Dissertations / Theses on the topic 'Serotonina'

INTRODUÇÃO: Apesar dos Inibidores Seletivos da Recaptura da Serotonina (ISRSs) serem a primeira escolha no tratamento do Transtorno de Estresse Pós-Traumático (TEPT) seu mecanismo de ação não é completamente compreendido. Possivelmente, um aumento na resiliência ao estresse esteja envolvido. Como a serotonina (5HT) ajuda a mediar as respostas ao estresse em outros transtornos ansiosos, o paradigma de Depleção de Triptofano Aguda (DTa) foi usado para diminuir a 5HT central em Pacientes com TEPT remitido com ISRSs. MÉTODOS: Dez pacientes com TEPT (diagnosticados pela Mini Entrevista Neuropsiquiátrica Internacional) que tiveram resposta completa com um ISRS (Escala de Impressões Clínicas Globais de Melhora 1-2 por pelo menos 3 meses) foram selecionados para o experimento. Os pacientes foram testados em duas ocasiões diferentes separadas por uma semana nas quais os pacientes receberam uma mistura contendo grandes aminoácidos neutros ou com (Depleção de Triptofano Falsa [DTf]; dia controle) ou sem triptofano (dia DTa). Auto relatos de ansiedade e humor, bem como medidas cardiovasculares, foram obtidos ao longo dos testes. Cinco horas e meia após a ingestão da mistura os pacientes foram re-expostos aos seus traumas através do procedimento de imaginação guiada de Pitman. RESLTADOS: Esses procedimentos provocaram elevados escores nas medidas avaliadas em ambos os dias, com respostas significativamente mais intensas no dia DTa conforme avaliado pelas Escalas Visuais Analógicas (DTa 47,57 [21,75] -v- DTf 20,71 [18,4]; p=0,001), Escala de Trauma de Davidson (29,4 [12,7] -v- 15,7 [7,79]; p=0,001), Inventário de Ansiedade de Spielberger versão Estado (28,9 [11,03] -v- 18,5 [10,13]; p=0,066, e Perfis de Estados de Humor (p<0,001). CONCLUSÕES: Esses dados são os primeiros a demonstrar que a depleção de 5HT piora as respostas subjetivas a re-experimentação de memórias traumáticas no TEPT e sugere que o aumento na função da 5HT induzida por ISRSs diminui os sintomas de TEPT, especialmente sob provocação, i.e. 5HT ajuda a mediar a resiliência ao estresse. Além de fornecer insights sobre o como os ISRSs funcionam no TEPT, esses dados também oferecem uma abordagem de potenciais novos tratamentos para esse transtorno
INTRODUCTION: Although Selective Serotonin Reuptake Inhibitors (SSRIs) are the first-line Posttraumatic Stress Disorder (PTSD) treatments their mechanism of action is unclear, but possibly improvement of stress resilience is involved. As serotonin (5HT) helps regulate stress responses in other anxiety disorders, the acute tryptophan depletion (aTD) technique was used to lower brain 5HT in SSRSs-remitted PTSD patients. METHODS: Ten patients with PTSD (Mini-International Neuropsychiatric Interview diagnosed) who had made a full recovery on SSRIs (Clinical Global Impressions Improvement Scale 1-2 for at least 3 months) were enrolled in the experiment. Patients were tested on 2 separate occasions a week apart - each session they received a drink containing large neutral amino acids either with (Sham Depletion [SD]; control day) or no tryptophan (aTD day). Self reports of anxiety and mood, as well as cardiovascular measures, were obtained throughout the tests. At 5.5 hours after the drink subjects were reexposed to their trauma using a modification of Pitmans imagery guided method. RESULTS: These procedures provoked elevated ratings on both days, with significantly more marked responses on the aTD day according to Visual Analogue Scales (aTD 47.57 [21.75] -v- SD 20.71 [18.4]; p=0.006), Davidson Trauma Scale (29.4 [12.7] -v- 15.7 [7.79]; p=0.001), Spielberger State Anxiety Inventory (28.9 [11.03] -v- 18.5 [10.13]; p=0.066, and Profile of Mood States (p<0.001). CONCLUSIONS: These data are the first to show that 5HT depletion worsens the subjective responses to reliving traumatic memories in PTSD and suggest that that SSRI-induced increases in 5HT function restrains PTSD symptoms, especially under provocation, i.e. 5HT helps mediate resilience to stress. As well as giving insights into how SSRIs work in PTSD, these data may also offer a translational approach to potential new treatments for this disorder

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:37:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreLBP_DISSERT.pdf: 2864599 bytes, checksum: a13a1f03e8e2475e1d935276b5b40c0c (MD5) Previous issue date: 2011-04-11
The hypothalamus is a diencephalic portion located around the third ventricle below the hypothalamic sulcus, limited by the optic chiasm, and by the mammillary bodies, acting as a center that integrates behavioral and homeostatic functions. Serotonin is a neurotransmitter produced in limited sites in the midbrain and brain stem, but is distributed throughout the central nervous system and has many functions, acting through specific receptors that are also distributed throughout the nervous system. Using immunohistochemical techniques, the aim of this study was to delineate the hypothalamic nuclei of the marmoset (Callithrix jacchus) and study the distribution of serotonin transporter and serotonin receptors in the hypothalamus of this species. We used the Nissl method to determine the cytoarchitecture of the hypothalamic nuclei, and immunohistochemistry to reveal the presence of NeuN as a method to determine the contours of the hypothalamic nuclei. As a result, we found serotonin containing fibers and terminals throughout the rostrocaudal extent of the hypothalamus, more concentrated in some nuclei, and even absent in some. Like serotonin, serotonin transporter was observed between pre-optic area and tuberal region of the hypothalamus, in densities and distribution similar to serotonin. The 5-HT1A and 5-HT1B receptors were found with minor differences among itselves regarding the disposition and intensity of staining.
O hipot?lamo ? uma por??o diencef?lica localizada ao redor do terceiro ventr?culo, abaixo do sulco hipotal?mico, ventralmente vemos seu limite anterior feito pelo quiasma ?ptico e posterior pelos corpos mamilares. Atuando como centro que integra fun??es homeost?ticas e comportamentais. A serotonina ? um neurotransmissor produzido em s?tios restritos ao mesenc?falo e tronco encef?lico, mas que ? distribu?do por todo o sistema nervoso central e tem in?meras fun??es, atuando atrav?s de receptores espec?ficos que tamb?m est?o distribu?dos por todo o sistema nervoso. Utilizando t?cnicas imunoistoqu?micas o objetivo desse trabalho foi delimitar os n?cleos hipotal?micos do sagui (Callithrix jacchus), bem como estudar a distribui??o de serotonina, transportador e receptores de serotonina no hipot?lamo dessa esp?cie. Utilizamos o m?todo de nissl para determinar a citoarquitetura dos n?cleos hipotal?micos, e a imunoistoqu?mica para revelar a presen?a de NeuN como m?todo auxiliar para determinar os contornos dos n?cleos hipotal?micos. Como resultados, encontramos fibras e terminais contendo serotonina por toda a extens?o rostro-caudal do hipot?lamo, sendo mais concentrados em alguns n?cleos, e at? mesmo ausente em alguns; assim como a serotonina, o transportador de serotonina foi observado entre a ?rea pr? ?ptica e a regi?o tuberal do hipot?lamo, com densidades e distribui??o semelhantes ?s da serotonina. Os receptores 5-HT1A e 5-HT1B foram encontrados com diferen?as m?nimas, entre si, quanto a disposi??o e intensidade de marca??o.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2010
Made available in DSpace on 2012-10-25T11:34:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 277716.pdf: 7887737 bytes, checksum: d87d9dbcbcd31b23a3a95ed256e75ad8 (MD5)
Muitas linhas de pesquisa sugerem que a serotonina tem importantes papéis nos tecidos periféricos durante as afecções articulares. Nosso objetivo neste estudo foi o de investigar a participação da serotonina na incapacitação articular, edema e extravasamento plasmático após a injeção de formalina 2% no joelho de ratos. Incapacitação articular foi medida através do tempo de elevação da pata (TEP; s) durante o período de 1 minuto de caminhada forçada, a cada 5 minutos, durante uma sessão experimental de 60 minutos. Edema articular foi avaliado pelo aumento de diâmetro articular, (DA; mm), e o extravasamento de plasma foi medido pela quantidade de azul de evans (25 mg / kg, i.v., 30 min antes do teste) no líquido sinovial (EP; mg / ml) 1 hora após a injeção de formalina. Formalina evocou duas fases de incapacitação, bem como aumento do DA e EP de forma dose-dependente. Serotonina sozinha (1; 10 e 100 nmol, i.a.) não modificou a nocicepção, entretanto todas as doses aumentaram o DA, e somente a maior dose causou aumento do EP. Serotonina (100 nmol, i.a.) co-injetada com formalina causou hipernocicepção em ambas as fases. Nenhuma dose alterou o DA ou EP. NAN-190 (100, 200 e 600 fmol, i.a.), ciproheptadina (160, 500, 1.500 fmol, i.a.) e ondansetrona (65 e 260 fmol, i.a.) diminuíram a nocicepção na 2ª fase. Nenhuma dose alterou o DA. Ciproheptadina (1.500 fmol, i.a.) aumentou o EP. Sumatriptano (1.5 e 5 pmol, i.a.) causou hipernocicepção na 2ª fase sem alterar o DA ou EP. Cromoglicato (1.6 mg, i.a.) não inibiu a hipernocicepção do sumatriptano nem alterou o DA e EP, assim como os pré-tratamentos com indometacina (2.5 mg/kg, i.p.) e furosemida (20 mg/kg, i.p.). Nossos resultados sugerem que a serotonina causa hipernocicepção ao menos via receptores 5-HT1-3 sem efeitos vasculares associados e que a hipernocicepção periférica do sumatriptano possivelmente é devido a mecanismo celular diferente do atribuído.

Doctor en Farmacología
Autorizada por el autor, pero con restricción para ser publicada a texto completo en el Portal de tesis, hasta enero de 2017
La Serotonina (5-HT) es un neurotransmisor detectado tempranamente durante el desarrollo del sistema nervioso central y recientemente se ha descrito su papel sobre los procesos de migración y morfología neuronal. Mediante la inhibición farmacológica de la síntesis de 5-HT durante el desarrollo embrionario, se ha determinado que la reducción en este neurotransmisor produce efectos a largo plazo reflejado en una disminución del peso del cerebro, alteración en la maduración neuronal y una disminución de la complejidad dendrítica. La 5-HT ejerce sus acciones a través de sus receptores ionotrópicos (5HT3) y metabotrópicos (5HT1, 5HT2, 5HT4-5HT7). Algunos de ellos se expresan tempranamente durante el desarrollo embrionario y más aún puede variar su distribución y/o niveles en forma dinámica durante el desarrollo pre y posnatal. Para efectos de esta Tesis se destacan los receptores 5HT1A y 5HT7 los cuales están presentes en estructuras cerebrales como el hipocampo. Interesantemente, el 5HT1A-R se expresa tempranamente durante el desarrollo embrionario; por lo cual se postula que la 5-HT tendría un efecto modulador sobre la migración, diferenciación y viabilidad celular. En cambio, solo se ha descrito una expresión dinámica del 5HT7-R durante el desarrollo posnatal; lo que sugiere una acción de este receptor en estadíos bien definidos. La sobre-expresión de los receptores serotoninérgicos 5HT1A y 5HT7 en líneas celulares, ha permitido estudiar su acoplamiento a distintas cascadas transduccionales. Se ha descrito el acoplamiento a diversas proteínas G que permiten la activación o inhibición de proteínas efectoras como AC, fosfolipasas, regulación de canales iónicos y activación de las vías MAPK y PI3K-Akt, entre otras. Estas vías participan promoviendo la formación de neuritas y dendritas y han sido involucradas con la regulación de la plasticidad sináptica. En contraste, los efectores de estos receptores descritos en líneas celulares no han sido bien definidos en neuronas. Si bien existen algunos antecedentes que apoyan la idea de que la 5-HT regula la morfología neuronal, no se ha establecido la participación de un subtipo de receptor en particular. La activación del 5HT1A-R induce un aumento en el número y largo de neuritas en neuroblastoma de ratón. En relación a estos cambios morfológicos, se ha descrito que la vía de las Rho GTPasas regula el citoesqueleto a través de la modulación de la cofilina, importante regulador del citoesqueleto de actina. Se ha demostrado un acoplamiento entre el 5HT7-R y Gα12 y el aumento del crecimiento de neuritas en neuronas hipocampales, aunque no se ha dilucidado cuáles son sus efectores río abajo. De acuerdo a estos antecedentes se postuló la siguiente hipótesis: “Agonistas de los receptores 5HT1A y 5HT7 activan vías transduccionales que modulan el citoesqueleto, efectos que se asocian a cambios morfológicos de neuronas hipocampales en cultivos”. Los objetivos fueron: 1) Determinar en neuronas hipocampales con distinta madurez, el efecto de agonistas de los receptores serotoninérgicos 5HT1A y 5HT7 sobre proteínas que participan en vías transduccionales, que tienen como blanco el citoesqueleto de microtúbulos y de actina, como Akt-GSK-3β, ERK y cofilina, respectivamente. 2) Determinar el efecto de agonistas de los receptores serotoninérgicos 5HT1A y 5HT7 sobre la morfología de neuronas hipocampales con distinta madurez. Estos objetivos se desarrollaron utilizando antagonistas específicos para los receptores 5HT1A (WAY-100635) y 5HT7 (SB269970). En esta tesis se demostró que la distribución del receptor 5HT1A experimenta una polarización a mayor madurez del cultivo, encontrándose tempranamente en el soma y más tardíamente con una localización somato-dendrítica, sin variar el nivel del receptor. En contraste, la distribución somato-dendrítica del 5HT7-R fue independiente de la madurez del cultivo. A su vez, se detectaron las isoformas 5HT7a-R y 5HT7b-R y cuya relación no varió durante los días del cultivo in vitro (DIV). No obstante, ambas isoformas aumentan significativamente entre los 2 y 14 DIV. El 8OH-DPAT, agonista de los receptores 5HT1A (Ki 10 nM) y 5HT7 (Ki 52 nM), promueve la activación de la vía Akt-GSK-3β a los 2 DIV, efecto que involucraría la participación del 5HT7-R y, probablemente al 5HT1A-R. Adicionalmente, el 8OH-DPAT en neuronas más maduras (7 DIV), aumentó la activación de la Akt, efecto independiente de los receptores 5HT1A y 5HT7. Estos resultados sugieren que este agonista puede activar a otros receptores, lo que plantea una reevaluación de su acción como agonista selectivo del 5HT1A. Por otra parte, a pesar de la activación de la Akt, no se observaron cambios en la fosforilación de la GSK-3β, sugiriendo una disociación de ambas quinasas a este estadío. Adicionalmente, el 8OH-DPAT ó la 5-HT no modificaron significativamente el estado de fosforilación de las ERK1/2. La estimulación durante 24 horas con 8OH-DPAT en neuronas con 2 DIV aumentó significativamente el número de las neuritas primarias, acompañado de un aumento en el largo neurítico total; efectos no asociados a los receptores 5HT1A y 5HT7. Estos resultados sugieren que el 8OH-DPAT activa un receptor que incrementa el número de neuritas sin afectar su largo. Interesantemente, se observó que la estimulación con 8OH-DPAT disminuyó significativamente la fosforilación inactivante de la cofilina en Ser3; efecto insensible a la acción de los antagonistas de los receptores 5HT1A y 5HT7. Similarmente, a los 7 DIV se observó una disminución significativa de los niveles fosforilados de cofilina luego de la estimulación con 5-HT, efecto no asociado a los receptores 5HT1A y 5HT7, sugiriendo la participación de un receptor serotoninérgico desconocido sobre la dinámica de actina. Adicionalmente, la activación del 5HT7-R con 8OH-DPAT y 5HT a los 2 DIV durante 24 h disminuye el número de las dendritas primarias pero promueve el crecimiento. A este mismo estadío neuronal, la 5-HT a través de 5HT1A-R y 5HT7-R aumentó el crecimiento de dendritas secundarias. Por otro lado, se demostró a los 8 DIV que la 5-HT aumenta el número de dendritas primarias más cortas a través de un receptor serotoninérgico desconocido. Adicionalmente, los cambios inducidos por la 5-HT a los 8 DIV, indican que el 5HT1A-R promueve una reducción en el largo de las dendritas primarias, fenómeno observado por la reducción en el número de las dendritas primarias más largas (> 40 μm); efecto también observado en las secundarias más largas (> 20 μm). En apoyo, el análisis de Sholl muestra una disminución de la complejidad neuronal asociada a este receptor. Es decir, el 5HT1A-R inhibe el crecimiento y la complejidad dendrítica, probablemente al frenar el crecimiento o elongación de éstas, quedando por establecer los mecanismos moleculares asociados. En apoyo a este hallazgo, se ha descrito recientemente en hipocampo de ratón adulto que el 5HT1A-R produce una disminución de las dendritas terciarias. En contraste, a los 8 DIV el 5HT7-R promueve un aumento del crecimiento de dendritas primarias y secundarias, siendo este último efecto también observado por la estimulación del 5HT1A-R. En resumen, el 5HT1A-R promueve una disminución de la complejidad dendrítica, en contraste al efecto positivo de la activación del 5HT7-R observado a nivel de las neuritas y dendritas; sugiriendo que estos receptores pueden modular la morfología neuronal de forma diferencial dependiendo de la madurez del cultivo. Además, por primera vez se involucra la participación de los receptores 5HT1A y 5HT7 sobre la morfología neuronal en cultivo primario de hipocampo de rata. Además, este estudio muestra los efectos de agonistas serotoninérgicos sobre vías transduccionales relacionadas a la modulación del citoesqueleto y cambios en la morfología que depende de la madurez de neuronas hipocampales.
Serotonin (5-HT) is a neurotransmitter found early during development of the central nervous system and recently it has been involved in cell migration and neuronal morphology. The pharmacological inhibition of 5-HT synthesis during embryonic development suggests that its reduction produces long-term effects reflected as decreased brain weight, altered neuronal maturation and reduction of dendritic complexity. The 5-HT exerts its actions through ionotropic (5HT3) and metabotropic (5HT1, 5HT2, 5HT4-5HT7) receptors. Some of these receptors are expressed early during embryonic development and their distribution or levels can change dynamically during pre-and postnatal development. This thesis focuses on 5HT1A and 5HT7 receptors, which are present in brain structures such as the hippocampus. Interestingly, the 5HT1A-R is expressed early during embryonic development, suggesting that 5-HT could have a modulating effect on cell migration, differentiation and viability. In contrast, a dynamics expression of 5HT7-R has been described during postnatal development, suggesting a role in well-defined neuronal stages. Overexpression of 5HT1A and 5HT7 serotonin receptors in cell lines has allowed studying their coupling to several transduction pathways. These receptors are coupled to several G protein allowing the activation or inhibition of effector proteins such as AC, phospholipases, regulation of ion channels and activation of MAPK and PI3K-Akt, among others. These pathways promote neurites and dendrites formation, and have been implicated in the regulation of synaptic plasticity. In contrast, the effectors of these receptors described in cell lines have not been well defined in neurons. Although some evidences support the idea that 5-HT regulates neuronal morphology, it has not been established which serotonergic receptors are involved. The 5HT1A-R activation induces an increase in both the number and length of neurites in mouse neuroblastoma. In relation to these morphological changes, it has been described that Rho GTPases pathway regulates the cytoskeleton through the modulation of cofilin, an important regulator of actin dynamics. Additionally, a link between 5HT7-R, activation of Gα12 and the increase of neurite outgrowth in hippocampal neurons has been described, but it has not been elucidated the transduction pathway involved. According to these evidences, the following hypothesis was proposed: “Agonists of 5HT1A and 5HT7 receptors activate pathways that modulate the cytoskeleton, effects that are associated with morphological changes in cultured hippocampal neurons." The aims were to: 1) Determine, the effect of 5HT1A-R and 5HT7-R agonist on proteins involved in transduction pathways, targeting microtubule and actin cytoskeleton like Akt-GSK- 3β, ERK and cofilin, respectively, on hippocampal neurons with different maturity. 2) Determine the effect of 5HT1A-R and 5HT7-R agonist on morphology of hippocampal neurons with different maturity. These objectives were developed using specific antagonists of 5HT1A (WAY-100635) and 5HT7 (SB269970) receptors. In this thesis it was shown that the distribution of 5HT1A receptor undergoes a polarization during the maturity of neurons, being early found in the soma and late with a somato-dendritic distribution but without changes on receptor levels. In contrast, the somato-dendritic distribution of 5HT7-R was independent of neuronal maturity. Besides, the isoforms “a” and “b” of 5HT7-R were detected without changes in their ratio during days in vitro (DIV). Nonetheless, both isoforms increased significantly from 2 to 14 DIV. The 8OH-DPAT, a 5HT1A (Ki 10 nM) and 5HT7 (Ki 52 nM) receptor agonist, promotes the activation of the Akt-GSK-3β pathway at 2 DIV, effect which involves the participation of 5HT7-R and probably the 5HT1A-R. Additionally, in more mature neurons (7 DIV) stimulation with 8OH-DPAT increased activation of Akt, an effect independent of 5HT1A and 5HT7 receptors. These results suggest that this agonist may activate other receptors, and hence demands a reconsideration of its action as selective 5HT1A agonist. Moreover, in spite of Akt activation, no changes were observed in the phosphorylation levels of GSK-3β, suggesting dissociation of both kinases at this stage. Additionally, neither 8OH-DPAT nor 5-HT altered the phosphorylation levels of ERK1/2. Stimulation for 24 hours with 8OH-DPAT at 2 DIV significantly increased the number of primary neurites, accompanied by an increase in the overall length of neurites; effects which are not related to 5HT1A and 5HT7 receptors. These evidences suggest that 8OH-DPAT targets an unknown receptor whose activation increases the number of neurites without affecting their length. Interestingly, it was observed that stimulation with 8OH-DPAT significantly decreased the inactivating phosphorylation of cofilin in Ser3; an effect insensitive to the antagonists of the 5HT1A and 5HT7 receptors. Similarly, a significant decrease of phosphorylated cofilin levels after stimulation with 5-HT was observed at 7 DIV; effect not associated to 5HT1A and 5HT7 receptors, suggesting the participation of an unknown serotonin receptor modulating actin dynamics. Additionally, the 5HT7-R activation with 8OH-DPAT and 5-HT at 2 DIV during 24 h decreases the number of primary dendrites but promotes its growth. At this neuronal stage, 5-HT stimulates secondary dendrite growth through both 5HT1A-R and 5HT7-R. Furthermore, this thesis demonstrated at 8 DIV that 5-HT increases the number of short primary dendrites via an unknown serotonergic receptor. Additionally, the changes induced by 5-HT at 8 DIV, indicate that 5HT1A-R promotes a reduction in the length of the primary dendrites, a phenomenon observed as reduction in the number of longer primary dendrites (> 40 um); effect also observed in longer secondary dendrites (> 20 um). In accordance, Sholl analysis shows a decrease in neuronal complexity associated with this receptor. Thus, 5HT1A-R inhibits primary dendritic growth and complexity, probably by slowing the growth or elongation, and the molecular mechanisms associated remains to be explained. In support of this finding, it has been recently described in adult mouse hippocampus, that 5HT1A-R promotes a decrease of tertiary dendrites. In contrast, this Thesis described that 5HT7-R induces an increased growth of primary and secondary dendrites at 8 DIV; being the latter effect also observed by 5HT1A-R stimulation. To summarize, the 5HT1A promotes a reduction of dendritic complexity in contrast to the positive effect of 5HT7 receptors observed in both neurites and dendrites; suggesting that these receptors differentially modulate the neuronal morphology depending on neuron maturity. Furthermore, we described for first time the participation of 5HT1A and 5HT7 on neuronal morphology in primary culture of rat hippocampal neurons. Additionally this study shows the effects of serotonergic agonists on transduction pathways related to cytoskeleton modulation and morphological changes depending on maturity of hippocampal neurons.
Conicyt

Submitted by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-08-10T18:15:49Z No. of bitstreams: 1 TeseVBR.pdf: 4285837 bytes, checksum: f56f2cc3a6bc871221c45ed2a7e0ac84 (MD5)
Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-08-10T18:15:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseVBR.pdf: 4285837 bytes, checksum: f56f2cc3a6bc871221c45ed2a7e0ac84 (MD5)
Approved for entry into archive by Ronildo Prado (ronisp@ufscar.br) on 2017-08-10T18:16:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseVBR.pdf: 4285837 bytes, checksum: f56f2cc3a6bc871221c45ed2a7e0ac84 (MD5)
Made available in DSpace on 2017-08-10T18:16:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseVBR.pdf: 4285837 bytes, checksum: f56f2cc3a6bc871221c45ed2a7e0ac84 (MD5) Previous issue date: 2017-04-07
Outra
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Canadian Institutes of Health Research (CIHR)
Serotonin (5-HT) is a neurotransmitter involved in nervous system development, being an important modulator of respiratory rhythm via activation of diverse receptors on respiratory neurons. Selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) such as fluoxetine act as antidepressants and are generally prescribed in depression therapy, including to pregnant women. This study investigated the effects of prenatal (E15-21) exposure to fluoxetine on the ventilatory and metabolic responses to 7% CO2 (hypercapnia) and 10% O2 (hypoxia) of male and female rats during postnatal development (P0-82). To this end, osmotic pumps were implanted subcutaneously in pregnant female rats at embryonic day (E) 15 and delivered vehicle (VEH) or fluoxetine (SSRI, 10 mg/Kg/day) during 7 days. Respiratory frequency (fR), tidal volume (Vt), ventilation (Ve ), O2 consumption (''VO2 ) and air convection requirements (Ve/VO2 ratio) of pups from these litters were studied. In P0-2 male rats, the SSRI group showed a lower Vt and a higher fR in room air conditions, whereas female rats of SSRI group showed a lower Vt in normocapnia normoxica and a higher hyperventilation induced by hypercapnia. At P6-8, male SSRI animals presented a higher fR during hypoxia together with a decrease in the number of neurons that express 5-HT in the caudal dorsal raphe (RDC). P6-8 females from ISRS group showed an attenuated fR during hypoxia. No differences were observed between male rats in the VEH and ISRS groups at P12-14 although there was an increase in the number of 5-HT neurons in the RD. SSRI females showed an attenuated hypercapnic ventilatory response. At P24-26, male SSRI animals showed a lower VEin room air conditions, a higher ventilatory response to hypercapnia and to hypoxia, together with an increase in the number of 5-HT neurons in the ROB and a higher density of TH expression in the LC area. P24-26 SSRI females displayed a lower Ve/V O2 due to a higher V O2 in room air conditions and a higher hyperventilation induced by hypercapnia. In P76-82 male rats, the SSRI group hypoventilated in room air conditions during both wakefulness and NREM sleep and showed a higher increase in Vt induced by hypoxia during wakefulness. These animals showed a higher number of 5-HT neurons in the ROB, RPA and an increase in the number of neurons that express TH in the A5 and in the LC rostral area. Finally, at P76-82, female SSRI rats showed a higher fR in room air conditions during both wakefulness and NREM sleep, an attenuated hypercapnic ventilatory response due to an attenuation of fR during NREM sleep; and an attenuated hypoxic ventilatory response during wakefulness. Also, these animals showed a decrease in the number of 5-HT neurons in the RD. Taken together, these data indicate that SSRI exposure during the prenatal period alters the development of the brainstem respiratory network and results in long lasting and sex specific changes in breathing pattern and in the ventilatory responses to respiratory challenges demonstrating that central and/or peripheric chemoreception may be disrupted in these animals.
A serotonina (5-HT) é um neurotransmissor envolvido no desenvolvimento de vários sistemas neuronais, sendo um importante modulador da ritmogênese respiratória via ativação em diversos receptores nos neurônios respiratórios. Os inibidores seletivos de recaptação de serotonina (ISRSs), como a fluoxetina, agem como antidepressivos e geralmente são prescritos na terapia da depressão, incluindo às mulheres grávidas. Este estudo investigou os efeitos de uma exposição prenatal [dia embrionário (E) 15-21] à fluoxetina nas respostas ventilatórias e metabólicas à hipercapnia (7% CO2) e hipóxia (10% O2) em ratos e ratas durante o desenvolvimento pós-natal (P0-82). Para isso, bombas osmóticas foram implantadas subcutaneamente em ratas grávidas em E15 e forneceram veículo (CTRL) ou fluoxetina (ISRS, 10 mg/Kg/dia) durante 7 dias. A frequência respiratória (fR), o volume corrente (Vt), a ventilação (V e ), o consumo de O2 (V O2) e o equivalente respiratório (V E/VO2) dessas ninhadas foram analisados. Em ratos P0-2, o grupo ISRS apresentou um Vt menor e uma fR maior em ar ambiente. Já as fêmeas do grupo ISRS apresentaram um Vt menor em normocapnia normóxica e um aumento da hiperventilação induzida por hipercapnia. Na idade P6-8, machos ISRS apresentaram uma fR maior durante a hipóxia juntamente com uma queda de 37,9% no número de neurônios que expressam 5-HT na rafe dorsal caudal (RDC), as fêmeas ISRS por sua vez, apresentaram uma fR atenuada em hipóxia em 6%. Nenhuma diferença das varíaveis respiratórias entre grupos foi observada em machos da idade P12-14, porém houve um aumento de 84,7% no número de neurônios que expressam 5-HT na rafe dorsal (RD). As ratas ISRS P12-14 apresentaram uma resposta ventilatória atenuada à hipercapnia. Na idade P24-26, os ratos ISRS demonstraram uma Ve menor em ar ambiente, uma maior resposta ventilatória à hipercapnia e à hipóxia, juntamente com um aumento de 56% no número de neurônios que expressam 5-HT na rafe obscurus (ROB) e uma maior densidade na expressão de tirosina hidroxilase (TH) na região do Locus coeruleus (LC) (16% de aumento). As fêmeas ISRS exibiram um menor V e/V O2 devido a um maior V O2 em normocapnia normóxica e uma maior hiperventilaçao induzida por hipercapnia. Nos ratos P76-82, o grupo ISRS hipoventilou em condições de ar ambiente durante vigília e sono NREM e apresentou um maior aumento no Vt induzido por hipóxia durante a vigília. Estes animais apresentaram um maior número de neurônios que expressam 5-HT na ROB, RPA e um aumento do número de neurônios que expressam TH na região A5 e na região rostral do LC. Finalmente, as fêmeas ISRS da idade P76-82 apresentaram uma maior fR em condições de ar ambiente durante a vigília e o sono NREM, uma resposta ventilatória a hipercapnia atenuada em devido a atenuação da fR durante o sono NREM; e uma resposta ventilatória a hipóxia atenuada durante a vigília. Adicionalmente, estes animais apresentaram uma redução do número de neurônios que expressam 5-HT na RD. Estes resultados, em conjunto, sugerem que uma exposição a ISRS durante o período prenatal altera o desenvolvimento da rede respiratória do tronco encefálico e promove efeitos em longo prazo e sexo específicos na respiração basal como em condições de desafios respiratórios, demonstrando que a quimiorrecepção central e/ou periférica pode estar alterada nestes animais.
CNPq: 209935/2013-8
CNPq: 141653/2012-4
FAPESP: 2012/15298-2
FAPESP: 2012/19966-0

A serotonina (5-HT) é um neuro-hormônio com complexos efeitos em humanos e animais. Embora se acredite que a sinalização serotoninérgica promova o desenvolvimento de tumores de cólon, também tem sido observado que a redução dos níveis de 5-HT aumenta o risco de malignidades neste órgão. Assim, é necessário investigar como a síntese de 5-HT modula a carcinogênese de cólon. Esta hipótese será explorada em experimentos mecanísticos envolvendo a exposição ou não de camundongos a um agente carcinogênico (azoximetano). Estes experimentos revelaram que a exposição carcinogênica aumentou a síntese de 5-HT no cólon, uma vez que os processos de liberação e degradação de 5-HT foram reduzidos, enquanto que a sua síntese e recaptação aumentaram. Após 24 semanas da 1° exposição carcinogênica, a deleção da síntese de 5-HT promoveu a multiplicidade tumoral no cólon, enquanto que ao longo de 12 semanas ocorreu um aumento de lesões preneoplásicas e proliferação celular. É interessante que 72 hrs após a sexta e última exposição carcinogênica o número de criptas aberrantes foram detectadas reduzidas na ausência de 5-HT, o que ocorreu em conjunto com uma redução da atividade proliferativa, aumento de células apoptóticas, e maior dano de DNA. Finalmente, a 5-HT modulou mecanismos de reparo genômico. Concluímos que a síntese serotoninérgica parece ser um fator de proteção do cólon intestinal, que caso inibida facilitaria o desenvolvimento tumoral neste tecido.
Serotonin (5-HT) is a neurohormone with complex effects in humans and animals. Although serotonergic signaling has been suggested to promote the development of colon tumors, the reduction in 5-HT levels was reported to increase the risk of colon cancer. Here, we sought to investigate how 5-HT synthesis modulates colon carcinogenesis. This hypothesis was explored in mechanistic experiments that carcinogenically exposed or not mice to azoxymethane. It revealed that carcinogenic exposure increased the synthesis of 5-HT in the colon since 5-HT release and decay were inhibited, while its synthesis and reuptake are promoted. After 24 weeks from the first carcinogenic exposure, the deletion of 5-HT synthesis increased tumor multiplicity, while following 12 weeks it promoted the development of preneoplastic lesions, and cell proliferation in the colon. Interestingly, 72 hrs after the sixth and last carcinogenic exposures the number of aberrant crypts were detected reduced in the absence of 5-HT, which occurred together with a reduced proliferation, but increased apoptosis and DNA damage. Finally, 5-HT modulated genomic repair mechanisms. We conclude that serotonergic synthesis seems to be a protective factor of the intestinal colon, which inhibited case facilitates tumor development in this tissue.

El enamoramiento implica procesos bioquímicos en los que sustancias como neurotransmisores, neuromoduladores y hormonas  interaccionan con células nerviosas u otros órganos. Al estar enamorados, los niveles de dopamina aumentan generando atención, deseo y motivación en todo lo relacionado al ser amado. La serotonina, por el contrario, se presenta en concentraciones bajas en este estado. La oxitocina, por su parte, entra en juego cuando la demanda de dopamina no se logra suplir y es crucial al entablar relaciones de largo plazo. El entendimiento del mecanismo de la oxitocina en el ser humano es crucial no solo para el conocimiento académico sino también porque brinda luces para el tratamiento de algunos desórdenes psicológicos.
Romantic love involves biochemical processes in which substances such as neurotransmitters, neuromodulators and hormones interact with other nerve cells or organs. When being in love, dopamine levels increases, generating attention, desire and motivation in everything related to the beloved person. Serotonin, however, is present in low levels in this state. When the body does not supply the necessary amount of dopamine, oxytocin is released. Oxytocin is vital in long term relationships. Understanding the mechanism of oxytocin in humans is crucial not only for academic knowledge of the chemistry of love but also because it provides new lights for the treatment of some psychological disorders.

Submitted by Felipe Lapenda (felipe.lapenda@ufpe.br) on 2015-03-16T13:44:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DIssertação Isabeli corrigida pretext.pdf: 929080 bytes, checksum: 12855f890850670d671974b1c5f7a8f5 (MD5)
Made available in DSpace on 2015-03-16T13:44:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DIssertação Isabeli corrigida pretext.pdf: 929080 bytes, checksum: 12855f890850670d671974b1c5f7a8f5 (MD5) Previous issue date: 2013
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico ; Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia de Pernambuco
A serotonina atua na regulação de eventos biológicos envolvidos no desenvolvimento precoce do sistema nervoso. Neste período crítico o aumento dos níveis encefálicos deste neurotransmissor pode alterar componentes do sistema serotoninérgico, como o transportador de serotonina. Os inibidores seletivos da recaptação de serotonina bloqueiam o transportador e aumentam a quantidade de serotonina extracelular. O aumento farmacologicamente induzido neste período é capaz de gerar alterações funcionais e estruturais permanentes ao sistema nervoso. Este estudo teve como objetivo avaliar a expressão gênica do SERT e o conteúdo de 5-HT no hipotálamo de ratos manipulados com fluoxetina durante a lactação. Ratos Wistar foram divididos em dois grupos, de acordo com a manipulação farmacológica realizada do 1º ao 21º dia de vida, Salina (n=9) e Fluoxetina (n=10), compostos por filhotes que receberam, respectivamente, solução de salina (NaCl 0.9%, 10μl/g, s.c.) e fluoxetina (10mg/kg, 10μl/g, s.c.). Foram analisados: a expressão gênica do SERT realizada no hipotálamo aos 21 e 40 dias e o peso corporal foi mensurado nos dias 1, 7, 14, 21 e 40. O presente trabalho demonstrou que a manipulação neonatal com fluoxetina promoveu menor ganho de peso corporal a partir do 14º dia até o final do experimento e aumento na expressão gênica do SERT aos 40 dias. Estes resultados indicam que a manipulação neonatal crônica do sistema serotoninérgico desencadeia alterações no principal componente de controle da neurotransmissão serotoninérgica, o SERT e consequentemente no neurotransmissor serotonina.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:37:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoacilGS_DISSERT.pdf: 4166780 bytes, checksum: d28a491081df0a86a997a1a2664b7535 (MD5) Previous issue date: 2010-12-28
Serotonin or 5-hydroxytryptamine (5-HT) is a substance found in many tissues of the body, including as a neurotransmitter in the nervous system, in which may exert varied post-synaptic actions. Inside the neuro-axis, the location of 5-HT neurons is almost restricted to the raphe nuclei of the brainstem, such that 5-HT-immunoreactivity can be considered a marker of the raphe nuclei. The raphe nuclei are located in the brainstem, at or near the midline. The serotonergic groups were originally alphanumerically classified as B1 to B9 towards caudorrostral in rats and can be divided into upper and lower groups. In this study the distribution of serotonergic neurons was studied using immunohistochemistry in the brain of the rock cavy (Kerodon rupestris), a species of rodent endemic to Northeastern Brazil. The cytoarchitectonic location of serotonergic neurons was established in series of adjacent coronal and sagittal sections stained by the Nissl method and immunohistochemistry for 5-HT. Thus, we defined the raphe rostral linear, caudal linear, dorsal, median, and paramedian pontine raphe nuclei, and B9 cluster, constituting the rostral group, and the interpositus, magnus, obscure and palidus, constituting the caudal part of the group, comparable to which has been described for other mammalian species
A serotonina ou 5-hidroxitriptamina (5-HT) ? uma subst?ncia encontrada em muitos tecidos do organismo, inclusive no sistema nervoso como neurotransmissor, onde pode exercer a??es p?s-sin?pticas variadas. Dentro do neuro-eixo, a localiza??o dos neur?nios 5-HT ? quase absoluta nos n?cleos da rafe do tronco encef?lico, de tal maneira que 5-HT neuronal pode ser considerada um marcador dos n?cleos da rafe. Os n?cleos da rafe est?o localizados no tronco encef?lico, na linha m?dia ou suas proximidades. Os grupamentos serotonin?rgicos foram originalmente classificados alfanumericamente como B1 a B9 no sentido caudorrostral no rato e podem ser divididos em grupos superior e inferior. Neste trabalho a distribui??o dos neur?nios serotonin?rgicos foi estudada com imunoistoqu?mica no c?rebro do moc? (Kerodon rupestris), uma esp?cie de roedor end?mica da regi?o Nordeste do Brasil. A localiza??o citoarquitet?nica dos neur?nios serotonin?rgicos foi estabelecida em s?ries de sec??es coronais e sagitais adjacentes submetidas a colora??o pelo m?todo de Nissl e imunoistoqu?mica para 5-HT. Assim, foram delimitados os n?cleos da rafe linear rostral, linear caudal, dorsal, mediano, paramediano e pontino da rafe e grupamento B9, compondo o grupo rostral, e os n?cleos interp?sito, magno, obscuro e p?lido, compondo o grupo caudal, compar?vel ao que j? foi descrito para outras esp?cies de mam?feros

Orientador: Glauber dos Santos Ferreira Da Silva
Coorientador: Luciane Helena Gargaglioni Batalhão
Banca: Kênia Cardoso Bícego
Banca: Wilfried Klein
Banca: Lizandra Amoroso
Banca: Daniel Breseghello Zoccal
Resumo: Variações na PCO2/pH sanguíneo em vertebrados são detectadas, principalmente, pelos quimiorreceptores centrais. Em aves, os tipos de neurônios quimiossensíveis intermediadores da resposta ventilatória não são conhecidos, assim como sua localização. Por outro lado, em mamíferos, sabe-se que estes quimiorreceptores compreendem uma grande população neuronal e estão distribuídos no sistema nervoso central. Dentre os tipos de quimiorreceptores centrais, em mamíferos, destacam-se os neurônios serotoninérgicos (5-HT) contidos em elevada concentração na rafe e que possuem projeções às principais regiões envolvidas na regulação da respiração. A partir do exposto, objetivou-se verificar a participação da serotonina no controle respiratório de frangos. Foram utilizados pintos carijós machos e fêmeas, em dois conjuntos experimentos com abordagem distintas que propuseram reduzir o conteúdo de serotonina liberado no espaço sináptico em resposta à hipercapnia e à hipóxia. O primeiro com deleção química dos neurônios 5-HT, mediante a injeção de 1µL de anti-SERT-SAP (0,1µM) no quarto ventrículo (4V), os grupos controle receberam injeções de PBS e IgG-SAP. O segundo experimento por inibição da biossíntese de serotonina pela p-clorofenilalanina (PCPA) em 100mg/kg i.p. (animais controles receberam salina 0,9% ou solução veículo). O anti-SERT-SAP reduziu o número de neurônios 5-HT no rombencéfalo dos pintos (P<0,05). Os animais anti-SERT-SAP apresentaram menor frequência respiratória (FR) que os ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: Variations in PCO2/pH blood in vertebrates are mainly detected by central chemoreceptors. In birds, the types of chemosensitive neurons mediating the ventilatory response are not known, as is their location. On the other hand, in mammals, it is known that these chemoreceptors comprise a large neuronal population and are distributed in the central nervous system. Among the types of central chemoreceptors in mammals, serotoninergic (5-HT) neurons are found in high concentration in the raphe and have projections to the main regions involved in the regulation of respiration. From the above, we aimed to verify the participation of serotonin in respiratory control of broilers. Male and female carybush chicks were used in two sets with distinct approaches that proposed to reduce the serotonin content released in the synaptic space in response to hypercapnia and hypoxia. The first with chemical deletion of 5-HT neurons, by injecting 1μL of anti-SERT-SAP (0.1μM) into the fourth ventricle (4V), the control groups received injections of PBS and IgG-SAP. The second experiment by inhibition of serotonin biosynthesis by p-chlorophenylalanine (PCPA) at 100mg/ kg i.p. (control animals received 0.9% saline or vehicle solution). Anti-SERT-SAP reduced the number of 5-HT neurons in the hindbrain of chicks (P <0.05). Anti-SERT-SAP animals presented lower respiratory rate (RF) than controls in ambient air (P<0.05). When they were exposed to hypercapnia of 7%, the ventilation (VE) of these animals ... (Complete abstract click electronic access below)
Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-26Bitstream added on 2014-06-13T18:44:41Z : No. of bitstreams: 1 hoshiba_ma_dr_jabo.pdf: 2741697 bytes, checksum: c38099a374c12bb742a6cd32c49e5ee4 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas (FAPEAM)
Como estratégia para diminuir o alto índice de canibalismo na larvicultura do matrinxã, o uso do aminoácido essencial triptofano (Trp) parece promissor. O aminoácido é o precursor do neurotransmissor mono-amínico serotonina (5-hidroxitriptamina, 5-HT) e sua taxa de biossíntese no encéfalo são limitadas pela disponibilidade desse aminoácido, que parece ser uma das principais limitações para a síntese de 5-HT. A ingestão aumentada de triptofano eleva o nível do aminoácido no encéfalo, resultando em biossíntese aumentada de 5-HT no encéfalo de peixes. Esse por sua vez, é um neurotransmissor que media uma ampla variedade de comportamentos (agressão, medo e estresse em várias espécies, assim como na relação das interações sociais em muitos animais) por ação no sistema nervoso central e periférico. Assim, o presente estudo utilizou um aminoácido promotor da serotonina (triptofano), um inibidor seletivo da recaptação do neurotransmissor (fluoxetina) e um inibidor da síntese da serotonina (PCPA – paraclorofenilalanina), para verificar seu papel na mediação do comportamento agressivo e no desenvolvimento e sobrevivência larval de matrinxã no período de 1 a 12 dias após a eclosão. O triptofano foi fornecido juntamente com a ração, já a fluoxetina e a paraclorofenilalanina foram dissolvidos na água. Esse estudo foi realizado em duas condições de temperatura de cultivo, ou seja, com temperatura controlada em uma faixa de variação estreita (26-28°C) e com temperaturas variando de 19 a 31°C. Os resultados obtidos permitiram concluir que o uso do triptofano como suplemento na ração, pode ser uma alternativa viável na criação de matrinxã, pois aumentou o crescimento e a sobrevivência da prole, exceto na concentração mais alta (2,96g/100g ração). O uso de fluoxetina também aumentou a sobrevivência da prole, com redução do canibalismo, no...
The use of tryptophan as a strategy to reduce cannibalism in matrinxã hatchery seems promising. This amino acid is a precursor of the neurotransmitter serotonin (5-hidroxy-triptamine, 5-HT) whose biosynthesis rate in brain is limited by the amino acid availability. The increased intake of tryptophan by brain elevates the amino acid concentration in tissue resulting in higher serotonin production in fish. Serotonin is involved in the control of several types of behavior (aggression, fear, stress and social interaction in many animals) through effect in central and peripheral nervous systems. The present study evaluated the effect of a serotonin synthesis promoter (tryptophan), a selective inhibitor of serotonin reuptake (fluoxetine) and a selective inhibitor of serotonin synthesis (PCPA – paraclorofenilalanine) on the control of the aggressive behavior and on early development of matrinxã up to 12 days after hatching. Tryptophan was offered in the diet, and fluoxetine and PCPA in immersion solutions. The study was performed in two rearing temperatures, controlled temperature (26-28°C) and natural temperature without control (19 a 31°C). The results showed that tryptophan might be an alternative in matrinxã rearing since it promoted growth and enhanced survival of progeny, except in the highest concentration tested (2.96g/100g diet). Fluoxetine also enhanced larvae survival, with cannibalism reduction. The highest concentration (5000 ppb fluoxetine/L) reduced growth. The immunohistochemistry showed that the serotoninergig system is already developed in larvae and is similar to that of the juvenile fish of the same species. The temperature variation affected negatively the biological responses tested in this study, suggesting to be a stressor for fish. The PCPA did not show responses that could demonstrate a biological pattern

A serotonina está presente no Sistema Nervoso Central (SNC), gânglios perifé-ricos, e órgãos neuroendócrinos de crustáceos, participando de muitos processos fisi-ológicos. Receptores serotoninérgicos com perfil farmacológico similar ao dos recep-tores 5-HT1 e 5-HT2 de vertebrados já foram identificados em crustáceos, assim como os efeitos de vários agonistas e antagonistas destes receptores. O objetivo geral deste trabalho foi investigar a localização dos receptores serotoninérgicos nos tecidos-alvo periféricos do caranguejo Neohelice granulata pela técnica de binding, utilizando serotonina triciada (5-HT-H3), identificar o perfil fisiológico e farmacológico dos receptores pela técnica de binding, utilizando metiotepina, antagonista dos receptores serotoninérgicos 5-HT1 e ciproeptadina, antagonista dos receptores serotoninérgicos 5-HT2 e verificar o efeito dos antagonistas sobre o metabolismo de carboidratos e a postura de caranguejos N. granulata. Os experimentos in vivo e in vitro, foram realizados com grupos de animais alimentados com dieta rica em proteínas (RP), rica em carboidratos (RC) e animais do campo. O presente trabalho mostra que fatores nutricionais relacionados às dietas ofe-recidas aos caranguejos interagem com a serotonina, controlando a homeostase da glicose. Resultados obtidos com a administração dos antagonistas metiotepina e ci-proeptadina sugerem que os receptores serotoninérgicos envolvidos no controle do metabolismo de carboidratos possam ter um mecanismo de ação similar aos recepto-res 5-HT2 de mamíferos. A administração de serotonina e ciproeptadina nos animais promoveu uma for-te flexão de membros e abdome. No entanto, a administração de metiotepina promo-veu um relaxamento da musculatura, sugerindo a existência de receptores com perfil farmacológico similar aos receptores 5-HT1 de mamíferos no sistema nervoso periférico. Não foram encontradas terminações nervosas próximas ou se inserindo nas lamelas branquiais, e também não se observou qualquer neurônio imunorreativo à serotonina em ambas as brânquias, sugerindo que a serotonina seja liberada de ór-gãos neuroendócrinos para a hemolinfa do N. granulata, e tenha sua ação como neu-ro-hormônio nas brânquias. Foram localizados receptores serotoninérgicos no caranguejo N.granulata através da ligação específica de serotonina triciada (5-HT-H3) nas brânquias posteriores, maior ligação entre todos, brânquias anteriores, coração, hepatopâncreas e músculo mandibular. Experimentos in vivo mostraram no músculo, hepatopâncreas e coração, que a administração de 5-HT juntamente com 5-HT-H3 promove redução da ligação em seus receptores em animais do campo, demonstrando a especificidade da ligação. Nos animais em dieta RC ou RP a ligação não foi alterada, sugerindo um possível efeito da dieta sobre a ligação de 5-HT-H3. Resultados da administração dos antagonistas no músculo, em conjunto com os obtidos na reação postural, reforçam a hipótese da presença de receptores com perfil farmacológico similar aos 5HT1 de mamíferos neste tecido. No hepatopâncreas e coração, a administração dos antagonistas sugerem a presença de receptores com perfil farmacológico distinto dos receptores 5-HT1 e 5-HT2. Em ambas as brânquias, observou-se que a ligação de 5-HT-H3 é alterada em função do tempo de injeção e apresentam alta ligação de 5-HT-H3. Nos animais da dieta RP a administração de 5-HT reduziu a ligação de 5-HT-H3 em ambas as brânquias, confirmando a especificidade da ligação e a dopamina reduziu a ligação de 5-HT-H3 nas brânquias anteriores. Com a administração dos antagonistas, sugere-se a existência de receptores serotoninérgicos nas brânquias com perfil farmacológico similar aos receptores 5-HT1 de mamíferos. Nos animais alimentados com dieta RC e do campo, não foram observadas alterações na ligação de 5-HT-H3 com o uso de 5-HT, dopamina e antagonistas em ambas as brânquias, mostrando novamente que a dieta pode estar interferindo na ligação de 5-HT-H3. Em estudos in vitro realizados em ambas as brânquias, as curvas de competi-ção entre 5-HT-H3 e serotonina em caranguejos alimentados com ambas as dietas, mostram que a serotonina inibe a ligação de 5-HT-H3 de forma dose-dependente, de-monstrando a especificidade da ligação. A metiotepina e ciproeptadina não inibiram a ligação de 5-HT-H3 de forma dose-dependente, mas observa-se uma diminuição de aproximadamente 50% na ligação em ambas as brânquias de animais alimentados com dieta RP, evidenciando a existência de receptores do tipo 5-HT1 e 5-HT2 nestes tecidos. O presente trabalho propõe a existência de receptores serotoninérgicos nas brânquias posteriores e anteriores, coração, hepatopâncreas e músculo mandibular do caranguejo N. granulata e que a dieta oferecida aos animais interfere na ligação da serotonina em seus receptores nestes tecidos-alvo periféricos. Existem provavelmen-te três tipos de receptores serotoninérgicos nos tecidos-alvo periféricos do caranguejo N. granulata: um receptor 5-HT1Neo com perfil similar ao receptor 5-HT1 de mamífero; um receptor 5-HT2Neo com perfil similar ao receptor 5-HT2 e provavelmente, um tercei-ro, o 5-HT-H3Neo com perfil farmacológico indeterminado.

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas.
Made available in DSpace on 2012-10-18T17:22:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T01:31:09Z : No. of bitstreams: 1 147002.pdf: 1425789 bytes, checksum: 53f60dfeb07e444a00cc449cd88f68b7 (MD5)

A provocação social é um método utilizado em animais de laboratório para a indução de elevados níveis de agressividade, produzindo padrões comportamentais semelhantes ao de indivíduos violentos. Estudos prévios utilizando drogas que atuam seletivamente sobre os receptores 5-HT1A e 5-HT1B demonstraram uma redução pronunciada no comportamento agressivo. Um dos mais importantes sítios de ação para esses agentes serotonérgicos é o córtex pré-frontal, uma região cerebral particularmente relevante no controle inibitório da agressividade e da impulsividade. O objetivo do presente estudo foi verificar os possíveis efeitos anti-agressivos da microinjeção de 8-OH-DPAT e CP-93,129 (agonistas específicos dos receptores 5-HT1A e 5-HT1B, respectivamente) na região ventro orbital do córtex pré-frontal de camundongos machos provocados socialmente. Para confirmar a especificidade do receptor, antagonistas 5-HT1A e 5-HT1B (WAY-100,635 e SB-224,289, respectivamente) também foram microinjetados na mesma região cerebral. 8-OH-DPAT na dose de 1.0 µg reduziu significativamente a freqüência de mordidas. A menor dose de CP- 93,129 (0.1 µg) também diminuiu o número de mordidas e de ataques laterais. Tais efeitos anti-agressivos não foram acompanhados por alterações no restante do repertório comportamental. A participação específica desses receptores foi verificada pela reversão dos efeitos com a utilização de WAY-100,635 (10.0 µg) e SB-224,289 (1.0 µg). Nossos resultados confirmam o envolvimento da região VO CPF e dos receptores 5-HT1A e 5-HT1B na modulação de altos níveis de agressividade, sem conseqüentes alterações em outras rotinas motoras.
Social instigation is used in rodents to induce high levels of aggression, a pattern of behavior similar to that of violent individuals. This procedure consists of a brief exposure to a provocative stimulus male, before direct confrontation with an intruder. Studies using 5- HT1A and 5-HT1B agonist receptors show a reduction in aggressive behavior. An important site of action for these drugs is the ventral orbito frontal cortex (VO PFC), an area of the brain which is particularly relevant in the inhibitory control of aggressiveness and impulsiveness. The objective of the present study was to assess the anti-aggressive effects of 5-HT1A and 5- HT1B agonist receptors (8-OH-DPAT and CP-93,129) on the VO PFC of socially provoked male mice. To confirm the specificity of the receptor, 5-HT1A and 5-HT1B antagonist receptors (WAY-100,635 and SB-224,289) were microinjected into the same area, in order to reverse the agonist effects. 8-OH-DPAT at 1.0 µg dose reduced the frequency of attack bites. The lowest dose of CP-93,129 (0.1 µg) also decreased the number of attack bites and lateral threats. The anti-aggressive effects were not accompanied by impairment of non-aggressive activities. Specific participation of the 1A and 1B receptors was verified by reversal of antiaggressive effects using selective antagonists WAY-100,635 (10.0 µg) and SB-224,289 (1.0 µg). In conclusion, the decrease in aggressiveness observed with microinjections of 5-HT1A and 5-HT1B receptor agonists into the VO PFC of socially provoked mice, supports the hypothesis that activation of these receptors modulates high levels of aggression in a behaviorally specific manner.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-27T19:30:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Isabeli Lins Pinheiro.pdf: 2366520 bytes, checksum: a21da65bdb7db4555098a8072ac35b29 (MD5)
Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-07T22:40:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Isabeli Lins Pinheiro.pdf: 2366520 bytes, checksum: a21da65bdb7db4555098a8072ac35b29 (MD5)
Made available in DSpace on 2018-08-07T22:40:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Isabeli Lins Pinheiro.pdf: 2366520 bytes, checksum: a21da65bdb7db4555098a8072ac35b29 (MD5) Previous issue date: 2017-03-13
O sistema serotoninérgico apresenta funções no controle de eventos biológicos fundamentais para o desenvolvimento adequado do sistema nervoso. A serotonina (5-HT) e o Transportador de Serotonina (SERT) são indispensáveis para este controle. A disponibilidade destes componentes é precisamente regulada durante o período crítico de desenvolvimento, e podem sofrer interferências provindas do ambiente alterando sua ação sobre o sistema nervoso. Os inibidores seletivos da recaptação de serotonina bloqueiam o SERT e promovem o aumento dos níveis extracelulares da 5-HT. A 5-HT está intimamente relacionada à ingestão alimentar, e parece ter uma relação inversa com o consumo energético, pois promove redução da ingestão alimentar por estimular a saciedade em ratos. Esta ação anorexígena da 5-HT exibe uma resistência quando requisitada por estímulos agudos, demonstrando que os animais desenvolvem adaptações de acordo com os estímulos ambientais sofridos no período de desenvolvimento. Este trabalho avaliou os efeitos da exposição à fluoxetina durante o período de lactação sobre parâmetros morfológicos e moleculares da serotonina e do transportador de serotonina, e seus efeitos sobre a ingestão alimentar de animais jovens. Métodos: Os animais foram divididos em dois grupos de acordo com a manipulação experimental, um grupo fluoxetina (F): filhotes machos que receberam aplicação de fluoxetina (10mg/kg, 10μl/g, s.c.) e um grupo controle (C): filhotes machos receberam aplicação de salina (NaCl 0.9%, 10μl/g, s.c), ambos durante toda a lactação (1º ao 21º dia de vida). Foram avaliados o peso corporal durante a lactação e aos 40 dias, ingestão alimentar e sequência comportamental da saciedade após a lactação, expressão gênica e protéica do SERT e o conteúdo de serotonina no hipotálamo aos 21 e 40 dias, e a imunorreatividade de neurônios ao SERT no hipotálamo e tronco encefálico aos 75 dias de vida. Resultados: A fluoxetina neonatal promoveu redução no peso corporal a partir do 11º dia até os 40 dias (11 dias SAL:34,3±1,8; FLU:30,4±2,7/ 40 dias SAL:166,9±27,2; FLU: 127,3±17,5) e na resposta hipofágica da serotonina (FLU:3,36±0,22; FLU+FLUAGUDA:3,37±0,26), aumento no conteúdo de serotonina aos 21 dias (SAL:4,55±0,55; FLU:7,12±0,96), do gene SERT (21 dias SAL:0,82±0,04; FLU:1,01±0,04/ 40 dias SAL:1,00±0,03; FLU:1,40±0,03) e da proteína SERT (21 dias SAL:100±4,47; FLU:119,25±6,47/ 40 dias SAL:92,29±3,40;FLU:117,96±8,75) no hipotálamo. A quantidade dos neurônios SERT nos núcleos arqueado (ARC) e paraventricular (PVN) do hipotálamo e núcleo dorsal (DR) da rafe no tronco encefálico foi menor nos ratos expostos à fluoxetina neonatal aos 75 dias (ARC SAL: 156,1±20,1; FLU:62±8,5/ PVN SAL:319,3±23,3; FLU:135±35,2/ DR SAL: 139,4±39,4; FLU: 47,4±9,1). Conclusão: Concluímos que a organização do sistema serotoninérgico durante o período crítico de desenvolvimento é fundamental para a programação da ingestão alimentar em roedores.
The serotoninergic system presents control of biological events fundamental to the proper development of the nervous system. A serotonin (5-HT) and the Serotonin Transporter (SERT) are indispensable for this control. The availability of components is precisely regulated during the critical period of development and can interfere with the nervous developmental. Selective serotonin reuptake inhibitors block SERT and promote increased extracellular 5-HT levels. 5-HT is closely related to dietary intake, it seems to be an inverse relation with energy consumption, as it promotes a reduction in food intake by stimulating satiety in rats. This anorectic action of 5-HT shows a resistance when required by a stimulus. This study evaluated the results of the exposure to fluoxetine during lactation on the role of serotonin morphology and serotonin molecules and the transport of serotonin and its effects on food intake of young animals. Methods: The animals were divided in two groups according to an experimental manipulation, a group fluoxetine (FLU): male pups that received application of fluoxetine (10mg/kg, 10μl/g, s.c.) and male pups that received application of saline (NaCl 0.9%, 10μl/g, s.c.), both during all lactation. The body weight during a lactation was evaluated at 40 days, the food intake after lactation, the expression of SERT and the content of hypothalamic serotonin at 21 and 40 days, and the immunoreactivity of the neurons SERT into hypothalamus and brainstem at 75 days of age. Results: Neonatal fluoxetine promoted a reduction in body weight from day 11 to 40 days (11 days SAL: 34,3±1,8; FLU:30,4±2,7/ 40 days SAL: 166,9±27,2; FLU: 127,3±17,5), and the hypophagic response of serotonin (FLU:3,36±0,22; FLU+FLUACUTE:3,37±0,26), increase in the serotonin content 21 days (SAL:4,55±0,55; FLU:7,12±0,96), SERT gene (21 days SAL:0,82±0,04; FLU:1,01±0,04/ 40 days SAL:1,00±0,03; FLU:1,40±0,03) and protein SERT (21 days SAL:100±4,47; FLU:119,25±6,47/ 40 days SAL:92,29±3,40;FLU:117,96±8,75) in the hypothalamus. The amount of SERT neurons in the arched nuclei (ARC) and paraventricular (PVN) of the hypothalamus and dorsal nucleus (DR) in the brainstem were lowers in the rats exposed to neonatal fluoxetine at 75 days (ARC SAL: 156,1±20,1; FLU:62±8,5/ PVN SAL:319,3±23,3; FLU:135±35,2/ DR SAL: 139,4±39,4; FLU: 47,4±9,1). Conclusion: We conclude that an organization of the serotonergic system during the critical period of development is fundamental to food intake programming in rodents.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas
Made available in DSpace on 2013-06-25T21:50:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 310917.pdf: 1085728 bytes, checksum: d351d3c19308e32fdf6eb3afebae7290 (MD5)
Estudos conduzidos em nosso laboratório avaliaram os efeitos da injeção local de 8-hidroxi-2-(di-npropilamino)-tetralina (8-OH-DPAT) na Área Hipotalâmica Lateral (AHL) sobre o comportamento ingestivo de fêmeas adaptadas a comer uma ração enriquecida com 10% de sacarose, durante o período diurno do estro e diestro. Os resultados mostraram que 8-OH-DPAT reduziu significativamente a ingestão de alimentos em ambos os estágios do ciclo. Investigações posteriores mostraram que o pré-tratamento da AHL com WAY100635 (antagonista dos receptores 5-HT1A) suprimiu o efeito hipofágico provocado pelo 8-OH-DPAT nas duas fases do ciclo. Neste contexto, a proposta do presente estudo foi investigar a localização do receptor 5-HT1A no circuito serotoninérgico da AHL por meio da injeção de um antagonista considerado de ação pós-sináptica, 1-(2-methoxyphenyl)-4-(4-succinimidobutyl)-piperazine (MM-77), em ratas em diestro e estro. Ratas adaptadas a consumir uma dieta rica em sacarose 10% e com cânulas cronicamente implantadas na AHL foram pré-tratadas com o veículo (ácido ascórbico 5%) ou MM-77 (doses de 0,37 e 0,74 nmol/200 nl) seguida pela injeção de veículo ou 8-OH-DPAT (6 nmol/200 nl). Os comportamentos foram avaliados durante 1 hora após a administração das drogas e os resultados mostraram que a injeção de 8-OH-DPAT reduziu significativamente a ingestão de alimentos em 60% na fase estro e 49% no diestro. Essa redução na quantidade de alimento ingerido foi acompanhada por uma redução na duração e na frequência de ingestão, na fase estro. Os animais que foram tratados com MM-77 seguido de veículo não apresentaram alterações nos comportamentos ingestivos e/ou não ingestivos. Porém, os animais tratados com MM-77 seguido de 8-OH-DPAT apresentaram um bloqueio do efeito hipofágico induzido pela injeção de 8-OH-DPAT. Estes resultados indicam que receptores 5-HT1A localizados na AHL participam no controle serotoninérgico de mecanismos relacionados à regulação da ingestão de alimentos e que estes circuitos são, possivelmente, afetados por hormônios esteroides ovarianos. Além disso, observa-se que a reversão da hipofagia (provocada por um antagonista de receptor 5-HT1A pós-sináptico) pode ter sido realizada por um bloqueio prévio do receptor pelo antagonista, indicando sua localização pós-sináptica.
Studies conducted in our laboratory evaluated the effects of local injection of 8-hydroxy-2-(di-npropilamino)-tetralin (8-OH-DPAT) in the lateral hypothalamic area (AHL) on feeding behavior of females adapted to eating a diet supplemented with 10% sucrose during the daytime estrus and diestrus. The results showed that 8-OH-DPAT significantly reduced food intake in both stages of the cycle. Subsequent investigations showed that pretreatment with WAY100635 (antagonist of 5-HT1A) abolished the hypophagic effect caused by 8-OH-DPAT in both stages of the cycle. In this context, the purpose of this study was to investigate the location of the 5-HT1A receptor in the serotonergic circuit of the AHL by injection of an antagonist considered with postsynaptic action, 1 - (2-methoxyphenyl) -4 - (4-succinimidobutyl )-piperazine (MM-77), in rats in diestrus and estrus. Rats adapted to consume a diet rich in 10% sucrose and carrying chronically implanted cannulas toward to the AHL were pretreated with the vehicle (5% ascorbic acid) or MM-77 (0.37 and 0.74 nmol) followed by injection of vehicle or 8-OH-DPAT (6 nmol). The behaviors were evaluated for 1 hour after drug administration and the results showed that the injection of 8-OH-DPAT reduced the food intake by 60% in the phase of the estrous and 49% in the diestrous. This reduction in food intake was accompanied by a reduction in the duration and frequency of the ingestive behavior, during the estrus. Animals that were treated with MM-77 followed by the vehicle showed no alterations in the ingestive and/or non ingestive behaviors. However, animals treated with MM-77 followed by 8-OH-DPAT showed blockage of the hypophagic effects induced by injection of 8-OH-DPAT. These results indicate that 5-HT1A receptors located in the AHL are involved in the serotoninergic control of the mechanisms related to the regulation of food intake and that these circuits are possibly affected by ovarian steroid hormones. Furthermore, it is observed that the reversal of the hypophagia (caused by an antagonist of 5-HT1A postsynaptic receptor) may have been carried out by a previous blockade of the receptor by the antagonist, indicating its postsynaptic location.

Orientador : Profª. Drª. Joice Maria da Cunha
Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 05/08/2016
Inclui referências : f. 78-100
Resumo: O diabetes é uma doença crônica, debilitante e de alta prevalência, cuja gravidade aumenta com o aparecimento de complicações subjacentes. Dentre estas, a dor neuropática diabética (DND) parece estar associada à morbidade e mortalidade no diabetes, dada a dificuldade de tratamento. A fisiopatologia da DND tem sido associada à redução do tônus imposto pelo sistema descendente inibitório, incluindo aqueles dependentes da liberação de serotonina (5-HT). Neste contexto, nossa hipótese é de a via indolamina 2,3-dioxigenase 1 (IDO1)/quinureninas (KYN) possa estar envolvida no mecanismo patológico da DND, uma vez que a mesma é a principal via de catabolismo do triptofano, levando à depleção de serotonina e à produção de quinureninas neurotóxicas. Assim, nosso objetivo foi investigar o papel da via IDO1/KYN na alodinia mecânica em animais com diabetes experimental induzido quimicamente por estreptozotocina (STZ). Verificamos que a alodinia mecânica inicia-se 2 semanas após a indução do diabetes, com pico na 4ª semana, havendo redução de cerca de 20% no limiar mecânico dos animais diabéticos (Dbt) quando comparados aos animais normoglicêmicos (Ngl). Corroborando a nossa hipótese, foi observado que 1) animais Dbt apresentam significativa redução os níveis de 5-HT no cordão espinhal (CE), com baixa reposição deste neurotransmissor (evidenciada pelo aumento da razão 5-HT1AA/5-HT) nesta estrutura e 2) o tratameto com fluoxetina (bloqueador da recaptação da serotonina) induziu efeito antinociceptivo nestes animais. Apesar da expressão de IDO1, enzima passo-limitante da via, não estar alterada em CE de animais Dbt quando comparada aos animais Ngl, o tratamento com 1-L-metil triptofano (antagonista da IDO1) promoveu antinocicepção em animais Dbt. A ausência de alteração na expressão da IDO no CE de animais Dbt pode estar associada a não observação de alterações significativas nos níveis de citocinas inflamatórias (IL-1?, IL-6 e TNF?) nem nos marcadores para astrócitos (GFAP) e micróglia (IBA-1) no CE destes animais. Curiosamente, os níveis de IL-1? e TNF? em nervo ciático de animais Dbt apresentam-se reduzidos quando comparados aos níveis observados em animais Ngl. Da mesma forma, a enzima quinurenina 3 monoxigenase (KMO), também importante na geração de KYN, não se demonstrou aumentada em animais Dbt em relação ao grupo Ngl, embora seu bloqueio farmacologíco pelo tratamento com JM-6 tenha induzido significativo efeito antinociceptivo nestes animais. Por fim, dada a ativação de receptores NMDA por algumas KYN, verificamos que a administração intratecal de um antagonista NMDA o MK-801 também aumentou significativamente o limiar mecânico em animais Dbt. Assim, podemos concluir que a ativação da via IDO1/KYN parece estar associada ao desenvolvimento da DNP, levando tanto a redução de 5-HT e, portanto, da ativação das vias descendentes inibitórias quanto ao aumento da produção de KYN, as quais possivelmente devido à ligação aos receptores NMDA aumentam o tônus das vias descendentes facilitatórias. Palavras-chave: Dor neuropática, diabetes, serotonina, IDO1, quinureninas.
Abstract: Diabetes is a highly disabling chronic disease, prevalent in both low and high income countries. Among the complications, the diabetic neuropathic pain (DNP) is cited as one of the main and more difficult to treat complication and is highly linked to higher mortality and morbidity in diabetic patients. The pathophysiology of DNP has been associated with a reduction of endogenous inhibitory descending pathway tonus, including the fat ones driven by neurotransmitters as serotonin. In this context, our hypothesis is that the indoleamine 2,3-dioxygenase 1 (IDO1)/kynurenine (KYN) pathway might be related to the pathological process of DNP, since this pathway is mainly related to the L-tryptophan catabolism, lowering serotonin levels and also producing neuroactive kynurenines. Then, we investigated the role of IDO1/KYN in the generation of mechanical allodynia in streptozotocin (STZ)-diabetic animals (Dbt) in which the mechanical allodynia was initiated 2 weeks after the STZ injection, peaking in the fourth week. Corroborating our hypothesis, we observed that Dbt rats have reduced spinal cord serotonin levels, and lower 5-HT turnover evidenced by an increase of the 5-HIAA/5HT ratio and that the mechanical allodynia in Dbt rats is significantly prevented by SSRI fluoxetine. Although the rate limiting enzyme IDO1 expression was not altered in the spinal cord from Dbt rats, the pharmacological blockade of IDO1 by 1-L-MT evoked a significant reduction in the mechanical allodynia in these animals. Pro inflammatory cytokine levels (IL-1?, IL-6 e TNF?) in the spinal cord did not differ between normoglycemic (Ngl) and Dbt rats while in sciatic nerve, we observed a reduction of IL-1? and TNF-? levels, revealing a lower pro inflammatory tonus in these tissues, which might explain the absence of statistical difference of IDO1 expression in the spinal cord. Given the presence of IDO1/KYN in glial cells and its importance for the neuropathic pain states, we observed no effect of diabetes on the expression of IBA-1 (microglial marker) and GFAP (astrocytic marker) production between Ngl and Dbt animals. In addition, immunofluorescence revealed morphological changes in astrocytic cells in the spinal cord of Dbt animals 3 and 4 weeks after the STZ injection, prompting to idea that these cells might have an alteration in its metabolism or function. The kynurenine 3-monooxigenase (KMO) enzyme, another important enzyme for the kynurenine generation, remained unchanged in Dbt rats after 4 weeks when compared to Ngl group, despite its blockade induced antinociception by JM-6 in these animals. Since NMDA receptors might be activated by quinurenins, as these receptors are upregulated in the DPN, we further demonstrated that the pharmacological blockade of these receptors also promoted reduction in the mechanical allodynia in Dbt group. All together, our data suggest that the physiopathology of DNP may involve the overactivation of IDO1/KYN pathway, which explained the decrease of serotonin levels/ turnover and the pharmacological effectiveness of compounds that interfere directly or indirectly in this pathway over the mechanical allodynia in DBT animals. Further studies however are needed to characterize the importance of this pathway activation not only in DNP but also in other neuropathic pain conditions. Keywords: diabetes; streptozotocin; serotonin; cytokines.

Orientador: Edson Antunes
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Made available in DSpace on 2018-07-21T12:25:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Binhara_IramaiaMendes_M.pdf: 1552383 bytes, checksum: e0083856ae06fb79873d77624a7b709e (MD5) Previous issue date: 1996
Resumo: Poliaminoácidos básicos tais como a polilisina e poliarginina produzem uma variedade de efeitos biológicos incluindo aumento da permeabilidade vascular, infiltração de leucócitos, inflamação pulmonar, agregação de plaquetas e ativação de mastócitos. Neste estudo, investigamos os mecanismos envolvidos na desgranulação de mastócitos induzida por poliarginina e polilisina usando-se mastócitos peritoneais isolados de ratos. Mastócitos de 10 ratos machos Wistar (200 a 300 g) foram obtidos por injeção de solução Krebs Ringer Fosfato (KRF) na cavidade peritoneal. O lavado peritoneal foi removido e centrifugado a 300 9 por 5 minutos à temperatura ambiente. A suspensão de células foi lavada com KRF e incubada com C4C]serotonina (C4C]5-HT; 40 nCi/ml) por 60 minutos. As células foram então lavadas 3 vezes em KRF. Alíquotas da suspensão celular foram aqueci das a 37°C por 20 minutos. Os agentes desgranuladores foram adicionados à suspensão. As células foram então centrigugadas (300 g, 10 minutos) e o sobrenadante removido para determinação da C4C]5-HT. A concentração de C4C]5-HT (%) foi determinada medindo-se a cintilação em contador f3 ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital
Abstract: Basic polyaminoacids such as polylysine and polyarginine produce a variety of biological effects including increase in vascular permeability, leucocytic infiltration, lung infllammation, platelet aggregation and mast cell activation. In this study we have further investigated the mechanisms involved in the mast cell degranulation induced by polyarginine and polylysine using isolated rat peritoneal mast cells. Mast cells of 10 male Wistar rats (200 - 300 g) were obtained by the injection of Krebs-Ringer Phosphate solution (KRP) into peritoneal cavity. The fluid was withdrawn and centrifuged at 300 9 for 5 min at roem temperaature. The cell suspension was washed twice in KRP and incubated with 40 nCi/ml of C"C]5-HT at 37C by 60 min. The cells were then washed three times in KRP. Aliquots of the peritoneal cell suspension were warmed at 37°C for 20 mino The stimulus were added to the suspension. The cells were then centrifuged (300 g, 10 min) aand the supematant removed for [1"C]5-HT determination. The [1"C]5 HT concentrations (%) was determined by measuring the radioactivity in a y counter. Poly-l-arginine caused a dose-dependent C"C]5-HT release (139.2 kD; 11 :t 5, 67 :t 4.4 and 70.4 :t 0.6% for 0.01, 0.1 and 1J,LM, respectively; n = 4). Similar responses were observed for either poly-D-Iysine (94.9 kD; 4 :t 0.6, 28 :t 6 and 41 :t 14 for 0.01,0.1 and 1 IlM, respectively; n = 4) and poly-l-Iysine (80.4 kD; 30 :t 1 and 61 :t 3.3% for 0.1 and 1 J,LM, respectively; n=12). The polyarginine-induced C4C]5-HT release was also dependent on the molecular weight of the polycation (5 1: 2 and 27 1: 7% for 11.6 kD and 139.3 kD, respectively; n = 6). Heparin (15 - 250 U/ml) and dermatan sulfate (0.1 mg I ml) virtually abolished the [14C] 5-HT release induced by polyarginine. In contrast, the enzymes chondroitinase AC, heparitinase I, heparitinase 11 and heparinase had no effect on the polyarginine-induced [14C] 5-HT release
Mestrado
Farmacologia
Mestre em Ciências

Orientador: Lauro T. Kubota
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica
Made available in DSpace on 2018-08-03T21:00:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castilho_TaniaJacometode_D.pdf: 2873159 bytes, checksum: 7c51369d8da8503c54b5af2b2c45b337 (MD5) Previous issue date: 2003
Resumo: Sendo os neurotransmissores compostos que desempenham papel importante no organismo humano, a análise dos mesmos é revestida de um interesse especial nas áreas médica e farmacêutica. A análise de neurotransmissores, utilizando um biossensor à base de peroxidase (HRP) imobilizada em pasta de carbono, pode ser uma alternativa às técnicas tradicionais de análise que são pouco seletivas (fluorimétrica), muito caras (CG-MS) ou demoradas (HPLC-ED). Estes fatores as tomam pouco adequadas para análises rápidas. Assim, esta tese refere-se ao desenvolvimento de um biossensor à base de peroxidase imobilizada em pasta de carbono para a determinação de neurotransmissores em amostras biológicas. Na construção do biossensor foram realizados oito procedimentos diferentes para imobilizar a enzima HRP e todas as condições experimentais determinadas, usando uma solução do neurotransmissor serotonina como composto de referência. Foram avaliados os valores de sensibilidade obtidos com a adição de glutaraldeído, albumina de soro bovino e a ativação da grafite com carbodiimida no processo de imobilização enzimática. -Os resultados indicaram que a composição da pasta tem grande influência na atividade da enzima imobilizada para catalisar a oxidação da serotonina. Os melhores resultados foram obtidos em tampão fosfato 0,1 moI L-I (pH = 7,0), contendo 10 !lmoI L-I de peróxido de hidrogênio, aplicando-se o potencial-50 mV vs ECS. Nestas condições, o biossensor apresentou resposta linear entre 0,2 e 2,0 fllIlol L-I, limite de detecção de 0,08 Ilmol L-I e tempo de resposta de 0,5 s. O biossensor apresentou sensibilidades semelhantes para a dopamina, a epinefrina e a norepinefrina. Para a serotonina a sensibilidade foi mais baixa, estando de acordo com o potencial redox mais elevado e ser esta substância um monofenol. O sensor proposto apresentou-se estável durante quatro horas de monitoramento, e uma diferença de resposta de 2% entre seis preparações. O biossensor foi aplicado com sucesso na determinação da concentração total de neurotransmissores em amostra de plasma sanguíneo de rato, sendo obtida uma recuperação de 102%
Abstract: Neurotransmitters are compounds that have a very important role on human body and their analysis have an especial interest to medical and pharmacological areas. This type of analysis using a biosensor with HRP enzyme immobilized on carbon paste might be an interesting alternative to the traditional methods that are low selective (fluorimetric), very expensive (GC-MS), or takes much time to accomplish the results (HPLC-ED). The characteristics mentioned above make them non appropriate for quick analysis. Thus, this work describes the biosensor development and its use for determination of neurotransmitter in biological samples. Eight different protocols on the HRP enzyme immobilization were used and optimal experimental conditions were determined using a serotonin solution as a standard. Values of sensitivity were evaluated by adding glutaraldehyde, bovine serum albumin, and carbodiimide to the enzyme immobilization processo The results showed that the paste composition has great influence on the enzyme activity for serotonin oxidation. The best results were obtained in 0.1 moI L-I phosphate buffer (pH=7.0) containing 10 J..lmol L-I of hydrogen peroxide at an applied potential of -50 mV vs SCE. On these conditions, the biosensor showed a linear response range from 0.2 to 2.0 J..lIDol L-I, a detection limit ofO.08 J..lIDol L-I and the response time was 0.5 seconds. The biosensor sensitivities for dopamine, epinephrine and norepinephrine were practically the same. For serotonin, the biosensor showed a slight lower sensitivity, what agrees with its redox potential. The proposed biosensor presented a stable response during 4 h under continuous monitoring. The difference of response was of 2% among six different preparations. The biosensor showed a successful use on the determination of the total ftaction of neurotransmitters in rat blood samples, obtaining an average recovery of 102%
Doutorado
Doutor em Ciências

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências
Made available in DSpace on 2012-10-19T05:46:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T22:47:01Z : No. of bitstreams: 1 182957.pdf: 3114560 bytes, checksum: 8ec78ff7058c6c16ee0ad93060283c28 (MD5)
O presente trabalho descreve os efeitos de injeções locais de 8-OH-DPAT em vários distritos do tegmento pontomesencefálico e no aqueduto ou 40 ventrículo de pombos domésticos sobre os comportamentos de ingestão hídrica e alimentar. Uma descrição neuroanatômica da distribuição de pericários 5-HT imunoreativos (5HT-IRp) visando auxiliar o mapeamento funcional realizado por meio de injeções locais de 8-OH-DPAT em distritos do tegmento pontomesencefálico indicou que a maioria dos 5-HT-IRp estão localizados em distritos paramedianos e da linha média do tegmento mesencefálico e pontino (rafe superior), ou em áreas do tegmento ventrolateral mesencefálico e dorsolateral pontino, referido como grupo lateral. Os efeitos ingestivos de injeções de 8-OH-DPAT ou de veículo, nestes distritos foram examinados em pombos saciados com livre acesso à água e alimento. Após aplicação destes tratamentos e ao longo de 60 minutos, foram registrados os padrões comportamentais de ingestão de água e alimento (freqüência, latência e duração), a latência e a duração das posturas de sono e sonolência, e a duração dos comportamentos de autolimpeza, imobilidade alerta, exploração do ambiente e locomoção, além dos consumos de água e alimento. As injeções de 8-OH-DPAT administradas nas estruturas paramedianas e da linha média e no aqueduto/40 ventrículo provocaram, efeitos dipsogênicos, de forma consistente, e efeitos hiperfágicos de menor incidência e intensidade. As injeções de 8-OH-DPAT provocaram, de forma dose-dependente, um aumento na quantidade de água ingerida por grama de alimento consumido, indicando uma desorganização do padrão periprandial de ingestão hídrica e um aumento seletivo no consumo de água. As injeções de 8-OH-DPAT administradas no grupo lateral e em regiões não imunoreativas do tegmento pontomesencefálico não afetaram a ingestão alimentar e hídrica. Além disso, as injeções de 8-OH-DPAT nos diversos distritos estudados não provocaram efeitos hipnogênicos ou alterações nos comportamentos exploratórios. Assim, os resultados obtidos no presente trabalho sugerem: 1) a participação de receptores 5-HT1a, localizados na linha média do tegmento pontomesencefálico na regulação do comportamento de ingestão hídrica em pombos e 2) neurônios serotoninérgicos da rafe superior e do grupo lateral participam de distintos circuitos funcionais.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2015.
Made available in DSpace on 2015-10-27T03:10:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 335658.pdf: 981343 bytes, checksum: 1c90a6747c10189aa0a563b8e6bc2dd7 (MD5) Previous issue date: 2015
Este trabalho teve como objetivo avaliar se a 5-HT liberada durante a agregação plaquetária participa da hipotensão observada na sepse e se isto estaria relacionado a uma hiporreatividade a agentes vasoconstritores nas veias. Para isso, foram utilizados ratos Wistar machos (250 - 300 g) provenientes do Biotério Central da Universidade Federal de Santa Catarina, que foram tratados com lipopolissacarídeo (LPS) ou salina após 5 minutos dos pré-tratamentos com 5-HT, ketanserina ou veículo, administrados via intraperitoneal. Foram realizadas medidas de tensão isométrica das veias jugulares e hemograma dos ratos após 6 e 24 horas dos tratamentos. A pressão arterial e a frequência cardíaca foram avaliadas por pletismografia de cauda 3, 6, 12, 24, 36, 48 e 72 horas após os tratamentos. Nos animais pré-tratados com veículo, após 6 horas do tratamento com LPS, observamos hiporreatividade na veia jugular ao agente contrátil 5-HT e hiper-reatividade aos agentes vasodilatadores acetilcolina, nitroprussito de sódio e noradrenalina em relação ao grupo tratado com salina. Após 24 horas do tratamento com LPS nos animais pré-tratados com veículo, as respostas contráteis e relaxantes na veia jugular não foram diferentes daquelas dos animais que receberam salina, exceto para o nitroprussiato de sódio, que manteve uma resposta vasodilatadora aumentada. O pré-tratamento com 5-HT antes de LPS manteve a hiporreatividade ao agente contrátil em veia jugular após 24 horas e atenuou a hiper-reatividade à acetilcolina e à noradrenalina em 6 horas e ao nitroprussiato de sódio em 24 horas. O pré-tratamento com o antagonista de receptores da 5-HT2A, a ketanserina, preveniu a hiporreatividade à 5-HT em veia jugular após 6 horas de tratamento quando comparados aos animais que receberam veículo como pré-tratamento e também preveniu a hiper-reatividade aos agentes relaxantes observada em animais pré-tratados com veículo. O LPS causou queda na pressão arterial até 24 horas após o tratamento, acompanhada de um aumento na frequência cardíaca que ficou elevada durante toda análise (até 72 horas do tratamento). O pré-tratamento com 5-HT dificultou o reestabelecimento da pressão arterial dos animais tratados com LPS, que se manteve diminuída até 48 horas após o tratamento, também acompanhada por aumento da frequência cardíaca. A ketanserina facilitou o12reestabelecimento da pressão arterial e da frequência cardíaca dos animais tratados com LPS, que voltaram aos níveis basais 12 horas após o tratamento. O tratamento com LPS ocasionou um aumento na dosagem indireta de óxido nítrico (NO), que não foi alterada com o pré-tratamento com 5-HT, mas que foi inibido com o pré-tratamento com a ketanserina. Além disso, os animais que receberam LPS apresentaram diminuição de plaquetas, linfócitos, monócitos e aumento de granulócitos, assim como dos animais pré-tratados com 5-HT. Ketanserina foi capaz de atenuar a queda na contagem de plaquetas em 24 horas após o tratamento. Podemos concluir que a 5-HT está envolvida na hipotensão observada no choque endotoxêmico associada à hiporreatividade venosa a agentes vasopressores. Além disso, antagonistas da 5-HT como o utilizado em nosso estudo, podem amenizar esses efeitos e melhorar os parâmetros hemodinâmicos e cardiovasculares do choque endotoxêmico.

Abstract : This study aimed to evaluate whether 5-HT released by platelet aggregation during sepsis contributes to hypotension observed in sepsis and if this is related to venous hyporeactivity to vasoconstrictor agents. For this, Wistar rats (250-300 g) from the Central Animal Facility of the Federal University of Santa Catarina treated with lipopolysaccharide (LPS) or saline after 5 minutes of pre-treatment with 5-HT, ketanserin or vehicle were used. Isometric tension measurements of the rat jugular veins and blood cell count were performed 6 and 24 hours after treatment. Blood pressure and heart rate measurements by tail cuff were obtained 3, 6, 12, 24, 36, 48 and 72 hours after treatment. When compared to saline treatment, 6 hours after treatment with LPS in the jugular veins from animals pretreated with vehicle, we observed decreased contractile response to 5-HT and increased relaxing responses to acetylcholine, norepinephrine and sodium nitroprusside. After 24 hours of LPS treatment in animals pretreated with vehicle, contractile and relaxant responses in the jugular vein were not different from those of animals receiving saline except for sodium nitroprusside, which maintained an increased relaxing response. Pretreatment with 5-HT maintained the hyporeactivity to the contractile agent in the jugular vein up to 24 hours after LPS treatment and decreased the hyperreactivity to acetylcholine and norepinephrine at 6 hours and to sodium nitroprusside at 24 hours after LPS treatment. Pretreatment with the 5-HT receptor antagonist, ketanserin, prevented either the decreased contraction to 5-HT and the increased relaxing responses to acetylcholine, norepinephrine and sodium nitroprusside in the jugular vein after 6 hours of LPS treatment compared with animals receiving vehicle as pretreatment. LPS caused a drop in blood pressure up to 24 hours after treatment, accompanied by an increase in heart rate that was maintained high throughout analysis (72 hours). Pretreatment with 5-HT impaired blood pressure recovery in animals treated with LPS, which remained decreased up to 48 hours after treatment, accompanied by increasead heart rate. Ketanserin improved the reestablishment of blood pressure and heart rate of the animals treated with LPS, which returned to baseline levels 12 hours after treatment. Treatment with LPS caused an14increase in plasma nitric oxide (NO) content, which was not modified by pre-treatment with 5-HT but was inhibited by pre-treatment with ketanserin. In addition, animals receiving LPS after vehicle and 5-HT as preatreatments exhibited reduced platelets, lymphocytes, monocytes and increased granulocytes. Ketanserin was able to mitigate the decline in platelet count at 24 hours after treatment. We can conclude that 5-HT from platelet aggregation in sepsis is involved in the hypotension observed in endotoxic shock associated with venous hyporeactivity to vasopressor agents. In addition, antagonists of 5-HT, as the one used in our study, may mitigate these effects and improve the hemodynamic and cardiovascular events observed in endotoxic shock.

ROCHA, Nayrton Flávio Moura. Efeito sinérgico da associação entre L-triptofano e analgésicos não-opióides em modelos de nocicepção experimental em camundongos. 2013. 134 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013.
Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-28T11:59:01Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_nfmrocha.pdf: 1457916 bytes, checksum: 3847f7c42bdc5f8b92cef0290a9abd1d (MD5)
Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2016-03-28T12:02:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_nfmrocha.pdf: 1457916 bytes, checksum: 3847f7c42bdc5f8b92cef0290a9abd1d (MD5)
Made available in DSpace on 2016-03-28T12:02:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_nfmrocha.pdf: 1457916 bytes, checksum: 3847f7c42bdc5f8b92cef0290a9abd1d (MD5) Previous issue date: 2013
The drug combination to reach greater clinical outcomes or reduce side effects is usual practice in the managing of several morbid conditions. The current painkillers have side effects potentially dangerous that should be monitoring during its utilization. Objective: to study the interaction between L-tryptophan and non-opioids analgesics dipyrone, ketoprofen or paracetamol, by oral or intraperitoneal route, in models of nociception in mice, including the investigation about the importance of blockage of serotonergic neurotransmission as well as alfa-2, melatonin and ATP-dependent potassium channel. The interaction with kynurenic acid was analyzed too. Results: The L-tryptophan (p.o. or i.p) does not possess antinociceptive activity as solely agent but it is capable to increase central 5-HT amount. The ED50 for antinociceptive effect of dipyrone or paracetamol were ED50=128,7 mg/kg (92,78-178,6 mg/kg) e ED50=281 mg/kg (204,1 – 387,0 mg/kg), respectively. The oral co-treatment (on the same administration) with L-triptophan in the proportion (weight/weight) 1:1,4 with dipyrone and 1:1,5 with paracetamol decrease with significance the ED50 to 33,30 mg/kg (28,05 – 39,54 mg/kg)* and 50,99 mg/kg (41,96 – 61,96 mg/kg)*, respectively. The previous intraperitoneal treatment with L-tryptophan (defined here as combined treatment) reduces the ED50 for analgesic effect of dipyrone (in the proportions of 1:1 and 1:2), paracetamol (1:4,12) or ketoprofen (5,7:1), to 30,90 mg/kg (23.10-43,56 mg/kg)* e 18,07 mg/kg (13,25- 24,67 mg/kg )*, 47,30 mg/kg (34.00 - 65.82 mg/kg)* e 2,09 mg/kg (1,355-3,224 mg/kg)*, respectively compared to solely treatment with dipyrone ED50=91,20 mg/kg (77.39 - 95.78 mg/kg ), Paracetamol ED50=96,18 mg/kg (76.23 - 121.3 mg/kg) or Cetoprofeno= 10,25 mg/kg (6,729 to 15,61mg/kg) on the abdominal writhing test induced by acetic acid. The treatment with L-tryptophan increases the central concentration of serotonin, but not influence the concentrations of noradrenaline or dopamine. L-tryptophan 25 or 50 mg/kg does not influence the concentration of cortical amount of glutamate. However, the combined treatment i.p. with non-effective doses of dipyrone and paracetamol reduces the concentration of this neurotransmitter. The combined treatment of L-tryptophan with non antinociceptive doses (i.g.) dipyrone and paracetamol exhibited antinociceptive effect in the formalin-induced licking test in both phases. The combination of L-tryptophan and dipyrone (i.p.) was effective when tested against the test nociception induced by capsaicin, but the association with paracetamol failed this test. Blockage of 5-HT synthesis by treatment with the inhibitor PCPA (p-chlorophenylalanine) antagonizes the synergistic effect of the L-tryptophan association with dipyrone in the writhing test. Kynurenic acid exerts a synergistic effect with dipyrone and paracetamol in the writhing test. The blockage of 5-HT2 and 5-HT3 receptor have no influence on the synergism of L-tryptophan and dipyrone, ketoprofen, paracetamol or writhing model. The 5-HT1 receptor blockage seems to be important for the synergistic effect of L-tryptophan ketoprofen with paracetamol and not having an effect on the synergism and dipyrone. The blockage of the α2 adrenergic receptor channels influences the synergism of L-tryptophan with paracetamol. The synergistic interaction with dipyrone is attenuated by blocking melatonin receptors. Conclusion: Our results showed that there is a synergistic relationship between L-tryptophan and antinociceptive activity of ketoprofen, paracetamol and dipyrone. The mechanism underlying this interaction appears to be different for dipyrone in relation to this mechanistic effect on ketoprofen and paracetamol, although in both cases it seems important the metabolism of L-tryptophan to serotonin and, possibly, kynurenic acid.
A combinação de drogas para atingir um efeito clínico maior, ou reduzir efeitos adversos, é prática corrente no tratamento de várias condições mórbidas. Os analgésicos de uso corrente possuem efeitos adversos potencialmente perigosos que merecem ressalvas quanto ao seu uso, pois se apresentam prevalentes nas doses terapêuticas usuais. Objetivos: estudar a interação entre L-triptofano e os analgésicos não opióides dipirona, cetoprofeno e paracetamol via intragátrica e intraperitoneal em modelos de nocicepção em camundongos, verificando a importância do bloqueio da neurotransmissão serotonérgica (Síntese e receptores 5-HT1, 5-HT2 e 5-HT3) bem como o bloqueio de receptores alfa-2 adrenérgicos, melatonina (MT-1 e MT-2) e canais de potássio dependentes de ATP (K+ATP). A interação com ácido quinurênico, um metabólito das vias das quinureninas também foi analisada. Resultados: O L-triptofano (i.g ou i.p.) não possui atividade antinociceptiva isoladamente, mesmo sendo capaz de aumentar a concentração central de 5-HT. Quando administrada via intragástrica, dipirona ou paracetamol apresentaram ED50=128,7 mg/kg (92,78-178,6 mg/kg) e ED50=281 mg/kg (204,1 – 387,0 mg/kg) para o efeito antinociceptivo, respectivamente. O tratamento conjunto (realizado na mesma administração via intragástrica, i.g.) com L-triptofano nas proporções (peso/peso) de 1:1,4 com dipirona e 1:1,5 com paracetamol reduz significativamente os valores de ED50 para 33,30 mg/kg (28,05 – 39,54 mg/kg)* e 50,99 mg/kg (41,96,– 61,96mg/kg)*, respectivamente. O tratamento prévio i.p com L-triptofano (definido como tratamento combinado) reduz as ED50 para o efeito analgésico da dipirona (nas proporções de 1:1 e 1:2), paracetamol (proporções de 1:4,12) ou cetoprofeno (proporções de 5,7:1), para 30,90 mg/kg (23.10-43,56 mg/kg)* e 18,07 mg/kg (13,25- 24,67 mg/kg )*, 47,30 mg/kg (34.00 - 65.82 mg/kg)* e 2,09 mg/kg (1,355-3,224 mg/kg)*, respectivamente, quando comparado aos tratamentos isolados de dipirona ED50=91,20 mg/kg (77.39 - 95.78 mg/kg ), Paracetamol ED50=96,18 mg/kg (76.23 - 121.3 mg/kg) e Cetoprofeno= 10,25 mg/kg (6,729 to 15,61mg/kg) no teste de contorções induzidas pelo ácido acético. O tratamento com L-triptofano aumenta as concentrações centrais de serotonina, mas não influência na concentrações de Dopamina ou Noradrenalina. O L-triptofano 25 ou 50 mg/kg não influencia na concentração cortical de glutamato, no entanto o tratamento combinado via i.p. com doses não-efetivas de dipirona e paracetamol reduz a concentração desse neurotransmissor. O tratamento conjunto de L-triptofano com doses não antinociceptivas (i.g) de dipirona e paracetamol exibiu efeito antinociceptivo no teste de lambedura induzido pela formalina em ambas as fases do teste. A associação de L-triptofano e dipirona (i.p.) mostrou-se efetiva quando testada frente ao teste de nocicepção induzida pela capsaicina, mas a associação com paracetamol falhou neste teste. O bloqueio da síntese de 5-HT, através do tratamento com o inibidor PCPA(p-clorofenilalanina) antagoniza o efeito sinérgico da associação entre L-triptofano e dipirona no teste de contorções abdominais. O ácido quinurênico exerce efeito sinérgico com a dipirona e paracetamol nos testes de contorções. O bloqueio dos receptores 5-HT2 e 5-HT3 não exercem influência sobre o sinergismo do L-triptofano com a dipirona, cetoprofeno ou paracetamol no modelo de contorções. O bloqueio de receptores de 5-HT1 parece ser importante para o efeito sinérgico do L-triptofano com paracetamol e cetoprofeno, não exercendo efeito sobre o sinergismo com a dipirona. O bloqueio de receptores α2 adrenérgicos influencia no sinergismo do L-triptofano com o paracetamol. A interação sinérgica com a dipirona é atenuada com o bloqueio de receptores de melatonina. Conclusão: Os nossos resultados mostraram que existe uma relação sinérgica entre o L-triptofano e a atividade antinociceptiva do cetoprofeno, paracetamol e dipirona. O mecanismo subjacente a esta interação parece ser diferente para a dipirona em relação a mecanística desse efeito para o paracetamol e cetoprofeno, embora para ambos os casos pareça ser necessária a metabolização do L-triptofano à serotonina e, possivelmente, a ácido quinurênico.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-03-28T12:35:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Manuella da Luz D Barros.pdf: 1660746 bytes, checksum: 1cd53d223f6d92ef7dab1a2d30b49ece (MD5)
Made available in DSpace on 2017-03-28T12:35:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Manuella da Luz D Barros.pdf: 1660746 bytes, checksum: 1cd53d223f6d92ef7dab1a2d30b49ece (MD5) Previous issue date: 2016-02-23
FACEPE
CNPQ
A plasticidade fenotípica compreende a capacidade do organismo de elaborar adaptações morfofuncionais em resposta aos estímulos ambientais. Essa capacidade é mais intensa durante a gestação e lactação (plasticidade do desenvolvimento), podendo estar associada a consequências ao longo da vida. Neste contexto, a serotonina (5-HT) tem papel determinante no desenvolvimento do sistema nervoso central. Além disso, a 5-HT participa do controle central homeostático do balanço energético no núcleo arqueado (Arc) do hipotálamo, estimulando a saciedade e o gasto de energia através da inibição de neurônios orexígenos e estimulação de neurônios anorexígenos via receptores 5-HT1B e 5-HT2C, respectivamente. Dessa forma, a alteração da atividade serotoninérgica durante o desenvolvimento pode modificar a regulação e a expressão do comportamento alimentar em longo prazo. Estudos prévios de nosso grupo de pesquisa apontaram que a inibição seletiva neonatal da recaptação de serotonina (ISNRS) pode estar associada a fenótipo hipofágico na vida adulta. Nós acreditamos que esse fenótipo se deve a maior atividade da via anorexígena no Arc. Diante disso, este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da ISNRS sobre o peso corporal, o comportamento alimentar e a atividade neuronal no Arc em resposta aos agonistas dos receptores 5HT2C e 5-HT1B em ratos adultos. Ratos Wistar foram tratados com solução salina (SAL, n=15) ou fluoxetina (FLUO, n=15) do 1° ao 21° dia pós-natal. Aos 170 dias de vida foi realizada cirurgia de estereotaxia para implantação de cânula no ventrículo lateral direito através da qual foram feitas as injeções intracerebroventricular (ICV). Aos 180 dias foi realizada a pesagem dos animais seguida de injeção ICV de ACSF, agonista do receptor 5-HT2C ou agonista do receptor 5-HT1B, obtendo-se seis grupos experimentais (n=5 animais/grupo): SAL+ACSF, SAL+AG.1B, SAL+AG.2C, FLUO+ACSF, FLUO+AG.1B e FLUO+AG.2C. A partir desses grupos, foi analisada a sequência comportamental de saciedade (SCS) e o número de células reativas contra proteína c-fos no Arc. Comparado ao grupo SAL, o grupo FLUO apresentou menor peso corporal. A ISNRS também promoveu maior ingestão alimentar frente ao estímulo com o agonista 5-HT2C, menor taxa alimentar após injeção de ACSF e antecipação do ponto de saciedade após estímulo com o agonista 5-HT1B. Além disso, o grupo FLUO apresentou maior número de células reativas contra c-fos no Arc frente ao agonista 5-HT2C. Corroborando nossa hipótese, a ISNRS parece promover aumento da atividade da via anorexígena no Arc na idade adulta, apesar de não ter ocorrido redução da ingestão alimentar. Em conjunto, os achados deste estudo sugerem que o menor peso corporal em ratos adultos submetidos à ISNRS pode ser consequência do aumento da atividade da via anorexígena no Arc, o que pode contribuir para um aumento do gasto energético.
Phenotypic plasticity comprises the ability of an organism to develop morphological and functional adaptations in response to environmental stimuli. This capacity is more intense during pregnancy and lactation (developmental plasticity) and may be associated with consequences throughout life. In this context, serotonin (5-HT) has a decisive role in the development of the central nervous system. Furthermore, 5-HT participates in homeostatic central control of energy balance in the arcuate nucleus (Arc) of the hypothalamus, stimulating satiety and energy expenditure through inhibition of orexigenic neurons and stimulation anorectic neurons via 5-HT1B receptors and 5-HT2C, respectively. Thus, the modification of serotonergic activity during development can change the regulation and expression of feeding behavior in the long term. Previous studies from our research group showed that neonatal selective serotonin reuptake inhibition (NSSRI) may be associated with hypophagic phenotype in adulthood. We believe that this phenotype is due to increased activity of anorectic via in the Arc. Thus, this study aimed to evaluate the effects of NSSRI on body weight, feeding behavior and neuronal activity in the Arc in response to 5-HT2C and 5-HT1B receptors agonists in adult rats. Wistar rats were treated with saline (SAL, n=15) or fluoxetine (FLUO, n=15) from 1° to 21° postnatal day. At 170 days, stereotactic surgery was performed for implantation of a cannula in the right lateral ventricle through which were made the intracerebroventricular injections (ICV). At 180 days, weighing of animals was performed followed by ICV injections of ACSF, 5-HT2C or 5-HT1B receptors agonists, resulting in six experimental groups (n=5 animals/group): SAL+ACSF, SAL+AG.1B, SAL+AG.2C, FLUO+ACSF, FLUO+AG.1B and FLUO+AG.2C. From these groups, behavioral satiety sequence (SCS) and number of reactive cells against c-fos protein in the Arc were analyzed. Compared to the SAL group, FLUO group had lower body weight. NSSRI also promoted greater food intake after stimulation with 5-HT2C receptor agonist, lower feed rate after injection of ACSF and anticipation of the point of satiety after stimulation with 5-HT1B receptor agonist. Furthermore, FLUO group had a higher number of reactive cells against c-fos in the Arc after stimulation with 5-HT2C receptor agonist. Corroborating our hypothesis, NSSRI seems to promote increased anorexigenic pathway activity in the Arc in adulthood, despite not having been reduced food intake. Together, the findings suggest that lower body weight in adult rats submitted to NSSRI may be a consequence of increased anorexigenic pathway activity in the Arc, which can contribute to an increase in energy expenditure.

Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2017-05-12T18:27:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação.pdf: 1932966 bytes, checksum: e5c87665e0d22baf18bc136471875d00 (MD5)
Made available in DSpace on 2017-05-12T18:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação.pdf: 1932966 bytes, checksum: e5c87665e0d22baf18bc136471875d00 (MD5) Previous issue date: 2016-03-04
FACEPE
Diversos estudos evidenciaram os efeitos da desnutrição perinatal sobre alterações morfofisiológicas no organismo adulto. No presente estudo, foi verificado os efeitos da desnutrição proteica perinatal sobre a expressão de receptores 5-HT1B nos núcleos paraventricular (PVN) e arqueado do hipotálamo, e no Caudado-Putamem (CPu) e Amigdala Basolateral (ABL). Além disso, foi analisado ainda os efeitos que essa desnutrição promoveu sobre a ativação neural no CPu, ABL e na Amigdala Central (AC). Foram utilizados dois principais grupos de ratos da linhagem Wistar: um grupo submetido a desnutrição proteica (8% caseína) durante o período da gestação e lactação; e o outro com dieta padrão (17% caseína). No 35º dia de vida os animais foram subdivididos em quatro grupos: Desnutrido que recebeu solução salina (D), Desnutrido que recebeu d-fenfluramina (DF), Controle que recebeu solução salina (C) e Controle que recebeu d-fenfluramina (CF), nas proporções de 3mg/kg p.c para fenfluramina e 1ml/kg para solução salina. Observou-se maior número de células imunorreativas (p<0,01) ao 5-HT1B na ABL no grupo desnutrido (33,8 ± 10,05, n=4) comparado ao controle (5,3 ± 1,53, n=3), enquanto que no CPu não houve modificação. No hipotálamo, foi verificado aumento de células 5-HT1B no grupo desnutrido comparado ao controle nos núcleos ARC (C= 14,3 ± 6,66, n=3 versus D= 26,8± 4,19, n=4, p<0,01) e PVN (C= 30 ± 8,19, n=3 versus D= 58,3 ± 16,66, n=4, p<0,05). Após a administração de fenfluramina, houve aumento no número de neurônios imunorreativos a proteína FOS no grupo desnutrido fenfluramina comparado ao desnutrido salina no CPu (D= 26,5 ± 21,56, n=4 versus DF= 106,5 ± 40,45, n=4, p<0,05) e AC (D= 13,6 ± 8,17, n=5 versus DF= 64 ± 31,48, n=3, p<0,05). No grupo controle, a fenfluramina não alterou o número de células ativadas no CPu (C= 16,5 ± 7,78, n=2 versus CF= 63 ± 39,28, n=3, p>0,05) e AC (C= 6,3 ± 4,93, n=3 versus CF= 44 ± 26,33, n=5, p>0,05). Não houve alteração no número de células imunorreativas a proteína FOS na ABL no grupo controle (C= 5 ± 3,37, n=4 versus CF= 21,3 ± 11,35, n=4, p>0,05) ou desnutrido (D= 20 ± 13,64, n=4 versus DF= 14,4 ± 3,13, n=5, p>0,05) quando comparados aos seus respectivos grupos salina. Este estudo evidenciou que a desnutrição proteica no período perinatal acarreta aumento na expressão de células imunorreativas contra o receptores 5-HT1B nos núcleos ARC, PVN e ABL tal como aumenta a ativação de neurônios no CPu e na AC em resposta a fenfluramina.
Several studies have shown the effects of perinatal malnutrition on morphological and physiological changes in the adult organism. In the present study was investigated the effects of perinatal protein malnutrition on the expression of 5-HT1B receptors in the paraventricular nucleus (PVN) of the hypothalamus, arcuate, caudate-putamen (CPu) and basolateral amygdala (GLA). In addition, it was analyzed the effects that malnutrition promoted on the neural activation of the CPu, Central GLA and the amygdala (AC). Two main groups of rats Wistar were used: A group subjected to protein malnutrition (8% casein) during the period of pregnancy and lactation and the other with standard diet (17% casein). On the 35th day of life the animals were divided into four groups: Malnourished received saline (D) Malnourished that received dfenfluramine (DF), control which received saline (C) and control that received dfenfluramine (CF) in the proportions of 3 mg/kg of BW fenfluramine and 1 ml/kg for saline. There were a higher number of immunoreactive cells (p <0.01) to the 5-HT 1B in the ABL in the undernourished group (33.8 ± 10.05, n = 4) compared to the control (5.3 ± 1.53, n = 3), whereas in the CPu no change was observed. In the hypothalamus, it was observed increase of 5-HT 1B cells in the undernourished group compared to the control in ARC cores (C = 14.3 ± 6.66, n = 3 and D = 26.8 ± 4.19, n = 4, p <0.01) and the PVN (C = 30 ± 8.19, n = 3 and D = 58.3 ± 16.66 n = 4, p <0.05). After administration of fenfluramine, there was an increase in the number of immunoreactive neurons FOS protein in malnourished group fenfluramine compared to saline undernourished in CPu (D = 26.5 ± 21.56, n = 4 and DF = 106.5 ± 40.45 , n = 4, p <0.05) and AC (D = 13.6 ± 8.17, n = 5 and 31.48 ± DF = 64, n = 3, p <0.05). In the control group, fenfluramine did not change the number of activated cells in CPu (C = 16.5 ± 7.78, n = 2 and CF = 63 ± 39.28, n = 3, p> 0.05) and AC (C = 6.3 ± 4.93, n = 3 and CF = 44 ± 26.33, n = 5, p> 0.05). There was no change in the number of immunoreactive cells FOS protein in the ABL in the control group (C = 5 ± 3.37, n = 4 and CF = 21.3 ± 11.35, n = 4, p> 0.05) or malnourished (D = 20 ± 13.64, n = 4 versus DF = 14.4 ± 3.13, n = 5, p> 0.05) when compared to their saline groups. This study showed that the protein malnutrition in the perinatal period causes an increase in the expression of immunoreactive cells against the 5-HT 1B receptors in the ARC cores, PVN and ABL as well as increases the activation of neurons in the CPu and AC in response to fenfluramine.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-06-14T12:41:46Z No. of bitstreams: 1 renataromanholipinhati.pdf: 1636769 bytes, checksum: 2040ff1c86aef423fdd77a3ebd21b33d (MD5)
Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-06-29T12:10:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 renataromanholipinhati.pdf: 1636769 bytes, checksum: 2040ff1c86aef423fdd77a3ebd21b33d (MD5)
Made available in DSpace on 2017-06-29T12:10:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 renataromanholipinhati.pdf: 1636769 bytes, checksum: 2040ff1c86aef423fdd77a3ebd21b33d (MD5) Previous issue date: 2011-08-16
FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais
O triptofano é um aminoácido essencial e precursor da síntese de serotonina (5-HT). Variações nos níveis plasmáticos de 5-HT estão relacionadas com alterações de humor, ansiedade, depressão, sono, fadiga e supressão de apetite. Neste estudo foi desenvolvido um método simples, rápido e sensível para a quantificação de triptofano em plasma e que emprega a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector diode array (DAD) no comprimento de onda fixo de 267 nm. A separação foi realizada em coluna analítica ACE 5 C18 (150 mm x 4,6 mm de diâmetro interno e tamanho da partícula de 5 µm), o tempo de corrida foi de 10 min. A fase móvel foi constituída por solução de acetato de sódio 5 mM e acetonitrila (92:8, v/v) e modo de eluição isocrática (1 mL min-1). A preparação da amostra consistiu na desproteinização do plasma utilizando ácido perclórico 8%. O triptofano foi caracterizado no tempo de retenção de 5 min. A especificidade foi monitorada utilizando matrizes normais, lipêmicas e hemolizadas, não sendo observado nenhum pico interferente no tempo de retenção do triptofano. A linearidade do método foi detectada entre 0,5 a 30,0 µg mL-1 e os coeficientes de variação do teste de precisão foram calculados intra e inter-dia para três concentrações (2,5; 5,0 e 15,0 µg mL-1) apresentando variações de 0,26 a 1,30% (intra-dia) e 3,07 a 3,97% (inter-dia) respectivamente. Exatidão e recuperação satisfatórias foram obtidas por este método, além de utilizar pequenas quantidades de solvente orgânico, caracterizando a técnica como eficiente e ecologicamente amigável.
Trytophan is an essential amino acid and a serotonin (5-HT) synthesis precursor. Altered plasma levels of 5-HT are related to humor and behavioral alterations, anxiety, depression, sleep, fatigue and appetite suppression. In this study, a simple, fast, sensitive and specific high-performance liquid chromatography (HPLC) method was developed for determination of tryptophan with diode array detection (DAD) setting at programmed wavelength (λ = 267 nm). The separation was carried out on an analytical column ACE 5 C18 (150 mm x 4.6 mm internal diameter, 5 μm particle size) in less than 10 min. Mobile phase consisted of 5 mM sodium acetate and acetonitrile (92:8, v/v), isocratically eluted (1 mL min-1). Sample preparation consisted of plasma deproteinization with 8% perchloric acid solution. Tryptophan was characterized by a retention time of 5 min. Specificity was monitored using lipemic and hemolysate plasma samples and any peak was observed at the same retention time of tryptophan. A linear range was detected from 0.5 to 30.0 µg mL-1 and coefficients of variation calculated from intra and inter-day from 3 concentration (2.5; 5.0 e 15.0 µg mL-1) assays precision were 0.26 – 1.30% and 3.07 – 3.97% respectively. Satisfactory accuracy and recovery were obtained by this method, and use small amounts of organic solvent, characterizing the technique as an efficient and eco-friendly.

Analisamos o efeito do sistema serotoninérgico no desenvolvimento somático e na ontogênese de reflexos dos filhotes, cujas mães foram submetidas a tratamento farmacológico durante a prenhez. Ratas wistar prenhas foram divididas em dois grupos (N=11): Grupo AD, tratadas com água destilada, Grupo Sert, tratadas com sertralina 30mg/kg, 0,5mL/100g, s.c. Um dia após o parto 8 neonatos (4 machos e 4 fêmeas) foram mantidos com suas mães do 1º ao 21º dia pós-natal. O investigador cego avaliou o crescimento somático, características físicas e maturação de reflexos. Aos 22 e 60 dias de idade os encéfalos foram processados com técnicas de imunoistoquímica contra 5-HT. O grupo Sert, macho ou fêmea, apresentou atraso no crescimento somático e na maturação de alguns reflexos. A quantidade de neurônios 5-HT-IR foi alterada nos núcleos da rafe nos ratos aos 22 dias de idade, mas não aos 60 dias. A análise da morfometria dos neurônios 5-HT-IR, em ambas as idades estudadas, revelou alterações em sua forma. Os resultados deste estudo demonstram a ação inibitória da serotonina sobre o crescimento somático e desenvolvimento sensório-motor bem como alterações na quantidade e na forma dos neurônios 5-HT em ratos.
The aim of the present study was to investigate the effects of prenatal sertraline exposure on offspring in growth and somatic development and even in the maturation of reflex in rats. Female wistar rats were treated with sertraline (Sert, 30 mg/kg, 0,5 mL/100 g, s.c., N=11) or distilled water (Control, N=11) during the whole pregnancy. After the birth, 8 pups (4 males and 4 females) were kept in each litter during lactation. The blind investigator evaluated indicators of general body growth parameters, somatic maturation and ontogeny of reflex during the period of lactation. The central nervous system alterations were approached by 5-HT-IR using the ABC-DAB-Peroxidase techniques in animals at the 22st and 60st postnatal day. The Sert group, showed reduction on the somatic growth and on the maturation of reflexes. There was reduction in the amount of the 5-HT-IR neurons in the raphe nuclei at the 22st postnatal day, but did not change at the 60st. The morphometric analysis revealed alterations in the shape of these cells at the 22st and 60st postnatal day. An inhibitory action of the 5-HT on the somatic and sensory-motor growth in these rats was also observed. After the lactation period, the amount and shape of the 5-HT neurons were altered.

A habenula lateral (LHb) inibe neurônios dopaminérgicos no mesencéfalo através de um nodo GABAérgico no tegmento mesopontino, o núcleo tegmental rostromedial (RMTg). Ambos a LHb e o RMTg também projetam para o núcleo dorsal da rafe (DR). A organização das projeções da LHb e do RMTg para o DR foi investigada através de injeções de um traçador anterógrado na LHb ou no RMTg e confirmada com injeções de traçadores retrógrados. Para identificar o fenótipo neuroquímico das projeções RMTg-DR, combinamos a hibridização in situ para mRNA de GAD67 com a detecção imunoistoquímica de traçadores retrógrados injetados no DR. Caracterizamos as subdivisões-alvo das projeções RMTg-DR através de dupla-imunofluorescência para o traçador anterógrado injetado no RMTg e serotonina ou o transportador vesicular de glutamato do tipo 3. Detectamos uma projeção focal direta da divisão medial da LHb para a parte caudal do DR. Em contraste, projeções GABAérgicas robustas do RMTg foram direcionadas para uma subdivisão central do DR enriquecida em neurônios presumidamente glutamatérgicos.
The lateral habenula (LHb) inhibits mesencephalic dopamine neurons through a mesopontine GABAergic node, the rostromedial tegmental nucleus (RMTg). Both LHb and RMTg also project to the dorsal raphe nucleus (DR). The organization of LHb and RMTg projections to the DR was investigated using anterograde tracer injections into the LHb or RMTg and confirmed with retrograde tracer injections. To identify the neurochemical phenotype of RMTg-DR projections, we associated in situ hybridization for GAD67 mRNA with immunohistochemical detection of retrograde tracers deposited in the DR. DR target regions of RMTg projections were characterized using double-imunofluorescence techniques for the anterograde tracer deposited into the RMTg and either serotonin or the type 3 vesicular glutamate transporter. We detected a focal direct projection from the medial LHb division to the caudal DR. In contrast the RMTg emits robust GABAergic projections to a central DR subdivision rich in presumptive glutamatergic neurons.

Foram estudados os efeitos de um estresse social, produzido pela introdução de um rato, na condição de \"intruso\", por uma hora, em uma comunidade formada por três elementos (macho dominante, macho submisso e fêmea), com relações sociais pré-estabelecidas, sobre o comportamento, a bioquímica e a atividade imune inata de neutrófilos. Os animais intrusos apresentaram, em relação ao grupo controle, tendência a serem mais ativos e menos ansiosos no Campo Aberto e no Labirinto em Cruz Elevado, níveis significantemente mais elevados de corticosterona sérica, burst oxidativo induzido por SAPI significantemente aumentado e, tanto no córtex frontal como no hipotálamo, sistemas serotonérgicos significantemente mais ativados. Os dados, foram interpretados como decorrentes de uma reação de estresse preparando o organismo dos animais intrusos para novo desafio: um eixo HPA mais ativado, com conseqüências favoráveis para uma ação rápida; uma resposta imune inata mais efetiva, para defesa contra possíveis injúrias e uma neuroquímica denotando um refreamento de comportamentos impulsivos, permitindo escolhas mais adequadas em contexto de confrontação social. Essa reação tornou os organismos mais ativos e eficazes, um exemplo do aspecto positivo do estresse. Demonstrou-se, também, a existência e importância das grandes diferenças individuais e necessidade de se tratar estatisticamente e interpretar com muito cuidado os efeitos de estímulos estressores mais sutis, onde essas diferenças despontam com menor clareza e podendo induzir a erro interpretativo.
The present works shows the effects of social stress, produced by introducing a rat, in the condition of \"intruder\", for one hour, in a community formed for three elements namely a dominant male , submissive male and a female, with preset social relations, concerning their behaviour, the biochemistry and the innate immune activity of neutrophils. The intruder animals displayed, in relationship to the control group, a tendency towards being more active and less anxious in the Open Field and the Plus Maze, as well as of serum corticosterone levels with higher values, as well as its oxidative burst being significantly increased. And, as in the frontal cortex as in hypothalamus is concerned, the author found significant activation of serotonergic systems. The data, had been indicative of the function of the reaction of stress in order to prepare the organism for a challenge: a activated HPA axis was increased, with favorable consequences for a fast action; an innate immune reply more effective and neurochemistry denoting cohibition of impulsive behaviours, allowing more adjusted choices in the context of social confrontation This reaction turned the organisms more active and efficient, in an example of the positive aspect of stress reaction. The data also demonstrated the existence and importance of the great individual differences and the need of keeping in mind the statistic approach and very careful interpretation of subtle stressors, whenever these differences appear clearly and may eventually induce to an interpretative error.

Com o objetivo de perceber de se o treino afeta a comunicação química do cérebro canino de uma forma permanente, estudaram-se dois grupos de cães: um grupo de cães treinado com marcadores e outro grupo sem contacto com nenhum tipo de treino. Foram recolhidas amostras sanguíneas dos dois grupos e medidas as concentrações de serotonina e dopamina. Os valores médios encontrados para a serotonina e dopamina para o grupo de controlo foram de 269.66 μg/l 56,97 ng/l respetivamente. Para a serotonina, a comparação das médias revelou diferenças entre os grupos (p=0,087), havendo uma diminuição no grupo de cães treinados. Já a dopamina não se verificou ser diferente entres os dois grupos estudados (p=0,2). As vias dopaminérgicas ativadas em situações de compulsão/adição são as mesmas que se ativam no circuito do reforço. Também os valores de serotonina estão diminuídos nesses casos, sugerindo que poderá haver uma componente compulsiva/aditiva em cães treinados; ABSTRACT: The effect of training markers in the cerebral neurochemistry of the dog To understand if dog training affects permanently the chemical communication of canine brain, two groups of dogs were studied: one group had dogs trained with markers and the other one had dogs without any type of training. Blood samples were collected from both groups and concentrations of serotonin and dopamine were measured. The mean values found for serotonin and dopamine for the control group were 269.66 μg/l and 56.93 ng/l respectively. Comparison of means of the groups revealed different values of serotonin between the two groups (p-value= 0,087) having a decrease in serotonin in the trained dog group. As for dopamine, it was not found to be different between the two groups studied (p-value=0,2). The dopaminergic pathways activated in compulsion/addition situations are the same ones that activate in the reinforcement circuit. Also, serotonin levels are decreased in these cases, suggesting that there may be a compulsive/additive component in trained dogs.

A epilepsia é a condição crônica mais prevalente dentre as doenças neurológicas graves, associada com taxas significativas de morbidade e mortalidade. Pacientes com epilepsia farmacorresistente possuem uma taxa de mortalidade 2 a 3 vezes maior que indivíduos sem epilepsia. A epilepsia do lobo temporal (ELT) é a principal causa de epilepsia farmacorresistente nos adultos e também o protótipo da epilepsia cirurgicamente tratável, portanto, com maior acessibilidade para estudo de possíveis mecanismos epileptogênicos. Esclerose hipocampal (EH) é o achado neuropatológico mais comum em pacientes com ELT. Evidências, baseadas em experimentos animais e estudos em humanos, sugerem que as vias serotoninérgicas desempenham um importante papel na epileptogênese. Pacientes com ELT, causadas pela EH, apresentam maior prevalência de transtornos do humor e psicose contribuindo para uma pior qualidade de vida, com consequente impacto negativo nas respostas terapêuticas farmacológicas e cirúrgicas. Além disso, alguns estudos sugerem a existência de um mecanismo patogênico operante comum entre estas condições. Portanto, esta é um importante variável para análise. O objetivo desse estudo foi correlacionar as variáveis clínicas da epilepsia e a presença de transtornos psiquiátricos coexistentes com a concentração de serotonina (5-HT), a densidade dos receptores serotoninérgicos e a densidade do transportador serotoninérgico (5-HTT) no hipocampo dos pacientes com ELT-EH, que foram submetidos à cirurgia devido à presença de epilepsia farmacorresistente. Foram avaliadas amostras de 44 hipocampos de pacientes cirurgicamente tratados para ELT-EH. A concentração de 5-HT foi avaliada por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com detecção por fluorescência. 5-HTT e os receptores serotoninérgicos 5-HT1A, 5-HT2A, 5-HT6 e 5-HT7 foram avaliados por Western Blot. Níveis mais baixos de concentração de 5-HT estiveram associados com a presença de crises TCG (Wilcoxon-Mann-Whitney; p = 0.019). A densidade aumentada do receptor 5-HT1A esteve associada com maior duração da epilepsia (coeficiente de correlação de Spearman: p = 0.040) e a densidade diminuída do receptor 5-HT6 esteve associado com presença de EME (Wilcoxon-Mann-Whitney: p = 0.0027). A densidade dos receptores 5-HT2A e 5-HT7 e do 5-HTT não estiveram associadas com variáveis clínicas da epilepsia. A concentração de 5-HT, a densidade dos receptores e a densidade de 5-HTT não estiveram associadas à presença dos transtornos psiquiátricos neste grupo de pacientes. Nossos achados sugerem que as vias serotoninérgicas estão associadas com mecanismos de epileptogênese. Não foi evidenciado associações entre as vias serotoninérgicas e a presença de comorbidades psiquiátricas neste grupo de pacientes com ELT-EH
Epilepsy is the most prevalent neurological condition and it is associated with significative morbidities and mortalities rates. Patients with refractory epilepsy have a 2- to 3-fold higher mortality rate than people without epilepsy. Temporal lobe epilepsy (TLE) is the most common form of adult drug-resistant epilepsy. It is also the prototype of a surgically treatable epilepsy and because of that it is the most accessible for studies focused in epileptogenesis. Hippocampal sclerosis (HS) is the most common neuropathological finding in patients with TLE. Evidences from experimental, clinical and image studies suggest that the serotonergic system play an important role in epileptogenesis. Patients with TLE-HS have a higher prevalence of mood disorder and psychosis contributing for a worse quality of life with and consequent negative impact in pharmacological and surgical responses. Furthermore, studies suggest a common pathogenic mechanism operant in both conditions. Therefore, this is an important analytical variable. The objective of this study was to correlate clinical variables of epilepsy and the presence of psychiatric disease with serotonin (5-HT) concentration, serotonergic receptor density and serotonergic transporter (5-HTT) density in the hippocampus of TLE-HS patients submitted for surgery due to refractory epilepsy. It was analyzed 44 hippocampal tissue samples from surgical treated TLE-HS patients. 5-HT concentration was assessed by high pressure liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection. 5-HTT and serotonergic receptors 5-HT1A, 5-HT2A, 5-HT6 and 5- HT7 were assessed by Western Blotting. Lower levels of 5-HT concentration were associated with the presence of generalized tonic-clonic seizures (Wilcoxon-Mann-Whitney; p = 0.019). A higher 5-HT1A receptor density was associated with longer epilepsy duration (Spearman correlation coefficient: p = 0.040). Lower 5-HT6 receptor density was associated with the presence of status epilepticus (Wilcoxon-Mann-Whitney: p = 0.0027). 5-HT2A receptor, 5- HT7 receptor and 5-HTT densities were not associated with clinical variables of epilepsy. 5-HT concentration, serotonergic receptors and transporter densities were not associated with the presence of psychiatric disease in this group of patients. Our findings suggest that the serotonergic pathways are associated with epileptogenesis mechanisms. It was not evidenced any association between serotonergic pathways and psychiatric comorbidities in this group of TLE-HS patients

INTRODUÇÃO: Testes provocativos com drogas serotonérgicas não apresentaram resultados consensuais em pacientes com TOC, sugerindo que a atividade serotonérgica seja heterogênea neste transtorno. É possível que a disfunção serotonérgica se relacione à resistência ao tratamento com inibidores de recaptura de serotonina (IRS) neste transtorno. O objetivo deste estudo foi comparar a atividade serotonérgica em pacientes com TOC resistente e responsivo ao tratamento com IRS e voluntários normais através de teste provocativo com citalopram. MÉTODOS: Foram estudados 30 pacientes com TOC resistente a IRS (RT), 30 pacientes com TOC respondedor (RP) e 30 voluntários sem transtorno mental (CN) pareados por sexo e idade. Cada indivíduo recebeu 20 mg de citalopram intravenoso. Foram dosados: prolactina, cortisol, hormônio de crescimento no plasma e serotonina em plasma rico em plaquetas nos seguintes tempos: -20, 0, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140 e 160 minutos. Como medidas da variação hormonal foram comparadas a variação percentual máxima (delta%) e a área sob a curva da variação. RESULTADOS: O citalopram não induziu sintomas ansiosos ou piora dos sintomas obsessivo-compulsivos nos pacientes. Também não houve mudanças significativas na concentração periférica de serotonina e na concentração de GH. A droga induziu um pico de secreção de prolactina no grupo controle (delta%=65,76 ± 105,1) maior que nos grupos RT e RP (RT delta%=17,41 ± 31,06; RP delta%=15,87 ± 31,71; p<0,05 em relação ao grupo controle). A secreção de cortisol mostrou-se atenuada apenas no grupo RT: (RT delta%=20,98 ± 58,14; RP delta%= 47,69 ± 66,94; CN delta%= 63,58 ± 88,4; p<0,05). CONCLUSÕES: Tanto pacientes resistentes como respondedores ao tratamento com IRS apresentaram resposta atenuada de prolactina ao citalopram em comparação a voluntários saudáveis, mas apenas pacientes resistentes apresentaram também resposta atenuada de cortisol, sugerindo maior disfunção serotonérgica neste grupo.
INTRODUCTION: Serotonergic pharmacological challenge tests have failed to produce consensual results in patients with OCD diagnosis, suggesting a heterogeneous 5-HT activity in this disorder. It is possible that serotonergic dysfunction is related with inadequate response to treatment with serotonin reuptake inhibitors (SRI). The aim of this study was to compare the neuroendocrine response to a serotonergic challenge in serotonin reuptake inhibitors treatment resistant and responders OCD patients and healthy volunteers. Methods: Thirty OCD resistant patients, 30 responders patients and 30 healthy volunteers, age and sex matched, were included. Each subject received 20 mg of intravenous citalopram. Prolactin, cortisol, growth hormone and serotonin were determined at the following times after the onset of citalopram infusion: -20, 0, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140 and 160 minutes. The maximal percentage variation (delta%) and area under the curve were compared as measures of hormonal variation. RESULTS: Citalopram has not induced any worsening of anxious or obsessive-compulsive symptoms among patients. No significant changes were observed either at platelet rich plasma serotonin concentration or at plasma growth hormone concentration. Citalopram has induced an increase in prolactin secretion in the control group (delta%=65.76 ± 105.1) while RT and RP groups showed blunted prolactin response (RT delta%=17.41 ± 31.06; RP delta%=15.87 ± 31.71; p<0.05). The cortisol response to citalopram was attenuated only in the RT group: (RT delta%=20.98 ± 58.14; RP delta%= 47.69 ± 66.94; CN delta%= 63.58 ±88.4; p<0.05). CONCLUSIONS: We concluded that either treatment resistant as responders patients have blunted prolactin response to citalopram, but only resistant patients also show an attenuated cortisol response, suggesting a more disrupted central serotonergic transmission in this group.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lucianasecchesdefreitas_tese.pdf: 1318047 bytes, checksum: 2f94fa7d973d746d2344caf42a9565ec (MD5) Previous issue date: 2011-09-08
Introduction: Serotonin is an important neurotransmitter in the central nervous system. It has been suggested that serotoninergic dysfunction mediates the pathophysiology of temporomandibular dysfunction (TMD). Polymorphisms in HTR2A gene can alter the number of receptors in the serotoninergic system, causing nociceptive pain and hyperalgesia in the TMD. Objective: The aim of this study is to determine the prevalence of the 102T-C polymorphism of HTR2A in patients with and without TMD. Casuistic and Method: This cross-sectional study examined 100 patients as index cases and 100 persons as controls, of both genders. DNA was extracted from peripheral blood leukocytes, and the site that encompassed the polymorphism was amplified by PCR-RFLP. Results: There were significantly more females among index cases compared with the control group (p<0.05). The CC genotype of the 102T-C polymorphism was more frequent in patients with TMD versus controls (OR: 2.25; CI 95%: 1.13-4.46; p<0.05). Conclusions: The 102T-C polymorphism of HTR2A gene is linked to TMD in the studied population.
Introdução: A serotonina é um importante neurotransmissor no sistema nervoso central. Tem sido sugerido que a disfunção serotoninérgica é responsável pela fisiopatologia da disfunção temporomandibular (DTM). Polimorfismos no gene HTR2A podem alterar o número de receptores do sistema serotoninérgico, ocasionando a dor nociceptiva e hiperalgesia na DTM. Objetivo: Determinar a prevalência do polimorfismo 102T-C no gene HTR2A em pacientes com e sem DTM. Casuística e Método: Estudo em corte transversal no qual foram avaliados 100 pacientes como casos-índice e 100 indivíduos como controles, de ambos os gêneros. O DNA foi extraído dos leucócitos do sangue periférico e o local que abrange o polimorfismo foi amplificado por PCR-RFLP. Resultados: O gênero feminino foi significativamente maior nos casos do índice em comparação com o grupo controle (p <0,05). O genótipo CC do polimorfismo 102T-C foi mais frequente em pacientes com DTM em comparação aos controles (OR: 2,25 IC 95%: 1,13-4,46, p<0,05). Conclusões: O polimorfismo 102T-C no gene HTR2A está associado à DTM na população estudada.

Introdução: O óxido nítrico (NO) tem sido relacionado como um importante neuromodulador envolvido com a neurobiologia da adaptação ao estresse e da depressão. De fato, a administração sistêmica ou intra-hipocampal de inibidores da NO sintase neuronial (nNOS) induz efeitos do tipo antidepressivo em modelos animais. Evidências recentes indicam que os efeitos sistêmicos dos inibidores da nNOS são dependentes dos níveis de serotonina no encéfalo. O sistema serotoninérgico do hipocampo dorsal, por ativação dos receptores serotoninérgicos do tipo 1A (5HT1A), facilita a adaptação ao estresse e contribui para os efeitos comportamentais de drogas antidepressivas. Portanto, o objetivo do presente estudo foi testar a hipótese de que o efeito do tipo antidepressivo induzido pela administração hipocampal de inibidores da nNOS seria mediado pela facilitação da neurotransmissão serotoninérgica local e subseqüente ativação de 5HT1A. Métodos: Após cirurgia estereotáxica, ratos Wistar com cânulas-guia direcionadas ao hipocampo dorsal foram submetidos a sessão de pré-teste (PT 15 minutos de nado) e receberam administrações locais das drogas: N-propil-L-arginina (NPA, inibidor seletivo da nNOS: 0,00001 - 1 nmol/0,5 µL), fluoxetina (SSRI: 1, 3 e 10 nmol/0,5 µL), WAY100635 (antagonista seletivo para 5HT1A: 1, 3 e 10 nmol/0,5 µL) ou veículo (0,5 µL). 24h depois, o tempo de imobilidade foi registrado em uma sessão de 5 minutos de nado. Todos os protocolos foram aprovados por um comitê de ética local (Proc. No 08.1.1133.53.4) Resultados: A administração intra hipocampal de NPA ou fluoxetina reduziu significativamente o tempo de imobilidade em animais submetidos ao teste do nado forçado, um efeito tipo antidepressivo. A administração de WAY100635 não induziu efeito por si, mas foi capaz de bloquear os efeitos induzidos por fluoxetina ou NPA. Conclusões: A inibição da nNOS, pelo NPA, ou a inibição da recaptação de serotonina, pela fluoxetina, no DH induziu efeito do tipo antidepressivo de similar magnitude. O fato de que o pré-tratamento com WAY100635 foi capaz de bloquear os efeitos induzidos por NPA e fluoxetina indica que ambos os efeitos são mediados por facilitação da neurotransmissão serotoninérgica local e subseqüente ativação de 5HT1A. Assim, esses resultados sugerem que níveis aumentados de NO no DH poderiam levar a um déficit na neurotransmissão serotoninérgica local e, portanto, predispor ao desenvolvimento das conseqüências comportamentais do estresse.
Introduction: Nitric oxide (NO) has been suggested to play an important role in the neurobiology of stress adaptation and depression. In fact, systemic or hippocampal administration of neuronal NO synthase (nNOS) inhibitors induces antidepressant-like effects in animal models. Recent evidence indicates that the systemic effects of nNOS inhibitors are dependent on serotonin levels in the brain. The serotonergic system of the dorsal hippocampus (DH), through the activation of serotonin 1A (5-HT1A) receptors, is proposed to mediate stress adaptation and the behavioral effects of antidepressant drugs. Therefore, the aim of the present study was to test the hypothesis that the antidepressant-like effects induced by nNOS inhibition into the hippocampus would be mediated by a facilitation of the local serotonergic neurotransmission and subsequent 5-HT1A receptor activation. Methods: Male Wistar rats with guide-cannulae aimed at the DH were submitted to the pretest session (PT - 15 minutes of swimming) and received local administrations of the drugs: n-propyl-L-arginine (NPA, selective nNOS inhibitor: 0.00001 - 1 nmol/0.5 µL), fluoxetine (SSRI: 1, 3 and 10 nmol/0.5 µL), WAY100635 (selective 5-HT1A antagonist: 1, 3 and 10 nmol/0.5 µL) or vehicle (0.5 µL). One day later, the immobility time was registered at a 5 minutes swimming test session. All protocols were approved by a local ethical committee (Proc. N. 08.1.1133.53.4.) Results: The intrahippocampal administration of NPA or fluoxetine reduced the immobility time in animals submitted to the forced swimming test, an antidepressant-like effect in this model. WAY100635 did not induce any effect per se, but it was able to block the effects induced by fluoxetine or NPA. Conclusions: Inhibition of nNOS, by NPA, or inhibition of serotonin reuptake, by fluoxetine, in the DH induced antidepressant-like effects of similar magnitude. The fact that pretreatment with WAY100635 was able to block NPA- and fluoxetine-induced effects indicates that both effects are mediated by a facilitation of the local serotonergic neurotransmission and subsequent activation of 5-HT1A receptors. Therefore, these results suggest that increased NO levels in the DH could impair local serotonergic neurotransmission and, thus, predisposes to the development of stress-induced behavioral consequences, such as depressive-like behaviors.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2013.
Made available in DSpace on 2013-12-05T23:03:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013Bitstream added on 2014-09-24T20:28:10Z : No. of bitstreams: 1 317907.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)
O sistema venoso periférico é capaz de captar e metabolizar 5-HT e, sendo o pênis um órgão vascular, percebe-se que pouco se sabe sobre a existência e funcionalidade do sistema serotoninérgico nos tecidos penianos. O objetivo do presente trabalho foi investigar o papel do sistema serotoninérgico na função erétil de ratos, utilizando drogas que alteram a homeostase de 5-HT. Nos testes bioquímicos de captação e metabolismo de 5-HT, a exposição da veia dorsal peniana (VDP) e do corpo cavernoso (CC) à 5-HT exógena causou aumento nos níveis de 5- HIAA, sem alterar os níveis de 5-HT, sugerindo que ocorreu captação seguida de rápido metabolismo de 5-HT. Em presença de pargilina, um inibidor da monoamina oxidase (MAO), houve diminuição dos níveis de 5-HIAA, associada a um aumento dos níveis de 5-HT, indicando que a MAO está presente e funcional nestes tecidos. A fluoxetina (inibidor seletivo do transportador de 5-HT), por sua vez, não inibiu a captação de 5-HT nestes tecidos. Resultados semelhantes foram observados para inibidores não seletivos dos transportadores de noradrenalina (NET), dopamina (DAT) e de serotonina (SERT). Por outro lado, na presença de decynium-22, um inibidor não seletivo dos transportadores de cátions orgânicos (OCTs), houve uma diminuição da captação de 5-HT. Nas medidas de reatividade vascular em VDP, a 5-HT causou contração dependente de sua concentração e na presença de pargilina a curva concentração efeito induzida por 5-HT na foi inalterada, ao passo que a fluoxetina aumentou a resposta contrátil máxima, enquanto que a ketanserina, antagonista de receptor 5-HT2A/C, diminuiu a potência da 5-HT para contrair esse vaso. Nas medidas de ereção peniana em animais não anestesiados induzida por apomorfina, o tratamento com 5-HT e com ketanserina, não modificou a resposta erétil, enquanto que nos ratos tratados com pargilina e fluoxetina, houve diminuição e aumento, respectivamente, no número de ereções induzida por apomorfina. Além disso, fluoxetina induziu ereções na ausência de apomorfina. Desse modo, podemos sugerir que a fluoxetina pode ser potencialmente importante na resposta erétil de ratos e este efeito pode estar relacionado a um aumento na veno- oclusão (pelo aumento da resposta contrátil à 5-HT na VDP), mas não pela inibição da recaptação de 5-HT no tecido do pênis estudado.

Abstract : The peripheral venous system is able to take up and metabolize 5-HT. Considering the penis as a vascular tissue, little is known about the existence and function of the serotonergic system in penile tissues. The objective of the present study was to investigate the role of the serotonergic system in the erectile function of rats using drugs that alter 5-HT homeostasis. In the biochemical experiments, exposure of the dorsal penile vein (DPV) and corpus cavernosum (CC) to exogenous 5-HT causes an increase in 5-HIAA levels but not in the 5-HT levels, suggesting uptake followed by fast metabolism of 5-HT. In the presence of pargyline an inhibitor of the monoamine oxidase (MAO) decreased levels of 5-HIAA were observed, associated with increased levels of 5-HT indicating that MAO is present and functional in these tissues. The selective inhibitor of the 5-HT transporter fluoxetine had no effect on 5-HT uptake in both tissues. Similar results were observed for the inhibitors of the transporters for norepinephrine (NET), dopamine (DAT) and 5-HT (SERT). On the other hand, the presence of decynium-22, a non-selective inhibitor of the organic cation transporters (OCTs) decreased 5-HT uptake. In the vascular reactivity measurements in DPV, 5-HT caused a concentration-dependent contraction. The concentration effect curve to 5- HT in the presence of pargyline was unchanged, whereas fluoxetine increased maximal contractile response induced by 5-HT and ketanserin, a 5-HT2A/c, receptor antagonist, decreased the potency of 5-HT to induce contraction of this vein. The number of erection induced by apomorphine in unanesthetized rats was not affected by previous treatment with 5-HT and ketanserin. Treatment with pargyline and fluoxetine decreased and increased, respectively, the number of erections induced by apomorphine. Moreover, fluoxetine induced erections even in the absence of apomorphine. Our results suggest that fluoxetine can potentially be significant in erectile response of rats and this effect may be related to an increase in venous occlusion (due to the increased contractile response to 5-HT in the DPV), but not by inhibiting the 5-HT reuptake in penile tissue studied.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-20Bitstream added on 2014-06-13T18:56:17Z : No. of bitstreams: 1 possi_apm_me_arafo.pdf: 1001124 bytes, checksum: f27e32f6f59c4f36970ecef2dd4683a6 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
A cafeína é provavelmente a substância psicoativa mais consumida no mundo. Essa substância está presente em alimentos, bebidas e medicamentos, sendo esses comercializados para indivíduos de todas as idades. Apesar disto, os efeitos da cafeína sobre os adolescentes são pouco compreendidos. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar os efeitos psicomotores e neuroquímicos da cafeína em ratos adolescentes e adultos. Para tanto, ratos Wistar adolescentes (dia pós-natal 37 - 40) ou adultos (dia pós-natal 70 - 74) tiveram sua atividade locomotora registrada após injeção intraperitoneal (i.p.) de salina ou cafeína (3, 10, 30, 60 ou 120 mg/kg). Em outro experimento ratos adolescentes e adultos receberam injeção i.p. de salina ou cafeína nas doses de 30 ou 100 mg/kg e as concentrações de dopamina, serotonina e seus metabólitos foram determinadas no córtex pré-frontal medial (CPFm), núcleo acumbens (NAc), caudado putamem (CPu) e área tegmental ventral (ATV) por cromatrografia líquida de alta resolução acoplada a detector eletroquímico. Nossos resultados demonstraram que a cafeína nas doses de 10 e 30 mg/kg induziram estimulação da atividade locomotora em ambos as idades, enquanto as doses mais elevadas (60 e 120 mg/kg) somente estimulou a atividade locomotora nos animais adolescentes. A injeção aguda de cafeína na dose de 30 e 100 mg/kg aumentou as concentrações de dopamina no CPu e na ATV em ratos adolescentes, mas não em adultos, e no NAc em ambas as idades. Além disso, cafeína causou aumento das concentrações de serotonina no CPFm em ratos adultos, mas não em adolescentes; e na ATV em ambas as idades. Portanto, em ratos adolescentes a cafeína causa estimulação em uma faixa de doses mais ampla que nos adultos. A alteração causada pela cafeína sobre o sistema dopaminérgico é mais evidente em ratos adolescentes do que adultos, enquanto...
Caffeine is the most consumed psychostimulant drug in the world. This drug is present in food, beverages and medicines marketed for individuals of all ages. Despite the great consumption of caffeine containing foods by children and adolescents, few studies investigated age related effects of caffeine. Thus, we investigated caffeine-induced locomotor activity, as well as the effects of caffeine on the dopaminergic and serotoninergic neurotransmission in adolescents and adults rats in areas important for motor behavior. Adolescent (postnatal day 37-40) or adult (postnatal day 70-74) Wistar rats had their locomotor activity registered following intraperitoneal (i.p.) injection of vehicle or caffeine (3, 10, 30, 60 or 120 mg/kg). In other experiment adolescent or adult rats received acute i.p. injections of 30 or 100 mg/kg of caffeine or saline and had the tissue levels of dopamine, 3,4-dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC), homovanillic acid (HVA), serotonin and 5-hydroxiindolacetic acid (5-HIAA) in the nucleus acumbens (NAc), medial pre-frontal cortex (mPFC), caudate putamen (CPu) and ventral tegmental area (VTA) quantified by high performance liquid chromatography (HPLC). Our results showed that 10 and 30 mg/kg of caffeine induced increased locomotor activity in both adolescent and adult rats, while at the higher caffeine doses (60 and 120 mg/kg) only adolescents were stimulated. The acute injection of 30 or 100 mg/kg of caffeine increased dopamine levels in the CPu and VTA in adolescent but not in adult rats, and in NAc in both ages. Furthermore, caffeine caused an increase in the concentration of serotonine in mPCF in adult but not in adolescent rats, and in VTA in both ages. Thus, in adolescent rats caffeine causes stimulation in a wider range of doses than in adults. The changes caused by caffeine on dopaminergic system are most evident in adolescent than adult rats, while... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:03:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8816_1.pdf: 1068492 bytes, checksum: 75506251a75134f7871049031b69f94e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006
São crescentes as evidências de interação entre o sistema nervoso e o metabolismo ósseo. Estudos recentes evidenciam receptores glutamatérgicos, dopaminérgicos e serotoninérgicos nas células ósseas. No entanto ainda não está bem documentado o papel da serotonina no osso. No presente estudo, foi investigado o papel da serotonina sobre o crescimento e desenvolvimento do tecido ósseo em ratos. Foram utilizados 60 ratos machos Wistar com idades de 30 e 90 dias. Para cada idade, os animais foram divididos em dois grupos: tratado e salina. Ao grupo tratado foi administrada fluoxetina, um potente inibidor seletivo da recaptação da serotonina ISRS, em dose de 10mg/Kg p.c. (10 l/g p.c., s.c). Ao grupo salina foi administrada solução salina a 0,9% (10 l/g). Os tratamentos foram realizados diariamente nos primeiros 21 dias pós-natais dos animais. Nas idades de 30 e de 90 dias, foram coletados para análise o fêmur e o sangue dos animais. O peso corporal (S= 88,38 ± 5,9; F= 81,34*), o peso relativo do fêmur (S= 3,42 ± 0,3 ; F=3,21 ± 0,22*) e o comprimento do fêmur (S= 21,97 ± 0,62, F= 21,27± 0,78*) apresentaram redução nos animais tratados com fluoxetina aos 30 dias de vida (*p<0.05). Os níveis séricos da fosfatase alcalina (S= 74 ± 11.9; F= 100.4± 12.3*) apresentaram-se maiores nos animais tratados aos 30 dias de idade. Aos 90 dias de idade não houve diferenças para estes parâmetros entre os grupos. A densidade do fêmur e seu ângulo colo-diáfise não apresentaram diferenças entre os grupos ou idades. A redução do peso relativo e comprimento femorais entre os animais jovens tratados com ISRS sugere um efeito precoce do ISRS sobre o metabolismo ósseo. Já o aumento na atividade da fosfatase alcalina precocemente sugere que houve incremento da atividade osteoblástica em resposta à agressão farmacológica no período de aleitamento. Sendo assim, a influência da serotonina sobre o metabolismo ósseo parece ser evidente em idade precoce tendo em vista que houve recuperação dos parâmetros estudados entre os animais adultos tratados com ISRS

Orientadores: Claudia Herrera Tambeli, Maria Cecilia F. A. Veiga
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Made available in DSpace on 2018-08-03T19:04:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ting_Elizabeth_M.pdf: 3202953 bytes, checksum: 19d676f0e41c99578f051e9850374149 (MD5) Previous issue date: 2003
Mestrado

Os casos de depressão têm vindo a aumentar cada vez mais. Muitas vezes por falta de diagnóstico atempado o tratamento inicial não é eficaz, o que faz com que o número de doentes crónicos continue a aumentar, aumentando consequentemente o consumo deste tipo de medicamentos. Em Portugal, os dados publicados pela Autoridade Nacional do Medicamento e Produtos de Saúde I.P. (INFARMED) referem que o subgrupo farmacoterapêutico antidepressivos e psicotrópicos estava, em 2000, entre os 10 primeiros no que diz respeito aos encargos para o Serviço Nacional de Saúde. A prescrição dos antidepressivos de nova geração, como os inibidores selectivos da recaptação da serotonina, tem sido crescente nos últimos anos, já que apresentam menos toxicidade para o organismo e um menor número de efeitos secundários. No entanto, nem sempre esta medicação é eficaz, continuando assim a prescrever-se antidepressivos tricíclicos e inibidores da monoaminoxidase, que apresentam uma elevada toxicidade e são muitas vezes usados em actos suicidas. O objectivo a que nos propusemos com este trabalho foi desenvolver e comparar várias técnicas para a preparação de amostras, como a extracção líquido-líquido (LLE) e a extracção em fase sólida (SPE), usando diferentes solventes e tipos de enchimento para a detecção de antidepressivos em plasma e urina. Os extractos foram analisados por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) acoplada a um detector de fotodiodos (PDA). Foram estudados nove antidepressivos: amitriptilina, nortriptilina, clomipramina, dotiepina, mianserina, trazodona, fluoxetina, sertralina e protriptilina, tendo sido este último usado como padrão interno.Os parâmetros estudados foram a selectividade, recuperação e limites de detecção, tendo estes parâmetros sido avaliados de acordo com as normas internacionalmente aceites para a validação de métodos bioanalíticos. Os valores de recuperação obtidos situaram-se entre 16-82% para a LLE e 42-97% para a SPE. De um modo geral, as técnicas de SPE utilizadas demonstraram ser mais adequadas para a determinação deste tipo de compostos em fluidos biológicos, devido à presença de um número menor de interferências endógenas. Por outro lado, a simplicidade de execução desta técnica torna-a mais facilmente automatizável. Finalmente, foi ainda possível demonstrar que o tipo de equipamento analítico utilizado no decorrer deste trabalho (HPLC/PDA) é uma técnica útil e ao alcance de qualquer laboratório para uma primeira fase da optimização de processos extractivos, reservando-se técnicas mais dispendiosas [como por exemplo LC/MS (MS) ou UPLC/MS (MS)] para a posterior validação dos métodos analíticos desenvolvidos.
Depression situations are increasing every year. Initial treatment measures are often non-effective, and this can be due to the lack of an early diagnosis, leading to an increase in the number of patients with chronic disease. As a consequence, the consumption of antidepressant drugs also increases. In Portugal, and according to the published data by Autoridade Nacional do Medicamento e Produtos de Saúde I.P. (INFARMED) referring to the year 2000, antidepressant and psychotropic medicines were included in the top 10 of the most burdensome therapeutic groups to the public treasury. The prescription of new generation antidepressants, such as the selective inhibitors of serotonin reuptake, has increased in recent years, as these are less toxic and present fewer side effects. However, this class of drugs is not always effective, thus tricyclic antidepressants and is monoaminoxidase inhibitors are still being largely prescribed; the toxicity of these drugs is high, and they are often used in suicides. The objective of this work was the development and comparison of several techniques for sample preparation, such as liquid-liquid extraction (LLE) or solid-phase extraction (SPE), for the detection of nine selected antidepressants in plasma and urine. Several different solvents and SPE cartridges (and sorbents) have been used, and extracts were analysed by high performance liquid chromatography (HPLC) coupled to a photodiode array detector (PDA). We have studied nine antidepressants, and these were amitriptyline, nortryptiline, clomipramine, dothiepin, mianserine, trazodone, fluoxetine, sertraline and protriptyline (internal standard). The studied parameters included selectivity, absolute recovery and detection limits, and these were evaluated taking into account internationally accepted criteria for bioanalytical method validation. The obtained recovery values were between 16-82% for LLE and 42-97% for SPE. In general, SPE-based techniques have shown more suitability for the determination of such compounds in these biological fluids due to the presence of less endogenous interferences. Moreover, this technique is more easily automated. Finally, it was further possible to demonstrate that the instrumentation used in this study (HPLC/PDA) is an useful and accessible analytical tool to any laboratory for the first stage of optimization of extraction methods, reserving more expensive techniques [e.g. LC/MS (MS) or UPLC/MS (MS)] for the subsequent validation of the developed analytical methods.

A S100B é uma proteína ligante de cálcio expressa e secretada por astrócitos, e possui efeito parácrino sobre os neurônios, atuando como fator neurotrófico. Estudos clínicos sugerem que níveis plasmáticos elevados de S100B estão correlacionados positivamente com a resposta à terapia antidepressiva, particularmente quando se utilizam inibidores seletivos da recaptação de serotonina, mas este mecanismo ainda é desconhecido. Neste trabalho foi avaliada a secreção de S100B em culturas primárias de astrócitos e fatias hipocampais de ratos expostos à fluoxetina e serotonina. Foi observado um significativo aumento da secreção de S100B frente à fluoxetina, e este efeito foi aparentemente dependente de PKA. Estes dados reforçam a importância da fluoxetina, independentemente da serotonina e receptores serotoninérgicos, no tratamento antidepressivo, bem como o papel da S100B nos distúrbio depressivos.
S100B is a calcium-binding protein, produced and secreted by astrocytes, which has a putative paracrine neurotrophic activity. Clinical studies have suggested that peripheral elevation of this protein is positively correlated with therapeutic antidepressant response, particularly selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs); however, the mechanism remains unclear. Here, we measured S100B secretion directly in hippocampal astrocyte cultures and hippocampal slices exposed to fluoxetine and observed a significant increment of S100B release in the presence of this SSRI, apparently dependent on PKA. Moreover, we found that serotonin (possibly 5HT1A receptor) reduces S100B secretion and antagonizes the effect of fluoxetine on S100B secretion. These data reinforce the effect of fluoxetine, independently of serotonin and serotonin receptors, suggesting a putative role for S100B in depressive disorders and that other molecular targets may be relevant for antidepressant activity.

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:00:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4014_1.pdf: 877470 bytes, checksum: d1b076f879fb8d9d2e99d5539bd5480f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
O objetivo deste estudo foi analisar as influências da maior disponibilidade de alimento durante a lactação sobre o crescimento somático, desenvolvimento sensório-motor e regulação serotoninérgica do consumo alimentar em ratos. Para obtenção de um estado de hiperalimentação foi utilizado o modelo experimental de redução da ninhada, sendo obtidos dois grupos experimentais: 1. Grupo Controle (n = 30), composto por animais mantidos em ninhadas com número controle de 8 filhotes, do 1º ao 21º dia de aleitamento; 2.Grupo Ninhada reduzida (n = 30), composto por animais submetidos a redução no 3º dia de lactação do número controle (8 por ninhada) para 2 filhotes. Durante este período, correspondente ao aleitamento, foram avaliados parâmetros de crescimento somático, maturação de características físicas e sensóriomotoras e quantificada a ingestão alimentar neonatal. Para quantificação do consumo alimentar neonatal os animais passaram por privação alimentar nos dias 7, 14 e 21. Após o período de separação, os filhotes foram devolvidos para suas mães e o consumo alimentar foi quantificado por ganho de peso após período de 1 hora de aleitamento. Durante os primeiros 21 dias de vida, foram realizadas avaliações de desenvolvimento somático e maturação reflexa. Ao 40º dia, cada grupo foi subdividido segundo o tratamento farmacológico diário, uma vez por dia, do 40o ao 52o dia de vida, nos subgrupos salina (injeção de solução de Nacl a 0,9%, 1ml/Kg i.p. n = 10) ou fluoxetina (injeção de solução de fluoxetina, 10mg/Kg, 1ml/kg i.p, n = 10). A partir de então, a avaliação da ingestão alimentar de 24 horas dos animais foi obtida diariamente durante os 12 dias do tratamento farmacológico. Para tanto, foram utilizadas gaiolas metabólicas apropriadas. O aumento de peso dos animais de ninhadas reduzidas foi observado já a partir do 4º dia pós-natal, persistindo até o 40º e 90º dias de vida. Observou-se aceleração na maturação de características somáticas e físicas bem como do desenvolvimento de reflexos. Essas alterações em animais Ninhada reduzida foram acompanhadas por aumento na ingestão alimentar durante a lactação. No entanto, aos 40 dias de idade, o grupo de animais de ninhadas reduzidas mostrava-se hipofágico com relação ao controle. Esse efeito foi revertido aos 90 dias. O tratamento com fluoxetina promoveu redução de ingestão alimentar em animais controle, por outro lado não foi efetivo em animais de ninhadas reduzidas, indicando menor sensibilidade desses animais ao efeito hipofágico desse fármaco. Os resultados deste estudo evidenciam um efeito precoce da hiperalimentação nos períodos iniciais da vida sobre os parâmetros de crescimento somático e desenvolvimento sensório-motor em ratos. O excesso de alimentação nos períodos iniciais da vida pode ter promovido alterações metabólicas na regulação serotoninérgica do comportamento alimentar, evidenciada pela ausência de resposta ao efeito agudo da fluoxetina nos animais de ninhadas reduzidas. Estes achados apontam para a importância da nutrição nos períodos iniciais da vida para o correto desenvolvimento dos sistemas fisiológicos, dentre os quais se destaca o SNC e o controle do comportamento alimentar

Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas.
Made available in DSpace on 2012-10-18T18:52:48Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2016-01-09T02:28:21Z : No. of bitstreams: 1 137811.pdf: 2083150 bytes, checksum: dd37316e42cf0456c27d391d2e8d20cd (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências.
Made available in DSpace on 2012-10-21T03:00:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências
Made available in DSpace on 2012-10-22T16:34:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 228770.pdf: 3534697 bytes, checksum: 22f1124a34c851a051e2b4c33968cda9 (MD5)
O presente trabalho investigou os efeitos de injeções sistêmicas de 8-OH-DPAT (agonista 5-HT1A; 0.06, 0.2, 0.6 e 2 mg/kg) e mCPP (agonista 5-HT2C/1B; 0.3, 1 e 3 mg/kg) sobre os comportamentos de ingestão hídrica e alimentar em pombos domésticos (Columba livia). As injeções foram administradas em dois períodos do ciclo claro-escuro, um período matutino (E1, 10 - 13h) caracterizado por ingestão de alimentos pequena e estável e um período vespertino (E2, 14-17 h) caracterizado por alta atividade ingestiva. Os episódios ingestivos e de comportamento de sono, alerta, locomoção, auto-limpeza e exploração foram analisados na primeira hora após a administração da droga em cada período. As injeções de 8-OH-DPAT, tanto em E1 quanto em E2, aumentaram a latência para o consumo de alimento e água e diminuíram o total ingerido após 3 e 24 horas da administração da droga, de forma dose-dependente. A análise comportamental revelou que o 8-OH-DPAT diminuiu a duração de exploração, auto-limpeza e alerta e aumentou a duração do sono na primeira hora investigada de cada período. A administração de mCPP em E1 reduziu a quantidade de alimento ingerido em 3 e 24 horas de registro, porém não se observou efeitos sobre os parâmetros ingestivos de duração, freqüência e latência dos episódios ingestivos. Em E2, as injeções de mCPP causaram diminuição na quantidade de alimento ingerido, este efeito foi acompanhado da diminuição do tempo despendido para comer na primeira hora de registro. As injeções de mCPP não alteraram a ingestão hídrica. Em todos animais tratados com mCPP ocorreu diminuição do comportamento de sono e em E1, um aumento na latência para o comportamento de alerta. O mCPP provocou movimentos orofágicos e tremores cervicais anormais mais intensos em E1 (50% dos animais tratados). Estes dados sugerem que: 1) a administração sistêmica de agonistas receptores 5-HT1A e 5-HT2C provoca hipofagia em pombos, porém, estes agonistas provocam feitos comportamentais distintos; 2) receptores 5-HT1A em pombos, estão envolvidos no controle do comportamento de sono, aumentando a duração e diminuindo a latência para o primeiro episódio deste comportamento; 3) receptores 5-HT2C participam do controle serotonérgico inibitório da ingestão de alimento; 4) a função destes receptores, assim como o observado em mamíferos, apresenta variações ao longo do dia.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2014.
Made available in DSpace on 2015-02-05T20:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 327710.pdf: 2234267 bytes, checksum: 907af40758fb55dabc5fe66403e0787c (MD5) Previous issue date: 2014
Introdução: diversos estudos demonstram que os circuitos serotonérgicos inibem a ingestão de alimentos e o sono em aves e mamíferos. A injeção intracerebroventricular (ICV) de 5-HT em pombos, entretanto, provoca efeitos diferentes: aumento na ingestão de água e na duração do sono. Nós associamos estas respostas à atuação de receptores 5-HT1A, pois a ativação destes receptores produz respostas similares. No entanto, os receptores 5-HT1A podem estar localizados no neurônio serotonérgico (autorreceptores) ou em outros neurônios (heterorreceptores). Dependendo da sua localização, a ativação destes receptores produz efeitos diferentes. Portanto, o nosso objetivo foi avaliar a participação dos receptores 5-HT1A nas respostas dipsogênica e hipnogênica provocadas pela 5-HT, na tentativa de especificar as respostas desencadeadas pela 5-HT à atuação de auto ou heterorreceptores. Métodos: os animais (pombos adultos, Columba lívia, de ambos os sexos, pesando entre 400-550 g) foram divididos em 5 grupos/experimentos diferentes. Experimento 1: 16 pombos foram divididos em dois grupos de acordo com o pré-tratamento e receberam: MM77 (antagonista de heterorreceptores 5-HT1A; 0, 23 ou 69 nmol), ou WAY100635 (WAY, antagonista de auto e heterorreceptores 5-HT1A; 0, 0,1, 0,3 ou 1 nmol) e 20 min. após foram tratados com 5-HT (50 e 150 nmol) ou 8-OH-DPAT (30 nmol; agonista de receptores 5-HT1A/7). Logo após o tratamento, o registro comportamental começou e a ingestão de alimentos foi verificada 60 min. após a última injeção. Experimento 2: 12 pombos foram divididos em 2 grupos e submetidos à cirurgia para injeção ICV (bilateral) da neurotoxina de neurônios serotonérgicos 5,7-dihidroxitriptamina (5,7-DHT, 200µg/injeção) ou de seu veículo. Após 12 dias, os animais começaram a ser testados com 5-HT (150 nmol), 8-OH-DPAT (30 nmol) ou veículo (ácido ascórbico 1% em NaCl 0,9%) com intervalo de 7 dias entre as injeções. Estes animais foram mortos 28 dias após a cirurgia e o conteúdo encefálico de 5-HT foi analisado para verificar os efeitos da lesão. Adicionalmente, nós utilizamos outros 18 animais divididos em três grupos, a) 6 animais naïve que foram mortos para servir como controle para os níveis basais de 5-HT e outros dois grupos (N: 6/grupo) que foram submetidos à cirurgia (injeção de 5,7-DHT ou do veículo) e perfundidos 12 dias após a cirurgia para verificar os efeitos da toxina sobre a densidade de neurônios serotonérgicos. Experimento 3: Secções do tronco e do hipotálamo de 6 animais não submetidos a qualquer manipulação experimental foram processados pela técnica de autorradiografia para detectar a distribuição dos sítios de ligação ao agonista tritiado [3H] 8-OH-DPAT. Experimento 4: 15 pombos com cânulas guia direcionadas ao ventrículo lateral direito foram divididos em 3 grupos e tratados com: 8-OH-DPAT (30 nmol) e tiveram livre acesso (N:5) ou foram privados de água após a injeção (N:5) e veículo (N:5). 90 min. após a injeção os animais foram perfundidos e as secções do tronco encefálico processadas para detecção da proteína Fos em neurônios serotonérgicos e não serotonérgicos, e secções do hipotálamo processadas para detectar somente a expressão da proteína Fos. Experimento 5: 10 pombos com cânulas guia direcionadas ao ventrículo lateral direito foram divididos em 3 grupos e tratados com: 5-HT (150 nmol) e tiveram livre acesso (N:5) ou foram privados de água após a injeção (N:5). 90 min. após, os animais foram perfundidos e secções contendo o hipotálamo foram processadas para a detecção da proteína Fos. Resultados: tanto a 5-HT como o 8-OH-DPAT provocaram intensa ingestão de água e aumento na duração do sono. O 8-OH-DPAT ainda aumentou a ingestão de alimento. Os efeitos ingestivos e hipnogênico dos tratamentos foram parcial ou totalmente afetados pelos antagonistas evidenciando a participação dos receptores 5-HT1A nas alterações comportamentais provocadas pela 5-HT. Entretanto, os dados farmacológicos não nos permitiram especificar entre a ação de auto ou heterorreceptores, mas indicam que a interação entre os dois receptores parece ser um importante aspecto do controle exercido pelos circuitos serotonérgicos sobre os comportamentos ingestivos. Apesar de diminuir drasticamente a densidade de neurônios serotonérgicos, a lesão não afetou as alterações provocadas pelos tratamentos o que sugere que em animais com a função serotonérgica prejudicada, receptores 5-HT1A localizados em neurônios não serotonérgicos parecem ser os responsáveis pelos efeitos dos tratamentos. Além disso, os antagonistas e a lesão dos neurônios serotonérgicos também aumentaram o sono dos animais indicando um efeito inibitório tônico dos neurônios serotonérgicos sobre o sono. Os tratamentos também aumentaram a atividade Fos em regiões hipotalâmicas ricas em receptores 5-HT1A e que parecem estar envolvidas com o controle da ingestão de alimento, dos fluídos corporais e do sono. Conclusão: As respostas dipsogênica e hipnogênica desencadeadas pela injeção de 5-HT parecem ser mediadas parcialmente tanto por auto como por heterorreceptores 5-HT1A. Aparentemente, estas respostas são mediadas por receptores 5-HT1A localizados em estruturas encefálicas (no tronco e no hipotálamo) envolvidas com o controle dos comportamentos ingestivos e de sono em aves. Nossos resultados revelaram sutis diferenças na atividade celular produzidas pela 5-HT e pelo 8-OH-DPAT que sugerem que outros receptores serotonérgicos também participam das respostas comportamentais organizadas pela 5-HT. Além disso, os resultados obtidos com a lesão sugerem que os receptores 5-HT1A parecem apresentar diferenças funcionais espécie-específicas, o que pode ser reflexo de diferentes pressões seletivas experimentadas por aves e mamíferos ao longo da evolução dos vertebrados.

Abstract : Introduction: several studies have demonstrated the inhibitory role of serotonergic circuits on ingestive and sleep behaviors both in mammals and birds. Intracerebroventricular (ICV) injections of serotonin (5-HT), however, evoked oposite effects: increased water intake and sleep. We associated these responses to 5-HT1A receptors, because the activation of these receptors caused similar responses. However, the 5-HT1A receptor is located on serotonergic neurons (as autoreceptor) as well as on different neurons (as heteroreceptor), and produces different effects based on its location. Therefore, we decided to investigate the participation of 5-HT1A receptor on dipsogenic and hypnogenic 5-HT-mediated responses to try discriminate the role of auto and heteroreceptors. Methods: the animals (adult pigeons, Columba lívia, both sex, 400-550g of body weight) were divided in 5 groups. Each group represented one different experiment. Experiment 1: 16 pigeons were divided in two groups according on the antagonist used as pretreatment and were injected with: MM77 (0, 23 or 69 nmol, heteroreceptor antagonist), or WAY100635 (WAY, 0, 0.1, 0.3 or 1 nmol, 5-HT1A auto and heterorreceptor antagonist) and 20 min. afterwards injected with 5-HT (0, 50 or 150 nmol) or 8-OH-DPAT (30 nmol). The animals behaviors were registered during the first hour after the last injection and the food and water intake was evaluated at the end of this period. Experiment 2: 12 pigeons were divided in 2 groups and were stereotaxically implanted with an ICV cannula guide (bilateral) to receive the serotonergic neurotoxin 5,7-Dihydroxytryptamine (5,7-DHT, 200µg/injection) or its vehicle. Past 12 days the tests with 5-HT (150 nmol), 8-OH-DPAT (30 nmol) or vehicle (1% ascorbic acid in 0.9 NaCl) started, with seven days apart each other. These animals were killed 28 days after the surgery and the encephalic levels of 5-HT were analised to verify possible degenerative effects of 5,7-DHT. Moreover, we used other 18 animals divided in three groups, a) six naïve pigeons that were killed to be used as reference of the basal levels of 5-HT and another 2 groups that were inject with 5.7-DHT (N: 6) or its vehicle (N:6) and were perfused 12 days later to verify the 5,7-DHT effects on serotonergic neurons. Experiment 3: six naïve pigeons were killed and had their brains dissecated and brainstem and hypothalamic sections reacted by autoradiographic approach to demonstrate the distribution of 5-HT1A binding sites with the selective radioligand [3H] 8-OH-DPAT. Experiment 4: 15 pigeons with ICV cannula guide implanted were divided in three groups and treated with: 8-OH-DPAT (30 nmol) withfree (N:5) or without acess to water after the injection (N:5), and vehicle (N:5). 90 min. later the animals were perfused and brainstem sections reacted to detect Fos protein expression in serotonergic and in non-serotonergic neurons, and hypothalamic sections processed to detect Fos activation. Experiment 5: 10 pigeons with ICV cannula guide implanted were divided in three groups and treated with: 5-HT (150 nmol) with free (N:5) or without acess to water after the injection (N:5). 90 min. later the animals were perfused and hypothalamic sections processed to detect the Fos activation. Results: both 5-HT and 8-OH-DPAT evoked huge increase in water intake and sleep duration. The 8-OH-DPAT injection also produce hyperphagic responses. The ingestive and hypnogenic effects of the treatments were partially or totally inhibited by the antagonists, sugesting the participation of 5-HT1A receptors on behavioral changes produced by 5-HT. However, the pharmacologic data did not permit specify between the action of 5-HT1A auto or heteroreceptors, but indicate the interaction between these two receptors as an important aspect of serotonergic control upon ingestive behavior. Besides its impressive effects on serotonergic neurons density, the 5,7-DHT lesion did not affect the behavioral changes caused by the treatments, suggesting that in animals with anormal serotonergic function, 5-HT1A receptors located in non-serotonergic neurons seem to be related to the treatments effects. Additionally, the antagonists and the 5,7-DHT lesion increased the sleep, indicating one tonic inhibitory effect of serotonergic circuits on sleep. The treatments also increased the Fos protein activation in hypothalamic regions with high 5-HT1A binding sites density that seem to be involved with food, body fluid and sleep regulation. Conclusion: the dipsogenic and hypnogenic responses evoked by 5-HT seem to be mediated partially by both 5-HT1A auto and heteroreceptors. Apparently, these responses are regulated by 5-HT1A receptors located on encephalic (hypothalamic and brainstem) regions directly or indirectly involved with ingestive and sleep/wake cycle regulation in birds. Our results also indicate small differences in the neuronal activity evoked by 5-HT and by 8-OH-DPAT suggesting that other serotonergic receptor also participate in behavioral responses organized by 5-HT. Moreover, the results produced by 5,7-DHT lesion indicate that 5-HT1A receptors seem present specie-specific functional differences that could represent different seletive pressions experimented by birds and mammal during vertebrate evolution.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia
Made available in DSpace on 2012-10-26T12:34:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 303359.pdf: 910152 bytes, checksum: 2313bdfb6f97b080a8d2af1664920c50 (MD5)
A serotonina (5-HT) é um neurotransmissor que está amplamente distribuído nos principais sistemas fisiológicos e apresenta uma ampla variedade de funções, tanto em sistemas neuronais quanto em extraneuronais. No sistema cardiovascular sabe-se que a 5-HT está envolvida na regulação do tônus vascular, no processo de coagulação sanguínea e também está associada a algumas patologias como aterosclerose e hipertensão pulmonar. Entretanto, o seu papel neste sistema não foi completamente elucidado. Estudos recentes demonstraram que veias e artérias são capazes de sintetizar, captar e metabolizar a 5-HT e que a captação de 5-HT em artérias parece ser mediada pelo transportador de 5-HT (SERT), enquanto que veias captam 5-HT por um mecanismo independente do SERT. Além disso, uma vez dentro da célula, a 5-HT também pode interagir com proteínas intracelulares através de um processo denominado serotonilação, modulando, desta forma, a atividade destas proteínas. Esses dados indicam que a 5-HT não exerce suas ações nos principais sistemas fisiológicos somente através da ativação de seus receptores. O objetivo do presente trabalho foi caracterizar o mecanismo de captação da 5-HT em veias e investigar a influência de substâncias que alteram a homeostase da 5-HT na reatividade vascular da veia jugular. Através da quantificação de 5-HT e do seu metabólito o ácido 5-hidroxi-indolacético (5-HIAA) por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), determinamos os níveis basais destas substâncias nos vasos. Em seguida, determinamos os níveis de 5-HT e 5-HIAA após a incubação com 5-HT exógena na presença de veículo ou de substâncias que influenciam o metabolismo, liberação ou captação de 5-HT. Em presença de pargilina, um inibidor da enzima que degrada a 5-HT, a monoamina oxidase (MAO), houve diminuição dos níveis de 5-HIAA, associada ao aumento dos níveis de 5-HT, indicando que o metabolismo da 5-HT foi inibido e sugerindo a participação desta enzima neste processo. A fluoxetina, um inibidor seletivo do transportador de 5-HT (SERT), a imipramina e a desipramina, inibidores dos transportadores de noradrenalina (NET) e do SERT e a cocaína, um inibidor dos transportadores de dopamina (DAT) e NET, não influenciaram na captação da 5-HT. Por outro lado, na presença de decynium-22, um inibidor não seletivo dos transportadores de cátions orgânicos (OCTs), houve uma diminuição da captação de 5-HT tanto na veia jugular quanto na veia cava. Em presença de norfenfluramina, um substrato do SERT que promoveria liberação de 5-HT de estoques intracelulares não foi observada diminuição nos níveis intracelulares de 5-HT, sugerindo que não há armazenamento de 5-HT em vesículas intracelulares. As curvas concentração resposta para 5-HT realizadas em veia jugular na presença de fluoxetina, imipramina, desipramina, cocaína e decynium 22 foram deslocadas para a direita em relação às curvas realizadas na presença de veículo. A pargilina potencializou a contração da 5-HT em veia jugular. Desta forma, concluímos que a captação de 5-HT em veia jugular e veia cava de ratos se dá através dos OCTs de modo independente de SERT, NET e DAT. Além disso, a fluoxetina, imipramina, desipramina, cocaína e decynium-22 interferem na resposta contrátil à 5-HT por outros mecanismos que não a inibição da captação de monoaminas. Finalmente, nossos resultados apontam para um provável envolvimento da 5-HT intracelular na resposta contrátil induzida por 5-HT em veia jugular de ratos.
Serotonin (5-HT) is a neurotransmitter widely distributed in the major physiological systems and has a wide variety of functions in both neuronal and extraneuronal systems. In the cardiovascular system 5-HT is involved in the regulation of vascular tone, blood coating process and is also associated with some diseases such as atherosclerosis and pulmonary hypertension. However, the role of 5-HT in the cardiovascular system has not been fully elucidated. Recent studies show that veins and arteries are able to synthesize, uptake and metabolize 5-HT and whereas arteries take up 5-HT via SERT, 5-HT uptake in veins is SERT independent. The 5-HT has action in the main physiological system activating its receptor. Furthermore, once inside the cell, 5-HT may also interact with intracellular proteins by a process called serotonilation, modulating the activity of these proteins. These findings indicate that 5-HT does not exert its functions in the main physiological systems solely by activating its receptors. The goal of this study was to characterize the mechanism by which 5-HT is taken up in veins and to investigate the influence of substances that alter 5-HT homeostasis in vascular reactivity of the jugular vein. By quantification of 5-HT and its metabolite 5-hydroxy indoleacetic acid (5HIAA) by high performance liquid chromatography (HPLC), the basal levels of these substances in veins were determined. Then, the levels of 5-HT and 5-HIAA in jugular vein and vena cava after incubation with exogenous 5-HT in presence of vehicle or substances that influence the uptake, release or metabolism of 5-HT were measured. In the presence of pargyline, an inhibitor of the enzyme that degrades 5-HT, 5-HIAA levels were decreased associated with an increase in 5-HT content. Fluoxetine, a selective inhibitor of the 5-HT transporter (SERT), imipramine and desipramine, norepinephrine transporter (NET) and SERT inhibitors and cocaine, a dopamine transporter (DAT) and NET inhibitor had no effect in 5-HT uptake. On the other hand, in the presence of decynium-22, a non-selective inhibitor of organic cationic transportes (OCTs), there was a reduction in 5-HT uptake in both jugular vein and vena cava. Norfenfluramine, a SERT substrate known to promote the release of intracellularly stored 5-HT, was ineffective in decreasing intracellular 5-HT content in veins, suggesting that 5-HT is not stored in vesicles in these vessels. The concentration-response curves to 5-HT performed in the presence of fluoxetine, imipramine, desipramine, cocaine and decynium-22, were shift to right in relation to the curves performed in the presence of vehicle. 5-HT-induced contraction in the jugular vein was potentiated by pargyline. Altogether, these results suggest that 5-HT uptake in veins is mediated by OCTs in a SERT, NET and DAT independent fashion. Moreover, fluoxetine, imipramine, desipramine and decynium-22 alter venous contraction by a mechanism not related to the inhibition of monoamine uptake. Finally, our results reveal a putative contribution of intracellular 5-HT to the contractile machinery in veins.

The putative 5-HT6 receptor agonist ST1936 has been shown to increase extracellular dopamine (DA) in the n.accumbens (NAc) Shell and in the medial prefrontal cortex (PFCX). These observations suggest that 5-HT6 receptors modulate DA transmission in mesolimbic and mesocortical terminal DA areas. To investigate the behavioral counterpart of this interaction I studied in rats the effect of 5-HT6 receptor blockade on cocaine stimulated overflow of DA in dialysates from the PFCX and from the NAc Shell and on cocaine i.v. selfadministration. Pretreatment with the 5-HT6 antagonist SB271046 reduced cocaine-induced increase of dialysate DA in the NAc Shell but not in the PFCX and impaired i.v. cocaine selfadministration. These suggest that 5-HT6 receptors play a role in cocaine reinforcement via their facilitatore interaction with DA projections to the NAc Shell. This 5-HT/DA interaction might provide the basis for a new pharmacotherapeutic strategy of cocaine addiction. Caffeine is one of the psychoactive substances most widely used as adulterant in illicit drugs, such as cocaine. Animal studies have demonstrated that caffeine is able to potentiate cocaine actions, although the enhancement of the cocaine reinforcing property by caffeine is less reported, and the results depend on the paradigms and experimental protocols used. In the present study I examined the ability of caffeine to enhance the motivational and rewarding properties of cocaine using the intravenous self-administration paradigm in rats. Additionally, the role of caffeine as a primer cue during extinction was evaluated. To this end, we assessed in naïve rats: 1) the ability of the combination of cocaine (0,125 mg/kg/infusion) and caffeine (0,0625 mg/kg/infusion) to maintain self-administration in fixed ratio (FR) and progressive ratio (PR) schedules of reinforcement compared with cocaine and caffeine alone; 2) the effect of caffeine in the maintenance of responding in the animals exposed to the combination of the drugs during cocaine extinction. Cocaine and the combination of cocaine and caffeine were self-administered on a FR and PR schedules of reinforcement, and the responding for the combination of the drugs was higher than cocaine alone. Caffeine was not reliably self-administered, but was able to maintain a drug-seeking behavior in rats previously exposed to cocaine plus caffeine. These findings suggest that the presence of caffeine enhances the reinforcing effects of cocaine and the motivational value of the drug. Our results highlight the role of active adulterants commonly used in illicit street drugs.

Submitted by Livia Mello (liviacmello@yahoo.com.br) on 2016-10-14T13:19:28Z No. of bitstreams: 1 TeseEVL.pdf: 11027777 bytes, checksum: 41dbb4fdedb476e263115ce57e0a47fd (MD5)
Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-11-08T18:47:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseEVL.pdf: 11027777 bytes, checksum: 41dbb4fdedb476e263115ce57e0a47fd (MD5)
Approved for entry into archive by Marina Freitas (marinapf@ufscar.br) on 2016-11-08T18:47:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TeseEVL.pdf: 11027777 bytes, checksum: 41dbb4fdedb476e263115ce57e0a47fd (MD5)
Made available in DSpace on 2016-11-08T18:47:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseEVL.pdf: 11027777 bytes, checksum: 41dbb4fdedb476e263115ce57e0a47fd (MD5) Previous issue date: 2016-08-05
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
The exposure to periods of hypoxemia and reoxygenation, as observed in patients with obstructive sleep apnea (OSA), promotes compensatory increases in ventilation, sympathetic activity and blood pressure (BP), by mechanisms not fully understood. In the present study, we investigated the central mechanisms responsible for the cardiorespiratory changes induced by acute intermittent hypoxia (AIH; 10 episodes of 6-7% O2 for 45 sec, every 5 min hyperoxia) either in adult male rats (270-280 g) anesthetized with urethane (1.2 g / kg, ip) or in in situ working heart-brainstem preparations of juvenile male rats (65-75 g). In in situ preparations, the AIH promoted long-term facilitation (LTF), of at least 1 hour, in the phrenic nerve (PN), abdominal (AbN) and thoracic sympathetic (tSN) activities (n=9, P<0.05). In these animals, we observed that the increase in tSN activity induced by AIH occurred during the late part of expiratory period, namely late-expiratory (late-E) phase, coupled with the emergence of late-E bursts in AbN activity. Considering studies showing the role of serotonin (5-HT) as the mediator of cardiorespiratory changes elicited by AIH, we verified that ketanserin (5-HT2 antagonist) microinjections in the RTN/pFRG in anesthetized rats, during AIH exposure, prevented the increase in abdominal motor activity (ABD) evoked by AIH (n=5, P<0.05), indicating the involvement of 5-HT2 receptor of RTN/pFRG in the generation of active expiration induced by AIH. We also showed that repeated activation of 5-HT2 receptors (3x every 5 min) in the RTN/pFRG of in situ preparation, using DOI, promoted LTF of the PN, AbN and tSN activities (n=9, P<0.05). Interestingly, the increase in the late-E AbN activity induced by DOI in the RTN/pFRG was critical for the development of sympathetic overactivity during late-E phase (n=9, P<0.05), similarly to the pattern observed in in situ preparations subjected to AIH. Microinjections of vehicle in the RTN/pFRG did not change PN, AbN and tSN activities. The increase in respiratory and sympathetic activities promoted by DOI microinjection in the RTN/pFRG was associated to sensitization/facilitation of CO2- drive to breath, since the exposure to hypocapnia eliminated the respiratory activity in control in situ preparation, but not in preparation that received DOI into the RTN/pFRG (n=9, P<0.05). Furthermore, we verified that the DOI-induced sensitization in the RTN/pFRG, which was determinant for the development of respiratory and sympathetic LTF, also depended on glutamatergic neurotransmission in the RTN/pFRG (n=9, P<0.05), because microinjections of kynurenic acid (glutamate receptor antagonist) were able to eliminate the respiratory and sympathetic LTF. Indeed, we found that glutamatergic neurotransmission of the RTN/pFRG is essential for the generation of active expiration, since kynurenic microinjections in the RTN/pFRFG of control in situ preparations abolished the late-E bursts in AbN and tSN induced by hypercapnia. Altogether, our data indicate that interactions between serotonergic and glutamatergic mechanisms in the RTN/pFRG is an essential mechanism for the occurrence of active expiration and late-E sympathetic overactivity after AIH exposure. Moreover, our findings suggest that the activation of 5-HT2 receptors in the RTN/pFRG modulates the excitation of central chemoreceptors of this area, through sensitization/facilitation of glutamatergic mechanisms.
A exposição a episódios de hipoxemia seguido de reoxigenação, como observado na apneia obstrutiva do sono (AOS), promove aumentos compensatórios na ventilação, na atividade simpática e na pressão arterial (PA), por mecanismos ainda não completamente elucidados. No presente estudo, exploramos os mecanismos centrais envolvidos nas alterações cardiorrespiratórias induzidas pela hipóxia intermitente aguda (HIA; 10 episódios 6-7% O2 por 45 s, a cada 5 min de hiperóxia) em ratos adultos (270-280 g) anestesiados com uretana (1,2 g/Kg, i.p.) e ratos jovens (65-75 g) na preparação in situ coração-tronco cerebral isolados. Em preparações in situ, a HIA promoveu uma facilitação a longo prazo (LTF), com duração de, pelo menos, 1 hora, nas atividades dos nervos frênico (PN), abdominal (AbN) e simpático torácico (tSN) (n=9, P<0,05). Nestes animais, observamos que o aumento da atividade tSN ocorreu, preferencialmente, durante a fase final do ciclo expiratório, denominada de fase E- tardia. Tal aumento da atividade simpática induzido pela HIA mostrou-se associada ao aparecimento de disparos E-tardios na atividade AbN (padrão de expiração ativa). Considerando estudos que envolvem a participação da serotonina (5-HT) como mediador das alterações cardiorrespiratórias induzidas pela HIA, verificamos em ratos anestesiados que microinjeções de ketanserina (antagonista 5-HT2) no RTN/pFRG, durante HIA, preveniram o aumento da atividade motora abdominal (ABD) evocado pela HIA (n=5, P<0,05), indicando a participação dos receptores 5-HT2 do RTN/pFRG na geração de expiração ativa induzida pela HIA. Mostramos também que a ativação repetida dos receptores 5-HT2 (3x a cada 5 min) no RTN/pFRG, com o agonista DOI, promoveram LTF nas atividades PN, AbN e tSN (n=9, P<0,05) em preparações in situ. Interessantemente, o aumento da atividade E-tardia AbN, induzido por DOI no RTN/pFRG, foi determinante para o desenvolvimento de hiperatividade simpática na fase expiratória E-tardia (n=9, P<0,05), semelhante àquela observada em preparações in situ submetidas à HIA. Tal elevação das atividades PN, AbN e tSN não foram observadas após a realização de microinjeção veículo no RTN/pFRG. O aumento nas atividades respiratórias e simpática promovidas pela microinjeção de DOI no RTN/pFRG foi associado a sensibilização/facilitação da atividade respiratória dependente de CO 2, uma vez que a redução do drive respiratório, por meio da exposição à hipocapnia, aboliu a atividade respiratória em preparações in situ controle, mas não em preparações que receberam microinjeções de DOI (n=9, P<0,05). Ademais, mostramos que a sensibilização induzida por DOI no RTN/pFRG, na qual resulta no LTF das atividades respiratória e simpática, dependem da neurotransmissão glutamatérgica também no RTN/pFRG (n=9, P<0,05), uma vez que microinjeções de ácido quinurênico (antagonista dos receptores glutamatérgicos) foram capazes de reverter o LTF respiratório e simpático. De fato, a neurotransmissão glutamatérgica é essencial para a geração do padrão expiratório, em resposta à hipercapnia, uma vez que o microinjeções de ácido quinurênico no RTN/pFRG de ratos controle, durante a exposição à hipercapnia, elimina os disparos E-tardios na atividade simpática e abdominal de preparações in situ. Em conjunto, nossos resultados sugerem uma interação importante entre os mecanismos serotoninérgicos e glutamatérgicos no RTN/pFRG, na qual parece ser determinante para o aparecimento do padrão de expiração ativa e aumento da atividade simpática após à exposição à HIA. Nossos dados sugerem que a ativação dos receptores 5- HT2 do RTN/pFRG modula a excitação das células quimiossensíveis desta região, mediante facilitação de mecanismos glutamatérgicos.
FAPESP: 2014/06.976-2; 2013/17.251-6
CNPq: 478640/2013-7

Orientador: Elisabeth Criscuolo Urbinati
Banca: Antônio Fernando Gervásio Leonardo
Banca: Leonardo Sussumu Takahashi
Banca: Luciane Helena Gargaglioni Batalhão
Banca: José Augusto Senhorini
Resumo: Como estratégia para diminuir o alto índice de canibalismo na larvicultura do matrinxã, o uso do aminoácido essencial triptofano (Trp) parece promissor. O aminoácido é o precursor do neurotransmissor mono-amínico serotonina (5-hidroxitriptamina, 5-HT) e sua taxa de biossíntese no encéfalo são limitadas pela disponibilidade desse aminoácido, que parece ser uma das principais limitações para a síntese de 5-HT. A ingestão aumentada de triptofano eleva o nível do aminoácido no encéfalo, resultando em biossíntese aumentada de 5-HT no encéfalo de peixes. Esse por sua vez, é um neurotransmissor que media uma ampla variedade de comportamentos (agressão, medo e estresse em várias espécies, assim como na relação das interações sociais em muitos animais) por ação no sistema nervoso central e periférico. Assim, o presente estudo utilizou um aminoácido promotor da serotonina (triptofano), um inibidor seletivo da recaptação do neurotransmissor (fluoxetina) e um inibidor da síntese da serotonina (PCPA - paraclorofenilalanina), para verificar seu papel na mediação do comportamento agressivo e no desenvolvimento e sobrevivência larval de matrinxã no período de 1 a 12 dias após a eclosão. O triptofano foi fornecido juntamente com a ração, já a fluoxetina e a paraclorofenilalanina foram dissolvidos na água. Esse estudo foi realizado em duas condições de temperatura de cultivo, ou seja, com temperatura controlada em uma faixa de variação estreita (26-28°C) e com temperaturas variando de 19 a 31°C. Os resultados obtidos permitiram concluir que o uso do triptofano como suplemento na ração, pode ser uma alternativa viável na criação de matrinxã, pois aumentou o crescimento e a sobrevivência da prole, exceto na concentração mais alta (2,96g/100g ração). O uso de fluoxetina também aumentou a sobrevivência da prole, com redução do canibalismo, no ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: The use of tryptophan as a strategy to reduce cannibalism in matrinxã hatchery seems promising. This amino acid is a precursor of the neurotransmitter serotonin (5-hidroxy-triptamine, 5-HT) whose biosynthesis rate in brain is limited by the amino acid availability. The increased intake of tryptophan by brain elevates the amino acid concentration in tissue resulting in higher serotonin production in fish. Serotonin is involved in the control of several types of behavior (aggression, fear, stress and social interaction in many animals) through effect in central and peripheral nervous systems. The present study evaluated the effect of a serotonin synthesis promoter (tryptophan), a selective inhibitor of serotonin reuptake (fluoxetine) and a selective inhibitor of serotonin synthesis (PCPA - paraclorofenilalanine) on the control of the aggressive behavior and on early development of matrinxã up to 12 days after hatching. Tryptophan was offered in the diet, and fluoxetine and PCPA in immersion solutions. The study was performed in two rearing temperatures, controlled temperature (26-28°C) and natural temperature without control (19 a 31°C). The results showed that tryptophan might be an alternative in matrinxã rearing since it promoted growth and enhanced survival of progeny, except in the highest concentration tested (2.96g/100g diet). Fluoxetine also enhanced larvae survival, with cannibalism reduction. The highest concentration (5000 ppb fluoxetine/L) reduced growth. The immunohistochemistry showed that the serotoninergig system is already developed in larvae and is similar to that of the juvenile fish of the same species. The temperature variation affected negatively the biological responses tested in this study, suggesting to be a stressor for fish. The PCPA did not show responses that could demonstrate a biological pattern
Doutor

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FERNANDA APARECIDA VARGAS DE BRITO E ALVES.pdf: 1009586 bytes, checksum: 8dc12edf912fed637ebefe39ffdd52d4 (MD5) Previous issue date: 2012-06-30
Introduction: Fibromyalgia is a syndrome characterized by widespread chronic pain. The syndrome is chronic with dubious possibility of healing. The prevalence in the world population varies from 0,66 to 4,4 %. It is believed that fibromyalgia is the result of abnormal changes in sensory processing of pain. In this context, are inserted gene polymorphisms T102C gene HTR2A serotonin receptor. The HTR2A gene T102C polymorphism is the presence of a thymine (T) or cytosine (C), defined by a transition from T to C at nucleotide position 102. It is a silent polymorphism receptor gene HTR2A, which determine the different levels of gene expression. Objectives: To determine and compare the allele frequency and genotype of the T102C polymorphism of the serotonin receptor gene HTR2A in a group of 48 women diagnosed with fibromyalgia and 50 healthy controls. Methodology: For this we used the PCR- RFLP , from DNA extracted from peripheral blood samples obtained from control and testing. The comparison of allele and genotype frequencies was performed by Chi -square test. Results: The results showed allele frequencies obtained for both groups were: T (46,9%) and C (53,1%). The TT genotype frequencies were found (22,9%), TC (47,9%) and CC (29,2%) for patients with fibromyalgia and TT (16%), TC (70%) and CC (14%) for controls. Conclusions: The FMS is composed of multiple characteristics that reflect a diversity of causes. Our results showed a significantly higher frequency for the CC genotype in patients with FMS, partially explaining the reduced serotoninergic response observed in such patients.
Introdução: A Fibromialgia é uma síndrome reumática caracterizada por dor difusa e crônica. A síndrome é crônica com duvidosa possibilidade de cura. A prevalência na população mundial varia de 0,66 a 4,4%. Acredita-se que a fibromialgia seja o resultado de mudanças anormais no processamento sensorial da dor. Neste contexto, inserem-se os polimorfismos do gene T102C do gene do receptor de serotonina HTR2A. O polimorfismo T102C do gene HTR2A consiste na presença de uma timina (T) ou citosina (C), definida por uma transição de um T para C na posição nucleotídica 102. Trata-se de um polimorfismo silencioso do gene do receptor HTR2A, que determinam níveis de expressão gênica diferentes. Objetivos: Determinar e comparar a freqüência alélica e genotípica do polimorfismo T102C do gene do receptor de serotonina HTR2A em um grupo de 48 mulheres diagnosticadas com fibromialgia e 50 controles saudáveis. Metodologia: Para isso foi utilizada a técnica de PCR-RFLP, a partir de DNA extraído de amostras de sangue periférico obtidas do grupo controle e testes. A comparação das freqüências alélicas e genotípicas foi feita por meio de teste Chi-quadrado. Resultados: Os resultados demonstraram as freqüências alélicas obtidas para os dois grupos foram: T (46,9%) e C (53,1%). As freqüências genotípicas encontradas foram TT (22,9%); TC (47,9%) e CC (29,2%) para os pacientes com fibromialgia e TT (16%); TC (70%) e CC (14%) para os controles. Conclusões: A SFM é composta por múltiplas características que refletem em uma diversidade de causas. Nossos resultados demonstraram que o genótipo CC foi significativamente mais comum nas pacientes com a SFM, justificando parcialmente a menor resposta serotononérgica observada nesse grupo.

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico
Estudios de funcionalización del 1H-indol-2-acido carboxílico, condujeron a la síntesis de una familia de compuestos N-{4-[4-(1H-Indol-2-carbonil)-1-piperazinil]-fenil}- arilamidas 4(a-h) con potencial actividad serotoninérgica en el sistema nervioso central. La obtención de este grupo de compuestos cursó en una secuencia de 3 pasos, obteniéndose con rendimiento global moderado. La secuencia sintética utilizada se inició mediante la reacción del 1H-indol-2-acido carboxílico con N,N´-Diciclohexilcarbodiimida y 4-nitro-fenilpiperazina, generando la 4- nitrofenilpiperazinilamida (2) en un 78% de rendimiento. La reducción de (2) generó la amina correspondiente (3) en un 50%, que fue sometida a reacción con una serie de haluros de acilo para dar finalmente la familia 4(a-h) con rendimientos entre un 65 a 75%. Se realizaron estudios de docking de los compuestos 4(a-h) en el receptor 5-HT1A obteniéndose puntajes de docking favorables de interacción entre los ligandos sintetizados y el receptor.
Functionalyzation studies on 1H-indol-2-carboxylic acid, led us to the synthesis of a series of N-{4-[4-(1H-indole-2-carbonyl)-1-piperazinyl]-phenyl}-arylamides 4(a-h), with potential serotonergic activity at the 5-HT1A R. The synthetic sequence took place in a three steps sequence and started by reaction between 1H-indol-2-carboxylic acid and N,N´-Diciclohexylcarbodiimide with 4- nitrophenylpiperazine, to give the amide (2) (78% yield). Further reduction of (4) provided the corresponding amine (5) in a 50% yield, which was finally reacted with a series of acil halide to give compounds 4(a-h) with yields between 65 to 75%. Docking studies were carried out for compounds 4(a-h) on the 5-HT1A R displaying favorable docking scores of interaction between receptor and ligand synthesized
FONDECYT