Academic literature on the topic 'Reprodução de equinos'

Surtos de fotossensibilização primária em equídeos associados à ingestão de Froelichia humboldtiana, são frequentes na região semiárida do Nordeste. A reprodução experimental da doença foi realizada em uma fazenda do município de Parelhas, Rio Grande do Norte, utilizando três equinos, dois experimentais e um controle. Os equinos experimentais permaneceram por 16 dias presos a cordas de 10 metros cada uma, em área invadida pela F. humboldtiana. A corda era fixada a cada dia em local diferente e outras plantas da área de pastejo que não F. humboldtiana eram arrancadas. O equino controle permaneceu em área isenta da F. humboldtiana. A partir do 4o dia de pastejo, os equinos experimentais começaram a apresentar prurido e queda de pelo nas áreas despigmentadas do chanfro, focinho, boleto e quartela, progredindo para vermelhidão, exsudato e formação de crostas, nos dias subsequentes. Não foram observadas alterações nas atividades séricas de aspartato aminotransferase, gama-glutamil transferase, lactato desidrogenase e fosfatase alcalina. A planta mostrou-se altamente palatável para os equinos. Não foi observada nenhuma alteração no equino controle. Os resultados comprovam que F. humboldtiana causa fotossensibilização primária em equinos após a ingestão de grandes quantidades de planta

Alguns fatores relacionados ao ambiente externo influenciam direta ou indiretamente os animais, fazendo com que eles apresentem características específicas em sua fisiologia reprodutiva. Dentre as variáveis ambientais, destaca-se o fotoperíodo diário, que permite classificar as espécies sazonais em animais de dia curto (pequenos ruminantes e bubalinos) e de dia longo (equinos). Assim, nessas espécies o funcionamento do eixo hipotálamo-hipófise-gonadal é modulado pela atuação da melatonina que é liberada em concentrações proporcionais a intensidade luminosa. A melatonina influencia a liberação direta do GnRH e indireta de gonadotrofinas (FSH e LH), assim como, influencia a gametogênese, síntese de hormônios sexuais e os comportamentos sexuais. O objetivo com essa revisão é abordar a influência do fotoperíodo na fisiologia reprodutiva, analisando os efeitos do ritmo circadiano e os aspectos fisiológicos da melatonina na regulação e modulação da reprodução animal.

No Brasil, como nos demais países, os investimentos em pesquisa com equinos estão relacionados às perspectivas dos segmentos da indústria equina no país. Este trabalho foi conduzido com o objetivo de revisar a literatura corrente com a perspectiva de avaliar o recente desenvolvimento científico e tecnológico na produção de equídeos. As pesquisas estão relacionadas às diversas áreas da equideocultura, como produção e manejo, genética e melhoramento, nutrição e alimentação, reprodução, medicina e cirurgia, doenças, sanidade e defesa sanitária. Há ainda pesquisas em áreas relacionadas ao hipismo, envolvendo fisiologia esportiva, equitação e treinamento de equinos e também, além de estudos sobre o comércio nacional e internacional de equinos. Considerando todas as áreas da equideocultura, o maior número de artigos publicados está relacionado às áreas da medicina e cirurgia e doenças e sanidade. Na área da Zootecnia, predominam as publicações de artigos associados à nutrição e alimentação dos equinos. No entanto, deve-se considerar que os interesses do agronegócio do cavalo, das associações de criadores, dos governos e da sociedade em geral influenciam as pesquisas e, consequentemente, as publicações dos artigos e trabalhos técnicos sobre equídeos.

O comportamento reprodutivo possui papel fundamental na determinação do relacionamento entre indivíduos e a perpetuação da espécie equina na natureza. O conhecimento acerca das peculiaridades comportamentais reprodutivas em equinos contribui, de forma positiva, para o estabelecimento de mudanças no manejo e visam melhoria da eficiência reprodutiva nos atuais sistemas de criação desses animais. A partir do conhecimento dos aspectos comuns ao ciclo estral e comportamento reprodutivo dos animais domésticos se pode chegar a um melhor resultado fazendo um manejo correto, diante do exposto, este trabalho buscou descrever as particularidades referentes à organização social, cortejo, cópula e conduta maternal de equinos com o objetivo de destacar a importância e influência do comportamento reprodutivo animal em relação ao sucesso reprodutivo. O presente estudo se constitui em uma revisão bibliográfica que aborda aspectos relacionados acerca do comportamento reprodutivo em equinos. A busca de artigos foi realizada nas bases de dados Scielo, Pubmed e Portal Capes, das quais foram selecionados artigos em texto completo, publicados em território nacional e internacional, no período de 1984 a 2017, nos idiomas inglês, espanhol e português. O conhecimento a fundo do comportamento reprodutivo animal pode contribuir de forma positiva para o estabelecimento de mudanças no manejo, que visam melhoria da eficiência reprodutiva nos atuais sistemas de criação, e que devem, portanto, ser incentivados. Palavras-chave: Reprodução. Garanhão. Comportamento Sexual. AbstractThe reproductive behavior plays a fundamental role in the separation between individuals and a perpetuation of the equine type in nature. Knowledge about the reproductive behavioral peculiarities in equines with positive capacity for change is not feasible and visually impossible to reproduce in the current animal’s exposure systems. From the knowledge of the common aspects to the estrous cycle and the animal's reproductive behavior, a better result can be reached by making a correct management. In view of the above, this work sought to describe the particularities regarding the social organization, courting, copulation and maternal equines with the aim of highlighting the importance and the influence of the reproductive animal’s behavior concerning the reproductive success. The present study is a bibliographical review that addresses aspects related to to the reproductive behavior in horses. The search for articles was carried out in the databases Scielo, Pubmed and Capes Portal, where articles were selected in the complete national and international document, from 1984 to 2017, in English, Spanish and English based on this work. Deep knowledge on the animal’s reproductive behavior can contribute positively to the establishment of changes in management, aimed at improving reproductive efficiency in current farming systems, and should therefore be encouraged. Keywords: Reproduction. Stallion. Sexual Behavior.

Os insultos vasculares afetam diretamente a produção e a qualidade das células espermáticas, portanto, o diagnóstico rápido dessas alterações é de extrema importância para evitar danos irreversíveis à reprodução. Desse modo, a ultrassonografia Doppler têm se mostrado um método eficaz no diagnóstico precoce de afecções reprodutivas relacionadas com distúrbios na perfusão sanguínea testicular. Além disso, possibilita o acompanhamento de tratamentos em curso, a fim de melhorar resultados terapêuticos e proporcionar melhor previsão de fertilidade aos garanhões. Em homens, já é um método empregado para diagnosticar distúrbios de fertilidade, entretanto, na veterinária os relatos ainda são escassos e o uso por andrologistas de equinos para este fim, é esporádico. O objetivo dessa revisão é apresentar os princípios da ultrassonografia Doppler e os benefícios para a andrologia de equinos, afim de ampliar o conhecimento a respeito da técnica e facilitar o diagnóstico de afecções durante exames reprodutivos de garanhões.

Os programas comerciais de transferência de embriões em éguas existem por mais de três décadas e são hoje uma das biotécnias mais utilizadas na reprodução assistida de equinos. O exame ultrassonográfico nos períodos pré e pós-cobertura de doadoras de embriões, assim como a avaliação de receptoras no momento da inovulação é de vital importância para o êxito de um programa de transferência de embriões. A ultrassonografia Doppler é uma técnica não-invasiva que permite a avaliação em tempo real da hemodinâmica do trato reprodutivo de animais de grande porte. Por fornecer detalhes anatômicos e informações imediatas sobre a fisiologia do fluxo sanguíneo de tecidos e órgãos, o exame doppler permite a avaliação do potencial ovulatório de folículos e do status funcional de corpo lúteo e útero, além de ser uma técnica auxiliar para o diagnóstico de distúrbios na hemodinâmica do sistema reprodutivo. Alterações na perfusão sanguínea dos futuros folículos dominantes são detectáveis em diferentes fases de seu desenvolvimento, como na divergência folicular e no período pré-ovulatório. A partir dessas informações, é possível determinar o princípio da atividade sexual e o momento ideal para o início de tratamentos superovulatórios e indutores de ovulação, assim como o momento mais apropriado para a realização de coberturas de éguas doadoras de embriões. A avaliação através do modo-Doppler do corpo lúteo e útero de éguas receptoras é também um instrumento auxiliar para a seleção de animais com perfil sérico de progesterona e ambiente uterino adequados para a sobrevivência do embrião e manutenção da gestação. Essa técnica pode ser útil ainda ao se avaliar a interação concepto-maternal. Apesar da aplicabilidade da tecnologia doppler dentro de programas de transferência de embriões, novos estudos visando a determinar padrões de normalidade e posterior caracterização de distúrbios de fluxo sanguíneo de trato reprodutivo ainda se fazem necessários.

RESUMO: Descrevem-se, na pele de equídeos, lesões de natureza mecânico-traumática causadas por espinhos de Mimosa spp. Dentre as três espécies da planta identificadas como responsáveis pelas lesões, M. setosa estava presente em maior quantidade (80%) e M. debilis e M. pudica encontravam-se em menor proporção na pastagem. Ocorreram três surtos de dermatite ulcerativa em períodos chuvosos de abril a maio de 2013, dezembro de 2013 a fevereiro de 2014 e abril a maio deste mesmo ano. Vinte e cinco equinos do Setor de Reprodução Animal da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro apresentaram, na pele, lesões ulcerativas com contornos irregulares, exsudato hemorrágico, recobertas por crostas. As lesões localizavam-se sobretudo nas regiões de quartela, boleto, articulação escapulo-umeral, lábios superior e inferior, focinho, narinas, bochechas e chanfro. Sete animais foram biopsiados e o exame histopatológico revelou ulceração da epiderme e infiltrado inflamatório constituído por macrófagos e neutrófilos, delimitado por tecido de granulação subjacente. Em alguns casos, foram observados microespículos das referidas plantas (tricomas hirsutos) em meio à reação inflamatória. O diagnóstico de dermatite cutânea causada pela ação traumática da planta baseou-se na presença de Mimosa spp. na pastagem, nas características e localização das lesões na pele dos equinos, nos achados histopatológicos e na recuperação após a retirada dos animais do pasto.

A busca intensiva por um manejo nutricional eficaz fez com que animais de diferentes categorias apresentassem sinais de sobrepeso. A obesidade é citada em diferentes raças como a causa de inúmeros problemas ortopédicos como laminite, osteocondrite dissecante e osteoartrite juvenil. O objetivo deste trabalho é avaliar por meio da avaliação radiográfica, a presença de alterações nas articulações do tarso de animais nascidos e criados em manejo extensivo em um criatório da raça Crioula, e que se mantinham em sobrepeso durante o ano todo. Foi realizado um estudo retrospectivo de coorte em condições de campo de fêmeas com sobrepeso e/ou obesidade desde o nascimento, até a idade adulta. Foram avaliadas 37 fêmeas equinas da raça Crioula, nascidas e criadas nesta mesma propriedade. Foi realizada a pesagem com fita e mensuração da gordura da base da cauda com a utilização de aparelho de ultrassonografia. As projeções radiográficas foram confeccionadas na região do tarso em ambos membros pélvicos. As éguas apresentaram média de escore de condição corporal 8, média de peso 557,29 +13,66 kg, gordura da base da cauda de 30,54 +3,17 mm. Cerca de 62,16% dos equinos apresentaram achados radiológicos, com alterações de diminuição de espaço articular, proliferações ósseas e osteófitos classificadas em grau 2, 3 e 4. Nos animais de um ano de idade (12 meses), foi observado 70% de alterações articulares nos ossos do tarso. Tanto a obesidade nas éguas em reprodução, quanto o sobrepeso nos animais em desenvolvimento, podem ser fatores etiológicos importantes para o desenvolvimento desta doença na raça Crioula.

Nutrição inadequada e a idade das doadoras de embriões são fatores que levam ao declínio na eficiência reprodutiva dosanimais, sendo um dos fatores responsáveis em interferir de forma negativa dentro de um programa de transferênciade embriões. O Promater® é um suplemento reprodutivo composto por vitaminas, minerais, aminoácidos, B-caroteno,L-carnitina e omegas 3, 6 e 9. Este produto é indicado para equinos em fase de reprodução com o intuito de obter melhoresresultados no desempenho reprodutivo. O objetivo do estudo é comparar o número de embriões coletados e confirmadosantes e depois do uso do suplemento em éguas doadoras para investigar se há influencia ou não do produto na eficiênciareprodutiva de éguas doadoras utilizadas em um programa de transferência de embriões equino. Além disso, avaliou-se operfil hematológico das doadoras antes e depois da inserção do suplemento na alimentação desses animais para saber se haviaalguma influência do Promater®.Foram utilizadas 5 éguas doadoras da raça Mangalarga Marchador com idade média de 20anos. As éguas foram suplementadas diariamente com 25 g do produto por um período de 84 dias. Os índices de recuperaçãoembrionária foram de 50% (10/20) e 52,6% (10/19), antes e após o tratamento com Promater®, respectivamente. As taxasde embriões confirmados foram de 80% (8/10) e 100% (10/10), antes e após o uso do suplemento. No entanto, não houvediferença significativa entre as taxas de recuperação e confirmação embrionária antes e após o uso do nutraceutico. Osresultados deste experimento demonstraram ser possível ter bons resultados com doadoras com mais de 20 anos e que paraisso são necessários cuidados como um ótimo manejo nutricional e sanitário, além de um controle folicular eficiente. Umnovo estudo, com um maior número de doadoras, se faz necessário para evidenciar esta melhora da eficiência reprodutiva.

Nutrição inadequada e a idade das doadoras de embriões são fatores que levam ao declínio na eficiência reprodutiva dos animais, sendo um dos fatores responsáveis em interferir de forma negativa dentro de um programa de transferência de embriões. O Promater® é um suplemento reprodutivo composto por vitaminas, minerais, aminoácidos, B-caroteno, L-carnitina e omegas 3, 6 e 9. Este produto é indicado para equinos em fase de reprodução com o intuito de obter melhores resultados no desempenho reprodutivo. O objetivo do estudo é comparar o número de embriões coletados e confirmados antes e depois do uso do suplemento em éguas doadoras para investigar se há influencia ou não do produto na eficiência reprodutiva de éguas doadoras utilizadas em um programa de transferência de embriões equino. Além disso, avaliou-se o perfil hematológico das doadoras antes e depois da inserção do suplemento na alimentação desses animais para saber se havia alguma influência do Promater®.Foram utilizadas 5 éguas doadoras da raça Mangalarga Marchador com idade média de 20 anos. As éguas foram suplementadas diariamente com 25 g do produto por um período de 84 dias. Os índices de recuperação embrionária foram de 50% (10/20) e 52,6% (10/19), antes e após o tratamento com Promater®, respectivamente. As taxas de embriões confirmados foram de 80% (8/10) e 100% (10/10), antes e após o uso do suplemento. No entanto, não houve diferença significativa entre as taxas de recuperação e confirmação embrionária antes e após o uso do nutraceutico. Os resultados deste experimento demonstraram ser possível ter bons resultados com doadoras com mais de 20 anos e que para isso são necessários cuidados como um ótimo manejo nutricional e sanitário, além de um controle folicular eficiente. Um novo estudo, com um maior número de doadoras, se faz necessário para evidenciar esta melhora da eficiência reprodutiva.

Este relatório contém a casuística das diferentes componentes do estágio fundamental realizado. São descritas as instalações dos locais de estágio e são desenvolvidos alguns temas abordados nos estágios: vacinação contra o tétano e contra a influenza equina, complicações mais comuns no pós-cirúrgico de cólicas, arterite séptica em cavalos adultos e em poldros, requisitos legais para um centro de recolha de sémen e para os garanhões doadores, vulvoplastia, colheita, avaliação e processamento de sémen. Assim como uma breve revisão da fisiologia reprodutiva da égua e do seu maneio reprodutivo. Contém ainda uma revisão mais aprofundada sobre transferência embrionária em equinos e um caso clinico acompanhado durante o estágio; ABSTRACT: Equine clinic, surgery and breeding This report contains a resume of the different components from the final externship. There are described the externship facilities and there are developed some of the discussed topics on it, such as: vaccination against tetanus and equine influenza, most common postoperative complications of colic surgery, septic arthritis in adult horses and foals, legal requirements to semen collection center and for the stallions donors, Caslick, collection, evaluation and semen processing. A brief review of the mare reproductive management. It also contains a most thorough review about embryo transfer and a clinical case followed during the externship.

Este relatório de estágio tem por base dois períodos de estágio distintos em duas espécies de grande porte: bovinos e equinos. O primeiro período de estágio foi efetuado na área de clínica e cirurgia de bovinos de aptidão leiteira, realizado no norte de Portugal e o segundo em clínica, cirurgia e reprodução de equinos, executado na Coudelaria de Alter Real. O relatório, dividido em duas partes, contém na primeira a exposição das atividades realizadas ao longo dos dois estágios, com breve revisão bibliográfica dos temas considerados mais pertinentes pela autora. A segunda parte, contém uma monografia com os resultados iniciais de um estudo retrospetivo dos efeitos ambientais e genéticos nas características seminais do garanhão Puro-sangue Lusitano; Abstract: Clinical Pathology and Reproduction in Cattle and Horses The present report is based on two distinct internship periods in two large species, cattle and horses. The first period of internship was carried out in heard health management, clinic and surgery of dairy cattle, carried out in the North of Portugal and, the second one took place in Royal Alter Stud farm, in Alter do Chão, in clinic, surgery and reproduction of horses. The report, divided in two parts, includes in the first the exposition of the activities performed during the two internships, with brief bibliographic reviews of subjects considered pertinent by the author. The second part contains a monograph with de preliminary results of a retrospective study about the genetic and environmental effects on the seminal traits, of the Lusitano stallion.

O presente relatório é baseado no estágio curricular realizado entre 1 de Março e 31 de Julho de 2014, co-orientado pela Dra. Marta Úson Olaso, focando-se principalmente no tema “reprodução equina”. É composto por 3 partes: casuística, monografia e análise de dados sobre o tema “reprodução no cio do poldro”. A primeira parte descreve a casuística que se acompanhou durante o estágio, diversas técnicas e casos reprodutivos assim como casos clínicos de diversas áreas. A monografia aborda o tema da reprodução no cio do poldro. A última parte, consiste num estudo retrospetivo referente aos dados das éguas acompanhadas pela Dra. Marta de 2009 a 2014, sobre a taxa de fertilidade no cio do poldro e diversos fatores que demonstraram afetar positiva ou negativamente esta taxa; ABSTRACT: Externship report - Breeding mares on foal heat The following document is the report of my externship that was realized from Mach 1st until July 31st, supervised by Drª Marta Úlson Olaso and with “Equine Reproduction” as the main focus. It is composed by three parts: casuistics, monography and data analysis on the subject “Breeding mares on foal heat”. The first part of the document describes the casuistics that I observed during the externship, namely a diversity of reproduction cases and other different clinical cases. The monograph is focused on the breeding of mares on Foal Heat and the last part of the document is data analysis of Drª. Marta Olaso clinical cases regarding this theme. The data comprises cases from 2009 until 2014 and relates fertility rate on foal heat with several external factor that were reported to influence this rate.

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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
Esta tese compreende quatro capítulos. Todos os estudos aqui relatados foram executados na Colorado State University (CSU), em Fort Collins-CO/USA. Foram utilizados sêmen de seis garanhões com idade entre 15 e 21 anos, das raças Puro-Sangue Inglês, Quarto de Milha e Árabe; estabulados no Laboratório de Reprodução Equina da CSU. Capítulo 1: dividido em três experimentos. Experimento 1: objetivou-se avaliar efeito do tratamento com 2 mg de ciclodextrina carregada com colesterol e estigmastanol (CCC , CCE); 1, 2 e 3 mg de ciclodextrina carregada com óleo de salmão (S1, S2 e S3) e com óleo de semente de linho (L1, L2 e L3) nas motilidades total (MT) e progressiva (MP) dos espermatozóides após descongelamento. Não foram observadas diferenças entre os tratamentos (p>0,05). Experimento 2: objetivou-se avaliar MT e MP do sêmen tratado com diferentes fontes de lipídeos sonicados em meio Whitten’s Modificado (MW), após congelamento convencional e congelamento precedido por choque pelo frio; e avaliar efeito do tratamento com 2 mg de CCC e CCE sobre motilidades após choque pelo frio. Os tratamentos usando lipídeos foram: 3 e 6 mg de óleo de salmão (S3 e S6), de óleo de semente de linho (L3 e L6), de gema de ovo de galinha (G3 e G6), de óleo fígado de bacalhau (B3 e B6) e de óleo de açafrão (A3 e A6). Nenhum dos tratamentos utilizando lipídeos melhorou motilidade após congelamento convencional (p>0,05). Para o sêmen submetido a 0 oC por 30 minutos, os tratamentos G6, CCC e CCE melhoraram MT e MP (p<0,05). Experimento 3: utilizou-se cromatografia gasosa para avaliar eficiência dos tratamentos em alterar o perfil de ácidos graxos da membrana espermática. Os tratamentos foram: 6 μg de óleo de semente de linho diluído em etanol (L1); 2 mg de ciclodextrina carregada com óleo de semente de linho (L2) e 6 mg de óleo de semente de linho sonicado em MW (L3). Nenhum dos tratamentos foi capaz de alterar o perfil de ácidos graxos da membrana espermática (p>0,05). Capítulo 2: objetivou-se mensurar quantidade de colesterol e estabelecer a relação colesterol:fosfolipídeos na membrana plasmática de células espermáticas tratadas com diferentes quantidades de CCC (0, 2, 4, 6 e 8 mg). Foram utilizados kit comercial (Cholesterol Liquicolor, Stanbio Laboratory, Boerne, TX, USA) para mensuração do colesterol e ensaio de ferrotiocianato de amônio para mensuração dos fosfolipídeos totais. A quantidade de colesterol encontrada nas células tratadas com 0, 2, 4, 6 e 8 mg de CCC foram respectivamente 0,22; 0,58; 0,77; 0,91 e 1,07 μg/10 6 de espermatozóides, e a relação colesterol:fosfolipídeos para os mesmos tratamentos foram 0,39; 0,72; 1,0; 1,16 e 1,36. A quantidade de colesterol na membrana foi maior a partir do uso de 2 mg de CCC (p<0,05), e a relação colesterol:fosfolipídeos a partir do tratamento com 4 mg de CCC (p<0,05). Capítulo 3: neste estudo o objetivo foi avaliar o comportamento do sêmen sem tratamento (CT) ou tratado com 20% de plasma seminal (PS) e 40 μM de PC-12 (PC) em eventos ligados à capacitação espermática durante incubação por 30 minutos (avaliações foram feitas no tempo 0 – T0, 5 – T5, 15 – T15 e 30 minutos – T30). Para isso cada um dos tratamentos foi submetido a quatro diferentes corantes: 1- CoroNa Green, que quantifica sódio intracelular (CG); 2- Fluo-3, que quantifica cálcio intracelular (Fluo); 3- FITC-PNA, que quantifica reação acrossômica (FP) e 4- Merocianina, que caracteriza fluidez/desorganização da membrana plasmática (Mero). Yo-Pro-1 ou iodeto de propídeo foram utilizados para avaliar integridade de membrana plasmática. As amostras foram lidas em citometria de fluxo. O tratamento com PC-12 aumentou o percentual de células com acrossoma reagido, detectada na avaliação aos 30 minutos. Este percentual, de 33%, foi maior que o dos demais tratamentos no mesmo tempo (CT: 13% e PS: 4%) e superior aos percentuais para o próprio PC-12 nos tempos 0 (7%), 5 (9%) e 15 minutos (16%). Com relação à fluidez da membrana plasmática não houve diferença no percentual de células com merocianina elevada entre os diferentes tratamentos, nem entre um mesmo tratamento ao longo do tempo (p>0,05). O estudo revelou efluxo de sódio das células espermáticas equinas viáveis após 15 minutos de incubação, sendo que nos tempos 15 e 30 minutos o percentual de celulas positivas para CG foram menores para tratamento com plasma seminal (8,8 e 4,8%) e maiores para tratamento com PC-12 (36 e 15,4%), em relação ao controle (23,6 e 11,8%, p<0,05). Após 15 minutos de incubação o sêmen dos três tratamentos apresentou percentual de células positivas para Fluo superior ao tempo 0, porém o plasma seminal retardou a entrada deste íon nas células, visto que, no T15 percentual de células Fluo+ foi menor que nos outros tratamentos (CT: 87%; PS: 59% e PC: 95%, p<0,05), voltando a se igualar no tempo 30 minutos (CT: 98%%; PS: 85% e PC: 97%, p>0,05). O meio MW utilizado foi capaz de induzir efluxo de sódio e influxo de cálcio, alterações que caracterizam capacitação espermática. Capítulo 4: os objetivos aqui foram avaliar eficiência de diluidores a base de gema de ovo (Lactose-EDTA) ou gema de ovo associada a leite em pó (FR5 modificado – FR5M) e eficiência do glicerol (GLI) ou da combinação deste com metilformamida (MF) em manter MT e MP dos espermatozóides após congelamento usando diferentes protocolos (0: congelamento sem resfriamento; 20: resfriamento em palhetas por 20 minutos a 5 oC antes do congelamento; 120T: resfriamento do sêmen em tubos por 120 minutos a 5 oC; 120P: resfriamento do sêmen em palhetas por 120 minutos a 5 oC). O FR5M preservou melhor a MP de células espermáticas em todos os protocolos de congelamento utilizados, mostrando benefício da combinação da gema de ovo com leite em pó no diluente de congelamento (15%, 21%, 26% e 25% para 0, 20, 120T e 120P, respectivamente, vs. 9%, 14%, 19% e 17%, para lactose-EDTA, p<0,05). A utilização de Lactose-EDTA 5%GLI apresentou resultados superiores para MT e MP se comparado ao mesmo diluidor com 3%MF + 2%GLI, o que mostra que o glicerol é um crioprotetor que pode ser utilizado em diferentes protocolos de congelamento (MT para Lactose-EDTA 5%GLI = 33%, 45%, 56% e 53% para 0, 20, 120T e 120P vs. 20%, 30% 35% e 36% para Lactose-EDTA 3%MF+ 2%GLI, p<0,05; MP para Lactose-EDTA 5%GLI = 19% e 17% para 120T e 120P vs. 11% e 10% para Lactose-EDTA 3%MF+ 2%GLI, p<0,05). O resfriamento do sêmen antes do congelamento pode ser realizado tanto em tubos quanto em palhetas de 0,5 mL, sem prejuízos às motilidades total e progressiva do sêmen após congelamento.
This thesis is compounded by four chapters. All work reported here were performed at Colorado State University (CSU), located in Fort Collins, CO / USA. Six stallions between 15 and 21 years old (Thoroughbred, Quarter Horse and Arabian breeds) and stabled at Equine Reproduction Laboratory at CSU were used in all experiments. Chapter 1: comprised by three experiments. Experiment 1: aimed to evaluate the effects on total motility (TM) and progressive motility (PM) after semen thawing from treatments with 2 mg of cyclodextrin-loaded-cholesterol and 2 mg of cyclodextrin-loaded-stigmastanol (CLC, CLS); 1, 2 and 3 mg of cyclodextrin-loaded-salmon oil (S1, S2 and S3); and 1, 2 and 3 mg of cyclodextrin- loaded-flax seed oil (F1, F2, and F3). No differences among treatments were detected (p>0.05). Experiment 2: aimed to evaluate TM and PM of semen treated with different sonicated lipids into Modified Whitten’s Medium (MW), after conventional freezing and freezing preceded by cold shock, and assess the effect of treatment with 2 mg of CLC and CLS on motility after cold shock. Treatments using lipids were: 3 and 6 mg of salmon oil (S3 and S6); 3 and 6 mg of flax seed oil (F3, F6); 3 and 6 mg of egg yolk (E3 and E6); 3 and 6 mg of cod liver oil (C3 and C6), 3 and 6 mg of safflower oil (SF3 and SF6). None of the lipid treatments improved motility after conventional freezing (p>0.05). For semen subjected to 0 °C for 30 minutes, TM and PM increased in semen treated with E6, CLC and CLS (p<0.05). Experiment 3: gas chromatography was used to evaluate effectiveness of treatments in altering the sperm membrane fatty acid profile. The treatments were: 6 μg of flax seed oil diluted with ethanol (F1); 2 mg of cyclodextrin-loaded- flax seed oil (F2) and 6 mg of flax seed oil sonicated in MW (F3). None of the treatments was able to change fatty acid profile in the sperm membrane (p>0.05). Chapter 2: aimed to measure the amount of cholesterol and to establish the cholesterol:phospholipids ratio in plasma membrane of fresh equine sperm cells treated with different amounts of CLC (0, 2, 4, 6 and 8 mg). A commercial kit was used to measure cholesterol (Cholesterol Liquicolor, Stanbio Laboratory, Boerne, TX, USA) and an ammonium ferrothiocyanate assay for total phospholipids measurement. Amount of cholesterol found for cells treated with 0, 2, 4, 6 and 8 mg CLC were, respectively, 0.22; 0.58; 0.77; 0.91 and 1.07 micrograms/10 6 sperm, and cholesterol:phospholipids ratios to the same treatments were 0.39; 0.72; 1.0; 1.16 and 1.36, respectively. Increase in cholesterol amount was observed when 2 mg of CLC was used (p<0.05), and cholesterol:phospholipids ratio was higher with 4 mg of CLC (p<0.05). Chapter 3: in this study the objective was to evaluate the response of fresh equine semen without treatment (CT) or treated with 20% of seminal plasma (SP) and 40 μM PC-12 (PC) in events related to sperm capacitation during incubation for 30 minutes (evaluations made at time 0 - T0, 5 - T5, 15 – T15 and 30 minutes - T30). Each treatment was subjected to four different dyes: 1- CoroNa Green, which measures intracellular sodium (CG); 2- Fluo-3, which measures intracellular calcium (Fluo); 3- FITC-PNA, which measures acrosome reaction (FP) and 4- Merocyanine, which characterizes plasma membrane fluidity/destabilization (Mero). Yo-Pro-1 or propidium iodide were used to assess cell membrane integrity. Samples were read in flow cytometry. An increased percentage of cells with reacted acrosome was observed in semen treated with PC-12 at T30. This proportion (33%) was higher than the other treatments at the same time (CT: 13% and SP: 4%) and higher than the proportion for PC-12 at T0 (7%), T5 (9%) and T15 (16%). There was no difference in the percentage of cells with high merocyanine between different treatments or between the same treatment over time (p>0.05). The study showed sodium efflux after 15 minutes incubation, and at times 15 and 30 minutes the percentage of positive cells for GC were lower in SP treatment (8.8 and 4.8%) and higher for PC-12 (36 and 15.4%) compared to the CT (23.6 and 11.8%, p <0.05). At T15 the semen of all treatments showed higher proportion of Fluo positive cells than T0, but seminal plasma delayed entry of the ion into the cells, since at T15 Fluo proportion of positive cells was lower than the other treatments (CT: 87%; SP: 59% and PC: 95%, p<0.05) and became similar at T30 (CT = 98%, SP= 85% and PC=97%, p> 0.05). The semen extender used was able to inducing sodium efflux and calcium influx, changes characterizing sperm capacitation. Chapter 4: the objectives were to evaluate efficiency of an egg yolk–based medium (lactose-EDTA) or egg yolk associated with powdered milk (modified FR5 - MFR5), and efficiency of glycerol (GLY) or a combination between GLY and dimethylformamide (MF) to maintain TM and PM sperm after freezing using different protocols (0: no cooling; 20: cooling straws for 20 minutes at 5 °C before freezing; 120T: cooling in tubes for 120 minutes at 5 °C; and 120P: cooling in straws for 120 minutes at 5 °C). MFR5 preserved PM in all freezing protocols, showing the benefit of the combination of egg yolk with powdered milk for freezing diluent (15%, 21%, 26% and 25% for 0, 20, 120T and 120P, respectively, vs. 9%, 14%, 19% and 17% for lactose-EDTA, p<0.05). The use of lactose-EDTA 5%GLY showed superior results for TM and PM if compared to the same medium with 3%MF + 2%GLY, indicating that glycerol is a cryoprotectant that can be used in several different freezing protocols (TM for Lactose-EDTA 5%GLY = 33%, 45%, 56% and 53% for 0, 20, 120T and 120P vs. 20% 30% 35% and 36% for LactoseEDTA 3%MF + 2%GLY, p <0.05; MP for Lactose-EDTA 5%GLY = 19% and 17% at 120T and 120P vs. 11% and 10% for Lactose-EDTA 3%MF + 2%GLY, p<0.05). The cooling before freezing can be performed either in tubes as in 0.5 mL straws for 120 minutes, without damage to total and progressive motility of thawed semen.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T20:19:18Z : No. of bitstreams: 1 fernandes_cb_me_botfmvz.pdf: 1144823 bytes, checksum: be397bc7e946052ec01bc5ab32eeebc8 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Este trabalho teve como objetivo avaliar a maturação nuclear e citoplasmática em duas condições experimentais. No experimento I (Exp I) comparou–se a utilização de três diferentes meios de cultivo TCM-199, SOFaa e HTF:BME na maturação in vitro de ovócitos eqüinos. No experimento II (Exp II) avaliou–se a habilidade dos ovócitos eqüinos maturados em meio HTF:BME suplementado com FSH homólogo e heterólogo e hormônio de crescimento eqüino (eGH), de serem fertilizados e passar pelo desenvolvimento embrionário e fetal após a transferência de ovócitos. Os ovários eqüinos foram obtidos de abatedouro e os ovócitos recuperados pela técnica de fatiamento. Em cada experimento foram realizadas cinco procedimentos com uma média de 30 ovócitos por grupo, estes foram maturados por 36 a 40 horas à 38,5ºC em atmosfera de 5% de CO2 em ar. A avaliação da maturação nuclear nos dois experimentos foi realizada em ovócitos desnudados, transferidos para gotas colocadas sobre lâmina histológica contendo 10μl Hoechst 33342 e examinados em microscópio invertido com luz fluorescente. A avaliação da morfologia citoplasmática foi realizada através de Microscopia Eletrônica de Transmissão. A análise estatística foi realizada através de ANOVA Para a transferência de ovócitos foram utilizadas receptoras não cíclicas, tratadas com Cipionato de Estradiol (ECP) por três dias (5, 3 e 2ml/dia IM). As receptoras foram inseminadas 12 horas pré e pós cirurgia, com 2x109 espermatozóides viáveis por inseminação. Foi realizada a transferência de 12,8 ovócitos maturados em média, nas condições do Exp II para cada égua, que após a cirurgia recebeu 200 mg/dia de progesterona... .
This study was designed to evaluate the nuclear and citoplasmatic oocyte maturation in two situations. Experiment I (ExpI) aimed to compare the use of TCM-199, SOFaa and HTF:BME media to mature equine oocytes in vitro. Experiment II (ExpII) evaluate the ability of equine oocytes matured in HTF:BME media containing homologous and heterologous FSH, associated with equine growth hormone (eGH), to undergo maturation and development after oocyte transfer. Equine ovaries were obtained in a slaughterhouse and the oocytes recovered after slicing the ovaries. For each experiment, five replicates were performed. After selection an average of 30 oocytes per group were matured during 36 to 40 hours at 38.5oC In an atmosphere with 5% CO2 in air. Nuclear maturation in both experiments was evaluated staining the oocytes with 10μl Hoechst 33342. Citoplasmatic maturation was analyzed in five oocytes per group using Transmission Electron Microscopy. All data was analyzed using ANOVA. For oocyte transfer, non-cycling recipient mares were treated with Estradiol Cipionate (ECP) during 3 days (5, 3 and 2ml/day IM). After transfer of an average of 12,8 oocytes matured in the Exp II conditions, each recipient mare was inseminated 12 hours pre- and post ovulation with 2x109 live sperm cells. After the surgery all recipient mares received 200 mg/day of progesterone... (Complete abstract, click electronic address below).

Resumo: Este trabalho teve como objetivo avaliar a maturação nuclear e citoplasmática em duas condições experimentais. No experimento I (Exp I) comparou-se a utilização de três diferentes meios de cultivo TCM-199, SOFaa e HTF:BME na maturação in vitro de ovócitos eqüinos. No experimento II (Exp II) avaliou-se a habilidade dos ovócitos eqüinos maturados em meio HTF:BME suplementado com FSH homólogo e heterólogo e hormônio de crescimento eqüino (eGH), de serem fertilizados e passar pelo desenvolvimento embrionário e fetal após a transferência de ovócitos. Os ovários eqüinos foram obtidos de abatedouro e os ovócitos recuperados pela técnica de fatiamento. Em cada experimento foram realizadas cinco procedimentos com uma média de 30 ovócitos por grupo, estes foram maturados por 36 a 40 horas à 38,5ºC em atmosfera de 5% de CO2 em ar. A avaliação da maturação nuclear nos dois experimentos foi realizada em ovócitos desnudados, transferidos para gotas colocadas sobre lâmina histológica contendo 10μl Hoechst 33342 e examinados em microscópio invertido com luz fluorescente. A avaliação da morfologia citoplasmática foi realizada através de Microscopia Eletrônica de Transmissão. A análise estatística foi realizada através de ANOVA Para a transferência de ovócitos foram utilizadas receptoras não cíclicas, tratadas com Cipionato de Estradiol (ECP) por três dias (5, 3 e 2ml/dia IM). As receptoras foram inseminadas 12 horas pré e pós cirurgia, com 2x109 espermatozóides viáveis por inseminação. Foi realizada a transferência de 12,8 ovócitos maturados em média, nas condições do Exp II para cada égua, que após a cirurgia recebeu 200 mg/dia de progesterona... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo).
Abstract: This study was designed to evaluate the nuclear and citoplasmatic oocyte maturation in two situations. Experiment I (ExpI) aimed to compare the use of TCM-199, SOFaa and HTF:BME media to mature equine oocytes in vitro. Experiment II (ExpII) evaluate the ability of equine oocytes matured in HTF:BME media containing homologous and heterologous FSH, associated with equine growth hormone (eGH), to undergo maturation and development after oocyte transfer. Equine ovaries were obtained in a slaughterhouse and the oocytes recovered after slicing the ovaries. For each experiment, five replicates were performed. After selection an average of 30 oocytes per group were matured during 36 to 40 hours at 38.5oC In an atmosphere with 5% CO2 in air. Nuclear maturation in both experiments was evaluated staining the oocytes with 10μl Hoechst 33342. Citoplasmatic maturation was analyzed in five oocytes per group using Transmission Electron Microscopy. All data was analyzed using ANOVA. For oocyte transfer, non-cycling recipient mares were treated with Estradiol Cipionate (ECP) during 3 days (5, 3 and 2ml/day IM). After transfer of an average of 12,8 oocytes matured in the Exp II conditions, each recipient mare was inseminated 12 hours pre- and post ovulation with 2x109 live sperm cells. After the surgery all recipient mares received 200 mg/day of progesterone... (Complete abstract, click electronic address below).
Orientador: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga
Coorientador: Marco Antonio Alvarenga
Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-01-04Bitstream added on 2014-06-13T20:59:35Z : No. of bitstreams: 1 blanco_idp_me_botfmvz.pdf: 957805 bytes, checksum: d8fe74b65ba19ca53f1ec69c651d4a0a (MD5)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Em éguas, o aprimoramento e a aplicação de técnicas como a ICSI, TO e transferência nuclear é restrita devido à dificuldade de obtenção de oócitos in vivo, atribuída a particularidades dos folículos ovarianos da espécie. Em folículos pré-ovulatórios, a expansão do cumulus que ocorre com a progressão da maturação folicular e deposição de ácido hialurônico aumenta os índices de recuperação de oócitos por folículo, enquanto o tratamento superovulatório, embora não seja eficiente em aumentar os índices de recuperação por folículo, melhora os índices de recuperação por égua. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da administração de hCG na expansão das células da granulosa e do cumulus e no índice de recuperação de oócitos a partir de folículos imaturos de éguas superovuladas. Para isso 10 éguas foram submetidas à OPU após três diferentes tratamentos hormonais (G1: EPE, G2: EPE/hCG e G3:controle). Cada égua foi submetida aos três tratamentos, tendo sido alternados um ciclo onde era permitido que houvesse ovulação, sem interferência, e um ciclo com OPU. No ciclo onde devia ocorrer aspiração, as éguas recebiam aplicações de prostaglandina no sétimo e oitavo dia após a ovulação. Para os grupos 1 e 2, iniciava-se o tratamento com EPE no D7. Quando a maioria dos folículos atingia entre 22 e 27 mm, somente o grupo 1 recebia hCG, a EPE era suspensa e efetuava-se OPU 24 horas depois para ambos os grupos. Para o grupo controle, após a aplicação de prostaglandina a OPU era efetuada 24 horas após o folículo dominante atingir 27-30 mm. Em todos os grupos foram aspirados folículos entre 10 e 35 mm. Não houve diferença entre os 3 grupos quanto aos índices de recuperação de oócitos por folículo, com médias de 15% a 16,7%. Entretanto, a hCG foi capaz de induzir uma expansão e luteinização precoce das células foliculares.
In mares, the use of artificial reproductive techniques (ART) such as intracitoplasmatic sperm injection (ICSI), oocyte transfer (OT), and cloning is limited by the low availability of oocytes obtained either in vitro or in vivo. The low recovery rate of oocytes from immature follicles seems to be linked with anatomical particularities of the follicular wall. In pre-ovulatory follicles (>35mm in diameter), final oocyte maturation is accompanied by the expansion of the cumulus, which releases the oocyte from the follicular wall resulting in increased recovery rates after follicular aspiration. The number of oocytes recovered in each OPU (Ovum Pick Up) section should be higher with superovulation. However, although the total number of oocytes recovered by each individual mare is increased, the recovery rate per follicle is still low. Treatment with hCG modifies the intra-follicular environment by inducing precocious expansion of the granulosa cells, leading to a higher recovery rate during OPU of pre-ovulatory follicles. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of hCG treatment on the recovery rate of oocytes obtained from immature follicles in mares superovulated with Equine Pituitary Extract (EPE). Ten mares were rotated in three different treatments: G1 – superovulated with EPE; G2 – Superovulated with EPE and treated with hCG, and G3 – Control. For all treatments, when the biggest follicle reached 27 – 30 mm, all follicles bigger than 10 mm were aspirated. Each OPU cycle was alternated with a rest cycle when a spontaneous ovulation occurred. Although treatment with hCG increased the number of follicles presenting expanded granulosa and high intra-follicular progesterone concentration, no statistically significant differences were observed between groups regarding oocyte recovery.

O presente trabalho retrata as atividades desenvolvidas ao longo do estágio curricular realizado na Luso Pecus, sob a orientação da Drª. Cristina Cosinha. A primeira parte consiste num relatório de estágio em que se encontra descrita e quantificada a casuística e procedimentos assistidos. Neste relatório, as várias áreas da clínica de equinos assistidas são categorizadas e é apresen-tada uma análise sucinta da distribuição dos casos/procedimentos, seguida do desenvolvimento de um caso relevante ou representativo, escolhido pela autora. A segunda parte é composta por uma monografia centrada numa revisão bibliográfica sobre o controlo reprodutivo da égua laminítica e pela apresentação de três casos clínicos, que levaram a autora a debruçar a atenção sobre o tema, de forma a retratar o impacto clínico e económico desta condição, bem como estratégias de melhor acompanhar os casos clínicos na prática diária; Equine clinics and surgery Abstract: This report describes the activities carried out during the externship at Luso Pecus, under the supervision of Drª. Cristina Cosinha. The first part of the report describes and quantifies all the cases and procedures observed. In this part, the multiple areas of the equine practice are orga-nized, and a synopsis of the distribution of the cases/procedures is presented, followed by a more detailed discussion of a relevant and representative case, of the authors choice. The second part is composed by a monography focused on a bibliographic review on the repro-ductive control of the laminitic mare, and by the presentation of three clinical cases that caught the attention of the author on the subject. Its purpose is to expose the clinical and economic impact of this condition, as well as develop strategies to best deal with the cases in the clinical practice.

A vitrificação de ovócitos pode ser de grande auxílio na manutenção genética após a morte e na pesquisa científica preservando ovócitos em diferentes estágios de maturação. Esta técnica é uma biotecnologia pouco utilizada na espécie equina devido às baixas taxas de viabilidade celular após a criopreservação. O objetivo deste estudo foi determinar a expressão de genes ligados a viabilidade celular e apoptose em complexos cúmulus ovócitos (CCOs) antes e após à vitrificação. Com este propósito, folículos entre 5 a 30 mm foram aspirados e 240 CCOs imaturos foram recuperados em abatedouro localizado em São Gabriel, RS, durante a estação reprodutiva. Os CCOs foram divididos em dois grupos: não vitrificados (n=120) e vitrificados (n=120). O protocolo de vitrificação foi realizado de acordo com método comercial EquiPro-VitKit (Minitube-Alemanha). Após vitrificação, CCOs foram mantidos em meio de maturação in vitro durante 6 horas e avaliados imediatamente. Os genes utilizados para análise de viabilidade dos CCOs foram: “bone morphogenetic protein” 15 (BMP 15); bcl-2- “like protein” 4 (BAX); Caspase 3 (CASP 3) e GAPDH (controle). A análise gênica foi realizada através do método de real-time PCR quantitativo (qRT-PCR). Foi observada diferença na expressão de mRNA do gene BAX (0.85 ± 0.08) em CCOs não vitrificados em comparação com vitrificados (2.05 ± 0.47; P = 0.03). Não foi observada diferença na expressão de mRNA do BMP15 (1.55 ± 0.73) em CCOs não vitrificados em comparação com vitrificados (2.84 ± 2.20; P > 0.05). Não foi observada diferença na expressão de mRNA do CASP3 (0.63 ± 0.20) em CCOs não vitrificados em comparação com vitrificados (0.64 ± 0.01; P > 0.05). Não foi observada diferença na expressão de mRNA do CASP3 (0.63 ± 0.20) em CCOs não vitrificados em comparação com vitrificados (0.64 ± 0.01; P > 0.05). Em conclusão, os resultados observados na expressão de BMP15 sugerem a permanência da viabilidade celular em CCOs equinos, porém, BAX sugere a ativação do processo de apoptose nas células expostas ao processo de vitrificação.
Oocyte vitrification is a modern technique that can be used to ensure genetic maintenance after animal death and to improve oocyte cryopreservation at different stages of maturation. Equine oocyte vitrification is a biotechnology rarely used in horses due to the low post-cryopreservation cell viability. The aim of this study was to determine the expression of genes linked to cell viability and apoptosis in equine cumulus-oocyte complexes (COCs) prior and after vitrification. With this purpose, 5 to 30 mm ovarian follicles were aspirated and 240 COCs were collected from a slaughterhouse in Southern Brazil during breeding season. The COCs were divided into two groups: non-vitrified control COCs (CON, n=120) and vitrified oocytes (VIT, n=120). Vitrification protocol was provided according to a commercially available method from EquiPro-VitKit. After vitrification, COCs were in vitro matured for 6 hours and immediately evaluated. Genes product abundance were: Bone morphogenetic protein 15 (Bmp 15); Bcl-2-associated X protein (Bax); Caspase 3 (Casp 3); and GAPDH (control). The gene expression analysis was performed by quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Difference was observed in COCs mRNA abundance for Bax gene from non-vitrified (0.85 ± 0.08) compared to vitrified (2.05 ± 0.47; P = 0.03). No difference was observed in the COCs mRNA abundance for Bmp 15 from non-vitrified (1.55 ± 0.73) compared to vitrified (2.84 ± 2.20; P > 0.05). There was no difference in mRNA abundance for Casp 3 in non-vitrified (0.63 ± 0.20) compared to vitrified (0.64 ± 0.01; P > 0.05). In conclusion, results demonstrate that Bmp 15 expression in vitrified COCs indicate cell viability; however, Bax suggest the activation of apoptosis cascade in cells exposed to vitrification process.

Orientador: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga
Banca: Cezinande de Meira
Banca: Marcelo Marcondes Seneda
Resumo: Em éguas, o aprimoramento e a aplicação de técnicas como a ICSI, TO e transferência nuclear é restrita devido à dificuldade de obtenção de oócitos in vivo, atribuída a particularidades dos folículos ovarianos da espécie. Em folículos pré-ovulatórios, a expansão do cumulus que ocorre com a progressão da maturação folicular e deposição de ácido hialurônico aumenta os índices de recuperação de oócitos por folículo, enquanto o tratamento superovulatório, embora não seja eficiente em aumentar os índices de recuperação por folículo, melhora os índices de recuperação por égua. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da administração de hCG na expansão das células da granulosa e do cumulus e no índice de recuperação de oócitos a partir de folículos imaturos de éguas superovuladas. Para isso 10 éguas foram submetidas à OPU após três diferentes tratamentos hormonais (G1: EPE, G2: EPE/hCG e G3:controle). Cada égua foi submetida aos três tratamentos, tendo sido alternados um ciclo onde era permitido que houvesse ovulação, sem interferência, e um ciclo com OPU. No ciclo onde devia ocorrer aspiração, as éguas recebiam aplicações de prostaglandina no sétimo e oitavo dia após a ovulação. Para os grupos 1 e 2, iniciava-se o tratamento com EPE no D7. Quando a maioria dos folículos atingia entre 22 e 27 mm, somente o grupo 1 recebia hCG, a EPE era suspensa e efetuava-se OPU 24 horas depois para ambos os grupos. Para o grupo controle, após a aplicação de prostaglandina a OPU era efetuada 24 horas após o folículo dominante atingir 27-30 mm. Em todos os grupos foram aspirados folículos entre 10 e 35 mm. Não houve diferença entre os 3 grupos quanto aos índices de recuperação de oócitos por folículo, com médias de 15% a 16,7%. Entretanto, a hCG foi capaz de induzir uma expansão e luteinização precoce das células foliculares.
Abstract: In mares, the use of artificial reproductive techniques (ART) such as intracitoplasmatic sperm injection (ICSI), oocyte transfer (OT), and cloning is limited by the low availability of oocytes obtained either in vitro or in vivo. The low recovery rate of oocytes from immature follicles seems to be linked with anatomical particularities of the follicular wall. In pre-ovulatory follicles (>35mm in diameter), final oocyte maturation is accompanied by the expansion of the cumulus, which releases the oocyte from the follicular wall resulting in increased recovery rates after follicular aspiration. The number of oocytes recovered in each OPU (Ovum Pick Up) section should be higher with superovulation. However, although the total number of oocytes recovered by each individual mare is increased, the recovery rate per follicle is still low. Treatment with hCG modifies the intra-follicular environment by inducing precocious expansion of the granulosa cells, leading to a higher recovery rate during OPU of pre-ovulatory follicles. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of hCG treatment on the recovery rate of oocytes obtained from immature follicles in mares superovulated with Equine Pituitary Extract (EPE). Ten mares were rotated in three different treatments: G1 - superovulated with EPE; G2 - Superovulated with EPE and treated with hCG, and G3 - Control. For all treatments, when the biggest follicle reached 27 - 30 mm, all follicles bigger than 10 mm were aspirated. Each OPU cycle was alternated with a rest cycle when a spontaneous ovulation occurred. Although treatment with hCG increased the number of follicles presenting expanded granulosa and high intra-follicular progesterone concentration, no statistically significant differences were observed between groups regarding oocyte recovery.
Mestre

A reprodutibilidade de pesquisas tem sido um tópico de grande discussão na comunidade científica. Esta questão tem motivado os principais periódicos a elaborarem documentos de boas práticas que ajudam os pesquisadores a organizarem os dados, códigos e artefatos de suas publicações para assegurar a reprodução dos trabalhos. Por causa disto, diversas ferramentas computacionais têm sido desenvolvidas com o objetivo de lidar com as questões de reprodutibilidade científica. Este trabalho apresenta uma ferramenta tecnológica para se obter reprodutibilidade de experimentos científicos realizados na criação de mapas de uso e cobertura da terra baseadas em técnicas de aprendizado de máquina com o pacote R denominado sits (Satellite Image Time Series). Esta ferramenta, denominada sits.rep, auxilia pesquisadores em todos os passos de seus experimentos, aumentando a produtividade das equipes que desenvolvem códigos de classificações de uso e cobertura da terra, uma vez que os pesquisadores podem se dedicar exclusivamente em produzir melhores classificações.