Academic literature on the topic 'Récepteurs des lipoprotéines'

RésuméAlors que l'alimentation de l'homme a beaucoup évoluée depuis ses origines, le génome humain est resté très stable. Pourtant, de très nombreux gènes ont des polymorphismes connus. En fait, on considère maintenant que les principales pathologies humaines (maladies cardiovasculaires, diabète, obésité et cancers) résultent d'une interaction entre des facteurs de succeptibilité génétique et des facteurs de l'environement, dont l'alimentation. Dans le domaine du métabolisme des lipoprotéines et des maladies cardiovasculaires, des polymorphimes de plusieurs gènes ont été identifiés et associés aux niveaux des paramètres lipidiques ou aà des réponses variables aux régimes, comme pour les apoprotéines (apo) E, B, A-IV et C-III, le LDL récepteur, la protéine microsomiale de transport (MTP), la protéine de liason des acides gras (FABP), la protéine de transport des esters de cholésterol (CETP), la lipoprotéine lipase ou la lipase hepatique. Nous réalisons une étude d'intervention à Marseille dans le but d'étudier l'interaction

L'obésité est une maladie multifactorielle qui constitue un facteur de risque de nombreuses pathologies, notamment les maladies cardiovasculaires, le diabète et les maladies neurodégénératives. Des études épidémiologiques récentes suggèrent un effet obésogène des contaminants environnementaux, mais peu d'informations sont disponibles sur leur effet potentiel sur le métabolisme des lipoprotéines hépatiques. L'objectif de cette étude était de déterminer l'effet de polluants environnementaux de la famille des hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP) sur trois récepteurs des lipoprotéines, le récepteur des LDL (LDL-R), le lipolysis-stimulated lipoprotein receptor (LSR) et le scavenger receptor B1 (SR-B1) ainsi que sur les ATP binding cassette transporter A1 (ABCA1) et G1 (ABCG1) en utilisant des modèles cellulaires et/ou animaux. Les études par immunoblots et immunofluorescence in vitro ont révélé que l'exposition de cellules Hepa1-6 au B[a]P diminue de manière significative les taux de protéine LSR, LDL-R et ABCA1, alors qu’aucune modification significative du taux et de l’activité du LSR n’a été observée lors d’une exposition au pyrène ou au phénanthrène. L’analyse en temps réel par PCR et les études avec la lactacystine ont révélé que cet effet était dû principalement à une augmentation de la dégradation par le protéasome plutôt qu’à une diminution de la transcription ou à une augmentation de la dégradation lysosomale. En outre, les ligand-blots ont révélé que les lipoprotéines exposées au B[a]P avaient une affinité réduite pour le LSR ou le LDL-R. Des souris C57Bl/6RJ ont été traitées par le B[a]P (0,5 mg / kg, i.p) toutes les 48 h pendant 15 jours. Le gain de poids observé est accompagné d’une augmentation des taux de triglycérides et de cholestérol plasmatiques, du taux de cholestérol hépatique, et d’une diminution du taux de LDL-R et ABCA1 chez animaux traités au B[a]P par rapport aux témoins. Les corrélations observées entre les taux de LSR et de LDL-R hépatiques chez les souris contrôle ne sont plus observées chez les souris traitées au B[a]P, ce qui suggère un dérèglement du métabolisme des lipoprotéines hépatiques. Ces résultats suggèrent que la prise de poids induite par le B[a]P est peut-être liée à son action inhibitrice sur le LSR et le LDL-R, ainsi que sur l’ABCA1 et le métabolisme des lipoprotéines hépatiques, ce qui conduit à un statut lipidique modifié chez les souris traitées au B[a]P, donnant ainsi un nouvel éclairage sur les mécanismes sous-jacents de la contribution des polluants tels que le B[a]P à la perturbation de l'homéostasie lipidique, susceptible de contribuer à la dyslipidémie associée à l'obésité<br>Obesity is a multifactorial disorder that represents a significant risk factor for many pathologies including cardiovascular diseases, diabetes and neurodegenerative diseases. Recent epidemiological studies suggest potential obesogenic effects of environmental contaminants, but little information is available on their potential effect on hepatic lipoprotein metabolism. The objective of this study was to determine the effect of the common environmental pollutants, belonging to polycyclic aromatic hydrocarbon (HAP) on three lipoprotein receptors, the LDL-receptor (LDL-R), the scavenger receptor B1 (SRB1) and the lipolysis-stimulated lipoprotein receptor (LSR) as well as the ATP binding cassette transporters A1 (ABCA1) and G1 (ABCG1) using cell and/or animal models. Immunoblot and immunofluorescence in vitro studies revealed that exposure of Hepa1-6 to benzo[a]pyrene (B[a]P) significantly decreased LSR, LDL-R and ABCA1 protein levels, whereas no significant changes in protein levels and LSR activity where observed upon cell treatment with pyrene or phenanthrene. Real-time PCR analysis, lactacystin and chloroquine studies revealed that this effect was due primarily to increased proteasome-mediated degradation rather than to decreased transcription or to increased lysosomal degradation. Furthermore, ligand blots revealed that lipoproteins exposed to B[a]P displayed markedly decreased binding to LSR or LDL-R. C57Bl/6RJ mice were treated with B[a]P (0.5 mg/kg, i.p) every 48 h for 15 days. The increased weight gain observed was accompanied by increased plasma triglycerides and cholesterol levels, increased liver cholesterol content, and decreased LDL-R, ABCA1, ABCG1 and SR-B1 protein levels in B[a]P-treated animals as compared to controls. Correlations observed between hepatic LSR and LDL-R levels in control mice were no longer observed in B[a]P treated mice, suggesting a potential dysregulation of hepatic lipoprotein metabolism.Taken together, these results suggest that B[a]P-induced weight gain may be due its inhibitory action on LSR and LDL-R, as well as ABCA1 and lipoprotein metabolism in the liver, which leads to the modified lipid status in B[a]P-treated mice, thus providing new insight into mechanisms underlying the involvement of pollutants such as B[a]P in the disruption of lipid homeostasis, potentially contributing to dyslipidemia associated with obesity

Un effet mitogene des lipoproteines de haute densite (hdl3) a ete mis en evidence et correle a leur liaison sur les cellules d'adenocarcinome pulmonaire humain a549. Les stimulations de la synthese d'adn et la proliferation cellulaire sont observees pour de faibles concentrations en hdl3. Les hdl3 se lient aux cellules a549 avec une forte affinite selon deux mecanismes: l'un specifique; l'autre de plus faible affinite est phospholipide-dependant. Les sites correspondant a la liaison specifique ont ete caracterises selon la methode de scatchard (capacite de liaison et constante de dissociation); il s'agit d'une proteine membranaire de poids moleculaire de 110 kilodaltons (kda). Deux differences importantes sont obtenues dans ces cellules par rapport a des cellules normales (fibroblastes). D'une part, le nombre des sites est 60% plus faible, d'autre part, il n'est pas stimulable par l'apport de cholesterol. La stimulation de la synthese de l'adn par les hdl3 semble etre dependante de l'occupation des sites specifiques par l'apolipoproteine ai, alors que l'occupation des sites phospholipidiques inhibe la synthese d'adn. L'analyse par electrophorese des proteines cellulaires phosphorylees sous l'effet des hdl3, montre que trois proteines de poids moleculaires respectifs 20, 24 et 28 kda ont leur degre de phosphorylation augmente. Un meme profil de phosphorylation est obtenu sous l'effet du ionophore calcique a23187. Les resultats obtenus suggerent l'implication d'un mecanisme d'action des hdl3 par augmentation du taux de calcium intracellulaire et probablement par la stimulation d'une kinase calmoduline-dependante

L'objectif de cette thèse a été d'apporter une base moléculaire aux mécanismes mis en jeu dans l'excrétion transintestinale du cholestérol (TICE). Cette voie, complémentaire à la voie biliaire, permet l'efflux du cholestérol plasmatique directement à travers la muqueuse intestinale. Au cours de ma thèse, J'ai mis en évidence que le TICE est un processus métabolique actif sensible à la température et à l'oxygène. J'ai démontré in vivo et ex vivo chez la souris mais également pour la première fois ex vivo chez l'homme, qu'à la fois les lipoprotéines plasmatiques de type LDL (Low density lipoprotein) ou HDL (High density lipoprotein) peuvent fournir du cholestérol au TICE. Bien que le LDLR (récepteur au LDL) ne soit pas indispensable au TICE, la modulation de son expression affecte le TICE. Ainsi, l'absence de PSCK9 (Proprotein convertase subtilisin / kexin type 9), un inhibiteur endogène du LDLR, ou un régime enrichi en statines augmentent l'expression intestinale du LDLR et stimulent le TICE. Enfin, j'ai également montré que le TICE est inductible par la diosgénine, un stéroïde végétal connu pour ses propriétés hypocholestérolémiantes. Les mécanismes moléculaires impliqués restent néanmoins à être identifiés. Au niveau apical, le transporteur multidrogues ABCB1 participe avec l'hétérodimère ABCG5/G8 à l'efflux entérocytaire du cholestérol. Mes travaux de thèse ont contribué à mieux comprendre les mécanismes moléculaires impliqués dans le fonctionnement et la régulation de cette voie. Sa caractérisation pourrait permettre à terme d'ouvrir de nouvelles perspectives thérapeutiques pour lutter contre l'hypercholestérolémie et les maladies cardiovasculaires chez l'homme<br>The aim of this thesis was to provide a molecular basis for the mechanisms involved in transintestinal cholesterol excretion (TICE). This pathway, complementary to the biliary pathway, allows the plasma cholesterol efflux directly through the intestinal mucosa. During my thesis, I have shown that TICE is an active metabolic process, temperature and oxygen -sensitive. I have demonstrated in vivo and ex vivo in mice but also for the first time ex vivo in humans, that both types of plasma lipoproteins LDL (Low density lipoprotein) and HDL (High density lipoprotein) can provide cholesterol for TICE. Even if the LDLR (LDL receptor) is not essential for TICE, its expression modulation affects TICE. Thus, the absence of PSCK9 (Proprotein convertase subtilisin / kexin type 9), an endogenous inhibitor of the LDLR or a statins-enriched diet, increase LDLR intestinal expression and stimulate TICE. Finally, I also found that TICE is inducible by diosgenin, a plant steroid known for its cholesterol-lowering properties. However, the molecular mechanisms involved remain to be identified. At the apical level, the multidrug transporter ABCB1 is involved with the heterodimer ABCG5/G8, in the enterocyte cholesterol efflux. During my PhD training, I have contributed to a better understanding of the molecular mechanisms involved in this pathway. Its characterization could eventually lead to open new therapeutic perspectives in the struggle against high cholesterol and cardiovascular disease in humans

Le Lipolysis Stimulated Receptor (LSR) fixe les lipoprotéines contenant l'apolipoprotéine (apo) B et l'apoE en présence des acides gras, et son affinité est optimale pour les fractions lipoprotéiniques les plus riches en triglycérides. Dans notre étude, nous avons utilisé les techniques du Northern blot, de la PCR quantitative en temps réel et de l'immunofluorescence pour examiner l'expression du LSR chez la souris adulte et au cours du développement embryonnaire. Chez l'adulte l'ARNm LSR est retrouvé dans tous les tissus étudiés sauf dans le muscle et le coeur. Les ARNm sont abondants dans le foie, le poumon, l'intestin, le rein et dans certains tissus stéroidogéniques (ovaires et testicules). Ils sont également présents à tous les stades embryonnaires étudiés. Les résultats de l'expression protéique sont corrélés à ceux de l'expression transcriptionnelle. Ainsi, le "patron" d'expression du LSR chez la souris adulte apporte des arguments supplémentaires sur son rôle possible de ce récepteur dans le transport lipidique au niveau de ces organes. Afin d'étudier le rôle physiologique du LSR in vivo, nous avons tenté d'obtenir des souris LSR-/- par recombinaison homologue. Sur un total de 379 souris génotypées, trois homozygotes seulement ont été identifiées. Cette répartition montre une grande létalité des homozygotes. Celle-ci se produit entre 12,5 et 15,5 jours de gestation. Les embryons LSR-/- se distinguent par un foie de taille réduite. Ces résultats indiquent que le LSR est indispensable pour le développement embryonnaire. Par ailleurs, étant donné que les souris hétérozygotes ne présentent aucun phénotype particulier, nous avons voulu analyser l'impact de l'invalidation de l'un des deux allèles du LSR chez des souris totalement déficientes en un autre récepteur de lipoprotéines à apoB/E, le LDLR. Comparés aux souris LDL-/-, les doubles mutants [LSR+/- ; LDR-/-] appelés LDLSR ont des taux plasmatiques de cholestérol total significativement plus faibles par diminution du cholestérol contenu dans les lipoprotéines non LDL et HDL. Ce résultat pourrait être expliqué par l'intervention de mécanismes compensateurs comme l'augmentation de l'activité d'autres récepteurs de lipoprotéines. Grâce au modèle LDLSR, nous avons pu mettre en évidence pour la première fois un rôle in vivo du LSR dans la régulation du métabolisme du cholestérol et des lipoprotéines<br>The lipolysis stimulated receptor (LSR) recognizes apolipoprotein B/E-containing lipoproteins in the presence of free fatty acids, and is thought to be involved in the clearance of triglyceride-rich lipoproteins (TRL). The distribution of LSR in mice was studied by Northern blots, quantitative PCR and immunofluorescence. In the adult, LSR mRNA was detectable in all tissues except muscle and heart, and was abundant in liver, lung, intestine, kidney, ovaries and testes. During embryogenesis, LSR mRNA was detectable at 7. 5 days post-coitum (E7) and increased up to E17 in parallel to prothrombin, a liver marker. In adult liver, immunofluorescence experiments showed a staining at the periphery of hepatocytes as well as in fetal liver at E12 and E15. These results are in agreement with the assumption that LSR is a plasma membrane receptor involved in the clearance of lipoproteins by liver, and suggest a possible role in steroidogenic organs, lung, intestine and kidney. To explore the role of LSR in vivo, the LSR gene was inactivated in 129/Ola ES cells by removing a gene segment containing exons 2-5, and 129/Ola-C57BL/6 mice bearing the deletion were produced. Although heterozygotes appeared normal, LSR homozygotes were not viable, with the exception of three males, while the total progeny of genotyped wild-type and heterozygote pups was 376. Mortzality of the homozygote embryos was observed between days 12. 5 and 15. 5 of gestation, a time at which their liver was much smaller than that of their littermates, indicating that the expression of LSR is critical for liver and embryonic devellopment. To evaluate the effect of inactivation of one allele LSR in LDL receptor-deficient mice, we produce double knockout animals [LSR+/-] called LDLSR Total plasma cholesterol concentration were approximately 40 % less as compared with LDLR-/- mice These finding supported the hypothesis of upregulation of other receptors in LDLSR mice

La lactoferrine est une glycoprotéine présente dans de nombreux milieux de sécretion et libérée des granules des neutrophiles durant l'inflammation. Les rôles biologiques décrits pour la lactoferrine sont centrés essentiellement sur la défense antimicrobienne et la réponse inflammatoire de l'organisme. Dans un premier temps, nos études ont porté sur l'activité bactéricide de la lactoferrine. Dans ce cadre, nous avons étudié les interactions de la lactoferrine avec les porines, protéines ancrées dans la membrane externe des bactéries gram négatif. Nous montrons que la lactoferrine se fixe sur les porines ompc et phoe d'e. Coli purifiées ou intégrées dans la membrane des bactéries gram négatif. Des études d'électrophysiologie démontrent que la lactoferrine limite la perméabilité membranaire de la porine ompc. Par ailleurs, la lactoferrine accélère la lyse de bactéries exprimant ompc ou phoe en phase stationnaire. L'ensemble de ces résultats suggère que la lactoferrine interagit avec les porines à la surface des bactéries gram négatif et exerce ainsi, en partie, son activite bactéricide<br>Dans une deuxième étape, nous nous sommes intéressés au rôle de la lactoferrine dans la régulation du processus inflammatoire induit par les lipopolysaccharides (lps) et leurs récepteurs. Dans ce contexte, nous montrons que la lactoferrine peut interagir avec le cd14 soluble (cd14s), un récepteur spécifique des lps, qui est implique dans l'activation de l'endothelium. La fixation de la lactoferrine sur le cd14s et sur le complexe cd14s-lps entraîne une inhibition de l'expression de molécules d'adhésion induite par le complexe cd14s-lps a la surface des cellules endothéliales. Par ailleurs, la lactoferrine inhibe la fixation des lps sur un autre récepteur, la sélectine l, et diminue ainsi la production de radicaux libres chez les neutrophiles. Ces travaux éclairent certains des mécanismes par lesquels la lactoferrine exerce ses activités anti-inflammatoires

Les divers progrès réalisés dans la physiopathologie de l'athérosclérose ont souligné le rôle central de Tinflammation à toutes les étapes du développement de la maladie vasculaire. De nombreux types cellulaires participent au développement et à la rupture des plaques d'athérosclérose, comme les monocytes/macrophages et les lymphocytes T CD4+. Une sous population lymphocytaire T, appelée T régulatrice, a été identifiée comme athéro-protéctrice. En effet, elle diminue le développement des plaques d'athérosclérose et induit un phénotype lésionnel plus stable. Au cours de ce travail de thèse, nous nous sommes intéressés à cette population T régulatrice. Dans un premier travail nous avons montré que la leptine, une adipokine, altère la fonction T régulatrice et que cet effet est capable, à lui seul, d'accélérer le développement de l'athérosclérose. Dans une approche plus appliquée, nous avons réussi à expandre in vivo la population T régulatrice naturelle grâce à l'administration de peptides dérivés de la protéine apoBlOO. Un tel traitement a alors permis de réduire le développement de l'athérosclérose chez la souris. A l'inverse, des lymphocytes T, les lymphocytes B étaient considérés comme anti-athérogènes. En effet, les différents travaux, essentiellement basés sur leur propriété humorale, montrent que les anticorps naturels anti-LDL oxydées limitent le développement des plaques d'athérosclérose. Pour la première fois, en utilisant un anticorps monoclonal deplétant les lymphocytes B chez des souris sensibles à l'athérosclérose, nous avons montré que les lymphocytes B favorisent le développement de la maladie en stimulant les réponses cellulaires adaptatives T-dépendantes<br>Atherosclerosis is an inflammatory disease of the arterial wall. Several cell types, like monocytes/macrophages and T lymphocytes are involved in atherosclerosis development and plaque rupture. Also, a sub-population of T cells, called regulatory T cells has shown a protective effect on atherosclerosis. Indeed, these cells limit plaque development and induce a more stable phenotype. My thesis was mainly focussed on this population in atherosclerosis. In a first study, we showed that leptin, an adipokin, inhibits regulatory T cells, which alone increases atherosclerosis development. In another study, we were able to expand in vivo the population of natural regulatory T cells by administration of apoBlOO derived peptides. This treatment resulted in a decrease of atherosclerosis development and progression in mice. Inversely to the T cells, B lymphocytes were considered as anti-atherogenic. Indeed, different studies, based on the humoral immunity, showed that antibodies anti-oxidized LDL limit the development of atherosclerosis. For the first time, using a monoclonal antibody that depletes B cells in atherosclerosis prone mice, we highlight the pro-atherogenic role of B cells induced by stimulation of T cell- dependent responses