Academic literature on the topic 'Récepteurs des oestrogènes – Dissertations universitaires'

Des études épidémiologiques ont démontré que l’exposition aux pesticides tels que le chlordécone augmente le risque du cancer, en particulier de la prostate. Il avait été précédemment montré au laboratoire que le chlordécone possède des propriétés pro-angiogéniques impliquant la libération de NO et la production de VEGF suite à l’activation du récepteur aux oestrogènes de type alpha (ERα). Les processus angiogéniques pouvant impliquer les espèces réactives de l’oxygène (EROs), produites notamment par la mitochondrie, l’objectif de ce travail a été d’évaluer la contribution de la biogenèse mitochondriale et du stress oxydatif dans l’angiogenèse induite par le chlordécone.Les résultats obtenus montrent que la biogenèse mitochondriale n’est pas essentielle pour la réponse angiogénique du chlordécone puisqu’elle n’est retrouvée que pour de forte concentration de chlordécone. Les mécanismes mis en jeu ont été identifiés au niveau des cellules endothéliales humaines. Ils impliquent une régulation spatio temporellede la production des EROs impliquant dans un premier temps la NADPH oxydase, elle même capable de stimuler la production mitochondriale d’EROs via la voie impliquant la NO synthase. Le chlordécone serait par ailleurs capable de favoriser la localisation périnucléaire des EROs afin de favoriser la production de VEGF. L’ensemble de ces effets implique le récepteur aux oestrogènes. Ce travail a donc permis d’identifier les mécanismes cellulaires impliqués dans la modulation de l’angiogenèse par le chlordécone. Ces mécanismes moléculaires pourraient contribuer à identifier de nouvelles cibles permettant de réguler les processus angiogéniques et la tumorigenèse induites par ce toxique
Epidemiological studies report that exposure to pesticides like chlordecone increases risk of prostate cancer and tumorigenesis. We have reported recently that the pro-angiogenic effect of chlordecone involving NO release and VEGF production is mediated through activation of α isoform of the estrogen receptor (ERα). Since mitochondria and ROS have been implicated inthe process of angiogenesis, this study aims to determine the contribution of mitochondrial biogenesisand oxidative stress in chlordecone-induce dangiogenesis. Firstly, our results indicate that mitochondrial biogenesis is not essential for chlordecone angiogenic response. We also identified the molecular mechanism involved; chlordecone induces endothelial cells angiogenesis by a spatiotemporal regulation of ROS production involving NADPH oxidase then mitochondrial O2 -via a NO sensitive pathways through activation of ERα.These findings propose that a molecular mechanism may partly explain the epidemiological evidence implicating chlordecone as risk factor of prostatic cancer

Contexte : les hormones œstrogéniques ont de nombreux effets protecteurs au niveau cardiovasculaire et rénal mais leurs mécanismes sont très complexes. Le récepteur aux œstrogènes ERα est le principal effecteur des effets bénéfiques de ces hormones. Il possède deux voies d’action. Dans le noyau, il a des effets génomiques via ses fonctions d’activation AF. A la membrane, il a des effets non-génomiques via une signalisation membranaire MISS. Première étude : dans une première étude, nous avons exploré le mécanisme protecteur d’ERα dans l’hypertension artérielle, un facteur de risque majeur de maladies cardiovasculaires. Nous avons mis en évidence le rôle protecteur des effets génomiques d’ERα via sa fonction AF-2 contre l’hypertension. Nous avons également observé que la stimulation de cette fonction par l’Estétrol suffisait à reproduire les effets protecteurs des œstrogènes, ce qui ouvre une perspective thérapeutique potentielle. Deuxième étude : dans une deuxième partie, nous avons étudié l’effet protecteur d’ERα dans le vieillissement cardiovasculaire et rénal. Cette étude, toujours en cours, a pu mettre en évidence que la souris femelle ne présentait pas d’altération majeure de la fonction vasculaire et rénale . Toutefois, le récepteur ERα ne semble pas impliqué dans cette protection vis-à-vis du vieillissement. Cette étude a toutefois permis de mettre en évidence que les œstrogènes agissaient sur la biogénèse mitochondriale, d’une manière inattendue. Ces résultats seront approfondis dans de prochaines expériences.Conclusion En conclusion, ce travail de thèse a permis de mieux cerner l’implication des hormones œstrogéniques et de leur récepteur ERα dans le système cardiovasculaire
Context : estrogenic hormones have numerous beneficial effects in the cardiovascular and renal systems but the underlying mechanisms are extensively complex. Estrogen receptor ERα is described as the main effector of the positive actions of estrogens. This receptor acts in the cell using two different pathways. In the nucleus, ERα acts as a transcription factor with genomic effects, through its activating functions AF. At the membrane, it exerts non-genomic effects, called MISS. First Study : in a first study, we have explored the protective mechanism of ERα in hypertension, a main risk factor in cardiovascular diseases. Using genetically modified mice, we have been able to highlight the involvement of AF-2 genomic actions against angiotensin II-induced hypertension. On the other hand, ERα-dependant MISS was not involved in ERα protection. Confirming our hypothesis, we found that AF-2 stimulation with estetrol was sufficient to completely prevent hypertension, thus providing a possible therapeutic perspective. Second Study : in a second project, we have investigated the protective actions of ERα against aging-related cardiovascular and renal alterations. This work is still ongoing but we found that 16 months-old female mice presented no obvious vascular or renal dysfunctions. Those results are surprising considering past published data on the subject. Aging mice lacking ERα-/-did not exhibit any particular alterations either. However, we were able to find that estrogens and ERs were involved in the mitochondria biogenesis in a surprising manner. These results will be further investigated in the future. Conclusion : to conclude, this work has allowed a better understanding of the estrogens receptors actions in the cardiovascular and renal systems

Les récepteurs des oestrogènes a et β (REa et REβ) régissent de manière opposée l'expression de gènes nécessaires à la prolifération et à la différentiation cellulaire. Leur activité transcriptionnelle dépend d'un ligand naturel et de molécules environnementales capables de perturber leur fonctionnement. Les cancers du sein et de l'ovaire peuvent être hormono-dépendants. Les thérapies visant à contrecarrer la progression des cancers du sein exprimant le REa reposent sur son inactivation par inhibition de la production d'oestrogènes et inhibition de son activité. L'hormonothérapie n'est pas proposée pour traiter les cancers de l'ovaire, en raison d'une résistance de nova qu'il faudrait mieux comprendre. Il est également nécessaire de mieux appréhender les mécanismes de la résistance acquise dans le cas de cancers du sein{ afin de rechercher de nouvelles thérapies. L'objectif de cette thèse a été de préciser les effets des RE sur la prolifération cellulaire et l'activation des gènes. Pour cela, nous avons établi des modèles cellulaires bioluminescents de cancer du sein et de l'ovaire, dont la bioluminescence est dépendante des ligands oestrogéniques. Ces lignées nous ont permis de préciser les effets de ligands sélectifs naturels, synthétiques et environnementaux sur l'activation de gènes par les RE a et β. L'autre volet de ce travail a consisté à établir d'autres modèles bioluminescents mammaires et ovariens permettant d'étudier la prolifération cellulaire et tumorale in vitro et in vivo. Nous démontrons également l'intérêt de ces modèles pour l'étude du mécanisme d'acquisition de l'hormono-résistance et la recherche de nouveaux traitements antitumoraux
Estrogen Receptors a and β (ERa and ERβ), which are members of the nuclear receptors superfamily, impact on cell proliferation and difrrentiation genes expression in an opposite manner. Both transcription factors activity belong to a natural ligand, but also to many environmental molecules, efficient to bind and disrupt their mechanism. Breast and ovarian cancers can be hormono-dependant cancers. Therapies aimed at counteract ERa positive breast cancers progression are mainly based on its invalidation. Nowadays, two strategies are applied: estrogen production inhibition using aromatase inhibitors, and ERa activity inhibition by anti-estrogens. On the contrary, hormono-therapy is not proposed for ovarian cancer treatment, because of a de nova resistance which remains to be better understood. It also appears essential to improve our knowledge about breast cancer resistance acquisition mechanisms, in order to research new therapies. The aim of this work was first to precise estrogen actions on~ cell proliferati n and target genes activation. For that, we established estrogen-responsive bioluminescent breast and ovarian cancers models. These cell lines allowed us to determine effects of naturat synthetic and environmental selective ligands on natural and synthetic genes activation through ERa and ERβ. The other part of this study consisted in establishing other breast and ovarian bioluminescent cell lines, allowing us to study cell and tumor proliferation in vitro and in vivo. We also show these bioluminescent models relevance to investigate hormono-resistance acquirement mechanisms and new anti-tumoral treatments

La mise au point de methodes immunologiques appliquees au dosage d'haptenes necessite la mise en oeuvre de technologies particulieres du fait : -des faibles affinites generalement obtenues pour les anticorps anti-haptene -de la difficulte d'immobilisation des haptenes sur le support solide - de la necessite d'amplifier le signal de la sonde dans le cas de dosages de haute sensibilite. L'objectif de ce travail est de mettre au point des methodes immunocompetitives, non isotopiques, sensibles et fiables pour les dosages cliniques des hormones steroidiques, en particulier les oestrogenes plasmatiques ou urinaires chez la femme. Dans une premiere etape, nous avons selectionne et obtenu des anticorps monoclonaux anti-oestrogenes de haute affinite (1. 4 et 2. 10#1#0m#-#1) et d'etroite specificite, apres une etude de differents types d'immunogenes et d'immunisations. Dans une deuxieme etape nous avons effectue la synthese de differents immunoreactifs : - le marquage des anticorps par des sondes fluorescentes et par des sondes enzymatiques. Ces marquages ont ete effectues soit directement soit indirectement par l'intermediaire du systeme biotine/avidine. - le couplage des steroides a des proteines permettant leur immobilisation sur les supports solides. Dans une troisieme etape nous avons developpe quatre types d'immunodosages : -un fluoroimmunodosage des steroides a ete effectue a l'aide d'un fluorimetre a excitation laser hautement sensible, mis au point par une equipe du cnam. - un enzymoimmunodosage de l'oestradiol plasmatique chez la femme - un enzymoimmunodosage avec une amplification du signal enzymatique par le systeme biotine/avidine - un enzymoimmunodosage dot-blot des steroides et sa quantification au moyen d'un systeme de double fibres optiques. Cette meme methode permet la realisation de bandelettes test a reponse tout ou rien pour deceler la periode de fertilite chez la femme.

La zone pellucide (ZP) est une enveloppe acellulaire transparente qui entoure l'ovocyte et l'embryon de mammifère jusqu'à son implantation. Au cours de l'interaction gamètique, elle intervient dans la reconnaissance et la fixation des spermatozoi͏̈des, dans le déclenchement de la réaction acrosomique ainsi que dans le blocage de la polyspermie. Trois glycoprotéines appelées ZP1, ZP2 et ZP3 composent la zone pellucide murine mais la composition de la zone pellucide humaine est encore imparfaitement connue. C'est pourquoi nous avons cherché à caractériser la structure pellucidaire humaine en électrophorèse après biotinylation des protéines et avons étudié ses glycoconjugués, en blot et en cytochimie, à l'aide de lectines et d'anticorps anti-oligosaccharides. La zone pellucide humaine se compose de trois protéines majoritaires appelées ZP1, ZP2 et ZP3 ainsi que d'une glycoprotéine polymérique minoritaire de 180 kDa. Les glycoconjugués Lewis b, sialyl-Lewis a et sialyl-Lewis x se retrouvent également dans la composition des chaînes saccharidiques des zones pellucides humaines. D'autre part, nous avons testé les lectines AAL et LTA ainsi que les anticorps anti-Lewis b, anti-sialyl-Lewis a et anti-sialyl-Lewis x dans le cadre de tests de fixation pellucidaire des spermatozoi͏̈des. Ces deux lectines ainsi que les anticorps anti-Lewis b et anti-sialyl-Lewis a inhibent significativement la fixation des spermatozoi͏̈des. De même, les néoglycoconjugués Lewis b, sialyl-Lewis a et syalyl-Lewis x inhibent significativement la fixation des spermatozoi͏̈des aux ZP. Nous avons pu localiser la fixation du néoglycoconjugué Lewis b sur la portion acrosomique des spermatozoi͏̈des humains. Avec cette même localisation, un anticorps anti L-sélectine marquait les spermatozoi͏̈des capacités. L'ensemble de ces résultats permet de mieux définir la composition protéique et saccharidique de la ZP humaine et nous avons identifié des glycoconjugués intervenant dans la fixation des spermatozoi͏̈des par l'intermédiaire de récepteurs qui restent à caractériser.

La maladie d’Alzheimer (MA) est la maladie neurodégénérative touchant le plus de personnes dans le monde. Jusqu’à présent, aucun traitement curatif n’existe pour soigner cette maladie, d’où la nécessité d’identifier et d’étudier de nouvelles cibles thérapeutiques.La découverte des effets bénéfiques de la caféine, antagoniste du récepteur à adénosine A2A (A2AR), conjuguée à une surexpression de ce dernier chez les patients atteints de la MA, font de ce récepteur une cible d’intérêt. En effet, des antagonistes des A2ARs ont montré leur capacité à améliorer les performances cognitives de par une diminution de la charge amyloïde associée à une diminution la phosphorylation de la protéine Tau.Bien que plusieurs antagonistes aient été développés pour le traitement de maladies neurodégénératives, ceux-ci présentent un manque d’efficacité corrélée à de faibles propriétés pharmacocinétiques. Ainsi, à partir d’études de modélisation moléculaire, deux nouvelles familles d’antagonistes présentant un noyau central benzoxazole ou quinazoline ont été conçus, synthétisés et évalués pharmacologiquement. Trois composés ont été sélectionnés et font actuellement l’objet d’études pharmacologiques complémentaires sur modèles animaux
Alzheimer’s disease (AD) is the most prevalent form of dementia in the aged population. So far, there is no way to halt or slow-down AD. Therefore, there is a constant need of developing novel therapeutic strategies.In recent years, adenosine A2A receptor (A2AR) has attracted a growing interest since it has been proved that this receptor is over-expressed during AD. Also, epidemiological studies showed that people consuming regularly caffeine-based beverages over a lifetime are substantially less likely to develop this disease. Indeed, A2AR antagonists improve memory performance as it reduces β-amyloid deposits and Tau-phosphorylation.Though several antagonists have been developed for the treatment of neurodegenerative diseases, current research efforts are focus on developing new antagonists with relevant ADME properties and a better efficacy. Based on a molecular modeling-guided design, we synthesised new A2AR antagonists with benzoxazole and quinazoline as central scaffold. Three molecules were selected and will be subject to evaluation on animal’s model

Peu d'études ont été consacrées à l'expression, la localisation et à la fonction des sous-types de récepteurs impliqués dans les effets des leucotriènes et des neurokinines sur les tissus vasculaires systémiques. Pour ce qui concerne les neurokinines, ce travail démontre pour la première fois, sur veine saphène humaine, l'expression des récepteurs NK1 et NK2 au niveau du muscle lisse et la réponse contractile induite par la NKA par stimulation des récepteurs NK2. De plus, les récepteurs NK1 ont été également localisés au niveau de l'endothélium de ce type de vaisseaux. Sur vaisseaux pulmonaires, seuls des récepteurs NK1 sont exprimés au niveau endothélial et leur stimulation induit une relaxation concentration-dépendante médiée à la fois par l'oxyde nitrique et les prostaglandines. Sur ces deux types de vaisseaux humains, la réponse aux neurokinines est caractérisée par l'apparition rapide d'une tachyphylaxie. Pour ce qui concerne les leucotriènes, les récepteurs de type CysLT1 et CysLT2 sont exprimés par les veines saphènes alors que les récepteurs CysLT1 sont les seuls exprimés par les bronches humaines. Sur les deux types de vaisseaux, seuls les récepteurs de type CysLT1 sont impliqués dans la réponse contractile. Les bronches humaines de petit diamètre (inférieur à 1mm) sont environ 30 fois plus sensibles aux leucotriènes que les bronches de plus grand diamètre. L'ensemble de ces résultats suggèrent l'intérêt thérapeutique potentiel des antagonistes des récepteurs des neurokinines et des leucotriènes en pathologies cardiovasculaire
Few studies have been devoted to the expression, localization and function of the receptor subtypes involved in the effects of leukotrienes and neurokinins on systemic vascular tissues. With respect to neurokinins, this work demonstrates for the first time the expression of NK1- and NK2-receptors on the smooth muscle of human saphenous veins and the contractile effect of NKA through NK2-receptor activation. In addition, NK1-receptors have been also localized on the endothelium of this vessel type. On human pulmonary vessels, we have only found the expression of NK1-receptors on the endothelium. These endothelial NK1-receptors are involved in substance P-induced relaxation through the release of nitric oxide and prostaglandins. On this two types of human vascular tissues, the functional responses are characterized by the rapid onset of tachyphylaxis. With respect to leukotrienes, both CysLT1- and CysLT2-receptors are expressed by saphenous veins whereas only CysLT1-receptors are expressed by human bronchus. On both tissues, only CysLT1-receptors are involved in the contractile response. The small human bronchi (internal diameter > 1mm) are about 30-fold more sensitive to the leukotriene contractile effects than the large human bronchi. As a whole, these results suggest the potential therapeutic interest of neurokinin and leukotriene antagonists in vascular diseases

L’adénosine est un neuromodulateur ubiquitaire impliqué dans différents processus physiologiques et neuroprotecteurs du système nerveux central. Elle agit via quatre sous-types de récepteurs couplés à protéine G (A1, A2a, A2b et A3). Le récepteur A2a (A2aR) est fortement exprimé dans des régions riches en dopamine, avec de fortes concentrations dans la zone du caudate-putamen du cerveau, où elle a un rôle important dans la transmission neuronale et dans le processus dégénératif d’origine extrapyramidale. Ainsi, le blocage du récepteur A2a s’est révélé être une cible prometteuse pour le traitement des maladies neurodégénératives tels la Maladie de Parkinson (MP) et la Maladie d’Alzheimer (MA). A ce jour, seulement trois composés sont en phase clinique dans le cadre du traitement de la MP. Toutefois, bien que très affins, ils ne possèdent pas des propriétés ADME ou une sélectivité optimales.Au début de ce projet, la sous-structure Tic-hydantoïne a été identifiée comme présentant une bonne affinité pour A2aR. Après étude des fonctions manquantes de cette molécule et en respectant les éléments pharmacophoriques nécessaires pour une bonne activité, nous avons imaginé et évalué dans la structure co-cristallisé du A2aR et du ligand antagoniste de référence ZM241385 différentes modulations autour de l’hétérocycle. Ceci a permis de proposer la famille des Tic-guanidines, qui présente une fonction donneur de liaison hydrogène avec le résidu Asn253 du site et qui a été synthétisé après optimisation d’un chemin synthétique original. De plus, 1700 molécules ont été conçues de novo et évaluées in silico. Parmi les familles potentiellement intéressantes, deux d’entre elles, les quinolizidinones et les amino-imidazopyridines ont été synthétisées et évaluées in vitro afin de déterminer leur affinité vis-à-vis le récepteur A2a ainsi que leur cytotoxicité vis-à-vis les cellules neuronales
Adenosine is a ubiquitous neuromodulator able to regulate many physiological processes and plays an important neuroprotective role in the central nervous system. Its effects are transmitted by four distinct G protein receptor subtypes designated A1, A2a, A2b, and A3. A2a receptors (A2aR) show a restricted distribution, being characteristic of the dopamine enriched areas, the highest concentration being in the caudate-putamen in brain, where it has an important role in neuronal signaling with this region and potential involvement in neurologic disease of extrapyramidal origin.A2a antagonism was shown to be a promising pharmacological target for neurodegenerative diseases such as Parkinson’s disease (PD) and Alzheimer disease (AD). Currently, only three compounds are still in clinical phase for PD treatment. Even if they show good affinities for the receptor, there is still a need for improving their ADME properties by keeping their selectivity towards other adenosine receptors.At the beginning of this project, a Tic-hydantoin derivative was identified as a new ligand with a good affinity for the A2a receptor. Based on the recently published crystalline structure of the A2A receptor complexed with the selective and high-affinity antagonist ZM241385 and a pharmacophoric model, we identified the missing features needed for a good affinity in our molecule. We designed and evaluated in silico many pharmacomodulations around the heterocyclic ring and Tic-guanidin substructure was proposed to present favorable hydrogen bound with Asn253 of the A2a binding site. This structure was obtained after optimization of a new synthetic pathway. Moreover, 1700 molecules were originally designed and evaluated in silico. Among potential interesting families, two of them, quinolizidinones and amino-imidazopyridines were synthesized and evaluated in vitro toward their affinity for A2a receptor and their cytotoxicity towards neuronal cells

Avec plus de 200 millions de personnes infectées et 600 millions d'individus exposés, les schistosomiases représentent la deuxième endémie parasitaire mondiale après le paludisme. L'utilisation d'une seule drogue (avec la description des premiers isolats résistants) et l'absence actuelle de vaccin disponible, témoignent de l'urgence et du besoin de développer de nouvelles stratégies de lutte contre le parasite. Le développement rationnel et efficace de nouvelles cibles chimiothérapeutiques et/ou vaccinales passe par une meilleure compréhension des mécanismes de développement et de différenciation du schistosome. Dans ce cadre, les récepteurs nucléaires d'hormones constituent des candidats d'étude privilégiés. Les récepteurs nucléaires sont une superfamille de facteurs de transcription ligand dépendant, impliqués dans les processus liés au développement et à la différenciation chez les métazoaires. Six membres ont été isolés chez le schistosome, dont SmFtz-F1 (S. Mansoni Fushi Tarazu-Factor1), objet d'étude de cette thèse. Les rôles des orthologues de ce récepteur, dans les processus du développement et de la différenciation sexuelle, au sein d'autres organismes, pourraient présager des fonctions similaires chez le parasite. Les membres de la famille Ftz-F1 sont des récepteurs orphelins (sans ligand caractérisé) se liant à l'ADN en monomères. La caractérisation fonctionnelle approfondie de SmFtz-F1 a révélé une conservation de certaines grandes fonctions, mais a surtout dévoilé l'existence de propriétés originales qui pourraient être propres à ce récepteur de schistosome. En effet, la modélisation moléculaire de son domaine de liaison au ligand suggère l'existence d'une activité ligand dépendante, indiquant que SmFtz-F1 ne serait pas un récepteur orphelin. De plus, nous avons observé, pour la première fois, une dimérisation originale et spécifique entre SmFtz-F1 et un homologue au récepteur RXR de vertébré chez le schistosome, SmRXR1 (Schistosoma mansoni Retinoid X Receptor 1). D'une manière générale, l'identification de mécanismes transcriptionnels et/ou de voies de signalisation propres au parasite, participe(nt), d'une part, à la compréhension des mécanismes de l'évolution du développement animal, et d'autre part, constitue une étape importante dans la recherche de nouveaux moyens de lutte contre les schistosomiases
Schistosomiasis is a major public health problem afflicting 200 million people with 600 million exposed to infection, and represents the second most important worldwide parasitic disease after malaria. In the absence of an effective vaccine and with only one drug effective against all schistosome species, there is a clear need for novel treatments. A rational approach to this problem is to characterize schistosome proteins that are potentially strongly involved in parasitic development and differentiation and are thus chemotherapeutic targets. One such family of proteins is represented by the nuclear hormone receptors (NRs). Nuclear receptors constitute a superfamily of ligand-dependent transcription factors which regulate a wide array of physiological and vital processes in the metazoa, including growth, development, sexual differentiation and metabolism. Six members of this superfamily have been isolated in schistosomes. The aim of this work was to investigate the functional properties of one of them, SmFtz-F1 (Schistosoma mansoni Fushi Tarazu-Factor 1). The Ftz-F1 subfamily contains orphan receptors that bind to their response element as monomers. The functional characterization of SmFtz-F1 has shown some conserved functions, but has especially revealed original functional properties that could be specific for this schistosome receptor. Indeed, the 3D modelling of the E domain suggests that SmFtz-F1 could be a ligand-dependant nuclear receptor. Moreover, we have observed, for the first time, an original and specific interaction between SmFtz-F1 and a schistosome RXR homologue, SmRXR1 (S. Mansoni Retinoid X Receptor). Overall, the characterization of specific parasite signaling pathways, first, allows the comprehension of the molecular mechanisms involved in the evolution of animal developement and, second, represents a key step in the search for new strategies to control schistosomiasis