Dissertations / Theses: 'Récepteurs des lipoprotéines'

1

Chomich-, Milosavljevic Dragana. "Mécanismes de transformation des macrophages humains en cellules spumeuses : rôle de la lipoprotéine lipase et des récepteurs de lipoprotéines." Paris 7, 2001. http://www.theses.fr/2001PA077178.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

2

Martinez, Laurent. "Caratérisation et purification de récepteurs hépathiques aux lipoprotéines de haute densité(HDL)." Toulouse 3, 2001. http://www.theses.fr/2001TOU30071.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

3

Duez, Hélène. "Rôle des récepteurs nucléaires PPARα et Rev-erbα dans le métabolisme des lipides et lipoprotéines, et le développement de l'athérosclérose". Lille 2, 2003. http://www.theses.fr/2003LIL2P007.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

4

Vacaresse, Nathalie. "Activation des récepteurs à tyrosine kinase par les acides gras et les lipoprotéines de faible densité oxydées." Toulouse 3, 2001. http://www.theses.fr/2001TOU30051.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

5

Layeghkhavidaki, Hamed. "Effet des polluants de type hydrocarbures aromatiques polycycliques sur l'homéostasie lipidique et les récepteurs des lipoprotéines hépatiques." Thesis, Université de Lorraine, 2014. http://www.theses.fr/2014LORR0120/document.

Full text

Abstract:

L'obésité est une maladie multifactorielle qui constitue un facteur de risque de nombreuses pathologies, notamment les maladies cardiovasculaires, le diabète et les maladies neurodégénératives. Des études épidémiologiques récentes suggèrent un effet obésogène des contaminants environnementaux, mais peu d'informations sont disponibles sur leur effet potentiel sur le métabolisme des lipoprotéines hépatiques. L'objectif de cette étude était de déterminer l'effet de polluants environnementaux de la famille des hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP) sur trois récepteurs des lipoprotéines, le récepteur des LDL (LDL-R), le lipolysis-stimulated lipoprotein receptor (LSR) et le scavenger receptor B1 (SR-B1) ainsi que sur les ATP binding cassette transporter A1 (ABCA1) et G1 (ABCG1) en utilisant des modèles cellulaires et/ou animaux. Les études par immunoblots et immunofluorescence in vitro ont révélé que l'exposition de cellules Hepa1-6 au B[a]P diminue de manière significative les taux de protéine LSR, LDL-R et ABCA1, alors qu’aucune modification significative du taux et de l’activité du LSR n’a été observée lors d’une exposition au pyrène ou au phénanthrène. L’analyse en temps réel par PCR et les études avec la lactacystine ont révélé que cet effet était dû principalement à une augmentation de la dégradation par le protéasome plutôt qu’à une diminution de la transcription ou à une augmentation de la dégradation lysosomale. En outre, les ligand-blots ont révélé que les lipoprotéines exposées au B[a]P avaient une affinité réduite pour le LSR ou le LDL-R. Des souris C57Bl/6RJ ont été traitées par le B[a]P (0,5 mg / kg, i.p) toutes les 48 h pendant 15 jours. Le gain de poids observé est accompagné d’une augmentation des taux de triglycérides et de cholestérol plasmatiques, du taux de cholestérol hépatique, et d’une diminution du taux de LDL-R et ABCA1 chez animaux traités au B[a]P par rapport aux témoins. Les corrélations observées entre les taux de LSR et de LDL-R hépatiques chez les souris contrôle ne sont plus observées chez les souris traitées au B[a]P, ce qui suggère un dérèglement du métabolisme des lipoprotéines hépatiques. Ces résultats suggèrent que la prise de poids induite par le B[a]P est peut-être liée à son action inhibitrice sur le LSR et le LDL-R, ainsi que sur l’ABCA1 et le métabolisme des lipoprotéines hépatiques, ce qui conduit à un statut lipidique modifié chez les souris traitées au B[a]P, donnant ainsi un nouvel éclairage sur les mécanismes sous-jacents de la contribution des polluants tels que le B[a]P à la perturbation de l'homéostasie lipidique, susceptible de contribuer à la dyslipidémie associée à l'obésité Obesity is a multifactorial disorder that represents a significant risk factor for many pathologies including cardiovascular diseases, diabetes and neurodegenerative diseases. Recent epidemiological studies suggest potential obesogenic effects of environmental contaminants, but little information is available on their potential effect on hepatic lipoprotein metabolism. The objective of this study was to determine the effect of the common environmental pollutants, belonging to polycyclic aromatic hydrocarbon (HAP) on three lipoprotein receptors, the LDL-receptor (LDL-R), the scavenger receptor B1 (SRB1) and the lipolysis-stimulated lipoprotein receptor (LSR) as well as the ATP binding cassette transporters A1 (ABCA1) and G1 (ABCG1) using cell and/or animal models. Immunoblot and immunofluorescence in vitro studies revealed that exposure of Hepa1-6 to benzo[a]pyrene (B[a]P) significantly decreased LSR, LDL-R and ABCA1 protein levels, whereas no significant changes in protein levels and LSR activity where observed upon cell treatment with pyrene or phenanthrene. Real-time PCR analysis, lactacystin and chloroquine studies revealed that this effect was due primarily to increased proteasome-mediated degradation rather than to decreased transcription or to increased lysosomal degradation. Furthermore, ligand blots revealed that lipoproteins exposed to B[a]P displayed markedly decreased binding to LSR or LDL-R. C57Bl/6RJ mice were treated with B[a]P (0.5 mg/kg, i.p) every 48 h for 15 days. The increased weight gain observed was accompanied by increased plasma triglycerides and cholesterol levels, increased liver cholesterol content, and decreased LDL-R, ABCA1, ABCG1 and SR-B1 protein levels in B[a]P-treated animals as compared to controls. Correlations observed between hepatic LSR and LDL-R levels in control mice were no longer observed in B[a]P treated mice, suggesting a potential dysregulation of hepatic lipoprotein metabolism.Taken together, these results suggest that B[a]P-induced weight gain may be due its inhibitory action on LSR and LDL-R, as well as ABCA1 and lipoprotein metabolism in the liver, which leads to the modified lipid status in B[a]P-treated mice, thus providing new insight into mechanisms underlying the involvement of pollutants such as B[a]P in the disruption of lipid homeostasis, potentially contributing to dyslipidemia associated with obesity

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

6

Tazi, Ahnini Khalid. "Modulation de la croissance des cellules d'adénocarcinome pulmonaire humain A 549 par les lipoprotéines de haute densité : mise en évidence d'un récepteur spécifique aux HDL et phosphorylations protéiques induites." Toulouse 3, 1993. http://www.theses.fr/1993TOU30118.

Full text

Abstract:

Un effet mitogene des lipoproteines de haute densite (hdl3) a ete mis en evidence et correle a leur liaison sur les cellules d'adenocarcinome pulmonaire humain a549. Les stimulations de la synthese d'adn et la proliferation cellulaire sont observees pour de faibles concentrations en hdl3. Les hdl3 se lient aux cellules a549 avec une forte affinite selon deux mecanismes: l'un specifique; l'autre de plus faible affinite est phospholipide-dependant. Les sites correspondant a la liaison specifique ont ete caracterises selon la methode de scatchard (capacite de liaison et constante de dissociation); il s'agit d'une proteine membranaire de poids moleculaire de 110 kilodaltons (kda). Deux differences importantes sont obtenues dans ces cellules par rapport a des cellules normales (fibroblastes). D'une part, le nombre des sites est 60% plus faible, d'autre part, il n'est pas stimulable par l'apport de cholesterol. La stimulation de la synthese de l'adn par les hdl3 semble etre dependante de l'occupation des sites specifiques par l'apolipoproteine ai, alors que l'occupation des sites phospholipidiques inhibe la synthese d'adn. L'analyse par electrophorese des proteines cellulaires phosphorylees sous l'effet des hdl3, montre que trois proteines de poids moleculaires respectifs 20, 24 et 28 kda ont leur degre de phosphorylation augmente. Un meme profil de phosphorylation est obtenu sous l'effet du ionophore calcique a23187. Les resultats obtenus suggerent l'implication d'un mecanisme d'action des hdl3 par augmentation du taux de calcium intracellulaire et probablement par la stimulation d'une kinase calmoduline-dependante

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

7

Berger, Jean-Mathieu. "Caractérisation des déterminants moléculaires impliqués dans la régulation de l'excrétion transintestinale du cholestérol (TICE)." Nantes, 2013. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=645cf6fc-9154-4880-bf2e-f248e3dcdcc6.

Full text

Abstract:

L'objectif de cette thèse a été d'apporter une base moléculaire aux mécanismes mis en jeu dans l'excrétion transintestinale du cholestérol (TICE). Cette voie, complémentaire à la voie biliaire, permet l'efflux du cholestérol plasmatique directement à travers la muqueuse intestinale. Au cours de ma thèse, J'ai mis en évidence que le TICE est un processus métabolique actif sensible à la température et à l'oxygène. J'ai démontré in vivo et ex vivo chez la souris mais également pour la première fois ex vivo chez l'homme, qu'à la fois les lipoprotéines plasmatiques de type LDL (Low density lipoprotein) ou HDL (High density lipoprotein) peuvent fournir du cholestérol au TICE. Bien que le LDLR (récepteur au LDL) ne soit pas indispensable au TICE, la modulation de son expression affecte le TICE. Ainsi, l'absence de PSCK9 (Proprotein convertase subtilisin / kexin type 9), un inhibiteur endogène du LDLR, ou un régime enrichi en statines augmentent l'expression intestinale du LDLR et stimulent le TICE. Enfin, j'ai également montré que le TICE est inductible par la diosgénine, un stéroïde végétal connu pour ses propriétés hypocholestérolémiantes. Les mécanismes moléculaires impliqués restent néanmoins à être identifiés. Au niveau apical, le transporteur multidrogues ABCB1 participe avec l'hétérodimère ABCG5/G8 à l'efflux entérocytaire du cholestérol. Mes travaux de thèse ont contribué à mieux comprendre les mécanismes moléculaires impliqués dans le fonctionnement et la régulation de cette voie. Sa caractérisation pourrait permettre à terme d'ouvrir de nouvelles perspectives thérapeutiques pour lutter contre l'hypercholestérolémie et les maladies cardiovasculaires chez l'homme The aim of this thesis was to provide a molecular basis for the mechanisms involved in transintestinal cholesterol excretion (TICE). This pathway, complementary to the biliary pathway, allows the plasma cholesterol efflux directly through the intestinal mucosa. During my thesis, I have shown that TICE is an active metabolic process, temperature and oxygen -sensitive. I have demonstrated in vivo and ex vivo in mice but also for the first time ex vivo in humans, that both types of plasma lipoproteins LDL (Low density lipoprotein) and HDL (High density lipoprotein) can provide cholesterol for TICE. Even if the LDLR (LDL receptor) is not essential for TICE, its expression modulation affects TICE. Thus, the absence of PSCK9 (Proprotein convertase subtilisin / kexin type 9), an endogenous inhibitor of the LDLR or a statins-enriched diet, increase LDLR intestinal expression and stimulate TICE. Finally, I also found that TICE is inducible by diosgenin, a plant steroid known for its cholesterol-lowering properties. However, the molecular mechanisms involved remain to be identified. At the apical level, the multidrug transporter ABCB1 is involved with the heterodimer ABCG5/G8, in the enterocyte cholesterol efflux. During my PhD training, I have contributed to a better understanding of the molecular mechanisms involved in this pathway. Its characterization could eventually lead to open new therapeutic perspectives in the struggle against high cholesterol and cardiovascular disease in humans

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

8

Mesli, Samir. "Rôle du Lipolysis Stimulated Receptor (LSR) : expression chez la souris adulte et au cours de l'embryogénèse : conséquences de l'invalidation du gène LSR." Bordeaux 2, 2005. http://www.theses.fr/2005BOR21308.

Full text

Abstract:

Le Lipolysis Stimulated Receptor (LSR) fixe les lipoprotéines contenant l'apolipoprotéine (apo) B et l'apoE en présence des acides gras, et son affinité est optimale pour les fractions lipoprotéiniques les plus riches en triglycérides. Dans notre étude, nous avons utilisé les techniques du Northern blot, de la PCR quantitative en temps réel et de l'immunofluorescence pour examiner l'expression du LSR chez la souris adulte et au cours du développement embryonnaire. Chez l'adulte l'ARNm LSR est retrouvé dans tous les tissus étudiés sauf dans le muscle et le coeur. Les ARNm sont abondants dans le foie, le poumon, l'intestin, le rein et dans certains tissus stéroidogéniques (ovaires et testicules). Ils sont également présents à tous les stades embryonnaires étudiés. Les résultats de l'expression protéique sont corrélés à ceux de l'expression transcriptionnelle. Ainsi, le "patron" d'expression du LSR chez la souris adulte apporte des arguments supplémentaires sur son rôle possible de ce récepteur dans le transport lipidique au niveau de ces organes. Afin d'étudier le rôle physiologique du LSR in vivo, nous avons tenté d'obtenir des souris LSR-/- par recombinaison homologue. Sur un total de 379 souris génotypées, trois homozygotes seulement ont été identifiées. Cette répartition montre une grande létalité des homozygotes. Celle-ci se produit entre 12,5 et 15,5 jours de gestation. Les embryons LSR-/- se distinguent par un foie de taille réduite. Ces résultats indiquent que le LSR est indispensable pour le développement embryonnaire. Par ailleurs, étant donné que les souris hétérozygotes ne présentent aucun phénotype particulier, nous avons voulu analyser l'impact de l'invalidation de l'un des deux allèles du LSR chez des souris totalement déficientes en un autre récepteur de lipoprotéines à apoB/E, le LDLR. Comparés aux souris LDL-/-, les doubles mutants [LSR+/- ; LDR-/-] appelés LDLSR ont des taux plasmatiques de cholestérol total significativement plus faibles par diminution du cholestérol contenu dans les lipoprotéines non LDL et HDL. Ce résultat pourrait être expliqué par l'intervention de mécanismes compensateurs comme l'augmentation de l'activité d'autres récepteurs de lipoprotéines. Grâce au modèle LDLSR, nous avons pu mettre en évidence pour la première fois un rôle in vivo du LSR dans la régulation du métabolisme du cholestérol et des lipoprotéines The lipolysis stimulated receptor (LSR) recognizes apolipoprotein B/E-containing lipoproteins in the presence of free fatty acids, and is thought to be involved in the clearance of triglyceride-rich lipoproteins (TRL). The distribution of LSR in mice was studied by Northern blots, quantitative PCR and immunofluorescence. In the adult, LSR mRNA was detectable in all tissues except muscle and heart, and was abundant in liver, lung, intestine, kidney, ovaries and testes. During embryogenesis, LSR mRNA was detectable at 7. 5 days post-coitum (E7) and increased up to E17 in parallel to prothrombin, a liver marker. In adult liver, immunofluorescence experiments showed a staining at the periphery of hepatocytes as well as in fetal liver at E12 and E15. These results are in agreement with the assumption that LSR is a plasma membrane receptor involved in the clearance of lipoproteins by liver, and suggest a possible role in steroidogenic organs, lung, intestine and kidney. To explore the role of LSR in vivo, the LSR gene was inactivated in 129/Ola ES cells by removing a gene segment containing exons 2-5, and 129/Ola-C57BL/6 mice bearing the deletion were produced. Although heterozygotes appeared normal, LSR homozygotes were not viable, with the exception of three males, while the total progeny of genotyped wild-type and heterozygote pups was 376. Mortzality of the homozygote embryos was observed between days 12. 5 and 15. 5 of gestation, a time at which their liver was much smaller than that of their littermates, indicating that the expression of LSR is critical for liver and embryonic devellopment. To evaluate the effect of inactivation of one allele LSR in LDL receptor-deficient mice, we produce double knockout animals [LSR+/-] called LDLSR Total plasma cholesterol concentration were approximately 40 % less as compared with LDLR-/- mice These finding supported the hypothesis of upregulation of other receptors in LDLSR mice

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

9

Descamps-Baveye, Sophie. "Rôles de la lactoferrine dans la défense antibactérienne et la régulation de la réponse inflammatoire induite par les lipopolysaccharides et leurs récepteurs." Lille 1, 2000. http://www.theses.fr/2000LIL10187.

Full text

Abstract:

La lactoferrine est une glycoprotéine présente dans de nombreux milieux de sécretion et libérée des granules des neutrophiles durant l'inflammation. Les rôles biologiques décrits pour la lactoferrine sont centrés essentiellement sur la défense antimicrobienne et la réponse inflammatoire de l'organisme. Dans un premier temps, nos études ont porté sur l'activité bactéricide de la lactoferrine. Dans ce cadre, nous avons étudié les interactions de la lactoferrine avec les porines, protéines ancrées dans la membrane externe des bactéries gram négatif. Nous montrons que la lactoferrine se fixe sur les porines ompc et phoe d'e. Coli purifiées ou intégrées dans la membrane des bactéries gram négatif. Des études d'électrophysiologie démontrent que la lactoferrine limite la perméabilité membranaire de la porine ompc. Par ailleurs, la lactoferrine accélère la lyse de bactéries exprimant ompc ou phoe en phase stationnaire. L'ensemble de ces résultats suggère que la lactoferrine interagit avec les porines à la surface des bactéries gram négatif et exerce ainsi, en partie, son activite bactéricide Dans une deuxième étape, nous nous sommes intéressés au rôle de la lactoferrine dans la régulation du processus inflammatoire induit par les lipopolysaccharides (lps) et leurs récepteurs. Dans ce contexte, nous montrons que la lactoferrine peut interagir avec le cd14 soluble (cd14s), un récepteur spécifique des lps, qui est implique dans l'activation de l'endothelium. La fixation de la lactoferrine sur le cd14s et sur le complexe cd14s-lps entraîne une inhibition de l'expression de molécules d'adhésion induite par le complexe cd14s-lps a la surface des cellules endothéliales. Par ailleurs, la lactoferrine inhibe la fixation des lps sur un autre récepteur, la sélectine l, et diminue ainsi la production de radicaux libres chez les neutrophiles. Ces travaux éclairent certains des mécanismes par lesquels la lactoferrine exerce ses activités anti-inflammatoires

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

10

Herbin, Olivier. "Modulation de la réponse lymphocytaire dans la physiopathologie de l'athérosclérose expérimentale." Paris 7, 2010. http://www.theses.fr/2010PA077141.

Full text

Abstract:

Les divers progrès réalisés dans la physiopathologie de l'athérosclérose ont souligné le rôle central de Tinflammation à toutes les étapes du développement de la maladie vasculaire. De nombreux types cellulaires participent au développement et à la rupture des plaques d'athérosclérose, comme les monocytes/macrophages et les lymphocytes T CD4+. Une sous population lymphocytaire T, appelée T régulatrice, a été identifiée comme athéro-protéctrice. En effet, elle diminue le développement des plaques d'athérosclérose et induit un phénotype lésionnel plus stable. Au cours de ce travail de thèse, nous nous sommes intéressés à cette population T régulatrice. Dans un premier travail nous avons montré que la leptine, une adipokine, altère la fonction T régulatrice et que cet effet est capable, à lui seul, d'accélérer le développement de l'athérosclérose. Dans une approche plus appliquée, nous avons réussi à expandre in vivo la population T régulatrice naturelle grâce à l'administration de peptides dérivés de la protéine apoBlOO. Un tel traitement a alors permis de réduire le développement de l'athérosclérose chez la souris. A l'inverse, des lymphocytes T, les lymphocytes B étaient considérés comme anti-athérogènes. En effet, les différents travaux, essentiellement basés sur leur propriété humorale, montrent que les anticorps naturels anti-LDL oxydées limitent le développement des plaques d'athérosclérose. Pour la première fois, en utilisant un anticorps monoclonal deplétant les lymphocytes B chez des souris sensibles à l'athérosclérose, nous avons montré que les lymphocytes B favorisent le développement de la maladie en stimulant les réponses cellulaires adaptatives T-dépendantes Atherosclerosis is an inflammatory disease of the arterial wall. Several cell types, like monocytes/macrophages and T lymphocytes are involved in atherosclerosis development and plaque rupture. Also, a sub-population of T cells, called regulatory T cells has shown a protective effect on atherosclerosis. Indeed, these cells limit plaque development and induce a more stable phenotype. My thesis was mainly focussed on this population in atherosclerosis. In a first study, we showed that leptin, an adipokin, inhibits regulatory T cells, which alone increases atherosclerosis development. In another study, we were able to expand in vivo the population of natural regulatory T cells by administration of apoBlOO derived peptides. This treatment resulted in a decrease of atherosclerosis development and progression in mice. Inversely to the T cells, B lymphocytes were considered as anti-atherogenic. Indeed, different studies, based on the humoral immunity, showed that antibodies anti-oxidized LDL limit the development of atherosclerosis. For the first time, using a monoclonal antibody that depletes B cells in atherosclerosis prone mice, we highlight the pro-atherogenic role of B cells induced by stimulation of T cell- dependent responses

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

11

Legueux, François Jacques Yves. "Le transporteur de cholestérol STARD3, surexprimé dans les cancers du sein, un régulateur du trafic du récepteur à l'EGF." Strasbourg, 2010. https://publication-theses.unistra.fr/restreint/theses_doctorat/2010/LEGUEUX_Francois_Jacques_Yves_2010.pdf.

Full text

Abstract:

Le cancer du sein est la première cause de mortalité par cancer chez la femme. L'étude de métastases ganglionnaires de cancers du sein a permis d’isoler le gène STARD3 (StAR related lipid Transfer Domain3) au laboratoire. STARD3 est amplifié et surexprimé avec l'oncogène ERBB2 dans les cancers. STARD3 est une protéine ubiquitaire liant le cholestérol, localisée dans les endosomes tardifs. ERBB2 est un membre de la famille des récepteurs de l’EGF impliqué dans la progression métastatique. L'objectif de cette thèse a été de tester l’hypothèse selon laquelle, il existerait un lien fonctionnel entre STARD3 et ERBB2. Dans les cellules qui surexpriment STARD3, l'altération morphologique des endosomes entraîne un défaut d’adressage du récepteur à l'EGF (EGFR) et sa séquestration dans un compartiment intracellulaire. La réduction d'EGFR membranaire diminue la et nous avons mis en évidence que le cholestérol cellulaire et la cavéoline s'accumulent dans le compartiment positif pour STARD3. De plus, STARD3 interagit avec EGFR au sein des endosomes, le rendant insensible à la dégradation ligand induite. Ces travaux démontrent l'importance de STARD3 dans la réponse cellulaire aux récepteurs membranaires. Ils permettent également de proposer de nouvelles hypothèses quant au lien fonctionnel existant entre ERBB2 et STARD3 dans la pathologie. Les récepteurs ERBB font l'objet de nouvelles thérapies ciblées innovantes dont certaines sont actuellement utilisées en clinique. Cependant, seulement un tiers des patientes répondent au traitement. L'approfondissement des connaissances sur les gènes co-exprimés avec ERBB2 est essentiel pour l'amélioration de ces thérapies Breast cancer remains the first cause of mortality among women in France. A study of lymph node metastasis was used to isolate STARD3 gene (StAR related lipid Transfer Domain3). In cancers, STARD3 is amplified and overexpressed with ERBB2 oncogene. STARD3 is a ubiquitous late endosomal cholesterol-binding protein. ERBB2 is a EGF receptor family member involved in metastatic progression. The objective of this thesis was to test the hypothesis that STARD3 and ERBB2 are functionally linked. In STARD3 overexpressing cells, all different types of endosomes morphologicaly altered leading to strong decrease of the EGF ligand binding to the cell surface. The mechanism involved is based on receptor sequestration in intracellular compartment. The reduction of plasma membrane receptor resulted in strong reduction of EGF signaling. We have demonstrated that cellular cholesterol and caveolin (a cholesterol-binding protein) accumulate in the intracellular STARD3 compartment. In addition, STARD3 and EGFR interact within endosomes, making it insensitive to ligand-induced downregulation. This study highlights the role of STARD3 in the cellular response to membrane receptors. We could also propose new hypotheses about the functional relationship existing between ERBB2 and STARD3 in pathology. ERBB receptors represent potential new targeted therapies. For example, trastuzumab (Herceptin) is a humanized antibody directed against the extracellular portion of ERBB2 currently used clinically. However, only one-third of patients respond to treatment and resistance are poorly understood. A better knowledge of ERBB2-coexpressed genes is crucial for the improvement of therapies

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

12

Castet, Valérie. "Infection in vitro des hépatocytes humains en culture primaire par le virus de l'hépatite C, rôle des candidats récepteurs CD81 et LDL-R." Montpellier 1, 2002. http://www.theses.fr/2002MON13516.

Full text

Abstract:

L'infection par le VHC constitue un véritable problème de santé publique puisque 170 millions d'individus sont contaminés dans le monde. Le mécanisme d'infection et de réplication du virus dans le foie est très mal connu. Nous avons montré au laboratoire que les cultures primaire d'hépatocytes humains adultes sont sensibles à l'infection in vitro par le VHC et permissives à la réplication du génome viral. Ce système représente donc un modèle très pertinent pour l'étude de l'effet antiviral de l'IFN alpha et pour l'étude des étapes précoces de l'infection. Dans la première partie de mon travail, nous avons montré que l'IFN alpha inhibe la réplication du VHC dans les hépatocytes infectés in vitro. Dans la deuxième partie, nous avons étudié les étapes précoces de l'infection virale. Deux récepteurs candidats sont proposés dans la littérature : la tétraspanine CD81 et le récepteur des lipoprotéines de faible densité (LDL-R). Par des stratégies d'inhibition à l'aide d'anticorps anti-CD81 et anti-LDL-R et par des expériences de compétition avec des formes solubles de ces protéines, nous avons montré que la protéine CD81 et le LDL-R sont impliqués dans le processus d'infection in-vitro par le VHC des hépatocytes humains en culture primaires. En conclusion, les cultures primaires d'hépatocytes humains constituent un excellent modèle pour l'étude de l'entrée du VHC et pour mettre en évidence les récepteurs ou co-récepteurs du VHC.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

13

Hanse, Marine. "Rôle du récepteur aux lipoprotéines, LSR, dans la régulation du transport et de la distribution des lipides alimentaires." Thesis, Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 2011. http://www.theses.fr/2011INPL086N/document.

Full text

Abstract:

Le récepteur hépatique aux lipoprotéines LSR est impliqué dans la clairance des lipoprotéines riches en triglycérides telles que les résidus de chylomicrons pendant la phase postprandiale. La réduction de l’expression du LSR chez la souris (LSR+/-) est associée à une dyslipidémie et une lipémie postprandiale élevée. Afin de mieux comprendre la régulation de la distribution des lipides alimentaires, nous avons cherché quels étaient les facteurs pouvant affecter le niveau protéique de LSR. La leptine, hormone sécrétée par le tissu adipeux et connue pour son action d’hormone de satiété au niveau du système nerveux central, a été démontrée dans cette thèse comme modulant l’expression de LSR par la régulation de la transcription du gène lsr. La leptine est impliquée dans la régulation de la lipogénèse à travers SREBP-1. Grâce à l’utilisation d’un extrait de Garcinia cambogia contenant un inhibiteur de l’ATP citrate lyase, nous avons démontré une interaction importante entre les enzymes lipogéniques, l’expression de LSR et d’autres récepteurs lipoprotéiques, afin de maintenir un équilibre entre la synthèse de lipides endogènes et l’apport alimentaire de lipides exogènes. Soumises à un régime hyperlipidique, les souris sauvages montrent une diminution de l’expression des enzymes lipogéniques hépatiques, aggravée chez les souris LSR+/-. Ces résultats indiquent qu’il existe un mécanisme de maintien de l’équilibre entre la lipogénèse (synthèse endogène de lipides), la lipolyse (utilisation lipidique comme substrat énergétique) et le stockage de lipides à travers une forte interaction entre les enzymes lipogéniques et LSR The hepatic lipoprotein receptor LSR is involved in the clearance of triglyceride-rich lipoproteins including chylomicrons remnants during the post-prandial phase. Reduced LSR protein expression in mice (LSR+/-) is associated with dyslipidemia and increased postprandial lipemia; these mice exhibit increased weight gain with aging or when placed under a high-fat diet. In order to better understand the regulation of the distribution of dietary lipids, we looked for factors that could regulate LSR protein levels. Leptin is a hormone secreted by the adipose tissue that is a centrally-acting satiety factor, and was demonstrated to modulate LSR mRNA and protein expression through the modulation of transcription of the gene lsr. Leptin has been reported be involved in the control of lipogenesis through SREBP-1c. Using Garcinia cambogia extract containing an inhibitor of ATP citrate lyase, we demonstrated that there is an important link between lipogenic enzymes and LSR protein levels and with other lipoprotein receptors that provides the means to maintain a balance between endogenous lipid synthesis and dietary intake of exogenous lipids. When exogenous lipid intake is increased in the form of a high-fat diet, mice exhibited a decrease in hepatic lipogenic enzymes expression, but a deficiency of LSR led to increased lipid content in the peripheral tissues. These results suggest the presence of mechanisms for the maintenance for the balance between lipogenesis (de novo endogenous lipid synthesis), lipolysis (lipids used as energy substrate), and lipid storage through an important link between lipogenic enzymes and LSR

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

14

Sali, Wahib. "Physico-chimie des lipopolysaccharides et réponse inflammatoire : rôle des lipoprotéines." Thesis, Dijon, 2014. http://www.theses.fr/2014DIJOS051/document.

Full text

Abstract:

Le LPS est un puissant agent pro-inflammatoire bactérien, dont la partie lipide A est considérée comme le principe actif. Néanmoins, la chaîne O des LPS influence leur agrégation en solution aqueuse. Notre but a été de déterminer le rôle de la chaîne O sur les effets biologiques et physiopathologiques des LPS.Nos travaux, menés selon trois axes stratégiques complémentaires, ont donné lieu aux avancées suivantes :- développement d'un dosage innovant des LPS par LC-MS/MS et d'un ratio d'inactivation des LPS sur la base d'une utilisation combinée dudit dosage et du test LAL. Ce ratio traduit la capacité d'un organisme hôte à inactiver les LPS, notamment par leur transfert aux HDL par la PLTP. Ce ratio pourrait être utile dans l'évaluation des patients à haut risque.- la longueur de la chaîne O module l'inflammation induite par les LPS. Au-delà de leur concentration d'agrégation critique, les LPS forment des agrégats dotés d’une architecture et de propriétés physico-chimiques dépendant de leur chaîne O. Ces deux paramètres déterminent l'activité biologique des LPS et leur métabolisme ;- développement d'un double marquage innovant des LPS confirmant leur voie principale d'élimination : le transport inverse du LPS. Ce travail définit donc les effets physiopathologiques induits par les LPS comme résultant de deux composantes : leur activité biologique et leur métabolisme. Toute stratégie de recherche ou thérapeutique ciblant les LPS, devrait donc prendre en compte leur structure moléculaire, leur agrégabilité et la relation entre ces deux paramètres, déterminants majeurs de l'activité biologique des LPS et de leur métabolisme LPS is a potent bacterial pro-inflammatory agent, consisting of hydrophilic, polysaccharide part and of a lipid A which is considered like active moiety. Nevertheless, the O chain of LPS influences their aggregation in aqueous media. Therefore, our goal has been to determine the role of O chain on the LPS biological and physiopathological effects. Our work was organized according to three main axes, and led to the following findings :- development of a new LPS assay by LC-MS/MS. The combination of this new technique with LAL test allowed us to calculate an inactivation ratio which reflects the ability of host organism to inactivate LPS, especially through their transfer to HDL by PLTP. The ratio could be useful in predicting outcome of high risk patients.- the length of O chain modulates LPS-induced inflammation. Above their critical aggregation concentration, LPS form aggregates with an architecture and physiochemical properties dependent on their O chain. Both parameters determine LPS biological activity and their metabolism.- development of an innovative dual labelling of LPS as a new tool to explore LPS elimination pathway : the reverse LPS transport. This work brings evidence that the physiopathological effects of LPS depend on two parameters : their biological activity and their metabolism. Any strategy of research or therapeutic targeting LPS should take into account their molecular structure, their aggregability and the relation between the both parameters, which are major determinants of their biological activity and their metabolism

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

15

Gueddari, Nai͏̈ma. "Mise en évidence et expression du récepteur aux LDL dans des lignées tumorales humaines : étude de sa régulation dans la lignée d'adénocarcinome pulmonaire A549." Toulouse 3, 1993. http://www.theses.fr/1993TOU30160.

Full text

Abstract:

Des sites de liaison aux ldl ont ete mis en evidence dans les lignees tumorales humaines d'origine epitheliale a549, mcf 7, igrov 1 et ovccr. L'analyse des resultats par la methode de scatchard revele une heterogeneite dans les affinites et les capacites de fixation maximale de ces sites dans ces lignees. Cette heterogeneite est retrouvee au niveau des taux d'arnm specifique du rldl exprimes par ces lignees. Les sites de liaison aux ldl exprimes par la lignee a549 sont sujets a une regulation par retrocontrole par les sterols. Cette regulation est relativement faible par rapport a celle observee dans les fibroblastes. Le nombre de sites et le taux d'arnm specifique, plus eleves en presence de cholesterol, sont moins stimules, lors d'une deprivation en cholesterol, que dans les fibroblastes. Cependant lorsque les cellules sont aussi deprivees en cholesterol endogene (biosynthese bloquee par la compactine), la capacite de liaison et le taux d'arnm specifique sont a nouveau stimules dans les cellules a549 mais pas dans les fibroblastes. Cette stimulation est abolie en presence de ldl. Par ailleurs, l'inhibition de l'activite tyrosine kinase entraine une baisse du nombre de sites rldl associee a une disparition d'arnm specifique. Ces travaux apportent des arguments en faveur d'anomalies de fonctionnement du rldl dans les cellules a549 qui aboutissent a leur surexpression dans un milieu contenant des lipoproteines. D'autre part, ils mettent en lumiere l'importance de l'activite de l'hmgcoa reductase et le role de la voie des tyrosine kinases dans la regulation de l'expression du rldl dans ces cellules

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

16

Marduel, Marie. "Génétique de l’hypercholestérolémie familiale, de l’analyse des mutations fréquentes à l’identification d’un gène impliqué dans des formes rares." Paris 5, 2010. http://www.theses.fr/2010PA05T046.

Full text

Abstract:

L’hypercholestérolémie est un risque majeur d’athérosclérose et de maladies cardiovasculaires graves. Elle a souvent des causes multifactorielles, mais il existe aussi des formes monogéniques, comme l’Hypercholestérolémie Familiale (HCF), caractérisée par une hyperLDLémie isolée. L'HCF est une maladie fréquente qui n’est que partiellement élucidée sur le plan génétique. Trois gènes majeurs sont connus : LDLR (récepteur des lipoprotéines LDL), APOB (apolipoprotéine B, constituant des LDL et ligand de leur récepteur) et PCSK9 (enzyme régulant la quantité de récepteurs des LDL à la surface cellulaire). Notre équipe a localisé un 4ème gène majeur, HCHOLA4, et montré une hétérogénéité génétique encore plus grande. L’objectif était de procéder à l’analyse des mutations responsables d’HCF dans la population française et d’identifier un nouveau gène majeur. Nous avons décrit la répartition et la nature des mutations LDLR, APOB, PSCK9 et « autres » dans une cohorte de 1358 proposants, et montré une certaine spécificité française avec 45% des événements encore jamais rapportés. Leur causalité a été évaluée par des analyses in silico et/ou par étude de coségrégation. De plus, nous avons mis en évidence un gradient de sévérité entre ces différentes formes. Nous avons par ailleurs localisé un cinquième gène responsable d’HCF en 19q13. 31 et détecté plusieurs mutations dans l’APOE, qui n’ont pas été retrouvées dans une large série de témoins. Leurs effets ont été étudiés par des approches génétiques, d’analyses in silico et/ou in vivo. Ce travail a permis de décrire plus précisément l’HCF et de montrer que certaines mutations de l’APOE pouvaient être à l’origine d’une nouvelle forme d’HCF Hypercholesterolomia is a major risk factor for atherosclerosis and serious cardiovascular weaknesses. It often is caused by more than one factor, but there exist monogenic forms, like Autosomal Dominant Hypercholesterolemia (ADH), that are caracterised by high levels of plasmatic LDL cholesterol. ADH is a frequent disease, but its molecular bases are not fully understood. Three major genes had been identified so far : LDLR (LDL receptor), APOB (apolipoprotein B, constituent of LDL accepted by their receptors) and PCSK9 (an enzyme regulating the quantity of receptors at the surface of their cell). Our team had recently identified a 4th major gene, HCHOLA4, and showed that the disease was genetically more heterogenous. The objective of the present work was to analyse mutations responsible of ADH in the French population, and search another major gene. We have analysed the distribution and the nature of the mutations LDLR, APOB, PSCK9 and “others” in 1358 French probands and shown a specific spectrum of mutations in the French population : 45% of the events had not been reported before. Their causal effect has been assessed by in silico analyses and/or by cosegretation studies. Moreover, we showed a gradient of severity between different ADH causing gene. We have also localised a 5th gene responsible of ADH, in 19q13. 31, and detected several mutations in the APOE gene that have not been traced in a normocholesterolemic control population. Effects of the mutations have been gauged by genetic approach and in silico and in vivo analysis. This work has thus been able to describe ADH more precisely, and show that some mutations of APOE might be the cause for a new type of ADH

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

17

Le, Borgne Roland. "Rôle des récepteurs du mannose 6-phosphate dans le recrutement des adaptateurs golgiens sur les membranes du réseau trans-golgien." Montpellier 2, 1995. http://www.theses.fr/1995MON20242.

Full text

Abstract:

La connection entre la voie de secretion et celle de l'endocytose est assuree par des vesicules mantelees par les proteines adaptatrices ap-1 et de la clathrine. Ces vesicules assurent le transport des deux recepteurs du mannose 6-phosphate et de leurs ligands, les enzymes lysosomiales, depuis le reseau trans-golgien vers les endosomes. Une des questions fondamentales en biologie cellulaire est de comprendre les mecanismes de recrutement et d'assemblage des composants du manteau sur le compartiment donneur, conduisant au tri et a l'empaquetage selectif de molecules au sein de la vesicule naissante. En prenant pour exemple les recepteurs du mannose 6-phosphate, notre travail a consiste a etudier les bases moleculaires de ces mecanismes de tri de proteines. Pour se faire, nous avons reconstitue in vitro la premiere etape de la formation d'une vesicule de transport mantelee par de la clathrine, c'est a dire l'interaction des proteines adaptatrices ap-1 sur les membranes du reseau trans-golgien. Cet essai in vitro nous a permis de montrer que les recepteurs du mannose 6-phosphate agissent de concert avec une petite gtpase de la famille des arfs pour permettre l'assemblage efficace du manteau de clathrine sur les membranes du reseau trans-golgien. De plus, nous avons determine le motif proteique, present dans le domaine cytoplasmique des recepteurs du mannose 6-phosphate, necessaire aux interactions avec les proteines adaptatrices (signal de tri). Ainsi, nous proposons que le tri de proteines transmembranaires est intimement couple a l'assemblage du manteau de clathrine. Le processus decrit ici pour l'implication des recepteurs du manose 6-phosphate dans l'assemblage du manteau de clathrine au niveau du reseau trans-golgien pourrait s'averer etre un mecanisme general pour la formation de vesicules de transport mantelees

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

18

Pinçon, Anthony. "Implication du récepteur LSR (lipolysis stimulated lipoprotein receptor) dans le contrôle de l’homéostasie du cholestérol cérébral et les capacités cognitives au cours du vieillissement." Thesis, Université de Lorraine, 2014. http://www.theses.fr/2014LORR0141/document.

Full text

Abstract:

La maladie d'Alzheimer (MA) est une maladie neurodégénérative touchant plusieurs millions de personnes. La MA a une origine multifactorielle. Diverses études suggèrent qu'une perturbation du métabolisme du cholestérol contribue au développement de la MA. Cependant, la littérature présente beaucoup de confusion. Il est donc crucial de mieux caractériser le métabolisme et l'implication du cholestérol dans la MA. Ce travail s'est intéressé au récepteur Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor (LSR) qui est un récepteur hépatique aux lipoprotéines participant à la clairance des lipides en phase post prandiale. Les objectifs de cette thèse ont été de caractériser la présence du récepteur LSR dans le cerveau de souris, de déterminer son rôle dans le contrôle de l'homéostasie du cholestérol cérébral et dans la physiopathologie de la MA. Ainsi, nous avons caractérisé la présence de LSR dans des structures cérébrales importantes pour les capacités cognitives et le métabolisme énergétique. Grâce à un modèle de souris hétérozygote pour le récepteur LSR, nous avons mis en évidence que la délétion d'un allèle LSR entraine une altération du métabolisme du cholestérol cérébral au cours du vieillissement, qui est corrélée avec une augmentation de la sensibilité au stress amyloïde. Ces résultats suggèrent un rôle du récepteur LSR dans le contrôle de l'homéostasie du cholestérol cérébral et renforcent l'idée qu'une altération de cette dernière peut impacter la physiopathologie de la MA. Enfin, nous avons observé que la déficience d'un allèle LSR chez des souris placées sous un régime hyperlipidique pouvait impacter le métabolisme lipidique périphérique ainsi que l'anxiété de ces souris Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease affecting millions of people. The origin of AD is multifactorial. Studies suggest that disturbance of cholesterol metabolism contributes to AD development. However, data in the literature is conflicting. It is therefore crucial to better characterize the metabolism and involvement of cholesterol in AD. This work focused on the Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor (LSR), a hepatic lipoprotein receptor involved in the clearance of lipoproteins during the postprandial phase. The objectives of this thesis were to characterize LSR receptor expression profile in the mouse brain, and to determine its role in both brain cholesterol homeostasis and in the pathophysiology of AD. We identified and characterized LSR expression in brain structures that are involved in cognitive abilities and the regulation of energy metabolism. Next, using a mouse model heterozygous for the LSR receptor, we were able to demonstrate that the deletion of one allele LSR causes impaired brain cholesterol metabolism in aging, which was correlated with increased susceptibility to amyloid stress. These results suggest a role of LSR receptor in brain cholesterol homeostasis and show that alterations of the brain cholesterol metabolism can impact AD pathophysiology. Finally, we observed that the deficiency of an LSR allele in mice on a high fat diets affected peripheral lipid metabolism and the anxiety in these mice

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

19

Espinosa, Delgado Sara. "Contribution respective des récepteurs P2Y13 et SR-BI dans le métabolisme du HDL-C et le développement de l'athérosclérose." Thesis, Toulouse 3, 2017. http://www.theses.fr/2017TOU30053.

Full text

Abstract:

L’effet athéroprotecteur des Lipoprotéines de Haute Densité (HDL) est principalement attribué à leur rôle clé dans Transport Retour du Cholestérol (RCT), un processus par lequel le cholestérol excédentaire des cellules périphériques est capté par les particules HDL pour être amené au foie où il sera préférentiellement sécrété dans les voies biliaires, puis excrété dans les fèces. Deux voies indépendantes ont été identifiées comme étant impliquées dans l’endocytose hépatique du HDL. La première est la voie ecto-F1-ATPase/P2Y13 dans laquelle l’apoA-I (apolipoprotéine majoritaire des HDL) se lie à la F1-ATPase exprimé à la surface des hépatocytes (ecto-F1-ATPase) et stimule l’hydrolyse d’ATP en ADP. L’ADP ainsi généré active le récepteur purinergique P2Y13 pour stimuler l’endocytose de l’holoparticule HDL (protéines + lipides) via un troisième récepteur différent de SR-BI. Les souris invalidées pour P2Y13 présentent une diminution des sécrétions de lipides biliaires accompagnée d’une diminution du RCT des macrophages vers les fèces sous régime normolipidique. Un régime riche en cholestérol (1.25% cholestérol) accentue ce phénotype. La voie SR-BI, quant à elle, est responsable de la captation sélective du cholestérol estérifié des HDL par le foie. Les souris invalidées pour SR-BI spécifiquement au niveau du foie (SR-BI KOfoie) présentent une hypercholestérolémie principalement attribuée à une augmentation du HDL-C et développent des plaques d’athérosclérose sous régime hypercholestérolémique. Dans une étude récente, nous avons montré que l’invalidation de P2Y13 dans le modèle murin proathérogène apoE KO induit une augmentation du développement d’athérosclérose associée à une diminution des sécrétions de lipides biliaires et du RCT des macrophages vers les fèces. De plus, dans ces souris, l’expression hépatique transcriptionnelle et protéique de SR-BI étaient fortement augmentées par rapport aux souris apoE KO, suggérant qu’un possible mécanisme de compensation pourrait exister entre les récepteurs P2Y13 et SR-BI. L’objectif de ma thèse a été d’étudier la contribution respective des récepteur P2Y13 et SR-BI dans le métabolisme du HDL-C et le développement de l’athérosclérose. Nous avons croisé des souris P2Y13 KO avec des souris SR-BI KOfoie et nous avons obtenu des souris doublement invalidées (P2Y13 x SR-BIfoie dKO). Le phénotype métabolique des souris dKO a été étudié sous régime normolipidique et hypercholestérolémique et le développement d’athérosclérose sous régime hypercholestérolémique. Par rapport aux souris sauvages, les souris dKO sous régime normolipidique, présentent une augmentation du cholestérol plasmatique similaire à celle observée chez les souris SR-BI KOfoie, principalement imputable à une augmentation du HDL-C. Les souris dKO, mais pas les souris SR-BI KO, montrent une diminution des sécrétions de lipides biliaires comparable à celle observée chez les souris P2Y13 KO. Ce phénotype métabolique observé chez les souris dKO est accentué sous régime hypercholestérolémique et est associé à une augmentation des plaques d’athérosclérose par rapport aux souris SR-BI KOfoie. L’ensemble des résultats montrent que la délétion hépatique de SR-BI contribue essentiellement à une augmentation des taux plasmatiques de cholestérol, et plus particulièrement HDL-C. La délétion de P2Y13, quant à elle, n’induit aucune variation des lipides plasmatiques mais contribue principalement à une diminution des sécrétions de lipides biliaires qui contribue au développement de l’athérosclérose chez les souris invalidées pour SR-BI hépatique. Ces résultats soutiennent le concept selon lequel le flux de cholestérol transporté par les HDL des tissus périphériques vers le foie et les voies de sécrétions biliaires est plus important dans l’athéro-protection que la concentration plasmatique en HDL-C. L’activation du récepteur P2Y13 constitue une approche thérapeutique intéressante pour cibler les HDL contre le développement de l’athérosclérose The atheroprotective effect of High Density Lipoproteins (HDL) is mostly attributed to their central role in Reverse Cholesterol Transport (RCT), a process whereby excess cholesterol is taken up from peripheral cells to be processed into HDL particles, then later delivered to the liver where it is preferentially secreted into the bile, either as free cholesterol or after transformation into bile acids, to be further excreted into the feces. Two independent pathways have been identified as being involved in the hepatic HDL uptake. The first one involves the ecto-F1-ATPase/P2Y13 pathway. Briefly, apoA-I (main HDL apolipoprotein) binds to the F1-ATPase expressed ectopically at the surface of the hepatocyte (ecto-F1-ATPase) and stimulates hydrolysis of extracellular ATP into ADP. The generated ADP selectively activates the purinergic receptor P2Y13 resulting in subsequent endocytosis of the HDL-holoparticle (i.e. protein and lipid moieties) through a low-affinity binding site distinct from SR-BI. Mice deficient for P2Y13 display decreased biliary lipids secretion associated to an impaired macrophage-to-feces RCT when fed a Chow Diet (CD), phenotype emphasized when fed a High Cholesterol Diet (HCD). Differently, the SR-BI pathway mediates selective HDL-cholesteryl ester uptake by the liver. Mice with liver-specific SR-BI deficiency (SR-BI-KOliver) display a hypercholesterolemia mainly due to an increase on HDL-C and develop atherosclerosis when fed a HCD. In a recent study, we showed that P2Y13 extinction in the pro-atherogenic mouse model apoE-KO resulted in an increase of atherosclerotic plaque development associated to a decreased biliary lipid secretion and macrophage-to-feces RCT. Moreover, in these mice, mRNA and protein level of hepatic SR-BI were consistently increased as compared to apoE KO mice, suggesting that a possible compensatory mechanism might exist between P2Y13 and SR-BI receptors. My thesis aimed to study the respective contribution of P2Y13 and hepatic SR-BI in HDL-C metabolism and atherosclerosis development. We crossbred P2Y13 KO with SR-BI KOliver mice and obtained double knockout mice (P2Y13 x SR-BIliver dKO). The phenotype of dKO mice was analysed with regards to HDL-C metabolism either on CD or after 20 weeks of HCD, and to atherosclerosis development on HCD. When fed a CD, dKO mice, showed an increase in plasma cholesterol compared to WT mice similar to that observed in SR-BI KOliver mice, mainly due to an increase in HDL-C. DKO, but not SR-BI KOliver mice, showed impaired biliary lipid secretion to the same extent than P2Y13 KO mice. HCD accentuated the metabolic phenotype of dKO mice, with an increase in atherosclerotic lipid lesions in dKO mice compared to SR-BI KOliver mice. The phenotypic features of P2Y13 x SR-BIliver dKO mice show that hepatic extinction of SR-BI essentially contributes to an increase of HDL-C levels. Conversely, P2Y13 extinction does not induce any change in plasma lipoprotein levels but mainly contributes to a decrease of hepato-biliary cholesterol secretions, which translates into an increased atherosclerosis development, on top of SR-BI hepatic extinction. These results support the concept that the dynamic flux of cholesterol transported by HDL from macrophage foam cells to the liver for further bile secretion is essential for athero-protection rather than steady-state HDL-C concentration. In the future of HDL-therapies, P2Y13 receptor activation constitutes an interesting therapeutic approach against atherosclerosis development

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

20

Blanchard, Valentin. "Approches biochimique, épidémiologique et clinique du métabolisme intégré de la Lipoprotéine (a)." Thesis, La Réunion, 2020. http://www.theses.fr/2020LARE0007.

Full text

Abstract:

Une personne sur cinq dans la population générale présente des niveaux plasmatiques élevés en lipoprotéine (a) [Lp(a)], une lipoprotéine extrêmement athérogène qui ressemble aux LDL. Les études physiopathologiques, épidémiologiques, et génétiques démontrent que lorsque la concentration sanguine en Lp(a) dépasse 125 nmol/L, la survenue d’événements cardiovasculaires augmente très fortement. La différence structurale majeure entre Lp(a) et LDL est que la Lp(a) contient une protéine caractéristique supplémentaire, l’apo(a), de taille très variable car elle contient entre 1 et 40 répétitions du domaine Kringle IV2 (KIV2). La taille de l’apo(a) est inversement corrélée aux concentrations plasmatiques en Lp(a). Outre l’apo(a), l’apoE et PCSK9 sont les deux seules autres protéines circulantes connues pour moduler les taux de Lp(a). L’objet de mes travaux de thèse a été de déterminer comment la taille de l’apo(a), le polymorphisme de l’apoE et l’inhibition pharmacologique de PCSK9 régulent les niveaux de Lp(a). Nous avons d’abord développé une approche méthodologique originale de spectrométrie de masse pour doser les apolipoprotéines, déterminer leurs polymorphismes, et en évaluer les flux métaboliques. Nous avons également mis au point une technique de séparation résolutive des différentes isoformes de l’apo(a) sur gel d’agarose. Nous montrons par spectrométrie de masse que l’apoE présente sur les VLDL gouverne la production (synthèse/assemblage) de la Lp(a). Par ailleurs, nous avons établi que les patients hypercholestérolémiques familiaux porteurs de l’isoforme E2 de l’apoE présentent des concentrations de Lp(a) plus faibles comparativement aux porteurs des isoformes E3 et E4, ce qui leur confère un taux de récidive pour les événements vasculaires réduit. Enfin, nous avons démontré chez des patients à haut risque cardiovasculaire que la réponse à un traitement par inhibiteurs de PCSK9 en termes de réduction de la Lp(a), est proportionnelle à la taille de l’apo(a). Nous avons également observé que le traitement par aphérèse d’un patient présentant des niveaux très élevés en Lp(a), le protège contre une récidive d’infarctus du myocarde. L’ensemble de mes résultats nous a permis de déterminer les modalités physiologiques par lesquelles la taille de l’apo(a) et le polymorphisme de l’apoE modulent les niveaux circulants de cette lipoprotéine extrêmement athérogène. Les thérapies actuelles (inhibiteurs de PCSK9, aphérèse) restent cependant insuffisantes pour une prise en charge optimale des patients avec une Lp(a) élevée One in five individuals in the population displays elevated circulating levels of lipoprotein (a) [Lp(a)], a highly atherogenic lipoprotein resembling LDL. Pathophysiological, epidemiological and genetic studies demonstrate that circulating Lp(a) levels above 125 nmol/L are associated with a sharp increase in cardiovascular events rate.The major structural difference between Lp(a) and LDL is that Lp(a) contains a signature protein, apo(a), extremely polymorphic in size as it contains 1 to more than 40 Kringle IV2 (KIV2) domains. The size of apo(a) is inversely correlated with the circulating levels of Lp(a). Besides apo(a), apoE and PCSK9 are the only other plasma proteins known to modulate Lp(a) levels. The aims of my PhD project were to assess how the size of apo(a), the polymorphism of apoE and the pharmacological inhibition of PCSK9 govern Lp(a) plasma concentrations. First, we have developed a robust methodological approach to quantitatively assay apolipoproteins, assess their polymorphisms and evaluate their metabolic fluxes by mass spectrometry. In addition, we have set up a resolutive separation technique allowing the investigation of distinct apo(a) isoforms on agarose gels. We then showed using mass spectrometry that apoE specifically present on VLDL impacts on Lp(a) production, synthesis and/or assembly. In addition, we clearly established that familial hypercholesterolemic patients specifically carrying the apoE2 isoform display reduced Lp(a) plasma levels and are thereby less prone to recurrent cardiovascular events compared with apoE3 or E4 carriers. Finally, we demonstrate that the response to PCSK9 inhibitor treatments of patients at high cardiovascular risk in terms of Lp(a) lowering is proportional to the size of apo(a). We also observed that apheresis procedures performed on a patient with extreme Lp(a) plasma levels reduce his risk of undergoing recurrent myocardial infarction. Taken together, my PhD results allowed us to decipher the physiological modalities by which apo(a) size and apoE polymorphism modulate the circulating levels of this extremely atherogenic lipoprotein species. The therapies currently available (PCSK9 inhibitors, plasmapheresis) remain however clearly insufficient to treat patients with elevated Lp(a)

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

21

Boucher, Philippe. "Régulation nutritionnelle de l'expression des principaux gènes qui contrôlent le métabolisme et la toxicité de l'alcool et du cholestérol alimentaire : CYP2E1, LDL récepteurs, HMG CoA réductase et LRP." Lyon 1, 1999. http://www.theses.fr/1999LYO1T160.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

22

Acier, Angelina. "Utilisation d’agents d’imagerie et de chimiothérapie conjugués à des peptides ciblant le récepteur aux LDL à des fins diagnostiques et thérapeutiques de l’adénocarcinome canalaire pancréatique." Thesis, Aix-Marseille, 2020. http://www.theses.fr/2020AIXM0030.

Full text

Abstract:

L’adénocarcinome pancréatique (ADKP) est l’un des cinq cancers les plus mortels avec un taux de survie à 5 ans de 8,2% et une médiane de survie de 6 mois. En raison de l’absence de symptômes précoces et de traitements efficaces, 85% des patients sont diagnostiqués à un stade avancé de la maladie. La détermination du profil métabolique de l’ADKP, que nous avons précédemment défini, a mis en exergue leur forte dépendance au cholestérol satisfaite en augmentant l'internalisation des lipoprotéines de faible densité (LDL), via les récepteurs aux LDL (LDLR) qui sont sur-représentés à la surface des cellules tumorales d’ADKP. Par conséquent, le LDLR constitue une voie prometteuse par laquelle les agents cytotoxiques et/ou d'imagerie seraient spécifiquement délivrés à l’ADKP.Nous avons créé des cellules tumorales pancréatiques Ldlr+/+ et Ldlr-/-, originellement issues d’ADKP de souris KIC (LSL-KRasG12D ; Ink4a/Arffl/fl ; Pdx1-Cre) et un conjugué fluorescent ciblant le LDLR (Fc(A680)-VH4127). In vitro, nous avons montré que ce conjugué cible spécifiquement le LDLR et qu’il est internalisé et adressé aux lysosomes, comme les LDL. Ensuite, nous avons montré que ce conjugué permet de discriminer les ADKP Ldlr+/+ sous-cutanés des autres tissus sains (pancréas, foie et glandes surrénales). Enfin, des résultats similaires ont été obtenus chez les souris KIC, présentant fidèlement les caractéristiques des ADKP humains, et injectées avec le conjugué Fc(A680)-VH4127. Ainsi, l'utilisation en clinique de ce conjugué améliorerait 1/ le diagnostic de l’ADKP (marges de résection, volume tumoral) et 2 / le suivi de la réponse thérapeutique et la détection des récidives chez les patients opérés Pancreatic adenocarcinoma (PDAC) is one of the five deadliest cancers, with a 5-year survival rate of 8.2% and a median survival of 6 months. Due to lack of early symptoms and effective treatments, 85% of the patients have an advanced disease at the time of diagnosis. In our previous work, aiming to decipher the metabolic reprogramming of PDAC, we showed its high dependence on cholesterol which it satisfies by increasing the low-density lipoprotein (LDL) internalization, through over-represented LDL receptors (LDLR) on pancreatic tumor cell surface. Therefore, LDLR could be a promising route for tumor-targeted delivery of cytotoxic and/or imaging agents. In this study, we generated Ldlr+/+ and Ldlr-/- pancreatic tumor cells derived from spontaneous PDAC mice model (KIC mice: LSL-KRasG12D ; Ink4a/Arffl/fl ; Pdx1-Cre) and used fluorescent labelled-vector cargo conjugate targeting LDLR extracellular domain (Fc(A680)-VH4127). In vitro, we showed that the conjugate specifically targets LDLR and is internalized and addressed to lysosomes, as the LDLR natural ligand. Then, we demonstrated that this conjugate specifically targets subcutaneous Ldlr+/+ pancreatic tumors and not healthy tissues (pancreas, liver, adrenal glands). Finally, similar results were obtained in KIC mice, faithfully presenting human PDAC features, injected with Fc(A680)-VH4127 conjugate. Hence, using this LDLR-targeting conjugate in clinic could improve 1/ PDAC diagnosis (resection margins, tumor volume) and thus increase the number of patients that could benefit from curative surgery and 2/ therapeutic response monitoring and recurrence detection in operated PDAC patients

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

23

Albecka, Anna. "Étude de l’entrée cellulaire du virus de l’hépatite C : rôle du récepteur aux LDL et identification de régions fonctionnelles des protéines de l’enveloppe virale." Thesis, Lille 1, 2010. http://www.theses.fr/2010LIL10143/document.

Full text

Abstract:

L’initiation du cycle infectieux du virus de l’hépatite C (HCV) nécessite la traversée de la membrane cellulaire. Cette étape d’entrée met en jeu les protéines d’enveloppe du virus ainsi que les récepteurs à la surface cellulaire. Au cours de cette thèse, nous nous sommes intéressés à ces deux aspects. Partant de l’hypothèse que les protéines d’enveloppe du HCV, E1 et E2, ont co-évolué au sein de chaque génotype, nous avons mis en évidence des incompatibilités fonctionnelles intergénotypiques entre ces protéines. Nous avons ensuite construit plusieurs séries de chimères intergénotypiques de E2 en nous basant sur un modèle structural. Ces chimères ont été étudiées d’un point de vue fonctionnel dans un système infectieux ainsi qu’à l’aide de pseudotypes rétroviraux. Ces travaux nous ont permis d’identifier plusieurs déterminants de E2 impliqués dans l’assemblage de la particule virale ainsi qu’une région juxtamembranaire prenant part au processus d’entrée virale. Cette dernière a été caractérisée d’un point de vue structural. Du fait de l’association potentielle entre le virus HCV et des lipoprotéines de faible densité, le LDLR a été proposé comme facteur d’entrée pour ce virus. Cependant, son rôle précis dans l’entrée du virus HCV reste mal compris. Nous avons étudié l’implication de ce récepteur en comparant les mécanismes d’internalisation du virus HCV et des lipoprotéines. Nous avons montré que la particule virale interagit avec le LDLR. Cependant, cette interaction ne semble pas conduire à une infection productive. De plus, nos données suggèrent que par ses fonctions de transport lipidique, le LDLR module la réplication génomique du virus HCV To initiate its life cycle, hepatitis C virus (HCV) needs to cross the cellular membrane. This process involves the viral envelope proteins and cellular receptor(s). During this thesis, we studied these two aspects. Our objectives were to identify new functional determinants in HCV glycoprotein E2 and to investigate the role of the LDL receptor (LDLR) during the HCV life cycle. With the hypothesis that E1 and E2 glycoproteins have co-evolved within the different genotypes, we identified functional intergenotypic incompatibilities between these two proteins. Based on a structural model, we then constructed several series of intergenotypic E2 chimeras. The functionality of these chimeras was analyzed in an infectious system and with the help of retroviral pseudotypes. This work led us to identify several E2 determinants involved in viral particle assembly as well as a juxtamembrane region taking part in virus entry. This latter has also been characterized at a structural level to better understand its role. Due to the potential interaction between HCV particle and low-density lipoproteins, the LDLR has been proposed as an entry factor for this virus. However, its exact role in HCV entry remains poorly understood. In this thesis, we investigated the role of this receptor in the HCV life cycle by comparing virus entry to the mechanism of lipoprotein uptake. We showed that the viral particle interacts with the LDLR. However, this interaction does not seem to lead to a productive infection. Furthermore, our data are in favour for a role of the LDLR as a lipid providing receptor which modules viral RNA replication

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

24

Akbar, Samina. "Régulation de l'expression hépatique de récepteur LSR (lipolys stimulated lipoprotein receptor) : rôles de l'acide docosahexaénoïque et du récepteur PPARa ( peroxisome proliferator-activated receptor alpha)." Thesis, Université de Lorraine, 2013. http://www.theses.fr/2013LORR0288/document.

Full text

Abstract:

Le récepteur LSR est un acteur important du métabolisme hépatique, puisqu'il joue un rôle dans la clairance des lipoprotéines à ApoB/ApoE riches en triglycérides durant la période postprandiale. Dans cette étude, nous avons montré qu'un traitement in vitro par DHA peut augmenter les niveaux de protéine et d'activité LSR dans les cellules d'hépatome de souris Hepa 1-6. En toute cohérence, un régime supplémenté en DHA a conduit à élever les niveaux de protéine LSR hépatique chez la souris. Mais aucune de ces deux études n'a montré de changement au niveau des ARNm. Ceci suggère que l'enrichissement en DHA influe positivement sur le microenvironnement de LSR et son ancrage à la surface de la cellule. Nous avons ensuite étudié le rôle du récepteur PPAR[alpha] dans la régulation du gène lsr. Une analyse in silico nous a permis d'identifier des éléments PPRE dans la région 5' régulatrice du gène humain et de ses homologues de souris et de rat. Des traitements pharmacologiques par des agoniste et antagoniste spécifiques de PPAR[alpha] ont montré que ce récepteur est impliqué dans la régulation transcriptionnelle de l'expression du LSR dans les cellules Hepa 1 6. Enfin, une analyse transcriptomique a révélé une diminution de l'expression de PPAR[alpha] et d'autres gènes impliqués dans le métabolisme lipidique hépatique chez la souris LSR+/- sous régime standard ou riche en graisses. En conclusion, toutes ces études indiquent que l'activité LSR hépatique est sous le contrôle de facteurs nutritionnels capables d'activer divers mécanismes de régulation, faisant du LSR une cible d'intérêt potentiel pour des stratégies nutritionnelles ou thérapeutiques destinées à prévenir ou traiter les dyslipidémies Lipolysis stimulated lipoprotein receptor (LSR) plays an important role in the clearance of ApoB/ApoE containing triglyceride-rich lipoproteins during postprandial phase. In this study, we demonstrated that in vitro treatment of mouse hepatoma cells, Hepa 1-6, with docosahexaenoic acid (DHA) led to an increase in LSR protein levels as well as its activity. Furthermore, the mice placed on the diet supplemented with DHA showed an increase in hepatic LSR protein. However, the mRNA levels remained unchanged in both in vitro and in vivo studies, suggesting that DHA enrichment may result in changes in LSR microenvironment that could affect its anchorage at the surface of cell membrane. Specific peroxisome proliferator response elements were identified in the upstream region of human, mouse and rat lsr gene by in silico analysis. We therefore sought to determine the role of the transcription factor, peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR[alpha]), in LSR regulation. In vitro pharmacological studies using PPAR[alpha]-selective agonist and antagonist agents demonstrated that PPAR[alpha] is indeed involved in the transcriptional regulation of LSR expression. Furthermore, qPCR array analysis revealed the downregulation of PPAR[alpha] and various genes involved in hepatic lipid metabolism in LSR+/- mice on standard and high-fat diets. In conclusion, these studies show that the hepatic LSR activity is controlled by dietary factors that can activate various pathways involved in regulating lipid homeostasis, therefore representing LSR as a potential target for either nutritional or therapeutic strategies towards the prevention or treatment of dyslipidemia

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

25

Brindisi, Marie-Claude. "Relaxation vasculaire et HDL : rôle de la glycation et de l'oxydation des HDL sur la capacité de ces HDL à contrecarrer les effets inhibiteurs des LDL oxydées sur la vasorelaxation endothélium-dépendante." Thesis, Dijon, 2012. http://www.theses.fr/2012DIJOMU05.

Full text

Abstract:

Contrairement aux HDL de sujets sains, les HDL de patients diabétiques ont perdu leur capacité à contrecarrer les effets inhibiteurs des LDL oxydées sur la vasorelaxation endothélium dépendante. Les mécanismes en cause ne sont pas connus. Or la glycation et l’oxydation sont deux phénomènes majeurs au cours du diabète. Nous avons donc étudié in vitro, le rôle de la glycation (associée ou non à une oxydation spontanée), et de l’oxydation d’HDL issues de sujets sains, sur leurs capacités à contrecarrer les effets inhibiteurs des LDL oxydées sur la vasorelaxation endothélium dépendante. Chaque condition a conduit au même constat: les HDL modifiées perdent leur pouvoir vasorelaxant en présence de LDL oxydées. En revanche, en l’absence de LDL oxydées, elles n’altèrent pas la vasorelaxation induite par l’acétylcholine. Ainsi les modifications structurelles des HDL (glycation, oxydation, ou les deux) induisent une perte de leur capacité à protéger l’endothélium du stress oxydatif, plutôt qu’un effet délétère direct sur l’endothélium. Un des mécanismes majeur impliqué dans ce phénomène est probablement l’absence de fixation de ces HDL modifiées à leur récepteur SR-BI. Elles ne pourraient plus alors s’opposer au niveau des cavéoles aux effets délétères des LDL oxydées, et ne favoriseraient plus la production de NO. Mais si aussi bien la glycation que l’oxydation des HDL entraînent ces effets néfastes, il semblerait qu’en condition physiopathologique (oxydation spontanée des HDL glyquées), l’oxydation ne majore pas cette perte de capacité des HDL à contrecarrer les effets inhibiteurs des LDL oxydées sur la vasorelaxation Contrary to HDL from normolipidaemic and normoglycaemic subjects, HDL from diabetic patients have lost their capacity to reverse the inhibition of vasorelaxation induced by oxidized LDL. Mechanisms involved are unknown. The glycation and oxidation of HDL are two major phenomena in diabetes mellitus. The aim of this work was to study in vitro the role of glycation (with or without spontaneous oxidation) and oxidation of HDL, on their capacity to counteract the inhibitory effect of oxidized LDL on endothelium-dependent vasorelaxation. Each state showed the same result, modified HDL lost their vasorelaxing power in stress conditions (with oxidized LDL). Nevertheless, modified HDL alone (without oxidized LDL) did not alter vasorelaxation induced by acetylcholine, after noradrenaline-induced vasoconstriction. Thus, modifications of HDL induce a loss of the ability to protect vessels from oxidative stress rather than have a direct deleterious effect on the vessel. One of the major mechanisms involved in this phenomenon is probably the loss of SR-BI binding of these modified HDL, that could lead to the inability of HDL to protect caveolae from deleterious effects induced by oxidized LDL and could not preserve NO production. However, though glycation, like oxidation of HDL, leads to these deleterious effects, it would seem that during physiopathological conditions, with the spontaneous oxidation of glycated HDL, oxidation does not aggravate the loss of the capacity of diabetic HDL to counteract the inhibitory effect of oxidized LDL on endothelium-dependent vasorelaxation

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

26

Varini, Karine. "Trafic intracellulaire de peptide-vecteurs ciblant le récepteur au LDL pour des stratégies de délivrance ciblée d'agents thérapeutiques ou d'imagerie à travers la barrière hémato-encéphalique." Thesis, Aix-Marseille, 2015. http://www.theses.fr/2015AIXM5023.

Full text

Abstract:

La plupart des médicaments développés pour les maladies du SNC n’atteignent pas leur cible en raison des propriétés uniques de la BHE, nécessitant la mise en place de stratégies de délivrance comme l'utilisation d'un processus physiologique, le RMT. Des peptides ciblant le LDLR (exprimé à la BHE et impliqué dans ces processus) ont été développés. Les objectifs de cette thèse ont été de caractériser le trafic intracellulaire et la capacité de transport de différentes formes de ces peptides dans différents modèles in vitro y compris dans un modèle de BHE.Les résultats obtenus dans une lignée cellulaire surexprimant le LDLR tagué GFP par imagerie en fluorescence montrent que les différentes formes de ces peptides lient le LDLR à la membrane plasmique d’où ils sont internalisés et adressés aux lysosomes sans interférer avec l’endocytose des LDL. Ils permettent l’adressage aux lysosomes de petites molécules (fluorochrome) et de protéines qui leur sont fusionnées, ces résultats indiquent qu’ils pourraient être utilisés pour cibler des molécules thérapeutiques aux lysosomes de cellules exprimant les LDLR. Dans le modèle in vitro de BHE, les peptides sont internalisés via le LDLR à partir du pôle apical et suivent un transport intracellulaire similaire aux LDL, étant déroutés de la voie de dégradation vers les lysosomes pour être transportés jusqu’au compartiment abluminal comme précédemment décrit pour le LDL et la transferrine. Ces données indiquent donc que les peptides ciblant le LDLR sont des candidats vecteurs intéressants pour compléter/améliorer le panel de peptide/anticorps existant et permettre le ciblage et le transport de molécules thérapeutiques à travers la BHE Many drugs are ineffective in treating CNS diseases due in part to unique properties of the BBB, requiring the establishment of delivery strategies such as the use of a physiological process, as the RMT. Peptides targeting the LDLR (expressed in the BBB and involved in these processes) have been developed. The objectives of this thesis were to characterize the intracellular traffic and transport capacity of different shapes of these peptides in various in vitro models including a model of BBB.The results obtained in a cell line overexpressing the LDLR tagged GFP by fluorescence imaging shows that the various forms of these peptides bind plasma membrane LDLR, where they are internalized and sent to lysosomes without interfering with LDL endocytosis. They allow lysosomal targeting of small molecules (fluorochrome) and proteins that are fused to them. These results indicate that it might be used to target therapeutic compounds to cells expressing LDLR lysosomes. In the in vitro BBB model, the peptides are internalized via the LDLR from the apical pole and follow a similar intracellular transport than LDL, being diverted from the lysosomal degradation pathway to be transported to the abluminal compartment as previously described for LDL and transferrin. These data indicate that the LDLR-targeting peptides seems useful vectors candidates to complete/improve the existing peptide/antibodies panel and allow the targeting and the transport of therapeutic molecules through the BBB

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

27

Dugardin, Camille. "Rôle du récepteur nucléaire Rev-erbα dans le contrôle du métabolisme lipidique dans l'entérocyte". Thesis, Lille 2, 2016. http://www.theses.fr/2016LIL2S045.

Full text

Abstract:

L’intestin joue un rôle clé dans le contrôle de l’homéostasie énergétique. Les entérocytes sont des cellules polarisées qui permettent les échanges entre la lumière intestinale (membrane apicale) et le compartiment lymphatique et sanguin (membrane baso-latérale). Dans cette thèse, nous nous sommes particulièrement intéressés au contrôle par les entérocytes de deux processus liés au métabolisme des lipides et du cholestérol : l’excrétion trans-intestinale de cholestérol (TICE) et l’absorption des lipides alimentaires.Très récemment, il a été montré que l’intestin contribue à 20-30% de l’excrétion fécale du cholestérol chez la souris. Ce mécanisme, appelé TICE, implique le passage direct du cholestérol provenant de la circulation sanguine à travers les entérocytes vers les fèces. De par son caractère modulable par des substances pharmacologiques comme l’ézétimibe et les statines, le TICE représente une cible thérapeutique potentielle pour corriger les dyslipidémies athérogènes du diabétique. Cependant, les mécanismes moléculaires gouvernant le transport rétrograde du cholestérol (du pôle baso-latéral au pôle apical) dans l’entérocyte lors du TICE, sont complètement inconnus. Dans une première étude, nous avons mis en évidence la lignée entérocytaire humaine Caco-2/TC7 comme un modèle d’étude des processus trans-entérocytaires liés au TICE. Nous avons d’abord montré que suite à l’incubation avec du plasma humain dans le compartiment baso-latéral et des micelles lipidiques dans le compartiment apical, les cellules Caco-2/TC7 miment des caractéristiques du TICE in vivo. De plus, grâce à ce modèle in vitro, nous avons pu identifier les microtubules comme acteurs nécessaires au transport rétrograde du cholestérol dans l’entérocyte. Dans une seconde étude, nous nous sommes intéressés au contrôle par le récepteur nucléaire Rev-erbα de la production des chylomicrons (CM) par les entérocytes. En effet, bien qu’essentiellement vue comme la conséquence d’une clairance retardée, des données émergentes présentent la surproduction de CM par l’intestin comme un contributeur majeur de la dyslipidémie chez l’insulino-résistant. Il existe une balance, au sein de l’entérocyte, entre l’utilisation des lipides absorbés pour un stockage transitoire sous forme de gouttelettes lipidiques (GL) cytosoliques ou pour l’assemblage de lipoprotéines riches en triglycérides (LRT). Le récepteur nucléaire Rev-erbα est un répresseur transcriptionnel impliqué dans le métabolisme énergétique et le rythme circadien. Rev-erbα contrôle particulièrement le métabolisme lipidique au niveau du foie et le catabolisme des LRT. Pour cette seconde étude, une lignée Caco-2/TC7 invalidée pour Rev-erbα (sh Rev-erbα) a donc été développée par infection lentivirale et différenciée sur insert. Les résultats indiquent que suite à l’incubation avec des micelles lipidiques dans le compartiment apical, les cellules Caco-2/TC7 sh Rev-erbα sécrètent plus de LRT dans le milieu baso-latéral et stockent moins de lipides sous la forme de GL cytosoliques. De plus, la lignée Caco-2/TC7 sh Rev-erbα présente une activité lipophagique plus importante et l’inhibition de l’autophagie par la bafilomycine dans cette lignée restaure la sécrétion baso-latérale de LRT et le stockage intracellulaire de GL aux mêmes niveaux que ceux de la lignée sh control. Cette seconde étude montre donc que l’invalidation de Rev-erbα dans l’entérocyte entraîne une augmentation de la mobilisation des lipides des GL via le processus de la lipophagie résultant en une augmentation de la sécrétion de LRT. Notre hypothèse est que Rev-erbα joue un rôle clé dans le contrôle de la balance GL/LRT et donc de la triglycéridémie post-prandiale.Les deux études présentées dans cette thèse permettent une meilleure compréhension des mécanismes liés au contrôle du métabolisme lipidique par l’intestin et mettent ainsi en avant l’intestin comme une cible thérapeutique potentielle pour corriger les dyslipidémies du diabétique The intestine plays a key role in the control of energy homeostasis. Enterocytes, which constitute the main cellular type of intestinal epithelium (> 90%), are polarized cells allowing exchanges between intestinal lumen (apical membrane) and lymph/blood compartment (basolateral membrane). In this thesis, cholesterol and lipid metabolism control by enterocytes was studied and particularly, trans intestinal cholesterol excretion (TICE) and dietary lipid absorption.Recently, it has been estimated that intestine contributes 20-30% of fecal neutral sterol excretion in chow-fed mice. This pathway called TICE involves the direct luminal secretion of plasma-derived cholesterol by enterocytes. Moreover, TICE can be pharmacologically modulated, for instance by ezetimibe and statins and so, represents a new therapeutic target in order to prevent atherosclerosis in type 2 diabetic patients. However, at present, the molecular mechanisms behind the trans-enterocytic process of TICE are still unknown, especially the steps sustaining cholesterol entry, trafficking and efflux in enterocytes. In the first study of this thesis, we highlighted the human enterocytic Caco-2/TC7 cell line as a suitable model to study the enterocyte-related processes of TICE. We have first shown that upon basolateral incubation with human plasma and apical incubation with lipid micelles, differentiated Caco-2/TC7 cells mimic some of the in vivo TICE features. Moreover, using this model, we have identified a key role of the microtubule network in the process.In the second study of this thesis, chylomicron secretion by enterocytes and its control by the nuclear receptor Rev-erbα were investigated. Indeed, although chylomicron remnant accumulation has been associated to a delayed clearance by the liver, some recent studies show that chylomicron overproduction by the intestine is a major contributor to dyslipidemia in insulin resistant patients. Dietary lipid absorption results from a balance between transient storage in enterocytes as cytosolic lipid droplets (LD) and secretion as triglyceride-rich lipoproteins (TRL). The nuclear receptor Rev-erbα is a transcriptional repressor involved in the energy metabolism and the circadian rhythm. Particularly, Rev-erbα controls lipid metabolism in the liver and thus the catabolism of TRL. The aim of this second study was to investigate the role of Rev-erbα in intestinal lipid metabolism and particularly in TRL secretion. To study that, Caco-2/TC7 cells infected with lentivirus encoding or not a shRNA targeting Rev-erbα (sh Rev-erbα) were grown on transwells. Compared to sh control, sh Rev-erbα Caco-2/TC7 cells secrete higher amounts of micelle-derived LRT in the basolateral medium and exhibit lower quantity of neutral lipids stored as cytosolic LD, whereas the apical uptake is not different. Activation of lipophagy in sh Rev-erbα compared to sh control cells was evidenced by a higher autophagic flux and an increased colocalization of the autophagy marker LC3 with LD. Finally, autophagy inhibition with bafilomycin in sh Rev-erbα cells restores lipid secretion to the same level as in sh control cells. This second study show that Rev-erbα knock-down in enterocytes leads to a higher lipophagy-mediated remobilization of intracellular lipids and an increased TRL secretion. Our hypothesis is that Rev-erbα may be a molecular gear in the control of chylomicron secretion and a major regulator of post-prandial triglyceridemia.In conclusion, these two studies allow to better understand lipid metabolism control by the intestine: the first one by identifying the contribution of the microtubule network in enterocytes for trans-enterocytic retrograde cholesterol transport; the second one by highlighting the nuclear receptor Rev-erbα as a regulator of TRL secretion by enterocytes. These two studies point out the intestine as a potential therapeutic target to treat dyslipidemia in type 2 diabetic patients

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

28

El, Hajj Aseel. "Rôle du LSR dans la régulation de l’homéostasie du cholestérol dans le système nerveux central." Electronic Thesis or Diss., Université de Lorraine, 2019. http://www.theses.fr/2019LORR0317.

Full text

Abstract:

Le cholestérol est un lipide crucial dans le système nerveux central (SNC) et sa régulation stricte assure un développement et une fonction neuronaux appropriés. Le cholestérol est synthétisé dans le SNC par les cellules gliales qui produisent et sécrètent le cholestérol pour répondre aux besoins neuronaux. Les lipoprotéines et leurs récepteurs sont des éléments clés de ce transport intercellulaire : où ces derniers reconnaissent, lient et endocytent les lipoprotéines contenant du cholestérol. Le récepteur de lipoprotéine stimulé par lipolyse (LSR) est le récepteur le plus récemment découvert dans le SNC. C'est un complexe protéique multimère qui subit des changements conformationnels lors de la liaison des acides gras libres, révélant ainsi un site de liaison qui reconnaît les apolipoprotéines B et E. L'inactivation complète du gène LSR est létale au niveau embryonnaire, probablement due à une fuite de la barrière hématoencéphalique. De plus, des études sur des souris LSR +/- ont révélé une modification de la distribution du cholestérol et des fonctions cognitives. Notre premier objectif était de réaliser le profilage LSR au niveau des tissus et des cellules. Nos résultats ont révélé une expression différentielle des sous-unités de LSR. Les études in vitro sur des cultures de cellules primaires ont démontré que le LSR était fortement exprimé dans différentes régions du SNC, à la fois dans les cellules gliales et neuronales. Notre hypothèse est qu'une forte expression du LSR dans les cellules gliales pourrait jouer un rôle dans le contrôle de la synthèse du cholestérol, en limitant le cholestérol en circulation dans le liquide extracellulaire du cerveau. Pour vérifier cette hypothèse, nous avons développé un système inductible Cre-lox ciblant spécifiquement les cellules gliales. Le phénotypage comportemental démontre un déficit de la fonction olfactive ayant un impact sur la mémoire sociale de ces animaux. Bien qu'aucun problème de vision n'ait été détecté, le test de reconnaissance d'objet a démontré que la mémoire visuelle était affectée. En outre, les tests sur le labyrinthe en Y et celui de Barns semblent affecter la mémoire à court et à long terme. Nos résultats suggèrent que l'inactivation spécifique de LSR dans les cellules gliales altère la mémoire des animaux, affectant la mémoire spatiale et sociale. Fait intéressant et similaire à AD, le signe précoce était lié au déficit en olfaction. En utilisant une stratégie combinant phénotypage comportemental, immunomarquage et analyse biochimique de marqueurs spécifiques de la plasticité synaptique, ce modèle pourrait également être utilisé pour déterminer le rôle du LSR dans la cognition cérébrale et le trafic de cholestérol dans le SNC, et pourrait fournir les moyens de valider le LSR en tant que cible thérapeutique potentielle pour le traitement des dommages causés par le stockage des lipides et le développement de maladies neurodégénératives dans le cerveau vieillissant Cholesterol is a crucial lipid in the central nervous system (CNS) and its strict regulation ensures proper neuronal development and function. Cholesterol is synthesized in the CNS by glial cells which produce and secrete cholesterol to meet neuronal needs. Lipoproteins and their receptors are key elements of this intercellular transport: where the latter recognize, bind and endocytose lipoproteins containing cholesterol. The lipolysis stimulated lipoprotein receptor (LSR) is the most recently discovered receptor in the CNS. It is a multimeric protein complex that undergoes conformational changes during the binding of free fatty acids, thus revealing a binding site which recognizes apolipoproteins B and E. Complete inactivation of the LSR gene is lethal at embryonic level, probably due to a leaky blood brain barrier. In addition, studies in LSR +/- mice have revealed a change in the distribution of cholesterol and cognitive functions. Our first goal was to perform LSR profiling at the tissue and cell level. Our results revealed a differential expression of the LSR subunits. In vitro studies in primary cell cultures have shown that LSR is highly expressed in different regions of the CNS, both in glial and neuronal cells. Our hypothesis was that a strong expression of LSR in glial cells could play a role in controlling the synthesis of cholesterol, by limiting the cholesterol circulating in the extracellular fluid of the brain. To verify this hypothesis, we have developed an inducible Cre-lox system specifically targeting glial cells. Behavioral phenotyping demonstrated a deficit in olfactory function which has an impact on the social memory of these animals. Although no visual problems were detected, the object recognition test showed that the visual memory was affected. Additionally, Y and Barnes mazes tests revealed an impacted short- and long-term memory. Our results suggest that specific inactivation of LSR in glial cells impairs animal memory, affecting spatial and social memory. Interestingly and similarly to AD, the early signs monitored olfactory deficits. Using a strategy combining behavioral phenotyping, immunostaining and biochemical analysis of specific markers of synaptic plasticity, this model could also be used to determine the role of LSR in brain cognition and cholesterol trafficking in the CNS, and could provide the means to validate LSR as a potential therapeutic target for the treatment of damage caused by lipid storage and the development of neurodegenerative diseases in the aging brain

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

29

Robbesyn, Fanny. "Effet protecteur des lipoprotéines de haute densité contre la signalisation des lipoprotéines de basse densité oxydées : étude du facteur de transcription Nuclear Factor-kappaB et du récepteur à l'epidermal growth factor." Toulouse 3, 2003. http://www.theses.fr/2003TOU30083.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

30

Noé-Galewski, Lydie. "Lipoprotéine lipase de plasma humain post-héparine, purification et anticorps : Récepteurs des LDL et régulation du métabolisme du cholésterol." Paris 6, 1986. http://www.theses.fr/1986PA066089.

Full text

Abstract:

Etude bibliographique de la lipoprotéine lipase (LPL): structure et propriétés physicochimiques; propriétés enzymatiques; propriétés immunologiques. Biosynthèse de la LPL; rôle de la LPL. Isolement et purification à partir du tissu adipeux de plasma post-héparine et de lait de femme: chromatographie d'affinité sur sépharose-héparine, focalisation isoélectrique préparative; résultats. Préparation d'anticorps anti-LPL, par injection au lapin de l'enzyme hautement purifiée.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

31

Serhan, Nizar. "Impact du récepteur purinergique P2Y13 sur le transport retour du cholestérol et le développement de l'athérosclérose." Toulouse 3, 2013. http://thesesups.ups-tlse.fr/3094/.

Full text

Abstract:

Le taux de HDL-Cholestérol (Lipoprotéine de Haute Densité, HDL-C) est inversement corrélé au risque cardiovasculaire. L'effet athéroprotecteur des HDL est principalement attribué à leur fonction métabolique dans le Transport Retour du Cholestérol (TRC), un processus par lequel le cholestérol excédentaire des cellules périphériques, et des macrophages spumeux en particulier, est pris en charge par les HDL pour être ramené vers le foie où il sera finalement éliminé via les secrétions biliaires. Notre équipe a décrit à la surface des hépatocytes humains une nouvelle voie de captation des HDL dans laquelle l'apoA-I, protéine majoritaire des HDL, se lie en surface des hépatocytes à un complexe enzymatique similaire à la F1-ATPase mitochondriale (appelé ecto-F1-ATPase) et active l'hydrolyse de l'ATP extracellulaire en ADP. L'ADP ainsi généré active spécifiquement le récepteur purinergique P2Y13 pour in fine stimuler l'endocytose des holoparticules HDL (protéines + lipides) via un récepteur de basse affinité, différent du récepteur SR-BI et dont l'identité reste à ce jour inconnu. Dans ce travail, nous avons étudié la fonction du récepteur P2Y13 dans le TRC et le développement de l'athérosclérose in vivo chez la souris. Dans une première partie, nous avons observé que des souris déficientes pour le récepteur P2Y13 (P2Y13 Knockout, KO) présentent une diminution de la captation hépatique en cholestérol et des secrétions de lipides biliaires. Ces changements sont accompagnés d'une forte diminution du TRC des macrophages vers les fèces et un régime riche en cholestérol (1. 25%, HCD) accentue ce phénotype. Inversement, l'injection en bolus d'un agoniste partiel du récepteur P2Y13, le cangrelor, stimule la captation hépatique et les secrétions en lipides biliaires (cholestérol, phospholipides et acides biliaires) chez des souris sauvages (WT) et des souris invalidées pour SR-BI hépatique (SR-BI KOliver) mais pas chez les souris P2Y13 KO. Sur le long terme, une infusion chronique de cangrelor pendant 3 jours sur des souris WT, diminue les concentrations plasmatiques en HDL-C en augmentant leur captation hépatique. Cet effet se retrouve corrélé à une augmentation des secrétions biliaires en acides biliaires. Dans une deuxième partie, nous avons démontré que l'invalidation de P2Y13 dans a modèle de souris d'athérosclérose, apoE KO, induit une augmentation de la plaque d'athérosclérose en corrélation avec une diminution des secrétions de lipides (cholestérol, phospholipides et acides biliaires) dans la bile et les fèces. Ainsi, l'ensemble de ces résultats montre que le récepteur P2Y13 pourrait constituer une nouvelle cible dans les thérapies HDL, visant à prévenir et/ou faire régresser le développement de la plaque d'athérosclérose The level of High Density Lipoprotein-Cholesterol (HDL-C) is inversely correlated to the risk of atherosclerotic cardiovascular disease. The protective effect of HDL is mostly attributed to their metabolic functions in Reverse Cholesterol Transport (RCT), a process whereby excess cell cholesterol is taken up from peripheral cells and macrophages by the HDL particles, and is later delivered to the liver for elimination by bile excretion. We have previously identified a new pathway for hepatic HDL uptake, involved in RCT. In this pathway, apoA-I, the major protein of HDL, binds an ecto-F1-ATPase leading to ATP hydrolysis into ADP. Extracellular ADP activates the P2Y13 receptor which stimulates in fine HDL uptake through an unknown low affinity receptor, distinct from the classical HDL receptor, SR-BI. In this work, we have investigated on mouse models the physiological relevance of P2Y13 receptor in RCT and atherosclerosis development. In a first part, we have showed that P2Y13 deficient mice fed on chow diet displayed a decrease in hepatic HDL-C uptake and biliary lipids secretions. In these conditions, P2Y13 deficiency was also associated with a strong decrease in RCT, from macrophages to the faeces. Moreover, the same phenotype was found on P2Y13 deficient mice fed on a high cholesterol diet (1. 25%, HCD). Conversely, intravenous bolus injection of cangrelor, a partial agonist of P2Y13, stimulated hepatic HDL uptake and biliary lipids secretions (cholesterol, bile acids and phospholipids) in both wild-type and scavenger receptor class B type I liver deficient mice, with no effect in P2Y13 knockout mice. Furthermore, a long-term chronic treatment with cangrelor, by continuous infusion for 3 days, decreased plasma HDL-C levels as a consequence of increased hepatic HDL uptake. These effects were correlated with an increase in biliary bile acid secretion. In a second part, we have showed that deficiency of P2Y13 in a mice model for atherosclerosis, apoE knockout mice, induced an increase in atherosclerosis development. This result was correlated with a decrease in biliary lipids secretions and excretions into the faeces. Taken together our results suggest that P2Y13 receptor could be a target for therapeutic intervention on HDL ("HDL-Therapies"), aiming to prevent or reduce the development of atherosclerosis

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

32

Jedidi, Iness. "Oxydation des LDL in vitro : mécanismes moléculaires de protection par l'aminoguanidine, régulation de l'expression de récepteur "scavenger" CD36 dans les macrophages humains par les lipides oxydés." Paris 5, 2004. http://www.theses.fr/2004PA05P616.

Full text

Abstract:

L'internalisation des lipoprotéines de basse densité oxydées (oxLDL) par les macrophages est un événement clef impliqué dans l'initiation et le développement de l'athérosclérose. La première étude avait pour objectif d'évaluer l'effet protecteur de l'aminoguanidine (AMG) vis à vis des composants lipidique et protéique des LDL oxydées par les radicaux libres oxygénés. Nous avons montré que l'aminoguanidine inhibe la peroxydation lipidique et la fragmentation de l'apo B de manière concentration dépendante. En revanche, il est peu efficace vis à vis de la carbonylation de l'apo B. Le récepteur "scavenger" CD36 a été identifié comme l'un des principaux récepteurs impliqués dans l'internalisation des oxLDL dans les macrophages. La seconde étude avait pour objectif de comparer les effets des oxLDL et de leurs produits d'oxydation dans la régulation de l'expression du gène CD36 au sein des macrophages humains. Nous avons montré que les oxLDL et les hydroperoxydes issus des esters de cholestérol augmentent l'expression du gène codant pour CD36 par un mécanisme impliquant probablement PPAR alpha The uptake of oxidized low density lipoproteins (oxLDL) by macrophages is a key event involved in the initiation and development of atherosclerosis. The first study aimed at evaluating the protective effect of aminoguanidine (AMG) towards both lipid and protein moieties of oxLDL oxidized by ·OH/O2·- free radicals. We have shown that AMG inhibits lipid peroxidation and apo B fragmentation in a concentration-dependent manner, whereas AMG was only poorly efficient against apo B carbonylation. The scavenger receptor CD36 has been identified as one major receptor that internalizes oxLDL into macrophages. The second study aimed at comparing the effects of oxLDL and their oxidized products on the regulation of CD36 gene expression in human macrophages. We have shown that oxLDL and cholesteryl ester hydroperoxides increase CD36 gene expression in a pathway probably involving PPAR alpha

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

33

Ramin-Mangata, Stéphane. "Le rôle du récepteur aux LDL et de PCSK9 dans le diabète de type 2." Thesis, La Réunion, 2020. http://www.theses.fr/2020LARE0005.

Full text

Abstract:

Les statines sont des médicaments hypolipémiants largement prescrits dans le cadre des maladies cardiovasculaires. Elles inhibent la synthèse endogène de cholestérol et induisent l’activation de l’expression du LDLR par le facteur de transcription SREBP-2. Ce sont des médicaments dont le bénéfice est indiscutable d’un point de vue cardiovasculaire. Néanmoins, l’action des statines est limitée par la proprotéine convertase subtilisin kexin type 9 (PCSK9), l’inhibiteur naturel du récepteur aux LDL (LDLR), qui est également sous la dépendance de SREBP-2. Ainsi, de nouvelles stratégies hypolipémiantes ciblant la forme circulante de PCSK9 ont été développées et autorisées. Ce sont les inhibiteurs de PCSK9. Bien que bénéfique, l’utilisation de statines à forte dose et à long terme induit dans certains cas l’apparition d’un diabète de type 2 chez les individus prédisposés. De plus, des variants génétiques « perte de fonction » de PCSK9 sont associés à l’apparition du diabète de type 2. Les effets des inhibiteurs de PCSK9 sur la survenue du diabète de type 2 à long terme ne sont pas connus à ce jour. Ainsi, nous avons émis l’hypothèse que l’engorgement en cholestérol des cellules β pancréatiques associé à des niveaux très élevés d’abondance du LDLR à la membrane suite à l’utilisation des statines et d’inhibiteurs de PCSK9 induit un dysfonctionnement cellulaire, une altération de la sécrétion d’insuline et à terme le diabète de type 2. Les objectifs de mes travaux de thèse ont été (i) de déterminer la modulation des taux de PCSK9 par les statines chez des individus diabétiques de type 2, (ii) d’étudier si les niveaux circulants réduits en PCSK9 seraient prédictifs de la survenue du diabète de type 2 et enfin (iii) d’évaluer l’effet des statines, de PCSK9 et des inhibiteurs de PCSK9 sur la sécrétion d’insuline par les cellules β. Au moyen de trois cohortes de patients, nous avons montré que la concentration plasmatique de PCSK9 est augmentée chez les diabétiques de types 2 et que les niveaux de PCSK9 circulants réduits sont négativement associés à une résistance à l’insuline et à une altération de la glycémie à jeun. En utilisant des sections de pancréas humains et des lignées de cellules β pancréatiques humaines, nous avons démontré pour la première fois que PCSK9 est exprimé, synthétisé et sécrété uniquement par les cellules β pancréatiques au niveau des îlots de Langerhans. Nous n’avons pas observé d’effet de PCSK9 et de ses inhibiteurs sur la sécrétion d’insuline en réponse au glucose. L’ensemble des résultats de mes travaux de thèse indiquent que l’inhibition de PCSK9 n’aura vraisemblablement pas d’effet pro-diabétogène, ce qui est rassurant pour le développement de ces nouvelles thérapies hypocholestérolémiants Statins are lipid-lowering drugs widely prescribed to prevent cardiovascular diseases. They inhibit the endogenous synthesis of cholesterol and thereby increase LDLR gene expression by activating the SREPB-2 transcription factor. The positive effects of statins regarding cardiovascular diseases are undisputable. However, their action is limited by the proprotein convertases subtilisin kexin type 9 (PCSK9), the natural inhibitor of the LDL receptor (LDLR), which is also activated by the SREBP-2 transcription factor. As a result, novel lipid-lowering strategies targeting circulating PCSK9 have emerged and have been approved recently. These are the PCSK9 inhibitors. Despite their well-established beneficial effects, the use of high doses of statins for long-term treatments induces in rare instances the onset of type 2 diabetes in predisposed individuals. In addition, “loss of function” genetic variants of PCSK9 are associated with an increased risk of type 2 diabetes. The effects of long term use of PCSK9 inhibitors on the risk of type 2 diabetes remain to be established. Thus, we hypothesized that cholesterol overload of insulin secreting pancreatic beta cells induced by the overexpression of the LDLR at their plasma membranes following treatment with statins and PCSK9 inhibitors may cause cell dysfunction, lower insulin secretion, and ultimately type 2 diabetes. The aims of my thesis were (i) to determine the circulating levels of PCSK9 and their modulation by statins in patients with type 2 diabetes, (ii) to determine if reduced circulating PCSK9 levels are predictive of new onset type 2 diabetes and finally (iii) to investigate the effect of statins, PCSK9, and PCSK9 inhibitors on beta cell function. Using three cohorts of patients, we showed that circulating PCSK9 plasma levels are increased in patients with type 2 diabetes and that reduced circulating PCSK9 levels are negatively associated with insulin resistance and elevated fasting blood glucose. In human pancreatic sections and human pancreatic beta cell lines, we showed for the first time that PCSK9 is expressed, synthesized and secreted only by beta cells in pancreatic islets. We did not find any significant effect of PCSK9 or PCSK9 inhibitors on glucose stimulated insulin secretion. Altogether, my thesis works underpin that the use of PCSK9 inhibitors in the clinic will probably not be diabetogenic. This is reassuring regarding the development of these new lipid-lowering therapies

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

34

Jenty, Marion. "Rôle de la signalisation LRP1/Wnt5a dans le métabolisme du cholestérol." Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ025/document.

Full text

Abstract:

L’athérosclérose débute par l’accumulation de cholestérol dans les cellules des parois artérielles, formant des plaques d’athéromes. LRP1 protège contre la maladie en inhibant l’accumulation intracellulaire de cholestérol et nous avions montré qu’une signalisation Wnt5a était impliquée dans cette inhibition. Le projet de thèse consistait à caractériser les mécanismes moléculaires de cette inhibition et à vérifier l’effet athéroprotecteur de Wnt5a. Nous avons montré in vitro et in vivo que Wnt5a inhibe l’accumulation de cholestérol via la stimulation de son export et l’inhibition de sa synthèse endogène. Nous avons ensuite observé que l’invalidation de Wnt5a spécifiquement dans les CMLv de souris LDLR-/- conduit à une augmentation des lésions athéromateuses après un régime riche en cholestérol, confirmant alors son rôle athéroprotecteur. Nos travaux ont ainsi permis de révéler le potentiel de Wnt5a en tant que cible thérapeutique dans le traitement contre l’athérosclérose Protects against intracellular cholesterol accumulation and we identified the secreted protein Wnt5a as a partner of this inhibitory effect of LRP1. The aim of this thesis is to determine the molecular mechanisms by which the LRP1/Wnt5a signaling pathway prevents cholesterol accumulation in cells and to study the antiatherogenic potential of Wnt5a. We first showed in vitro and in vivo that Wnt5a decreases cellular cholesterol content by stimulating its efflux through the induction of cholesterol transporters expression and by down-regulating the expression of HMGCoA-reductase. Then we used mice deleted for Wnt5a specifically in smooth muscle cells, which present more atherosclerotic lesions than control mice after a high cholesterol diet. This confirms that Wnt5a protects against atherosclerosis and could be an interesting therapeutic target in the treatment of the disease

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

35

Alcouffe, Julie. "Effets inhibiteur et apoptotique des LDL oxydées sur les lymphocytes T activités : implication du système Fas-Fas ligand." Toulouse 3, 2003. http://www.theses.fr/2003TOU30016.

Full text

Abstract:

L'athérosclérose et les accidents vasculaires qu'elle entraîne constituent un problème de santé publique dans les pays industrialisés. Actuellement, les lipoprotéines de basse densité (LDL, pour low density-lipoproteins) oxydées observées dans les plaques d'athérome sont considérées comme des acteurs essentiels de la pathogénie de l'athérosclérose. Les LDL oxydées proviennent de l'oxydation des LDL plasmatiques par les cellules de la paroi vasculaire suivant des mécanismes encore mal connus, qui leur confèrent des propriétés biologiques propres. Dans le but général d'étudier le rôle encore controversé du système immunitaire dans le développement de l'athérosclérose, nous avons cherché à caractériser in vitro les interactions entre les LDL oxydées et les lymphocytes T activés, en utilisant plusieurs modèles d'activation lymphocytaire T. En effet, l'apparition des lésions d'athérosclérose s'accompagne d'une réaction inflammatoire constante, qui implique la présence des cellules immunitaires et des cytokines. En particulier, les lymphocytes T activés sont observés de façon très abondante à plusieurs stades d'évolution des lésions d'athérome activés, induisant une inhibition de la prolifération et de l'activation lymphocytaire (inhibition de la sécrétion d'interleukine-2 et de l'expression de CD25 et de NF-kB). . Atherosclerosis and associated vascular accidents have become a major public health problem in industrialized countries. Oxidized low density lipoproteins (LDL) observed in atheroma are considered as essential actors in atherosclerosis pathogenesis. Oxidized LDL come from plasma LDL oxidization by vascular wall cells through mechanisms which remain rather unknown and confer oxidized LDL distinct biological properties. With the purpose to study the controversial role played by the immune system in atherosclerosis development, we attempted to characterize in vitro interactions between oxidized LDL and activated T lymphocytes in various T cell activation models. .

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

36

Delezie, Julien. "Rôle du récepteur nucléaire Rev-erba dans les mécanismes d'anticipation des repas et le métabolisme." Phd thesis, Université de Strasbourg, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00801656.

Full text

Abstract:

La première partie de mon travail de thèse a été de définir le rôle joué par le récepteur nucléaire Rev-erb alpha dans les mécanismes de synchronisation par la nourriture d'une horloge circadienne putative, non encore localisée, appelée " horloge alimentaire ". La seconde partie de mon travail a consisté à étudier la participation de Rev-erb alpha dans les régulations des métabolismes glucidique et lipidique. L'ensemble de nos données indique que le répresseur transcriptionnel Rev-erb alpha joue un rôle charnière dans les fonctions circadiennes ainsi que dans le métabolisme. En effet, d'un point de vue circadien, l'absence de Rev-erb alpha altère la synchronisation à l'heure des repas - démontré par une réduction des sorties comportementales et physiologiques de l'horloge alimentaire, ainsi que par l'absence d'ajustement du rythme de la protéine d'horloge PER2 dans l'oscillateur cérébelleux. Sur le plan métabolique, la délétion de ce gène modifie notamment le métabolisme des lipides - démontré par une accumulation excessive de tissu adipeux, une utilisation préférentielle des acides gras, ainsi qu'une perte de contrôle de l'expression de la Lipoprotéine lipase.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

37

Ratet, Gwenn. "Contributions à l’étude de l’échappement des leptospires au système immunitaire : mise en évidence chez la souris de la colonisation rénale chronique à l’aide de leptospires bioluminescents, et rôle de la lipoprotéine LipL21 dans l’échappement du peptidoglycane à la reconnaissance par les récepteurs Nods." Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2015. http://www.theses.fr/2015PA05T012.

Full text

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

38

Tahri-Jouti, Mohammed Ali. "Étude de la fixation des lipopolysaccharides sur les macrophages de souris." Paris 11, 1989. http://www.theses.fr/1989PA112148.

Full text

Abstract:

Démonstration de l'existence d'une fixation spécifique saturable de lipopolyoside sur des macrophages péritonéaux de souris élicites au thioglycolate ainsi que sur des cellules de lignées macrophasiques murines. Deux sous structures distinctes du Lipide A sont impliquées dans cette fixation et provoquent des effets différents comme la production d'Interleukine 1 ou la sécrétion du facteur de nécrose tumorale. Ceci suggère donc la présence de 2 sites de fixation spécifiques distincts à la surface des macrophages.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

39

Mlih, Mohamed. "Implication de LRP1 et ShcA dans deux pathologies cardiovasculaires : l'arthérosclérose et l'insuffisance cardiaque." Thesis, Strasbourg, 2012. http://www.theses.fr/2012STRAJ086/document.

Full text

Abstract:

Les maladies cardiovasculaires sont la première cause de mortalité dans le monde. Une meilleure compréhension des mécanismes physiopathologiques est nécessaire. Dans ce travail de thèse nous nous sommes intéressés à deux pathologies cardiovasculaires : l’athérosclérose et l’insuffisance cardiaque. Récemment, nous avons identifié le récepteur LRP1 et la protéine adaptatrice ShcA comme étant deux protéines impliquées dans deux de ces pathologies cardiovasculaires. Nousavons montré que ShcA joue un rôle protecteur dans l’insuffisance cardiaque. Chez les souris déficientes en ShcA au niveau cardiaque, nous observons une cardiomyopathie caractérisée par une dilatation du ventricule gauche associée à une perte de la contractilité. Nous avons montré que ShcA est essentiel à l’organisation des sarcomères et ceci très tôt durant l’embryogenèse. Dans une deuxième partie nous avons montré qu’en l’absence de PPARgamma, LRP1 était nécessaire à la calcification vasculaire en activant la voie prochondrogénique de Wnt5a. Nous avons montré que PPARgamma protège de la calcification vasculaire en induisant l’expression de Sfrp2 qui agit comme un antagoniste de Wnt5a Cardiovascular disease is the number one cause of death worldwide. A better understanding of the pathophysiological mechanisms is necessary. In this thesis we are focused on two cardiovascular diseases: atherosclerosis and heart failure. Recently, we identified the LRP1 receptor and the adapter protein ShcA as two proteins involved in two of these cardiovascular diseases. We have shown that ShcA exerts a protective role against heart failure. Mutant mice lacking ShcA in the heart exhibit a dilated cardiomyopathy with reduced cardiac contractility. Myocyte ultrastructure analysis shows that Shc A is essential to maintain sarcomeric intégrity in early embryonic heart development. in last part we have shown vascular calcification in the absence of PPARgamma requires expression of LRP1 in vascular smooth muscle cells. LRP1 promotes a Wnt5a-dependent prochondrogenic pathway. We show that PPARgamma protects against vascular calcification by inducing the expression of secreted frizzled-related protein-2 (Sfrp2, wich functions as a Wnt5a antagonist

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

40

Corbineau, Sébastien. "Génération de progéniteurs hépatiques dérivés de cellules souches : application à l’hypercholestérolémie familiale." Thesis, Paris 11, 2011. http://www.theses.fr/2011PA114821/document.

Full text

Abstract:

La transplantation d’hépatocytes représente une alternative à la transplantation hépatique pour le traitement de certaines maladies métaboliques dont l’hypercholestérolémie familiale. Les cellules souches embryonnaires (ES) et les cellules souches pluripotentes induites (iPS) humaines représentent de nouvelles sources de cellules hépatiques. Nous avons mis au point une approche de différenciation des cellules souches humaines en cellules hépatiques et généré ainsi des cellules dérivées de cellules iPS de patients atteints d’hypercholestérolémie familiale Hepatocyte transplantation represents an alternative to liver for the treatment of metabolic diseases including familial hypercholesterolaemia. Embryonic stem cells (ES) and induced pluripotent stem cells (iPS) represent new sources of hepatic cells. We have developed an approach to differentiate human stem cells into hepatic cells and thus we have generated hepatic cells derived from iPS of familial hypercholesterolaemia patients

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

41

Molino, Yves. "Mise en place de modèles in vitro de barrière hémato‐encéphalique et étude du transfert transendothélial de vecteurs et conjugués ciblant le récepteur au LDL." Thesis, Aix-Marseille, 2015. http://www.theses.fr/2015AIXM5076/document.

Full text

Abstract:

La barrière hémato-encéphalique (BHE) protège le système nerveux central (SNC) des fluctuations plasmatiques des molécules endogènes, mais aussi exogènes, et notamment des molécules à potentiel thérapeutique. L’imperméabilité de la BHE est compensée par la présence de mécanismes qui assurent le transport transendothélial des nutriments nécessaires au tissu nerveux, parmi lesquels la transcytose relayée par différents récepteurs. Dans le but d’améliorer le transfert d’agents thérapeutiques à travers la BHE, nous développons des « vecteurs » qui se lient à certains de ces récepteurs. Au cours de notre thèse, nous avons développé et optimisé des modèles in vitro de BHE et barrière sang-moelle épinière (BSME) syngéniques de rats et souris, basés sur la co-culture de cellules endothéliales microvasculaires (CEMs) cérébrales (CEMCs) ou spinales (CEMSs) et d'astrocytes. Parmi les récepteurs étudiés, nous montrons que le LDLR est exprimé à la membrane plasmique apicale des CEMCs et qu’il est impliqué dans la transcytose du LDL tout en évitant le compartiment lysosomal, confirmant l’intérêt de son ciblage dans nos approches. Nous montrons que nos vecteurs, conjugués à une molécule organique ou à un cargo protéique, sont endocytés par les CEMCs de façon LDLR-dépendante, évitent le compartiment lysosomal et franchissent la monocouche de CEMCs. Nous avons également mis en place des modèles in vitro de BHE et BSME enflammés, sachant que l’inflammation des CEMs est associée à de nombreuses pathologies du SNC. Ces modèles seront utiles pour évaluer des stratégies de vectorisation ciblant préférentiellement les structures du SNC en situation pathologique The blood-brain barrier (BBB) protects the central nervous system (CNS) from plasma fluctuations of endogenous, but also exogenous molecules, including therapeutic molecules. The BBB’s restrictive properties are compensated by the presence of different mechanisms that provide transport of nutrients across the BBB, including transcytosis of endogenous ligands mediated by receptors. Our objective is to improve drug delivery across the BBB and we developed “vectors” that target different recpetors. During our thesis we developed and optimized cellular tools and approaches, in particular syngeneic in vitro models of the BBB and blood-spinal cord barrier (BSCB) from both rat and mouse, based on the co-culture of brain (BMECs) or spinal cord (SCMECs) microvascular endothelial cells (MECs) and astrocytes. Among the receptors we studied, we show that the LDL receptor (LDLR) is expressed at the apical plasma membrane of BMECs and confirmed that it is involved in transcytosis of LDL through the vesicular compartment, while avoiding the lysosomal compartment, further establishing its interest as a target receptor. We show that our vectors conjugated to an organic molecule or to a protein cargo are endocytosed by BMECs in a LDLR-dependent manner, avoid the lysosomal compartment and cross the BMEC monolayers. Finally, we developed BBB and BSCB in vitro models in inflammatory conditions, considering that MECs inflammation is associated with many CNS lesions and pathologies. These models will be useful to better understand the inflammatory processes of CNS endothelial cells and to evaluate vectorization strategies preferentially targeting CNS structures in pathological condition

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

42

Berland, Chloé. "Triglyceride-sensing in the mesocorticolimbic system and reward-driven behaviour control." Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. https://theses.md.univ-paris-diderot.fr/Berland_Chloe_2_va_20180911.pdf.

Full text

Abstract:

La progression rapide de l’obésité en Europe est en partie due à un déséquilibre de l’homéostasie énergétique lié à une consommation excessive d’aliments gras et sucrés, et à des modes de vie sédentaires. Cette consommation excessive d'aliments riches en calories, à fort impact hédonique,dépend en partie de la libération de dopamine dans le système mésocorticolimbique, autrement nommé circuit de la récompense. La libération de dopamine dans le système mésocorticolimbique est un facteur nécessaire aux comportements compulsifs liés à la nourriture, et les aliments riches pourraient être responsables d’une alimentation trop excessive, assimilable aux dysfonctionnements du système mésocorticolimbique relatifs aux drogues d’abus. En particulier, la majorité des lipides issus de notre alimentation circulent sous forment de triglycérides devant être hydrolysés en acides gras libres pour pouvoir être oxydés par la cellule, et s'accumulent en condition obèse (hypertriglycéridémie). Les neurones du système mésocorticolimbique expriment certaines enzymes liées au métabolisme de ces triglycérides, notamment la lipoprotéine lipase, ce qui suggère qu’ils peuvent les détecter et moduler en conséquence leur activité, et donc la libération de dopamine. Le but de cette thèse est d'étudier les mécanismes moléculaires et cellulaires qui relient prise alimentaire et signalisation induite par les lipides dans le système nerveux central, et en particulier dans le système dopaminergique Obesity spreading is due to an imbalance of energy homeostasis, with excessive consumption of sweet and fat food, and sedentary lifestyles. Food intake partly depends on dopamine release in the mesocorticolimbic system, and calorie-rich hedonic food, among other objects of desire, stimulate this reward circuit. Dopaminergic release in the mesocorticolimbic system is a main factor for compulsive feeding, and calorie-rich food could be responsible for abnormal feeding behaviours, where excessive food intake is assimilated to MCL malfunctions similar to drugs addiction. More particularly, postprandial triglycerides represent a major source of dietary lipids, and obesity is often associated with hypertriglyceridemia, but also with dopaminergic signalling impairments. Mesocorticolimbic system neurons express several enzymes involved in triglycerides hydrolysis, such as the lipoprotein lipase, suggesting an ability to sense triglycerides and modulate their activity accordingly. The aim of this thesis is to identify cellular and molecular mechanisms by which dietary triglycerides act onto dopaminergic structures and control food intake

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

43

Sacco, Emmanuelle. "Identification et caractérisation de 3-hydroxyacyl déshydratases/2-trans-enoyl hydratases (R)-spécifiques potentiellement impliquées dans la biosynthèse de lipides chez le bacille tuberculeux." Toulouse 3, 2007. http://www.theses.fr/2007TOU30010.

Full text

Abstract:

L'un des problèmes majeurs dans la lutte contre la tuberculose est l'apparition de souches de Mycobacterium tuberculosis résistantes aux antibiotiques. Les 3-hydroxyacyl déshydratases/2-trans-enoyl hydratases (R)-spécifiques, enzymes clés du métabolisme lipidique, représentent des cibles pharmacologiques potentielles, notamment chez les mycobactéries. Par des approches complémentaires, nous avons identifié et caractérisé plusieurs de ces enzymes, appartenant à la sous-famille hydratase 2. En particulier, les données enzymologiques suggèrent que trois d'entre elles, associées en deux hétérodimères distincts, seraient impliquées dans un système Fatty Acid Synthase de type II, participant à la biosynthèse des acides mycoliques, composants essentiels à la survie des mycobactéries. Ces protéines présentent des perspectives intéressantes pour le développement d'antibiotiques antituberculeux Tuberculosis is still a major health concern in the world. Lipids play a major role in the pathogenic character of the tubercle bacillus and their biosynthesis requires the involvement of (R)-specific 3-hydroxyacyl dehydratases/trans-2-enoyl hydratases which have not been identified so far in this organism. These enzymes represent a sink of potential new antituberculosis targets. We report the identification and the characterization in Mycobacterium tuberculosis of several of these proteins that belong to the hydratase 2 subfamily. In particular, the enzymatic data suggest that three of them, associated into two distinct heterodimers, would belong to a type II Fatty Acid Synthase complex, which is involved in the mycolic acid biosynthesis, components essential for the survival of mycobacteria. These enzymes represent very interesting targets for antituberculous drug development

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

44

Dianat, Noushin. "Cellules souches pluripotentes humaines et modélisation de maladies hépatiques : l'hypercholestérolémie familiale et les cholangiopathies." Thesis, Paris 11, 2014. http://www.theses.fr/2014PA114810.

Full text

Abstract:

La thérapie cellulaire pourrait représenter une alternative à la transplantation hépatique dans certaines pathologies comme les maladies métaboliques sévères. Toutefois, la pénurie de donneurs d’organes implique la nécessité de trouver de nouvelles sources de cellules hépatiques comme les cellules souches pluripotentes qui peuvent être amplifiées extensivement et différenciées en tout type cellulaire. Les cellules souches embryonnaires humaines (hESC) et les cellules souches pluripotentes induites humaines (hiPSC) générées à partir des cellules somatiques de patients puis différenciées en hépatocytes représentent une source potentielle d’hépatocytes. Ces cellules permettent en outre d’envisager la transplantation d’hépatocytes autologues génétiquement modifiés comme alternative à la transplantation hépatique pour le traitement de certaines maladies génétiques du foie. L’hypercholestérolémie familiale (HF) est une maladie autosomale dominante due à des mutations dans le gène codant le Récepteur aux Low Density Lipoproteins (RLDL) qui est à l’origine d’un taux élevé de cholestérol sanguin de patients HF. Les patients homozygotes doivent épurer leur sérum par LDL-aphérèse en moyenne deux fois par mois dès le plus jeune âge pour éviter les infarctus mortels survenant dès l’enfance. Les hépatocytes différenciées à partir des iPSC de patients et leur correction in vitro, permettent d'évaluer la faisabilité de la transplantation d'hépatocytes autologues génétiquement modifiés pour le traitement de l’hypercholestérolémie familiale.Au cours du développement du foie, des hépatocytes et des cholangiocytes, les deux types de cellules épithéliales hépatiques, dérivent de progéniteurs hépatiques bipotents (les hépatoblastes). Bien que les cholangiocytes formant les canaux biliaires intrahépatiques ne représentent qu'une petite fraction de la population cellulaire totale du foie (3%), ces cellules régulent activement la composition de la bile par réabsorption des acides biliaires, un processus qui est important dans des maladies choléstatiques du foie. Dans la première partie de cette étude nous avons mis au point une approche de différenciation des cellules souches pluripotentes (hESC et hiPSC) en cholangiocytes fonctionnels. Ces cellules serviront à la modélisation des maladies génétiques touchant les cholangiocytes formant des canaux biliaires. Dans la deuxième partie, nous avons généré des iPSC spécifiques de patients HF (HF-iPSC), différenciées en hépatocytes et corrigé le défaut phénotypique par transfert lentiviral de l’ADNc codant le LDLR dans les HF-iPSC Cell therapy can be an alternative to liver transplantation in some cases such as severe metabolic diseases. However, the shortage of organ donors implies the need to find new sources of liver cells such as hepatocytes derived from pluripotent stem cells that can be amplified and differentiated extensively into any cell type. Human embryonic stem cells (hESC) and human induced pluripotent stem cells (hiPSC) generated from somatic cells of patients and then differentiated into hepatocytes represent a potential source of transplantable hepatocytes. These cells now make it possible to consider the transplantation of genetically modified autologous hepatocytes as an alternative to liver transplantation for the treatment of genetic diseases of the liver.Familial hypercholesterolemia (FH) is an autosomal dominant disorder caused by mutations in the gene encoding the receptor for Low Density Lipoproteins (LDLR), which is the cause of high blood cholesterol in these patients. Homozygous patients should purify their serum LDL-apheresis on average twice a month starting at a young age to avoid fatal myocardial infarction occurring in childhood.Human hepatocytes differentiated from patient’s induced pluripotent stem cells (iPSCs) allow assessing the feasibility to transplant genetically modified autologous hepatocytes as treatment of familial hypercholesterolemia.During the liver development, hepatocytes and cholangiocytes, the two types of hepatic epithelial cells, derive from bipotent hepatic progenitors (hepatoblasts). Although cholangiocytes, forming intrahepatic bile ducts, represent a small fraction of the total liver cell population (3%), they actively regulate bile composition by secretion and reabsorption of bile acids, a process that is important in cholestatic liver diseases. In the first part of this study we developed an approach to differentiate pluripotent stem cells (hESC and hiPSC) into functional cholangiocytes. These cells could be used for the modeling of genetic biliary diseases. In the second part, we generated FH patient specific iPSCs (HF-iPSC), differentiated them into hepatocytes and tried to correct the disease phenotype by lentiviral introduction of LDLR cDNA cassette in HF-iPSC

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

45

Miranda, Leonor. "Regulation of cholesterol intake by the corpus luteum." Thèse, 2010. http://hdl.handle.net/1866/3947.

Full text

Abstract:

Résumé L’approvisionnement en cholestérol est un facteur limitant la stéroïdogenèse ovarienne. Pour cette raison, la majorité du cholestérol requis pour la synthèse des stéroïdes est importé de la circulation via les récepteurs des lipoprotéines de haute (HDL) et de basse densité (LDL) nommés scavenger receptor (SR-BI) et low-density lipoprotein receptor (LDLr). L’ARN messager de SR-BI est exprimé dans les ovaires de porcs durant toutes les étapes de la folliculogenèse ainsi que dans le corps jaune (CL). L’expression de la protéine SR-BI a également été détectée dans les follicules de souris lors du cycle œstral. Chez les deux espèces, l’expression est concentrée dans le cytoplasme et en périphérie des cellules du follicule. Les gonadotrophines induisent l'expression de SR-BI dans les cellules de la granulosa porcines, avec une expression cytoplasmique qui augmente durant la période périovulatoire, et avec une migration aux périphéries cellulaires durant la maturation du CL. Une conformation de 82 kDa de SR-BI est fortement exprimée dans le CL porcin, avec une conformation moins abondante de 57 kDa. Les différences entre les conformations sont attribuables à la glycosylation. La culture in vitro de follicules porcins avec des gonatrophines chorioniques humaines (hCG) a induit une hausse de régulation dépendante du temps du SR-BI de 82 kDa dans les cellules du granulosa. SR-BI et LDLr ont été exprimés réciproquement, avec LDLr étant le plus élévé dans les cellules folliculaires du granulosa et diminuant précipitamment avec la formation du CL. Pour explorer plus en détail les mécanismes d’approvisionnement en cholestérol de la stéroïdogenèse ovarienne, nous avons examiné des souris soumis à un traitement de désaccouplement de l'ovulation, et des souris portant la mutation nulle du gène Scarb1 (SR-BI-/-). Les résultats ont démontré que des ovocytes enfermés dans des structures lutéinisées expriment SR-BI. Les souris SR-BI-/ - présentaient de petits CLs, et de large follicules avec des cellules de thèque hypertrophiées et des kystes folliculaires avec des cavités remplies de sang et une diminution de 50% du niveau de progestérone dans le sérum. Les souris SR-BI-/ - traitées avec une combinaison de 20 g / g de mevinoline et 100  g / g de chloroquine ont démontré une diminution de 43% du niveau de progestérone sérique chez le type sauvage et de 30% chez les souris SR-BI-/ -. L’expression protéique de l’enzyme limitant pour la synthèse du cholestérol, 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase (HMGR), a augmenté chez les souris SR-BI-/-. Nous avons présenté des preuves démontrant que les cellules des follicules expriment le SR-BI durant la stéroïdogenèse et que la lutéinisation augmente l’expression de SR-BI. La maturation post-transcriptionelle est caractérisée par la glycosylation. Sous des conditions normales, l’expression de LDLr est arrêtée durant la lutéinisation. Ainsi SR-BI devient le facteur principal pour l’importation du cholestérol extracellulaire. En plus, la perturbation extracellulaire du cholestérol synthétisé de novo et l’absorption par les LDLr chez les souris SR-BI-/- diminuent la fonction lutéal. L’homéostasie du cholestérol ovarien est très importante pour une lutéinisation adéquate et sa perturbation mène à une réduction, mais non à un blocage complet, de la fonction lutéal. En conclusion, l’expression de SR-BI est un facteur important, mais non essentiel, pour maintenir l’homéostasie du cholestérol ovarien et la synthèse des stéroïdes, et la lutéinisation. Un réseau de mécanismes complémentaires et compensatoires d’approvisionnement en cholestérol agit en concert pour assurer la synthèse des stéroïdes ovariens. Abstract Ovarian cholesterol supply is rate limiting to ovarian steroidogenesis. For this reason, the majority of cholesterol required for steroid synthesis is imported via scavenger receptor-BI (SR-BI) and the low-density lipoprotein (LDL) receptor from circulating HDL and LDL. SR-BI mRNA is expressed in pig ovaries at all stages of folliculogenesis and in the corpus luteum (CL). SR-BI protein expression in mouse ovary during estrous cycle was also detected. In both species, expression is concentrated in cytoplasm and periphery of follicular cells. Gonadotropins induce SR-BI expression in pig granulosa cells, with cytoplasmic expression increasing through the periovulatory period, with migration to the cell periphery as the CL matured. An 82-kDa form of SR-BI is strongly expressed in the pig CL, with the less abundant 57-kDa form, differences between forms are attributable to glycosylation. In vitro culture of pig follicles with human chorionic gonadotropin (hCG) induced time-dependent upregulation of 82-kDa SR-BI in granulosa cells. SR-BI and LDL receptor were reciprocally expressed, with the latter highest in follicular granulosa cells, declining precipitously with CL formation. To further explore mechanisms of cholesterol supply to ovarian steroidogenesis, we examined mice treated to uncouple ovulation and mice bearing null mutation of the Scarb1 gene (SR-BI-/-). Results show entrapped oocytes in luteinized structures expressed SR-BI. SR-BI-/- mice displayed small corpora lutea, large follicles with theca cells hypertrophied, follicular cysts with blood filled cavities and 50% decreased in plasma progesterone. In SR-BI-/- mice, treatment with a combination of 20 g/g of mevinolin and 100 g/g of chloroquine (CHLORO) was employed to disturbed cholesterol sources. Serum progesterone was reduced by 43% in wild type and 30% in SR-BI-/- mice. The protein expression of the rate-limiting enzyme for cholesterol synthesis, 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase (HMGR) increased in SR-BI-/- mice. It was concluded that follicular cells express SR-BI during follicle development and luteinization causes upregulation of SR-BI expression. Posttranslational maturation is characterized by glycosylation. Under normal conditions expression of the LDLr (low density lipoprotein recepors) is extinguished during luteinization such that SR-BI becomes the principal means of importation of extracellular cholesterol. Further, perturbation of cholesterol de novo synthesis and uptake from LDLr in SR-BI-/- mice leads to a reduction of luteal function. Ovarian cholesterol homeostasis is central to adequate luteinization, and its perturbation leads to reduction, but not to complete impairment, of luteal function. We conclude that SR-BI expression is an important but not essential factor in maintaining ovarian cholesterol homeostasis, steroid synthesis and luteinization. A network of complementary and compensatory cholesterol supply mechanisms act in concert to assure ovarian steroid synthesis. Studies were funded by Colegio de Postgraduados, México. CONACyT, México. SRE, México. Ministère de l’Éducation du Québec, University of Montreal and an Operating Grant to B.D. Murphy from the Canadian Institutes of Health Research.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

46

Éthier, Chiasson Maude. "Influence du profil lipidique maternel sur l'expression de récepteurs à lipoprotéine de faible densité." Mémoire, 2007. http://www.archipel.uqam.ca/4760/1/M9779.pdf.

Full text

Abstract:

L'obésité, avec les conséquences physiologiques qu'elle engendre, est sans doute une des pathologies entraînant le plus grand nombre de décès en Amérique du Nord. On note un accroissement de l'obésité chez les enfants qui semble pouvoir être corrélée au profil lipidique de la mère durant la grossesse. Cependant, les échanges lipidiques placentaires demeurent un volet de la science encore peu étudié. Dans le plasma, le cholestérol est véhiculé via les lipoprotéines, principalement par un certain type, soit les lipoprotéines à faible densité (LDL). Ces LDL natives sont reconnues par le récepteur aux LDL (LDLr) présent à la surface des syncytiotrophoblastes. Chez l'humain, le troisième trimestre de la grossesse associé à une hypercholestérolémie prononcée pouvant avoir comme conséquence d'engendrer des LDL oxydées. Ces particules sont considérées comme étant plus arthérogéniques, puisque leur affinité avec le LDLr est réduite. Ces LDL oxydées sont les ligands d'autres récepteurs soit le « lectinlike oxidized low density lipoprotein receptor-1 » (LOX-1) et le « scavenger receptor type BI» (SR-BI). Par contre, la régulation de l'expression de ces différents récepteurs au niveau du placenta, en cas d'hypercholestérolémie, reste en grande partie inexplorée. Le but de cette étude est de caractériser la régulation de l'expression des différents récepteurs de LDL dans le placenta en fonction du profil lipidique maternel, soit de la concentration de cholestérol plasmatique, de l'indice de masse corporel pré-grossesse (IMC) et du gain de poids (GDP) en cours de grossesse. Les femmes sélectionnées sont dans un premier temps classées selon leur concentration plasmatique (inférieur à 7mM ou supérieur à 8mM), puis rétrospectivement classées selon leur IMC (normal, inférieur ou supérieur à la normale établie), ainsi qu'en fonction de leur GDP durant la grossesse (normal, inférieur ou supérieur à la normale). De plus, l'expression de ces différents récepteurs sera aussi quantifiée chez un groupe de femmes présentant un diabète gestationnel. Enfin, la localisation de ces récepteurs au niveau du syncytiotrophoblaste, soit au niveau de la membrane à bordure en brosse (BBM) ou de la membrane basale plasmique (BPM), sera déterminée. L'expression protéique des différents récepteurs dans le placenta est quantifiée par immunobuvardage de type Western et par immunohistochimie. Les résultats démontrent une diminution de l'expression du LDLr, chez les femmes ayant une concentration de cholestérol >8mM, qui semble être corrélée négativement à l'IMC et au GDP. Inversement, une augmentation de l'expression de LOX-1 est observée chez les femmes ayant une concentration de cholestérol <7mM et semble être corrélée positivement avec l'IMC, mais négativement avec le GDP. L'expression de SR-BI ne semble pas être modifiée. Ainsi, l'environnement placentaire est influencé par les IMC et GDP hors norme, ce qui, à long terme, pourrait être associé à une augmentation des problèmes cardiovasculaires. (Subventionné par IRSC) ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Placenta, LDL, LDL oxydées, LDLr, LOX-1, SR-BI, diabète gestationnel

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

47

Luangrath, Vilayphone. "Importance du récepteur Cluster of differentiation-36 dans le métabolisme des LDL natives et oxydées chez la souris." Mémoire, 2006. http://www.archipel.uqam.ca/3454/1/M9556.pdf.

Full text

Abstract:

Les lipoprotéines sont des molécules sanguines composées de lipides et de protéines dont la fonction est de véhiculer les lipides, dont le cholestérol, vers les cellules de l'organisme. Le maintien de l'équilibre plasmatique en cholestérol est réalisé par le taux de synthèse et de captation qui peut s'effectuer principalement par deux voies. D'abord, la captation globale, est un processus d'épuration totale puisqu'elle consiste en la prise et la dégradation complète des lipoprotéines. Dans le cas des lipoprotéines à apoprotéine B, cette voie fait surtout intervenir le récepteur de lipoprotéine de faible densité (rLDL). Cependant, l'homéostasie cellulaire lipidique peut également être régulée par la voie de la captation sélective qui implique seulement la captation d'une fraction des lipides sans amener la dégradation des molécules protéiques. Cette voie fait intervenir l'action de récepteurs scavengers de classe B dont le scavenger de classe B type l (SR-BI). Le SR-BI, reconnu comme étant un récepteur de lipoprotéines de haute densité (HDL) ayant la capacité de prendre sélectivement les esters de cholestérol (EC), a également été reconnu pour sa capacité à lier et à capter sélectivement les EC d'autres classes de lipoprotéines, dont les LDL natives. Un autre récepteur dans la famille des récepteurs scavengers de classe B, le Cluster of differentiation-36 (CD36) manifeste également son implication dans le métabolisme des lipoprotéines. Cependant, son rôle a surtout été démontré au niveau des LDL oxydées (LDLox). Il aurait aussi une faible implication au niveau du métabolisme des HDL. Son rôle dans le métabolisme des LDL reste encore à être défini. Il est maintenant bien reconnu que de hauts niveaux de LDL plasmatiques ont une corrélation positive avec l'incidence de développement de maladies cardiovasculaires telle que l'athérosclérose. Ainsi, l'objectif du présent projet visait à élucider l'implication de CD36 dans le métabolisme des lipoprotéines de faible densité natives et oxydées à différents degrés. Cette étude a été réalisée grâce il des souris transgéniques déficientes pour le gène CD36 (-/-) et de souris sauvages (+/+) servant de contrôles. Le métabolisme des différentes lipoprotéines a été évalué selon des analyses de clairances plasmatiques. Pour ce faire, des lipoprotéines marquées radioactivement au niveau de leur portion protéique ou lipidique ont été injectées et des échantillons sanguins ont été prélevés pour mesurer la quantité de lipoprotéines résiduelles non métabolisées restant en circulation. Des courbes de clairances plasmatiques ont ensuite été tracées et à partir de celles-ci, le taux catabolique fractionnel (TCF) a été calculé pour chacune des parties (protéique et lipidique) des différentes lipoprotéines afin de quantifier la proportion de lipoprotéines métabolisées par les souris. Au terme de ces analyses, le foie des souris a été récolté et analysé pour son contenu en radioactivité dans le but d'évaluer la contribution de cet organe dans le métabolisme des lipoprotéines à l'étude. Les résultats montrent que les LDL et les LDL légèrement oxydées (LOX) sont soumises à la captation sélective, puisque la partie lipidique est éliminée plus rapidement que la partie protéique. Ce processus de prise sélective n'est toutefois pas retrouvé pour les LDL fortement oxydées (FOX) étant donné une clairance moins rapide en lipides qu'en protéines. L'absence de CD36 a pour effet d'accélérer la clairance de la partie protéique des LDL, mais ralentit de manière importante la clairance des LOX et des FOX. De plus, le foie contribue de façon importante au métabolisme des différentes lipoprotéines, mais le CD36 hépatique ne participe pas à cette prise hépatique. En somme, les LDL sont, en partie, éliminées par la voie de la captation sélective, mais leur oxydation progressive entraîne leur clairance via la captation globale. L'importance de CD36 dans l'élimination des LDL oxydées au niveau extra-hépatique suggère une contribution de ce récepteur dans le développement de l'athérosclérose. ______________________________________________________________________________

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

48

Smaani, Ali. "Caractérisation des mécanismes responsables des effets variables du récepteur des lipoprotéines de faible densité sur l’intégrité des cellules endothéliales lymphatiques." Thesis, 2020. http://hdl.handle.net/1866/24508.

Full text

Abstract:

Le système lymphatique joue un rôle clé dans le transport du cholestérol hors de la paroi artérielle et une dysfonction lymphatique précède l'apparition de l'athérosclérose. Cette dysfonction est associée à une diminution de l’expression du récepteur des lipoprotéines de faible densité (LDLR) et est à priori indépendante des taux de cholestérol circulant. Il a été démontré que les souris dépourvues de la proprotéine subtilisine/kexine de type 9 (PCSK9), une proprotéine qui mène à la dégradation du LDLR, ont une fonction lymphatique améliorée, tandis que les souris dépourvues de LDLR développent une dysfonction lymphatique. Nous visons maintenant à mieux comprendre les mécanismes par lesquels la présence de PCSK9 dans la lymphe ou la modulation du LDLR sur les cellules endothéliales lymphatiques (CEL) affecte la fonction lymphatique. Les CEL sont incubées avec du PCSK9 ou traitées avec un ARN inhibant spécifiquement l’expression du LDLR afin d’évaluer comment la présence de PCSK9 ou la modulation du LDLR affecte l'intégrité des CEL. Nos résultats démontrent que le PCSK9 n’induit pas la sécrétion de cytokines inflammatoires et n'affecte pas l'expression des marqueurs lymphatiques. L’inhibition de l’expression du LDLR entraîne une diminution des marqueurs lymphatiques membranaires endothéliaux. La diminution du LDLR a aussi entrainé une diminution des taux de certains lipides intracellulaires et en particulier des phospholipides, des sphingolipides et des triglycérides. Ces résultats suggèrent qu'une perte du LDLR, mais pas la présence de PCSK9 en circulation, pourrait induire à une altération de l'endothélium lymphatique causée par une diminution de l’expression de protéines membranaires essentielles au bon transport de la lymphe. The lymphatic system plays a key role in the removal of cholesterol from the artery wall and lymphatic dysfunction is known to occur prior to the onset of atherosclerosis. This dysfunction is associated with reduced expression of the low-density-lipoprotein receptor (LDLR) and is first independent of circulating cholesterol levels. It has been shown that mice lacking proprotein subtilisin/kexin type 9 (PCSK9), a proprotein that degrades LDLR, have improved lymphatic function while mice lacking LDLR had a lymphatic dysfunction. We now aim to better understand the mechanisms by which the presence of PCSK9 in lymph or the modulation of LDLR on lymphatic endothelial cells (LECs) affects lymphatic function. Incubation of LECs with PCSK9 and specific targeting of LDLR expression with silencing RNAs were used to further evaluate how PCSK9 or modulation of LDLR affect the metabolism and integrity of LECs. Our results demonstrate that PCSK9 does not induce the secretion of inflammatory cytokines and does not affect the expression of lymphatic markers. LDLR silencing RNA leads to a decrease of membrane-bound lymphatic endothelial cell markers. A decrease in LDLR expression also led to a decrease in the content of some intracellular lipids and particularly phospholipids, sphingolipids and triglycerides. These results suggest that loss of LDLR expression, but not circulating PCSK9, could lead to alterations in the lymphatic endothelium caused by loss of membrane integrity which could in turn affect lymph transport.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

49

Tremblay, Félix. "Influence des mécanismes d'endocytose et de la localisation membranaire du récepteur Scavenger de classe B, type I sur la captation sélective des esters de cholestérol des lipoprotéines de faible (LDL) et de haute (HDL) densité." Mémoire, 2010. http://www.archipel.uqam.ca/3399/1/M11506.pdf.

Full text

Abstract:

Le récepteur scavenger de classe B type 1 (SR-BI) est essentiel au transport inverse du cholestérol puisqu'il en effectue la dernière étape: la captation sélective (CS) des esters de cholestérol (EC) à partir des lipoprotéines, c'est-à-dire l'internalisation de leurs EC sans dégradation de leur portion protéique. Au niveau hépatique, ce mécanisme d'importance demeure cependant mal défini. Nous avions déjà montré qu'un mécanisme de rétroendocytose était responsable de la CS dans des cellules HepG2 et que la CS dépendait de la localisation membranaire du SR-BI. Ici, nous vérifions si des voies d'endocytose, qui sont indépendantes de la clathrine et dépendent de microdomaines membranaires comme les radeaux lipidiques, ne pourraient pas expliquer l'activité du SR-BI à l'égard des LDL et HDL). Le traitement des cellules avec des inhibiteurs «classiques» de l'endocytose (NH4 CI: choc hyperosmotique, privation d'ATP, chlorpromazine (CPZ), puis le traitement avec des inhibiteurs différentiant ces voies selon qu'elle dépendent ou non de la dynamine-2 (dynasore) ou de GTPases de la famille de Rho (sous unité B de la toxine de C. difficile (CDTxB)) révèlent que le SR-BI ne se conduit pas de façon identique à l'égard des deux ligands. Les résultats indiquent que la CS des EC-HDL), de par sa sensibilité aux NH4CI et CPZ et par son augmentation en présence de dynasore ou de CDTxB, serait effectuée par endocytose suivant une voie dépendant de la clathrine et qu'elle pourrait être régulée négativement par une voie dépendant de RhoA. La CS des EC-LDL, sensible à la CPZ et augmentée par la CDTxB, pourrait dépendre, elle, d'une voie d'endocytose régulée par Cdc42 ou la flotilline. En somme, les résultats permettent une caractérisation plus approfondie de la CS et les différences de régulation de la CS envers les deux principales classes de lipoprotéines chez l'humain s'ajoutent à celles déjà mises en évidence par nous. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : lipoprotéines, cholestérol, endocytose indépendante de la clathrine, radeaux lipidiques, cellules hépatiques

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

50

Ait, Hamouda Hocine. "Étude du trafic cellulaire de la convertase de proprotéine PCSK9 responsable de la dégradation du récepteur des lipoprotéines de faible densité (LDLR)." Thèse, 2014. http://hdl.handle.net/1866/11842.

Full text

Abstract:

Les maladies cardiovasculaires (MCV) sont la principale cause de mortalité dans les pays industrialisés. L'hypercholestérolémie constitue un facteur de risque majeur pour les MCV. Elle est caractérisée par des niveaux élevés de lipoprotéines de faible densité (LDL, aussi appelé “mauvais cholestérol”). La présence prolongée de haut niveaux de LDL dans la circulation augmente le risque de formation de plaques athérosclérotiques, ce qui peut conduire à l'obstruction des artères et l'infarctus du myocarde. Le LDL est normalement extrait du sang par sa liaison au récepteur du LDL (LDLR) qui est responsable de son endocytose dans les hépatocytes. Des études génétiques humaines ont identifié PCSK9 (proprotein convertase subtilisin/kexin type 9) comme le troisième locus responsable de l'hypercholestérolémie autosomique dominante après le LDLR et son ligand l’apolipoprotéine B-100. PCSK9 interagit avec le LDLR et induit sa dégradation, augmentant ainsi les niveaux plasmatiques de LDL. Les mutations gain de fonction (GF) de PCSK9 sont associées à des niveaux plasmatiques élevés de LDL et à l'apparition précoce des MCV, alors que les mutations perte de fonction (PF) de PCSK9 diminuent le risque de MCV jusqu’à ~ 88% grâce à une réduction du LDL circulant. De ce fait, PCSK9 constitue une cible pharmacologique importante pour réduire le risque de MCV. PCSK9 lie le LDLR à la surface cellulaire et/ou dans l'appareil de Golgi des hépatocytes et provoque sa dégradation dans les lysosomes par un mécanisme encore mal compris. Le but de cette étude est de déterminer pourquoi certaines mutations humaines de PCSK9 sont incapables de dégrader le LDLR tandis que d'autres augmentent sa dégradation dans les lysosomes. Plusieurs mutations GF et PF de PCSK9 ont été fusionnées à la protéine fluorecente mCherry dans le but d'étudier leur mobilité moléculaire dans les cellules hépatiques vivantes. Nos analyses quantitatives de recouvrement de fluorescence après photoblanchiment (FRAP) ont montré que les mutations GF (S127R et D129G) avaient une mobilité protéique plus élevée (> 35% par rapport au WT) dans le réseau trans- Golgien. En outre, nos analyses quantitatives de recouvrement de fluorescence inverse après photoblanchiment (iFRAP) ont montré que les mutations PF de PCSK9 (R46L) avaient une mobilité protéique plus lente (<22% par rapport au WT) et une fraction mobile beaucoup plus petite (<40% par rapport au WT). Par ailleurs, nos analyses de microscopie confocale et électronique démontrent pour la toute première fois que PCSK9 est localisée et concentrée dans le TGN des hépatocytes humains via son domaine Cterminal (CHRD) qui est essentiel à la dégradation du LDLR. De plus, nos analyses sur des cellules vivantes démontrent pour la première fois que le CHRD n'est pas nécessaire à l'internalisation de PCSK9. Ces résultats apportent de nouveaux éléments importants sur le mécanisme d'action de PCSK9 et pourront contribuer ultimement au développement d'inhibiteurs de la dégradation du LDLR induite par PCSK9. Coronary heart diseases (CHD) are a leading cause of death in Western societies. Hypercholesterolemia is a major risk factor for CHD. It is characterized by high levels of circulating low-density lipoprotein cholesterol (LDL, also called "bad cholesterol"). The prolonged presence of elevated levels of LDL in the circulation increases the risk of formation of atherosclerotic plaques, which can lead to obstruction of arteries and myocardial infarction. LDL is normally cleared from the blood through the binding of its sole protein constituent apolipoprotein B100 to hepatic LDL receptor (LDLR), which mediates its endocytosis in the liver. Human genetic studies have identified PCSK9 as the third gene responsible of autosomal dominant hypercholesterolemia after LDLR and its ligand apolipoprotein B100. PCSK9 interacts with the LDLR and induces its degradation thereby causing plasma LDL levels to rise. PCSK9 gain-of-function (GOF) mutations are associated with elevated plasma LDL levels and premature CHD while PCSK9 loss-offunction (LOF) mutations reduce the risk of CHD up to ~88% owing to reduction of circulating LDL. Accordingly, PCSK9 is recognized as a major pharmacological target to lower the risk of CHD. PCSK9 binds the LDLR at the cell surface and/or in the Golgi apparatus of hepatocytes and causes its degradation in lysosomes by a mechanism not yet clearly understood. The goal of this study was to determine why some human PCSK9 mutations fail to induce LDLR degradation while others increase it in lysosomes. Several PCSK9 LOF and GOF mutations were fused to the fluorescent protein mCherry to study their molecular mobility in living human liver cells. Our quantitative analysis of fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) showed that PCSK9 GOF mutations S127R and D129G have a higher protein mobility (>35% compared to WT) at the trans- Golgi network (TGN). Our quantitative analysis of inverse fluorescence recovery after photobleaching (iFRAP) showed that PCSK9 LOF mutation R46L presented a much slower protein mobility (<22% compared to WT) and a much slower mobile fraction (<40% compared to WT). In addition, our confocal and electron microscopy analyses demonstrate for the first time that PCSK9 is localized and concentrated at the TGN of human hepatocytes. Furthermore, our results demonstrate that PCSK9 localization in the TGN is mediated through its C-terminal cysteine and histidine-rich domain (CHRD), which is essential for LDLR degradation. Also, our live-cell analyses demonstrate for the first time that the CHRD is not required for internalization of PCSK9. These results provide important new information on the mechanism of action of PCSK9 and may ultimately help in the development of inhibitors of the PCSK9-induced LDLR degradation.

APA, Harvard, Vancouver, ISO, and other styles

Dissertations / Theses on the topic 'Récepteurs des lipoprotéines'

Create a spot-on reference in APA, MLA, Chicago, Harvard, and other styles