myocardiques induites par l'entraînement d'endurance, la bradycardie, l'amélioration de la fonction diastolique et le développement d'une hypertrophie cardiaque sont les plus connues. Nous avons démontré dans nos différentes études que des modifications de l'expression des β AR semblent être impliquées dans les adaptations cardio-vasculaires observées lors de l'hypertrophie cardiaque liée à l'entraînement. D'autres facteurs interviennent également pour expliquer ces adaptations cardiaques fonctionnelles et morphologiques. Parmi ceux-ci, il faut notamment citer des adaptations tissulaires impliquant l'amélioration de la vascularisation artérielle sans changement dans la densité du collagène. Ces différents éléments soulignent le caractère physiologique et bénéfique des modifications induites par l'entraînement en endurance. Les études expérimentales réalisées au niveau cardiaque, et présentées dans ce mémoire ont essayé autant que faire se peut d'étudier les différents niveaux d'organisation de l'organisme (cellule-tissu-organe), susceptibles de subir certaines modifications liées à l'entraînement
Among myocardial modifications induced by aerobic physical training: a bradycardia, an improvement of diastolic function and a developed cardiac hypertrophy are the well known. We demonstrated in our different studies that expression modifications of β AR seem to be involved in the cardiovascular adaptations observed during cardiac hypertrophy linked to training. Others factors also take place to explain morphological and functional cardiac adaptations. Among them, we can note tissular adaptations involving increased arteries number, without change in collagen density. These different elements emphasize the physiological and beneficial pattern of modifications induced by endurance training. The experimental studies realised on heart, and presented in this thesis, tried to elucidate the different organisation levels of organism (cell-tissu-organ), liable to be subject to some modifications linked to training