Dissertations / Theses: 'Stérilité masculine'

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Touhami, Ahami 19 Ahmed Omar. "Les dysfonctions sexuelles masculines isolées ou associées à la stérilité secondaire : aspects cliniques et épidémiologiques." Lyon 1, 1986. http://www.theses.fr/1986LYO1H064.

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Montjean, Debbie. "Anomalies génétiques et épigénétiques associées à l'infertilité masculine." Paris 6, 2011. http://www.theses.fr/2011PA066724.

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Said, Lamia. "Aromatase, estrogènes et infertilité masculine." Caen, 2009. http://www.theses.fr/2009CAEN2020.

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Abstract:

L’implication de l’aromatase dans la qualité du spermatozoïde a été appréhendée chez des patients tunisiens consultant pour infertilité et présentant des anomalies de la mobilité et de la forme des spermatozoïdes. Une diminution significative du transcrit aromatase a été notée chez les tératospermiques et les asthénotératospermiques. Les asthénospermiques se divisent en deux sous-groupes avec des taux d’ARNm de l’aromatase abaissés dans le premier et augmentés dans le second. Une corrélation significative entre les taux de transcrits de l’aromatase et le pourcentage de formes atypiques et/ou l’IAM a été enregistrée. Les taux des paramètres biochimiques du plasma séminal montrent une diminution du fructose chez les asthénozoospermiques en comparaison aux asthénotératozoospermiques. L’analyse de corrélation révèle que l’a-glucosidase neutre est corrélée avec le volume séminal et le pH; l’acide citrique avec le pH et le fructose avec le volume séminal, la numération des spermatozoïdes et la morphologie. Une implication des gènes de l’aromatase et des récepteurs aux estrogènes alpha dans la stérilité des hybrides chromosomiques issus de croisements entre souris domestiques Robertsoniennes (22Rb) 2n=22 et standard (40Std) 2n=40 a été vérifiée par l’analyse de l’expression des gènes de l’aromatase et du récepteur aux estrogènes alpha. Nos résultats n’ont pas montré de différence des taux d’ARNm de ces marqueurs dans les testicules entre les hybrides et les races parentales, mais chez les femelles une réduction du taux d’ARNm de l’aromatase a été observée dans les ovaires des hybrides du croisement (♀40Std×♂22Rb)
The involvement of aromatase in the quality of the spermatozoa was undertaken in Tunisian patients with abnormal mobility and morphology spermatozoa and undergoing infertility assessment. A significant decrease of aromatase transcript was noted in both teratozoospermia and asthenoteratozoospermia groups compared with normozoospermia. Asthenozoospermia group was divided into two sub-groups with aromatase mRNA rates lowered in the first and increased in the second. Moreover, a significant correlation between mRNA aromatase and the percentage of sperm morphology and/or MAI was recorded. The seminal plasma biochemical parameters in these patients revealed a significant reduction of fructose level in the asthenozoospermic in comparison with asthenoteratozoospermic patients. The correlation analysis reveals that neutral a- glucosidase is correlated with seminal volume and pH; citric acid with pH and fructose with seminal volume, sperm count and morphology. The implication of aromatase and estrogen receptor alpha gene in the sterility of chromosomal hybrid mice resulting from crosses between Robertsonian (22Rb) 2n = 22 and standard (40Std) 2n = 40 domestics mice was verified by the analysis of the expression of aromatase and estrogens receptor alpha genes. Our data showed no difference of mRNA rates of these two markers in the testes between hybrids and parental races but, in females a reduced level of aromatase ARNm was observed in the ovaries of hybrids resulting from the cross (♀40Std×♂22Rb)

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Fellmann, Florence. "Génétique et infertilité masculine : étude d'une population d'hommes infertiles et contribution à la caractérisation de la pathologie moléculaire du chromosome Y." Besançon, 2002. http://www.theses.fr/2002BESA0024.

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Abstract:

Ce travail rapporte l'étude d'une population d'hommes présentant une infertilité dans le contexte d'une demande d'AMP [aide médicale à la procréation]. L'étude moléculaire du bras long du chromosome Y, dans la région AZF, montre la fréquence non négligeable des microdélétions de cette région, justifiant la proposition de cette analyse dans tous les cas d'infertilité sévère inexpliquée. Les délétions complètes de la région AZFa sont identifiées avec une fréquence supérieure aux données de la littérature, associées à une azoospermie sécrétoire. L'existence de délétions partielles de la région AZFb et AZFc est montrée : les délétions partielles proximales AZFb sont rares et le phénotype associé mérite d'être exploré plus avant. Ce travail montre l'intérêt de la mise en œuvre de la PCR [polymerase chain reaction] quantitative en temps réel pour la détection des délétions et des duplications partielles de la région AZFc. Ces résultats sont comparés et discutés en fonction des données concernant la cartographie et la pathologie moléculaire de l'Y
The study of an infertile male population seeking for Assisted Reproductive Technology is reported. Molecular study of the long arm of the Y chromosome, in AZF region, shows a relatively high ftequency of microdeletions, reflecting and confirming the interest of such an analysis in severe unexplained male infertility. Complete AZFa deletions are detected with a higher ftequency compared to literature data, essentially in non-obstructive azoospermia. Moreover, partial AZFb and AZFc deletions are detected: partial ptoximal AZFb deletions are rare and the associated phenotype has to be delimited. This work shows the interest of real-time PCR [polymerase chain reaction] technique to detect partial deletions or duplications of the AZFc region. The results are discussed following available data regarding mapping and molecular pathology of the Y chromosome

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Roze, Virginie. "Locus AZFc, gènes de la famille DAZ et infertilité masculine : recherche et caractérisation de microréarrangements au niveau génomique et quantification de l'expression génique au niveau testiculaire." Besançon, 2006. http://www.theses.fr/2006BESA0014.

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Abstract:

La région AZFc du bras long du chromosome Y est une des régions les moins stables du génome humain. Elle est composée de multiples palindromes entraînant différents types de réarrangements, dont certains seraient associés à l'infertilité masculine. Nous avons recherché les microréarrangements d'AZFc dans 2 populations : 344 hommes infertiles et 136 hommes d'une population contrôle (119 normospermiques et 17 présentant une azoospermie de type obstructif). Nous avons observé une fréquence élevée de remaniements génomiques (8,7%), avec des fréquences de délétions et de duplications similaires dans les deux populations. Les remaniements ont ensuite été caractérisés au niveau des gènes DAZ et CDY1 et au niveau des haplogroupes du chromosome Y. Nous avons également étudié l'expression des gènes de la famille DAZ par RT-PCR [reverse transcription-polymerase chain reaction] quantitative « en temps réel» à partir de 30 biopsies testiculaires présentant des situations d'infertilité masculine bien identifiées. Différents profils d'expression ont été obtenus en fonction des gènes et des pathologies de la fertilité
The AZFc region on the Y chromosome long arm is one of the most unstable regions in the human genome. It consists almost entirely of very long repeats, is prone to rearrangement and some of them have been reported to be associated with male infertility. We screened two populations: 344 infertile patients and 136 controls for AZFc microrearrangements and we observed a high frequency of genomic rearrangements with similar frequency of deletions and duplications in both populations. Rearrangements were then characterized using DAZ and CDY 1 genes analyses and Y chromosome haplogroup determination. We also studied DAZ gene family expression by "real time" quantitative RT-PCR [reverse transcription-polymerase chain reaction] from 30 testicular biopsies presenting distinct histological pictures. Different expression profiles were obtained according to the gene tested and the fertility status

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Baume, Brugnon Florence. "Apoptose du spermatozoïde et fertilité masculine." Clermont-Ferrand 1, 2009. http://theses.clermont-universite.fr/nondiff/2009CLF1MM01.pdf.

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Abstract:

Pour mieux comprendre la signification des marqueurs d'apoptose dans les spermatozoïdes éjaculés humains, l'objectif de notre étude était de mesurer ces marqueurs dans les spermatozoïdes prélevés à différents niveaux du tractus génital masculin dans différentes situations physiopathologiques. Pour évaluer la qualité fonctionnelle de ces spermatozoïdes, des relations ont été recherchées entre l'expression de ces marqueurs et les résultats obtenus en assistance médicale à la procréation. Les marqueurs analysés sont des facteurs mis en jeu dans l'initiation et l'activation de l'apoptose (poly-caspases, caspase-3, -8 ou -9 activée(s)), et des signes précoces (externalisation de la phosphatidylsérine, PS) ou tardifs (fragmentation de l'ADN) de l'apoptose. Pour certains échantillons, une analyse ultrastructurale des spermatozoïdes a aussi été réalisée. La mesure de l'expression des caspases activées a fait l'objet d'une mise au point compte-tenu de l'hétérogénéité des populations spermatiques et de la faible quantité de spermatozoïdes disponibles. Finalement, nous avons retenu une mesure par double marquage associant un inhibiteur fluorescent vert des caspases activées et un colorant fluorescent rouge (Propidium Iodide) avec une détection soit en cytométrie en flux soit en microscopie à fluorescence selon la nature des spermatozoïdes analysés. Chez des patients présentant une agénésie bilatérale des canaux déférents, la proportion de spermatozoïdes vivants ou morts exprimant des caspases activées est plus élevée dans les spermatozoïdes testiculaires que dans les spermatozoïdes épididymaires suggérant une initiation du processus apoptique dans les testicules et une incapacité des spermatozoïdes épididymaires à initier l'apoptose. Dans ces conditions, en ICSI, le risque d'injecter un spermatozoïde apoptique dans un ovocyte est plus élevé avec les spermatozoïdes testiculaires et pourrait expliquer pour une part, les résultats de moins bonne qualité avec ces spermatozoïdes testiculaires qu'avec les spermatozoïdes épididymaires. Chez des patients infertiles, porteurs d'une translocation chromosomique réciproque ou Robertsonienne autosomique, il existe une expression plus importante des modifications ultrastructurales et des marqueurs biochimiques d'apoptose (caspases activées, fragmentation de l'ADN, externalisation de la PS) associée à des signes d'immaturité ultrastructurale, comparé aux spermatozoïdes d'hommes fertiles. Ces résultats pourraient expliquer que dans l'éjaculat de ces patients, il existe une prédominance de gamètes équilibrés sur le plan chromosomique. En effet, les gamètes présentant un déséquilibre auraient été éliminées préférentiellement par apoptose. En conclusion, les marqueurs d'apoptose exprimés par les spermatozoïdes éjaculés seraient le reflet d'une altération de la spermatogenèse avec une apoptose initiée et avortée dans le testicule associée à des anomalies de maturation et différentiation. La mesure des marqueurs d'apoptose dans les spermatozoïdes apporterait une aide dans la compréhension et la prise en charge de l'infertilité masculine, en particulier en assistance médicale à la procréation
In order to have a better insight into the implications of apoptosis markers in human ejaculated spermatozoa, the aim of our study was to measure these markers in the spermatozoa collected at different levels in the male genital tract in various physiopathological situations. To analyse the functional quality of these spermatozoa, the analysis of relationships between the expression of these markers and the results obtained after assisted reproductive technology was assessed. The markers analysed are factors that are involved in the initiation and activation of apoptosis (activated poly-caspases, caspases-3, -8, -9) and early (externalisation of phosphatidylsérine, PS), or late (DNA fragmentation) signs of apoptosis. Ultrastuctural analysis of the spermatozoa was also carried out for some samples. Measurement of the expression of activated caspases was subject of adjustment given the heterogeneity of the sperm samples and the low quantity of spermatozoa available. Finally, we decided on measurement using a double staining associating a green fluorescent inhibitor for the activated caspases and a red fluorescen vital staining (Propidium Iodide), with detection either by flow cytometry or by fluorescent microscopy depending on the type of spermatozoa to be analysed. In patients presenting congenital bilateral absence of vas deferens, the proportion of living or dead spermatozoa expressing activated caspases was higher in the testicular spermatozoa than in the epididymal spermatozoa suggesting that the apoptotic process started in the testicles and that epididymal spermatozoa were incapable of initiating apoptosis. Under these conditions, in case of ICSI, the risk of injecting an apoptotic spermatozoa into an ovocyte is higher with the testicular spermatozoa and could explain, in part, the different and inferior results obtained with these testicular spermatozoa, compared with epididymal spermatozoa. In the ejaculated spermatozoa of infertile reciprocal or Robertsonian autosomal translocation carriers, the expression of ultrastructural modifications and biochemical markers of apoptosis (activated caspases, DNA fragmentation, PS externalisation) associated with signs of ultrastructural immaturity was higher than in spermatozoa of fertile men. These results could explain that in the ejaculate of these patients, there is a predominance of chromosomal balanced spermatozoa. The gametes presenting an imbalance would have been preferentially eliminated by apoptosis. In conclusion, the apoptosis markers expressed by ejaculated spermatozoa would reflect the impairment of spermatogenesis with apoptosis initiated and aborted in the testicle associated with maturation and differentiation abnormalities. So measurement of apoptosis markers in spermatozoa could be helpful for the understanding of male infertility, particularly to predict the outcome of assisted reproductive technologies

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Heyraud, Dominique. "Evolution de l'oligo-asthénospermie dans l'infertilité masculine." Montpellier 1, 1993. http://www.theses.fr/1993MON11083.

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Metzler-Guillemain, Catherine. "Etude structurale et fonctionnelle de la vésicule sexuelle au cours de la méiose masculine." Aix-Marseille 2, 2003. http://www.theses.fr/2003AIX20670.

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Koscinski, Isabelle. "Génétique de l'infertilité." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2008. http://www.theses.fr/2008STR13216.

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Abstract:

L’infertilité touche au XXIème siècle un couple sur 5. La publication de cas familiaux d’infertilité suggère de possibles causes génétiques à l’infertilité. Le travail comporte deux parties :1. La globozoospermie. Une analyse de liaison par puces ADN 10K est réalisée dans une fratrie consanguine (3 frères globozoospermiques et 3 fertiles) et révèle une mutation de Spermatogenesis Associated 16 (SPATA16). Un trouble de l’épissage de l’exon 4 est suspecté et confirmé in vitro (SPATA16 humaine est exclusivement testiculaire). L’exon 4 exclu en cas de mutation contient un domaine tétratricopeptidique, domaine d’interaction protéine/protéine. Cette étude précise le diagnostic d’infertilité familiale et élargit les connaissances sur la biogenèse de l’acrosome. Enfin, spécifiquement testiculaire, SPATA16 est une cible intéressante de contraception masculine. 2. Recherche d’une cause génétique aux échecs inexpliqués d’implantation embryonnaire avec l’étude des mucines endométriales MUC1 et MUC4, potentiellement impliquées dans l’inhibition de l’implantation embryonnaire. La région centrale des mucines, codée par l’exon 2, présente un polymorphisme VNTR. Une petite taille VNTR est suspecte d’entraîner des échecs d’implantation embryonnaire humaine. MUC1 et MUC4 sont étudiées ici, du polymorphisme VNTR (par Southern blot) à l’expression endométriale (ARNm par RT-PCR et protéine par immunohistochimie) dans 3 populations : femmes fertiles spontanément, femmes ayant eu un enfant par FIV et femmes présentant plusieurs échecs inexpliqués d’implantation embryonnaire. Aucune différence significative de polymorphisme VNTR ou d’expression n’est retrouvée n’est entre les 3 groupes.

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Marchetti, Carole. "L'apoptose dans le sperme éjaculé : une piste pour le développement de nouveaux marqueurs potentiels de l'infertilité masculine ?" Lille 2, 2006. http://www.theses.fr/2006LIL2S057.

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Abstract:

Récemment, il a été émis l'hypothèse que la mort cellulaire des spermatozoïdes par apoptose puisse représenter une cause d'infertilité masculine et par conséquent, que les événements apoptotiques présents dans les spermes éjaculés seraient potentiellement de nouveaux marqueurs diagnostiques de l'infertilité masculine utilisables pour orienter les choix des techniques d'assistance médicale à la procréation. L'objectif de ce travail a été de tester cette hypothèse sur des échantillons de spermes provenant de patients infertiles enrôlés dans des protocoles de fécondation in vitro (FIV). Pour se faire, dans un premier temps, l'analyse en cytométrie de flux des stigmates apoptotiques classiques de cellules somatiques (chute du potentiel de membrane mitochondriale (dpm), génération de substances réactives de l'oxygène, fragmentation de l'ADN et perte de viabilité) a été réalisée en parallèle de l'analyse conventionnelle du spermogramme. Nous avons ainsi observé que parmi ces marqueurs apoptotiques, la détermination du dpm représentait le test le plus sensible pour évaluer la qualité des spermes de patients infertiles puisque le pourcentage de spermatozoïdes à dpm élevé était fortement corrélé à la mobilité fléchante et aux taux de fécondation après FIV. Nous avons ensuite pu démontrer que la détection par cytométrie en flux des caspases actives -des enzymes impliquées dans l'apoptose des cellules somatiques- dans les spermes éjaculés est également le reflet de la qualité des spermatozoïdes. Pleinement convaincus de l'utilité de la détection des marqueurs apoptotiques dans les spermes de patients infertiles, notre attention s'est ensuite focalisée sur la mise en place de conditions optimales pour détecter de manière fiable les variations du dpm au laboratoire de biologie de la reproduction. Nos résultats indiquent que plusieurs fluorochromes sont utilisables de manière identique pour détecter avec précision les variations du dpm dans les spermatozoïdes en cytométrie de flux, leur choix dépendant de leurs caractéristiques spectrales afin de les utiliser pour des marquages multiparamétriques. Encouragés par ces résultats, nous avons souhaité caractériser les capacités fécondantes des spermatozoïdes en fonction de leur dpm. En utilisant le tri cellulaire par cytométrie, nous avons montré que les spermatozoïdes viables à dpm élevé représentaient une sous population de spermatozoïdes de haute qualité aux capacités élevées de fécondation, puisqu'ils avaient une morphologie normale, une mobilité importante et étaient capables de subir la réaction acrosomique induite par le calcium ionophore. Enfin, nous avons étudié l'influence du pourcentage de spermatozoïdes ayant des mitochondries fonctionnelles, sur le succès des FIV. Nous avons ainsi observé que lorsque l'éjaculat présente moins de 64 % des spermatozoïdes avec un dpm élevé, aucune grossesse n'est observée après FIV. En conclusion, notre travail démontre l'intérêt de développer l'évaluation des marqueurs apoptotiques au laboratoire de biologie de la reproduction et en particulier, la détermination du dpm dans les spermes éjaculés fournit une information précise capable d'identifier les patients à au risque d'échec de FIV.

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Arkhis, Ahmed. "Contribution à l'étude des nucléoprotéines basiques du spermatozoïde humain." Paris 12, 1992. http://www.theses.fr/1992PA120001.

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Abstract:

Apres purification et caracterisation des proteines intermediaires (hpi1, hpi2, hps1, hps2) et des protamines de type p2(hp2, hp3, hp4), l'etude a montre que toutes ces proteines sont structurellement et immunologiquement apparentees. En effet, toutes ces proteines partagent une sequence c-terminale de 54 residus equivalent a la protamine hp3. En tenant compte des homologies de structure et de la taille de ces proteines, la proteine hpi1 peut etre consideree comme le precurseur des protamines hp2, hp3 et hp4. La protamine hpi1 subit une maturation pendant laquelle les proteines hpi2 (81 residus), hps1 (69 residus) et hps2 (66 residus) sont liberes et correspondent donc a trois pro-protamines. Dans ce groupe, la protamine hp2 s'est revelee phosphorylee. La protamine hp1 (de type p1) se trouve sous forme non phosphorylee mono et diphosphorylee. L'analyse quantitative de ces memes proteines isolees a partir de spermatozoides d'hommes steriles met en evidence des modifications dans la teneur de ces proteines suggerant un disfonctionnement dans le processus de maturation. Ceci pourrait etre a l'origine de la sterilite

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Aldebert, Isabelle. "Le facteur masculin dans la fécondation in vitro." Montpellier 1, 1989. http://www.theses.fr/1989MON11068.

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Ferfouri, Fatma. "Anomalies génétiques et épigénétiques de l’ADN spermatique et infertilité masculine." Versailles-St Quentin en Yvelines, 2012. http://www.theses.fr/2012VERS0054.

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Abstract:

L’infertilité masculine parait augmenter depuis plusieurs décennies. Ses étiologies sont multiples, mais les causes génétiques et épigénétiques paraissent importantes. Nous avons dans cette thèse étudié différentes causes génétiques et épigénétiques d’infertilité en mettant en évidence les anomalies portées par les spermatozoïdes et parfois transmissibles au conceptus. Ce travail comporte trois parties, à savoir, tout d'abord, les infertilités associées à des anomalies du caryotype constitutionel en étudiant les conséquences pour le risque chromosomique porté par les spermatozoïdes avec le risque évalué sur tous les spermatozoïdes puis, les infertilités, à caryotype constitutionel normal, dont l’origine génique a parfois été démontrée et où la morphologie spermatique est altérée avec les spermatozoïdes macrocéphales, les spermatozoïdes globozoocéphales et les spermatozoïdes à larges ou petites vacuoles et enfin, les anomalies de la méthylation de l’ADN dans les différentes étiologies d’azoospermie. Ces approches ont un triple intérêt car elles permettent d'évaluer les risques pour le conceptus, de guider la prise en charge des patients et le choix des spermatozoïdes à injecter dans l’ovocyte. A plus long terme grâce à une compréhension des mécanismes en jeu, prévenir des infertilités et proposer de véritables solutions thérapeutiques
The male infertility seems to increase for several decades. Infertility etiologies are multiple, but the genetic and epigenetic causes are important. Here, we tried to study, the abnormalities carried by spermatozoa and sometimes transmissible in the conceptus. This work contains three parts, in a first time, the infertility linked with abnomalities of constitutionel karyotype by studying the consequences for the chromosomal risk with the risk estimated on all spermatozoa, in a second time, the infertility, with normal constitutionel karyotype, where the genetic origin was sometimes demonstrated and sperm morphology altered with macrocephalic sperm, Globozoospermia and spermatozoa with large or small vacuoles and in fine, DNA methylation abnormalities in various azoospermic aetiologies. These approaches have a triple interest because, it estimate the risks for conceptus and advice patients care, guide the choice of spermatozoa to be injected in the oocyte

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Merignargues, Isabelle. "Evaluation de la fécondance des spermatozoïdes : apport respectif des tests inter-espèces (homme-hamster) et intra-espèce." Clermont-Ferrand 1, 1987. http://www.theses.fr/1987CLF11056.

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Abstract:

Après un rappel des mécanismes physiologiques de la fécondation, nous avons étudié dans une population d' hommes stériles : - l' incidence du spermogramme, du spermocytogramme, de la biochimie du sperme, de la spermoculture, sur le résultat du test de fécondance inter-espèces - la valeur prédictive du test de fécondance inter-espèces vis-à-vis de la grossesse (spontanée, par GIFT ou par FIV), de la segmentation des ovocytes in-vitro (test intra-espèce) - la valeur prédictive du test intra-espèce vis-à-vis de la grossesse par GIFT. Dans notre étude, le seuil de positivité du test de fécondance inter-espèces prédictif de la survenue d' une grossesse et de la segmentation in-vitro est de 4 %. La présence d' au moins un embryon en FIV est prédictif de la survenue d' une grossesse en GIFT.

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Pasteur, Xavier. "Contribution de la cytométrie en flux dans l'étude de la colorabilité de la chromatine des spermatozoïdes humains." Lyon 1, 1991. http://www.theses.fr/1991LYO1T014.

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Besson, Jaoul Monique. "Infertilité masculine et blessures symboliques dans la filiation : une étude comparative et psychodynamique." Paris 7, 2008. http://www.theses.fr/2008PA070048.

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Abstract:

Cette recherche est née de la constatation clinique de l'existence d'événements traumatiques dans la filiation de certains hommes souffrant d'infertilité en particulier dans la filiation de certains hommes souffrant d'infertilité en particulier dans la branche paternelle; il s'agira de déterminer si le projet de devenir père pourrait être entravée par les difficultés d'identification qui en résultent. L'approche psychodynamique sera consacrée à approcher le lien entre l'impact psychique de ces événements et la survenue d'une infertilité
The object of this study is the history of a set of infertile men through a filiation grid, based on psychoanalytical approach ; it examines the genealogical tree and applies the filiation grid to a sample of 30 înfertle men met in art departement cornpared to a reference group. The resuit shows a statistical difference in the two population. We can therefore assume than in the past génération play a part in some case of infertility

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Jguirim-Keller, Sihem. "Les paternités médicalement assistées : quelques considérations cliniques et psychopathologiques relatives aux nouvelles techniques de procréation." Paris 7, 2009. http://www.theses.fr/2009PA070093.

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Abstract:

Cette thèse en psychanalyse et médecine est enracinée dans un service médical d'assistance à la procréation d'une part et d'andrologie d'autre part. L'auteur envisage les aléas du travail de subjectivation de pères infertiles entre pesanteurs biotechnologiques et « bricolage » conscients et inconscients qui illustrent la limite de l'affirmation d'une paternité qui pourrait s'affranchir de sa corporéité. L'hypothèse d'une corporéité de la paternité non pas seulement somatique mais narcissique et libidinale est d'abord posée. Le fait que les nouvelles techniques de procréation soient prises dans le montage paradoxal du « pharmakon » en constitue la deuxième. La méthodologie repose sur les observations préliminaires des consultations médecin/patients qui continuent de revenir au service d'andrologie après une PMA couronnée de succès par une naissance puis sur des entretiens de recherche. Le paradigme de l'hypocondrie s'impose dans cette clinique comme « une boussole » pour comprendre la « guerre froide » du sujet ainsi mis à l'épreuve face à une médecine moderne armée des techniques. Le symptôme somatique d'impuissance sexuelle observé chez les patients présentés dans cette recherche vient comme pour attester qu'une atteinte au corps narcissique a eu lieu, atteinte que les substances pharmacologiques échouent à colmater. La pathologie hypocondriaque apparaît dans ce cas comme une suppléance au désastre de l'effacement de soi
This thesis in psychoanalysis and medicine is rooted in medical assistance to procreation on one hand and Andrology on the other. The author envisages the variety mode of subjectivation of infertile fathers between biotechnologiques heaviness and « handicrafts » conscious and unconscious. This work illustrate the limit of affirmation of paternity that could liberate from its corporeality. The hypothesis of a corporeality of paternity not only somatic but narcissist and libidinal is first stipulated. The fact that the new technology of procreation are taken in the paradoxical montage of "Pharmakon" constitutes the second. The methodology is based on preliminary observations of medical consultations doctor / patients who continue to return to the service of andrology after the PMA crowned with success by a childbirth and also on research interviews. The paradigm of hypochondria is imposed in this clinic as a "compass" to understand the "cold war" of the subject and also tested against a modem medicine armed with technology. The somatic symptoms of impotence observed at the patients presented in this research comes as if to certify that an attack of the narcissistic body takes place that chemical substances fail to stop it. The pathology hypochondriac appears in that case as a substitute to the disaster of the erasure of self

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Guichaoua, Marie-Roberte. "L'infertilité masculine d'origine chromosomique : ses mécanismes : apport de l'étude du stade pachytène dans les spermatocytes I en prophase de Méiose." Aix-Marseille 2, 1990. http://www.theses.fr/1990AIX21904.

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Boscher, Dominique. "Varicocèle primitif de l'enfant et de l'adolescent." Caen, 1990. http://www.theses.fr/1990CAEN3108.

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Gregoire, Anne-Sophie. "Mise au point d'une technique de PCR multiplex pour la recherche de microdélétions sur le chromosome Y." Paris 5, 1999. http://www.theses.fr/1999PA05P165.

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Raverot, Gérald. "Expression et fonction de Sox3 : du développement gonadique au contrôle de l'initiation de la spermatogenèse : étude d'un modèle de souris Sox3 KO et application à l'infertilité chez l'homme." Lyon 1, 2006. http://www.theses.fr/2006LYO10030.

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Abstract:

Sox3 a été proposé comme étant un gène clé du déterminisme sexuel. Cependant, les souris males Sox3 ko présente un développement testiculaire normal mais sont infertiles et présentent une altération de la spermatogenèse dès la période postnatale. A P14, les souris Sox3 ko n'avaient presque plus de cellules germinales en dehors des spermatogonies indifférenciées. Par immunohistochimie il a été démontré que Sox3 était exprimé par une sous-population de cellules germinales proliférantes localisées à la base des tubes séminifères. L'expression Sox3 colocalise avec neurogenin 3, un facteur de transcription impliqué dans la différentiation des spermatogonies. En l'absence de Sox3 l'expression de Ngn3 est réduite alors que celle d'Oct4, marqueur des spermatogonies indifférenciées est augmentée. Sox3 est donc exprimé par les spermatogonia As, Apr et Aal et, par une voie impliquant ngn3, est nécessaire à la spermatogenèse. Nous avons supposé que des mutations SOX3 pourraient se produire dans un groupe de patients infertiles. Cependant, nos données indiquent que les mutations dans le gène SOX3 ne sont pas une cause fréquente d'infertilité masculine

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Elinati, Elias. "Génétique de l'infertilité masculine." Phd thesis, Université de Strasbourg, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00872193.

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Abstract:

Le génotypage d'une famille jordanienne consanguine constituée de 5 frères globozoospermiques et de 3 frères fertiles sur puce Affymetrix, a permis d'identifier un nouveau gène responsable de la globozoospermie situé dans un intervalle de 6.4Mb en 12q14.2. Au regard de son expression prédominante dans le testicule et l'implication de son orthologue, chez C. elegans, dans la polarisation cellulaire, le gène DPY19L2 est un gène candidat parfait. Le gène, codant pour une protéine transmembranaire, est flanqué par deux séquences répétées (LCRs) qui partagent 96,5% d'identité. Dans une première étude, une délétion de 200Kb englobant l'ensemble du gène a été mise en évidence chez les 4 frères infertiles de cette famille jordanienne ainsi que chez 3 autres patients non apparentés. Nous avons ensuite recruté une plus grande cohorte de 54 patients. Parmi ces patients, 20 sont homozygotes pour la délétion de DPY19L2 et 7 sont hétérozygotes composites associant la délétion hétérozygote et une mutation ponctuelle. En outre, nous avons identifié, 4 patients avec des mutations ponctuelles homozygotes. Par conséquent, la fréquence d'implication de DPY19L2 s'élève à 66.7%. En tout, 9 points de cassures, regroupés en deux hotspots au sein des LCRs, ont pu être mis en évidence. Ceci confirme que le mécanisme sous-jacent de la délétion est une recombinaison homologue non allélique (NAHR) entre les LCRs. En conclusion, nous confirmons que DPY19L2 est le principal gène de la globozoospermie et nous élargissons le spectre des mutations possible dans ce gène.

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Choucair, Fadi. "Exploration du transcriptome spermatique par le séquençage nouvelle génération et le portrait épigénétique de l’infertilité masculine." Electronic Thesis or Diss., Université Côte d'Azur (ComUE), 2018. http://www.theses.fr/2018AZUR4058.

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Abstract:

L’infertilité masculine est actuellement considérée comme un problème majeur qui pose une situation alarmante sur la santé publique. L’oligozoospermie, l’asthénozoospermie et la tératozoospermie sont les trois anomalies les plus connues des spermatozoïdes. Elles affectent, respectivement, la densité, la motilité et la morphologie des spermatozoïdes. Un spermatozoïde anormal est très souvent corrélé à des altérations génétiques et épigénétiques qui peuvent affecter considérablement le transcriptome. Dans ce sens, le séquençage aléatoire du transcriptome entier des spermatozoïdes ou RNA-seq constitue un outil puissant pour caractériser ces maladies. Jusqu’à présent, il n’existe aucune étude exploitant des données RNA-seq chez des hommes présentant de telles anomalies spermatiques. L’objectif principal de notre étude fût d’identifier des profils distincts des modifications du transcriptome de chaque phénotype d’infertilité pour ainsi révéler des gènes-signatures qui tamponnent une spermatogenèse pathologiquePour ce faire, les transcriptomes des spermatozoïdes de 60 sujets infertiles atteints soit d’oligozoospermie, d’asthénozoospermie ou de tératozoospermie ont été comparés à ceux de 20 patients fertiles. Ces analyses supervisées nous ont conduit à identifier: (i) les gènes clés spécifiques aux différentes anomalies des spermatozoïdes (ii) les voies de signalisation associées, (ii) les différents longs ARNs non codants dérégulés dans ces anomalies. Au niveau de l’oligozoospermie, les transcrits de spermatozoïdes dérégulés étaient associées à divers stades de la spermatogenèse, y compris le cycle cellulaire méiotique, l’assemblage du complexe synaptonémal, la cohésion des chromatides sœurs, les processus métaboliques de piRNA, le processus catabolique protéique dépendant de la voie de l’ubiquitine, à la réponse aux dommages de l'ADN et particulièrement le processus de fécondation. Quant à l’asthenozoospermia, la spermatogenèse, l’assemblage du cil, des voies métaboliques reliées à la spermatogenèse, la chimiotaxie et la physiologie des cellules immunitaires ont été significativement dérégulés. De plus, ce qui nous a intéressé au plus était l’analyse des transcrits sous-exprimés qui a permis l’identification de nombreux transcrits associées aux modifications des histones. Nous avons aussi mis en évidence une sous expression des gènes différentiellement exprimés qui définit la tératozoospermie. Cette sous expression est associée au système ubiquitine-protéasome, à l’organisation du cytosquelette, au cycle cellulaire, à la SUMOylation en réponse aux dommages de l'ADN et aux protéines de réparation ainsi qu’à de nombreux modulateurs épigénétiques. Les gènes signature de l'oligozoospermie ont été liés au processus de fécondation et les composants de la matrice extracellulaire, tandis que ceux de la tératozoospermie sont liés à la spermatogenèse et la morphogenèse cellulaire, alors que les gènes signature de l'asthénozoospermie sont impliqués dans l'assemblage du ribosome et du flagelle. En complément de cette étude, nous avons réalisé une étude très globale du paysage épigénétique du sperme des hommes infertiles. Nous avons, ainsi comparé les niveaux des espèces réactives de l’oxygène (ERO), de méthylation de l’ADN, ainsi que l’intégrité de la chromatine dans les spermatozoïdes de 30 individus infertiles avec ceux de 33 individus fertiles. Nos analyses montrent des niveaux élevés d’ERO chez les individus infertiles. Ces niveaux sont d’une part négativement corrélés avec les niveaux de méthylation globale de l’ADN et d’autre part négativement corrélés avec ceux de la 5-hydroxyméthylcytosine et de la 5-formylcytosine (intermédiaire dans le processus de déméthylation active). Ces derniers suggèrent qu’une infertilité associée au stress oxydatif conditionne l’épigénome du sperme. En conclusion, l’ensemble de notre travail apporte des ressources précieuses et originales dans la compréhension des pathologies de sperme
Male infertility is actually considered as a public alarming health problem. The sperm pathologies spectrum ranges between different phenotypes including oligozoospermia, asthenozoospermia and teratozoospermia depending on the sperm conventional parameters abnormalities. Abnormal sperm is characterized by genetic alterations and epigenetic alterations which can affect the transcriptome extensively. These alterations in RNA profiles are retrospectively indicative of aberrant spermatogenic events. RNA-seq is a powerful tool for comprehensive characterization of whole transcriptome. To date, RNA-seq analysis of sperm from infertile men has not been reported. Our objectives are: (i) recognize key clusters, key pathways and specific gene transcripts for different sperm abnormalities; (ii) catalog the spermatozoal lncRNAs in different sperm pathologies; (iii) identify signature genes which are mechanistically important in the cascade of events driving a pathological spermatogenesis; (iii) portray the global epigenetic landscape in sperm from infertile men. Expression data from 60 sperm samples from 3 groups of infertile men (oligozoospermia, asthenozoospermia, and teratozoospermia) were generated on Illumina HiSeq platform, compared to 20 fertiles, and the resulting gene expression patterns were analyzed for functional enrichment. Our supervised analyses identified numerous differentially expressed genes between fertile and infertile men. In oligozoospermia, the deregulated spermatozoal transcripts were associated with various stages of spermatogenesis including meiotic cell cycle, synaptonemal complex assembly, sister chromatid cohesion, piRNA metabolic process, ubiquitin-dependent protein catabolic process, cellular response to DNA damage stimulus and interestingly fertilization. As for asthenozoospermia, spermatogenesis, cilium assembly, metabolic-related pathways, chemotaxis and immune cell physiology were most significantly differentially expressed. Interestingly, numerous transcripts associated with histone modifications were highly down-regulated. With regards to teratozoospermia, we evidenced sperm-specific differentially expressed genes which are involved in the ubiquitin-proteasome, cytoskeleton organization, the cell cycle pathway, SUMOylation of DNA damage response and repair proteins, as well as many putative epigenetic modulators of gene expression.. We also attempted to identify distinct patterns of gene expression changes that were definite to the different abnormal sperm phenotypes in infertile men relative to controls. Signature genes of oligozoospermia were over-enriched by genes involved in fertilization and extracellular matrix components, while signature genes of teratozoospermia were enriched by genes involved in spermatogenesis and cellular components involved in morphogenesis, whilst signature genes of asthenozoospermia were enriched by genes implicated in ribosome and cilium assembly.We complemented this work by a parallel epigenetic analysis of the global epigenetic landscape in infertile men. We compared the levels of reactive oxygen species (ROS), DNA integrity and global epigenetic parameters in sperm from 33 infertile subjects with abnormal semen parameters compared to fertile individuals. We pointed out that infertile men are characterized by strikingly high levels of reactive oxygen species (ROS) which were in part negatively correlated with the global DNA methylation, and positively correlated with the levels of 5-hydroxymethylcytosine and 5-formylcytosine (active demethylation intermediates). These findings suggest that male infertility associated with oxidative stress shapes the sperm epigenetic landscape. In summary, this original work yielded a transcriptional portrait of sperm abnormalities and provided valuable resources that would further elucidate sperm pathologies

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Sermondade-Pichod, Nathalie. "Impact de l'indice de masse corporelle de l'homme sur les paramètres spermatiques et le pouvoir fécondant." Paris 13, 2012. http://www.theses.fr/2012PA132040.

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Abstract:

De nombreux facteurs concernant le mode de vie et l’environnement sont susceptibles d’agir sur la fertilité masculine, en provoquant des altérations des paramètres spermatiques, quantitatives ouqualitatives. Nos objectifs étaient d’évaluer les relations entre l’Indice de Masse Corporelle (IMC)masculin et les paramètres spermatiques, ainsi que les effets de la perte de poids. Dans une méta-analyse collaborative incluant plus de 13000 hommes, nous retrouvons un lien entre surpoids/obésité et oligo/azoospermie, ainsi qu’une association dose-effet entre l’IMC et le risque d’anomalie du nombre de spermatozoïdes. Nous relatons une corrélation positive entre IMC et intégrité nucléaire mesurée par la fragmentation de l’ADN spermatique, soulignant un rôle central du stress oxydant dans l’impact de l’obésité sur le sperme. En revanche, aucun lien entre IMC et capacité de fixation des spermatozoïdes à la zone pellucide ovocytaire n’a été observé. Nous rapportons le cas de cinq patients obèses infertiles acceptant une prise en charge hygiénodiététique personnalisée. Une diminution du taux de fragmentation de l’ADN spermatique a été retrouvée en parallèle à une modification de la composition corporelle. Enfin, nous rapportons le cas de trois patients pour lesquels une détérioration majeure des paramètres spermatiques a été observée dans les mois suivant la chirurgie bariatrique. Ce potentiel effet délétère justifie d’informer les patients et de leur proposer une auto-conservation préventive de spermatozoïdes. Ces données soulignent l’importance de la prise en compte de la corpulence des hommes en cas d’infertilité du couple, y compris lorsque les paramètres classiques du spermogramme sont normaux. Les perspectives de ce travail s’inscrivent dans la prise en charge globale, personnalisée et multidisciplinaire des deux membres du couple infertile. La nutrition apparaît comme un élément fondamental, mais aussi indissociable des autres facteurs environnementaux
Numerous factors concerning lifestyle and environment may affect male fertility, in particular by causing quantitative or qualitative sperm defects. The objectives of our work were to evaluate the relationship between male body mass index (BMI) and semen parameters, as well as the effects of weight loss. In a collaborative meta-analysis including more than 13000 individuals, we reported a link between overweight/obesity and oligo/azoospermia, as well as a dose-effect association between BMI and the risk to present an abnormal total sperm count. We found a positive correlation between BMI and nuclear integrity measured by sperm DNA fragmentation, underlining a key role of oxidative stress for the impact of obesity on sperm. On the other hand, no link between BMI and binding ability of sperm cells to the oocyte zona pellucida was observed. We reported the case of five infertile obese patients who accepted personalized dietary care. In parallel of a significant modification of body composition, a decrease of sperm DNA fragmentation rate was found. Finally, we also reported the case of three patients, for whom was observed an drastic decrease of semen parameters during the months following bariatric surgery. This potential deleterious effect justifies proposing preventive sperm cryopreservation. These data underline the importance to consider male corpulence in case of infertility of the couple, including when conventional sperm parameters are normal. The perspectives of this work join global, personalized and multidisciplinary care of both partners in case of infertility. Nutrition appears as a fundamental element, but also inseparable from other environmental factors

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Saut, Noëmie. "Délétions du chromosome Y et infertilité chez l'homme et chez la souris." Aix-Marseille 2, 2001. http://www.theses.fr/2001AIX20674.

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Walschaerts, Marie. "La santé reproductive de l'homme : méthodologie et statistique." Toulouse 3, 2011. http://thesesups.ups-tlse.fr/1470/.

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Abstract:

La santé reproductive de l'homme est un indicateur de la santé générale de celui-ci. Elle est également intimement liée aux expositions de l'environnement et du milieu de vie. Aujourd'hui, on observe une baisse séculaire de la qualité du sperme et une augmentation des pathologies et malformations de l'appareil reproducteur masculin. L'objectif de ce travail est d'étudier la santé reproductive de l'homme d'un point de vue épidémiologique et par le biais de différents outils statistiques. Nous nous sommes intéressés à l'incidence et aux facteurs de risque du cancer du testicule. Ensuite, nous avons étudié le parcours thérapeutique d'une population d'hommes ayant consulté pour infécondité masculine en analysant la relation entre leurs paramètres du sperme et leurs investigations andrologiques, ainsi que l'issue de leur projet parental. Enfin, l'événement naissance a été analysé en tenant compte de son délai de réalisation en utilisant des modèles de durées de vie incluant la censure à droite : modèles de Cox et arbres de survie. En y associant des techniques de sélection stable de variables (stepwise, pénalisation de type L1, bootstrap) les performances prédictives de ces méthodes ainsi que leur capacité à fournir aux cliniciens un modèle facilement interprétable ont été comparées. Dans le sud de la France, l'incidence du cancer du testicule a doublé au cours des 20 dernières années. L'effet cohorte de naissance, c'est-à-dire l'effet générationnel, suggère un effet délétère des expositions environnementales sur la santé reproductive de l'homme. Toutefois, aucune exposition du milieu de vie de l'homme durant sa vie adulte ne semble être un facteur de risque potentiel de survenue du cancer du testicule, suggérant l'hypothèse d'une exposition à des perturbateurs endocriniens in utero. Actuellement, la responsabilité de l'homme dans des difficultés à concevoir représente 50% des causes d'infertilité. La prise en charge de l'homme est donc essentielle. Dans notre cohorte de couples consultant pour des problèmes d'infertilité, un examen andrologique anormal est observé chez 85% des partenaires masculins. Une relation significative est observée entre l'examen de sperme et l'examen andrologique, suggérant la nécessité de pratiquer des investigations cliniques afin d'identifier les causes d'infertilité masculine. Finalement, un couple sur deux réussit à avoir un enfant. Et l'âge des hommes de plus de 35 ans apparaît comme un facteur de risque majeur, ce qui devrait encourager les couples à entamer leur projet parental le plus tôt possible. En prenant en compte la composante temporelle dans l'issue reproductive de ces couples inféconds, les modèles de durée de vie obtenus sont très souvent instables du fait du grand nombre de covariables. Nous avons intégré des techniques de rééchantillonnage à des approches de sélection de variables. Bien que l'approche Random Survival Forests soit la meilleure en qualité de prévision, ses résultats ne sont pas facilement interprétables. Concernant les autres méthodes, les résultats diffèrent selon la taille de l'échantillon. L'algorithme stepwise intégré au modèle de Cox ne converge pas si le nombre d'événements est trop faible. L'approche qui consiste à choisir la meilleure division en bootstrappant l'échantillon à chaque noeud lors de la construction d'un arbre de survie ne paraît pas avoir une meilleure capacité prédictive qu'un simple arbre de survie quand l'échantillon est suffisamment grand. Finalement, le modèle de Cox avec une sélection de variables par pénalisation de type L1 donne un bon compromis entre facilité d'interprétation et prévision dans le cas de petits échantillons
Male reproductive health is an indicator of his overall health. It is also closely linked to environmental exposures and living habits. Nowadays, surveillance of male fertility shows a secular decline in sperm quality and increased disease and malformations of the male reproductive tract. The objective of this work is to study the male reproductive health in an epidemiologic aspect and through various statistical tools. Initially, we were interested in the pathology of testicular cancer, its incidence and its risk factors. Then, we studied the population of men consulting for male infertility, their andrological examination, their therapeutic care and their parenthood project. Finally, the birth event was analyzed through survival models: the Cox model and the survival trees. We compared different methods of stable selection variables (the stepwise bootstrapped and the bootstrap penalisation L1 method based on Cox model, and the bootstrap node-level stabilization method and random survival forests) in order to obtain a final model easy to interpret and which improve prediction. In South of France, the incidence of testicular cancer doubled over the past 20 years. The birth cohort effect, i. E. The generational effect, suggests a hypothesis of a deleterious effect of environmental exposure on male reproductive health. However, the living environment of man during his adult life does not seem to be a potential risk factor for testicular cancer, suggesting hypothesis of exposure to endocrine disruptors in utero. The responsibility of man for difficulties in conceiving represents 50% of cases of infertility, making the management of male infertility essential. In our cohort, 85% of male partners presented an abnormal clinical examination (either a medical history or the presence of an anomaly in andrological examination). Finally, one in two couples who consulted for male infertility successfully had a child. The age of men over 35 appears to be a major risk factor, which should encourage couples to start their parenthood project earlier. Taking into account the survival time in the reproductive outcome of these infertile couples, the inclusion of large numbers of covariates gives models often unstable. We associated the bootstrap method to variables selection approaches. Although the method of Random Survival Forests is the best in the prediction performance, the results are not easily interpretable. Results are different according to the size of the sample. Based on the Cox model, the stepwise algorithm is inappropriate when the number of events is too small. The bootstrap node-level stabilization method does not seem better in prediction performance than a simple survival tree (difficulty to prune the tree). Finally, the Cox model based on selection variables with the penalisation L1 method seems a good compromise between interpretation and prediction

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Marsault, Ivan. "Stress oxydatif et infertilité masculine : étude comparative des effets de l'acide férulique et du férulate d'éthyle sur la survie des spermatozoi͏̈des après test de migration." Paris 5, 1999. http://www.theses.fr/1999PA05P077.

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Jerczynski, Olivia. "Rôle des microARNs et des protéines extracellulaires de l'épididyme murin dans la fertilité mâle." Master's thesis, Université Laval, 2018. http://hdl.handle.net/20.500.11794/30201.

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Abstract:

Seulement 30% des cas d'infertilité masculine peuvent être diagnostiqués grâce à un spermogramme. Comme l'épididyme joue un rôle important dans la maturation posttesticulaire spermatique, le dysfonctionnement de cet organe peut être à l'origine de cas d'infertilité non expliquée. Ainsi, puisque la communication intercellulaire au niveau du tractus reproducteur mâle est différente lorsqu’il y a un problème de fertilité, nous avons émis l’hypothèse qu’une signature moléculaire précise pourrait aider à mieux comprendre et diagnostiquer une plus large population. Pour ce faire, nous avons utilisé un modèle murin génétiquement modifié ayant une délétion conditionnelle (cKO) pour une enzyme impliquée dans la biogenèse des microARNs (miARNs) au niveau proximal de l’épididyme. Nous avons comparé le profil d’expression des miARNs et des gènes au sein de l’épididyme avec un modèle de souris témoin. Cent cinquante-quatre miARNs ont illustrés une forte diminution d’expression chez la souris génétiquement modifiée, dont miR-210, miR-672, miR-191 and miR-204. Notons également la variation d’expression des protéines AZGP1 (Zn-alpha 2-glycoprotein) et PATE4 (Prostate And Testis Expressed 4 protein) qui ont particulièrement attiré notre attention, car elles sont directement impliquées dans le pouvoir fécondant masculin. Deuxièmement, comme ces molécules se sont avérées être relarguées dans le milieu extracellulaire, nous avons décidé d’investiguer leur mode de sécrétion dans le liquide épididymaire afin d’évaluer leur potentiel en tant que biomarqueurs pour un certain type d’infertilité masculine. En nous référant aux critères de l’Organisation Mondial de la santé (OMS), j’ai créé une biobanque contenant 43 échantillons humains. J’ai pu mettre également en pratique une méthode plus actuelle d’isolement de vésicules membranaire à partir de fluide séminal. Finalement, j’ai validé l’association de 4 molécules (miR-672, miR- 191 and miR-204 et AZGP1) avec les exosomes. Tous ces résultats suggèrent donc qu’il existe un profil moléculaire associé au phénotype de fertilité et que ces nouvelles molécules extracellulaires pourraient aider à représenter des sous-types d’infertilité masculine.
Only 30% cases of male infertility can be diagnosed with a spermogram. As the epididymis plays an important role in spermatic post-testicular maturation, the dysfunction of this organ may be at the origin of unexplained infertility. Thus, since intercellular communication in the male reproductive tract is different when there is a fertility problem, we hypothesized that a precise molecular signature could help to better understand and diagnose a larger population. To do this, we used a genetically modified murine model with a conditional kockout (cKO) for an enzyme involved in the biogenesis of microRNAs (miRNAs) at the proximal level of the epididymis. We compared the epididymal miRNAs and genes expression pattern between a control and cKO mouse model. One hundred and fifty-four miRNAs showed a strong expression decrease in the genetically modified mice, including miR-210, miR-672, miR-191 and miR-204. Note also the variation in expression of the proteins AZGP1 (Zn-alpha 2-glycoprotein) and PATE4 (Prostate And Testis Expressed 4 protein) which have particularly attracted our attention, because they are directly involved in the male fertility. Secondly, since these molecules were found to be released into the extracellular environment, we decided to investigate their secretion pattern in the epididymal fluid in order to evaluate their potential as biomarkers for a certain type of male infertility. Referring to the criteria of the World Health Organization (WHO), I was able to create a biobank containing 43 human samples. I was also able to practice a more current method of isolating membrane vesicles from seminal fluid. Finally, I validated the association of 4 molecules (miR-672, miR-191 and miR-204 and AZGP1) with exosomes. All these results therefore suggest that there is a molecular profile associated with the fertility phenotype and that these new extracellular molecules might help to represent subtypes of male infertility.

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Ben, Khelifa Mariem. "Identification et caractérisation de gènes impliqués dans l'infertilité masculine." Phd thesis, Université de Grenoble, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00987437.

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Abstract:

Près de 15% des couples sont confrontés à des problèmes d'infertilité. Dans près de la moitié des cas, une composante masculine est retrouvée, avec souvent une anomalie des paramètres du spermogramme montrant une diminution de la qualité du sperme. L'étiologie de la grande majorité des infertilités masculines reste inconnue et une origine génétique est probablement responsable d'une proportion importante des troubles de la spermatogénèse. Ce travail comporte deux parties: dans la 1ère partie, l'analyse d'une large cohorte de patients (n=87), nous a permis d'identifier deux nouvelles mutations du gène AURKC. La mutation [c.36-2A>G] a été identifiée uniquement à l'état hétérozygote chez deux frères et le 2ème variant identifié [p.Y248*]: est une mutation récurrente retrouvée chez 11 patients non apparenté d'origine maghrébine et européenne. La 2ème partie de notre étude a été réalisée sur 20 patients infertiles présentant un phénotype homogène d'anomalies flagellaire de type flagelles courts, absents et de calibre irrégulier associé a une asthénozoospermie. Nous avons appliqué la stratégie d'homozygotie par filiation qui a permis de mettre en évidence deux régions d'homozygoties communes: la 1ère région, située sur le chromosome 3, est commune à 9/20 patients et la 2ème sur le chromosome 20 commune à 13/20 patients. Trois gènes candidats présents dans ces régions ont été sélectionnés : les gènes KIF9, SPAG4 et DNAH1. Le séquençage du gène DNAH1 a permis de mettre en évidence des mutations de type faux-sens [c.3877G>A], run-on [c.12796 T>C] et d'épissage [c.5094+1G>A] [c.11958-1G>A]. L'absence de la protéine DNAH1 a pu être mise en évidence par immunomarquage sur les spermatozoïdes d'un patients porteur de la mutation [c.11958-1G>A] et confirme la dégradation du transcrit muté par NMD également observé. Les analyses par microscopie électronique sur les spermatozoïdes d'un patient de la cohorte ont permis de mettre en évidence des anomalies de la structure de l'axonème. Cette étude précise le diagnostic d'infertilité masculine et élargit les connaissances sur les gènes impliquées dans la spermatogenèse.

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Elfassy-Zarka, Yaelle. "Impact du syndrome métabolique sur les fonctions de reproduction masculines : rôle des adipokines." Thesis, Sorbonne université, 2019. http://www.theses.fr/2019SORUS683.

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Abstract:

Le syndrome métabolique (SM), dont la prévalence augmente ces dernières décennies, a un impact négatif sur les fonctions de reproduction masculine. Les adipokines sécrétées par le tissu adipeux, jouent un rôle à différents niveaux sur l’axe de reproduction. Ces adipokines très peu étudiées dans le sperme pourraient être le lien entre SM et fertilité altérée. Nous avons donc étudié ces adipokines séminales, tout d’abord en validant la fiabilité de leur dosage dans le plasma séminal (SP) qui est une matrice visqueuse difficilement homogène. Une fois les conditions pré-analytiques déterminées pour obtenir des dosages fiables, nous avons étudié les adipokines séminales chez des patients métaboliquement normaux puis en contexte de SM ou non dans une cohorte de 160 hommes partenaires de couples infertiles. La durée d’infertilité était plus longue chez les hommes présentant un SM. Les adipokines étaient plus concentrées dans le sang que dans le SP, à l’exception de l’Interleukine-6 (IL-6) et de la visfatine. En cas de SM, l’adiponectine diminuait dans le sang de façon attendue, mais augmentait d’un facteur 2,1 dans le SP à la différence des autres adipokines qui variaient selon un profil identique dans le sang que dans le sperme. L’IL-6 séminale était corrélée positivement à la concentration, la mobilité progressive et la vitalité spermatiques. Ces données confirment l’importance de dépister le SM chez les hommes partenaires de couple infertile. Elles suggèrent notamment un rôle des adipokines séminales pour moduler la fertilité des hommes présentant un SM. L’IL-6 jouerait un rôle bénéfique les fonctions spermatiques potentiellement via l’AMPK. Les perspectives de ce travail s’inscrivent dans une prise en charge globale des couples infertiles afin de rétablir un métabolisme optimal à la conception
Metabolic syndrome (MS) which increase since last decades impairs male reproductive functions. Adipokines, secreted by adipose tissue, are involved in reproductive axis. These adipokines are poorly studied in semen and could be the link between MS and fertility. Fistly, we performed pre-analytical conditions to obtain reliable dosages in seminal plasma (SP). Thus, we studied seminal and circulating adipokines in metabolically normal patients and then in 160 male partners of infertile couple which present or not MS. Infertility time was longer in men with MS. Adipokines were more concentrated in blood than SP, except for Interleukin-6 (IL-6) and visfatin. In case of MS, adiponectin was decrease as expected, but 2.1 fold higher in SP than men without MS, unlike other adipokines which variate the same way in blood than in SP. Seminal IL-6 was significantly correlated with sperm concentration, progressive motility and vitality. These data confirm the importance of screening infertile patients for MS. It suggest an involvement of seminal adipokines to modulate fertility in men with MS, and that seminal IL-6 could play a beneficial role on sperm functions probably by AMPK actions. The perspectives of this work are part of a global management of infertile couples to restore optimal metabolism to procreate

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PIQUAOT, TROUVE CORINNE. "Du desir d'enfant a l'"enfant i. A. D. " : essai d'analyse sociologique du processus de parentalite dans les "familles i.a.d."." Caen, 2000. http://www.theses.fr/2000CAEN1294.

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L'insemination artificielle avec donneur permet aux couples dont le mari est sterile d'avoir un enfant. Les centres d'etudes et de conservation des oeufs et du sperme humains mettent a leur disposition, sous certaines conditions, le sperme de donneurs anonymes. Ils l'attribuent en tenant compte des caracteristiques physiques du mari, l'objectif etant de ne pas introduire chez l'enfant de dissemblances qui reveleraient l'artifice technique. Le simulacre de filiation naturelle est alors total. Aux yeux de tous le mari est le pere biologique de l'enfant. L'anonymat des donneurs, legalise par la loi bioethique de juillet 1994, ainsi que le secret de la conception, adopte par la majorite des "parents i. A. D. ", participent a ce processus. A partir de donnees recueillies aupres de "meres i. A. D. " "traitees" au c. E. C. 0. S. De caen, ce travail analyse la construction sociale de la parentalite dans ces familles deux elements sont mis en evidence. Tout d'abord, malgre l' "anonymisation" l'oubli total est impossible. De nombreux evenements rappellent aux parents leur parcours quelque peu particulier. Ensuite, meme si les aleas du quotidien tendent a faire d'eux des parents comme les autres, ils ne le sont jamais tout a fait en raison de ce mensonge" qui pese sur leur existence. Cette these montre que ce n'est pas tant l' "intrusion" d'un donneur qui s'avere problematique que la clandestinite dans laquelle est maintenu le mode de conception de l'enfant. Si la societe accepte l'i. A. D. , ce ne semble etre que dans la mesure ou celle-ci ne contribue pas a faire advenir l'idee de pluriparentalite.

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Nguyen, Minh Huong. "Infertilité masculine : fragmentation de l'ADN spermatique, ségrégation méiotique et facteurs génétiques." Thesis, Brest, 2015. http://www.theses.fr/2015BRES0034/document.

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Abstract:

L'infertilité affecte environ 15% des couples et l'étiologie est masculine dans la moitié des cas.Cette thèse étudie trois facteurs de l'infertilité masculine et se divise en deux parties décrites ci-dessous. Dans la première partie,l'équipement chromosomique et la fragmentation de I'ADN spermatique dans les gamètes d'hommes infertiles ont été étudiés par la technique FISH et TUNEL. Chez 4 patients présentant une mosaïque gonosomique, un taux élevé de gamètes aneuploïdes et de fragmentation de I'ADN spermatique a été observé. Concernant les l3 patients ayant une anomalie chromosomique de structure, l'équipement chromosomique et l'état de I'ADN spermatique ont été analysés dans chaque gamète. Les résultats montrent que les gamètes chromosomiquement déséquilibrés ont un ADN plus fragmenté que ceux dont l'équipement chromosomique est normal ou équilibré. Dans la deuxième partie, la mise au point d'une technique d'étude du transcriptome dans les spermatozoïdes a été faite sur des échantillons de sperme frais et congelé. La combinaison d'un gradient de densités discontinues et d'une lyse des cellules somatiques permet d'éliminer complètement des cellules somatiques en récupérant le maximum possible de spermatozoïdes dans le sperme. Le kit NucleoSpin RNA XS (Macherey Nagel) est plus adapté pour I'extraction d'ARN spermatiques que le kit d'extraction d'ARN de chez Qiagen. La pureté des ARN spermatiques est vérifiée par RT-PCR et le Bioanalyzer 2700. Ces deux méthodes donnent des résultats similaires et concordants. L'analyse de microarray montre que les spermatozoïdes frais ne partagent pas le même profil d'expression génétique que les spermatozoïdes congelés
Infertility affects about 15% of couples with male factor found in half of the cases. This Ph.D thesisinvestigates three causes of male infertility including chromosomal abnormality, genetic disorderand factors related to alterations in sperm DNA quality. The thesis is organized into two parts.In the first part, the chromosomal equipment and sperm DNA fragmentation in gametes of infertilemen were assessed by FISH and TUNEL. On the one hand, a high rate of aneuploid gametes andsperm DNA fragmentation were observed in four patients with gonosomal mosaicism. On the otherhand, analysis of chromosomal equipment and sperm nuclear DNA in each gamete from 13 patientswith structural chromosome abnormalities showed that unbalanced gametes have more fragmentedDNA than normal or balanced ones.In the second part, a technique for analysing the transcriptome in spermatozoa was developed onfresh and frozen semen. In fact, the combination of a discontinuous density gradient and a somaticcell lysis solution makes it possible to completely eliminate somatic cells and to recover as manysperms in the semen as possible. The XS NucleoSpin RNA kit (Macherey Nagel) was found to bemore suitable for RNA extraction than the RNA extraction kit from Qiagen. The purity of sperm RNA was verified by both RT-PCR and the Bíoanalyzer 2100. These two methods have yieldedsimilar and consistent results. The microarray analysis showed that fresh sperms do not share thesame gene expression profile than frozen ones

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Coutton, Charles. "Caractérisation génétique de moléculaire et l'infertilité masculine : applications à plusieurs formes sévères de tératozoospermie." Thesis, Université Grenoble Alpes (ComUE), 2015. http://www.theses.fr/2015GREAS023.

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Abstract:

L'infertilité masculine concerne plus de 20 millions d'homme à travers le monde et représente un véritable enjeu de santé public. Bien que multifactorielle, l'infertilité masculine a une composante génétique importante qui jusqu'à présent n'a été que peu étudiée. L'objectif de mon travail a été d'initier et de poursuivre les investigations génétiques sur trois phénotypes de tératozoospermie: les spermatozoïdes macrocéphales, la globozoospermie et les anomalies morphologiques multiples des flagelles (AMMF).Pour le premier phénotype, nous avons étudié 87 patients, dont 83 cas-index, présentant un phénotype de macrozoospermie. Nous avons trouvé la mutation c.144delC dans le gène AURKC chez 82% des patients (68/83) confirmant qu'il s'agit de l'évènement génétique prépondérant pour ce phénotype. Une nouvelle mutation récurrente, p.Y248*, entrainant la dégradation totale du transcrit anormal par nonsense-mediated mRNA decay, a été retrouvée chez 10 patients non‐apparentés. L'identification de deux mutations ancestrales dans AURKC maintenues au cours de l'évolution malgré leur effet délétère sur la reproduction chez l'homme homozygote, ouvre la question d'un potentiel avantage sélectif procuré par l'haplo-insuffisance d'AURKC.Pour le second phénotype, nous avons analysé une cohorte de 34 patients globozoospermiques par séquençage et MLPA (multiplex ligation-dependent probe amplification). Au total, la délétion homozygote de DPY19L2 a été retrouvée chez 22 patients sur 30 cas non apparentés (73.3%) et 3 nouvelles mutations ponctuelles ont été identifiées. Ces résultats indiquent que l'analyse moléculaire de DPY19L2 des patients globozoospermiques ne devrait pas être limitée à la recherche de la délétion homozygote de DPY19L2. Dans un second temps, nous avons démontré que la délétion récurrente de DPY19L2 était médiée par le mécanisme de recombinaison homologue non allélique (NAHR) entre deux séquences répétées homologues (LCR) de 28kb situées de chaque côté du gène. La très grande majorité des points de cassure surviennent dans une région de 1,2 kb située dans la partie centrale des LCRs. Cette région minimale de recombinaison est elle‐même centrée sur une séquence consensus de 13 nucléotides reconnue par PRDM9, une protéine à doigts de zinc qui favorise la survenue des cassures doubles brins initiant les processus de recombinaisons. Les modèles théoriques prédisent que, lors de la méiose, le mécanisme NAHR génère de novo plus d'allèles recombinés délétés que dupliqués. Étonnamment, dans la population générale les allèles DPY19L2 dupliqués sont trois fois plus fréquents que les allèles délétés. Nous avons développé une PCR digitale sur le sperme afin de mesurer le taux de délétions et de duplications de novo à ce locus chez des témoins. Tel qu'il était prédit par le modèle de NAHR, nous avons identifié un taux de délétions supérieur à celui des duplications. Ce paradoxe peut s'expliquer par la sélection qui s'opère à l'encontre des hommes infertiles porteurs de la délétion homozygote et potentiellement des hommes porteurs d'une délétion hétérozygote.Enfin pour le troisième phénotype, nous avons réalisé l'analyse par cartographie par homozygotie de 20 patients infertiles, dont 18 cas-index, présentant des anomalies morphologiques du flagelle. Cinq mutations homozygotes ont été identifiées dans le gène DNAH1 parmi les 18 patients non-apparentés (28%). Ce gène code pour une chaine lourde des bras internes de dynéine exprimée dans le testicule. Des analyses d'immunofluorescence et de RT-PCR ont confirmé le caractère pathogène d'une de ces mutations situées sur un site donneur d'épissage. Les analyses par microscopie électronique ont révélé une désorganisation générale de l'axonème incluant une disparition des doublets centraux et des bras internes de dynéine suggérant que DNAH1 est une protéine clé dans la biogenèse du flagelle du spermatozoïde
Male infertility affects more than 20 million men worldwide and represents a major health concern. Although multifactorial, male infertility has a strong genetic basis which has so far not been extensively studied. The objectives of my thesis were to initiate and conduct some genetic investigations on three specific phenotypes of teratozoospermia: macrozoospermia, globozoospermia and multiple morphological abnormalities of the flagella (MMAF).For the first phenotype, we studied 87 patients with macrozoospermia, including 83 index cases, and identified c.144delC, a pathogenic mutation in the AURKC gene in 82% of patients (68/83) confirming that this variant is the main cause of macrozoospermia. A new recurrent mutation, p.Y248*, leading to degradation of the mutant transcripts by non-sense mediated mRNA decay was identified in 10 unrelated patients. Patients with no identified AURKC mutation have a decreased rate of spermatozoa with a large head and multiple flagella. Identification of two ancestral mutations in AURKC maintained during evolution despite their negative effect on reproduction in homozygous men, raises the question of a potential selective advantage provided by the AURKC haploinsufficiency.For the second phenotype, we first analyzed 34 patients presenting with globozoospermia using MLPA (multiplex ligation-dependent probe amplification) and Sanger sequencing. In total, 22 of the 30 unrelated patients where homozygous for the DPY19L2 deletion (73.3%) and 3 novel point mutations were identified. These results suggest that the molecular investigation of the DPY19L2 gene in globozoospermic patients should not be limited to the detection of the DPY19L2 genomic deletion and open interesting perspectives for the identification of DPY19L2 partners during acrosome biogenesis. Subsequently, we demonstrated that the genomic deletion was mediated by Non-Allelic Homologous Recombination (NAHR) between two homologous 28-Kb Low Copy Repeats (LCRs) located on each side of the gene. The vast majority of genomic breakpoints fell within a 1.2-Kb region central to the 28-Kb LCR. A 13-mer consensus sequence is located in the centre of that 1.2-Kb region recognized by PRDM9, a multi-unit zinc finger binding protein that promotes the formation of double-strand breaks (DSBs) initiating the homologous recombination process. The accepted theoretical NAHR model predicts that during meiosis, NAHR produces more deleted than duplicated alleles. Surprisingly, array-CGH data show that, in the general population, DPY19L2 duplicated alleles are approximately three times as frequent as deleted alleles. In order to shed light on this paradox, we developed a sperm-based digital PCR to measure the de novo rates of deletions and duplications at this locus. As predicted by the NAHR model, we identified an excess of de novo deletions over duplications. These discording results may be explained by the purifying selection against sterile, homozygous deleted men. Heterozygous deleted men might also suffer a small fitness penalty.Lastly, for the third phenotype, homozygosity mapping was carried out on a cohort of 20 North African individuals, presenting with primary infertility resulting from impaired sperm motility caused by a mosaic of multiple morphological abnormalities of the flagella (MMAF). Five unrelated subjects out of 18 (28%) carried a homozygous variant in DNAH1, which encodes an inner dynein heavy chain and is expressed in testis. RT-PCR and immunostaining studies confirmed the pathogenic effect of one of these mutations located on a donor splice site. Electronic microscopy revealed a general axonemal disorganization including mislocalization of the microtubule doublets and loss of the inner dynein arms suggesting that DNAH1 plays a critical role in sperm flagellum biogenesis and assembly

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Voisin, Allison. "Physiologie de la réponse et de la tolérance immunes dans l'épididyme murin." Thesis, Université Clermont Auvergne‎ (2017-2020), 2018. http://www.theses.fr/2018CLFAC102.

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Abstract:

L’épididyme, organe clé de la fertilité masculine, est le lieu de maturation et de stockage des spermatozoïdes. Cependant, l’arrivée massive et tardive de ces cellules à la puberté, longtemps après la mise en place du répertoire du soi, en fait des cibles potentielles pour le système immunitaire qui risque de les détruire. Dans le même temps, l’épididyme est fréquemment la cible d’infections rétrogrades qui, non contrôlées, altèrent la fertilité. Par conséquent, l’épididyme doit mettre en place une réponse immunitaire efficace contre les agents pathogènes tout en établissant une tolérance envers les spermatozoïdes. Une altération de cet équilibre est impliquée dans 10 à 15% des cas d’infertilité masculine. Le testicule a longtemps été considéré, à tort, comme le seul organe possédant une immunité dans le tractus génital mâle, induisant un retard dans l’étude des autres organes, dont l’épididyme.Les travaux menés au cours de cette thèse visaient à compléter les connaissances disponibles sur les acteurs cellulaires et moléculaires potentiellement impliqués dans les mécanismes de maintien de l’équilibre immun dans l’épididyme murin. Mon premier objectif était d’identifier et de quantifier les populations de phagocytes mononucléaires et de lymphocytes, présents dans le tissu en contexte physiologique. J’ai ainsi identifié et localisé trois populations lymphocytaires jamais décrites dans l’épididyme murin. La suite de mes travaux a porté sur l’étude du Transforming growth factor-beta (TGF-β), dont la voie de signalisation est impliquée dans la tolérance aux spermatozoïdes chez la souris, sans que la molécule ou ses récepteurs y soient totalement décrits. Nous avons ainsi montré que les 3 isoformes du TGF-β et de ses récepteurs sont exprimées de manière différentielle tout au long de l’organe, suggérant des rôles variés dans la physiologie épididymaire, en plus de la tolérance aux spermatozoïdes.Ces études ont montré la richesse des mécanismes potentiellement impliqués dans l’équilibre immun épididymaire et offrent de nombreuses pistes de recherche qui viseraient à améliorer les traitements de l’infertilité masculine d’origine immunologique
The epididymis, a key organ of male fertility, is the place of maturation and storage of sperm. However, the massive and late arrival of these cells at puberty, long after the setting of self-tolerance, makes them potential targets for the immune system which risks to destroy them. At the same time, the male genital tract, in contact with the external environment, is frequently challenged by ascending pathogens, which, if not controlled, impair fertility. Therefore, the epididymis must develop an efficient immune response against pathogens while establishing effective tolerance towards sperm. Alteration of this equilibrium is involved in 10 to 15% of male infertility cases. Nevertheless, the immune system of the epididymis has long been neglected compared to that of the testis, due to the common and admittedly mistaken idea that the testis conferred their immune protection to the whole genital tract. The work carried out during this PhD. aimed to strengthen the available knowledge on cellular and molecular actors involved in the maintenance of the immune balance in the murine epididymis. My first objective was to identify and quantify the mononuclear phagocyte and lymphocyte populations present, at steady state, in the tissue. I identified and located three lymphocyte populations never described in the murine epididymis. The rest of my work focused on Transforming growth factor-beta (TGF-β), whose signaling pathway is involved in sperm tolerance in mice, but, its receptors had not been fully described in the organ. We have shown that the three TGF-β isoforms and their receptors are differently expressed throughout the organ, suggesting various roles in epididymal physiology, in addition to sperm tolerance.These studies have shown the diverse potential mechanisms involved in epididymal immune balance and offer many avenues for research to improve treatments of male infertility of immunological origin

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Bhatt, Samarth. "Segregation analysis of paracentric inversions in human sperm." Montpellier 1, 2008. http://www.theses.fr/2008MON1T002.

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Abstract:

Les inversions paracentriques sont des anomalies chromosomiques généralement considérées comme inoffensives. Toutefois, des cas de porteurs de chromosomes remaniés issus d'inversions paracentriques ont été rapportés, soulignant la nécessité d'étudier le comportement méiotique de ces anomalies. Seules quelques études ont été pratiquées, utilisant la technique de fécondation croisée Homme-Hamster, le typage génétique des spermatozoïdes (sperm typing) ou l'hybridation in situ fluorescente (FISH) par marquages centromériques ou télomériques. Afin d'améliorer l'efficacité de l'étude méiotique des inversions paracentriques, nous avons développé l'utilisation des sondes BAC qui permettent une localisation chromosomique précise des points de cassures chromosomiques et l'identification de tous les produits méiotiques des inversions dans le sperme humain. Les points de cassures et la ségrégation méiotique de 3 inversions paracentriques, inv(5)(q13. 2q33. 1), inv(9)(q21. 2q34. 13) et inv(14)(q23. 2q32. 13), ont ainsi été déterminés. Les taux de recombinants observés dans ces 3 inversions varient de 3,72% à12,55%. Cette localisation des points de cassures et l'analyse des séquences d'ADN adjacentes sont essentielles pour mettre en évidence la formation de boucles d'inversion, pour déterminer le risque de recombinaison à terme, ainsi que pour étudier les mécanismes méiotiques de formation des recombinaisons. Ainsi, la présence de régions d'ADN riches en recombinaisons et en duplications inter-chromosomiques a été mise en évidence, en complément de la formation de recombinants chromosomiques. Par ailleurs, une nouvelle technique de FISH multi-couleurs 3D (3D MCB FISH) a été adaptée aux spermatozoïdes humains pour l'analyse in situ des ségrégations. Cette approche permet de visualiser in situ les inversions paracentriques et d'estimer la fréquence de tous les types de recombinants issus de boucles d'inversion, de recombinaisons U-loop ou de processus de cassure/fusion des chromatides-soeurs.

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Monrose, Mélusine. "Etude des rôles du récepteur nucléaire CAR dans la physiologie et les physiopathologies testiculaires." Electronic Thesis or Diss., Université Clermont Auvergne (2021-...), 2022. http://www.theses.fr/2022UCFAC114.

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Abstract:

Les troubles de la fertilité représentent un enjeu majeur de santé publique puisqu’ils concernent des millions de personnes en âge de procréer à travers le monde. Le facteur masculin intervient dans 50% des cas identifiés d’infertilité du couple, impliquant des anomalies qualitatives et/ou quantitatives de la production spermatique. Cependant à l’heure actuelle, l’origine d’une grande partie des troubles de la reproduction masculine demeure inexpliquée. Depuis plusieurs décennies le monde constate une augmentation de ces troubles, plus particulièrement dans les pays développés, attirant ainsi l’attention de la communauté scientifique sur l’implication des polluants environnementaux dans l’étiologie de l’infertilité. Le nombre et la diversité des polluants xénobiotiques relargués dans la nature sont colossaux et menacent de nombreuses fonctions physiologiques dont la reproduction, en raison de leurs capacités d’interaction avec de multiples voies de signalisations. Selon les chercheurs, l’exposition périnatale aux xénobiotiques peut altérer la physiologie testiculaire et prédisposer au développement de troubles de la fertilité. Néanmoins, une meilleure compréhension des signalisations associées aux molécules environnementales et de leurs liens avec les physiopathologies testiculaires est essentielle afin d’identifier de nouvelles causes d’infertilité. Les récepteurs CAR et PXR sont des récepteurs de xénobiotiques exprimés dans le testicule chez l’Homme ainsi que chez le rongeur. Cependant leurs rôles au sein du testicule n’ont pas encore été entièrement établis. Dans cette étude, nous avons étudié les impacts sur la physiologie testiculaire et sur la fonction de reproduction des modulations néonatales de leur signalisation dans un modèle murin. Nos résultats montrent que l’inhibition de la signalisation CAR entraîne des troubles de la fertilité chez la souris, associés à des altérations qualitatives des spermatozoïdes. En effet, nous avons identifié des défauts au niveau des processus de différenciation précoce et tardif des cellules germinales impliquant notamment des dérégulations de la signalisation FOXO1 ainsi que des niveaux d’acétylation de l’histone H4pouvant être associées à une rétention des histones au sein du génome spermatique. De plus, nous avons également mis en évidence des impacts délétères additifs des activations néonatales des voies de signalisation CAR et PXR sur la fertilité des souris. Notre étude souligne les rôles majeurs des récepteurs nucléaires CAR et PXR dans la physiologie testiculaire ainsi que leur implication potentielle dans la survenue des troubles de la fertilité dans un contexte d’expositions environnementales
Fertility disorders are a major public health concern since they concern millions of people of reproductive age all over the world. The male factor is involved in 50% of identified cases of infertility within couples, involving qualitative and quantitative alterations of the sperm production. However, there are still too many unknowns regarding the cause of many male reproductive disorders. For several decades, an increase in these disorders has been detected especially in developed countries, attracting the scientific community attention to the involvement of environmental pollutants in the etiology of infertility. The number and variety of xenobiotics released into the environment are huge and threaten many physiological functions because of the multiple intracellular signalling pathways that they can affect. According to the researchers, perinatal exposure to xenobiotics may induce altered testicular physiology and predispose to the development of fertility disorders. However, It is essential to better understand the signalling pathways involved in the negative environmental impacts of xenobiotics on testicular physiology to identify other causes of infertility. CAR and PXR are xenobiotic receptors expressed in the testis in men as well as rodents. However, their roles within the testis have not been fully established. In this study, we have identified impacts of neonatal modulations of their signalling on the testicular physiology and the reproduction function in mice. Our data showed that the inhibition of CAR signalling leads to fertility disorders in mice, correlated with qualitative sperm production. Indeed, we have detected alterations in the early and late differentiations of germ cells, notably involving FOXO1 signalling and H4 acetylation levels deregulations that can be associated with histones retention within the sperm genome. Moreover, we have highlighted deleterious additive impacts of the neonatal co-activation of CAR and PXR signalling of mice fertility. Our study has identified major roles of CAR and PXR nuclear receptors in testicular physiology and their potential implication in the emergence of fertility disorders associated with environmental exposures

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Choucair, Fadi. "Exploration du transcriptome spermatique par le séquençage nouvelle génération et le portrait épigénétique de l’infertilité masculine." Thesis, Université Côte d'Azur (ComUE), 2018. http://www.theses.fr/2018AZUR4058/document.

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Abstract:

L’infertilité masculine est actuellement considérée comme un problème majeur qui pose une situation alarmante sur la santé publique. L’oligozoospermie, l’asthénozoospermie et la tératozoospermie sont les trois anomalies les plus connues des spermatozoïdes. Elles affectent, respectivement, la densité, la motilité et la morphologie des spermatozoïdes. Un spermatozoïde anormal est très souvent corrélé à des altérations génétiques et épigénétiques qui peuvent affecter considérablement le transcriptome. Dans ce sens, le séquençage aléatoire du transcriptome entier des spermatozoïdes ou RNA-seq constitue un outil puissant pour caractériser ces maladies. Jusqu’à présent, il n’existe aucune étude exploitant des données RNA-seq chez des hommes présentant de telles anomalies spermatiques. L’objectif principal de notre étude fût d’identifier des profils distincts des modifications du transcriptome de chaque phénotype d’infertilité pour ainsi révéler des gènes-signatures qui tamponnent une spermatogenèse pathologiquePour ce faire, les transcriptomes des spermatozoïdes de 60 sujets infertiles atteints soit d’oligozoospermie, d’asthénozoospermie ou de tératozoospermie ont été comparés à ceux de 20 patients fertiles. Ces analyses supervisées nous ont conduit à identifier: (i) les gènes clés spécifiques aux différentes anomalies des spermatozoïdes (ii) les voies de signalisation associées, (ii) les différents longs ARNs non codants dérégulés dans ces anomalies. Au niveau de l’oligozoospermie, les transcrits de spermatozoïdes dérégulés étaient associées à divers stades de la spermatogenèse, y compris le cycle cellulaire méiotique, l’assemblage du complexe synaptonémal, la cohésion des chromatides sœurs, les processus métaboliques de piRNA, le processus catabolique protéique dépendant de la voie de l’ubiquitine, à la réponse aux dommages de l'ADN et particulièrement le processus de fécondation. Quant à l’asthenozoospermia, la spermatogenèse, l’assemblage du cil, des voies métaboliques reliées à la spermatogenèse, la chimiotaxie et la physiologie des cellules immunitaires ont été significativement dérégulés. De plus, ce qui nous a intéressé au plus était l’analyse des transcrits sous-exprimés qui a permis l’identification de nombreux transcrits associées aux modifications des histones. Nous avons aussi mis en évidence une sous expression des gènes différentiellement exprimés qui définit la tératozoospermie. Cette sous expression est associée au système ubiquitine-protéasome, à l’organisation du cytosquelette, au cycle cellulaire, à la SUMOylation en réponse aux dommages de l'ADN et aux protéines de réparation ainsi qu’à de nombreux modulateurs épigénétiques. Les gènes signature de l'oligozoospermie ont été liés au processus de fécondation et les composants de la matrice extracellulaire, tandis que ceux de la tératozoospermie sont liés à la spermatogenèse et la morphogenèse cellulaire, alors que les gènes signature de l'asthénozoospermie sont impliqués dans l'assemblage du ribosome et du flagelle. En complément de cette étude, nous avons réalisé une étude très globale du paysage épigénétique du sperme des hommes infertiles. Nous avons, ainsi comparé les niveaux des espèces réactives de l’oxygène (ERO), de méthylation de l’ADN, ainsi que l’intégrité de la chromatine dans les spermatozoïdes de 30 individus infertiles avec ceux de 33 individus fertiles. Nos analyses montrent des niveaux élevés d’ERO chez les individus infertiles. Ces niveaux sont d’une part négativement corrélés avec les niveaux de méthylation globale de l’ADN et d’autre part négativement corrélés avec ceux de la 5-hydroxyméthylcytosine et de la 5-formylcytosine (intermédiaire dans le processus de déméthylation active). Ces derniers suggèrent qu’une infertilité associée au stress oxydatif conditionne l’épigénome du sperme. En conclusion, l’ensemble de notre travail apporte des ressources précieuses et originales dans la compréhension des pathologies de sperme
Male infertility is actually considered as a public alarming health problem. The sperm pathologies spectrum ranges between different phenotypes including oligozoospermia, asthenozoospermia and teratozoospermia depending on the sperm conventional parameters abnormalities. Abnormal sperm is characterized by genetic alterations and epigenetic alterations which can affect the transcriptome extensively. These alterations in RNA profiles are retrospectively indicative of aberrant spermatogenic events. RNA-seq is a powerful tool for comprehensive characterization of whole transcriptome. To date, RNA-seq analysis of sperm from infertile men has not been reported. Our objectives are: (i) recognize key clusters, key pathways and specific gene transcripts for different sperm abnormalities; (ii) catalog the spermatozoal lncRNAs in different sperm pathologies; (iii) identify signature genes which are mechanistically important in the cascade of events driving a pathological spermatogenesis; (iii) portray the global epigenetic landscape in sperm from infertile men. Expression data from 60 sperm samples from 3 groups of infertile men (oligozoospermia, asthenozoospermia, and teratozoospermia) were generated on Illumina HiSeq platform, compared to 20 fertiles, and the resulting gene expression patterns were analyzed for functional enrichment. Our supervised analyses identified numerous differentially expressed genes between fertile and infertile men. In oligozoospermia, the deregulated spermatozoal transcripts were associated with various stages of spermatogenesis including meiotic cell cycle, synaptonemal complex assembly, sister chromatid cohesion, piRNA metabolic process, ubiquitin-dependent protein catabolic process, cellular response to DNA damage stimulus and interestingly fertilization. As for asthenozoospermia, spermatogenesis, cilium assembly, metabolic-related pathways, chemotaxis and immune cell physiology were most significantly differentially expressed. Interestingly, numerous transcripts associated with histone modifications were highly down-regulated. With regards to teratozoospermia, we evidenced sperm-specific differentially expressed genes which are involved in the ubiquitin-proteasome, cytoskeleton organization, the cell cycle pathway, SUMOylation of DNA damage response and repair proteins, as well as many putative epigenetic modulators of gene expression.. We also attempted to identify distinct patterns of gene expression changes that were definite to the different abnormal sperm phenotypes in infertile men relative to controls. Signature genes of oligozoospermia were over-enriched by genes involved in fertilization and extracellular matrix components, while signature genes of teratozoospermia were enriched by genes involved in spermatogenesis and cellular components involved in morphogenesis, whilst signature genes of asthenozoospermia were enriched by genes implicated in ribosome and cilium assembly.We complemented this work by a parallel epigenetic analysis of the global epigenetic landscape in infertile men. We compared the levels of reactive oxygen species (ROS), DNA integrity and global epigenetic parameters in sperm from 33 infertile subjects with abnormal semen parameters compared to fertile individuals. We pointed out that infertile men are characterized by strikingly high levels of reactive oxygen species (ROS) which were in part negatively correlated with the global DNA methylation, and positively correlated with the levels of 5-hydroxymethylcytosine and 5-formylcytosine (active demethylation intermediates). These findings suggest that male infertility associated with oxidative stress shapes the sperm epigenetic landscape. In summary, this original work yielded a transcriptional portrait of sperm abnormalities and provided valuable resources that would further elucidate sperm pathologies

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Vigneron-Dousset, Brigitte. "Etudes de certains facteurs de croissance en biologie humaine : l'axe somatotrope et son exploration, les insulin-like growth factors et leurs activateurs de faible masse moléculaire, les facteurs de croissance et la fertilité masculine." Nancy 1, 1997. http://www.theses.fr/1997NAN19009.

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Le but de ce travail consiste en une approche destinée à préciser le rôle joué par certains facteurs de croissance dans les domaines de la croissance et de la fertilité. L'exploration de l'axe somatotrope et la contribution de ses différents acteurs ont permis de mieux cerner les mécanismes qui pourraient contribuer à l'accélération transitoire de la croissance constatée dans les mois suivant la transplantation rénale en dehors de toute thérapeutique par hormone recombinante. L'approche plus fondamentale concerne la purification et l'identification, à partir de sérum humain, d'un hexapeptide, de structure primaire : HWESAS, stimulant in vitro les activités de sulfatation et mitogénique des insulin-like growth factors. Les études originales réalisées sur les cytokines dans le sperme humain laissent entrevoir l'implication potentielle de ces facteurs de croissance dans l'hypofertilité masculine. Ce travail met en exergue la diversité et les multiples facettes des facteurs de croissance ouvrant des perspectives dans la compréhension de leurs interactions dans le fonctionnement et la régulation des activités cellulaires.

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Givelet, Maëlle. "Étude des cellules souches germinales : caractérisation des cellules souches germinales humaines et effets de l'hypoxie Transcriptional landscape of spermatogonial stem cells and progenitors in human spermatogenesis Impact of hypoxia on the proliferation and colony-formation capacity of SSCs in culture Spermatogonial stem cells and progenitors are refractory to reprogramming to pluripotency by the transcription factors Oct3/4, c-Myc, Sox2 and Klf4." Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. http://www.theses.fr/2018USPCB038.

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Abstract:

Tout au long de la vie, les spermatozoïdes sont produits dans le testicule à partir des cellules souches germinales (CSGs), au cours du processus de spermatogenèse. Les CSGs ont la capacité de s'auto-renouveler pour maintenir le stock de cellules souches et d'entrer en différenciation. L'infertilité masculine est responsable dans un cas sur deux des difficultés à enfanter au sein du couple. Chez les patients traités par radiothérapie et/ou chimiothérapie (plus particulièrement chez les enfants atteints de cancer), un des effets secondaires majeurs qui altèrent la qualité de vie après guérison est l'atteinte du stock de CSGs et les problèmes d'infertilité qui en découlent. Des solutions thérapeutiques telles que la transplantation de CSGs provenant de biopsies testiculaires réalisées avant les traitements anticancéreux sont actuellement étudiées. Des travaux récents de transplantation testiculaire de CSGs chez le primate non humain ont permis de restaurer, chez l'animal stérilisé, une spermatogénèse permettant la fécondation in vitro d'ovocytes à partir de spermatozoïdes issus des CSGs transplantées. Ces résultats très encourageants font entrer pour la première fois la transplantation des CSGs dans le champ de l'application préclinique. Cependant, l'identité du pool de CSGs humaines et les mécanismes moléculaires gouvernant leur auto-renouvellement restent peu connus. Mon travail de thèse a porté sur la caractérisation des CSGs chez l'Homme. Au cours de ce projet j'ai également utilisé le modèle murin afin de mieux appréhender certains mécanismes de régulation physiologique des CSGs. Dans un premier temps, ce travail de thèse a contribué à définir, à l'aide d'une combinaison de marqueurs cellulaires et d'un test fonctionnel, la transplantation testiculaire, une population de spermatogonies immatures enrichie en CSGs. Le profil d'expression de cette population a été réalisé par une analyse transcriptomique, et nous a permis de définir un réseau de régulateurs de la transcription préférentiellement exprimé dans cette population. Parmi ces régulateurs, nous nous sommes focalisés sur l'étude du répresseur de transcription bHLH Hes1 dans le modèle murin. Dans des conditions de culture de privation de sérum et de facteurs de croissance, induisant un arrêt prolifératif et la quiescence, notre étude tend à montrer un rôle protecteur de Hes1 contre la mort cellulaire. Nous avons également observé une diminution du nombre de cellules ayant le potentiel à régénérer une spermatogenèse dans les cultures de CSGs lorsque l'expression de Hes1 est diminuée à l'aide de siRNA. Dans un second temps, nous avons étudié l'effet de l'hypoxie sur l'auto-renouvellement et la différenciation des CSGs murines en culture. En effet, l'hypoxie est une composante importante de la niche des cellules souches qui régule leur destin cellulaire. Nous avons observé qu'une forte hypoxie (1% et 0,1% d'oxygène) a un effet délétère sur la capacité des CSGs murines à former des colonies, et qu'elle induit modérément la quiescence et un début de différenciation. Un effet positif sur la fonctionnalité des CSGs adultes murines a été observé à 3,5% d'oxygène, mais ces conditions n'ont pas d'effets bénéfiques sur la prolifération et le maintien des CSGs humaines à long terme. Enfin, mon travail de thèse a contribué à une meilleure compréhension des mécanismes responsables de la reprogrammation spontanée vers la pluripotence des CSGs in vitro. Si les facteurs de Yamanaka sont efficaces pour la reprogrammation des cellules somatiques testiculaires, ils ne permettent pas celle des CSGs adultes. Ces résultats suggèrent donc l'existence d'un mécanisme spécifique empêchant la reprogrammation par les facteurs de Yamanaka des cellules germinales adultes en un état pluripotent
Throughout life, sperm cells are produced from germinal stem cells (GSCs) during the process of spermatogenesis in the testis. GSCs have the ability to self-renew to maintain stem cell stock and to differentiate. Male infertility is responsible in one out of two cases of issues of procreation. In patients treated with radiotherapy and/or chemotherapy (particularly in children with cancer), one of the major side effects that affects the quality of life after healing is the attrition of the GSCs stock and the subsequent problems of infertility. The most severe infertility issue, the Sertoli-Cell-Only syndrome with a complete germ cell aplasia, results from the exhaustion of the GSCs population. Therapeutic solutions such as transplantation of GSCs obtained from testicular biopsies harvested prior to cancer treatments are being studied. Recent studies on testicular transplantation of GSCs in non-human primates have shown the restoration, in the sterilized animal, of spermatogenesis allowing in vitro fertilization of oocytes by intracytoplasmic microinjection of spermatozoa derived from transplanted GSCs. These very encouraging results bring for the first time the transplantation of GSCs into the field of preclinical application. However, the identity of the pool of human GSCs and the molecular mechanisms governing their self-renewal remain poorly known. My thesis work focused on the characterization of GSCs in humans. During this project I also used the mouse model of GSCs to better understand some mechanisms of the physiological regulation of GSCs. As a first step, this thesis work has contributed to define, using a combination of cell markers and the testicular transplantation, as functional test, a population of immature spermatogonia enriched in GSCs. The specific expression profile of this population was performed by transcriptomic analysis, and allowed us to define a transcription regulator network preferentially expressed in this population. Among the enriched transcriptional regulators in the human immature spermatogonia population, we focused on the study of the bHLH transcriptional repressor Hes1 in the murine model. Under serum and growth factors-deprived conditions of culture inducing proliferative arrest and quiescence, our study tends to show a protective role of HES1 against cell death. In addition, we also observed a decrease in the number of cells with the potential to regenerate spermatogenesis in GSCs cultures when Hes1 expression is decreased. Secondly, we studied the effect of hypoxia on the self-renewal and differentiation of murine GSCs in culture. Indeed, hypoxia is an important component of the stem cell niche that regulates their cell fate. We observed that high hypoxia (1% and 0.1% oxygen) has a deleterious effect on the ability of murine GSCs to form colonies, and moderately induce quiescence and the onset of differentiation of GSCs. A positive effect on the functionality of murine adult GSCs has been observed at 3.5% oxygen, but these conditions do not support the proliferation and maintenance at long-term of human GSCs. Finally, this work has contributed to a better understanding of the mechanisms responsible for the spontaneous reprogramming to pluripotency of GSCs in vitro. While Yamanaka factors are effective for reprogramming testicular somatic cells, they do not allow reprogrammation of adult GSCs and spermatogonial progenitors. These results suggest the existence of a specific mechanism preventing reprogramming by Yamanaka factors of adult germ cells into a pluripotent state

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Kherraf, Zine-Eddine. "Exploration génétique et moléculaire de défauts post-méiotiques sévères de la spermatogenèse entrainant une infertilité masculine." Thesis, Université Grenoble Alpes (ComUE), 2018. http://www.theses.fr/2018GREAS010/document.

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Abstract:

L’infertilité est considérée actuellement par l’organisation mondiale de la santé (OMS) comme une préoccupation majeure de santé affectant plus de 50 millions de couples dans le monde. Dans les pays occidentaux, la majorité des couples infertiles ont recours aux techniques d’assistance médicale à la procréation (AMP) pour obtenir une grossesse. Malgré le succès de ces techniques, près de la moitié des couples qui ont recours à l’AMP sortent du parcours de soin sans enfant. Une partie de ces échecs est expliquée par l’altération de la gamétogenèse. Chez l’homme, la spermatogenèse fait interagir des centaines de gènes spécifiquement exprimés dans le testicule. L’abondance de ces gènes suggère que les troubles de la spermatogenèse présentent une forte composante génétique. Récemment, les avancées techniques ont favorisé l’identification de gènes responsables de ces anomalies mais la grande majorité des cas d’infertilité masculine reste classée comme idiopathique. L’objectif de la thèse est d’identifier de nouvelles causes génétiques responsables d’infertilité masculine et d’élucider les mécanismes physiopathologiques associés à ces anomalies.Au cours de ma thèse j’ai participé avec l’équipe GETI (génétique, épigénétique et thérapies de l’infertilité) à l’exploration génétique et moléculaire de deux phénotypes distincts d’anomalies spermatiques liés à des défauts post-méiotiques de la spermatogenèse : une forme rare d’azoospermie non obstructive (ANO) et le phénotype d’anomalies morphologiques multiples du flagelle spermatique (AMMF). Enfin j’ai joué un rôle important dans la création et l’analyse de modèles murins pour caractériser la pathogénie de ces anomalies.L’analyse génétique de deux frères infertiles nés de parents consanguins et présentant une ANO idiopathique associée à un arrêt post-méiotique de la spermatogenèse nous a permis d’identifier un variant homozygote délétère dans le gène SPINK2 qui code pour un inhibiteur de sérine-protéases. L’étude des souris KO pour ce gène nous a permis d’observer que les souris mâles adultes sont infertiles et miment parfaitement les phénotypes spermatique et testiculaire observés chez nos patients. Nous avons montré que la protéine codée par ce gène est exprimée dans l’acrosome à partir du stade de spermatide ronde. En l’absence de Spink2, l’activité protéolytique non-neutralisée des protéases cibles qui transitent par le Golgi cause sa fragmentation et bloque la spermiogénèse au stade de spermatide ronde. Nous avons également pu observer que les spermatozoïdes provenant de patients et de souris hétérozygotes présentent un taux élevé d’anomalies morphologiques et une baisse de la mobilité progressive conduisant à une hypofertilité à expressivité variable. Ces résultats montrent pour la première fois que l’oligo-tératozoospermie et l’azoospermie peuvent constituer un continuum pathologique dû à une même pathogénie.Nous avons également réalisé le séquençage exomique complet d’une cohorte de 78 individus AMMF non apparentés et avons identifié chez 49 sujets des mutations bi-alléliques délétères dans 11 gènes candidats dont DNAH1, CFAP43, CFAP44, WDR66 et FSIP2, soit un rendement diagnostique de 63%. Ces résultats confirment l’hétérogénéité génétique du phénotype MMAF et l’efficacité diagnostique du séquençage haut débit dans son exploration. Nous avons également validé l’implication de certains gènes candidats (n=4) dans ce phénotype chez le modèle murin knock-out créé par la nouvelle technologie d’édition du génome, CRISPR/Cas9.Dans son ensemble, ce travail montre l’intérêt et l’efficacité de la combinaison du séquençage exomique et de la technique de CRISPR/Cas9 pour étudier les troubles de la spermatogenèse et l’infertilité masculine
Infertility is currently considered by the World Health Organization (WHO) as a major health concern affecting more than 50 million couples worldwide. In western countries, the majority of infertile couples seek assisted reproductive technologies (ART) to achieve a pregnancy. Despite the success of these techniques, almost half of these couples fail to obtain a child. Part of these failures are explained by the alteration of gametogenesis. In humans, spermatogenesis involves hundreds of genes specifically expressed in the testis. The abundance of these genes suggests that spermatogenic defects are associated with a strong genetic component. Recently, technical advances have led to the identification of numerous causative genes, but the vast majority of male infertility cases remain idiopathic. The aim of the present thesis is to identify new genetic causes responsible for male infertility and to elucidate the physiopathological mechanisms associated with these anomalies.During my thesis, I participated with the team GETI (genetics, epigenetics and therapies of infertility) in the genetic exploration of two phenotypes of male infertility related to post-meiotic defects of spermatogenesis: a rare form of non-obstructive azoospermia and the phenotype of multiple morphological abnormalities of the sperm flagella (MMAF). I have also played a key role in creation and analysis of transgenic mice to better characterize the pathogeny of the identified genetic causes in Human.Genetic analyses performed on two infertile brothers born form consanguineous parents and presenting an-idiopathic non-obstructive azoospermia associated with a post-meiotic arrest of spermatogenesis allowed us to identify a homozygous variant in the SPINK2 gene that encodes a serine-protease inhibitor. Phenotypic analysis of Spink2-/- adult male mice showed that they are infertile and perfectly mimic the sperm and testicular phenotypes observed in our patients. We showed that Spink2 protein is expressed from the round spermatid stage and localized in the acrosome, a lysosomal-like vesicle rich in proteases that play a key role during fertilization. When Spink2 is absent, the deregulated proteolytic activity of the targeted proteases such as acrosin leads to the fragmentation of the Golgi apparatus and arrest of spermiogenesis at the round spermatid stage. We also showed that sperm from heterozygous human and mice present a high level of morphological abnormalities and a decrease of progressive motility leading to a variable subfertility. These results showed for the first time that oligo-teratozoospermia and azoospermia could present a pathological continuum due to the same pathogeny.We also performed exome sequencing in a cohort of 78 non related MMAF subjects and identified in 49 cases deleterious bi-allelic mutations in a total of 11 candidate genes including DNAH1, CFAP43, CFAP44, WDR66 and FSIP2 giving a genetic diagnosis yield of 63%. These results confirm the genetic heterogeneity of MMAF and the efficiency of high throughput sequencing in genetic exploration of this phenotype. We also demonstrated the pathogenic implication of certain candidate genes (n=4) using knock-out mice created by the new technology of genome editing, CRISPR/Cas9.Overall, this work demonstrates the interest and effectiveness of combining exome sequencing and CRISPR/Cas9 system to study spermatogenesis disorders and male infertility

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Dumargne, Marie-Charlotte. "Genetic and epigenetic factors associated with human male infertility." Thesis, Paris 6, 2016. http://www.theses.fr/2016PA066068.

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Abstract:

La spermatogenèse est un processus complexe qui dépend de la coopération de nombreux gènes. Son produit final le spermatozoïde, est un sujet d’étude idéal car il renferme à la fois des indices d’événements passés ainsi que des informations qui seront transmises à l'ovocyte lors de la fécondation. L'identification de nouveaux acteurs de la spermatogenèse, des modifications spécifiques de l'ADN du sperme ou la présence de transcrits spécifiques pourraient servir comme biomarqueurs dans le diagnostic de l’infertilité. Cette thèse avait pour but d’analyser le génome, le transcriptome et l’épigénome de spermatozoïdes dans le contexte de l'infertilité masculine. Nous avons identifié de nouvelles causes génétiques et confirmé la présence d'anomalies de méthylation dans le sperme d'hommes infertiles. Nous avons découvert 20 mutations dans le gène SOX8, chez des patients atteints de trouble du développement sexuel ou d'infertilité masculine ou féminine, qui apparaît comme un régulateur du développement et de la fonction gonadique. Par séquençage d’exome, une mutation dans le gène ATAD2 modeleur de la chromatine spécifique de la lignée germinale mâle fut également identifiée. Par RNA-seq et MeDIP-chIP du sperme d’hommes fertiles et infertiles, nous avons caractérisé la signature transcriptionnelle du sperme. La majorité des ARNs spermatiques humain est remarquablement conservée chez les mammifères placentaires suggérant des fonctions ancestrales importantes. Enfin, nos données transcriptomiques et épigénétiques tendent à indiquer qu’une expression et une régulation adéquates des gènes impliqués dans le remodelage de la chromatine constituent un facteur clé pour la fertilité masculine
Spermatogenesis is a complex process which depends on the cooperation of many genes. The end-product, the spermatozoon, is an ideal subject for study since it carries both clues of the past events and information which will be transmitted to the oocyte at fertilization. The identification of main actors of spermatogenesis, specific modifications of sperm DNAs or sperm specific isoforms could improve our understanding of a such complex mechanism and could serve as a determination of biomarkers or diagnostic tools for fertility. The aim of the project was to go further three omes: genome, epigenome and transcriptome of mature human sperm in the context of male infertility. We identified new genetic causes of male infertility and confirmed the presence of methylation abnormalities in sperm cells of infertile men. Firstly, SOX8 gene was found mutated in a cohort of 20 patients with disorder of sex development and male or female infertility. Similarly, to NR5A1, SOX8 appears to be a novel regulator of gonadal development and function. Then by exome-sequencing, we identified a homozygous nonsense mutation in the male germline-specific chromatin modeler ATAD2. Furthermore, RNA-seq and MeDIP-chIP of sperm from fertile and infertile men along with bioinformatics analyzes of the generated data, enabled us to characterize more deeply the normal sperm transcriptional signature. We also found that the majority of human sperm RNAs are remarkably preserved in placental mammals suggesting crucial ancestral functions. Finally, proper expression and regulation of chromatin remodelers seem to be critical for male fertility, as revealed by both the transcriptomic and the epigenetic data

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Lejeune, Hervé. "Régulations endocrines, paracrines et autocrines des cellules de Leydig : des modèles animaux au testicule humain, étude in vitro." Lyon 1, 1998. http://www.theses.fr/1998LYO1H114.

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Blagosklonov, Oxana. "Pathologie moléculaire du locus AZF : recherche de corrélation génotype-phénotype gonadique." Besançon, 2002. http://www.theses.fr/2002BESA0010.

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Kaafarani, Nizar. "Recherche de Chlamydia Trachomatis par amplification génique dans le sperme avant fécondation in vitro : une série de 103 couples." Bordeaux 2, 1998. http://www.theses.fr/1998BOR23015.

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Batias, Catherine. "Mise au point et validation d' une méthode d' étude de la toxicité testiculaire chez le rat mâle." Paris 5, 1995. http://www.theses.fr/1995PA05P221.

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Devianne, Isabelle. "Évaluation de la réaction acrosomique de spermes fertiles et hypoféconds in vitro, à l'aide de l'anticorps monoclonal GB24 et de la cytométrie en flux." Bordeaux 2, 1994. http://www.theses.fr/1994BOR23097.

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Van, Schoore Grégory. "Etude d'un récepteur orphelin apparenté aux récepteurs aux hormones glycoprotéiques, LGR4." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 2008. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/210545.

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Abstract:

Les récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) sont impliqués dans la majeure partie des communications intercellulaires. Un grand nombre de RCPG ont été découverts en comparant la séquence des récepteurs connus avec les données fournies par le séquençage du génome humain. Pour plus d'une centaine de ces récepteurs, le ligand activateur ou agoniste est inconnu. Ces récepteurs sont dès lors qualifiés d'orphelins.

Les LGR forment une sous-famille de RCPG structurellement proches de la rhodopsine qui comprend les récepteurs aux hormones glycoprotéiques (TSH, LH, hCG, FSH) et à la relaxine. LGR4 est un membre de cette famille dont ni la fonction précise, ni l'agoniste ne sont connus.

Dans un premier temps, une cartographie détaillée de l'expression de Lgr4 chez la souris a été obtenue. Nous avons tiré parti de l'existence d'une lignée de souris transgéniques dont le gène Lgr4 a été interrompu par l'introduction d'une cassette comportant deux marqueurs histologiques. L'activité beta-galactosidase d'un de ces marqueurs a été analysée chez les souris hétérozygotes. Ces dernières ne présentent pas de phénotype particulier, ce qui permet d'estimer que l'expression des marqueurs rend effectivement compte de l'expression normale du gène Lgr4. Lgr4 est exprimé dans un grand nombre de structures, notamment dans le cartilage, le rein, les appareils reproducteurs mâle et femelle et certaines cellules du système nerveux.

Ensuite, le phénotype des souris homozygotes pour l'inactivation de Lgr4 (LGR4KO) a été exploré. Ces souris présentent à la naissance un poids inférieur à leurs congénères des autres phénotypes. Les mâles sont stériles à cause d'une malformation des tubules efférents et de l'épididyme. Un blocage au niveau des tubules efférents reliant le testicule à l'épididyme contraint les spermatozoïdes à s'accumuler à la sortie du testicule, dans la région du rete testis. De plus, les tubes de l'épididyme, pourtant normaux à la naissance, ne s'allongent pas pour former la structure convolutée habituelle. L'épithélium de ces tubes est aplati et est entouré d'une quantité anormalement élevée de mésenchyme.

Dans un troisième temps, des outils nécessaires aux futures tentatives d'identification de l'agoniste naturel de LGR4 ont été réalisés. Il s'agit :(1) d'anticorps monoclonaux dirigés contre la partie extracellulaire du récepteur humain. (2) d'un appât moléculaire pour la ‘pêche au ligand’. Cet appât est constitué du domaine extracellulaire du récepteur humain couplé à un marqueur histologique. (3) d'une construction peptidique constituée du domaine extracellulaire du récepteur humain couplé à une queue poly-histidine. Cette construction est destinée à servir de greffon lors de chromatographies d'affinités devant permettre de purifier le ligand. (4) de lignées cellulaires exprimant le récepteur LGR4 humain ainsi que le système æquorine devant permettre de détecter l'activation de ce récepteur.

Les données apportées par ce travail montrent un rôle important du récepteur LGR4 au cours du développement et permettent de circonscrire le champ des recherches futures. Ceci, ainsi que les outils moléculaires développés, constitue une base pour l'identification future de l'agoniste et la détermination précise de la fonction de LGR4.
Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques
info:eu-repo/semantics/nonPublished

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Okutman, Özlem. "Genetics of male infertility : genes implicated in non-obstructive azoospermia and severe oligozoospermia." Thesis, Strasbourg, 2015. http://www.theses.fr/2015STRAJ049/document.

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Abstract:

Parmi les couples avec un projet parental, le facteur masculin d’infertilité est responsable d’environ 20%. Malgré de longues années d’activités d’assistance médicale à la procréation, un nombre important de cas reste idiopathiques. Considérant le nombre élevé des gènes potentiellement impliqués dans la gamétogenèse, il est fort probable que la majorité des formes ‘idiopathiques’ sont d’origine génétique. Dans l'étude présente, nous avons d’identifier deux nouveaux gènes impliqués dans une infertilité masculine. Nos données suggèrent que la mutation dans TEX15 puisse corréler avec une diminution du nombre de spermatozoïdes au fil du temps. Un test diagnostique identifiant la mutation chez un patient pourrait fournir une indication d’organiser au plus tôt une cryopréservation du sperme. On a aussi identifié MAGEB4 liées à l’X comme un nouveau gène impliqué dans une infertilité masculine héritée. Cette étude fournit le premier indice sur la fonction physiologique d'une protéine MAGE
Among couples with a desire for a child, male factor is responsible approximately 20%. Despite long years of assisted reproductive activities, a significant number of cases remain idiopathic. Considering the high predicted number of genes involved in male gametogenesis, it is likely that most ‘idiopathic’ forms may have a genetic origin. In the present study, we have defined two new genes implicated in male infertility. Our data suggested that a nonsense mutation in TEX15 correlates with a decrease in sperm count over time. A diagnostic test identifying the mutation in man could provide an indication of spermatogenic failure and prompt patients to undertake sperm cryopreservation at an early age. We also identified MAGEB4 as a new X-linked gene involved in an inherited male infertility. This study provides the first clue on the physiological function of a MAGE protein

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Dirami, Thassadite. "Le transporteur anionique TAT1 (SLC26A8) : rôle physiologique et implication dans les asthénozoospermies humaines." Thesis, Paris 5, 2012. http://www.theses.fr/2012PA05T050/document.

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Abstract:

La protéine TAT1 (Testis Anion Transporter 1 ; SLC26A8) appartient à la famille des SLC26, une famille de transporteurs d’anions qui contribuent dans différents épithelia à l’homéostasie cellulaire. La protéine TAT1 s’exprime exclusivement dans les cellules germinales mâles, chez l’homme et chez la souris. Sur le spermatozoïde mature, la protéine TAT1 est localisée à la jonction des pièces intermédiaire (PI) et principale (PP) du flagelle, au niveau de l’annulus, une structure en forme d’anneau composée de différents polymères de Septines (1, 4, 6, 7 et 12).Le modèle murin d’invalidation du gène Tat1 présente une infertilité mâle par asthénozoospermie totale (absence de mobilité des spermatozoïdes) et des défauts de capacitation associés à des anomalies structurales du flagelle (plicature du flagelle, disjonction entre la PI et la PP, atrophie de l’annulus). Ce modèle indique que la protéine TAT1 pourrait avoir un rôle structural dans le maintien de l’annulus et dans la mise en place du flagelle. Par ailleurs, la protéine TAT1 possédant une activité de transport d’anions, il est vraisemblable qu’elle puisse influer directement sur la régulation de la mobilité et de la capacitation puisqu’il est bien établi que les échanges ioniques sont essentiels au contrôle de ces deux processus.En effet, les ions chlorure, bicarbonate et calcium participent à l’activation de la voie de signalisation AMPc/PKA, au cours des processus de mobilité et de capacitation (i.e. processus de maturation ayant lieu dans le tractus génital féminin et conférant au spermatozoïde un mouvement hyperactivé et la capacité à interagir avec l’ovocyte).Plusieurs travaux ont montré une interaction physique et fonctionnelle des membres de la famille SLC26 avec le canal chlorure/bicarbonate CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator) dont les mutations sont responsables de la mucoviscidose. De manière intéressante des données récentes ont montré l’expression de CFTR dans le spermatozoïde et son rôle dans la régulation des flux de chlorure au cours de la capacitation. Au cours de ma thèse, nous avons testé la coopération entre les protéines TAT1 et CFTR ; nous avons pu montrer que la protéine TAT1 est capable d’interagir physiquement avec CFTR et de stimuler son activité de transport d’anions, suggérant qu’in vivo les deux protéines forment un complexe moléculaire impliqué dans la régulation des flux de chlorure et de bicarbonate dans le spermatozoïde.Tout comme TAT1, plusieurs membres de la famille SLC26 ont une expression tissulaire spécifique. Par ailleurs, les mutations génétiques de certains SLC26 sont associées à des pathologies humaines (surdité, diarrhée chlorurée congénitale et chondrodysplasie). De par le phénotype du modèle murin Tat1 et l’importance des SLC26 en pathologie humaine, TAT1 constitue un bon candidat dans la recherche des causes génétiques des asthénozoospermies humaines.Le laboratoire a mis en place au cours de ma thèse, un projet de recherche de mutations du gène TAT1 dans les asthénozoospermies humaines. Le séquençage des régions codantes du gène TAT1 dans une cohorte de 147 hommes infertiles par asthénozoospermie a ainsi permis d’identifier des variations de séquence inédites du gène chez 7 sujets. L’étude in vitro de certains variants indique pour trois d’entre eux une instabilité des formes mutantes associée à un défaut de stimulation du canal CFTR, in vitro. Par ailleurs, les spermatozoïdes de ces patients présentent d’importantes anomalies flagellaires dans la mise en place de la pièce intermédiaire, compatible avec un rôle de la protéine TAT1 et de ses partenaires (les septines) dans la genèse du flagelle
TAT1 (Testis Anion Transporter 1 ; SLC26A8) belongs to the SLC26 family of anion transporters, which is implicated in cellular homeostasis of different epithelia. TAT1 is exclusively expressed in male germ cells, in human and mouse. On mature spermatozoa, TAT1 is located at the annulus, a ring-shaped structure composed of different septins polymers (1, 4, 6, 7 and 12), at the junction of the midpiece (MP) and principal piece (PP) of the flagellum.The knock-out mouse model of Tat1 gene shows a male infertility by complete asthenozoospermia (lack of sperm motility) and capacitation defects combined with flagellar structural abnormalities (flagella bending, MP and PP disjunction and atrophy of the annulus). This model suggests that the TAT1 protein could fulfill structural roles in the annulus and during flagellum biogenesis. Moreover TAT1 displayind an anion transport activity, it could also be implicated in the control of sperm motility and capacitation by regulating anions exchannges, which are well known to be essential for both processes.Indeed, chloride, bicarbonate and calcium ions are involved in the activation of the cAMP/PKA pathway, controlling sperm motility and capacitation processes (i.e. maturation events occuring in the female genital tract and providing the spermatozoa an hyperactivation movement and the ability to interact with oocyte).Several publications have reported a physical and functionnal interaction between SLC26 family members and the chloride/bicarbonate CFTR channel (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator), which mutations are responsible of cystic fibrosis. Interestingly, recent data showed CFTR expression in spermatozoa and its role in the regulation of chloride fluxes during capacitation. During my thesis, we tested TAT1 and CFTR cooperation; we showed that TAT1 can interact physically with CFTR and stimulate its anion transport activity, suggesting that in vivo they form a molecular complex involved in the regulation of chloride and bicarbonate fluxes during sperm capacitation.Like TAT1, several SLC26 family members have a tissue specific expression. Furthermore genetic mutations in several SLC26 members result in human pathology such as deafness, congenital chloride diarrhea and chondrodysplasia. According to the phenotype of the KO Tat1 mouse model and the role of SLC26 members in human pathology, TAT1 constitutes a good candidate for the search of genetic causes of human asthenozoospermia.During my thesis, the laboratory has set up, a research project aiming at identifying mutations in the TAT1 gene that are responsible for human asthenozoospermia.Sequencing of the TAT1 gene coding regions in a cohort of 147 infertile men presenting with asthenozoospermia allowed us to identify several new sequence variations in in the TAT1 gene. In vitro study of these variants shows that 3 of them are associated with protein instability and abrogate CFTR stimulation. Besides, patients sperm show important flagellar abnormalities in the midpiece, consistent with a role of TAT1 and its partners (septins) in flagellum biogenesis

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Berby, Benoît. "Τélοmères et altératiοns nucléaires des spermatοzοïdes humains." Electronic Thesis or Diss., Normandie, 2024. http://www.theses.fr/2024NORMR117.

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Abstract:

Les télomères sont des structures essentielles de la biologie des eucaryotes, participant à la réplication et à la protection du génome. Ils interagissent avec le contenu nucléaire soit directes, soit via un complexe de shelterines appelé télosome. Ils raccourcissent après la division cellulaire. Les télomères spermatiques ont des rôles et une architecture spécifiques. Organisés en doublets et quadruplets, un noyau de spermatozoïde haploïde contient entre 12 et 23 signaux détectables. Raccourcis par les divisions successives, ils font l'objet d'une restauration et d'un allongement permanents dans les cellules germinales. Leur longueur varie selon les individus et les générations, interrogeant sur les facteurs impliqués.Dans le cadre du cette thèse, nous avons étudié trois situations différentes. Premièrement, nous avons cherché à savoir si la longueur des télomères et le nombre moyen de télomères dans le noyau spermatique étaient liés au stress oxydatif et aux altérations des paramètres nucléaires parmi les hommes infertiles. Nous avons réalisé une étude prospective sur 52 hommes, avec un groupe cas de 30 hommes infertiles présentant des altérations conventionnelles des paramètres du sperme et un groupe contrôle d'hommes fertiles normozoospermiques. Le nombre moyen de télomères par tête de spermatozoïde était significativement plus élevé chez les cas (21.7 ± 4.3 versus 18.8 ± 3.0, p = 0.049) tout comme la présence d’espèces réactives de l'oxygène intracytoplasmiques et les défauts de condensation. Plus le nombre de télomères était élevé, plus il y avait de défauts de condensation de la chromatine (r = 0.29, p 0.04).Deuxièmement, nous avons évalué l'impact du cancer du testicule et de ses traitements sur les télomères spermatiques. Nous avons réalisé une étude ancillaire sur 29 patients dans le cadre d'un projet de recherche qui suivait des patients atteints de cancer du testicule avant et après chimiothérapie ou radiothérapie adjuvante. Les patients avaient un nombre plus élevé de signaux de télomères par tête de spermatozoïde que les témoins avant et après le traitement (18.1 ± 2.7 versus 15.2 ± 1.4, p = 0.004 au diagnostic et 18.0 ± 3.2 à T24). La longueur moyenne des télomères spermatiques ne variait pas entre les groupes. Après chimiothérapie, les patients présentaient la combinaison la plus élevée de télomères extrêmement courts et le nombre le plus élevé de télomères par tête de spermatozoïde (58% versus 29% après radiothérapie).Troisièmement, nous avons évalué les paramètres conventionnels et nucléaires (télomères et fragmentation de l'ADN) du sperme parmi une population de 50 donneurs de sperme fertiles et en bonne santé ayant donné des spermatozoïdes sur une période de 24 ans. Plus le don était ancien, plus la numération spermatique était élevée (r = 0.46, p = 001) et plus le nombre de signaux télomériques était faible (r = 0.27, p = 0.04). Les hommes plus âgés avaient une plus grande proportion de noyaux avec un nombre attendu de signaux (12-23). La distribution du nombre de télomères par tête spermatique différait entre les dons effectués avant 1998 et après 2000. Les hommes de moins de 36 ans ayant fait un don après 2000 avaient des télomères plus courts que les autres groupes.Nous avons montré que les altérations des télomères des spermatozoïdes sont présentes parallèlement aux altérations conventionnelles du spermogramme et au cancer des testicules. Nous nous soulevons des inquiétudes concernant la longueur des télomères spermatiques chez les jeunes hommes contemporains, parallèlement à la baisse mondiale du nombre de spermatozoïdes. Les télomères des spermatozoïdes apparaissent une cible précieuse pour l'évaluation de la qualité du sperme
Telomeres are pivotal structures of eukaryote biology, engaged in genome replication and protection. Their interactions with nuclear content are either direct or mediated via a shelterin complex named telosome. They are known to decreased after cell division. Sperm telomeres have specific roles and architecture. Organized in doublets and quadruplets, their number expected in a haploid sperm nucleus is comprised between 12 and 23. Essential but diminished during meiosis, they are subject to permanent restauration and lengthening in germinal sperm cells. Their length varies amongst individuals and generations, interrogating about factors implicated in sperm telomere shortening and disorganization. During the present work, we focused on three different situations. First, we investigate whether sperm telomere length and mean number of telomeres in sperm nucleus were related to oxidative stress and nuclear parameters alterations in a population of infertile males. We performed an prospective study over 52 males, with a case group of 30 infertile males presenting conventional semen parameter alterations and a control group of normozoospermic fertile males. Mean number of telomeres per sperm head was significantly elevated in infertile men with oligozoospermia (21.7 ± 4.3 versus 18.8 ± 3.0, p = 0.049) as were as intracytoplasmic reactive oxygen species and condensation defects. The higher number of telomeres, the more chromatin condensation defects were observed (r = 0.29, p 0.04). Secondly, we assessed the impact of testicular cancer and its therapy on sperm telomeres. We performed an ancillary study of 29 patients over a research project which had followed testicular cancer patients before and after adjuvant chemotherapy and radiotherapy. Patients had a higher number of telomere signal per sperm head than control before and after treatment (18.1 ± 2.7 versus 15.2 ± 1.4, p = 0.004 at diagnosis and 18.0 ± 3.2 at T24). Mean sperm telomere length did not vary between groups. Patients who received chemotherapy had the highest combination of extremely shorts sperm telomeres and highest number of telomeres per sperm head (58% versus 29% in the radiotherapy group). Thirdly, we assessed conventional and nuclear (telomeres and DNA fragmentation) semen parameters among a population of 50 healthy fertile sperm donor who donated spermatozoa over 24 years long timeframe. The older donation was, the higher sperm count (r = 0.46, p = 001). Older donations had less telomere signals (r = 0.27, p = 0.04). Older men had less alterations of telomere interactions and presented more sperm nucleus exhibiting the expected number of telomere signals (12-23). Distribution of telomere number per sperm head differed between donations made before 1998 and after 2000. Men under 36 who donated after 2000 had shorter telomeres than the other groups. We showed that sperm telomere alterations are presents alongside conventional semen alterations and testicular cancer. We raised concern regarding sperm telomere length of contemporary youth, in parallel to worldwide sperm count decline. Sperm telomeres are a valuable target for semen quality evaluation

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Dissertations / Theses on the topic 'Stérilité masculine'

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